JP2024520785A - ガラクトースを含む臓内微生物個体群改善用の組成物 - Google Patents
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Abstract
ガラクトースを含む臓内微生物個体群改善用、体重減少用薬学組成物食品組成物、または飼料組成物、およびその肥満の予防および／または治療および／または改善に使用するための用途が提供される。【選択図】図２
Description
［関連出願との相互引用］
本出願は、２０２１年６月１１日付の韓国特許出願第１０－２０２１－００７６３４４号に基づいた優先権の利益を主張し、当該韓国特許出願の文献に開示されたすべての内容は本明細書の一部として含まれる。
本出願は、２０２１年６月１１日付の韓国特許出願第１０－２０２１－００７６３４４号に基づいた優先権の利益を主張し、当該韓国特許出願の文献に開示されたすべての内容は本明細書の一部として含まれる。
ガラクトースを含む臓内微生物個体群改善用、体重減少用薬学組成物食品組成物、または飼料組成物、およびその肥満の予防および／または治療および／または改善に用いるための用途が提供される。
ガラクトースは、単糖類の一種で、主に甘味剤で使用され、甘味剤以外の用途はあまり知られていなかった。近年、口腔細菌のクオラムセンシングを抑制してバイオフィルム生成を抑制して、口腔疾患の虫歯および歯周病を効率的に抑制することができることが明らかになった。
しかし、現在までガラクトースの研究は、口腔内にだけ限られており、臓内細菌に対してはどのような影響を与えるのかについての研究がほとんど行われていない。臓内細菌は、口腔細菌より構成がはるかに複雑であるだけでなく、検体採取、表現型観察などが難しいという点で、研究に多くの制約があるのが現状である。
本明細書で、ガラクトースを含む組成物の臓内微生物個体群改善および／または体重減少（体重減量）および／または肥満の予防、改善、および／または治療用途が提供される。一例は、ガラクトースを臓内微生物個体群改善、体重減少（体重減量）、および／または肥満の予防、改善、および／または治療に使用するための用途を提供する。
具体的に、一例は、ガラクトースを含む臓内微生物個体群改善用の組成物を提供する。
他の例は、ガラクトースを有効成分として含む体重減少用薬学的組成物を提供する。
他の例は、ガラクトースを有効成分として含む肥満の予防および／または治療用薬学的組成物を提供する。
他の例は、ガラクトースを有効成分として含む、体重減少用食品組成物を提供する。
他の例は、ガラクトースを有効成分として含む、肥満の予防および／または改善用食品組成物を提供する。
他の例は、ガラクトースを有効成分として含む、体重減少用飼料組成物を提供する。
他の例は、ガラクトースを有効成分として含む、肥満の予防および／または改善用飼料組成物を提供する。
他の例は、ガラクトースを臓内微生物個体群改善を必要とする個体（対象）に投与する段階を含む、臓内微生物個体群改善方法を提供する。
他の例は、ガラクトースの薬学的有効量を体重減少を必要とする個体（対象）に投与する段階を含む、体重減少方法を提供する。
他の例は、ガラクトースの薬学的有効量を肥満の予防、改善、および／または治療を必要とする個体（対象）に投与する段階を含む、肥満の予防、改善、および／または治療方法を提供する。
他の例は、ガラクトースの体重減少用薬学的組成物、肥満の予防および／または治療用薬学的組成物、体重減少用食品組成物、肥満の予防および／または改善用食品組成物、体重減少用飼料組成物、または肥満の予防および／または改善用飼料組成物の製造に使用するための用途を提供する。
本明細書で、高脂肪食（Ｈｉｇｈ Ｆａｔ Ｄｉｅｔ）で肥満を誘導した実験動物（マウス）にガラクトースを経口投与して糞便を採取してメタゲノム分析を実施した結果、肥満と関連する臓内微生物の比率に変化が現れるのを確認して、ガラクトースの臓内微生物個体群改善および／または体重減少（体重減量）および／または肥満の予防、改善、および／または治療用途を提供する。
本明細書で、「ガラクトース（ｇａｌａｃｔｏｓｅ）」は、６個の炭素原子が含まれている単糖類であって、アルデヒド基を有しているアルド－スであり、化学式はＣ６Ｈ１２Ｏ６である。ガラクトースとグルコースは、４番炭素（Ｃ４）で立体化学的性質が異なるエピマーである。本明細書で使用されるガラクトースは、Ｄ－ガラクトースであってもよく、オリゴマー化およびポリマー化されていないモノマー形態でありうる。
一様態は、ガラクトースを有効成分として含む臓内微生物個体群改善用の組成物を提供する。
「臓内微生物個体群改善」は、対照群（組成物投与前または組成物未投与群）と比較して臓内有益菌を増加させるのを意味することができる。臓内有益菌の増加は、臓内有益菌の個体数増加および／または比率（臓内有益菌個体数／全体臓内細菌個体数）の増加を意味することができる。
したがって、臓内微生物個体群改善用の組成物は、対照群（組成物投与前または組成物未投与群）と比較して、臓内有益菌の比率（または個体数）を増加させることを特徴とすることができる。
臓内微生物は、臓内に存在する全ての微生物を意味することができ、アクチノバクテリア（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ、放線菌）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）、メライナバクテリア（ｃａｎｄｉｄａｔｕｓｍｅｌａｉｎａｂａｃｔｅｒｉａ）、シアノバクテリア（Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ、藍色細菌）、デフェリバクテレス（Ｄｅｆｅｒｒｉｂａｃｔｅｒｅｓ、デフェリバクター科）、ファーミキューテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ、フィルミクテス門）、プロテオバクテリア（Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）、テネリリクテス（Ｔｅｎｅｒｉｃｕｔｅｓ）、ベルコミクロビア（Ｖｅｒｒｕｃｏｍｉｃｒｏｂｉａ、ベルコミクロビウム門）、アッケルマンシア属（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、乳酸桿菌）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）等からなる群より選択される１種以上の微生物を含むことができる。
一例において、臓内微生物はアッケルマンシア属（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）、アリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）、およびラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、乳酸桿菌）からなる群より選択される１種以上の微生物でありうる。
臓内有益菌は、臓内微生物のうち、体重減少および／または肥満の予防、改善、および／または治療効果がある細菌であり、臓内有益菌は、アッケルマンシア属細菌、ラクトバシラス細菌、およびアリスティペス細菌からなる群より選択される一つ以上（また二つ以上、三つ以上、または全て）の細菌を含むことができる。一例において、臓内有益菌は、アッケルマンシア属細菌でありうる。
細菌（全体臓内微生物または臓内有益菌）の個体数は、組成物を投与した対象（個体）から採取した試料（例えば、糞便）を採取して、メタゲノム分析、メタゲノムシーケンシングなどの方法で確認することができるが、これに制限されるものではない。
他の様態は、ガラクトースを有効成分として含む体重減少用の組成物（例えば、薬学的組成物、食品組成物、または飼料組成物など）を提供する。
さらに他の様態は、ガラクトースを有効成分として含む肥満の予防、改善、および／または治療用の組成物（例えば、薬学的組成物、食品組成物、または飼料組成物など）を提供する。
「体重減少」または「肥満の予防、改善、および／または治療」とは、組成物投与前または組成物未投与群と比較して、臓内有益菌の比率（または個体数）が増加することを意味することができる。
したがって、記組成物は、対照群（正常体重対象、組成物投与前または組成物未投与群）と比較して、臓内有益菌の比率（または個体数）を増加させることを特徴とするため、体重減少；および／または肥満の予防、改善、および／または治療効果を達成することができる。
臓内有益菌は、体重減少および／または肥満の予防、改善、および／または治療効果がある細菌で、臓内有益菌は。アッケルマンシア属細菌、ラクトバシラス細菌、アリスティペス細菌からなる群より選択される一つ以上（二つ以上、三つ以上、または全て）の細菌を含むことができるが、これに制限されるものではない。
したがって、一例において、ガラクトースを有効成分として含み、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上（例えば、一つ、二つ、または三つ全て）の臓内有益菌の比率を増加させること（または比率が増加すること）を特徴とする、臓内微生物個体群改善用の組成物、体重減少用薬学的組成物、肥満の予防、または治療用薬学的組成物、体重減少用食品組成物、肥満の予防、または改善用食品組成物、体重減少用飼料組成物、または肥満の予防、または改善用飼料組成物を提供する。
他の例において、ガラクトースを有効成分として含み、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率を増加させることを特徴とする、組成物（臓内微生物個体群改善用の組成物、体重減少用および／または肥満の予防、改善、および／または治療用薬学的組成物、食品組成物、および／または飼料組成物）を提供する。
組成物は、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率（または個体数）を増加させ、追加的に、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上（例えば、一つ、または二つ全て）の比率を増加させることを特徴とすることができる。
組成物は、正常体重個体と比較して、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上（例えば、一つ、二つ、または三つ全て）の臓内有益菌の比率が減少した対象に投与することを特徴とすることができる。
一例において、組成物は、正常体重個体と比較してアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率が減少した対象に投与することを特徴とすることができる。
組成物は、正常体重個体と比較してアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率が減少し、追加的に、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上（例えば、一つ、または二つ全て）の比率が減少した対象に投与することを特徴とすることができる。
具体的に、組成物は、臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率を増加させることを特徴とし、
正常体重対象と比較して臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率が減少した対象に投与するためのものでありうる。
正常体重対象と比較して臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率が減少した対象に投与するためのものでありうる。
組成物は、臓内有益菌のうちアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌の比率を追加的に増加させることを特徴とすることができる。
臓内有益菌の量、個体数、および／または比率が増加すると、体重減少および／または肥満の予防、改善、および／または治療効果がある。
本明細書において、「治療」は、症状の軽減または改善、疾患の範囲の減少、疾患進行の遅延または緩和、疾患状態または症状の改善、軽減または安定化、部分的または完全な回復、生存の延長、その他良い治療結果などを全て含む意味で使用される。「予防」は、特定疾病を有していない対象に作用して特定疾病が発病しないようにするか、その発病時期を遅らせる全ての機序および／または効果を含む意味で使用される。
本明細書において、薬学的組成物は、ヒト、犬、猫、馬、牛、豚、ヤギ、ウサギ、マウス、ラットなどを含むほ乳動物またはこれから分離された細胞、組織、またはその培養物に様々な経路で投与することができる。投与方式は、通常使用されるいずれの方式であってもよく、例えば、経口投与、または静脈投与、筋肉投与、皮下投与、腹膜内投与のような非経口投与であってもよく、特に経口投与によって投与することができる。薬学的組成物は、通常の方法により散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾルなどの経口型製剤などで製剤化して使用することができる。
薬学的組成物は、有効成分としてガラクトース以外に薬剤学的に適し生理学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤などの補助剤を追加的に含有するものでありうる。担体、賦形剤、または希釈剤は、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、デンプン、アカシアゴム、アルジネート、ゼラチン、リン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、ヒドロキシ安息香酸メチル、ヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム及び鉱物油などからなる群より選択された1種以上である。製剤化する場合には、通常使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などからなる群より選択した１種以上の希釈剤または賦形剤を使用することができる。経口投与のための固形製剤には錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、粉末剤、懸濁剤などからなる群より選択された１種以上が含まれ、このような固形製剤は、ガラクトースに少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、デンプン、カルシウムカーボネート、スクロース、ラクトース、ゼラチンなどからなる群より選択された１種以上を混合して調製することができる。また単純な賦形剤以外に、ステアリン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤も使用される。経口投与のための液状製剤としては、懸濁剤、内容液剤、油剤、シロップ剤などからなる群より選択された１種以上が該当するが、一般に使用される単純希釈剤の水、リキッドパラフィン以外に、様々な賦形剤、例えば湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などからなる群より選択した１種以上が含まれる。
薬学的組成物または有効成分としてのガラクトースは、薬学的有効量で投与することができる。薬学的組成物または有効成分としてのガラクトースの投与量は、製剤化方法、投与方式、患者の年令、体重、性別、病的状態、食べ物、投与時間、投与間隔、投与経路、排泄速度および反応感応性のような要因によって多様に処方することができる。投与用量は、患者の年齢、体重、性別、投与形態、健康状態および疾患程度により変わることがあり、医師または薬剤師の判断により一定時間間隔で１回～数回に分けて投与することもできる。例えば、薬学的組成物の１回または１日投与量は、有効成分（ガラクトース）重量基準に０．００１～１００００ｍｇ／ｋｇ、具体的に、０．０１～１００００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～５０００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～３０００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～２５００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～２０００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～１５００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～１０００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～５００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～３００ｍｇ／ｋｇ、０．０１～２００ｍｇ／ｋｇ、０．１～１００００ｍｇ／ｋｇ、０．１～５０００ｍｇ／ｋｇ、０．１～３０００ｍｇ／ｋｇ、０．１～２５００ｍｇ／ｋｇ、０．１～２０００ｍｇ／ｋｇ、０．１～１５００ｍｇ／ｋｇ、０．１～１０００ｍｇ／ｋｇ、０．１～５００ｍｇ／ｋｇ、０．１～３００ｍｇ／ｋｇ、０．１～２００ｍｇ／ｋｇ、０．１～１００ｍｇ／ｋｇ、０．～５０ｍｇ／ｋｇ、０．１～３０ｍｇ／ｋｇ、０．１～２０ｍｇ／ｋｇ、０．１～１０ｍｇ／ｋｇ、１～１００００ｍｇ／ｋｇ、１～５０００ｍｇ／ｋｇ、１～３０００ｍｇ／ｋｇ、１～２５００ｍｇ／ｋｇ、１～２０００ｍｇ／ｋｇ、１～１５００ｍｇ／ｋｇ、１～１０００ｍｇ／ｋｇ、１～５００ｍｇ／ｋｇ、１～３００ｍｇ／ｋｇ、１～２００ｍｇ／ｋｇ、１～１００ｍｇ／ｋｇ、１～５０ｍｇ／ｋｇ、１～３０ｍｇ／ｋｇ、１～２０ｍｇ／ｋｇ、０．１～１０ｍｇ／ｋｇ、１０～１００００ｍｇ／ｋｇ、１０～５０００ｍｇ／ｋｇ、１０～３０００ｍｇ／ｋｇ、１０～２５００ｍｇ／ｋｇ、１０～２０００ｍｇ／ｋｇ、１０～１５００ｍｇ／ｋｇ、１０～１０００ｍｇ／ｋｇ、１０～５００ｍｇ／ｋｇ、１０～３００ｍｇ／ｋｇ、１０～２００ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１０～５０ｍｇ／ｋｇ、１０～３０ｍｇ／ｋｇ、１０～２０ｍｇ／ｋｇ、３０～１００００ｍｇ／ｋｇ、３０～５０００ｍｇ／ｋｇ、３０～３０００ｍｇ／ｋｇ、３０～２５００ｍｇ／ｋｇ、３０～２０００ｍｇ／ｋｇ、３０～１５００ｍｇ／ｋｇ、３０～１０００ｍｇ／ｋｇ、３０～５００ｍｇ／ｋｇ、３０～３００ｍｇ／ｋｇ、３０～２００ｍｇ／ｋｇ、３０～１００ｍｇ／ｋｇ、３０～５０ｍｇ／ｋｇ、５０～１００００ｍｇ／ｋｇ、５０～５０００ｍｇ／ｋｇ、５０～３０００ｍｇ／ｋｇ、５０～２５００ｍｇ／ｋｇ、５０～２０００ｍｇ／ｋｇ、５０～１５００ｍｇ／ｋｇ、５０～１０００ｍｇ／ｋｇ、５０～５００ｍｇ／ｋｇ、５０～３００ｍｇ／ｋｇ、５０～２００ｍｇ／ｋｇ、または５０～１００ｍｇ／ｋｇの範囲であるが、これに制限されるものではない。１回または１日投与量は、単位用量形態で一つの製剤で製剤化されたり、適切に分量して製剤化されたり、多用量容器内に入って製造されてもよい。投与量は、平均的な場合を例示したものあり、個人的な差によるその投与量が高くても低くてもよい。
食品組成物は、日常食事で欠乏しやすい栄養素や人体に有用な機能を持った原料（以下、「機能性原料」）を使用して製造した食品で、健康を維持したり所定の疾病または症状を予防および／または改善（緩和）するの役に立つすべての食品を意味し、最終製品形態には特別な制限がない。例えば、食品組成物は、各種食品、健康機能食品、飲料組成物、食品添加剤などからなる群より選択されたものであるが、これに制限されるものではない。
食品組成物に含まれている有効成分としてのガラクトースの含有量は、食品の形態、所望する用途などにより適切に特別な制限がなくて、例えば、全体食品重量の０．００１～９９重量％、０．０１～９９重量％、０．０１～９５重量％、０．０１～９０重量％、０．０１～８０重量％、０．０１～５０重量％、０．１～９９重量％、０．１～９５重量％、０．１～９０重量％、０．１～８０重量％、０．１～５０重量％、１～９９重量％、１～９５重量％、１～９０重量％、１～８０重量％、１～５０重量％、１０～９９重量％、１０～９５重量％、１０～９０重量％、１０～８０重量％、１０～５０重量％、２５～９９重量％、２５～９５重量％、２５～９０重量％、２５～８０重量％、２５～５０重量％、４０～９９重量％、４０～９５重量％、４０～９０重量％、４０～８０重量％、４０～５０重量％、５０～９９重量％、５０～９５重量％、５０～９０重量％、５０～８０重量％、６０～９９重量％、６０～９５重量％、６０～９０重量％、または６０～８０重量％でありうる。
食品組成物は、様々な栄養剤、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤または天然風味剤などの風味剤、着色剤、充填剤（チーズ、チョコレートなど）、ペクチン酸またはその塩、アルギン酸またはその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤などからなる群より選択された１種以上を追加的に含有することができる。このような添加剤の比率は、全体食品組成物１００重量部当り０．００１～約２０重量部の範囲で選択されるのが一般的であるが、これに制限されるものではない。
一例において、組成物（例えば、薬学的組成物、食品組成物、飼料組成物など）は、正常体重対象（例えば、個体、患者など）と比較して、臓内有益菌の比率（または個体数）が減少された対象（例えば、個体、患者など）に投与することを特徴とすることができる。
臓内有益菌の比率は、全体臓内細菌の数と対比した臓内有益菌の数を意味し、臓内有益菌の比率（または個体数）が減少されたことは、対照群（肥満状態でないこと；正常体重個体）の臓内有益菌の比率（または個体数）と対比して臓内有益菌の比率が減少したことを意味する。
また他の様態は、ガラクトースを臓内微生物個体群改善を要する個体（対象）に投与する段階を含む、臓内微生物個体群改善方法を提供する。
また他の様態は、ガラクトースの薬学的有効量を体重減少を要する個体（対象）に投与する段階を含む、体重減少方法または肥満の予防および／または治療方法を提供する。
本明細書では、ガラクトースが、肥満と関連する臓内微生物の比率に変化をもたらすことを確認し、このような効果に基づいてガラクトースの臓内微生物個体群改善用または体重減少または肥満の予防、改善、および／または治療用の組成物を提供する。
以下、本発明を下記実施例によってより具体的に説明する。しかし、これらは本発明を例示するためであり、本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されるものではない。
実施例１．飼料および実験動物の容易
１．１．ガラクトースの準備
乳糖を乳糖加水分解酵素を使用してグルコースとガラクトースに分離した後、ガラクトースを分離錠精製し、水分を除去して粉末化し、ガラクトース試料を準備して、下記試験に使用した。
１．１．ガラクトースの準備
乳糖を乳糖加水分解酵素を使用してグルコースとガラクトースに分離した後、ガラクトースを分離錠精製し、水分を除去して粉末化し、ガラクトース試料を準備して、下記試験に使用した。
１．２．実験動物の準備
本明細書で動物実験は、湿度５０±５％、温度２２±２℃に維持される環境で全南（チョンナム）大学ＩＡＣＵＣで定めた規定に従って行った。
本明細書で動物実験は、湿度５０±５％、温度２２±２℃に維持される環境で全南（チョンナム）大学ＩＡＣＵＣで定めた規定に従って行った。
実験動物として飼育された５週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（ダムルサイエンス（株））を準備して、飼料と水を十分に供給しながら１週間実験室環境で適応させた後、実験に使用した。寝藁はアレルギーを誘発することなく埃がなく、毒性がなく吸水性があり病原体がないものを使用した。ケージは、動物を清潔に維持するために週に１回交換し、水は給水瓶で自由給水した。
１．３．高脂肪飼料（Ｈｉｇｈ－Ｆａｔ－Ｄｉｅｔ）誘導肥満動物モデルの準備および試験設計
実施例１．２で準備された５週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを２週間の純化過程後、群別に体重を合わせた後使用した。マウスが７週齢になる時点から、高脂肪飼料（ＨＦＤ：Ｈｉｇｈ Ｆａｔ Ｄｉｅｔ）で肥満を誘導した。
実施例１．２で準備された５週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを２週間の純化過程後、群別に体重を合わせた後使用した。マウスが７週齢になる時点から、高脂肪飼料（ＨＦＤ：Ｈｉｇｈ Ｆａｔ Ｄｉｅｔ）で肥満を誘導した。
高脂肪飼料は、脂肪含有量を約６０重量％に、一般飼料は脂肪含有量を略１０重量％にした。
高脂肪飼料（Ｄ１２４９２）は、１ｇ当たり５．２４ｋｃａｌで、一般飼料（Ｄ１２４５０Ｂ）は１ｇ当たり３．８２ｋｃａｌでそれぞれ計算した。
マウスを１６週間の一般飼料または高脂肪飼料を自由給餌し、各群別にＰＢＳおよびガラクトースを毎日経口投与した。飼料投入量と残量を週に２回測定して、一日のカロリー摂取量を計算し、体重は間に一回定められた時間に測定した。
マイクロバイオーム分析のために図１に提示した通り糞便を採取し、マクロジェン（株）に分析を依頼した。糞便採取は、体重が平均に最も近いマウス５匹を選別した後に採取した。
使用された高脂肪飼料と一般飼料の成分を下記表１に示した。
試験動物を下記表２のように分類して、ＰＢＳまたはガラクトースを投与した。
実施例２．
高脂肪飼料（Ｈｉｇｈ－Ｆａｔ－Ｄｉｅｔ）誘導肥満モデルでガラクトースマイクロバイオーム（ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ）分析
各群当たり個体数を８匹にし、実験８週後第３群（ＨＦＤ－ＰＢＳ）、第５群（ＨＦＤ－Ｇａｌ １００ｍｇ／ｋｇ）および第６群（ＨＦＤ－Ｇａｌ ５０ｍｇ／ｋｇ）の糞便を採取してメタゲノム（ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）分析を実施した。メタゲノム分析は、マクロジェン（株）にメタゲノムシーケンシング（ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）を依頼して結果を得た。
高脂肪飼料（Ｈｉｇｈ－Ｆａｔ－Ｄｉｅｔ）誘導肥満モデルでガラクトースマイクロバイオーム（ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ）分析
各群当たり個体数を８匹にし、実験８週後第３群（ＨＦＤ－ＰＢＳ）、第５群（ＨＦＤ－Ｇａｌ １００ｍｇ／ｋｇ）および第６群（ＨＦＤ－Ｇａｌ ５０ｍｇ／ｋｇ）の糞便を採取してメタゲノム（ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）分析を実施した。メタゲノム分析は、マクロジェン（株）にメタゲノムシーケンシング（ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）を依頼して結果を得た。
臓内有益菌として、アッケルマンシア属（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、乳酸桿菌）、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）に属する細菌は、肥満を改善することができる属として知られている。
臓内微生物中、肥満関連臓内微生物の属別組成を分析したものを図２および下記表３に示した。
図２および表３に示されているように、ガラクトースを投与した群においては、対照群と比較してアッケルマンシア属細菌、ラクトバシラス、およびアリスティペスの比率が増加した。
実験結果は、ＴＴＥＳＴの方法で有意性検査し、有意性については、Ｐ値が０．０５より小さい時に、その値を有意性がある値に定めた（（*）＜０．０５、（**）＜０．０１、（***）＜０．００１）。
実施例３．体重測定
実施例１．３で設計された実験期間（１６週）、毎週定められた時間にガラクトースまたはＰＢＳ投与前に試験動物の体重を測定し、体重変化（増体率）、生存率（体重が、初期体重の２０％未満に減少する場合安楽死させる）を測定した。増体率は、実験動物が７週齢になる時点の体重（初期体重）を１００％にし、その後各時点で測定された体重を初期体重に対する相対値で計算して算定した。
実施例１．３で設計された実験期間（１６週）、毎週定められた時間にガラクトースまたはＰＢＳ投与前に試験動物の体重を測定し、体重変化（増体率）、生存率（体重が、初期体重の２０％未満に減少する場合安楽死させる）を測定した。増体率は、実験動物が７週齢になる時点の体重（初期体重）を１００％にし、その後各時点で測定された体重を初期体重に対する相対値で計算して算定した。
このように得られた増体率の平均値（ｎ＝８）を図３に示した。図３に示されているように、一般飼料摂取群では、ＰＢＳ投与群とガラクトース投与群の増体率間有意な差が観察されない反面、高脂肪飼料摂取群では、対照群（ＰＢＳ投与）と比較してガラクトース投与群の増体率が顕著に減少したことを確認することができる。
このような結果は、ガラクトースが高脂肪飼料によって肥満が誘導された個体の体重減量に効果があることを示す。
実施例４．糖負荷試験（Ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ Ｇｌｕｃｏｓｅ Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ Ｔｅｓｔ）
実験動物を試験の前日午後９時から試験当日午前９時まで空腹維持（１２時間絶食）後、血糖検査を行った。空腹条件を維持するために、飼料と寝藁を除去して絶食を誘導した。
実験動物を試験の前日午後９時から試験当日午前９時まで空腹維持（１２時間絶食）後、血糖検査を行った。空腹条件を維持するために、飼料と寝藁を除去して絶食を誘導した。
０．２μｍのろ過で滅菌させた１０％（ｗ／ｖ）グルコース（ｉｎＰＢＳ）溶液を準備し、各個体毎に２ｍｇのグルコース／ｇ、用量＝体重×２０（μｌ）ずつを腹腔投与した後、マウスをケージに再び入れて、血糖数値を０、３０、６０、９０、１２０分毎に測定した。血糖検査は尾静脈採血して実施した。糖負荷試験は、高脂肪飼料で肥満誘導後、１３週目に実施した。
測定された血糖結果を図４に示し、図４のグラフの曲線下面積を図５に示した。図４および図５に示されているように、高脂肪飼料摂取群（ＨＤ）と一般飼料摂取群（ＮＤ）共にガラクトース投与によって血糖が減少し、高脂肪飼料摂取群では対照群（ＰＢＳ投与）と比較してガラクトース投与群の血糖水準が顕著に減少し、特に１２０分に測定時には高脂肪飼料摂取群のガラクトース投与群が正常飼料摂取群と同等な程度の血糖水準を示した。結果は、ガラクトースが高脂肪飼料によって肥満が誘導された個体だけでなく正常個体（一般試料摂取群）においても血糖降下効果があることを示す。
以上の説明から、みた発明が属する技術分野の当業者は、本発明がその技術的な思想や必須的特徴を変更せずに他の具体的な形態で実施できるいうことを理解するはずである。これと関連して、以上で記述した実施例はすべての面において例示的なものであり限定されてないものと理解しなければならない。本発明の範囲は、詳細な説明より後述する特許請求範囲の意味および範囲、そしてその等価概念から導き出されるすべての変更または変形された形態が本発明の範囲に含まれると解釈されなければならない。
Claims (16)
- ガラクトースを有効成分として含み、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上の臓内有益菌の比率を増加させることを特徴とする、臓内微生物個体群改善用の組成物。
- ガラクトースを有効成分として含み、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上の臓内有益菌の比率を増加させることを特徴とする、体重減少用の薬学的組成物。
- ガラクトースを有効成分として含み、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上の臓内有益菌の比率を増加させることを特徴とする、肥満の予防または治療用の薬学的組成物。
- 前記薬学的組成物は、対照群と比較して前記臓内有益菌の比率が減少した対象に投与することを特徴とする、請求項２または３に記載の薬学的組成物。
- 前記薬学的組成物は、臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率を増加させることを特徴とし、
正常体重対象と比較して臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率が減少した対象に投与するためのものである、請求項２または３に記載の薬学的組成物。 - 前記薬学的組成物は、臓内有益菌のうちアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌の比率を追加的に増加させることを特徴でするものである、請求項５に記載の薬学的組成物。
- ガラクトースを有効成分として含み、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上の臓内有益菌の比率を増加させることを特徴とする、体重減少用の食品組成物。
- ガラクトースを有効成分として含み、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上の臓内有益菌の比率を増加させることを特徴とする、肥満の予防または改善用の食品組成物。
- 前記食品組成物は、対照群と比較して前記臓内有益菌の比率が減少した対象に投与することを特徴とする、請求項７または８に記載の食品組成物。
- 前記食品組成物は、臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率を増加させることを特徴とし、
正常体重対象と比較して臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率が減少した対象に投与するためのものである、請求項７または８に記載の食品組成物。 - 前記食品組成物は、臓内有益菌のうちアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌の比率を追加的に増加させることを特徴でするものである、請求項１０に記載の食品組成物。
- ガラクトースを有効成分として含み、アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上の臓内有益菌の比率を増加させることを特徴とする、体重減少用の飼料組成物。
- ガラクトースを有効成分として含み；アッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ラクトバシラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）細菌、およびアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌からなる群より選択される一つ以上の臓内有益菌の比率を増加させることを特徴とする、肥満の予防または改善用の飼料組成物。
- 前記飼料組成物は、対照群と比較して前記臓内有益菌の比率が減少した対象に投与することを特徴とする、請求項１２または１３に記載の飼料組成物。
- 前記飼料組成物は、臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率を増加させることを特徴とし、
正常体重対象と比較して臓内有益菌のうちアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の比率が減少した対象に投与するためのものである、請求項１２または１３に記載の飼料組成物。 - 前記飼料組成物は、臓内有益菌のうちアリスティペス（Ａｌｉｓｔｉｐｅｓ）細菌の比率を追加的に増加させることを特徴とするものである、請求項１５に記載の飼料組成物。
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