JP3020300B2 - 動物細胞培養用組成物、培養方法および生理活性物質の製造法 - Google Patents
動物細胞培養用組成物、培養方法および生理活性物質の製造法Info
- Publication number
- JP3020300B2 JP3020300B2 JP3096034A JP9603491A JP3020300B2 JP 3020300 B2 JP3020300 B2 JP 3020300B2 JP 3096034 A JP3096034 A JP 3096034A JP 9603491 A JP9603491 A JP 9603491A JP 3020300 B2 JP3020300 B2 JP 3020300B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polymer
- cells
- culture
- physiologically active
- active substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、動物細胞を培養するた
めの組成物、動物細胞の培養方法および生理活性物質の
製造法に関する。
めの組成物、動物細胞の培養方法および生理活性物質の
製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】動物細胞を大量に効率よく培養する技術
は、モノクローナル抗体をはじめ有用な生理活性物質の
生産に応用されているが、従来用いられてきた培地には
１０％程度の血清が含有されていた。
は、モノクローナル抗体をはじめ有用な生理活性物質の
生産に応用されているが、従来用いられてきた培地には
１０％程度の血清が含有されていた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら血清は高
価であり、またロット差があるため、細胞を大量に培養
するには問題がある。さらに血清には異種蛋白質が多く
含まれるため、培養後に目的の有用物質を回収精製する
際にも不都合が生じる。
価であり、またロット差があるため、細胞を大量に培養
するには問題がある。さらに血清には異種蛋白質が多く
含まれるため、培養後に目的の有用物質を回収精製する
際にも不都合が生じる。
【０００４】そのため種々の無血清培地が開発されてき
たが、細胞の増殖性、生存性および生理活性物質の生産
性の面で血清含有培地に比べて十分なものとは言えな
い。またアルブミン等の血清成分の添加が不可欠である
場合も多く、血清含有培地の持つ価格、精製面等の欠点
は完全にはなくなっていない。
たが、細胞の増殖性、生存性および生理活性物質の生産
性の面で血清含有培地に比べて十分なものとは言えな
い。またアルブミン等の血清成分の添加が不可欠である
場合も多く、血清含有培地の持つ価格、精製面等の欠点
は完全にはなくなっていない。
【０００５】いずれにしても従来知られている培地は、
細胞培養によって有用物質を大量に効率よく得るために
は必ずしも十分満足できるものではなかった。
細胞培養によって有用物質を大量に効率よく得るために
は必ずしも十分満足できるものではなかった。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者は、生理活性物
質の生産性を高める物質の検索を進めた結果、りん脂質
類似構造を持つポリマーを含有した動物細胞培養用組成
物で動物細胞を培養すると、生理活性物質の生産性が高
まることを見出し、さらに研究した結果、本発明を完成
した。
質の生産性を高める物質の検索を進めた結果、りん脂質
類似構造を持つポリマーを含有した動物細胞培養用組成
物で動物細胞を培養すると、生理活性物質の生産性が高
まることを見出し、さらに研究した結果、本発明を完成
した。
【０００７】即ち、本発明は１）主鎖がポリメタクリロ
イルエステルで、側鎖が一般式（１）： （式中、Ｙはホスホリルコリン残基、アミノエタノール
残基、セリン残基、イノシトール残基またはＯ−を表
す。）で表されるポリマーを含有することを特徴とする
動物細胞培養用組成物、２）ポリマーが２−メタクリロ
イルオキシエチルホスホリルコリンのホモポリマーであ
る上記１）記載の組成物、
イルエステルで、側鎖が一般式（１）： （式中、Ｙはホスホリルコリン残基、アミノエタノール
残基、セリン残基、イノシトール残基またはＯ−を表
す。）で表されるポリマーを含有することを特徴とする
動物細胞培養用組成物、２）ポリマーが２−メタクリロ
イルオキシエチルホスホリルコリンのホモポリマーであ
る上記１）記載の組成物、
【０００８】３）ポリマーが２−メタクリロイルオキシ
エチルホスホリルコリンと他のモノマーとのコポリマー
である上記１）記載の組成物、４）主鎖がポリメタクリ
ロイルエステルで、側鎖が一般式（１）で表されるポリ
マーを含有する培地で動物細胞を培養することを特徴と
する動物細胞の培養方法、
エチルホスホリルコリンと他のモノマーとのコポリマー
である上記１）記載の組成物、４）主鎖がポリメタクリ
ロイルエステルで、側鎖が一般式（１）で表されるポリ
マーを含有する培地で動物細胞を培養することを特徴と
する動物細胞の培養方法、
【０００９】５）主鎖がポリメタクリロイルエステル
で、側鎖が一般式（１）で表されるポリマーを含有する
培地で生理活性物質を産生する動物細胞を培養し、培養
物中にこれを生成蓄積せしめ、採取することを特徴とす
る生理活性物質の製造法、６）生理活性物質がモノクロ
ーナル抗体である上記５）記載の製造法、に関するもの
である。
で、側鎖が一般式（１）で表されるポリマーを含有する
培地で生理活性物質を産生する動物細胞を培養し、培養
物中にこれを生成蓄積せしめ、採取することを特徴とす
る生理活性物質の製造法、６）生理活性物質がモノクロ
ーナル抗体である上記５）記載の製造法、に関するもの
である。
【００１０】本発明の組成物は、基礎培地およびりん脂
質類似構造を持つポリマーからなる。該基礎培地として
は、動物細胞の培養に用いられるものであればいずれの
ものでも良い。
質類似構造を持つポリマーからなる。該基礎培地として
は、動物細胞の培養に用いられるものであればいずれの
ものでも良い。
【００１１】例えば、市販されている各種基礎培地（イ
ーグルＭＥＭ、イーグルＢＭＥ、ダルベッコ変法イーグ
ル培地、イスコフ培地、Ｌ−１５培地、マッコイ５ａ培
地、メディウム１９９、ハムＦ１０、ハムＦ１２、ＲＰ
ＭＩ１６４０等）あるいはこれらを混合した培地が挙げ
られる。
ーグルＭＥＭ、イーグルＢＭＥ、ダルベッコ変法イーグ
ル培地、イスコフ培地、Ｌ−１５培地、マッコイ５ａ培
地、メディウム１９９、ハムＦ１０、ハムＦ１２、ＲＰ
ＭＩ１６４０等）あるいはこれらを混合した培地が挙げ
られる。
【００１２】さらにこれらの培地に細胞の増殖に必要な
因子（インシュリン、トランスフェリン、ステロイドホ
ルモン、上皮細胞増殖因子、繊維芽細胞増殖因子、エタ
ノールアミン、２−メルカプトエタノール、亜セレン酸
ナトリウム等）を必要に応じて添加した培地が挙げられ
る。
因子（インシュリン、トランスフェリン、ステロイドホ
ルモン、上皮細胞増殖因子、繊維芽細胞増殖因子、エタ
ノールアミン、２−メルカプトエタノール、亜セレン酸
ナトリウム等）を必要に応じて添加した培地が挙げられ
る。
【００１３】さらにこれらの培地に通常の使用量あるい
はそれ以下の量の血清またはアルブミンを添加した培地
でも良い。
はそれ以下の量の血清またはアルブミンを添加した培地
でも良い。
【００１４】また市販の無血清培地〔例えばＨＢ−１０
２（ハナ・メディア社製）、ＨＬ−１（ベントレット社
製）、ＡＳＦ培地（味の素社製）、ｅ−ＲＤＦ（極東製
薬社製）等〕を該基礎培地として用いることもできる。
２（ハナ・メディア社製）、ＨＬ−１（ベントレット社
製）、ＡＳＦ培地（味の素社製）、ｅ−ＲＤＦ（極東製
薬社製）等〕を該基礎培地として用いることもできる。
【００１５】本発明で用いられるりん脂質類似構造を持
つポリマーとは、ホスファチジルコリン、ホスファチジ
ルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファ
チジルイノシトール、ホスファチジン酸等のりん脂質と
同一又は類似の親水性基、例えば下記式〔Ａ〕〜式
〔Ｅ〕のような親水性基を持つポリマーを言う。
つポリマーとは、ホスファチジルコリン、ホスファチジ
ルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファ
チジルイノシトール、ホスファチジン酸等のりん脂質と
同一又は類似の親水性基、例えば下記式〔Ａ〕〜式
〔Ｅ〕のような親水性基を持つポリマーを言う。
【００１６】
【化１】
【００１７】
【化２】
【００１８】
【化３】
【００１９】
【化４】
【００２０】
【化５】
【００２１】ポリマーはりん脂質と同一又は類似の親水
性基を持つ重合性モノマーの単独重合あるいは他のモノ
マーとの共重合により得られる。共重合の相手モノマー
としては種々のものが使用でき、特に限定されず、例え
ばアクリル酸エステル、メタクリル酸エステル、スチレ
ンおよびその誘導体等の重合性不飽和モノマー等が挙げ
られる。
性基を持つ重合性モノマーの単独重合あるいは他のモノ
マーとの共重合により得られる。共重合の相手モノマー
としては種々のものが使用でき、特に限定されず、例え
ばアクリル酸エステル、メタクリル酸エステル、スチレ
ンおよびその誘導体等の重合性不飽和モノマー等が挙げ
られる。
【００２２】他のモノマーの使用量は特に限定されない
が、りん脂質と同一又は類似の親水性基を持つ重合性モ
ノマーの割合が全体の５モル％以上となるように用いる
のが好ましく、特に３０モル％以上となるように用いる
のが好ましい。
が、りん脂質と同一又は類似の親水性基を持つ重合性モ
ノマーの割合が全体の５モル％以上となるように用いる
のが好ましく、特に３０モル％以上となるように用いる
のが好ましい。
【００２３】ポリマーは、従来公知の方法によって合成
することができる。例えばアゾビスイソブチロニトリル
等を開始剤とするラジカル重合が挙げられる。ポリマー
の精製法としては通常の手法が用いられる。例えば再沈
殿、透析、クロマトグラフィ等が適用される。
することができる。例えばアゾビスイソブチロニトリル
等を開始剤とするラジカル重合が挙げられる。ポリマー
の精製法としては通常の手法が用いられる。例えば再沈
殿、透析、クロマトグラフィ等が適用される。
【００２４】りん脂質と同一又は類似の親水性基を持つ
重合性モノマーの例としては、下記式〔Ｆ〕の構造を持
つ２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンが
挙げられる。
重合性モノマーの例としては、下記式〔Ｆ〕の構造を持
つ２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンが
挙げられる。
【００２５】
【化６】
【００２６】本発明で用いられるポリマーの平均分子量
は好ましくは１０3 〜１０6 、特に好ましくは１０4 〜
１０5 程度である。又、本発明で用いられるポリマーの
基礎培地中での濃度は好ましくは１０〜１００００μｇ
／ｍｌ、特に好ましくは１００〜５０００μｇ／ｍｌで
ある。ポリマーはあらかじめ培養用組成物中に混合され
ていても良いし、使用時に混入しても良い。
は好ましくは１０3 〜１０6 、特に好ましくは１０4 〜
１０5 程度である。又、本発明で用いられるポリマーの
基礎培地中での濃度は好ましくは１０〜１００００μｇ
／ｍｌ、特に好ましくは１００〜５０００μｇ／ｍｌで
ある。ポリマーはあらかじめ培養用組成物中に混合され
ていても良いし、使用時に混入しても良い。
【００２７】本発明の培養方法で培養される動物細胞は
特に限定されず、例えばヒト、マウス、ラット、サル、
ウシ、ハムスター等の哺乳動物由来の各種リンパ系細
胞、ハイブリドーマ、正常二倍体細胞、株化腫瘍細胞、
その他の細胞が培養できる。具体的にはBall-1. Namalv
a, Jurkat. NS-1, P3U1, Hela, Vero, CHO, BHK-21. L9
29等の細胞が挙げられる。
特に限定されず、例えばヒト、マウス、ラット、サル、
ウシ、ハムスター等の哺乳動物由来の各種リンパ系細
胞、ハイブリドーマ、正常二倍体細胞、株化腫瘍細胞、
その他の細胞が培養できる。具体的にはBall-1. Namalv
a, Jurkat. NS-1, P3U1, Hela, Vero, CHO, BHK-21. L9
29等の細胞が挙げられる。
【００２８】本発明の生理活性物質の製造法に用いられ
る動物細胞としては、例えばインターフェロンを産生す
るNamalva, インターロイキン−２を産生するJurkat,
モノクローナル抗体を産生する各種ハイブリドーマ（マ
ウス−マウス、マウスーヒト、ヒト−ヒト等）、組織プ
ラスミノーゲンアクチベータを産生するヒト肺癌細胞ま
たはメラノーマ細胞等が挙げられる。
る動物細胞としては、例えばインターフェロンを産生す
るNamalva, インターロイキン−２を産生するJurkat,
モノクローナル抗体を産生する各種ハイブリドーマ（マ
ウス−マウス、マウスーヒト、ヒト−ヒト等）、組織プ
ラスミノーゲンアクチベータを産生するヒト肺癌細胞ま
たはメラノーマ細胞等が挙げられる。
【００２９】また種々の有用物質を産生するように遺伝
子操作を施した細胞や、ウィルスを感染させてワクチン
の製造等に利用するウィルス感受性の細胞も挙げること
ができる。
子操作を施した細胞や、ウィルスを感染させてワクチン
の製造等に利用するウィルス感受性の細胞も挙げること
ができる。
【００３０】本発明の培養方法又は製造法において、培
養を行なう際、通常培養に用いられる容器または装置を
用いることができる。例えばマルチウェルプレート、シ
ャーレ、培養フラスコ、スピンナーフラスコ、ジャーフ
ァーメンター、ファーメンター、ローラーボトル、ホロ
ーファイバー、マイクロキャリアー等が挙げられる。
養を行なう際、通常培養に用いられる容器または装置を
用いることができる。例えばマルチウェルプレート、シ
ャーレ、培養フラスコ、スピンナーフラスコ、ジャーフ
ァーメンター、ファーメンター、ローラーボトル、ホロ
ーファイバー、マイクロキャリアー等が挙げられる。
【００３１】培養の条件は、通常培養に用いられる条件
で良く、例えば３７℃にて５％CO2 雰囲気下で良好な結
果が得られる。
で良く、例えば３７℃にて５％CO2 雰囲気下で良好な結
果が得られる。
【００３２】培養液から細胞を採取するには、浮遊細胞
の場合は、例えば培養液を直接遠心分離機やろ過機にか
けて集める。接着細胞の場合は、例えば０．２５％トリ
プシン−０．０２％ＥＤＴＡ液を添加して細胞を浮遊さ
せた後遠心分離やろ過により集める。
の場合は、例えば培養液を直接遠心分離機やろ過機にか
けて集める。接着細胞の場合は、例えば０．２５％トリ
プシン−０．０２％ＥＤＴＡ液を添加して細胞を浮遊さ
せた後遠心分離やろ過により集める。
【００３３】細胞培養によって生産される生理活性物質
は、その物質が培養液中に蓄積される場合、ろ過または
遠心分離により上澄液を得、これから採取される。また
細胞内に蓄積される物質の場合には、ろ過または遠心分
離により得た細胞をホモジナイズ、超音波処理、化学薬
品処理等を施し、生産物を抽出した上澄液を得る。
は、その物質が培養液中に蓄積される場合、ろ過または
遠心分離により上澄液を得、これから採取される。また
細胞内に蓄積される物質の場合には、ろ過または遠心分
離により得た細胞をホモジナイズ、超音波処理、化学薬
品処理等を施し、生産物を抽出した上澄液を得る。
【００３４】上記上澄液から生理活性物質を分離、精製
するには、公知の方法を適宜組み合わせて行う。例えば
硫安沈殿、透析、限外ろ過、電気泳動、ゲルろ過、イオ
ン交換クロマトグラフィ、逆相クロマトグラフィ、アフ
ィニティクロマトグラフィ等が適用される。
するには、公知の方法を適宜組み合わせて行う。例えば
硫安沈殿、透析、限外ろ過、電気泳動、ゲルろ過、イオ
ン交換クロマトグラフィ、逆相クロマトグラフィ、アフ
ィニティクロマトグラフィ等が適用される。
【００３５】本発明の組成物を用いることにより、生理
活性物質を大量に効率よく得ることができる。
活性物質を大量に効率よく得ることができる。
【００３６】
【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を更に具体的に
説明する。
説明する。
【００３７】実施例１ ｅ−ＲＤＦ（極東製薬社製）にインシュリン０．２Ｕ／
ｍｌ、トランスフェリン３５μｇ／ｍｌ、エタノールア
ミン２０μＭ、亜セレン酸ナトリウム２．５×１０-8Ｍ
を添加した培地を基礎培地とし、これに各種濃度の２−
メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンのホモポ
リマーまたは２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリンとメタクリル酸ブチルとのコポリマーまたは牛
血清アルブミンを添加した培地をシャーレ（ファルコン
1008, ｎ＝５）に分注した。
ｍｌ、トランスフェリン３５μｇ／ｍｌ、エタノールア
ミン２０μＭ、亜セレン酸ナトリウム２．５×１０-8Ｍ
を添加した培地を基礎培地とし、これに各種濃度の２−
メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンのホモポ
リマーまたは２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリンとメタクリル酸ブチルとのコポリマーまたは牛
血清アルブミンを添加した培地をシャーレ（ファルコン
1008, ｎ＝５）に分注した。
【００３８】これにモノクローナル抗体（ＩｇＧ）産生
マウス−マウスハイドリドーマＬｕ２４３細胞を２．５
×１０6 個／ｍｌとなるように接種し、５％ＣＯ2 イン
キュベーター中３７℃で３日間培養した後、その上澄液
中の抗体量をα−マウスＩｇをコートしたプレートによ
るＥＩＡ法で測定した。表１に結果を示した。数字は基
礎培地のみで培養した場合の成績を１００とした場合の
相対値で示した。
マウス−マウスハイドリドーマＬｕ２４３細胞を２．５
×１０6 個／ｍｌとなるように接種し、５％ＣＯ2 イン
キュベーター中３７℃で３日間培養した後、その上澄液
中の抗体量をα−マウスＩｇをコートしたプレートによ
るＥＩＡ法で測定した。表１に結果を示した。数字は基
礎培地のみで培養した場合の成績を１００とした場合の
相対値で示した。
【００３９】 表１． りん脂質類似構造を持つポリマーの抗体産生に及ぼす効果 添加濃度（μｇ／ｍｌ） １０ １００ １０００ 添加物 ＰＭＰＣ １２０ ２５０ ７００ Ｐ（ＭＰＣ−ＢＭＡ） １２０ ３００ １０００ ＢＳＡ １００ １２０ ２５０
【００４０】 ＰＭＰＣ：２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンのホモポリマー （平均分子量約１０万） Ｐ（ＭＰＣ−ＢＭＡ）：２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンと メタクリル酸ブチルとのコポリマー（平均分子量約７ 万、２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリ ン：メタクリル酸ブチル＝４７：５３） ＢＳＡ ： 牛血清アルブミン 表１に見られるように、りん脂質類似構造を持つポリマ
ーの添加により抗体産生は著しく向上している。
ーの添加により抗体産生は著しく向上している。
【００４１】実施例２ Ｌｕ２４３の代りにモノクローナル抗体（ＩｇＭ）産生
マウス−マウスハイブリドーマＳＴ４３９細胞を用い
て、実施例１と同様の実験を行った。表２に結果を示し
た。
マウス−マウスハイブリドーマＳＴ４３９細胞を用い
て、実施例１と同様の実験を行った。表２に結果を示し
た。
【００４２】 表２ りん脂質類似構造を持つポリマーの抗体産生に及ぼす効果 添加濃度（μｇ／ｍｌ） １０ １００ １０００ 添加物 ＰＭＰＣ １７０ ６００ １１００ Ｐ（ＭＰＣ−ＢＭＡ） １９０ ６５０ １４００ ＢＳＡ １７０ ２５０ ３５０
【００４３】表２に見られるように、ＳＴ４３９につい
ても、りん脂質類似構造を持つポリマーの添加により抗
体産生は著しく向上している。
ても、りん脂質類似構造を持つポリマーの添加により抗
体産生は著しく向上している。
【００４４】
【発明の効果】本発明の組成物を用いて生理活性物質を
産生する細胞を培養した場合は、物質生産性が高まるの
で、生理活性物質を効率的に生産するつことができ、工
業生産上有利である。本発明で用いられるりん脂質類似
構造を持つポリマーは、血清やアルブミンに比べ安価で
あり、かつ不純物をほとんど含まないので、従来の培地
に比べ価格が安く、かつ目的とする物質の精製が容易で
あり、工業生産上有利である。
産生する細胞を培養した場合は、物質生産性が高まるの
で、生理活性物質を効率的に生産するつことができ、工
業生産上有利である。本発明で用いられるりん脂質類似
構造を持つポリマーは、血清やアルブミンに比べ安価で
あり、かつ不純物をほとんど含まないので、従来の培地
に比べ価格が安く、かつ目的とする物質の精製が容易で
あり、工業生産上有利である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｐ 21/00 Ｃ１２Ｎ 15/00 Ｃ (Ｃ１２Ｐ 21/00 Ｃ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｐ 21/08 Ｃ１２Ｒ 1:91）
Claims (6)
- 【請求項１】主鎖がポリメタクリロイルエステルで、側
鎖が一般式（１）： （式中、Ｙはホスホリルコリン残基、アミノエタノール
残基、セリン残基、イノシトール残基またはＯ−を表
す。）で表されるポリマーを含有することを特徴とする
動物細胞培養用組成物。 - 【請求項２】ポリマーが２−メタクリロイルオキシエチ
ルホスホリルコリンのホモポリマーである請求項１記載
の組成物。 - 【請求項３】ポリマーが２−メタクリロイルオキシエチ
ルホスホリルコリンと他のモノマーとのコポリマーであ
る請求項１記載の組成物。 - 【請求項４】主鎖がポリメタクリロイルエステルで、側
鎖が一般式（１）で表されるポリマーを含有する培地で
動物細胞を培養することを特徴とする動物細胞の培養方
法。 - 【請求項５】主鎖がポリメタクリロイルエステルで、側
鎖が一般式（１）で表されるポリマーを含有する培地で
生理活性物質を産生する動物細胞を培養し、培養物中に
これを生成蓄積せしめ、採取することを特徴とする生理
活性物質の製造法。 - 【請求項６】生理活性物質がモノクローナル抗体である
請求項５記載の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3096034A JP3020300B2 (ja) | 1991-04-03 | 1991-04-03 | 動物細胞培養用組成物、培養方法および生理活性物質の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3096034A JP3020300B2 (ja) | 1991-04-03 | 1991-04-03 | 動物細胞培養用組成物、培養方法および生理活性物質の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04304882A JPH04304882A (ja) | 1992-10-28 |
| JP3020300B2 true JP3020300B2 (ja) | 2000-03-15 |
Family
ID=14154161
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3096034A Expired - Fee Related JP3020300B2 (ja) | 1991-04-03 | 1991-04-03 | 動物細胞培養用組成物、培養方法および生理活性物質の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3020300B2 (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2832119B2 (ja) * | 1992-11-17 | 1998-12-02 | ポーラ化成工業株式会社 | 化粧料 |
| EP0767212B1 (en) | 1995-04-03 | 2001-07-18 | Nof Corporation | Process for producing an aqueous solution of phosphorylcholine group bearing polymer and aqueous solution of phosphorylcholine group bearing polymer |
| JP3532692B2 (ja) | 1995-04-03 | 2004-05-31 | 日本油脂株式会社 | ホスホリルコリン基含有重合体水性溶液および製造方法 |
| JP6286947B2 (ja) * | 2013-08-30 | 2018-03-07 | 日油株式会社 | 細胞凝集塊の製造方法、及び薬剤のスクリーニング方法 |
| JP6286948B2 (ja) * | 2013-08-30 | 2018-03-07 | 日油株式会社 | 細胞凝集塊の製造方法、及び薬剤のスクリーニング方法 |
-
1991
- 1991-04-03 JP JP3096034A patent/JP3020300B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04304882A (ja) | 1992-10-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110923196B (zh) | 无血清培养基及其制备方法和间充质干细胞的培养方法 | |
| EP1720979B1 (en) | Use of a serum-free cell culture medium for the production of il-18bp in mammalian cells | |
| DE69927707T2 (de) | Menschliche hybrid-wirtszelle zur expression von säugetier-genen | |
| JP3206772B2 (ja) | 哺乳類細胞の培養方法 | |
| JP2525436B2 (ja) | 細胞培養による蛋白質の製造 | |
| Voigt et al. | Hybridoma cell growth and anti-neuroblastoma monoclonal antibody production in spinner flasks using a protein-free medium with microcarriers | |
| CN1240831C (zh) | 微载体培养中国仑鼠卵巢细胞生产异源性分泌蛋白质的方法 | |
| JP2006525015A (ja) | 懸濁した動物細胞の灌流培養による生物学的物質の製造方法 | |
| JP3020300B2 (ja) | 動物細胞培養用組成物、培養方法および生理活性物質の製造法 | |
| Kato et al. | The design of polymer microcarrier surfaces for enhanced cell growth | |
| JP2002191353A (ja) | 細胞培養支持体及びその製造方法 | |
| DE3785086T2 (de) | Zubereitung fuer zellkultur und ihre verwendung. | |
| JP6108170B2 (ja) | 細胞培養用培地 | |
| JPH02131573A (ja) | ポリビニルピロリドン含有活性剤および特定培地 | |
| JP2022008203A (ja) | 細胞用培地添加剤およびその利用 | |
| JPH02200177A (ja) | 動物細胞培養用組成物、培養方法および生理活性物質の製造法 | |
| Bryant et al. | Regulation of growth and gene activity in euploid hybrids between human neonatal fibroblasts and epithelioid amniotic fluid cells. | |
| JPH0732705B2 (ja) | 動物細胞増殖用組成物およびそれを用いる動物細胞の増殖方法 | |
| JPH0595783A (ja) | 浮遊細胞用無血清合成培地 | |
| JPH0851993A (ja) | 生理活性物質の製造法 | |
| CN116656607B (zh) | 一种t细胞无血清培养基及其应用 | |
| JP2751325B2 (ja) | 蛋白質の産生方法 | |
| JPH05207873A (ja) | 付着性動物細胞の培養方法 | |
| JPH0561907B2 (ja) | ||
| JP2004135672A (ja) | 動物細胞又は組織を培養するための、ポリエチレングリコールを含んで成る組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |