JP2024514974A

JP2024514974A - Ａｄｇｒｅ２及び／またはｃｌｅｃ１２ａを標的とするキメラ受容体及びその使用

Info

Publication number: JP2024514974A
Application number: JP2023565502A
Authority: JP
Inventors: ミチェルサデライン，; サシャピー．ハウブナー，; ジョージマンシラ－ソト，; ゲイリーシャピロ，; シンユエヘ，
Original assignee: Millennium Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Millennium Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2021-04-26
Filing date: 2022-04-25
Publication date: 2024-04-03
Also published as: MX2023012681A; KR20240005720A; IL306141A; WO2022232016A2; AU2022267219A1; EP4330275A2; BR112023022297A2; WO2022232016A3; ECSP23081501A; CO2023015212A2; CL2023003185A1; TW202305004A; US20220363775A1; CA3212596A1

Abstract

本開示の主題は、ＡＤＧＲＥ２を標的とするキメラ受容体及びＣＬＥＣ１２Ａを標的とするキメラ受容体を提供する。本開示の主題はまた、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体を含む細胞、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体を含む細胞、及びＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体とＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体とを含む細胞を提供する。本開示の主題は、腫瘍、例えば、ＡＭＬを治療するためのそのような細胞の使用をさらに提供する。【選択図】図１Ａ

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年４月２６日に出願された米国仮特許出願第６３／１７９，７９９号、及び２０２１年１２月９日に出願された米国仮特許出願第６３／２８７，６５５号に対する優先権を主張するものであり、これらの各米国仮特許出願の内容全体を参照により援用し、これらの各米国仮特許出願に対して優先権を主張する。

配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照することにより本明細書に組み込まれる。上記のＡＳＣＩＩコピーは、２０２２年４月２１日に作成され、０８７１０８＿０１１０＿ＳＬ．ｔｘｔという名前を付けられ、サイズが１５０，７６２バイトである。

１．導入
本開示の主題は、免疫療法のための方法及び組成物を提供する。本開示の主題は、ＡＤＧＲＥ２を標的とするキメラ受容体、及びＣＬＥＣ１２Ａを標的とするキメラ受容体、そのようなキメラ受容体を含む細胞、ならびに治療、例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の治療にそのような細胞を使用する方法に関する。

２．背景技術
細胞ベースの免疫療法は、がん治療のための治癒可能性を持つ療法である。Ｔ細胞などの免疫細胞は、選択された抗原に特異的なキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）と呼ばれる人工または合成の抗原受容体をコードする遺伝物質の導入によって、腫瘍抗原を標的とするように改変することができる。ＣＡＲを使用する標的Ｔ細胞療法は、近年、血液悪性腫瘍の治療において臨床的成果を挙げている。

再発性及び難治性の急性骨髄性白血病（Ｒ／ＲＡＭＬ）の予後は非常に不良である。唯一の治療の選択肢は同種造血幹細胞移植であるが、これは、治療の失敗ならびに治療に関連する重大な毒性及び死亡率を伴うことが多い。したがって、Ｒ／ＲＡＭＬには新しい治療アプローチが切実に必要とされている。過去数年にわたり、ＣＤ１９を標的とするキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するように遺伝子改変された自己Ｔ細胞は、Ｒ／ＲＢ細胞血液悪性腫瘍患者の治療に革命をもたらして転帰を改善し、Ｒ／Ｒ急性リンパ芽球性白血病及び／または特定のＢ細胞非ホジキンリンパ腫に対する３つのＣＤ１９ＣＡＲ（チサゲンレクロイセル、アキシカブタゲンシロロイセル、及びブレクスカブタゲンオートロイセル）のＦＤＡによる承認につながっている。ＡＭＬの場合、ＣＡＲＴ細胞療法の臨床研究はまだ初期段階にあり、主にＣＤ３３及びＣＤ１２３ＣＡＲＴ細胞を用いた臨床結果は、正常造血におけるＣＤ３３及びＣＤ１２３の大量発現、ならびにＡＭＬ腫瘍細胞における表現型の異質性によるものである、安全性及び有効性の両方の面での課題を示唆する。したがって、現在臨床研究中の代替ＣＡＲ療法と比較して、改善された安全性及び有効性を提供する可能性のある、Ｒ／ＲＡＭＬのための新規な組み合わせのＣＡＲフォーマットが必要とされている。

３．発明の概要
本開示の主題は、ＡＤＧＲＥ２を標的とするキメラ受容体、及びＣＬＥＣ１２Ａを標的とするキメラ受容体、そのようなキメラ受容体を含む細胞、ならびに治療、例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の治療にそのような細胞を使用する方法を提供する。

一態様では、本開示の主題は、ＡＤＧＲＥ２を標的とするキメラ受容体を提供する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体は、ＡＤＧＲＥ２に結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内ドメインを含む。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、ａ）配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変体を含むＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／またはｂ）配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。

ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、またはＦ（ａｂ）_２を含む。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖを含む。ある実施形態では、ｓｃＦｖはヒト化ｓｃＦｖである。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、または配列番号１４６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４６、または配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、または配列番号１４７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４７、または配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、または配列番号５５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、または配列番号５６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４６、または配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４７、または配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、
ａ）重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）重鎖可変領域は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）重鎖可変領域は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を含む、
ｄ）重鎖可変領域は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含む、
ｅ）重鎖可変領域は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号５３で表されるアミノ酸配列を含む、
ｆ）重鎖可変領域は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号５６で表されるアミノ酸配列を含む、または
ｇ）重鎖可変領域は、配列番号１４６で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１４７で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、
ａ）重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）重鎖可変領域は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）重鎖可変領域は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を含む、または
ｄ）重鎖可変領域は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間にリンカーを含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、または配列番号１４９で表されるアミノ酸配列からなる。

ある実施形態では、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、Ｎ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号４１、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号４１、配列番号４５、配列番号４８、または配列番号５１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号４１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。

ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、約１０^－８Ｍ未満、約１０^－９Ｍ未満、約１０^－１０Ｍ未満、約１０^－１１Ｍ未満、約１０^－１２Ｍ未満、または約１０^－１３Ｍ未満の解離定数（Ｋ_Ｄ）でＡＤＧＲＥ２に結合する。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、約１～約１００ｎＭの間のＥＣ５０でＡＤＧＲＥ２に結合する。ある実施形態では、ＥＣ５０は約１０～約９５ｎＭである。ある実施形態では、ＥＣ５０は約２５～約７５ｎＭである。

ある実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド、ＣＤ２８ポリペプチド、ＣＤ３ζポリペプチド、ＣＤ４ポリペプチド、４－１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＣＴＬＡ－４ポリペプチド、ＰＤ－１ポリペプチド、ＬＡＧ－３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、またはＢＴＬＡポリペプチドを含む。ある実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８ポリペプチドを含む。

ある実施形態では、細胞内ドメインは、ＣＤ３ζポリペプチドを含む。ある実施形態では、ＣＤ３ζポリペプチドは、改変ＣＤ３ζポリペプチドである。ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、天然ＩＴＡＭ１、２つの機能喪失変異からなるＩＴＡＭ２変異体、及び２つの機能喪失変異からなるＩＴＡＭ３変異体を含む。ある実施形態では、天然ＩＴＡＭ１は、配列番号１５で表されるアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＩＴＡＭ２変異体は、配列番号２１で表されるアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＩＴＡＭ３変異体は、配列番号２５で表されるアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、配列番号２７で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。

ある実施形態では、細胞内ドメインは、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域をさらに含む。ある実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチド、４－１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ－１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを含む。ある実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチドを含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）、またはＴＣＲ様融合分子である。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体はＣＡＲである。

一態様では、本開示の主題は、ＣＬＥＣ１２Ａを標的とするキメラ受容体を提供する。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、ＣＬＥＣ１２Ａに結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内ドメインを含む。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、
ｉ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｉ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｉｉ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｖ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉ）配列番号１０９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉｉ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉｉｉ）配列番号１２０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、あるいは
ｉｘ）配列番号１２９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変領域、及び／または
ｉ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｉ）配列番号８４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｉｉ）配列番号９２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｖ）配列番号９９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉ）配列番号１１０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉｉ）配列番号１１５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉｉｉ）配列番号１２３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、あるいは
ｉｘ）配列番号１３２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変領域、を含む。

ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、またはＦ（ａｂ）_２を含む。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含む。ある実施形態では、ｓｃＦｖはヒトｓｃＦｖである。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、
ａ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｂ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｃ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｄ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｅ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｆ）配列番号１０９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｇ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｈ）配列番号１２０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、または
ｉ）配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、
ａ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｂ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｃ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、または
ｄ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、軽鎖可変領域は、
ａ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｂ）配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｃ）配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｄ）配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｅ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｆ）配列番号１１０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｇ）配列番号１１５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｈ）配列番号１２３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、または
ｉ）配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む。

ある実施形態では、軽鎖可変領域は、
ａ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｂ）配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｃ）配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、または
ｄ）配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む。

ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、キメラ受容体は、
ａ）重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｂ）重鎖可変領域は、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｃ）重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｄ）重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｅ）重鎖可変領域は、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｆ）重鎖可変領域は、配列番号１０９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１１０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｇ）重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１１５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｈ）重鎖可変領域は、配列番号１２０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１２３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、または
ｉ）重鎖可変領域は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、を含む。

ある実施形態では、
ａ）重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｂ）重鎖可変領域は、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｃ）重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、または
ｄ）重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号７５、配列番号８６、配列番号９５、配列番号１００、配列番号１０６、配列番号１１１、配列番号１１７、配列番号１２６、または配列番号１３５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号７５、配列番号８６、配列番号９５、配列番号１００、配列番号１０６、配列番号１１１、配列番号１１７、配列番号１２６、または配列番号１３５で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号７５、配列番号８６、配列番号９５、または配列番号１００で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号７６、配列番号８７、配列番号９６、配列番号１０１、配列番号１０７、配列番号１１２、配列番号１１８、配列番号１２７、または配列番号１３６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号７６、配列番号８７、配列番号９６、配列番号１０１、配列番号１０７、配列番号１１２、配列番号１１８、配列番号１２７、または配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号７６、配列番号８７、配列番号９６、または配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、
ａ）重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）重鎖可変領域は、配列番号８６で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号８７で表されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）重鎖可変領域は、配列番号９５で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号９６で表されるアミノ酸配列を含む、
ｄ）重鎖可変領域は、配列番号１００で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を含む、
ｅ）重鎖可変領域は、配列番号１０６で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１０７で表されるアミノ酸配列を含む、
ｆ）重鎖可変領域は、配列番号１１１で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１１２で表されるアミノ酸配列を含む、
ｇ）重鎖可変領域は、配列番号１１７で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１１８で表されるアミノ酸配列を含む、
ｈ）重鎖可変領域は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を含む、または
ｉ）重鎖可変領域は、配列番号１３５で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、キメラ受容体は、
ａ）重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）重鎖可変領域は、配列番号８６で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号８７で表されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）重鎖可変領域は、配列番号９５で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号９６で表されるアミノ酸配列を含む、または
ｄ）重鎖可変領域は、配列番号１００で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を含む、を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、Ｎ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号７９、配列番号８８、配列番号９７、配列番号１０２、配列番号１０８、配列番号１１３、配列番号１１９、配列番号１２８、または配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号７９、配列番号８８、配列番号９７、または配列番号１０２で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号７９で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。

ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、約１０^－８Ｍ未満、約１０^－９Ｍ未満、約１０^－１０Ｍ未満、約１０^－１１Ｍ未満、約１０^－１２Ｍ未満、または約１０^－１３Ｍ未満の解離定数（Ｋ_Ｄ）でのＣＬＥＣ１２Ａへの結合を含む。ある実施形態では、Ｋ_Ｄは約０．１ｐＭ以下である。ある実施形態では、Ｋ_Ｄは約０．０５ｐＭ～約０．５ｐＭの間である。ある実施形態では、Ｋ_Ｄは約０．１ｎＭ～約５．０ｎＭの間である。ある実施形態では、Ｋ_Ｄは約０．３ｎＭ～約３．５ｎＭの間である。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、約１ｎＭ～約１００ｎＭの間のＥＣ５０でＣＬＥＣ１２Ａに結合する。

ある実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド、ＣＤ２８ポリペプチド、ＣＤ３ζポリペプチド、ＣＤ４ポリペプチド、４－１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＣＴＬＡ－４ポリペプチド、ＰＤ－１ポリペプチド、ＬＡＧ－３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、またはＢＴＬＡポリペプチドを含む。ある実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチドを含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）、またはＴＣＲ様融合分子である。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）である。

ある実施形態では、細胞内ドメインは、ＣＤ３ζポリペプチドを含まない。ある実施形態では、細胞内ドメインは、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域を含む。ある実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチド、４－１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ－１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを含む。ある実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域は、４－１ＢＢポリペプチドを含む。

ある実施形態では、キメラ受容体はベクターから発現される。ある実施形態では、ベクターは、ウイルスベクターである。ある実施形態では、ウイルスベクターは、レトロウイルスベクターである。

本開示の主題は、本明細書に開示されるキメラ受容体を含む細胞をさらに提供する。ある実施形態では、細胞は、本明細書に開示されるＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体を含む。ある実施形態では、細胞は、本明細書に開示されるＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体を含む。ある実施形態では、細胞は、ａ）本明細書に開示されるＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体、及びｂ）本明細書に開示されるＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体を含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であり、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体はキメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）である。

ある実施形態では、ＣＡＲは、ＡＤＧＲＥ２に結合し、かつ
ａ）配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変領域、及び／または
ｂ）配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変領域、を含む細胞外抗原結合ドメインを含む。

ある実施形態では、重鎖可変領域は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、
ａ）重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含み、及び／または
ｂ）軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＣＲは、細胞外抗原結合ドメインを含み、この細胞外抗原結合ドメインは、ＣＬＥＣ１２Ａに結合し、
ａ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変領域、及び／または
ｂ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変領域、を含む。

ある実施形態では、
ａ）重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含み、及び／または
ｂ）軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、細胞は、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体及び／またはＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体を形質導入される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体及び／またはＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、細胞の表面上に構成的に発現される。ある実施形態では、細胞は、免疫応答性細胞である。ある実施形態では、細胞は、リンパ系の細胞または骨髄系の細胞である。ある実施形態では、細胞は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、リンパ系細胞が分化し得る幹細胞、及び骨髄系細胞が分化し得る幹細胞からなる群から選択される。ある実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。ある実施形態では、Ｔ細胞は、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、メモリーＴ細胞、制御性Ｔ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、ナチュラルキラーＴ細胞、粘膜関連インバリアントＴ細胞、及びγδ型Ｔ細胞からなる群から選択される。ある実施形態では、細胞は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。ある実施形態では、ＮＫ細胞は、幹細胞に由来する。ある実施形態では、幹細胞は、多能性幹細胞である。ある実施形態では、多能性幹細胞は、胚様幹細胞または人工多能性幹細胞である。

さらに、本開示の主題は、本明細書に開示されるキメラ受容体をコードする核酸分子を提供する。ある実施形態では、核酸分子は、本明細書に開示されるＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体をコードする。ある実施形態では、核酸分子は、本明細書に開示されるＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体をコードする。

ある実施形態では、核酸分子は、キメラ受容体に作動可能に連結されたプロモーターをさらに含む。ある実施形態では、プロモーターは、内因性または外因性である。ある実施形態では、外因性プロモーターは、伸長因子（ＥＦ）－１プロモーター、サイトメガロウイルス前初期プロモーター（ＣＭＶ）プロモーター、シミアンウイルス４０初期プロモーター（ＳＶ４０）プロモーター、ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）プロモーター、メタロチオネインプロモーター、及びユビキチンＣプロモーターからなる群から選択される。ある実施形態では、プロモーターは、誘導プロモーターである。ある実施形態では、誘導プロモーターは、ＮＦＡＴ転写応答エレメント（ＴＲＥ）プロモーター、ＣＤ６９プロモーター、ＣＤ２５プロモーター、ＩＬ－２プロモーター、４－１ＢＢプロモーター、ＰＤ１プロモーター、及びＬＡＧ３プロモーターからなる群から選択される。ある実施形態では、プロモーターは内因性プロモーターである。ある実施形態では、内因性プロモーターは、ＴＣＲアルファプロモーター、ＴＣＲベータプロモーター、及びベータ２－ミクログロブリンプロモーターから選択される。

本開示の主題は、本明細書に開示されるＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体をコードする第１の核酸分子、及び本明細書に開示されるＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体をコードする第２の核酸分子を含む核酸組成物も提供する。

本開示の主題は、本明細書に開示される核酸分子または本明細書に開示される核酸組成物を含むベクターも提供する。ある実施形態では、ベクターは、ウイルスベクターである。ある実施形態では、ベクターは、レトロウイルスベクターである。

本開示の主題は、本明細書に開示される核酸分子または本明細書に開示される核酸組成物を発現する細胞をさらに提供する。ある実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。

本開示の主題は、本明細書に開示される細胞を含む組成物を提供する。ある実施形態では、組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む薬学的組成物である。ある実施形態では、組成物は、約２５×１０^６～約１５０×１０^６個の細胞を含む。ある実施形態では、組成物は、約２５×１０^６～約５０×１０^６個の細胞を含む。ある実施形態では、組成物は、約２．５×１０^６個の細胞を含む。

本開示の主題は、さらに、本開示の細胞を使用する様々な方法を提供する。本開示の主題は、対象における腫瘍負荷を軽減する方法を提供する。ある実施形態では、この方法は、本明細書に開示される細胞または組成物を対象に投与することを含む。ある実施形態では、この方法は、対象における腫瘍細胞の数を減少させ、腫瘍サイズを減少させ、及び／または腫瘍を根絶する。

本開示の主題は、腫瘍を有する対象の生存期間を増やしまたは延ばす方法を提供する。ある実施形態では、この方法は、本明細書に開示される細胞または組成物を対象に投与することを含む。

本開示の主題は、対象における腫瘍を治療する及び／または予防する方法を提供する。ある実施形態では、この方法は、本明細書に開示される細胞または組成物を対象に投与することを含む。

ある実施形態では、腫瘍は、ＡＤＧＲＥ２及び／またはＣＬＥＣ１２Ａを発現する。ある実施形態では、腫瘍は、がんである。ある実施形態では、腫瘍は、血液癌である。ある実施形態では、腫瘍は、多発性骨髄腫、白血病、リンパ腫、及び骨髄性悪性腫瘍からなる群から選択される。ある実施形態では、白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）、混合表現型急性白血病（ＭＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、及びＢ細胞前リンパ球性白血病からなる群から選択される。ある実施形態では、白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。ある実施形態では、ＡＭＬは、再発性／難治性の急性骨髄性白血病（Ｒ／ＲＡＭＬ）である。ある実施形態では、骨髄性悪性腫瘍は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性新生物（ＭＰＮ）、骨髄／リンパ系新生物（例えば、好酸球増加及び血小板由来成長因子受容体アルファ（ＰＤＧＦＲＡ）、血小板由来成長因子受容体ベータ（ＰＤＧＦＲＢ）、もしくは線維芽細胞成長因子受容体１（ＦＧＦＲ１）の再構成、またはＰＣＭ１－ＪＡＫ２を伴う骨髄／リンパ系新生物）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫、及びＴリンパ芽球性白血病／リンパ腫からなる群から選択される。ある実施形態では、骨髄性悪性腫瘍は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を含む。ある実施形態では、対象は、ヒト対象である。

さらに、本開示の主題は、本明細書に開示されるキメラ受容体を含む細胞を作製する方法を提供する。ある実施形態では、この方法は、本明細書に開示されるキメラ受容体をコードする核酸分子を細胞に導入することを含む。

さらに、本開示の主題は、本明細書に開示されるＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体、及び本明細書に開示されるＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体を含む細胞を作製する方法を提供する。ある実施形態では、この方法は、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体をコードする核酸分子及び本明細書に開示されるＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体をコードする核酸分子を細胞に導入することを含む。

４．簡単な図面の説明
以下の発明を実施するための形態は、例として与えられるが、本発明を記載される特定の実施形態に限定することは意図されておらず、添付の図面と併せて理解することができる。

Ａ及びＢは、新鮮なＡＭＬ患者サンプル（末梢血または骨髄）のフローサイトメトリーによって評価された、ＡＤＧＲＥ２、ＣＤ３３、及びＣＤ１２３の標的抗原発現プロファイルを示す。ｎ＝１６の形態学的疾患を有するｒ／ｒ成人ＡＭＬ患者。標的発現を、バルクＡＭＬ細胞（ＣＤ４５_ｄｉｍ／ＳＳＣ_ｌｏｗゲート）と白血病幹細胞［ＬＳＣ；バルクＡＭＬ細胞ゲート内のＬｉｎ－ＣＤ３４＋ＣＤ３８－（ＣＤ４５ＲＡ＋）］との間で比較した。標的陽性のゲートは、同じサンプルの陰性対照集団（Ｔ細胞またはＢ細胞）に基づいて設定された。Ａは、各点で表される個々の患者サンプルのバルクまたはＬＳＣ集団内の標的陽性ＡＭＬ細胞の割合を示す。評価されたＡＭＬ患者の大多数では、バルクとＬＳＣの両方で、ＡＭＬ細胞の＞９０％がＡＤＧＲＥ２に対して陽性であった。Ｂは、７０％を超える標的陽性ＡＭＬ細胞を有する評価されたＡＭＬ患者集団の割合を示している。評価された全てのＡＭＬ患者は、バルク及びＬＳＣの両方で＞７０％のＡＤＧＲＥ２陽性ＡＭＬ細胞を持っていた。Ａ及びＢは、新鮮なＡＭＬ患者サンプル（末梢血または骨髄）のフローサイトメトリーによって評価された、ＡＤＧＲＥ２、ＣＤ３３、及びＣＤ１２３の標的抗原発現プロファイルを示す。ｎ＝１６の形態学的疾患を有するｒ／ｒ成人ＡＭＬ患者。標的発現を、バルクＡＭＬ細胞（ＣＤ４５_ｄｉｍ／ＳＳＣ_ｌｏｗゲート）と白血病幹細胞［ＬＳＣ；バルクＡＭＬ細胞ゲート内のＬｉｎ－ＣＤ３４＋ＣＤ３８－（ＣＤ４５ＲＡ＋）］との間で比較した。標的陽性のゲートは、同じサンプルの陰性対照集団（Ｔ細胞またはＢ細胞）に基づいて設定された。Ａは、各点で表される個々の患者サンプルのバルクまたはＬＳＣ集団内の標的陽性ＡＭＬ細胞の割合を示す。評価されたＡＭＬ患者の大多数では、バルクとＬＳＣの両方で、ＡＭＬ細胞の＞９０％がＡＤＧＲＥ２に対して陽性であった。Ｂは、７０％を超える標的陽性ＡＭＬ細胞を有する評価されたＡＭＬ患者集団の割合を示している。評価された全てのＡＭＬ患者は、バルク及びＬＳＣの両方で＞７０％のＡＤＧＲＥ２陽性ＡＭＬ細胞を持っていた。ＣＡＲ、ＣＣＲ、及びＣＡＲ＋ＣＣＲの概略図を示す。ＣＤ３３及びＣＤ１２３－ＣＡＲと比較して抗白血病効果が向上するＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１アプローチの理論的根拠を示す。ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ単独でもある程度の抗白血病活性は得られるが、ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗ回避機構により制限される可能性がある。ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲ単独では細胞溶解を媒介しない。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、低親和性ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲと高親和性ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲとを組み合わせることによって、ＡＭＬ指向の結合力を高め、ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗＡＭＬ回避のリスクを軽減する。さらに、４－１ＢＢを介したＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲ依存性のトランス共刺激は、Ｔ細胞の機能をさらに強化する。比較すると、単一標的のＣＤ３３－ＣＡＲまたはＣＤ１２３－ＣＡＲアプローチは、低抗原の回避と表現型の不均一性とにより有効性が制限される可能性がある（図１の標的プロファイルを参照）。Ａ～Ｃは、正常な造血組織及び非造血組織におけるＡＤＧＲＥ２、ＣＬＥＣ１２Ａ（ＣＤ３７１）、ＣＤ３３、及びＣＤ１２３のタンパク質発現プロファイルを示し、ＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａのほとんど重複しない発現プロファイルを示している。Ａ及びＢは、代表的な成人正常ドナー骨髄細胞集団におけるＡＤＧＲＥ２／ＣＬＥＣ１２Ａ対ＣＤ３３／ＣＤ１２３のフローサイトメトリー共発現プロファイルを示す（ゲーティング：単球－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｍｅｄ／ＣＤ１４＋、顆粒球－ＣＤ４５_ｄｉｍ／ＳＳＣ_ｈｉ、ＨＳＣ－ＣＤ４５_ｄｉｍ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ３４＋／ＣＤ３８－／ＣＤ４５ＲＡ－／ＣＤ９０＋、Ｔ細胞－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ３＋、Ｂ細胞－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ１９＋）。Ｃは、ホルマリン固定パラフィン包埋正常ヒト組織におけるＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａの免疫組織化学共染色の概要を示すヒートマップを示す。染色強度は、非特異的染色の可能性が高い液体を除いた、細胞の陽性を指す。ＡＤＧＲＥ２／ＣＬＥＣ１２Ａは、免疫関連組織（主に単球系）の骨髄細胞での共発現が期待されていたが、評価した他の組織では重複発現が見られないか、限定的であった。Ａ～Ｃは、正常な造血組織及び非造血組織におけるＡＤＧＲＥ２、ＣＬＥＣ１２Ａ（ＣＤ３７１）、ＣＤ３３、及びＣＤ１２３のタンパク質発現プロファイルを示し、ＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａのほとんど重複しない発現プロファイルを示している。Ａ及びＢは、代表的な成人正常ドナー骨髄細胞集団におけるＡＤＧＲＥ２／ＣＬＥＣ１２Ａ対ＣＤ３３／ＣＤ１２３のフローサイトメトリー共発現プロファイルを示す（ゲーティング：単球－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｍｅｄ／ＣＤ１４＋、顆粒球－ＣＤ４５_ｄｉｍ／ＳＳＣ_ｈｉ、ＨＳＣ－ＣＤ４５_ｄｉｍ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ３４＋／ＣＤ３８－／ＣＤ４５ＲＡ－／ＣＤ９０＋、Ｔ細胞－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ３＋、Ｂ細胞－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ１９＋）。Ｃは、ホルマリン固定パラフィン包埋正常ヒト組織におけるＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａの免疫組織化学共染色の概要を示すヒートマップを示す。染色強度は、非特異的染色の可能性が高い液体を除いた、細胞の陽性を指す。ＡＤＧＲＥ２／ＣＬＥＣ１２Ａは、免疫関連組織（主に単球系）の骨髄細胞での共発現が期待されていたが、評価した他の組織では重複発現が見られないか、限定的であった。Ａ～Ｃは、正常な造血組織及び非造血組織におけるＡＤＧＲＥ２、ＣＬＥＣ１２Ａ（ＣＤ３７１）、ＣＤ３３、及びＣＤ１２３のタンパク質発現プロファイルを示し、ＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａのほとんど重複しない発現プロファイルを示している。Ａ及びＢは、代表的な成人正常ドナー骨髄細胞集団におけるＡＤＧＲＥ２／ＣＬＥＣ１２Ａ対ＣＤ３３／ＣＤ１２３のフローサイトメトリー共発現プロファイルを示す（ゲーティング：単球－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｍｅｄ／ＣＤ１４＋、顆粒球－ＣＤ４５_ｄｉｍ／ＳＳＣ_ｈｉ、ＨＳＣ－ＣＤ４５_ｄｉｍ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ３４＋／ＣＤ３８－／ＣＤ４５ＲＡ－／ＣＤ９０＋、Ｔ細胞－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ３＋、Ｂ細胞－ＣＤ４５_ｈｉ／ＳＳＣ_ｌｏｗ／ＣＤ１９＋）。Ｃは、ホルマリン固定パラフィン包埋正常ヒト組織におけるＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａの免疫組織化学共染色の概要を示すヒートマップを示す。染色強度は、非特異的染色の可能性が高い液体を除いた、細胞の陽性を指す。ＡＤＧＲＥ２／ＣＬＥＣ１２Ａは、免疫関連組織（主に単球系）の骨髄細胞での共発現が期待されていたが、評価した他の組織では重複発現が見られないか、限定的であった。ＣＤ３３－ＣＡＲ及びＣＤ１２３－ＣＡＲと比較して安全性プロファイルを向上させるためのＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１アプローチの理論的根拠を示している。最適化された親和性と微調整されたＣＤ３ζシグナル伝達強度とを備えたＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲだけでも、低レベルまたは非常に低レベルのＡＤＧＲＥ２を持つ細胞（それぞれＨＳＣまたは顆粒球）を温存する。高親和性ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲ単独では細胞溶解を媒介しない。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、低親和性のＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲと高親和性のＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲとを組み合わせている。正常な造血細胞は、ＡＤＧＲＥ２とＣＬＥＣ１２Ａとの発現プロファイルがほとんど重複しておらず、ＣＬＥＣ１２ＡはＨＳＣに対して陰性である。したがって、ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲを追加してもＨＳＣ毒性のリスクは増加しない。ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖバインダー選択スキームを示す。Ａ～Ｃは、異なるＡＤＧＲＥ２標的発現レベルに関連した１８時間のインビトロＣＡＲ細胞傷害性アッセイを示す。高いＡＤＧＲＥ２レベルで最大の細胞毒性を示し、非常に低いＡＤＧＲＥ２レベルで最小の細胞毒性を示す、主要なヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖの好ましいプロファイルが観察された。異なるヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ候補と元の２Ａ１ｓｃＦｖをＳＦＧレトロウイルス２８ｚ１ＸＸＣＡＲベクターバックボーンでテストした。各ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖについて、２つのシグナルペプチドを研究した。１つは確立されたＣＤ８αシグナルペプチドを含み、もう１つは代替のＩｇＨＶ１－４シグナルペプチドを含む。色付きの線で示されているのは、細胞毒性の特徴を持つ６つのｓｃＦｖである。残りのｓｃＦｖ候補（凡例には含まれていない）は灰色で表示されている。ＣＡＲＴ細胞を、様々なレベルのＡＤＧＲＥ２：高レベル（ＷＴ、Ａ）、低レベル（クローン１Ｅ８、Ｂ）、及び非常に低レベル（クローン９Ｄ６、Ｃ）を発現するＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株と１８時間共培養した。細胞毒性は、ＭＯＬＭ１３細胞から放出されるルシフェラーゼシグナルに基づいて測定された。Ａ～Ｃは、異なるＡＤＧＲＥ２標的発現レベルに関連した１８時間のインビトロＣＡＲ細胞傷害性アッセイを示す。高いＡＤＧＲＥ２レベルで最大の細胞毒性を示し、非常に低いＡＤＧＲＥ２レベルで最小の細胞毒性を示す、主要なヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖの好ましいプロファイルが観察された。異なるヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ候補と元の２Ａ１ｓｃＦｖをＳＦＧレトロウイルス２８ｚ１ＸＸＣＡＲベクターバックボーンでテストした。各ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖについて、２つのシグナルペプチドを研究した。１つは確立されたＣＤ８αシグナルペプチドを含み、もう１つは代替のＩｇＨＶ１－４シグナルペプチドを含む。色付きの線で示されているのは、細胞毒性の特徴を持つ６つのｓｃＦｖである。残りのｓｃＦｖ候補（凡例には含まれていない）は灰色で表示されている。ＣＡＲＴ細胞を、様々なレベルのＡＤＧＲＥ２：高レベル（ＷＴ、Ａ）、低レベル（クローン１Ｅ８、Ｂ）、及び非常に低レベル（クローン９Ｄ６、Ｃ）を発現するＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株と１８時間共培養した。細胞毒性は、ＭＯＬＭ１３細胞から放出されるルシフェラーゼシグナルに基づいて測定された。Ａ～Ｃは、異なるＡＤＧＲＥ２標的発現レベルに関連した１８時間のインビトロＣＡＲ細胞傷害性アッセイを示す。高いＡＤＧＲＥ２レベルで最大の細胞毒性を示し、非常に低いＡＤＧＲＥ２レベルで最小の細胞毒性を示す、主要なヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖの好ましいプロファイルが観察された。異なるヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ候補と元の２Ａ１ｓｃＦｖをＳＦＧレトロウイルス２８ｚ１ＸＸＣＡＲベクターバックボーンでテストした。各ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖについて、２つのシグナルペプチドを研究した。１つは確立されたＣＤ８αシグナルペプチドを含み、もう１つは代替のＩｇＨＶ１－４シグナルペプチドを含む。色付きの線で示されているのは、細胞毒性の特徴を持つ６つのｓｃＦｖである。残りのｓｃＦｖ候補（凡例には含まれていない）は灰色で表示されている。ＣＡＲＴ細胞を、様々なレベルのＡＤＧＲＥ２：高レベル（ＷＴ、Ａ）、低レベル（クローン１Ｅ８、Ｂ）、及び非常に低レベル（クローン９Ｄ６、Ｃ）を発現するＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株と１８時間共培養した。細胞毒性は、ＭＯＬＭ１３細胞から放出されるルシフェラーゼシグナルに基づいて測定された。異なるＡＤＧＲＥ２標的発現レベルにおける６つのヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖのインビボ抗腫瘍ＣＡＲ有効性を示す。インビボ抗腫瘍ＣＡＲ有効性モデルは、主要なヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖに対して良好なプロファイルを示し、高ＡＤＧＲＥ２レベルでは強力な有効性を示し、低ＡＤＧＲＥ２レベルでは細胞毒性が減少し、非常に低いＡＤＧＲＥ２レベルでは細胞毒性が存在しない。６つの異なるヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ候補と元の２Ａ１ｓｃＦｖを、ＳＦＧベースのレトロウイルス２８ｚ１ＸＸＣＡＲバックボーンでテストした。６～８週齢のＮＳＧマウスを用いたインビボＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株異種移植実験。－５日目に、示されたＭＯＬＭ１３細胞株クローンをマウスに尾静脈を介して注射した（用量：マウス当たり１Ｅ６細胞）。－１日目に、ｆｆＬｕｃベースのインビボ生物発光イメージングによってＡＭＬの生着が確認された。０日目に、マウスに尾静脈を介してＣＡＲＴ細胞を注射した（用量：マウス１匹あたり３Ｅ５個のＣＡＲ陽性細胞）。続いて、ＡＭＬ負荷は生物発光イメージングによって定量化され、総流束（ｐ／ｓ）によって表される。異なるＡＤＧＲＥ２標的発現レベルにおける６つのヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖのインビボ抗腫瘍ＣＡＲ有効性を示す。インビボ抗腫瘍ＣＡＲ有効性モデルは、主要なヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖに対して良好なプロファイルを示し、高ＡＤＧＲＥ２レベルでは強力な有効性を示し、低ＡＤＧＲＥ２レベルでは細胞毒性が減少し、非常に低いＡＤＧＲＥ２レベルでは細胞毒性が存在しない。６つの異なるヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ候補と元の２Ａ１ｓｃＦｖを、ＳＦＧベースのレトロウイルス２８ｚ１ＸＸＣＡＲバックボーンでテストした。６～８週齢のＮＳＧマウスを用いたインビボＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株異種移植実験。－５日目に、示されたＭＯＬＭ１３細胞株クローンをマウスに尾静脈を介して注射した（用量：マウス当たり１Ｅ６細胞）。－１日目に、ｆｆＬｕｃベースのインビボ生物発光イメージングによってＡＭＬの生着が確認された。０日目に、マウスに尾静脈を介してＣＡＲＴ細胞を注射した（用量：マウス１匹あたり３Ｅ５個のＣＡＲ陽性細胞）。続いて、ＡＭＬ負荷は生物発光イメージングによって定量化され、総流束（ｐ／ｓ）によって表される。異なるＡＤＧＲＥ２標的発現レベルにおける６つのヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖのインビボ抗腫瘍ＣＡＲ有効性を示す。インビボ抗腫瘍ＣＡＲ有効性モデルは、主要なヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖに対して良好なプロファイルを示し、高ＡＤＧＲＥ２レベルでは強力な有効性を示し、低ＡＤＧＲＥ２レベルでは細胞毒性が減少し、非常に低いＡＤＧＲＥ２レベルでは細胞毒性が存在しない。６つの異なるヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ候補と元の２Ａ１ｓｃＦｖを、ＳＦＧベースのレトロウイルス２８ｚ１ＸＸＣＡＲバックボーンでテストした。６～８週齢のＮＳＧマウスを用いたインビボＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株異種移植実験。－５日目に、示されたＭＯＬＭ１３細胞株クローンをマウスに尾静脈を介して注射した（用量：マウス当たり１Ｅ６細胞）。－１日目に、ｆｆＬｕｃベースのインビボ生物発光イメージングによってＡＭＬの生着が確認された。０日目に、マウスに尾静脈を介してＣＡＲＴ細胞を注射した（用量：マウス１匹あたり３Ｅ５個のＣＡＲ陽性細胞）。続いて、ＡＭＬ負荷は生物発光イメージングによって定量化され、総流束（ｐ／ｓ）によって表される。ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖバインダー選択スキームを示す。Ａ及びＢは、ＡＭＬ細胞株Ｕ９３７及びＭＯＬＭ１３との関連における、ＴＲＡＣＣＡＲ－２８ｚ１ＸＸフォーマットにおけるＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖのインビトロＣＡＲ細胞毒性を示す。インビトロ１８時間ＣＡＲ細胞傷害性アッセイは、高レベル及び低レベルのＣＬＥＣ１２Ａレベルで強力な有効性を備えた、主要なＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖの良好なプロファイルを示している。異なるＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ候補をＴＲＡＣ－ＡＡＶ２８ｚ１ＸＸＣＡＲバックボーンでテストした。色付きの線で示されているのは、様々なＣＬＥＣ１２Ａレベルの状況で最も高い有効性を示す９つのｓｃＦｖである。Ａは、ＣＬＥＣ１２Ａ－ｈｉｇｈ細胞株Ｕ９３７による細胞毒性を示す。Ｂは、ＣＬＥＣ１２Ａ－ｌｏｗ細胞株ＭＯＬＭ１３による細胞毒性を示す。残りのｓｃＦｖ候補は灰色で表示される。Ｔ細胞をＡＭＬ細胞株と１８時間共培養した。細胞毒性は、ＡＭＬ細胞株からのルシフェラーゼシグナルに基づいて測定された。主要なＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖに対する高い有効性を示すインビボ抗腫瘍ＣＡＲ有効性モデルを示す。９つの異なるＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ候補をＴＲＡＣ－ＡＡＶ２８ｚ１ＸＸＣＡＲバックボーンでテストした。６～８週齢のＮＳＧマウスを用いたインビボＵ９３７ＡＭＬ細胞株異種移植実験。－４日目に、示されたＵ９３７細胞株クローンをマウスに尾静脈を介して注射した（用量：マウス当たり１Ｅ６細胞）。－１日目に、ｆｆＬｕｃベースのインビボ生物発光イメージングによってＡＭＬの生着が確認された。０日目に、マウスに尾静脈を介してＣＡＲＴ細胞を注射した（用量：マウス１匹あたり４Ｅ５個のＣＡＲ陽性細胞）。続いて、ＡＭＬ負荷は生物発光イメージングによって定量化され、総流束（ｐ／ｓ）によって表される。Ａ～Ｃは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１概念を検証するインビトロ及びインビボＣＡＲ有効性アッセイを示す（図３に概略図として示す）。Ａは、インビトロ１８時間ＣＡＲ細胞毒性アッセイを示す。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１を形質導入したＴ細胞を、標的を発現しない（ＡＤＧＲＥ２－／ＣＬＥＣ１２Ａ－）、またはＣＡＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２＋／ＣＬＥＣ１２Ａ－）、ＣＣＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２－／ＣＬＥＣ１２Ａ＋）、またはＣＡＲとＣＣＲ標的の両方（ＡＤＧＲＥ２＋／ＣＬＥＣ１２Ａ＋）を過剰発現するＥＬ４マウスリンパ腫細胞株と共培養した。ＣＤ１９ターゲティング１９２８ｚ１ＸＸＣＡＲコンストラクトをネガティブ対照として使用した。％細胞毒性は、特定のエフェクター：標的（Ｅ：Ｔ）比における標的特異的殺傷効果を示す。Ｂ及びＣは、６～８週齢のＮＳＧマウスを用いたインビボＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株異種移植実験を示す。－５日目に、示されたＭＯＬＭ１３細胞株クローンをマウスに尾静脈を介して注射した（用量：マウス当たり１×１０^６細胞）。－１日目に、ｆｆＬｕｃベースのインビボ生物発光イメージングによってＡＭＬの生着が確認された。０日目に、マウスに尾静脈を介してＣＡＲＴ細胞を注射した（用量：マウス１匹あたり５×１０^５個のＣＡＲ陽性細胞）。続いて、ＡＭＬ負荷は生物発光イメージングによって定量化され、総流束（ｐ／ｓ）によって表される。Ａ～Ｃは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１概念を検証するインビトロ及びインビボＣＡＲ有効性アッセイを示す（図３に概略図として示す）。Ａは、インビトロ１８時間ＣＡＲ細胞毒性アッセイを示す。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１を形質導入したＴ細胞を、標的を発現しない（ＡＤＧＲＥ２－／ＣＬＥＣ１２Ａ－）、またはＣＡＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２＋／ＣＬＥＣ１２Ａ－）、ＣＣＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２－／ＣＬＥＣ１２Ａ＋）、またはＣＡＲとＣＣＲ標的の両方（ＡＤＧＲＥ２＋／ＣＬＥＣ１２Ａ＋）を過剰発現するＥＬ４マウスリンパ腫細胞株と共培養した。ＣＤ１９ターゲティング１９２８ｚ１ＸＸＣＡＲコンストラクトをネガティブ対照として使用した。％細胞毒性は、特定のエフェクター：標的（Ｅ：Ｔ）比における標的特異的殺傷効果を示す。Ｂ及びＣは、６～８週齢のＮＳＧマウスを用いたインビボＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株異種移植実験を示す。－５日目に、示されたＭＯＬＭ１３細胞株クローンをマウスに尾静脈を介して注射した（用量：マウス当たり１×１０^６細胞）。－１日目に、ｆｆＬｕｃベースのインビボ生物発光イメージングによってＡＭＬの生着が確認された。０日目に、マウスに尾静脈を介してＣＡＲＴ細胞を注射した（用量：マウス１匹あたり５×１０^５個のＣＡＲ陽性細胞）。続いて、ＡＭＬ負荷は生物発光イメージングによって定量化され、総流束（ｐ／ｓ）によって表される。Ａ～Ｃは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１概念を検証するインビトロ及びインビボＣＡＲ有効性アッセイを示す（図３に概略図として示す）。Ａは、インビトロ１８時間ＣＡＲ細胞毒性アッセイを示す。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１を形質導入したＴ細胞を、標的を発現しない（ＡＤＧＲＥ２－／ＣＬＥＣ１２Ａ－）、またはＣＡＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２＋／ＣＬＥＣ１２Ａ－）、ＣＣＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２－／ＣＬＥＣ１２Ａ＋）、またはＣＡＲとＣＣＲ標的の両方（ＡＤＧＲＥ２＋／ＣＬＥＣ１２Ａ＋）を過剰発現するＥＬ４マウスリンパ腫細胞株と共培養した。ＣＤ１９ターゲティング１９２８ｚ１ＸＸＣＡＲコンストラクトをネガティブ対照として使用した。％細胞毒性は、特定のエフェクター：標的（Ｅ：Ｔ）比における標的特異的殺傷効果を示す。Ｂ及びＣは、６～８週齢のＮＳＧマウスを用いたインビボＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株異種移植実験を示す。－５日目に、示されたＭＯＬＭ１３細胞株クローンをマウスに尾静脈を介して注射した（用量：マウス当たり１×１０^６細胞）。－１日目に、ｆｆＬｕｃベースのインビボ生物発光イメージングによってＡＭＬの生着が確認された。０日目に、マウスに尾静脈を介してＣＡＲＴ細胞を注射した（用量：マウス１匹あたり５×１０^５個のＣＡＲ陽性細胞）。続いて、ＡＭＬ負荷は生物発光イメージングによって定量化され、総流束（ｐ／ｓ）によって表される。ｐＳＦＧ－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１制限マップ（８９４０ｂｐ）を示す。ＡＤＧＲＥ２ＡＤＧＲＥ２－Ａ－ＣＡＲ及びＣＬＥＣ１２ＡＣＬＥＣ１２Ａ－Ａ－ＣＣＲを含むＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１バイシストロン性構築物のためのガンマレトロウイルスベクター設計を示す。略語：ＬＴＲ＝長い末端反復、ＳＤ＝スプライスドナー部位、ＳＡ＝スプライスアクセプター部位、ＳＰ＝シグナルペプチド、ｓｃＦｖ＝単鎖可変フラグメント、Ｈ＝ヒンジ、ＴＭ＝膜貫通、Ｃ＝共刺激ドメイン、Ｓ＝刺激ドメイン。代表的なＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の製造計画を示す。代表的なＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の製造計画を示す。代表的なＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の製造計画を示す。Ｄ３０疾患評価後の治療コースを導くためのアルゴリズムを示す。Ａ及びＢは、可溶化膜タンパク質（ＳＭＰ）アッセイを示す。Ａ及びＢは、組み合わせゲーティング戦略を示す。Ａは、以前に記載された組み合わせＣＡＲゲーティング戦略を示す。Ａ及びＢは、組み合わせゲーティング戦略を示す。Ａは、以前に記載された組み合わせＣＡＲゲーティング戦略を示す。Ａ及びＢは、組み合わせゲーティング戦略を示す。Ｂは、「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」ゲート戦略を示す。Ａ及びＢは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１を介したＡＤＧＲＥ２／ＣＬＥＣ１２Ａ共標的化に関連した「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」ゲーティング戦略を検証するインビトロＣＡＲ有効性アッセイを示す。Ａは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１形質転換Ｔ細胞によって誘導され、標的なし（ＡＤＧＲＥ２^－／ＣＬＥＣ１２Ａ^－）、またはＣＡＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２^＋／ＣＬＥＣ１２Ａ^－）、ＣＣＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２^－／ＣＬＥＣ１２Ａ^＋）、またはＣＡＲ及びＣＣＲ標的の両方（ＡＤＧＲＥ２^＋／ＣＬＥＣ１２Ａ^＋）のいずれかを過剰発現するＥＬ４マウスリンパ腫細胞株と共培養された細胞毒性を示す。１９２８ｚ１ＸＸＣＡＲをネガティブ対照として用いた。Ａ及びＢは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１を介したＡＤＧＲＥ２／ＣＬＥＣ１２Ａ共標的化に関連した「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」ゲーティング戦略を検証するインビトロＣＡＲ有効性アッセイを示す。Ｂは、異なるＡＤＧＲＥ２レベル（すなわち、ＡＤＧＲＥ２－ｈｉｇｈ（ＷＴ）、ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗ、及びＡＤＧＲＥ２－ｖｅｒｙ－ｌｏｗ）を発現するように改変されたＭＯＬＭ１３標的細胞と共培養した、形質導入されていない、ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ－、ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲ－、またはＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１形質導入Ｔ細胞によって誘導された細胞毒性を示す。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１Ｔ細胞を使用した「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」ゲート戦略のインビボ検証を示す。腫瘍の増殖と生存は、非形質導入、ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ－、ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ＋ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＡＲ－、ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲ－、またはＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１形質導入Ｔ細胞の注入を受けたＮＳＧＡＭＬ異種移植モデルで測定された。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１Ｔ細胞を使用した「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」ゲート戦略のインビボ検証を示す。腫瘍の増殖と生存は、非形質導入、ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ－、ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ＋ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＡＲ－、ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲ－、またはＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１形質導入Ｔ細胞の注入を受けたＮＳＧＡＭＬ異種移植モデルで測定された。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１Ｔ細胞を使用した「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」ゲート戦略のインビボ検証を示す。腫瘍の増殖と生存は、非形質導入、ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ－、ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ＋ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＡＲ－、ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲ－、またはＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１形質導入Ｔ細胞の注入を受けたＮＳＧＡＭＬ異種移植モデルで測定された。Ｔ細胞用量滴定及びＡＭＬ再チャレンジによるＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１のインビボストレス試験を示す。腫瘍の増殖と生存は、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１形質導入Ｔ細胞を異なる用量で注射したＮＳＧＡＭＬ異種移植モデルで測定された。

５．発明を実施するための形態
本開示の主題は、ＡＤＧＲＥ２を標的とするキメラ受容体及びＣＬＥＣ１２Ａを標的とするキメラ受容体を提供する。本開示の主題はさらに、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体を含む細胞、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体を含む細胞、ならびに本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体、及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体を含む細胞を提供する。細胞は、免疫応答性細胞、例えば、遺伝子改変された免疫応答性細胞（例えば、Ｔ細胞またはＮＫ細胞）であり得る。本明細書で開示される主題はまた、治療、例えばＡＤＧＲＥ２及び／またはＣＬＥＣ１２Ａに関連する腫瘍（例えばＡＭＬ）の治療及び／または予防のためにそのような細胞を使用する方法も提供する。

本開示の主題の非限定的な実施形態は、本明細書及び実施例によって説明される。

開示を明確にする目的のため、限定するためではなく、詳細な説明は次のサブセクションに分かれている。

５．１．定義
５．２．キメラ受容体
５．３．ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン
５．４．ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の例
５．５．ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン
５．６．ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の例
５．７．細胞
５．８．核酸分子、ベクター及び遺伝子改変
５．９．製剤化及び投与
５．１０．治療方法

５．１．定義
特に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示の主題が属する分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。以下の参考文献、Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎｅｔａｌ．，ＤｉｃｔｉｏｎａｒｙｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ（２ｎｄｅｄ．１９９４）；ＴｈｅＣａｍｂｒｉｄｇｅＤｉｃｔｉｏｎａｒｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｗａｌｋｅｒｅｄ．，１９８８）；ＴｈｅＧｌｏｓｓａｒｙｏｆＧｅｎｅｔｉｃｓ，５ｔｈＥｄ．，Ｒ．Ｒｉｅｇｅｒｅｔａｌ．（ｅｄｓ．），ＳｐｒｉｎｇｅｒＶｅｒｌａｇ（１９９１）；及びＨａｌｅ＆Ｍａｒｈａｍ，ＴｈｅＨａｒｐｅｒＣｏｌｌｉｎｓＤｉｃｔｉｏｎａｒｙｏｆＢｉｏｌｏｇｙ（１９９１）は、本開示の主題で使用される多くの用語の一般的な定義を当業者に提供する。本明細書で使用する場合、以下の用語は、別途記載しない限り、以下でそれらのものとされる意味を有する。

本明細書で使用するとき、「約」または「およそ」という用語は、当業者によって決定される特定の値についての許容可能な誤差範囲内であることを意味し、これは値を測定する方法、または決定する方法、すなわち、測定システムの限界に部分的に依存する。例えば、「約」とは、当技術分野での１実施当たり、３標準偏差以内または３標準偏差超を意味し得る。あるいは、「約」は、所与の値の２０％までの範囲、好ましくは１０％までの範囲、より好ましくは５％までの範囲、さらにより好ましくは１％までの範囲を意味することができる。あるいは、特に生物学的システムまたはプロセスに関して、この用語は、値の、好ましくは５倍以内、より好ましくは２倍以内の桁内を意味することが可能である。

「免疫応答性細胞」とは、免疫応答において機能する細胞、またはその前駆細胞、もしくは子孫細胞を意味する。ある実施形態では、免疫応答性細胞はリンパ系細胞である。リンパ系細胞の非限定的な例としては、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂ細胞、及びリンパ系細胞に分化し得る幹細胞が挙げられる。ある実施形態では、免疫応答性細胞は骨髄系細胞である。

「免疫応答性細胞を活性化する」とは、免疫応答の開始をもたらす、細胞におけるシグナル伝達の誘導またはタンパク質発現の変化を意味する。例えば、リガンド結合、及び免疫受容体チロシンベースの阻害モチーフ（ＩＴＡＭ）に応答してＣＤ３鎖がクラスター化すると、シグナル伝達カスケードが生成される。ある実施形態では、内因性ＴＣＲまたは外因性ＣＡＲが抗原に結合すると、結合した受容体近くの多くの分子のクラスター化を含む免疫学的シナプスの形成が起こる（例えば、ＣＤ４またはＣＤ８、ＣＤ３γ／δ／ε／ζなど）。この膜結合シグナル伝達分子のクラスター化により、ＣＤ３鎖内に含まれるＩＴＡＭモチーフがリン酸化されることが可能になる。このリン酸化により、Ｔ細胞活性化経路が開始され、最終的にはＮＦ－κＢ及びＡＰ－１などの転写因子が活性化される。これらの転写因子は、Ｔ細胞媒介免疫応答を開始するために、Ｔ細胞の包括的な遺伝子発現を誘導して、増殖のためのＩＬ－２産生、及び主要制御因子Ｔ細胞タンパク質の発現を増加させる。

「免疫応答性細胞を刺激する」とは、強力で持続的な免疫応答をもたらすシグナルを意味する。様々な実施形態において、シグナルは、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の活性化後に起こるか、または限定されないが、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＯＸ４０、ＣＤ４０及びＩＣＯＳを含む受容体を介して同時に媒介される。複数の刺激シグナルを受け取ることは、強力で長期的なＴ細胞媒介免疫応答を展開するために重要である。Ｔ細胞はすぐに抑制され、抗原に対して反応しなくなる。これらの共刺激シグナルの効果は様々であり得るが、一般に、完全かつ持続的な根絶のために抗原に強力に応答する長命で増殖性の抗アポトーシスＴ細胞を生成するために、遺伝子発現の増加をもたらす。

本明細書で使用される「抗体」という用語は、完全な抗体分子だけでなく、免疫原結合能力を保持している抗体分子のフラグメントも意味する。このようなフラグメントも当技術分野でよく知られており、インビトロ及びインビボの両方で恒常的に使用されている。したがって、本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、完全な免疫グロブリン分子だけでなく、周知の活性フラグメントＦ（ａｂ’）_２及びＦａｂも意味する。Ｆ（ａｂ’）_２、及びインタクト抗体のＦｅフラグメントが欠けたＦａｂフラグメントは、循環からより迅速に除去され、インタクトな抗体よりも低い非特異的組織結合を有し得る（Ｗａｈｌｅｔａｌ．，ＮｕｃｌＭｅｄ（１９８３）；２４：３１６－３２５）。本明細書で使用される場合、完全な天然抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、単鎖Ｖ領域フラグメント（ｓｃＦｖ）、融合ポリペプチド、及び非従来型の抗体が含まれる。ある実施形態では、抗体は、ジスルフィド結合によって相互接続された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質である。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書でＶ_Ｈと略記される）及び重鎖定常（Ｃ_Ｈ）領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書でＶ_Ｌと略記される）及び軽鎖定常Ｃ_Ｌ領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメインＣ_Ｌから構成される。Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称されるより保存された領域と共に散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域にさらに細分化され得る。各Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端へと、次の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で配列される。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）を含めた、宿主組織または因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。

本明細書で使用される場合、「ＣＤＲ」は、免疫グロブリン重鎖及び軽鎖の超可変領域である抗体の相補性決定領域アミノ酸配列として定義される。例えば、Ｋａｂａｔｅｔａｌ．，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，４ｔｈＵ．Ｓ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅａｌｔｈａｎｄＨｕｍａｎＳｅｒｖｉｃｅｓ、ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ（１９８７）、またはＩＭＧＴ番号付けシステム（Ｌｅｆｒａｎｃ，ＴｈｅＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｓｔ（１９９９）；７：１３２－１３６；Ｌｅｆｒａｎｃｅｔａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００３）；２７：５５－７７）を参照されたい。一般に、抗体は、可変領域に３つの重鎖及び３つの軽鎖のＣＤＲまたはＣＤＲ領域を含む。ＣＤＲは、抗体が抗原またはエピトープに結合するための接触残基の大部分を提供する。ある実施形態では、ＣＤＲ領域は、ＩＭＧＴ番号付けシステムを用いて区別される。ある実施形態では、ＣＤＲ領域は、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／ＩＭＧＴ＿ｖｑｕｅｓｔ／ｉｎｐｕｔで利用可能なＩＭＧＴ番号付けシステムを使用して区別される。

本明細書で使用するとき、「単鎖可変フラグメント」または「ｓｃＦｖ」という用語は、Ｖ_Ｈ：：ＶＬヘテロ二量体を形成するために共有結合された、免疫グロブリン（例えば、マウスまたはヒト）の重鎖（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖（Ｖ_Ｌ）の可変領域の融合タンパク質のことをいう。重鎖（Ｖ_Ｈ）と軽鎖（Ｖ_Ｌ）とは、直接結合されるか、またはＶ_ＨのＮ末端をＶ_ＬのＣ末端に、もしくはＶ_ＨのＣ末端をＶ_ＬのＮ末端に、接続する、ペプチドコードリンカー（例えば、１０、１５、２０、２５個のアミノ酸）によって結合される。リンカーは通常、柔軟性のためにグリシンが豊富で、溶解性のためにセリンまたはトレオニンが豊富である。リンカーは、細胞外抗原結合ドメインの重鎖可変領域と軽鎖可変領域を連結することができる。リンカーの非限定的な例は、Ｓｈｅｎｅｔａｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．８０（６）：１９１０－１９１７（２００８）及びＷＯ２０１４／０８７０１０に開示され、それらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ある実施形態では、リンカーはＧ４Ｓリンカーである。

ある実施形態では、リンカーは、以下に提供される配列番号１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳ［配列番号１］

ある実施形態では、リンカーは、以下に提供される配列番号２で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ［配列番号２］

ある実施形態では、リンカーは、以下に提供される配列番号３で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳ［配列番号３］

ある実施形態では、リンカーは、以下に提供される配列番号４で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳ［配列番号４］

ある実施形態では、リンカーは、以下に提供される配列番号５で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＧＧＧＧＳ［配列番号５］

ある実施形態では、リンカーは、以下に提供される配列番号６で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ［配列番号６］

ある実施形態では、リンカーは、重鎖定常領域の最初の３つのアミノ酸を含む。ある実施形態では、リンカーは、以下に提供される配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＡＳＴＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ［配列番号１４９］

定常領域の除去及びリンカーの導入にもかかわらず、ｓｃＦｖタンパク質は元の免疫グロブリンの特異性を保持する。単鎖Ｆｖポリペプチド抗体は、Ｈｕｓｔｏｎ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，（１９８８）；８５：５８７９－５８８３；米国特許第５，０９１，５１３号、５，１３２，４０５号及び４，９５６，７７８号；ならびに米国特許公開第２００５０１９６７５４号及び２００５０１９６７５４号によって記載されているように、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌコード配列を含む核酸から発現させることができる。阻害活性を有する拮抗性ｓｃＦｖが記載されている（例えば、Ｚｈａｏｅｔａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ（Ｌａｒｃｈｍｔ）（２００８）；２７（６）：４４５－５１；Ｐｅｔｅｒｅｔａｌ．，ＪＣａｃｈｅｘｉａＳａｒｃｏｐｅｎｉａＭｕｓｃｌｅ（２０１２）；Ａｕｇｕｓｔ１２；Ｓｈｉｅｈｅｔａｌ．，ＪＩｍｕｎｏｌ（２００９）；１８３（４）：２２７７－８５；Ｇｉｏｍａｒｅｌｌｉｅｔａｌ．，ＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓｔ（２００７）；９７（６）：９５５－６３；Ｆｉｆｅｅｔａ．，ＪＣｌｉｎＩｎｖｓｔ（２００６）；１１６（８）：２２５２－６１；Ｂｒｏｃｋｓｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１９９７３（３）：１７３－８４；Ｍｏｏｓｍａｙｅｒｅｔａｌ．，ＴｈｅｒＩｍｍｕｎｏｌ１９９５２（１０：３１－４０）を参照されたい）。刺激活性を有するアゴニスト性ｓｃＦｖが記載されている（Ｐｅｔｅｒｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ（２００３）；２５２７８（３８）：３６７４０－７；Ｘｉｅｅｔａｌ．，ＮａｔＢｉｏｔｅｃｈ１９９７１５（８）：７６８－７１；Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒｅｔａｌ．，ＣｒｉｔＲｅｖＩｍｍｕｎｏｌ（１９９７）；１７（５－６）：４２７－５５；Ｈｏｅｔａｌ．，ＢｉｏＣｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ（２００３）；１６３８（３）：２５７－６６）。

本明細書で使用される「キメラ抗原受容体」または「ＣＡＲ」という用語は、免疫応答性細胞を活性化または刺激することができる細胞内シグナル伝達ドメインに融合された細胞外抗原結合ドメインを含む分子を指す。ある実施形態では、ＣＡＲはまた、膜貫通ドメインを含む。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖを含む。ｓｃＦｖは、抗体の可変重領域と可変軽領域との融合から得られ得る。代替的に、または追加的に、ｓｃＦｖは、（例えば、Ｆａｂライブラリーから得られた抗体からではなく）Ｆａｂに由来してもよい。ある実施形態では、ｓｃＦｖは膜貫通ドメインに融合され、次いで細胞内シグナル伝達ドメインに融合される。

「キメラ共刺激受容体」または「ＣＣＲ」という用語は、抗原に結合して共刺激シグナルを提供するが、単独では活性化シグナルを提供しないキメラ受容体を指す。ＣＣＲは、Ｋｒａｕｓｅ，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．（１９９８）；１８８（４）：６１９－６２６、及びＵＳ２００２００１８７８３に記載されており、その内容全体が参照により組み込まれる。ＣＣＲは共刺激シグナルを模倣するが、ＣＡＲとは異なり、単独では活性化シグナルを提供しない。例えば、ＣＣＲはＣＤ３ζポリペプチドを欠いている。

「実質的に同一」または「実質的に相同」とは、ポリペプチドまたは核酸分子が、参照アミノ酸配列（例えば、本明細書に記載されるアミノ酸配列のいずれか）または参照核酸配列（例えば、本明細書に記載される核酸配列のいずれか）と少なくとも約５０％の相同性または同一性を示すポリペプチドまたは核酸分子を意味する。ある実施形態では、そのような配列は、比較に使用されるアミノ酸または核酸の配列と少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％または少なくとも約１００％相同または同一である。

配列同一性は、配列分析ソフトウェア（例えば、ＧｅｎｅｔｉｃｓＣｏｍｐｕｔｅｒＧｒｏｕｐ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷｉｓｃｏｎｓｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｅｎｔｅｒ，１７１０ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＡｖｅｎｕｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．５３７０５のＳｅｑｕｅｎｃｅＡｎａｌｙｓｉｓＳｏｆｔｗａｒｅＰａｃｋａｇｅ、ＢＬＡＳＴ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＧＡＰ、またはＰＩＬＥＵＰ／ＰＲＥＴＴＹＢＯＸプログラム）を使用して測定されてもよい。かかるソフトウェアは、種々の置換、欠失、及び／または他の修飾に相同性の程度を割り当てることによって、同一または類似の配列を一致させる。保存的置換は、通常、以下の群、すなわち、グリシン、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、リジン、アルギニン、及びフェニルアラニン、チロシン内の置換を含む。同一性の程度を測定する例示的な方法では、ｅ－３～ｅ－１００の確率スコアが密接に関連した配列を示すＢＬＡＳＴプログラムが使用される場合がある。

本明細書で使用される場合、２つのアミノ酸配列間の相同性パーセントは、２つの配列間の同一性パーセントに相当する。２つの配列間の同一性パーセントは、２つの配列の最適な整列のために導入する必要があるギャップの数、及び各ギャップの長さを考慮した配列によって共有される同一の位置の数の関数（すなわち、相同性％＝同一位置の数／位置の合計数×１００）である。配列の比較及び２つの配列間の同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成され得る。

２つのアミノ酸配列間の相同性パーセントは、ＰＡＭ１２０重み付け残基表、１２のギャップ長ペナルティ、及び４のギャップペナルティを用い、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれているＥ．ＭｅｙｅｒｓとＷ．Ｍｉｌｌｅｒのアルゴリズム（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１１－１７（１９８８））を使用して、決定することができる。さらに、２つのアミノ酸配列間の相同性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックスのいずれか、ならびに１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップ重み及び１、２、３、４、５または６の長さ重みを用い、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍで入手可能）のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４４－４５３（１９７０））アルゴリズムを使用して決定できる。

さらに、または代わりに、本開示主題のアミノ酸配列は、例えば関連配列を同定するために公共データベースに対して検索を実行するための「クエリ配列」としてさらに使用することができる。そのような検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３～１０のＸＢＬＡＳＴプログラム（バージョン２．０）を用いて実施してもよい。ＢＬＡＳＴタンパク質検索を、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワード長＝３を用いて実行して、本明細書に開示される特定の配列（例えば、ｓｃＦｖｍ９０３、ｍ９０４、ｍ９０５、ｍ９０６、及びｍ９００の重鎖及び軽鎖可変領域配列）と相同なアミノ酸配列を得ることができる。比較目的のためのギャップアライメントを得るために、Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，（１９９７）ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．２５（１７）：３３８９－３４０２で説明されているようにＧａｐｐｅｄＢＬＡＳＴを利用できる。ＢＬＡＳＴ及びＧａｐｐｅｄＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラムのデフォルトパラメータ（例えば、ＸＢＬＡＳＴ及びＮＢＬＡＳＴ）を使用してもよい。「有効量」とは、治療時に有益なまたは望ましい臨床結果に影響を与えるのに十分な量である。有効量を１回以上の用量で対象に投与することができる。ある実施形態では、有効量は、疾患の進行を緩和する、改善する、安定化させる、回復に向かわせるもしくは遅らせる、あるいは疾患の病理学的結果を軽減するのに十分な量であり得る。有効量は、医師がケースバイケースで決定することができ、当業者の知識の範囲内である。有効量を達成するために適切な投与量を決定する際には、通常は、いくつかの要因が考慮される。これらの因子には、対象の年齢、性別及び体重、治療される状態、状態の重篤度、ならびに投与される細胞の形態及び有効濃度が含まれる。

本明細書で使用する場合、「内因性」という用語は、細胞または組織内で通常発現される核酸分子またはポリペプチドを指す。

本明細書で使用する場合、「外因性」という用語は、細胞内に内因的に存在しない核酸分子またはポリペプチドを指す。したがって、「外因性」という用語は、外来、異種、及び過剰発現された核酸分子及びポリペプチドなど、細胞内で発現される任意の組換え核酸分子またはポリペプチドを包含することになる。「外因性」核酸とは、天然の野生型細胞には存在しない核酸を意味する。例えば、外因性核酸は、配列、位置／場所、またはその両方によって内因性の対応物とは異なる場合がある。明確にするために、外因性核酸は、その天然の内因性対応物と比較して、同じ配列を有することも、異なる配列を有することもある。これは、遺伝子工学によって細胞自体またはその前駆体に導入することができ、場合によっては、非天然プロモーターまたは分泌配列などの代替制御配列に連結することもできる。

「異種核酸分子またはポリペプチド」とは、細胞または細胞から得られたサンプル中に通常は存在しない核酸分子（例えば、ｃＤＮＡ、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子）またはポリペプチドを意味する。この核酸は、別の生物に由来するものであってもよく、あるいは、例えば、細胞またはサンプルにおいて通常は発現されないｍＲＮＡ分子であってもよい。

「調節する」とは、ポジティブまたはネガティブに変化させることを意味する。例示的な調節には、約１％、約２％、約５％、約１０％、約２５％、約５０％、約７５％、または約１００％の変化が含まれる。

「増加」とは、少なくとも約５％プラスに変化することを意味する。変化は、約５％、約１０％、約２５％、約３０％、約５０％、約７５％、約１００％またはそれ以上であり得る。

「低減」とは、少なくとも約５％だけマイナスに変化させることを意味する。変化は、約５％、約１０％、約２５％、約３０％、約５０％、約７５％、または約１００％でさえもあり得る。

「単離された」、「精製された」、または「生物学的に純粋な」という用語は、天然の状態で通常それに付随する成分が様々な程度で含まれていない材料を指す。「隔離」は、元の発生源または周囲からの分離の程度を示す。「浄化」とは、隔離よりも高い分離の程度を示す。「精製された」または「生物学的に純粋な」タンパク質には、他の物質が十分に含まれていないため、不純物がタンパク質の生物学的特性に重大な影響を与えたり、他の悪影響を引き起こしたりすることはない。すなわち、核酸またはペプチドは、組み換えＤＮＡ技術によって作製される場合には細胞材料、ウイルス材料、または培地が実質的に含まれない場合に、または化学合成される場合には化学前駆体または他の化学物質が実質的に含まれない場合に精製されている。純度と均一性は通常、分析化学技術、例えば、ポリアクリルアミドゲル電気泳動または高速液体クロマトグラフィーを使用して決定される。「精製された」という用語は、核酸またはタンパク質が電気泳動ゲル内に本質的に１つのバンドを生じさせることを意味する場合がある。修飾、例えば、リン酸化またはグリコシル化を受ける可能性のあるタンパク質の場合、異なる修飾により異なる単離タンパク質が生成される可能性があり、これらを個別に精製することができる。

「単離された細胞」とは、細胞に天然に付随する分子及び／または細胞成分から分離された細胞を意味する。

本明細書で使用される「抗原結合ドメイン」という用語は、細胞上に存在する特定の抗原決定基または抗原決定基のセットに特異的に結合できるドメインを指す。

「受容体」とは、１つ以上のリガンドに選択的に結合する細胞膜上に存在するポリペプチドまたはその一部を意味する。

「シグナル配列」または「リーダー配列」とは、新たに合成されたタンパク質のＮ末端に存在し、分泌経路への進入を指示するペプチド配列（例えば、５、１０、１５、２０、２５または３０個のアミノ酸）を意味する。

「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、米国特許法においてこの用語に帰せられる広い意味を有することを意図しており、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などを意味することがある。

本明細書で使用される場合、「治療」は、治療されている個体または細胞の疾病経過を変化させようと企てる臨床介入を指し、予防のために、または臨床病理経過中に行うことができる。治療の治療効果には、疾患の発生または再発の予防、症状の緩和、疾患の任意の直接的または間接的な病理学的結果の減少、転移の予防、疾患進行速度の低減、病状の回復または一次緩和、及び寛解または予後の改善が含まれるが、これらに限定されない。疾患または障害の進行を予防することにより、罹患している対象もしくは診断された対象または障害の疑いのある対象における障害による悪化を予防することができる一方で、障害のリスクのある対象または障害の疑いのある対象における障害の発症または症状を予防することができる治療を行うことができる。

本明細書における「個体」または「対象」は、ヒトまたは非ヒト動物、例えば哺乳動物などの脊椎動物である。哺乳動物には、ヒト、霊長類、家畜、スポーツ動物、げっ歯類、及びペットが含まれるが、これらに限定されない。非ヒト動物対象の非限定的な例としては、マウス、ラット、ハムスター、モルモットなどのげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマならびに類人猿及びサルなどの非ヒト霊長類が挙げられる。

本明細書で使用するとき、用語「保存的配列改変」は、アミノ酸配列を含む本開示のキメラ受容体の結合特性に実質的に影響を及ぼさないか、またはそれらの結合特性を変更しないアミノ酸改変を指す。保存的改変としては、アミノ酸の置換、付加、及び欠失が含まれ得る。改変は、部位特異的変異導入及びＰＣＲ媒介変異導入などの当該技術分野で知られている標準的な技術によって、本開示のキメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインに導入することができる。アミノ酸は、それらの電荷や極性などの物理化学的性質に応じてグループに分類できる。保存的アミノ酸置換は、アミノ酸残基が同じグループ内のアミノ酸で置き換えられているものである。例えば、アミノ酸は電荷によって分類できる：正電荷のアミノ酸にはリジン、アルギニン、ヒスチジンが含まれ、負電荷のアミノ酸にはアスパラギン酸、グルタミン酸が含まれ、中性電荷のアミノ酸にはアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンが含まれる。さらに、アミノ酸は極性によって分類できる。極性アミノ酸には、アルギニン（塩基性極性）、アスパラギン、アスパラギン酸（酸性極性）、グルタミン酸（酸性極性）、グルタミン、ヒスチジン（塩基性極性）、リジン（塩基性極性）セリン、トレオニン、及びチロシンが含まれ、非極性アミノ酸には、アラニン、システイン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トリプトファン、及びバリンが含まれる。したがって、ＣＤＲ領域内の１つ以上のアミノ酸残基を同じグループからの他のアミノ酸残基で置換することができ、本明細書に記載の機能アッセイを使用して、改変された抗体の保持された機能（すなわち、上記（ｃ）から（ｌ）に記載の機能）について試験することができる。ある実施形態では、特定の配列またはＣＤＲ領域内の１つ以下、２つ以下、３つ以下、４つ以下、５つ以下の残基が改変される。

本開示の主題の他の態様は、以下の開示に記載されており、本開示の主題の範囲内である。

５．２．キメラ受容体
ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ＡＤＧＲＥ２またはＣＬＥＣ１２Ａに結合する細胞外抗原結合ドメインを含む。細胞外抗原結合ドメインは、抗体の抗原結合フラグメント、抗体の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）の抗原結合フラグメント、抗体の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）の抗原結合フラグメント、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、またはＦ（ａｂ）_２であり得る。ある実施形態では、細胞外抗原結合フラグメントは、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である。ある実施形態では、ｓｃＦｖはヒトｓｃＦｖである。ある実施形態では、ｓｃＦｖはヒト化ｓｃＦｖである。ある実施形態では、ｓｃＦｖはマウスｓｃＦｖである。ある実施形態では、Ｆａｂは架橋されている。

ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である。ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）である。ある実施形態では、キメラ受容体は、ＴＣＲ様融合分子である。

５．２．１．キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）
ある実施形態では、キメラ受容体は、ＣＡＲである。ＣＡＲは、免疫エフェクター細胞に目的の特異性を移植または付与する、操作された受容体である。ＣＡＲは、モノクローナル抗体の特異性をＴ細胞へ移植するために使用することができ、そのコード配列の転移がレトロウイルスベクターによって促進される。

ＣＡＲには３つの世代がある。「第１世代」ＣＡＲは、典型的には、細胞外抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）から構成され、これは膜貫通ドメインに融合され、膜貫通ドメインが細胞質／細胞内シグナル伝達ドメインに融合される。「第１世代」ＣＡＲは、ＨＬＡ媒介抗原提示とは独立して、デノボ抗原認識を提供し、単一融合分子内のＣＤ３ζ鎖シグナル伝達ドメインを介してＣＤ４^＋及びＣＤ８^＋Ｔ細胞の両方の活性化を引き起こすことができる。「第２世代」ＣＡＲは、様々な共刺激分子（例えば、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０）からの細胞内シグナル伝達ドメインをＣＡＲの細胞質尾部に追加して、Ｔ細胞に追加のシグナルを提供する。「第２世代」ＣＡＲには、共刺激（例えば、ＣＤ２８または４－１ＢＢ）及び活性化（ＣＤ３ζ）の両方を提供するＣＡＲが含まれる。「第３世代」ＣＡＲには、複数の共刺激（例えば、ＣＤ２８及び４－１ＢＢ）及び活性化（ＣＤ３ζ）を提供するＣＡＲが含まれる。ある実施形態では、キメラ受容体は第２世代ＣＡＲである。ある実施形態では、キメラ受容体は、共刺激分子の細胞内ドメインまたはそのフラグメントを含むＣＡＲである。

５．２．１．１．ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメイン
ある実施形態では、ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）である。ある実施形態では、ｓｃＦｖはヒトｓｃＦｖである。ある実施形態では、ｓｃＦｖはヒト化ｓｃＦｖである。ある実施形態では、ｓｃＦｖはマウスｓｃＦｖである。ある実施形態では、ｓｃＦｖは、抗原－Ｆｃ融合タンパク質を用いてｓｃＦｖファージライブラリーをスクリーニングすることによって同定される。

ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはＦａｂである。ある実施形態では、Ｆａｂは架橋されている。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインはＦ（ａｂ）_２である。前述の分子のいずれも、細胞外抗原結合ドメインを形成するための異種配列との融合タンパク質に含まれ得る。

キメラ受容体、例えばＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインの結合は、例えば酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、ＦＡＣＳ分析、バイオアッセイ（例えば増殖阻害）、またはウェスタンブロットアッセイによって確認することができる。これらのアッセイのそれぞれは、一般に、目的の複合体に特異的な標識試薬（例えば、抗体、またはｓｃＦｖ）を使用することにより、特に関心があるタンパク質－抗体複合体の存在を検出する。例えば、ｓｃＦｖを放射性標識して、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）に使用することができる（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Ｗｅｉｎｔｒａｕｂ，Ｂ．，ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆＲａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＳｅｖｅｎｔｈＴｒａｉｎｉｎｇＣｏｕｒｓｅｏｎＲａｄｉｏｌｉｇａｎｄＡｓｓａｙＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ＴｈｅＥｎｄｏｃｒｉｎｅＳｏｃｉｅｔｙ，Ｍａｒｃｈ，１９８６を参照されたい）。放射性同位体は、γカウンターまたはシンチレーションカウンターを使用する手段などによって、あるいはオートラジオグラフィーによって検出することができる。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインは、蛍光マーカーで標識される。蛍光マーカーの非限定的な例としては、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、青色蛍光タンパク質（例えば、ＥＢＦＰ、ＥＢＦＰ２、Ａｚｕｒｉｔｅ、及びｍＫａｌａｍａ１）、シアン蛍光タンパク質（例えば、ＥＣＦＰ、Ｃｅｒｕｌｅａｎ、及びＣｙＰｅｔ）、及び黄色蛍光タンパク質（例えば、ＹＦＰ、Ｃｉｔｒｉｎｅ、Ｖｅｎｕｓ、及びＹＰｅｔ）が挙げられる。

５．２．１．２．ＣＡＲの膜貫通ドメイン
ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、膜の少なくとも一部に及ぶ疎水性アルファヘリックスを含む。膜貫通ドメインが異なると、受容体の安定性も異なる。抗原認識後、受容体が集合し、シグナルが細胞に伝達される。本開示の主題によれば、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ２８の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ３ζの天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ４の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、４－１ＢＢの天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＯＸ４０の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＩＣＯＳの天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ８４の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ１６６の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ８ａの天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ８ｂの天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＩＣＡＭ－１の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＴＬＡ－４の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ２７の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＣＤ４０の天然または改変された膜貫通ドメインまたはそのフラグメント、ＮＫＧＤ２またはそのフラグメント、あるいはそれらの組み合わせを含み得る。

ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド（例えば、ＣＤ８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）を含む。

ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド（例えば、ＣＤ８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）を含む。ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド（例えば、ヒトＣＤ８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）を含む。ある実施形態では、ＣＤ８ポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号ＮＰ＿００１１３９３４５．１（配列番号７）を有するアミノ酸配列と少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同もしくは同一であるアミノ酸配列もしくはそのフラグメントを含むか、またはそれからなり、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。ある実施形態では、ＣＤ８ポリペプチドは、少なくとも約２０、または少なくとも約３０、または少なくとも約４０、または少なくとも約５０、または少なくとも約６０、または少なくとも約７０、及び最大約２３５のアミノ酸長である配列番号７の連続部分であるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＣＤ８ポリペプチドは、配列番号７のアミノ酸１～２３５、１～５０、５０～１００、１００～１５０、１５０～２００、１３７～２０７、または２００～２３５を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、配列番号７のアミノ酸１３７～２０７を含むか、またはそれらからなるＣＤ８ポリペプチドを含む。配列番号７を以下に提供する。

ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＳＱＦＲＶＳＰＬＤＲＴＷＮＬＧＥＴＶＥＬＫＣＱＶＬＬＳＮＰＴＳＧＣＳＷＬＦＱＰＲＧＡＡＡＳＰＴＦＬＬＹＬＳＱＮＫＰＫＡＡＥＧＬＤＴＱＲＦＳＧＫＲＬＧＤＴＦＶＬＴＬＳＤＦＲＲＥＮＥＧＹＹＦＣＳＡＬＳＮＳＩＭＹＦＳＨＦＶＰＶＦＬＰＡＫＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＮＨＲＮＲＲＲＶＣＫＣＰＲＰＶＶＫＳＧＤＫＰＳＬＳＡＲＹＶ［配列番号７］

配列番号７のアミノ酸１３７～２０７をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号８で表され、以下に提供される。
Ｃｃｃａｃｃａｃｇａｃｇｃｃａｇｃｇｃｃｇｃｇａｃｃａｃｃａａｃｃｃｃｇｇｃｇｃｃｃａｃｇａｔｃｇｃｇｔｃｇｃａｇｃｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｇｃｇｃｃｃａｇａｇｇｃｇｔｇｃｃｇｇｃｃａｇｃｇｇｃｇｇｇｇｇｇｃｇｃａｇｔｇｃａｃａｃｇａｇｇｇｇｇｃｔｇｇａｃｔｔｃｇｃｃｔｇｔｇａｔａｔｃｔａｃａｔｃｔｇｇｇｃｇｃｃｃｃｔｇｇｃｃｇｇｇａｃｔｔｇｔｇｇｇｇｔｃｃｔｔｃｔｃｃｔｇｔｃａｃｔｇｇｔｔａｔｃａｃｃｃｔｔｔａｃｔｇｃａａｃ［配列番号８］

ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド（例えば、マウスＣＤ８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）を含む。ある実施形態では、ＣＤ８ポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号ＡＡＡ９２５３３．１（配列番号９）を有するアミノ酸配列と少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同もしくは同一であるアミノ酸配列もしくはそのフラグメントを含むか、またはそれからなり、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。ある実施形態では、ＣＤ８ポリペプチドは、少なくとも約２０、または少なくとも約３０、または少なくとも約４０、または少なくとも約５０、または少なくとも約６０、または少なくとも約７０、または少なくとも約１００、または少なくとも約２００、及び最大約２４７のアミノ酸長である配列番号９の連続部分であるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＣＤ８ポリペプチドは、配列番号９のアミノ酸１～２４７、１～５０、５０～１００、１００～１５０、１５０～２００、１５１～２１９、または２００～２４７を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、配列番号９のアミノ酸１５１～２１９を含むか、またはそれらからなるＣＤ８ポリペプチドを含む。配列番号９を以下に提供する。
１ＭＡＳＰＬＴＲＦＬＳＬＮＬＬＬＭＧＥＳＩＩＬＧＳＧＥＡＫＰＱＡＰＥＬＲＩＦＰＫＫＭＤＡＥＬＧＱＫＶＤＬＶＣＥＶＬＧＳＶＳ
６１ＱＧＣＳＷＬＦＱＮＳＳＳＫＬＰＱＰＴＦＶＶＹＭＡＳＳＨＮＫＩＴＷＤＥＫＬＮＳＳＫＬＦＳＡＶＲＤＴＮＮＫＹＶＬＴＬＮＫＦＳ
１２１ＫＥＮＥＧＹＹＦＣＳＶＩＳＮＳＶＭＹＦＳＳＶＶＰＶＬＱＫＶＮＳＴＴＴＫＰＶＬＲＴＰＳＰＶＨＰＴＧＴＳＱＰＱＲＰＥＤＣＲＰ
１８１ＲＧＳＶＫＧＴＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＩＣＶＡＰＬＬＳＬＩＩＴＬＩＣＹＨＲＳＲＫＲＶＣＫＣＰＲＰＬＶＲＱＥＧＫＰ
２４１ＲＰＳＥＫＩＶ［配列番号９］

ある実施形態では、本開示のＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ２８ポリペプチド（例えば、ＣＤ２８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）を含む。

ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ２８ポリペプチド（例えば、ヒトＣＤ２８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）を含む。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号ＮＰ＿００６１３０（配列番号１０）を有するアミノ酸配列と少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または１００％相同もしくは同一であるアミノ酸配列もしくはそのフラグメントを含むか、またはそれからなり、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、少なくとも約２０、または少なくとも約３０、または少なくとも約４０、または少なくとも約５０、及び最大約２２０のアミノ酸長である配列番号１０の連続部分であるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、配列番号９のアミノ酸１～２２０、１～５０、５０～１００、１００～１５０、１５０～２００、１５３～１７９、または２００～２２０を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、配列番号１０のアミノ酸１５３～１７９を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。配列番号１０は以下に提供される。
１ＭＬＲＬＬＬＡＬＮＬＦＰＳＩＱＶＴＧＮＫＩＬＶＫＱＳＰＭＬＶＡＹＤＮＡＶＮＬＳＣＫＹＳＹＮＬＦＳＲＥＦＲＡＳＬＨＫＧＬＤ
６１ＳＡＶＥＶＣＶＶＹＧＮＹＳＱＱＬＱＶＹＳＫＴＧＦＮＣＤＧＫＬＧＮＥＳＶＴＦＹＬＱＮＬＹＶＮＱＴＤＩＹＦＣＫＩＥＶＭＹＰＰ
１２１ＰＹＬＤＮＥＫＳＮＧＴＩＩＨＶＫＧＫＨＬＣＰＳＰＬＦＰＧＰＳＫＰＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶＲ
１８１ＳＫＲＳＲＬＬＨＳＤＹＭＮＭＴＰＲＲＰＧＰＴＲＫＨＹＱＰＹＡＰＰＲＤＦＡＡＹＲＳ［配列番号１０］

配列番号１０のアミノ酸１５３～１７９をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号１１で表され、以下に提供される。
ｔｔｔｔｇｇｇｔｇｃｔｇｇｔｇｇｔｇｇｔｔｇｇｔｇｇａｇｔｃｃｔｇｇｃｔｔｇｃｔａｔａｇｃｔｔｇｃｔａｇｔａａｃａｇｔｇｇｃｃｔｔｔａｔｔａｔｔｔｔｃｔｇｇｇｔｇ［配列番号１１］

ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ＣＤ２８ポリペプチド（例えば、マウスＣＤ２８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）を含む。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号ＮＰ＿０３１６６８．３（配列番号１２）を有するアミノ酸配列と少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または１００％相同もしくは同一であるアミノ酸配列もしくはそのフラグメントを含むか、またはそれからなり、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、少なくとも約２０、または少なくとも約３０、または少なくとも約４０、または少なくとも約５０、及び最大約２１８のアミノ酸長である配列番号１２の連続部分であるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、配列番号１２のアミノ酸１～２２０、１～５０、５０～１００、１００～１５０、１５０～２００、１５１～１７７、または２００～２１８を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、配列番号１２のアミノ酸１５１～１７７を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。配列番号１２は以下に提供される。
１ＭＴＬＲＬＬＦＬＡＬＮＦＦＳＶＱＶＴＥＮＫＩＬＶＫＱＳＰＬＬＶＶＤＳＮＥＶＳＬＳＣＲＹＳＹＮＬＬＡＫＥＦＲＡＳＬＹＫＧＶ
６１ＮＳＤＶＥＶＣＶＧＮＧＮＦＴＹＱＰＱＦＲＳＮＡＥＦＮＣＤＧＤＦＤＮＥＴＶＴＦＲＬＷＮＬＨＶＮＨＴＤＩＹＦＣＫＩＥＦＭＹＰ
１２１ＰＰＹＬＤＮＥＲＳＮＧＴＩＩＨＩＫＥＫＨＬＣＨＴＱＳＳＰＫＬＦＷＡＬＶＶＶＡＧＶＬＦＣＹＧＬＬＶＴＶＡＬＣＶＩＷＴＮＳＲ
１８１ＲＮＲＬＬＱＳＤＹＭＮＭＴＰＲＲＰＧＬＴＲＫＰＹＱＰＹＡＰＡＲＤＦＡＡＹＲＰ［配列番号１２］

ある実施形態では、ＣＡＲは、細胞外抗原結合ドメインを膜貫通ドメインに連結するスペーサー領域をさらに含む。スペーサー領域は、ＣＡＲの活性化能を維持しながら、抗原結合ドメインが異なる方向に配向できるようにするのに十分な柔軟性を有して、抗原認識を促進することができる。

ある実施形態では、ＣＡＲのヒンジ／スペーサー領域は、ＣＤ８の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ２８の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ３ζの天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ４０の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、４－１ＢＢの天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＯＸ４０の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ８４の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ１６６の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ８ａの天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ８ｂの天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＩＣＯＳの天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＩＣＡＭ－１の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＴＬＡ－４の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ２７の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＣＤ４０の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、ＮＫＧＤ２の天然または改変されたヒンジ領域またはそのフラグメント、合成ポリペプチド（免疫応答に関連するタンパク質に基づいていない）、またはそれらの組み合わせを含む。ヒンジ／スペーサー領域は、ＩｇＧ１由来のヒンジ領域、または免疫グロブリンのＣＨ_２ＣＨ_３領域及びＣＤ３の一部、ＣＤ２８ポリペプチドの一部（例えば、配列番号１０または１２の一部）、ＣＤ８ポリペプチドの一部（例えば、配列番号７または９の一部）、前述のいずれかと少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、もしくは少なくとも約１００％相同もしくは同一であるその変異体、または合成スペーサー配列であり得る。

ある実施形態では、ＣＡＲのヒンジ／スペーサー領域は、ＣＤ２８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、ＣＡＲのヒンジ／スペーサー領域は、配列番号１０のアミノ酸１１４～１５２を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。

配列番号１０のアミノ酸１１４～１５２をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号１３で表され、以下に提供される。
ａｔｔｇａａｇｔｔａｔｇｔａｔｃｃｔｃｃｔｃｃｔｔａｃｃｔａｇａｃａａｔｇａｇａａｇａｇｃａａｔｇｇａａｃｃａｔｔａｔｃｃａｔｇｔｇａａａｇｇｇａａａｃａｃｃｔｔｔｇｔｃｃａａｇｔｃｃｃｃｔａｔｔｔｃｃｃｇｇａｃｃｔｔｃｔａａｇｃｃｃ［配列番号１３］

５．２．１．３．ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメイン
ある実施形態では、ＣＡＲは、細胞内シグナル伝達ドメインを含む。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζポリペプチドを含む。ＣＤ３ζは、細胞（例えば、リンパ系の細胞、例えば、Ｔ細胞）を活性化または刺激することができる。野生型（「天然」）ＣＤ３ζは、３つの機能的な免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、３つの機能的な塩基性リッチストレッチ（ＢＲＳ）領域（ＢＲＳ１、ＢＲＳ２及びＢＲＳ３）を含む。ＣＤ３ζは、抗原が結合された後に、細胞（例えば、リンパ系細胞、例えば、Ｔ細胞）に活性化シグナルを伝達する。ＣＤ３ζ鎖の細胞内シグナル伝達ドメインは、内因性ＴＣＲからのシグナルの主な伝達物質である。

ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、天然ＣＤ３ζを含む。ある実施形態では、天然ＣＤ３ζポリペプチドは、ＮＣＢＩ参照番号ＮＰ＿９３２１７０（配列番号１４）を有するアミノ酸配列と少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同もしくは同一であるアミノ酸配列もしくはそのフラグメントを含むか、またはそれからなり、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。ある実施形態では、天然ＣＤ３ζポリペプチドは、少なくとも約２０、または少なくとも約３０、または少なくとも約４０、または少なくとも約５０、少なくとも約１００、少なくとも約１１０、及び最大約１６４のアミノ酸長である配列番号１４の連続部分であるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、天然ＣＤ３ζポリペプチドは、配列番号１４のアミノ酸１～１６４、１～５０、５０～１００、５２～１６４、１００～１５０、または１５０～１６４を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号１４のアミノ酸５２～１６４を含むか、またはそれらからなるＣＤ３ζポリペプチドを含む。配列番号１４は以下に提供される。
１ＭＫＷＫＡＬＦＴＡＡＩＬＱＡＱＬＰＩＴＥＡＱＳＦＧＬＬＤＰＫＬＣＹＬＬＤＧＩＬＦＩＹＧＶＩＬＴＡＬＦＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤ
６１ＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡ
１２１ＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ［配列番号１４］

ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、改変ＣＤ３ζポリペプチドを含む。ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、１つ、２つまたは３つのＩＴＡＭを含む。ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、天然のＩＴＡＭ１を含む。ある実施形態では、天然ＩＴＡＭ１は、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲ［配列番号１５］

配列番号１５のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号１６で表され、以下に提供される。
Ｃａｇａａｃｃａｇｃｔｃｔａｔａａｃｇａｇｃｔｃａａｔｃｔａｇｇａｃｇａａｇａｇａｇｇａｇｔａｃｇａｔｇｔｔｔｔｇｇａｃａａｇａｇａ［配列番号１６］

ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、１つ以上の機能喪失変異を含むＩＴＡＭ１変異体を含む。ある実施形態では、ＩＴＡＭ１変異体は、２つの機能喪失変異を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、１つ以上（例えば、２つ）の機能喪失変異のそれぞれは、ＩＴＡＭ１におけるチロシン残基の突然変異を含む。ある実施形態では、ＩＴＡＭ１変異体は、２つの機能喪失変異からなる。ある実施形態では、ＩＴＡＭ１変異体は、以下に提供される配列番号１７で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＱＮＱＬＦＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＦＤＶＬＤＫＲ［配列番号１７］

配列番号１７のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号１８で表され、以下に提供される。
ＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＴＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＴＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡ［配列番号１８］

ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、天然ＩＴＡＭ２を含む。ある実施形態では、天然ＩＴＡＭ２は、以下に提供される配列番号１９で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫ［配列番号１９］

配列番号１９のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号２０で表され、以下に提供される。
ＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡ［配列番号２０］

ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、ＩＴＡＭ２変異体を含む。ある実施形態では、ＩＴＡＭ２変異体は、１つ以上の機能喪失変異を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＩＴＡＭ２変異体は、２つの機能喪失変異を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、１つ以上（例えば、２つ）の機能喪失変異のそれぞれは、ＩＴＡＭ２におけるチロシン残基の突然変異を含む。ある実施形態では、ＩＴＡＭ２変異体は、２つの機能喪失変異からなる。ある実施形態では、ＩＴＡＭ２変異体は、以下に提供される配列番号２１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＱＥＧＬＦＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＦＳＥＩＧＭＫ［配列番号２１］

配列番号２１のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号２２で表され、以下に提供される。
Ｃａｇｇａａｇｇｃｃｔｇｔｔｃａａｔｇａａｃｔｇｃａｇａａａｇａｔａａｇａｔｇｇｃｇｇａｇｇｃｃｔｔｃａｇｔｇａｇａｔｔｇｇｇａｔｇａａａ［配列番号２２］

ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、天然ＩＴＡＭ３を含む。ある実施形態では、天然ＩＴＡＭ３は、以下に提供される配列番号２３で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱ［配列番号２３］

配列番号２３のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号２４で表され、以下に提供される。
ＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧ［配列番号２４］

ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、ＩＴＡＭ３変異体を含む。ある実施形態では、ＩＴＡＭ３変異体は、２つの機能喪失変異を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、１つ以上（例えば、２つ）の機能喪失変異のそれぞれは、ＩＴＡＭ３におけるチロシン残基の突然変異を含む。ある実施形態では、ＩＴＡＭ３変異体は、２つの機能喪失変異を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＩＴＡＭ３変異体は、以下に提供される配列番号２５で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＨＤＧＬＦＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＦＤＡＬＨＭＱ［配列番号２５］

配列番号２５のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号２６で表され、以下に提供される。
Ｃａｃｇａｔｇｇｃｃｔｔｔｔｃｃａｇｇｇｔｃｔｃａｇｔａｃａｇｃｃａｃｃａａｇｇａｃａｃｃｔｔｃｇａｃｇｃｃｃｔｔｃａｃａｔｇｃａｇ［配列番号２６］

様々な改変ＣＤ３ζポリペプチド及び改変ＣＤ３ζポリペプチドを含むＣＡＲは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる国際特許出願公開第ＷＯ２０１９／１３３９６９号に開示されている。

ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、天然ＩＴＡＭ１、１つ以上（例えば２つ）の機能喪失変異を含むか、またはそれらからなるＩＴＡＭ２変異体、及び１つ以上（例えば２つ）の機能喪失変異を含むか、またはそれらからなるＩＴＡＭ３変異体、を含む改変ＣＤ３ζポリペプチドを含む。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、天然ＩＴＡＭ１、２つの機能喪失変異からなるＩＴＡＭ２変異体、及び２つの機能喪失変異からなるＩＴＡＭ３変異体を含む改変ＣＤ３ζポリペプチドを含む。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号１５で表されるアミノ酸配列からなる天然ＩＴＡＭ１、配列番号２１で表されるアミノ酸配列からなるＩＴＡＭ２変異体、及び配列番号２５で表されるアミノ酸配列からなるＩＴＡＭ３変異体を含む改変ＣＤ３ζポリペプチドを含む。ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは「１ＸＸ」と表される。ある実施形態では、改変ＣＤ３ζポリペプチドは、配列番号２７で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。配列番号２７は以下に提供される。
ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＦＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＦＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＦＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＦＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ［配列番号２７］

ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号２７と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、少なくとも約１００％同一であるアミノ酸配列またはそれらのフラグメントを含むかまたはそれからなる改変ＣＤ３ζポリペプチドを含み、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。

配列番号２７のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号２８で表され、以下に提供される。
ａｇａｇｔｇａａｇｔｔｃａｇｃａｇｇａｇｃｇｃａｇａｃｇｃｃｃｃｃｇｃｇｔａｃｃａｇｃａｇｇｇｃｃａｇａａｃｃａｇｃｔｃｔａｔａａｃｇａｇｃｔｃａａｔｃｔａｇｇａｃｇａａｇａｇａｇｇａｇｔａｃｇａｔｇｔｔｔｔｇｇａｃａａｇａｇａｃｇｔｇｇｃｃｇｇｇａｃｃｃｔｇａｇａｔｇｇｇｇｇｇａａａｇｃｃｇａｇａａｇｇａａｇａａｃｃｃｔｃａｇｇａａｇｇｃｃｔｇｔｔｃａａｔｇａａｃｔｇｃａｇａａａｇａｔａａｇａｔｇｇｃｇｇａｇｇｃｃｔｔｃａｇｔｇａｇａｔｔｇｇｇａｔｇａａａｇｇｃｇａｇｃｇｃｃｇｇａｇｇｇｇｃａａｇｇｇｇｃａｃｇａｔｇｇｃｃｔｔｔｔｃｃａｇｇｇｔｃｔｃａｇｔａｃａｇｃｃａｃｃａａｇｇａｃａｃｃｔｔｃｇａｃｇｃｃｃｔｔｃａｃａｔｇｃａｇｇｃｃｃｔｇｃｃｃｃｃｔｃｇｃ［配列番号２８］

ある実施形態では、ＣＡＲは第２世代ＣＡＲである。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、少なくとも共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。ある実施形態では、共刺激シグナル伝達領域は、少なくとも１つの共刺激分子の細胞内ドメインまたはそのフラグメントを含む。

本明細書で使用するとき、「共刺激分子」とは、抗原に対するリンパ球の効率的応答を提供することができる、抗原受容体またはそのリガンド以外の細胞表面分子を指す。ある実施形態では、共刺激分子は最適なリンパ球活性化を提供することができる。共刺激分子の非限定的な例としては、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ－１０、ＣＤ２７、ＣＤ４０、及びＮＫＧＤ２が挙げられる。共刺激分子は、共刺激リガンドに結合することができる。共刺激リガンドは、細胞表面に発現するタンパク質であり、その受容体に結合すると共刺激応答を、すなわち、キメラ受容体（例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ））が標的抗原に結合したときに提供される刺激を生じさせる細胞内応答を、生成する。一例として、４－１ＢＢリガンド（すなわち、４－１ＢＢＬ）は、ＣＡＲシグナルと組み合わせてＣＡＲ^＋Ｔ細胞のエフェクター細胞機能を誘導する細胞内シグナルを提供するために、４－１ＢＢに結合し得る。

ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８ポリペプチド、例えばＣＤ２８の細胞内ドメインまたはそのフラグメントを含む共刺激シグナル伝達領域を含む。ある実施形態では、ＣＤ２８は、配列番号１０で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、少なくとも約１００％相同または同一であるアミノ酸配列またはそのフラグメントを含むかまたはそれからなり、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、少なくとも約２０、または少なくとも約３０、または少なくとも約４０、または少なくとも約５０、及び最大約２２０のアミノ酸長である配列番号１０の連続部分であるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、配列番号１０のアミノ酸１～２２０、１～５０、５０～１００、１００～１５０、１１４～２２０、１５０～２００、１８０～２２０、または２００～２２０を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号１０のアミノ酸１８０～２２０を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む共刺激シグナル伝達領域を含む。

配列番号１０のアミノ酸１８０～２２０をコードする例示的な核酸配列は、配列番号２９で表され、以下に提供される。
Ａｇｇａｇｔａａｇａｇｇａｇｃａｇｇｃｔｃｃｔｇｃａｃａｇｔｇａｃｔａｃａｔｇａａｃａｔｇａｃｔｃｃｃｃｇｃｃｇｃｃｃｃｇｇｇｃｃｃａｃｃｃｇｃａａｇｃａｔｔａｃｃａｇｃｃｃｔａｔｇｃｃｃｃａｃｃａｃｇｃｇａｃｔｔｃｇｃａｇｃｃｔａｔｃｇｃｔｃｃ［配列番号２９］

ある実施形態では、ＣＤ２８は、配列番号１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、少なくとも約１００％相同または同一であるアミノ酸配列またはそのフラグメントを含むかまたはそれからなり、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、少なくとも約２０、または少なくとも約３０、または少なくとも約４０、または少なくとも約５０、及び最大２１８のアミノ酸長である配列番号１２の連続部分であるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＣＤ２８ポリペプチドは、配列番号１２のアミノ酸１～２１８、１～５０、５０～１００、１００～１５０、１５０～２１８、１７８～２１８、または２００～２１８を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、本開示のＣＡＲの共刺激シグナル伝達領域は、配列番号１２のアミノ酸１７８～２１８を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。

ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、４－１ＢＢポリペプチド、例えば、４－１ＢＢの細胞内ドメインまたはそのフラグメント（例えば、ヒト４－１ＢＢの細胞内ドメインまたはそのフラグメント）を含む共刺激シグナル伝達領域を含む。４－１ＢＢは、ＮＣＢＩ参照番号ＮＰ＿００１５５２（配列番号３０）を有するアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、少なくとも約１００％相同または同一であるアミノ酸配列またはそれらのフラグメントを含むかまたはそれからなる場合があり、及び／または任意選択で、１つまで、または２つまで、または３つまでの保存的アミノ酸置換を含み得る。ある実施形態では、４－１ＢＢポリペプチドは、少なくとも約２０、または少なくとも約３０、または少なくとも約４０、または少なくとも約５０、または少なくとも約１００、または少なくとも約１５０、または少なくとも約１５０、及び最大約２５５のアミノ酸長である配列番号３０の連続部分であるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、４－１ＢＢポリペプチドは、配列番号３０のアミノ酸１～２５５、１～５０、５０～１００、１００～１５０、１５０～２００、２００～２５５、または２１４～２５５を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号３０のアミノ酸２１４～２５５を含むか、またはそれらからなる４－１ＢＢポリペプチドを含む共刺激シグナル伝達領域を含む。配列番号３０は以下に提供される。
１ＭＧＮＳＣＹＮＩＶＡＴＬＬＬＶＬＮＦＥＲＴＲＳＬＱＤＰＣＳＮＣＰＡＧＴＦＣＤＮＮＲＮＱＩＣＳＰＣＰＰＮＳＦＳＳＡＧＧＱＲ
６１ＴＣＤＩＣＲＱＣＫＧＶＦＲＴＲＫＥＣＳＳＴＳＮＡＥＣＤＣＴＰＧＦＨＣＬＧＡＧＣＳＭＣＥＱＤＣＫＱＧＱＥＬＴＫＫＧＣＫＤＣ
１２１ＣＦＧＴＦＮＤＱＫＲＧＩＣＲＰＷＴＮＣＳＬＤＧＫＳＶＬＶＮＧＴＫＥＲＤＶＶＣＧＰＳＰＡＤＬＳＰＧＡＳＳＶＴＰＰＡＰＡＲＥ
１８１ＰＧＨＳＰＱＩＩＳＦＦＬＡＬＴＳＴＡＬＬＦＬＬＦＦＬＴＬＲＦＳＶＶＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧ
２４１ＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ［配列番号３０］

配列番号３０のアミノ酸２１４～２５５をコードする例示的な核酸配列は、配列番号３１で表され、以下に提供される。
ａａａｃｇｇｇｇｃａｇａａａｇａａｇｃｔｃｃｔｇｔａｔａｔａｔｔｃａａａｃａａｃｃａｔｔｔａｔｇａｇａｃｃａｇｔａｃａａａｃｔａｃｔｃａａｇａｇｇａａｇａｔｇｇｃｔｇｔａｇｃｔｇｃｃｇａｔｔｔｃｃａｇａａｇａａｇａａｇａａｇｇａｇｇａｔｇｔｇａａｃｔｇ［配列番号３１］

ある実施形態では、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、２つ以上の共刺激分子の細胞内ドメインまたはその部分、例えばＣＤ２８の細胞内ドメインまたはそのフラグメント、及び４－１ＢＢの細胞内ドメインまたはそのフラグメント、あるいはＣＤ２８の細胞内ドメインまたはそのフラグメント、及びＯＸ４０の細胞内ドメインまたはそのフラグメントを含む共刺激シグナル伝達領域を含む。

５．２．２．キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）
ある実施形態では、キメラ受容体は、ＣＣＲである。本開示のＣＣＲは、抗原（例えば、ＡＤＧＲＥ２またはＣＬＥＣ１２Ａ）に結合し、共刺激シグナルを提供するが、単独では活性化シグナルを提供しない。ある実施形態では、ＣＣＲはＣＤ３ζポリペプチドを含まない。ＣＣＲは、抗原提示細胞上の天然の共刺激リガンドの非存在下で、共刺激、例えばＣＤ２８様シグナルを提供する。組み合わせ抗原認識、すなわちＣＣＲをＣＡＲと組み合わせて使用すると、二重抗原発現Ｔ細胞に対するＴ細胞の反応性が増強され、それによって選択的な腫瘍標的化が向上され得る。Ｋｌｏｓｓｅｔａｌ．は、組み合わせ抗原認識、スプリットシグナル伝達、ならびに臨界においてバランスのとれたＴ細胞の活性化及び共刺激の強度を統合して、各抗原を個別に発現する細胞を温存しつつ、抗原の組み合わせを発現する標的細胞を排除するＴ細胞を生成する戦略を記載している（その内容全体が参照により組み込まれる、Ｋｌｏｓｓｅｔａｌ．，ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（２０１３）；３１（１）：７１－７５）。このアプローチでは、Ｔ細胞の活性化は、１つの抗原のＣＡＲ媒介認識を必要とするが、共刺激は、第２の抗原に特異的なＣＣＲによって独立して媒介される。腫瘍選択性を達成するために、組み合わせ抗原認識アプローチは、第２の抗原の同時ＣＣＲ認識による救済がなければ効果がなくなるレベルまでＴ細胞活性化の効率を低下させる。

