JP2024517617A - てんかんによって誘発された脳損傷診断用マーカーとしてのネオゲニンの用途 - Google Patents
てんかんによって誘発された脳損傷診断用マーカーとしてのネオゲニンの用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2024517617A JP2024517617A JP2023563085A JP2023563085A JP2024517617A JP 2024517617 A JP2024517617 A JP 2024517617A JP 2023563085 A JP2023563085 A JP 2023563085A JP 2023563085 A JP2023563085 A JP 2023563085A JP 2024517617 A JP2024517617 A JP 2024517617A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- neogenin
- epilepsy
- brain damage
- induced
- present
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102100031900 Neogenin Human genes 0.000 title claims abstract description 142
- 108010076969 neogenin Proteins 0.000 title claims abstract description 142
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 title claims abstract description 108
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 title claims abstract description 88
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 title claims abstract description 88
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 title claims abstract description 88
- 239000003550 marker Substances 0.000 title abstract description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 45
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 21
- 208000005809 status epilepticus Diseases 0.000 claims description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 41
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 34
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 34
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 29
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 28
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 claims description 26
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 25
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 25
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 20
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 19
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 14
- 238000001262 western blot Methods 0.000 claims description 14
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 12
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 claims description 12
- DWJXYEABWRJFSP-XOBRGWDASA-N DAPT Chemical group N([C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)OC(C)(C)C)C=1C=CC=CC=1)C(=O)CC1=CC(F)=CC(F)=C1 DWJXYEABWRJFSP-XOBRGWDASA-N 0.000 claims description 10
- 238000011977 dual antiplatelet therapy Methods 0.000 claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 10
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 claims description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 6
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 claims description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 6
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 claims 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 10
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 abstract description 7
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 32
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 29
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 24
- 230000021597 necroptosis Effects 0.000 description 21
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- QCHFTSOMWOSFHM-WPRPVWTQSA-N (+)-Pilocarpine Chemical compound C1OC(=O)[C@@H](CC)[C@H]1CC1=CN=CN1C QCHFTSOMWOSFHM-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 18
- QCHFTSOMWOSFHM-UHFFFAOYSA-N SJ000285536 Natural products C1OC(=O)C(CC)C1CC1=CN=CN1C QCHFTSOMWOSFHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 18
- 229960001416 pilocarpine Drugs 0.000 description 18
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 14
- -1 elucic Substances 0.000 description 13
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 13
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N N-Methyl-D-aspartic acid Chemical compound CN[C@@H](C(O)=O)CC(O)=O HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 11
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 11
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 10
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 10
- 102000053171 Glial Fibrillary Acidic Human genes 0.000 description 9
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- VLSMHEGGTFMBBZ-UHFFFAOYSA-N alpha-Kainic acid Natural products CC(=C)C1CNC(C(O)=O)C1CC(O)=O VLSMHEGGTFMBBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 9
- VLSMHEGGTFMBBZ-OOZYFLPDSA-N kainic acid Chemical compound CC(=C)[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)[C@H]1CC(O)=O VLSMHEGGTFMBBZ-OOZYFLPDSA-N 0.000 description 9
- 229950006874 kainic acid Drugs 0.000 description 9
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 8
- 230000036541 health Effects 0.000 description 8
- 210000004295 hippocampal neuron Anatomy 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 7
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 7
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 7
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 7
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 7
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 7
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 7
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000979001 Homo sapiens Methionine aminopeptidase 2 Proteins 0.000 description 6
- 101000969087 Homo sapiens Microtubule-associated protein 2 Proteins 0.000 description 6
- 102100023174 Methionine aminopeptidase 2 Human genes 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 6
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 6
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 6
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 6
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 6
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 5
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 5
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 5
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 5
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IGAZHQIYONOHQN-UHFFFAOYSA-N Alexa Fluor 555 Chemical compound C=12C=CC(=N)C(S(O)(=O)=O)=C2OC2=C(S(O)(=O)=O)C(N)=CC=C2C=1C1=CC=C(C(O)=O)C=C1C(O)=O IGAZHQIYONOHQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 101001011663 Homo sapiens Mixed lineage kinase domain-like protein Proteins 0.000 description 4
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 4
- 102100030177 Mixed lineage kinase domain-like protein Human genes 0.000 description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 230000003492 excitotoxic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 4
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 4
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 4
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 4
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 4
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 4
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 4
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 4
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 4
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 4
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 4
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 3
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 3
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 3
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940125373 Gamma-Secretase Inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 3
- 206010063629 Hippocampal sclerosis Diseases 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 3
- ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N [9-(dimethylamino)-10-methylbenzo[a]phenoxazin-5-ylidene]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].O1C2=CC(=[NH2+])C3=CC=CC=C3C2=NC2=C1C=C(N(C)C)C(C)=C2 ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 3
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 3
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 3
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 210000001947 dentate gyrus Anatomy 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 3
- 239000003540 gamma secretase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 230000004694 hippocampus damage Effects 0.000 description 3
- 239000001341 hydroxy propyl starch Substances 0.000 description 3
- 235000013828 hydroxypropyl starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 3
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 3
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 3
- 239000003147 molecular marker Substances 0.000 description 3
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 3
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 3
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 3
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 2
- 206010009346 Clonus Diseases 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 2
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 2
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 2
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 2
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ABBQHOQBGMUPJH-UHFFFAOYSA-M Sodium salicylate Chemical compound [Na+].OC1=CC=CC=C1C([O-])=O ABBQHOQBGMUPJH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YKTSYUJCYHOUJP-UHFFFAOYSA-N [O--].[Al+3].[Al+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] Chemical compound [O--].[Al+3].[Al+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] YKTSYUJCYHOUJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 2
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 2
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 2
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 235000001465 calcium Nutrition 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229960005069 calcium Drugs 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 2
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 208000028329 epileptic seizure Diseases 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 2
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 2
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 2
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 2
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 231100000318 excitotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 231100000063 excitotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 2
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 2
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 2
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 2
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 2
- 210000001661 hippocampal ca3 region Anatomy 0.000 description 2
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 2
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001422 normality test Methods 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 2
- 239000011505 plaster Substances 0.000 description 2
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 230000002488 pyknotic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008354 sodium chloride injection Substances 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- 229960004025 sodium salicylate Drugs 0.000 description 2
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 description 1
- QIZPVNNYFKFJAD-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2-prop-1-ynylbenzene Chemical compound CC#CC1=CC=CC=C1Cl QIZPVNNYFKFJAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FKOKUHFZNIUSLW-UHFFFAOYSA-N 2-Hydroxypropyl stearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(C)O FKOKUHFZNIUSLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZSLUVFAKFWKJRC-IGMARMGPSA-N 232Th Chemical compound [232Th] ZSLUVFAKFWKJRC-IGMARMGPSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1-piperidin-4-ylpyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CC(O)CN1C1CCNCC1 HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000006491 Acacia senegal Nutrition 0.000 description 1
- 206010001497 Agitation Diseases 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 1
- 102000002659 Amyloid Precursor Protein Secretases Human genes 0.000 description 1
- 108010043324 Amyloid Precursor Protein Secretases Proteins 0.000 description 1
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 239000012583 B-27 Supplement Substances 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 238000011814 C57BL/6N mouse Methods 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 description 1
- 101800004419 Cleaved form Proteins 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 description 1
- 208000001654 Drug Resistant Epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- UGJMXCAKCUNAIE-UHFFFAOYSA-N Gabapentin Chemical compound OC(=O)CC1(CN)CCCCC1 UGJMXCAKCUNAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010018341 Gliosis Diseases 0.000 description 1
- 244000060234 Gmelina philippensis Species 0.000 description 1
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 238000001276 Kolmogorov–Smirnov test Methods 0.000 description 1
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 241000195947 Lycopodium Species 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- MQHWFIOJQSCFNM-UHFFFAOYSA-L Magnesium salicylate Chemical compound [Mg+2].OC1=CC=CC=C1C([O-])=O.OC1=CC=CC=C1C([O-])=O MQHWFIOJQSCFNM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 1
- 241000282341 Mustela putorius furo Species 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 239000008118 PEG 6000 Substances 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 1
- CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N Phenytoin Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 1
- 229920002584 Polyethylene Glycol 6000 Polymers 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- HCBIBCJNVBAKAB-UHFFFAOYSA-N Procaine hydrochloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 HCBIBCJNVBAKAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KNAHARQHSZJURB-UHFFFAOYSA-N Propylthiouracile Chemical compound CCCC1=CC(=O)NC(=S)N1 KNAHARQHSZJURB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012311 Shapiro-Wilk normality test Methods 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- BCKXLBQYZLBQEK-KVVVOXFISA-M Sodium oleate Chemical compound [Na+].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC([O-])=O BCKXLBQYZLBQEK-KVVVOXFISA-M 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 229910052776 Thorium Inorganic materials 0.000 description 1
- KJADKKWYZYXHBB-XBWDGYHZSA-N Topiramic acid Chemical compound C1O[C@@]2(COS(N)(=O)=O)OC(C)(C)O[C@H]2[C@@H]2OC(C)(C)O[C@@H]21 KJADKKWYZYXHBB-XBWDGYHZSA-N 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 229940045942 acetone sodium bisulfite Drugs 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 150000001346 alkyl aryl ethers Chemical class 0.000 description 1
- CEGOLXSVJUTHNZ-UHFFFAOYSA-K aluminium tristearate Chemical compound [Al+3].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CEGOLXSVJUTHNZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- SNAAJJQQZSMGQD-UHFFFAOYSA-N aluminum magnesium Chemical compound [Mg].[Al] SNAAJJQQZSMGQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940063655 aluminum stearate Drugs 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated effect Effects 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 1
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001773 anti-convulsant effect Effects 0.000 description 1
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 1
- 229960003965 antiepileptics Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 230000005756 apoptotic signaling Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012216 bentonite Nutrition 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OIJMIQIDIZASII-UHFFFAOYSA-N benzene;benzoic acid Chemical compound C1=CC=CC=C1.OC(=O)C1=CC=CC=C1 OIJMIQIDIZASII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000001164 bioregulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N butanamide Chemical compound CCCC(N)=O DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- FNAQSUUGMSOBHW-UHFFFAOYSA-H calcium citrate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O FNAQSUUGMSOBHW-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000001354 calcium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000004227 calcium gluconate Substances 0.000 description 1
- 235000013927 calcium gluconate Nutrition 0.000 description 1
- 229960004494 calcium gluconate Drugs 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- MKJXYGKVIBWPFZ-UHFFFAOYSA-L calcium lactate Chemical compound [Ca+2].CC(O)C([O-])=O.CC(O)C([O-])=O MKJXYGKVIBWPFZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001527 calcium lactate Substances 0.000 description 1
- 235000011086 calcium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002401 calcium lactate Drugs 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 235000011132 calcium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L calcium;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoate Chemical compound [Ca+2].OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I calcium;potassium;disodium;(2s)-2-hydroxypropanoate;dichloride;dihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[Na+].[Na+].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].C[C@H](O)C([O-])=O BPKIGYQJPYCAOW-FFJTTWKXSA-I 0.000 description 1
- BMLSTPRTEKLIPM-UHFFFAOYSA-I calcium;potassium;disodium;hydrogen carbonate;dichloride;dihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[Na+].[Na+].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].OC([O-])=O BMLSTPRTEKLIPM-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 229940105329 carboxymethylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- DGBIGWXXNGSACT-UHFFFAOYSA-N clonazepam Chemical compound C12=CC([N+](=O)[O-])=CC=C2NC(=O)CN=C1C1=CC=CC=C1Cl DGBIGWXXNGSACT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007931 coated granule Substances 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008119 colloidal silica Substances 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- JNGZXGGOCLZBFB-IVCQMTBJSA-N compound E Chemical compound N([C@@H](C)C(=O)N[C@@H]1C(N(C)C2=CC=CC=C2C(C=2C=CC=CC=2)=N1)=O)C(=O)CC1=CC(F)=CC(F)=C1 JNGZXGGOCLZBFB-IVCQMTBJSA-N 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000010217 densitometric analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000008355 dextrose injection Substances 0.000 description 1
- 229940084927 diazepam 10 mg Drugs 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940064790 dilantin Drugs 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- SFCNPIUDAIFHRD-UHFFFAOYSA-N ditert-butyl-[[2-(ditert-butylphosphanylmethyl)phenyl]methyl]phosphane Chemical compound CC(C)(C)P(C(C)(C)C)CC1=CC=CC=C1CP(C(C)(C)C)C(C)(C)C SFCNPIUDAIFHRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 238000001378 electrochemiluminescence detection Methods 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 235000015897 energy drink Nutrition 0.000 description 1
- 239000002662 enteric coated tablet Substances 0.000 description 1
- 230000002397 epileptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- HAPOVYFOVVWLRS-UHFFFAOYSA-N ethosuximide Chemical compound CCC1(C)CC(=O)NC1=O HAPOVYFOVVWLRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 230000007387 gliosis Effects 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004565 granule cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 239000004312 hexamethylene tetramine Substances 0.000 description 1
- 235000010299 hexamethylene tetramine Nutrition 0.000 description 1
- VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N hexamethylenetetramine Chemical compound C1N(C2)CN3CN1CN2C3 VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002962 histologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008173 hydrogenated soybean oil Substances 0.000 description 1
- 239000008172 hydrogenated vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 208000013403 hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 230000009474 immediate action Effects 0.000 description 1
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical group 0.000 description 1
- 235000020887 ketogenic diet Nutrition 0.000 description 1
- 229940072170 lamictal Drugs 0.000 description 1
- PYZRQGJRPPTADH-UHFFFAOYSA-N lamotrigine Chemical compound NC1=NC(N)=NN=C1C1=CC=CC(Cl)=C1Cl PYZRQGJRPPTADH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000015122 lemonade Nutrition 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229940040145 liniment Drugs 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 description 1
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N magnesium oxide Inorganic materials [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000869 magnesium oxide Drugs 0.000 description 1
- 229940072082 magnesium salicylate Drugs 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N magnesium;oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[Mg+2] AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000006984 memory degeneration Effects 0.000 description 1
- 208000023060 memory loss Diseases 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001002 morphogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012120 mounting media Substances 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- IHYNKGRWCDKNEG-UHFFFAOYSA-N n-(4-bromophenyl)-2,6-dihydroxybenzamide Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1C(=O)NC1=CC=C(Br)C=C1 IHYNKGRWCDKNEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 238000013188 needle biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000007383 nerve stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000004766 neurogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000006576 neuronal survival Effects 0.000 description 1
- 229940072228 neurontin Drugs 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002889 oleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000000668 oral spray Substances 0.000 description 1
- 229940041678 oral spray Drugs 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- CTRLABGOLIVAIY-UHFFFAOYSA-N oxcarbazepine Chemical compound C1C(=O)C2=CC=CC=C2N(C(=O)N)C2=CC=CC=C21 CTRLABGOLIVAIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 229940066842 petrolatum Drugs 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N phenobarbital Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002695 phenobarbital Drugs 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- VYMDGNCVAMGZFE-UHFFFAOYSA-N phenylbutazonum Chemical compound O=C1C(CCCC)C(=O)N(C=2C=CC=CC=2)N1C1=CC=CC=C1 VYMDGNCVAMGZFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229940023488 pill Drugs 0.000 description 1
- 229960002139 pilocarpine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- RNAICSBVACLLGM-GNAZCLTHSA-N pilocarpine hydrochloride Chemical compound Cl.C1OC(=O)[C@@H](CC)[C@H]1CC1=CN=CN1C RNAICSBVACLLGM-GNAZCLTHSA-N 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 1
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 238000010149 post-hoc-test Methods 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 229940088417 precipitated calcium carbonate Drugs 0.000 description 1
- 229960001309 procaine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 229940093625 propylene glycol monostearate Drugs 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 1
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- XWGJFPHUCFXLBL-UHFFFAOYSA-M rongalite Chemical compound [Na+].OCS([O-])=O XWGJFPHUCFXLBL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940106773 sabril Drugs 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N shellac Chemical compound OCCCCCC(O)C(O)CCCCCCCC(O)=O.C1C23[C@H](C(O)=O)CCC2[C@](C)(CO)[C@@H]1C(C(O)=O)=C[C@@H]3O ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- RYYKJJJTJZKILX-UHFFFAOYSA-M sodium octadecanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O RYYKJJJTJZKILX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019830 sodium polyphosphate Nutrition 0.000 description 1
- YNJORDSKPXMABC-UHFFFAOYSA-N sodium;2-hydroxypropane-2-sulfonic acid Chemical compound [Na+].CC(C)(O)S(O)(=O)=O YNJORDSKPXMABC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000006190 sub-lingual tablet Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 229940098466 sublingual tablet Drugs 0.000 description 1
- 229940035023 sucrose monostearate Drugs 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000001180 sulfating effect Effects 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000002511 suppository base Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 239000007939 sustained release tablet Substances 0.000 description 1
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003760 tallow Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 229940090016 tegretol Drugs 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 201000008914 temporal lobe epilepsy Diseases 0.000 description 1
- KFVSLSTULZVNPG-UHFFFAOYSA-N terbutaline sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O.CC(C)(C)[NH2+]CC(O)C1=CC(O)=CC(O)=C1.CC(C)(C)[NH2+]CC(O)C1=CC(O)=CC(O)=C1 KFVSLSTULZVNPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000892 thaumatin Substances 0.000 description 1
- 235000010436 thaumatin Nutrition 0.000 description 1
- 229940098465 tincture Drugs 0.000 description 1
- 229940035305 topamax Drugs 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 235000013337 tricalcium citrate Nutrition 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940061414 trileptal Drugs 0.000 description 1
- 239000003656 tris buffered saline Substances 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 210000001186 vagus nerve Anatomy 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- PJDFLNIOAUIZSL-UHFFFAOYSA-N vigabatrin Chemical compound C=CC(N)CCC(O)=O PJDFLNIOAUIZSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 1
- 229940063682 zarontin Drugs 0.000 description 1
- XOOUIPVCVHRTMJ-UHFFFAOYSA-L zinc stearate Chemical compound [Zn+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O XOOUIPVCVHRTMJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- UBQNRHZMVUUOMG-UHFFFAOYSA-N zonisamide Chemical compound C1=CC=C2C(CS(=O)(=O)N)=NOC2=C1 UBQNRHZMVUUOMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002911 zonisamide Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
- G01N33/6896—Neurological disorders, e.g. Alzheimer's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
- A61K31/221—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin with compounds having an amino group, e.g. acetylcholine, acetylcarnitine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/28—Neurological disorders
- G01N2800/2857—Seizure disorders; Epilepsy
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本発明は、てんかんによって誘発された脳損傷診断用マーカーとしてのネオゲニン(neogenin)の用途に関する。てんかんにより脳損傷が誘発された場合、切断されたネオゲニンが増加するので、本発明による組成物を用いててんかんによって誘発された脳損傷を容易かつ迅速に診断でき、脳損傷に起因する疾患の治療剤の開発のための標的として活用できる。【選択図】図1c
Description
本発明は、てんかんによって誘発された脳損傷を診断するための組成物、これを含む診断用キット、これを用いたてんかんによって誘発された脳損傷の診断に必要な情報を提供する方法及びてんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質をスクリーニングする方法などに関する。
本発明は、2021年4月16日付で出願された大韓民国特許出願第10-2021-0050037号に基づく優先権を主張し、前記出願の明細書及び図面に開示されたすべての内容は、本出願に援用される。
てんかん(epilepsy)は、神経細胞の一部が短時間で過度な電気を発生させて繰り返し発作が発生する慢性化した疾患群で、神経生物学的、精神的、認知的、社会的変化を伴う深刻な神経疾患である。
てんかんは、アルツハイマー病(Alzheimer)及び脳卒中(Stroke)に続いて3番目に一般的な神経系疾患で、世界人口の約0.5~2%がてんかんを患っている。また、世界中で毎年10万人当たり45人程度で新しい患者が発生しており、国内には約30~40万人のてんかん患者がいると推定されている。
一方、ニューロンの死を主な特徴とする海馬硬化症(Hippocampal sclerosis)は、側頭葉てんかん患者でよく観察される病変で、長期間の繰り返し発作を原因とみなすことができる。
海馬硬化症は、海馬のサイズが小さくなる疾患であるため、てんかんの後遺症として記憶喪失の他にもうつ病や不安症など精神科的疾患が現れることもあり、ひどい場合は死亡に至ることもある。
したがって、てんかんによる過度な発作からニューロンを保護することにより、海馬の機能喪失と誤配線(miswiring)を防止できる方法を発見する必要性がある。
また、海馬ニューロンの死の基礎となるメカニズムは、興奮毒性壊死(excitotoxic necrosis)及び遺伝子依存的な(gene-dependent)アポトーシス信号(apoptotic signaling)を介してプログラミングされる細胞死(programmed cell death)の特徴をすべて有しているので、発作の抑制とともに興奮毒性によるニューロンの死を防御できる薬物が患者に提供されれば、より効果的にてんかんを治療できるだろう。
一方、IgGスーパーファミリーに属する受容体であるネオゲニンは、4つのタイプ(Ig-like loopドメイン、fibronectin IIIドメイン、Transmembraneドメイン及び細胞内ドメインであるP seriesドメイン)の主なドメインを有しており、多様な信号経路のスプライス酵素(splice enzyme)によって多様な切断形態を持つことができるように複数のスプライス部位(splice site)を有しており、ニューロン幹細胞の分化、肝臓のイオン機能媒介体、乳房形態形成因子としての役割まで、非常に多様な機能を持つことができることが知られている(Cole SJ,Bradford D and Cooper HM、2007;Wilson NH and Key B,2007)。
現在、海馬のCA3下位領域(subfield)と粒細胞下帯(subgranular zone)でネオゲニンが発現するので、ニューロン幹細胞と顆粒ニューロン(granule neuron)でもネオゲニンが発現すると考えられる。
しかし、これまでネオゲニンが脳損傷と関連があるという内容については知られていない。
本発明者らは、てんかんによって誘発される脳損傷を早期に診断する方法及びこれを予防又は治療できる製剤を開発するために鋭意研究した結果、てんかんにより脳損傷が誘発される場合、切断された形態のネオゲニンが増加し、ネオゲニンの切断を抑制する場合、海馬においてネクロトーシスが減少することを確認することにより、本発明を完成した。
そこで、本発明の目的は、切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷診断用組成物を提供することである。
本発明の他の目的は、てんかん患者群を対象とするてんかんによって誘発された脳損傷診断のための組成物であって、前記組成物は、切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤を有効成分として含むことを特徴とする組成物を提供することである。
本発明のさらに他の目的は、前記本発明の組成物を有効成分として含むてんかんによって誘発される脳損傷診断用キットを提供することである。
本発明のさらに他の目的は、被検体から分離された生物学的試料において切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷診断に必要な情報を提供する方法を提供することである。
本発明のさらに他の目的は、(a)てんかん重積状態(status epilepticus;SE)患者から分離された生物学的試料に候補物質を処理する段階、(b)前記試料の切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階、(c)候補物質非処理群に比べて切断されたネオゲニンのレベルを減少させる場合、前記物質は、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質であると判定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質をスクリーニングする方法を提供することである。
本発明のさらに他の目的は、ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用薬学的組成物を提供することである。
しかし、本発明が解決しようとする技術的課題は、以上で言及した課題に制限されず、言及されていないさらに他の課題は、以下の記載から当業者が明確に理解できるだろう。
前記目的を達成するため、本発明は、切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷診断用組成物を提供する。
本発明の一実施例において、前記切断されたネオゲニンは、てんかんによって誘発された脳損傷の発生時にレベルが増加するものであってもよいが、これに制限されるものではない。
本発明の他の実施例において、前記てんかんは、てんかん重積状態(status epilepticus;SE)であってもよいが、これに制限されるものではない。
本発明のさらに他の実施例において、前記切断されたネオゲニンのレベルを測定できる製剤は、前記切断されたネオゲニンに特異的な抗体またはアプタマーであってもよいが、これに制限されるものではない。
また、本発明は、てんかん患者群を対象とするてんかんによって誘発された脳損傷診断のための組成物であって、前記組成物は、切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤を有効成分として含むことを特徴とする組成物を提供する。
また、本発明は、本発明による組成物を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷診断用キットを提供する。
また、本発明は、被検体から分離された生物学的試料において切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷診断に必要な情報を提供する方法を提供する。
また、本発明は、被検体から分離された生物学的試料において切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷診断方法を提供する。
本発明の一実施例において、前記被験体は、ヒトを含む哺乳類であってもよいが、これに制限されるものではない。
本発明の他の実施例において、前記生物学的試料は、海馬由来試料であってもよいが、これに制限されるものではない。
本発明のさらに他の実施例において、前記方法は、測定した前記切断されたネオゲニンのレベルが対照群の切断されたネオゲニンのレベルと比較して増加した場合、てんかんによって誘発された脳損傷であると判定する段階をさらに含んでもよいが、これに制限されるものではない。
本発明のさらに他の実施例において、前記対照群は、正常人またはてんかん重積状態(status epilepticus;SE)を伴わないてんかん患者から分離された生物学的試料であってもよいが、これに制限されるものではない。
本発明のさらに他の実施例において、前記切断されたネオゲニンのレベルは、ウェスタンブロット、ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)、放射免疫分析(RIA:radioimmunoassay)、放射免疫拡散法(radioimmunodiffusion)及び免疫沈降分析法(immunoprecipitation assay)からなる群から選ばれる1つ以上の方法で測定されるものであってもよいが、これに制限されるものではない。
また、本発明は、切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤の、てんかんによって誘発された脳損傷診断用途を提供する。
また、本発明は、(a)てんかん重積状態(status epilepticus;SE)患者から分離された生物学的試料に候補物質を処理する段階、(b)前記試料の切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階、及び(c)候補物質非処理群に比べて切断されたネオゲニンのレベルを減少させる場合、前記物質は、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質であると判定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質をスクリーニングする方法を提供する。
本発明の一実施例において、前記試料は、海馬由来試料であってもよいが、これに制限されるものではない。
本発明のさらに他の実施例において、前記(b)段階の測定は、ウェスタンブロット、ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)、放射免疫分析(RIA:radioimmunoassay)、放射免疫拡散法(radioimmunodiffusion)、及び免疫沈降分析法(immunoprecipitation assay)からなる群から選ばれてもよいが、これに制限されるものではない。
また、本発明は、ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用薬学的組成物を提供する。
本発明の一実施例において、前記抑制剤は、DAPT(N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycinet-butyl ester)であってもよいが、これに制限されるものではない。
また、本発明は、ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含む組成物を、これを必要とする個体に投与する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療方法を提供する。
また、本発明は、ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含む組成物のてんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用途を提供する。
また、本発明は、てんかんによって誘発された脳損傷治療用薬剤を製造するためのネオゲニン(neogenin)切断抑制剤の用途を提供する。
本発明は、てんかんによって誘発された脳損傷を診断するためのネオゲニンの用途に関し、本発明による診断用組成物を用いて脳損傷を早期に迅速かつ正確に診断及び予測できる効果があり、さらにてんかんによって誘発された脳損傷治療剤の開発のための標的として活用できる効果がある。
さらに、γ―セクレターゼ抑制剤であるDAPTは、てんかん発作によって誘発される切断されたネオゲニンの生成とネクロトーシス(necroptosis)を効果的に抑制するので、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用薬学的組成物の有効成分として有用に使用できるものと期待される。
本発明者らは、てんかんによって誘発される脳損傷を早期に診断する方法及びこれを予防又は治療できる製剤を開発するために鋭意研究した結果、てんかんにより脳損傷が誘発される場合、切断された形態のネオゲニンが増加し、ネオゲニンの切断を抑制する場合、海馬においてネクロトーシスが減少することを確認することにより、本発明を完成した。
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明の一実施例によれば、ピロカルピン(pilocarpine)を投与しててんかんを誘導した動物モデルの海馬において切断された形態のネオゲニンが増加したことを確認した(実験例1参照)。
本発明の他の実施例によれば、培養したラットの海馬にカイニン酸を処理しててんかん発作を誘導した結果、ニューロンと星状膠細胞の両方でネオゲニンの発現が減少したことを確認した(実験例2参照)。
本発明のさらに他の実施例によれば、ピロカルピンを投与しててんかんを誘導した動物モデルの海馬においててんかん発作によりネクロトーシスが誘導され、海馬が損傷することを確認した(実験例3参照)。
本発明のさらに他の実施例によれば、ネオゲニンの切断を抑制することにより神経毒性からニューロンを保護でき、てんかん発作により誘導されるネクロトーシスを減少させることができることを確認した(実験例4参照)。
これらの結果により、本発明者らは、てんかんにより脳損傷が誘発された場合、そうでない場合に比べて細胞内での切断されたネオゲニンが増加していることを確認することにより、ネオゲニンを脳損傷の発症の有無を診断できる診断用マーカーとして使用できるという事実を確認した。
さらに、本発明者らは、ネオゲニン切断抑制剤であるDAPTを処理する場合、SE発生後のネクロトーシス(necroptosis)のマーカーであるpMLKLの発現が減少したことを確認することにより、切断された形態のネオゲニン生成抑制を通じて脳損傷の程度を予防、改善、または治療できることを確認した。
そこで、本発明は、切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷診断用組成物を提供しうる。
本明細書で使用される用語の「ネオゲニン(neogenin)」は、NEO 1遺伝子によって暗号化されるタンパク質で、海馬領域で高く発現されるもので、ヒトの場合、GenBank:AAC51287.1,GenBank:AAB17263.1のような配列を有することが知られているタンパク質であり、ヒト以外にもこれに対応する多様な個体由来のネオゲニンをすべて制限なく含んでもよい。
本発明において特に説明がない限り、ネオゲニンは切断されていない状態の全長(full-length)ネオゲニンを意味する。
本明細書で使用される用語の「切断されたネオゲニン(truncated neogenin)」は、多様な信号経路のスプライス酵素(splice enzyme)による複数の切断形態のうち1つであってもよく、好ましくは、ネオゲニンにある4つの切断位置のうちPドメインを標的とし、タンパク質分解酵素であるγ-セクラターゼ(gamma-secretase)によりPドメインが切断された形態であってもよい。
前記「Pドメイン」は、ネオゲニンの細胞内ドメイン(intracellular domain)で、P1、P2及びP3ドメインからなり、ヒト以外にもこれに対応する多様な個体由来ネオゲニンでのconserved domainで、例えば、Pドメインは、配列番号1または2の配列を有するドメインであってもよい。
本発明の一実施例によれば、切断されたネオゲニンは、PドメインのP1ドメイン部分が切断されたもので、全長ネオゲニンの分子量は、240kDaであったが、P1ドメイン部分が切断されたネオゲニンの分子量は、160kDaであった(図5参照)。
本発明において、前記切断されたネオゲニンは、てんかんによって誘発された脳損傷の発生時にレベルが増加するものであってもよい。
本明細書で使用される用語の「てんかん(epilepsy)」は、脳の異常な過興分と過同期化によって神経細胞の一部が短時間で過度な電気を発生させ、繰り返し発作(seizure)が発生する慢性化した疾患群で、神経生物学的、精神的、認知的、社会的変化を伴う深刻な神経疾患を意味する。てんかんにより神経細胞の異常過剰興奮性(hyperexcitability)による興奮毒性(excitotoxicity)が誘発され、てんかんによる病理学的損傷がよく現れる大脳部位のうち、海馬(hippocampus)内で海馬硬化症(hippocampal sclerosis)、膠質化(gliosis)、異常神経発生(abnormal neurogenesis)と歯状回顆粒細胞異常細胞構築(cytoarchitectural abnormality of dentate granule cells)及び異常シナプス回路形成(aberrant synpatic circuit)などが現れることがあり、前記のような海馬内の病理学的現象が進行することにより、慢性てんかん発作(chronic epileptic seizure)が発生し、認知及び記憶障害だけでなく、薬物治療にも反応しない製剤不応性難治性てんかんが発生する。
本発明において、前記てんかんは、てんかん重積状態(status epilepticus;SE)であってもよい。
前記「てんかん重積状態(status epilepticus;SE)」とは、てんかん発作が30分以上持続するか、意識が回復していない状態で繰り返し発作が発生する状態を意味する。
本発明において、前記てんかんは、ヒトを含む哺乳類で発症するものであってもよく、例えば、前記哺乳類は、ヒト、イヌ、ネコ、マウス、ウサギ、ウマ、ヒツジ、ハムスター、ハリネズミ、フェレット(ferret)、またはギニアピグ(guinea pig)であってもよい。
本明細書で使用される用語の「ネクロトーシス(necroptosis)」とは、プログラミングされて現れる細胞壊死(programmed necrosis)を意味するもので、ネクロトーシスは、アポトーシス(apoptosis)とは異なり、カスパーゼ(caspase)活性化なしに起こる細胞死で、主に病的な状況で起こる細胞死である。
本発明において、前記切断されたネオゲニンのレベルを測定できる製剤は、前記切断されたネオゲニンに特異的な抗体またはアプタマーであってもよい。
本明細書で使用される用語の「抗体」とは、抗原性部位に対して指示される特異的なタンパク質分子を意味する。本発明の目的上、抗体はマーカータンパク質に対して特異的に結合する抗体を意味し、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体及び組換え抗体をすべて含む。また、抗原-抗体結合性を有するものであれば、全抗体の一部も本発明の抗体に含まれ、本発明の切断されたネオゲニンに特異的に結合するすべての種類の免疫グロブリン抗体が含まれる。例えば、2つの全長の軽鎖及び2つの全長の重鎖を有する完全な形態の抗体だけでなく、抗体分子の機能的な断片、すなわち、抗原結合機能を有するFab、F(ab’)、F(ab’)2及びFvなどを含む。さらに、本発明の抗体には、本発明のネオゲニンに特異的に結合できるものであれば、ヒト化抗体、キメリック抗体などの特殊抗体と組換え抗体も含まれる。
本明細書で使用される用語の「アプタマー(aptamer)」とは、試料内の検出しようとする分析物質と特異的に結合できる物質で、それ自体で安定した3次構造を有する一本鎖核酸(DNA、RNA、または変形核酸)を意味することで、特異的に試料内の標的タンパク質の存在を確認しうる。アプタマーの製造は一般的なアプタマーの製造方法により、確認しようとする標的タンパク質に対して選択的であり、高い結合力を有するオリゴヌクレオチドの配列を決定して合成した後、オリゴヌクレオチドの5’末端や3’末端をアプタマーチップの官能基に結合できるように、-SH、-COOH、-OHまたはNH2に変更させることにより行われてもよいが、これに制限されるものではない。
前記ネオゲニンに特異的な抗体を含む本発明の組成物は、公知のタンパク質を感知する方法に必要な製剤をさらに含んでもよく、本組成物を用いて公知のタンパク質を感知する方法を制限なく使用して被検体(本発明では被検体から得た生物学的試料)でネオゲニンのレベルを測定してもよい。
本明細書で使用される用語の「診断」とは、特定の疾病または疾患に対する対象(subject)の感受性(susceptibility)を判定すること、対象が特定の疾病または疾患を現在有しているか否かを判定すること、特定の疾病または疾患にかかった対象の予後(prognosis)を決定すること、またはテラメトリクス(therametrics)(例えば、治療効能に対する情報を提供するためにオブジェクトの状態をモニタリングすること)を含む。
また、本発明は、てんかん患者群を対象とするてんかんによって誘発された脳損傷診断のための組成物であって、前記組成物は、切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤を有効成分として含むことを特徴とする組成物を提供しうる。
本発明において、前記患者群は、てんかん重積状態(status epilepticus;SE)を患った患者群であってもよい。
また、本発明は、本発明によるてんかんによって誘発された脳損傷診断用組成物を含むてんかんによる脳損傷診断用キットを提供しうる。
前記本発明のキットには、標的タンパク質をマーカーとして認識する抗体だけでなく、分析方法に適した1種類またはそれ以上の他の構成成分組成物、溶液または装置が含まれてもよい。
また、本発明は、被検体から分離された生物学的試料において切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷診断に必要な情報を提供する方法を提供しうる。
また、本発明は、被検体から分離された生物学的試料において切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷診断方法を提供する。
本発明によるてんかんによって誘発された脳損傷診断方法は、脳損傷による症状が現れる前に迅速に診断でき、これにより脳損傷が悪化する前に治療剤投与などのように即時対応が可能である。
そこで、本発明によるてんかんによって誘発された脳損傷診断方法は、てんかんによって誘発された脳損傷の治療に効果的に使用されてもよい。
本発明において、前記被検体は、ヒトを含む哺乳類であってもよく、てんかんによって誘発された脳損傷を有するか、またはあると疑われる個体であってもよい。
本発明において、前記生物学的試料は、海馬由来試料であってもよい。
本発明において、測定した前記切断されたネオゲニンのレベルが対照群の切断されたネオゲニンのレベルと比較して増加した場合、てんかんによって誘発された脳損傷であると判定する段階をさらに含んでもよい。
本発明において、対照群とは、正常人またはてんかん重積状態(status epilepticus;SE)を伴わないてんかん患者から分離された生物学的試料を意味する。
本発明において、前記切断されたネオゲニンのレベル測定は、当業界で公知のタンパク質発現測定方法によるものであれば、測定方法が特に制限されないが、例えば、ウェスタンブロット、ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)、放射免疫分析(RIA,radioimmunoassay)、放射免疫拡散法(radioimmunodiffusion)及び免疫沈降分析法(immunoprecipitation assay)からなる群から選ばれる1つ以上であってもよい。
本明細書で使用される用語の「測定」とは、所望の物質(本発明におけるマーカータンパク質)の存在(発現)の有無を測定及び確認すること、または所望の物質の存在レベル(発現レベル)の変化を測定及び確認することをすべて含む意味である。すなわち、前記タンパク質の発現レベルを測定することは、発現の有無を測定すること(すなわち、発現の有無を測定すること)、または前記タンパク質の質的、量的変化レベルを測定することを意味する。前記測定は、定性的方法(分析)と定量的方法の両方を含めて制限なく行われてもよい。タンパク質レベルの測定において定性的方法と定量的方法の種類は、当業界でよく知られており、本明細書に記載の実験法がこれに含まれる。各方法ごとに具体的なタンパク質レベル比較方式は、当業界でよく知られている。したがって、前記目的タンパク質の検出は、切断されたネオゲニンの存在有無の検出、または前記タンパク質発現量の増加(上向き調節)または減少(下向き調節)を確認することを含む意味である。
本発明において、前記生物学的試料は、てんかんによって誘発された脳損傷を診断するために被検体から採取されたものであれば制限なく使用されてもよく、例えば、組織、細胞、血液、血清、血漿、唾液、及び尿などが含まれてもよく、好ましくは、生物学的組織試料または細胞試料、例えば、病変組織に由来する細胞、組織、器官、微細針吸引検体、コア針生検(core needle biopsy)検体及び真空吸入生検検体からなる群から選ばれた1つ以上で測定されてもよい。前記生物学的試料は、検出または診断に使用する前に前処理してもよい。例えば、均質化(homogenization)、濾過、蒸留、抽出、濃縮、妨害成分の不活性化、試薬の添加などを含んでもよい。前記試料は、タンパク質マーカーの探知感度を増加させるために用意できるが、例えば、被験体から得られた試料は、アニオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー(size exclusion chromatography)、液体クロマトグラフィー、連続抽出(sequential extraction)またはゲル電気泳動などの方法を用いて前処理されてもよい。
また、本発明は、下記段階を含むてんかんによって誘発された脳損傷の治療方法を提供しうる。
(a)被験体から分離された生物学的試料において切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階、
(b)切断されたネオゲニンのレベルが対照群の切断されたネオゲニンのレベルと比較して増加した場合、てんかんによって誘発された脳損傷であると判定する段階、及び
(c)てんかんによって誘発された脳損傷を治療する段階。
本発明において、前記(c)段階において治療は、薬物治療、手術治療、迷走神経刺激術、ケトン食療法などの方法を使用してもよい。
本発明において、前記薬物は、抗けいれん剤、例えば、テグレトール(Tegretol)、ジランチン(Dilantin)、マイソリン(Mysolin)、オルホイール(Orfil)、フェノバビタール(phenobarbital)、リボトリール(Rivotril)、ザロンチン(Zarontin)、サブリル(Sabril)、ラミクタル(Lamictal)、ゾニサミド(Zonisamide)、トパマックス(Topamax)、トリレプタル(Trileptal)、及びニューロンチン(Neurontin)からなる群から選ばれた1つ以上の抗けいれん剤であってもよいが、これに制限されるものではない。
本発明において、前記薬物は、本発明によるネオゲニン切断抑制剤を有効成分として含む薬学的組成物であってもよいが、これに制限されるものではない。
本発明において、前記手術治療は、側頭葉切除術、てんかん発生病変除去術、局所的脳皮質切除術、てんかん路遮断術、及び大脳半球切除術からなる群から選ばれる1つ以上であってもよいが、これに制限されるものではない。
また、本発明は、(a)てんかん重積状態(status epilepticus;SE)患者から分離された生物学的試料に候補物質を処理する段階、(b)前記試料の切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階、及び(c)候補物質非処理群に比べて切断されたネオゲニンのレベルを減少させる場合、前記物質は、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質であると判定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質をスクリーニングする方法を提供しうる。
本発明において、前記試料は、海馬由来試料であってもよい。
本発明において、前記(b)段階の測定は、ウェスタンブロット、ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)、放射免疫分析(RIA、radioimmunoassay)、放射免疫拡散法(radioimmunodiffusion)、免疫沈降分析法(immunoprecipitation assay)からなる群から選ばれるものであってもよい。
また、本発明は、ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用薬学的組成物を提供しうる。
本発明において、前記抑制剤は、γ-セクラターゼ抑制剤(gamma-secretase inhibitor)であり、例えば、(5S)-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-6-フェニル-(4R)-ヒドロキシ-(2R)-ベンジルヘキサオニル)-L-ロイシル-L-フェニルアラニンアミド((5S)-(tertbutoxycarbonylamino)-6-phenyl-(4R)-hydroxy-(2R)-benzylhexanoyl)-L-leu-L-phe-amide,L-685,458),(S,S)-2-[2-(3,5-ジフルオロフェニル)-アセチルアミノ]-N-(1-メチル-2-オキソ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-ベンゾ[e][1,4]ジアゼピン-3-イル)-プロピオンアミド((S,S)-2-[2-(3,5-difluorophenyl)-acetylamino]-N-(1-methyl-2-oxo-5-phenyl-2,3-dihydro-1H-benzo[e][1,4]diazepin-3-yl)-propionamide,compound E)、及びDAPT(N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycinet-butyl ester)からなる群から選ばれてもよく、好ましくは、DAPT(N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl))-L-alanyl]-S-phenylglycinet-butyl ester)であってもよいが、これに制限されず、ネオゲニンの切断を抑制できるものであれば、すべて含まれてもよい。
本発明において「薬学的組成物」とは、疾患の予防または治療を目的として製造されたものを意味し、それぞれ通常の方法によって多様な形態で剤形化して使用されてもよい。例えば、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップなどの経口型剤形で剤形化してもよく、外用剤、坐剤及び滅菌注射用液の形態で剤形化して使用されてもよい。
本発明による薬学的組成物は、薬学的組成物の製造に通常使用される適切な担体、賦形剤及び希釈剤をさらに含んでもよい。前記賦形剤は、例えば、希釈剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、吸着剤、保湿剤、フィルム-コーティング物質、及び制御放出添加剤からなる群から選ばれる1つ以上であってもよい。
本発明による薬学的組成物は、それぞれ通常の方法により散剤、顆粒剤、徐放性顆粒剤、腸溶性顆粒剤、液剤、点眼剤、エルシリック剤、乳剤、懸濁液剤、酒精剤、トローチ剤、芳香水剤、リモナーデ剤、錠剤、徐放性錠剤、腸溶性錠剤、舌下錠、硬質カプセル剤、軟質カプセル剤、徐放性カプセル剤、腸溶性カプセル剤、丸剤、チンキ剤、軟調エキス剤、乾燥エキス剤、流動エキス剤、注射剤、カプセル剤、灌流液、硬膏剤、ローション剤、パスタ剤、噴霧剤、吸入剤、パッチ剤、滅菌注射液、またはエアロゾルなどの外用剤などの形態で剤形化して使用されてもよく、前記外用剤は、クリーム、ジェル、パッチ、噴霧剤、軟膏剤、硬膏剤、ローション剤、リニメント剤、パスタ剤またはカタプラズマ剤などの剤形を有してもよい。
本発明による薬学的組成物に含まれてもよい担体、賦形剤及び希釈剤としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、オリゴ糖、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、デンプン、アカシアゴム、アルギネート、ゼラチン、カルシウムホスフェイト、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、非晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、マグネシウムステアレート及び鉱物油が挙げられる。
製剤化する場合は、通常、使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を使用して調製される。
本発明による錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、トローチ剤の添加剤として、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、小麦デンプン、乳糖、白糖、ブドウ糖、果糖、D-マンニトール、沈降炭酸カルシウム、合成ケイ酸アルミニウム、リン酸一水素カルシウム、硫酸カルシウム、塩化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、精製ラノリン、微結晶セルロース、デキストリン、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カオリン、尿素、コロイド状シリカゲル、ヒドロキシプロピルスターチ、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、HPMC1928、HPMC2208、HPMC2906、HPMC2910、プロピレングリコール、カゼイン、乳酸カルシウム、プリモゼルなどの賦形剤、ゼラチン、アラビアゴム、エタノール、寒天粉、酢酸フタル酸セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ブドウ糖、精製水、カゼインナトリウム、グリセリン、ステアリン酸、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、微結晶セルロース、デキストリン、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ヒドロキシメチルセルロース、精製シェラック、デンプン糊、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンなどの結合剤が使用されてもよく、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、トウモロコシデンプン、寒天粉、メチルセルロース、ベントナイト、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クエン酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、無水ケイ酸、1-ヒドロキシプロピルセルロース、デキストラン、イオン交換樹脂、酢酸ポリビニル、ホルムアルデヒド処理カゼイン及びゼラチン、アルギン酸、アミロース、グアルゴム(Guar gum)、重曹、ポリビニルピロリドン、リン酸カルシウム、ゲル化澱粉、アラビアゴム、アミロペクチン、ペクチン、ポリリン酸ナトリウム、エチルセルロース、白糖、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、D-ソルビトール液、硬質無水ケイ酸などの崩壊剤、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、水素化植物油(Hydrogenated vegetable oil)、タルク、石松子、カオリン、ワセリン、ステアリン酸ナトリウム、カカオ脂、サリチル酸ナトリウム、サリチル酸マグネシウム、ポリチレングリコールPEG4000、PEG6000、流動パラフィン、水素添加大豆油(Lubri wax)、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸亜鉛、ラウリル硫酸ナトリウム、酸化マグネシウム、マクロゴール(Macrogol)、合成ケイ酸アルミニウム、無水ケイ酸、高級脂肪酸、高級アルコール、シリコーン油、パラフィン油、ポリエチレングリコール脂肪酸エーテル、デンプン、塩化ナトリウム、酢酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム、dl-ロイシン、硬質無水ケイ酸などの滑沢剤が使用されてもよい。
本発明による液剤の添加剤としては、水、希塩酸、希硫酸、クエン酸ナトリウム、モノステアリン酸スクロース類、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル類(ツインエステル)、ポリオキシエチレンモノアルキルエーテル類、ラノリンエーテル類、ラノリンエステル類、酢酸、塩酸、アンモニア水、炭酸アンモニウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、プロルアミン、ポリビニルピロリドン、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどが使用されてもよい。
本発明によるシロップ剤には白糖の溶液、他の糖類または甘味剤などが使用されてもよく、必要に応じて芳香剤、着色剤、保存剤、安定剤、懸濁化剤、乳化剤、粘稠剤などが使用されてもよい。
本発明の乳剤には精製水が使用されてもよく、必要に応じて乳化剤、保存剤、安定剤、芳香剤などが使用されてもよい。
本発明による懸濁剤には、アカシア、トラガカンタ、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、微結晶セルロース、アルギン酸ナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、HPMC1828、HPMC2906、HPMC2910など懸濁化剤が使用されてもよく、必要に応じて界面活性剤、保存剤、安定剤、着色剤、芳香剤が使用されてもよい。
本発明による注射剤には、注射用蒸留水、0.9%塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロース+塩化ナトリウム注射液、ピーイージー(PEG)、ラクトリンゲル注射液、エタノール、プロピレングリコール、不揮発性油-ごま油、綿実油、落花生油、大豆油、トウモロコシ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、安息香酸ベンゼンなどの溶剤、安息香酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、尿素、ウレタン、モノエチルアセトアミド、ブタゾリジン、プロピレングリコール、ツイン類、ニジョンチン酸アミド、ヘキサミン、ジメチルアセトアミドなどの溶解補助剤、弱酸及びその塩(酢酸と酢酸ナトリウム)、弱塩基及びその塩(アンモニア及び酢酸アンモニウム)、有機化合物、タンパク質、アルブミン、ペプトン、ガム類などの緩衝剤、塩化ナトリウムなどの等張化剤、亜硫酸ナトリウム(NaHSO3)二酸化炭素ガス、メタ重亜硫酸ナトリウム(Na2S2O5)、亜硫酸ナトリウム(Na2SO3)、窒素ガス(N2)、エチレンジアミンテトラ酢酸などの安定剤、ソジウムビスルフィド0.1%、ソジウムホルムアルデヒドスルホキシレート、チオウレア、エチレンジアミンテトラ酢酸ジナトリウム、アセトンソジウムビスルファイトなどの硫酸化剤、ベンジルアルコール、クロロブタノール、塩酸プロカイン、ブドウ糖、グルコン酸カルシウムなどの無痛化剤、CMCナトリウム、アルギン酸ナトリウム、ツイン80、モノステアリン酸アルミニウムなどの懸濁化剤を含んでもよい。
本発明による坐剤には、カカオ脂、ラノリン、ウイテプゾール、ポリエチレングリコール、グリセロゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸とオレイン酸の混合物、スバナル(Subanal)、綿実油、落花生油、ヤシ油、カカオバター+コレステロール、レシチン、ラネットワックス、モノステアリン酸グリセロール、ツインまたはスパン、イムハウゼン(Imhausen)、モノレン(モノステアリン酸プロピレングリコール)、グリセリン、アデプスソリダス(Adeps solidus)、ブチラムテゴ-G(Buytyrum Tego-G)、セベスパマ16(Cebes Pharma 16)、ヘキサライドベース95、コトマ(Cotomar)、ヒドロコートSP、S-70-XXA、S-70-XX75(S-70-XX95)、ヒドロコート(Hydrokote)25、ヒドロコート711、イドロポスタール(Idropostal)、マサエストラリウム(Massa estrarium、A、AS、B、C、D、E、I、T)、マサ-MF、マスポール、マスポール-15、ネオスポスタル-エン、パラマウンド-B、スポシロ(OSI、OSIX、A、B、C、D、H、L)、坐剤基剤IVタイプ(AB、B、A、BC、BBG、E、BGF、C、D、299)、スポスタル(N、Es)、ウェコビ(W、R、S、M、Fs)、テゼスタートリグリセリド基剤(TG-95、MA、57)などの基剤が使用されてもよい。
経口投与用固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれ、このような固形製剤は、前記抽出物に少なくとも1つ以上の賦形剤、例えば、デンプン、カルシウムカーボネート(calcium carbonate)、スクロース(sucrose)またはラクトース(lactose)、ゼラチンなどを混合して調製される。また、単純な賦形剤の他に、マグネシウムスチレートタルクなどの潤滑剤も使用される。
経口投与用液状製剤としては、懸濁剤、内容液剤、乳剤、シロップ剤などが該当するが、よく使用される単純希釈剤である水、リキドパラフィンの他に様々な賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などが含まれてもよい。非経口投与用製剤には、滅菌水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤が含まれる。非水性溶剤、懸濁溶剤としては、プロピレングリコール(propylene glycol)、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、エチルオレートなどの注射可能なエステルなどが使用されてもよい。
本発明による薬学的組成物は、薬学的に有効な量で投与する。本発明において、「薬学的に有効な量」とは、医学的治療に適用可能な合理的な受恵/リスク比で疾患を治療するのに十分な量を意味し、有効用量レベルは、患者疾患の種類、重症度、薬物の活性、薬物に対する敏感度、投与時間、投与経路及び排出比率、治療期間、同時に使用される薬物を含む要素及びその他の医学分野においてよく知られている要素によって決定されてもよい。
本発明による薬学的組成物は、個別治療剤として投与するか、または他の治療剤と併用して投与されてもよく、従来の治療剤とは順次的または同時に投与されてもよく、単一または多重投与されてもよい。前記要素をすべて考慮し、副作用なしに最小限の量で最大の効果が得られる量を投与することが重要であり、これは本発明が属する技術分野において通常の技術者によって容易に決定されてもよい。
本発明の薬学的組成物は、個体に様々な経路で投与されてもよい。投与のすべての方式は、予想できるが、例えば、経口服用、皮下注射、腹腔投与、静脈注射、筋肉注射、脊髄周囲空間(硬膜内)注射、舌下投与、頬粘膜投与、直腸内挿入、膣内挿入、眼球投与、耳投与、鼻腔投与、吸入、口または鼻による噴霧、皮膚投与、経皮投与などによって投与されてもよい。
本発明の薬学的組成物は、治療する疾患、投与経路、患者の年齢、性別、体重及び疾患の重症度などの様々な関連因子とともに、活性成分である薬物の種類によって決定される。
また、本発明は、ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含む組成物を、これを必要とする個体に投与する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療方法を提供する。
また、本発明は、ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含む組成物のてんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用途を提供する。
また、本発明は、てんかんによって誘発された脳損傷治療用薬剤を製造するためのネオゲニン(neogenin)切断抑制剤の用途を提供する。
本発明において、「個体」とは、てんかんによって誘発された脳損傷の治療を必要とする対象を意味し、より具体的には、ヒトまたは非-ヒトの霊長類、マウス(mouse)、ラット(rat)、イヌ、ネコ、ウマ、及びウシなどの哺乳類を意味する。
本発明において「投与」とは、任意の適切な方法で個体に所定の本発明の組成物を提供することを意味する。
本明細書で使用される用語の「予防」とは、てんかんによって誘発される脳損傷の発生前に先制的に本発明による薬学的組成物の投与により、てんかんによって誘発される脳損傷を抑制させるか、または遅延させるすべての行為を意味するもので、てんかん発作によってニューロンに起こる細胞死であるネクロトーシス(necroptosis)を抑制することにより、ニューロンを保護することを含む。
本明細書で使用される用語の「治療」とは、本発明による薬学的組成物の投与によっててんかんによって誘発された脳損傷の症状が好転するか、または有利に変更させるすべての行為を意味する。
また、本発明は、ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷の予防または改善用食品組成物を提供しうる。
本発明のネオゲニン切断抑制剤を食品添加物として使用する場合、前記ネオゲニン切断抑制剤をそのまま添加するか、または他の食品や食品成分とともに使用してもよく、通常の方法によって適宜使用してもよい。有効成分の混合量は、使用目的(予防、健康または治療的処置)に応じて適宜決定されてもよい。一般に、食品または飲料の製造時、本発明のネオゲニン切断抑制剤は、原料に対して15重量%以下、または10重量%以下の量で添加されてもよい。しかし、健康及び衛生を目的とするか、または健康調節を目的とする長期間の摂取の場合、前記量は前記範囲以下であってもよく、安全性の面で何の問題もないため、有効成分は、前記範囲以上の量で使用されてもよい。
前記食品の種類には特に制限はない。前記物質を添加できる食品の例としては、肉類、ソーセージ、パン、チョコレート、キャンディー類、スナック類、菓子類、ピザ、ラーメン、その他の麺類、ガム類、アイスクリーム類を含む酪農製品、各種スープ、飲料水、お茶、ドリンク剤、アルコール飲料及びビタミン複合剤などがあり、通常の意味での健康機能食品をすべて含む。
本発明による健康飲料組成物は、通常の飲料のように、様々な香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含有してもよい。上述した天然炭水化物は、ブドウ糖および果糖などのモノサッカライド、マルトース及びスクロースなどのジサッカライド、デキストリン及びシクロデキストリンなどのポリサッカライド、及びキシリトール、ソルビトール及びエリトリトールなどの糖アルコールである。甘味剤としては、タウマチン、ステビア抽出物などの天然甘味剤や、サッカリン、アスパルテームなどの合成甘味剤などが使用されてもよい。前記天然炭水化物の割合は、本発明の組成物100mLあたり一般に約0.01~0.20g、または約0.04~0.10gである。
前記に加えて、本発明の組成物は、様々な栄養剤、ビタミン、電解質、風味剤、着色剤、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護コロイド増粘剤、pH調整剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤などを含有してもよい。その他に、本発明の組成物は、天然フルーツジュース、フルーツジュース飲料及び野菜飲料の製造のための果肉を含有してもよい。これらの成分は独立してまたは組み合わせて使用してもよい。このような添加剤の割合はあまり重要ではないが、本発明の組成物100重量部当たり0.01~0.20重量部の範囲から選ばれるのが一般的である。
本発明において、前記食品組成物は、健康機能性食品組成物であってもよいが、これに制限されるものではない。
本明細書において、「健康機能性食品」とは、特定保健用食品(food for special health use,FoSHU)と同じ用語で、栄養供給の他にも生体調節機能が効率的に現れるように加工された医学、医療効果の高い食品を意味するが、前記食品は、肥満の予防または改善に有用な効果を得るために錠剤、カプセル、粉末、顆粒、液状、丸剤などの多様な形態で製造されてもよい。
本発明の健康機能性食品は、当業界で通常使用される方法により製造可能であり、前記製造時には、当業界で通常添加する原料及び成分を添加して製造してもよい。また、一般薬品とは異なり、食品を原料として薬品の長期服用時に発生しうる副作用などのないという長所があり、携帯性に優れている。
本発明で使用される用語は、本発明における機能を考慮しながら、可能な限り現在広く使用されている一般的な用語を選択したが、これは当分野に従事する技術者の意図または判例、新技術の出現などによって変わり得る。また、特定の場合には、出願人が任意に選定した用語もあり、この場合、該当する発明の説明部分で詳細にその意味を記載する。したがって、本発明で使用される用語は、単なる用語の名称ではなく、その用語が有する意味と本発明の全般にわたる内容に基づいて定義されるべきである。
本発明の明細書全体において、ある部分がある構成要素を「含む」とすると、これは特に反対の記載がない限り、他の構成要素を除外するのではなく、他の構成要素をさらに含んでもよいことを意味する。本発明の明細書の全体で使用される程度の用語の「約」、「実質的に」などは、言及された意味に固有の製造及び物質許容誤差が提示されるとき、その数値またはその数値に近い意味で使用され、本発明の理解を助けるために正確かつ絶対的な数値が言及された開示内容を非良心的な侵害者が不当に利用することを防止するために使用される。
本発明の明細書全体において、マルクーシュ形式の表現に含まれる「これらの組み合わせ」という用語は、マルクーシュ形式の表現に記載された構成要素からなる群から選ばれる1つ以上の混合または組み合わせを意味するもので、前記構成要素からなる群から選ばれる一つ以上を含むことを意味する。
(発明の実施のための形態)
以下、本発明の理解を助けるために好ましい実施例を提示する。しかし、下記の実施例は本発明をより容易に理解するために提供されるものであり、下記の実施例によって本発明の内容が限定されるものではない。
[実施例]
実施例1.実験動物
6週齢のC57BL/6Nオスマウス(大韓民国、京畿道、Koatech)とSprague-Dawleyラット(18日目胚;大韓民国、京畿道、Samtako)を標準温度22±1℃及び照明時間12時間(8:00点灯~20:00消灯)の環境で自由に飼料と水を摂取できるように飼育した。動物実験は、カトリック大学校の倫理委員会(CUMS-2020-0103-01)と檀国大学校動物研究所の動物管理委員会(DKU-16-024)の承認を受けており、実験動物の管理及び使用に対する国立保健院の指針(NIH発行番号,80-23,1996年改訂)に従って行った。
実施例1.実験動物
6週齢のC57BL/6Nオスマウス(大韓民国、京畿道、Koatech)とSprague-Dawleyラット(18日目胚;大韓民国、京畿道、Samtako)を標準温度22±1℃及び照明時間12時間(8:00点灯~20:00消灯)の環境で自由に飼料と水を摂取できるように飼育した。動物実験は、カトリック大学校の倫理委員会(CUMS-2020-0103-01)と檀国大学校動物研究所の動物管理委員会(DKU-16-024)の承認を受けており、実験動物の管理及び使用に対する国立保健院の指針(NIH発行番号,80-23,1996年改訂)に従って行った。
実施例2.てんかん誘導マウスモデルの作製
ピロカルピン(pilocarpine)誘導てんかんモデルは、以前に報告されているように(Cho KO et al.,2015;Jang HJ et al.,2019;Jeong KH et al.,2011;Kim JE and Cho KO,2018)作製した。具体的には、マウスにスコポラミンメチルナイトレート(scopolamine methyl nitrate;catalog no.S2250;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)2mg/kgとターブタリンヘミサルフェート塩(terbutaline hemisulfate salt;catalog no.P6503;カリフォルニア、Sigma-Aldrich)2mg/kgをそれぞれ腹腔内に投与し、30分後にピロカルピン塩酸塩(pilocarpine hydrochloride;catalog no.P6503;ミズーリ,セントルイス、Sigma-Aldrich)280mg/kgを投与した。ピロカルピン投与後、約3時間行動発作の重症度と長さをモニタリングした。発作段階は、Racine Scale(Racine RJ,1972)によって決定した(段階1:facial clonus、段階2:head nodding、段階3:forelimb clonus、段階4:rearing、段階5:rearing及びfalling)。持続的な全身けいれん発作(段階3~段階5)のあるマウスをSE(Status Epilepticus;てんかん重積状態)を示すものとみなし、さらなる実験のために選別した。SE発生後3時間が経過した後、ジアゼパム(diazepam)10mg/kgを腹腔内に投与して発作を終結させた。発作終結後、回復を促進するため、温度が30℃に設定されたインキュベーター(incubator)で2日間または正常体温を維持できるまで水に濡らした飼料(chow)を提供して回復を助けた。次に、犠牲前まで前記実施例1の飼育環境で飼育した。
ピロカルピン(pilocarpine)誘導てんかんモデルは、以前に報告されているように(Cho KO et al.,2015;Jang HJ et al.,2019;Jeong KH et al.,2011;Kim JE and Cho KO,2018)作製した。具体的には、マウスにスコポラミンメチルナイトレート(scopolamine methyl nitrate;catalog no.S2250;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)2mg/kgとターブタリンヘミサルフェート塩(terbutaline hemisulfate salt;catalog no.P6503;カリフォルニア、Sigma-Aldrich)2mg/kgをそれぞれ腹腔内に投与し、30分後にピロカルピン塩酸塩(pilocarpine hydrochloride;catalog no.P6503;ミズーリ,セントルイス、Sigma-Aldrich)280mg/kgを投与した。ピロカルピン投与後、約3時間行動発作の重症度と長さをモニタリングした。発作段階は、Racine Scale(Racine RJ,1972)によって決定した(段階1:facial clonus、段階2:head nodding、段階3:forelimb clonus、段階4:rearing、段階5:rearing及びfalling)。持続的な全身けいれん発作(段階3~段階5)のあるマウスをSE(Status Epilepticus;てんかん重積状態)を示すものとみなし、さらなる実験のために選別した。SE発生後3時間が経過した後、ジアゼパム(diazepam)10mg/kgを腹腔内に投与して発作を終結させた。発作終結後、回復を促進するため、温度が30℃に設定されたインキュベーター(incubator)で2日間または正常体温を維持できるまで水に濡らした飼料(chow)を提供して回復を助けた。次に、犠牲前まで前記実施例1の飼育環境で飼育した。
実施例3.1次細胞培養(Primary cell culture)
ラットの海馬ニューロンは、Hong N,Kim MH,Min CK,Kim HJ and Lee JH,2017に開示された方法を一部変形して培養した。16.5%ウレタンで母体Sprague-Dawleyラットを麻酔し、子宮から18日目のラット胎児を得た。立体顕微鏡の下でフォーセプスを用いてラット胎児の脳から海馬を分離し、HEPES-buffered Hanks’salt solution(20mM HEPES,137mM NaCl,1.3mM CaCl2,0.4mM MgSO4,0.5mM MgCl2,5.0mM KCl,0.4mM KH2PO4,0.6mM Na2HPO4,3.0mM NaHCO3及び5.6mM Glucose,pH7.4)に入れた。細胞を5mlのピペット及びflame-narrowedパスツールピペットで粉砕して解離し、遠心分離でペレット化し、2%B-27supplement、0.25%Glutamax I、及びペニシリン、ストレプトマイシン、及びアンホテリシンB(amphotericin B)をそれぞれ100U/ml、100μg/ml、及び0.025μg/mlで含み、L-グルタミンを含まないpH7.4のneurobasal培地に再懸濁した。解離した細胞を0.2mg/mlのマトリゲル(Matrigel)(米国、マサチューセッツ、ベッドフォード、BD Bioscience)でプレコート(precoated)された25mm円形カバーガラス当たり110,000cellsの密度でプレーティングし、10%CO2及び90%airの加湿化された大気で37℃の条件で成長させた。培地の75%を交換する方式で新鮮な培地を3、7及び10日に供給した。実験に使用した細胞は、少なくとも12日間、有糸分裂阻害剤(mitotic in hibitor)を含まずに培養した。
ラットの海馬ニューロンは、Hong N,Kim MH,Min CK,Kim HJ and Lee JH,2017に開示された方法を一部変形して培養した。16.5%ウレタンで母体Sprague-Dawleyラットを麻酔し、子宮から18日目のラット胎児を得た。立体顕微鏡の下でフォーセプスを用いてラット胎児の脳から海馬を分離し、HEPES-buffered Hanks’salt solution(20mM HEPES,137mM NaCl,1.3mM CaCl2,0.4mM MgSO4,0.5mM MgCl2,5.0mM KCl,0.4mM KH2PO4,0.6mM Na2HPO4,3.0mM NaHCO3及び5.6mM Glucose,pH7.4)に入れた。細胞を5mlのピペット及びflame-narrowedパスツールピペットで粉砕して解離し、遠心分離でペレット化し、2%B-27supplement、0.25%Glutamax I、及びペニシリン、ストレプトマイシン、及びアンホテリシンB(amphotericin B)をそれぞれ100U/ml、100μg/ml、及び0.025μg/mlで含み、L-グルタミンを含まないpH7.4のneurobasal培地に再懸濁した。解離した細胞を0.2mg/mlのマトリゲル(Matrigel)(米国、マサチューセッツ、ベッドフォード、BD Bioscience)でプレコート(precoated)された25mm円形カバーガラス当たり110,000cellsの密度でプレーティングし、10%CO2及び90%airの加湿化された大気で37℃の条件で成長させた。培地の75%を交換する方式で新鮮な培地を3、7及び10日に供給した。実験に使用した細胞は、少なくとも12日間、有糸分裂阻害剤(mitotic in hibitor)を含まずに培養した。
海馬星状膠細胞(astrocyte)は、Min JO et al.,2015に開示された方法を一部変更して培養した。解離した細胞を3,500,000cells/T25 flaskの密度でプレーティングし、10%CO2及び90%airの加湿化された大気で37℃の条件で成長させた。以後、細胞が合流(confluence)に達するまで3~4日ごとに新鮮な培地を供給した。星状膠細胞は、0.5×trypsin/EDTA(catalog no.T4174;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)に分離し、1:9に希釈した後にプレーティングし、使用前まで約80-90%合流(confluence)に達するまで成長させた。分離された細胞は、~95%の純粋な星状膠細胞で、GFAP(glial fibrillary acidic protein)に対する抗体に免疫陽性(immunepositivity)を示したが、ニューロンや希突起膠細胞(oligodendrocyte)のマーカーに免疫反応性(immunereactivity)を示さなかった。
実施例4.MTT assay
ラットの海馬ニューロンを96well-plateに1.4×104cells密度でシーディング(seeding)した。37℃で24時間、100μM NMDA(N-methyl-D-aspartate;catalog no.M3262;ミズーリ、セントルイス、Sigma-Aldrich)及び/又は1μM DAPT(N-[N-(3,5)-Difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester;catalog no.D5942;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)を処理したニューロンを4時間0.5mg/mlの最終濃度でMTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl-2,5-dipheyltetrazolium bromide;catalog no.M5655;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)でインキュベーション(incubation)した。次に、溶液を除去し、ジメチルスルホキシド(dimethyl sulfoxide)を添加して不溶性の紫色のホルマザン(Formazan)生成物を溶解させた。吸光度は、microplate readerを用いて570nmの波長で測定した。対照群(nontreated cell)においてホルマザンの吸光度は、100%生存率(viability)を示す。
ラットの海馬ニューロンを96well-plateに1.4×104cells密度でシーディング(seeding)した。37℃で24時間、100μM NMDA(N-methyl-D-aspartate;catalog no.M3262;ミズーリ、セントルイス、Sigma-Aldrich)及び/又は1μM DAPT(N-[N-(3,5)-Difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester;catalog no.D5942;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)を処理したニューロンを4時間0.5mg/mlの最終濃度でMTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl-2,5-dipheyltetrazolium bromide;catalog no.M5655;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)でインキュベーション(incubation)した。次に、溶液を除去し、ジメチルスルホキシド(dimethyl sulfoxide)を添加して不溶性の紫色のホルマザン(Formazan)生成物を溶解させた。吸光度は、microplate readerを用いて570nmの波長で測定した。対照群(nontreated cell)においてホルマザンの吸光度は、100%生存率(viability)を示す。
実施例5.免疫蛍光法と組織学的評価(Immunofluorescence and histologic assessment)
SE発生後、3日または7日目のマウスを麻酔し、pH7.4の0.1M phosphate bufferでsalineと4%パラホルムアルデヒド(paraformaldehyde)で経心灌流(transcardially perfusion)させた。脳を摘出し、24時間パラホルムアルデヒドで固定した後、3日間30%スクロース(sucrose)溶液で抗凍結(cryoprotect)した。次に、Tissue-Tek(日本,東京,Sakura Finetechnical)に挿入して液体窒素で急速凍結した。次に、一連のcoronal section(30μm厚さ)をクライオスタット(cryostat)で切断し、染色のためにさらに処理した。
SE発生後、3日または7日目のマウスを麻酔し、pH7.4の0.1M phosphate bufferでsalineと4%パラホルムアルデヒド(paraformaldehyde)で経心灌流(transcardially perfusion)させた。脳を摘出し、24時間パラホルムアルデヒドで固定した後、3日間30%スクロース(sucrose)溶液で抗凍結(cryoprotect)した。次に、Tissue-Tek(日本,東京,Sakura Finetechnical)に挿入して液体窒素で急速凍結した。次に、一連のcoronal section(30μm厚さ)をクライオスタット(cryostat)で切断し、染色のためにさらに処理した。
二重免疫蛍光(double immunofluorescence)を行うため、組織切片を1時間0.01M PBSで10% normal goat serumとともにインキュベーションした後、4℃で一晩ネオゲニン(1:200;コロラド州、リトルトン、Novus Biologics)及びGFAP(1:400;カリフォルニア、テメキュラ、Chemicon Internation,Inc.)抗体とインキュベーションした。翌日、組織切片を室温で2時間、Alexa Fluor 488-conjugated anti-rabbit IgG(1:300;カリフォルニア、カールスバッド,Invitrogen)及びCy3-conjugated anti-mouse IgG(1:500;ペンシルベニア、ウエストグローブ,Jackson ImmunoResearch)とともにインキュベーションした。最後に、共焦点顕微鏡(confocal microscope)(LSM 700;ドイツ,イェーナ,Carl Zeiss,Co.,Ltd.)に組織切片を取り付けて観察した。
組織学的評価のため、組織をスライドの上に載置し、100%、95%、90%、80%、及び70%エタノールとtap waterでそれぞれ3分ずつ再水和した後、15分間0.1%クレシルバイオレット(cresyl violet staining)溶液(catalog no.C5042;ミズーリ,セントルイス、Sigma-Aldrich)でインキュベーションした。過度な染色は、95%エタノールと0.1%氷酢酸(glacial acetic acid)で除去した後、スライドは、100%エタノール、50%エタノール/キシレン(xylene)及び100%キシレンの溶液で脱水した。組織切片をDPX mountant(catalog no.06522;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)で取り付け、upright microscope(BX51;日本,東京,Olympus Corp.)で視覚化した。
実施例6.免疫細胞化学(Immunocytochemistry)
海馬ニューロンを10分間-20℃でメタノール(methanol)で固定し、5分間0.3%Triton X-100を細胞に透過させた後、1.5時間PBSで10%bovine serum albuminでブロッキング(blocking)した。次に、0.2%bovine serum albuminで補充された溶液でmouse anti-MAP2(catalog no.M9942;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)またはanti-GFAP(マサチューセッツ,バーリントン,Millipore)及びrabbit anti-neogen(テキサス,ダラス,Santa Cruz Biotechnology,Inc.)抗体(1:100希釈)とともに一晩4℃でインキュベーションした。PBSで洗浄した後、細胞をAlexa Fluor 488-conjugated anti-rabbit IgG(Invitrogen)及びAlexa Fluor 555-conjugated anti-mouse IgG(Invitrogen)とともに室温で1.5時間インキュベーションした。PBSで洗浄した後、細胞核をDAPIで対比染色(counterstain)した。次に、カバースリップ(coverslip)をVectashield mounting medium(カリフォルニア,バーリンゲーム,Vector Laboratories,Inc.)のあるスライドに取り付けた。Alexa Fluor 488(励起、488nm;放出、>519nm)及びAlexa Fluor 555(励起、555nm;放出、>565nm)で標識されたニューロンを共焦点顕微鏡(LSM 700;Carl Zeiss,Co.,Ltd.)で観察した。
海馬ニューロンを10分間-20℃でメタノール(methanol)で固定し、5分間0.3%Triton X-100を細胞に透過させた後、1.5時間PBSで10%bovine serum albuminでブロッキング(blocking)した。次に、0.2%bovine serum albuminで補充された溶液でmouse anti-MAP2(catalog no.M9942;ミズーリ,セントルイス,Sigma-Aldrich)またはanti-GFAP(マサチューセッツ,バーリントン,Millipore)及びrabbit anti-neogen(テキサス,ダラス,Santa Cruz Biotechnology,Inc.)抗体(1:100希釈)とともに一晩4℃でインキュベーションした。PBSで洗浄した後、細胞をAlexa Fluor 488-conjugated anti-rabbit IgG(Invitrogen)及びAlexa Fluor 555-conjugated anti-mouse IgG(Invitrogen)とともに室温で1.5時間インキュベーションした。PBSで洗浄した後、細胞核をDAPIで対比染色(counterstain)した。次に、カバースリップ(coverslip)をVectashield mounting medium(カリフォルニア,バーリンゲーム,Vector Laboratories,Inc.)のあるスライドに取り付けた。Alexa Fluor 488(励起、488nm;放出、>519nm)及びAlexa Fluor 555(励起、555nm;放出、>565nm)で標識されたニューロンを共焦点顕微鏡(LSM 700;Carl Zeiss,Co.,Ltd.)で観察した。
実施例7.ウェスタンブロット
脳組織を冷却した(chilled)ProEXTMCETi lysis buffer(大韓民国,大田,TransLab Biosciences)で溶解した。溶解物を遠心分離により精製してタンパク質を抽出するために上清液を収集した。各サンプルから同量(30~40μg)のタンパク質を8%SDS-polyacrylamide gelから分離し、ポリビニリデンジフルオリド膜(polyvinylidene difluoride membrane)に移した。次に、膜を室温で1時間、0.1%Tween-20を含むTris-buffered salineで3%bovine serum albuminでブロッキング(blocking)した後、anti-neogenin(1:2,000;Novus Biolocicals)、anti-MLKL(mixed lineage kinase domain-like pseudokinase)(1:1,000;マサチューセッツ,ダンバース,Cell Signaling Technology)、及びanti-pMLKL(phosphorylated MLKL)(1:1,000;Cell Signaling Technology)抗体とともに4℃で一晩中インキュベーションした。次に、膜を1時間室温でhorseradish peroxidase-conjugated secondary anti-rabbitまたはanti-mouse抗体(1:2,000;Novus Biologicals)とともに1時間インキュベーションした。enhanced chemiluminescence detection kit(大韓民国,大田,Elpis Biotech,Inc.)を使用してバンドを検出した後、積載対照群(loading control)でmouse monoclonal anti-β(1:2,000;Santa Cruz Biotechnology,Inc.)またはanti-α tubulin antibody(1:2,000;Santa Cruz Biotechnology,Inc.)を使用してブロットを再探索(reprobe)した。バンド免疫反応性の相対的定量化は、ImageQuant LAS 4000(日本,東京,Fujifilm)を使用して濃度計分析により行われた。
脳組織を冷却した(chilled)ProEXTMCETi lysis buffer(大韓民国,大田,TransLab Biosciences)で溶解した。溶解物を遠心分離により精製してタンパク質を抽出するために上清液を収集した。各サンプルから同量(30~40μg)のタンパク質を8%SDS-polyacrylamide gelから分離し、ポリビニリデンジフルオリド膜(polyvinylidene difluoride membrane)に移した。次に、膜を室温で1時間、0.1%Tween-20を含むTris-buffered salineで3%bovine serum albuminでブロッキング(blocking)した後、anti-neogenin(1:2,000;Novus Biolocicals)、anti-MLKL(mixed lineage kinase domain-like pseudokinase)(1:1,000;マサチューセッツ,ダンバース,Cell Signaling Technology)、及びanti-pMLKL(phosphorylated MLKL)(1:1,000;Cell Signaling Technology)抗体とともに4℃で一晩中インキュベーションした。次に、膜を1時間室温でhorseradish peroxidase-conjugated secondary anti-rabbitまたはanti-mouse抗体(1:2,000;Novus Biologicals)とともに1時間インキュベーションした。enhanced chemiluminescence detection kit(大韓民国,大田,Elpis Biotech,Inc.)を使用してバンドを検出した後、積載対照群(loading control)でmouse monoclonal anti-β(1:2,000;Santa Cruz Biotechnology,Inc.)またはanti-α tubulin antibody(1:2,000;Santa Cruz Biotechnology,Inc.)を使用してブロットを再探索(reprobe)した。バンド免疫反応性の相対的定量化は、ImageQuant LAS 4000(日本,東京,Fujifilm)を使用して濃度計分析により行われた。
実施例8.統計分析
すべてのデータは、平均±SEMで表記した。すべての統計分析は、Prism 9(カリフォルニア,ラホヤ,GraphPad Software,Inc.)を使用して行った。in vivoウェスタンブロット分析のため、ROUT test(Q=1%)に基づいてoutlierを除去した後、Kolmogorov-SmirnovまたはShapiro-Wilk normality testを行った。正規性検定(normality test)を通過できなかった(切断された形態のネオゲニン)データセットの場合、Kruskal-Wallis test後にDunn’s post hoc testを行った。正規性検定を通過したデータセットの場合、同じSDs(standard deviations)のassumptionに従ってone-way(MLKL及びpMLKL)またはBrown-Forsythe(全長ネオゲニン)ANOVAを行った後、Benjamini,Krieger,及びYekutieliのpost hoc two-stage step-up方法を行った。In vitro実験の場合、統計分析は、単一比較にはStudent’s t-testまたは複数の統計的比較にはBonferroni post-testを用いたone-way ANOVAを使用して行った。p-value<0.05の場合、統計的に有意性があるとみなした。
すべてのデータは、平均±SEMで表記した。すべての統計分析は、Prism 9(カリフォルニア,ラホヤ,GraphPad Software,Inc.)を使用して行った。in vivoウェスタンブロット分析のため、ROUT test(Q=1%)に基づいてoutlierを除去した後、Kolmogorov-SmirnovまたはShapiro-Wilk normality testを行った。正規性検定(normality test)を通過できなかった(切断された形態のネオゲニン)データセットの場合、Kruskal-Wallis test後にDunn’s post hoc testを行った。正規性検定を通過したデータセットの場合、同じSDs(standard deviations)のassumptionに従ってone-way(MLKL及びpMLKL)またはBrown-Forsythe(全長ネオゲニン)ANOVAを行った後、Benjamini,Krieger,及びYekutieliのpost hoc two-stage step-up方法を行った。In vitro実験の場合、統計分析は、単一比較にはStudent’s t-testまたは複数の統計的比較にはBonferroni post-testを用いたone-way ANOVAを使用して行った。p-value<0.05の場合、統計的に有意性があるとみなした。
[実験例]
実験例1.ピロカルピン誘導SE発生後の海馬においてネオゲニンの発現
ピロカルピンによる急性発作後、海馬においてネオゲニンの発現を確認した。二重免疫蛍光の結果、図1aに示すように、sham群の海馬においてニューロン及びGFAP-陽性星状膠細胞(astrocyte)細胞の両方においてネオゲニン免疫反応性を示し、これはピロカルピン投与後、最大7日まで持続した。ウェスタンブロットの結果、図1b及び1cに示すように、ピロカルピン投与後、3日目に全長(full-length)ネオゲニンのレベルが減少したことが示され、これはsham群のレベルと比較したとき、7日後に回復したことが確認できた。一方、ピロカルピン誘導SE発生後、3日及び7日目に切断された形態のネオゲニンのレベルで著しく上昇を示したが、これはsham群では明らかではなかった。前記結果は、ピロカルピンによって誘導された急性発作が海馬でネオゲニンの切断を誘発させることを示す。
実験例1.ピロカルピン誘導SE発生後の海馬においてネオゲニンの発現
ピロカルピンによる急性発作後、海馬においてネオゲニンの発現を確認した。二重免疫蛍光の結果、図1aに示すように、sham群の海馬においてニューロン及びGFAP-陽性星状膠細胞(astrocyte)細胞の両方においてネオゲニン免疫反応性を示し、これはピロカルピン投与後、最大7日まで持続した。ウェスタンブロットの結果、図1b及び1cに示すように、ピロカルピン投与後、3日目に全長(full-length)ネオゲニンのレベルが減少したことが示され、これはsham群のレベルと比較したとき、7日後に回復したことが確認できた。一方、ピロカルピン誘導SE発生後、3日及び7日目に切断された形態のネオゲニンのレベルで著しく上昇を示したが、これはsham群では明らかではなかった。前記結果は、ピロカルピンによって誘導された急性発作が海馬でネオゲニンの切断を誘発させることを示す。
実験例2.in vitro発作モデルで培養した海馬細胞におけるネオゲニンの発現
in vitroで発作モデルを作製するため、SEモデルの作製に一般的に使用される(BeN-Ari Y,1985;Nadler JV,1979)カイニン酸(kainic acid)を培養したラット海馬細胞に24時間150μMで処理した。150μMカイニン酸またはビヒクル(対照群)で24時間処理した後、図2a及び図2bに示すように、共焦点顕微鏡でニューロンにおけるネオゲニン及びMAP2発現、及び星状膠細胞におけるネオゲニン及びGFAP発現を視覚化した。図2b及び図2dに示すように、カイニン酸の処理は、ニューロンと星状膠細胞の両方においてネオゲニンの発現を有意に減少させた(P<0.05 vs 対照群)。また、カイニン酸は、MAP2の発現は有意に減少させたが(P<0.01 vs 対照群)、GFAPの発現は増加させており(P<0.05 vs 対照群)、これは反応性星状膠細胞の誘導を示す。以上の結果から、in vitro発作モデルにおいてニューロンと星状膠細胞の両方でネオゲニンの発現が減少したことが確認できた。
in vitroで発作モデルを作製するため、SEモデルの作製に一般的に使用される(BeN-Ari Y,1985;Nadler JV,1979)カイニン酸(kainic acid)を培養したラット海馬細胞に24時間150μMで処理した。150μMカイニン酸またはビヒクル(対照群)で24時間処理した後、図2a及び図2bに示すように、共焦点顕微鏡でニューロンにおけるネオゲニン及びMAP2発現、及び星状膠細胞におけるネオゲニン及びGFAP発現を視覚化した。図2b及び図2dに示すように、カイニン酸の処理は、ニューロンと星状膠細胞の両方においてネオゲニンの発現を有意に減少させた(P<0.05 vs 対照群)。また、カイニン酸は、MAP2の発現は有意に減少させたが(P<0.01 vs 対照群)、GFAPの発現は増加させており(P<0.05 vs 対照群)、これは反応性星状膠細胞の誘導を示す。以上の結果から、in vitro発作モデルにおいてニューロンと星状膠細胞の両方でネオゲニンの発現が減少したことが確認できた。
実験例3.ピロカルピン誘導SE発生後の海馬損傷及びネクロトーシス(necroptosis)
SE発生に誘導された海馬の損傷を確認するため、クレシルバイオレット染色(cresyl violet staining)を行った。その結果、図3aに示すように、対照群(sham群)の海馬は、CA3ピラミッド細胞層(pyramidal cell layer)及び歯状回門(hilus of dentate gyrus)で完全な形態の細胞を示した。しかし、ピロカルピンによって誘導されたSE発生後、3日目にCA3ピラミッド細胞層(pyramidal cell layer)及び歯状回門(hilus of dentate gyrus)において核濃縮細胞(pyknotic cell)が観察され、7日目にピラミッド細胞(pyramidal cell)及び歯状回細胞(dentate hilar cell)の両方において、図1b及び図1cに示した切断されたネオゲニンの増加に対応する明確な核濃縮形態(pyknotic morphology)が観察された。SEによって誘導されたアポトーシスのタイプを評価するため、ネクロトーシスの重要な分子マーカーであるpMLKLに対してウェスタンブロットを行った。その結果、図3b及び図3cに示すように、sham群と比較して海馬においてpMLKL発現は、ピロカルピンにより誘導されたSE発生後、3日目に増加したが、急性発作後、7日目に対照群レベルに減少した。前記結果は、SE発生後、3日以内に海馬ネクロトーシスが誘導されることを意味する。
SE発生に誘導された海馬の損傷を確認するため、クレシルバイオレット染色(cresyl violet staining)を行った。その結果、図3aに示すように、対照群(sham群)の海馬は、CA3ピラミッド細胞層(pyramidal cell layer)及び歯状回門(hilus of dentate gyrus)で完全な形態の細胞を示した。しかし、ピロカルピンによって誘導されたSE発生後、3日目にCA3ピラミッド細胞層(pyramidal cell layer)及び歯状回門(hilus of dentate gyrus)において核濃縮細胞(pyknotic cell)が観察され、7日目にピラミッド細胞(pyramidal cell)及び歯状回細胞(dentate hilar cell)の両方において、図1b及び図1cに示した切断されたネオゲニンの増加に対応する明確な核濃縮形態(pyknotic morphology)が観察された。SEによって誘導されたアポトーシスのタイプを評価するため、ネクロトーシスの重要な分子マーカーであるpMLKLに対してウェスタンブロットを行った。その結果、図3b及び図3cに示すように、sham群と比較して海馬においてpMLKL発現は、ピロカルピンにより誘導されたSE発生後、3日目に増加したが、急性発作後、7日目に対照群レベルに減少した。前記結果は、SE発生後、3日以内に海馬ネクロトーシスが誘導されることを意味する。
実験例4.ネオゲニン切断の抑制がニューロンの生存に及ぼす影響
興奮毒性(excitotoxicity)がネオゲニンの発現に同様に影響を及ぼすかを確認するため、培養された海馬ニューロンに100μM NMDAを処理した。共焦点顕微鏡で観察した結果、図4aに示すように、NMDAは、MAP2-陽性ラット海馬ニューロンにおいてネオゲニンの発現を有意に減少させることが示された(P<0.05 vs 対照群)。特に、図4bに示すように、このようなネオゲニン発現の減少は、ネオゲニン切断抑制剤であるDAPT 1μMを24時間細胞に処理することにより改善されたことが確認できた(P<0.05 vs 対照群)。このような効果が神経保護効果があるかどうかを確認するため、MTT分析を行った。その結果、図4bに示すように、NMDAは、海馬ニューロンの死を誘導するのに対し、1μM DAPT処理は、細胞生存を有意に改善した(P<0.01 vs 対照群)。前記結果は、海馬ニューロンがネオゲニンの切断を抑制することにより、NMDAによって誘導される神経毒性から保護できることを意味する。
興奮毒性(excitotoxicity)がネオゲニンの発現に同様に影響を及ぼすかを確認するため、培養された海馬ニューロンに100μM NMDAを処理した。共焦点顕微鏡で観察した結果、図4aに示すように、NMDAは、MAP2-陽性ラット海馬ニューロンにおいてネオゲニンの発現を有意に減少させることが示された(P<0.05 vs 対照群)。特に、図4bに示すように、このようなネオゲニン発現の減少は、ネオゲニン切断抑制剤であるDAPT 1μMを24時間細胞に処理することにより改善されたことが確認できた(P<0.05 vs 対照群)。このような効果が神経保護効果があるかどうかを確認するため、MTT分析を行った。その結果、図4bに示すように、NMDAは、海馬ニューロンの死を誘導するのに対し、1μM DAPT処理は、細胞生存を有意に改善した(P<0.01 vs 対照群)。前記結果は、海馬ニューロンがネオゲニンの切断を抑制することにより、NMDAによって誘導される神経毒性から保護できることを意味する。
さらに、DAPT1がネクロトーシスを抑制できるかどうかを確認するため、ウェスタンブロットでpMLKLの発現程度を比較した結果、図4cに示すように、DAPT1処理でNMDAによって誘導されたネクロトーシスが減少したことが確認できた。
前述したように、てんかんによる急性発作によって海馬で損傷が誘発された場合、全長ネオゲニンのレベルは減少するのに対し、切断された形態のネオゲニンのレベルは、増加することが示された。また、ネオゲニン切断抑制剤を処理した場合、ネクロトーシスマーカーであるpMLKLの発現が減少することが示されており、これを通じてネオゲニン切断抑制剤をてんかんによる脳損傷の予防、改善または治療物質の有効成分として使用できることが確認された。
前述した本発明の説明は例示のためのものであり、本発明が属する技術分野の通常の知識を有する者は、本発明の技術的思想や必須的な特徴を変更することなく他の具体的な形態に容易に変形が可能であることが理解できるだろう。したがって、前述した実施例はすべての点で例示的なものであり、限定的なものではないと理解すべきである。
本発明は、てんかんによって誘発された脳損傷を診断するためのネオゲニンの用途に関し、本発明による診断用組成物を用いて脳損傷を早期に迅速かつ正確に診断及び予測できる効果があり、さらにてんかんによって誘発された脳損傷治療剤の開発のための標的として活用できる。また、γ―セクレターゼ抑制剤であるDAPTは、てんかん発作によって誘発される切断されたネオゲニンの産生とネクロトーシス(necroptosis)を効果的に抑制するので、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用薬学的組成物の有効成分として有用に使用でき、産業上利用可能性がある。
Claims (20)
- 切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷診断用組成物。
- 前記切断されたネオゲニンは、てんかんによって誘発された脳損傷の発生時にレベルが増加することを特徴とする、請求項1に記載の診断用組成物。
- 前記てんかんは、てんかん重積状態(status epilepticus;SE)であることを特徴とする、請求項1に記載の診断用組成物。
- 前記切断されたネオゲニンのレベルを測定できる製剤は、前記切断されたネオゲニンに特異的な抗体またはアプタマーであることを特徴とする、請求項1に記載の診断用組成物。
- てんかん患者群を対象とするてんかんによって誘発された脳損傷診断のための組成物であって、
前記組成物は、切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定できる製剤を有効成分として含むことを特徴とする、てんかんによって誘発された脳損傷診断のための組成物。 - 請求項1~5のいずれか一項に記載の組成物を有効成分として含む、てんかんによって誘発された脳損傷診断用キット。
- 被検体から分離された生物学的試料において切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷診断に必要な情報を提供する方法。
- 前記被験体は、ヒトを含む哺乳類であることを特徴とする、請求項7に記載の方法。
- 前記生物学的試料は、海馬由来試料であることを特徴とする、請求項7に記載の方法。
- 前記方法は、測定した前記切断されたネオゲニンのレベルが対照群の切断されたネオゲニンのレベルと比較して増加した場合、てんかんによって誘発された脳損傷であると判定する段階をさらに含むことを特徴とする、請求項7に記載の方法。
- 前記対照群は、正常人またはてんかん重積状態(status epilepticus;SE)を伴わないてんかん患者から分離された生物学的試料であることを特徴とする、請求項10に記載の方法。
- 前記切断されたネオゲニンのレベルは、ウェスタンブロット、ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)、放射免疫分析(RIA:radioimmunoassay)、放射免疫拡散法(radioimmunodiffusion)及び免疫沈降分析法(immunoprecipitation assay)からなる群から選ばれる1つ以上の方法で測定されることを特徴とする、請求項7に記載の方法。
- (a)てんかん重積状態(status epilepticus;SE)患者から分離された生物学的試料に候補物質を処理する段階、
(b)前記試料の切断されたネオゲニン(truncated neogenin)のレベルを測定する段階、及び
c)候補物質非処理群に比べて切断されたネオゲニンのレベルを減少させる場合、前記物質は、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質であると判定する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用物質をスクリーニングする方法。 - 前記試料は、海馬由来試料であることを特徴とする、請求項13に記載のスクリーニングする方法。
- 前記(b)段階の測定は、ウェスタンブロット、ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)、放射免疫分析(RIA:radioimmunoassay)、放射免疫拡散法(radioimmunodiffusion)及び免疫沈降分析法(immunoprecipitation assay)からなる群から選ばれることを特徴とする、請求項13に記載のスクリーニングする方法。
- ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含むてんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用薬学的組成物。
- 前記抑制剤は、DAPT(N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycinet-butyl ester)であることを特徴とする、請求項16に記載の薬学的組成物。
- ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含む組成物を、これを必要とする個体に投与する段階を含む、てんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療方法。
- ネオゲニン(neogenin)切断抑制剤を有効成分として含む組成物のてんかんによって誘発された脳損傷の予防または治療用途。
- てんかんによって誘発された脳損傷治療用薬剤を製造するためのネオゲニン(neogenin)切断抑制剤の用途。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020210050037A KR20220143474A (ko) | 2021-04-16 | 2021-04-16 | 뇌전증에 의해 유발된 뇌 손상 진단용 마커로서의 네오제닌의 용도 |
KR10-2021-0050037 | 2021-04-16 | ||
PCT/KR2022/003085 WO2022220403A1 (ko) | 2021-04-16 | 2022-03-04 | 뇌전증에 의해 유발된 뇌손상 진단용 마커로서의 네오제닌의 용도 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2024517617A true JP2024517617A (ja) | 2024-04-23 |
Family
ID=83640439
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023563085A Pending JP2024517617A (ja) | 2021-04-16 | 2022-03-04 | てんかんによって誘発された脳損傷診断用マーカーとしてのネオゲニンの用途 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2024517617A (ja) |
KR (1) | KR20220143474A (ja) |
WO (1) | WO2022220403A1 (ja) |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20040102525A1 (en) * | 2002-05-22 | 2004-05-27 | Kozachuk Walter E. | Compositions and methods of treating neurological disease and providing neuroprotection |
KR20110006545A (ko) * | 2009-07-14 | 2011-01-20 | 경상대학교산학협력단 | 모체 간질에 의한 태아의 신경기능장애 질환의 진단방법 및 이의 치료제의 스크리닝 방법 |
KR101547307B1 (ko) | 2013-09-03 | 2015-08-25 | 한국과학기술원 | 뇌전증 진단용 바이오마커 |
-
2021
- 2021-04-16 KR KR1020210050037A patent/KR20220143474A/ko not_active Application Discontinuation
-
2022
- 2022-03-04 JP JP2023563085A patent/JP2024517617A/ja active Pending
- 2022-03-04 WO PCT/KR2022/003085 patent/WO2022220403A1/ko active Application Filing
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2022220403A1 (ko) | 2022-10-20 |
KR20220143474A (ko) | 2022-10-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Magga et al. | Human intravenous immunoglobulin provides protection against Aβ toxicity by multiple mechanisms in a mouse model of Alzheimer's disease | |
US10240156B2 (en) | Modulation of synaptic maintenance | |
US20180318383A1 (en) | Peptide having neuronal loss prevention and regeneration effects, and composition containing same | |
Hu et al. | Transient receptor potential melastatin 2 contributes to neuroinflammation and negatively regulates cognitive outcomes in a pilocarpine-induced mouse model of epilepsy | |
JP2000507828A (ja) | アルツハイマー病の診断および治療法 | |
JP2022514526A (ja) | 神経保護剤と組み合わせたsarm1の阻害剤 | |
JPWO2013129220A1 (ja) | ペプチドを含む医薬または食品 | |
Di Spiezio et al. | Analysis of cathepsin B and cathepsin L treatment to clear toxic lysosomal protein aggregates in neuronal ceroid lipofuscinosis | |
Xu et al. | The protective effect of safinamide in ischemic stroke mice and a brain endothelial cell line | |
TWI814760B (zh) | 脂質運載蛋白型前列腺素d2合成酵素產生促進劑 | |
US20230365626A1 (en) | Alloferon Peptide and Method Using the Same | |
JP2024517617A (ja) | てんかんによって誘発された脳損傷診断用マーカーとしてのネオゲニンの用途 | |
CA3190919C (en) | Peptide composition for prevention or treatment of alzheimer's disease | |
WO2023034115A1 (en) | Fenfluramine for treatment of demyelinating diseases and conditions | |
JP7249433B2 (ja) | 蜂毒抽出物を有効成分として含有する神経炎症疾患の予防または治療用組成物 | |
US11229675B2 (en) | Therapeutic peptides for excitatory neurotoxicity-related injuries | |
JPWO2008143151A1 (ja) | サリューシンをターゲットとする動脈硬化性疾患の治療剤及び検出薬 | |
Tang et al. | Neuronal pyroptosis mediated by STAT3 in early brain injury after subarachnoid hemorrhage | |
Lobanovskaya | The role of PSA-NCAM in the survival of retinal ganglion cells | |
WO2010058517A1 (ja) | IgGおよび/またはIgGのFc断片を含む神経細胞刺激剤 | |
KR101448155B1 (ko) | 3-메틸아데닌을 유효성분으로 함유하는 신경병증성 통증의 억제 또는 치료용 조성물 | |
RU2816119C1 (ru) | Пептидная композиция для профилактики или лечения болезни альцгеймера | |
JP2013503117A (ja) | 神経障害または神経変性障害の処置 | |
Gao et al. | Astrocyte-derived hepcidin aggravates neuronal iron accumulation after subarachnoid hemorrhage by decreasing neuronal ferroportin1 | |
Sharifulina et al. | Amyloid Precursor Protein, Alpha-, Beta-and Gamma-Secretases Expression in Penumbra Cells after Photothrombotic Stroke. Evaluation of the Neuroprotective Effect of Secretase Inhibitors |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20231211 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231211 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20231211 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20231211 |