EA031085B1 - Способ выделения ацетилированного астаксантина из yarrowia lipolytica - Google Patents

Способ выделения ацетилированного астаксантина из yarrowia lipolytica Download PDF

Info

Publication number
EA031085B1
EA031085B1 EA201691949A EA201691949A EA031085B1 EA 031085 B1 EA031085 B1 EA 031085B1 EA 201691949 A EA201691949 A EA 201691949A EA 201691949 A EA201691949 A EA 201691949A EA 031085 B1 EA031085 B1 EA 031085B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
carotenoids
astaxanthin
aqueous solution
yarrowia lipolytica
carried out
Prior art date
Application number
EA201691949A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201691949A1 (ru
EA201691949A8 (ru
Inventor
Джеймс Треганован
Карлос Сантос
Джулия Кесслер
Даниель Гренфелл-Ли
Клаудиа Тониато
Кристиан Шефер
Original Assignee
ДСМ АйПи АССЕТС Б.В.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ДСМ АйПи АССЕТС Б.В. filed Critical ДСМ АйПи АССЕТС Б.В.
Publication of EA201691949A1 publication Critical patent/EA201691949A1/ru
Publication of EA201691949A8 publication Critical patent/EA201691949A8/ru
Publication of EA031085B1 publication Critical patent/EA031085B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C403/00—Derivatives of cyclohexane or of a cyclohexene or of cyclohexadiene, having a side-chain containing an acyclic unsaturated part of at least four carbon atoms, this part being directly attached to the cyclohexane or cyclohexene or cyclohexadiene rings, e.g. vitamin A, beta-carotene, beta-ionone
    • C07C403/24—Derivatives of cyclohexane or of a cyclohexene or of cyclohexadiene, having a side-chain containing an acyclic unsaturated part of at least four carbon atoms, this part being directly attached to the cyclohexane or cyclohexene or cyclohexadiene rings, e.g. vitamin A, beta-carotene, beta-ionone having side-chains substituted by six-membered non-aromatic rings, e.g. beta-carotene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
    • C11B1/10—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P23/00—Preparation of compounds containing a cyclohexene ring having an unsaturated side chain containing at least ten carbon atoms bound by conjugated double bonds, e.g. carotenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/16—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring the ring being unsaturated

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способу выделения ацетилированного астаксантина из Yarrowia lipolytica, включающему экстракцию ацетилированного астаксантина из биомассы Yarrowia lipolytica с помощью CHCl, по меньшей мере одну промывку полученного экстракта с использованием воды и по меньшей мере одну промывку полученного экстракта с использованием водного раствора лимонной кислоты. Концентрация водного раствора лимонной кислоты может составлять 3 мас.% в пересчете на общую массу водного раствора. Способ может существляться в периодическом или непрерывном режиме. Экстракцию можно проводить при температуре ниже точки кипения растворителя. Способ может дополнительно включать сушку раствора, содержащего ацетилированный астаксантин.

Description

Изобретение относится к способу выделения ацетилированного астаксантина из Yarrowia lipolytica, включающему экстракцию ацетилированного астаксантина из биомассы Yarrowia lipolytica с помощью СН2О2, по меньшей мере одну промывку полученного экстракта с использованием воды и по меньшей мере одну промывку полученного экстракта с использованием водного раствора лимонной кислоты. Концентрация водного раствора лимонной кислоты может составлять 3 мас.% в пересчете на общую массу водного раствора. Способ может существляться в периодическом или непрерывном режиме. Экстракцию можно проводить при температуре ниже точки кипения растворителя. Способ может дополнительно включать сушку раствора, содержащего ацетилированный астаксантин.
031085 В1
Настоящее изобретение относится к способу выделения каротиноидов из каротиноидпродуцирующего биоорганизма, в частности к выделению ацетилированного астаксантина из Y arrowia lipolytica.
Каротиноиды представляют собой органические пигменты от желтого до красного цвета, которые естественным образом вырабатываются определенными биоорганизмами, в том числе фотосинтезирующими организмами (например, растениями, водорослями, цианобактериями), а также некоторыми грибами. Каротиноиды ответственны за оранжевый цвет моркови, а также за розовый цвет фламинго и лосося и красный цвет омаров и креветок. Животные, однако, не могут продуцировать каратиноиды и должны получать их через пищу.
Каротиноидные пигменты (например, β-каротин и астаксантин) используются в промышленности в качестве ингредиентов для пищевых и кормовых материалов, и оба выполняют пищевую функцию и повышают приемлемость для потребителя. Например, астаксантин широко используется в аквакультуре лосося для того, чтобы обеспечить розовой/красный пигмент, характерный для их диких собратьев. Некоторые каротиноиды обеспечивают потенциальное благоприятное воздействие на здоровье, например, в качестве предшественников витамина A или антиоксидантов (см, например, Jyonouchi et al., Nutr, Cancer 16:93, 1991; Giovannucci et al., J. Natl. Cancer Inst. 87:1767, 1995; Miki, Pure Appl. Chem 63:141, 1991; Chew et al., Anticancer Res. 19:1849, 1999; Wang et al., Antimicrob. Agents Chemother. 44:2452, 2000). Некоторые каротиноиды, такие как астаксантин, β-каротин, ликопин, лютеин и зеаксантин, в настоящее время продаются как пищевые добавки.
Природные каротиноиды могут быть либо получены путем экстракции растительного материала, либо путем микробного синтеза; но лишь немногие растения широко используются для коммерческого производства каротиноидов, и производительность синтеза каротиноидов в этих растениях является относительно низкой. Микробное продуцирование каротиноидов является более привлекательным путем производства. Примеры каротиноидпродуцирующих микроорганизмов (=биоорганизмов) включают водоросли (Haematococcus Pluvialis, продающиеся под торговым названием NatuRose (ТМ) у Cyanotech Corp., Кайлуа-Кона, Гаваи; Dunaliella sp.;. Thraustochytrium sp.), дрожжи (Phaffia rhodozyma, которые недавно были переименованы в Xanthophyllomyces dendrorhous; Labyrinthula sp.; Saccharomyces cerevisiae и Yarrowia lipolytica) и бактерии (Paracoccus marcusii, Bradyrhizobium, Rhodobacter sp., Brevibacterium, Escherichia coli и Methylomonas sp). Кроме того, также возможно рекомбинантное производство каротиноидов, так как гены, участвующие в биосинтезе каротиноидов, хорошо известны и были гетерологично экспрессированы в различных клетках-хозяевах (например, E.coli, Candida utilis, Saccharomyces cerevisiae, Methylomonas sp.). К настоящему времени некоторые из этих примеров пригодны для производства каротиноидных продуктов в значительных количествах экономически эффективным способом для промышленного применения.
Настоящее изобретение относится к усовершенствованному способу выделения каротиноидов из каротиноидпродуцирующих биоорганизмов, а также к композиции, содержащей такие каротиноиды, и к применению такой твердой композиции в кормовых продуктах (или премиксах).
Как правило, эти биоорганизмы продуцируют каротиноид(ы), соединение(я) ретинола или другой низкомолекулярный липофильный агент(ы) и накапливают полученное соединение в количестве, превышающем или равном 1% от массы сухого вещества их клеток.
В настоящее время каротиноиды получают следующим образом.
После окончания продуцирования каратиноида биоорганизмом каротиноид отделяют, промывают, а затем дополнительно включают в искомую форму для применения.
Неожиданно мы обнаружили, что, когда выделенный каротиноид обрабатывают по меньшей мере один раз стадией промывки с использованием водного раствора кислоты Бренстеда, то полученный каротиноид обладает лучшими свойствами (например, чистотой кристаллической формы, что дает лучшую композицию (стабильную эмульсию) из-за меньшего количества нежелательного липофильного остатка после проведения способа).
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу (C) выделения каротиноида из каротиноидпродуцирующего биоорганизма, который включает следующие стадии:
(i) извлечение каротиноида из биомассы по меньшей мере одним растворителем (I);
(ii) необязательно по меньшей мере одна стадия промывки с использованием по меньшей мере одного растворителя (II), который не смешивается с растворителем (I); и (iii) необязательно сушка полученного раствора, содержащего каротиноид, в котором после стадии (i) осуществляется по меньшей мере одна стадия промывки с использованием водного раствора кислоты Бренстеда (стадия (i')).
Предпочтительным является способ, в котором кислоту Бренстеда выбирают из группы, состоящей из фосфорной кислоты и органических кислот.
Более предпочтительной кислотой Бренстеда является органическая кислота.
Более предпочтительно кислоту Бренстеда выбирают из группы, состоящей из лимонной кислоты, винной кислоты и малеиновой кислоты.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу (C1), который является способом (C), в
- 1 031085 котором кислоту Бренстеда выбирают из группы, состоящей из фосфорной кислоты и органической кислоты.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу (C2), который является способом (C), в котором кислота Бренстеда представляет собой органическую кислоту.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу (C3), который является способом (C), в котором кислоту Бренстеда выбирают из группы, состоящей из лимонной кислоты, винной кислоты и малеиновой кислоты.
Концентрация водного раствора кислоты Бренстеда в способе согласно настоящему изобретению может изменяться. Концентрация водного раствора кислоты Бренстеда, как правило, составляет до 10 мас.% в пересчете на общую массу водного раствора. Обычно концентрация кислоты Бренстеда составляет по меньшей мере 0,01 мас.%, предпочтительно концентрация кислоты Бренстеда составляет 0,01-10 мас.%, более предпочтительно 1-5 мас.% в пересчете на общую массу водного раствора.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу (C4) который является способом (C), (C1), (C2) или (C3), в котором концентрация водного раствора кислоты Бренстеда составляет 0,01-10 мас.% в пересчете на общую массу водного раствора, предпочтительно 1-5 мас.% в пересчете на общую массу водного раствора.
Способ в соответствии с настоящим изобретением может быть осуществлен как в периодическом режиме, так и в непрерывном. Такая гибкость также является большим преимуществом.
Полученный кристалл действительно имеет лучшие свойства, чем полученный способами предшествующего уровня техники.
Экстрагирование (стадия (i)) обычно проводят при температуре окружающей среды (20-25°С). Но способ также может быть осуществлен при более высокой или более низкой температуре (при необходимости под давлением).
Предпочтительно способ проводят при температуре, которая ниже температуры кипения растворителя, используемого для экстракции.
Предпочтительно экстракция каротиноидов из биомассы осуществляется по меньшей мере в одном растворителе (стадия (i)). Этот растворитель или смесь растворителей предпочтительно не смешивается с водой.
Подходящими растворителями для стадии (i) являются, например, CH2Cl2, хлороформ, н-гептан и нгексан.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу (C5), который является способом (C), (C1), (C2), (C3) или (C4), в котором извлечение каротиноидов из биомассы осуществляется по меньшей мере в одном растворителе (стадия (i)), не смешивающемся с водой.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу (C6), который является способом (C), (C1), (C2), (C3), (C4) или (C5), в котором экстракция каротиноидов из биомассы осуществляется по меньшей мере в одном растворителе (стадия (i)), который выбран из группы, состоящей из CH2Cl2, хлороформа, н-гептана и н-гексана.
Экстрагирование (стадия (i)) обычно проводят при температуре окружающей среды (20-25°С). Но способ также может быть осуществлен при более высокой или более низкой температуре (при необходимости под давлением).
Предпочтительно способ проводят при температуре, которая ниже температуры кипения растворителя, который используется для экстракции (для того, чтобы избежать требования применения давления).
Биомасса может быть извлечена как таковая, или биомасса может быть вначале измельчена (и необязательно высушена), а затем экстрагирована; или биомасса может быть измельчена и экстрагирована одновременно. Кроме того, также возможно объединение этих процедур.
Способ в соответствии с настоящим изобретением также может включать дополнительные одну или несколько стадий промывки. Это не является существенным признаком настоящего изобретения, но в дальнейшем может улучшить качество получаемого каротиноида.
Такая стадия промывки (стадия (ii)) проводится после стадии (i), а также до и/или после стадии (i').
Стадию промывки осуществляют по меньшей мере с одним растворителем (II), который не смешивается с растворителями (I), используемыми на стадии (i).
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу (C7), который является способом (C), (C1), (C2), (C3), (C5) или (C6), в котором одну или несколько стадий промывки (стадия (ii)) проводят после стадии (i), а также до и/или после стадии (i').
И, наконец, на стадии (iii) состав можно высушить с получением каротиноида в сухом виде.
Но также можно использовать каротиноид в растворителе (или диспергированным в экстракционном растворителе).
Кроме того, после стадии экстракции (стадии (i)) возможно удаление растворителя в дополнительной стадии. Это может быть полезно, когда весь способ выделения проводят, например, в двух разных местах и/или хранят выделенный материал перед следующей стадией. Транспортировку и хранение проще осуществлять без какого-либо растворителя.
Биоорганизм продуцирует каротиноид(ы) (или также соединение(я) ретинола или другой низкомо
- 2 031085 лекулярный липофильный агент(ы)) и накапливает полученное соединение в количестве, превышающем или равном 1% от массы сухого вещества клеток.
Термин биоорганизм при использовании в данном документе включает, например, биоорганизмы животные, млекопитающие, насекомые, растения, грибы, дрожжи, водоросли, бактерии, цианобактерии, архебактерии и протозои.
Биоорганизм, который продуцирует каротиноиды, может быть натуральным (поскольку может быть найден в природе) или может быть модифицированным.
Подходящие биоорганизмы известны в данной области, то есть из WO 2006102342.
Термин каротиноид, как он понимается в данной области, относится к структурно разнообразному классу пигментов, полученных из промежуточных продуктов изопреноидного пути. Стадией коммитирования в биосинтезе каротиноидов является образование фитоена из геранилгеранилпирофосфата. Каротиноиды могут быть ациклическими или циклическими и могут содержать или не содержать кислород, так что термин каротиноиды включают как каротины, так и ксантофиллы. В общем, каротиноиды представляют собой углеводородные соединения, имеющие сопряженный полиеновый углеродный скелет, формально получаемые из пятиуглеродного соединения IPP, включая тритерпены (C30 диапокаротиноиды) и тетратерпены (C40 каротиноиды), а также их кислородсодержащие производные и другие соединения, которые, например, имеют длину C35, C50, C60, C70, C80 или другие длины. Многие каротиноиды имеют сильные свойства поглощения света и могут варьировать по длине свыше C200-C30 диапокаротеноидов, как правило, состоящих из шести изопреновых единиц, соединенных таким образом, что расположение изопреновых единиц инвертируется в центре молекулы так, что две центральные метальные группы находятся в 1,6-положении относительно друг друга, а остальные неконцевые метальные группы - в 1,5-положении относительно друг друга. Такие C30 каротиноиды могут быть формально получены из ациклической C30H42 структуры, имеющей длинную центральную цепь с сопряженными двойными связями, путем (i) гидрогенизации, (ii) дегидрогенизации, (iii) циклизации, (iv) окисления, (v) эстерификации/гликозилирования или любой комбинации этих процессов. C40 каротиноиды обычно состоят из восьми изопреновых единиц, соединенных таким образом, что расположение изопреновых единиц инвертируется в центре молекулы, так что две центральные метальные группы находятся в 1,6-положении относительно друг друга, а остальные неконцевые метальные группы - в 1,5-положении относительно друг друга. Такие C40 каротиноиды могут быть формально получены из ациклической C40H56 структуры, имеющей длинную центральную цепь с сопряженными двойными связями, путем (i) гидрогенизации, (ii) дегидрирования, (iii) циклизации, (iv) окисления, (v) этерификации/гликозилирования или любой комбинации этих процессов. Класс C40 каротиноидов также включает некоторые соединения, которые возникают при перестройках углеродного скелета либо при (формальном) удалении части этой структуры. Более чем 600 различных каротиноидов были идентифицированы в природе.
Каротиноиды включают, без ограничения перечисленным, антераксантин, адонирубин, адониксантин, астаксантин, кантаксантин, капсорубин, β-криптоксантин, α-каротин, β-каротин, δ-каротин, εкаротин, эхиненон, 3-гидроксиэхиненон, 3'-гидроксиэхиненон, γ-каротин, ψ-каротин, 4-кето-у-каротин, ζкаротин, α-криптоксантин, деоксифлексиксантин, диатоксантин, 7,8-дидегидроастаксантин, дидегидроликопен, фукоксантин, фукоксантинол, изорениератен, β-изорениератен, лактукаксантин, лютеин, ликопин, миксобактон, мимулаксантин, неоксантин, нейроспорен, гидроксинейроспорен, перидинин, фитоен, родопин, родопин глюкозид, родоксантин, 4-кеторубиксантин, сифонаксантин, сфероидин, сфероиденон, спириллоксантин, торулен, 4-кетоторулен, 3-гидрокси 4-кетоторулен, уриолид, уриолид ацетат, виолаксантин, зеаксантин-в-диглюкозид, зеаксантин и C30 каротиноиды. Кроме того, каротиноидные соединения включают производные этих молекул, которые могут включать гидрокси-, метокси-, оксо-, эпокси-, карбокси- или альдегидные функциональные группы. Кроме того, включенные каротиноидные соединения включают сложный эфир (например, сложный эфир гликозида, сложный эфир жирной кислоты, ацетилирование) и сульфатные производные (например, этерифицированные ксантофиллы).
Предпочтительно, если каротиноиды выбирают из группы, состоящей из астаксантина, производных астаксантина (таких как этерифицированный астаксантин), зеаксантина и производных зеаксантина (например, этерифицированного зеаксантина).
Каротиноиды, полученные согласно настоящему изобретению, могут быть использованы в любом из множества применений, например, путем использования их биологических или питательных свойств (например, в качестве антиоксиданта и т.п.) и/или их свойств пигмента. Например, каротиноиды могут быть использованы в фармацевтических препаратах (см., например, Bertram, Nutr. Rev. 57:182, 1999; Singh et al., Oncology 12:1643, 1998; Rock, Pharmacol. Titer. 75:185, 1997; Edge et al., J. Photochem Photobiol 41:189, 1997; заявка на пат. США 2004/0116514; заявка на пат. США 2004/0259959), пищевых добавках (см., например, Koyama et al., J. Photochem Photobiol 9:265, 1991; Bauernfeind, Carotenoids as colorants and vitamin A precursors, Academic Press, NY, 1981; заявка на пат. США 2004/0115309; заявка на пат. США 2004/0234579), электрооптических приложениях, добавках для кормов для животных (см., например, Krinski, Pure Appl. Chem. 66:1003, 1994; Polazza et al., Meth. E nzymol. 213: 403, 1992), косметических средствах (в качестве антиоксидантов и/или в качестве косметических средств, в том числе отду
- 3 031085 шек, см., например, заявку на пат. США 2004/0127554) и т.д. Каротиноиды, продуцируемые в соответствии с настоящим изобретением, могут также быть использованы в качестве промежуточных продуктов получения других соединений (например, стероидов и т.д.).
В качестве примеров фармацевтических и/или медицинских приложений, астаксантин и/или их сложные эфиры могут быть полезны при лечении воспалительных заболеваний, астмы, атопического дерматита, аллергии, множественной миеломы, атеросклероза, сердечно-сосудистых заболеваний, заболеваний печени, заболеваний сосудов головного мозга, тромбоза, заболеваний, связанных с неоангиогенезом, включая рак, ревматизм, диабетическую ретинопатию; дегенерации желтого пятна и расстройства мозга, гиперлипидемии, ишемии почек, диабета, гипертензии, пролиферации и метастазирования опухолей; и нарушения обмена веществ. Кроме того, каротиноиды и астаксантин могут быть полезны при профилактике и лечении усталости, для улучшения функции почек при нефропатии из-за воспалительных заболеваний, а также при профилактике и лечении других заболеваний, связанных с жизненными привычками. Далее, было установлено, что астаксантин играет роль ингибитора различных биологических процессов, в том числе ингибитора интерлейкинов, ингибитора I фосфодиэстеразы, ингибитора фосфолипазы A2, ингибитора циклооксигеназы-2, ингибитора матриксных металлопротеиназ, ингибитора пролиферации клеток эндотелия капилляров, ингибитора липоксигеназы. См., например, японскую публикацию № 2006022121, опубликованную 20060126 (JP Appl No. 2005-301156 подана 20051017); японскую публикацию № 2006016408, опубликованную 20060119 (JP Appl No. 2005-301155 подана 20051017); японскую публикацию № 2006016409, опубликованную 20060119 (JP Appl No. 2005-301157 подана 20051017); японскую публикацию № 2006016407, опубликованную 20060119 (JP Appl No. 2005301153 подана 20051017); японскую публикацию № 2006008717, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005-301151 подана 20051017); японскую публикацию № 2006008716, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005-301150 подана 20051017); японскую публикацию № 2006008720, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005- 301158 подана 20051017); японскую публикацию № 2006008719, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005-301154 подана 20051017); японскую публикацию № 2006008718, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005-301152 подана 20051017); японскую публикацию № 2006008713, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005-301147 подана 20051017); японскую публикацию № 2006008715, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005-301149 подана 20051017); японскую публикацию № 2006008714, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005-301148 подана 20051017); и японскую публикацию № 2006008712, опубликованную 20060112 (JP Appl No. 2005-301146 подана 20051017).
Каротиноиды в кристаллической форме, полученные способом в соответствии с настоящим изобретением, далее могут быть включены в составы с помощью способов, обычно применяемых к каротиноидам.
Например, они могут быть использованы в жидкой, гелеобразной или твердой композициях. Они могут быть приготовлены в виде эмульсии/дисперсии или любой другой широко известной форме.
Поэтому настоящее изобретение также относится к применению каротиноида, полученного способом в соответствии с настоящим изобретением, как описано выше, в производстве пищевых продуктов, кормов, фармацевтических средств и/или средств личной гигиены.
Кроме того, настоящее изобретение также относится к применению по меньшей мере одной твердой композиции, как описано выше, в производстве премикса для пищевых продуктов, кормов, фармацевтических средств и/или средств личной гигиены.
Кроме того, настоящее изобретение также относится к пищевым продуктам, кормовым продуктам, фармацевтическим средствам и/или средствам личной гигиены, содержащим по меньшей мере один твердый состав, описанный выше.
Кроме того, данное изобретение относится также к премиксам (для пищевых продуктов, кормов, фармацевтических средств и/или средств личной гигиены), содержащим по меньшей мере один твердый состав, описанный выше.
Следующие примеры служат для иллюстрации настоящего изобретения.
Все части и проценты относятся к массе.
Примеры
Следующие примеры были приготовлены в соответствии с описанием.
Пример 1. Ацетилированный астаксантин.
Биомассу (Yarrowia lipolytica) экстрагировали CH2Cl2. Полученный таким образом раствор, который включал ацетилированный астаксантин, промывали примерно в два раза большим количеством деионизированной воды. Водную фазу отбрасывали. Эту стадию промывки повторяли.
Полученный таким образом раствор промывали водным раствором (3 мас.%) лимонной кислоты.
После этого раствор лимонной кислоты сливали.
Полученный таким образом раствор содержал около 1,6 мас.% (в пересчете на общую массу раствора) ацетилированного астаксантина.
Этот раствор использовали для получения эмульсии (с лигносульфонатом в качестве эмульгатора). Эта эмульсия оставалась стабильной также после удаления (органического) растворителя и распыли
- 4 031085 тельной сушки.
Пример 2. Ацетилированный астаксантин.
Биомассу (Yarrowia lipolytica) экстрагировали CH2Cl2.
Этот раствор разделяли на 3 части, и все части промывали лимонной кислотой, после чего растворы объединяли и еще раз промывали лимонной кислотой.
Этот раствор использовали для получения эмульсии (с лигносульфонатом в качестве эмульгатора). Эта эмульсия также оставалась стабильной после удаления (органического) растворителя и распылительной сушки.
Пример 3 (сравнительный пример). Ацетилированный астаксантин.
Биомассу (Yarrowia lipolytica) экстрагировали CH2Cl2.
Стадию промывки лимонной кислотой не проводили.
Полученный таким образом раствор предназначен для получения эмульсии (с лигносульфонатом в качестве эмульгатора).
Стабильная эмульсия не была получена, и не было возможности использовать эту эмульсию для дальнейших составов.

Claims (5)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Способ выделения ацетилированного астаксантина из Yarrowia lipolytica, включающий следующие стадии:
    (i) экстракция ацетилированного астаксантина из биомассы Yarrowia lipolytica с помощью CH2Cl2;
    (ii) по меньшей мере одна стадия промывки полученного экстракта с использованием воды и (iii) по меньшей мере одна стадия промывки полученного экстракта с использованием водного раствора лимонной кислоты.
  2. 2. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что концентрация водного раствора лимонной кислоты составляет 3 мас.% в пересчете на общую массу водного раствора.
  3. 3. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что способ осуществляют в периодическом или непрерывном режиме.
  4. 4. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что экстракцию (стадия (i)) проводят при температуре ниже точки кипения растворителя.
  5. 5. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что способ дополнительно включает сушку полученного раствора, который включает ацетилированный астаксантин.
    О
EA201691949A 2014-03-28 2015-03-26 Способ выделения ацетилированного астаксантина из yarrowia lipolytica EA031085B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP14162365 2014-03-28
PCT/EP2015/056594 WO2015144831A1 (en) 2014-03-28 2015-03-26 Process for isolating a carotenoid from a carotenoid-producing bioorganism

Publications (3)

Publication Number Publication Date
EA201691949A1 EA201691949A1 (ru) 2017-02-28
EA201691949A8 EA201691949A8 (ru) 2017-06-30
EA031085B1 true EA031085B1 (ru) 2018-11-30

Family

ID=50433962

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201691949A EA031085B1 (ru) 2014-03-28 2015-03-26 Способ выделения ацетилированного астаксантина из yarrowia lipolytica

Country Status (10)

Country Link
US (1) US9902692B2 (ru)
EP (1) EP3122723B1 (ru)
JP (1) JP6593341B2 (ru)
CN (1) CN106232578B (ru)
BR (1) BR112016022546B8 (ru)
CL (1) CL2016002456A1 (ru)
DK (1) DK3122723T3 (ru)
EA (1) EA031085B1 (ru)
ES (1) ES2680471T3 (ru)
WO (1) WO2015144831A1 (ru)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001055100A1 (en) * 2000-01-27 2001-08-02 Dsm N.V. Isolation of carotenoid crystals
US6329557B1 (en) * 2000-06-09 2001-12-11 Prodemex, S.A. De C.V. Purification of xanthophylls from marigold extracts that contain high levels of chlorophylls
US20110282083A1 (en) * 2010-05-14 2011-11-17 Kalamazoo Holdings, Inc. Process of converting esterified xanthophylls from capsicum to non-esterified xanthophlls in high yields and purities

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6504067B1 (en) * 1999-11-24 2003-01-07 Industrial Organica S.A. De C.V. Process to obtain xanthophyll concentrates of high purity
WO2002077105A1 (fr) * 2001-03-22 2002-10-03 Fuji Chemical Industry Co., Ltd. Compositions pulverulentes a base d'astaxanthine et procede de production associe
RU2211862C2 (ru) 2001-10-29 2003-09-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (-) ШТАММ ГЕТЕРОТАЛЛИЧНОГО ФИКОМИЦЕТА Blakeslea trispora, ПРОДУЦИРУЮЩИЙ ЛИКОПИН В ПАРЕ С РАЗНЫМИ (+)ШТАММАМИ Blakeslea trispora, И СПОСОБ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО СИНТЕЗА ЛИКОПИНА
US7629007B2 (en) * 2005-12-19 2009-12-08 Industrias Vepinsa, S.A. de C.V. Process for purification of free xanthophylls
EP2465938A1 (en) * 2009-08-11 2012-06-20 Kaneka Corporation Production method for astaxanthin-containing composition
CN101774955A (zh) * 2009-12-08 2010-07-14 江苏省农业科学院 一种由万寿菊干花颗粒制备高含量反式叶黄素晶体的方法
CN103012230A (zh) 2013-01-06 2013-04-03 大连医诺生物有限公司 三孢布拉霉菌中类胡萝卜素的高效提取新工艺

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001055100A1 (en) * 2000-01-27 2001-08-02 Dsm N.V. Isolation of carotenoid crystals
US6329557B1 (en) * 2000-06-09 2001-12-11 Prodemex, S.A. De C.V. Purification of xanthophylls from marigold extracts that contain high levels of chlorophylls
US20110282083A1 (en) * 2010-05-14 2011-11-17 Kalamazoo Holdings, Inc. Process of converting esterified xanthophylls from capsicum to non-esterified xanthophlls in high yields and purities

Also Published As

Publication number Publication date
US9902692B2 (en) 2018-02-27
US20170129854A1 (en) 2017-05-11
BR112016022546A2 (pt) 2018-06-19
ES2680471T3 (es) 2018-09-07
EA201691949A1 (ru) 2017-02-28
CN106232578B (zh) 2019-06-07
CL2016002456A1 (es) 2017-06-09
EA201691949A8 (ru) 2017-06-30
WO2015144831A1 (en) 2015-10-01
BR112016022546B1 (pt) 2020-10-20
BR112016022546B8 (pt) 2020-12-22
JP6593341B2 (ja) 2019-10-23
DK3122723T3 (en) 2018-08-13
JP2017516750A (ja) 2017-06-22
EP3122723B1 (en) 2018-05-09
CN106232578A (zh) 2016-12-14
EP3122723A1 (en) 2017-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Isler Carotenoids
Jackson et al. The chemistry of novel xanthophyll carotenoids
Berman et al. Nutritionally important carotenoids as consumer products
JP4252535B2 (ja) キサントフィル結晶の調製方法
Vachali et al. Microbial carotenoids
Rodriguez-Amaya Carotenes and xanthophylls as antioxidants
Kadian et al. Pharmacological effects of carotenoids: a review
US20190261666A1 (en) Biomass formulation
Spinola et al. Microalgae nutraceuticals: the role of lutein in human health
Rivera Vélez Guide for carotenoid identification in biological samples
AU2010200636A1 (en) A process for isolation of carotenoids from plant sources
Kaczor et al. Carotenoids: overview of nomenclature, structures, occurrence, and functions
US8247615B2 (en) Process of converting esterified xanthophylls from Capsicum to non-esterified xanthophylls in high yields and purities
da Silveira Vasconcelos et al. Analysis of tetraterpenes and tetraterpenoids (carotenoids)
EA031085B1 (ru) Способ выделения ацетилированного астаксантина из yarrowia lipolytica
Isler et al. Carotenoids as food colourants
Murillo et al. Carotenoids with κ-end group
Safari et al. Effect of temperature, pH, and time factors on the stability and antioxidant activity of the extracted astaxanthin from haematococcus microalgae (Haematococcus pluvialis)
Chandrika Carotenoid dyes-properties
Khachatourians Carotenoids: biotechnological improvements for human health and sustainable development
Martins et al. Astaxanthin in microalgae Eustigmatophyceae
Martínez-Cámara et al. Main Carotenoids Produced by Microorganisms. Encyclopedia 2021, 1, 1223–1245
Paniagua-Michel Marine Natural Products: Bioactive Isoprenoids and Provitamin A Carotenoids
Keddar Supramolecular solvents extraction of bioactive compounds from Scenedesmus sp. biomass
Mussagy et al. Ketocarotenoids adonirubin and adonixanthin: Properties, health benefits, current technologies, and emerging challenges

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM