JP4035185B2 - セリンプロテアーゼ阻害剤 - Google Patents
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Description
【発明が属する技術分野】
【０００１】
本発明は、ボダイジュ抽出物を含むセリンプロテアーゼ阻害剤に関する。
【従来の技術】
【０００２】
セリンプロテアーゼ阻害剤は動物、植物中に広く分布しており、例えば動物由来のものとしては、ウシ、ブタ、ヒツジの膵臓、耳下腺、リンパ腺などから分離されており、植物由来のものとしてはダイズ、コムギ、トウモロコシなどから分離されている。セリンプロテアーゼ阻害剤の応用例として抗炎症剤（特開平３−１７６４９９号公報）、臨床検査薬（特開平３−２７９８５９号公報）、急性循環不全およびそれにともなう臓器機能不全に対する治療薬（特開平３−２２７９４１号公報）がある。
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明はセリンプロテアーゼ阻害剤を提供し、その用途拡大を目的としたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明のセリンプロテアーゼ阻害剤は、本発明者らによる植物抽出物のセリンプロテアーゼ阻害活性の検討中、その活性を認め、本発明を完成するに至った。
【０００５】
本発明のセリンプロテアーゼ阻害剤は、次に示される方法により得られる。例えば、ボダイジュ（学名 Ｆｉｃｕｓ ｒｅｌｉｇｉｏｓａ Ｌｉｎｎｅの葉など）を水、エタノール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコールなどの水溶性溶媒の単独あるいはそれらの混合溶媒によって加熱あるいは常温にて抽出し、その抽出液をそのままあるいは濃縮して利用することができる。また、抽出液を凍結乾燥してもよい。
【０００６】
本発明のセリンプロテアーゼ阻害剤は、乾固物として０．０００１〜１０重量％の濃度で用いることができる。０．０００１重量％以下の濃度では充分な効果が得られず、１０重量％以上の濃度では効果の増強がみられず不経済である。
【実施例】
【０００７】
次に本発明を詳細に説明するため実施例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。
【０００８】
実施例−１
ボダイジュ抽出物は原材料に対して１０倍量の５０％エタノール水溶液を加え、室温で７日間、時々振とうしながら抽出した後、ろ紙で濾過したものを用いた。
【発明の効果】
【０００９】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００１０】
実験例−１ セリンプロテアーゼ活性阻害作用
ボダイジュ抽出物のトリプシン活性に対する阻害実験を行った。トリプシン（シグマ社）を０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）緩衝液に溶解して１００Ｕ／ｍｌの酵素溶液を調製した。０．５ｍｌの０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）緩衝液に４４０μｌの水、５０μｌの被験液（抽出物を乾固物として１（ｗ／ｖ）％含む）および１０μｌの酵素溶液を加え、３０℃で２分間保温した。次に、１０μｌの１０ｍＭ Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−ＭＣＡ（ペプチド研）ＤＭＳＯ溶液を加え、１時間の反応後、1ｍｌの反応停止液を加え、遊離したＡＭＣの蛍光強度を測定した。抽出物無添加時の活性に対する添加時の活性の値から、活性阻害率を求めた。その結果、表１に示すようにボ ダイジュ抽出物はトリプシン活性に対し、阻害効果を示した。その阻害率は８５．０％であった。
【００１１】
【表１】
【００１２】
実験例−２ エラスターゼ活性阻害作用
ボダイジュ抽出物のエラスターゼ活性に対する阻害実験を行った。カゼインを基質として含む、ポリアクリルアミドゲルを作製し、５０Ｕ／ｍｌのエラスターゼ（シグマ社）を試料とした電気泳動を行った。その後、このゲルごとトリス−塩酸緩衝液中で３７℃で２０時間酵素基質反応を行った。この際、抽出物を０．２５（ｗ／ｖ）％の濃度で緩衝液中に添加した。反応終了後、ゲルをタンパク染色すると、エラスターゼの活性は染色されないバンドとして検出される。このバンドをデンシトメーターにて定量し、抽出物無添加時の活性に対する添加時の活性の値から、活性阻害率を求めた。その結果、表２に示すようにボダイジュ抽出物はエラスターゼ活性に対し、阻害効果を示した。その阻害率は７７．３％であった。
【００１３】
【表２】
【０００１】
本発明は、ボダイジュ抽出物を含むセリンプロテアーゼ阻害剤に関する。
【従来の技術】
【０００２】
セリンプロテアーゼ阻害剤は動物、植物中に広く分布しており、例えば動物由来のものとしては、ウシ、ブタ、ヒツジの膵臓、耳下腺、リンパ腺などから分離されており、植物由来のものとしてはダイズ、コムギ、トウモロコシなどから分離されている。セリンプロテアーゼ阻害剤の応用例として抗炎症剤（特開平３−１７６４９９号公報）、臨床検査薬（特開平３−２７９８５９号公報）、急性循環不全およびそれにともなう臓器機能不全に対する治療薬（特開平３−２２７９４１号公報）がある。
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明はセリンプロテアーゼ阻害剤を提供し、その用途拡大を目的としたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明のセリンプロテアーゼ阻害剤は、本発明者らによる植物抽出物のセリンプロテアーゼ阻害活性の検討中、その活性を認め、本発明を完成するに至った。
【０００５】
本発明のセリンプロテアーゼ阻害剤は、次に示される方法により得られる。例えば、ボダイジュ（学名 Ｆｉｃｕｓ ｒｅｌｉｇｉｏｓａ Ｌｉｎｎｅの葉など）を水、エタノール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコールなどの水溶性溶媒の単独あるいはそれらの混合溶媒によって加熱あるいは常温にて抽出し、その抽出液をそのままあるいは濃縮して利用することができる。また、抽出液を凍結乾燥してもよい。
【０００６】
本発明のセリンプロテアーゼ阻害剤は、乾固物として０．０００１〜１０重量％の濃度で用いることができる。０．０００１重量％以下の濃度では充分な効果が得られず、１０重量％以上の濃度では効果の増強がみられず不経済である。
【実施例】
【０００７】
次に本発明を詳細に説明するため実施例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。
【０００８】
実施例−１
ボダイジュ抽出物は原材料に対して１０倍量の５０％エタノール水溶液を加え、室温で７日間、時々振とうしながら抽出した後、ろ紙で濾過したものを用いた。
【発明の効果】
【０００９】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００１０】
実験例−１ セリンプロテアーゼ活性阻害作用
ボダイジュ抽出物のトリプシン活性に対する阻害実験を行った。トリプシン（シグマ社）を０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）緩衝液に溶解して１００Ｕ／ｍｌの酵素溶液を調製した。０．５ｍｌの０．１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）緩衝液に４４０μｌの水、５０μｌの被験液（抽出物を乾固物として１（ｗ／ｖ）％含む）および１０μｌの酵素溶液を加え、３０℃で２分間保温した。次に、１０μｌの１０ｍＭ Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−ＭＣＡ（ペプチド研）ＤＭＳＯ溶液を加え、１時間の反応後、1ｍｌの反応停止液を加え、遊離したＡＭＣの蛍光強度を測定した。抽出物無添加時の活性に対する添加時の活性の値から、活性阻害率を求めた。その結果、表１に示すようにボ ダイジュ抽出物はトリプシン活性に対し、阻害効果を示した。その阻害率は８５．０％であった。
【００１１】
【表１】
実験例−２ エラスターゼ活性阻害作用
ボダイジュ抽出物のエラスターゼ活性に対する阻害実験を行った。カゼインを基質として含む、ポリアクリルアミドゲルを作製し、５０Ｕ／ｍｌのエラスターゼ（シグマ社）を試料とした電気泳動を行った。その後、このゲルごとトリス−塩酸緩衝液中で３７℃で２０時間酵素基質反応を行った。この際、抽出物を０．２５（ｗ／ｖ）％の濃度で緩衝液中に添加した。反応終了後、ゲルをタンパク染色すると、エラスターゼの活性は染色されないバンドとして検出される。このバンドをデンシトメーターにて定量し、抽出物無添加時の活性に対する添加時の活性の値から、活性阻害率を求めた。その結果、表２に示すようにボダイジュ抽出物はエラスターゼ活性に対し、阻害効果を示した。その阻害率は７７．３％であった。
【００１３】
【表２】
Claims (1)
- ボダイジュ（学名：Ｆｉｃｕｓ ｒｅｌｉｇｉｏｓａ Ｌｉｎｎｅ）抽出物を含むセリンプロテアーゼ阻害剤。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP29757596A JP4035185B2 (ja) | 1996-10-18 | 1996-10-18 | セリンプロテアーゼ阻害剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29757596A JP4035185B2 (ja) | 1996-10-18 | 1996-10-18 | セリンプロテアーゼ阻害剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10120586A JPH10120586A (ja) | 1998-05-12 |
| JP4035185B2 true JP4035185B2 (ja) | 2008-01-16 |
Family
ID=17848336
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP29757596A Expired - Fee Related JP4035185B2 (ja) | 1996-10-18 | 1996-10-18 | セリンプロテアーゼ阻害剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4035185B2 (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JP4901025B2 (ja) * | 2001-06-22 | 2012-03-21 | 株式会社ナリス化粧品 | エラスターゼ阻害剤 |
| US20030138467A1 (en) * | 2001-12-27 | 2003-07-24 | Avon Products, Inc. | Methods for improving the aesthetic appearance of skin |
| JP2004196696A (ja) * | 2002-12-18 | 2004-07-15 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 関節炎の予防剤または治療剤 |
| JP4875298B2 (ja) * | 2004-12-28 | 2012-02-15 | 一丸ファルコス株式会社 | トリプシン阻害剤 |
| JP2006213610A (ja) * | 2005-02-02 | 2006-08-17 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | トリプシン阻害剤 |
| JP2010195831A (ja) * | 2010-06-12 | 2010-09-09 | Lotte Co Ltd | ＩκＢキナーゼ阻害剤 |
| KR101775613B1 (ko) | 2014-09-16 | 2017-09-07 | 주식회사 메디바이오랩 | 망고스틴 추출물 또는 알파, 감마 망고스틴을 유효성분으로 포함하는 치주질환 예방 또는 개선용 조성물 |
-
1996
- 1996-10-18 JP JP29757596A patent/JP4035185B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH10120586A (ja) | 1998-05-12 |
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