JP3437647B2 - 被検体を検出する装置および方法 - Google Patents
被検体を検出する装置および方法Info
- Publication number
- JP3437647B2 JP3437647B2 JP18359494A JP18359494A JP3437647B2 JP 3437647 B2 JP3437647 B2 JP 3437647B2 JP 18359494 A JP18359494 A JP 18359494A JP 18359494 A JP18359494 A JP 18359494A JP 3437647 B2 JP3437647 B2 JP 3437647B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- analyte
- separation matrix
- matrix
- detecting
- detection means
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/525—Multi-layer analytical elements
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
- Y10T436/143333—Saccharide [e.g., DNA, etc.]
- Y10T436/144444—Glucose
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/25—Chemistry: analytical and immunological testing including sample preparation
- Y10T436/25375—Liberation or purification of sample or separation of material from a sample [e.g., filtering, centrifuging, etc.]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、生物学的流体中の被検
体を検出する装置および方法に関する。装置は、被検体
を試料流体から分離する分離マトリックスを含み、この
場合、分離マトリックスはＨＥＰＥＳ緩衝剤を含有す
る。方法は、分離マトリックスを有する装置に試料流体
を塗布したのち、分離マトリックスに隣接する検出層に
おける検出手段によって試料中の被検体を検出すること
を含む。
体を検出する装置および方法に関する。装置は、被検体
を試料流体から分離する分離マトリックスを含み、この
場合、分離マトリックスはＨＥＰＥＳ緩衝剤を含有す
る。方法は、分離マトリックスを有する装置に試料流体
を塗布したのち、分離マトリックスに隣接する検出層に
おける検出手段によって試料中の被検体を検出すること
を含む。
【０００２】
【従来の技術】終点検出技術において、非常に少量の生
物学的流体試料の中の被検体（例えばグルコース、トリ
グリセリド、コレステロールなど）の濃度の速やかかつ
正確な測定を可能にする装置および方法が求められてい
る。被検者から血液試料を採取することの困難や不都合
のため、少量の試料を使用する装置の必要性は、血中グ
ルコースの検出に特に関連する。
物学的流体試料の中の被検体（例えばグルコース、トリ
グリセリド、コレステロールなど）の濃度の速やかかつ
正確な測定を可能にする装置および方法が求められてい
る。被検者から血液試料を採取することの困難や不都合
のため、少量の試料を使用する装置の必要性は、血中グ
ルコースの検出に特に関連する。
【０００３】現在利用しうるそのような装置には、ACCU
CHEK EASY TEST STRIPS （商標）およびACCUTREND （登
録商標）がある（いずれもBoehringer Mannheim 社）。
これらの装置は、分離層またはろ過層に緩衝剤を含まな
いことを特徴とする多層試薬系である。
CHEK EASY TEST STRIPS （商標）およびACCUTREND （登
録商標）がある（いずれもBoehringer Mannheim 社）。
これらの装置は、分離層またはろ過層に緩衝剤を含まな
いことを特徴とする多層試薬系である。
【０００４】緩衝剤は一般に、検出層の中に存在する試
薬組成物のpHを調節する目的で、その検出層の中に存在
する組成物に加えられる。この目的での緩衝剤の使用
は、例えば米国特許第５，１１６，７６３号に記載され
ている。
薬組成物のpHを調節する目的で、その検出層の中に存在
する組成物に加えられる。この目的での緩衝剤の使用
は、例えば米国特許第５，１１６，７６３号に記載され
ている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、被検体の検
出に必要な時間を減らすように働くＨＥＰＥＳを含浸さ
せた分離マトリックスを有する検出装置を提供する。予
想外にも、ＨＥＰＥＳは、検出層における終点測定を迅
速化する。他の緩衝剤はこの同じ利点を示さない。
出に必要な時間を減らすように働くＨＥＰＥＳを含浸さ
せた分離マトリックスを有する検出装置を提供する。予
想外にも、ＨＥＰＥＳは、検出層における終点測定を迅
速化する。他の緩衝剤はこの同じ利点を示さない。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明は、その一態様に
おいて、生物学的流体試料中の被検体を検出する装置で
あって、 ａ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックス、 ｂ）被検体を検出する手段であって、被検体が分離マト
リックスから検出手段に移動することができるよう、分
離マトリックスに対して垂直方向に隣接し、分離マトリ
ックスと実質的に重なっている（合致する）検出手段と
を含む装置を意図する。
おいて、生物学的流体試料中の被検体を検出する装置で
あって、 ａ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックス、 ｂ）被検体を検出する手段であって、被検体が分離マト
リックスから検出手段に移動することができるよう、分
離マトリックスに対して垂直方向に隣接し、分離マトリ
ックスと実質的に重なっている（合致する）検出手段と
を含む装置を意図する。
【０００７】含まれるＨＥＰＥＳの量は、７０〜１５０
ミリモル、好ましくは８０〜１００ミリモルである。
ミリモル、好ましくは８０〜１００ミリモルである。
【０００８】検出手段は、被検体と相互作用して検出可
能な信号を発する化学試薬を含有するマトリックスであ
ることが好ましい。グルコースについて好ましい検出手
段は、ＡＴＰ、ＮＡＤ、ヘキソキナーゼ、グルコース−
６−リン酸デヒドロゲナーゼ、ジアホラーゼおよび指示
薬を含有する合成膜である。
能な信号を発する化学試薬を含有するマトリックスであ
ることが好ましい。グルコースについて好ましい検出手
段は、ＡＴＰ、ＮＡＤ、ヘキソキナーゼ、グルコース−
６−リン酸デヒドロゲナーゼ、ジアホラーゼおよび指示
薬を含有する合成膜である。
【０００９】好ましい実施態様においては、分離マトリ
ックスは、ガラス繊維フィルタである。より好ましく
は、このガラス繊維フィルタは、カバー部に隣接する試
料塗布面側と、検出手段に隣接する試薬側面とを有し
て、試薬面のガラス繊維が塗布面のガラス繊維よりも短
いものである。
ックスは、ガラス繊維フィルタである。より好ましく
は、このガラス繊維フィルタは、カバー部に隣接する試
料塗布面側と、検出手段に隣接する試薬側面とを有し
て、試薬面のガラス繊維が塗布面のガラス繊維よりも短
いものである。
【００１０】分離マトリックスは、コロイド粒子もしく
はセルの凝集を促進する凝集促進物質または非溶血性界
面活性剤のような表面活性剤を含有することができる。
はセルの凝集を促進する凝集促進物質または非溶血性界
面活性剤のような表面活性剤を含有することができる。
【００１１】好ましくは、生物学的流体は細胞外液であ
り、より好ましくは、そのような流体は血液である。
り、より好ましくは、そのような流体は血液である。
【００１２】検出装置はさらに、（１）透明な窓を有す
るベース部であって、検出手段が、ベース部に対して垂
直方向に隣接し、その透明な窓と少なくとも部分的に重
なるように位置しているベース部と、（２）開口を有す
るカバー部であって、分離マトリックスに対して垂直方
向に隣接するカバー部とを含む。
るベース部であって、検出手段が、ベース部に対して垂
直方向に隣接し、その透明な窓と少なくとも部分的に重
なるように位置しているベース部と、（２）開口を有す
るカバー部であって、分離マトリックスに対して垂直方
向に隣接するカバー部とを含む。
【００１３】好ましくは、ベース部の透明な窓は、ガラ
スまたはポリカーボネートのようなプラスチックからな
るものである。
スまたはポリカーボネートのようなプラスチックからな
るものである。
【００１４】したがって、本発明は、その好ましい態様
において、生物学的流体中のグルコースを検出する装置
であって、 ａ）ポリカーボネート製の透明な窓を有するプラスチッ
ク製のベース部、 ｂ）ベース部に対して垂直方向に隣接し、その透明な窓
と少なくとも部分的に重なっている、グルコースを検出
するための手段であって、ＡＴＰ、ＮＡＤ、ヘキソキナ
ーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、ジア
ホラーゼおよび指示薬を含有するマトリックスを含む検
出手段、 ｃ）検出手段に対して垂直方向に隣接し、検出手段と実
質的に重なっている、ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリ
ックス、及び ｄ）分離マトリックスと重なっている開口を有し、分離
マトリックスに対して垂直方向に隣接するカバー部とを
含む装置、を意図する。
において、生物学的流体中のグルコースを検出する装置
であって、 ａ）ポリカーボネート製の透明な窓を有するプラスチッ
ク製のベース部、 ｂ）ベース部に対して垂直方向に隣接し、その透明な窓
と少なくとも部分的に重なっている、グルコースを検出
するための手段であって、ＡＴＰ、ＮＡＤ、ヘキソキナ
ーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、ジア
ホラーゼおよび指示薬を含有するマトリックスを含む検
出手段、 ｃ）検出手段に対して垂直方向に隣接し、検出手段と実
質的に重なっている、ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリ
ックス、及び ｄ）分離マトリックスと重なっている開口を有し、分離
マトリックスに対して垂直方向に隣接するカバー部とを
含む装置、を意図する。
【００１５】さらに別の好ましい態様において、本発明
は、生物学的流体中の被検体を検出する方法であって、 ａ）ｉ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックス、 ii）被検体を検出する手段であって、被検体が分離マト
リックスから検出手段に移動することができるよう、分
離マトリックスに対して垂直方向に隣接し、分離マトリ
ックスと実質的に重なっている検出手段、を含む被検体
検出装置を用意する工程； ｂ）生物学的流体の試料を検出装置の分離マトリックス
に塗布する工程； ｃ）検出装置を、被検体が分離マトリックスを横断し、
検出マトリックスに進入し、被検体の存在を示す信号を
発するのに十分な期間だけ維持する工程；及び ｄ）該信号、ひいては被検体の存在を検出する工程を含
む方法を意図する。
は、生物学的流体中の被検体を検出する方法であって、 ａ）ｉ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックス、 ii）被検体を検出する手段であって、被検体が分離マト
リックスから検出手段に移動することができるよう、分
離マトリックスに対して垂直方向に隣接し、分離マトリ
ックスと実質的に重なっている検出手段、を含む被検体
検出装置を用意する工程； ｂ）生物学的流体の試料を検出装置の分離マトリックス
に塗布する工程； ｃ）検出装置を、被検体が分離マトリックスを横断し、
検出マトリックスに進入し、被検体の存在を示す信号を
発するのに十分な期間だけ維持する工程；及び ｄ）該信号、ひいては被検体の存在を検出する工程を含
む方法を意図する。
【００１６】もう一つの好ましい実施態様においては、
生物学的流体は血液であり、分離マトリックスは凝集促
進物質および表面活性剤を含有する。
生物学的流体は血液であり、分離マトリックスは凝集促
進物質および表面活性剤を含有する。
【００１７】Ｉ．検出装置
本発明の装置は、生物学的流体中の被検体を検出する多
層試薬系装置である。このような装置は、垂直方向に互
いに隣接して位置する２枚の層（例えば、一方の層がも
う一方の層の上にある）を含む。
層試薬系装置である。このような装置は、垂直方向に互
いに隣接して位置する２枚の層（例えば、一方の層がも
う一方の層の上にある）を含む。
【００１８】第一の層は、少なくとも、被検体を含有す
る疑いのある生物学的流体の試料を受け入れ、被検体の
検出を妨げる試料中の他の物質から被検体を分離するよ
うに働く。本明細書に使用する「分離マトリックス」と
は、試料を受け入れ、分離機能を実行する層をいう。以
下に述べるように、分離層は、試料の前処理のような他
の機能を実行することができる。
る疑いのある生物学的流体の試料を受け入れ、被検体の
検出を妨げる試料中の他の物質から被検体を分離するよ
うに働く。本明細書に使用する「分離マトリックス」と
は、試料を受け入れ、分離機能を実行する層をいう。以
下に述べるように、分離層は、試料の前処理のような他
の機能を実行することができる。
【００１９】第二の層は、分離マトリックスから被検体
を受け入れ、少なくとも被検体を検出するように働く。
ここに使用する「検出する」またはその相当語は、被検
体を測定し、被検体の存在を示す検出可能な信号を発す
ることをいう。好ましくは、このような発された信号
は、流体試料中の被検体の量または濃度に比例する。検
出可能な信号は、物理的手段、化学的手段または他の手
段によって検出することができる信号である。ここに使
用する「検出する手段」またはその相当語は、少なくと
も該検出機能を実行する層をいう。
を受け入れ、少なくとも被検体を検出するように働く。
ここに使用する「検出する」またはその相当語は、被検
体を測定し、被検体の存在を示す検出可能な信号を発す
ることをいう。好ましくは、このような発された信号
は、流体試料中の被検体の量または濃度に比例する。検
出可能な信号は、物理的手段、化学的手段または他の手
段によって検出することができる信号である。ここに使
用する「検出する手段」またはその相当語は、少なくと
も該検出機能を実行する層をいう。
【００２０】本発明は、ある好ましい態様において、生
物学的流体試料中のグルコースを検出する装置であっ
て、分離マトリックスと、グルコースを検出する手段と
を含む装置を意図する。本発明の装置に使用される分離
マトリックスは、緩衝剤４−（２−ヒドロキシエチル）
−１−ピペラジン−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を
含有する。この好ましい態様によると、本発明は、 ａ）グルコースを検出する手段、及び ｂ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックスであって、
グルコースが分離マトリックスから検出手段に移動する
ことができるよう、検出手段に対して垂直方向に隣接
し、検出手段と実質的に重なっているマトリックス、を
含むグルコース検出装置を意図する。
物学的流体試料中のグルコースを検出する装置であっ
て、分離マトリックスと、グルコースを検出する手段と
を含む装置を意図する。本発明の装置に使用される分離
マトリックスは、緩衝剤４−（２−ヒドロキシエチル）
−１−ピペラジン−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を
含有する。この好ましい態様によると、本発明は、 ａ）グルコースを検出する手段、及び ｂ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックスであって、
グルコースが分離マトリックスから検出手段に移動する
ことができるよう、検出手段に対して垂直方向に隣接
し、検出手段と実質的に重なっているマトリックス、を
含むグルコース検出装置を意図する。
【００２１】ここに使用する「実質的に重なっている」
とは、垂直方向に隣接する構造体どうしの重なり合う程
度が約５０％、好ましくは約７５％、さらに好ましくは
約９０％を超えていることをいう。ここに使用する「マ
トリックス」とは、別の物質を封入する、含有する、あ
るいは埋め込む物質をいう。
とは、垂直方向に隣接する構造体どうしの重なり合う程
度が約５０％、好ましくは約７５％、さらに好ましくは
約９０％を超えていることをいう。ここに使用する「マ
トリックス」とは、別の物質を封入する、含有する、あ
るいは埋め込む物質をいう。
【００２２】ある実施態様において、被検体を検出する
手段は、グルコースを検出するのに使用される化学試薬
を含有するマトリックスを含む。本明細書では、このよ
うなマトリックスを検出マトリックスと呼ぶ。検出マト
リックスは、天然材料または合成材料からなる膜である
ことが好ましい。このような膜材料は、（１）分析され
る試料（被検体およびそのような試料の成分を含む）お
よび装置（例えば被検体を検出する装置）に使用される
他の試薬に対して化学的に耐性であり、（２）検出され
る試料のすべての成分および装置の他の部品に対して非
反応性（すなわち化学的に不活性）である。好ましく
は、検出マトリックスとして使用される膜は、以下の第
１表に示すような合成材料からなるものである。
手段は、グルコースを検出するのに使用される化学試薬
を含有するマトリックスを含む。本明細書では、このよ
うなマトリックスを検出マトリックスと呼ぶ。検出マト
リックスは、天然材料または合成材料からなる膜である
ことが好ましい。このような膜材料は、（１）分析され
る試料（被検体およびそのような試料の成分を含む）お
よび装置（例えば被検体を検出する装置）に使用される
他の試薬に対して化学的に耐性であり、（２）検出され
る試料のすべての成分および装置の他の部品に対して非
反応性（すなわち化学的に不活性）である。好ましく
は、検出マトリックスとして使用される膜は、以下の第
１表に示すような合成材料からなるものである。
【００２３】
【表１】
【００２４】検出手段は、多孔度の低いものが好まし
い。好ましい孔径は、約０．２ミクロン〜約３．０ミク
ロンであり、より好ましくは約０．４５ミクロン〜約
０．６５ミクロンである。
い。好ましい孔径は、約０．２ミクロン〜約３．０ミク
ロンであり、より好ましくは約０．４５ミクロン〜約
０．６５ミクロンである。
【００２５】好ましくは、被検体を検出する手段は、そ
のような被検体と相互作用し、被検体の存在を示す物理
的または化学的な信号を発する１種以上の化学試薬を含
む。好ましくは、発される信号は、試料中の被検体の量
または濃度に比例する。
のような被検体と相互作用し、被検体の存在を示す物理
的または化学的な信号を発する１種以上の化学試薬を含
む。好ましくは、発される信号は、試料中の被検体の量
または濃度に比例する。
【００２６】被検体を検出するのに使用される化学試薬
は、当該技術において周知のものである。好ましい実施
態様においては、このような化学試薬が被検体と相互作
用して色に変化を起こす（例えば被検体の測色検定）。
被検体がグルコースである好ましい実施態様において
は、グルコースの測色検出に使用される化学試薬は、周
知のヘキソキナーゼ反応に使用されるものである。これ
らの化学反応およびこのような反応に包含される試薬を
以下に示す。
は、当該技術において周知のものである。好ましい実施
態様においては、このような化学試薬が被検体と相互作
用して色に変化を起こす（例えば被検体の測色検定）。
被検体がグルコースである好ましい実施態様において
は、グルコースの測色検出に使用される化学試薬は、周
知のヘキソキナーゼ反応に使用されるものである。これ
らの化学反応およびこのような反応に包含される試薬を
以下に示す。
【００２７】
【化１】
【００２８】このような実施態様によると、本発明の装
置は、グルコースのヘキソキナーゼ検出に必要な基質、
酵素および指示薬を含有する検出マトリックスを含む。
これらの試薬は、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、ニコ
チンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）、ヘキソ
キナーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、
ジアホラーゼおよび指示薬を含む。好ましい指示薬は、
テトラゾリウム塩、例えば２−（ｐ−ロドフェニル）−
３−（ｐ−ニトロフェニル）−５−フェニルテトラゾリ
ウムクロリド（すなわちＩＮＴ）、ｐ−ニトロブルーテ
トラゾリウムクロリド（すなわちＮＢＴ）または２−
（４−ジフルオロメチル−５−クロロチアゾリル）−３
−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−５−（３，
４−メチレンジオキシフェニル）テトラゾリウムベンゼ
ンスルホネートである。
置は、グルコースのヘキソキナーゼ検出に必要な基質、
酵素および指示薬を含有する検出マトリックスを含む。
これらの試薬は、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、ニコ
チンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ）、ヘキソ
キナーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、
ジアホラーゼおよび指示薬を含む。好ましい指示薬は、
テトラゾリウム塩、例えば２−（ｐ−ロドフェニル）−
３−（ｐ−ニトロフェニル）−５−フェニルテトラゾリ
ウムクロリド（すなわちＩＮＴ）、ｐ−ニトロブルーテ
トラゾリウムクロリド（すなわちＮＢＴ）または２−
（４−ジフルオロメチル−５−クロロチアゾリル）−３
−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−５−（３，
４−メチレンジオキシフェニル）テトラゾリウムベンゼ
ンスルホネートである。
【００２９】他の好ましい実施態様においては、被検体
はコレステロール、トリグリセリド、アミラーゼなどで
ある。これらの被検体の検出に使用される化学試薬は、
当該技術において周知のものである。そのような試薬の
例を、以下に記す実施例３に示す。
はコレステロール、トリグリセリド、アミラーゼなどで
ある。これらの被検体の検出に使用される化学試薬は、
当該技術において周知のものである。そのような試薬の
例を、以下に記す実施例３に示す。
【００３０】本発明の装置は、被検体を検出する手段に
対して垂直方向に隣接し、そのような検出手段と実質的
に重なっている分離マトリックスであって、被検体が分
離マトリックスから検出手段に移動することができるよ
うなマトリックスを含む。好ましい実施態様において
は、この分離マトリックスは検出手段と接触している。
対して垂直方向に隣接し、そのような検出手段と実質的
に重なっている分離マトリックスであって、被検体が分
離マトリックスから検出手段に移動することができるよ
うなマトリックスを含む。好ましい実施態様において
は、この分離マトリックスは検出手段と接触している。
【００３１】好ましくは、分離マトリックスは、上記に
定義したような天然または合成の、化学的に耐性かつ化
学的に不活性の材料からなる膜フィルタである。好まし
くは、分離マトリックスは、試料に含有される被検体が
膜フィルタを透過して検出マトリックスに入り込む移動
を可能にするために多孔性の高いものである。特に好ま
しい実施態様においては、分離マトリックスはガラス繊
維フィルタである。多孔質のガラス繊維フィルタは市販
されている（Whatman 社、英国）。
定義したような天然または合成の、化学的に耐性かつ化
学的に不活性の材料からなる膜フィルタである。好まし
くは、分離マトリックスは、試料に含有される被検体が
膜フィルタを透過して検出マトリックスに入り込む移動
を可能にするために多孔性の高いものである。特に好ま
しい実施態様においては、分離マトリックスはガラス繊
維フィルタである。多孔質のガラス繊維フィルタは市販
されている（Whatman 社、英国）。
【００３２】分離マトリックスは、本発明の装置におい
て検出手段に対して垂直方向に隣接して並べられると、
その試料塗布側面が検出手段から反対側に位置し、試薬
側面が検出手段に面する側にそれに隣接して位置するこ
とを見てとることができる。好ましい実施態様において
は、分離マトリックスは、これらの両側面について不均
等である。
て検出手段に対して垂直方向に隣接して並べられると、
その試料塗布側面が検出手段から反対側に位置し、試薬
側面が検出手段に面する側にそれに隣接して位置するこ
とを見てとることができる。好ましい実施態様において
は、分離マトリックスは、これらの両側面について不均
等である。
【００３３】好ましい実施態様においては、これらの側
面は、マトリックスに塗布された液状試料の横方向の延
展を促進するそれらの能力に関して不均等である。この
実施態様によると、分離マトリックスの塗布側面は、塗
布された液状試料の横方向の延展を試薬側面が促進する
ほどには促進しない。したがって、塗布された試料の延
展は、その試料が分離マトリックスを塗布側面から試薬
側面まで横断（透過）して検出手段に向かうときに起こ
る。
面は、マトリックスに塗布された液状試料の横方向の延
展を促進するそれらの能力に関して不均等である。この
実施態様によると、分離マトリックスの塗布側面は、塗
布された液状試料の横方向の延展を試薬側面が促進する
ほどには促進しない。したがって、塗布された試料の延
展は、その試料が分離マトリックスを塗布側面から試薬
側面まで横断（透過）して検出手段に向かうときに起こ
る。
【００３４】分離マトリックスがガラス繊維フィルタで
ある場合、このような横方向延展の不均等な促進は、試
薬側のガラス繊維を塗布側のガラス繊維よりも短くする
ことによって達成される。このような不均等なガラス繊
維フィルタの使用が、そのような試料中の被検体の検出
に必要な試料の量を減らし、そのような検出に必要な時
間を短縮する。
ある場合、このような横方向延展の不均等な促進は、試
薬側のガラス繊維を塗布側のガラス繊維よりも短くする
ことによって達成される。このような不均等なガラス繊
維フィルタの使用が、そのような試料中の被検体の検出
に必要な試料の量を減らし、そのような検出に必要な時
間を短縮する。
【００３５】分離マトリックスはさらに、被検体の検出
に悪影響を及ぼさないものである限り、塗布された試料
と相互作用する物質を含有することができる。そのよう
な物質の一例は、コロイド粒子またはセルの凝集を促進
し、被検体と、被検体の検出を妨げるおそれのある他の
物質との分離を助長するように働く薬剤である。
に悪影響を及ぼさないものである限り、塗布された試料
と相互作用する物質を含有することができる。そのよう
な物質の一例は、コロイド粒子またはセルの凝集を促進
し、被検体と、被検体の検出を妨げるおそれのある他の
物質との分離を助長するように働く薬剤である。
【００３６】一例として、生物学的流体が血液であり、
グルコースを検出する手段が測色手段である場合、赤血
球の存在が色の検出を妨げるであろう。そのような赤血
球が検出手段に移行し、色の検出を妨げることのないよ
う、分離マトリックス中で赤血球を凝集させることがで
きる。全血試料について使用するのに好ましい凝集促進
物質は、レクチンのような凝集反応促進剤である。好ま
しいレクチンは、じゃがいもレクチンである。
グルコースを検出する手段が測色手段である場合、赤血
球の存在が色の検出を妨げるであろう。そのような赤血
球が検出手段に移行し、色の検出を妨げることのないよ
う、分離マトリックス中で赤血球を凝集させることがで
きる。全血試料について使用するのに好ましい凝集促進
物質は、レクチンのような凝集反応促進剤である。好ま
しいレクチンは、じゃがいもレクチンである。
【００３７】分離マトリックスはまた、界面活性剤のよ
うな表面活性剤を含むことができる。試料が全血である
場合、好ましい界面活性剤は、非溶血性界面活性剤、例
えばポリオキシエチレンの官能化誘導体（例えばCremop
hor EL、Sigma Chem. 社、米ミズーリ州セントルイス）
またはSurfynol 465（Air Products and Chemicals社）
である。
うな表面活性剤を含むことができる。試料が全血である
場合、好ましい界面活性剤は、非溶血性界面活性剤、例
えばポリオキシエチレンの官能化誘導体（例えばCremop
hor EL、Sigma Chem. 社、米ミズーリ州セントルイス）
またはSurfynol 465（Air Products and Chemicals社）
である。
【００３８】好ましくは、生物学的流体は、細胞外液、
例えば血液、血しょう、血清、尿などである。好ましい
細胞外液は血液である。
例えば血液、血しょう、血清、尿などである。好ましい
細胞外液は血液である。
【００３９】本発明の装置のもう一つの実施態様におい
ては、分離マトリックスおよび検出手段は、分離マトリ
ックスおよび検出手段を支持し、試料塗布のために装置
にアクセスすることを可能にし、発された信号の検出を
可能にするように働くさらなる層の間にはさみ込まれて
いる。
ては、分離マトリックスおよび検出手段は、分離マトリ
ックスおよび検出手段を支持し、試料塗布のために装置
にアクセスすることを可能にし、発された信号の検出を
可能にするように働くさらなる層の間にはさみ込まれて
いる。
【００４０】このような好ましい実施態様によると、本
発明は、生物学的流体中の被検体を検出する装置であっ
て、 ａ）透明な窓を有するベース部、 ｂ）ベース部に対して垂直方向に隣接し、その窓と少な
くとも部分的に重なっている、被検体を検出する手段、 ｃ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックスであって、
その被検体が分離マトリックスから検出手段に移動する
ことができるよう、検出手段に対して垂直方向に隣接
し、検出手段と実質的に重なっている分離マトリック
ス、及び ｄ）分離マトリックスと重なっている開口を有し、分離
マトリックスに対して垂直方向に隣接するカバー部、を
含む装置を意図する。
発明は、生物学的流体中の被検体を検出する装置であっ
て、 ａ）透明な窓を有するベース部、 ｂ）ベース部に対して垂直方向に隣接し、その窓と少な
くとも部分的に重なっている、被検体を検出する手段、 ｃ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックスであって、
その被検体が分離マトリックスから検出手段に移動する
ことができるよう、検出手段に対して垂直方向に隣接
し、検出手段と実質的に重なっている分離マトリック
ス、及び ｄ）分離マトリックスと重なっている開口を有し、分離
マトリックスに対して垂直方向に隣接するカバー部、を
含む装置を意図する。
【００４１】本発明の装置のベース部およびカバー部
は、上記に定義したような化学的に耐性かつ化学的に不
活性である材料からなることができる。
は、上記に定義したような化学的に耐性かつ化学的に不
活性である材料からなることができる。
【００４２】化学的に耐性かつ不活性の材料には、ガラ
ス、プラスチックおよび金属がある。好ましい材料は、
ポリスチレンのようなプラスチックである。材料を適当
な形状および大きさのベース部またはカバー部に製する
手段は、当該技術において周知のものである（以下の実
施例を参照）。
ス、プラスチックおよび金属がある。好ましい材料は、
ポリスチレンのようなプラスチックである。材料を適当
な形状および大きさのベース部またはカバー部に製する
手段は、当該技術において周知のものである（以下の実
施例を参照）。
【００４３】ベース部は、検出マトリックスへのアクセ
スを提供する開口を含む。このようなアクセスは、被検
体と、被検体を検出するのに使用される化学試薬との間
の相互作用から発せられる信号の視認または他の方法で
の検出のために必要である。
スを提供する開口を含む。このようなアクセスは、被検
体と、被検体を検出するのに使用される化学試薬との間
の相互作用から発せられる信号の視認または他の方法で
の検出のために必要である。
【００４４】好ましい実施態様においては、ベース部の
開口は、発された信号の視認を可能にする透明な材料で
覆われている。カバーとして使用される透明な材料は、
上述したような化学的に耐性かつ化学的に不活性な物質
からなる。好ましい透明な材料は、ポリカーボネートの
ような透明なプラスチックである。
開口は、発された信号の視認を可能にする透明な材料で
覆われている。カバーとして使用される透明な材料は、
上述したような化学的に耐性かつ化学的に不活性な物質
からなる。好ましい透明な材料は、ポリカーボネートの
ような透明なプラスチックである。
【００４５】検出手段の少なくとも一部は、発された信
号をベース部を通して視認することができるよう、ベー
ス部の開口に重ねて並べられる。
号をベース部を通して視認することができるよう、ベー
ス部の開口に重ねて並べられる。
【００４６】カバー部は、分離マトリックスと重なって
いる開口を有している。このカバー部の開口を介して、
生物学的流体の試料が分離マトリックスに塗布される。
いる開口を有している。このカバー部の開口を介して、
生物学的流体の試料が分離マトリックスに塗布される。
【００４７】II．生物学的流体中の被検体を検出する方
法 本発明は、もう一つの態様において、生物学的流体中の
被検体を検出する方法を意図する。このような方法によ
ると、 ａ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックス、及び ｂ）被検体を検出する手段であって、被検体が分離マト
リックスから被検体を検出する手段に移動することがで
きるよう、分離マトリックスに対して垂直方向に隣接
し、そのマトリックスと実質的に重なっている検出手
段、を含む検出装置の分離マトリックスに生物学的流体
の試料を塗布する。
法 本発明は、もう一つの態様において、生物学的流体中の
被検体を検出する方法を意図する。このような方法によ
ると、 ａ）ＨＥＰＥＳを含有する分離マトリックス、及び ｂ）被検体を検出する手段であって、被検体が分離マト
リックスから被検体を検出する手段に移動することがで
きるよう、分離マトリックスに対して垂直方向に隣接
し、そのマトリックスと実質的に重なっている検出手
段、を含む検出装置の分離マトリックスに生物学的流体
の試料を塗布する。
【００４８】そして、試料を塗布された装置を、試料中
の被検体が分離マトリックスを横断し、検出手段に進入
し、検出手段と相互作用し、被検体の存在を示す、ある
いは、存在する被検体の量もしくは濃度に比例する検出
可能な信号を発するのに十分な期間、ある温度に維持す
る。そして、ベース部にある透明な窓を通して、発され
た信号を検出する。
の被検体が分離マトリックスを横断し、検出手段に進入
し、検出手段と相互作用し、被検体の存在を示す、ある
いは、存在する被検体の量もしくは濃度に比例する検出
可能な信号を発するのに十分な期間、ある温度に維持す
る。そして、ベース部にある透明な窓を通して、発され
た信号を検出する。
【００４９】試料を塗布された装置は、約４℃〜約５０
℃、より好ましくは約１５℃〜約３０℃、さらに好まし
くは約２５℃に維持することが好ましい。
℃、より好ましくは約１５℃〜約３０℃、さらに好まし
くは約２５℃に維持することが好ましい。
【００５０】好ましい実施態様においては、維持時間は
約２分未満、より好ましくは約１分未満である。好まし
くは、試料は、約５マイクロリットル（μl ）〜約２０
μl、より好ましくは約３μl 〜約１５μl 、さらに好
ましくは約３μl 〜約１０μl の量を装置に塗布する。
約２分未満、より好ましくは約１分未満である。好まし
くは、試料は、約５マイクロリットル（μl ）〜約２０
μl、より好ましくは約３μl 〜約１５μl 、さらに好
ましくは約３μl 〜約１０μl の量を装置に塗布する。
【００５１】好ましい実施態様においては、分離マトリ
ックスはガラス繊維フィルタである。このようなフィル
タをさらに、レクチンのような凝集促進剤および非溶血
性界面活性剤のような表面活性剤で含浸することができ
る。
ックスはガラス繊維フィルタである。このようなフィル
タをさらに、レクチンのような凝集促進剤および非溶血
性界面活性剤のような表面活性剤で含浸することができ
る。
【００５２】分離マトリックスおよび被検体を検出する
手段は、上述したものと同じであることが好ましい。本
発明の方法に使用される装置はさらに、上述したような
カバー部およびベース部をさらに含むことができる。こ
れらの部分の好ましい実施態様はまた、被検体検出方法
に使用するのに好ましい実施態様である。
手段は、上述したものと同じであることが好ましい。本
発明の方法に使用される装置はさらに、上述したような
カバー部およびベース部をさらに含むことができる。こ
れらの部分の好ましい実施態様はまた、被検体検出方法
に使用するのに好ましい実施態様である。
【００５３】
【実施例】以下の実施例により、本発明の具体的な実施
態様を説明する。ただし、これらの実施例は、請求の範
囲および明細書をいかなる方法でも制限するものではな
い。
態様を説明する。ただし、これらの実施例は、請求の範
囲および明細書をいかなる方法でも制限するものではな
い。
【００５４】実施例１：被検体検出装置の組立て
何層かの薄いプラスチックシートおよび接着テープを使
用して検出装置を組み立てた。装置全体の厚さは、層の
数を変えることによって変化させた。適当な接着剤を使
用して、このような種々の層を互いに貼り合せた。好ま
しい接着剤の一例は、３Ｍ社から市販されている両面接
着テープである。装置の各層は、American Can. 社から
市販されている高密度ポリスチレンシート〔厚さ０．０
１５cm（０．００６インチ）〕から構成した。
用して検出装置を組み立てた。装置全体の厚さは、層の
数を変えることによって変化させた。適当な接着剤を使
用して、このような種々の層を互いに貼り合せた。好ま
しい接着剤の一例は、３Ｍ社から市販されている両面接
着テープである。装置の各層は、American Can. 社から
市販されている高密度ポリスチレンシート〔厚さ０．０
１５cm（０．００６インチ）〕から構成した。
【００５５】所望の枚数のプラスチックシートを貼り合
せたのち、貼り合せた各層を貫通する穴を開けて、分離
層および検出層のための空洞を設けた。透明な最下層
（ポリカーボネート）を加え、検出層および分離層をそ
の中に入れ、塗布部位を備えた最上層を加えて、各層を
装置の中に封入した。最上層および最下層にはポリエチ
レンテレフタレートを使用することができる。本発明の
検出装置の概略図を図１に示す。
せたのち、貼り合せた各層を貫通する穴を開けて、分離
層および検出層のための空洞を設けた。透明な最下層
（ポリカーボネート）を加え、検出層および分離層をそ
の中に入れ、塗布部位を備えた最上層を加えて、各層を
装置の中に封入した。最上層および最下層にはポリエチ
レンテレフタレートを使用することができる。本発明の
検出装置の概略図を図１に示す。
【００５６】実施例２：ＨＥＰＥＳ緩衝剤の効果
実施例１のようにして装置を作製した。このとき、分離
層として使用したガラス繊維フィルタは、ＨＥＰＥＳ緩
衝剤、じゃがいもレクチンおよびCremophor ELを含有す
るものであった。切断したフィルタを、ＨＥＰＥＳ １
５０mM（pH７．５）と、じゃがいもレクチン５７，６０
０単位／ｌと、Cremophor EL １．３重量％との水溶液
に浸漬することにより、ガラス繊維フィルタをこれらの
物質で含浸した。浸漬したのち、繊維を溶液から出し、
オーブン中５０℃で約１５分間乾燥させた。
層として使用したガラス繊維フィルタは、ＨＥＰＥＳ緩
衝剤、じゃがいもレクチンおよびCremophor ELを含有す
るものであった。切断したフィルタを、ＨＥＰＥＳ １
５０mM（pH７．５）と、じゃがいもレクチン５７，６０
０単位／ｌと、Cremophor EL １．３重量％との水溶液
に浸漬することにより、ガラス繊維フィルタをこれらの
物質で含浸した。浸漬したのち、繊維を溶液から出し、
オーブン中５０℃で約１５分間乾燥させた。
【００５７】ナイロン（Biodyne A 、孔径０．４５ミク
ロン、PALL Biosupport 社、米ニューヨーク州ロングア
イランド）製の合成膜を、ＡＴＰ、ＮＡＤ、ヘキソキナ
ーゼ、グルコース−６−リン酸（Ｇ−６−Ｐ）デヒドロ
ゲナーゼ、ジアホラーゼおよびＮＢＴ（テトラゾリウム
塩、Sigma Chem. 社）で含浸し、それを検出層として使
用した。含浸は、以下の最終濃度を有する水溶液に合成
膜を浸漬することによって実施した。
ロン、PALL Biosupport 社、米ニューヨーク州ロングア
イランド）製の合成膜を、ＡＴＰ、ＮＡＤ、ヘキソキナ
ーゼ、グルコース−６−リン酸（Ｇ−６−Ｐ）デヒドロ
ゲナーゼ、ジアホラーゼおよびＮＢＴ（テトラゾリウム
塩、Sigma Chem. 社）で含浸し、それを検出層として使
用した。含浸は、以下の最終濃度を有する水溶液に合成
膜を浸漬することによって実施した。
【００５８】
テトラゾリウム指示薬（例えばＮＢＴ） ５．５重量％
ＮＡＤ １重量％
ＡＴＰ ４．７重量％
酢酸マグネシウム ０．７重量％
ウシ血清アルブミン ０．４重量％
ヘキソキナーゼ ８００単位／ml
グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ ８００単位
／ml ジアホラーゼ ８００単位／ml pH７．５のＨＥＰＥＳ緩衝剤 ３．７重量％ 不活性成分 ２％
／ml ジアホラーゼ ８００単位／ml pH７．５のＨＥＰＥＳ緩衝剤 ３．７重量％ 不活性成分 ２％
【００５９】これらの化学薬品は、Sigma Chem. 社から
入手した。まず、発色性指示薬を検出マトリックスに組
み込んだ。このマトリックスを熱風オーブン中５０℃で
５分間乾燥させた。次に、乾燥したマトリックスを、緩
衝剤、基質／補因子および酵素を含有する上述の水溶液
で含浸した。含浸したマトリックスを再び５０℃で１０
分間乾燥させた。
入手した。まず、発色性指示薬を検出マトリックスに組
み込んだ。このマトリックスを熱風オーブン中５０℃で
５分間乾燥させた。次に、乾燥したマトリックスを、緩
衝剤、基質／補因子および酵素を含有する上述の水溶液
で含浸した。含浸したマトリックスを再び５０℃で１０
分間乾燥させた。
【００６０】そして、実施例１に述べた手順にしたがっ
て、ガラス繊維フィルタおよび含浸した合成膜（検出
膜）を、透明なポリカーボネート製の窓を有するプラス
チック製のベース部と、０．２５cm（０．１０インチ）
の開口を有する熱成形したポリスチレン製のカバーとの
間にはさみ込んだ。
て、ガラス繊維フィルタおよび含浸した合成膜（検出
膜）を、透明なポリカーボネート製の窓を有するプラス
チック製のベース部と、０．２５cm（０．１０インチ）
の開口を有する熱成形したポリスチレン製のカバーとの
間にはさみ込んだ。
【００６１】ポリスチレン製のカバーの開口を介して全
血をガラス繊維フィルタに塗布し、色の変化を基にして
グルコースを検出した。分離層におけるＨＥＰＥＳの存
在が終点測定を迅速化し、４０％および６０％のヘマト
クリット全血試料の場合でいずれも８０秒未満の期間で
分析を実施することができた（図２および３）。ＨＥＰ
ＥＳに代えて他の緩衝剤、例えばトリス（ヒドロキシメ
チル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、ＴＡＰＳＯ、ＭＥＳ
および食塩水を用いても、何の利点も得られなかった。
血をガラス繊維フィルタに塗布し、色の変化を基にして
グルコースを検出した。分離層におけるＨＥＰＥＳの存
在が終点測定を迅速化し、４０％および６０％のヘマト
クリット全血試料の場合でいずれも８０秒未満の期間で
分析を実施することができた（図２および３）。ＨＥＰ
ＥＳに代えて他の緩衝剤、例えばトリス（ヒドロキシメ
チル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、ＴＡＰＳＯ、ＭＥＳ
および食塩水を用いても、何の利点も得られなかった。
【００６２】実施例３：その他の被検体
上述した手順を用いて、他の被検体についての検出装置
を作製することができた。以下の含浸溶液は、コレステ
ロール、トリグリセリドおよびアミラーゼの検出に使用
するための検出マトリックスを含浸するのに使用した溶
液の例である。
を作製することができた。以下の含浸溶液は、コレステ
ロール、トリグリセリドおよびアミラーゼの検出に使用
するための検出マトリックスを含浸するのに使用した溶
液の例である。
【００６３】コレステロールの場合
塩酸テトラメチルベンジジン指示薬染料 １．５重量％
pH７．０のPipes 緩衝剤 ４重量％
ペルオキシダーゼ ２４０単位／ml
コレステロールエステラーゼ ２４０単位／ml
コレステロールオキシダーゼ １２０単位／ml
不活性成分 １２％
【００６４】トリグリセリドの場合
テトラゾリウム指示薬 １．１重量％
pH７．５のＨＥＰＥＳ緩衝剤 ２．４重量％
硫酸マグネシウム ０．７重量％
ＡＴＰ ２．７重量％
ＮＡＤ ７．１重量％
リパーゼ ２５，０００単位／ml
リパーゼ ８００単位／ml
グリセロール−３−リン酸デヒドロゲナーゼ １，００
０単位／ml ジアホラーゼ ５００単位／ml 不活性成分 １．５％
０単位／ml ジアホラーゼ ５００単位／ml 不活性成分 １．５％
【００６５】アミラーゼの場合
ｐ−ニトロ−マルトヘプトシド（Genzyme 社） １７．
３重量％ グルコアミラーゼ １６単位／ml α−グルコシダーゼ ７０単位／ml pH７．０のPipes １．７重量％ 塩化カルシウム ５mM
３重量％ グルコアミラーゼ １６単位／ml α−グルコシダーゼ ７０単位／ml pH７．０のPipes １．７重量％ 塩化カルシウム ５mM
【００６６】本発明の構成および方法を好ましい実施態
様に関して説明してきたが、本発明の概念、真髄および
範囲から逸脱することなく、本明細書に記載する構造、
方法および処理段階もしくはその順序に変更を加えうる
ことが当業者に明らかであろう。
様に関して説明してきたが、本発明の概念、真髄および
範囲から逸脱することなく、本明細書に記載する構造、
方法および処理段階もしくはその順序に変更を加えうる
ことが当業者に明らかであろう。
【図１】検出装置を表す略図である。
【図２】分離マトリックス中のＨＥＰＥＳ緩衝剤が６０
％のヘマトクリット（Ｈｃｔ）を有する血液中のグルコ
ースの測定に及ぼす影響を示すグラフである。
％のヘマトクリット（Ｈｃｔ）を有する血液中のグルコ
ースの測定に及ぼす影響を示すグラフである。
【図３】分離マトリックス中のＨＥＰＥＳ緩衝剤が４０
％のヘマトクリット（Ｈｃｔ）を有する血液中のグルコ
ースの測定に及ぼす影響を示すグラフである。
％のヘマトクリット（Ｈｃｔ）を有する血液中のグルコ
ースの測定に及ぼす影響を示すグラフである。
１ カバー部
１ａ 開口
２ 分離マトリックス
３ 検出手段
４ ベース部
４ａ 開口
４ｂ 通気孔
フロントページの続き
(56)参考文献 特開 平５−99918（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
G01N 33/66
G01N 31/22
G01N 33/52
Claims (14)
- 【請求項１】 生物学的流体中の被検体を検出する装置
であって、 ａ）凝集促進剤、および７０〜１５０ミリモルの緩衝剤
４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジン−エタ
ンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を含有する分離マトリック
ス、及び ｂ）該被検体を検出する手段であって、該被検体が該分
離マトリックスから該被検体を検出する手段に移動する
ことができるよう、該分離マトリックスに対して垂直方
向に隣接し、そのマトリックスと実質的に重なっている
検出手段、を含み、分離マトリックスにおけるＨＥＰＥ
Ｓ緩衝剤の存在により終点測定を迅速化することを特徴
とする装置。 - 【請求項２】 該検出手段が、該被検体と相互作用し
て、該生物学的流体中の該被検体の存在を示す、検出可
能な信号を発する１種以上の化学試薬を含有する膜であ
る請求項１記載の装置。 - 【請求項３】 該化学試薬が、ＡＴＰ、ＮＡＤ、ヘキソ
キナーゼ、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、
ジアホラーゼおよび指示薬を含む請求項２記載の装置。 - 【請求項４】 該分離マトリックスが膜フィルタである
請求項１〜３のいずれか１項記載の装置。 - 【請求項５】 該膜フィルタがガラス繊維フィルタであ
る請求項４記載の装置。 - 【請求項６】 該ガラス繊維フィルタが、該検出手段か
ら離れた側に位置する試料塗布側面と、該検出手段に面
する側にそれに隣接して位置する試薬側面とを有して、
該試薬側面が該塗布側面よりも短い繊維を有する請求項
５記載の装置。 - 【請求項７】 該分離マトリックスが非溶血性の界面活
性剤も含む請求項１〜６のいずれか１項記載の装置。 - 【請求項８】 ａ）透明な窓を有するベース部であっ
て、該検出手段が該ベース部に対して垂直方向に隣接
し、該透明な窓と少なくとも部分的に重なるように位置
するベース部と、 ｂ）開口を有するカバー部であって、該分離マトリック
スに対して垂直方向に隣接し、それと重なっているカバ
ー部とをさらに含む請求項１〜７のいずれか１項記載の
装置。 - 【請求項９】 該窓がポリカーボネートからなる請求項
８記載の装置。 - 【請求項１０】 分離マトリックス中に存在するＨＥＰ
ＥＳの量が８０〜１００ミリモルである請求項１〜９の
いずれか１項記載の装置。 - 【請求項１１】 血中グルコースを分析する装置であっ
て、 ａ）ＡＴＰ、ＮＡＤ、ヘキソキナーゼ、グルコース−６
−リン酸デヒドロゲナーゼ、ジアホラーゼおよび指示薬
を含有する合成膜、及び ｂ）該合成膜に対して垂直方向に隣接し、該合成膜と実
質的に重なっており、凝集促進剤、および７０〜１５０
ミリモルの緩衝剤４−（２−ヒドロキシエチル）−１−
ピペラジン−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を含有す
るガラス繊維フィルタ、 を含み、分離マトリックスにおけるＨＥＰＥＳ緩衝剤の
存在により終点測定を迅速化することを特徴とする装
置。 - 【請求項１２】 生物学的流体中の被検体を検出する方
法であって、 ａ）ｉ）凝集促進剤、および７０〜１５０ミリモルの緩
衝剤４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジン−
エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を含有する分離マトリ
ックス、及び ii）該被検体を検出するための手段であって、該被検体
が該分離マトリックスから該被検体を検出する手段に移
動することができるよう、該分離マトリックスに対して
垂直方向に隣接し、そのマトリックスと実質的に重なっ
ている検出手段、を含む検出装置を用意する工程； ｂ）該生物学的流体の試料を該分離マトリックスに塗布
する工程；及び ｃ）該被検体と該検出手段との間の反応を測定する工程
を含み、分離マトリックスにおけるＨＥＰＥＳ緩衝剤の
存在により終点測定を迅速化することを特徴とする方
法。 - 【請求項１３】 該生物学的流体が全血である請求項１
２記載の方法。 - 【請求項１４】 ＨＥＰＥＳが８０〜１００ミリモルの
量で存在する請求項１２又は１３記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US10229693A | 1993-08-05 | 1993-08-05 | |
| US08/102296 | 1993-08-05 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0763764A JPH0763764A (ja) | 1995-03-10 |
| JP3437647B2 true JP3437647B2 (ja) | 2003-08-18 |
Family
ID=22289145
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18359494A Expired - Fee Related JP3437647B2 (ja) | 1993-08-05 | 1994-08-04 | 被検体を検出する装置および方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6190918B1 (ja) |
| EP (1) | EP0638805B1 (ja) |
| JP (1) | JP3437647B2 (ja) |
| AU (1) | AU666821B2 (ja) |
| CA (1) | CA2127172C (ja) |
| DE (1) | DE69428749T2 (ja) |
| ES (1) | ES2162621T3 (ja) |
Families Citing this family (54)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1579814A3 (en) | 1996-05-17 | 2006-06-14 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | Methods and apparatus for sampling and analyzing body fluid |
| US20020010406A1 (en) | 1996-05-17 | 2002-01-24 | Douglas Joel S. | Methods and apparatus for expressing body fluid from an incision |
| DE19781162C2 (de) * | 1996-10-30 | 2002-05-23 | Mercury Diagnostics Inc | Teststreifen zur Analyse einer Körperflüssigkeitsprobe und zum Auswerten in einem Testinstrument |
| US5948695A (en) | 1997-06-17 | 1999-09-07 | Mercury Diagnostics, Inc. | Device for determination of an analyte in a body fluid |
| US6471868B1 (en) * | 1998-04-10 | 2002-10-29 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Method of preparing glass fiber filter |
| US6656697B1 (en) | 1998-09-28 | 2003-12-02 | Lifescan, Inc. | Diagnostics based on tetrazolium compounds |
| US5902731A (en) | 1998-09-28 | 1999-05-11 | Lifescan, Inc. | Diagnostics based on tetrazolium compounds |
| US6635434B1 (en) | 1999-09-17 | 2003-10-21 | Exiqon A/S | Immunoassay for pesticides and their degradation products |
| US6485923B1 (en) | 2000-02-02 | 2002-11-26 | Lifescan, Inc. | Reagent test strip for analyte determination having hemolyzing agent |
| US9282925B2 (en) | 2002-02-12 | 2016-03-15 | Dexcom, Inc. | Systems and methods for replacing signal artifacts in a glucose sensor data stream |
| US8010174B2 (en) | 2003-08-22 | 2011-08-30 | Dexcom, Inc. | Systems and methods for replacing signal artifacts in a glucose sensor data stream |
| US8260393B2 (en) | 2003-07-25 | 2012-09-04 | Dexcom, Inc. | Systems and methods for replacing signal data artifacts in a glucose sensor data stream |
| US6703216B2 (en) | 2002-03-14 | 2004-03-09 | The Regents Of The University Of California | Methods, compositions and apparatuses for detection of gamma-hydroxybutyric acid (GHB) |
| CA2455669A1 (en) * | 2003-02-04 | 2004-08-04 | Bayer Healthcare, Llc | Method and test strip for determining glucose in blood |
| EP1447665B1 (en) * | 2003-02-11 | 2016-06-29 | Bayer HealthCare LLC | Method for reducing effect of hematocrit on measurement of an analyte in whole blood |
| US8423113B2 (en) | 2003-07-25 | 2013-04-16 | Dexcom, Inc. | Systems and methods for processing sensor data |
| US7591801B2 (en) | 2004-02-26 | 2009-09-22 | Dexcom, Inc. | Integrated delivery device for continuous glucose sensor |
| US8160669B2 (en) | 2003-08-01 | 2012-04-17 | Dexcom, Inc. | Transcutaneous analyte sensor |
| US20190357827A1 (en) | 2003-08-01 | 2019-11-28 | Dexcom, Inc. | Analyte sensor |
| US8369919B2 (en) | 2003-08-01 | 2013-02-05 | Dexcom, Inc. | Systems and methods for processing sensor data |
| US8761856B2 (en) | 2003-08-01 | 2014-06-24 | Dexcom, Inc. | System and methods for processing analyte sensor data |
| US8332008B2 (en) | 2003-08-01 | 2012-12-11 | Dexcom, Inc. | System and methods for processing analyte sensor data |
| US8275437B2 (en) | 2003-08-01 | 2012-09-25 | Dexcom, Inc. | Transcutaneous analyte sensor |
| US20080119703A1 (en) | 2006-10-04 | 2008-05-22 | Mark Brister | Analyte sensor |
| US6931327B2 (en) | 2003-08-01 | 2005-08-16 | Dexcom, Inc. | System and methods for processing analyte sensor data |
| US8622905B2 (en) | 2003-08-01 | 2014-01-07 | Dexcom, Inc. | System and methods for processing analyte sensor data |
| US7774145B2 (en) | 2003-08-01 | 2010-08-10 | Dexcom, Inc. | Transcutaneous analyte sensor |
| US7920906B2 (en) | 2005-03-10 | 2011-04-05 | Dexcom, Inc. | System and methods for processing analyte sensor data for sensor calibration |
| US20140121989A1 (en) | 2003-08-22 | 2014-05-01 | Dexcom, Inc. | Systems and methods for processing analyte sensor data |
| US9247900B2 (en) | 2004-07-13 | 2016-02-02 | Dexcom, Inc. | Analyte sensor |
| WO2005051170A2 (en) | 2003-11-19 | 2005-06-09 | Dexcom, Inc. | Integrated receiver for continuous analyte sensor |
| US11633133B2 (en) | 2003-12-05 | 2023-04-25 | Dexcom, Inc. | Dual electrode system for a continuous analyte sensor |
| US8364231B2 (en) | 2006-10-04 | 2013-01-29 | Dexcom, Inc. | Analyte sensor |
| US8423114B2 (en) | 2006-10-04 | 2013-04-16 | Dexcom, Inc. | Dual electrode system for a continuous analyte sensor |
| EP2256493B1 (en) | 2003-12-05 | 2014-02-26 | DexCom, Inc. | Calibration techniques for a continuous analyte sensor |
| EP3263032B1 (en) | 2003-12-09 | 2024-01-24 | Dexcom, Inc. | Signal processing for continuous analyte sensor |
| US8808228B2 (en) | 2004-02-26 | 2014-08-19 | Dexcom, Inc. | Integrated medicament delivery device for use with continuous analyte sensor |
| EP1751532A1 (en) * | 2004-05-14 | 2007-02-14 | Bayer Healthcare, LLC | Methods for performing hematocrit adjustment in glucose assays and devices for same |
| EP3021104A1 (en) | 2004-07-02 | 2016-05-18 | Bayer Healthcare LLC | Methods for manufacturing a light guide test sensor for use in determining an analyte in a fluid sample |
| US20060020192A1 (en) | 2004-07-13 | 2006-01-26 | Dexcom, Inc. | Transcutaneous analyte sensor |
| US7640048B2 (en) | 2004-07-13 | 2009-12-29 | Dexcom, Inc. | Analyte sensor |
| US8452368B2 (en) | 2004-07-13 | 2013-05-28 | Dexcom, Inc. | Transcutaneous analyte sensor |
| WO2007102842A2 (en) | 2006-03-09 | 2007-09-13 | Dexcom, Inc. | Systems and methods for processing analyte sensor data |
| EP2152350A4 (en) | 2007-06-08 | 2013-03-27 | Dexcom Inc | INTEGRATED MEDICINE DELIVERY DEVICE FOR USE WITH A CONTINUOUS ANALYZING SUBSTANCE SENSOR |
| EP4159114B1 (en) | 2007-10-09 | 2024-04-10 | DexCom, Inc. | Integrated insulin delivery system with continuous glucose sensor |
| EP2252196A4 (en) | 2008-02-21 | 2013-05-15 | Dexcom Inc | SYSTEMS AND METHOD FOR PROCESSING, TRANSMITTING AND DISPLAYING SENSOR DATA |
| CA2741373A1 (en) * | 2008-10-30 | 2010-06-03 | Peixuan Guo | Membrane-integrated viral dna-packaging motor protein connector biosensor for dna sequencing and other uses |
| US9801575B2 (en) | 2011-04-15 | 2017-10-31 | Dexcom, Inc. | Advanced analyte sensor calibration and error detection |
| US20110004085A1 (en) | 2009-04-30 | 2011-01-06 | Dexcom, Inc. | Performance reports associated with continuous sensor data from multiple analysis time periods |
| DE112012000326B4 (de) * | 2011-04-22 | 2014-07-31 | Polymer Technology Systems, Inc. | Blutseparations-System und -Verfahren für einen Trockenteststreifen |
| CN104023968B (zh) * | 2011-12-22 | 2017-05-24 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 多层机织制品以及这种多层机织制品用作干基质点应用的载体的用途 |
| AU2018354120B2 (en) | 2017-10-24 | 2024-05-30 | Dexcom, Inc. | Pre-connected analyte sensors |
| US11331022B2 (en) | 2017-10-24 | 2022-05-17 | Dexcom, Inc. | Pre-connected analyte sensors |
| US20230020985A1 (en) * | 2019-12-19 | 2023-01-19 | Radiometer Medical Aps | Porous membrane sensor assembly |
Family Cites Families (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CS164231B2 (ja) * | 1972-09-28 | 1975-11-07 | ||
| US4186251A (en) * | 1973-03-01 | 1980-01-29 | Miles Laboratories, Inc. | Composition and method for determination of cholesterol |
| CA1056746A (en) * | 1974-09-06 | 1979-06-19 | Chung J. Lai | Biologically active membrane material |
| NO770196L (no) * | 1976-01-22 | 1977-07-25 | Wellcome Found | Kjemiske pr¦vesystemer. |
| US4230757A (en) * | 1978-06-21 | 1980-10-28 | Eastman Kodak Company | Sonically securing articles in plastic mounts |
| US4223090A (en) * | 1978-07-13 | 1980-09-16 | American Hospital Supply Corporation | Reagents for the enzymatic determination of triglycerides |
| DE3303098A1 (de) * | 1983-01-31 | 1984-08-02 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und reagenz zur glucosebestimmung im haemolysierten blut |
| US4680259A (en) * | 1984-09-26 | 1987-07-14 | Eastman Kodak Company | Analytical element and method for colorimetric determination of total cholesterol |
| US5116763A (en) * | 1984-11-19 | 1992-05-26 | Miles Inc. | Nonenzymatic glucose test |
| US4772561A (en) * | 1985-12-23 | 1988-09-20 | Miles Inc. | Test device and method of determining concentration of a sample component |
| CA1295216C (en) * | 1986-04-04 | 1992-02-04 | James P. Albarella | Rainbow test device |
| US4898813A (en) * | 1986-04-04 | 1990-02-06 | Albarella James P | Catalytic test composition intended to produce a range of colors |
| JPH0684972B2 (ja) * | 1986-04-19 | 1994-10-26 | 栄研化学株式会社 | ラテツクス凝集反応用試薬 |
| US4885240A (en) * | 1986-09-04 | 1989-12-05 | Eastman Kodak Company | Use of organic buffers to reduce dehydroascorbic acid interference in analytical methods |
| JPH01318958A (ja) * | 1988-06-21 | 1989-12-25 | Konica Corp | 乾式分析要素 |
| FI81120C (fi) * | 1988-09-26 | 1990-09-10 | Kone Oy | Foerfarande foer bestaemning av glukos ur biologiska vaetska samt reagensblandning foer tillaempning av foerfarandet. |
| US4933092A (en) * | 1989-04-07 | 1990-06-12 | Abbott Laboratories | Methods and devices for the separation of plasma or serum from whole blood |
| US5135716A (en) * | 1989-07-12 | 1992-08-04 | Kingston Diagnostics, L.P. | Direct measurement of HDL cholesterol via dry chemistry strips |
| DE4015157A1 (de) * | 1990-05-11 | 1991-11-14 | Miles Inc | Asymetrische sandwich-membranen fuer diagnose-teststreifen |
| DE4015589A1 (de) * | 1990-05-15 | 1991-11-21 | Boehringer Mannheim Gmbh | Vorrichtung und deren verwendung zur abtrennung von plasma aus vollblut |
| JPH04324347A (ja) * | 1991-04-24 | 1992-11-13 | Terumo Corp | 試験具 |
| JPH0556798A (ja) * | 1991-08-29 | 1993-03-09 | Internatl Reagents Corp | α−アミラーゼ測定方法 |
| EP0535485B1 (en) * | 1991-10-03 | 1997-07-16 | Bayer Corporation | Device and method of separating and assaying whole blood |
-
1994
- 1994-06-30 CA CA002127172A patent/CA2127172C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-06-30 AU AU66099/94A patent/AU666821B2/en not_active Ceased
- 1994-07-25 DE DE69428749T patent/DE69428749T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1994-07-25 ES ES94111552T patent/ES2162621T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-07-25 EP EP94111552A patent/EP0638805B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-08-04 JP JP18359494A patent/JP3437647B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1995
- 1995-03-06 US US08/400,786 patent/US6190918B1/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0638805A3 (en) | 1996-07-31 |
| AU666821B2 (en) | 1996-02-22 |
| EP0638805B1 (en) | 2001-10-24 |
| EP0638805A2 (en) | 1995-02-15 |
| DE69428749T2 (de) | 2002-05-08 |
| CA2127172A1 (en) | 1995-02-06 |
| ES2162621T3 (es) | 2002-01-01 |
| DE69428749D1 (de) | 2001-11-29 |
| AU6609994A (en) | 1995-03-16 |
| CA2127172C (en) | 1998-07-14 |
| US6190918B1 (en) | 2001-02-20 |
| JPH0763764A (ja) | 1995-03-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3437647B2 (ja) | 被検体を検出する装置および方法 | |
| EP0654659B1 (en) | Defined volume test device | |
| US4987085A (en) | Blood filtering metering device | |
| EP0382207B1 (en) | Analytical element for whole blood | |
| EP1854894B1 (en) | Method for measuring high density lipoprotein cholesterol | |
| EP0524596B1 (en) | Method of measuring analyte using dry analytical element | |
| JP3439836B2 (ja) | 被検体を検出する装置および方法 | |
| EP0244825B1 (en) | Dry-type analytical element for cholesterol | |
| EP0526226B1 (en) | Device and method for conducting biological assays containing particulate screening system | |
| JP3129850B2 (ja) | 血清コリンエステラーゼ活性についてのアッセイ方法及び分析要素 | |
| WO1988009824A1 (en) | Improvements in diagnostic test strips | |
| US8202490B2 (en) | Membranes and methods for coating membranes | |
| US5935802A (en) | Method of assaying a blood sample for prothrombin | |
| JP2565788B2 (ja) | 高比重リポ蛋白コレステロールの定量方法 | |
| JP2006087325A (ja) | 分析用試薬、乾式分析要素、および分析方法 | |
| JP2004156983A (ja) | ピロ燐酸定量用乾式分析素子 | |
| JP3147565B2 (ja) | 全血分析要素及びそれを用いた測定方法 | |
| ERTINGSHAUSEN | Whole-blood test for total cholesterol by a self-metering, self-timing disposable device with built-in quality control | |
| AU1802888A (en) | Improvements in diagnostic test strips | |
| JPH05322887A (ja) | 全血分析要素及びそれを用いた測定方法 | |
| JPH02143155A (ja) | 特定成分の分析方法 | |
| JPH0578318B2 (ja) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080606 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090606 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090606 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100606 Year of fee payment: 7 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |