JP3211914B2 - 革および毛皮をライミングする方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ライミング水浴がアル
カリプロテアーゼと同時にチオ尿素ジオキシドを含有す
る革および毛皮をライミングする方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】いわゆるビームハウスの過程でたいてい
アルカリ性工程、脱毛のために必要な条件を造り必要な
剥皮を引き起す灰汁槽が適用される（Kirk-Othmer Ency
clopedia of chemical Technology第１版、第８巻、２
９１〜２９６、Interscience; Ullmann's Encyclopaedi
e der Techn. Chemie, 第３版、第１１巻、頁５６０、
第４版、第１６巻、頁１１８〜１１９； F. Stather, G
erberei Chemie und Gerbereitechnologie, Akademie-
出版、Berlin 1967）。実際にはすべていわゆるシャー
プにしたライミング液で、主として水酸化カルシウムお
よび硫化ナトリウムの組合せで作業する。個々における
工程の実施は、毛を破壊または取得すべきかどうかに左
右される。特に無機の硫化物との取扱いで必然的に伴う
危険を色々のやり方で回避しようとした。硫化水素を遊
離することができる条件の回避を除けば、まだ新しい時
期での興味は酵素によるライミング法に向っていた（E.
Pfleiderer U.R. Reiner in H.J. Rehm & G.Reed Ed.,
Biotechnology Vol. 6h, Pg. 730〜743, VCH, Weinheim
1988）。その際主として蛋白質分解の酵素〔Ｅ．Ｃ．
３．４〕それと並んでなおリパーゼ〔Ｅ．Ｃ．３．１．
１．３〕およびアミラーゼ〔Ｅ．Ｃ．３．２．１〕が使
用される。

【０００３】排水中の危険の可能性ある硫化物の含有率
を低下させるためには、チオ化合物、アミンおよびハイ
ドロトロープの成分に応じた使用が提案された。硫黄化
合物のみで例えば脱毛を行うことはできる。しかしこの
事実は問題の解決を意味するものでなく、確かにまたこ
の物質も排水を汚染し悪臭公害に至る。酵素による脱毛
は依然として、主として小動物毛皮の際および羊毛取得
のため、ただ限られた意味しかなかった。それに対して
大きい家畜の革の際の酵素による脱毛は、第一に当時不
完全な脱毛作用のためおよびコラーゲン一粒起膜を損傷
するためないしはあまり激しい皮膚物質破壊のため行わ
れなかった。またライミングにおけるアルカリプロテア
ーゼの成分に応じた使用は硫化物の僅少な量と一緒に心
配のないものではない。こうしてたしかに硫化物成分は
酵素使用により明らかに低下せしめることができ非常に
良好な面積収率を殆ど瘢痕組織なしに得るが、しかし革
は粒起性、ゆるんだショルダー構造および粗い、一部ヌ
ーバックされた瘢痕形の傾向がある。

【０００４】少し前にはチオ尿素ジオキシド（ＴＨＤ
Ｏ）ないしはホルムアミジンスルフィン酸を硫化物代替
物として使用することが提案された（オーストリア特許
第３８１９５２号明細書、ヨーロッパ特許公開第１９７
９１８号明細書）。この化合物はシステインに対し極め
て高い還元性を有し、その結果０．１〜１重量％の配量
で酸化カルシウムないしは炭酸カルシウムと一緒に申し
分ない脱毛を引き起す。該化合物はかなり無臭で毛の取
得の程度は純粋なスルフィドライミングの場合よりも明
らかに良い。その上該化合物は、良好な生物学的分解性
であるから、僅かな排水毒性である。これらの長所は比
較的高価に直面しかつ調査結果では、そうして製造され
た革は従来のライミングで処理した製品の最適な柔軟性
を持っていないということである。これらの理由はおそ
らく、これまでチオ尿素ジオキシドを純粋な使用に徹し
なかったことにあろう。このため新規の提案は、ＴＨＤ
Ｏをハイドロトロープで膨潤を軽減する物質と、例え
ば、相応するアルカリ量の際所望の剥皮を達成するため
にアミンを使用する方向に進んでいる（ヨーロッパ特許
公開第３０６４７４号明細書）。一部ではＴＨＤＯを別
に添加物なしにその漂白作用のため再なめしで、通常皮
の重量に対して０．３〜０．４重量％の量で使用する。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の議題
は、既述の現状技術にかんがみて、伝統的ライミング方
法の長所とチオ尿素ジオキシド使用の有利な効果を一つ
にする方法を提供することにあった。特にその方法およ
びその際使用する作用原理の生態系協調に留意すること
であった。

【０００６】

【課題を解決するための手段】前記課題は本発明による
ライミング法により、ライミング水浴はｐＨ値１０〜１
４、有利には１２〜１４の範囲でチオ尿素ジオキシドお
よびエラスターゼ活性を有するアルカリプロテアーゼＡ
Ｐを含有させることにより解決される。有利にはライミ
ング浴は０．３〜２重量％、特に０．５〜１重量％のチ
オ尿素ジオキシドを１種以上のアルカリプロテアーゼＡ
Ｐの有効な量と一緒に含有する。当該発明の意味でのラ
イミング法とは毛をほぐすこと、本来のライミング、剥
皮および場合により該ライミングを包含する。重要なこ
とは、本発明による方法においては無機の硫化物ないし
は硫化物イオンの存在および反応条件下で硫化物を発生
する薬剤を断念することができることである。かくして
ＴＨＤＯおよびアルカリプロテアーゼからの本発明によ
る組合せは硫化物の無いライミングおよび／または該ラ
イミングのためにもまた硫化物の乏しいライミング／該
ライミングのためにも極めてすぐれている。

【０００７】エラスターゼ活性を有するアルカリプロテ
アーゼＡＰエラスターゼ〔Ｅ．Ｃ．３．４．２１．１
１〕を特徴付けるため、大動脈のエラスチン繊維を加水
分解するその能力を引合に出す（W. Appel H.U. Berg M
eyer Ed. Methoden der Engymatischen Analyse, 3. Au
flage, Bd.I., S. 1081〜1085 Verlag Chemie 1974; J.
Mandel S.P. Cholowick U.N.O. Kaplan: Methods in En
zymology, Bd. V, S. 665, Academic Press 1962)。

【０００８】また結晶した形でもエラスターゼ製造は初
めから不均一であると做なさなければならない。最も純
粋な製品であってもなお一部蛋白分解性の、非エラスト
分解の活性を含有している。構造および独特な活性にお
いてエラターゼはトリプシンおよびキモトリプシンに似
ていると思われる。定量的決定はエラスチンの分解をベ
ースとする（蛋白質分解もまた粘液溶解も）。決定方法
としては主として、オルシン（ないしはコンゴーレッ
ド、ジメチルアミノナフタリンスルホン酸）またはフル
オレシンのような色素で負わせるエラスチンの分解が引
用される。

【０００９】エラスターゼ活性を有する本発明により使
用されるアルカリプロテアーゼＡＰはアルカリ性ｐＨ範
囲、一般にはｐＨ１２±２の範囲での最適作用により特
徴付けられる。

【００１０】他の源種を排除すべきでないけれども、特
にバクテリの形の、特にバシルの微生物は現在有利な出
発物質をなしている。その外に例えばフラボバクテリウ
ムエラストリチシウム、クロロトリジウムヒストリチシ
ウム、Ｓｔａｐｈ．エピデルミスが挙げられる。バシル
スタイプからアルカリプロテアーゼを製造する際、手が
かりとして、アルカリプロテアーゼ３０〜６０重量％、
エラスターゼ０．００２〜２重量を中性プロテアーゼお
よびコラーゲナーゼの外に得る（ソ連特許第８０２９０
９号明細書、Chem. Ahstr. 94,148 340x参照）。

【００１１】また近年アルカリエラスターゼも遺伝子操
作の生成物として、例えばアルカリエラスターゼ遺伝子
のアルカロフィレムバシルスからのクロニーングおよび
バシルスサブチリスでの発現により製造されている（特
開平２−７６５８６号公報、Chem. Ahstr. 115, 249 56
lc; y.ch. Tsai et al. Biochim. Biophys. Acta 1986,
883(3), 439-47, Appl. Envivon. Microbiol. 1988, 5
4(12) 3156〜61; Chem. Abstr. 110,, 110535a; R. Kan
eko et al. Japan. J. Bacteriol. 171(9)5232-36(198
9)）。最近の研究では、アルカロフィルバシルスＳｐ．
ＹａＢにより細胞外で作るアルカリエラスターゼＹａＢ
の単離およびＢ．サブチリスで遺伝子の発現が報告され
ている。また約５９％エラスターゼ活性を有するアルカ
リプロテアーゼはアスペルギルス（Ａ．変色性８３７）
からも取得された（Chem. Abstr.100, 66 560x参照）。
外の源種はペゾイドマンナースータイプ、例えばＰ．ア
エルギノサ（A.Lazdunski et al. Biochimie 1990, 72
(2-3) 147〜56）である。

【００１２】エラスターゼ活性の測定は当該発明の目的
のためには一部実験的に決められる方法により行った。
そこに示すようにエラスターゼの効果の一定の単位は以
下においてはエラスターゼ単位としてＥ．Ｕ．ｇｌｙで
表わす。その際定義として：エラスターゼ単位（Ｅ．
Ｕ．ｇｌｙ）に相応するのはトリニトロベンゾールスル
ホン酸定量のグリシン１マイクロモルの吸収光である：
分析条件：基質はエラスチン、緩衝液ｐＨ８中で３７℃
でその際毎分の吸収光上昇を評価する。酵素製剤ＡＰ中
の効果のある酵素の活性は本発明による方法では有利に
は一定の関係にある。

【００１３】この関係は以下のように計算によって定義
付けられる：アルカリプロテアーゼのプロテアーゼ活性
〔Ｌｏｅｈｌｅｉｎ−Ｖｏｌｈａｒｄ−単位（ＬＶ
Ｅ）〕を係数Ｆの千倍で除せば数値的に本発明の目的の
ために選ばれた単位Ｅ．Ｕ．ｇｌｙでエラスターゼ活性
が結果として生じる（実験の部参照）。係数Ｆは本発明
により０．６および２０、有利には１〜５の間にある。

【００１４】本発明によって使用できる酵素製剤ＡＰに
存在するアルカリプロテアーゼ〔Ｅ．Ｃ．３．４．２
１〕は通常のやり方で特徴付けられる（Ｋirk-othmer 3
rd. Ed. Vol. 9, pp. 199〜202, J. Wiley 1980; Ullma
nn's Encyclopedia of Industrial Chemistry Vol. A9,
pp. 409〜414, VCH 1987; L. Keay "process Biochem
istry 17〜21 (1971) 参照）。主としてセリンタイプ
に属するこれらのプロテアーゼはその最適作用を普通は
ｐＨ範囲約８〜１３で発揮する。特にバクテリアプロテ
アーゼ、特にバシルス系については、有利にはエラスタ
ーゼ活性を始めから持って来たようなものが挙げられ
る。しかしまた異なる源種のアルカリプロテアーゼも互
いに組合せることもできるが、その際エラスターゼ活性
は相応する添加物により持込まれる。

【００１５】このようなアルカリプロテアーゼとしては
とりわけバシルス系から取得された、特にＢ．スブチリ
ス、およびＢ．ホルムス、Ｂ．リヒニホルミス、Ｂ．ア
ルカロフィルス、Ｂ．ポリミキサ、Ｂ．メーセンテリシ
ウス、さらにストレプトマイセス系から取得され、例え
ばＳ．アルカロフィルスも挙げられる。

【００１６】アルカリバクテリア−プロテアーゼでの有
利な作業温度（これはしかし当該の場合では明らかに下
廻っていなければならない）は一般に４０〜６０℃で、
真菌プロテアーゼではむしろ２０〜４０℃にある。

【００１７】アルカリ真菌プロテアーゼとしてアスペル
ギルス系、例えばＡ.オリサエから、ペニシリニウム
系、例えばＰ.シアノフルブムまたはペシルミセスペル
シシヌスからのようなものが挙げられる。アルカリ真菌
プロテアーゼの活性は主としてｐＨ範囲８.０〜１１.０
にある。

【００１８】アルカリプロテアーゼの蛋白分解効果は一
般に行なわれているようにＡｎｓｏｎ−ヘモグロビン法
（M.L. Anson J. Gen. Physiol. 22 79(1939)）かない
しＬｏｅｈｌｅｉｎ−Ｖｏｌｈａｒｄ法（ＴＥＧＥＷＡ
により改良、Das Leder, 22,121〜126 1971参照）によ
り決定される。

【００１９】その際Ｌｏｅｈｌｅｉｎ−Ｖｏｌｈａｒｄ
単位は、カゼイン濾液２０ｍｌ中で加水分解生成物の上
昇が５．７５×１０~³ｍｌ０．１ｎＮａＯＨの等量に相
応して生起する酵素量に相応する。使用すべきプロテア
ーゼ活性は一般にはＫｇ革当り１０００および６０００
０ＬＶＥの間、有利にはＫｇ革当り２０００および１４
０００ＬＶＥの間にある。

【００２０】各活性により本発明による方法では、おお
まかな規則として４０００ＬＶＥを有するアルカリバク
テリアプロテアーゼ（バシルスアルカロフィリス）を使
用する際は使用する皮および毛皮の重量に対してプロテ
アーゼ量０．０５〜０．８重量％、有利には約０．１〜
０．３重量％で普通行う。

【００２１】蛋白質分解酵素ＡＰと一緒に本発明により
チオ尿素ジオキシド０．３〜２重量％、有利には０．５
〜１重量％を使用する。浴長さは使用する皮および毛皮
の重量に対してたいていは１００〜１２０重量％であ
る。

【００２２】浴のｐＨ範囲の調整は有利には石灰水化物
を用いて行なうが、しかし持ち分に応じまた苛性ソーダ
液および／またはソーダを使用することができる。さら
に剥皮を良好にするためには常法の薬剤、例えば有機ア
ミン、例えばジエタノールアミンおよび／またはハイド
ロープ物質例えば、尿素を共使用することができる。

【００２３】方法の実施 通例のように新鮮なまたは塩蔵の生皮から出発する。一
般には前処理のため汚れソーキングおよびメーンソーキ
ングを行なう（アメリカ特許第４３４４７６２号明細
書）。メーンソーキングは企業常法のように通常適当な
プロテアーゼおよび／または界面活性財を使用して９〜
１０のｐＨで４〜６時間以上行う。

【００２４】メーンソーキングの浴は通例は排出し新規
の浴で続行する。一般には酵素による反応は２０〜２８
℃の温度範囲、有利には２６℃で行う。アルカリ性ｐＨ
に、特に１０〜１３の範囲で調整され、酵素およびチオ
尿素ジオキシドを含有する浴を通常の反応容器、例えば
混合器、なめし槽等で、作動させながら、例えば充分な
時間、おおまかな規則として約９０分と言われている
が、皮および毛皮に、これらが充分無毛になるまで、作
用させる。

【００２５】次いで若干のアルカリ、例えば５０％の苛
性ソーダ液０．２重量％で再アルカリ性とすることがで
きる、その際有利には約３０分作動する。それに続いて
やや長い処理期間、合理的には短期間の作動／やや長い
静止、例えば、１分作動し、５９分静止し、の順番で、
これを例えば１８時間以上行う。引き続いて該浴を排出
する。毛は従来の硫化物石灰ライミングを使用する際よ
りも損傷が少ないことが明らかとなる。有利には、例え
ば各２００％の２５℃の水で１５分間２回再洗浄する。

【００２６】以後の化工は常法で、例えばなめし／脱石
灰／ピッケル／クロームなめしの順に行うことができ
る。

【００２７】有利な効果 本発明による方法はすばらしい柔軟な革の製造を可能に
するが、その際特に、ふつう分解する酵素を使用するに
かかわらず全く完全な瘢痕形成が存在することが強調さ
れる。総じて本結果は非常に驚くべきものと做すことが
できる、だがライミングで酵素を使用の際期待すべきヌ
バック化は、ショルダーにおける期待される瘢痕性と同
様起らない。

【００２８】本発明による方法の枠内で酵素を使用する
ことによりチオ尿素ジオキシドの必要とする使用量を明
らかに減少させることができる。かくしてライミングに
おけるチオ尿素ジオキシドおよびアルカリ性プロテアー
ゼとの組合せはエコロジー的に特に有利なライミング方
法を可能にし、これが充分確実に使用できる高い皮革品
質と結び付く。エコロジー的利点は第一に良好な毛収得
およびそれによって排水で僅かなＣＳＢ負荷同様にまた
硫化物の各使用の回避にある。

【００２９】以下の例は本発明を詳細に説明するために
役立つ。

【００３０】

【実施例】

例１〜４： 生皮：塩蔵のないしは新しいリンド皮、重量クラス３０
〜３９Ｋｇ（シバルツブント牛）１ｔ。

【００３１】前処理：汚れソーキングメーンソーキング
を企業通例のように界面活性剤を使用しpH９〜１０で４
〜６時間行う。メーンソーキング浴を排出し全部の例で
新規の浴でさらに加工した。

【００３２】全パーセントのデータは塩ないし生皮重量
に対しての重量％を表わす。

【００３３】例１： 生皮： 塩蔵 牛生皮１ｔ ライミング 水、２６℃ １５０．０％ 石灰 ３．５％ チオ尿素ジオキシド ０．８％ 蛋白質分解酵素、例えばバシルス ０．３％ アルカロフィルス、ｐＨ−最適効果 ｐＨ１０〜１３、４０００ＬＶＥ単位、エラスターゼ値６．４（Ｆ＝１．６） ９０分。皮がさらに、無毛になるで作動 ５０％苛性ソーダ液 ０．２％ ３０分作動 引き続いてさらに１８時間処理（１分作動、５９分静
止）。

【００３４】浴排出(毛は従来のスルフィド／カルク−
ライミングの際よりも少なく分解)。

【００３５】２５℃、２００％の水で１５分間洗浄２回
なめし液／脱カルキ／ピックリング／クロームなめしに
よる企業通例の加工。

【００３６】例２ 生皮： 新規の牛皮 １ｔ ライミング（毛採取）： 水 ２６℃ １００．０％ 石灰、９０分作動、ｐＨ１２〜１２．５ １．０％ チオ尿素ジオキシド １．０％ 蛋白質分解のアルカリ安定の酵素 ０．３％ （例えばバシルスアルカロフィルス） ｐＨ−効果最適 ｐＨ１０〜１３、４０００ＬＶＥ、エ
ラスターゼ値６．０（Ｆ＝１．５) ９０分、作動、ｐＨ１２〜１３、皮は無毛でその構造良
好となる；毛は浴ポンプ循環により篩を介して分離する
ことができる。

【００３７】 水 ２６℃ ＋５０．０％ 石灰水加物 ２．５％ １０分作動 ５０％苛性ソーダ液 ０．２％ さらに１５時間処理（自動機：２分作動、５８分静止）：浴排出 各２５０％の水で洗浄２回、２６℃、１５分。

【００３８】さらに企業通例加工。

【００３９】例３： 生皮： 塩蔵牛皮 １ｔ スルフィドの少ないライミング： 水 ２６℃ １５０．０％ 石灰水加物 ３．５％ ７２％ナトリウムスルフヒドラート ０．４％ ３０分作動 チオ尿素ジオキシド ０．４％ 蛋白質分解の、アルカリ安定の酵素 ０．１％ （例えば、バシルスアルカロフィルス）、４０００ＬＶＥ、エラスターゼ値６ ．８（Ｆ＝１．７） ６０分。皮無毛まで作動 ５０％苛性ソーダ液 ＋０．３％ さらに１８時間作動（自動機：２分作動、５８分静
止）。

【００４０】浴排出 各１５０％水２５℃で１５分間洗浄２回。

【００４１】さらに企業通例のように加工。

【００４２】例４：例えば高い色彩一様性を有する特に
柔い家具用皮革を製造するための在来のスルフィド／石
灰ライミングおよび本発明による作用物質組合せを有す
る該ライミング 生皮： 塩蔵牛皮 １ｔ ライミング： 水、２６℃ １５０．０％ 石灰水加物 ２．０％ ナトリウムスルフヒドラート ０．９％ ２〜３０分作動 石灰水加物、２分作動 １．０％ ６０％の硫化ナトリウム ０．４％ ３０分作動 次いで自働機：２分作動、５８分静止 総
計１５時間浴排出、２回洗浄、皮脱肉および１．８〜２
ｍｍに剥ぐ。

【００４３】 再ライミング： 水、２６℃ １５０．０％ 石灰水加物 １．０％ チオ尿素ジオキシド ０．３％ 蛋白質分解、アルカリ安定酵素 ０．１％ （例えばバシルス、アルカロフィルス）、４０００ＬＶ
Ｅ、エラスターゼ値９．２（Ｆ＝２．３） ２０分作動、次いでさらに６時間：２分作動、５８分静
止。

【００４４】浴排出、洗浄しさらに企業通例の加工す
る。

【００４５】本発明により使用する酵素のエラスターゼ
活性度の測定。

【００４６】原理 ｐＨ＝８のエラスチン懸濁液を酵素と一緒に３７℃で２
時間インキュベートし、その後濾過による基質の分離に
よりインキュベーションを中断する。溶液を更にトリニ
トロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＡ）で着色し、４２０
ｎｍでの光濃度を測定する。

【００４７】定義 １エラスターゼ単位は、エラスチン懸濁液中で規定の試
験の標準条件下で１分当りグリツン１μモルに対するＴ
ＮＢＡ当量で着色が展開する酵素の量である。

【００４８】反応剤 エラスチン（シグマ ロット７１ Ｆ−８０２０；Ｎ
ｏ．Ｅ−１６２５） ホウ酸（極上） トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＡ） グリシン 器具： 振動サーモスタット：３７℃ 水浴：５０℃ 溶液 1. ０．１Ｍホウ酸緩衝液、ｐＨ＝８．０ ホウ酸（極上）６．２ｇの溶液を１Ｎ ＮａＯＨでｐＨ
＝８．０に調整し、蒸留水で１ｌに満す。

【００４９】2. ＴＮＢＡ反応剤 蒸留水約８００ｍｌおよびホウ酸（極上）６．２ｇを加
え、１Ｎ ＮａＯＨでｐＨ＝８にする。ＴＮＢＡ２４０
ｇをこれに加え、ｐＨを場合により再び調整し、かつ混
合物を蒸留水１ｌに入れる。ＴＮＢＡ反応剤を合理的に
は褐色壜に保存し、日毎新しく加える。

【００５０】反応： 主試験値 エラスチン２５０ｍｇを摺り合せ栓付の５０ｍｌ細口エ
ルレンマイヤーフラスコで秤量し、０．１Ｍホウ酸緩衝
液１０ｍｌと混合した。該フラスコを振動サーモスタッ
トで１０分間予熱した。酵素溶液１ｍｌを加えた後フラ
スコの含有物をよく混合し、フラスコを３７℃で振動サ
ーモスタットにもどした。

【００５１】反応混合物をひだ付濾紙により濾過して正
確に２時間後反応を中止した。ＴＮＢＡ法を使用して断
片の着色を直接行った。

【００５２】ＴＮＢＡ反応 サンプル１００μｌをＴＮＢＡ反応剤８ｍｌに加え、水
浴中で５０℃で２５分まで反応時間を維持した。正確に
２５分後、管を氷水に入れ、４２０ｎｍでの吸光を直接
その後測定した。

【００５３】空白試験値 この場合に酵素溶液を２時間の反応時間終了後、初めて
加える。ほかの処理は主試験値のように行う、すなわち
反応終了とともに開始する。

【００５４】グリシン検量線の形成 ＴＮＢＡでのグリシンの着色を測定し、グリシンのマイ
クロモルを光濃度の値にプロットした。

【００５５】操作 グリシン３．７５ｇを蒸留水１００ｍｌに溶かし、これ
から０．２５ｍｌを取り出し、５００ｍｌに希釈した。
このサンプル１００μｌを取り出し、ＴＮＢＡ法により
着色した。４２０ｎｍでの光濃度の測定を行った。ほか
のサンプルを相当する方法で製造した。検量線を構成す
るための例を以下の表に記載した。

【００５６】 グリシン濃度 ４２０ｎｍでの グリシン重量（ｇ） （μモル／ｍｌ） 光濃度 ３.７５／１００−０.２５／５００ ０.２５ ０.３０ ３.７５／１００−０.２５／２５０ ０.５ ０.０５８ ３.７５／１００−０.５０／２５０ １.０ ０.１１０ ３.７５／１００−１.００／２５０ ２.０ ０.２３２ ３.７５／１００−１.００／２００ ２.５ ０.３１３ ３.７ ／１００−１.５０／２００ ３.７５ ０.４９６ 空白試験値 ＴＮＢＡ反応剤＋蒸留水１００μｌの混合物で測定した
吸光値をすべてのグリシン値から引いた。

【００５７】酵素活性度の算定 活性度測定（主試験値−空白試験値）で測定された光濃
度値の相違を検量曲線からグリシンμモルに転化し、こ
れからエラスターゼ単位を以下の式により決定すること
ができる。

【００５８】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ティルマン テーゲル ドイツ連邦共和国 ゼーハイム−ユーゲ ンハイム ブレスラウアー シュトラー セ 35 (72)発明者 ゲルトルート ヴィック ドイツ連邦共和国 ダルムシュタット 12 アウミューレンヴェーク 36 (56)参考文献 特開 平１−230700（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−95300（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C14C 1/00 - 1/08

Claims (6)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 アルカリ性水浴で蛋白質分解酵素を使用
   して革および毛皮をライミングする方法において、１０
   〜１４の範囲内のｐＨ値を有するライミング浴が同時に
   チオ尿素ジオキシドおよびエラスターゼ活性を有するア
   ルカリプロテアーゼＡＰを含有することを特徴とする革
   および毛皮をライミングする方法。
2. 【請求項２】 ライミング浴がチオ尿素ジオキシド０．
   ３〜２重量％を含有する請求項１記載の方法。
3. 【請求項３】 ライミング浴がアルカリプロテアーゼ
   〔Ｅ．Ｃ．３．４．２１〕の他にアルカリエラスターゼ
   〔Ｅ．Ｃ．３．４．２１．１１〕の有効な成分を含有す
   る請求項１または２記載の方法。
4. 【請求項４】 ライミング浴がスルフィド添加物を含有
   していない請求項１から３までのいずれか１項記載の方
   法。
5. 【請求項５】 アルカリプロテアーゼがバクテリアプロ
   テアーゼである請求項１から４までのいずれか１項記載
   の方法。
6. 【請求項６】 アルカリバクテリアプロテアーゼがバシ
   ルスアルカロフィルスから取得された請求項５記載の方
   法。