JP2884628B2 - ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキット - Google Patents
ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキットInfo
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はヒトIL−６の免疫化学的測定方法に関するも
のである。
のである。
インターロイキン６−（BSF2/以下IL−６と略す）
は、種々の重要な生理活性を有し、広く細胞の増殖分化
に関与しているタンパク質である。さらにIL−６の異常
産生が種々の自己免疫疾患の病因因子である可能性が報
告されている（岸本、平野、Ann.Rev.Immuno.,6,p485,1
988年参照）。
は、種々の重要な生理活性を有し、広く細胞の増殖分化
に関与しているタンパク質である。さらにIL−６の異常
産生が種々の自己免疫疾患の病因因子である可能性が報
告されている（岸本、平野、Ann.Rev.Immuno.,6,p485,1
988年参照）。
生体内で多様な生理活性を強く発揮するIL−６の生理
的濃度を知ることは、各種疾患の新しい診断マーカーと
して期待されている。IL−６の生物活性測定法として
は、100fg/mlのIL−６が測定可能な高感度のものが報告
されている（T.Matsduaら、Eur.J.Immunol.,18,p951,19
88年参照）。しかしながら、この方法は、多数の検体を
迅速、且つ簡単に測定することができないという欠点を
有する。多数の検体を迅速、且つ簡単に測定する方法と
して一般に種々の免疫測定法が知られている。IL−６の
測定のために免疫測定法を応用した例として、前記T.Ma
tsudaらの報告によれば、検出系にアルカリホスファタ
ーゼを使用する方法によって、ヒト膀胱癌細胞由来IL−
６をヒト血清に希釈したモデル検体系において50pg/ml
のIL−６が測定可能である旨記載されている。しかしな
がら、この方法を大腸菌由来組換IL−６をヒト血清に溶
解して調製した検体モデル系においては上記のごとき感
度は得られなかった（第２図を参照のこと）。
的濃度を知ることは、各種疾患の新しい診断マーカーと
して期待されている。IL−６の生物活性測定法として
は、100fg/mlのIL−６が測定可能な高感度のものが報告
されている（T.Matsduaら、Eur.J.Immunol.,18,p951,19
88年参照）。しかしながら、この方法は、多数の検体を
迅速、且つ簡単に測定することができないという欠点を
有する。多数の検体を迅速、且つ簡単に測定する方法と
して一般に種々の免疫測定法が知られている。IL−６の
測定のために免疫測定法を応用した例として、前記T.Ma
tsudaらの報告によれば、検出系にアルカリホスファタ
ーゼを使用する方法によって、ヒト膀胱癌細胞由来IL−
６をヒト血清に希釈したモデル検体系において50pg/ml
のIL−６が測定可能である旨記載されている。しかしな
がら、この方法を大腸菌由来組換IL−６をヒト血清に溶
解して調製した検体モデル系においては上記のごとき感
度は得られなかった（第２図を参照のこと）。
一般に、ヒト検体中のIL−６を測定するには、分析系
が、ヒト検体中に自然に存在するIL−６をそれが自然に
存在する程度の濃度レベルにおいて検出することができ
るだけの感度を有すると共に、同レベルの濃度の組換IL
−６を検出できなければならない。なぜなら、そうでな
ければ、分析系の標準試薬として組換IL−６を使用する
ことができないからである。
が、ヒト検体中に自然に存在するIL−６をそれが自然に
存在する程度の濃度レベルにおいて検出することができ
るだけの感度を有すると共に、同レベルの濃度の組換IL
−６を検出できなければならない。なぜなら、そうでな
ければ、分析系の標準試薬として組換IL−６を使用する
ことができないからである。
従って、種々の一般的な免疫測定法が知られているに
もかかわらず、ヒト検体中のIL−６をそれが自然に存在
するような低濃度レベルにおいて検出できる程の実用的
な感度を有する分析方法は知られていなかった。
もかかわらず、ヒト検体中のIL−６をそれが自然に存在
するような低濃度レベルにおいて検出できる程の実用的
な感度を有する分析方法は知られていなかった。
従って本発明は、ヒトの検体中に存在するIL−６を検
出するのに十分な感度を有するIL−６の免疫測定法を提
供しようとするものであり、その前提条件としてヒトの
検体中に存在するIL−６及び組換IL−６の両者を同程度
の感度で検出することができる方法、及びその方法に使
用するためのキットを提供しようとするものである。
出するのに十分な感度を有するIL−６の免疫測定法を提
供しようとするものであり、その前提条件としてヒトの
検体中に存在するIL−６及び組換IL−６の両者を同程度
の感度で検出することができる方法、及びその方法に使
用するためのキットを提供しようとするものである。
本発明者らは前記の課題を解決すべく種々検討した結
果、一次抗体として抗−IL−６モノクローナル抗体を使
用し、二次抗体としてビオチンにより標識された抗−IL
−６ポリクローナル抗体を使用し、そしてストレプトア
ジビン／β−ガラクトシダーゼ接合体とβ−ガラクトシ
ダーゼの基質とを用いるという特定の組合せにより、数
十pg/mlの濃度のIL−６を測定することできるという全
く新しい知見を得、これに基づいて本発明を完成した。
果、一次抗体として抗−IL−６モノクローナル抗体を使
用し、二次抗体としてビオチンにより標識された抗−IL
−６ポリクローナル抗体を使用し、そしてストレプトア
ジビン／β−ガラクトシダーゼ接合体とβ−ガラクトシ
ダーゼの基質とを用いるという特定の組合せにより、数
十pg/mlの濃度のIL−６を測定することできるという全
く新しい知見を得、これに基づいて本発明を完成した。
従って本発明は、ヒトIL−６に対するモノクローナル
抗体、ビオチン標識抗ヒトIL−６ポリクローナル抗体、
並びに検出系としてのストレプトアビジン／β−ガラク
トシダーゼ及びその基質を用いることを特徴とするヒト
IL−６の免疫学的測定法；並びにヒトIL−６に対するモ
ノクローナル抗体、ビオチン標識抗ヒトIL−６ポリクロ
ーナル抗体、並びに検出系としてのストレプトアビジン
／β−ガラクトシダーゼを含んで成るIL−６の免疫化学
的測定キットを提供する。
抗体、ビオチン標識抗ヒトIL−６ポリクローナル抗体、
並びに検出系としてのストレプトアビジン／β−ガラク
トシダーゼ及びその基質を用いることを特徴とするヒト
IL−６の免疫学的測定法；並びにヒトIL−６に対するモ
ノクローナル抗体、ビオチン標識抗ヒトIL−６ポリクロ
ーナル抗体、並びに検出系としてのストレプトアビジン
／β−ガラクトシダーゼを含んで成るIL−６の免疫化学
的測定キットを提供する。
1.IL−６の免疫化学的測定法 IL−６の免疫化学的測定法は、ヒト血清、尿、その他
例えば関節液等中に含まれるIL−６の生理的濃度、ヒト
細胞を培養いたときの培養上清中のIL−６濃度、さらに
はIL−６を遺伝子工学的に生産したり、IL−６を反応さ
せたときに生じるサンプルのIL−６濃度を正確かつ迅速
に測定することを目的としている。
例えば関節液等中に含まれるIL−６の生理的濃度、ヒト
細胞を培養いたときの培養上清中のIL−６濃度、さらに
はIL−６を遺伝子工学的に生産したり、IL−６を反応さ
せたときに生じるサンプルのIL−６濃度を正確かつ迅速
に測定することを目的としている。
この方法においては、まず一次抗体としての抗−IL−
６モノクローナル抗体を固体支持体に固定する。この固
体支持体としては、マイクロタイタープレート、各種の
ビーズ状の例えばポリスチレン、ポリプロピレン等のプ
ラスチック製金属セラミックス等の無機物質製等の免疫
測定法において常用されている支持体を用いることがで
きる。また、抗体の固定も常法に従って行うことができ
る。次に、この固定された一次抗体と分析検体とを接触
せしめる。これにより検体中のIL−６は特異的に該抗体
と結合する。次に二次抗体を加え、一次抗体を介して支
持体に固定されたIL−６と二次抗体とを結合せしめる。
二次抗体には標識物質としてビオチンが結合している。
次に、検出系としてのストレプトアビジン／β−ガラク
トシダーゼを添加し、前記ビオチンとストレプトアビジ
ンとの結合を介してβ−ガラクトシダーゼが固定され
る。検出系の成分としてβ−ガラクトシダーゼを使用す
るのが本発明の特徴である。次に、β−ガラクトシダー
ゼの基質を加えることにより発色せしめ、この発色強度
を常法、例えば光度計により読み取る。発色性のβ−ガ
ラクトシダーゼ基質としては、免疫測定において常用さ
れている基質、例えば４−メチルウンベリフェリル−β
−Ｄ−ガラクトシド、オルトニトロフェニルガラクトピ
ラノシド（OPNG）等を用いることができる。
６モノクローナル抗体を固体支持体に固定する。この固
体支持体としては、マイクロタイタープレート、各種の
ビーズ状の例えばポリスチレン、ポリプロピレン等のプ
ラスチック製金属セラミックス等の無機物質製等の免疫
測定法において常用されている支持体を用いることがで
きる。また、抗体の固定も常法に従って行うことができ
る。次に、この固定された一次抗体と分析検体とを接触
せしめる。これにより検体中のIL−６は特異的に該抗体
と結合する。次に二次抗体を加え、一次抗体を介して支
持体に固定されたIL−６と二次抗体とを結合せしめる。
二次抗体には標識物質としてビオチンが結合している。
次に、検出系としてのストレプトアビジン／β−ガラク
トシダーゼを添加し、前記ビオチンとストレプトアビジ
ンとの結合を介してβ−ガラクトシダーゼが固定され
る。検出系の成分としてβ−ガラクトシダーゼを使用す
るのが本発明の特徴である。次に、β−ガラクトシダー
ゼの基質を加えることにより発色せしめ、この発色強度
を常法、例えば光度計により読み取る。発色性のβ−ガ
ラクトシダーゼ基質としては、免疫測定において常用さ
れている基質、例えば４−メチルウンベリフェリル−β
−Ｄ−ガラクトシド、オルトニトロフェニルガラクトピ
ラノシド（OPNG）等を用いることができる。
上記の方法を実施するための測定キットは、抗−IL−
６モノクローナル抗体、ビオチン標識された抗−IL−６
ポリクローナル抗体、及びストレプトアビジン／β−ガ
ラクトシダーゼ接合体を含んで成る。このキットはさら
にβ−ガラクトシダーゼ基質を含むことができるが、こ
れは分析現場において別途調達することも容易である。
６モノクローナル抗体、ビオチン標識された抗−IL−６
ポリクローナル抗体、及びストレプトアビジン／β−ガ
ラクトシダーゼ接合体を含んで成る。このキットはさら
にβ−ガラクトシダーゼ基質を含むことができるが、こ
れは分析現場において別途調達することも容易である。
2.IL−６に対するモノクローナル抗体 本発明に適当なIL−６に対するモノクローナル抗体と
は生体内で産生されるIL−６および標準品として使用す
る遺伝子工学的に作製されたIL−６に同程度の抗体価を
有するモノクローナル抗体である。該抗体は常法により
作製することができる。すなわち遺伝子工学的に作製し
た組換IL−６や培養細胞の上清等から分離精製したIL−
６をマウス、例えばBalb/c等に免疫して、抗体価が上が
ったところで、脾細胞をミエローマ細胞と融合してハイ
ブリドーマを作製する。次にIL−６を特異的に認識する
モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマをスクリ
ーニングすればよい。
は生体内で産生されるIL−６および標準品として使用す
る遺伝子工学的に作製されたIL−６に同程度の抗体価を
有するモノクローナル抗体である。該抗体は常法により
作製することができる。すなわち遺伝子工学的に作製し
た組換IL−６や培養細胞の上清等から分離精製したIL−
６をマウス、例えばBalb/c等に免疫して、抗体価が上が
ったところで、脾細胞をミエローマ細胞と融合してハイ
ブリドーマを作製する。次にIL−６を特異的に認識する
モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマをスクリ
ーニングすればよい。
3.IL−６に対するポリクローナル抗体 本発明に適当なIL−６に対するポリクローナル抗体と
は、生体内で産生されるIL−６および標準品として使用
する遺伝子工学的に生産されるIL−６に対して、同程度
の抗体価を有する抗体である。該抗体を生産する生物種
は、ウサギ、ヒツジ、ヤギなど種々の生物種を例示する
ことができる。該抗体を作製するための免疫原として
は、遺伝子工学的に作製された組換IL−６、例えば大腸
菌由来IL−６等を例示できる。
は、生体内で産生されるIL−６および標準品として使用
する遺伝子工学的に生産されるIL−６に対して、同程度
の抗体価を有する抗体である。該抗体を生産する生物種
は、ウサギ、ヒツジ、ヤギなど種々の生物種を例示する
ことができる。該抗体を作製するための免疫原として
は、遺伝子工学的に作製された組換IL−６、例えば大腸
菌由来IL−６等を例示できる。
以下本発明をさらに詳細に説明するために実施例を示
すが、本発明はこれら実施例に限定されるものではな
い。
すが、本発明はこれら実施例に限定されるものではな
い。
実施例1.ヒトIL−６の免疫化学的測定法 コート用緩衝液（0.05M炭酸ナトリウム、pH8〜９）に
溶解した２μg/mlの抗−IL−６モノクローナル抗体MH16
6（T.Matsdaら、Eur.J.Immunol.,18,p951,1988年参照）
を96穴プレート（NUNC社製）にウエルあたり100μｌ入
れ、４℃で１晩放置した。翌日、溶液を捨て、ブロック
用緩衝液（PBS,0.1％BSA,0.2％gelation,0.05％アジ化
ナトリウム）をウエルあたり150μｌ加え、30分以上室
温で放置した。次に溶液を捨て、リンス用緩衝液（PBS,
0.1％Tween20）で３回以上洗った後、測定すべきサンプ
ルを加え、室温で２〜３時間放置した。溶液を捨て、リ
ンス用緩衝液で３回以上洗った後、リンス用緩衝液に溶
解した５μg/mlのビオチン化抗−IL−６ポリクローナル
抗体を加え、37℃で１時間放置した。さらに溶液を捨
て、リンス用緩衝液で３回以上洗った後、1mM MgCl2を
含むリンス用緩衝液で1000倍に稀釈したスレプトアジビ
ン／β−ガラクトシダーゼを加え、37℃で30分放置し
た。その後、溶液を捨て、リンス用緩衝液で３回以上洗
った。それから基質用緩衝液（0.01Mリン酸ナトリウ
ム、0.1M NaCl,1mM MgCl2、0.1％アジ化ナトリウム、pH
7.0）に溶解した0.1mg/mlの４−メチルウンベリフェニ
ル−β−Ｄ−ガラクトシド（シグマ社）をウエルあたり
100μｌ加え、遊離した４−メチルウンベリフェロンの
螢光強度を螢光イムノリーダーで測定した。
溶解した２μg/mlの抗−IL−６モノクローナル抗体MH16
6（T.Matsdaら、Eur.J.Immunol.,18,p951,1988年参照）
を96穴プレート（NUNC社製）にウエルあたり100μｌ入
れ、４℃で１晩放置した。翌日、溶液を捨て、ブロック
用緩衝液（PBS,0.1％BSA,0.2％gelation,0.05％アジ化
ナトリウム）をウエルあたり150μｌ加え、30分以上室
温で放置した。次に溶液を捨て、リンス用緩衝液（PBS,
0.1％Tween20）で３回以上洗った後、測定すべきサンプ
ルを加え、室温で２〜３時間放置した。溶液を捨て、リ
ンス用緩衝液で３回以上洗った後、リンス用緩衝液に溶
解した５μg/mlのビオチン化抗−IL−６ポリクローナル
抗体を加え、37℃で１時間放置した。さらに溶液を捨
て、リンス用緩衝液で３回以上洗った後、1mM MgCl2を
含むリンス用緩衝液で1000倍に稀釈したスレプトアジビ
ン／β−ガラクトシダーゼを加え、37℃で30分放置し
た。その後、溶液を捨て、リンス用緩衝液で３回以上洗
った。それから基質用緩衝液（0.01Mリン酸ナトリウ
ム、0.1M NaCl,1mM MgCl2、0.1％アジ化ナトリウム、pH
7.0）に溶解した0.1mg/mlの４−メチルウンベリフェニ
ル−β−Ｄ−ガラクトシド（シグマ社）をウエルあたり
100μｌ加え、遊離した４−メチルウンベリフェロンの
螢光強度を螢光イムノリーダーで測定した。
第１図は、本方法により、血清に溶解した組換IL−６
（Y.Asageoら、biotechnology,6,p806,1988年参照）が
数十pg/mlまで測定できることを示している。第２図
は、二次抗体としてアルカリフォスファターゼ結合抗−
ウサギイムノグロブリン及びその基質を用いて発色させ
たときと本方法との比較を示す。第１図及び第２図の結
果から、本方法のIL−６の測定感度が優れることが示さ
れた。
（Y.Asageoら、biotechnology,6,p806,1988年参照）が
数十pg/mlまで測定できることを示している。第２図
は、二次抗体としてアルカリフォスファターゼ結合抗−
ウサギイムノグロブリン及びその基質を用いて発色させ
たときと本方法との比較を示す。第１図及び第２図の結
果から、本方法のIL−６の測定感度が優れることが示さ
れた。
実施例2.エイズ患者血清中のヒトIL−６濃度の測定 健常人及びエイズウイルス保持者（症状により３段階
に区別）の血清を実施例１に示す方法でIL−６濃度を測
定した結果を第３図に示す。第３図にエイズウイルス保
持者では疾患の進行と血清中のIL−６濃度が相関してい
ることを示す。
に区別）の血清を実施例１に示す方法でIL−６濃度を測
定した結果を第３図に示す。第３図にエイズウイルス保
持者では疾患の進行と血清中のIL−６濃度が相関してい
ることを示す。
実施例3.ATL患者血清中のヒトIL−６濃度の測定 健常人及びHTLVウイルス保持者（症状により３段階に
区別）の血清を実施例１に示す方法でIL−６濃度を測定
した結果を第４図に示す。第４図はHTLVウイルス保持者
では疾患の進行と血清中のIL−６濃度が相関しているこ
とを示す。
区別）の血清を実施例１に示す方法でIL−６濃度を測定
した結果を第４図に示す。第４図はHTLVウイルス保持者
では疾患の進行と血清中のIL−６濃度が相関しているこ
とを示す。
実施例4.ATL患者由来のHTLV感染Ｔ細胞株培養上清のIL
−６濃度の測定 ATL患者からHTLV感染Ｔ細胞を採取し、これより自立
的に増殖するＴ細胞を樹立し、TL−Morと名付けた。TL
−Morを10％牛胎児血清を含むRPMI1640培地で１×105/m
lの濃度で３日間培養し、上清中のIL−６濃度を測定し
た結果を第５図に示す。第５図は、HTLV感染Ｔ細胞はIL
−６を産生していることを示している。
−６濃度の測定 ATL患者からHTLV感染Ｔ細胞を採取し、これより自立
的に増殖するＴ細胞を樹立し、TL−Morと名付けた。TL
−Morを10％牛胎児血清を含むRPMI1640培地で１×105/m
lの濃度で３日間培養し、上清中のIL−６濃度を測定し
た結果を第５図に示す。第５図は、HTLV感染Ｔ細胞はIL
−６を産生していることを示している。
本発明で提供されるIL−６の免疫化学測定法はIL−６
濃度を高感度で迅速に、しかも多数の検体を同時に測定
することを可能にした。この方法は、各疾患でのIL−６
の生理的濃度を調べたり、IL−６の疾患における役割を
解明したり、他の薬剤の効果を調べるのに有用である。
濃度を高感度で迅速に、しかも多数の検体を同時に測定
することを可能にした。この方法は、各疾患でのIL−６
の生理的濃度を調べたり、IL−６の疾患における役割を
解明したり、他の薬剤の効果を調べるのに有用である。
第１図は、血清に溶解した大腸菌由来組換IL−６濃度を
実施例１に示す方法で測定したときの、各種IL−６濃度
に対する発色を示す。 第２図は、血清に溶解した大腸菌由来組換IL−６濃度を
T.Matsudaらの方法（Eur.J.Immunol.,18,p951,1988年参
照）により測定した場合と、本方法により測定した場合
の各種IL−６濃度に対する基質の発色を示す。 第３図は、健常人（NHS）及びエイズウイルス感染者（A
SYMPTOMMATIC CARRIERは症状のでていない感染者、ARC
は免疫不全の患者、AIDSは免疫不全患者）の血清中のIL
−６濃度を実施例１に示す方法で測定した結果（６〜10
検体の平均値）を示す。 第４図は、健常人（NHS）及びHTLV感染者（HTLV−1HCは
症状のでていない感染者、TUMOR TYPEは皮膚に腫瘍をも
つ患者、NON−TUMOR TYPEは白血病性の患者）の血清中
のIL−６濃度を実施例１に示す方法で測定した結果（６
〜10検体の平均値）を示す。 第５図は、培養及びHTLV感染Ｔ細胞の培養上清中のIL−
６濃度を実施例１に示した方法で測定した結果を示す。
実施例１に示す方法で測定したときの、各種IL−６濃度
に対する発色を示す。 第２図は、血清に溶解した大腸菌由来組換IL−６濃度を
T.Matsudaらの方法（Eur.J.Immunol.,18,p951,1988年参
照）により測定した場合と、本方法により測定した場合
の各種IL−６濃度に対する基質の発色を示す。 第３図は、健常人（NHS）及びエイズウイルス感染者（A
SYMPTOMMATIC CARRIERは症状のでていない感染者、ARC
は免疫不全の患者、AIDSは免疫不全患者）の血清中のIL
−６濃度を実施例１に示す方法で測定した結果（６〜10
検体の平均値）を示す。 第４図は、健常人（NHS）及びHTLV感染者（HTLV−1HCは
症状のでていない感染者、TUMOR TYPEは皮膚に腫瘍をも
つ患者、NON−TUMOR TYPEは白血病性の患者）の血清中
のIL−６濃度を実施例１に示す方法で測定した結果（６
〜10検体の平均値）を示す。 第５図は、培養及びHTLV感染Ｔ細胞の培養上清中のIL−
６濃度を実施例１に示した方法で測定した結果を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) G01N 33/53 G01N 33/577 ＢＩＯＳＩＳ ＪＩＣＳＴ
Claims (4)
- 【請求項１】１次抗体としてのヒトIL−６に対するモノ
クローナル抗体、２次抗体としてのビオチン標識抗ヒト
IL−６ポリクローナル抗体、並びに検出系としてのスト
レプトアジビン／β−ガラクトシダーゼ及びその基質を
用いることを特徴とするヒトIL−６の免疫化学的測定
法。 - 【請求項２】ヒトIL−６に対するモノクローナル抗体、
ビオチン標識抗ヒトIL−６ポリクローナル抗体、並びに
検出系としてのストレプトアジビン／β−ガラクトシダ
ーゼ及びその基質を用いてヒトIL−６を免疫化学的に測
定することを特徴とする、AIDSウイルスの検出・測定方
法。 - 【請求項３】ヒトIL−６に対するモノクローナル抗体、
ビオチン標識抗ヒトIL−６ポリクローナル抗体、並びに
検出系としてのストレプトアジビン／β−ガラクトシダ
ーゼ及びその基質を用いてヒトIL−６を免疫化学的に測
定することを特徴とする、HTLVの検出・測定方法。 - 【請求項４】請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法
を実施するための、ヒトIL−６に対するモノクローナル
抗体、ビオチン標識抗ヒトIL−６ポリクローナル抗体、
ストレプトアビジン／β−ガラクトシダーゼを含んで成
るヒトIL−６の免疫化学的測定用キット。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27186289A JP2884628B2 (ja) | 1989-10-20 | 1989-10-20 | ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキット |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27186289A JP2884628B2 (ja) | 1989-10-20 | 1989-10-20 | ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキット |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03135766A JPH03135766A (ja) | 1991-06-10 |
| JP2884628B2 true JP2884628B2 (ja) | 1999-04-19 |
Family
ID=17505931
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP27186289A Expired - Lifetime JP2884628B2 (ja) | 1989-10-20 | 1989-10-20 | ヒトｉｌ―６の免疫化学的測定法及びそのためのキット |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2884628B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015165357A1 (zh) * | 2014-04-29 | 2015-11-05 | 北京普恩光德生物科技开发有限公司 | 白介素6检测试剂盒 |
-
1989
- 1989-10-20 JP JP27186289A patent/JP2884628B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015165357A1 (zh) * | 2014-04-29 | 2015-11-05 | 北京普恩光德生物科技开发有限公司 | 白介素6检测试剂盒 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH03135766A (ja) | 1991-06-10 |
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