JP2938566B2 - 安定なヘモグロビン基準溶液 - Google Patents

安定なヘモグロビン基準溶液

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Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 血液の種々のパラメーターを測定するための分析装置
を使用するためには、新鮮な正常な人間の血液中に見ら
れる性質とできる限り近い性質を示す基準溶液の利用が
必要である。基準溶液の既知のパラメーターを測定する
ことにより、器械使用を監視および基準化し、患者の血
液試料を非常に正確に測定することができる。
血液中のCO2およびO2の分圧を測定する器械の信頼性
および正確性を監視する一方法は、既知量のCO2、O2お
よびN2を含有する気体混合物を用いて圧力測定されてい
る新鮮な人間血液試料を使用する。そのような方法は、
BurnettによりClinical Chemistry、27（10）、1761（1
981）中に記載されている。
血液が適当に圧力測定されているときには、試料はCO
2およびO2の精密な一定の分圧を有するであろう。これ
らの準備された試料を次に分析器械中に導入し、そして
pCO2およびpO2値が測定される。該試料は、既知のpCO2
およびpO2値を有する外は患者の血液検査試料と類似の
ものであるので、圧力測定された血液の試験値が圧力測
定用に使用される気体混合物を基にした理論値の等しい
ならば、この機器は未知患者試料の測定に関して信頼性
があると考えることができる。
圧力測定された血液の使用は、血液気体器械使用の監
視に関して満足のいくものであると考えられるが、該方
式は多数の欠点を有しており、そのために、研究室での
非常に少割合の場合以外のあらゆる場合における使用が
限定される。
例えば、人間から得られた血液試料は、試料の圧力測
定および試験を行わなければならない研究室の人間に対
して、重大な健康上の被害を与える可能性のある肝炎ウ
ィルスおよびHIVなどの伝染性病原体に汚染されがちで
ある。さらに、pCO2およびpO2を測定するために一般的
に使用される機器が血液のpHの測定にも使用されてい
る。圧力測定された血液のpH値は既知でないため、該試
料をpH測定の監視用には使用することができず、そして
別のpH対照標準を使用しなければならない。
同様に血液試料に関するpCO2、pO2およびpHの測定を
行う多くの研究室は、血液気体器械の近くに置かれてい
るCO−酸素計で合計ヘモグロビンおよびヘモグロビン留
分も測定している。しかしながら、圧力測定用に使用さ
れた血液は無作為の患者試料から得られているため、圧
力測定された試料は既知のヘモグロビン値を有しておら
ず、従ってCO−酸素計を監視するためには有用ではな
い。従って、別の対照基準がこの器械用にも必要であ
る。
最後に、圧力測定された血液試料を適切に準備するた
めの全工程は訓練された技術を必要としそして多くの研
究室は訓練された人間や試料準備時間を有していない。
これらの欠点のために、ほとんどの研究室は人間血液
を模倣しているが新鮮な血液とは全く異なる性質を有す
る対照基準を使用している。例えば、CO2およびO2を用
いて圧力測定されている緩衝水溶液がしばしば使用され
ている。これらの物質はpH、pCO2およびpO2に関するあ
らかじめ測定された値に関して評価される。しかしなが
ら、組成、物理的性質および化学的性質においてそれら
は全血とは非常に異なっている。
他の対照基準は改質された人間赤血球の緩衝懸濁液ま
たは溶解された赤血球から製造されたヘモグロビン溶液
からなっている。これらの物質は水性基礎の対照用のも
のより実際の血液に近い性質を有しているが、それらの
pO2緩衝作用および新鮮血液のO2飽和特性供与不能性の
ためにこれらの物質は圧力測定された新鮮血液よりむし
ろ水溶液と似た行動をする。さらに、それらは人間血液
から製造されるため、技術者の健康上の危険は排除でき
ない。
まとめると、圧力測定された新鮮な人間血液の代わり
に使用されている市販の血液気体対照は一般的には簡便
性、経済性および理想的な対照基準の間の妥協物である
と考えられている。
感染に対して敏感性でなく、包装することができて血
液試料の使用時に必要な試料採取および製造段階を省く
ことができ、そして包装形で安定な基準溶液に対する要
望がある。さらに、その溶液は新鮮な人間血液と同じ方
法で圧力測定できて新鮮な人間血液と同様なO2飽和特性
および他の性質を有する対照基準を与えなければならな
いが、血液試料とは異なりこれらのパラメーター並びに
pO2およびpCO2の測定における器械性能を監視するため
のあらかじめ測定されたpHおよびヘモグロビン値を有し
ているであろう。
市販の血液を基にした物質の一部は圧力測定用の予備
包装流体として使用することができるが、相当な割合の
ヘモグロビンからメトヘモグロビン（これは酸素と結合
しない）への酸化を伴わずにこれらの物質を製造および
貯蔵することができないため、溶液は新鮮な血液の酸素
飽和性質を失ってしまい、その結果として、該物質は圧
力測定溶液としての血液代用品として不適当になる。
血液を基にした物質中のメトヘモグロビン含有量を減
少させるための系を提供しようとする試みが種々の科学
者の研究主題であった。例えば、チャン（Chiang）他の
米国特許4,485,174中では「メトヘモグロビンリダクタ
ーゼ」酵素系が低いメトヘモグロビン水準を保つための
手段として記載されている。しかしながら、ヘモグロビ
ン溶液が酸素含有雰囲気下に貯蔵されている時にはメト
ヘモグロビン還元用試薬の供給が枯渇するため、この系
は限定された有用性しか示さなかった。
他の血液−気体対照溶液および方法は米国特許3,859,
049、米国特許3,973,913、米国特許4,001,142、および
米国特許4,469,792中に記載されている。さらに、血液
−気体対照溶液および方法はスタイナー（Steiner）
他、クリニカル・ケミストリー（Clinical Chemistr
y）、24、793（1978）により記載されている。しかしな
がら、これらのそれぞれは限定された貯蔵寿命を有する
対照基準および／または生理学的に不正確な値を与える
化学的調合物を記載している。
従って、適当な気体混合物を用いる平衡化後に血液−
気体分析装置の監視用に使用できる血液を基にした基準
溶液に対する要望が依然として存在している。基準溶液
は好適には長い貯蔵寿命を有し、生理学的に正確な血液
−気体値を与え、そして多数の試料で均一な値を与える
べきである。
発明の要旨 本発明は、血液−気体分析器械使用およびCO−酸素計
用の対照基準として使用することのできる安定なヘモグ
ロビン溶液に関するものである。より特に、本発明は血
液中に一般的に存在している種々の気体で平衡化されて
新鮮な全血中で通常見いだされるパラメーターと同様な
種々のパラメーターを有する溶液を与えることのできる
ヘモグロビン−含有水溶液に関するものである。そのよ
うな平衡化された溶液は血液−気体分析およびCO−酸素
計器械使用における対照としての用途を有している。
本発明の一態様は、 ａ）ヘモグロビン、 ｂ）あらかじめ測定された気体混合物を用いる平衡化後
に溶液のpHを安定化させるための炭酸水素塩イオン源、 ｃ）メトヘモグロビンの低い水準を保つためのチオ官能
基源、 ｄ）メトヘモグロビン還元反応に触媒作用を与えるため
の金属イオン触媒源、 ｅ）少なくとも１種の有機ポリ燐酸エステル、および ｆ）有機緩衝剤 からなる水溶液である。
嫌気性条件を保つために、混合物はCO2を含有してい
る不活性雰囲気（好適には窒素）下に貯蔵される。有機
ポリ燐酸エステル類は、ヘモグロビン分子をメトヘモグ
ロビンへの酸化を容易に受けないような空間的構造で安
定化させるために作用する。
さらに、該溶液は種々の追加成分類も含有することも
でき、それらには抗バクテリア剤および抗菌・カビ剤並
びに赤血球溶解剤が包含されるがそれらに限定されるも
のではない。
該溶液は使用直前まで密封された環境中で嫌気性条件
下に保たれている。対照としてのそれの使用が望まれて
いる時には、溶液を例えば圧力測定の如き方法により生
理学的気体を用いて平衡化することができる。圧力測定
中に生成するかもしれないメトヘモグロビンを接触還元
させるために作用するチオ基および金属イオン触媒の存
在によりメトヘモグロビンの水準は低く保たれる。平衡
化されると、該系は血液気体/pH分析器械使用を監視す
るのに適しているpH、PCO2およびpO2の値を与える。該
溶液はCO−酸素計器械使用を目盛り付けおよび監視する
ためのヘモグロビンおよびヘモグロビン種の画分の生理
学的水準も与える。該溶液は電解質（Na+、K+、Ca++、C
l-）用の基準溶液としても使用することができる。最後
に、該溶液は新鮮な全血と同様な酸素飽和特性も示して
いる。
発明の詳細な記載 本発明は、特に血液気体およびCO−酸素計器械使用の
ための安定な基準溶液である。生理学的気体が貯蔵中に
溶液中に存在しているような血液気体/CO−酸素計の目
盛り付けおよび監視用にこれまでに使用されている溶液
とは異なり、本発明の溶液は使用直前に生理学的気体を
用いて平衡化される安定なヘモグロビン水溶液からなっ
ている。この溶液およびそれに伴なう平衡化方法によ
り、これまでに使用されている対照のものより長い貯蔵
寿命を有する血液気体基準溶液が得られる。これは、貯
蔵、気体平衡化および使用中の望ましくないメトヘモグ
ロビンの生成を抑制するために使用する金属イオンで触
媒作用を受けたメトヘモグロビン還元系の使用により、
一部が達成されるものである。
細胞を含まないヘモグロビン溶液は健康な動物の血液
から製造される。好適態様では、ヘモグロビン源は人間
の血液ではなく牛の血液である。改質された赤血球溶液
および支質を含まない人間のヘモグロビン溶液は市販さ
れているが、これらの人間源の溶液は肝炎ウィルスおよ
びHIVなどの種々の人間の病原体による汚染に対して敏
感である。従って血液を基にした基準溶液中では非−人
間血液製品の使用が望ましい。そのためには、健康な動
物から採取された牛の血液の使用が好ましく、その理由
は物理的および化学的特性において人間の血液とそれが
似ているためである。
さらに、本発明は他の対照基準中で見られるものと比
べて新鮮な全血のものと似ている酸素飽和特性も示す。
例えば、酸素飽和を分圧に対してプロットする時には、
既知の基準溶液は双曲線を示す。それとは対照的に、本
発明の溶液は新鮮な全血と同様にＳ状曲線を示す。さら
に、50％飽和を得るために必要な酸素分圧に関する値す
ななちP50値が本発明の基準溶液に対して測定されてい
る。牛の赤血球誘導体から製造された圧力測定された溶
液から得られるこのP50値は18−34mmHgの範囲内であ
り、26の公式値であった。この値は新鮮な人間の血液か
ら得られるものの、一般的には約27mmHg、と非常に近
い。
赤血球の溶液を食塩水で繰り返し洗浄する。その後、
洗浄された赤血球を脱イオン水と一緒にする。この時点
で、一部の赤血球溶解が起きるかもしれない。次に、残
りの赤血球を溶解剤の添加により溶解させる。好適態様
では、溶解剤は塩化ベンゼトニウムである。この化合物
は、それが細胞溶解剤として作用することの他に抗バク
テリアおよび抗菌・カビ活性も与えるため、選択されて
いる。任意に、この時点で例えば好適な２−フェノキシ
エタノールの如き別の化合物を溶液に加えて、溶液にさ
らに抗バクテリアおよび抗菌・カビ活性を与えることも
できる。生じた溶液は完全に溶解された赤血球支質およ
びヘモグロビンを溶液中に含有している。支質をこの時
点で遠心により除去することもでき、またはそれを次の
処理段階後に除去することもできる。
次にメトヘモグロビン還元系を完全に溶解されたヘモ
グロビン溶液に加える。好適なメトヘモグロビン還元系
は、有効なチオ（−SH）官能基を有する化学物質群から
選択されたスルホヒドロ化合物を含んでいる。そのよう
な化学物質には還元形のグルタチオン、メルカプトエタ
ノール、システインおよびそれらの誘導体類が包含され
るが、それらに限定されるものではない。触媒量の金属
イオンを溶液に加えられたセレン、テルルおよび銅の塩
により供給して、メトヘモグロビン還元反応に触媒反応
を与える。そのような金属イオンで触媒作用を受けたメ
トヘモグロビン還元系は、マスカワ（Masukawa）および
イワタ（Iwata）、ライフ・サイエンス（Life Sienc
e）、21（５）、695（1977）中に記載されており、それ
の教示はここでは参照として記しておく。この参考文献
では、メトヘモグロビンがグルタチオン、２−メルカプ
トエタノールおよびシステインにより還元される反応用
の触媒として、セレナイト、セレネートおよびセレノシ
スチンが記載されている。
さらに、ポリ燐酸エステル化合物の添加により溶媒に
対してさらにメトヘモグロビン生成抵抗性を付与するこ
ともできる。この化合物は、ヘモグロビンをメトヘモグ
ロビン形に容易に酸化されないような空間的構造中で安
定化される。好適なポリ燐酸エステル化合物には、2,3
−ジホスホグリセレートイノシトールヘキサホスフェー
ト（フィチン酸とも称されている）、およびアデノシン
トリホスフェートが包含される。ヘモグロビンを安定化
させるためのポリ燐酸エステル類の使用はマンゾウリ
（Mansouri）、ヘモグロビン（Hemoglobin）、５
（６）、579（1981）によりさらに詳細に記載されてお
り、それの教示はここでは参照として記しておく。
上記のヘモグロビン安定化系の添加後に、溶液のpHを
生理的範囲内に調節する。好適態様では、pHを例えば窒
素または希ガスの如き不活性雰囲気下で水性NaOHを使用
して約7.0−7.6の間に調節する。炭酸水素イオン源、好
適には炭酸水素ナトリウム、並びにグッズ緩衝剤および
それらの誘導体から選択された適当な有機緩衝剤を加え
て、pHを緩衝する。好適な緩衝剤には、Ｎ−２−ヒドロ
キシエチルピペラジン−Ｎ′−２−エタンスルホン酸
（HEPES;pKa＝7.31）、３−［Ｎ−ビス（ヒドロキシエ
チル）−アミノ］−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸
（DIPSO;pKa＝7.35）、ピペラジン−N,N′−ビス（２−
ヒドロキシプロパンスルホン酸）（POPSO;pKa＝7.6
3）、３−［Ｎ−（トリス−ヒドロキシメチル）メチル
アミノ］−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（TAPSO;
pKa＝7.39）、およびＮ−ヒドロキシエチル−ピペラジ
ン−Ｎ′−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（HEPPS
O;pKa＝7.73）が包含される。
溶液を0.2um最大孔寸法の最終的フィルターを有する
一連の膜フィルター中に通して、残っている赤血球支質
を除去する。任意に、発泡防止剤をこの時点で加えるこ
ともできる。
ヘモグロビン溶液を次に約４−７％の二酸化炭素を含
有している窒素または他の不活性気体を用いて泡立させ
る。この窒素による泡立ち段階が溶液中のオキシヘモグ
ロビンを還元されたヘモグロビンに転化させそして嫌気
性条件を保つために作用している。気体混合物中の二酸
化炭素は溶液中での約7.0−7.2の間という許容可能なpH
値を保つために使用される。次に溶液を溶液中の泡立ち
と同様な雰囲気中で例えばガラスアンプルの如き容器中
に密封する。
水溶液中に含有されている生成したヘモグロビンは好
適には、少なくとも約95％の還元されたヘモグロビン、
３％より少ないメトヘモグロビン、２％より少ないオキ
シヘモグロビン、２％より少ないカルボキシヘモグロビ
ンおよび0.3容量％より少ない酸素からなっている。溶
液はそこに含有されている還元されたヘモグロビンの結
果として紫青色を有している。たとえあるとしても少量
の酸化剤（分子状酸素を含む）はわずかであるため、メ
トヘモグロビンの生成はほとんど完全に排除される。溶
液中には無視できるほどのメトヘモグロビンしか存在し
ていないため、メトヘモグロビン還元系はこの時点では
使用されない。むしろ、系はその後の気体平衡化中に溶
液使用直前のメトヘモグロビンの生成を抑制するために
作用するであろう。
溶液を血液気体/CO−酸素計器械の監視用に使用しよ
うとする時には、それを最初に生理学的気体混合物を用
いて平衡化しなければならない。好適な方法では、この
平衡化は圧力測定により行われる。圧力測定とは、希望
する気体を液体中に泡立たせることによりまたは導入気
体と相互作用する大表面積を有する液体膜を生成するこ
とにより液体が気相と平衡化されるような方法を記すた
めに使用されている語句である。圧力測定の詳細な論議
は、R.W.バーネット（Burnett）、クリニカル・ケミス
トリー（Clinical Chemistry）、27（10）、1761（198
1）により提唱されており、それの教示はここでは参照
として記しておく。圧力測定中（または周囲空気への露
呈時）に、溶液は還元されたヘモグロビンの存在を示す
紫青色からオキシヘモグロビンの存在を示す赤色に急速
に変化する。圧力測定中に生成するメトヘモグロビンの
量は、前記の金属イオンで触媒作用を受けたメトヘモグ
ロビン還元系のために、最少のままである。
平衡化の完了時に、溶液は既知のあらかじめ測定され
た水準のpH、pCO2およびpO2を有しているであろう。従
って、溶液を血液気体/pH分析器により分析することが
でき、そして器械使用を監視し且つ設定点からの最少流
程を確実にするために使用できる。該溶液は、合計ヘモ
グロビンおよびヘモグロビン群の留分類の水準を測定す
るために使用されるCO−酸素計装置の目盛り付けおよび
監視用にも使用することができる。
好適態様では、該溶液は正常人間の血液見本であっ
た。この態様では、該溶液は下記の組成を有していた： 使用時に、この溶液を圧力測定計により５容量％のCO
2、12％のO2および83％のN2からなる気体混合物を用い
て平衡化した。pHが約7.38−約7.42の範囲内になり、pC
O2が約34−約38mmHgの範囲内になり、そしてpO2が約83
−約89mmHgの範囲内になるまで、この平衡化は37℃にお
いて行われた。最も好適な態様では、平衡化後に溶液は
37℃において約7.4のpH、約36mmHgのpCO2および約86mmH
gのpO2を有するであろう。
他の好適態様では、該溶液は酸性症に罹っている人間
患者の血液見本であった。この態様では、該溶液は下記
の組成を有していた： 使用時に、この溶液を圧力測定計により７容量％のCO
2、７％のO2および86％のN2からなる気体混合物を用い
て平衡化した。pHが約7.12−約7.18の範囲になり、pCO2
が約48−約52mmHgの範囲内になり、そしてpO2が約47−
約53mmHgの範囲内になるまで、この平衡化は37℃におい
て行われた。最も好適な態様では、平衡化後に、溶液は
37℃において約7.15のpH、約50mmHgのpCO2および約50mm
HgのpO2を有するであろう。
さらに別の好適態様では、該溶液は滷性症に罹ってい
る人間患者の血液見本であった。この態様では、該溶液
は下記の組成を有していた： 使用時に、この溶液を圧力測定計により2.8容量％のC
O2、20％のO2および77.2％のN2からなる気体混合物を用
いて平衡化した。pHが約7.58−約7.62の範囲内になり、
pCO2が約19−約21mmHgの範囲内になり、そしてpO2が約1
40−約144mmHgの範囲内になるまで、この平衡化は37℃
において行われた。最も好適な態様では、平衡化後に、
溶液は37℃において約7.6のpH、約20mmHgのpCO2および
約142mmHgのpO2を有するであろう。
大量の正常血液の基準溶液見本を製造するための好適
なバッチ工程成績表を下記に示す。
試薬： （Ａ）牛の赤血球懸濁液 （Ｂ）それぞれ２％の２−フェノキシエタノールおよび
塩化ベンゼトニウムを含有している水溶液 （Ｃ）0.72％のNa2SeO3および1.87％のフィチン酸を含
有している水溶液 （Ｄ）約7.4の合計pHを与えるための、１リットルの脱
イオン水中の119.15gのHEPESおよび11.03gのNaOH （Ｅ）１リットルの脱イオン水中の4.92gの還元された
グルタチオン 工程： １）牛の赤血球懸濁液を食塩水溶液で少なくとも４回洗
浄し、 ２）脱イオン水を用いて合計ヘモグロビン含有量を18.0
g％に調節し（一部の赤血球の溶解がその時点で起こる
かもしれない）、 ３）50mlの試薬（Ｂ）を800mlの部分的に溶解された赤
血球懸濁液に加え、少量を同時に加え、そして充分混合
してヘモグロビン凝集を避けることにより、赤血球溶解
を完了させ、 ４）段階（３）で得られた850mlの完全に溶解されたヘ
モグロビン溶液にそれぞれ50mlの試薬（Ｃ）および
（Ｄ）を加え、 ５）50mlの試薬（Ｅ）を加えて合計容量を１リットルと
し、 ６）窒素（100％）雰囲気中で４％NaOH水溶液をゆっく
り加えることにより溶液のpHを7.4に調節し（加えられ
るNaOHの合計容量は記録されて前記の試薬の添加が必要
かどうかが決められる）、 ７）2.45g/lの固体NaHCO3を溶液に加え、 ８）ヘモグロビン溶液を約0.2umの最大孔寸法を有する
フィルターを通して濾過し、 ９）少量の例えば発泡防止剤Ａ濃縮物の如きシリコーン
基にした泡除去剤を溶液に加え、 10）オキシヘモグロビン値が合計ヘモグロビンの１％よ
り少なくなるまで、ヘモグロビン溶液に約４−７％のCO
2を含有している窒素気体を室温において流し、 11）溶液を頭部空間に段階10）の気体混合物を含有する
個々の密封されたアンプル中に分割する。
生成した基準溶液の密封されたアンプルは室温におい
て少なくとも３ヶ月間そして４℃において少なくとも１
年間貯蔵することができた。血液−気体/CO−酸素計装
置を監視するための使用が望まれる時に、アンプルを開
きそして前記の如きあらかじめ測定された気体混合物を
用いる圧力測定にかけた。生成した基準溶液は、pH、pC
O2、pO2、合計ヘモグロビン含有量およびヘモグロビン
種類の部分などの新鮮な人間全血の多くの特徴を有して
いた。
同等物 当技術の専門家は、日常的な経験だけでここに記載さ
れている発明の個別態様の多くの同等物を認識または確
認できるであろう。そのような同等物は下記の請求の範
囲により包括されることが意図される。

Claims (17)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】ａ）ヘモグロビン、 ｂ）炭酸水素塩イオン源、 ｃ）チオ官能基源、 ｄ）金属イオン触媒源、 ｅ）少なくとも１種の有機ポリ燐酸エステル、および ｆ）有機緩衝剤 を含有している水溶液からなる安定なヘモグロビン基準
    溶液。
  2. 【請求項２】ヘモグロビンが95％の還元されたヘモグロ
    ビンを含んでいる、請求項１に記載の溶液。
  3. 【請求項３】ａ）約３重量％より少ないメトヘモグロビ
    ン、 ｂ）約２重量％より少ないカルボキシヘモグロビン、 ｃ）約２重量％より少ないオキシヘモグロビン、および ｄ）約0.3容量％より少ない酸素 を含有している、請求項２に記載の溶液。
  4. 【請求項４】さらに抗微生物剤を含んでいる、請求項３
    に記載の安定な基準溶液。
  5. 【請求項５】O2、CO2およびN2の適切な気体混合物を用
    いる圧力測定後に約18−約34mmHgの間のP50を有する、
    請求項４に記載の安定な基準溶液。
  6. 【請求項６】ヘモグロビンが哺乳動物のヘモグロビンで
    ある、請求項５に記載の安定な基準溶液。
  7. 【請求項７】ヘモグロビンが牛のヘモグロビンである、
    請求項６に記載の安定な基準溶液。
  8. 【請求項８】チオ官能基が還元されたグルタチオン、メ
    ルカプトエタノール、システインまたはそれらの誘導体
    類から選択されたスルホヒドロ化合物により供給され
    る、請求項７に記載の安定な基準溶液。
  9. 【請求項９】金属イオン触媒源がセレン、テルルおよび
    銅からなる群から選択された金属の塩を含む、請求項８
    に記載の安定な基準溶液。
  10. 【請求項１０】有機ポリ燐酸エステル化合物が2,3−ジ
    ホスホグリセレート、フィチン酸およびトリ燐酸アデノ
    シンからなる群から選択される、請求項９に記載の安定
    な基準溶液。
  11. 【請求項１１】CO2および基準溶液に関して不活性な気
    体を含有している頭部空間を有する密封された容器中に
    含有されている、請求項１に記載の安定な基準溶液。
  12. 【請求項１２】ａ）約13−約15g/dlの間の ｉ）少なくとも約95％の還元されたヘモグロビン、 ii）約３％より少ないメトヘモグロビン、 iii）約２％より少ないカルボキシヘモグロビン、 iv）約２％より少ないオキシヘモグロビン、および ｖ）約0.3容量％より少ない酸素 の部分からなる牛のヘモグロビン溶液、 ｂ）約0.09−約0.11g/dlの間の２−フェノキシエタノー
    ル、 ｃ）約0.09−約0.11g/dlの間の塩化ベンゼトニウム、 ｄ）約1.0−約20μＭの範囲の濃度の亜セレン酸ナトリ
    ウム、 ｅ）約0.1−約1.4mMの範囲の濃度のフィチン酸、 ｆ）約0.5−約8mMの範囲の濃度の還元されたグルタチオ
    ン、 ｇ）約28.5−約30.5mMの範囲の濃度の炭酸水素ナトリウ
    ム、および ｈ）約20−約40mMの範囲の濃度のHEPES緩衝剤 を含有している水溶液からなる安定なヘモグロビン基準
    溶液。
  13. 【請求項１３】少なくとも約93％の窒素、希ガスおよび
    それらの混合物からなる群から選択される不活性気体並
    びに残りの量のCO2からなる気体を含有している頭部空
    間を有する密封された容器中に含まれている、請求項12
    に記載の安定な基準溶液。
  14. 【請求項１４】ａ）約８−約10g/dlの間の ｉ）少なくとも約95％の還元されたヘモグロビン、 ii）約３％より少ないメトヘモグロビン、 iii）約２％より少ないカルボキシヘモグロビン、 iv）約２％より少ないオキシヘモグロビン、および ｖ）約0.3容量％より少ない酸素 の部分からなる牛のヘモグロビン溶液、 ｂ）約0.09−約0.11g/dlの間の２−フェノキシエタノー
    ル、 ｃ）約0.09−約0.11g/dlの間の塩化ベンゼトニウム、 ｄ）約１−約20μＭの範囲の濃度の亜セレン酸ナトリウ
    ム、 ｅ）約0.1−約1.4mMの範囲の濃度のフィチン酸、 ｆ）約0.5−約8mMの範囲の濃度の還元されたグルタチオ
    ン、 ｇ）約19.5−約21.5mMの範囲の濃度の炭酸水素ナトリウ
    ム、および ｈ）約20−約40mMの範囲の濃度のHEPES緩衝剤 を含有している水溶液からなる安定なヘモグロビン基準
    溶液。
  15. 【請求項１５】少なくとも約93％の窒素、希ガスおよび
    それらの混合物からなる群から選択される不活性気体並
    びに残りの量のCO2からなる気体を含有している頭部空
    間を有する密封された容器中に含まれている、請求項14
    に記載の安定な基準溶液。
  16. 【請求項１６】ａ）約17−約19g/dlの間の ｉ）少なくとも約95％の還元されたヘモグロビン、 ii）約３％より少ないメトヘモグロビン、 iii）約２％より少ないカルボキシヘモグロビン、 iv）約２％より少ないオキシヘモグロビン、および ｖ）約0.3容量％より少ない酸素 の部分からなる牛のヘモグロビン溶液、 ｂ）約0.09−約0.11g/dlの間の２−フェノキシエタノー
    ル、 ｃ）約0.09−約0.11g/dlの間の塩化ベンゼトニウム、 ｄ）約１−約20μＭの範囲の濃度の亜セレン酸ナトリウ
    ム、 ｅ）約0.1−約1.4mMの範囲の濃度のフィチン酸、 ｆ）約0.5−約8mMの範囲の濃度の還元されたグルタチオ
    ン、 ｇ）約19−約21mMの範囲の濃度の炭酸水素ナトリウム、
    および ｈ）約20−約40mMの範囲の濃度のHEPPSO緩衝剤 を含有している水溶液からなる安定なヘモグロビン基準
    溶液。
  17. 【請求項１７】少なくとも約93％の窒素、希ガスおよび
    それらの混合物からなる群から選択される不活性気体並
    びに残りの量のCO2からなる気体を含有している頭部空
    間を有する密封された容器中に含まれている、請求項16
    に記載の安定な基準溶液。
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Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5328848A (en) * 1988-07-25 1994-07-12 Abbott Laboratories Method for hydrating and calibrating a sterilizable fiber-optic catheter
US5045529A (en) * 1989-03-27 1991-09-03 Bionostics, Inc. Tonometric fluid for blood gas and co-oximetry instruments
US5558985A (en) * 1989-03-27 1996-09-24 Bionostics Incorporated Stable hemoglobin reference solution
US5246859A (en) * 1990-10-15 1993-09-21 Puritan-Bennett Corporation Method of stabilizing a carbon dioxide sensor
TW284788B (ja) * 1991-05-28 1996-09-01 L Air Liquide Soliete And Nyme Dour L Expl Des Proce
IT1250746B (it) * 1991-08-02 1995-04-21 Gabrio Tancredi Metodo per produrre una sostanza di calibrazione in fase liquida avente una predeterminata concentrazione di c02 adatta alla calibrazione di strumenti analitici del tipo emogasanalizzatori
JP3193494B2 (ja) * 1992-01-03 2001-07-30 レール・リキード・ソシエテ・アノニム・プール・レテュード・エ・レクスプロワタシオン・デ・プロセデ・ジョルジュ・クロード 希ガスを使用し、グルコースから高フルクトースコーンシロップを製造する方法
US6509192B1 (en) * 1992-02-24 2003-01-21 Coulter International Corp. Quality control method
US6362003B1 (en) 1992-02-24 2002-03-26 Coulter Corporation Hematological reference control composition containing leukocyte analogs, methods of making, and uses thereof
EP0587877B1 (en) 1992-04-03 1997-06-18 L'air Liquide, Societe Anonyme Pour L'etude Et L'exploitation Des Procedes Georges Claude A method of controlling browning reactions using noble gases
US6342261B1 (en) 1992-04-03 2002-01-29 American Air Liquide Method of preserving foods using noble gases
US5364777A (en) * 1992-04-03 1994-11-15 American Air Liquide Method of improving lipase activity using noble gases
US5212092A (en) * 1992-05-22 1993-05-18 Puritan-Bennett Corporation Storage and calibration solution for multiparameter intravascular blood gas sensor device
US5739037A (en) * 1992-09-29 1998-04-14 Drew Scientific Limited Process for eliminating labile glycohaemoglobin from a sample
US5382525A (en) * 1992-11-27 1995-01-17 American Air Liquide Method of effecting increased performance of diagnostic enzyme reaction systems using noble gases
CA2109458A1 (en) 1992-11-27 1994-05-28 Kevin C. Spencer Method of improving processes using pectinase enzymes with noble gases
US5328823A (en) * 1992-11-27 1994-07-12 American Air Liquide Enzyme-based biosensors for detecting noble gases
SE504914C2 (sv) * 1993-06-11 1997-05-26 Boehringer Mannheim Scandinavi Förfarande för bestämning av HbA1C och komposition för genomförandet av förfarandet
US6288027B1 (en) 1995-03-23 2001-09-11 Biopure Corporation Preserving a hemoglobin blood substitute with a transparent overwrap
US6271351B1 (en) 1995-03-23 2001-08-07 Biopure Corporation Method for preserving a hemoglobin blood substitute
US6610832B1 (en) 1995-03-23 2003-08-26 Biopure Corporation Preserving a hemoglobin blood substitute with a transparent overwrap
AU1083497A (en) * 1995-11-30 1997-06-19 Somatogen, Inc. Method for control of functionality during cross-linking of hemoglobins
EP0868521A2 (en) 1995-12-22 1998-10-07 Somatogen Inc. Globins containing binding domains
EP1950298A3 (en) 1997-05-02 2008-12-24 Baxter Biotech Technology S.A.R.L. Hemoglobin mutants with increased soluble expression and/or reduced nitric oxide scavenging
WO1999018979A1 (en) * 1997-10-10 1999-04-22 Baxter International Inc. Storage-stable hemoglobin composition
JP5410647B2 (ja) * 1999-07-01 2014-02-05 シスメックス株式会社 グリコヘモグロビン分析装置用の標準物質及びコントロール物質
JP2003517462A (ja) * 1999-07-22 2003-05-27 アベンティス・ファーマスーティカルズ・インコーポレイテツド 複数回投与用エリスロポエチン製剤
KR20020032534A (ko) 1999-07-22 2002-05-03 게리 디. 스트리트, 스티븐 엘. 네스비트 보존 제약 제형
US6518010B2 (en) 2001-02-28 2003-02-11 Biopure Corporation Use of defibrinated blood for manufacture of a hemoglobin-based oxygen carrier
WO2002085111A1 (en) 2001-04-18 2002-10-31 Northfield Laboratories Flexible container system for storage of stabilized hemoglobin solutions
US7001715B2 (en) * 2002-02-28 2006-02-21 Biopure Corporation Purification of red blood cells by separation and diafiltration
US6846678B2 (en) * 2002-12-20 2005-01-25 Terumo Cardiovascular Systems, Co.-Tustin Gamma sterilized buffer solutions for pH measurement
WO2006003926A1 (ja) * 2004-06-30 2006-01-12 Terumo Kabushiki Kaisha ウィルス不活化ヘモグロビンおよびその製造方法
US8251907B2 (en) 2005-02-14 2012-08-28 Optiscan Biomedical Corporation System and method for determining a treatment dose for a patient
US20080077074A1 (en) * 2006-08-15 2008-03-27 Richard Keenan Method of analyzing the composition of bodily fluids
US20090004159A1 (en) * 2006-01-24 2009-01-01 The Board Of Trustees Of The University Of Illinoi Polymerized Hemoglobin Media and Its Use in Isolation and Transplantation of Islet Cells
WO2007087570A2 (en) * 2006-01-24 2007-08-02 Northfield Laboratories, Inc. Polymerized hemoglobin media and its use in isolation and transplantation of islet cells
US8412293B2 (en) * 2007-07-16 2013-04-02 Optiscan Biomedical Corporation Systems and methods for determining physiological parameters using measured analyte values
JP5294257B2 (ja) * 2008-11-13 2013-09-18 アルフレッサファーマ株式会社 ヘモグロビンの測定方法および測定用キット
JP5554000B2 (ja) * 2009-02-19 2014-07-23 積水メディカル株式会社 糖化ヘモグロビン測定用試料の測定方法
US9091676B2 (en) 2010-06-09 2015-07-28 Optiscan Biomedical Corp. Systems and methods for measuring multiple analytes in a sample
CN104094099B (zh) 2011-04-15 2017-05-03 罗氏血液诊断股份有限公司 测量细胞体积和成份
CN114176510B (zh) * 2021-11-29 2024-08-23 中南大学湘雅医院 一种头戴式眼压测量仪及云端平台

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4163734A (en) * 1975-05-30 1979-08-07 Radiometer A/S Reference liquid for blood gas equipment
US3973913A (en) * 1976-01-29 1976-08-10 Louderback Allan Lee Blood control standard
US4189401A (en) * 1978-07-17 1980-02-19 Beckman Instruments, Inc. Method of storing a biological reference control standard and biological reference control standard obtained thereby
US4199471A (en) * 1978-11-16 1980-04-22 Louderback Allan Lee Freeze-stable liquid blood control standard
US4301117A (en) * 1979-01-30 1981-11-17 Analytical Products, Inc. Gas-liquid equilibration apparatus
US4289648A (en) * 1979-03-20 1981-09-15 Ortho Diagnostics, Inc. Blood gas controls composition, method and apparatus
US4279775A (en) * 1979-12-31 1981-07-21 Louderback Allan Lee Blood gas control
US4299728A (en) * 1980-07-21 1981-11-10 Instrumentation Laboratory Inc. Blood gas control
US4469792A (en) * 1980-12-31 1984-09-04 Allied Corporation Blood gas calibration and control fluid utilizing stroma-free hemoglobin
US4401652A (en) * 1980-12-31 1983-08-30 Allied Corporation Process for the preparation of stroma-free hemoglobin solutions
US4485174A (en) * 1982-09-29 1984-11-27 Instrumentation Laboratory Inc. Hemoglobin-based blood gas control
US4711852A (en) * 1984-11-05 1987-12-08 Akzo N.V. Control for blood gas analyzers and hemoglobin analysis
NL8403425A (nl) * 1984-11-09 1986-06-02 Stichting Gastransport Stromavrije hemoglobine-oplossing, werkwijze voor de bereiding daarvan en toepassing daarvan.
US4843013A (en) * 1986-04-09 1989-06-27 Bionostics, Incorporated Multiple control standard for blood analysis
US4753888A (en) * 1986-04-09 1988-06-28 Bionostics, Inc. Multiple control standard for blood analysis
US4945062A (en) * 1988-06-15 1990-07-31 Bionostics Incorporated Control for blood gas/calcium analysis instrumentation
US5013666A (en) * 1988-06-15 1991-05-07 Bionostics, Incorporated Control for blood gas/calcium analysis instrumentation
US5045529A (en) * 1989-03-27 1991-09-03 Bionostics, Inc. Tonometric fluid for blood gas and co-oximetry instruments

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