JP3234640B2 - 土壌修復法 - Google Patents
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- Y02W30/50—Reuse, recycling or recovery technologies
- Y02W30/78—Recycling of wood or furniture waste
Landscapes
- Fire-Extinguishing Compositions (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はシロアリ腸内由来微生物
を利用した土壌修復法に関するものである。
を利用した土壌修復法に関するものである。
【０００２】近年、環境調査で、有害で難分解性な芳香
族化学物質が多種類検出されるなど、これらによる環境
汚染がクローズアップされてきており、生態系に与える
影響が懸念されている。したがって汚染の拡大を防止し
ていくと共に、汚染された環境を再生していく技術の確
立が強く望まれている。環境修復技術の一例として、土
壌中の微生物の機能を利用し汚染物質を分解・無公害化
する技術があり、生態系の自浄能力を強化することによ
り汚染物質の分解を促進することを狙いとしている。本
発明の技術は、フェノール系化合物で汚染された土壌例
えば、ガス製造プラントサイト、製油所の汚染土壌、石
油精製所跡地、燃料基地跡地、パルプ工場跡地などのフ
ェノール系化合物が汚染している土壌の修復などに適用
できる。また、本発明の技術はフラン類汚染土壌の修復
にも有効であり、例えばテトラヒドロフラン、フルフラ
ール、フルフリルアルコール、クマラン等のフラン類化
合物は、表面コーティング、接着剤、染料、等各種有機
溶剤に用いられており、特にフルフラールは、一般のア
ルデヒド類と同様に有毒な物質であるため、これらの化
学工場跡地などの土壌汚染の修復に適用できる。
族化学物質が多種類検出されるなど、これらによる環境
汚染がクローズアップされてきており、生態系に与える
影響が懸念されている。したがって汚染の拡大を防止し
ていくと共に、汚染された環境を再生していく技術の確
立が強く望まれている。環境修復技術の一例として、土
壌中の微生物の機能を利用し汚染物質を分解・無公害化
する技術があり、生態系の自浄能力を強化することによ
り汚染物質の分解を促進することを狙いとしている。本
発明の技術は、フェノール系化合物で汚染された土壌例
えば、ガス製造プラントサイト、製油所の汚染土壌、石
油精製所跡地、燃料基地跡地、パルプ工場跡地などのフ
ェノール系化合物が汚染している土壌の修復などに適用
できる。また、本発明の技術はフラン類汚染土壌の修復
にも有効であり、例えばテトラヒドロフラン、フルフラ
ール、フルフリルアルコール、クマラン等のフラン類化
合物は、表面コーティング、接着剤、染料、等各種有機
溶剤に用いられており、特にフルフラールは、一般のア
ルデヒド類と同様に有毒な物質であるため、これらの化
学工場跡地などの土壌汚染の修復に適用できる。
【０００３】
【従来の技術】フェノールの分解手段としては、熱によ
るもの、オゾンによるもの等がある。しかし、コスト、
操作性、更に土壌中ということを考慮すると微生物によ
る分解が強く示唆されるが、フェノール分解能を有する
微生物には、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、アシネトバ
クター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、などの細
菌、オーレオバシディウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕ
ｍ）属、フサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、などの真
菌、及びトリコスポロン（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ）
属、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属などの酵母が知られ
ている。これらの状況は、『微生物による有機化合物の
変換』（学会出版センター）に詳しい。特に、本発明に
かかわる公知のシユードモナス属細菌としては、プチダ
（ｐｕｔｉｄａ）種が挙げられる。またクレゾールに関
しても、クレゾール分解能を有する微生物で単離された
例は皆無に近い。耐性株としても、シュードモナスＱＴ
３１株（Ｃ．マスキューら、バイオテクノロジー・レタ
ーズ、第９巻、第９号、６５５〜６６０頁、１９８７
年）などのシュードモナス属に属する細菌等がわずかに
報告されるにとどまっている。
るもの、オゾンによるもの等がある。しかし、コスト、
操作性、更に土壌中ということを考慮すると微生物によ
る分解が強く示唆されるが、フェノール分解能を有する
微生物には、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、アシネトバ
クター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、などの細
菌、オーレオバシディウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕ
ｍ）属、フサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、などの真
菌、及びトリコスポロン（Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ）
属、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属などの酵母が知られ
ている。これらの状況は、『微生物による有機化合物の
変換』（学会出版センター）に詳しい。特に、本発明に
かかわる公知のシユードモナス属細菌としては、プチダ
（ｐｕｔｉｄａ）種が挙げられる。またクレゾールに関
しても、クレゾール分解能を有する微生物で単離された
例は皆無に近い。耐性株としても、シュードモナスＱＴ
３１株（Ｃ．マスキューら、バイオテクノロジー・レタ
ーズ、第９巻、第９号、６５５〜６６０頁、１９８７
年）などのシュードモナス属に属する細菌等がわずかに
報告されるにとどまっている。
【０００４】一方前記の各種フラン類を一つの微生物
で、分解する技術は知られておらずフルフラールに関し
てわずかに報告例があるに過ぎない。Ｓ．Ｍｏｒｉｍｏ
ｔｏ，Ｍ．Ｍｕｒａｋａｍｉ（１９６７）Ｊ．Ｆｅｒｍ
ｅｎｔ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．の例や、Ａｃｅｔｏｂａｃｔ
ｅｒ，Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ，Ｂｒｅｖｉｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ，Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，Ｍｉｃ
ｒｏｃｏｃｃｕｓ．などによるフルフラールの２フラン
カルボン酸への変換に関して旧ソ連邦の特許があるに留
まっている。（微生物による有機化合物の変換；学会出
版センター）
で、分解する技術は知られておらずフルフラールに関し
てわずかに報告例があるに過ぎない。Ｓ．Ｍｏｒｉｍｏ
ｔｏ，Ｍ．Ｍｕｒａｋａｍｉ（１９６７）Ｊ．Ｆｅｒｍ
ｅｎｔ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．の例や、Ａｃｅｔｏｂａｃｔ
ｅｒ，Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ，Ｂｒｅｖｉｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ，Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，Ｍｉｃ
ｒｏｃｏｃｃｕｓ．などによるフルフラールの２フラン
カルボン酸への変換に関して旧ソ連邦の特許があるに留
まっている。（微生物による有機化合物の変換；学会出
版センター）
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】先に述べた如くフェノ
ールやフルフラールの分解能を有する菌が知られていな
い訳ではないが、現実の汚染サイトではこれらの化合物
の一種だけの汚染は、むしろ稀であり、他のフェノール
性物質やフラン類を含んでいる場合が多い。しかも土壌
中という特殊な環境で活性が求められるなど実用上の諸
条件を満たし、かつ十分な分解能を持つかと言う観点で
眺めてみると現在の既知菌種の範囲では十分といえず更
なる菌種の獲得が必要である。新たな菌種は、当然既知
菌種と成育条件等が異なりこれは菌の応用範囲や利用形
態が豊富なものとなることを意味する。例えば、その例
として抗生物質耐性、糖の利用性などがある。前述の化
合物を含む土壌の処理を想定した場合、処理に用いる菌
は分解能もさることながらダメージを受けにくく劣悪な
環境でも成育できる、すなわち多くの抗生物質に対し耐
性を持ちなおかつ幾つかの糖に対して資化能力をもち合
わせている方が良好に成育する可能性が高く分解能も高
水準が維持でき得る。このように、従来菌が持ち得なか
った高い能力を保有した新菌を見出すことが実用上観点
から強く求められている。
ールやフルフラールの分解能を有する菌が知られていな
い訳ではないが、現実の汚染サイトではこれらの化合物
の一種だけの汚染は、むしろ稀であり、他のフェノール
性物質やフラン類を含んでいる場合が多い。しかも土壌
中という特殊な環境で活性が求められるなど実用上の諸
条件を満たし、かつ十分な分解能を持つかと言う観点で
眺めてみると現在の既知菌種の範囲では十分といえず更
なる菌種の獲得が必要である。新たな菌種は、当然既知
菌種と成育条件等が異なりこれは菌の応用範囲や利用形
態が豊富なものとなることを意味する。例えば、その例
として抗生物質耐性、糖の利用性などがある。前述の化
合物を含む土壌の処理を想定した場合、処理に用いる菌
は分解能もさることながらダメージを受けにくく劣悪な
環境でも成育できる、すなわち多くの抗生物質に対し耐
性を持ちなおかつ幾つかの糖に対して資化能力をもち合
わせている方が良好に成育する可能性が高く分解能も高
水準が維持でき得る。このように、従来菌が持ち得なか
った高い能力を保有した新菌を見出すことが実用上観点
から強く求められている。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記観点
からフェノール類やフラン類を分解する新たな菌種を探
索した結果、シロアリ腸内から、土壌中のフェノール、
クレゾール更にはフラン類を同時に分解し更に抗生物質
耐性、糖の利用性に優れた菌を見出し、本発明の完成に
至った。本発明に用いたシロアリは、タカサゴシロアリ
（Ｎａｓｕｔｉｔｅｒｍｅｓ ｔａｋａｓａｇｏｅｎｓ
ｉｓ）に属し、沖縄・八重山諸島に分布するものであ
る。そして本発明の一実施態様にかかる土壌修復法は、
フェノール系化合物およびフラン系化合物の少なくとも
一方で汚染された汚染土壌の修復法であって、該汚染土
壌にフェノール系化合物およびフラン系化合物の分解能
を有するシュードモナス・セパシアＫＫ０１を接触させ
て該土壌中に含まれるフェノール系化合物およびフラン
系化合物の少なくとも一方を分解する過程を有すること
を特徴とするものである。
からフェノール類やフラン類を分解する新たな菌種を探
索した結果、シロアリ腸内から、土壌中のフェノール、
クレゾール更にはフラン類を同時に分解し更に抗生物質
耐性、糖の利用性に優れた菌を見出し、本発明の完成に
至った。本発明に用いたシロアリは、タカサゴシロアリ
（Ｎａｓｕｔｉｔｅｒｍｅｓ ｔａｋａｓａｇｏｅｎｓ
ｉｓ）に属し、沖縄・八重山諸島に分布するものであ
る。そして本発明の一実施態様にかかる土壌修復法は、
フェノール系化合物およびフラン系化合物の少なくとも
一方で汚染された汚染土壌の修復法であって、該汚染土
壌にフェノール系化合物およびフラン系化合物の分解能
を有するシュードモナス・セパシアＫＫ０１を接触させ
て該土壌中に含まれるフェノール系化合物およびフラン
系化合物の少なくとも一方を分解する過程を有すること
を特徴とするものである。
【０００７】本発明の細菌の分離は後に示す実施例１に
記載の通りに行ない、分離して得た菌株の菌学的性質は
以下に示す通りである。 Ａ．形態的性状 （１）グラム染色：陰性 （２）細胞の大きさおよび形：長さ１．０〜２．０μ
ｍ、幅０．５μｍ前後の桿菌 （３）運動性：あり （４）鞭毛： Ｂ．各種培地における成育状況 Ｃ．生理的性質 （１）好気性、嫌気性の区別 偏性好気性 （２）糖の分解様式 酸化型 （３）オキシダーゼの生成 ＋ （４）硝酸塩の還元 ＋ （５）硫化水素の生成 − （６）インドールの生成 − （７）ウレアーゼの生成 − （８）ゼラチンの液化 − （９）アルギニンの加水分解 − （１０）リジンの脱炭酸 ＋ （１１）オルニチンの脱炭酸 − （１２）クエン酸の利用 ＋ （１３）メチルカルビノールアセチル反応（ＶＰ反応） − （１４）トリプトファンデアミナーゼの検出 − （１５）ＯＮＰＧ − （１６）炭水化物類の利用性 ブドウ糖 ＋ 果糖 ＋ 麦芽糖 ＋ ガラクトース ＋ キシロース ＋ マンニット ± しょ糖 − 乳糖 ＋ エスクリン − イノシット − ソルビット − ラムノース − メリビオース − アミグダリン − Ｌ＋アラビノース ＋ 以上の諸性質から、本菌株は、シゥードモナス属に属し
ていることは明らかであり、シュードモナス・セパシア
に属せしめるのが適当であると認められた。
記載の通りに行ない、分離して得た菌株の菌学的性質は
以下に示す通りである。 Ａ．形態的性状 （１）グラム染色：陰性 （２）細胞の大きさおよび形：長さ１．０〜２．０μ
ｍ、幅０．５μｍ前後の桿菌 （３）運動性：あり （４）鞭毛： Ｂ．各種培地における成育状況 Ｃ．生理的性質 （１）好気性、嫌気性の区別 偏性好気性 （２）糖の分解様式 酸化型 （３）オキシダーゼの生成 ＋ （４）硝酸塩の還元 ＋ （５）硫化水素の生成 − （６）インドールの生成 − （７）ウレアーゼの生成 − （８）ゼラチンの液化 − （９）アルギニンの加水分解 − （１０）リジンの脱炭酸 ＋ （１１）オルニチンの脱炭酸 − （１２）クエン酸の利用 ＋ （１３）メチルカルビノールアセチル反応（ＶＰ反応） − （１４）トリプトファンデアミナーゼの検出 − （１５）ＯＮＰＧ − （１６）炭水化物類の利用性 ブドウ糖 ＋ 果糖 ＋ 麦芽糖 ＋ ガラクトース ＋ キシロース ＋ マンニット ± しょ糖 − 乳糖 ＋ エスクリン − イノシット − ソルビット − ラムノース − メリビオース − アミグダリン − Ｌ＋アラビノース ＋ 以上の諸性質から、本菌株は、シゥードモナス属に属し
ていることは明らかであり、シュードモナス・セパシア
に属せしめるのが適当であると認められた。
【０００８】シュードモナス・セパシアは、多くの抗生
物質に耐性を示すことで知られている。
物質に耐性を示すことで知られている。
【０００９】しかしながら、後記する実施例からも明ら
かなように、本菌は、卓越したフェノール・クレゾール
分解能、更にはフラン類分解能をも合わせ持っている。
このような菌は、従来の既知シュードモナス・セパシア
には存在しないことから、新菌株と認定し、Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ ＫＫ０１と命名して工
業技術院微生物工業技術研究所に寄託した（寄託番号：
Ｐ−１２８６９号）。この寄託は、平成５年３月９日付
で国際寄託当局である通商産業省工業技術院生命工学工
業技術研究所（旧名：通商産業省工業技術院微生物工業
技術研究所）におけるブタペスト条約に基づく国際寄託
（受託番号：ＦＥＲＭ ＢＰ−４２３５）に移管され
た。本菌を自然に、もしくは人工的手段によって変異さ
せて得られる変異株であっても、すべて本発明に包含さ
れる。本菌の培養は、通常シュードモナスの培養に用い
られる培地で行なえばよく、炭素源としては、フェノー
ル単一でも十分成育するが、グルコースなどを適宜用い
ることができる。また窒素源としては、例えば酵母エキ
ス、ペプトンなどを単独または組み合わせて用いること
ができる。その他必要に応じてリン酸水素第一カリウ
ム、塩化アンモニウムなどを添加することができる。培
養は、好気条件下で行なうことができ、液状でも固状で
もよい。培養温度は、３０度近辺が望ましい。
かなように、本菌は、卓越したフェノール・クレゾール
分解能、更にはフラン類分解能をも合わせ持っている。
このような菌は、従来の既知シュードモナス・セパシア
には存在しないことから、新菌株と認定し、Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ ＫＫ０１と命名して工
業技術院微生物工業技術研究所に寄託した（寄託番号：
Ｐ−１２８６９号）。この寄託は、平成５年３月９日付
で国際寄託当局である通商産業省工業技術院生命工学工
業技術研究所（旧名：通商産業省工業技術院微生物工業
技術研究所）におけるブタペスト条約に基づく国際寄託
（受託番号：ＦＥＲＭ ＢＰ−４２３５）に移管され
た。本菌を自然に、もしくは人工的手段によって変異さ
せて得られる変異株であっても、すべて本発明に包含さ
れる。本菌の培養は、通常シュードモナスの培養に用い
られる培地で行なえばよく、炭素源としては、フェノー
ル単一でも十分成育するが、グルコースなどを適宜用い
ることができる。また窒素源としては、例えば酵母エキ
ス、ペプトンなどを単独または組み合わせて用いること
ができる。その他必要に応じてリン酸水素第一カリウ
ム、塩化アンモニウムなどを添加することができる。培
養は、好気条件下で行なうことができ、液状でも固状で
もよい。培養温度は、３０度近辺が望ましい。
【００１０】
【実施例】実施例１ シロアリ腸内由来微生物群からの
シュードモナス・セパシアＫＫ０１株の分離 １）タカサゴシロアリ（Ｎａｓｕｔｉｔｅｒｍｅｓ ｔ
ａｋａｓａｇｏｅｎｓｉｓ）のうちハタラキシロアリを
３０匹程度シャーレーに取る。
シュードモナス・セパシアＫＫ０１株の分離 １）タカサゴシロアリ（Ｎａｓｕｔｉｔｅｒｍｅｓ ｔ
ａｋａｓａｇｏｅｎｓｉｓ）のうちハタラキシロアリを
３０匹程度シャーレーに取る。
【００１１】２）エチルアルコール（９５％）をシャー
レーに注ぎシロアリ表面を滅菌する。
レーに注ぎシロアリ表面を滅菌する。
【００１２】３）Ｍ９溶液でシロアリを洗い、エチルア
ルコールを取り除く。（２回） ４）Ｍ９溶液中でシロアリを擂り潰して無菌的に濾液を
取る。
ルコールを取り除く。（２回） ４）Ｍ９溶液中でシロアリを擂り潰して無菌的に濾液を
取る。
【００１３】５）上記溶液の一部を培養液（０．０５％
フェノール、０．０５％酵母エキス、Ｍ９）に接種し３
０度で培養を行う。
フェノール、０．０５％酵母エキス、Ｍ９）に接種し３
０度で培養を行う。
【００１４】６）上記培養液を０．０５％フェノール、
１．２％寒天、Ｍ９からなるフェノールを唯一の炭素源
とする寒天培地に塗布し３０度で培養する。
１．２％寒天、Ｍ９からなるフェノールを唯一の炭素源
とする寒天培地に塗布し３０度で培養する。
【００１５】７）良好に成育したシュードモナス・セパ
シアＫＫ０１のコロニーを得た。
シアＫＫ０１のコロニーを得た。
【００１６】実施例２ シロアリ腸内細菌によるフェノ
ール系化合物汚染土壌の修復 １）タカサゴシロアリ（Ｎａｓｕｔｉｔｅｒｍｅｓ ｔ
ａｋａｓａｇｏｅｎｓｉｓ）のうちハタラキシロアリを
３０匹程度シャーレーに取る。
ール系化合物汚染土壌の修復 １）タカサゴシロアリ（Ｎａｓｕｔｉｔｅｒｍｅｓ ｔ
ａｋａｓａｇｏｅｎｓｉｓ）のうちハタラキシロアリを
３０匹程度シャーレーに取る。
【００１７】２）エチルアルコール（９５％）をシャー
レーに注ぎシロアリ表面を滅菌する。
レーに注ぎシロアリ表面を滅菌する。
【００１８】３）Ｍ９溶液でシロアリを洗い、エチルア
ルコールを取り除く。（２回） ４）Ｍ９溶液中でシロアリを擂り潰して濾過して溶液を
得る。
ルコールを取り除く。（２回） ４）Ｍ９溶液中でシロアリを擂り潰して濾過して溶液を
得る。
【００１９】５）上記溶液の１０ｍｌを試験土壌（１５
００ｐｐｍフェノール、５００ｐｐｍｏ−クレゾール、
５００ｐｐｍ ｐ−クレゾール、５００ｐｐｍクレゾー
ルを含む８０ｍｌ水溶液を滅菌済土壌５００ｇに拡散さ
せたもの）に接種し攪拌した後静置培養した。
００ｐｐｍフェノール、５００ｐｐｍｏ−クレゾール、
５００ｐｐｍ ｐ−クレゾール、５００ｐｐｍクレゾー
ルを含む８０ｍｌ水溶液を滅菌済土壌５００ｇに拡散さ
せたもの）に接種し攪拌した後静置培養した。
【００２０】６）土壌中のフェノール系化合物をＨＰＬ
Ｃ法により定量し、フェノール系化合物の除去率を実験
開始時のトータルの化合物を１．０としそれに対する比
率としてもとめた。この結果を図１に示す。この表示の
しかたは図２から図８まで同じである。 実施例３ シュードモナス・セパシアＫＫ０１によるフ
ェノール系化合物汚染土壌の修復シュード モナス・セパシアＫＫ０１の単一コロニーを、
液体培地５ｍｌ（０．０５％フェノール、０．０５％酵
母エキス、Ｍ９）に接種し３０度で培養を行なった。
Ｏ．Ｄ．０．７を越えた時点で実施例２の５）で用いた
試験土壌に培養液を注ぎ攪拌した後室温で静置培養を行
なった。土壌中のフェノール系化合物をＨＰＬＣ法によ
り定量し、除去率を経日的に求めた。この結果を図２に
示す。 実施例４ シロアリ腸内細菌を用い、木粉を併用してフ
ェノール系化合物汚染土壌の修復 １）実施例２の４）で得た溶液１０ｍｌを試験土壌（１
５００ｐｐｍ フェノール、５００ｐｐｍ ｏ−クレゾ
ール、５００ｐｐｍ ｐ−クレゾール、５００ｐｐｍ
クレゾールを含む水溶液８０ｍｌ及び６０メッシュブナ
木粉５０ｇを滅菌済土壌５００ｇに拡散させたもの）に
接種し攪拌した後静置培養した。
Ｃ法により定量し、フェノール系化合物の除去率を実験
開始時のトータルの化合物を１．０としそれに対する比
率としてもとめた。この結果を図１に示す。この表示の
しかたは図２から図８まで同じである。 実施例３ シュードモナス・セパシアＫＫ０１によるフ
ェノール系化合物汚染土壌の修復シュード モナス・セパシアＫＫ０１の単一コロニーを、
液体培地５ｍｌ（０．０５％フェノール、０．０５％酵
母エキス、Ｍ９）に接種し３０度で培養を行なった。
Ｏ．Ｄ．０．７を越えた時点で実施例２の５）で用いた
試験土壌に培養液を注ぎ攪拌した後室温で静置培養を行
なった。土壌中のフェノール系化合物をＨＰＬＣ法によ
り定量し、除去率を経日的に求めた。この結果を図２に
示す。 実施例４ シロアリ腸内細菌を用い、木粉を併用してフ
ェノール系化合物汚染土壌の修復 １）実施例２の４）で得た溶液１０ｍｌを試験土壌（１
５００ｐｐｍ フェノール、５００ｐｐｍ ｏ−クレゾ
ール、５００ｐｐｍ ｐ−クレゾール、５００ｐｐｍ
クレゾールを含む水溶液８０ｍｌ及び６０メッシュブナ
木粉５０ｇを滅菌済土壌５００ｇに拡散させたもの）に
接種し攪拌した後静置培養した。
【００２１】２）土壌中のフェノール系化合物をＨＰＬ
Ｃ法により定量し、フェノール系化合物の除去率をもと
めた。この結果を図３に示す。 実施例５ シュードモナス・セパシアＫＫ０１により木
粉を併用してフェノール系化合物汚染土壌の修復シュード モナス・セパシアＫＫ０１の単一コロニーを、
液体培地５ｍｌ（０．０５％フェノール、０．０５％酵
母エキス、Ｍ９）に接種し３０度で培養を行なった。
Ｏ．Ｄ．０．７を越えた時点で実施例４と同様に準備し
た試験土壌に培養液を注ぎ攪拌した後室温で静置培養を
行なった。土壌中のフェノール系化合物をＨＰＬＣ法に
より定量し、除去率を経日的に求めた。この結果を図４
に示す。 実施例６ シロアリ腸内細菌によるフラン系化合物汚染
土壌の修復 １）実施例２の４）で得た溶液１０ｍｌを試験土壌（テ
トラヒドロフラン、フルフラール、フルフリルアルコー
ル、クマリン各々１０００ｐｐｍ水溶液２０ｍｌを滅菌
済土壌５００ｇに拡散させたもの）に接種し攪拌した後
静置培養した。 ２）土壌中のフラン系化合物をＨＰＬＣ法により定量
し、除去率をもとめた。この結果を図５に示す。 実施例７ シュードモナス・セパシアＫＫ０１によるフ
ラン系化合物汚染土壌の修復シュード モナス・セパシアＫＫ０１の単一コロニーを、
液体培地５ｍｌ（０．０５％酵母エキス、Ｍ９）に接種
し３０度で培養を行なった。Ｏ．Ｄ．０．７を越えた時
点で実施例６と同様に準備した試験土壌に培養液を注ぎ
攪拌した後室温で静置培養を行なった。土壌中のフラン
系化合物をＨＰＬＣ法により定量し、除去率をもとめ
た。この結果を図６に示す。 実施例８ シロアリ腸内細菌によるフラン系化合物汚染
土壌を木粉を併用して修復 １）実施例２の４）で得た溶液１０ｍｌを試験土壌（テ
トラヒドロフラン、フルフラール、フルフリルアルコー
ル、クマラン各々１０００ｐｐｍ水溶液２０ｍｌ及び６
０メッシュブナ木粉５０ｇを滅菌済土壌５００ｇに拡散
させたもの）に接種し攪拌した後静置培養した。
Ｃ法により定量し、フェノール系化合物の除去率をもと
めた。この結果を図３に示す。 実施例５ シュードモナス・セパシアＫＫ０１により木
粉を併用してフェノール系化合物汚染土壌の修復シュード モナス・セパシアＫＫ０１の単一コロニーを、
液体培地５ｍｌ（０．０５％フェノール、０．０５％酵
母エキス、Ｍ９）に接種し３０度で培養を行なった。
Ｏ．Ｄ．０．７を越えた時点で実施例４と同様に準備し
た試験土壌に培養液を注ぎ攪拌した後室温で静置培養を
行なった。土壌中のフェノール系化合物をＨＰＬＣ法に
より定量し、除去率を経日的に求めた。この結果を図４
に示す。 実施例６ シロアリ腸内細菌によるフラン系化合物汚染
土壌の修復 １）実施例２の４）で得た溶液１０ｍｌを試験土壌（テ
トラヒドロフラン、フルフラール、フルフリルアルコー
ル、クマリン各々１０００ｐｐｍ水溶液２０ｍｌを滅菌
済土壌５００ｇに拡散させたもの）に接種し攪拌した後
静置培養した。 ２）土壌中のフラン系化合物をＨＰＬＣ法により定量
し、除去率をもとめた。この結果を図５に示す。 実施例７ シュードモナス・セパシアＫＫ０１によるフ
ラン系化合物汚染土壌の修復シュード モナス・セパシアＫＫ０１の単一コロニーを、
液体培地５ｍｌ（０．０５％酵母エキス、Ｍ９）に接種
し３０度で培養を行なった。Ｏ．Ｄ．０．７を越えた時
点で実施例６と同様に準備した試験土壌に培養液を注ぎ
攪拌した後室温で静置培養を行なった。土壌中のフラン
系化合物をＨＰＬＣ法により定量し、除去率をもとめ
た。この結果を図６に示す。 実施例８ シロアリ腸内細菌によるフラン系化合物汚染
土壌を木粉を併用して修復 １）実施例２の４）で得た溶液１０ｍｌを試験土壌（テ
トラヒドロフラン、フルフラール、フルフリルアルコー
ル、クマラン各々１０００ｐｐｍ水溶液２０ｍｌ及び６
０メッシュブナ木粉５０ｇを滅菌済土壌５００ｇに拡散
させたもの）に接種し攪拌した後静置培養した。
【００２２】２）土壌中のフラン系化合物をＨＰＬＣ法
により定量し、除去率をもとめた。この結果を図７に示
す。 実施例９ シュードモナス・セパシアＫＫ０１によるフ
ラン系化合物汚染土壌を木粉を併用して修復シュード モナス・セパシアＫＫ０１の単一コロニーを、
液体培地５ｍｌ（０．０５％酵母エキス、Ｍ９）に接種
し３０度で培養を行なった。Ｏ．Ｄ．０．７を越えた時
点で実施例８と同様に準備した試験土壌に培養液を注ぎ
攪拌した後室温で静置培養を行なった。土壌中のフラン
系化合物をＨＰＬＣ法により定量し、除去率を経日的に
求めた。この結果を図８に示す。
により定量し、除去率をもとめた。この結果を図７に示
す。 実施例９ シュードモナス・セパシアＫＫ０１によるフ
ラン系化合物汚染土壌を木粉を併用して修復シュード モナス・セパシアＫＫ０１の単一コロニーを、
液体培地５ｍｌ（０．０５％酵母エキス、Ｍ９）に接種
し３０度で培養を行なった。Ｏ．Ｄ．０．７を越えた時
点で実施例８と同様に準備した試験土壌に培養液を注ぎ
攪拌した後室温で静置培養を行なった。土壌中のフラン
系化合物をＨＰＬＣ法により定量し、除去率を経日的に
求めた。この結果を図８に示す。
【００２３】
【発明の効果】本発明によって、従来不可能だったフェ
ノール系化合物またはフラン系化合物による汚染土壌の
修復が可能になった。
ノール系化合物またはフラン系化合物による汚染土壌の
修復が可能になった。
【図１】実施例２におけるフェノール系化合物の除去率
を経日的に示す図である。
を経日的に示す図である。
【図２】実施例３におけるフェノール系化合物の除去率
を経日的に示す図である。
を経日的に示す図である。
【図３】実施例４における木材成分を併用したフェノー
ル系化合物の除去率を経日的に示す図である。
ル系化合物の除去率を経日的に示す図である。
【図４】実施例５における木材成分を併用したフェノー
ル系化合物の除去率を経日的に示す図である。
ル系化合物の除去率を経日的に示す図である。
【図５】実施例６におけるフラン系化合物の除去率を経
日的に示す図である。
日的に示す図である。
【図６】実施例７におけるフラン系化合物の除去率を経
日的に示す図である。
日的に示す図である。
【図７】実施例８における木材成分を併用したフラン系
化合物の除去率を経日的に示す図である。
化合物の除去率を経日的に示す図である。
【図８】実施例９における木材成分を併用したフラン系
化合物の除去率を経日的に示す図である。
化合物の除去率を経日的に示す図である。
フロントページの続き (56)参考文献 特公 平８−24589（ＪＰ，Ｂ２) 特公 平４−36758（ＪＰ，Ｂ２) 特公 平３−49271（ＪＰ，Ｂ２) 特許2566708（ＪＰ，Ｂ２) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) B09B 3/00 A62D 3/00 C12N 1/20 ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)
Claims (3)
- 【請求項１】 フェノール系化合物およびフラン系化合
物の少なくとも一方で汚染された汚染土壌の修復法であ
って、該汚染土壌にフェノール系化合物およびフラン系
化合物の分解能を有するシュードモナス・セパシアＫＫ
０１を接触させて該土壌中に含まれるフェノール系化合
物およびフラン系化合物の少なくとも一方を分解する過
程を有することを特徴とする汚染土壌の修復法。 - 【請求項２】 該フェノール系化合物が、フェノール、
ｏ−クレゾール、ｍ−クレゾールおよびｐ−クレゾール
から選ばれる少なくとも１つである請求項１記載の汚染
土壌の修復法。 - 【請求項３】 該フラン系化合物が、テトラヒドロフラ
ン、フルフラール、フルフリルアルコールおよびクマラ
ンから選ばれる少なくとも１つである請求項１記載の汚
染土壌の修復方法。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20677792A JP3234640B2 (ja) | 1992-08-03 | 1992-08-03 | 土壌修復法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20677792A JP3234640B2 (ja) | 1992-08-03 | 1992-08-03 | 土壌修復法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0655153A JPH0655153A (ja) | 1994-03-01 |
| JP3234640B2 true JP3234640B2 (ja) | 2001-12-04 |
Family
ID=16528917
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20677792A Expired - Fee Related JP3234640B2 (ja) | 1992-08-03 | 1992-08-03 | 土壌修復法 |
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| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3234640B2 (ja) |
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| CN102553891B (zh) * | 2012-01-19 | 2014-01-22 | 河北大学 | 一种利用超声波消除土霉素药渣中残留药物成分的方法 |
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| CN117402787A (zh) * | 2023-10-24 | 2024-01-16 | 广东省环保研究总院有限公司 | 一种降低抗生素抗性基因含量的修复材料及方法和应用 |
-
1992
- 1992-08-03 JP JP20677792A patent/JP3234640B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0655153A (ja) | 1994-03-01 |
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