JP3151982B2 - ホスホエノールピルビン酸の製造方法 - Google Patents
ホスホエノールピルビン酸の製造方法Info
- Publication number
- JP3151982B2 JP3151982B2 JP34963392A JP34963392A JP3151982B2 JP 3151982 B2 JP3151982 B2 JP 3151982B2 JP 34963392 A JP34963392 A JP 34963392A JP 34963392 A JP34963392 A JP 34963392A JP 3151982 B2 JP3151982 B2 JP 3151982B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- yeast
- phosphoenolpyruvate
- producing
- carbon source
- present
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-N phosphoenolpyruvic acid Chemical compound OC(=O)C(=C)OP(O)(O)=O DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 19
- 229930029653 phosphoenolpyruvate Natural products 0.000 title claims description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 9
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 18
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 claims description 11
- 241000235648 Pichia Species 0.000 claims description 6
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 claims description 6
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 5
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 241000235035 Debaryomyces Species 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- -1 phosphate compound Chemical class 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001489172 Ogataea glucozyma Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 235000005205 Pinus Nutrition 0.000 description 1
- 241000218602 Pinus <genus> Species 0.000 description 1
- 102000013009 Pyruvate Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108020005115 Pyruvate Kinase Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910001854 alkali hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、酵母の生産する炭素源
資化酵素系を用いて炭素源よりホスホエノールピルビン
酸を生成蓄積せしめ採取する方法に関する。
資化酵素系を用いて炭素源よりホスホエノールピルビン
酸を生成蓄積せしめ採取する方法に関する。
【０００２】ホスホエノールピルビン酸（以下ＰＥＰと
略す）は高エネルギーリン酸化合物であり、アデノシン
三リン酸（ＡＴＰ）の再生系には必須かつ重要な化合物
である。
略す）は高エネルギーリン酸化合物であり、アデノシン
三リン酸（ＡＴＰ）の再生系には必須かつ重要な化合物
である。
【０００３】
【従来の技術】ＰＥＰの化学合成は古くから公知（Ｃｈ
ｅｍ．Ｐｅｖ．，Ｖｏｌ．６１，６０７（１９６１））
であり、生化学的手段によりＰＥＰを生成させる方法と
しては、デバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅ
ｓ）属の乾燥菌体を用いる方法（Ｊ．Ｆｅｒｍｅｎｔ．
Ｔｅｃｈｎｏｌ．，Ｖｏｌ．６５，２２５（１９８
７））が知られている。
ｅｍ．Ｐｅｖ．，Ｖｏｌ．６１，６０７（１９６１））
であり、生化学的手段によりＰＥＰを生成させる方法と
しては、デバリオマイセス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅ
ｓ）属の乾燥菌体を用いる方法（Ｊ．Ｆｅｒｍｅｎｔ．
Ｔｅｃｈｎｏｌ．，Ｖｏｌ．６５，２２５（１９８
７））が知られている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、化学合
成は収率、収量が低く、また乾燥菌体による酵素法は、
乾燥菌体調整など、操作が煩雑であるという問題があっ
た。
成は収率、収量が低く、また乾燥菌体による酵素法は、
乾燥菌体調整など、操作が煩雑であるという問題があっ
た。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、収率、収
量が高くかつ操作が簡便なＰＥＰの製造方法について鋭
意検討した結果、以下の本発明に到達した。
量が高くかつ操作が簡便なＰＥＰの製造方法について鋭
意検討した結果、以下の本発明に到達した。
【０００６】すなわち、本発明は、サッカロミセス（Ｓ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、ハンゼヌラ（Ｈａｎｓ
ｅｎｕｌａ）属、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属、キャンデ
ィダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属またはトルロプシス（Ｔｏｒ
ｕｌｏｐｓｉｓ）属に属する酵母の培養物を用いて、前
記酵母の資化し得る炭素源よりホスホエノールピルビン
酸を生成蓄積せしめ、これを単離採取することを特徴と
するホスホエノールピルビン酸の製造方法である。
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、ハンゼヌラ（Ｈａｎｓ
ｅｎｕｌａ）属、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）属、キャンデ
ィダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属またはトルロプシス（Ｔｏｒ
ｕｌｏｐｓｉｓ）属に属する酵母の培養物を用いて、前
記酵母の資化し得る炭素源よりホスホエノールピルビン
酸を生成蓄積せしめ、これを単離採取することを特徴と
するホスホエノールピルビン酸の製造方法である。
【０００７】本発明において使用され得る酵母として
は、サッカロミセス属、ハンゼヌラ属、ピキア属、トル
ロプシス属、キャンディダ属に属する酵母であれば、い
かなるものも使用できる。このうち、各種炭素源資化能
力の高いものが好ましく使用できる。好ましい酵母の具
体例としては、たとえば、サッカロミセス・セレビシェ
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉｅ（Ｉ
ＦＯ ０２１３、０５３８、１９５０）、サッカロミセ
ス・クルイベリ Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｋｌｕｙ
ｖｅｒｉ（ＩＦＯ １９８２）、ハンゼヌラ・グルコザ
イマ Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｇｌｕｃｏｚｙｍａ（ＩＦ
Ｏ １４７２）、ピキア・パストリスＰｉｃｈｉａ ｐ
ａｓｔｏｒｉｓ（ＩＦＯ ０９４８）、キャンディダ・
メタノリカ Ｃａｎｄｉｄａ ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃａ
（ＡＴＣＣ ２６１７５）、キャンディダ・リポリティ
カ Ｃａｎｄｉｄａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ（ＩＦＯ０
７１７）、トルロプシス・ピナス Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉ
ｓ ｐｉｎｕｓ（ＩＦＯ ０７４１）、トルロプシス・
グラブラータ Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ ｇｌａｂｒａｔ
ａ（ＩＦＯ ０６２２）などが挙げられる。
は、サッカロミセス属、ハンゼヌラ属、ピキア属、トル
ロプシス属、キャンディダ属に属する酵母であれば、い
かなるものも使用できる。このうち、各種炭素源資化能
力の高いものが好ましく使用できる。好ましい酵母の具
体例としては、たとえば、サッカロミセス・セレビシェ
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉｅ（Ｉ
ＦＯ ０２１３、０５３８、１９５０）、サッカロミセ
ス・クルイベリ Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｋｌｕｙ
ｖｅｒｉ（ＩＦＯ １９８２）、ハンゼヌラ・グルコザ
イマ Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｇｌｕｃｏｚｙｍａ（ＩＦ
Ｏ １４７２）、ピキア・パストリスＰｉｃｈｉａ ｐ
ａｓｔｏｒｉｓ（ＩＦＯ ０９４８）、キャンディダ・
メタノリカ Ｃａｎｄｉｄａ ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃａ
（ＡＴＣＣ ２６１７５）、キャンディダ・リポリティ
カ Ｃａｎｄｉｄａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ（ＩＦＯ０
７１７）、トルロプシス・ピナス Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉ
ｓ ｐｉｎｕｓ（ＩＦＯ ０７４１）、トルロプシス・
グラブラータ Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ ｇｌａｂｒａｔ
ａ（ＩＦＯ ０６２２）などが挙げられる。
【０００８】本発明においては、酵母の培養物を用い
る。培養物は上記酵母を適当な栄養培地に培養すること
によって調整できる。これらの酵母を培養するための培
地としては、通常の天然あるいは合成培地が用いられる
が、好ましくはアミノ酸を適当に含んだ天然培地が良好
に用いられる。
る。培養物は上記酵母を適当な栄養培地に培養すること
によって調整できる。これらの酵母を培養するための培
地としては、通常の天然あるいは合成培地が用いられる
が、好ましくはアミノ酸を適当に含んだ天然培地が良好
に用いられる。
【０００９】本発明で用いる酵母の培養物の形態は任意
であり、酵母の培養した培養物そのもの、培養された生
菌体、真空乾燥菌体、凍結乾燥菌体、有機溶媒による乾
燥菌体などの乾燥菌体、処理菌体などが本発明の範囲に
含まれる。このうち、工業的には酵母を栄養培地に培養
した培養物そのものが有利に用いられる。
であり、酵母の培養した培養物そのもの、培養された生
菌体、真空乾燥菌体、凍結乾燥菌体、有機溶媒による乾
燥菌体などの乾燥菌体、処理菌体などが本発明の範囲に
含まれる。このうち、工業的には酵母を栄養培地に培養
した培養物そのものが有利に用いられる。
【００１０】ピルビン酸生成原料である炭素源として
は、本発明で使用する酵母が資化し得るものであればい
かなるものでもよい。好ましい炭素源の具体例として
は、グルコース、フラクトース、シュクロース、マンノ
ース、マンニトール、キシロース、ガラクトース、糖
蜜、ソルビトール、グリセリンなどの糖もしくは糖アル
コール、酢酸、クエン酸、乳酸などの有機酸、メタノー
ル、エタノール、プロパノールなどのアルコール類、そ
の他炭化水素などを挙げることができる。糖もしくは糖
アルコールを用いることにより、より好ましい結果を得
ることができる。
は、本発明で使用する酵母が資化し得るものであればい
かなるものでもよい。好ましい炭素源の具体例として
は、グルコース、フラクトース、シュクロース、マンノ
ース、マンニトール、キシロース、ガラクトース、糖
蜜、ソルビトール、グリセリンなどの糖もしくは糖アル
コール、酢酸、クエン酸、乳酸などの有機酸、メタノー
ル、エタノール、プロパノールなどのアルコール類、そ
の他炭化水素などを挙げることができる。糖もしくは糖
アルコールを用いることにより、より好ましい結果を得
ることができる。
【００１１】本発明で使用する酵母の培養物の量は、乾
燥菌体濃度に換算して１〜５０ｇ／ｌが好ましく、より
好ましくは５〜２０ｇ／ｌの範囲である。
燥菌体濃度に換算して１〜５０ｇ／ｌが好ましく、より
好ましくは５〜２０ｇ／ｌの範囲である。
【００１２】また、生成蓄積系中の酵素反応はＡＴＰ、
マグネシウムイオン、カリウムイオンおよびリン酸を必
要とするものが多く、ＡＴＰが０．１ｍＭ〜１５ｍＭ、
好ましくは１ｍＭ〜５ｍＭであり、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏが０．０１〜０．２％、好ましくは０．０２〜０．１
％であり、ＫＨ2 ＰＯ4 が３〜１４％、好ましくは６〜
１３％の濃度で用いられるのが通常である。
マグネシウムイオン、カリウムイオンおよびリン酸を必
要とするものが多く、ＡＴＰが０．１ｍＭ〜１５ｍＭ、
好ましくは１ｍＭ〜５ｍＭであり、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏが０．０１〜０．２％、好ましくは０．０２〜０．１
％であり、ＫＨ2 ＰＯ4 が３〜１４％、好ましくは６〜
１３％の濃度で用いられるのが通常である。
【００１３】生成蓄積反応中は有機酸の生成に伴ってｐ
Ｈの低下が生じるので、炭酸カルシウムまたは苛性カリ
などのアルカリで通常ｐＨ５〜１０、好ましくは７〜９
に調節することがホスホエノールピルビン酸生産のため
には有効である。
Ｈの低下が生じるので、炭酸カルシウムまたは苛性カリ
などのアルカリで通常ｐＨ５〜１０、好ましくは７〜９
に調節することがホスホエノールピルビン酸生産のため
には有効である。
【００１４】反応中の温度は２０〜３７℃、好ましくは
２５〜３２℃が適当である。
２５〜３２℃が適当である。
【００１５】反応終了後、生成蓄積系中に生成蓄積した
ホスホエノールピルビン酸は逆浸透膜などを使い、ホス
ホエノールピルビン酸とリン酸を分離し、水酸化アルカ
リを加え、ホスホエノールピルビン酸のアルカリ金属塩
水溶液とし、濃縮・晶析により単離できる。
ホスホエノールピルビン酸は逆浸透膜などを使い、ホス
ホエノールピルビン酸とリン酸を分離し、水酸化アルカ
リを加え、ホスホエノールピルビン酸のアルカリ金属塩
水溶液とし、濃縮・晶析により単離できる。
【００１６】
【実施例】以下、実施例によって本発明を説明する。
【００１７】実施例において生成したピルビン酸の確認
と定量は、高速液体クロマトグラフィー、ピルベートキ
ナーゼと乳酸デヒドロゲナーゼを用いる酵素法などによ
り行った。以下の分析結果については上記両分析法とも
よく合致しており、同じ分析数値を示した。
と定量は、高速液体クロマトグラフィー、ピルベートキ
ナーゼと乳酸デヒドロゲナーゼを用いる酵素法などによ
り行った。以下の分析結果については上記両分析法とも
よく合致しており、同じ分析数値を示した。
【００１８】実施例１ 表１に示した各種酵母を、グリコース０．５％、ＫＨ2
ＰＯ4 ０．２％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ０．０５％、ペ
プトン１．０％、酵母エキス０．１％、ｐＨ６．０から
なる倍地１００mlを５００ml容振盪フラスコに分注滅菌
後、１白金植菌し、２４時間、３０℃で振盪培養した。
ＰＯ4 ０．２％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ０．０５％、ペ
プトン１．０％、酵母エキス０．１％、ｐＨ６．０から
なる倍地１００mlを５００ml容振盪フラスコに分注滅菌
後、１白金植菌し、２４時間、３０℃で振盪培養した。
【００１９】培養終了後遠心分離して集菌し、これをグ
ルコース１％、ＫＨ2 ＰＯ4 ９％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏ０．０５％、ＡＴＰ５ｍＭを含有する反応液６０ml
（ＫＯＨ水溶液でｐＨを７．５に調整）に添加し、３０
℃で３０時間反応した。
ルコース１％、ＫＨ2 ＰＯ4 ９％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏ０．０５％、ＡＴＰ５ｍＭを含有する反応液６０ml
（ＫＯＨ水溶液でｐＨを７．５に調整）に添加し、３０
℃で３０時間反応した。
【００２０】各反応液中に生成したホスホエノールピル
ビン酸は、表１のとおりであった。
ビン酸は、表１のとおりであった。
【表１】
【００２１】実施例２ 実施例１で用いた反応液の炭素源を表２に示す炭素源に
おきかえ、表２に示す菌株を用いて培養した結果を表２
に示す。
おきかえ、表２に示す菌株を用いて培養した結果を表２
に示す。
【００２２】
【表２】
【００２３】
【発明の効果】本発明によれば、酵母の生産する炭素源
資化酵素系を用いて、炭素源よりホスホエノールピルビ
ン酸を温和な条件下で煩雑な操作を要することなく製造
することができる。
資化酵素系を用いて、炭素源よりホスホエノールピルビ
ン酸を温和な条件下で煩雑な操作を要することなく製造
することができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 9/00 Ｃ１２Ｒ 1:78） (Ｃ１２Ｐ 9/00 Ｃ１２Ｒ 1:84） (Ｃ１２Ｐ 9/00 Ｃ１２Ｒ 1:72） (Ｃ１２Ｐ 9/00 Ｃ１２Ｒ 1:73） (Ｃ１２Ｐ 9/00 Ｃ１２Ｒ 1:88）
Claims (1)
- 【請求項１】 サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙ
ｃｅｓ）属、ハンゼヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）属、ピ
キア（Ｐｉｃｈｉａ）属、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄ
ａ）属またはトルロプシス（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）属
に属する酵母の培養物を用いて、前記酵母の資化し得る
炭素源よりホスホエノールピルビン酸を生成蓄積せし
め、これを単離採取することを特徴とするホスホエノー
ルピルビン酸の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34963392A JP3151982B2 (ja) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | ホスホエノールピルビン酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34963392A JP3151982B2 (ja) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | ホスホエノールピルビン酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06197778A JPH06197778A (ja) | 1994-07-19 |
| JP3151982B2 true JP3151982B2 (ja) | 2001-04-03 |
Family
ID=18405059
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP34963392A Expired - Fee Related JP3151982B2 (ja) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | ホスホエノールピルビン酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3151982B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1081230A2 (en) | 1999-08-30 | 2001-03-07 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for producing N-acetyl-neuraminic acid |
-
1992
- 1992-12-28 JP JP34963392A patent/JP3151982B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1081230A2 (en) | 1999-08-30 | 2001-03-07 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for producing N-acetyl-neuraminic acid |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH06197778A (ja) | 1994-07-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Onishi et al. | Microbial production of xylitol from glucose | |
| JP3090810B2 (ja) | パルミトオレイン酸の製造方法 | |
| EP0366922B1 (en) | Fermentation process for producing 2-keto-L-gulonic acid | |
| CN103168103A (zh) | 阿糖醇的生产 | |
| US3962034A (en) | Method for producing s-adenosylmethionine or methylthioadenosine by yeast | |
| JP3151982B2 (ja) | ホスホエノールピルビン酸の製造方法 | |
| JPS5846318B2 (ja) | ２−ケト−ｌ−グロン酸の製造方法 | |
| JP2000210095A (ja) | キシリト―ル又はｄ―キシルロ―スの製造法 | |
| US4407953A (en) | Fermentation process for production of alpha-isopropylmalic acid | |
| CA1239361A (en) | METHOD OF PREPARING D(-)-.beta.-HYDROXYISOBUTYRIC ACID BY FERMENTATION | |
| US7479381B1 (en) | Production of itaconic acid by Pseudozyma antarctica | |
| US3733253A (en) | Method of producing citric acid | |
| US4310635A (en) | Fermentative production of D(-)-β-hydroxyisobutyric acid | |
| JP3146641B2 (ja) | 光学活性マンデル酸の製造方法 | |
| JPH035800B2 (ja) | ||
| US4271268A (en) | Process for producing D-arabitol | |
| US4981794A (en) | Method of preparing D(-)-β-hydroxyisobutyric acid by fermentation | |
| JPS5923794B2 (ja) | ジヒドロキシアセトンの製造法 | |
| JP2600874B2 (ja) | ガラクトオリゴ糖の製造方法 | |
| JPH0669B2 (ja) | 光学活性（ｒ）−４−フエニル−２−ブタノ−ルの製造法 | |
| JPS6112678B2 (ja) | ||
| JP2936551B2 (ja) | （ｒ）−（＋）−３−ハロ乳酸の製造法 | |
| JP3178128B2 (ja) | 光学活性２，２，２−トリハロゲノ−１−フェニルエタノールの製造方法 | |
| US3698999A (en) | Fermentative preparation of coenzyme a | |
| JP2902031B2 (ja) | 光学活性（ｓ）―３―フェニル―３―ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |