JP4809242B2 - 新規なcc−ケモカイン結合タンパク質 - Google Patents
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Description
a)rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号4)を含むタンパク質;
b)成熟rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号6)を含むタンパク質;
c)ストリンジェント条件下で、a)またはb)のタンパク質をコードする核酸配列とハイブリダイゼーション可能な核酸分子によってコードされるタンパク質(前記核酸分子はCC−ケモカインと結合し、LPSに誘導される、単球によるTNF−αの放出を阻害するタンパク質をコードする);
d)a)、b)、またはc)のタンパク質とアミノ酸配列が少なくとも約70%同一であり、かつ、CC−ケモカインと結合し、LPSに誘導される、単球によるTNF−αの放出を阻害するタンパク質;
e)その断片がCC−ケモカインと結合し、LPSに誘導される、単球によるTNF−αの放出を阻害する、a)、b)、c)、またはd)のタンパク質の断片;ならびに
f)その断片が免疫調節活性を有する、a)、b)、c)、d)のタンパク質の断片、
からなる群から選択される。
a)rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号4)を有するタンパク質;
b)成熟rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号6)を有するタンパク質;
c)その断片がCC−ケモカインと結合し、LPSに誘導される、単球によるTNF−αの放出を阻害する、a)またはb)のタンパク質の断片;
d)その断片が哺乳類へ投与される場合に免疫化活性を有する、a)またはb)のタンパク質の断片;
e)その変異体に1以上のアミノ酸残基が付加、欠失、または置換されており、前記変異体がCC−ケモカインと結合し、LPSに誘導される、単球によるTNF−αの放出を阻害する、a)またはb)のタンパク質の活性変異体;
f)その融合タンパク質が、以下の、膜結合タンパク質の細胞外ドメイン、免疫グロブリンの定常領域、多量体化ドメイン、シグナルペプチド、移行シグナル、およびタグ配列から選択される1以上のアミノ酸配列と作動可能なように連結されるa)、b)、c)、d)またはe)のタンパク質を含み、前記融合タンパク質がケモカインと結合し、LPSに誘導される、単球によるTNF−αの放出を阻害する、融合タンパク質
からなる群から選択される。
a)rsChBP−1のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする核酸分子(配列番号3);
b)成熟rsChBP−1のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする核酸分子(配列番号5);
c)ストリンジェント条件下で、a)またはb)の核酸分子とハイブリダイゼーション可能であって、CC−ケモカインと結合するタンパク質をコードする核酸分子;
d)a)またはb)のタンパク質とアミノ酸配列が少なくとも約70%同一であり、CC−ケモカインと結合するタンパク質をコードする核酸分子;
e)a)またはb)の核酸分子によってコードされるタンパク質の、CC−ケモカインと結合する断片をコードする核酸分子;および
f)a)、b)、c)、d)、e)の核酸分子の縮重変異体
からなる群から選択される。
a)rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号4)を有するタンパク質;
b)成熟rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号6)を有するタンパク質;
c)CC−ケモカインと結合する、タンパク質a)、またはb)の断片;
d)哺乳類へ投与される場合に免疫化活性を有する、a)またはb)のタンパク質の断片;
e)その変異体に1以上のアミノ酸残基が付加、欠失、または置換されていて、その変異体がCC−ケモカインと結合する、a)、b)、c)、またはd)のタンパク質の活性変異体;
f)以下の、膜結合タンパク質の細胞外ドメイン、免疫グロブリンの定常領域、多量体化ドメイン、シグナルペプチド、移行シグナル、およびタグ配列から選択される1以上のアミノ酸配列と作動可能なように連結されるa)、b)、c)、d)またはe)のタンパク質を含む融合タンパク質
からなる群から選択されるタンパク質をコードする。
a)本発明のDNA;および
b)発現カセット;
を含み得、前記DNA(a)は、配列(b)に含まれる組織特異的な、構成性または誘導性プロモーターと作動可能なように会合する。
a)核酸分子(例えば、DNA);
b)オリゴヌクレオチド;
c)タンパク質;および
d)抗体
からなる群から選択される少なくとも1種類の化合物である。
クリイロコイタマダニというダニの唾液は、免疫調節活性を有する分子の同定に既に用いられているが(Matsumoto K et al.,J Vet Med Sci 2003;Matsumoto K et al.,2001;Ferreira BR and Silva JS,1998)、具体的にCC−ケモカインを対象とする結合または調節活性ではない。
次に、rhSEにおいて同定されたCC−ケモカイン結合活性をクリイロコイタマダニ唾液腺由来のcDNAライブラリーを生成することによってDNA/タンパク質配列のレベルで同定し、その後それを用いてこのようなcDNAを培地に分泌されたタンパク質として発現している哺乳類細胞のプールを作製した。
LPSに誘導される単球によるTNF−α放出
rsChBP−1の生物活性を、rsChBP−1タンパク質のLPSに誘導される単球によるTNF−α放出を阻害する能力について試験するアッセイによって測定した。
Claims (38)
- a)rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号4)を含むタンパク質;
b)成熟rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号6)を含むタンパク質;
c)a)またはb)のタンパク質とアミノ酸配列が少なくとも90%同一であり、CC−ケモカインと結合するタンパク質;および
d)CC−ケモカインと結合する、a)、b)、またはc)のタンパク質の断片;
からなる群から選択されるポリペプチド。 - a)rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号4)から成るタンパク質;
b)成熟rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号6)から成るタンパク質;
c)CC−ケモカインと結合する、a)またはb)のタンパク質の断片;
d)1個または数個のアミノ酸残基が付加、欠失、または置換され、かつCC−ケモカインと結合する、a)またはb)のタンパク質の活性変異体;
e)以下の、膜結合タンパク質の細胞外ドメイン、免疫グロブリン定常領域、多量体化ドメイン、ヘテロ二量体タンパク質ホルモン、シグナルペプチド、移行シグナル、およびタグ配列から選択される1個以上のアミノ酸配列と作動可能式に連結されるa)、b)、c)またはd)のタンパク質を含む融合タンパク質、
からなる群から選択される、請求項1に記載のポリペプチド。 - 前記ポリペプチドが翻訳後に修飾されることを特徴とする、請求項1または2に記載のポリペプチド。
- 前記タンパク質がグリコシル化されることを特徴とする、請求項3に記載のポリペプチド。
- 前記タンパク質が活性画分または塩の形態であるか、あるいはPEGポリマーの付加により修飾されていることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか一項に記載のポリペプチド。
- 請求項1〜4のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする核酸分子。
- a)rsCHBP−1のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする核酸分子(配列番号3);
b)成熟rsCHBP−1のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする核酸分子(配列番号5);
c)ストリンジェント条件下で、a)またはb)の核酸分子とハイブリダイゼーション可能であり、且つCC−ケモカインと結合するタンパク質をコードする核酸分子;
d)a)またはb)のタンパク質とアミノ酸配列が少なくとも90%同一であり、且つCC−ケモカインと結合するタンパク質をコードする核酸分子;
e)a)、b)、c)またはd)の核酸分子によりコードされるタンパク質の断片をコードする核酸分子であって、前記断片はCC−ケモカインと結合し;および
f)a)、b)、c)、d)またはe)の核酸分子の縮重変異体、
からなる群から選択される、請求項6に記載の核酸分子。 - 前記核酸分子が、
a)rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号4)から成るタンパク質;
b)成熟rsChBP−1のアミノ酸配列(配列番号6)から成るタンパク質;
c)CC−ケモカインと結合する、a)またはb)のタンパク質の断片;
d)1個または数個のアミノ酸残基が付加、欠失、または置換され、且つCC−ケモカインと結合する、a)またはb)のタンパク質の活性変異体;および
e)以下の、膜結合タンパク質の細胞外ドメイン、免疫グロブリン定常領域、多量体化ドメイン、シグナルペプチド、移行シグナル、およびタグ配列から選択される1個以上のアミノ酸配列と作動可能式に連結されるa)、b)、c)またはd)のタンパク質を含む融合タンパク質、
からなる群から選択されるタンパク質をコードする、請求項7に記載の核酸分子。 - CC−ケモカインがCCL5/RANTES、CCL3/MIP−1α、および/またはCCL2/MCP−1であることを特徴とする、請求項6〜8のいずれか一項に記載の核酸分子。
- 前記分子がDNA分子である、請求項6〜9のいずれか一項に記載の核酸分子。
- 前記DNA分子がcDNA分子である、請求項10に記載の核酸分子。
- 前記分子が配列番号3または5のDNA配列を含むかまたは配列番号3または5のDNA配列である、請求項6に記載の核酸分子。
- 請求項6〜12のいずれか一項に記載の核酸分子を含む、クローニングベクターまたは発現ベクター。
- 前記核酸分子と作動可能式に会合するプロモーターをさらに含む、請求項13に記載の発現ベクター。
- 前記プロモーターが、組織特異的な、構成プロモーターまたは誘導プロモーターである、請求項14に記載の発現ベクター。
- 請求項13〜15のいずれか1項に記載の発現ベクターで形質転換またはトランスフェクトされた宿主細胞。
- 遺伝的に改変されて請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチドを産生する細胞。
- 発現を可能とする、または促進する条件下で請求項16に記載の宿主細胞を培養することを含む、ポリペプチドを調製するための方法。
- タンパク質を精製することをさらに含む、請求項18に記載の方法。
- ヒト投与のためのタンパク質を製剤化することをさらに含む、請求項18または19に記載の方法。
- CC−ケモカイン結合タンパク質を発現するトランスジェニック非ヒト動物であって、前記動物の細胞が、請求項6〜12のいずれか一項に記載の単離された核酸分子または組換え核酸分子、あるいは請求項13〜15のいずれか一項に記載の発現ベクターを含むことを特徴とする、トランスジェニック非ヒト動物。
- 請求項1、請求項2のa)、請求項2のb)、請求項2のc)、請求項2のd)、請求項3、請求項4及び請求項5のいずれかに記載のポリペプチドに免疫反応性である抗体。
- モノクローナル抗体である、請求項22に記載の抗体。
- キメラ抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体である、請求項22または23に記載の抗体。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項6〜12のいずれか一項に記載の核酸分子、または請求項13〜15のいずれか一項に記載のクローニングベクターまたは発現ベクター、または請求項16または17に記載の細胞、および製薬上許容される希釈剤もしくは担体を含む、医薬組成物。
- 医薬として使用するための、請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項25に記載の組成物。
- 哺乳動物における免疫反応または炎症反応の治療または予防のための医薬の製造のための、請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項25に記載の組成物の使用。
- 動物におけるCC−ケモカイン関連疾患の治療または予防のための使用のための、請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項25に記載の組成物。
- CC−ケモカインがCCL5/RANTES、CCL3/MIP−1α、またはCCL2/MCP−1であることを特徴とする、請求項27に記載の使用。
- 疾患が、炎症性疾患、自己免疫疾患、免疫疾患、感染、アレルギー性疾患、心血管疾患、代謝性疾患、消化管疾患、神経疾患、敗血症、移植拒絶に関連する疾患、または線維性疾患である、請求項27に記載の使用。
- 寄生虫、ウイルス、または細菌に対する哺乳動物のワクチン接種のための医薬の調製における、請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチドの使用。
- 医薬として使用するための、請求項6〜12のいずれか一項に記載の核酸分子によりコードされるタンパク質。
- 哺乳動物において免疫反応または炎症反応を調節するための組成物の調製における、請求項6に記載の核酸分子の使用。
- 吸血性の外部寄生虫に対して非ヒト動物を免疫化するための方法であって、前記非ヒト動物へ請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチドを投与することを含む方法。
- 治療有効量の、請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチドを前非ヒト動物へ投与することを含む、それを必要とする非ヒト動物において免疫反応または炎症反応を調節する方法。
- CC−ケモカイン関連疾患を治療または予防するための方法であって、それを必要とする非ヒト動物へ、有効量の請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチドを投与することを含む方法。
- CC−ケモカインまたは類似体、CC−ケモカイン結合タンパク質または受容体、CC−ケモカインおよびCC−ケモカイン結合タンパク質の相互作用、あるいは前記相互作用のアンタゴニストまたはアゴニストを検出するためのキットであって、検出試薬および:
a)請求項6の核酸分子;
b)請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチド;および
c)請求項22、23または24の抗体、
からなる群から選択される少なくとも1種類の化合物を含むキット。 - インビトロでCC−ケモカインまたは類似体、CC−ケモカイン結合タンパク質または受容体、CC−ケモカインおよびCC−ケモカイン結合タンパク質の相互作用、あるいは前記相互作用のアンタゴニストまたはアゴニストを検出するための方法であって、試料を、
a)請求項6の核酸分子;
b)請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリペプチド;および
c)請求項22、23または24の抗体、
からなる群から選択される1種類の化合物と接触させることを含む方法。
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