JP4674288B2 - 歯科用材料。 - Google Patents
歯科用材料。 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4674288B2 JP4674288B2 JP2004105083A JP2004105083A JP4674288B2 JP 4674288 B2 JP4674288 B2 JP 4674288B2 JP 2004105083 A JP2004105083 A JP 2004105083A JP 2004105083 A JP2004105083 A JP 2004105083A JP 4674288 B2 JP4674288 B2 JP 4674288B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- dna
- chitosan
- dental material
- complex
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Dental Preparations (AREA)
Description
上記キトサンを用いたサケ精子由来のDNA(300塩基対)の修飾はキトサン水溶液とDNA水溶液を混合して行う。
・DNA溶液;サケ精子由来DNA(300塩基対、ニチロ社製)を蒸留水に溶解する。(5mg/1ml)
・キトサン溶液;キトサン(分子量13万、ニチロ社製)を0.2N HCl50mlに溶解した。この溶液に0.2N NaOHと蒸留水を徐々に加え、pH5の溶液100mlとした。(5mg/1ml)
撹拌しているキトサン水溶液100mlにDNA水溶液を加え、1時間反応させた。反応後生じた沈殿物を遠心分離した。得られた沈殿物をトリス塩酸緩衝液(10mM, pH7.2)(以下Tris-HCl緩衝液という)60mlで洗浄し、再度遠心分離した。Tris-HCl緩衝液洗浄は2回行った。次に、蒸留水60mlで洗浄した後、遠心分離を行った。蒸留水洗浄は3回行った。得られた白色沈殿物を凍結乾燥した。収量は600mgで、リンの定量よりDNA/キトサン複合体の分子量比率は0.95/1であった。
上記の製造方法の中で反応物の濃度を変えた場合、すなわちDNA水溶液(7.5mg/1ml)とキトサン水溶液(2.5mg/1ml)あるいはDNA水溶液(2.5mg/1ml)とキトサン水溶液(7.5mg/1ml)を用いるとDNA/キトサン複合体の分子量比率は1.28/1と0.88/1で、収量は700mgと300mgであった。
上記の製造方法の中で緩衝液の種類を変えた場合はDNA/キトサン複合体中の気孔率と気孔径が異なる。
例えば、リン酸緩衝液(10mM、pH7.2、0.9%NaCl)(以下PBS緩衝液という)、HEPES緩衝液(10mM、pH7.2)よりTris-HCl緩衝液やホウ酸緩衝液(10mM, pH7.2)で洗浄したDNA/キトサン複合体中の気孔の数は多く、形態も大きい。(図1、図2)
上記の製造方法の中でDNA/キトサンの分子量比率が異なれば、同じ緩衝液で処理してもDNA/キトサン反応物中の気孔率と気孔径が異なる。例えば、Tris-HCl緩衝液で洗浄したDNA/キトサン複合体中のDNA含有量の少ない物の方が気孔率は大きい。(図3)
マウスの線維芽細胞L-929細胞を20,000
cells/mlの濃度になるように調製し、96ウエルの各ウエルに0.1 ml播種した。24時間後に、実施例1で得たDNA/キトサン複合体、出発原料であるDNAおよびキトサン粉末を0.25mg/ml、0.5mg/mlおよび1mg/mlの濃度になるように培養液(EagleのMEM)で調製した後、順次希釈して、液交換を行い細胞に2日間作用させた。2日間後にMTS法にて細胞生存率を対照(試料未添加)群に対する百分率で表した(図4)。 キトサン単独よりDNA/キトサン反応物の方が細胞生存率はどの濃度でも明らかに高く、細胞毒性が無いことが示唆された。
エーテル麻酔下で、生後7週齢のSD系雄性ラットの背部皮膚をメスで切開後、すみやかに皮下組織に、実施例1で得られたDNA/キトサン複合体を埋入し縫合した。この際、キトサン単体を埋入したもの、背部の皮膚切開のみを加えてそれぞれ縫合した実験を同時に行った。術後1,3,5,10日に背部皮下組織を摘出、10%ホルマリンにて2日浸漬固定後、通法どおりパラフィン包埋し、薄切後HE染色を施し検討した。
術後3日の標本において、DNA/キトサン複合体埋入群とキトサン単体埋入群で明らかな組織反応の違いがみられた。すなわち、DNA/キトサン複合体埋入群では、皮下組織の一部に複合体がわずかに残存するのみで、周囲組織の反応も極めて微弱であった(図5)のに対し、キトサン単体投与群では多量のキトサンがいまだ皮下組織中にみられ、残留キトサンに対し多量の白血球の浸潤も同時に観察され、周囲組織への起炎性も強かった(図6)。
その後、DNA/キトサン複合体埋入群では術後5日には、皮膚切開のみの対照群と同様の状態に回復したのに対し、キトサン単体埋入群では、術後10日にも相当量のキトサンの残留がみられ、同時に周囲組織に対する起炎性を保持していた。
抗ガン剤である赤色のドキソルビシンを蒸留水に溶解した。(200mg/ml) この溶液に実施例1で得られたDNA/キトサン複合体 3mgを添加し、3日間反応させた。反応液の吸光度(480nm)を測定して塩酸ドキソルビシンの残量を定量した。その結果、反応液中のドキソルビシンの濃度(8mg/ml)は減少しており、塩酸ドキソルビシンのインターカレーションが示唆された。また、DNA/キトサン複合体の赤色化は肉眼でも確認できた。その他の抗ガン剤(アクチノマイシン、ダウノマイシン、ダウノルビシン、ピラルビシン)も同様の結果が得られた。
医療用材料は治療部位や治療方法によって要求される形態や状態は異なる。DNA/キトサン複合体は治療方針に適合した形態や状態の調整が可能である。例えば、実施例1で得られたDNA/キトサン複合体をフィルター上に置いたテフロン製リング(高さ1mm、内径5mm)に注入し、ろ過後、凍結乾燥すれば円盤状の形態となる。したがって、モールドの形態を調整すればいかなる形態の成形物も得られる。さらに、緩衝液を選択すれば気孔率の調整も可能となる。また、ホウ酸緩衝液やTris-HCl緩衝液で洗浄したDNA/キトサン複合体を蒸留水に入れ、撹拌すれば容易に懸濁し流動性を示す。この懸濁液中のDNA/キトサン複合体は注射針を通る。したがって、注射器による投与も可能である。
Claims (7)
- DNA特有の二重螺旋構造が壊されずに保持されており、且つ水に対する溶解性を実質的に有していないDNA/キトサン複合体の賦形物または賦形されていない形態の物に分子量が300〜1300Daの範囲の低分子化合物である薬効成分若しくは骨再生誘導因子若しくは線維芽細胞成長因子又は組織再生誘導因子をインターカレートおよび/またはグルーブバインディングして当該薬効成分若しくは骨再生誘導因子若しくは線維芽細胞成長因子又は組織再生誘導因子を患部に送達、供給するようにしたことを特徴とする歯科用材料。
- 前記DNA/キトサン複合体の賦形されていない形態の物に薬効成分をインターカレートおよび/またはグルーブバインディングしたものを溶液製剤、分散製剤、半固形製剤、粉粒体製剤又は成型製剤のいづれかの剤形に形成したことを特徴とする請求項1に記載の歯科用材料。
- 前記DNA/キトサン複合体からなる賦形物に抗菌剤をインターカレートおよび/またはグルーブバインディングして抗菌剤を患部に送達、供給するようにしたことを特徴とする請求項1に記載の歯科用材料。
- 前記抗菌剤が、抗歯周病菌剤であることを特徴とする請求項3に記載の歯科用材料。
- 前記DNA/キトサン複合体からなる賦形物に薬剤や組織再生誘導因子をインターカレートおよび/またはグルーブバインディングしたものを用いて製造されたメンブレン、フィルム、ライニング材またはコーティング材にしたの歯科用材料であって、当該薬剤や組織再生誘導因子を患部や必要な箇所に送達、供給するようにしたことを特徴とする請求項1に記載の歯科用材料。
- 前記DNA/キトサン複合体の賦形されていない形態の物に薬効成分をインターカレートおよび/またはグルーブバインディングしたものを溶液製剤、分散製剤、半固形製剤、粉粒体製剤又は成型製剤のうちいづれかの剤形に形成し、これを添加物として原料に加えたもので医療用材料および/または歯科用材料を製造し、当該歯科用材料を介して薬効成分を患部に送達、供給するようにしたことを特徴とする請求項1に記載の歯科用材料。
- 前記DNA/キトサン複合体の賦形されていない形態の物に薬効成分をインターカレートおよび/またはグルーブバインディングしたものを溶液製剤、分散製剤、半固形製剤、粉粒体製剤又は成型製剤のうちいづれかの剤形に形成し、これを添加物として添加した原料でプライマー、ボンディング剤、コンボジットレジン、仮封材、裏層材、根管充填材、歯周包帯材、合着用セメント、ダイレクトボンディング材、デンチャー、リベース材、デンチャー用抗菌剤といった歯科材料を製造し、当該歯科材料を介して前記薬効成分を患部に薬効成分を送達、供給するようにしたことを特徴とする請求項1に記載の歯科用材料。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2004105083A JP4674288B2 (ja) | 2004-03-31 | 2004-03-31 | 歯科用材料。 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2004105083A JP4674288B2 (ja) | 2004-03-31 | 2004-03-31 | 歯科用材料。 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005289852A JP2005289852A (ja) | 2005-10-20 |
JP4674288B2 true JP4674288B2 (ja) | 2011-04-20 |
Family
ID=35323216
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004105083A Expired - Fee Related JP4674288B2 (ja) | 2004-03-31 | 2004-03-31 | 歯科用材料。 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4674288B2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20160062096A (ko) | 2013-09-25 | 2016-06-01 | 마루하 니치로 가부시키가이샤 | 골 형성용의 의료용 또는 치과용 재료 |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4718416B2 (ja) * | 2006-10-31 | 2011-07-06 | 忠男 福島 | Dnaとポリカチオンの複合体からのフィルムの製造方法 |
JP4801193B2 (ja) | 2008-12-19 | 2011-10-26 | 忠男 福島 | 骨形成用の医療用または歯科用材料 |
JP5470840B2 (ja) * | 2008-12-26 | 2014-04-16 | 東レ株式会社 | 医療用材料 |
WO2013027929A2 (ko) * | 2011-08-25 | 2013-02-28 | 오스템임플란트 주식회사 | 친수성 표면을 갖는 티타늄 임플란트 |
KR101248785B1 (ko) * | 2012-04-30 | 2013-04-03 | 오스템임플란트 주식회사 | 초친수성을 갖는 티타늄 임플란트, 그 표면처리 및 보관 방법 |
KR101710615B1 (ko) * | 2016-09-07 | 2017-02-27 | 주식회사 파마리서치프로덕트 | 생착률을 증가시킨 이식용 진피층 및 이의 제조 방법 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000510847A (ja) * | 1996-05-17 | 2000-08-22 | ジーンメディシン・インコーポレーテッド | 核酸を細胞内に送達するためのキトサン関連組成物 |
JP2001500109A (ja) * | 1996-07-10 | 2001-01-09 | ウエスト、ファルマシューティカル、サービシズ、ドラッグ、デリバリー、アンド、クリニカル、リサーチ、センター、リミテッド | 上皮細胞への遺伝子の送達に適当な組成物 |
JP2001327591A (ja) * | 2000-03-13 | 2001-11-27 | Shigeo Okahata | 医療用または歯科用材料およびその製造方法 |
JP2002509117A (ja) * | 1998-01-16 | 2002-03-26 | ザ・ジョーンズ・ホプキンス・ユニバーシティ | 粒状複合体による核酸ワクチンの経口投与 |
WO2003028759A1 (en) * | 2001-09-28 | 2003-04-10 | University Of South Florida | Rsv gene expression vaccine |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH1077235A (ja) * | 1996-09-05 | 1998-03-24 | Yakult Honsha Co Ltd | 水不溶性核酸・キトサン複合体及びその製造法 |
IL158622A0 (en) * | 2001-04-30 | 2004-05-12 | Yissum Res Dev Co | Composite scaffolds and methods using same for generating complex tissue grafts |
-
2004
- 2004-03-31 JP JP2004105083A patent/JP4674288B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000510847A (ja) * | 1996-05-17 | 2000-08-22 | ジーンメディシン・インコーポレーテッド | 核酸を細胞内に送達するためのキトサン関連組成物 |
JP2001500109A (ja) * | 1996-07-10 | 2001-01-09 | ウエスト、ファルマシューティカル、サービシズ、ドラッグ、デリバリー、アンド、クリニカル、リサーチ、センター、リミテッド | 上皮細胞への遺伝子の送達に適当な組成物 |
JP2002509117A (ja) * | 1998-01-16 | 2002-03-26 | ザ・ジョーンズ・ホプキンス・ユニバーシティ | 粒状複合体による核酸ワクチンの経口投与 |
JP2001327591A (ja) * | 2000-03-13 | 2001-11-27 | Shigeo Okahata | 医療用または歯科用材料およびその製造方法 |
WO2003028759A1 (en) * | 2001-09-28 | 2003-04-10 | University Of South Florida | Rsv gene expression vaccine |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20160062096A (ko) | 2013-09-25 | 2016-06-01 | 마루하 니치로 가부시키가이샤 | 골 형성용의 의료용 또는 치과용 재료 |
US10166313B2 (en) | 2013-09-25 | 2019-01-01 | Maruha Nichiro Corporation | Medical or dental material for osteogenesis |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2005289852A (ja) | 2005-10-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Tian et al. | Chemical and physical chitosan hydrogels as prospective carriers for drug delivery: A review | |
Shariatinia | Carboxymethyl chitosan: Properties and biomedical applications | |
Li et al. | Tailoring materials for modulation of macrophage fate | |
Abourehab et al. | Recent advances of chitosan formulations in biomedical applications | |
Hoseinpour et al. | Applications of zeolitic imidazolate framework-8 (ZIF-8) in bone tissue engineering: A review | |
Mohebbi et al. | Chitosan in biomedical engineering: a critical review | |
Hakim et al. | Biocompatible and biomaterials application in drug delivery system in oral cavity | |
Hu et al. | Recent advances in chitosan-based layer-by-layer biomaterials and their biomedical applications | |
JP6143269B2 (ja) | 自己組織化複合超小型ペプチドポリマーヒドロゲル | |
Chang et al. | Amphiphilic hydrogels for biomedical applications | |
Yavvari et al. | Emerging biomedical applications of polyaspartic acid-derived biodegradable polyelectrolytes and polyelectrolyte complexes | |
Fakhruddin et al. | Halloysite nanotubes and halloysite-based composites for biomedical applications | |
Dong et al. | Injectable adhesive hydrogel through a microcapsule cross-link for periodontitis treatment | |
Aminabhavi et al. | Production of chitosan-based hydrogels for biomedical applications | |
Ashe et al. | Gelatin carrageenan sericin hydrogel composites improves cell viability of cryopreserved SaOS-2 cells | |
Gkouma et al. | Applications of halloysite in tissue engineering | |
Feng et al. | Gel/hydrogel‐based in situ biomaterial platforms for cancer postoperative treatment and recovery | |
Izbudak et al. | Layered double hydroxide-based nanocomposite scaffolds in tissue engineering applications | |
KR101606112B1 (ko) | mPEG-b-RSPCL-b-mPEG 블록공중합체 및 상기 블록공중합체를 이용한 나노약물전달용 조성물 | |
JP4674288B2 (ja) | 歯科用材料。 | |
JP4801193B2 (ja) | 骨形成用の医療用または歯科用材料 | |
Chen et al. | Recent Trends in the Development of Polyphosphazenes for Bio-applications | |
JP2001327591A (ja) | 医療用または歯科用材料およびその製造方法 | |
Dan et al. | Synergistic approach of graphene oxide-silver-titanium nanocomposite film in oral and dental studies: A new paradigm of infection control in dentistry | |
Alsalhi | Applications of selected polysaccharides and proteins in dentistry: A review |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090224 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090425 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100406 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100603 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20101005 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20101111 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140204 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4674288 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313115 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |