JP3797131B2 - 電気泳動装置 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、微量のタンパクや核酸、薬物などを分析する電気泳動装置に関し、さらに詳しくは、電気泳動部材として透明板状部材の内部にサンプルが電気泳動により分離される分離流路を備えたマイクロチップを用いるマイクロチップ電気泳動装置、及び電気泳動部材としてキャピラリを用いるキャピラリ電気泳動装置を含む電気泳動装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
微量のタンパク質や核酸などを分析するための電気泳動装置として、キャピラリ電気泳動装置が主として用いられてきた。近年になって、キャピラリに代わってマイクロチップを用いるマイクロチップ電気泳動装置が使用されるようになっている。マイクロチップ電気泳動装置では、２枚の透明部材を接合して形成されたマイクロチップと称される電気泳動部材が使用される。そのマイクロチップの例を図５に示す。
【０００３】
マイクロチップ５１は、一対の透明板状の無機材料（例えばガラス、石英、シリコンなど）又はプラスチックからなる透明部材５１ａ，５１ｂからなり、例えば半導体製造プロセスに用いられる写真製版技術やマイクロマシニング技術などにより、一方の基材５１ｂの表面に互いに交差する泳動用キャピラリ溝（流路）５３，５５を形成し、他方の基材５１ａにはその流路５３，５５の端に対応する位置に貫通孔をアノードリザーバ５７ａ、カソードリザーバ５７ｃ、サンプルリザーバ５７ｓ、ウエイストリザーバ５７ｗとして設けたものである。マイクロチップ５１は、両基材５１ａ，５１ｂを（Ｃ）に示すように重ねて接合した状態で使用される。
【０００４】
このマイクロチップ５１を用いて電気泳動を行なう場合、分析に先立って、例えばシリンジを使った圧送により、いずれかのリザーバ、例えばアノードリザーバ５７ａから流路５３，５５内及びリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗ内に分離媒体を充填する。次いで、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗ内に充填された分離媒体を除去し、短い方の流路（サンプル注入流路）５３の一方の端に対応するサンプルリザーバ５７ｓにサンプルを注入し、他のリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｗにバッファ液を注入する。
【０００５】
分離媒体、サンプル及びバッファ液を注入したマイクロチップ５１を電気泳動装置に装着する。各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに所定の電圧を印加し、サンプルを流路５３中に泳動させて両流路５３，５５の交差部５９に導く。各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに印加する電圧を切り換えて、長い方の流路（分離流路）５５の両端のリザーバ５７ａ，５７ｃ間の電圧により、交差部５９に存在するサンプルを分離流路５５内に電気泳動的に導入する。
【０００６】
分離流路５５内にサンプルを導入した後、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに収容された溶液の電気伝導度の差に起因する電気泳動の不安定要素を除くために、リザーバ５７ｓ内に収容されているサンプルをリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｗに収容されているのと同じバッファ液で置換する。
その後、各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに電気泳動用の電圧を印加して、分離流路５５内に注入したサンプルを分離流路５５内で分離させる。
【０００７】
キャピラリ電気泳動装置では、キャピラリの一端にサンプルを注入し、そのキャピラリの両端間に泳動電圧を印加することにより、サンプルをキャピラリ内で電気泳動させて分離させる。
【０００８】
このような電気泳動装置において分離成分の検出を行なう１つの方法として、例えば紫外可視分光光度計などの吸光光度計の検出器を分離流路の適当な位置に配置しておき、その位置で、目的成分の光吸収があるサンプル吸収波長の光の吸光度を測定し、その吸光度の時間的変化をモニターすることにより成分の分離をモニターする方法がある。
他の検出方法としては、分離流路の所定の範囲にわたって光を照射し、分離流路に沿って配列された複数個の受光素子を備えた光検出器により分離流路内で分離された目的成分による光の吸収を分離流路に沿った所定の範囲にわたって同時に２次元的に捕らえる方法も提案されている（特開平１０−１３２７８３号公報参照。）
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
光吸収を検出することで成分を検出する場合、気泡や泳動媒体中の不純物（微粒子）などが分離流路内に存在すると、目的成分由来ではない泳動媒体中の気泡や不純物に起因する光吸収が検出されることがあり、ノイズの原因になる。その結果、検出精度が低下するという問題があった。
【００１０】
そこで本発明は、電気泳動装置において、目的成分の吸光度感度を落とすことなく、気泡や不純物に起因するノイズ信号を低減することを目的とするものである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明は、透明部材にて形成され、その内部にサンプルが電気泳動により分離される分離流路を備えた電気泳動部材と、上記分離流路の両端間に泳動電圧を印加する泳動電源装置と、前分光又は後分光により、上記分離流路の所定の位置に又は所定の範囲にわたって光を照射し、上記分離流路の所定の位置又は所定の範囲からの、目的成分の光吸収があるサンプル吸収波長の光及び目的成分の光吸収がないか又は少なく、サンプル吸収波長とは異なる波長域のリファレンス波長の光を検出する光学検出部と、サンプル吸収波長での上記光学検出部のサンプル検出信号と同波長でのバックグラウンド光量とからそのサンプル吸収波長での吸光度を算出し、前記リファレンス吸収波長での前記光学検出部のサンプル検出信号と同波長でのバックグラウンド光量とからそのリファレンス波長での吸光度を算出する吸光度計算部と、上記吸光度計算部が算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する吸光度補正部とを備えている電気泳動装置である。
ここで、リファレンス波長において「目的成分の光吸収が少なく」というのは、「目的成分の吸光度感度を落とさない程度に少なく」という意味である。
【００１２】
気泡や泳動媒体中の不純物などの光吸収は波長依存性が少ないため、サンプル吸収波長でもリファレンス波長でも同程度の光吸収をもつ。これにより、サンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を引き算して補正することで、目的成分の吸光度感度を落とすことなく、気泡や不純物に起因するノイズ信号のみを効果的に低減できる。
【００１３】
上記電気泳動部材の例として、マイクロチップとキャピラリを挙げることができる。本発明は、マイクロチップ電気泳動装置又はキャピラリ電気泳動装置に適用するのに相応しいが、他の電気泳動装置にも適用できるものである。
【００１４】
【実施例】
図１は、一実施例を示すブロック図である。図２は、その実施例を一部ブロック図を含んで示す概略構成図である。電気泳動部材としては図５に示したマイクロチップを用いた。図１、図２及び図５を参照して一実施例の構成を説明する。
【００１５】
光源としての例えば重水素ランプ１からの光の光路にはミラー３、スリット５及びミラー７が設けられており、重水素ランプ１からの光は、ミラー３、スリット５及びミラー７により平行光にされる。ミラー７による反射光の光路には、平行光にされた重水素ランプ１からの光を分光する分光器９が設けられている。分光器９により分光された光の光路には、その分光された光のうち、特定波長の光（単色光）をマイクロチップ５１の分離流路５５の所定範囲に導くミラー１３が設けられている。分光器９には、分光器９を回転させて分離流路５５に照射する単色光の波長を選択する波長選択部１１が接続されている。図１ではミラー３、スリット５、ミラー７及びミラー１３の図示は省略されている。
【００１６】
マイクロチップ５１の光入射側とは反対側には、分離流路５５からの光を測定するための複数のフォトダイオードが分離流路５５に沿って配列されたフォトダイオードアレイ１５が備えられている。マイクロチップ５１の近傍には分離流路５５，５３の両端に高電圧を印加するための高圧電源１７が配置されている。マイクロチップ５１の近傍には、分離媒体やバッファ液などの泳動媒体及びサンプルを供給するための送液系１９も配置されている。
フォトダイオードアレイ１５には、フォトダイオードアレイ１５に配置された各フォトダイオードの検出信号をＡ／Ｄ変換器などの信号処理回路２１を介して取り込むデータ処理部２３が電気的に接続されている。
【００１７】
データ処理部２３には、サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓ、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒ、サンプル吸収波長光量記憶部２７ｓ及びリファレンス波長光量記憶部２７ｒが設けられている。記憶部２５ｓ，２５ｒ，２７ｓ，２７ｒは信号処理回路２１に電気的に接続されている。サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓは、目的成分の光吸収があるサンプル吸収波長の光がサンプル分離前の分離流路５５に照射されたときの光量をバックグラウンド光量として記憶する。リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒは、目的成分の光吸収がないリファレンス波長の光がサンプル分離前の分離流路５５に照射されたときの光量をバックグラウンド光量として記憶する。サンプル吸収波長光量記憶部２７ｓは、サンプル吸収波長がサンプル分離後の分離流路５５に照射されたときの光量を記憶する。リファレンス波長光量記憶部２７ｒは、リファレンス波長がサンプル分離後の分離流路５５に照射されたときの光量を記憶する。
【００１８】
データ処理部２３には、サンプル吸光波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓに記憶されたバックグラウンド光量及びサンプル吸光波長光量記憶部２７ｓに記憶された光量に基づいてサンプル吸収波長での吸光度を計算するサンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓと、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒに記憶されたバックグラウンド光量及びリファレンス波長光量記憶部２７ｒに記憶された光量に基づいてリファレンス波長での吸光度を計算するリファレンス波長吸光度計算部２９ｒと、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓが算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長吸光度計算部２９ｒが算出したリファレンス波長での吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する吸光度補正部３１が設けられている。吸光度補正部３１が算出した補正吸光度データは、例えば補正吸光度データの解析や印刷、保存などを行なうパーソナルコンピュータへ伝送される。
【００１９】
本発明を構成する吸光度計算部は、サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓ、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒ、サンプル吸収波長光量記憶部２７ｓ、リファレンス波長光量記憶部２７ｒ、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓ及びリファレンス波長吸光度計算部２９ｒにより構成される。
サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓ、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒ、サンプル吸収波長光量記憶部２７ｓ及びリファレンス波長光量記憶部２７ｒは例えば１つ又は複数の記憶装置により実現され、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓ、リファレンス波長吸光度計算部２９ｒ及び吸光度補正部３１は例えば１つ又は複数のＣＰＵ（中央演算処理装置）により実現される。
【００２０】
この実施例の動作を説明する。ここではサンプルとしてＤＮＡ（デオキシリボ核酸）を用いる場合について説明する。
マイクロチップ５１を所定の位置に配置する。送液系１９により、いずれかのリザーバ、例えばアノードリザーバ５７ａから流路５３，５５内及びリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗ内に分離媒体を充填する。次いで、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗ内に充填された分離媒体を除去し、サンプル注入流路５３の一方の端に対応するサンプルリザーバ５７ｓにサンプルを注入し、他のリザーバ５７ａ、５７ｃ，５７ｗにバッファ液を注入する。
【００２１】
高圧電源１７により、各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに所定の電圧を印加し、サンプルをサンプル注入流路５３中に泳動させて両流路５３，５５の交差部５９に導く。各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに印加する電圧を切り換えて、分離流路５５の両端のリザーバ５７ａ，５７ｃ間の電圧により、交差部５９に存在するサンプルを分離流路５５内に電気泳動的に導入する。
分離流路５５内にサンプルを導入した後、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに収容された溶液の電気伝導度の差による電気泳動の不安定要素を除くため、リザーバ５７ｓ内に収容されているサンプルをリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｗに収容されているのと同じバッファ液で置換する。
【００２２】
波長選択部１１により、分光器９の角度を制御して、サンプル吸収波長の光、例えば波長が２６０ｎｍの光を分離流路５５の所定範囲に照射する。このとき、分離流路５５の所定範囲にサンプルが存在しない状態である。そのときの分離流路５５の所定範囲からの光をフォトダイオードアレイ１５により検出し、信号処理回路２１を経てサンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓに記憶する。
【００２３】
波長選択部１１により、分光器９の角度を変更して、リファレンス波長の光、例えば波長が３２０〜３５０ｎｍの光、ここでは３２０ｎｍの光を分離流路５５の所定範囲に照射する。このときも、分離流路５５の所定範囲にサンプルが存在しない状態である。そのときの分離流路５５の所定範囲からの光をフォトダイオードアレイ１５により検出し、信号処理回路２１を経てリファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒに記憶する。
【００２４】
高圧電源１７により、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに所定の泳動電圧を印加して、サンプルを分離流路５５内で分離させる。分離が完了した時点でリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに印加する高圧を切り、泳動を停止する。
【００２５】
波長選択部１１により、分光器９の角度を制御して、サンプル吸収波長である２６０ｎｍの光を分離流路５５の所定範囲に照射する。このとき、分離流路５５の所定範囲でサンプルが分離している状態である。そのときの分離流路５５の所定範囲からの光をフォトダイオードアレイ１５により検出し、信号処理回路２１を経てサンプル吸収波長光量記憶部２７ｓに記憶する。
【００２６】
波長選択部１１により、分光器９の角度を変更して、リファレンス波長である３２０ｎｍの光を分離流路５５の所定範囲に照射する。このときも、分離流路５５の所定範囲でサンプルが分離している状態である。そのときの分離流路５５の所定範囲からの光をフォトダイオードアレイ１５により検出し、信号処理回路２１を経てリファレンス波長光量記憶部２７ｒに記憶する。
【００２７】
図３は、吸光度データを示す波形図であり、（Ａ）はサンプル吸収波長（２６０ｎｍ）での波形図、（Ｂ）はリファレンス波長（３２０ｎｍ）での波形図、（Ｃ）は補正吸光度データを示す波形図である。縦軸は吸光度、横軸は分離流路位置を示す。
サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓにより、記憶部２５ｓに記憶されたバックグラウンド光量及び記憶部２７ｓに記憶された光量に基づいて、Lambert-Beerの式を適用して、サンプル吸収波長での吸光度を計算する（（Ａ）参照）。
サンプル吸収波長の吸光度＝
-log（{サンプル吸収波長光量}／{サンプル吸収波長バックグラウンド光量}）
ここで対数の底は１０である。
サンプル吸収波長での吸光度データ（Ａ）には、目的成分のピークＰのほか、気泡に起因するノイズＮが見られる。また、ベースラインには、気泡や不純物に起因する細かなノイズが多数見られる。
【００２８】
リファレンス波長吸光度計算部２９ｒにより、記憶部２５ｒに記憶されたバックグラウンド光量及び記憶部２７ｒに記憶された光量に基づいて、Lambert-Beerの式を適用して、リファレンス波長での吸光度を計算する（（Ｂ）参照）。
リファレンス波長の吸光度＝
-log（{リファレンス波長光量}／{リファレンス波長バックグラウンド光量}）
ここで対数の底は１０である。
リファレンス波長での吸光度データ（Ｂ）には、サンプル吸収波長での吸光度データ（Ａ）と同じ分離流路位置に気泡に起因するノイズＮ’が見られる。また、ベースラインには、サンプル吸収波長での吸光度データ（Ａ）の分離流路位置に対応して気泡や不純物に起因する細かなノイズが多数見られる。
【００２９】
吸光度補正部３１により、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓが算出した吸光度からリファレンス波長吸光度計算部２９ｒが算出した吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する（（Ｃ）参照）。
補正吸光度＝{サンプル吸収波長吸光度}−{リファレンス波長吸光度}
補正吸光度データ（Ｃ）では、バッファ液溶液中の気泡や微粒子などに起因するノイズが低減され、目的成分のピークＰ’が明確になっているのが分かる。このように、バッファ液溶液中の気泡や微粒子などに起因するノイズを目的成分に対する感度を損なわずに効果的に低減できる。
得られた補正吸光度データをパーソナルコンピュータに伝送し、解析、印刷、保存などを行なう。
【００３０】
この実施例では、サンプル吸収波長として２６０ｎｍ、リファレンス波長として３２０ｎｍを用いているが、本発明はこれに限定されるものではなく、サンプル吸収波長は目的成分の吸収が最大になる波長を選択し、リファレンス波長は目的成分の吸収が少なく、なおかつノイズが少ない波長（光源の輝度が十分にある波長など）を選択することができる。
【００３１】
また、この実施例では、分離流路の所定範囲での吸光度を測定しているが、本発明が適用される電気泳動装置はこれに限定されるものではなく、検出器を分離流路の適当な位置に配置しておき、その位置での吸光度の時間的変化をモニターすることにより成分の分離をモニターする電気泳動装置にも適用することができる。図４にその電気泳動装置の一実施例を示す。
【００３２】
図４は、他の実施例を一部ブロック図を含んで示す概略構成図である。図２と同じ機能を果たす部分には同じ符号を付し、その説明は省略する。
重水素ランプ１からの光の光路にはミラー３ａ、スリット５ａ、ミラー７ａ及び分光器９が設けられている。重水素ランプ１からの光は、ミラー３ａによりスリット５ａに結像される。スリット５ａを通過した光はミラー７ａに照射される。ミラー７による反射光の光路には分光器９が設けられている。分光器９により分光された光の光路には、その分光された光のうち、特定波長の光（単色光）をスリット５ｂに結像するミラー１３ａが設けられている。スリット５ｂを通過した光は集光レンズ１４によりマイクロチップ５１の分離流路５５の所定位置に結像される。分光器９には波長選択部１１が接続されている。
【００３３】
マイクロチップ５１の光入射側とは反対側には、分離流路５５からの光を測定するためのフォトダイオード１５ａが備えられている。マイクロチップ５１の近傍には高圧電源１７及び送液系１９が配置されている。
フォトダイオード１５ａには、フォトダイオード１５ａの検出信号を信号処理回路２１を介して取り込むデータ処理部２３が電気的に接続されている。データ処理装置２３は、図１に示す構成と同じである。
【００３４】
マイクロチップ５１の分離流路５５にサンプルが存在しない状態でサンプル吸収波長の光とリファレンス波長の光を順に照射して、バックグランド光量をサンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓとリファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒに記憶した後、高圧電源１７によりマイクロチップ５１に泳動電圧を印加してサンプルの分離を開始する。
【００３５】
波長選択部により分光器９の角度を制御して、分離流路５５にサンプル吸収波長の光とリファレンス波長の光を交互に照射し、サンプル吸収波長の光が照射されたときのフォトダイオード１５ａの検出信号の時間的変化をサンプル吸収波長光量記憶部２７ｓに記憶し、リファレンス波長の光が照射されたときのフォトダイオード１５ａの検出信号の時間的変化をリファレンス吸収波長光量記憶部２７ｓに記憶する。
【００３６】
サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓにより、サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓ及びサンプル吸収波長光量記憶部２７ｓに記憶された光量に基づいてサンプル吸収波長での吸光度の時間的変化を計算する。リファレンス波長吸光度計算部２９ｒにより、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒ及びリファレンス波長光量記憶部２７ｒに記憶された光量に基づいてサンプル吸収波長での吸光度の時間的変化を計算する。
【００３７】
吸光度補正部３１により、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓが算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長吸光度計算部２９ｒが算出したリファレンス波長での吸光度を、時間位置を対応させて差し引いて、補正吸光度データを得る。これにより、目的成分の吸光度感度を落とすことなく、気泡や不純物に起因するノイズ信号を低減することができる。
このように、本発明を、検出器を分離流路の適当な位置での吸光度の時間的変化をモニターする電気泳動装置にも適用できる。
【００３８】
上記の実施例では、光源からの光を分光器により単色光にして分離流路に照射する電気泳動装置（前分光）に本発明を適用しているが、本発明が適用される電気泳動装置はこれに限定されるものではなく、分離流路からの光を分光器により分光してサンプル吸収波長の光及びリファレンス波長の光を検出する電気泳動装置（後分光）に適用することもできる。
また、上記の実施例では、本発明をマイクロチップ電気泳動装置に適用しているが、本発明はこれに限定されるものではなく、キャピラリ電気泳動装置など、他の電気泳動装置にも提供することができる。
【００３９】
【発明の効果】
本発明の電気泳動装置では、電気泳動部材と、泳動電源装置と、分離流路からのサンプル吸収波長の光及びサンプル吸収波長とは異なる波長域のリファレンス波長の光を検出する光学検出部と、光学検出部の検出信号に基づいてサンプル吸収波長での吸光度及びリファレンス波長での吸光度をそれぞれ算出する吸光度計算部と、吸光度計算部が算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する吸光度補正部とを備えているようにしたので、サンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を引き算して補正することにより、目的成分の吸光度感度を落とすことなく、気泡や不純物に起因するノイズ信号を効果的に低減できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】一実施例を示すブロック図である。
【図２】同実施例を一部ブロック図を含んで示す概略構成図である。
【図３】吸光度データを示す波形図であり、（Ａ）はサンプル吸収波長（２６０ｎｍ）での波形図、（Ｂ）はリファレンス波長（３２０ｎｍ）での波形図、（Ｃ）は補正吸光度データを示す波形図である。
【図４】他の実施例を一部ブロック図を含んで示す概略構成図である。
【図５】マイクロチップの一例を表す図であり、（Ａ）は一方の基材の上面図、（Ｂ）は他方の基材の上面図、（Ｃ）は両基材を重ね合わせた状態での側面図である。
【符号の説明】
１ 重水素ランプ
３，７，１３ ミラー
５ スリット
９ 分光器
１１ 波長選択部
１５ フォトダイオードアレイ
１７ 高圧電源
１９ 送液系
２１ 信号処理回路
２３ データ処理部
２５ｓ サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部
２５ｒ リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部
２７ｓ サンプル吸収波長光量記憶部
２７ｒ リファレンス波長光量記憶部
２９ｓ サンプル吸収波長吸光度計算部
２９ｒ リファレンス波長吸光度計算部
３１ 吸光度補正部
【発明の属する技術分野】
本発明は、微量のタンパクや核酸、薬物などを分析する電気泳動装置に関し、さらに詳しくは、電気泳動部材として透明板状部材の内部にサンプルが電気泳動により分離される分離流路を備えたマイクロチップを用いるマイクロチップ電気泳動装置、及び電気泳動部材としてキャピラリを用いるキャピラリ電気泳動装置を含む電気泳動装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
微量のタンパク質や核酸などを分析するための電気泳動装置として、キャピラリ電気泳動装置が主として用いられてきた。近年になって、キャピラリに代わってマイクロチップを用いるマイクロチップ電気泳動装置が使用されるようになっている。マイクロチップ電気泳動装置では、２枚の透明部材を接合して形成されたマイクロチップと称される電気泳動部材が使用される。そのマイクロチップの例を図５に示す。
【０００３】
マイクロチップ５１は、一対の透明板状の無機材料（例えばガラス、石英、シリコンなど）又はプラスチックからなる透明部材５１ａ，５１ｂからなり、例えば半導体製造プロセスに用いられる写真製版技術やマイクロマシニング技術などにより、一方の基材５１ｂの表面に互いに交差する泳動用キャピラリ溝（流路）５３，５５を形成し、他方の基材５１ａにはその流路５３，５５の端に対応する位置に貫通孔をアノードリザーバ５７ａ、カソードリザーバ５７ｃ、サンプルリザーバ５７ｓ、ウエイストリザーバ５７ｗとして設けたものである。マイクロチップ５１は、両基材５１ａ，５１ｂを（Ｃ）に示すように重ねて接合した状態で使用される。
【０００４】
このマイクロチップ５１を用いて電気泳動を行なう場合、分析に先立って、例えばシリンジを使った圧送により、いずれかのリザーバ、例えばアノードリザーバ５７ａから流路５３，５５内及びリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗ内に分離媒体を充填する。次いで、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗ内に充填された分離媒体を除去し、短い方の流路（サンプル注入流路）５３の一方の端に対応するサンプルリザーバ５７ｓにサンプルを注入し、他のリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｗにバッファ液を注入する。
【０００５】
分離媒体、サンプル及びバッファ液を注入したマイクロチップ５１を電気泳動装置に装着する。各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに所定の電圧を印加し、サンプルを流路５３中に泳動させて両流路５３，５５の交差部５９に導く。各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに印加する電圧を切り換えて、長い方の流路（分離流路）５５の両端のリザーバ５７ａ，５７ｃ間の電圧により、交差部５９に存在するサンプルを分離流路５５内に電気泳動的に導入する。
【０００６】
分離流路５５内にサンプルを導入した後、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに収容された溶液の電気伝導度の差に起因する電気泳動の不安定要素を除くために、リザーバ５７ｓ内に収容されているサンプルをリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｗに収容されているのと同じバッファ液で置換する。
その後、各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに電気泳動用の電圧を印加して、分離流路５５内に注入したサンプルを分離流路５５内で分離させる。
【０００７】
キャピラリ電気泳動装置では、キャピラリの一端にサンプルを注入し、そのキャピラリの両端間に泳動電圧を印加することにより、サンプルをキャピラリ内で電気泳動させて分離させる。
【０００８】
このような電気泳動装置において分離成分の検出を行なう１つの方法として、例えば紫外可視分光光度計などの吸光光度計の検出器を分離流路の適当な位置に配置しておき、その位置で、目的成分の光吸収があるサンプル吸収波長の光の吸光度を測定し、その吸光度の時間的変化をモニターすることにより成分の分離をモニターする方法がある。
他の検出方法としては、分離流路の所定の範囲にわたって光を照射し、分離流路に沿って配列された複数個の受光素子を備えた光検出器により分離流路内で分離された目的成分による光の吸収を分離流路に沿った所定の範囲にわたって同時に２次元的に捕らえる方法も提案されている（特開平１０−１３２７８３号公報参照。）
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
光吸収を検出することで成分を検出する場合、気泡や泳動媒体中の不純物（微粒子）などが分離流路内に存在すると、目的成分由来ではない泳動媒体中の気泡や不純物に起因する光吸収が検出されることがあり、ノイズの原因になる。その結果、検出精度が低下するという問題があった。
【００１０】
そこで本発明は、電気泳動装置において、目的成分の吸光度感度を落とすことなく、気泡や不純物に起因するノイズ信号を低減することを目的とするものである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
本発明は、透明部材にて形成され、その内部にサンプルが電気泳動により分離される分離流路を備えた電気泳動部材と、上記分離流路の両端間に泳動電圧を印加する泳動電源装置と、前分光又は後分光により、上記分離流路の所定の位置に又は所定の範囲にわたって光を照射し、上記分離流路の所定の位置又は所定の範囲からの、目的成分の光吸収があるサンプル吸収波長の光及び目的成分の光吸収がないか又は少なく、サンプル吸収波長とは異なる波長域のリファレンス波長の光を検出する光学検出部と、サンプル吸収波長での上記光学検出部のサンプル検出信号と同波長でのバックグラウンド光量とからそのサンプル吸収波長での吸光度を算出し、前記リファレンス吸収波長での前記光学検出部のサンプル検出信号と同波長でのバックグラウンド光量とからそのリファレンス波長での吸光度を算出する吸光度計算部と、上記吸光度計算部が算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する吸光度補正部とを備えている電気泳動装置である。
ここで、リファレンス波長において「目的成分の光吸収が少なく」というのは、「目的成分の吸光度感度を落とさない程度に少なく」という意味である。
【００１２】
気泡や泳動媒体中の不純物などの光吸収は波長依存性が少ないため、サンプル吸収波長でもリファレンス波長でも同程度の光吸収をもつ。これにより、サンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を引き算して補正することで、目的成分の吸光度感度を落とすことなく、気泡や不純物に起因するノイズ信号のみを効果的に低減できる。
【００１３】
上記電気泳動部材の例として、マイクロチップとキャピラリを挙げることができる。本発明は、マイクロチップ電気泳動装置又はキャピラリ電気泳動装置に適用するのに相応しいが、他の電気泳動装置にも適用できるものである。
【００１４】
【実施例】
図１は、一実施例を示すブロック図である。図２は、その実施例を一部ブロック図を含んで示す概略構成図である。電気泳動部材としては図５に示したマイクロチップを用いた。図１、図２及び図５を参照して一実施例の構成を説明する。
【００１５】
光源としての例えば重水素ランプ１からの光の光路にはミラー３、スリット５及びミラー７が設けられており、重水素ランプ１からの光は、ミラー３、スリット５及びミラー７により平行光にされる。ミラー７による反射光の光路には、平行光にされた重水素ランプ１からの光を分光する分光器９が設けられている。分光器９により分光された光の光路には、その分光された光のうち、特定波長の光（単色光）をマイクロチップ５１の分離流路５５の所定範囲に導くミラー１３が設けられている。分光器９には、分光器９を回転させて分離流路５５に照射する単色光の波長を選択する波長選択部１１が接続されている。図１ではミラー３、スリット５、ミラー７及びミラー１３の図示は省略されている。
【００１６】
マイクロチップ５１の光入射側とは反対側には、分離流路５５からの光を測定するための複数のフォトダイオードが分離流路５５に沿って配列されたフォトダイオードアレイ１５が備えられている。マイクロチップ５１の近傍には分離流路５５，５３の両端に高電圧を印加するための高圧電源１７が配置されている。マイクロチップ５１の近傍には、分離媒体やバッファ液などの泳動媒体及びサンプルを供給するための送液系１９も配置されている。
フォトダイオードアレイ１５には、フォトダイオードアレイ１５に配置された各フォトダイオードの検出信号をＡ／Ｄ変換器などの信号処理回路２１を介して取り込むデータ処理部２３が電気的に接続されている。
【００１７】
データ処理部２３には、サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓ、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒ、サンプル吸収波長光量記憶部２７ｓ及びリファレンス波長光量記憶部２７ｒが設けられている。記憶部２５ｓ，２５ｒ，２７ｓ，２７ｒは信号処理回路２１に電気的に接続されている。サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓは、目的成分の光吸収があるサンプル吸収波長の光がサンプル分離前の分離流路５５に照射されたときの光量をバックグラウンド光量として記憶する。リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒは、目的成分の光吸収がないリファレンス波長の光がサンプル分離前の分離流路５５に照射されたときの光量をバックグラウンド光量として記憶する。サンプル吸収波長光量記憶部２７ｓは、サンプル吸収波長がサンプル分離後の分離流路５５に照射されたときの光量を記憶する。リファレンス波長光量記憶部２７ｒは、リファレンス波長がサンプル分離後の分離流路５５に照射されたときの光量を記憶する。
【００１８】
データ処理部２３には、サンプル吸光波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓに記憶されたバックグラウンド光量及びサンプル吸光波長光量記憶部２７ｓに記憶された光量に基づいてサンプル吸収波長での吸光度を計算するサンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓと、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒに記憶されたバックグラウンド光量及びリファレンス波長光量記憶部２７ｒに記憶された光量に基づいてリファレンス波長での吸光度を計算するリファレンス波長吸光度計算部２９ｒと、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓが算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長吸光度計算部２９ｒが算出したリファレンス波長での吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する吸光度補正部３１が設けられている。吸光度補正部３１が算出した補正吸光度データは、例えば補正吸光度データの解析や印刷、保存などを行なうパーソナルコンピュータへ伝送される。
【００１９】
本発明を構成する吸光度計算部は、サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓ、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒ、サンプル吸収波長光量記憶部２７ｓ、リファレンス波長光量記憶部２７ｒ、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓ及びリファレンス波長吸光度計算部２９ｒにより構成される。
サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓ、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒ、サンプル吸収波長光量記憶部２７ｓ及びリファレンス波長光量記憶部２７ｒは例えば１つ又は複数の記憶装置により実現され、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓ、リファレンス波長吸光度計算部２９ｒ及び吸光度補正部３１は例えば１つ又は複数のＣＰＵ（中央演算処理装置）により実現される。
【００２０】
この実施例の動作を説明する。ここではサンプルとしてＤＮＡ（デオキシリボ核酸）を用いる場合について説明する。
マイクロチップ５１を所定の位置に配置する。送液系１９により、いずれかのリザーバ、例えばアノードリザーバ５７ａから流路５３，５５内及びリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗ内に分離媒体を充填する。次いで、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗ内に充填された分離媒体を除去し、サンプル注入流路５３の一方の端に対応するサンプルリザーバ５７ｓにサンプルを注入し、他のリザーバ５７ａ、５７ｃ，５７ｗにバッファ液を注入する。
【００２１】
高圧電源１７により、各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに所定の電圧を印加し、サンプルをサンプル注入流路５３中に泳動させて両流路５３，５５の交差部５９に導く。各リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに印加する電圧を切り換えて、分離流路５５の両端のリザーバ５７ａ，５７ｃ間の電圧により、交差部５９に存在するサンプルを分離流路５５内に電気泳動的に導入する。
分離流路５５内にサンプルを導入した後、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに収容された溶液の電気伝導度の差による電気泳動の不安定要素を除くため、リザーバ５７ｓ内に収容されているサンプルをリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｗに収容されているのと同じバッファ液で置換する。
【００２２】
波長選択部１１により、分光器９の角度を制御して、サンプル吸収波長の光、例えば波長が２６０ｎｍの光を分離流路５５の所定範囲に照射する。このとき、分離流路５５の所定範囲にサンプルが存在しない状態である。そのときの分離流路５５の所定範囲からの光をフォトダイオードアレイ１５により検出し、信号処理回路２１を経てサンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓに記憶する。
【００２３】
波長選択部１１により、分光器９の角度を変更して、リファレンス波長の光、例えば波長が３２０〜３５０ｎｍの光、ここでは３２０ｎｍの光を分離流路５５の所定範囲に照射する。このときも、分離流路５５の所定範囲にサンプルが存在しない状態である。そのときの分離流路５５の所定範囲からの光をフォトダイオードアレイ１５により検出し、信号処理回路２１を経てリファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒに記憶する。
【００２４】
高圧電源１７により、リザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに所定の泳動電圧を印加して、サンプルを分離流路５５内で分離させる。分離が完了した時点でリザーバ５７ａ，５７ｃ，５７ｓ，５７ｗに印加する高圧を切り、泳動を停止する。
【００２５】
波長選択部１１により、分光器９の角度を制御して、サンプル吸収波長である２６０ｎｍの光を分離流路５５の所定範囲に照射する。このとき、分離流路５５の所定範囲でサンプルが分離している状態である。そのときの分離流路５５の所定範囲からの光をフォトダイオードアレイ１５により検出し、信号処理回路２１を経てサンプル吸収波長光量記憶部２７ｓに記憶する。
【００２６】
波長選択部１１により、分光器９の角度を変更して、リファレンス波長である３２０ｎｍの光を分離流路５５の所定範囲に照射する。このときも、分離流路５５の所定範囲でサンプルが分離している状態である。そのときの分離流路５５の所定範囲からの光をフォトダイオードアレイ１５により検出し、信号処理回路２１を経てリファレンス波長光量記憶部２７ｒに記憶する。
【００２７】
図３は、吸光度データを示す波形図であり、（Ａ）はサンプル吸収波長（２６０ｎｍ）での波形図、（Ｂ）はリファレンス波長（３２０ｎｍ）での波形図、（Ｃ）は補正吸光度データを示す波形図である。縦軸は吸光度、横軸は分離流路位置を示す。
サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓにより、記憶部２５ｓに記憶されたバックグラウンド光量及び記憶部２７ｓに記憶された光量に基づいて、Lambert-Beerの式を適用して、サンプル吸収波長での吸光度を計算する（（Ａ）参照）。
サンプル吸収波長の吸光度＝
-log（{サンプル吸収波長光量}／{サンプル吸収波長バックグラウンド光量}）
ここで対数の底は１０である。
サンプル吸収波長での吸光度データ（Ａ）には、目的成分のピークＰのほか、気泡に起因するノイズＮが見られる。また、ベースラインには、気泡や不純物に起因する細かなノイズが多数見られる。
【００２８】
リファレンス波長吸光度計算部２９ｒにより、記憶部２５ｒに記憶されたバックグラウンド光量及び記憶部２７ｒに記憶された光量に基づいて、Lambert-Beerの式を適用して、リファレンス波長での吸光度を計算する（（Ｂ）参照）。
リファレンス波長の吸光度＝
-log（{リファレンス波長光量}／{リファレンス波長バックグラウンド光量}）
ここで対数の底は１０である。
リファレンス波長での吸光度データ（Ｂ）には、サンプル吸収波長での吸光度データ（Ａ）と同じ分離流路位置に気泡に起因するノイズＮ’が見られる。また、ベースラインには、サンプル吸収波長での吸光度データ（Ａ）の分離流路位置に対応して気泡や不純物に起因する細かなノイズが多数見られる。
【００２９】
吸光度補正部３１により、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓが算出した吸光度からリファレンス波長吸光度計算部２９ｒが算出した吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する（（Ｃ）参照）。
補正吸光度＝{サンプル吸収波長吸光度}−{リファレンス波長吸光度}
補正吸光度データ（Ｃ）では、バッファ液溶液中の気泡や微粒子などに起因するノイズが低減され、目的成分のピークＰ’が明確になっているのが分かる。このように、バッファ液溶液中の気泡や微粒子などに起因するノイズを目的成分に対する感度を損なわずに効果的に低減できる。
得られた補正吸光度データをパーソナルコンピュータに伝送し、解析、印刷、保存などを行なう。
【００３０】
この実施例では、サンプル吸収波長として２６０ｎｍ、リファレンス波長として３２０ｎｍを用いているが、本発明はこれに限定されるものではなく、サンプル吸収波長は目的成分の吸収が最大になる波長を選択し、リファレンス波長は目的成分の吸収が少なく、なおかつノイズが少ない波長（光源の輝度が十分にある波長など）を選択することができる。
【００３１】
また、この実施例では、分離流路の所定範囲での吸光度を測定しているが、本発明が適用される電気泳動装置はこれに限定されるものではなく、検出器を分離流路の適当な位置に配置しておき、その位置での吸光度の時間的変化をモニターすることにより成分の分離をモニターする電気泳動装置にも適用することができる。図４にその電気泳動装置の一実施例を示す。
【００３２】
図４は、他の実施例を一部ブロック図を含んで示す概略構成図である。図２と同じ機能を果たす部分には同じ符号を付し、その説明は省略する。
重水素ランプ１からの光の光路にはミラー３ａ、スリット５ａ、ミラー７ａ及び分光器９が設けられている。重水素ランプ１からの光は、ミラー３ａによりスリット５ａに結像される。スリット５ａを通過した光はミラー７ａに照射される。ミラー７による反射光の光路には分光器９が設けられている。分光器９により分光された光の光路には、その分光された光のうち、特定波長の光（単色光）をスリット５ｂに結像するミラー１３ａが設けられている。スリット５ｂを通過した光は集光レンズ１４によりマイクロチップ５１の分離流路５５の所定位置に結像される。分光器９には波長選択部１１が接続されている。
【００３３】
マイクロチップ５１の光入射側とは反対側には、分離流路５５からの光を測定するためのフォトダイオード１５ａが備えられている。マイクロチップ５１の近傍には高圧電源１７及び送液系１９が配置されている。
フォトダイオード１５ａには、フォトダイオード１５ａの検出信号を信号処理回路２１を介して取り込むデータ処理部２３が電気的に接続されている。データ処理装置２３は、図１に示す構成と同じである。
【００３４】
マイクロチップ５１の分離流路５５にサンプルが存在しない状態でサンプル吸収波長の光とリファレンス波長の光を順に照射して、バックグランド光量をサンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓとリファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒに記憶した後、高圧電源１７によりマイクロチップ５１に泳動電圧を印加してサンプルの分離を開始する。
【００３５】
波長選択部により分光器９の角度を制御して、分離流路５５にサンプル吸収波長の光とリファレンス波長の光を交互に照射し、サンプル吸収波長の光が照射されたときのフォトダイオード１５ａの検出信号の時間的変化をサンプル吸収波長光量記憶部２７ｓに記憶し、リファレンス波長の光が照射されたときのフォトダイオード１５ａの検出信号の時間的変化をリファレンス吸収波長光量記憶部２７ｓに記憶する。
【００３６】
サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓにより、サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部２５ｓ及びサンプル吸収波長光量記憶部２７ｓに記憶された光量に基づいてサンプル吸収波長での吸光度の時間的変化を計算する。リファレンス波長吸光度計算部２９ｒにより、リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部２５ｒ及びリファレンス波長光量記憶部２７ｒに記憶された光量に基づいてサンプル吸収波長での吸光度の時間的変化を計算する。
【００３７】
吸光度補正部３１により、サンプル吸収波長吸光度計算部２９ｓが算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長吸光度計算部２９ｒが算出したリファレンス波長での吸光度を、時間位置を対応させて差し引いて、補正吸光度データを得る。これにより、目的成分の吸光度感度を落とすことなく、気泡や不純物に起因するノイズ信号を低減することができる。
このように、本発明を、検出器を分離流路の適当な位置での吸光度の時間的変化をモニターする電気泳動装置にも適用できる。
【００３８】
上記の実施例では、光源からの光を分光器により単色光にして分離流路に照射する電気泳動装置（前分光）に本発明を適用しているが、本発明が適用される電気泳動装置はこれに限定されるものではなく、分離流路からの光を分光器により分光してサンプル吸収波長の光及びリファレンス波長の光を検出する電気泳動装置（後分光）に適用することもできる。
また、上記の実施例では、本発明をマイクロチップ電気泳動装置に適用しているが、本発明はこれに限定されるものではなく、キャピラリ電気泳動装置など、他の電気泳動装置にも提供することができる。
【００３９】
【発明の効果】
本発明の電気泳動装置では、電気泳動部材と、泳動電源装置と、分離流路からのサンプル吸収波長の光及びサンプル吸収波長とは異なる波長域のリファレンス波長の光を検出する光学検出部と、光学検出部の検出信号に基づいてサンプル吸収波長での吸光度及びリファレンス波長での吸光度をそれぞれ算出する吸光度計算部と、吸光度計算部が算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する吸光度補正部とを備えているようにしたので、サンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を引き算して補正することにより、目的成分の吸光度感度を落とすことなく、気泡や不純物に起因するノイズ信号を効果的に低減できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】一実施例を示すブロック図である。
【図２】同実施例を一部ブロック図を含んで示す概略構成図である。
【図３】吸光度データを示す波形図であり、（Ａ）はサンプル吸収波長（２６０ｎｍ）での波形図、（Ｂ）はリファレンス波長（３２０ｎｍ）での波形図、（Ｃ）は補正吸光度データを示す波形図である。
【図４】他の実施例を一部ブロック図を含んで示す概略構成図である。
【図５】マイクロチップの一例を表す図であり、（Ａ）は一方の基材の上面図、（Ｂ）は他方の基材の上面図、（Ｃ）は両基材を重ね合わせた状態での側面図である。
【符号の説明】
１ 重水素ランプ
３，７，１３ ミラー
５ スリット
９ 分光器
１１ 波長選択部
１５ フォトダイオードアレイ
１７ 高圧電源
１９ 送液系
２１ 信号処理回路
２３ データ処理部
２５ｓ サンプル吸収波長バックグラウンド光量記憶部
２５ｒ リファレンス波長バックグラウンド光量記憶部
２７ｓ サンプル吸収波長光量記憶部
２７ｒ リファレンス波長光量記憶部
２９ｓ サンプル吸収波長吸光度計算部
２９ｒ リファレンス波長吸光度計算部
３１ 吸光度補正部
Claims (2)
- 透明部材にて形成され、その内部にサンプルが電気泳動により分離される分離流路を備えた電気泳動部材と、
前記分離流路の両端間に泳動電圧を印加する泳動電源装置と、
前分光又は後分光により、前記分離流路の所定の位置に又は所定の範囲にわたって光を照射し、前記分離流路の所定の位置又は所定の範囲からの、目的成分の光吸収があるサンプル吸収波長の光及び目的成分の光吸収がないか又は少なく、サンプル吸収波長とは異なるリファレンス波長の光を検出する光学検出部と、
前記サンプル吸収波長での前記光学検出部のサンプル検出信号と同波長でのバックグラウンド光量とからそのサンプル吸収波長での吸光度を算出し、前記リファレンス吸収波長での前記光学検出部のサンプル検出信号と同波長でのバックグラウンド光量とからそのリファレンス波長での吸光度を算出する吸光度計算部と、
前記吸光度計算部が算出したサンプル吸収波長での吸光度からリファレンス波長での吸光度を差し引いて補正吸光度を算出する吸光度補正部と、を備えたことを特徴とする電気泳動装置。 - 前記電気泳動部材はマイクロチップ又はキャピラリである請求項１に記載の電気泳動装置。
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