JP3527502B1 - ステロール脂肪酸エステル含有組成物およびその製造方法 - Google Patents

Abstract

【要約】 【課題】 食用油に所定の濃度以上配合され、かつ配合
された食用油を低温保存したときに、白濁などを生じな
いステロール脂肪酸エステル含有組成物を提供するこ
と。 【解決手段】 本発明のステロール脂肪酸エステル含有
組成物は、ステロールと、５重量％以下の長鎖飽和脂肪
酸を含有する脂肪酸および／または中鎖脂肪酸、全構成
脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸が５重量％以下であるグリセ
リドおよび／または中鎖脂肪酸グリセリド、あるいは長
鎖脂肪酸含有油または該油に由来する脂肪酸などで代表
される脂肪酸あるいはグリセリドとを反応させることに
より得られる。このステロール脂肪酸エステル含有組成
物を、ステロールに換算して２重量％以上となるように
食用油に配合し、５℃で２４時間放置しても、食用油は
澄明な状態が維持される。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【発明の属する技術分野】本発明は、食用油あるいは食
用加工油に、濁り、沈殿などを生じることがなく、安定
に配合されるステロール脂肪酸エステル含有組成物、お
よびその製造方法、並びにこのステロール脂肪酸エステ
ル含有組成物を含有する食用油あるいは食用加工油に関
する。 【０００２】 【従来の技術】ステロールの血中コレステロール値を低
減させる機能が注目されており、食用油あるいは食用加
工油（例えば、ジグリセロールなどを主体とする食用
油）に、ステロールあるいはステロールを主体とするス
テロール／ステロール脂肪酸エステル混合物を添加した
油脂製品（例えば、てんぷら油、サラダ油、ドレッシン
グ、マーガリン等）が販売されている。 【０００３】しかし、遊離のステロールは融点が高く、
食用油には溶解しにくいという問題があり、遊離ステロ
ールが２重量％前後食用油脂中に含まれると、溶解でき
なかった遊離ステロールが浮遊、沈殿して食用油に濁り
を生じ、外見が悪くなるばかりでなく、ドレッシング、
マヨネーズなどの乳化を要する食品に用いた場合に、乳
化しにくくなるなどの問題が生じる。 【０００４】他方、ステロール脂肪酸エステルは、ステ
ロールに比べると融点が低いため、ステロールの代替品
として、食用油、食用加工油への使用が検討されてい
る。一般に、食用に供されるステロール脂肪酸エステル
は、植物油の製造工程で生じるステロールを脂肪酸でエ
ステル化する、あるいはステロール脂肪酸エステルを回
収することによって製造されている。しかし、この植物
油に由来するステロール脂肪酸エステルは、純品として
精製することが困難で、ステロール脂肪酸エステル含有
組成物として供給されている。このようなステロール脂
肪酸エステル含有組成物を、食用油あるいは食用加工油
にステロールに換算して２重量％程度の濃度で添加し、
冷蔵庫で一夜保存すると、食用油に沈殿あるいは白濁が
生じ、油の外見上不都合が生じるだけでなく、乳化に際
して、不都合が生じる。 【０００５】この問題を検討するため、高純度のステロ
ールを出発原料とし、リパーゼを触媒として脂肪酸でエ
ステル化し、高純度のステロール脂肪酸エステルを製造
する方法が開示されている（特許文献１）。しかし、出
発原料の高純度ステロールは高価であり、製造されたス
テロール脂肪酸エステルはステロールより高価となる。
さらに、高純度のステロール脂肪酸エステルであって
も、２重量％以上食用油に溶解した場合に、白濁が生じ
るなど、根本的な解決には至っていない。 【０００６】上記の通り、ステロール脂肪酸エステル含
有組成物は、植物油の製造工程で生じる副産物から製造
される場合が多い（特許文献２〜７）。このような方法
として、ビタミン類、ステロール、脂肪酸、中性脂質、
炭化水素などを含む混合物を、水を含む反応系でリパー
ゼ処理し、中性脂質の加水分解と同時にステロールを脂
肪酸でエステル化してステロール脂肪酸エステルに変換
した後、ステロール脂肪酸エステルを蒸留残渣として回
収し、ステロール脂肪酸エステル含有組成物を分離精製
する方法が知られている（特許文献２、３、４および
７）。しかし、このように精製された高純度のステロー
ル脂肪酸エステルを、食用油あるいは食用加工油に添加
し、保存したときに食用油あるいは食用加工油に白濁、
沈殿が生じるため、食用油に添加するには、まだ改良の
余地がある。 【０００７】 【特許文献１】特公平５−３３７１２号公報 【特許文献２】特開２０００−３０２７７７号公報 【特許文献３】特開２００２−１５３２９６号公報 【特許文献４】特開２００２−２３３３９６号公報 【特許文献５】特開２００２−１７１９９３号公報 【特許文献６】特開２００２−２３３３９７号公報 【特許文献７】特開２００２−２３３３９８号公報 【０００８】 【発明が解決しようとする課題】そこで、食用油、食用
加工油などに添加したときに白濁、沈殿を生じることが
ないステロール脂肪酸エステル含有組成物が望まれてい
る。 【０００９】 【課題を解決するための手段】本発明者らは、高純度の
ステロール脂肪酸エステルであっても、ステロールに換
算して２重量％以上食用油に溶解した場合に、白濁が生
じる原因について検討した結果、ステロール−長鎖飽和
脂肪酸エステルが食用油中に所定量以上存在すると、冷
蔵保存した場合に白濁することを見出した。この結果を
基に、食用油、食用加工油に大量に添加しても白濁（曇
り）や沈澱を生じさせないステロール脂肪酸エステル含
有組成物を得ることに成功し、本発明を完成するに至っ
た。 【００１０】本発明は、ステロール脂肪酸エステル含有
組成物であって、該組成物をステロールに換算して２．
０重量％の濃度となるように食用油中に溶解し、かつ、
５℃で２４時間放置した場合に、該食用油の澄明な状態
が維持され得る、ステロール脂肪酸エステル含有組成物
を提供する。 【００１１】本発明は、また、ステロール−長鎖不飽和
脂肪酸エステルを主成分とし、ステロール−長鎖飽和脂
肪酸エステルを含有するステロール脂肪酸エステル含有
組成物であって、該組成物中のステロール−長鎖飽和脂
肪酸エステル量が、ステロール−長鎖不飽和脂肪酸エス
テルとステロール−長鎖飽和脂肪酸エステルとの合計量
の５重量％以下である、ステロール脂肪酸エステル含有
組成物を提供する。 【００１２】さらに、本発明は、前記いずれかのステロ
ール脂肪酸含有組成物を含有する食用油または食用加工
油であって、ステロール脂肪酸エステルをステロールに
換算して２．０重量％以上含有し、かつ、５℃で２４時
間放置した場合に、該食用油または食用加工油の澄明な
状態が維持され得る、食用油または食用加工油を提供す
る。 【００１３】本発明は、また、ステロール脂肪酸エステ
ル含有組成物を含有する食用油または食用加工油であっ
て、ステロール脂肪酸エステルをステロールに換算して
２．０重量％以上含有し、かつステロール長鎖飽和脂肪
酸エステルを０．５重量％以下の量で含有する食用油ま
たは食用加工油を提供する。 【００１４】さらに、本発明は、ステロール脂肪酸エス
テル含有組成物の製造方法であって、ステロールと、全
脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸が５重量％以下である脂肪酸
および／または中鎖脂肪酸とを反応させて、ステロール
脂肪酸エステルを生成させる工程；を含む、方法を提供
する。 【００１５】本発明は、さらに、ステロール脂肪酸エス
テル含有組成物の製造方法であって、ステロールと、全
構成脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸が５重量％以下であるグ
リセリドおよび／または中鎖脂肪酸グリセリドとを反応
させて、ステロール脂肪酸エステルを生成させる工程；
を含む、方法を提供する。 【００１６】本発明は、また、ステロール脂肪酸エステ
ル含有組成物の製造方法であって、ステロールと、全構
成脂肪酸中に長鎖飽和脂肪酸を７．５重量％以下の量含
有する油、または該油に由来する脂肪酸とを、長鎖不飽
和脂肪酸を優先的にエステル化反応あるいはエステル交
換反応によりステロールに転移するリパーゼの存在下、
エステル化率が８５％以下となるように反応させ、ステ
ロール長鎖飽和脂肪酸エステル量が、ステロール長鎖不
飽和脂肪酸エステルとステロール長鎖飽和脂肪酸エステ
ルの合計量の５重量％以下であるステロール脂肪酸エス
テルを生成させる工程；を含む方法を提供する。 【００１７】好ましい実施態様においては、前記リパー
ゼが、キャンディダ（Candida）属、またはシュードモ
ナス（Pseudomonas）属に属する微生物に由来するリパ
ーゼである。 【００１８】好ましい実施態様においては、前記ステロ
ールが、植物油脱臭留出物に由来する粗ステロールであ
り、さらに、得られたステロール脂肪酸エステルを蒸留
・精製する工程を含む。 【００１９】好ましい実施態様においては、得られたス
テロール脂肪酸エステルを直接加温して溶解するか、ま
たは溶媒に加温溶解し、次いで、徐冷して、沈殿を生じ
させる工程；および該沈殿物を回収して、ステロール長
鎖飽和脂肪酸エステル量を低下させる工程を含む。 【００２０】別の本発明は、ステロール長鎖不飽和脂肪
酸エステルおよびステロール長鎖飽和脂肪酸エステルを
含有する画分を直接加温して溶解するか、または溶媒に
加温溶解する工程；徐冷し、沈殿を生じさせる工程；お
よび、該沈殿物を回収する工程；を含む、ステロール長
鎖飽和脂肪酸エステル量がステロール長鎖不飽和脂肪酸
エステルとステロール長鎖飽和脂肪酸エステルとの合計
量の５重量％以下であるステロール脂肪酸エステル含有
組成物の製造方法を提供する。 【００２１】 【発明の実施の形態】本発明で使用される食用油は、５
℃で冷蔵保存しても、白濁、沈澱などを生じない油をい
い、例えば、大豆油、菜種油、パーム分別油、サフラワ
ー油、オリーブ油、綿実油、ゴマ油、コメ油、アマニ油
などが挙げられる。食用加工油とは、食用油には一般に
含まれていない他の成分（例えばジグリセリド、中鎖脂
肪酸を含む油）を含む油、あるいは食用油の成分の一部
をこの成分で置き換えた油をいう。 【００２２】本発明のステロール脂肪酸エステル含有組
成物は、ステロール−長鎖不飽和脂肪酸エステルを主成
分とし、ステロール−長鎖飽和脂肪酸エステル、その他
の物質が含まれる。ここで長鎖脂肪酸というときは、Ｃ
１４〜２４の脂肪酸をいう。本発明のステロール脂肪酸
エステル含有組成物は、ステロール長鎖飽和脂肪酸エス
テルの含量が５重量％以下であることが好ましい。４重
量％以下であることがより好ましく、３重量％以下であ
ることがさらに好ましい。ステロール長鎖飽和脂肪酸エ
ステルの含量が５重量％以下であれば、ステロール脂肪
酸エステルをステロールに換算して６重量％以上となる
ように配合し、冷蔵保存（５℃、２４時間）しても、食
用油の澄明な状態を維持し得る。ステロール長鎖飽和脂
肪酸エステルは融点が高いため、０．５重量％を超えて
食用油等に含有されると、冷蔵保存したときに、食用油
等に白濁が生じるなど澄明な状態が維持されないと考え
られる。 【００２３】ここで、「澄明な状態を維持する」とは、
５℃で２４時間放置したときに食用油（あるいは食用加
工油）に、白濁あるいは沈殿（以下、白濁等という）が
生じないことを意味する。 【００２４】本発明のステロール脂肪酸エステル含有組
成物中に、ステロール脂肪酸エステルは１０重量％以上
含まれる。好ましくは２０重量％以上、５０重量％以
上、あるいは７０重量％以上含まれる。食用油等に添加
する観点からは、組成物中にステロール脂肪酸エステル
が８０重量％以上含まれることが好ましく、９０重量％
以上含まれることがより好ましく、９５重量％以上〜１
００％未満含まれることがさらに好ましい。 【００２５】本発明のステロール脂肪酸エステル含有組
成物は、ステロール脂肪酸エステルが実質的に１００％
である場合を含む。ステロール脂肪酸エステル以外の成
分としては、例えば、ステロール脂肪酸エステル製造の
材料（例えば、植物油の製造工程で得られる粗ステロー
ル）に由来する、ステロール脂肪酸エステルと分離でき
なかった成分が挙げられる。また、用途を考慮して、ス
テロール脂肪酸エステル以外の成分として、食用油、食
用加工油などを用いてもよい（例えば、ステロール脂肪
酸エステルに食用油、食用加工油などを配合してもよ
い）。 【００２６】本発明のステロール脂肪酸エステル含有組
成物を、食用油等にステロール脂肪酸エステルが３．０
重量％（ステロールに換算して２．０重量％）となるよ
うに溶解し、５℃で２４時間放置しても、本発明の組成
物が配合された食用油等は澄明な状態を維持し得る。好
ましいステロール脂肪酸エステル含有組成物は、ステロ
ール脂肪酸エステルが５．０重量％（ステロールに換算
して３．０重量％）、あるいは６．０重量％（ステロー
ルに換算して３．７重量％）となるように食用油等に溶
解し、同条件で放置しても、この食用油等が澄明な状態
を維持し得るような、組成物である。従来のステロール
脂肪酸エステル含有組成物は、約３重量％以上のステロ
ール脂肪酸エステルが含まれるように食用油等に配合す
ると澄明な状態が維持できなかった。 【００２７】本発明のステロール脂肪酸エステル含有組
成物は、ステロール脂肪酸エステルが３．０重量％以
上、好ましくは５重量％以上、より好ましくは１０重量
％以上、さらには２０重量％以上、必要に応じて５０重
量％以上となるように食用油等に配合される。なお、配
合に際しては、配合によって得られる食用油等に含まれ
るステロール長鎖飽和脂肪酸エステルの総量が０．５重
量％以下、好ましくは０．４重量％以下となるようにす
ることが、澄明な状態を維持するために好ましい。 【００２８】本発明のステロール脂肪酸エステル含有組
成物は、ステロールと脂肪酸とのエステル化反応あるい
はエステル交換反応、あるいはステロールとグリセリド
のエステル交換反応を利用することによって製造するこ
とができる。なお、以下、脂肪酸というときは、遊離脂
肪酸および／または脂肪酸エステルを意味し、また、グ
リセリドというときは、トリグリセリド、ジグリセリド
および／またはモノグリセリドを意味する場合がある。 【００２９】（ステロール脂肪酸エステルの製造に用い
るステロール）本発明に用いられるステロールには、特
に制限はなく、精製された市販のステロールを用いても
良い。あるいは、植物油脱臭留出物に由来する粗ステロ
ールを用いてもよい。植物油脱臭留出物に由来する粗ス
テロールは、従来廃棄されており、これを利用すること
は、資源の有効利用と廃棄物の減少（環境汚染の低下）
につながる。 【００３０】粗ステロールの原料となる植物油脱臭留出
物は、植物油を精製する工程中、例えば、１３３〜７０
０ Ｐａ、２２０〜２６０℃などの条件下で行う脱臭工
程から留出してくる副産物である。好ましい油として
は、大豆油、菜種油、ヒマワリ油、パーム油、綿実油、
コメ油などが挙げられるが、これらに限定されない。こ
の植物油脱臭留出物中には、ビタミン類（トコフェロー
ル、トコトリエノールなど）、ステロール、遊離脂肪
酸、モノ、ジ、トリグリセリド、炭化水素、ステロール
脂肪酸エステルなどが含まれている。 【００３１】植物油脱臭留出物を、例えば１．３３〜２
６．６６Ｐａ（０．０１〜０．２ｍｍＨｇ）、１８０〜
２８０℃の条件で分子蒸留に供すると、遊離脂肪酸、ス
テロール、トコフェロール（および／またはトコトリエ
ノール）、および炭化水素類を主成分とする、分子量２
５０〜５００の化合物で構成される低沸点物質を含有す
る留分が得られる。この留分を、粗ステロール画分
（１）として、本発明に用いることができる。 【００３２】得られた粗ステロール画分（１）中には、
約５０重量％の遊離脂肪酸が含まれている。この遊離脂
肪酸中の長鎖飽和脂肪酸含量が所望する含量以下である
なら、得られた粗ステロール画分（１）は、ステロール
脂肪酸エステルの合成原料である長鎖脂肪酸とステロー
ルが混合された液として、そのまま、酵素法あるいは化
学法により、ステロール脂肪酸エステルを合成する反応
に使用される。 【００３３】ステロール脂肪酸エステルの純度を高くす
るために、粗ステロール画分（１）から、さらに遊離脂
肪酸を除去して、粗ステロール画分（２）を得、これを
ステロールの原料として使用することが、より好まし
い。粗ステロール画分（１）から遊離脂肪酸を除去する
には、分子蒸留が好ましく、その条件として、例えば、
６．６５〜６６．６５Ｐａ（０．０５〜０．５ｍｍＨ
ｇ）、１６０〜２５０℃が挙げられる。粗ステロール画
分（２）は遊離脂肪酸をほとんど含まず、ステロール、
トコフェロール（または／およびトコトリエノール）、
炭化水素類、グリセリドなどを含む、分子量３５０〜５
００の化合物で構成される。 【００３４】また、粗ステロール画分（１）あるいは
（２）からトコフェロール（または／およびトコトリエ
ノール）を除去して得られるステロール画分を粗ステロ
ール画分（３）として用いることができる。粗ステロー
ル画分（２）からのトコフェロール（および／またはト
コトリエノール）の除去は、当業者が通常用いる方法
（溶媒分別法、膜分離法、クロマトグラフィーなど）を
用いて行うことができるが、好ましくは溶媒分別法によ
り行われる。 【００３５】粗ステロール画分（２）を溶媒分別して、
粗ステロール画分（３）を調製する場合、以下のような
方法が例示される。粗ステロール画分（２）に対して、
適切な量の溶媒（例えば、３〜１０倍容量のエタノール
あるいはメタノール）を加え、加温して、粗ステロール
画分（２）を完全に溶解させた後、５〜−２０℃まで徐
冷する。ステロールと炭化水素類は沈殿するが、トコフ
ェロール（および／またはトコトリエノール）は可溶性
画分に移行する。ステロールを含む沈殿物は濾過、遠心
分離などによって回収することができる。 【００３６】以上のような例示の方法で得られる、植物
油脱臭留出物に由来する粗ステロール画分（１）〜
（３）などが、ステロール脂肪酸エステルの合成に用い
られる。 【００３７】（ステロール脂肪酸エステルの製造に用い
る脂肪酸）本発明に用いられる脂肪酸（遊離脂肪酸ある
いは脂肪酸エステル）としては、長鎖飽和脂肪酸の含量
が、全脂肪酸中、５重量％以下であることが好ましい。
一般的に、長鎖不飽和脂肪酸（オレイン酸、リノール
酸、α-リノレン酸など）含量の高いサフラワー油、菜
種油、アマニ油、オリーブ油、大豆油、綿実油、米油な
どの食用油（以下、まとめて長鎖脂肪酸含有油というこ
とがある）は、長鎖飽和脂肪酸の含量が比較的低いとい
うものの、長鎖飽和脂肪酸の含量は、全構成脂肪酸中の
長鎖脂肪酸の５重量％を超える。そのため、これらの長
鎖脂肪酸含有油を、例えば、化学法で加水分解し、グリ
セロールあるいはグリセリドを除くことによって得られ
る脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸の含量は、５重量％を超え
る。そこで、有機溶媒の存在および非存在下での低温分
別法、蒸留法、尿素付加法、酵素法などの方法を、単独
であるいは組み合わせて用いることにより、長鎖飽和脂
肪酸の含量を５重量％以下、好ましくは３重量％以下に
することができる。 【００３８】原料である長鎖脂肪酸含有油のグリセリド
の全構成脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸の含量が５重量％を
超える場合でも、酵素法を用いることにより、長鎖飽和
脂肪酸の含量が５重量％以下の脂肪酸（遊離脂肪酸）を
調製することができる。この酵素法は、リパーゼの基質
特異性（脂肪酸特異性）を利用する。リパーゼには、グ
リセリドに結合している長鎖飽和脂肪酸と長鎖不飽和脂
肪酸とを加水分解するに際して、長鎖飽和脂肪酸より
も、長鎖不飽和脂肪酸を遊離し易いリパーゼが存在す
る。このような基質特性を有するリパーゼであれば、起
源を問わないで使用できる。例えば、キャンディダ（Ca
ndida）属、ゲオトリカム（Geotrichum）属、シュード
モナス（Pseudomonas）属、バークホルデリア（Burkhol
deria）属またはアルカリゲネス（Alcaligenes）属に属
する微生物などから得られるリパーゼが用いられる。中
でも、キャンディダ（Candida）属あるいはゲオトリカ
ム（Geotrichum）属に属する微生物から得られるリパー
ゼが好ましく用いられる。これらの酵素を触媒として長
鎖脂肪酸含有油（原料油）を部分加水分解すると、長鎖
不飽和脂肪酸が長鎖飽和脂肪酸よりも容易に遊離されて
くる。その結果、生じた脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸の含
量は、原料油に含まれているグリセリドを構成する脂肪
酸中の長鎖飽和脂肪酸の含量よりも低くなる。 【００３９】このリパーゼの基質特異性を利用する加水
分解反応において、長鎖不飽和脂肪酸が長鎖飽和脂肪酸
よりも容易に遊離される。従って、加水分解率が低いほ
ど、遊離脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸の相対的な量が低下
するが、脂肪酸の回収率は低くなる。加水分解率は、酵
素量、反応時間、反応温度、水分量、攪拌速度などによ
って変化するため適宜決定すればよい。加水分解率は８
５％以下が好ましく、８０％以下がより好ましく、７５
％以下がさらに好ましい。 【００４０】リパーゼは反応混液１ｇ当たり１〜５００
０単位（Ｕ）、好ましくは５〜５００Ｕ添加し、遊離型
酵素であっても固定化酵素であっても良い。なお、リパ
ーゼ１Ｕとはオリーブ油を基質として用いた加水分解反
応で、１分間に１μmolの脂肪酸を遊離する酵素量であ
る。水分量は５〜９０％、反応温度は１０〜７０℃が好
ましい。反応時間は、操作性を考慮し２〜７２時間が好
ましい。この条件下で攪拌しながら反応を行い、加水分
解率が８５％以下、好ましくは８０％以下、より好まし
くは７５％以下になるような反応条件を設定すると、酵
素の脂肪酸特異性が引き出され、原料油のグリセリドを
構成する脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸が５重量％を超えて
いた場合でも、脂肪酸画分中の長鎖飽和脂肪酸含量を５
重量％以下とすることができる。 【００４１】（ステロール脂肪酸エステルの製造に用い
るグリセリド）また、全構成脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸
が５重量％以下であるグリセリドを用いることもでき
る。このようなグリセリドは、例えば、有機溶媒の存在
下、あるいは非存在下での低温分別法を採用し、長鎖飽
和脂肪酸を含有するグリセリドを除くことによって得ら
れる。あるいは、グリセリドを（完全に）加水分解した
後、上記リパーゼの基質特異性（脂肪酸特異性）を利用
して、エステル化あるいはエステル交換反応することに
より、長鎖不飽和脂肪酸を優先的にグリセリドに取りこ
ませることによっても得られる。エステル化率を８５％
以下、好ましくは８０％以下、より好ましくは７５％以
下になるような反応条件を設定すると、酵素の脂肪酸特
異性が引き出され、原料油のグリセリドを構成する脂肪
酸中の長鎖飽和脂肪酸が５重量％以下とすることができ
る。 【００４２】また、長鎖飽和脂肪酸を７．５重量％以下
の量含有するグリセリドも、酵素（リパーゼ）の基質特
異性（脂肪酸特異性）を利用する場合に、使用できる。
このようなグリセリドと、長鎖不飽和脂肪酸を優先的に
エステル化反応あるいはエステル交換反応によりステロ
ールに転移するリパーゼの存在下、エステル化率が８５
％以下となるように反応させると、ステロール長鎖飽和
脂肪酸エステル量が、ステロール長鎖不飽和脂肪酸エス
テルとステロール長鎖飽和脂肪酸エステルの合計量の５
重量％以下であるステロール脂肪酸エステルが生成され
る。例えば、菜種油、アマニ油など、グリセリド中の長
鎖飽和脂肪酸含量が比較的低い油は、そのまま、酵素
（リパーゼ）によるステロールとのエステル交換反応に
原料として用いることができる。 【００４３】（ステロール脂肪酸エステルの製造に用い
るその他の原料）上記長鎖脂肪酸含有油の他に、中鎖脂
肪酸（Ｃ８〜Ｃ１２の飽和脂肪酸またはそのエステル）
あるいは中鎖脂肪酸のグリセリドをステロール脂肪酸エ
ステル製造の原料として用いることもできる。ステロー
ル−中鎖脂肪酸エステルの融点は、ステロール長鎖飽和
脂肪酸エステルの融点より低いからである。したがっ
て、中鎖脂肪酸あるいは中鎖脂肪酸のグリセリドをステ
ロール脂肪酸エステル製造の原料として用いることもで
きる。さらに、長鎖脂肪酸含有油あるいはこの油に由来
する脂肪酸を、中鎖脂肪酸あるいはそのグリセリドで希
釈して、長鎖飽和脂肪酸の含量を５重量％以下にしたも
のも原料として用いられる。 【００４４】（ステロール脂肪酸エステル含有組成物の
製造）本発明のステロール脂肪酸エステル含有組成物
は、上記ステロールと、上記(i)５重量％以下の長鎖飽
和脂肪酸を含有する脂肪酸および／または中鎖脂肪酸、
(ii)全構成脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸が５重量％以下で
あるグリセリドおよび／または中鎖脂肪酸グリセリド、
あるいは、(iii) 全構成脂肪酸中の長鎖飽和脂肪酸が５
重量％を超える長鎖脂肪酸含有油または該油に由来する
脂肪酸などで代表されるグリセリドあるいは脂肪酸とを
反応させることにより得られる。以下、本発明でステロ
ールと反応させる(i)、(ii)の材料を総称して、「長鎖
飽和脂肪酸の含有量が低い脂肪酸類」ということがあ
る。 【００４５】ステロールと長鎖飽和脂肪酸の含有量が低
い脂肪酸類との反応には、一般に化学法と酵素法があ
り、反応させる長鎖飽和脂肪酸の含有量が低い脂肪酸類
の種類によって、適宜選択すればよい。 【００４６】化学法による場合は、エステル化あるいは
エステル交換反応により、ステロール脂肪酸エステルが
合成されると考えられる。化学法によるエステル化ある
いはエステル交換反応としては、当業者が、通常使用す
る方法が適用される。例えば、ステロール量に対し、等
モル〜１０モル等量の長鎖飽和脂肪酸の含有量が低い脂
肪酸類を加え、減圧下で窒素ガスを吹き込みながら、１
５０〜３００℃で攪拌しつつ、０．５〜２４時間加温す
る。また、この反応においてアルカリ触媒（ＫＯＨ、Ｎ
ａＯＨ、Ｎａ−メチラート、Ｎａ−エチラートなどが好
ましい）や金属触媒（ＳｎＯ、ＺｎＯなど）を用いる
と、反応温度を下げることができ、反応時間も短縮でき
る。この反応により、ステロール脂肪酸エステルが得ら
れる。反応に用いた触媒は、中和後あるいはそのまま水
洗、または助剤を加えて、濾過することにより除去され
る。 【００４７】酵素法は、例えば、リパーゼの存在下、ス
テロールと脂肪酸あるいはグリセリドとを反応させる
（特許文献２参照）。用いるリパーゼはその起源を問わ
ない。例えば、キャンディダ（Candida）属、ゲオトリ
カム（Geotrichum）属、シュードモナス（Pseudomona
s）属、バークホルデリア（Burkholderia）属またはア
ルカリゲネス（Alcaligenes）属に属する微生物等に由
来するリパーゼが好ましく用いられる。リパーゼによる
ステロールのエステル化あるいはエステル交換反応は、
例えば、ステロールに、水、リパーゼ、および長鎖飽和
脂肪酸の含有量が低い脂肪酸類を混合し、反応させるこ
とにより行われる。水は、反応に用いるステロール１０
０重量部に対して、水を５〜７０重量部、好ましくは１
０〜５０重量部添加される。長鎖飽和脂肪酸の含有量が
低い脂肪酸類は、ステロールに対して、等モル〜２０モ
ル等量、好ましくは２〜１０モル等量添加される。添加
するリパーゼの量は反応条件（反応温度、水分量、攪拌
速度など）によって変化するため、適宜決定すればよ
い。リパーゼは、反応混液１ｇ当たり５〜５０００単位
（Ｕ）、好ましくは１０〜５００Ｕとなるように添加す
ることが好ましい。必要に応じて、ヘキサン、t-ブタノ
ール、アセトン等の有機溶媒を添加して行ってもよい。
反応は、１０〜７０℃、好ましくは２０〜５０℃で攪拌
しながら行うことが好ましい。反応時間は酵素量、反応
温度、脂肪酸量等によって変化するため特に規定できな
いが、２〜７２時間が好ましい。この反応によりステロ
ール脂肪酸エステルが得られる。 【００４８】化学法では、不飽和脂肪酸と飽和脂肪酸の
比率がそのまま、生成するステロール脂肪酸エステルに
反映される。これに対して、酵素法では、上記の通り、
リパーゼの脂肪酸特異性を反映して、ステロールに、長
鎖不飽和脂肪酸が長鎖飽和脂肪酸よりも転移されやすい
ため、ステロール脂肪酸エステル中のステロール長鎖飽
和脂肪酸エステルの含量が、原料に含まれている長鎖飽
和脂肪酸の含量よりも低くなる。従って、酵素法が好ま
しく用いられる。 【００４９】以下、本発明のステロール脂肪酸エステル
含有組成物の製造方法を、代表的な、第１〜３方法を基
に具体的に説明するが、本発明は、これらの方法に限定
されない。 【００５０】第１方法はステロールと５重量％以下の長
鎖飽和脂肪酸を含有する脂肪酸および／または中鎖脂肪
酸とを反応させる方法である。この方法では、化学法、
酵素法ともに用いられる。脂肪酸が遊離脂肪酸である場
合はエステル化反応が行われ、脂肪酸エステルである場
合は、エステル交換反応が行われる。酵素の基質特異性
（脂肪酸特異性）を考慮すると、酵素法が好ましい。長
鎖不飽和脂肪酸が長鎖飽和脂肪酸よりも利用されやすい
ことから、エステル化において、得られるステロール脂
肪酸エステル中のステロール長鎖飽和脂肪酸エステルの
含有量は、化学法による場合よりも低下する。また、エ
ステル交換反応においても、長鎖不飽和脂肪酸エステル
の方が、長鎖飽和脂肪酸エステルよりもステロールに転
移されやすいことから、ステロール脂肪酸エステル中の
ステロール長鎖飽和脂肪酸エステルの含有量が、化学法
で得られるよりも、低下するからである。 【００５１】第２方法は、ステロールと全構成脂肪酸中
の長鎖飽和脂肪酸が５重量％以下であるグリセリドおよ
び／または中鎖脂肪酸グリセリドとを反応させる方法で
ある。この第２方法においても、化学法および酵素法の
いずれの方法も使用できる。この反応においては、エス
テル交換反応が主に関与していると考えられる。酵素の
基質特異性（脂肪酸特異性）を考慮すると、酵素法によ
るエステル交換反応が好ましい。グリセリドの構成脂肪
酸中の長鎖不飽和脂肪酸が遊離されやすいこと、およ
び、遊離した長鎖不飽和脂肪酸がステロールに転移され
やすいことから、ステロール脂肪酸エステル中のステロ
ール長鎖飽和脂肪酸エステルの含有量が、化学法で得ら
れるよりも、低下するからである。 【００５２】第３方法は、ステロールと、全構成脂肪酸
中の長鎖飽和脂肪酸が５重量％を超える長鎖脂肪酸含有
油あるいはこの長鎖脂肪酸含有油に由来する脂肪酸と
を、長鎖不飽和脂肪酸を優先的にエステル化反応あるい
はエステル交換反応によりステロールに転移するリパー
ゼの存在下、反応させる方法である。リパーゼとして
は、キャンディダ（Candida）属、ゲオトリカム（Geotr
ichum）属、シュードモナス（Pseudomonas）属、バーク
ホルデリア（Burkholderia）属またはアルカリゲネス
（Alcaligenes）属に属する微生物に由来するリパーゼ
が好ましく使用される。最も好ましくは、キャンディダ
（Candida）属、およびシュードモナス（Pseudomonas）
属の微生物に由来するリパーゼである。エステル交換率
は、８５％以下、好ましくは８０％以下、さらに好まし
くは７５％以下となるような反応条件を設定すること
が、長鎖飽和脂肪酸を５重量％以下とするのに好まし
い。この方法により、原料のグリセリドを構成する脂肪
酸中の長鎖飽和脂肪酸が、６〜７．５重量％程度である
場合でも、ステロール長鎖飽和脂肪酸エステルの含量が
５重量％以下のステロール脂肪酸エステルが得られる。 【００５３】（ステロール脂肪酸エステル含有組成物の
精製）上記方法により製造されたステロール脂肪酸エス
テル含有組成物は、そのまま食用油等に配合することも
できる。しかし、一般的には、さらに精製される。粗ス
テロール、特に植物油脱臭留出物に由来する粗ステロー
ル画分（１）〜（３）を用いて得られるステロール脂肪
酸エステルは、さらに精製されることが好ましい。精製
法に特に制限はなく、例えば、蒸留、溶媒分別、膜分
離、各種のクロマトグラフィー、吸着、低温分別法など
によって精製される。 【００５４】粗ステロール画分（１）および粗ステロー
ル画分（２）は、上記の通り、分子量約５００以下の化
合物で構成されている。この粗ステロール画分（１）ま
たは（２）と、長鎖飽和脂肪酸含量の低い油脂類とを反
応させた場合、反応液中に含まれる分子量５００以上の
化合物は、合成産物であるステロール脂肪酸エステルだ
けである。この点に着目すると、反応液からステロール
脂肪酸エステルを精製するには、分子量（沸点）の差を
利用した分子蒸留法が好ましい。例えば、１．３３〜２
６．６６Ｐａ（０．０１〜０．２ｍｍＨｇ）、１８０〜
２８０℃の条件で蒸留すると、ステロール脂肪酸エステ
ル以外の全化合物を蒸留留分として除去することができ
る。残渣画分に回収されたステロール脂肪酸エステル
は、０．１３〜０．６７Ｐａ（０．００１〜０．００５
ｍｍＨｇ）、２３０〜２８０℃の条件で蒸留すると、留
分に効率よく回収することができる。 【００５５】さらに、ステロール脂肪酸エステル中のス
テロール長鎖飽和脂肪酸エステル含量が高い場合、低温
分別法により、ステロール長鎖飽和脂肪酸エステル含量
を低減することができる。低温分別法は、ステロール脂
肪酸エステルを適切な温度に直接加熱する（すなわち、
無溶媒系で加熱する）か、ステロール脂肪酸エステルを
適切な溶媒、例えば、ヘキサン、アセトン、あるいはメ
タノール、エタノールなどの低級アルコール類に溶解
し、適切な温度に加熱してステロール脂肪酸エステルを
完全に溶解させた後、低温（１０℃以下、好ましくは５
℃以下）になるまで徐冷し、その低温で適切な時間静置
する。静置後、沈殿物であるステロール脂肪酸エステル
を濾過、膜分離などの方法で分離すると、ステロール脂
肪酸エステル中のステロール長鎖飽和脂肪酸エステル含
量が低下する。 【００５６】低温分別法に用いる上記溶媒は、単独で用
いてもよいし、混合溶媒として用いてもよい。例えば、
ヘキサン：エタノール（１：２容量比）などが好ましく
用いられる。 【００５７】この低温分別法は、精製ステロールあるい
は植物油脱臭留出物に由来する粗ステロール画分から上
記方法で合成したステロール脂肪酸エステルに対して適
用されるだけでなく、植物油脱臭留出物から粗ステロー
ル画分（１）を留去した蒸留残渣に含まれるステロール
脂肪酸エステル含有画分に対しても行うことができる。 【００５８】この蒸留残渣であるステロール脂肪酸エス
テル画分には、ステロール脂肪酸エステルと中性脂質と
が主成分として含まれるため、低温分別法を適用する場
合、まず、中性脂質を除くことが好ましい。中性脂質の
除去は、酵素法により、中性脂質をグリセロールと脂肪
酸にほぼ完全に分解することにより行われる。得られた
分解液をさらに蒸留することにより、ステロール脂肪酸
エステルを回収する。このステロール脂肪酸エステル画
分に上記低温分別法を適用することができ、ステロール
脂肪酸エステル中のステロール長鎖飽和脂肪酸エステル
含量をさらに低下させることができる。 【００５９】上記の方法で得られたステロール脂肪酸エ
ステル含有組成物は、食用油または食用加工油に、ステ
ロールに換算して２．０重量％以上となるように溶解
し、かつ、５℃で２４時間放置したときに、該食用油ま
たは食用加工油の澄明な状態が維持され得る。 【００６０】 【実施例】以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、
この実施例が本発明を限定しないことはいうまでもな
い。 【００６１】なお、実施例において、出発原料、反応生
成物などの定量、定性分析は以下の方法によった。ステ
ロール、ステロール脂肪酸エステル、脂肪酸、ジグリセ
リド、およびトリグリセリドはガスクロマトグラフィ
ー、あるいはＴＬＣ／ＦＩＤアナライザーにより分析し
た。ガスクロマトグラフィーは、ＤＢ−１ｈｔキャピラ
リーカラム（J&W Scientific社；０．２５ｍｍ×５ｍ）
を用い、１２０〜２８０℃は１５℃／分で、２８０〜３
７０℃は１０℃／分でそれぞれ昇温し、３７０℃で１分
間維持した。注入口および検出器（ＦＩＤ）の温度は３
８０℃であった。 【００６２】調製例１： ステロールのリノール酸エス
テル（ＳｔＬｎＡ）の合成 ステロール（Ｓ−タイプ；純度９７．８％；タマ生化学
製）とリノール酸（純度９５．１％；株式会社八代製）
をモル比で１：６になるように混合した。この混液１６
８ｇに水４２ｍＬを加え、得られた反応混液１ｇ当たり
２００ＵのCandida rugosa由来のリパーゼ（リパーゼＯ
Ｆ；名糖産業製）を３００ｍＬ容量のナス型フラスコに
入れ、３０℃、５００ｒｐｍで３０時間攪拌しながらエ
ステル化反応を行った（エステル化率：８４．３％）。
反応後、ステロールおよびステロール脂肪酸エステルを
アルカリ条件下でヘキサン抽出した。得られたヘキサン
抽出物をヘキサン／酢酸エチル（９８：２ 容量比）の
混合溶媒を用いたシリカゲルクロマトグラフィーに供
し、ステロールのリノール酸エステルを精製した（３
４．０ｇ）。 【００６３】調製例２：ステロールのパルミチン酸エス
テル（ＳｔＰＡ）の合成 ステロールとパルミチン酸（純度９９％；東京化成製）
をモル比で２：３になるように混合した。この混合物３
７ｇとＮａＯＨ７５ｍｇを１００ｍＬ容量のナス型フラ
スコに入れ、２３５℃、１２．０ＫＰａ、５００ｒｐｍ
で５時間、さらに１．３ＫＰａで３時間攪拌しながらエ
ステル化反応を行った。反応後、４０ｍＬの水（９０
℃）で３回水洗した。回収した油分をヘキサンに溶か
し、ヘキサン／酢酸エチル（９８：２ 容量比）の混合
溶媒を用いたシリカゲルクロマトグラフィーを行ってス
テロールのパルミチン酸エステルを精製した（２３．９
ｇ）。 【００６４】調製例３：菜種油の全構成脂肪酸の調製 菜種油２ｋｇと水２ｋｇを５Ｌ容量の４つ口フラスコに
入れ、さらにキャンディダ・ルゴーサ（Candida rugos
a）由来のリパーゼ（リパーゼＯＦ；名糖産業製）を反
応液に対して７０Ｕ／ｇになるように加えた後、３０
℃、２００ｒｐｍで攪拌しながら、２４時間加水分解し
た（加水分解率；９６．５％）。反応後、８０℃まで加
温して油層と水層に分離し、油層を回収した。得られた
油層（１７９０ｇ）は遠心式分子蒸留機（ＭＳ−１５
０：日本車輌製）を用いて１７５℃、２６．６Ｐａで蒸
留し、５３ｇの留分１と１７２５ｇの残渣１に分画し
た。さらに残渣１を２３０℃、２６．６Ｐａで蒸留し、
菜種脂肪酸を留分２として回収した（１５４９ｇ；酸価
２０１ｍｇＫＯＨ／ｇ）。蒸留残渣２は１７０ｇであっ
た。蒸留精製した菜種脂肪酸中には５．８％の飽和脂肪
酸（パルミチン酸４．０％；ステアリン酸１．８％）と
９４．２％の不飽和脂肪酸が含まれていた（長鎖飽和脂
肪酸／（長鎖飽和脂肪酸＋長鎖不飽和脂肪酸）×１００
＝５．８）。 【００６５】調製例４：菜種油から飽和脂肪酸含量の低
い脂肪酸の調製 菜種油４ｋｇと水１．２ｋｇを攪拌翼付きリアクター
（ＭＤＬ−１００１；丸菱バイオエンジ製）に入れ、さ
らにリパーゼＯＦを反応液に対して２０Ｕ／ｇになるよ
うに加えた後、３０℃、２００ｒｐｍで攪拌しながら１
２時間加水分解した（加水分解率７３．７％）。反応
後、８０℃まで加温して油層と水層に分離し、油層を回
収した。得られた油層（３６７９ｇ）は、１８５℃、２
６．６Ｐａで蒸留し、６６２ｇの留分１と２９７８ｇの
残渣１に分画した。さらに残渣１を２３０℃、２６．６
Ｐａで蒸留し、菜種油由来の飽和脂肪酸含量の低い脂肪
酸を留分２として回収した（１９３７ｇ；酸価２００ｍ
ｇＫＯＨ／ｇ）。蒸留残渣２は１０１２ｇであった。蒸
留精製した菜種脂肪酸中には３．５％の飽和脂肪酸（パ
ルミチン酸２．５％；ステアリン酸１．０％）と９６．
５％の不飽和脂肪酸が含まれていた（長鎖飽和脂肪酸／
（長鎖飽和脂肪酸＋長鎖不飽和脂肪酸）×１００＝３．
５）。 【００６６】この結果は、キャンディダ・ルゴーサ（Ca
ndida rugosa）由来のリパーゼの飽和脂肪酸に対する活
性はＣ１８不飽和脂肪酸（オレイン酸、リノール酸、α
−リノレン酸）に対する活性より低く、特にステアリン
酸を認識しにくいことを示している。この性質を利用し
て加水分解率７５％以下に抑えると、ステアリン酸含量
は１．７〜１．０％まで減少させることができた。ま
た、蒸留法と組合せることにより、パルミチン酸の含量
を４．０〜２．５％まで減少させることができた。 【００６７】実施例１： ステロール脂肪酸エステルの
サラダ油への溶解性におよぼすステロール長鎖飽和脂肪
酸エステルの影響 調製例１で合成したステロールのリノール酸エステル
（ＳｔＬｎＡ）に、調製例２で合成したステロールのパ
ルミチン酸エステル（ＳｔＰＡ）を、０〜５重量％にな
るように加え、ＳｔＬｎＡ／ＳｔＰＡ混合物（ステロー
ル脂肪酸エステル含有組成物）を調製した。この組成物
を菜種油に対して１５重量％になるように添加し、ステ
ロール長鎖飽和脂肪酸エステル（ＳｔＰＡ）の含量が
０．１〜０．７５％となるように調製した。これを、５
℃の冷蔵庫に放置し、経時的に２週間、観察した。この
放置期間中に形成される白濁等を目視により観察し、そ
の結果を表１に示す。 【００６８】 【表１】【００６９】表１の結果からあきらかなように、菜種油
中にステロール長鎖飽和脂肪酸エステル（ＳｔＰＡ）が
０．４５重量％より少ない量含まれている場合、このス
テロール脂肪酸エステル含有組成物は完全に溶解し、１
日目で白濁等が生じることはなかった。ステロール長鎖
飽和脂肪酸エステル（ＳｔＰＡ）が０．４５重量％では
４日目に白濁等が観察され（表１（５））、０．３７５
重量％では１０日目に白濁等が観察された（表１
（４））が、０．３重量％以下では、１４日目でも白濁
等は認められなかった（表１（１）〜（３））。他方、
ステロール長鎖飽和脂肪酸エステル（ＳｔＰＡ）として
０．６重量％以上添加すると、ステロール脂肪酸エステ
ル含有組成物は溶解するものの、２４時間目までに白濁
等が生じた（表１（６）〜（７））。この結果より、ス
テロール脂肪酸エステル含有組成物を菜種油に添加した
ときに観察される白濁等は、ステロール長鎖飽和脂肪酸
エステルに起因し、その含量が菜種油に対して０．５重
量％以下であれば白濁等は発生しないことが分かった。 【００７０】比較例１：大豆油脱臭留出物由来の粗ステ
ロール（粗ステロール画分（１））のエステル化による
ステロール脂肪酸エステルの合成 大豆油脱臭留出物からトコフェロールを含む粗ステロー
ル（粗ステロール画分（１））を、以下のように調製し
た。薄膜式分子蒸留機（Wiprene２−０３型；神鋼パン
テック製）を用い、大豆油脱臭留出物１ｋｇを２５０
℃、１３．３Ｐａで蒸留し、７１８ｇの留分１と、２８
１ｇの残渣１に分画した。留分１には、遊離脂肪酸５
３．０重量％、ステロール１４．３重量％、トコフェロ
ール１１．５重量％が含まれていた。 【００７１】この留分１に、水１８０ｍＬ、および反応
液１ｇ当たり１００ＵのリパーゼＯＦを２Ｌ容量の４つ
口フラスコに入れ、窒素気流下、３５℃、２００ｒｐｍ
で攪拌しながら４８時間エステル化反応を行った。反応
終了後、５００ｍＬの水を加えて９０℃まで加温し、油
分を回収した。回収した油分を２５０℃、２．７Ｐａで
分子蒸留し、トコフェロール、炭化水素、および未反応
のステロールを留分として除去した。残渣中に含まれて
いるステロール脂肪酸エステルは、２８５℃、０．４Ｐ
ａで蒸留し、留分として精製した（収量１２５ｇ）。得
られたステロール脂肪酸エステルの純度は９３．２％
で、ステロール脂肪酸エステルを構成している脂肪酸の
内、長鎖飽和脂肪酸の含量は１１．９重量％（パルミチ
ン酸１０．４重量％；ステアリン酸１．５重量％）であ
った。 【００７２】比較例２：大豆油脱臭留出物由来の粗ステ
ロール（粗ステロール画分（２））と菜種油由来の脂肪
酸を原料としたステロール脂肪酸エステルの合成（酵素
法） 大豆油脱臭留出物からトコフェロールを含む粗ステロー
ル（粗ステロール画分（２））を以下のようにして調製
した。薄膜式分子蒸留機（Wiprene２−０３型；神鋼パ
ンテック製）を用い、大豆油脱臭留出物１ｋｇを２５０
℃、１３．３Ｐａで蒸留し、７１５ｇの留分１と、２７
８ｇの残渣１に分画した。留分１に含まれている遊離脂
肪酸を除去するために、留分１を、さらに２００℃、１
３．３Ｐａで蒸留し、４２５ｇの留分２と、２８０ｇの
残渣２（遊離脂肪酸含量３．５重量％）に分画した。残
渣２は３６．９重量％のステロール、２８．６重量％の
トコフェロール、３．１重量％の部分グリセリド、およ
び２９．８重量％の未同定炭化水素類を含んでいた。 【００７３】残渣２の粗ステロール２７７ｇ、調製例３
で調製した菜種油由来の長鎖飽和脂肪酸５．８重量％の
菜種油脂肪酸２７０ｇ（ステロール量に対して４モル等
量）、水１３７ｍＬ、および反応液１ｇ当たり６００Ｕ
のリパーゼＯＦを２Ｌ容量の４つ口フラスコに入れ、窒
素気流下、３５℃、２００ｒｐｍで攪拌しながら４８時
間エステル化反応を行った（ステロールのエステル化率
８７．８％）。反応後、５００ｍＬの水を加えて９０℃
まで加温し、油分を回収した。回収した油分を２５０
℃、２．７Ｐａで分子蒸留し、トコフェロール、炭化水
素、および未反応の脂肪酸とステロールとを留分として
除去した。残渣中に含まれているステロール脂肪酸エス
テルは、２８５℃、０．４Ｐａで蒸留し、留分として精
製した（収量１１３ｇ）。得られたステロール脂肪酸エ
ステルの純度は９２．９％で、ステロール脂肪酸エステ
ルを構成している脂肪酸の内、飽和脂肪酸の含量は６．
２重量％（パルミチン酸５．１重量％；ステアリン酸
１．１重量％）であった。 【００７４】実施例２：精製ステロールと菜種油由来の
全脂肪酸を原料として合成したステロール脂肪酸エステ
ル含有組成物（化学合成） 精製ステロール（Ｓ−タイプ；タマ生化学製）と調製例
３で調製した菜種油由来の全脂肪酸をモル比で２：３に
混合した。この混液４００ｇとＮａＯＨ０．８ｇを２Ｌ
容量の４つ口フラスコに入れ、窒素気流下、２３５℃、
１２．０ＫＰａ、２００ｒｐｍで攪拌しながら５時間反
応させた。さらに１．３ＫＰａまで減圧度を高め、３時
間攪拌しながらエステル化反応を行った（ステロールの
エステル化率９９．５％）。反応後、５００ｍＬの水
（９０℃）で３回水洗し、回収した油分を２５０℃、
８．０Ｐａで分子蒸留を行い、未反応の脂肪酸とステロ
ールを留分として除去した。残渣中に含まれているステ
ロール脂肪酸エステルは、２８５℃，０．４Ｐａで蒸留
し、留分として精製した（収量２９８ｇ）。得られたス
テロール脂肪酸エステルの純度は９４．５重量％で、ス
テロール脂肪酸エステルを構成している脂肪酸の内、飽
和脂肪酸の含量は５．６重量％（パルミチン酸３．９重
量％；ステアリン酸，１．７重量％）であった。 【００７５】実施例３：精製ステロールと菜種油由来で
飽和脂肪酸含量の低い脂肪酸を原料として合成したステ
ロール脂肪酸エステル含有組成物（化学合成） 精製ステロール（Ｓ−タイプ；タマ生化学製）と調製例
４で調製した菜種油由来の飽和脂肪酸含量の低い脂肪酸
を原料として用いた。ステロールと脂肪酸をモル比で
２：３に混合した混液４００ｇとＮａＯＨ０．８ｇを２
Ｌ容量の４つ口フラスコに入れ、実施例２と同じ条件下
でエステル化反応を行い（ステロールのエステル化率９
９．６％）、３回水洗後、分子蒸留によりステロール脂
肪酸エステル含有組成物を精製した（収量２９４ｇ）。
得られたステロール脂肪酸エステルの純度は９４．９重
量％で、ステロール脂肪酸エステルを構成している脂肪
酸の内、飽和脂肪酸の含量は３．５重量％（パルミチン
酸２．４重量％、ステアリン酸１．１重量％）であっ
た。 【００７６】実施例２および３に示したように、化学法
を採用したとき、非常に効率よくエステル化反応が進行
する。また、合成されたステロール脂肪酸エステル中の
構成脂肪酸の組成は、原料として用いた脂肪酸の組成と
全く同じであった。 【００７７】実施例４： 精製ステロールと菜種油由来
の全脂肪酸を原料として合成したステロール脂肪酸エス
テル（酵素法） 精製ステロール（Ｓ−タイプ；タマ生化学製）と調製例
３で調製した菜種油由来の全脂肪酸をモル比で１：６に
混合する。４つ口フラスコ（３Ｌ容量）にこの混液１ｋ
ｇと水２５０ｍＬを混合し、リパーゼＯＦを反応混液１
ｇ当たり１００Ｕになるように入れ、窒素気流下、３５
℃、２００ｒｐｍで攪拌しながら４８時間エステル化反
応を行った（ステロールのエステル化率７９．８％）。
反応後、５００ｍＬの水を加えて９０℃まで加温し、油
分を回収した。回収した油分を２５０℃、２．７Ｐａで
分子蒸留し、未反応の脂肪酸とステロールを留分として
除去した。残渣中に含まれているステロール脂肪酸エス
テルは、２８５℃，０．４Ｐａで蒸留し、留分として精
製した（収量２２３ｇ）。得られたステロール脂肪酸エ
ステル含有組成物中のステロール脂肪酸エステルの純度
は９４．１重量％で、ステロール脂肪酸エステルを構成
している脂肪酸の内、飽和脂肪酸の含量は３．７重量％
（パルミチン酸２．８重量％；ステアリン酸０．９重量
％）であった。 【００７８】調製例４で示したように、リパーゼＯＦ
（C. rugosa由来）は、菜種油を構成している脂肪酸の
内、飽和脂肪酸、特にステアリン酸を認識しにくい特徴
を有している。この特徴は、脂肪酸とステロールとのエ
ステル化反応においても観察された。ステロール脂肪酸
エステルの合成率を８０％程度に抑えることにより、原
料脂肪酸中に存在した４．０重量％のパルミチン酸はス
テロール脂肪酸エステル中では２．８重量％まで減少
し、また１．８重量％存在したステアリン酸はステロー
ル脂肪酸エステル中では０．９重量％まで減少した。 【００７９】実施例５：精製ステロールと菜種油由来で
飽和脂肪酸含量の低い脂肪酸を原料として合成したステ
ロール脂肪酸エステル含有組成物（酵素法） 精製ステロール（Ｓ−タイプ；タマ生化学製）と、調製
例４で調製した菜種油由来の飽和脂肪酸含量の低い脂肪
酸を原料として用いた。ステロールと脂肪酸をモル比で
１：６に混合した混液１ｋｇに水２５０ｍＬを加えて反
応混液とし、反応混液１ｇ当たり１００ＵのリパーゼＯ
Ｆを２Ｌ容量の４つ口フラスコに入れ、実施例４と同じ
条件でエステル化反応を行い（ステロールのエステル化
率８２．３％）、反応液から得られた油分から分子蒸留
によりステロール脂肪酸エステルを精製した（収量２３
４ｇ）。得られたステロール脂肪酸エステル含有組成物
中のステロール脂肪酸エステルの純度は９３．９重量％
で、ステロール脂肪酸エステルを構成している脂肪酸の
内、飽和脂肪酸の含量は２．４重量％（パルミチン酸
１．８重量％；ステアリン酸０．６重量％）であった。 【００８０】実施例４と同様に、リパーゼＯＦの脂肪酸
特異性を利用して、ステロールのエステル化率を約８０
％に制御すると、原料脂肪酸中に含まれていた２．５重
量％のパルミチン酸が、ステロール脂肪酸エステル中で
は１．８重量％まで減少し、１．０重量％含まれていた
ステアリン酸は０．６重量％まで減少した。以上の結果
は、（１）リパーゼを触媒とした菜種油の加水分解を利
用して遊離脂肪酸中の飽和脂肪酸含量を下げ、（２）沸
点の差を利用した蒸留法によりパルミチン酸含量を下
げ、さらに（３）ステロールと遊離脂肪酸とのエステル
化反応にリパーゼを利用することにより、ステロール脂
肪酸エステル中のステロール長鎖飽和脂肪酸エステルの
含量を効率よく低下させることができることを示してい
る。 【００８１】実施例６：大豆油脱臭留出物由来の粗ステ
ロール（粗ステロール画分（２））と菜種油由来で飽和
脂肪酸含量の低い脂肪酸を原料としたステロール脂肪酸
エステルの合成（酵素法） 大豆油脱臭留出物からトコフェロールを含む粗ステロー
ル（粗ステロール画分（２））は以下のようにして調製
した。薄膜式分子蒸留機（Wiprene２−０３型；神鋼パ
ンテック製）を用い、大豆油脱臭留出物１ｋｇを２５０
℃、１３．３Ｐａで蒸留し、７１４ｇの留分１と、２８
０ｇの残渣１に分画した。留分１に含まれている遊離脂
肪酸を除去するために、留分１を、さらに２００℃、１
３．３Ｐａで蒸留し、４２７ｇの留分２と、２８１ｇの
残渣２（遊離脂肪酸含量２．２重量％）に分画した。残
渣２は３７．５重量％のステロール、２８．１重量％の
トコフェロール、１．３重量％の部分グリセリド、およ
び３０．９重量％の未同定炭化水素類を含んでいた。 【００８２】残渣２の粗ステロール２７７ｇ、調製例４
で調製した菜種油由来の飽和脂肪酸含量の低い脂肪酸２
７０ｇ（ステロール量に対して４モル等量）、水１３７
ｍＬ、および反応液１ｇ当たり１００ＵのリパーゼＯＦ
を２Ｌ容量の４つ口フラスコに入れ、窒素気流下、３５
℃、２００ｒｐｍで攪拌しながら４８時間エステル化反
応を行った（ステロールのエステル化率８２．９％）。
反応後、５００ｍＬの水を加えて９０℃まで加温し、油
分を回収した。回収した油分を２５０℃、２．７Ｐａで
分子蒸留し、トコフェロール、炭化水素、および未反応
の脂肪酸とステロールとを留分として除去した。残渣中
に含まれているステロール脂肪酸エステルは、２８５
℃、０．４Ｐａで蒸留し、留分として精製した（収量１
１４ ｇ）。得られたステロール脂肪酸エステルの純度
は９３．８％で、ステロール脂肪酸エステルを構成して
いる脂肪酸の内、飽和脂肪酸の含量は２．７重量％（パ
ルミチン酸２．１重量％；ステアリン酸０．６重量％）
であった。 【００８３】実施例７：大豆油脱臭留出物由来の粗ステ
ロール（粗ステロール画分（３））と菜種油由来の飽和
脂肪酸含量の低い脂肪酸を原料としたステロール脂肪酸
エステル含有組成物の合成（酵素法） 大豆油脱臭留出物からの粗ステロール画分（３）は、以
下のようにして調製した。実施例６に記載した方法に従
って、大豆油脱臭留出物１ｋｇを２５０℃、１３．３Ｐ
ａで蒸留し、７２３ｇの留分１と２７１ｇの残渣１に分
画した。留分１に含まれている遊離脂肪酸を除去するた
めに、これを２００℃、１３．３Ｐａで蒸留し、４４２
ｇの留分２と２７１ｇの残渣２（遊離脂肪酸含量１．９
％）に分画した。この残渣２（２６５ｇ）に１３００ｍ
Ｌのエタノールを加え、攪拌しながら−５℃まで冷却
し、生成した沈殿物を濾過により回収した（収量２７９
ｇ；乾燥重量１８４ｇ）。得られた沈殿物中のステロー
ル含量は４９．５重量％（乾燥重量換算）であり、トコ
フェロール、未同定炭化水素類、および部分グリセリド
が混在していた。 【００８４】回収した粗ステロール２７９ｇ、調製例４
で調製した菜種油由来で飽和脂肪酸含量の低い脂肪酸２
４７ｇ（ステロール量に対して４モル等量）を２Ｌ容量
の４つ口フラスコに入れ、１００℃、１．３ＫＰａで１
時間攪拌しながらエタノールを除去した。次いで、水１
０５ｍＬ（反応液に対して２０％）、および反応液１ｇ
当たり１００ＵのリパーゼＯＦを加え、窒素気流下、３
５℃、２００ｒｐｍで攪拌しながら、４８時間、エステ
ル化反応を行った（ステロールのエステル化率，８０．
２％）。反応後、５００ｍＬの水を加えて９０℃まで加
温し、油分を回収した。回収した油分を２５０℃、２．
７Ｐａで分子蒸留し、未反応の脂肪酸とステロール、お
よびトコフェロール、炭化水素の混在物質を留分として
除去した。残渣中に含まれているステロール脂肪酸エス
テルは、２８５℃、０．４Ｐａで蒸留して留分として精
製した（収量１０１ｇ）。得られたステロール脂肪酸エ
ステル含有組成物中のステロール脂肪酸エステルの純度
は９３．５％で、ステロール脂肪酸エステルを構成して
いる脂肪酸の内、飽和脂肪酸の含量は２．５重量％（パ
ルミチン酸１．８重量％；ステアリン酸０．７重量％）
であった。 【００８５】実施例６と７より、ステロールと脂肪酸の
エステル化反応に、リパーゼＯＦを触媒として用いる
と、反応系中に分子量が５００以下の植物油脱臭留出物
由来の化合物が含まれていても、エステル化反応は全く
妨害されず、ステロール長鎖飽和脂肪酸エステル含量の
低いステロール脂肪酸エステルを効率よく製造できるこ
とが分かった。 【００８６】実施例８：低温分別法によるステロール脂
肪酸エステルの精製 実施例６および７で得られた、ステロール画分を留去し
たそれぞれの残渣を併せて、出発原料として用いた（実
施例６の残渣１：２８０ｇ；実施例７の残渣１：２６５
ｇ）。この出発原料中には、３８．５重量％のステロー
ル脂肪酸エステル、４７．３重量％の中性脂質、４．５
重量％のステロール、０．９重量％のトコフェロール、
０．４重量％の遊離脂肪酸、および８．４重量％の未同
定炭化水素類が含まれていた。出発原料５３０ｇ、水１
３３ｍＬ、および反応液１ｇ当たり１００Ｕのリパーゼ
ＯＦを４つ口フラスコに入れ、３５℃、２００ｒｐｍで
２４時間、攪拌しながらインキュベートした。この反応
中に中性脂質はほぼ完全に加水分解された。反応液から
回収した油分を２５０℃、１．３Ｐａで分子蒸留し、２
６８ｇの留分と２２６ｇの残渣に分画した。得られた残
渣からステロール脂肪酸エステルを精製するために、２
８５℃、０．５Ｐａで蒸留し、ステロール脂肪酸エステ
ルを留分中に回収した（収量１７０ｇ；純度９３．１
％）。得られたステロール脂肪酸エステル中の構成脂肪
酸は１６．９重量％のパルミチン酸、４．２重量％のス
テアリン酸、および７８．９重量％の不飽和脂肪酸であ
った。このステロール脂肪酸エステルからステロール長
鎖飽和脂肪酸エステルを除去するために、６８０ｍＬの
ヘキサン／エタノール（１：２ 容量比）を加えて５０
℃まで加温してステロール脂肪酸エステルを完全に溶解
させた。溶解後、０℃まで徐冷し一夜放置した。生成し
た沈殿物を濾過により除去した後、脱溶媒して８１ｇの
ステロール脂肪酸エステルを回収した。得られたステロ
ール脂肪酸エステル含有組成物中のステロール脂肪酸エ
ステルの純度は９５．３％で、構成脂肪酸はパルミチン
酸３．１重量％、ステアリン酸０．８重量％および不飽
和脂肪酸９６．１重量％であった。これより、飽和脂肪
酸のステロール脂肪酸エステルを除去する方法として溶
媒−低温分別法が効果的であることが分かった。 【００８７】実施例９：実施例２〜８で製造したステロ
ール脂肪酸エステル含有組成物の菜種油に対する溶解性 実施例２〜８で製造したステロール脂肪酸エステル含有
組成物を１０重量％あるいは１５重量％になるように菜
種油に加え、これを、５℃の冷蔵庫に放置し、経時的に
２週間、観察した。この放置期間中に形成される白濁等
を目視により観察した。その結果を、各菜種油中のステ
ロール長鎖飽和脂肪酸エステルの含有量とともに、表２
および表３に示す。表２はステロール脂肪酸エステル含
有組成物を１０重量％添加したときの結果であり、表３
はステロール脂肪酸エステル含有組成物を１５重量％添
加したときの結果である。ステロール脂肪酸エステル含
有組成物を１０重量％添加した場合、いずれの菜種油に
も、ステロール脂肪酸エステルは９重量％以上（ステロ
ール換算で５．５重量％以上）含まれている。 【００８８】 【表２】 【００８９】 【表３】 【００９０】本発明のステロール脂肪酸エステル含有組
成物は、ステロール脂肪酸エステルとして９重量％以上
含有されても完全に溶解した。白濁等の形成は、菜種油
中に存在するステロール長鎖飽和脂肪酸エステル含量と
相関し、その含量を０．３重量％以下に抑えると、少な
くとも５℃で２週間放置しても、白濁等は形成されない
ことが分かった。 【００９１】以上の結果より、ステロール脂肪酸エステ
ル含有組成物を菜種油に溶解させ、低温で放置したとき
に発生してくる白濁等は、ステロール脂肪酸エステル含
有組成物中に含まれている飽和脂肪酸のステロール脂肪
酸エステルの含量に大きく影響されると結論した。 【００９２】 【発明の効果】本発明のステロール脂肪酸エステル含有
組成物は、ステロール脂肪酸エステル中のステロール長
鎖飽和脂肪酸エステル含量を低くすることによって、ス
テロールに換算して２重量％となるように食用油に溶解
し、かつ、５℃で２４時間放置しても白濁、あるいは沈
殿を生じることはないため、ステロールよりも食用油脂
に大量に添加され得、血中コレステロール値の低減効果
がさらに発揮される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 廣田 益教 三重県阿山郡伊賀町柘植町9469 株式会 社八代 伊賀工場内 (56)参考文献 特開2002−201484（ＪＰ，Ａ) 特開 平10−310555（ＪＰ，Ａ) 特開2000−300191（ＪＰ，Ａ) ”化学工業”，1987年，第38巻，第５ 号，ｐ．410−417 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C11B 5/00 C11C 3/04 A23D 9/00 506 ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)

Claims (1)

1. (57)【特許請求の範囲】 【請求項１】 ステロール脂肪酸エステルをステロール
   に換算して２．０重量％以上含有する大豆油、菜種油、
   パーム分別油、サフラワー油、オリーブ油、綿実油、ゴ
   マ油、およびアマニ油からなる群から選択される食用油
   を、５℃で２４時間放置した場合においても澄明な状態
   に維持する方法であって、該食用油中のステロール長鎖
   飽和脂肪酸エステルの量を０．５重量％以下とすること
   を特徴とする、方法。