JP4547446B2 - TGF−βを利用した遺伝子療法 - Google Patents
TGF−βを利用した遺伝子療法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4547446B2 JP4547446B2 JP2008176059A JP2008176059A JP4547446B2 JP 4547446 B2 JP4547446 B2 JP 4547446B2 JP 2008176059 A JP2008176059 A JP 2008176059A JP 2008176059 A JP2008176059 A JP 2008176059A JP 4547446 B2 JP4547446 B2 JP 4547446B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- tgf
- cartilage
- cells
- cell
- growth factor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/495—Transforming growth factor [TGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1841—Transforming growth factor [TGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
b)培養された結合組織細胞集団を、前記組換えベクターでインビトロトランスフェクションさせることにより、形質転換された結合組織細胞集団を製造する段階;及び
c)前記形質転換された結合組織細胞を、哺乳動物宿主の関節炎性関節腔に、関節内注射して移植することにより、前記DNAシーケンスが前記関節腔内で発現されて結合組織を再生する段階;
を含む関節炎の治療方法に関するものである。
b)培養された結合組織細胞集団を、前記組換えベクターでインビトロトランスフェクションさせることにより、形質転換された結合組織細胞集団を製造する段階;及び
c)前記形質転換された結合組織細胞を、哺乳動物宿主の関節炎性関節腔に、関節内注射して移植することにより、前記DNAシーケンスが前記関節腔内で発現されてガラス軟骨を再生する段階;
を含むガラス軟骨の再生方法に関するものである。
(プラスミドの構造)
メタロチオネイン発現コンストラクト(pM)を製造するために、増幅のためのオリゴヌクレオチドに含まれた Xba I 及び Bam HI 制限酵素サイトを利用して、ゲノムDNAを利用したポリメラーゼチェーン反応でメタロチオネイン Iプローモーター(−660/+63)を製造した。増幅された切片を、pBluescript(Stratagene,La Jolla, CA)のXba I−Bam HIサイトでサブクローニングした。TGF−β1コード序列を含む1.2−kb Bgl II 切片と3'末端の成長ホルモンポリーAサイトをpMのBam HI−SalIサイト内にサブクローニングしてプラスミドpmTβ1を製造した。
TGF−β cDNAを、繊維芽細胞(NIH 3T3−TGF−β1)内に、またはヒト包皮繊維芽細胞/TGF−β1内にトランスフェクションさせた。これらを、10%仔牛胎児血清が含まれたDulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM)(Gibco−BRL、 Rockville、 MD)で培養した。TGF−β1 cDNAシーケンスをメタロチオネイン遺伝子プローモーターを持ったpmTβ1ベクターに付加した。また、ネオマイシン抵抗性遺伝子シーケンスもベクター内に挿入した。
グアニジウム イソチオシアネート/フェノール/クロロホルムを使って細胞からトータルRNAを分離した。トータルRNAを0.66 M ホルムアルデヒドを含む1.0%アガロース−ゲル上で電気泳動させて、DURALON−UV膜に移し、UV STRATALINKER(STRATAGENE)と交差結合させた。Blotsを前混成化し、65℃で1%仔牛血清アルブミン、7%(w/v) SDS、0.5 M 燐酸ナトリウム及び1mM EDTAを含む溶液で混成化した。混成化したblotsをフィルム露出前に0.1% SDS、 1X SSCで20分間50℃で洗浄した。RNA blotsをヒトTGF−β1の32P−ラベルしたcDNA プローブで混成化した。β−アクチンのプローブを試料ローディングのためのコントロールとして利用した。
2.0−2.5kg体重のニュージーランド白い兎を動物モデルとして選択した。ケタミン(Ketamine)とロームプン(roumpun)で痲酔させた後、各兎を消毒した。アキレス腱を露出させて、腱の中間部位に104、105及び106cells/ml濃度の細胞を0.2ml−0.3ml注入した。トランスフェクションされたDNAの発現のために、兎の飲み物に硝酸亜鉛を添加した。アキレス腱の実験で、最適濃度を決定した後、関節内注射を行った。膝関節を露出させて、ナイフで一部及び完全に軟骨欠損を作った。軟骨下骨を露出させないように注意しながら、ガラス軟骨層に一部欠損を作った。完全欠損は、ガラス軟骨を全部とり除いた後、軟骨下骨が露出されるようにした。外科的傷を縫合した後、106cells/ml濃度の細胞を関節内に注射し、硝酸亜鉛を飲み物に添加した。
腱と膝関節を回収した後、標本をホルマリンで固定させて、硝酸で脱石灰した。それらをパラフィン−ブロックに埋め込み、0.8μm厚さの薄切れに切った。再生された組職を顕微鏡で観察するためにヘマトキシリン−エオシン及びサフラニン−Oステイニングを利用した。
(安定な細胞株)
トランスフェクションは、カルシウム−ホスファート共沈法を利用して行った(図1)。生存したコロニーの約80%が、転移遺伝子(transgene) mRNAを発現した。このような選別されたTGF−β1−生産細胞を、硝酸亜鉛溶液で培養した。細胞を100μM 硝酸亜鉛溶液で培養するとmRNAが生産される。TGF−β1分泌速度は、約32ng/106細胞/24hrだった。
NIH 3T3−TGF−β1細胞の生存を確認するために、兎のアキレス腱を観察した。肉眼で観察する場合、106cells/ml濃度の方が、104及び105の濃度より腱がもっと厚かった。一部及び完全に軟骨に欠損を作った後、106cells/ml濃度のNIH 3T3−TGF−β1細胞0.3mlを膝関節内に注射した。注入後2から6週まで関節を調査した。一部欠損された軟骨では、新たに形成されたガラス関節が観察された;2週経過後、ガラス関節が現われ、6週経過後、軟骨欠損がガラス軟骨で覆われた(図2)。再生された軟骨の厚さは、時間が経つにつれて厚くなった(図3)。注入された細胞がTGF−β1を分泌し、これはTGF−β1抗原を使った兔疫組職化学ステイニングによって確認された(図3)。TGF−β1のトランスフェクションがない正常繊維芽細胞が注入された反対側は、ガラス軟骨で覆われなかった。一部欠損された部位では、再生されたガラス軟骨がサフラニン−Oステイニングによって赤色に染色された(図4)。(新たに形成された軟骨の深さは殆ど損失された深みと等しい。)このような結果は、注入された細胞が、作用のパラクリン作用モードを介して、周りの正常軟骨細胞を活性化させること示す。
参考文献
Andrew JG, Hoyland J, Andrew SM, Freemont AJ and Marsh D: Demonstration of TGF- B1 m-RNA by in situ hybridization in normal fracture healing. Calcif Tissue Int, 52: 74-78, 1993.
Bourque WT, Gross M and Hall BK: Expression of four growth factors during fracture repair. Int J Dev Biol, 37: 573-579, 1993
Brand T and Schneider MD: Inactive type II and type I receptors: TGF-B are dominant Inhibitors of TGF-B dependent transcription. J Biol Chem, 270: 8274-8284, 1995.
Brittberg M, Lindahl A, Nilsson A, Ohlsson C, Isaksson O and Peterson L: Treatment of deep cartilage defects in the knee with autologous chondrocyte transplantation. New Engl J Med 331: 889-895, 1994.
Carrington JL, Roberts AB, Flanders KC, Roche NS and Reddi AH: Accumulation, localization and compartmentation of TGF-B during enchondral bone development. J Cell Biology, 107: 1969-1975, 1988
Centrella M, Massague J and Canalis E: Human platelet-derived transforming growth factor-B stimulates parameters of bone growth in fetal rat calvariae. Endocrinology, 119: 2306-2312, 1986.
Cheifetz S. Weatherbee JA, Tsang MLS, Anderson JK, Lucas R, Massague J; Transforming Growth factor beta system, a complex pattern of cross-reactive ligands and receptors. Cell, 48: 409-415, 1987.
Chenu C, Pfeilschifter J, Mundy GR and Roodman GD: TGF-B inhibits formation of osteoclast-like cells in long -term human marrow cultures. Proc Natl Acad Sci, 85: 5683-5687, 1988
Critchlow MA, Bland YS and Ashhurst DE: The effect of exogenous transforming growth factor-B2 on healing fractures in the rabbit. Bone, 521-527, 1995.
Dallas SL, Miyazono K, Skerry TM, Mundy GR and Bonewald LF: Dual role for the latent transforming growth factor beta binding protein (LTBP) in storage of latent TGF-B in the extracellular matrix and as a structural matrix protein. J cell Biol, 131: 539-549, 1995.
Dumont N, O'Connor M and Philip A: Transforming growth factor receptors on human endometrial cells: identification of the type I and II receptors and glycosyl-phosphatidylinositol anchored TGF-B binding proteins. M Cell Endo, 111: 57-66, 1995.
Frenkel SR, Toolan B, Menche D, Pitman MI and Pachence JM: Chondrocyte transplantation using a collagen bilayer matrix for cartilage repair. J Bone J Surg (Br) 79-B: 831-836, 1997.
Heine UI, Munoz EF, Flanders KC, Ellingsworth LR, Peter Lam H-Y, Thompson NL, Roberts AB and Sporn MB: Role of Transforming Growth Factor-B in the development of the mouse embryo. J Cell Biology, 105: 2861-2876, 1987.
Jenks S: Gene therapy: Mastering the basics, defining details (news). J Natl Cancer Inst, 89(16): 1182-1184,1997.
Joyce ME, Roberts AB, Sporn MB and Bolander ME: Transforming Growth Factor-B and the initiation of chondrogenesis and osteogenesis in the rat femur. J Cell Biology, 110: 2195-2207, 1990
Lind M, Schumacker B, Soballe K, Keller J, Melsen F, and Bunger: Transforming growth factor-B enhances fracture healing in rabbit tibiae. A Orthop Scand, 64(5):553-556, 1993
Lopez-Casillas F, Chifetz S, Doody J, Andres JL, Lane WS Massague J: Structure and expression of the membrane proteoglycan component of the TGF-B receptor system. Cell, 67: 785-795, 1991.
Madri JA, Pratt BM and Tucker AM: Phenotypic modulation of endothelial cells by Transforming Growth Factor-B dpends upon the composition and organization of the extracellular matrix. J Cell Biology, 106: 1375-1384, 1988.
Mankin HJ: The response of articular cartilage to mecanical injury. J Bone Joint Surg, 52A: 460-466, 1982.
Massague, Ann. Rev. Biochem. 67:753-791, 1998.
Matsumoto K, Matsunaga S, Imamura T, Ishidou Y, Yosda H Sakou T: Expression and distribution of transforming growth factor-B during fracture healing. In vivo, 8: 215-220, 1994
Miettinen PJ, Ebner R, Lopez AR and Derynck R: TGF-B induced transdifferentiation of mammary epithelial cells to mesenchymal cells: involvement of type I receptors. J Cell Biology, 127-6: 2021-2036, 1994.
O'Driscoll, J.Bone Joint Surg., 80A:1795-1812,1998.
Ozkaynak E, Rueger DC, Drier EA, Corbett C and Ridge RJ: OP-1 cDNA encodes an osteogenic Protein in the TGF-B family. EMBO J, 9: 2085-2093, 1990
Rosenburg L: Chemical basis for he histological use of Safranin-O in the study of articular cartilage. J Bone Joint Surg, 53A:69-82, 1971.
Sampath TK, Rueger DC: Structure, function and orthopedic applications of osteogenic protein-1 (op-1). Complications in ortho, 101-107, 1994.
Snyder SH: The molecular basis of communication between cells. Sci Am, 253(4): 132-140,1985.
Sporn MB and Roberts AB: Peptide growth factors are multifunctional. Nature (London),332:217-219, 1988.
Wakefield LM, Smith DM, Flanders KC and Sporn MB: Latent transforming growth factor-B from human platelets. J Biol Chem, 263, 7646-7654, 1998.
Wolff JA and Lederberg J: A history of gene transfer and therapy, John A. Wolff, Editor. Gene Therapeutics, 3-25, 1994. Birkhauser, Boston.
Wrana JL, Attisano L, Wieser R, Ventura F and Massague J: Mechanism of activation of the TGF-B receptor. Nature, 370: 341-347, 1994.
Claims (8)
- トランスフォーミング成長因子(transforming growth factor)−β(TGF−β)をエンコードし、プロモーターに作動的にリンクされたDNAシーケンスを含む組換えウイルス又はプラスミドベクターでトランスフェクションされた軟骨細胞を含み、関節腔に直接移植されることを特徴とする関節炎に対するエクスビボ治療用の注射剤。
- 前記組換えウイルスベクターがレトロウイルスベクターであることを特徴とする請求項1記載の注射剤。
- 前記軟骨細胞は、移植される前には保管されることを特徴とする請求項1又は2記載の注射剤。
- 前記軟骨細胞は、移植される前には、液体窒素下で10%DMSOで保管されることを特徴とする請求項3記載の注射剤。
- 前記TGF−βは、ヒト又は豚のTGF−β1、TGF−β2、又は、TGF−β3であることを特徴とする請求項1から4のいずれかに記載の注射剤。
- トランスフォーミング成長因子(transforming growth factor)−β(TGF−β)をエンコードし、プロモーターに作動的にリンクされたDNAシーケンスを含む組換えウイルス又はプラスミドベクターでトランスフェクションされた軟骨細胞を有効成分として含み、軟骨欠損部位に注入されることを特徴とするガラス軟骨再生用細胞組成物。
- 前記トランスフェクションは、リポソームカプセル法、カルシウム・ホスファート共沈法、電気穿孔法、そしてDEAE−デキストラン媒介法によって成ることを特徴とする請求項6記載の軟骨再生用細胞組成物。
- 前記プラスミドがpmTβ1であることを特徴とする請求項6又は7記載の軟骨再生用細胞組成物。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1019990015854A KR20000072904A (ko) | 1999-05-03 | 1999-05-03 | TGF-β분비세포를 포함하는 인대손상 치료 및 연골재생 촉진제 |
US09/345,415 US6315992B1 (en) | 1999-06-30 | 1999-06-30 | Generating cartilage in a mammal using fibroblasts transfected with a vector encoding TGF-β-1 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006195771A Division JP4188986B2 (ja) | 1999-05-03 | 2006-07-18 | TGF−βを利用した遺伝子療法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2009019039A JP2009019039A (ja) | 2009-01-29 |
JP4547446B2 true JP4547446B2 (ja) | 2010-09-22 |
Family
ID=26635050
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2000615060A Expired - Lifetime JP4592186B2 (ja) | 1999-05-03 | 2000-05-03 | 関節内注射用の組成物を生産する方法 |
JP2006195771A Expired - Lifetime JP4188986B2 (ja) | 1999-05-03 | 2006-07-18 | TGF−βを利用した遺伝子療法 |
JP2008176059A Expired - Lifetime JP4547446B2 (ja) | 1999-05-03 | 2008-07-04 | TGF−βを利用した遺伝子療法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2000615060A Expired - Lifetime JP4592186B2 (ja) | 1999-05-03 | 2000-05-03 | 関節内注射用の組成物を生産する方法 |
JP2006195771A Expired - Lifetime JP4188986B2 (ja) | 1999-05-03 | 2006-07-18 | TGF−βを利用した遺伝子療法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP1175228A4 (ja) |
JP (3) | JP4592186B2 (ja) |
KR (1) | KR100702725B1 (ja) |
CN (2) | CN1371289B (ja) |
AU (1) | AU778047B2 (ja) |
CA (1) | CA2373045C (ja) |
WO (1) | WO2000066177A1 (ja) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2002243307A1 (en) * | 2000-11-08 | 2002-07-24 | Tissuegene, Inc. | Gene therapy using tgf-beta |
CA2479042C (en) * | 2002-03-12 | 2014-05-13 | Tissuegene, Inc. | Cartilage regeneration using chondrocyte and tgf-.beta. |
US7005127B2 (en) * | 2002-03-29 | 2006-02-28 | Tissuegene, Inc. | Mixed-cell gene therapy |
EP1542707A2 (en) * | 2002-07-09 | 2005-06-22 | Stryker Corporation | Compositions and methods for ligament growth and repair |
JP2006515765A (ja) * | 2002-11-15 | 2006-06-08 | エスディージーアイ・ホールディングス・インコーポレーテッド | 滑膜性関節を治療するためのコラーゲンベース材料および方法 |
JPWO2005073365A1 (ja) * | 2004-01-29 | 2007-09-13 | 株式会社 ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング | 移植用細胞の処理方法、細胞懸濁液、移植用補綴物、および損傷部位の治療方法 |
CN105640992A (zh) * | 2008-03-21 | 2016-06-08 | 组织基因公司 | 椎间盘退化的治疗 |
JP5388233B2 (ja) * | 2011-01-19 | 2014-01-15 | 富士ソフト株式会社 | 再生軟骨の軟骨特性を評価する方法 |
US10793625B2 (en) * | 2012-05-01 | 2020-10-06 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods for treating or preventing osteoarthritis |
JP2016531147A (ja) * | 2013-09-09 | 2016-10-06 | フィジーン、エルエルシーFigene, Llc | コンドロサイトまたは軟骨型細胞の再生のための遺伝子治療 |
JP7269231B2 (ja) | 2017-06-30 | 2023-05-08 | コーロン ライフ サイエンス インコーポレイテッド | 細胞治療剤の有効性の評価方法 |
CN113372432A (zh) * | 2021-06-15 | 2021-09-10 | 深圳市臻质医疗科技有限公司 | 一种基于化学修饰mRNA编码蛋白因子诱导和/或增强软骨损伤修复的方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1996039196A1 (en) * | 1995-06-06 | 1996-12-12 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | Gene transfer for treating a connective tissue of a mammalian host |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5858355A (en) * | 1990-12-20 | 1999-01-12 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | IRAP gene as treatment for arthritis |
US5869041A (en) * | 1996-01-12 | 1999-02-09 | The Miriam Hospital | Delivery of bioactive compounds to an organism |
US6077987A (en) * | 1997-09-04 | 2000-06-20 | North Shore-Long Island Jewish Research Institute | Genetic engineering of cells to enhance healing and tissue regeneration |
EP2075002B1 (en) * | 1998-05-01 | 2013-02-13 | University of Pittsburgh | Myoblasts for the repair of urinary sphincter muscle |
US6315992B1 (en) * | 1999-06-30 | 2001-11-13 | Tissuegene Co. | Generating cartilage in a mammal using fibroblasts transfected with a vector encoding TGF-β-1 |
-
2000
- 2000-05-03 EP EP00925522A patent/EP1175228A4/en not_active Ceased
- 2000-05-03 AU AU44242/00A patent/AU778047B2/en not_active Expired
- 2000-05-03 CN CN008070741A patent/CN1371289B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-03 JP JP2000615060A patent/JP4592186B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-03 WO PCT/IB2000/000653 patent/WO2000066177A1/en not_active Application Discontinuation
- 2000-05-03 CA CA2373045A patent/CA2373045C/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-03 KR KR1020017013987A patent/KR100702725B1/ko active IP Right Grant
- 2000-05-03 CN CN2010105280759A patent/CN101972275A/zh active Pending
-
2006
- 2006-07-18 JP JP2006195771A patent/JP4188986B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2008
- 2008-07-04 JP JP2008176059A patent/JP4547446B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1996039196A1 (en) * | 1995-06-06 | 1996-12-12 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | Gene transfer for treating a connective tissue of a mammalian host |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2373045A1 (en) | 2000-11-09 |
JP2002542801A (ja) | 2002-12-17 |
AU778047B2 (en) | 2004-11-11 |
JP4188986B2 (ja) | 2008-12-03 |
CN1371289B (zh) | 2013-03-20 |
CN1371289A (zh) | 2002-09-25 |
KR20020036943A (ko) | 2002-05-17 |
AU4424200A (en) | 2000-11-17 |
EP1175228A1 (en) | 2002-01-30 |
JP2009019039A (ja) | 2009-01-29 |
CA2373045C (en) | 2016-07-26 |
EP1175228A4 (en) | 2003-02-26 |
WO2000066177A1 (en) | 2000-11-09 |
CN101972275A (zh) | 2011-02-16 |
JP4592186B2 (ja) | 2010-12-01 |
JP2007008950A (ja) | 2007-01-18 |
KR100702725B1 (ko) | 2007-04-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4547446B2 (ja) | TGF−βを利用した遺伝子療法 | |
US6797703B1 (en) | Gene therapy using TGF-β | |
US7282200B2 (en) | Mixed-cell gene therapy | |
JP4033400B2 (ja) | 軟骨細胞とTGF−βを用いた軟骨再生 | |
US20220160780A1 (en) | Mixed-cell gene therapy | |
US20080226611A1 (en) | Gene Therapy Using TGF-beta | |
US7338655B1 (en) | Gene therapy using TGF-β | |
CN113939323B (zh) | 使用软骨细胞和TGF-β进行软骨再生 | |
US20190224248A1 (en) | Cartilage regeneration using chondrocyte and tgf-beta | |
WO2002055656A2 (en) | GENE THERAPY USING TGF-$g(b) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20081224 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090323 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090326 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090423 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100112 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100402 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100407 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100518 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100608 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100705 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130709 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Ref document number: 4547446 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |