JP4029032B2 - 高レベルのクロロフィルを含有するマリゴールド抽出物からのキサントフィルの精製 - Google Patents
高レベルのクロロフィルを含有するマリゴールド抽出物からのキサントフィルの精製 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4029032B2 JP4029032B2 JP2002501797A JP2002501797A JP4029032B2 JP 4029032 B2 JP4029032 B2 JP 4029032B2 JP 2002501797 A JP2002501797 A JP 2002501797A JP 2002501797 A JP2002501797 A JP 2002501797A JP 4029032 B2 JP4029032 B2 JP 4029032B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- solvent
- dispersion
- residue
- water
- chlorophyll
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C403/00—Derivatives of cyclohexane or of a cyclohexene or of cyclohexadiene, having a side-chain containing an acyclic unsaturated part of at least four carbon atoms, this part being directly attached to the cyclohexane or cyclohexene or cyclohexadiene rings, e.g. vitamin A, beta-carotene, beta-ionone
- C07C403/24—Derivatives of cyclohexane or of a cyclohexene or of cyclohexadiene, having a side-chain containing an acyclic unsaturated part of at least four carbon atoms, this part being directly attached to the cyclohexane or cyclohexene or cyclohexadiene rings, e.g. vitamin A, beta-carotene, beta-ionone having side-chains substituted by six-membered non-aromatic rings, e.g. beta-carotene
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
- A61P27/12—Ophthalmic agents for cataracts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Description
発明の分野
本発明は、高レベルのクロロフィル色素(葉緑素)を含有し得るマリゴールド原抽出物からの、ルテイン及びゼアキサンチンの精製処理に関する。
【0002】
関連技術の説明
カロチノイドは、植物、一部の魚、甲殻類、鳥類、藻類及びバクテリアに豊富に見出される天然色素の群から成る。この色素の群には、カロチン(例えばβ−カロチン)及びキサントフィル(例えばルテイン及びゼアキサンチン)を含む黄色カロチノイドと、カプサンチン、カンタキサンチン及びアスタキサンチンを含む赤色カロチノイドとがある。これらの黄色及び赤色カロチノイドは、しばしば、植物でも特に顕花植物に、主として緑色のクロロフィル色素を含む他の分類の色素と共に存在する。
【0003】
マリゴールドから抽出されるカロチノイド、特にキサントフィルは、養鶏業界において、ブロイラーの皮や卵黄の着色に、何十年にも渡って用いられている。ルテインは、ゼアキサンチンよりも遙かに高濃度でマリゴールド抽出物中に存在する。養鶏業界で用いられている着色製剤で、ゼオキサンチンを生じるためにルテインが異性化された、ゼオキサンチン濃度が比較的高いものが、最近市場に出てきている(トレス(Torres)の米国特許第5,523,494号及びロドリゲス(Rodriguez)の米国特許第5,973,211号)。
【0004】
養鶏業界におけるカロチノイドの商業的な重要性に加え、カロチノイドは、最近、科学者から、人間の健康増進における潜在的な役割に関して、かなりの注目を集めている。α及びβ−カロチン、ルテイン並びにゼアキサンチンのような化合物は、強い抗酸化作用を有することが示されており、これは、癌、動脈硬化、白内障、黄斑変性等の病気を抑制又は防止し得るものである(ボーエン(Bowen)、WO98/45241)。ルテイン及びゼアキサンチンは、人間の網膜の黄斑領域に存在するただ2つのカロチノイドであり、視力に関わる黄斑の正常な機能に関係する。カロチノイドが免疫応答を高めることも報告されている。代謝プロセスの副生成物として生成されると共に環境汚染物質(例えば、汚れた空気中の二酸化窒素及びオゾン、重金属、ハロゲン化炭化水素、電離放射線、煙草の煙等)から生じるフリーラジカルは、上記の多くの病気の原因として関わっている。カロチノイドは、有害な化学反応のカスケードを開始させ得る反応性が高い酸素フリーラジカルの、強力なクエンチャーである。カロチノイドは、特に酸素の分圧が低いと、連鎖破壊型抗酸化剤としても機能する。従って、カロチノイドは、フリーラジカルに誘発される反応を抑制するよう作用できると共に、フリーラジカルの発生を防止でき、それにより、フリーラジカル/酸化ダメージを制限することができる。
【0005】
タゲテス・エレクタ(Tagetes erecta)から手摘みされるマリゴールドの花弁は、自然界で見出される、含有カロチノイド濃度が最も高いものの1つである。マリゴールドの工業規模の栽培及び収穫プロセスの機械化により、一般的に花弁と共に刈り取られる、葉、茎、雑草及び他の植物の部分の量が増加した。このような原材料からミール(meals)を抽出すると、高レベルのクロロフィル及び関連化合物を有するオレオ樹脂が得られる。その結果、このようなオレオ樹脂では、手摘みの花から得られるオレオ樹脂よりも、ルテイン及びゼアキサンチンの濃度が比較的低くなる。
【0006】
クロロフィルの含有量が高いマリゴールド抽出物は、カロチノイド及びクロロフィルの加水分解を完了するために、通常、アルカリ性の条件下で鹸化される。反応混合物中には、通常、様々なレベルの他の脂質、クロロフィリン、及び鹸化不能物質も存在する。その結果、機械的に収穫されたマリゴールドのミールから得られたオレオ樹脂のキサントフィル濃度が比較的低いことと、含有する色素のレベルが様々であることとが、人間が消費するためのキサントフィル製品の商業的な開発を妨げてきた。従って、大規模に機械的に収穫されるマリゴールド栽培から得られる、高レベルのクロロフィルを有し得るミールから、高純度のルテイン及びゼアキサンチン濃縮物を得るための、工業的な処理の必要性が残っている。
【0007】
発明の概要
本発明は、高レベルのクロロフィルを有し得る鹸化されたマリゴールド抽出物を用いて、高純度のルテイン及びゼアキサンチン濃縮物を得るための、工業規模の処理を提供する。本発明は、生成物中の全カロチノイドにおいてゼアキサンチン及びルテインのレベルが97%を超える、人体への使用に用途を有し得るキサントフィル濃縮物を生成することも目的とする。
【0008】
詳細には、本発明は、鹸化された抽出物からキサントフィルを精製する処理に関する。この処理は、鹸化された抽出物を水中に分散して分散物を形成する工程と、任意の水溶性化合物の一部が水に溶解して水相及び水に不溶性の残留物を構成する条件下で、前記分散物を混合する工程と、前記残留物から前記水相を分離する工程と、任意の脂溶性化合物の少なくとも一部が無極性溶媒に溶解し、前記無極性溶媒からキサントフィルの少なくとも一部が沈殿して沈殿物を構成する条件下で、前記残留物を前記無極性溶媒と接触させる工程と、前記沈殿物から前記無極性溶媒を分離する工程と、任意の残存クロロフィルの少なくとも一部が極性溶媒に溶解するように、該極性溶媒で前記沈殿物を洗浄する工程と、前記沈殿物から前記極性溶媒を分離して、望ましい純度レベルのキサントフィルを含有する生成物を生じる工程と、を有する。
【0009】
本発明の1つの態様では、前記鹸化された抽出物が、カロチノイド及びクロロフィルの混合物を含有する機械的に収穫されたマリゴールドから得られる。
【0010】
変形例では、この処理は、前記無極性溶媒及び前記極性溶媒中に含まれるカロチノイドの実質的な部分を回収する工程と、不活性雰囲気中で生成物から溶媒を除去し乾燥させる工程と、前記分散物を混合する前に、前記分散物のpHを約5.0〜7.0に調整する工程とを更に有する。このpHは、燐酸、硫酸、塩酸、酢酸、又は類似の特性を有する任意の無機若しくは有機酸から成る群から選択される酸を添加することによって調整されてもよい。
【0011】
更なる変形例では、この処理は、前記分散物を混合する前に、前記分散物の温度を約45℃〜80℃に調整する工程と、前記残留物を前記無極性溶媒と接触させる前に、前記残留物を水で洗浄する工程とを更に有してもよく、前記洗浄に用いられる水のpHが約5.0〜7.0に調整されると共に前記水の温度が約45℃〜80℃に調整されてもよい。
【0012】
1つの態様では、前記無極性溶媒が、ヘキサン、へプタン、シクロヘキサン、オクタン、芳香族炭化水素類、エーテル類及びハロゲン化炭化水素類から成る群から選択され、前記極性溶媒が、ケトン、アルコール、アミン、及びそれらの混合物から成る群から選択される。
【0013】
別の態様では、前記生成物中のキサントフィルが、加水分解されたルテイン及びゼアキサンチンの混合物を含有する。前記ルテイン及びゼアキサンチンが、前記鹸化された抽出物中の95%を超えるカロチノイドを含有してもよい。前記生成物が、前記鹸化された抽出物1キログラム当たり400〜900グラムの総カロチノイドを更に含有してもよい。前記鹸化された抽出物が、約0〜20%のクロロフィルを含有してもよい。前記分散物中のカロチノイドの濃度が、前記鹸化された抽出物1キログラム当たり約0.1〜15グラムであってもよく、又は、より好ましくは、前記鹸化された抽出物1キログラム当たり約5〜10グラムであってもよい。
【0014】
この処理の別の変形例では、前記無極性溶媒が、残留物1部につき溶媒が1〜25部の比率で用いられてもよく、より好ましくは、残留物1部につき溶媒が5〜12部の比率で用いられてもよい。前記極性溶媒が、沈殿物1部につき溶媒が1〜15部の比率で用いられてもよく、より好ましくは、沈殿物1部につき溶媒が4〜10部の比率で用いられてもよい。前記無極性溶媒及び前記極性溶媒が周囲温度で用いられてもよい。
【0015】
本発明の1つの態様では、前記生成物が、人体への投与に適している。
【0016】
本発明の別の変形例では、望ましい純度レベルのキサントフィルを得る処理が開示される。この処理は、機械的に収穫された植物組成物の、鹸化された抽出物を得る工程を有する。この植物組成物は、キサントフィルを含有する第1の植物の部分とクロロフィルを含有する第2の植物の部分とから成る。鹸化された抽出物は水で洗浄され、油性の残留物が残される。この残留物は、任意の脂溶性化合物の少なくとも一部が無極性溶媒に溶解し、無極性溶媒からキサントフィルの少なくとも一部が沈殿して沈殿物を構成する条件下で、無極性溶媒と接触させられる。この無極性溶媒は沈殿物から分離される。次に、沈殿物は、任意の残存クロロフィルの少なくとも一部が極性溶媒に溶解するように、極性溶媒で洗浄される。この極性溶媒は沈殿物から分離され、望ましい純度レベルのキサントフィルを含有する生成物が生じる。
【0017】
好ましい実施形態の詳細説明
天然の供給源からのカロチノイドの抽出及び分離には、多くの手順を使用できる。例えば、フィリップ(Philip)(米国特許第4,048,203号)は、アルコール媒体中でのルテインの精製処理を開示している。ティチョウスキー(Tyczhowski)(Pault.Sci.70(3):651−54)は、異なる溶媒を用いた結晶化による、鹸化されたマリゴールド抽出物からの遊離ルテインの分離を教示している。オージッヒ(Ausich)(米国特許第5,648,564号)は、アルカリ性プロピレングリコール溶液中にて鹸化され、次いで結晶化されたマリゴールド抽出物からのルテインの分離及び精製を開示している。カーチク(Khachik)(米国特許第5,382,714号)は、低温でのアルコール/水混合液を用いた洗浄、及び低温での複数の二成分溶媒混合液中での結晶化による、鹸化されたマリゴールド抽出物からのルテインの分離及び精製を教示している。より最近では、カーチク(WO99/20587)が、KOH及びNaHOのアルコール溶液を用いて鹸化された複数の植物抽出物からカロチノイドを抽出し、結晶化にTHF及び水を用いる、ルテインの分離及び精製を開示している。この処理により、カロチノイドの原材料中に存在するクロロフィルを分離することが可能である。ヒルズ(Hills)(米国特許第4,851,339号)は、特にある藻類から、カロチン、テトラピロール及びポルフィリンを同時に分離する処理を記載している。
【0018】
キタオカ(Kitaoka)(EP 732 378 A2)は、無極性溶媒及び水溶液による液液抽出を用いた、非常に希薄な着色抽出物に適用可能な処理を記載している。レペタ(Repeta)(Monogr.Oceanogr.Methodol.,1997,10:239−60)は、分析及び構造説明の目的で、カロチノイドの様々な精製法を詳しく検討しているが、商業的な規模の用途は意図されていない。
【0019】
本発明は、特に、比較的高レベルのクロロフィルを有するマリゴールド抽出物を含む天然の供給源から、ルテイン及びゼアキサンチンを分離及び精製する処理を開示する。詳細には、この処理の原材料は、20g/kg以上の緑色物質を含有する鹸化されたマリゴールド抽出物を含む。しかし、開示される処理は、より低レベルの汚染クロロフィル色素を有する別の原材料の供給源からの、キサントフィルの分離及び精製にも適用可能であるとも考えられる。様々な原材料の供給源には、藻類、蚕の排泄物、ホウレンソウ及びアルファルファの葉が含まれる。
【0020】
本発明の好ましい一実施形態では、1キログラム当たり約40〜約150グラムのカロチノイド及び1キログラム当たり約5〜約20グラムのクロロフィルを含有するマリゴールド抽出物を、出発原料として用いる。このような抽出物は、メキシコ国シナロア、ロスモチス(Los Mochis, Sinaloa)所在のプロドゥクトス・デシドラタドス・デ・メヒコ(メキシコ)(Productos Deshidratados de Mexico)(PRODEMEX)によって生産される。これらの抽出物の生成に用いられるマリゴールドの花は、機械的に収穫された、クロロフィル及び誘導体を豊富に含む、かなりの量の葉、茎、花柄、及び他の植物の部分を有するものであってもよい。
【0021】
マリゴールドのミールは、機械的に収穫した花を脱水することによって用意される。脱水には、ベルト式、トレー式、棚式、及びドラム式乾燥機又は天日干しを含む複数の方法がある。乾燥材料は粉砕され、次に、例えばヘキサン等の無極性溶媒を用いた溶媒抽出が行われる。次に、溶媒を蒸発させて除去し、マリゴールドのオレオ樹脂を得る。このオレオ樹脂を鹸化して、存在するキサントフィル及びクロロフィルを完全に加水分解する。鹸化は、オレオ樹脂を水酸化ナトリウム若しくは水酸化カリウム又は他のアルカリで処理することによって達成されてもよい。鹸化条件は当業者に周知である。
【0022】
鹸化反応中に、遊離ルテイン、遊離ゼアキサンチン、及び他の遊離キサントフィル、並びに、ミリスチン酸、パルミチン酸及びステアリン酸等の脂肪酸のナトリウム塩及びカリウム塩が得られる。更に、鹸化剤として用いられる塩基(例えばNaOH又はKOH)に応じて、色素分子上のフィチル基及びメチル基を、ナトリウム又はカリウムで置換してもよい。鹸化中に、水溶性クロロフィリンが生成されてもよい。
【0023】
次に、鹸化された抽出物を水で洗浄する。抽出物は水中に分散され、最終的に、水性分散物1キログラム当たりのキサントフィルの合計量が約0.1〜30グラム、好ましくは約5〜10グラムの濃度となるように、希釈される。水性分散物は、均質な混合物を構成するよう十分に混合されるのが好ましい。
【0024】
次に、酢酸、燐酸、硫酸、塩酸、又は類似の特性を有する任意の無機酸若しくは有機酸から成る群から選択される酸の水溶液を用いて、混合物のpHを約1.0〜7.0、好ましくは約5.0〜6.5に調整する。酸の溶液の濃度は、約5〜25%(w/w)に設定されてもよい。混合物の温度は、約20℃〜80℃、好ましくは約45℃〜70℃に保たれるべきである。水溶性クロロフィリン及び他の水溶性の不純物を含有する水相が、上部の油性の残留物から容易に分離すると、混合物のpHが十分に低減(中和)される。従来の分離装置を用いて、下部の水相を取り出すことができる。油性の残留物は、水溶性の残存クロロフィリン及びキサントフィルを幾分含有している。
【0025】
一定のpHを保った水で更に洗浄することにより、油性の上部相から、残存している水溶性の緑色物質の濃度を低減してもよい。各洗浄ごとに、残留物の体積に対して4〜20倍、好ましくは8〜15倍の体積の水を用いることができる。洗浄水は、次に行われる緑色色素の分離のために、溜めておかれてもよい。油性の残留物からクロロフィル及び関連化合物が実質的に除去され、主に脂質、水及びキサントフィルを含有する状態になるまで、水による洗浄を続けてもよい。
【0026】
次に、無極性溶媒を用いて、湿った油性の残留物の抽出を行う。溶媒は、短鎖脂肪族(例えばヘキサン)若しくは芳香族炭化水素、アルキル置換溶媒、又はそれらの混合物から成る群から選択されてもよい。炭化水素は6〜8個の炭素原子を有するのが好ましい。各抽出ごとに、油性の残留物1部につき約1〜20部、好ましくは約5〜10部の無極性溶媒(w/w)を用いてもよい。少なくとも2回の抽出を用いるのが好ましい。抽出が行われる温度は約−20℃〜70℃、好ましくは約15℃〜45℃、最も好ましくは約35℃〜45℃である。無極性溶媒中に、脂質及びカロチン並びに他の脂溶性物質が抽出され、この無極性溶媒を分離して溜めることができる。
【0027】
抽出中に無極性溶媒中で沈殿する固形分は、ルテイン及びゼアキサンチンを豊富に含む。残りの量のクロロフィルが依然として存在することもある。極性溶媒を用いて更に1、2回の洗浄を行えば、クロロフィルによる汚染レベルを最小限にするのに十分なはずである。極性溶媒は、ケトン、アルコール、アミン、又は類似の性質を有する他の任意の極性溶媒であってよい。溶媒は、クロロフィリンの分離に用いられたのと同じ酸を用いて酸性化されるべきである。残存固形分の重量に対して3〜20部の溶媒を用いてもよいが、6〜10部の溶媒を用いるのが好ましい。洗浄は周囲温度で行うのが好ましい。洗浄に用いた溶媒を集めて溶媒を回収してもよい。従来の方法を用いて、好ましくは不活性雰囲気中で、溶媒を除去し最終的な固形分を乾燥する。
【0028】
以下の実施例から、本発明がより完全に理解されよう。
【0029】
例1
約660グラムの鹸化されたマリゴールド抽出物(この材料は、鹸化抽出物1キログラム当たり、約72.5グラムのキサントフィル及び約12グラムのクロロフィルを含有する)を、周囲温度で水中に分散し、混合物中の総カロチノイドが1キログラム当たり10グラムとなる最終的な濃度を得た。25%燐酸水溶液を用いて、混合物のpHを6に調整した。次に、温度を70℃に上昇させた。20分間にわたって激しく混合した後、混合物を放置した。底に、カリウム及びマグネシウムクロロフィリンを含有する水相が生成され、これは容易に分離された。体積の6倍の酸性水溶液を用いて、残りの油性物質を更に3回洗浄し、緑色色素の大半を除去した。全てのクロロフィリン溶液を集め、後の処理のために保存した。
【0030】
1部の油に対して6部のヘキサンを有する溶液を用いて、油性の残りの部分を周囲温度で20分間にわたり洗浄した。脂肪酸、カロチン、及びヘキサンに可溶な他の脂質を豊富に含む溶媒相から、キサントフィルが沈殿を開始した。次に、この溶媒を濾過にて分離し、ヘキサンによる洗浄を、1回目と同様に、更に2回繰り返した。残存固形分を、不活性ガス中で、湿度が約4%になるまで乾燥させた。
【0031】
80%の初期色素を含有する、49グラムの重量を有する生成物が得られた。これは、92.2%のルテイン及び6.1%のゼアキサンチンを有する、生成物1キログラム当たりカロチノイド660グラムの濃度に相当し、人体への使用に非常に適している。
【0032】
例2
1キログラムの鹸化されたマリゴールド抽出物(1キログラム当たり110グラムのキサントフィル及び18グラムのクロロフィル)を、周囲温度で水中に分散し、1キログラム当たりカロチノイドが10グラムの分散物を得た。15%酢酸水溶液を用いて、混合物のpHを6.8に調整した。次に、一定速度で撹拌しながら温度を60℃に上昇させ、30分間にわたって撹拌した。次に、分離するまで(約15分間)混合物を放置し、水層を分離した。pH6.8の水による洗浄を更に3回繰り返し、4回目の洗浄後、緑色の色合いが非常に微かになった。
【0033】
ペースト1部当たり8部の溶媒を用いて、ヘキサン:へプタン混合溶媒(2:1)で残りのペーストを洗浄した。チャンバボウル内でこの混合物を遠心分離し、この固相に更に2回の抽出を行い、脂質の大半を除去した。この液体留分から溶媒を蒸発させて回収し、出発原料の総カロチノイドの約14%を有する油性の残留物が残った。これらのカロチノイドは、主に、カロチン、β−クリプトキサンチン、シス及びトランス−ルテインからのエポキシド、並びに僅かなトランス−ルテインであった。遠心分離によって得られた固形ペレット中の溶媒を、窒素中の乾燥により除去し、原材料の色素の約80%を有する生成物を得た。ルテイン及びゼアキサンチンの合計は、総カロチノイドの97.5%であった。乾燥した生成物の重量は150グラムであった。
【0034】
例3
本明細書に全体を参照として援用する米国特許第5,973,211号(ロドリゲス)に記載の手順に従って、約600グラムのマリゴールドミールを鹸化及び異性化した(総キサントフィル中、ゼアキサンチン61%、ルテイン34%)。例1に記載されている方法で、得られた抽出物を処理した。開始時の抽出物は、1キログラム当たりの総カロチノイドが50グラム及び1キログラム当たりのクロロフィルが5グラムの濃度を有していた。処理後、得られた生成物は、1キログラム当たりの総カロチノイドが510グラムの濃度を有し、そのうちの66%がゼアキサンチンで、33%がルテインであった。最終的な濃度及び色素プロフィールは、残存化学物質をほとんど又は全く含まず、且つ、危険な化合物を全く含まず、人体への使用に非常に適した特性を示した。
【0035】
例4
鹸化されたマリゴールド抽出物の10キログラムのバッチ(1キログラム当たりの総カロチノイド90グラム、クロロフィル20グラム)を水と混合し、1キログラム当たりのキサントフィルが約10グラムの濃度の混合物を得た。10%塩酸水溶液を添加して、混合物のpHを6に調整した。20分間撹拌しながら、温度を50℃に調整した。撹拌を止め、混合物を1時間放置した。カリウムクロロフィリン及びマグネシウムクロロフィリンを含有する底部の水層を分離した。抽出物1部に対して6部の水で油性の残留物を2回洗浄し、後で緑色色素を回収するために水性層を分離した。残りの半固形部分を、1部の油に対して8部のヘキサンと混合して分散物を得、これを遠心分離して固めたスラッジを形成した。このスラッジをヘキサンで2回洗浄した。遠心分離された液体部分を溜め、真空中で溶媒を蒸発させて除去した。例2で得られた残留物と同様の残留物が生成され、養鶏産業の着色製品に用いるために保存した。遠心分離された固体部分は、依然として僅かなクロロフィルのような物質を含有していた。このクロロフィルのような物質を除去するために、燐酸でpH3に酸性化したアセトン(固形分1部に対して6部の溶媒)を用いて、ペレットを20分間洗浄した。得られた分散物を濾過し、濾過器から濾過物を除去し、pH3に酸性化された4部のアセトンを用いて更に1回洗浄した。濾液を集め、溶媒を回収した。溶媒の除去後、緑色の残留物を得た。養鶏用着色製品用に、これをヘキサン抽出による残留物と混合した。精製された固形分中の残存溶媒を、窒素流中での乾燥により除去した。精製された物質の収率は、出発材料中のカロチノイドの85%であり、そのうちルテイン及びゼアキサンチンは97%であった。最終的な乾燥粉末の重量は1.1キログラムであった。
【0036】
本発明の複数の実施形態を説明したが、本発明の説明を、本発明の基本的な処理を用いた別の実施形態を提供するように変更できることは明らかである。従って、当業者には、本発明の範囲が、上記に例として詳細に説明された具体的な実施形態ではなく、本明細書に添付された特許請求の範囲によって定義されるものであることが認識されよう。
Claims (22)
- 機械的に収穫されたマリゴールド、藻類、蚕の排泄物、ホウレンソウ又はアルファルファの葉から得られる鹸化された抽出物からキサントフィルを製造する方法において、前記鹸化された抽出物はカロチノイド及びクロロフィルの混合物を含有し、
鹸化された抽出物を水中に分散して分散物を形成する工程と、
任意の水溶性化合物の一部が水に溶解して水相及び水に不溶性の残留物を構成する条件下で、前記分散物を混合する工程と、
前記残留物から前記水相を分離する工程と、
任意の脂溶性化合物の少なくとも一部が無極性溶媒に溶解し、前記無極性溶媒からキサントフィルの少なくとも一部が沈殿して沈殿物を構成する条件下で、前記残留物を前記無極性溶媒と接触させる工程であって、ここで前記無極性溶媒が、ヘキサン、へプタン、シクロヘキサン、オクタン、芳香族炭化水素類、エーテル類及びハロゲン化炭化水素類から成る群から選択される、工程と、
前記沈殿物から前記無極性溶媒を分離して、望ましい純度レベルのキサントフィルを含有する生成物を生じる工程と、
を有する方法。 - 任意の残存クロロフィルの少なくとも一部が極性溶媒に溶解するように、該極性溶媒で前記沈殿物を洗浄する工程であって、ここで前記極性溶媒が、ケトン、アルコール、アミン、及びそれらの混合物から成る群から選択される、工程、と、
前記沈殿物から前記極性溶媒を分離する工程と、
をさらに有する請求項1に記載の方法。 - 前記無極性及び/又は極性溶媒を除去することによって前記無極性溶媒及び前記極性溶媒中に含まれるカロチノイドの実質的な部分を回収する工程を更に有することを特徴とする、請求項1または2に記載の方法。
- 不活性雰囲気中で生成物から溶媒を除去し乾燥させる工程を更に有することを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記分散物を混合する前に、前記分散物のpHを5.0〜7.0に調整することを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 燐酸、硫酸、塩酸、または酢酸から成る群から選択される酸を添加することによって前記pHを調整することを特徴とする、請求項5に記載の方法。
- 前記分散物を混合する前に、前記分散物の温度を45℃〜80℃に調整することを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記残留物を前記無極性溶媒と接触させる前に、前記残留物を水で洗浄する工程を更に有することを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記洗浄に用いられる水のpHが5.0〜7.0に調整されると共に前記水の温度が45℃〜80℃に調整されることを特徴とする、請求項8に記載の方法。
- 前記無極性溶媒が、6〜8個の炭素原子を有する芳香族炭化水素であることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記生成物中のキサントフィルが、加水分解されたルテイン及びゼアキサンチンの混合物を含有することを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記ルテイン及びゼアキサンチンが、前記鹸化された抽出物中の95%を超えるカロチノイドを含有することを特徴とする、請求項11に記載の方法。
- 前記生成物が、前記鹸化された抽出物1キログラム当たり400〜900グラムの総カロチノイドを含有することを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記鹸化された抽出物が、0〜20%のクロロフィルを含有することを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記分散物中のカロチノイドの濃度が、前記鹸化された抽出物1キログラム当たり0.1〜15グラムであることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記分散物中のカロチノイドの濃度が、前記鹸化された抽出物1キログラム当たり5〜10グラムであることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記無極性溶媒が、残留物1部につき溶媒が1〜25部の比率で用いられることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記無極性溶媒が、残留物1部につき溶媒が5〜12部の比率で用いられることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記極性溶媒が、沈殿物1部につき溶媒が1〜15部の比率で用いられることを特徴とする、請求項2に記載の方法。
- 前記極性溶媒が、沈殿物1部につき溶媒が4〜10部の比率で用いられることを特徴とする、請求項2に記載の方法。
- 前記無極性溶媒及び前記極性溶媒が周囲温度で用いられることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記生成物中の全カロチノイドにおいてゼアキサンチン及びルテインのレベルが97%を超える、請求項1又は2に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US09/590,611 | 2000-06-09 | ||
US09/590,611 US6329557B1 (en) | 2000-06-09 | 2000-06-09 | Purification of xanthophylls from marigold extracts that contain high levels of chlorophylls |
PCT/IB2001/001217 WO2001094279A2 (en) | 2000-06-09 | 2001-06-07 | Purification of xanthophylls from marigold extracts that contain high levels of chlorophylls |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2003535835A JP2003535835A (ja) | 2003-12-02 |
JP4029032B2 true JP4029032B2 (ja) | 2008-01-09 |
Family
ID=24362926
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002501797A Expired - Fee Related JP4029032B2 (ja) | 2000-06-09 | 2001-06-07 | 高レベルのクロロフィルを含有するマリゴールド抽出物からのキサントフィルの精製 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6329557B1 (ja) |
EP (1) | EP1289916B1 (ja) |
JP (1) | JP4029032B2 (ja) |
CN (1) | CN1212299C (ja) |
AT (1) | ATE404516T1 (ja) |
AU (1) | AU2001266277A1 (ja) |
DE (1) | DE60135330D1 (ja) |
ES (1) | ES2311525T3 (ja) |
IL (2) | IL152958A0 (ja) |
MX (1) | MXPA02011792A (ja) |
NO (1) | NO328529B1 (ja) |
WO (1) | WO2001094279A2 (ja) |
Families Citing this family (34)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2358862B (en) * | 1999-12-21 | 2004-07-21 | Fermentron Ltd | Processes for Extracting Carotenoids from Biomass Carotenoid Sources |
US6784351B2 (en) * | 2001-06-29 | 2004-08-31 | Ball Horticultural Company | Targetes erecta marigolds with altered carotenoid compositions and ratios |
US7575766B2 (en) * | 2001-06-29 | 2009-08-18 | Ball Horticultural Company | Tagetes erecta with altered carotenoid compositions and ratios |
CN1309693C (zh) * | 2002-02-05 | 2007-04-11 | 海宁凤鸣叶绿素有限公司 | 一种从万寿菊花制备叶黄素结晶的方法 |
AU2003218109A1 (en) * | 2002-03-11 | 2003-09-29 | Prodemex, S.A. De C.V. | Enhanced feeding and growth rates of aquatic animals fed an astaxanthin product derived from marigold extract |
US6737535B2 (en) | 2002-06-05 | 2004-05-18 | Kancor Flavours And Extracts Limited | Trans-lutein enriched xanthophyll ester concentrate and a process for its preparation |
US6743953B2 (en) | 2002-08-26 | 2004-06-01 | Kancor Flavours & Extracts Ltd. | Process for the preparation of xanthophyll crystals |
US7109361B2 (en) * | 2003-03-07 | 2006-09-19 | Nu-Tein Co., Inc. | Isolation of lutein from alfalfa |
US20040176475A1 (en) * | 2003-03-07 | 2004-09-09 | Mark Hoffman | Isolation of lutein from alfalfa |
US7541166B2 (en) * | 2003-09-19 | 2009-06-02 | Microfluidic Systems, Inc. | Sonication to selectively lyse different cell types |
PE20050398A1 (es) * | 2003-09-22 | 2005-06-03 | Rosales Jose Antonio Socla | Proceso y purificacion de las xantofilas de marigold |
RU2006132336A (ru) * | 2004-02-10 | 2008-03-20 | Нестек С.А. (Ch) | Композиции, содержащие цис-изомеры каротиноидного соединения, и способ их получения |
WO2007087815A2 (en) | 2004-12-17 | 2007-08-09 | Metanomics Gmbh | Process for the control of production of fine chemicals |
US7351424B2 (en) * | 2004-07-22 | 2008-04-01 | Bio Lut S.A. De C.V. | Enhanced purity trans-lutein-ester compositions and methods of making same |
EP2329815A1 (en) | 2005-02-11 | 2011-06-08 | Kalamazoo Holdings, Inc. | A capsicum variety exhibiting a hyper-accumulation of zeaxanthin and products derived therefrom |
US8592662B2 (en) | 2005-02-11 | 2013-11-26 | Kalamazoo Holdings, Inc. | Capsicum variety exhibiting a hyper-accumulation of zeaxanthin and products derived therefrom |
CN1332947C (zh) * | 2005-08-03 | 2007-08-22 | 浙江医药股份有限公司新昌制药厂 | 一种从植物油树脂中分离提纯叶黄素晶体的方法 |
US20070065487A1 (en) * | 2005-09-21 | 2007-03-22 | Bio Lut S.A. De C.V. | Trans-lutein xantophyll ester of high purity and high bioavailability in micellar solution and a process for the preparation thereof |
US7629007B2 (en) * | 2005-12-19 | 2009-12-08 | Industrias Vepinsa, S.A. de C.V. | Process for purification of free xanthophylls |
US7671242B2 (en) * | 2005-12-21 | 2010-03-02 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Isolation of aflatoxin-free lutein from aflatoxin-contaminated plants and plant products |
ES2281277B1 (es) * | 2005-12-29 | 2008-06-16 | Investigaciones Quimicas Y Farmaceuticas, S.A. | Procedimiento para la preparacion de xantofilas de origen natural de elevada pureza. |
ES2281276B1 (es) * | 2005-12-29 | 2008-06-16 | Investigaciones Quimicas Y Farmaceuticas, S.A. | Procedimiento para la preparacion de concentrados de xantofilas. |
WO2007098435A2 (en) * | 2006-02-21 | 2007-08-30 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Lutein extraction from ozone-treated plant sources |
AT503329A1 (de) * | 2006-03-02 | 2007-09-15 | Omnica Gmbh | Verfahren zur herstellung einer zusammensetzung, welche zumindest ein xantophyll enthält |
US20080124755A1 (en) * | 2006-10-12 | 2008-05-29 | Michael Tai-Man Louie | Biosynthesis of beta-cryptoxanthin in microbial hosts using an Arabidopsis thaliana beta-carotene hydroxylase gene |
EP2196207B1 (en) | 2008-12-12 | 2012-09-05 | Allied Biotech Corporation | Method for the purification of carotenoids from plant extracts and the products so obtained |
WO2010138210A1 (en) | 2009-05-29 | 2010-12-02 | Kalamazoo Holdings, Inc. | Methods of saponifying xanthophyll esters and isolating xanthophylls |
US8247615B2 (en) | 2010-05-14 | 2012-08-21 | Kalamazoo Holdings, Inc. | Process of converting esterified xanthophylls from Capsicum to non-esterified xanthophylls in high yields and purities |
DK2571942T3 (da) | 2010-05-17 | 2014-08-04 | Dynadis Biotehc India Private Ltd | Fremgangsmåde til isolering og oprensning af carotenoider |
WO2014043288A1 (en) | 2012-09-12 | 2014-03-20 | Butamax Advanced Biofuels Llc | Processes and systems for the production of fermentation products |
BR112015014187B8 (pt) | 2012-12-19 | 2022-08-30 | Novus Int Inc | Composição de xantofila, seu uso, ração animal e métodos de aumento da eficácia de pigmentação e do teor de carotenoide da ração |
EA031085B1 (ru) * | 2014-03-28 | 2018-11-30 | ДСМ АйПи АССЕТС Б.В. | Способ выделения ацетилированного астаксантина из yarrowia lipolytica |
CN109463491A (zh) * | 2019-01-07 | 2019-03-15 | 刘安军 | 一种富含水溶性叶绿素的速溶绿茶及其制备方法 |
KR102523297B1 (ko) * | 2020-12-23 | 2023-04-20 | 박수민 | 메리골드를 이용한 설포라판 함유 기능성 유정란 생산용 사료 조성물 및 이를 이용한 유정란 생산 방법 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4048203A (en) | 1976-12-06 | 1977-09-13 | Thomas Philip | Purification of lutein-fatty acid esters from plant materials |
US5382714A (en) | 1994-03-17 | 1995-01-17 | The Catholic University Of America | Process for isolation, purification, and recrystallization of lutein from saponified marigold oleoresin and uses thereof |
US5523494A (en) | 1994-07-20 | 1996-06-04 | Industrial Organica, S.A. De C.V. | Process for the isomerization of lutein |
JP3398248B2 (ja) | 1995-03-16 | 2003-04-21 | 新日本石油株式会社 | キサントフィル化合物の精製方法 |
US5648564A (en) | 1995-12-21 | 1997-07-15 | Kemin Industries, Inc. | Process for the formation, isolation and purification of comestible xanthophyll crystals from plants |
US5973211A (en) | 1997-07-18 | 1999-10-26 | Prodemex, S.A. De C.V. | Pigmenting efficiency of a natural xanthophyll by isomerization |
AU1271999A (en) | 1997-10-21 | 1999-05-10 | Office Of Technology Liaison | Process for extraction and purification of lutein, zeaxanthin and rare carotenoids from marigold flowers and plants |
US6191293B1 (en) * | 1998-04-20 | 2001-02-20 | Inexa, Industria Extractora C.A. | Trans-xanthophyll ester concentrates of enhanced purity and methods of making same |
-
2000
- 2000-06-09 US US09/590,611 patent/US6329557B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-06-07 ES ES01943749T patent/ES2311525T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 CN CNB018108547A patent/CN1212299C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-07 EP EP01943749A patent/EP1289916B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 AU AU2001266277A patent/AU2001266277A1/en not_active Abandoned
- 2001-06-07 DE DE60135330T patent/DE60135330D1/de not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-07 JP JP2002501797A patent/JP4029032B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-07 WO PCT/IB2001/001217 patent/WO2001094279A2/en active IP Right Grant
- 2001-06-07 MX MXPA02011792A patent/MXPA02011792A/es active IP Right Grant
- 2001-06-07 IL IL15295801A patent/IL152958A0/xx active IP Right Grant
- 2001-06-07 AT AT01943749T patent/ATE404516T1/de not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-11-20 IL IL152958A patent/IL152958A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-12-02 NO NO20025785A patent/NO328529B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2003535835A (ja) | 2003-12-02 |
IL152958A (en) | 2007-08-19 |
CN1212299C (zh) | 2005-07-27 |
US6329557B1 (en) | 2001-12-11 |
MXPA02011792A (es) | 2004-05-14 |
NO328529B1 (no) | 2010-03-15 |
WO2001094279A2 (en) | 2001-12-13 |
NO20025785L (no) | 2002-12-02 |
NO20025785D0 (no) | 2002-12-02 |
EP1289916B1 (en) | 2008-08-13 |
CN1434792A (zh) | 2003-08-06 |
WO2001094279A3 (en) | 2002-04-11 |
EP1289916A2 (en) | 2003-03-12 |
EP1289916A4 (en) | 2005-06-15 |
AU2001266277A1 (en) | 2001-12-17 |
ATE404516T1 (de) | 2008-08-15 |
IL152958A0 (en) | 2003-06-24 |
ES2311525T3 (es) | 2009-02-16 |
DE60135330D1 (de) | 2008-09-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4029032B2 (ja) | 高レベルのクロロフィルを含有するマリゴールド抽出物からのキサントフィルの精製 | |
EP1963245B1 (en) | Process for purification of free xanthophylls | |
US6504067B1 (en) | Process to obtain xanthophyll concentrates of high purity | |
US7271298B2 (en) | Process for isolation and purification of xanthophyll crystals from plant oleoresin | |
AU2002347590B8 (en) | An improved process for the preparation of xanthophyll crystals | |
AU2005331246B2 (en) | Isolation and purification of carotenoids from Marigold flowers | |
US4320050A (en) | Process for selectively extracting dyestuffs contained in cyanophyceae algae, the so-extracted dyestuffs and their use, particularly in foodstuffs | |
US8425948B2 (en) | Process for isolation of lutein and zeaxanthin crystals from plant sources | |
US8481769B2 (en) | Isolation and purification of cartenoids from marigold flowers | |
MXPA99009568A (en) | Process for obtaining concentrate of xanthophylls of high purity |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20040908 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20060113 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20060113 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20060113 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20060807 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060822 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20061122 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20061130 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070222 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20071002 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20071015 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101019 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111019 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121019 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131019 Year of fee payment: 6 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |