JP2771958B2 - 溶血による干渉を回避する検体の分析方法 - Google Patents
溶血による干渉を回避する検体の分析方法Info
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、溶血による測定誤
差を回避しながら医学的検体を分析する方法に関するも
のである。
差を回避しながら医学的検体を分析する方法に関するも
のである。
【０００２】
【従来の技術】生化学的検査で最も一般的に用いられる
検査材料は血清または血漿である。血清や血漿から各種
アナライト（被分析物）を測定する際に、検体の性質に
起因して測定結果に影響を及ぼす誤差が生じることがあ
る。この意味での測定誤差は特に溶血検査材料の場合に
起こり得る。血液検体の溶血は分析測定結果を実質的に
誤らせることとなる。
検査材料は血清または血漿である。血清や血漿から各種
アナライト（被分析物）を測定する際に、検体の性質に
起因して測定結果に影響を及ぼす誤差が生じることがあ
る。この意味での測定誤差は特に溶血検査材料の場合に
起こり得る。血液検体の溶血は分析測定結果を実質的に
誤らせることとなる。
【０００３】血液検体において溶血が起こると、一部の
赤血球が破壊され、この過程で放出された成分が検査材
料を汚染する。その結果として、血清または血漿の分析
値がヘモグロビンのような赤血球の成分により影響をう
け、誤りを生むこととなる。
赤血球が破壊され、この過程で放出された成分が検査材
料を汚染する。その結果として、血清または血漿の分析
値がヘモグロビンのような赤血球の成分により影響をう
け、誤りを生むこととなる。
【０００４】こうした欠点をなくすために、特許文献 U
S-A-4,263,512 は、アナライトとともに血液検体中の干
渉性色素原を定量することを提案しており、そして溶血
の程度（色素原の濃度と相関関係がある）に応じた測定
誤差の補正を行うことを推奨している。しかし、この従
来の補正法は、溶血検査材料における測定誤差を補正す
る目的で赤血球から放出された赤血球色素を考慮に入れ
ているにすぎない。EP-0 268 025 B1 は、溶血による干
渉の度合と、アナライトの濃度と、干渉によって生じる
測定誤差と、の間には量的関係が存在することを指摘し
ている。この関係は重回帰 (multiple regression)を用
いて表すことができる。このフィッティングから誘導さ
れた補正係数により、（アナライト濃度に対する他の潜
在的依存を無視して）例えばＨｂ値を測定することによ
り独立に測定された溶血干渉に基づいて分析結果の補正
が可能である。
S-A-4,263,512 は、アナライトとともに血液検体中の干
渉性色素原を定量することを提案しており、そして溶血
の程度（色素原の濃度と相関関係がある）に応じた測定
誤差の補正を行うことを推奨している。しかし、この従
来の補正法は、溶血検査材料における測定誤差を補正す
る目的で赤血球から放出された赤血球色素を考慮に入れ
ているにすぎない。EP-0 268 025 B1 は、溶血による干
渉の度合と、アナライトの濃度と、干渉によって生じる
測定誤差と、の間には量的関係が存在することを指摘し
ている。この関係は重回帰 (multiple regression)を用
いて表すことができる。このフィッティングから誘導さ
れた補正係数により、（アナライト濃度に対する他の潜
在的依存を無視して）例えばＨｂ値を測定することによ
り独立に測定された溶血干渉に基づいて分析結果の補正
が可能である。
【０００５】ベックマン社 (Beckman Company)から販売
されている臨床化学分析装置“Synchron CX 5 ”は、反
応の時間経過を測定して干渉バックグラウンドを補償す
るために１組２〜５波長を利用するものである。反応に
無関係な追加の波長を適切に選択することにより、内因
性のスペクトル干渉を自動的に補正することが可能であ
る。１６秒の間隔で、８フラッシュ光度測定が実施さ
れ、すなわち、最大５波長の場合、８×５＝４０の測定
データが得られる。その後、シグナルの補正のために次
の多色光の式が用いられる： 吸光度差＝差（Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ＋ｋ） ここで、 Ａ ＝ 二色光で測定されたアナライト反応の吸光
度の変化 Ｂ〜Ｅ ＝ 加重された二色光補正波長 ｋ ＝ 考慮される脂血症、溶血または黄疸の不在
下で血清のスペクトル影響を許容する定数。
されている臨床化学分析装置“Synchron CX 5 ”は、反
応の時間経過を測定して干渉バックグラウンドを補償す
るために１組２〜５波長を利用するものである。反応に
無関係な追加の波長を適切に選択することにより、内因
性のスペクトル干渉を自動的に補正することが可能であ
る。１６秒の間隔で、８フラッシュ光度測定が実施さ
れ、すなわち、最大５波長の場合、８×５＝４０の測定
データが得られる。その後、シグナルの補正のために次
の多色光の式が用いられる： 吸光度差＝差（Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ＋ｋ） ここで、 Ａ ＝ 二色光で測定されたアナライト反応の吸光
度の変化 Ｂ〜Ｅ ＝ 加重された二色光補正波長 ｋ ＝ 考慮される脂血症、溶血または黄疸の不在
下で血清のスペクトル影響を許容する定数。
【０００６】この自動分析装置によると、多色光補正
(polychromatic correction) は、それが試験適用の一
部であるときか、または試験に特有の限界（これ以上で
は干渉誤差が検体回収率に著しい影響を及ぼす）を超え
たときだけ、無条件（ベックマン分析装置）に実施可能
である。
(polychromatic correction) は、それが試験適用の一
部であるときか、または試験に特有の限界（これ以上で
は干渉誤差が検体回収率に著しい影響を及ぼす）を超え
たときだけ、無条件（ベックマン分析装置）に実施可能
である。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、溶血
血液の血清検体または血漿検体中の汚染成分によって生
じる測定誤差を、従来の補正法よりも正確に、しかもか
なり容易に測定できるようにする分析方法を提供するこ
とにある。
血液の血清検体または血漿検体中の汚染成分によって生
じる測定誤差を、従来の補正法よりも正確に、しかもか
なり容易に測定できるようにする分析方法を提供するこ
とにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】この課題は、検体中に存
在する成分の測光法による実際の測定に先立って、検体
を予備反応にかけて該反応において検体の溶血度を測定
し、そして、溶血度と干渉成分の測定誤差寄与とを相関
させることにより決定された数値を用いて、その後得ら
れた検査成分の測定値を補正することからなる、溶血に
よる測定誤差を回避しながら医学的検体を分析する方法
により達成される。
在する成分の測光法による実際の測定に先立って、検体
を予備反応にかけて該反応において検体の溶血度を測定
し、そして、溶血度と干渉成分の測定誤差寄与とを相関
させることにより決定された数値を用いて、その後得ら
れた検査成分の測定値を補正することからなる、溶血に
よる測定誤差を回避しながら医学的検体を分析する方法
により達成される。
【０００９】従来の技術と比べたときの本発明の方法の
顕著な特徴は、溶血検体の測定値を補正するにあたっ
て、例えば検体のヘモグロビン値を測定することにより
溶血度を独立に測定する必要がないという利点である。
さらに、検体の溶血度と、溶血血清または溶血血漿にお
いて測定された予備反応と、の間にはある関係が見いだ
された。この場合、予備反応は検体と試薬の存在下で行
われるが、実際の測定反応の開始試薬を加える前に行わ
れる。
顕著な特徴は、溶血検体の測定値を補正するにあたっ
て、例えば検体のヘモグロビン値を測定することにより
溶血度を独立に測定する必要がないという利点である。
さらに、検体の溶血度と、溶血血清または溶血血漿にお
いて測定された予備反応と、の間にはある関係が見いだ
された。この場合、予備反応は検体と試薬の存在下で行
われるが、実際の測定反応の開始試薬を加える前に行わ
れる。
【００１０】本発明において記載した生物測定モデルの
助けを借りると、予備反応から検体の溶血度を直接概算
して、分析結果の対応する補正を行うことが可能であ
る。この分析において考慮しなければならない誤差への
更なる寄与は、検査しようとする物質が赤血球にも存在
するため、結果として溶血後の検体中に追加的に存在す
る特定物質を測定する場合に、溶血検体の不正確な結果
が得られることがあるという事実である。測定誤差に対
するこの寄与もまた本発明の方法によって考慮されてい
る。なぜならば、溶血度に加えて、検体中に含まれるア
ナライトの含量も予備反応に加わるからである。
助けを借りると、予備反応から検体の溶血度を直接概算
して、分析結果の対応する補正を行うことが可能であ
る。この分析において考慮しなければならない誤差への
更なる寄与は、検査しようとする物質が赤血球にも存在
するため、結果として溶血後の検体中に追加的に存在す
る特定物質を測定する場合に、溶血検体の不正確な結果
が得られることがあるという事実である。測定誤差に対
するこの寄与もまた本発明の方法によって考慮されてい
る。なぜならば、溶血度に加えて、検体中に含まれるア
ナライトの含量も予備反応に加わるからである。
【００１１】本発明による方法は溶血による測定誤差の
補正を可能とし、特に基準域（女性では３１Ｕ／ｌ、男
性では３７Ｕ／ｌ）で補正するのに有効である（回収率
の増加＜１０％（図１参照））。さらに、基準域以外で
は、従来の方法の場合に得られた８０％程度の干渉を、
適切な補正を用いることにより３０％以下に低下させる
ことができる。
補正を可能とし、特に基準域（女性では３１Ｕ／ｌ、男
性では３７Ｕ／ｌ）で補正するのに有効である（回収率
の増加＜１０％（図１参照））。さらに、基準域以外で
は、従来の方法の場合に得られた８０％程度の干渉を、
適切な補正を用いることにより３０％以下に低下させる
ことができる。
【００１２】本発明による方法では、予備反応のみが検
体の個々の性質を考慮しており、かくして、以前の実験
データに基づいて、更なる特別の補正法を検査材料に対
して実施する必要がない。特に、追加の測定を必要とし
ない。このことは、溶血血清または溶血血漿についての
以前に記載された補正法と比べて、重大な長所となる。
体の個々の性質を考慮しており、かくして、以前の実験
データに基づいて、更なる特別の補正法を検査材料に対
して実施する必要がない。特に、追加の測定を必要とし
ない。このことは、溶血血清または溶血血漿についての
以前に記載された補正法と比べて、重大な長所となる。
【００１３】本発明の好適な実施態様では、予備反応も
測光法により測定される。この場合、測光法による測定
は二色光測定により、特に３４０／４０５ｎｍで行い、
実際の測定値を２波長の結果の差から誘導することが好
ましい。予備反応はＮＡＤＨとＬＤＨを含む試薬の添加
により開始することが有利である。特に好ましい実施態
様では、この試薬はさらにＭＤＨを含有する。
測光法により測定される。この場合、測光法による測定
は二色光測定により、特に３４０／４０５ｎｍで行い、
実際の測定値を２波長の結果の差から誘導することが好
ましい。予備反応はＮＡＤＨとＬＤＨを含む試薬の添加
により開始することが有利である。特に好ましい実施態
様では、この試薬はさらにＭＤＨを含有する。
【００１４】本発明のさらに好ましい実施態様では、予
備反応により測定された溶血度と、干渉成分（特に、ヘ
モグロビン）または検査成分（しかし、溶血の結果とし
て検体中に存在する）により生じた測定誤差に対する寄
与との関係の信頼度が、さまざまな健康状態、年齢およ
び性別の被検者の大グループの広範な土台の上にたって
確実なものとされる。
備反応により測定された溶血度と、干渉成分（特に、ヘ
モグロビン）または検査成分（しかし、溶血の結果とし
て検体中に存在する）により生じた測定誤差に対する寄
与との関係の信頼度が、さまざまな健康状態、年齢およ
び性別の被検者の大グループの広範な土台の上にたって
確実なものとされる。
【００１５】特に好ましい方法において、予備反応と検
査成分に関する主反応との関係は式：
査成分に関する主反応との関係は式：
【００１６】
【００１７】（式中、物質は検体に含まれる検査成分を
表す）により規定される。
表す）により規定される。
【００１８】干渉を排除するための１つの可能性は、予
備反応と主反応の間の数学的関係の助けを借りて確かめ
ることができる。模式的な反応時間経過は図２に示して
あり、全反応についての数学的関係は次のとおりであ
る：
備反応と主反応の間の数学的関係の助けを借りて確かめ
ることができる。模式的な反応時間経過は図２に示して
あり、全反応についての数学的関係は次のとおりであ
る：
【００１９】
【００２０】ここで、物質は血清または赤血球中に存在
する検査成分を意味する。これは、時間単位あたりの測
定値の変化（全反応速度論）が、溶血フリーの血清のシ
グナルと赤血球のシグナルと予備反応（実際の測定試薬
の添加後に続行される）のシグナルから構成されること
を意味する。これから干渉フリーの血清値を算出するた
めには、式は次のように解く必要があり、
する検査成分を意味する。これは、時間単位あたりの測
定値の変化（全反応速度論）が、溶血フリーの血清のシ
グナルと赤血球のシグナルと予備反応（実際の測定試薬
の添加後に続行される）のシグナルから構成されること
を意味する。これから干渉フリーの血清値を算出するた
めには、式は次のように解く必要があり、
【００２１】
【００２２】
【００２３】を求めるための上記式が導かれる。集めた
データは、重直線回帰に基づいて
データは、重直線回帰に基づいて
【００２４】
【００２５】を算出するための次のモデルにおいて用い
られる：
られる：
【００２６】
【００２７】本発明の範囲において、補正値を求めるの
に必要な式はデータキャリアーに保存しておき、これを
用いて電子的情報処理により分析結果を自動的に補正す
ることが特に有利である。データキャリアーに保存され
た情報から測定誤差の値をすでに計算できることが特に
好ましい。このためには、予備反応により測定された溶
血度と測定誤差に対する寄与との関係について被検者の
大グループにおいて測定されたデータをデータキャリア
ーに保存しておく。
に必要な式はデータキャリアーに保存しておき、これを
用いて電子的情報処理により分析結果を自動的に補正す
ることが特に有利である。データキャリアーに保存され
た情報から測定誤差の値をすでに計算できることが特に
好ましい。このためには、予備反応により測定された溶
血度と測定誤差に対する寄与との関係について被検者の
大グループにおいて測定されたデータをデータキャリア
ーに保存しておく。
【００２８】この方法を使用するに際して、干渉を受け
やすい成分の補正値はプリントアウトで、および／また
は測定に用いられる電子的情報処理のディスプレーに表
示されるようにすることが特に好ましい。その場合、補
正値を許容範囲とともに表示することが望ましい。しか
し、測定値が特定の許容範囲内で自動的に補正されるよ
うにすること、そして、これらの許容範囲外の補正は状
況の適切な考慮後に手動で行うことが得策であるかもし
れない。
やすい成分の補正値はプリントアウトで、および／また
は測定に用いられる電子的情報処理のディスプレーに表
示されるようにすることが特に好ましい。その場合、補
正値を許容範囲とともに表示することが望ましい。しか
し、測定値が特定の許容範囲内で自動的に補正されるよ
うにすること、そして、これらの許容範囲外の補正は状
況の適切な考慮後に手動で行うことが得策であるかもし
れない。
【００２９】本発明による方法は、（ａ）ＧＯＴ／ＧＰ
Ｔ生物化学反応型の方法に対応する方法で検出しうるア
ナライトのグループおよび／または（ｂ）総タンパク
質、アルブミン、ＬＤＨ、カリウム、総コレステロー
ル、遊離コレステロール、尿酸、トリグリセリド、ナト
リウム、塩化物、β−リポタンパク質、チモール濁度試
験、硫酸亜鉛濁度試験、リン脂質および遊離脂肪酸を含
むアナライトのグループに属するものから選ばれる検査
成分のために使用することが特に好ましい。その場合、
赤血球中の濃度が血清または血漿中の濃度より高い成分
を測定することも可能であり、これは本発明の好適な実
施態様にあたる。
Ｔ生物化学反応型の方法に対応する方法で検出しうるア
ナライトのグループおよび／または（ｂ）総タンパク
質、アルブミン、ＬＤＨ、カリウム、総コレステロー
ル、遊離コレステロール、尿酸、トリグリセリド、ナト
リウム、塩化物、β−リポタンパク質、チモール濁度試
験、硫酸亜鉛濁度試験、リン脂質および遊離脂肪酸を含
むアナライトのグループに属するものから選ばれる検査
成分のために使用することが特に好ましい。その場合、
赤血球中の濃度が血清または血漿中の濃度より高い成分
を測定することも可能であり、これは本発明の好適な実
施態様にあたる。
【００３０】従って、本発明の方法は、実際の測定反応
に加えて、溶血度の測定を可能にする予備反応のみを実
施することからなる、溶血による測定誤差を回避しなが
ら血液、血清または血漿検体中に存在する成分を定量す
るための、自動化が簡単で、迅速な方法である。
に加えて、溶血度の測定を可能にする予備反応のみを実
施することからなる、溶血による測定誤差を回避しなが
ら血液、血清または血漿検体中に存在する成分を定量す
るための、自動化が簡単で、迅速な方法である。
【００３１】
【発明の実施の形態】本発明について、実施例および添
付の図面によりさらに詳しく説明することにする。実施例１ グルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼ（ＧＯ
Ｔ）の定量実験溶血検査材料によるＧＯＴ活性の強い干
渉があり、これは偽陽性の結果をもたらす。溶血度とＧ
ＯＴ活性の増加との間には、はっきりとした依存性が見
られる。血清値約２０Ｕ／ｌおよびＨｂ値５００ｍｇ／
ｄｌにおいて、ＧＯＴは従来の方法により８０％も高く
測定される。この干渉は主にＧＯＴが赤血球中に存在す
るという事実によるものであり、従って、溶血度とＧＯ
Ｔ活性の増加との間には直接的な関係が存在する。
付の図面によりさらに詳しく説明することにする。実施例１ グルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼ（ＧＯ
Ｔ）の定量実験溶血検査材料によるＧＯＴ活性の強い干
渉があり、これは偽陽性の結果をもたらす。溶血度とＧ
ＯＴ活性の増加との間には、はっきりとした依存性が見
られる。血清値約２０Ｕ／ｌおよびＨｂ値５００ｍｇ／
ｄｌにおいて、ＧＯＴは従来の方法により８０％も高く
測定される。この干渉は主にＧＯＴが赤血球中に存在す
るという事実によるものであり、従って、溶血度とＧＯ
Ｔ活性の増加との間には直接的な関係が存在する。
【００３２】
【００３３】この測定は３４０ｎｍ（主波長）と４０５
ｎｍ（第２波長）で実施される。ＮＡＤＨの分解が検出
される。
ｎｍ（第２波長）で実施される。ＮＡＤＨの分解が検出
される。
【００３４】溶血物調製１：採血（ヘパリン血漿）／遠
心分離／上澄みの廃棄／血液ケークを０．９％ＮａＣｌ
で３回洗浄、水による赤血球の破壊およびグラスウール
を介しての濾過／Ｈｂ含量の測定。これは同一ドナーの
血清をスパイク(spike) するために使用された。
心分離／上澄みの廃棄／血液ケークを０．９％ＮａＣｌ
で３回洗浄、水による赤血球の破壊およびグラスウール
を介しての濾過／Ｈｂ含量の測定。これは同一ドナーの
血清をスパイク(spike) するために使用された。
【００３５】溶血物調製２：採血（血清）／遠心分離／
血清を貯蔵／血液ケークへのガラスビーズの添加および
２〜３時間の激しい攪拌／遠心分離（ガラスビーズが細
胞破片と溶血物の間の分離層として役立つ）／ピペット
による上澄みの分離およびＨｂ含量の測定。
血清を貯蔵／血液ケークへのガラスビーズの添加および
２〜３時間の激しい攪拌／遠心分離（ガラスビーズが細
胞破片と溶血物の間の分離層として役立つ）／ピペット
による上澄みの分離およびＨｂ含量の測定。
【００３６】溶血物調製２を使って、異なる濃度範囲の
２０のそれぞれの血清について次の結果が得られた。こ
れらの血清は８段階でスパイクされた：５０，１００，
１５０，２００，２５０，３００，４００，５００ｍｇ
／ｄｌ Ｈｂ（図３）。測定は日立７１７臨床化学分析
装置を使って測定ポイント１０−２０（予備反応）およ
び３０−５０（主反応）で行った。
２０のそれぞれの血清について次の結果が得られた。こ
れらの血清は８段階でスパイクされた：５０，１００，
１５０，２００，２５０，３００，４００，５００ｍｇ
／ｄｌ Ｈｂ（図３）。測定は日立７１７臨床化学分析
装置を使って測定ポイント１０−２０（予備反応）およ
び３０−５０（主反応）で行った。
【００３７】上述した補正手順の有効性を確認するため
に、最初に、非溶血ヒト血清のパネルを日立７１７分析
装置で測定し、測定したＧＯＴ活性をＢＭ目標値とし
た。その後、８つの異なる溶血物を加えた、このパネル
からの２５の血清（合計２１７検体）を測定した。
に、最初に、非溶血ヒト血清のパネルを日立７１７分析
装置で測定し、測定したＧＯＴ活性をＢＭ目標値とし
た。その後、８つの異なる溶血物を加えた、このパネル
からの２５の血清（合計２１７検体）を測定した。
【００３８】非溶血検体の測定値（目標値）と、補正手
順を踏んでまたは踏まないで得られた溶血検体の対応す
る測定値（実際値）との方法比較を図４（目標値と実際
値との相関＝０．９２３）および図５（目標値と実際値
との相関＝０．９８１）に示してある。この結果は、数
回再現されたものであるが、明らかに溶血干渉がここに
述べた方法によって効果的に補正され得ることを示して
いる。
順を踏んでまたは踏まないで得られた溶血検体の対応す
る測定値（実際値）との方法比較を図４（目標値と実際
値との相関＝０．９２３）および図５（目標値と実際値
との相関＝０．９８１）に示してある。この結果は、数
回再現されたものであるが、明らかに溶血干渉がここに
述べた方法によって効果的に補正され得ることを示して
いる。
【００３９】予備反応の説明 １．試薬の影響 試薬１の組成： 1. リン酸一水素ナトリウム 2. リン酸二水素ナトリウム バッファーＡ 3. Ｌ（＋）−アスパラギン酸一ナトリウム 4. ＬＤＨ 5. ＮＡＤＨ 酵素錠剤＋充填剤 6. ＭＤＨ 防腐剤：窒化ナトリウム 置換実験において、３４０／４０５ｎｍでの予備反応に
おける増加の原因と、この場合に主反応がどのようにふ
るまうかを説明することができた。
おける増加の原因と、この場合に主反応がどのようにふ
るまうかを説明することができた。
【００４０】
【表１】
【００４１】試薬Ｒ１を溶血検体に加えるとき、溶血度
が増加するにつれてシグナル増加を伴う予備反応が起こ
る。測定は３４０／４０５ｎｍで二色光測定により行っ
た。同一の測定を３４０ｎｍで行う場合は、予備反応が
見られない。対照的に、４０５ｎｍではシグナルが次第
に減少する反応が起こる（図６および７）。従って、２
波長間で差を生じさせることにより、結果的に増加する
予備反応が起こる。
が増加するにつれてシグナル増加を伴う予備反応が起こ
る。測定は３４０／４０５ｎｍで二色光測定により行っ
た。同一の測定を３４０ｎｍで行う場合は、予備反応が
見られない。対照的に、４０５ｎｍではシグナルが次第
に減少する反応が起こる（図６および７）。従って、２
波長間で差を生じさせることにより、結果的に増加する
予備反応が起こる。
【図１】回収率と検体活性と溶血血液検体の干渉との関
係を示す図である。四角は溶血によって引き起こされる
ＧＯＴ寄与を排除していない検体活性を示し、星印は溶
血によるＧＯＴ寄与を排除した場合の検体活性を示す。
係を示す図である。四角は溶血によって引き起こされる
ＧＯＴ寄与を排除していない検体活性を示し、星印は溶
血によるＧＯＴ寄与を排除した場合の検体活性を示す。
【図２】全反応の反応時間経過および数学的関係を模式
的に示す図である。
的に示す図である。
【図３】さまざまな濃度範囲の２０の異なる血清に関し
て溶血物調製２を用いて得られた結果を示す。上記の血
清は８段階でスパイクされた：５０，１００，１５０，
２００，２５０，３００，４００，５００ｍｇ／ｄｌ
Ｈｂ。
て溶血物調製２を用いて得られた結果を示す。上記の血
清は８段階でスパイクされた：５０，１００，１５０，
２００，２５０，３００，４００，５００ｍｇ／ｄｌ
Ｈｂ。
【図４】非溶血検体の測定値（目標値）と、補正手順を
踏まないで得られた溶血検体の対応する測定値（実際
値）との比較を示す図である。目標値と実際値との相関
は０．９２３である。
踏まないで得られた溶血検体の対応する測定値（実際
値）との比較を示す図である。目標値と実際値との相関
は０．９２３である。
【図５】非溶血検体の測定値（目標値）と、補正手順を
踏んで得られた溶血検体の対応する測定値（実際値）と
の比較を示す図である。目標値と実際値との相関は０．
９８１である。
踏んで得られた溶血検体の対応する測定値（実際値）と
の比較を示す図である。目標値と実際値との相関は０．
９８１である。
【図６】ＧＯＴ Ｈｂ濃度系列を用いて３４０ｎｍで行
った測定を示す図である。時間に対する吸光度を測定す
る。
った測定を示す図である。時間に対する吸光度を測定す
る。
【図７】ＧＯＴ Ｈｂ濃度系列を用いて４０５ｎｍで行
った測定を示す図である。時間に対する吸光度を測定す
る。
った測定を示す図である。時間に対する吸光度を測定す
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 クリストフ ベルディング ドイツ連邦共和国 ディー−81667 ミ ュンヘン ピュトリッヒシュトラーセ １番地 (72)発明者 ヴィルヘルム クライダー ドイツ連邦共和国 ディー−82418 ム ルノー フロシュハオセン 24番地 (56)参考文献 特開 昭63−50743（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) G01N 33/49
Claims (12)
- 【請求項１】赤血球の溶血の結果、干渉成分が混在し得
る検体中のアナライトの測定方法であって、NADHおよび
LDHを含む試薬を該検体に添加することによって誘導さ
れる予備反応によって該検体中の溶血に起因した干渉成
分の放出量を２つの異なる波長で測光法で測定し；該ア
ナライトを測光法で測定するための測定試薬を添加した
後、該検体中の該アナライトの全量を主反応で測定し；
該予備反応によって決定された溶血度を示す補正因子に
よって該全量値を補正して該アナライトの補正値を得る
ことを含む方法。 - 【請求項２】測光法による測定が３４０ｎｍと４０５ｎ
ｍで二色光測定により行われ、実際の測定値が２波長の
結果の差をとることにより得られる、請求項１に記載の
方法。 - 【請求項３】試薬がさらにMDHを含む、請求項１または
２に記載の方法。 - 【請求項４】予備反応により測定された溶血度と、干渉
成分により生じた測定誤差に対する寄与との関係が、さ
まざまな健康状態、年齢および性別の被検者の大グルー
プの広範な土台の上にたって確実なものとされる、請求
項１〜３のいずれか１つに記載の方法。 - 【請求項５】予備反応と検査成分に関する測定反応との
相関関係が式： （式中、物質は検体に含まれる検査成分を表す）により
得られる、請求項１〜４のいずれか１つに記載の方法。 - 【請求項６】補正値を計算するのに必要な式がデータキ
ャリアーに保存され、これを用いて電子的情報処理によ
り分析結果を自動的に補正する、請求項１〜５のいずれ
か１つに記載の方法。 - 【請求項７】 測定誤差の値をデータキャリアーに保存
された情報から計算することができる、請求項６に記載
の方法。 - 【請求項８】 干渉される成分の補正値がプリントアウ
トで表示されるか、かつ／また、電子的情報処理のディ
スプレーに表示される、請求項６または７に記載の方
法。 - 【請求項９】 補正値が許容範囲とともに表示される、
請求項６〜８のいずれか１つに記載の方法。 - 【請求項１０】 測定値の補正が単に特定の許容範囲内
で自動的に行われる、請求項８または９に記載の方法。 - 【請求項１１】 検査成分が(a) ＧＯＴ／ＧＰＴ生物化
学反応型の方法に対応する方法で検出しうるアナライト
のグループおよび／または(b) 総タンパク質、アルブミ
ン、ＬＤＨ、カリウム、総コレステロール、遊離コレス
テロール、尿酸、トリグリセリド、ナトリウム、塩化
物、β−リポタンパク質、チモール濁度試験、硫酸亜鉛
濁度試験、リン脂質および遊離脂肪酸を含むアナライト
のグループに属するものから選ばれる、請求項１〜１０
のいずれか１つに記載の方法。 - 【請求項１２】 血清または血漿中よりも赤血球中に高
い濃度で含まれる成分を測定する、請求項１〜１１のい
ずれか１つに記載の方法。
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|---|---|---|---|
| DE4427492:0 | 1994-08-03 | ||
| DE4427492A DE4427492A1 (de) | 1994-08-03 | 1994-08-03 | Verfahren zur Analyse einer medizinischen Probe unter Vermeidung von Störbeiträgen aufgrund von Hämolyse |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08101191A JPH08101191A (ja) | 1996-04-16 |
| JP2771958B2 true JP2771958B2 (ja) | 1998-07-02 |
Family
ID=6524848
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7198810A Expired - Fee Related JP2771958B2 (ja) | 1994-08-03 | 1995-08-03 | 溶血による干渉を回避する検体の分析方法 |
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|---|---|
| US (1) | US6268167B1 (ja) |
| EP (1) | EP0695805B1 (ja) |
| JP (1) | JP2771958B2 (ja) |
| DE (2) | DE4427492A1 (ja) |
| ES (1) | ES2221924T3 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110114670A (zh) * | 2016-12-28 | 2019-08-09 | 富士胶片株式会社 | 血液分析方法及血液检查试剂盒 |
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|---|---|---|---|---|
| US4996037A (en) * | 1985-09-13 | 1991-02-26 | Berkebile Donald C | Processes for the manufacture of enriched pitches and carbon fibers |
| DE19622089A1 (de) * | 1996-05-31 | 1997-12-04 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur Analyse Hämoglobin enthaltender medizinischer Proben |
| DK0906567T3 (da) * | 1996-05-31 | 2001-04-17 | Roche Diagnostics Gmbh | Fremgangsmåde til fjernelse af hæmoglobininterferenser ved albuminbestemmelse |
| DE19624015A1 (de) * | 1996-06-15 | 1997-12-18 | Boehringer Mannheim Gmbh | Analysensystem mit einer Einheit zur Reduktion von AOX-Schadstoffen in Fluidabfällen |
| DE19846301A1 (de) | 1998-10-08 | 2000-04-13 | Roche Diagnostics Gmbh | Verfahren zur Bestimmung von alkalischer Phospatase unter Beseitigung von Hämoglobin-Störungen |
| DE19846300A1 (de) * | 1998-10-08 | 2000-04-13 | Roche Diagnostics Gmbh | Verfahren zur Bestimmung von alkalischer Phosphatase unter Reduzierung von Hämoglobin-Störungen durch das Rate-Blank-Verfahren |
| DE10248555B4 (de) * | 2002-10-18 | 2004-12-02 | Roche Diagnostics Gmbh | Verfahren und Analysesystem zur Ermittlung der Konzentration eines Analyten in einer Probe, die aus dem Analyten und der Probenmatrix besteht und Testelement dafür |
| EP1641444B1 (en) * | 2003-06-02 | 2016-03-23 | Isis Innovation Limited | Treatment of muscle fatigue |
| ES2670413T3 (es) | 2003-06-03 | 2018-05-30 | The United States Government As Represented By The Department Of Health And Human Services | Suplementos nutricionales y composiciones terapéuticas que comprenden derivados de (R)-3-hidroxibutirato |
| US8642654B2 (en) | 2009-04-16 | 2014-02-04 | Isis Innovation Limited | Hydroxybutyrate ester and medical use thereof |
| EP2199791B1 (de) * | 2008-12-19 | 2019-05-01 | F. Hoffmann-La Roche AG | Verfahren zum Bestimmen der Hämolyse einer Blutprobe sowie Vorrichtung |
| US8084223B2 (en) * | 2009-03-23 | 2011-12-27 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Detection of false results in assays |
| CN102384893A (zh) * | 2011-08-16 | 2012-03-21 | 南京欣迪生物药业工程有限责任公司 | 一种精浆γ-L-谷氨酰基转肽酶活性定量检测试剂盒及应用 |
| JP6883384B2 (ja) | 2012-11-05 | 2021-06-09 | ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， アズ リプレゼンテッド バイ ザ セクレタリー， デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ | 電離放射線による傷害から組織を防護するためのケトン体 |
| GB201304467D0 (en) | 2013-03-12 | 2013-04-24 | Tdeltas Ltd | Compound for use in protecting skin |
| GB2515603B (en) | 2013-03-14 | 2015-10-14 | Isis Innovation | Process for producing (R)-3-Hydroxybutyl (R)-3-Hydroxybutyrate |
| WO2016024791A1 (en) | 2014-08-12 | 2016-02-18 | Samsung Electronics Co., Ltd. | Sample test method, microfluidic device, and test device |
| KR102310652B1 (ko) * | 2014-08-12 | 2021-10-12 | 삼성전자주식회사 | 샘플 검사 방법, 미세유동장치 및 검사장치 |
| RU2571081C1 (ru) * | 2014-09-10 | 2015-12-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ДАГЕСТАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" | Способ определения кислотной устойчивости эритроцитов хладнокровных животных |
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| CN116298328A (zh) * | 2022-12-06 | 2023-06-23 | 北京大学第三医院（北京大学第三临床医学院） | 一种用于测定溶血标本血钾浓度的试剂盒 |
Family Cites Families (8)
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|---|---|---|---|---|
| DE2847176C2 (de) * | 1977-10-31 | 1982-05-06 | Hitachi, Ltd., Tokyo | Verfahren zur photometrischen Bestimmung von Substanzen im Blutserum |
| US4242446A (en) * | 1978-07-26 | 1980-12-30 | Coulter Electronics, Inc. | Method for determining a substance in a biological fluid and reagent combination for use in the method |
| DE3330246A1 (de) * | 1983-08-22 | 1985-03-14 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und reagenz zur bestimmung von transaminasen |
| JPS6350743A (ja) * | 1986-08-20 | 1988-03-03 | Hitachi Ltd | 溶血のある血液試料の分析方法 |
| JPS63120243A (ja) * | 1986-11-07 | 1988-05-24 | Hitachi Ltd | 自動分析装置 |
| DE4221807C2 (de) * | 1992-07-03 | 1994-07-14 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur analytischen Bestimmung der Konzentration eines Bestandteiles einer medizinischen Probe |
| US5416026A (en) * | 1993-10-04 | 1995-05-16 | I-Stat Corporation | Method for detecting the change in an analyte due to hemolysis in a fluid sample |
| US5590052A (en) * | 1994-04-14 | 1996-12-31 | Abaxis, Inc. | Error checking in blood analyzer |
-
1994
- 1994-08-03 DE DE4427492A patent/DE4427492A1/de not_active Withdrawn
-
1995
- 1995-08-02 EP EP95112145A patent/EP0695805B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-02 ES ES95112145T patent/ES2221924T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-02 DE DE59510903T patent/DE59510903D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1995-08-03 JP JP7198810A patent/JP2771958B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-11-03 US US08/963,563 patent/US6268167B1/en not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110114670A (zh) * | 2016-12-28 | 2019-08-09 | 富士胶片株式会社 | 血液分析方法及血液检查试剂盒 |
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| EP0695805B1 (de) | 2004-05-19 |
| US6268167B1 (en) | 2001-07-31 |
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