JP3045761B2 - 補正用紙片を有する呈色試験紙 - Google Patents
補正用紙片を有する呈色試験紙Info
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- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
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Description
液体試料の成分試験に用いる呈色試験紙の改良に関す
る。
種呈色紙片を貼着した複合呈色試験紙、およびその複合
呈色試験紙を用い、数種の異なる波長で測定することに
より、着色検体等の影響を回避することのできる試料中
の各種異常物質の分析方法が開示されている。しかし、
用いられる反射率補正用紙片には、呈色紙片の基礎材で
ある濾紙がそのまま用いられており、補正用紙片に特別
な処方を施すことは述べられていない。
分析する場合、検体に含まれる着色成分により各項目で
影響度が異なり、補正効果にも影響を与えることが予想
される。
場合、処理していない濾紙(試薬未含有)を補正試験片
とすると、上記公開特許に基づけば、偽陽性を回避する
事はできるが、逆に偽陰性を与えることがあり得る。
提供しようとするものである。
の呈色試験紙片および1枚の補正用紙片を有する、液体
試料中の成分を検出するための呈色試験紙において、補
正用紙片のpHを呈色試験片により測定する項目に応じて
調整することを特徴とする呈色試験紙を提供する。
て、着色 検体(尿)の影響は、短波長になる程強くな
る。一般に、短波長測で測定する項目には、ビリルビ
ン、ウロビリノーゲン、亜硝酸、ケトン体などがある
が、これらの内、ビリルビン、ウロビリノーゲン、亜硝
酸はダイナミックレンジが小さく、補正用紙片にはより
高い較正力が要求される。さらには、ビリルビン、ウロ
ビリノーゲン等のアゾカップリングを利用した試験紙片
では、特異性がやや低いという問題もあり、正確な測定
の為には、誤差要因を一つでも多く排除することが望ま
しい。
の着色の挙動を調べた所、試験紙片によって着色成分の
スペクトル特性が変化していることが分った。この挙動
はほぼ試験紙片のpHに依存していることが明らかとなっ
た。
ヘモグロビンがある。
酸性であるから、補正用紙片としては、強酸性のものを
用いるのが有効である。実際、補正用紙片として、酒石
酸含有濾紙(I)と未含浸濾紙(II)を用いた場合の較
正能力について、各種項目毎に検討してみると、ビリル
ビン、ウロビリノーゲン、亜硝酸については、補正用紙
片(I)は(II)に比べ著しい較正力の向上が見られ
る。付加的には、蛋白試験紙においても改善が見られ
る。この理由としては、蛋白試験紙のpHが約3であり、
比較的強酸性であることが考えられる。
が、好ましくは反射率を光学的に測定して呈色度を検出
し、各成分の存在および濃度を検出する為の呈色試験紙
である。呈色試験紙の構成は、好ましくは上記特開昭56
−12814号公報に記載の構成によるが、目的用途に応じ
て種々変更できることは言うまでもない。
アルカリの水溶液に補正用紙片を浸けることにより簡単
に行える。酸性成分としては、酒石酸、クエン酸、シュ
ウ酸、フタル酸、スルホサリチル酸、メタリン酸などの
有機酸、及び酸性条件を与える種々の緩衝剤が使用で
き、アルカリとしては、炭酸ナトリウム、エチレンジア
ミン四酢酸ナトリム、四ホウ酸ナトリム、リン酸三ナト
リムなどのアルカリ性条件を与える種々の緩衝剤が使用
できる。
宜調節すればよい。また、1つの呈色試験紙に複数の呈
色紙片を設けて複数の成分を検出しようとする場合、検
出項目により最適pHは異なるが、補正用紙片のpHを適切
に選択すれば、1つの補正用紙片により複数の項目につ
いて較正を行うことができる。実際、後記実施例では、
pH1.5の補正用紙片により、pH1〜6の反応pHの項目の較
正が行なわれている。
して補正用紙片を得ることができる。
片のpHが調節されていることを除き、特公昭56−12814
号に記載の呈色試験紙と実質的に同じ構成であってよ
く、複数の項目を1つの呈色試験紙により検出できる第
6図に示すような構成が好ましい。第6図の呈色試験紙
は、スティック3の表面に、一方の端から補正用紙片2
および呈色紙片1、1′、1″が担持された構成を有し
ている。
に具体的に説明する。
射スペクトルを示す。
り、これと比較すると、他の7検体での反射スペクトル
が種々のパターンを有していることが分かる。第1図
(f)は、緑色尿の場合の反射スペクトルであり、長波
長でもかなりの吸収を持つことが分かる。第1図中、破
線は本発明の補正用紙片でのスペクトルを、実線は特開
昭53−101491号に記載の補正用紙片でのスペクトルを示
す。
した尿(3検体)、および以下のように調製したプール
尿(5検体)を用いた。
0、1、2、5および10μ/mlとなるようにプール尿
に添加。
を用い、温度37℃、検体量8μで行った。測定回路
は、着色尿については1回、プール尿については5回で
あった。
市販の尿試験紙(京都第一科学株式会社製ユリフレッ
ト)と同一の成分を、濾紙(東洋濾紙株式会社製No.514
A)に含浸し、乾燥して調製した、蛋白質、ビリルビ
ン、ウロビリノーゲンおよび亜硝酸塩の各項目試験用紙
片を用いた。
に酒石酸を含浸させたもの(pH1.5)を用いた。
補正用紙片として用いた。
能力をグラフ化して示す。横軸は検体番号(40検体。内
36〜40がプール尿)であり、縦軸は、較正効果値を感度
曲線から濃度換算して得た濃度である。較正効果値(C
P)は、次のようにして求める: まず、呈色試験紙片および補正用紙片についてそれぞ
れ、水での反射スペクトルと着色尿で反射スペクトルと
をある波長で測定する。水での反射スペクトル強度をRa
(呈色試験紙片)およびRa′(補正用紙片)とし、着色
尿での反射スペクトル強度をRb(呈色試験紙片)および
Rb′(補正用紙片)とする。呈色試験紙片における着色
度CDtは、log(1/Rb)−log(1/Ra)で表され、一方、
補正紙片における着色度CDcは、log(1/Rb′)−log(1
/Ra′)で表される。そして、CPはCDt−CDcとして求め
られる。CP=0であれば、適正な較正が行なわれてお
り、CP>0であれば、過小較正であって偽陽性化傾向に
あり、逆にCP<であれば過剰較正であって偽陰性化傾向
にある。
正効果を示す。第2図(a)は比較補正用紙片を用いた
場合の結果を示し、第2図(b)は本発明の補正用紙片
を用いた場合の結果を示す。(以下の図において、
(a)が比較呈色試験紙での結果を、(b)が本発明の
呈色試験紙での結果を示す。) 明らかに本発明の呈色試験紙の場合、較正効果が優れ
ており、特にプール尿に全血を高濃度で加えた場合にも
較正できることが分かる。
ける較正効果を示す。本発明の呈色試験紙は比較試験紙
と同程度の較正効果を示している。
における較正効果を、第5図(a)および(b)は亜硝
酸塩の検出における較正効果を示す。いずれの場合に
も、本発明の呈色試験紙の較正効果は比較呈色試験紙に
比べて著しく向上している。
の検出を行う例について本発明を説明したが、本発明
は、蛍光や発光測定にも適用可能であることは言うまで
もない。
用紙片での反射スペクトルを示す図、および 第2〜5図は、それぞれ、尿中の蛋白質、ビリルビン、
ウロビリノーゲンおよび亜硝酸塩の検出における較正効
果を示すグラフである。 第6図は、本発明の呈色試験紙の斜視図である。 1、1′、1″……呈色試験紙片、2……補正用紙片、
3……スティック。
Claims (2)
- 【請求項1】少なくとも2枚の呈色試験紙片および1枚
の補正用紙片を有する、液体試料中の成分を検出するた
めの呈色試験紙において、該補正用紙片のpHが呈色試験
紙片により測定する項目に応じて調整されていることを
特徴とする呈色試験紙。 - 【請求項2】補正用紙片が反射率補正用紙片である請求
項1記載の呈色試験紙。
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