JP2573678B2 - 液体クロマトグラフ用試料注入方法 - Google Patents
液体クロマトグラフ用試料注入方法Info
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- JP2573678B2 JP2573678B2 JP63287464A JP28746488A JP2573678B2 JP 2573678 B2 JP2573678 B2 JP 2573678B2 JP 63287464 A JP63287464 A JP 63287464A JP 28746488 A JP28746488 A JP 28746488A JP 2573678 B2 JP2573678 B2 JP 2573678B2
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Description
【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は液体クロマトグラフに用いられ、液体クロマ
トグラフのカラムへ試料を可変量注入する液体クロマト
グラフ用試料注入方法に関する。
トグラフのカラムへ試料を可変量注入する液体クロマト
グラフ用試料注入方法に関する。
［従来の技術］ 液体クロマトグラフ用試料注入方法では、固定量注入
法と可変量注入法とがある。固定量注入法はサンプルル
ープの全容量に試料液を導入しこれをカラムに注入する
ので、試料注入量は毎回正確である。しかし、分析条件
検討中には試料注入量を変えて試験する必要があるの
で、容量の異なるサンプルループを取り換えなければな
らず煩雑である。そこで、分析条件検討中にはサンプル
ループを固定して可変量注入法を用い、分析条件確定後
は固定量注入法を用いるのが好ましい。
法と可変量注入法とがある。固定量注入法はサンプルル
ープの全容量に試料液を導入しこれをカラムに注入する
ので、試料注入量は毎回正確である。しかし、分析条件
検討中には試料注入量を変えて試験する必要があるの
で、容量の異なるサンプルループを取り換えなければな
らず煩雑である。そこで、分析条件検討中にはサンプル
ループを固定して可変量注入法を用い、分析条件確定後
は固定量注入法を用いるのが好ましい。
しかし、従来の可変量注入法は試料注入量が不正確で
あるという問題点がある。
あるという問題点がある。
次に、第１図に示す本発明の実施例に係る液体クロマ
トグラフ用試料注入装置を用いてこの従来法（特開昭62
−50659号公報）を説明する。
トグラフ用試料注入装置を用いてこの従来法（特開昭62
−50659号公報）を説明する。
ポートＡ〜Ｆを備えた六方弁10は試料吸入ルートと試
料導入ルートとを切り換える為のものであり、実線で示
す流路と点線で示す流路のいずれか一方が選択的に導通
される。この実線で示す流路を導通させた状態で、計量
シリンジ20のピストンを引いて、試料吸入管14の先端に
設けられた試料吸入針14aから空気を数μｌ吸引した
後、試料吸入針14aを試料瓶16内に挿入して計量シリン
ジ20のピストンをさらに引き、試料液18を吸引して空気
21及び試料液18を第４図に示す状態にする。図中、36は
試料導入前に流路中に存在していた洗浄溶媒である。
料導入ルートとを切り換える為のものであり、実線で示
す流路と点線で示す流路のいずれか一方が選択的に導通
される。この実線で示す流路を導通させた状態で、計量
シリンジ20のピストンを引いて、試料吸入管14の先端に
設けられた試料吸入針14aから空気を数μｌ吸引した
後、試料吸入針14aを試料瓶16内に挿入して計量シリン
ジ20のピストンをさらに引き、試料液18を吸引して空気
21及び試料液18を第４図に示す状態にする。図中、36は
試料導入前に流路中に存在していた洗浄溶媒である。
一方、貯槽24内の溶離液26はポンプ28により送液さ
れ、サンプルループ22、カラム30、検出器32をこの順に
通って外部に排出されている。
れ、サンプルループ22、カラム30、検出器32をこの順に
通って外部に排出されている。
次に、六方弁10を切り換えて点線で示す流路を導通さ
せた後、計量シリンジ20のピストンをさらに引いて試料
吸入針14a側の試料吸入管14内に存在する試料液18をサ
ンプルループ22内に吸引する。次に、六方弁10を切り換
えて元の状態にし、サンプルループ22内の試料をカラム
30内へ注入する。
せた後、計量シリンジ20のピストンをさらに引いて試料
吸入針14a側の試料吸入管14内に存在する試料液18をサ
ンプルループ22内に吸引する。次に、六方弁10を切り換
えて元の状態にし、サンプルループ22内の試料をカラム
30内へ注入する。
次に、洗浄溶媒により試料吸入針14aの先端から計量
シリンジ20までの流路を洗浄する。
シリンジ20までの流路を洗浄する。
以上の処理は複数の試料について連続的かつ自動的に
行われ、このような試料注入装置はオートサンプラと称
されている。
行われ、このような試料注入装置はオートサンプラと称
されている。
［発明が解決しようとする課題］ ここで、試料液をサンプルループ22内に吸引する前
（実線で示す流路）では、サンプルループ22内の圧力は
通常100kg/cm2程度と高圧であるのに対し、試料吸入管1
4内の試料液の圧力は大気圧に等しい。したがって、試
料吸入管14内の試料液をサンプルループ22内へ吸引する
ために六方弁10を切り換えて点線で示す流路を導通させ
ると、サンプルループ22内の溶離液が膨張して試料吸入
管14内へ流れ込み、試料液が第５図に示す如く押し戻さ
れ、溶離液が試料液中に拡散する。この押し戻される量
は、サンプルループ22の容量、サンプルループ22内の圧
力及び溶離液の種類によって異なるが、通常、サンプル
ループ22の容量の数％、例えばサンプルループ22の容量
が500μｌの場合には数μｌ〜数十μｌ程度であること
を本発明者は知見した。したがって、計量シリンジ20で
設定量吸引してもサンプルループ22内への試料液注入量
が設定量以下となり、特に、試料導入量が数十μｌの場
合には大きな計量誤差となる。
（実線で示す流路）では、サンプルループ22内の圧力は
通常100kg/cm2程度と高圧であるのに対し、試料吸入管1
4内の試料液の圧力は大気圧に等しい。したがって、試
料吸入管14内の試料液をサンプルループ22内へ吸引する
ために六方弁10を切り換えて点線で示す流路を導通させ
ると、サンプルループ22内の溶離液が膨張して試料吸入
管14内へ流れ込み、試料液が第５図に示す如く押し戻さ
れ、溶離液が試料液中に拡散する。この押し戻される量
は、サンプルループ22の容量、サンプルループ22内の圧
力及び溶離液の種類によって異なるが、通常、サンプル
ループ22の容量の数％、例えばサンプルループ22の容量
が500μｌの場合には数μｌ〜数十μｌ程度であること
を本発明者は知見した。したがって、計量シリンジ20で
設定量吸引してもサンプルループ22内への試料液注入量
が設定量以下となり、特に、試料導入量が数十μｌの場
合には大きな計量誤差となる。
本発明の目的は、このような点に着目し、計量誤差を
低減できる液体クロマトグラフ用試料注入装置を提供す
ることにある。
低減できる液体クロマトグラフ用試料注入装置を提供す
ることにある。
［課題を解決するための手段］ この目的を達成するために、本発明に係る液体クロマ
トグラフ用試料注入方法では、 ポートＡ〜Ｆを備えた流路切換手段のポートＢ−Ｅ間
にサンプルループが接続され、該流路切換手段のポート
Ｃ及びＤにそれぞれ送液ポンプ及びカラムが接続され、
該流路切換手段のポートＡとＦの一方に第１吸入管が接
続され、該流路切換手段のポートＡとＦの他方と計量シ
リンジとの間に第２吸入管が接続され、該流路切換手段
の第１切換状態においてポートＢ−Ｃ間、Ｄ−Ｅ間及び
Ｆ−Ａ間が導通状態になり且つポートＡ−Ｂ間、Ｃ−Ｄ
間及びＥ−Ｆ間が遮断状態になり、該流路切換手段の第
２切換状態においてポートＢ−Ｃ間、Ｄ−Ｅ間及びＦ−
Ａ間が遮断状態になり且つポートＡ−Ｂ間、Ｃ−Ｄ間及
びＥ−Ｆ間が導通状態になる液体クロマトグラフを用
い、 該流路切換手段を該第１切換状態にし、 該計量シリンジのピストンを引いて、該第１吸入管か
ら気体を吸入し次いで試料液を吸入し、該気体及び該試
料液を該第２吸入管内まで吸入し、 該流路切換手段を該第２切換状態にし、 該計量シリンジのピストンを押して、該第２吸入管内
の試料液を設定量だけ該サンプルループ内に導入し、 該流路切換手段を該第１切換状態にする。
トグラフ用試料注入方法では、 ポートＡ〜Ｆを備えた流路切換手段のポートＢ−Ｅ間
にサンプルループが接続され、該流路切換手段のポート
Ｃ及びＤにそれぞれ送液ポンプ及びカラムが接続され、
該流路切換手段のポートＡとＦの一方に第１吸入管が接
続され、該流路切換手段のポートＡとＦの他方と計量シ
リンジとの間に第２吸入管が接続され、該流路切換手段
の第１切換状態においてポートＢ−Ｃ間、Ｄ−Ｅ間及び
Ｆ−Ａ間が導通状態になり且つポートＡ−Ｂ間、Ｃ−Ｄ
間及びＥ−Ｆ間が遮断状態になり、該流路切換手段の第
２切換状態においてポートＢ−Ｃ間、Ｄ−Ｅ間及びＦ−
Ａ間が遮断状態になり且つポートＡ−Ｂ間、Ｃ−Ｄ間及
びＥ−Ｆ間が導通状態になる液体クロマトグラフを用
い、 該流路切換手段を該第１切換状態にし、 該計量シリンジのピストンを引いて、該第１吸入管か
ら気体を吸入し次いで試料液を吸入し、該気体及び該試
料液を該第２吸入管内まで吸入し、 該流路切換手段を該第２切換状態にし、 該計量シリンジのピストンを押して、該第２吸入管内
の試料液を設定量だけ該サンプルループ内に導入し、 該流路切換手段を該第１切換状態にする。
［実施例］ 図面に基づいて本発明の一実施例を説明する。
（１）試料吸入流路の洗浄 試料吸入管14を第１図右方へ移動させて試料吸入針14
aを洗浄ポート38内に挿入し、六方弁10は実線で示す流
路を導通させ、三方弁12は点線で示す流路を導通させ
る。この状態で計量シリンジ20のピストンを引いて貯槽
34内の洗浄溶媒36を吸引する。次に、三方弁12を切り換
え、計量シリンジ20のピストンを押して試料吸入管14か
ら洗浄溶媒36を洗浄ポート内に排出する。これにより、
計量シリンジ20から試料吸入針14aの先端までの流路が
洗浄される。
aを洗浄ポート38内に挿入し、六方弁10は実線で示す流
路を導通させ、三方弁12は点線で示す流路を導通させ
る。この状態で計量シリンジ20のピストンを引いて貯槽
34内の洗浄溶媒36を吸引する。次に、三方弁12を切り換
え、計量シリンジ20のピストンを押して試料吸入管14か
ら洗浄溶媒36を洗浄ポート内に排出する。これにより、
計量シリンジ20から試料吸入針14aの先端までの流路が
洗浄される。
（２）試料吸入 次に、試料吸入針14aを第１図に示す位置まで移動さ
せながら計量シリンジ20のピストンを引いて空気を試料
吸入管14内先端部に数μｌ吸引し、試料吸入管14を下降
させて試料16内に挿入し、計量シリンジ20のピストンを
さらに引いて試料液18を設定量より数μｌ多い量だけ試
料吸入管14内に吸引する。次に、試料吸入針14aを上昇
させて第１図に示す状態にし、計量シリンジ20をさらに
引いて、第２図に示す如く、試料吸入管14内の試料液18
の後端を六方弁10のポートＡ付近に位置させる。すなわ
ち、ポートＦと計量シリンジ20の間の試料吸入管14内に
分析用の試料液18を位置させる。
せながら計量シリンジ20のピストンを引いて空気を試料
吸入管14内先端部に数μｌ吸引し、試料吸入管14を下降
させて試料16内に挿入し、計量シリンジ20のピストンを
さらに引いて試料液18を設定量より数μｌ多い量だけ試
料吸入管14内に吸引する。次に、試料吸入針14aを上昇
させて第１図に示す状態にし、計量シリンジ20をさらに
引いて、第２図に示す如く、試料吸入管14内の試料液18
の後端を六方弁10のポートＡ付近に位置させる。すなわ
ち、ポートＦと計量シリンジ20の間の試料吸入管14内に
分析用の試料液18を位置させる。
この試料吸入工程と並行して、他方では、貯槽24内の
溶離液26がポンプ28により送液され、サンプルループ2
2、カラム30、検出器32をこの順に通って外部に排出さ
れている。
溶離液26がポンプ28により送液され、サンプルループ2
2、カラム30、検出器32をこの順に通って外部に排出さ
れている。
（３）サンプルループ22内への試料導入 次に、六方弁10を切り換えて点線で示す流路を導通さ
せ、計量シリンジ20のピストンを押して試料液18をサン
プルループ22内に導入する。計量シリンジ20の押出量は
設定された試料注入量と同じ（六方弁10の内部流路の断
面及び長さは実際には図示したものより小さく、この流
路内の試料量は設定流量に比し無視できる。）であり、
この押し出しにより試料液18の空気21側端は、第３図に
示す如く、六方弁10のポートＦ付近に位置する。
せ、計量シリンジ20のピストンを押して試料液18をサン
プルループ22内に導入する。計量シリンジ20の押出量は
設定された試料注入量と同じ（六方弁10の内部流路の断
面及び長さは実際には図示したものより小さく、この流
路内の試料量は設定流量に比し無視できる。）であり、
この押し出しにより試料液18の空気21側端は、第３図に
示す如く、六方弁10のポートＦ付近に位置する。
六方弁10を第２図に示す状態から第３図に示す状態に
切り換えた際には、サンプルループ22内の圧力が切り換
え前において通常100kg/cm2程度と高いため、切り換え
によりサンプルループ22内の溶離液26が膨張してサンプ
ルループ22からその両側の試料吸入管14内に流出する。
しかし、計量シリンジ20は閉じているのに対し試料吸入
針14aは解放端となっており、かつ、分析用の試料液18
は計量シリンジ20側の試料吸入管14内に存在し、しか
も、この分析用試料液18と洗浄液36との間に空気21が存
在するので、空気21は一時的に圧縮されるものの元の状
態に戻る。
切り換えた際には、サンプルループ22内の圧力が切り換
え前において通常100kg/cm2程度と高いため、切り換え
によりサンプルループ22内の溶離液26が膨張してサンプ
ルループ22からその両側の試料吸入管14内に流出する。
しかし、計量シリンジ20は閉じているのに対し試料吸入
針14aは解放端となっており、かつ、分析用の試料液18
は計量シリンジ20側の試料吸入管14内に存在し、しか
も、この分析用試料液18と洗浄液36との間に空気21が存
在するので、空気21は一時的に圧縮されるものの元の状
態に戻る。
したがって、試料液18を設定量だけサンプルループ22
内に導入することができ、サンプルループ22内の溶離液
26が試料液18内に拡散して試料導入量に大きな誤差が生
ずるものを防止することができる。
内に導入することができ、サンプルループ22内の溶離液
26が試料液18内に拡散して試料導入量に大きな誤差が生
ずるものを防止することができる。
しかも、この空気層21により、試料吸入工程において
試料吸入管14内で試料液18中に洗浄液36が拡散するのを
防止することができる。この効果は上記公開公報におけ
る介在空気の効果と同一であるが、上記効果は新規な効
果である。
試料吸入管14内で試料液18中に洗浄液36が拡散するのを
防止することができる。この効果は上記公開公報におけ
る介在空気の効果と同一であるが、上記効果は新規な効
果である。
（４）カラム30内への試料注入 次に、六方弁10を切り換えて実線で示す流路を導通さ
せ、サンプルループ22内に導入された上述の試料液18を
カラム30内へ注入させる。
せ、サンプルループ22内に導入された上述の試料液18を
カラム30内へ注入させる。
以上の処理を繰り返し自動的に行う。
なお、本発明において介在される空気21は一箇所に限
定されず、空気、分析に用いられない少量の試料液、空
気、分析用試料液をこの順に試料吸入管14内に吸引して
もよい。また、空気の代わりに他の気体を介在させても
よい。
定されず、空気、分析に用いられない少量の試料液、空
気、分析用試料液をこの順に試料吸入管14内に吸引して
もよい。また、空気の代わりに他の気体を介在させても
よい。
［発明の効果］ 以上説明した如く、本発明によれば、最初の第１切換
状態においてサンプルループ内の溶離液は高圧になって
おり、次の第２切換状態において第１吸入管は解放端と
なっており第２吸入管内は閉じているので、サンプルル
ープ内の圧力が急低下して溶離液が膨張し第１吸入管内
に流出し、第２吸入管内の気体は一時的に圧縮されるも
ののその後元の状態に戻り、これにより、試料液を設定
量だけサンプルループ内に導入することが可能となり、
次の第１切換状態において正確に可変試料量をカラムに
注入することができるという効果を奏する。
状態においてサンプルループ内の溶離液は高圧になって
おり、次の第２切換状態において第１吸入管は解放端と
なっており第２吸入管内は閉じているので、サンプルル
ープ内の圧力が急低下して溶離液が膨張し第１吸入管内
に流出し、第２吸入管内の気体は一時的に圧縮されるも
ののその後元の状態に戻り、これにより、試料液を設定
量だけサンプルループ内に導入することが可能となり、
次の第１切換状態において正確に可変試料量をカラムに
注入することができるという効果を奏する。
第１図乃至第３図は本発明の一実施例に係り、 第１図は液体クロマトグラフ用試料注入装置の概略構成
図、 第２図は試料吸入管内への試料吸入工程の最終点を示す
図、 第３図はサンプルループ内への試料導入工程の最終点を
示す図である。 第４図及び第５図は従来法の問題点を説明する図であ
る。 図中、 10は六方弁 12は三方弁 14は試料吸入管 18は試料液 20は計量シリンジ 22はサンプルループ 26は溶離液 28はポンプ 30はカラム 32は検出器 36は洗浄溶媒
図、 第２図は試料吸入管内への試料吸入工程の最終点を示す
図、 第３図はサンプルループ内への試料導入工程の最終点を
示す図である。 第４図及び第５図は従来法の問題点を説明する図であ
る。 図中、 10は六方弁 12は三方弁 14は試料吸入管 18は試料液 20は計量シリンジ 22はサンプルループ 26は溶離液 28はポンプ 30はカラム 32は検出器 36は洗浄溶媒
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭62−32365（ＪＰ，Ａ) 特開 昭62−50659（ＪＰ，Ａ) 特開 昭62−167470（ＪＰ，Ａ)
Claims (1)
- 【請求項１】ポートＡ〜Ｆを備えた流路切換手段のポー
トＢ−Ｅ間にサンプルループが接続され、該流路切換手
段のポートＣ及びＤにそれぞれ送液ポンプ及びカラムが
接続され、該流路切換手段のポートＡとＦの一方に第１
吸入管が接続され、該流路切換手段のポートＡとＦの他
方と計量シリンジとの間に第２吸入管が接続され、該流
路切換手段の第１切換状態においてポートＢ−Ｃ間、Ｄ
−Ｅ間及びＦ−Ａ間が導通状態になり且つポートＡ−Ｂ
間、Ｃ−Ｄ間及びＥ−Ｆ間が遮断状態になり、該流路切
換手段の第２切換状態においてポートＢ−Ｃ間、Ｄ−Ｅ
間及びＦ−Ａ間が遮断状態になり且つポートＡ−Ｂ間、
Ｃ−Ｄ間及びＥ−Ｆ間が導通状態になる液体クロマトグ
ラフを用い、 該流路切換手段を該第１切換状態にし、 該計量シリンジのピストンを引いて、該第１吸入管から
気体を吸入し次いで試料液を吸入し、該気体及び該試料
液を該第２吸入管内まで吸入し、 該流路切換手段を該第２切換状態にし、 該計量シリンジのピストンを押して、該第２吸入管内の
試料液を設定量だけ該サンプルループ内に導入し、 該流路切換手段を該第１切換状態にする、 ことを特徴とする液体クロマトグラフ用試料注入方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63287464A JP2573678B2 (ja) | 1988-11-14 | 1988-11-14 | 液体クロマトグラフ用試料注入方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63287464A JP2573678B2 (ja) | 1988-11-14 | 1988-11-14 | 液体クロマトグラフ用試料注入方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02132369A JPH02132369A (ja) | 1990-05-21 |
| JP2573678B2 true JP2573678B2 (ja) | 1997-01-22 |
Family
ID=17717677
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63287464A Expired - Fee Related JP2573678B2 (ja) | 1988-11-14 | 1988-11-14 | 液体クロマトグラフ用試料注入方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2573678B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014097731A1 (ja) | 2012-12-19 | 2014-06-26 | 株式会社 日立ハイテクノロジーズ | 試料導入装置 |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0829715A3 (en) * | 1996-08-15 | 1999-12-22 | Kyoto Daiichi Kagaku Co., Ltd. | Method and apparatus for performing liquid chromatography |
| JP3815322B2 (ja) * | 2001-12-27 | 2006-08-30 | 株式会社島津製作所 | 試料導入装置 |
| US20110016955A1 (en) * | 2008-02-29 | 2011-01-27 | Waters Technologies Corporation | Sample Dilution for Chromatography of Multiple Process Streams |
| JP7357787B2 (ja) | 2020-05-29 | 2023-10-06 | 株式会社日立ハイテク | 自動分析装置の制御方法 |
| CN114923993B (zh) * | 2022-04-15 | 2023-06-20 | 华南理工大学 | 一种基于柱前在线衍生法的液相色谱系统及使用方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6232365A (ja) * | 1985-08-06 | 1987-02-12 | Japan Spectroscopic Co | 分析装置における液体試料の吸引方法 |
| JPS6250659A (ja) * | 1985-08-29 | 1987-03-05 | Shimadzu Corp | 液体クロマトグラフへの試料導入方法 |
-
1988
- 1988-11-14 JP JP63287464A patent/JP2573678B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014097731A1 (ja) | 2012-12-19 | 2014-06-26 | 株式会社 日立ハイテクノロジーズ | 試料導入装置 |
| JP2014119400A (ja) * | 2012-12-19 | 2014-06-30 | Hitachi High-Technologies Corp | 試料導入装置 |
| US10794874B2 (en) | 2012-12-19 | 2020-10-06 | Hitachi High-Tech Corporation | Sample injection device |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH02132369A (ja) | 1990-05-21 |
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