JP2634759B2 - 愛玩動物尿症病の体外診断方法 - Google Patents
愛玩動物尿症病の体外診断方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、家庭で飼われる犬や猫
を始めとする愛玩動物の尿症病、例えば尿路結石症や泌
尿器症候群を簡易に体外診断する方法に関する。
を始めとする愛玩動物の尿症病、例えば尿路結石症や泌
尿器症候群を簡易に体外診断する方法に関する。
【０００２】
【従来技術とその課題】近年、犬や猫等の愛玩動物尿症
病の増加が著しく、その発症率も高くなる傾向が続いて
いる。その原因として、最近の生活環境の変化に伴って
ペットの室内飼いが増え、運動不足等によるストレスが
増大していることや、ペットフードに代表されるように
食餌種が均質化していることが指摘されているが、正確
な原因解明には至っていない。
病の増加が著しく、その発症率も高くなる傾向が続いて
いる。その原因として、最近の生活環境の変化に伴って
ペットの室内飼いが増え、運動不足等によるストレスが
増大していることや、ペットフードに代表されるように
食餌種が均質化していることが指摘されているが、正確
な原因解明には至っていない。
【０００３】ところで、獣医分野においては、このよう
な愛玩動物尿症病の増加に対処するため、体外診断によ
って簡単に症病を判定する方法が必要になっている。し
かるに、現状では、愛玩動物尿症病を的確に捉える指標
がないため、実用的な体外診断方法は未だ見出されてお
らず、その診断方法の確立が大きな課題となっている。
因みに、従来においてアルカリ尿が症病に結び付くもの
として尿のＰＨ測定により症病判定を行えるとされてい
た時期もあったが、実際には食餌からくるＰイオン等の
影響が大きく現れるため、アルカリ尿と症病の関連は薄
いことが既に判明している。
な愛玩動物尿症病の増加に対処するため、体外診断によ
って簡単に症病を判定する方法が必要になっている。し
かるに、現状では、愛玩動物尿症病を的確に捉える指標
がないため、実用的な体外診断方法は未だ見出されてお
らず、その診断方法の確立が大きな課題となっている。
因みに、従来においてアルカリ尿が症病に結び付くもの
として尿のＰＨ測定により症病判定を行えるとされてい
た時期もあったが、実際には食餌からくるＰイオン等の
影響が大きく現れるため、アルカリ尿と症病の関連は薄
いことが既に判明している。
【０００４】本発明は、上述の状況に鑑み、愛玩動物尿
症病の関連因子を尿の化学的処置方法によって確実に定
量的に検出し、検出結果の目視判定により症病の有無及
び程度を容易に且つ正確に把握でき、もって近年の愛玩
動物尿症病の増加に即応できる実用性の高い体外診断方
法を提供することを目的としている。
症病の関連因子を尿の化学的処置方法によって確実に定
量的に検出し、検出結果の目視判定により症病の有無及
び程度を容易に且つ正確に把握でき、もって近年の愛玩
動物尿症病の増加に即応できる実用性の高い体外診断方
法を提供することを目的としている。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明の請求項１に係る愛玩動物尿症病の体外診断
方法は、発色指示薬としてキシリルアゾバイオレット−
１、界面活性剤としてポリオキシエチレンアルキルフェ
ニルエーテル、妨害イオンのマスキング剤としてトリエ
タノールアミンとエチレングリコールビス（２−アミノ
エチルエーテル）Ｎ・Ｎ’−４酢酸をそれぞれ含有し、
キシリルアゾバイオレット−１の１重量部に対し、ポリ
オキシエチレンアルキルフェニルエーテルが５０〜２０
０重量部、マスキング剤が７０〜３００重量部であり、
トリエタノールアミン／エチレングリコールビス（２−
アミノエチルエーテル）Ｎ・Ｎ’−４酢酸の重量比を１
／１．５〜１／４の割合とした診断剤のｐＨ１１〜１２
のとを前者／後者の重量比で１／１．５〜１／４の割合
で含有する診断剤の水溶液を愛玩動物尿と混合し、この
混合液の発色によって尿症病を診断することを特徴とす
る構成を採用したものである。
に、本発明の請求項１に係る愛玩動物尿症病の体外診断
方法は、発色指示薬としてキシリルアゾバイオレット−
１、界面活性剤としてポリオキシエチレンアルキルフェ
ニルエーテル、妨害イオンのマスキング剤としてトリエ
タノールアミンとエチレングリコールビス（２−アミノ
エチルエーテル）Ｎ・Ｎ’−４酢酸をそれぞれ含有し、
キシリルアゾバイオレット−１の１重量部に対し、ポリ
オキシエチレンアルキルフェニルエーテルが５０〜２０
０重量部、マスキング剤が７０〜３００重量部であり、
トリエタノールアミン／エチレングリコールビス（２−
アミノエチルエーテル）Ｎ・Ｎ’−４酢酸の重量比を１
／１．５〜１／４の割合とした診断剤のｐＨ１１〜１２
のとを前者／後者の重量比で１／１．５〜１／４の割合
で含有する診断剤の水溶液を愛玩動物尿と混合し、この
混合液の発色によって尿症病を診断することを特徴とす
る構成を採用したものである。
【０００６】
【発明の細部構成と作用】本発明の愛玩動物尿症病の体
外診断方法に用いる診断剤は、溶液形態として少量の愛
玩動物尿と混合した際、尿中にＭｇイオン又は／及びＣ
ａイオンが存在すれば、そのイオン濃度に対応した色濃
度で発色する。これらＭｇイオン及びＣａイオンは排尿
障害や尿路閉塞の如き尿路結石症ならびに血尿や膀胱炎
の如き泌尿器症候群の罹患に伴って尿中に現れることが
判明しており、後述実施例で例示するように、上記発色
を肉眼で視認するだけで、簡単に尿症病の有無を確実に
判定できると共に、発色濃度によって疾患の程度も判る
ことが確認されている。
外診断方法に用いる診断剤は、溶液形態として少量の愛
玩動物尿と混合した際、尿中にＭｇイオン又は／及びＣ
ａイオンが存在すれば、そのイオン濃度に対応した色濃
度で発色する。これらＭｇイオン及びＣａイオンは排尿
障害や尿路閉塞の如き尿路結石症ならびに血尿や膀胱炎
の如き泌尿器症候群の罹患に伴って尿中に現れることが
判明しており、後述実施例で例示するように、上記発色
を肉眼で視認するだけで、簡単に尿症病の有無を確実に
判定できると共に、発色濃度によって疾患の程度も判る
ことが確認されている。
【０００７】従って、獣医にあっては、まず診断すべき
愛玩動物から採尿して上記の診断薬に混合し、発色を生
じた場合に治療を要すると判断し、その発色濃度が薄い
愛玩動物は軽度疾患として利尿薬の投与により排尿を促
進させたり、発色濃度が濃い愛玩動物については重度疾
患として外科的処置をとる等、適切を治療方法を選択で
きる。
愛玩動物から採尿して上記の診断薬に混合し、発色を生
じた場合に治療を要すると判断し、その発色濃度が薄い
愛玩動物は軽度疾患として利尿薬の投与により排尿を促
進させたり、発色濃度が濃い愛玩動物については重度疾
患として外科的処置をとる等、適切を治療方法を選択で
きる。
【０００８】なお、尿中の金属イオンを酵素法で測定す
る方法も考えられるが、試薬の調製に複雑な操作が必要
である上、試薬の安定性が極めて悪く冷蔵庫で保存して
も有効期間は１ヵ月程度でしかないため、保存後に使用
した場合に測定結果の再現性ひいては信頼性が低く、二
液性の試薬を用いるので取扱いも不便であり、また測定
液が透明であるために肉眼観察による簡単な症病判定を
行えず、高価な機器を用いる吸光光度測定で定量する他
はなく、しかも試薬自体が非常に高価であることから、
愛玩動物尿症病に対する体外診断方法としては到底採用
できない。
る方法も考えられるが、試薬の調製に複雑な操作が必要
である上、試薬の安定性が極めて悪く冷蔵庫で保存して
も有効期間は１ヵ月程度でしかないため、保存後に使用
した場合に測定結果の再現性ひいては信頼性が低く、二
液性の試薬を用いるので取扱いも不便であり、また測定
液が透明であるために肉眼観察による簡単な症病判定を
行えず、高価な機器を用いる吸光光度測定で定量する他
はなく、しかも試薬自体が非常に高価であることから、
愛玩動物尿症病に対する体外診断方法としては到底採用
できない。
【０００９】本発明で用いる診断剤に配合されるキシリ
ルアゾバイオレット−１は、下記構造式で表される１−
アゾ−２−ヒドロキシ−３−（２・４−ジメチルカルボ
キシアニリド）−ナフトレン−１’−（２−ヒドロキシ
ベンゼン−５−スルホン酸）ナトリウムであって、一般
にＭｇイオン定量用の発色指示薬として知られるもので
ある。しかして、本発明の診断方法においては、愛玩動
物尿中に含まれるＭｇ2+、Ｃａ2+が下記構造式中のＯＨ
基との置換によりキレート化されて発色するが、他のＭ
ｇイオン用或いはＣａイオン用発色指示薬に比較し、特
に経時安定性に優れると共に、愛玩動物尿を対象として
高い感度が得られるという利点がある。なお、この発色
は、ＰＨ１１以上のアルカリ領域で赤紫色となる。
ルアゾバイオレット−１は、下記構造式で表される１−
アゾ−２−ヒドロキシ−３−（２・４−ジメチルカルボ
キシアニリド）−ナフトレン−１’−（２−ヒドロキシ
ベンゼン−５−スルホン酸）ナトリウムであって、一般
にＭｇイオン定量用の発色指示薬として知られるもので
ある。しかして、本発明の診断方法においては、愛玩動
物尿中に含まれるＭｇ2+、Ｃａ2+が下記構造式中のＯＨ
基との置換によりキレート化されて発色するが、他のＭ
ｇイオン用或いはＣａイオン用発色指示薬に比較し、特
に経時安定性に優れると共に、愛玩動物尿を対象として
高い感度が得られるという利点がある。なお、この発色
は、ＰＨ１１以上のアルカリ領域で赤紫色となる。
【００１０】
【化１】
【００１１】診断剤に配合するポリオキシエチレンアル
キルフェニルエーテルは、所謂非イオン界面活性剤であ
るが、脂質分子と同様な両親媒性を有しており、愛玩動
物尿中の脂質分子や膜蛋白質を可溶化し、もって発色指
示薬であるキシリルアゾバイオレット−１の発色安定性
を高める作用を示すと共に、難溶性のキシリルアゾバイ
オレット−１を可溶化する溶解剤としても機能する。こ
のようなポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル
としては、特に制限されないが、アルキル基がイソオク
チル基であるものが好適であり、更にポリオキシエチレ
ン構造−（ＣＨ2 ＣＨ2 Ｏ）n Ｈのｎが９〜１０である
ものがより好適である。
キルフェニルエーテルは、所謂非イオン界面活性剤であ
るが、脂質分子と同様な両親媒性を有しており、愛玩動
物尿中の脂質分子や膜蛋白質を可溶化し、もって発色指
示薬であるキシリルアゾバイオレット−１の発色安定性
を高める作用を示すと共に、難溶性のキシリルアゾバイ
オレット−１を可溶化する溶解剤としても機能する。こ
のようなポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル
としては、特に制限されないが、アルキル基がイソオク
チル基であるものが好適であり、更にポリオキシエチレ
ン構造−（ＣＨ2 ＣＨ2 Ｏ）n Ｈのｎが９〜１０である
ものがより好適である。
【００１２】マスキング剤は、愛玩動物尿中のＭｇイオ
ン及びＣａイオン以外の主要金属イオンをマスキング
（隠蔽）することにより、これらイオンにより指示薬の
発色が妨害されるのを防ぎ、もって診断精度を高める機
能を果たす。このようなマスキング剤として機能する化
合物は多種存在するが、本発明においては、犬や猫等の
一般的な哺乳動物の尿症病判定への適合性より、２価及
び３価のＦｅイオン用としてのトリエタノールアミン
（ＴＥＡ）と、Ｍｎ，Ｎｉイオン用としてのエチレング
リコールビス（２−アミノエチルエーテル）Ｎ・Ｎ’−
４酢酸（ＥＧＴＡ）とを併用する。これらＴＥＡとＥＧ
ＴＡの配合比率は、前者／後者の重量比で１／１．５〜
１／４の範囲とすべきであり、この配合比率を外れる場
合は指示薬の発色信頼性ひいては尿症病の判定精度が低
下する。
ン及びＣａイオン以外の主要金属イオンをマスキング
（隠蔽）することにより、これらイオンにより指示薬の
発色が妨害されるのを防ぎ、もって診断精度を高める機
能を果たす。このようなマスキング剤として機能する化
合物は多種存在するが、本発明においては、犬や猫等の
一般的な哺乳動物の尿症病判定への適合性より、２価及
び３価のＦｅイオン用としてのトリエタノールアミン
（ＴＥＡ）と、Ｍｎ，Ｎｉイオン用としてのエチレング
リコールビス（２−アミノエチルエーテル）Ｎ・Ｎ’−
４酢酸（ＥＧＴＡ）とを併用する。これらＴＥＡとＥＧ
ＴＡの配合比率は、前者／後者の重量比で１／１．５〜
１／４の範囲とすべきであり、この配合比率を外れる場
合は指示薬の発色信頼性ひいては尿症病の判定精度が低
下する。
【００１３】なお、愛玩動物尿中のＣａイオンは上記の
ＴＥＡ及びＥＧＴＡによってある程度はマスキングされ
るが、完全なマスキングではなく、また愛玩動物の尿症
病は特に尿中のＭｇイオン量との関連が強いため、Ｃａ
イオンによる発色が多少抑えられても尿症病診断の信頼
性には全く影響はない。しかして、本発明においては、
Ｍｇイオンのみによる発色を得るために、診断剤中に上
記のＴＥＡ及びＥＧＴＡと共にＣａイオンに対するマス
キング剤、例えばＮａ2 ＳＯ4 の如き硫酸イオン供与化
合物を配合してもよい。
ＴＥＡ及びＥＧＴＡによってある程度はマスキングされ
るが、完全なマスキングではなく、また愛玩動物の尿症
病は特に尿中のＭｇイオン量との関連が強いため、Ｃａ
イオンによる発色が多少抑えられても尿症病診断の信頼
性には全く影響はない。しかして、本発明においては、
Ｍｇイオンのみによる発色を得るために、診断剤中に上
記のＴＥＡ及びＥＧＴＡと共にＣａイオンに対するマス
キング剤、例えばＮａ2 ＳＯ4 の如き硫酸イオン供与化
合物を配合してもよい。
【００１４】本発明方法に用いる診断剤は、前記のよう
に、発色指示薬としてキシリルアゾバイオレット−１、
界面活性剤としてポリオキシエチレンアルキルフェニル
エーテル、マスキング剤として特定比率のＴＥＡとＥＧ
ＴＡ、を必須成分として含むものであり、これら成分を
溶解した水溶液、これら成分の混合粉末、これら成分を
デキストリンの如き水溶性バインダーを介して造粒した
顆粒やタブレット等、種々の形態とでき、いずれの形態
でも極めて安定性に優れており、常温下で長期保存後に
使用しても愛玩動物尿症病の判定結果に充分な再現性が
得られる。なお、固形形態のものでは、使用時に水に溶
解して水溶液として愛玩動物尿に添加混合すればよい。
に、発色指示薬としてキシリルアゾバイオレット−１、
界面活性剤としてポリオキシエチレンアルキルフェニル
エーテル、マスキング剤として特定比率のＴＥＡとＥＧ
ＴＡ、を必須成分として含むものであり、これら成分を
溶解した水溶液、これら成分の混合粉末、これら成分を
デキストリンの如き水溶性バインダーを介して造粒した
顆粒やタブレット等、種々の形態とでき、いずれの形態
でも極めて安定性に優れており、常温下で長期保存後に
使用しても愛玩動物尿症病の判定結果に充分な再現性が
得られる。なお、固形形態のものでは、使用時に水に溶
解して水溶液として愛玩動物尿に添加混合すればよい。
【００１５】上記各成分の配合割合は、発色指示薬であ
るキシリルアゾバイオレット−１の１重量部に対して、
ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルを５０〜
２００重量部、特に好ましくは８０〜１５０重量部程
度、マスキング剤を７０〜３００重量部、特に好ましく
は１００〜２００重量部程度、に設定する。
るキシリルアゾバイオレット−１の１重量部に対して、
ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルを５０〜
２００重量部、特に好ましくは８０〜１５０重量部程
度、マスキング剤を７０〜３００重量部、特に好ましく
は１００〜２００重量部程度、に設定する。
【００１６】しかして、愛玩動物尿症病の体外診断は水
溶液形態の診断剤に一定量の愛玩動物尿を添加混合する
だけでよいが、その際のＰＨ変動による発色の色合い変
化を回避するために、診断剤水溶液中に予め緩衝剤を配
合することにより、ＰＨがキシリルアゾバイオレット−
１の赤紫発色域である１１〜１２の範囲に保持されるよ
うに設定する。このような緩衝剤としては、燐酸水素ナ
トリウムの如き水溶性燐酸塩、水酸化ナトリウムの如き
アルカリ化合物等が挙げられ、固形形態の診断剤では水
溶液にする際にこれらを添加配合すればよい。
溶液形態の診断剤に一定量の愛玩動物尿を添加混合する
だけでよいが、その際のＰＨ変動による発色の色合い変
化を回避するために、診断剤水溶液中に予め緩衝剤を配
合することにより、ＰＨがキシリルアゾバイオレット−
１の赤紫発色域である１１〜１２の範囲に保持されるよ
うに設定する。このような緩衝剤としては、燐酸水素ナ
トリウムの如き水溶性燐酸塩、水酸化ナトリウムの如き
アルカリ化合物等が挙げられ、固形形態の診断剤では水
溶液にする際にこれらを添加配合すればよい。
【００１７】
【実施例】 キシリルアゾバイオレット−１ ０．１重量部 ポリオキシエチレンイソオクチルフェニルエーテル １０．３重量部 （イー・アイ・デュポン社製のトリトン×−１００） ＴＥＡ ５．０重量部 ＥＧＴＡ １０．６重量部 燐酸水素ナトリウム ７１．６重量部 水酸化ナトリウム ５．０重量部 水 ８９７．４重量部
【００１８】上記成分を混合して愛玩動物用体外診断剤
の水溶液（無色透明，ＰＨ１１．７）を調製し、この水
溶液各１０ミリリットルに対して後述する各検査動物の
尿０．５ミリリットルを添加混合し、５分後に試験液の
色を目視観察し、予め作成した発色濃度段階表と比較し
て発色程度（＋の数値が大きいほど発色濃度が高い）を
判定した。その結果を、獣医師による実際の臨床診断に
よって判明した各愛玩動物の症病、チタンイエロー法に
て測定した尿中Ｍｇ量、アンモニア滴下法にて実測した
尿石の有無（＋は有り、−は無し）と共に下記表１に示
す。なお愛玩動物尿は、膀胱圧縮法、導尿カテーテル
法、自然放尿のいずれかで採尿した。
の水溶液（無色透明，ＰＨ１１．７）を調製し、この水
溶液各１０ミリリットルに対して後述する各検査動物の
尿０．５ミリリットルを添加混合し、５分後に試験液の
色を目視観察し、予め作成した発色濃度段階表と比較し
て発色程度（＋の数値が大きいほど発色濃度が高い）を
判定した。その結果を、獣医師による実際の臨床診断に
よって判明した各愛玩動物の症病、チタンイエロー法に
て測定した尿中Ｍｇ量、アンモニア滴下法にて実測した
尿石の有無（＋は有り、−は無し）と共に下記表１に示
す。なお愛玩動物尿は、膀胱圧縮法、導尿カテーテル
法、自然放尿のいずれかで採尿した。
【００１９】
【表１】
【００２０】上表の結果から、診断剤に愛玩動物尿を添
加混合した際、健常な愛玩動物の検査液は無変色である
のに対し、尿症病に罹患している愛玩動物の検査液は全
て発色し、その発色濃度が尿中Ｍｇ量とよく対応してい
ることが判る。従って、本発明の体外診断方法によれ
ば、検査液を肉眼で観察するだけで極めて簡単に尿症病
の有無を誤りなく判定できると共に、発色濃度によって
症病の程度を判断できることが明らかである。なお、尿
石からはスツルバイト（Ｍｇ塩）とアパタイト（燐酸カ
ルシウム）が検出され、他に蓚酸カルシウムの存在が推
定されることから、本発明の診断方法によって尿石の有
無も確実に診断できることが判る。
加混合した際、健常な愛玩動物の検査液は無変色である
のに対し、尿症病に罹患している愛玩動物の検査液は全
て発色し、その発色濃度が尿中Ｍｇ量とよく対応してい
ることが判る。従って、本発明の体外診断方法によれ
ば、検査液を肉眼で観察するだけで極めて簡単に尿症病
の有無を誤りなく判定できると共に、発色濃度によって
症病の程度を判断できることが明らかである。なお、尿
石からはスツルバイト（Ｍｇ塩）とアパタイト（燐酸カ
ルシウム）が検出され、他に蓚酸カルシウムの存在が推
定されることから、本発明の診断方法によって尿石の有
無も確実に診断できることが判る。
【００２１】
【発明の効果】本発明によれば、猫や犬等の愛玩動物の
尿を特定の診断剤水溶液に添加混合し、得られる検査液
の発色を目視観察するだけの極めて簡単な手段により、
愛玩動物が尿結石症や泌尿器症候群の如き尿症病に罹患
しているか否かを再現性よく正確に判定できると共に、
症病の程度も判明し、その結果に基づいて適切な治療方
法を指示することが可能となり、もって近年の愛玩動物
尿症病の増加に即応できる実用性及び信頼性のの高い体
外診断法を提供できる。
尿を特定の診断剤水溶液に添加混合し、得られる検査液
の発色を目視観察するだけの極めて簡単な手段により、
愛玩動物が尿結石症や泌尿器症候群の如き尿症病に罹患
しているか否かを再現性よく正確に判定できると共に、
症病の程度も判明し、その結果に基づいて適切な治療方
法を指示することが可能となり、もって近年の愛玩動物
尿症病の増加に即応できる実用性及び信頼性のの高い体
外診断法を提供できる。
Claims (1)
- 【請求項１】 発色指示薬としてキシリルアゾバイオレ
ット−１、界面活性剤としてポリオキシエチレンアルキ
ルフェニルエーテル、妨害イオンのマスキング剤として
トリエタノールアミンとエチレングリコールビス（２−
アミノエチルエーテル）Ｎ・Ｎ’−４酢酸をそれぞれ含
有し、 キシリルアゾバイオレット−１の１重量部に対し、ポリ
オキシエチレンアルキルフェニルエーテルが５０〜２０
０重量部、マスキング剤が７０〜３００重量部であり、 トリエタノールアミン／エチレングリコールビス（２−
アミノエチルエーテル）Ｎ・Ｎ’−４酢酸の 重量比を１
／１．５〜１／４の割合とした診断剤のｐＨ１１〜１２
の水溶液を動物尿と混合し、この混合液の発色によって
尿症病を診断することを特徴とする愛玩動物尿症病の体
外診断方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5191201A JP2634759B2 (ja) | 1993-08-02 | 1993-08-02 | 愛玩動物尿症病の体外診断方法 |
| EP94112071A EP0638808A1 (en) | 1993-08-02 | 1994-08-02 | Composite reagent for a veterinary diagnostic test |
| US08/642,409 US5629211A (en) | 1993-08-02 | 1996-05-03 | Veterinary diagnostic test |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5191201A JP2634759B2 (ja) | 1993-08-02 | 1993-08-02 | 愛玩動物尿症病の体外診断方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
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