ある実施形態では、ＣＣＲは、抗原（例えば、ＡＤＧＲＥ２またはＣＬＥＣ１２Ａ）に結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び少なくとも１つの共刺激分子の細胞内ドメインまたはそのフラグメントを含む共刺激シグナル伝達領域を含む。ある実施形態では、ＣＣＲは、単独では活性化シグナルを免疫応答性細胞に送達しない。共刺激分子の非限定的な例としては、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ－１０、ＣＤ２７、ＣＤ４０、及びＮＫＧＤ２が挙げられる。ある実施形態では、ＣＣＲの共刺激シグナル伝達領域は、共刺激シグナル伝達分子の細胞内ドメインまたはそのフラグメントを含む。ある実施形態では、１つの共刺激シグナル伝達分子はＣＤ２８である。ある実施形態では、１つの共刺激シグナル伝達分子は４－１ＢＢである。ある実施形態では、ＣＣＲの共刺激シグナル伝達領域は、第１の共刺激シグナル伝達分子の細胞内ドメインまたはそのフラグメントと、第２の共刺激シグナル伝達分子の細胞内ドメインまたはそのフラグメントとを含む。ある実施形態では、第１の共刺激シグナル伝達分子及び第２の共刺激シグナル伝達分子は、ＣＤ２８及び４－１ＢＢである。

ＣＡＲと同様に、ＣＣＲの細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）_２、またはＣＣＲの細胞外抗原結合ドメインを形成する異種配列との融合タンパク質であり得る。

５．２．３．ＴＣＲ様融合分子
ある実施形態では、キメラ受容体は、ＴＣＲ様融合分子である。ＴＣＲ融合分子の非限定的な例としては、ＨＬＡ非依存性ＴＣＲベースのキメラ抗原受容体（「ＨＩＴ－ＣＡＲ」としても知られ、例えば、その全体が参照により組み込まれる国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ１９／０１７５２５号に開示されたもの）、Ｔ細胞受容体融合構造体（ＴＲｕＣ）（例えば、その全体が参照により組み込まれる、Ｂａｅｕｅｒｌｅｅｔａｌ．， “ＳｙｎｔｈｅｔｉｃＴＲｕＣｒｅｃｅｐｔｏｒｓｅｎｇａｇｉｎｇｔｈｅｃｏｍｐｌｅｔｅＴｃｅｌｌｒｅｃｅｐｔｏｒｆｏｒｐｏｔｅｎｔａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒｒｅｓｐｏｎｓｅ，” ＮａｔｕｒｅＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓｖｏｌｕｍｅ１０，Ａｒｔｉｃｌｅｎｕｍｂｅｒ：２０８７（２０１９）に開示されたもの）、合成Ｔ細胞受容体及び抗原受容体（ＳＴＡＲ）（例えば、その全体が参照により組み込まれる、Ｌｉｕｅｔａｌ．ＳｃｉｅｎｃｅＴｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ（２０２１）；１３（５８６）：ｅａｂｂ５１９１に開示されたもの）、抗体－Ｔ細胞受容体（ＡｂＴＣＲ）（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｘｕｅｔａｌ．ＣｅｌｌＤｉｓｃｏｖｅｒｙ（２０１８）４：６２に開示されたもの）、ならびにＴ細胞抗原カプラ（ＴＡＣ）（例えば、その全体が参照により組み込まれる、Ｈｅｌｓｅｎｅｔａｌ．ＮａｔｕｒｅＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ（２０１８）；９：３０４９に開示されたもの）が挙げられる。

ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子は、細胞外抗原結合ドメイン及び定常ドメインを含む抗原結合鎖を含み、ＴＣＲ様融合分子は、ＨＬＡ非依存的に抗原に結合する。ある実施形態では、定常ドメインは、天然または改変されたＴＲＡＣポリペプチド、天然または改変されたＴＲＢＣポリペプチド、天然または改変されたＴＲＤＣポリペプチド、天然または改変されたＴＲＧＣポリペプチド、及び任意の変異体またはその機能的フラグメントからなる群から選択されるＴ細胞受容体定常領域を含む。ある実施形態では、定常ドメインは、天然または改変されたＴＲＡＣポリペプチドを含む。ある実施形態では、定常ドメインは、天然または改変されたＴＲＢＣポリペプチドを含む。ある実施形態では、定常ドメインは、別の定常ドメインとホモ二量体またはヘテロ二量体を形成することができる。ある実施形態では、抗原結合鎖は、ＣＤ３ζポリペプチドと結合することができる。ある実施形態では、抗原結合鎖は、抗原（例えば、ＡＤＧＲＥ２またはＣＬＥＣ１２Ａ）に結合すると、抗原結合鎖に結合するＣＤ３ζポリペプチドを活性化することができる。ある実施形態では、ＣＤ３ζポリペプチドの活性化は、免疫応答性細胞を活性化することができる。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子は、ＣＤ３複合体と統合して、ＨＬＡ非依存性抗原認識を提供することができる。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体中の内因性ＴＣＲを置換する。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子の細胞外抗原結合ドメインは、別の細胞外抗原結合ドメインと二量体化することができる。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子の細胞外抗原結合ドメインは、細胞表面受容体に対するリガンド、細胞表面リガンドに対する受容体、抗体もしくはそのフラグメントの抗原結合部分、またはＴＣＲの抗原結合部分を含む。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子の細胞外抗原結合ドメインは、１つまたは２つの免疫グロブリン可変領域（複数可）を含む。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子の細胞外抗原結合ドメインは、抗体の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含む。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子の細胞外抗原結合ドメインは、抗体の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子の細胞外抗原結合ドメインは、別の細胞外抗原結合ドメインと二量体化することができる。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子の細胞外抗原結合ドメインは、抗体のＶ_Ｈを含み、Ｖ_Ｈは、抗体のＶ_Ｌを含む別の細胞外抗原結合ドメインと二量体化して、フラグメント変数（Ｆｖ）を形成することができる。ある実施形態では、ＴＣＲ様融合分子の細胞外抗原結合ドメインは、抗体のＶ_Ｌを含み、Ｖ_Ｌは、抗体のＶ_Ｈを含む別の細胞外抗原結合ドメインと二量体化して、フラグメント変数（Ｆｖ）を形成することができる。

５．３．ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン
ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ＡＤＧＲＥ２を標的とする。ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ＡＤＧＲＥ２に結合する細胞外抗原結合ドメインを含む。

接着Ｇタンパク質共役型受容体Ｅ２（ＡＤＧＲＥ２）は、ＥＭＲ２、ＣＤ３１２、ＶＢＵ、またはＣＤ９７としても知られており、接着ＧＰＣＲファミリーのメンバーである。これは、単球／マクロファージ、樹状細胞、及びあらゆる種類の顆粒球によって発現される。ＡＤＧＲＥ２は、グリコサミノグリカン鎖のコンドロイチン硫酸部分に結合し、細胞付着性を促進する細胞表面受容体である。これは、顆粒球の走化性、脱顆粒、接着を促進する。マクロファージでは、ＡＤＧＲＥ２は、ＩＬ８及びＴＮＦを含む炎症性サイトカインの放出を促進する。シグナルは、大方、Ｇタンパク質を介して伝達される。

ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ヒトＡＤＧＲＥ２を標的とする。ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ヒトＡＤＧＲＥ２に結合する細胞外抗原結合ドメインを含む。ある実施形態では、ヒトＡＤＧＲＥ２は、Ｕｎｉｐｒｏｔ参照番号Ｑ９ＵＨＸ３－１（配列番号３２）を有するアミノ酸配列、またはそのフラグメントを含むか、またはそれからなる。配列番号３２は以下に提供される。
ＭＧＧＲＶＦＬＶＦＬＡＦＣＶＷＬＴＬＰＧＡＥＴＱＤＳＲＧＣＡＲＷＣＰＱＤＳＳＣＶＮＡＴＡＣＲＣＮＰＧ
ＦＳＳＦＳＥＩＩＴＴＰＭＥＴＣＤＤＩＮＥＣＡＴＬＳＫＶＳＣＧＫＦＳＤＣＷＮＴＥＧＳＹＤＣＶＣＳＰＧＹ
ＥＰＶＳＧＡＫＴＦＫＮＥＳＥＮＴＣＱＤＶＤＥＣＱＱＮＰＲＬＣＫＳＹＧＴＣＶＮＴＬＧＳＹＴＣＱＣＬＰＧ
ＦＫＬＫＰＥＤＰＫＬＣＴＤＶＮＥＣＴＳＧＱＮＰＣＨＳＳＴＨＣＬＮＮＶＧＳＹＱＣＲＣＲＰＧＷＱＰＩＰＧ
ＳＰＮＧＰＮＮＴＶＣＥＤＶＤＥＣＳＳＧＱＨＱＣＤＳＳＴＶＣＦＮＴＶＧＳＹＳＣＲＣＲＰＧＷＫＰＲＨＧＩ
ＰＮＮＱＫＤＴＶＣＥＤＭＴＦＳＴＷＴＰＰＰＧＶＨＳＱＴＬＳＲＦＦＤＫＶＱＤＬＧＲＤＹＫＰＧＬＡＮＮＴ
ＩＱＳＩＬＱＡＬＤＥＬＬＥＡＰＧＤＬＥＴＬＰＲＬＱＱＨＣＶＡＳＨＬＬＤＧＬＥＤＶＬＲＧＬＳＫＮＬＳＮ
ＧＬＬＮＦＳＹＰＡＧＴＥＬＳＬＥＶＱＫＱＶＤＲＳＶＴＬＲＱＮＱＡＶＭＱＬＤＷＮＱＡＱＫＳＧＤＰＧＰＳ
ＶＶＧＬＶＳＩＰＧＭＧＫＬＬＡＥＡＰＬＶＬＥＰＥＫＱＭＬＬＨＥＴＨＱＧＬＬＱＤＧＳＰＩＬＬＳＤＶＩＳ
ＡＦＬＳＮＮＤＴＱＮＬＳＳＰＶＴＦＴＦＳＨＲＳＶＩＰＲＱＫＶＬＣＶＦＷＥＨＧＱＮＧＣＧＨＷＡＴＴＧＣ
ＳＴＩＧＴＲＤＴＳＴＩＣＲＣＴＨＬＳＳＦＡＶＬＭＡＨＹＤＶＱＥＥＤＰＶＬＴＶＩＴＹＭＧＬＳＶＳＬＬＣ
ＬＬＬＡＡＬＴＦＬＬＣＫＡＩＱＮＴＳＴＳＬＨＬＱＬＳＬＣＬＦＬＡＨＬＬＦＬＶＡＩＤＱＴＧＨＫＶＬＣＳ
ＩＩＡＧＴＬＨＹＬＹＬＡＴＬＴＷＭＬＬＥＡＬＹＬＦＬＴＡＲＮＬＴＶＶＮＹＳＳＩＮＲＦＭＫＫＬＭＦＰＶ
ＧＹＧＶＰＡＶＴＶＡＩＳＡＡＳＲＰＨＬＹＧＴＰＳＲＣＷＬＱＰＥＫＧＦＩＷＧＦＬＧＰＶＣＡＩＦＳＶＮＬ
ＶＬＦＬＶＴＬＷＩＬＫＮＲＬＳＳＬＮＳＥＶＳＴＬＲＮＴＲＭＬＡＦＫＡＴＡＱＬＦＩＬＧＣＴＷＣＬＧＩＬ
ＱＶＧＰＡＡＲＶＭＡＹＬＦＴＩＩＮＳＬＱＧＶＦＩＦＬＶＹＣＬＬＳＱＱＶＲＥＱＹＧＫＷＳＫＧＩＲＫＬＫ
ＴＥＳＥＭＨＴＬＳＳＳＡＫＡＤＴＳＫＰＳＴＶＮ
［配列番号３２］

ヒトＡＤＧＲＥ２は、ＥＧＦ様１ドメイン、ＥＧＦ様２ドメイン、ＥＧＦ様３ドメイン、ＥＧＦ様４ドメイン、ＥＧＦ様５ドメイン、及びＧＰＳドメインを含む。ある実施形態では、ＥＧＦ様１ドメインは、配列番号３２のアミノ酸２５～６６を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＥＧＦ様２ドメインは、配列番号３２のアミノ酸６７～１１８を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＥＧＦ様３ドメインは、配列番号３２のアミノ酸１１９～１６２を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＥＧＦ様４ドメインは、配列番号３２のアミノ酸１６３～２１１を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＥＧＦ様５ドメインは、配列番号３２のアミノ酸２１２～２６０を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、ＧＰＳドメインは、配列番号３２のアミノ酸４７９～５２９を含むか、またはそれらからなる。

ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、配列番号３２で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、少なくとも約１００％同一であるアミノ酸配列またはそのフラグメントを含むかまたはそれからなるＡＤＧＲＥ２ポリペプチドを標的とする。

ある実施形態では、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＡＤＧＲＥ２のストーク領域に結合する。ある実施形態では、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＡＤＧＲＥ２のＧＰＳドメインに結合する。ある実施形態では、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＡＤＧＲＥ２のＥＧＦ様５ドメインに結合する。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、セクション５．２．１に開示される構造を有する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、ＡＤＧＲＥ２に結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体はキメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）である。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＣＲは、セクション５．２．２に開示される構造を有する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＣＲは、ＡＤＧＲＥ２に結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び免疫応答性細胞に活性化シグナルを提供しない細胞内シグナル伝達ドメインを含み、例えば、細胞内シグナル伝達ドメインはＣＤ３ζポリペプチドを含まない。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体は、ＴＣＲ様融合分子である。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＴＣＲ様融合分子は、セクション５．２．３に開示される構造を有する。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、少なくとも約１×１０^－６Ｍ、少なくとも約１×１０^－７Ｍ、少なくとも約１×１０^－８Ｍ、少なくとも約１×１０^－９Ｍ、または少なくとも約１×１０^－１０Ｍの解離定数（Ｋ_Ｄ）でＡＤＧＲＥ２（例えば、ヒトＡＤＧＲＥ２）に結合する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、約２×１０^－８Ｍの解離定数（Ｋ_Ｄ）を有するＡＤＧＲＥ２（例えば、ヒトＡＤＧＲＥ２）に結合する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、約２×１０^－８Ｍ～約８×１０^－９Ｍの解離定数（Ｋ_Ｄ）を有するＡＤＧＲＥ２（例えば、ヒトＡＤＧＲＥ２）に結合する。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、約１ｎＭ～約５０ｎＭ、約５ｎＭ～約３０ｎＭ、約５ｎＭ～約２５ｎＭ、または約８ｎＭ～約２０ｎＭの解離定数（Ｋ_Ｄ）でＡＤＧＲＥ２（例えば、ヒトＡＤＧＲＥ２）に結合する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、少なくとも約５０ｎＭ、少なくとも約４０ｎＭ、少なくとも約３５ｎＭ、少なくとも約３０ｎＭ、少なくとも約２５ｎＭ、少なくとも約２０ｎＭ、少なくとも約１９ｎＭ、少なくとも約１８ｎＭ、少なくとも約１７ｎＭ、少なくとも約１６ｎＭ、少なくとも約１５ｎＭ、少なくとも約１４ｎＭ、少なくとも約１３ｎＭ、少なくとも約１２ｎＭ、少なくとも約１１ｎＭ、少なくとも約１０ｎＭ、少なくとも約９ｎＭ、少なくとも約８ｎＭ、少なくとも約７ｎＭ、少なくとも約６ｎＭ、または少なくとも約５ｎＭの解離定数（Ｋ_Ｄ）でＡＤＧＲＥ２（例えば、ヒトＡＤＧＲＥ２）に結合する。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号３３～３５を表１に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号３６～３８を表１に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３９で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３９と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号３９を以下の表１に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４０で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４０と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号４０を以下の表１に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは、配列番号４１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは「ＡＤＧＲＥ２－Ａ」と表される。配列番号４１のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号４２で表される。配列番号４１及び４２を表１に示す。表１に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号３３～３５を表１及び表２に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号３６～３８を表１及び表２に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４３で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４３で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号４３を以下の表２に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４４で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、キメラ受容体（例えば、ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４４で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号４４を以下の表２に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号４４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは、表２に提供される配列番号４５で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは「ＡＤＧＲＥ２－Ｂ」と表される。表２に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号３３～３５を表１～３に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号３６～３８を表１～３に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、キメラ受容体（例えば、ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４６で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号４６を以下の表３に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４７で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号４７を以下の表３に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号４７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは、表３に提供される配列番号４８で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは「ＡＤＧＲＥ２－Ｃ」と表される。表３に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号３３～３５を表１～４に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号３６～３８を表１～４に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４９で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４９で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号４９を以下の表４に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５０で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５０で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号５０を以下の表４に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは、表４に提供される配列番号５１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは「ＡＤＧＲＥ２－Ｄ」と表される。表４に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号３４～３６を表１～５に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号３６～３８を表１～５に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５２で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５２で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号５２を以下の表５に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５３で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５３で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号５３を以下の表５に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号５３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは、表５に提供される配列番号５４で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは「ＡＤＧＲＥ２－Ｅ」と表される。表５に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号３３～３５を表１～６に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号３６～３８を表１～６に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５５で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号５５を以下の表６に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５６で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号５６を以下の表６に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号５６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは、表６に提供される配列番号５７で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは「ＡＤＧＲＥ２－Ｆ」と表される。表６に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号３３～３５を表１～７に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号３６～３８を表１～７に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４６で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号１４６を以下の表７に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４７で表されるアミノ酸配列と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号１４７を以下の表７に示す。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１４６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号１４７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは、表７に提供される配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ｓｃＦｖは「ＡＤＧＲＥ２－Ｇ」と表される。表７に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

特定配列（例えば、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５６、配列番号１４６、または配列番号１４７）に対して、少なくとも約８０％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％（例えば、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、または約９９％）の相同性または同一性を含むかまたはそれからなるＶ_Ｈ及び／またはＶ_Ｌアミノ酸配列は、特定の配列（複数可）に対して置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含み得るが、標的抗原（例えば、ＡＤＧＲＥ２）に結合する能力を保持する。ある実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、特定の配列（例えば、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５６、配列番号１４６、または配列番号１４７）において置換、挿入、及び／または欠失が行われる。ある実施形態では、置換、挿入、または欠失は、細胞外抗原結合ドメインのＣＤＲの外側の領域（例えば、ＦＲ内）で生じる。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、その配列（配列番号３９、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５６、配列番号１４６、または配列番号１４７）の翻訳後修飾を含む、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５６、配列番号１４６、または配列番号１４７から選択されるＶ_Ｈ及び／またはＶ_Ｌ配列を含む。

ある実施形態では、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＡＤＧＲＥ２への結合に関して、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合する。ある実施形態では、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＡＤＧＲＥ２への結合に関して、例えば、本開示のｓｃＦｖ（例えば、ＡＤＧＲＥ２－Ａ、ＡＤＧＲＥ２－Ｂ、ＡＤＧＲＥ２－Ｃ、ＡＤＧＲＥ２－Ｄ、ＡＤＧＲＥ２－Ｅ、ＡＤＧＲＥ２－Ｆ、及びＡＤＧＲＥ２－Ｇ）のいずれか１つのＶ_Ｈ配列及びＶ_Ｌ配列を含む参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合する。

ある実施形態では、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む参照抗体またはその抗原結合部分とＡＤＧＲＥ２上の同じまたは実質的に同じエピトープ領域に結合する。ある実施形態では、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、例えば、本開示のｓｃＦｖ（例えば、ＡＤＧＲＥ２－Ａ、ＡＤＧＲＥ２－Ｂ、ＡＤＧＲＥ２－Ｃ、ＡＤＧＲＥ２－Ｄ、ＡＤＧＲＥ２－Ｅ、ＡＤＧＲＥ２－Ｆ、及びＡＤＧＲＥ２－Ｇ）のいずれか１つのＶ_Ｈ配列及びＶ_Ｌ配列を含む参照抗体またはその抗原結合部分とＡＤＧＲＥ２上の同じまたは実質的に同じエピトープ領域に結合する。

ＡＤＧＲＥ２への結合に関して参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合または競合する、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＥＬＩＳＡ、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、Ｂｉａｃｏｒｅ、フローサイトメトリー、ウェスタンブロッティング、及び他の任意の適切な定量的または定性的抗体結合アッセイを含むが、これらに限定されない、当技術分野で公知の定型的方法を使用することによって同定することができる。競合ＥＬＩＳＡは、その全体が参照により組み込まれる、Ｍｏｒｒｉｓ， “ＥｐｉｔｏｐｅＭａｐｐｉｎｇｏｆＰｒｏｔｅｉｎＡｎｔｉｇｅｎｓｂｙＣｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎＥＬＩＳＡ”，ＴｈｅＰｒｏｔｅｉｎＰｒｏｔｏｃｏｌｓＨａｎｄｂｏｏｋ（１９９６），ｐｐ５９５－６００，ｅｄｉｔｅｄｂｙＪ．Ｗａｌｋｅｒに記載されている。ある実施形態では、抗体結合アッセイは、ＡＤＧＲＥ２に対する参照抗体の初期結合を測定することと、参照抗体を試験細胞外抗原結合ドメインと混合することと、試験細胞外抗原結合ドメインの存在下で、参照抗体のＡＤＧＲＥ２への二次結合を測定することと、参照抗体の初期結合と二次結合とを比較することとを含む。初期結合と比較して参照抗体のＡＤＧＲＥ２への二次結合が減少していることは、試験細胞外抗原結合ドメインが、ＡＤＧＲＥ２への結合に関して、参照抗体、例えば、同じまたは実質的に同じエピトープ、重複するエピトープ、または隣接するエピトープを認識する抗体と交差競合することを示す。ある実施形態では、参照抗体は、例えば、蛍光色素、ビオチン、またはペルオキシダーゼで標識される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２は、例えばフローサイトメトリー試験において細胞内で発現される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２は、（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ試験における）Ｂｉａｃｏｒｅシップ、または表面プラズモン共鳴分析に適した他の媒体を含む表面上に固定化される。完全に無関係な抗体（ＡＤＧＲＥ２に結合しない）の存在下での参照抗体の結合は、対照の高値として機能し得る。対照の低値は、標識参照抗体を未標識参照抗体とインキュベートすることによって得ることができ、その場合、標識参照抗体の競合及び結合の減少が起こることになる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２に対する参照抗体の結合を、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％だけ減少させる試験細胞外抗原結合ドメインは、ＡＤＧＲＥ２への結合に関して参照抗体と交差競合する細胞外抗原結合ドメインであるとみなされる。ある実施形態では、アッセイは室温で行われる。

ある実施形態では、抗体結合アッセイは、ＡＤＧＲＥ２に対する試験細胞外抗原結合ドメインの初期結合を測定することと、試験細胞外抗原結合ドメインを参照抗体と混合することと、参照抗体の存在下で、試験細胞外抗原結合ドメインのＡＤＧＲＥ２への二次結合を測定することと、試験細胞外抗原結合ドメインの初期結合と二次結合とを比較することとを含む。ここで、初期結合と比較して試験細胞外抗原結合ドメインのＡＤＧＲＥ２への二次結合が減少していることは、試験細胞外抗原結合ドメインが、ＡＤＧＲＥ２への結合に関して、参照抗体、例えば、同じまたは実質的に同じエピトープ、重複するエピトープ、または隣接するエピトープを認識する抗体と交差競合することを示す。ある実施形態では、試験細胞外抗原結合ドメインは、例えば、蛍光色素、ビオチン、またはペルオキシダーゼで標識される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２は、例えばフローサイトメトリー試験において細胞内で発現される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２は、（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ試験における）Ｂｉａｃｏｒｅシップ、または表面プラズモン共鳴分析に適した他の媒体を含む表面上に固定化される。完全に無関係な抗体（ＡＤＧＲＥ２に結合しない）の存在下での試験細胞外抗原結合ドメインの結合は、対照の高値として機能し得る。対照の低値は、標識試験細胞外抗原結合ドメインを未標識試験細胞外抗原結合ドメインとインキュベートすることによって得ることができ、この場合、標識試験細胞外抗原結合ドメインの競合及び結合の減少が起こることになる。ある実施形態では、参照抗体の存在下でＡＤＧＲＥ２への結合が、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９５％だけ減少する試験細胞外抗原結合ドメインは、ＡＤＧＲＥ２への結合に関して参照抗体と交差競合する細胞外抗原結合ドメインであるとみなされる。ある実施形態では、アッセイは室温で行われる。

ある実施形態では、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、細胞外抗原結合ドメインの重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを接続するリンカーを含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号３で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号４で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号５で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号６で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｌ－Ｖ_Ｈに配置される。

さらに、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体は、新生タンパク質を小胞体に導くリーダーまたはシグナルペプチドを含むことができる。ある実施形態では、リーダーまたはシグナルペプチドは、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に位置する（例えば、共有結合する）。キメラ受容体がグリコシル化されて細胞膜に固定される場合は、シグナルペプチドまたはリーダーが必須となり得る。シグナル配列またはリーダーは、分泌経路への進入を指示する、新たに合成されたタンパク質のＮ末端に存在するペプチド配列（約５、約１０、約１５、約２０、約２５、または約３０アミノ酸長）であり得る。シグナルペプチドまたはリーダー配列の非限定的な例としては、ＩＬ－２シグナル配列、ＣＤ８リーダー配列、カッパリーダー配列、アルブミンリーダー配列、及びプロラクチンリーダー配列が挙げられる。ある実施形態では、ＩＬ－２シグナル配列は、配列番号５８または配列番号５９で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、カッパリーダー配列は、配列番号６０または配列番号６１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＣＤ８シグナル配列は、配列番号６２または配列番号６３で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、アルブミンリーダー配列は、配列番号６４で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、プロラクチンリーダー配列は、配列番号６５で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体は、ＣＤ８ポリペプチドを含むシグナルペプチドを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体は、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＣＤ８ポリペプチドを含むシグナルペプチドを含む。
ＭＹＲＭＱＬＬＳＣＩＡＬＳＬＡＬＶＴＮＳ［配列番号５８］
ＭＹＳＭＱＬＡＳＣＶＴＬＴＬＶＬＬＶＮＳ［配列番号５９］
ＭＥＴＰＡＱＬＬＦＬＬＬＬＷＬＰＤＴＴＧ［配列番号６０］
ＭＥＴＤＴＬＬＬＷＶＬＬＬＷＶＰＧＳＴＧ［配列番号６１］
ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰ［配列番号６２］
ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡ［配列番号６３］
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＳＳＡＹＳ［配列番号６４］
ＭＤＳＫＧＳＳＱＫＧＳＲＬＬＬＬＬＶＶＳＮＬＬＬＣＱＧＶＶＳ［配列番号６５］

５．４．ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体の例
ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体は、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲである。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、（ａ）（ｉ）配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含むＶ_Ｈと、（ｉｉ）配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含むＶ_Ｌとを含む細胞外抗原結合ドメイン、（ｂ）ＣＤ２８ポリペプチドを含むヒンジ／スペーサー領域、（ｃ）ＣＤ２８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン（例えば、ヒトＣＤ２８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）、ならびに（ｄ）（ｉ）ＣＤ３ζポリペプチドと、（ｉｉ）ＣＤ２８ポリペプチド（例えば、ヒトＣＤ２８の細胞内ドメインまたはそのフラグメント）を含む共刺激シグナル伝達領域とを含む細胞内シグナル伝達ドメイン、を含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるリンカーを介して連結される。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、Ｎ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号１０のアミノ酸１５３～１７９を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、共刺激シグナル伝達領域は、配列番号１０のアミノ酸１８０～２２０を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、ヒンジ／スペーサー領域は、配列番号１０のアミノ酸１１４～１５２を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメイン及び膜貫通ドメインはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列からなる。配列番号１５０は以下に提供される。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、以下に提供される配列番号６６で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＶＡＫＰＧＡＳＶＫＬＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＷＭＱＷＩＫＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＡＶＹＰＧＤＧＤＴＲＨＴＱＫＦＫＧＫＡＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＶＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＦＴＡＹＧＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＭＳＡＳＰＧＥＲＶＴＭＳＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＱＳＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＦＴＩＳＳＭＥＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＬＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＡＡＡＩＥＶＭＹＰＰＰＹＬＤＮＥＫＳＮＧＴＩＩＨＶＫＧＫＨＬＣＰＳＰＬＦＰＧＰＳＫＰＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶＲＳＫＲＳＲＬＬＨＳＤＹＭＮＭＴＰＲＲＰＧＰＴＲＫＨＹＱＰＹＡＰＰＲＤＦＡＡＹＲＳＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＦＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＦＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＦＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＦＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ［配列番号６６］
ＲＡＡＡ［配列番号１５０］

例示的な核酸配列、配列番号６６のアミノ酸配列は、以下に提供される配列番号６７で表される。
ｃａａｇｔｔｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇａｇｃｇｇｃｇｃｃｇａａｇｔｇｇｃａａａｇｃｃｔｇｇａｇｃｇｔｃａｇｔｃａａｇｃｔｇｔｃｃｔｇｃａａａｇｃｇａｇｔｇｇｃｔａｔａｃｇｔｔｃａｃｇａａｃｔａｃｔｇｇａｔｇｃａｇｔｇｇａｔａａａｇｃａｇｇｃｔｃｃｃｇｇｇｃａｇｇｇｔｃｔｇｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇａｇｃｃｇｔｃｔａｃｃｃａｇｇｇｇａｃｇｇｃｇａｃａｃｃｃｇｇｃａｃａｃｔｃａａａａｇｔｔｃａａｇｇｇｃａａｇｇｃｃａｃｃｃｔｇａｃｃｇｃｔｇａｃａａｇａｇｃａｃａａｇｃａｃａｇｃｇｔａｃａｔｇｇａｇｇｔｇｔｃｃｔｃｔｔｔｇａｇａｔｃｃｇａａｇａｔａｃｃｇｃｔｇｔｇｔａｔｔａｔｔｇｔｇｃｃｃｇｇｇｇｃｔｔｃａｃｔｇｃａｔａｃｇｇｇａｔｇｇａｔｔａｃｔｇｇｇｇａｃａａｇｇｃａｃｔａｃｃｇｔｇａｃｔｇｔｃａｇｃｔｃｃｇｇｇｇｇｔｇｇａｇｇｃｔｃａｇｇｃｇｇｇｇｇｇｇｇｔｔｃａｇｇａｇｇｇｇｇｇｇｇａｔｃｔｇａａａｔｔｇｔｇｃｔｇａｃａｃａｇａｇｃｃｃｔｇｃｃａｃａａｔｇｔｃｔｇｃｔａｇｃｃｃｔｇｇｃｇａｇｃｇｃｇｔｇａｃｃａｔｇｔｃｔｔｇｔａｇｃｇｃｃａｇｃａｇｃａｇｃｇｔｇｔｃｃｔａｃａｔｇｃａｔｔｇｇｔａｔｃａａｃａｇａａｇｔｃｃｇｇｃｃａｇｔｃｔｃｃｃａａｇｃｇｇｔｇｇａｔｃｔａｃｇａｔａｃａａｇｃａａｇｃｔｇｇｃｃｔｃｃｇｇｃｇｔｇｃｃｃｇｃｃａｇａｔｔｔｔｃｔｇｇｃａｇｃｇｇｃｔｃｔｇｇａａｃａｇａｔｔａｃａｃｃｔｔｃａｃｃａｔｃｔｃｔａｇｃａｔｇｇａａｃｃｔｇａｇｇａｔｔｔｔｇｃｃａｃｃｔａｃｔａｔｔｇｃｃａｇｃａｇｔｇｇｔｃｃａｇｃａａｔｃｃｃｃｔｇａｃａｔｔｔｇｇａｇｇａｇｇｃａｃｃａａｇｃｔｇｇａａａｔｔａａｇａｇａｇｃｇｇｃｃｇｃａａｔｔｇａａｇｔｔａｔｇｔａｔｃｃｔｃｃｔｃｃｔｔａｃｃｔａｇａｃａａｔｇａｇａａｇａｇｃａａｔｇｇａａｃｃａｔｔａｔｃｃａｔｇｔｇａａａｇｇｇａａａｃａｃｃｔｔｔｇｔｃｃａａｇｔｃｃｃｃｔａｔｔｔｃｃｃｇｇａｃｃｔｔｃｔａａｇｃｃｃｔｔｔｔｇｇｇｔｇｃｔｇｇｔｇｇｔｇｇｔｔｇｇｔｇｇａｇｔｃｃｔｇｇｃｔｔｇｃｔａｔａｇｃｔｔｇｃｔａｇｔａａｃａｇｔｇｇｃｃｔｔｔａｔｔａｔｔｔｔｃｔｇｇｇｔｇａｇｇａｇｔａａｇａｇｇａｇｃａｇｇｃｔｃｃｔｇｃａｃａｇｔｇａｃｔａｃａｔｇａａｃａｔｇａｃｔｃｃｃｃｇｃｃｇｃｃｃｃｇｇｇｃｃｃａｃｃｃｇｃａａｇｃａｔｔａｃｃａｇｃｃｃｔａｔｇｃｃｃｃａｃｃａｃｇｃｇａｃｔｔｃｇｃａｇｃｃｔａｔｃｇｃｔｃｃａｇａｇｔｇａａｇｔｔｃａｇｃａｇｇａｇｃｇｃａｇａｃｇｃｃｃｃｃｇｃｇｔａｃｃａｇｃａｇｇｇｃｃａｇａａｃｃａｇｃｔｃｔａｔａａｃｇａｇｃｔｃａａｔｃｔａｇｇａｃｇａａｇａｇａｇｇａｇｔａｃｇａｔｇｔｔｔｔｇｇａｃａａｇａｇａｃｇｔｇｇｃｃｇｇｇａｃｃｃｔｇａｇａｔｇｇｇｇｇｇａａａｇｃｃｇａｇａａｇｇａａｇａａｃｃｃｔｃａｇｇａａｇｇｃｃｔｇｔｔｃａａｔｇａａｃｔｇｃａｇａａａｇａｔａａｇａｔｇｇｃｇｇａｇｇｃｃｔｔｃａｇｔｇａｇａｔｔｇｇｇａｔｇａａａｇｇｃｇａｇｃｇｃｃｇｇａｇｇｇｇｃａａｇｇｇｇｃａｃｇａｔｇｇｃｃｔｔｔｔｃｃａｇｇｇｔｃｔｃａｇｔａｃａｇｃｃａｃｃａａｇｇａｃａｃｃｔｔｃｇａｃｇｃｃｃｔｔｃａｃａｔｇｃａｇｇｃｃｃｔｇｃｃｃｃｃｔｃｇｃ［配列番号６７］

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端にシグナルペプチドを含む。ある実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＣＤ８ポリペプチドを含む。

５．５．ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン
ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ＣＬＥＣ１２Ａを標的とする。ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ＣＬＥＣ１２Ａに結合する細胞外抗原結合ドメインを含む。

Ｃ型レクチンドメインファミリー１２メンバーＡ（ＣＬＥＣ１２Ａ）は、ＣＬＬ－１、ＣＬＬ１、ＤＣＡＬ－２、ＭＩＣＬ、ＣＤ３７１としても知られており、３０ｋＤのＣ型レクチン膜貫通糖タンパク質である。これは、単球、顆粒球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、及び好塩基球で発現される。ＣＬＥＣ１２Ａは、Ｓｒｃ相同ホスファターゼＳＨＰ－１及びＳＨＰ－２をそのリン酸化細胞質免疫受容体チロシンベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）に導入する免疫抑制受容体である（Ｓａｎｃｈｏｅｔａｌ．，ＡｎｎｕＲｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ（２０１２）；３０：４９１－５２９；Ｙａｎｅｔａｌ．，ＦｒｏｎｔＩｍｍｕｎｏｌ（２０１５）；６：４０８；Ｌａｈｏｕｄｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ（２０１１）；１８７：８４２）。ＣＬＥＣ１２Ａは、自己免疫及び炎症性疾患を制御する負の調節性尿酸結晶（尿酸一ナトリウム、ＭＳＵ）受容体として関係があるとされている（Ｎｅｕｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ（２０１４）；４０：３８９－９９）。ＣＬＥＣ１２Ａは、顆粒球及び単球機能の負の調節因子である（Ｍａｒｓｈａｌｌｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ（２００４）；２７９（１５）：１４７９２－８０２；Ｐｙｚｅｔａｌ．，ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌ（２００８）；３８（４）：１１５７－６３）。

ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ヒトＣＬＥＣ１２Ａを標的とする。ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、ヒトＣＬＥＣ１２Ａに結合する細胞外抗原結合ドメインを含む。ある実施形態では、ヒトＣＬＥＣ１２Ａは、Ｕｎｉｐｒｏｔ参照番号Ｑ５ＱＧＺ９－２（配列番号６８）を有するアミノ酸配列、またはそのフラグメントを含むか、またはそれからなる。配列番号６８は以下に提供される。
ＭＳＥＥＶＴＹＡＤＬＱＦＱＮＳＳＥＭＥＫＩＰＥＩＧＫＦＧＥＫＡＰＰＡＰＳＨＶＷＲＰＡＡＬＦＬＴＬＬＣＬＬＬＬＩＧＬＧＶＬＡＳＭＦＨＶＴＬＫＩＥＭＫＫＭＮＫＬＱＮＩＳＥＥＬＱＲＮＩＳＬＱＬＭＳＮＭＮＩＳＮＫＩＲＮＬＳＴＴＬＱＴＩＡＴＫＬＣＲＥＬＹＳＫＥＱＥＨＫＣＫＰＣＰＲＲＷＩＷＨＫＤＳＣＹＦＬＳＤＤＶＱＴＷＱＥＳＫＭＡＣＡＡＱＮＡＳＬＬＫＩＮＮＫＮＡＬＥＦＩＫＳＱＳＲＳＹＤＹＷＬＧＬＳＰＥＥＤＳＴＲＧＭＲＶＤＮＩＩＮＳＳＡＷＶＩＲＮＡＰＤＬＮＮＭＹＣＧＹＩＮＲＬＹＶＱＹＹＨＣＴＹＫＫＲＭＩＣＥＫＭＡＮＰＶＱＬＧＳＴＹＦＲＥＡ
［配列番号６８］

ヒトＣＬＥＣ１２Ａは、細胞質ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞外ドメインを含む。ある実施形態では、細胞質ドメインは、配列番号６８のアミノ酸１～４３を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号６８のアミノ酸４４～６４を含むか、またはそれらからなる。ある実施形態では、細胞外ドメインは、配列番号６８のアミノ酸６５～２６５を含むか、またはそれらからなる。

ある実施形態では、本開示のキメラ受容体は、配列番号６８で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、少なくとも約１００％同一であるアミノ酸配列またはそのフラグメントを含むかまたはそれからなるＣＬＥＣＬ１２Ａポリペプチドを標的とする。

ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＣＬＥＣ１２Ａの細胞外ドメインに結合する。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＡＲは、セクション５．２．１に開示される構造を有する。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＡＲは、ＣＬＥＣ１２Ａに結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体はキメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）である。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲは、セクション５．２．２に開示される構造を有する。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲは、ＣＬＥＣ１２Ａに結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び免疫応答性細胞に活性化シグナルを提供しない細胞内シグナル伝達ドメインを含み、例えば、細胞内シグナル伝達ドメインはＣＤ３ζポリペプチドを含まない。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、ＴＣＲ様融合分子である。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＴＣＲ様融合分子は、セクション５．２．３に開示される構造を有する。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、少なくとも約１×１０^－６Ｍ、少なくとも約１×１０^－７Ｍ、少なくとも約１×１０^－８Ｍ、少なくとも約１×１０^－９Ｍ、または少なくとも約１×１０^－１０Ｍの解離定数（Ｋ_Ｄ）でＣＬＥＣ１２Ａ（例えば、ヒトＣＬＥＣ１２Ａ）に結合する。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、少なくとも約２×１０^－８Ｍの解離定数（Ｋ_Ｄ）を有するＣＬＥＣ１２Ａ（例えば、ヒトＣＬＥＣ１２Ａ）に結合する。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、約２×１０^－８Ｍ～約８×１０^－９Ｍの解離定数（Ｋ_Ｄ）を有するＣＬＥＣ１２Ａ（例えば、ヒトＣＬＥＣ１２Ａ）に結合する。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、約１ｎＭ～約５０ｎＭ、約５ｎＭ～３０ｎＭ、約５ｎＭ～約２５ｎＭ、または約８ｎＭ～約２０ｎＭの解離定数（Ｋ_Ｄ）でＣＬＥＣ１２Ａ（例えば、ヒトＣＬＥＣ１２Ａ）に結合する。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、少なくとも約５０ｎＭ、少なくとも約４０ｎＭ、少なくとも約３５ｎＭ、少なくとも約３０ｎＭ、少なくとも約２５ｎＭ、少なくとも約２０ｎＭ、少なくとも約１９ｎＭ、少なくとも約１８ｎＭ、少なくとも約１７ｎＭ、少なくとも約１６ｎＭ、少なくとも約１５ｎＭ、少なくとも約１４ｎＭ、少なくとも約１３ｎＭ、少なくとも約１２ｎＭ、少なくとも約１１ｎＭ、少なくとも約１０ｎＭ、少なくとも約９ｎＭ、少なくとも約８ｎＭ、少なくとも約７ｎＭ、少なくとも約６ｎＭ、少なくとも約５ｎＭの解離定数（Ｋ_Ｄ）でＣＬＥＣ１２Ａ（例えば、ヒトＣＬＥＣ１２Ａ）に結合する。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号６９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号６９～７１を表８に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号７２～７４を表８に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号６９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号７１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号７２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０８と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号７５を以下の表８に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０９と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号７６を以下の表８に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは、配列番号７９で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ａ」と表される。配列番号７９のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号８０で表される。配列番号７９及び８０を表８に示す。表８に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号８１～８３を表９に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号７３、８４、及び８５を表９に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号８４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８６と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号８６を以下の表９に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８７と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号８７を以下の表９に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号８７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは、表９に提供される配列番号８８で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｂ」と表される。表９に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号８９～９１を表１０に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号９２～９４を表１０に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号９１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号９２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９５と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号９５を以下の表１０に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９６と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号９６を以下の表１０に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号９６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは、表１０に提供される配列番号９７で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｃ」と表される。表１０に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号８９、９０、及び９８を表１１に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号９９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号９３、９９、及び１５１を表１１に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号９８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号９９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１００で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１００と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１００で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号１００を以下の表１１に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０１で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０１と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号１０１を以下の表１１に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１００で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは、表１１に提供される配列番号１０２で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｄ」と表される。表１１に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号８１、８３、及び１０３を表１２に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号７３、１０４、及び１０５を表１２に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１０４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０６と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号１０６を以下の表１２に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０７と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号１０７を以下の表１２に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号１０７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは、表１２に提供される配列番号１０８で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｅ」と表される。表１２に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号８３、１０３、及び１０９を表１３に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号７３、８５、及び１１０を表１３に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１１０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１０９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１１０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１１と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号１１１を以下の表１３に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１２と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号１１２を以下の表１３に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号１１２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは、表１３に提供される配列番号１１３で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｆ」と表される。表１３に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号１１４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号８９、９０、及び１１４を表１４に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号９３、１１５、及び１１６を表１４に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号１１４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１１５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号１１４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１１５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１７と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号１１７を以下の表１４に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１８で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１８と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１８で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号１１８を以下の表１４に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１１７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号１１８で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは、表１４に提供される配列番号１１９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｇ」と表される。表１４に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号１２２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号１２０～１２２を表１５に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号１２３～１２５を表１５に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号１２２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１２３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号１２２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１２３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、キメラ受容体（例えば、ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、キメラ受容体（例えば、ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２６と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号１２６を以下の表１５に示す。

ある実施形態では、キメラ受容体（例えば、ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、キメラ受容体（例えば、ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２７と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号１２７を以下の表１５に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは、表１５に提供される配列番号１２８で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｈ」と表される。表１５に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、及び配列番号１３１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含む。配列番号１２９～１３１を表１６に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。配列番号１３２～１３４を表１６に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列または保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１３５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１３５と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１３５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈを含む。配列番号１３５を以下の表１６に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％（例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％）相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１３６と約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％または約１００％相同または同一であるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。配列番号１３６を以下の表１６に示す。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖ）の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号１３５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ｓｃＦｖは、表１６に提供される配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ｓｃＦｖは「ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｊ」と表される。表１６に示すＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けシステムに従って識別される。

特定配列（例えば、配列番号７５、配列番号７６、配列番号８６、配列番号８７、配列番号９５、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１２、配列番号１１７、配列番号１１８、配列番号１２６、配列番号１２７、配列番号１３５、または配列番号１３６）に対して、少なくとも約８０％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％（例えば、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、または約９９％）の相同性または同一性を有するＶ_Ｈ及び／またはＶ_Ｌアミノ酸配列は、特定の配列（複数可）に対して置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含み得るが、標的抗原（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ）に結合する能力を保持する。ある実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、特定の配列（例えば、配列番号７５、配列番号７６、配列番号８６、配列番号８７、配列番号９５、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１２、配列番号１１７、配列番号１１８、配列番号１２６、配列番号１２７、配列番号１３５、または配列番号１３６）において置換、挿入、及び／または欠失が行われる。ある実施形態では、置換、挿入、または欠失は、細胞外抗原結合ドメインのＣＤＲの外側の領域（例えば、ＦＲ内）で生じる。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメインは、その配列（配列番号７５、配列番号７６、配列番号８６、配列番号８７、配列番号９５、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１２、配列番号１１７、配列番号１１８、配列番号１２６、配列番号１２７、配列番号１３５、または配列番号１３６）の翻訳後修飾を含む、配列番号７５、配列番号７６、配列番号８６、配列番号８７、配列番号９５、配列番号９６、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１１１、配列番号１１２、配列番号１１７、配列番号１１８、配列番号１２６、配列番号１２７、配列番号１３５、または配列番号１３６から選択されるＶ_Ｈ及び／またはＶ_Ｌ配列を含む。

ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＣＬＥＣ１２Ａへの結合に関して、例えば、本開示のｓｃＦｖ（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ａ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｂ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｃ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｄ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｅ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｆ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｇ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｈ、及びＣＬＥＣ１２Ａ－Ｊ）のいずれか１つのＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列、ならびにＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列を含む参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合する。ある実施形態では、本開示のキメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＣＬＥＣ１２Ａへの結合に関して、例えば、本開示のｓｃＦｖ（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ａ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｂ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｃ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｄ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｅ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｆ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｇ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｈ、及びＣＬＥＣ１２Ａ－Ｊ）のいずれか１つのＶ_Ｈ配列及びＶ_Ｌ配列を含む参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合する。

ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＣＬＥＣ１２Ａへの結合に関して、ｓｃＦｖＣＬＥＣ１２Ａ－ＡのＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列、ならびにＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列を含む参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合する。例えば、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＣＬＥＣ１２Ａへの結合に関して、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表される配列を有するアミノ酸を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号７４で表される配列を有するアミノ酸を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合する。ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＣＬＥＣ１２Ａへの結合に関して、ｓｃＦｖＣＬＥＣ１２Ａ－ＡのＶ_Ｈ及びＶ_Ｌ配列を含む参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合する。例えば、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ＣＬＥＣ１２Ａへの結合に関して、配列番号７５で表される配列を有するアミノ酸を含むＶ_Ｈ、及び配列番号７６で表される配列を有するアミノ酸を含むＶ_Ｌを含む参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合する。

ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、参照抗体またはその抗原結合部分と同じＣＬＥＣ１２Ａ上のエピトープに結合する。例えば、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、例えば、本開示のｓｃＦｖ（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ａ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｂ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｃ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｄ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｅ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｆ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｇ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｈ、及びＣＬＥＣ１２Ａ－Ｊ）のいずれか１つのＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列、ならびにＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列を含む参照抗体またはその抗原結合部分と同じＣＬＥＣ１２Ａ上のエピトープに結合する。ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、例えば、本開示のｓｃＦｖ（例えば、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ａ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｂ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｃ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｄ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｅ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｆ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｇ、ＣＬＥＣ１２Ａ－Ｈ、及びＣＬＥＣ１２Ａ－Ｊ）のいずれか１つのＶ_Ｈ配列及びＶ_Ｌ配列を含む参照抗体またはその抗原結合部分と同じＣＬＥＣ１２Ａ上のエピトープに結合する。

ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖＣＬＥＣ１２Ａ－ＡのＶ_ＨＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列、ならびにＶ_ＬＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列を含む参照抗体またはその抗原結合フラグメントと同じＣＬＥＣ１２Ａ上のエピトープに結合する。例えば、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ２、配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含む参照抗体またはその抗原結合フラグメントと同じＣＬＥＣ１２Ａ上のエピトープに結合する。ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖＣＬＥＣ１２Ａ－ＡのＶ_Ｈ配列及びＶ_Ｌ配列を含む参照抗体またはその抗原結合フラグメントと同じまたは実質的に同じＣＬＥＣ１２Ａ上のエピトープに結合する。例えば、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｈ、及び配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含むＶ_Ｌを含む参照抗体またはその抗原結合フラグメントと同じＣＬＥＣ１２Ａ上のエピトープに結合する。

ＣＬＥＣ１２Ａへの結合に関して参照抗体またはその抗原結合部分と交差競合または競合する、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインは、当技術分野で公知の定型的方法、例えばセクション５．３に開示されている方法を使用することによって同定することができる。

ある実施形態では、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラの細胞外抗原結合ドメインは、細胞外抗原結合ドメインの重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを接続するリンカーを含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号３で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号４で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号５で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号６で表されるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含む。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメイン内の可変領域は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）が配置されるように、次々に連結されなければならない。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインがｓｃＦｖである場合、可変領域はＮ末端からＣ末端へＶ_Ｌ－Ｖ_Ｈに配置される。

さらに、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、新生タンパク質を小胞体に導くリーダーまたはシグナルペプチドを含むことができる。ある実施形態では、リーダーまたはシグナルペプチドは、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の細胞外抗原結合ドメインのＮ末端に位置する（例えば、共有結合する）。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、セクション５．３に開示されるリーダーまたはシグナルペプチドを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、ＣＤ８ポリペプチドを含むシグナルペプチドを含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＣＤ８ポリペプチドを含むシグナルペプチドを含む。

５．６．ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体の例
ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体はＣＣＲである。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲは、（ａ）（ｉ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含むＶ_Ｈと、（ｉｉ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含むＶ_Ｌとを含む細胞外抗原結合ドメイン、（ｂ）４－１ＢＢポリペプチドを含む細胞内ドメイン（例えば、ヒト４－１ＢＢポリペプチド、例えば、その一部の４－１ＢＢ（例えば、ヒト４－１ＢＢ）の細胞内ドメイン）、を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲは、ＣＤ８ポリペプチド（例えば、ヒトＣＤ８ポリペプチド、例えば、ＣＤ８（例えば、ヒトＣＤ８）の膜貫通ドメインまたはその一部）を含む膜貫通ドメインをさらに含む。ある実施形態では、細胞内ドメインは、配列番号３０のアミノ酸２１４～２５５を含むか、またはそれらからなる４－１ＢＢポリペプチドを含む。ある実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号７のアミノ酸１３７～２０７を含むか、またはそれらからなるＣＤ８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、配列番号１４９で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるリンカーを介して連結される。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、Ｎ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、細胞外抗原結合ドメイン及び膜貫通ドメインはリンカーを介して連結される。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１５０で表されるアミノ酸配列からなる。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲは、以下に示される配列番号１３８で表されるアミノ酸配列を含む。
ＱＬＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＳＴＹＹＷＧＷＩＲＱＰＰＲＫＧＬＥＷＩＧＳＴＨＹＲＧＳＴＹＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＶＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＬＴＧＥＶＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＳＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＹＳＴＰＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫＲＡＡＡＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＮＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ［配列番号１３８］

例示的な核酸配列、配列番号１３８のアミノ酸配列は、以下に示される配列番号１３９で表される。
ｃａｇｃｔｃｃａｇｃｔｃｃａａｇａｇｔｃａｇｇｇｃｃａｇｇｔｃｔｃｇｔｇａａａｃｃｇａｇｔｇａｇａｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｇａｃｃｔｇｃａｃａｇｔｇａｇｔｇｇｔｇｇａｔｃａａｔｃｔｃａａｇｃｔｃｔａｃｃｔａｃｔａｔｔｇｇｇｇｇｔｇｇａｔｔｃｇｇｃａｇｃｃｃｃｃｔａｇａａａｇｇｇｇｃｔｔｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇｃａｇｃａｃｔｃａｔｔａｔｃｇａｇｇａｔｃｔａｃｃｔａｔｔａｔａａｔｃｃｔｔｃｔｃｔｇａａａａｇｃａｇａｇｔｔａｃｃａｔｃｔｃｔｇｔｇｇａｔａｃｇｔｃｃａａａａａｔｃａｇｔｔｃａｇｔｃｔｇａａｇｇｔａｔｃａｔｃｃｇｔｇａｃｔｇｃｔｇｃｃｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔｇｔａｃｔａｔｔｇｃｇｃｇａｇｇｇａｇｃｔｇａｃａｇｇｔｇａｇｇｔｃｔｔｔｇａｃｔａｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇｃａｃａｃｔｃｇｔｇａｃｃｇｔｇｔｃｔｔｃｔｇｃｃｔｃａａｃａｇｇａｇｇｇｇｇｔｇｇｇａｇｔｇｇａｇｇｃｇｇｔｇｇａｔｃａｇｇｇｇｇａｇｇａｇｇｇａｇｔｇａｃａｔｃｃａｇａｔｇａｃｇｃａｇｔｃｃｃｃｔｔｃｃａｇｃｔｔｇｔｃｃｇｃａｔｃｔｇｔｇｇｇｔｇａｔａｇｇｇｔｃａｃｇａｔｔａｃａｔｇｔａｇｇｇｃｔａｇｔｃａｇａｇｔａｔｔｔｃｔａｇｔｔａｃｃｔｇａａｔｔｇｇｔａｃｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｃａａｇｇｃａｃｃａａａｇｔｔｇｃｔｃａｔｃｔａｔｇｃｇｇｃｃｔｃｃｔｃｔｃｔｇｃａａｔｃｔｇｇｃｇｔｇｃｃｇｔｃｃａｇａｔｔｔａｇｔｇｇａｔｃａｇｇｃｔｃｃｇｇａａｃｃｇａｔｔｔｃａｃｃｃｔｔａｃｇａｔｃｔｃｃｔｃａｃｔｔｃａａｃｃｃｇａｇｇａｔｔｔｃｇｃｃａｃａｔａｔｔａｃｔｇｔｃａａｃａａａｇｃｔａｔｔｃｔａｃａｃｃｇｔｔｃａｃｃｔｔｃｇｇａｃｃｇｇｇｇａｃａａａａｇｔｇｇａｔａｔｔａａａｃｇｇｇｃｇｇｃｃｇｃｃｃｃｃａｃｃａｃｇａｃｇｃｃａｇｃｇｃｃｇｃｇａｃｃａｃｃａａｃｃｃｃｇｇｃｇｃｃｃａｃｇａｔｃｇｃｇｔｃｇｃａｇｃｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｇｃｇｃｃｃａｇａｇｇｃｇｔｇｃｃｇｇｃｃａｇｃｇｇｃｇｇｇｇｇｇｃｇｃａｇｔｇｃａｃａｃｇａｇｇｇｇｇｃｔｇｇａｃｔｔｃｇｃｃｔｇｔｇａｔａｔｃｔａｃａｔｃｔｇｇｇｃｇｃｃｃｃｔｇｇｃｃｇｇｇａｃｔｔｇｔｇｇｇｇｔｃｃｔｔｃｔｃｃｔｇｔｃａｃｔｇｇｔｔａｔｃａｃｃｃｔｔｔａｃｔｇｃａａｃａａａｃｇｇｇｇｃａｇａａａｇａａｇｃｔｃｃｔｇｔａｔａｔａｔｔｃａａａｃａａｃｃａｔｔｔａｔｇａｇａｃｃａｇｔａｃａａａｃｔａｃｔｃａａｇａｇｇａａｇａｔｇｇｃｔｇｔａｇｃｔｇｃｃｇａｔｔｔｃｃａｇａａｇａａｇａａｇａａｇｇａｇｇａｔｇｔｇａａｃｔｇ［配列番号１３９］

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端にシグナルペプチドを含む。ある実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号６３で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるＣＤ８ポリペプチドを含む。

５．７．細胞
本開示の主題は、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、セクション５．３及び５．４に開示のもの）を含む細胞を提供する。さらに、本開示の主題は、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、セクション５．５及び５．６に開示のもの）を含む細胞を提供する。

ある実施形態では、細胞は、リンパ系細胞及び骨髄系細胞からなる群から選択される。ある実施形態では、細胞は、免疫応答性細胞である。ある実施形態では、免疫応答性細胞はリンパ系細胞である。

ある実施形態では、細胞はリンパ系細胞である。リンパ系細胞は、抗体の産生、細胞免疫系の調節、血液中の外来因子の検出、宿主にとって外来の細胞の検出などを提供することができる。リンパ系細胞の非限定的な例としては、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、リンパ系細胞が分化し得る幹細胞が挙げられる。ある実施形態では、幹細胞は、多能性幹細胞である。ある実施形態では、多能性幹細胞は、胚性幹細胞（ＥＳＣ）または人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）である。

ある実施形態では、細胞は、Ｔ細胞である。Ｔ細胞は、胸腺内で成熟し、主に細胞性免疫を担うリンパ球であり得る。Ｔ細胞は適応免疫系に関与している。本開示の主題のＴ細胞は、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、メモリーＴ細胞（セントラルメモリーＴ細胞を含む）、幹細胞様メモリー（または幹様メモリーＴ細胞）、及び２種類のエフェクターメモリーＴ細胞（例えば、ＴＥＭ細胞及びＴＥＭＲＡ細胞）、制御性Ｔ細胞（サプレッサーＴ細胞としても知られる）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、ナチュラルキラーＴ細胞、粘膜関連インバリアントＴ細胞、ならびにγδＴ細胞を含むがこれらに限定されない任意のタイプのＴ細胞であり得る。細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬまたはキラーＴ細胞）は、感染した体細胞または腫瘍細胞の死を誘導できるＴリンパ球のサブセットである。患者自身のＴ細胞が、キメラ受容体、例えばＣＡＲまたはＣＣＲの導入を通じて、特定の抗原を標的とするように遺伝子改変されることがある。ある実施形態では、免疫応答性細胞はＴ細胞である。Ｔ細胞は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞またはＣＤ８^＋Ｔ細胞であり得る。ある実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞である。ある実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８^＋Ｔ細胞である。

ある実施形態では、細胞はＮＫ細胞である。ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞は、細胞性免疫の一部であり、自然免疫応答中に作用するリンパ球であり得る。ＮＫ細胞は、標的細胞に対して細胞傷害効果を発揮するために事前の活性化を必要としない。ある実施形態では、細胞は遺伝子改変されたＮＫ細胞である。ある実施形態では、細胞は編集されたＮＫ細胞である。ある実施形態では、細胞は幹細胞由来のＮＫ細胞である。ある実施形態では、細胞は、多能性幹細胞に由来するＮＫ細胞である。ある実施形態では、細胞は人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）由来のＮＫ細胞である。

本開示の主題のヒトリンパ球の種類としては、末梢ドナーリンパ球、例えば、Ｓａｄｅｌａｉｎｅｔａｌ．，ＮａｔＲｅｖＣａｎｃｅｒ（２００３）；３：３５－４５（ＣＡＲを発現するように遺伝的に改変された末梢ドナーリンパ球を開示する）、Ｍｏｒｇａｎ，Ｒ．Ａ．，ｅｔａｌ．２００６Ｓｃｉｅｎｃｅ３１４：１２６－１２９（α及びβヘテロ二量体を含む完全長の腫瘍抗原認識Ｔ細胞受容体複合体を発現するように遺伝的に改変された末梢ドナーリンパ球を開示する）、Ｐａｎｅｌｌｉｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ（２０００）；１６４：４９５－５０４；Ｐａｎｅｌｌｉｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ（２０００）；１６４：４３８２－４３９２（腫瘍生検における腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）に由来するリンパ球培養物を開示する）、及びＤｕｐｏｎｔｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ（２００５）；６５：５４１７－５４２７；Ｐａｐａｎｉｃｏｌａｏｕｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（２００３）；１０２：２４９８－２５０５（人工抗原提示細胞（ＡＡＰＣ）またはパルス樹状細胞を使用して選択的にインビトロで増殖させた抗原特異的末梢血白血球を開示する）に開示されているものが挙げられるが、これらに限定されない。

細胞（例えば、Ｔ細胞またはＮＫ細胞）は、自己、非自己（例えば、同種異系）であってもよく、または操作された前駆細胞もしくは幹細胞からインビトロで得ることができる。

本開示の主題の細胞は、骨髄系の細胞であり得る。骨髄系細胞の非限定的な例としては、単球、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好中球、好酸球、巨核球、マスト細胞、赤血球、血小板、及び骨髄系細胞が分化し得る幹細胞が挙げられる。ある実施形態では、幹細胞は、多能性幹細胞（例えば、胚性幹細胞または人工多能性幹細胞）である。

ある実施形態では、本開示の細胞は、腫瘍内微小環境を調節することができる。腫瘍は、免疫の認識と排除から自らを守るための悪性細胞による一連の機構が関与する、宿主の免疫応答に対して敵対的な微小環境を有する。この「敵対的な腫瘍内微小環境」は、浸潤制御性ＣＤ４^＋Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）、ＴＧＦ－βを含む免疫抑制サイトカイン、及び活性化されたＴ細胞（ＣＴＬＡ－４及びＰＤ－１）によって発現される免疫抑制受容体を標的とするリガンドの発現を含む様々な免疫抑制因子を含む。これらの免疫抑制機構は寛容の維持と不適切な免疫応答の抑制とに役割を果たすが、腫瘍内微小環境内ではこれらの機構が効果的な抗腫瘍免疫応答を妨げる。これらの免疫抑制因子は集合的に、標的腫瘍細胞と遭遇すると、適合移植された改変Ｔ細胞の顕著なアネルギーまたはアポトーシスを誘導する可能性がある。

ある実施形態では、細胞がキメラ受容体（複数可）を発現するように、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体及び／または本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体で、細胞に形質導入することができる。

さらに、本開示の主題は、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、セクション５．３に開示のもの）及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、セクション５．４に開示のもの）を含む細胞を提供する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体はＣＡＲである。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２標的キメラ受容体はＣＣＲである。したがって、ある実施形態では、本開示の主題は、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＡＲ及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲを含む細胞を提供する。

ある実施形態では、本明細書に開示される細胞は、ＡＤＧＲＥ２に対して単独で陽性である細胞と比較して、ＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａの両方に対して陽性である細胞に対して、より高い程度の細胞溶解活性を示す。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、低い結合親和性または低い結合親和力でＡＤＧＲＥ２に結合する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、アクセス可能性の低いエピトープでＡＤＧＲＥ２に結合する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲがＣＬＥＣ１２Ａに結合する結合親和性と比較して、より低い結合親和性でＡＤＧＲＥ２に結合する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲがＣＬＥＣ１２Ａに結合する結合親和性と比較して、５分の１以下の結合親和性でＡＤＧＲＥ２に結合する。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲがＣＬＥＣ１２Ａに結合する結合親和性と比較して、１０分の１、２０分の１、３０分の１、４０分の１、５０分の１、６０分の１、７０分の１、８０分の１、９０分の１、１００分の１、２００分の１、５０００分の１、１０００分の１、５０００分の１、または１００００分の１以下の結合親和性でＡＤＧＲＥ２に結合する。

５．５．１．細胞の例
ある実施形態では、細胞は、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲ及びＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲを含む。

ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、（ａ）（ｉ）配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含むＶ_Ｈと、（ｉｉ）配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含むＶ_Ｌとを含む細胞外抗原結合ドメイン、（ｂ）ＣＤ２８ポリペプチドを含むヒンジ／スペーサー領域、（ｃ）ＣＤ２８ポリペプチドを含む膜貫通ドメイン（例えば、ヒトＣＤ２８の膜貫通ドメインまたはそのフラグメント）、ならびに（ｄ）（ｉ）ＣＤ３ζポリペプチドと、（ｉｉ）ＣＤ２８ポリペプチド（例えば、ヒトＣＤ２８の細胞内ドメインまたはそのフラグメント）を含む共刺激シグナル伝達領域とを含む細胞内シグナル伝達ドメイン、を含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるリンカーを介して連結される。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、Ｎ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号１０のアミノ酸１５３～１７９を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、共刺激シグナル伝達領域は、配列番号１０のアミノ酸１８０～２２０を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、ヒンジ／スペーサー領域は、配列番号１０のアミノ酸１１４～１５２を含むか、またはそれらからなるＣＤ２８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、ＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲは、配列番号６６で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。

ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＡＲは、（ａ）（ｉ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＨＣＤＲ３を含むＶ_Ｈと、（ｉｉ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＶ_ＬＣＤＲ３を含むＶ_Ｌとを含む細胞外抗原結合ドメイン、（ｂ）４－１ＢＢポリペプチドを含む細胞内ドメイン（例えば、ヒト４－１ＢＢポリペプチド、例えば、その一部の４－１ＢＢ（例えば、ヒト４－１ＢＢ）の細胞内ドメイン）、を含む。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲは、ＣＤ８ポリペプチド（例えば、ヒトＣＤ８ポリペプチド、例えば、ＣＤ８（例えば、ヒトＣＤ８）の膜貫通ドメインまたはその一部）を含む膜貫通ドメインをさらに含む。ある実施形態では、細胞内ドメインは、配列番号３０のアミノ酸２１４～２５５を含むか、またはそれらからなる４－１ＢＢポリペプチドを含む。ある実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号７のアミノ酸１３７～２０７を含むか、またはそれらからなるＣＤ８ポリペプチドを含む。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、配列番号２で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなるリンカーを介して連結される。ある実施形態では、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、Ｎ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される。ある実施形態では、ＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲは、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を含む。

５．８．核酸分子、ベクター及び遺伝子改変
本開示の主題は、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体（例えば、セクション５．３及び５．４に開示のもの）をコードする核酸分子を提供する。ある実施形態では、核酸分子は、本開示のＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲに作動可能に連結されたプロモーターをさらに含む。このような核酸分子を含む細胞も提供される。

さらに、本開示の主題は、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体（例えば、セクション５．５及び５．６に開示のもの）をコードする核酸分子を提供する。ある実施形態では、核酸分子は、本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＡＲに作動可能に連結されたプロモーターをさらに含む。このような核酸分子を含む細胞も提供される。

さらに、本開示の主題は、ＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体をコードする核酸分子、及びＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体をコードする核酸分子を含む核酸組成物を提供する。このような核酸組成物を含む細胞も提供される。

ある実施形態では、プロモーターは、内因性または外因性である。ある実施形態では、外因性プロモーターは、伸長因子（ＥＦ）－１プロモーター、サイトメガロウイルス前初期プロモーター（ＣＭＶ）プロモーター、シミアンウイルス４０初期プロモーター（ＳＶ４０）プロモーター、ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）プロモーター、メタロチオネインプロモーター、及びユビキチンＣプロモーターからなる群から選択される。ある実施形態では、内因性プロモーターは、ＴＣＲアルファプロモーター、ＴＣＲベータプロモーター、及びベータ２－ミクログロブリンプロモーターから選択される。ある実施形態では、プロモーターは、誘導プロモーターである。ある実施形態では、誘導プロモーターは、ＮＦＡＴ転写応答エレメント（ＴＲＥ）プロモーター、ＣＤ６９プロモーター、ＣＤ２５プロモーター、ＩＬ－２プロモーター、４－１ＢＢプロモーター、ＰＤ１プロモーター、及びＬＡＧ３プロモーターからなる群から選択される。

本開示の主題は、本開示の核酸分子を含むベクターも提供する。ある実施形態では、ベクターは、ウイルスベクターである。ある実施形態では、ウイルスベクターは、レトロウイルスベクターである。ある実施形態では、レトロウイルスベクターは、ガンマレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクターである。

ある実施形態では、ベクターは、本開示のＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲ及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲをコードする核酸分子を含む。ある実施形態では、核酸分子は、配列番号１４０で表されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする。ある実施形態では、核酸分子は、配列番号１４１で表されるヌクレオチド配列を含む。配列番号１４０及び１４１を以下に示す。
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核酸分子は、当技術分野で知られている方法によって、または本明細書で記載されるように、細胞内に送達され得る。細胞の遺伝子改変は、実質的に均一な細胞組成物に組み換えＤＮＡ構築物を形質導入することによって達成することができる。ある実施形態では、レトロウイルスベクター（例えば、ガンマレトロウイルスベクターまたはレンチウイルスベクター）が、細胞へのＤＮＡ構築物の導入に使用される。例えば、本開示のキメラ受容体をコードするポリヌクレオチドは、レトロウイルスベクター内にクローニングされ、その内因性プロモーター、レトロウイルス長末端反復、または対象の標的細胞型に特異的なプロモーターから発現を駆動することができる。非ウイルスベクターも使用され得る。

本開示の少なくとも１つのキメラ受容体（例えば、本開示の２つのキメラ受容体、例えば、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体、及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体）を含む細胞の最初の遺伝子改変のために、レトロウイルスベクターを形質導入に使用することができるが、他の任意の適切なウイルスベクターまたは非ウイルス送達系を使用することができる。キメラ受容体（複数可）は、単一のマルチシストロン発現カセット内、単一のベクターの複数の発現カセット内、または複数のベクター内に構築され得る。ポリシストロン発現カセットを作製する要素の例としては、様々なウイルス及び非ウイルスの内部リボソームエントリー部位（ＩＲＥＳ、例えば、ＦＧＦ－１ＩＲＥＳ、ＦＧＦ－２ＩＲＥＳ、ＶＥＧＦＩＲＥＳ、ＩＧＦ－ＩＩＩＲＥＳ、ＮＦ－κΒ ＩＲＥＳ、ＲＵＮＸ１ＩＲＥＳ、ｐ５３ＩＲＥＳ、Ａ型肝炎ＩＲＥＳ、Ｃ型肝炎ＩＲＥＳ、ペスチウイルスＩＲＥＳ、アフトウイルスＩＲＥＳ、ピコルナウイルスＩＲＥＳ、ポリオウイルスＩＲＥＳ及び脳心筋炎ウイルスＩＲＥＳ）及び切断可能なリンカー（例えば、２Ａペプチド、例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ及びＦ２Ａペプチド）が含まれるが、これらに限定されない。ある実施形態では、Ｐ２Ａペプチドは、以下に提供される配列番号１４２で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。
ＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ［配列番号１４２］

配列番号１４２のアミノ酸配列をコードする例示的なヌクレオチド配列は、配列番号１４３で表され、以下に提供される。
ｇｇａａｇｃｇｇａｇｃｔａｃｔａａｃｔｔｃａｇｃｃｔｇｃｔｇａａｇｃａｇｇｃｔｇｇａｇａｃｇｔｇｇａｇｇａｇａａｃｃｃｔｇｇａｃｃｃ［配列番号１４３］

レトロウイルスベクターと適切なパッケージングラインとの組み合わせも適しており、ここではキャプシドタンパク質は、ヒト細胞に感染するために機能することになる。種々の両親媒性ウイルス産生細胞株が知られており、これには、ＰＡ１２（Ｍｉｌｌｅｒｅｔａｌ．，（１９８５）ＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌ（１９８５）；５：４３１－４３７）；ＰＡ３１７（Ｍｉｌｌｅｒ．，ｅｔａｌ．，ＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌ（１９８６）；６：２８９５－２９０２）；及びＣＲＩＰ（Ｄａｎｏｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ（１９８８）；８５：６４６０－６４６４）が挙げられるが、これらに限定されない。非両性粒子も適しており、例えば、ＶＳＶＧ、ＲＤ１１４またはＧＡＬＶエンベロープで疑似型付けされた粒子及び当技術分野で公知のその他の任意の粒子が適している。

可能な形質導入方法には、細胞の産生細胞との直接共培養（Ｂｒｅｇｎｉｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（１９９２）；８０：１４１８－１４２２）、またはウイルス上清単独、または適切な成長因子及びポリカチオンの有無にかかわらず濃縮されたベクターストックを使用した培養（Ｘｕｅｔａｌ．，ＥｘｐＨｅｍａｔ（１９９４）；２２：２２３－２３０；及びＨｕｇｈｅｓｅｔａｌ．ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ（１９９２）；８９：１８１７）も含まれる。

他の形質導入ウイルスベクターを用いて細胞を改変することもできる。ある実施形態では、選択されたベクターは、感染の高効率ならびに安定した組み込み及び発現を示す（例えば、Ｃａｙｏｕｅｔｔｅｅｔａｌ．，ＨｕｍａｎＧｅｎｅＴｈｅｒａｐｙ８：４２３－４３０，１９９７；Ｋｉｄｏｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＥｙｅＲｅｓｅａｒｃｈ１５：８３３－８４４，１９９６；Ｂｌｏｏｍｅｒｅｔａｌ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＶｉｒｏｌｏｇｙ７１：６６４１－６６４９，１９９７；Ｎａｌｄｉｎｉｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２７２：２６３－２６７，１９９６；及びＭｉｙｏｓｈｉｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９４：１０３１９，１９９７を参照されたい）。使用可能なその他のウイルスベクターとしては、例えば、アデノウイルス、レンチウイルス、及びアデナ関連ウイルスベクター、ワクシニアウイルス、ウシパピローマウイルス、またはエプスタイン・バーウイルスなどのヘルペスウイルスが挙げられる（例えば、ｔｈｅｖｅｃｔｏｒｓｏｆＭｉｌｌｅｒ，ＨｕｍａｎＧｅｎｅＴｈｅｒａ（１９９０）；１５－１４；Ｆｒｉｅｄｍａｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ２４４：１２７５－１２８１，１９８９；Ｅｇｌｉｔｉｓｅｔａｌ．，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ（１９８８）；６：６０８－６１４；Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖｅｔａｌ．，ＣｕｒＯｐｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ（１９９０）；１：５５－６１；Ｓｈａｒｐ，ＴｈｅＬａｎｃｅｔ（１９９１）；３３７：１２７７－７８；Ｃｏｒｎｅｔｔａｅｔａｌ．，ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ３６：３１１－２２，１９８７；Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８４）；２２６：４０１－４０９；Ｍｏｅｎ，ＢｌｏｏｄＣｅｌｌｓ１７：４０７－１６，１９９１；Ｍｉｌｌｅｒｅｔａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ（１９８９）；７：９８０－９０；ＬｅＧａｌＬａＳａｌｌｅｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９３）；２５９：９８８－９０；及びＪｏｈｎｓｏｎ，Ｃｈｅｓｔ（１９９５）１０７：７７Ｓ－８３Ｓも参照されたい）。レトロウイルスベクターは特に良好に開発され、臨床環境で使用されている（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇｅｔａｌ．，ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ（１９９０）；３２３：３７０，１９９０；Ａｎｄｅｒｓｏｎｅｔａｌ．，米国特許第５，３９９，３４６号）。

非ウイルスのアプローチも、細胞の遺伝子改変に利用することができる。例えば、リポフェクションの存在下で核酸を投与することにより（Ｆｅｉｇｎｅｒｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵ．Ｓ．Ａ．（１９８７）；８４：７４１３；Ｏｎｏｅｔａｌ．，ＮｅｕｒｏｓｃｉＬｅｔｔ（１９９０）；１７：２５９；Ｂｒｉｇｈａｍｅｔａｌ．，ＡｍＪＭｅｄＳｃｉ（１９８９）；２９８：２７８；Ｓｔａｕｂｉｎｇｅｒｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌ（１９８３）；１０１：５１２，Ｗｕｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ（１９８８）；２６３：１４６２１；Ｗｕｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ（１９８９）；２６４：１６９８５）、または外科的条件下におけるマイクロインジェクションにより（Ｗｏｌｆｆｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９０）；２４７：１４６５）、細胞中に核酸分子を導入することができる。遺伝子導入のための他の非ウイルス的手段としては、リン酸カルシウム、ＤＥＡＥデキストラン、エレクトロポレーション、及びプロトプラスト融合を用いたインビトロでのトランスフェクションが挙げられる。リポソームはまた、細胞へのＤＮＡの送達に潜在的に有益であり得る。対象の罹患組織への正常な遺伝子の移植は、エクスビボで正常な核酸を培養可能な細胞型（例えば、自己または異種の初代細胞またはその子孫）に移入し、その後、その細胞（またはその子孫）を標的組織に注射するか、または全身注射することによっても達成することができる。組み換え受容体はまた、トランスポザーゼまたは標的ヌクレアーゼ（例えば、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、メガヌクレアーゼまたはＴＡＬＥＮ、ＣＲＩＳＰＲ）を使用して誘導しまたは得ることもできる。一過性発現は、ＲＮＡエレクトロポレーションにより得ることができる。

また、任意の標的ゲノム編集方法を、本開示の少なくとも１つのキメラ受容体（例えば、本開示の２つのキメラ受容体、例えば、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体、及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体）を細胞へ送達するために使用することもできる。ある実施形態では、ＣＲＩＳＰＲシステムを使用して、本開示の少なくとも１つのキメラ受容体（例えば、本開示の２つのキメラ受容体、例えば、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体、及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体）を送達する。ある実施形態では、ジンクフィンガーヌクレアーゼを使用して、本開示の少なくとも１つのキメラ受容体（例えば、本開示の２つのキメラ受容体、例えば、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体、及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体）を送達する。ある実施形態では、ＴＡＬＥＮシステムを使用して、本開示の少なくとも１つのキメラ受容体（例えば、本開示の２つのキメラ受容体、例えば、本開示のＡＤＧＲＥ２標的キメラ受容体、及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的キメラ受容体）を送達する。

規則的に間隔を空けてクラスター化した短鎖反復回文配列（ＣＲＩＳＰＲ）システムは、原核細胞において発見されたゲノム編集ツールである。ゲノム編集に利用する場合、このシステムにはＣａｓ９（ｃｒＲＮＡをそのガイドとして利用してＤＮＡを修飾できるタンパク質）、ＣＲＩＳＰＲＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ、Ｃａｓ９と活性複合体を形成するｔｒａｃｒＲＮＡ（通常はヘアピンループの形）に結合する領域とともに、Ｃａｓ９を宿主ＤＮＡの正しいセクションに導くためにＣａｓ９が使用するＲＮＡを含む）、トランス活性化ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ、ｃｒＲＮＡに結合し、Ｃａｓ９と活性複合体を形成する）、及びＤＮＡ修復テンプレートのオプションのセクション（特定のＤＮＡ配列の挿入を可能にする細胞修復プロセスを導くＤＮＡ）が含まれる。ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９は、しばしば、標的細胞を形質転換するためにプラスミドを用いる。ｃｒＲＮＡは、これがＣａｓ９が細胞内で標的ＤＮＡを同定して直接結合するために使用する配列であるため、各用途に合わせて設計する必要がある。ＣＡＲ発現カセットを担持する修復テンプレートも、カットの両側で重なり、挿入配列をコードする必要があるため、用途ごとに設計する必要がある。複数のｃｒＲＮＡ及びｔｒａｃｒＲＮＡを共にパッケージしてシングルガイドＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）を形成することができる。このｓｇＲＮＡは、Ｃａｓ９遺伝子と結合してプラスミドにされ、細胞内にトランスフェクトされ得る。

ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）は、ジンクフィンガーＤＮＡ結合ドメインとＤＮＡ切断ドメインとを結合させることによって生成される人工制限酵素である。ジンクフィンガードメインは、ジンクフィンガーヌクレアーゼがゲノム内の所望の配列を標的にすることを可能にする特定のＤＮＡ配列を標的とするように設計することができる。個々のＺＦＮのＤＮＡ結合ドメインは、典型的には、複数の個々のジンクフィンガリピートを含み、それぞれが複数の塩基対を認識することができる。新規のジンクフィンガードメインを生成する最も一般的な方法は、既知の特異性のより小さいジンクフィンガー「モジュール」を組み合わせることである。ＺＦＮにおいて最も一般的な切断ドメインは、ＩＩｓ型制限エンドヌクレアーゼＦｏｋＩからの非特異的切断ドメインである。内因性相同組換え（ＨＲ）機構及びＣＡＲ発現カセットを保有する相同ＤＮＡテンプレートを使用して、ＺＦＮは、ＣＡＲ発現カセットをゲノムに挿入するために使用することができる。標的配列がＺＦＮにより切断されると、ＨＲ機構は損傷を受けた染色体と相同ＤＮＡ鋳型との間の相同性を探索し、その後、染色体の切断された２つの末端の間で鋳型の配列をコピーすることにより、相同ＤＮＡ鋳型をゲノムに組み込む。

転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）は、ＤＮＡの特定の配列を切断するように設計され得る制限酵素である。ＴＡＬＥＮ系は、ＺＦＮとほぼ同じ原理で動作する。それらは、転写活性化因子様エフェクターＤＮＡ結合ドメインとＤＮＡ切断ドメインとを組み合わせることによって生成される。転写活性化因子様エフェクター（ＴＡＬＥ）は、特定のヌクレオチドを強力に認識する２つの可変位置を有する３３～３４個のアミノ酸反復モチーフで構成されている。これらのＴＡＬＥのアレイを組み立てることにより、ＴＡＬＥＤＮＡ結合ドメインを操作して所望のＤＮＡ配列に結合し、それによってヌクレアーゼがゲノムの特定の位置で切断するように誘導できる。ポリヌクレオチド治療法で使用するためのｃＤＮＡ発現は、任意の適切なプロモーター（例えば、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）、メタロチオネインプロモーター、またはユビキチンＣプロモーター）から誘導され、任意の適切な哺乳類調節要素またはイントロン（例えば、伸長因子１ａエンハンサー／プロモーター／イントロン構造）によって調節され得る。例えば、必要に応じて、特定の細胞型における遺伝子発現を優先的に指示することが知られているエンハンサーを使用して、核酸の発現を誘導することができる。使用されるエンハンサーには、組織特異的または細胞特異的エンハンサーとして特徴付けられるものを含めることができるが、これらに限定されない。代替的に、ゲノムクローンが治療用の構築物として使用される場合、調節は、同族調節配列によって媒介され得るか、または必要に応じて、上記のプロモーターまたは調節要素のいずれかを含む、異種源に由来する調節配列によって媒介され得る。

ゲノム編集剤／システムを送達する方法は、必要に応じて変わり得る。ある実施形態では、選択されたゲノム編集方法の成分は、１つ以上のプラスミド中のＤＮＡ構築物として送達される。ある実施形態では、成分は、ウイルスベクターによって送達される。一般的な送達方法としては、電気穿孔、マイクロインジェクション、遺伝子銃、インペレフェクション、静水圧、連続注入、超音波処理、マグネトフェクション、アデノ随伴ウイルス、ウイルスベクターのエンベロープタンパク質擬タイピング、複製能を有するベクター、ｃｉｓ及びｔｒａｎｓ作用要素、単純ヘルペスウイルス、及び化学ビヒクル（例えば、オリゴヌクレオチド、リポプレックス、ポリマーソーム、ポリプレクサ、デンドリマー、無機ナノ粒子、及び細胞透過性ペプチド）が挙げられるが、これらに限定されない。

５．９．製剤化及び投与
本開示の主題はまた、本開示の細胞を含む組成物（例えば、セクション５．５に開示されたもの）を提供する。ある実施形態では、この組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む医薬組成物である。

本開示の細胞を含む組成物は、例えば、等張水溶液、懸濁液、乳濁液、分散液、または粘稠な組成物などの滅菌液体製剤として都合よく提供することができ、これらは選択されたｐＨに緩衝可能である。液体調製物は、通常、ゲル、他の粘性組成物、及び固体組成物よりも調製が容易である。加えて、液体組成物は、特に注射により、投与するのにやや便利である。他方で、粘性組成物は、特定の組織との比較的長い接触時間を提供するために、適切な粘度範囲内で配合され得る。液体または粘稠な組成物は、担体を含むことができ、担体は、例えば、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、ポリオール（例えば、グリセリン、プロピレングリコール、液状ポリエチレングリコールなど）及びそれらの適切な混合物を含む溶媒または分散媒であり得る。

本開示の細胞を含む組成物は、抗原に対する免疫応答を誘導及び／または増強するため、及び／または新生物を治療及び／または予防するために、対象に全身的にまたは直接提供することができる。ある実施形態では、本開示の細胞またはそれを含む組成物は、目的の臓器（例えば、新生物に冒された臓器）に直接注入される。あるいは、本開示の細胞またはそれを含む組成物は、例えば、循環系（例えば、腫瘍血管系）への投与により、目的の臓器に間接的に提供される。膨張剤及び分化剤は、インビトロまたはインビボで細胞の産生を増加させるために、細胞または組成物の投与前、投与中または投与後に提供され得る。

投与される細胞の量は、治療される対象によって異なり得る。ある実施形態では、本開示の細胞の、約１０^４～約１０^１０、約１０^４～約１０^７、約１０^５～約１０^７、約１０^５～約１０^９、または約１０^６～約１０^８が対象に投与される。ある実施形態では、本開示の細胞の約１０×１０^６～約１５０×１０^６が対象に投与される。ある実施形態では、本開示の細胞の約２５×１０^６～約１５０×１０^６が対象に投与される。ある実施形態では、本開示の細胞の約２５×１０^６～約５０×１０^６が対象に投与される。ある実施形態では、本開示の細胞の少なくとも約１０×１０^６、約２５×１０^６、約５０×１０^６、約１００×１０^６、または約１５０×１０^６が対象に投与される。ある実施形態では、本開示の細胞の約２５×１０^６が対象に投与される。有効量とみなされる量の正確な決定は、特定の対象の体格、年齢、性別、体重、及び状態など、各対象に個別の要因に基づくことができる。投与量は、本開示及び当技術分野の知識から当業者によって容易に確認され得る。

本開示の細胞及び組成物は、当技術分野で公知の任意の方法によって投与することができ、これには、以下に限定されるものではないが、静脈内投与、皮下投与、節内投与、腫瘍内投与、髄腔内投与、胸腔内投与、骨内投与、腹腔内投与、胸膜投与、及び対象への直接投与が含まれる。本開示の細胞は、生理学的に許容される任意のビヒクル中で、通常は血管内に投与することができるが、細胞が再生及び分化に適した部位（例えば、胸腺）を見つけることができる骨または他の好都合な部位に導入することもできる。

５．１０．治療の方法
本開示の主題は、本開示の細胞またはその細胞を含む組成物を使用する様々な方法を提供する。本開示の細胞及びそれを含む組成物は、療法または薬剤に使用され得る。例えば、本開示の主題は、それを必要とする対象において免疫応答を誘導及び／または増強する方法を提供する。本開示の細胞及びそれを含む組成物は、対象における腫瘍負荷を低減するために使用され得る。本開示の細胞及びそれを含む組成物は、対象の腫瘍細胞の数を減少させ、腫瘍のサイズを小さくし、及び／または腫瘍を根絶することができる。本開示の細胞及びそれを含む組成物は、対象における腫瘍を処置及び／または予防するために使用され得る。本開示の細胞及びそれを含む組成物は、腫瘍に罹患した対象の生存を延長するために使用され得る。ある実施形態では、上記の方法のそれぞれは、所望の効果、例えば、既存の状態の緩和または再発の防止を達成するために、本開示の細胞またはこれを含む組成物（例えば医薬組成物）を投与することを含む。治療の場合、投与される量は、所望の効果を生じさせるのに有効な量である。有効量は、１回または１連の投与で投与され得る。有効量は、ボーラス内で、または連続灌流によって提供され得る。

ある実施形態では、腫瘍は、ＡＤＧＲＥ２及び／またはＣＬＥＣ１２Ａと関連している。ある実施形態では、腫瘍細胞はＡＤＧＲＥ２とＣＬＥＣ１２Ａの両方を発現する。ある実施形態では、腫瘍細胞はＡＤＧＲＥ２とＣＬＥＣ１２Ａの両方を過剰発現する。

ある実施形態では、腫瘍はがんである。ある実施形態では、腫瘍は、血液癌である。ある実施形態では、腫瘍は、多発性骨髄腫、白血病、リンパ腫、及び骨髄性悪性腫瘍からなる群から選択される。白血病の非限定的な例としては、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）、混合表現型急性白血病（ＭＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、及びＢ細胞前リンパ球性白血病が挙げられる。リンパ腫の非限定的な例には、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、ＡＬＫ陽性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、ＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病に発生する大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、リンパ形質細胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＭＺＬ）、粘膜関連リンパ組織リンパ腫（ＭＡＬＴ）、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＮＭＺＬ）、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、形質芽球性リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫（ＳＭＺＬ）、及びワルデンシュトレームマクログロブリン血症が含まれる。リンパ腫は、ホジキンリンパ腫または非ホジキンリンパ腫であり得る。骨髄性悪性腫瘍の非限定的な例には、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性新生物（ＭＰＮ）、骨髄／リンパ系新生物（例えば、好酸球増加及び血小板由来成長因子受容体アルファ（ＰＤＧＦＲＡ）、血小板由来成長因子受容体ベータ（ＰＤＧＦＲＢ）、もしくは線維芽細胞成長因子受容体１（ＦＧＦＲ１）の再構成、またはＰＣＭ１－ＪＡＫ２を伴う骨髄／リンパ系新生物）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫、及びＴリンパ芽球性白血病／リンパ腫が含まれる。ある実施形態では、骨髄性悪性腫瘍は、骨髄異形成症候群を含む。

ある実施形態では、腫瘍は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。ある実施形態では、腫瘍は、再発性／難治性の急性骨髄性白血病（Ｒ／ＲＡＭＬ）である。

ある実施形態では、対象は、ヒト対象である。対象は、疾患の進行形態を有する可能性があり、その場合、治療目的は、疾患の進行の緩和または好転、及び／または副作用の改善を含み得る。対象は、既に治療を受けている病歴を有する場合があり、その場合、治療目的には通常、再発リスクの減少または遅延が含まれることになる。

本開示の少なくとも１つのキメラ受容体（例えば、本開示の２つのキメラ受容体、例えば、本開示のＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲ及び本開示のＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲ）の表面発現の結果として、採用可能に移入された細胞は、腫瘍部位において増強されかつ選択的な細胞溶解活性を有する。さらに、細胞は、それらの腫瘍への局在性及びそれらの増殖後に、腫瘍部位を、生理的抗腫瘍応答に関与する広範囲の細胞に対してより良好な結果を導く環境に変える。

免疫合併症（「悪性Ｔ細胞形質転換」として知られる）、例えば、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）のリスクを回避または最小化するために、または健康な組織が腫瘍細胞と同じ標的抗原を発現する場合に、本開示の細胞にさらなる改変を導入することができ、ＧｖＨＤに類似した結果をもたらす。この問題に対する潜在的な解決策は、本開示の細胞に自殺遺伝子を組み込むことである。適切な自殺遺伝子には、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ（ｈｓｖ－ｔｋ）、誘導性カスパーゼ９自殺遺伝子（ｉＣａｓｐ－９）、及び短縮型ヒト上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲｔ）ポリペプチドが含まれるが、これらに限定されない。ある実施形態では、自殺遺伝子はＥＧＦＲｔポリペプチドである。ＥＧＦＲｔポリペプチドは、抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ）を投与することにより、Ｔ細胞除去を可能にし得る。ＥＧＦＲｔは、本開示のキメラ受容体（複数可）の上流に共有結合することができる。本開示のキメラ受容体をコードする核酸を含むベクター内に自殺遺伝子を含ませることができる。このようにして、悪性Ｔ細胞形質転換（例えばＧＶＨＤ）の間に、自殺遺伝子を活性化するように設計されたプロドラッグ（例えば、プロドラッグ（例えば、ｉＣａｓｐ－９を活性化することができるＡＰ１９０３））の投与により、本開示のキメラ受容体を発現する自殺遺伝子活性化細胞にアポトーシスが誘発される。本開示のキメラ受容体に自殺遺伝子を組み込むことで、受容体を発現している細胞の大部分を非常に短時間で除去することができ、安全性のレベルが高まる。自殺遺伝子が組み込まれた本開示の細胞は、細胞注入後の所定の時点で先制的に除去することができ、または毒性の最も初期の兆候で根絶することができる。

６．実施例
本開示の実施は、特に断りのない限り、当業者の範囲内である分子生物学（組み換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学及び免疫学の従来の技術を使用する。そのような技術は、“ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ”，ｓｅｃｏｎｄｅｄｉｔｉｏｎ（Ｓａｍｂｒｏｏｋ，１９８９）；“ＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ” （Ｇａｉｔ，１９８４）；“ＡｎｉｍａｌＣｅｌｌＣｕｌｔｕｒｅ” （Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，１９８７）；“ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ” “ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ” （Ｗｅｉｒ，１９９６）；”ＧｅｎｅＴｒａｎｓｆｅｒＶｅｃｔｏｒｓｆｏｒＭａｍｍａｌｉａｎＣｅｌｌｓ” （ＭｉｌｌｅｒａｎｄＣａｌｏｓ，１９８７）；“ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ” （Ａｕｓｕｂｅｌ，１９８７）；“ＰＣＲ：ＴｈｅＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ”，（Ｍｕｌｌｉｓ，１９９４）；“ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ” （Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９１）などの文献で、詳しく説明されている。これらの技術は、本明細書に開示されるポリヌクレオチド及びポリペプチドの製造に適用可能であり、したがって、本開示の主題を製造し、実施する際に考慮され得る。特定の実施形態にとって特に有用な技術については、以下のセクションで説明する。

以下の実施例は、当業者に、本開示の細胞及び組成物の製造方法及び使用方法の完全な開示及び説明を提供するために提示されており、発明者らが発明とみなすものの範囲を限定することを意図したものではない。

実施例１－ＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａを標的とする
本開示の主題は、現在臨床検査中の代替のＣＡＲ治療と比較して改善された安全性及び有効性を提供する可能性を有するＲ／ＲＡＭＬのための新規な組み合わせＣＡＲフォーマットを評価する。

ＡＭＬにおけるＣＡＲ療法の適用は、その個体内及び個体間の表現型の不均一性によって課題があり、理想的なＣＡＲ標的を検証する必要がある。潜在的なＣＡＲ標的を同定するために、悪性組織及び正常組織に由来する利用可能な転写及びプロテオミクスデータセットを分析し、初代ＡＭＬ患者サンプル、健康な骨髄造血幹／前駆細胞（ＨＳＰＣ）、及び健康な初代Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を行った（Ｐｅｒｎａｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＣｅｌｌ２（４）：５０６－５１９．ｅ５。（２０１７））。どの標的もＣＤ１９に匹敵する表面発現プロファイルを示さなかった。ＣＤ１９は事実上全てのＢ細胞白血病細胞で高レベルで発現し、ＨＳＰＣ及びＴ細胞にはまったく存在せず、Ｂ細胞領域の外側では体系的に検出できなかった。しかし、この分析により、ＡＭＬの新規の潜在的なＣＡＲ標的である接着Ｇタンパク質共役受容体Ｅ２（ＡＤＧＲＥ２）を特定した。潜在的なＣＡＲ標的のペアワイズ分析は、ＡＭＬクローンの不均一性と一致して、組み合わせＣＡＲ標的アプローチが毒性を最小限に抑えながらＡＭＬ腫瘍の根絶に潜在的に有効である可能性があることを示唆した。

ＡＤＧＲＥ２（ＥＭＲ２）は、上皮成長因子（ＥＧＦ）－ＴＭ７タンパク質ファミリーのメンバーである（Ｌｉｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ４１．３（１９９７）：３０１－３０８）。その発現は単球／マクロファージに制限され、活性化されたＴ細胞及びＢ細胞では上方制御されない（Ｌｉｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ６７．２（２０００）：１８８－２００）。フローサイトメトリー分析により、分析したＲ／ＲＡＭＬ患者集団の大部分におけるＡＭＬ細胞の９０％超に対してＡＤＧＲＥ２陽性が明らかになった（図１）。ＡＤＧＲＥ２は、ＡＭＬの総バルク集団と、最も重要なことには、白血病幹細胞（ＬＳＣ）の治療に関連する割合との両方において陽性であることが判明した。ＣＤ３３及びＣＤ１２３などのその他の候補標的もまた、大半の患者において陽性であったが、特にＬＳＣにおいては、ＡＤＧＲＥ２ほど一貫して陽性ではないことを見出した。したがって、ＡＤＧＲＥ２は、Ｒ／ＲＡＭＬ患者において完全奏効を達成する可能性がより高い可能性を提供できるため、ＣＡＲ標的として選択した。

Ｃ型レクチンドメインファミリー１２メンバーＡ（ＣＬＥＣ１２Ａ／ＣＤ３７１）は、ＡＭＬにおける十分に説明されている候補標的であり、大部分のＡＭＬ患者において発現している（Ｐｅｒｎａｅｔａｌ．，Ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌ３２．４（２０１７）：５０６－５１９；Ｈａｕｂｎｅｒｅｔａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ３３．１（２０１９）：６４－７４；Ｂａｋｋｅｒｅｔａｌ．，Ｃａｎｃｅｒｒｅｓｅａｒｃｈ６４．２２（２００４）：８４４３－８４５０）。他のグループは、すでに、米国で進行中の第１相臨床試験においてＣＡＲ標的としてそれを追及している（Ｔａｓｈｉｒｏｅｔａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＴｈｅｒａｐｙ２５．９（２０１７）：２２０２－２２１３）。

本開示の主題は、Ｒ／ＲＡＭＬを治療するために、ＡＤＧＲＥ２に特異的なＣＡＲ及びＣＬＥＣ１２Ａに特異的なＣＣＲをコードする、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１（図２）と呼ばれる組み合わせＣＡＲ－ＣＣＲベクターを使用することを提案する。ＣＡＲは、ＣＤ２８共刺激ドメイン及び減衰ＣＤ３ζ１ＸＸ活性化ドメインを有する。以前に、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインのＩＴＡＭモチーフの遺伝子改変は、エフェクターとメモリー特性との好ましいバランスを達成することで治療効果を高め、それによって前Ｂ型急性リンパ芽球性白血病ＮＡＬＭ６マウスモデルにおける機能的ＣＡＲＴ細胞の持続性が強化されたことが証明されている（Ｆｅｕｃｈｔｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅ２５．１（２０１９）：８２－８８）。ＣＣＲは４－１ＢＢ共刺激を提供してＴ細胞の生存を強化し、低抗原ＡＭＬ回避を防ぐ。ＣＤ３ζドメインを含まないため、ＣＡＲのように細胞死滅を媒介しない。

ＡＤＧＲＥ２発現は、一般的に、非悪性細胞と比較してＡＭＬ細胞において上方制御される。ＨＳＣを含むいくつかの正常細胞タイプにおけるＡＤＧＲＥ２発現を考慮して、ＡＭＬ細胞を優先的に標的とする標的戦略を設計した。このアプローチでは、第１のステップは、ＣＡＲ療法の安全性を改善するためにＡＤＧＲＥ２ＣＡＲの親和性及び活性化の可能性を低下させ、第２のステップは、ＡＭＬ漏出を防止するために、ＬＳＣ上に発現されるがＨＳＣ上には発現されない第２の分子であるＣＬＥＣ１２Ａ（ＣＤ３７１）を共ターゲティングすることによってＬＳＣに対するＡＤＧＲＥ２ＣＡＲ係合を救済した。ＣＬＥＣ１２Ａを、キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）を介して標的とした。この受容体は、アビディティー及び共刺激の増加をもたらすが、細胞溶解活性を開始しない。したがって、ＣＣＲは、ＣＡＲがＡＭＬ細胞におけるＡＤＧＲＥ２を検出する助けとなる。

ＣＡＲシグナル伝達は、ＣＡＲのｓｃＦｖ親和性及びＣＡＲ標的抗原密度に依存するＣＡＲのｓｃＦｖ部分の標的係合に応じて引き起こされる。ＡＤＧＲＥ２ＣＡＲｓｃＦｖ親和性は、ＡＭＬ腫瘍細胞よりも低いＡＤＧＲＥ２抗原レベルを有する健康細胞がＣＡＲ活性化を誘発せず、そのため保護されるように最適化されており、重要な安全機能が追加されており、同時に、ＡＤＧＲＥ２抗原レベルの下方制御によるＡＭＬ脱出のリスクを増大するように最適化した（図３）。ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗＡＭＬ漏出のリスクを軽減するために、ＣＬＥＣ１２ＡＣＣＲを添加すると、ＡＭＬ細胞に対する全体的なアビディティーが増加し、それにより低親和性ＡＤＧＲＥ２ＣＡＲが「補償」されるが、ＡＤＧＲＥ２陰性／ＣＬＥＣ１２ａ陽性細胞の除去は開始されない。ＣＬＥＣ１２ＡＣＣＲはＣＤ３ζドメインを欠いており、ＣＡＲとして機能しなかった。同時にＣＡＲ活性化がない場合の単離ＣＣＲ活性化は、Ｔ細胞の活性化または細胞毒性を引き起こさなかった（図３）。

標的選択及びキメラ受容体の設計は、正常組織及び正常造血における標的発現に関連する安全性の特徴を考慮して行った。ＡＤＧＲＥ２とＣＬＥＣ１２Ａの共発現は単球サブセットに限定されていたが、他の全ての主要な系統では、ＡＤＧＲＥ２の発現が低いか、フローサイトメトリーでは検出不能であり（図４Ａ）、これはＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１がＨＳＣ及び顆粒球に対する活性の低下を示すことを示唆している（図５）。比較すると、ＨＳＣで共発現していた代替の標的ＣＤ３３及びＣＤ１２３は、より高いＣＡＲ媒介血液毒性をもたらした（図４Ｂ及び５）。ＩＨＣに対するＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａの市販の抗体を用いて、本開示の主題は、非造血組織が、検出されたシグナルの大部分がマクロファージなどの組織常駐骨髄由来細胞に関連するものと、ほとんど重複しない発現プロファイルを有することを実証した（図４Ｃ）。まとめると、これらの標的発現データは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ベクターを介したＣＡＲによるＡＤＧＲＥ２とＣＣＲによるＣＬＥＣ１２Ａとの組み合わせターゲティングが、ＡＤＧＲＥ２ターゲティング単独と比較して、正常な造血組織及び非造血組織に対するＣＡＲ－ＣＣＲＴ細胞の毒性を最小限に抑えることができ、ＣＤ３３またはＣＤ１２３ＣＡＲＴ細胞と比較して、ＨＳＣを温存する可能性が高くなることを示す。

要約すると、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ベクターに組み合わせたＡＤＧＲＥ２ＣＡＲとＣＬＥＣ１２ＡＣＣＲとは、微調整されたＣＤ３ζ１ＸＸＣＡＲシグナル伝達の文脈で、ＣＤ２８と４－１ＢＢ共刺激シグナル伝達の送達を最適化することによって、ＡＤＧＲＥ２抗原漏出のリスクを軽減し、全体的にＣＡＲＴ細胞効率を向上させたが、２つのＣＡＲを結合させることによって生じる可能性のあるオンターゲット／オフ腫瘍毒性が累積することはない。標的及びキメラ受容体設計のこの合理的な組合せ選択は、ＬＳＣｓを含むＲ／ＲＡＭＬのターゲティングを強化しつつ、望ましくない毒性のリスクを低減することができる。

実施例２－ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ
ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ベクター中のＡＤＧＲＥ２単鎖フラグメント可変部（ｓｃＦｖ）を、モノクローナル抗ヒトＡＤＧＲＥ２クローン２Ａ１抗体のペプチド配列を使用して生成したヒト化組み換え抗体２４バージョンから選択した。バインダー選択スキームは図６に存在する。マウスモノクローナル抗ヒトＡＤＧＲＥ２クローン２Ａ１は、ヒトサンプル中のＡＤＧＲＥ２発現を検出するために広く使用されている抗体である（Ｂｏｙｄｅｎｅｔａｌ．，ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ．３７４（７）：６５６－６３（２０１６））。（１）ヒト化２Ａ１抗体変異体の発現、（２）フローサイトメトリーによって測定したＡＤＧＲＥ２過剰発現のマウスリンパ腫ＥＬ４細胞への組み換え抗体の結合、及び（３）免疫原性スコアに基づいて、１８個のヒト化組み換え抗体を候補プールから選択した。次に、ＶＨ及びＶＬドメインを同定して、１８個のｓｃＦｖ候補を生成し、次いでこれらをＳＦＧベースのガンマレトロウイルスＣＡＲベクターに組み込み、機能的ＣＡＲアッセイで試験した（図７Ａ～図７Ｃ及び図８）。

ＣＡＲカセット中でヒト化２Ａ１ｓｃＦｖをそれぞれ発現するＳＦＧ－ガンマレトロウイルスベクターにＴ細胞を形質導入することにより、ＡＤＧＲＥ２特異的ＣＡＲＴ細胞を作製し、ＣＡＲＴ細胞の細胞毒性を、ＡＭＬ細胞株ＭＯＬＭ１３を用いて測定した。ＡＭＬ細胞よりも低いレベルのＡＤＧＲＥ２を発現するＨＳＣを含む、一部の正常な細胞型におけるＡＤＧＲＥ２発現を認識して、ＭＯＬＭ１３細胞株を、低（ＷＴ）または高レベルのＣＬＥＣ１２Ａを共発現させながら、高（ＷＴ）、低、または非常に低レベルのＡＤＧＲＥ２発現を実現するように遺伝子改変した（下の表１７を参照）。

これらの改変ＭＯＬＭ１３細胞株により、ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗ正常細胞を温存しながらＡＤＧＲＥ２－ｈｉｇｈＡＭＬ細胞を効率的に枯渇させる可能性が最も高く、それによって好ましい安全性プロフィールを維持するヒト化ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖの同定が可能になった（図７Ａ～図７Ｃ及び図８）。インビトロＣＡＲスクリーニングは、２つの異なるシグナルペプチド（ＣＤ８ａまたはＩｇＨＶ１－４）に関連する１８の異なるＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ候補が含まれていた。インビトロ標的細胞溶解の最も適切なパターンを媒介した６つのｓｃＦｖのセット（ＡＤＧＲＥ２－ｈｉｇｈ細胞の最大溶解及びＡＤＧＲＥ２－ｖｅｒｙ－ｌｏｗ細胞の最小溶解）を、試験した２つのシグナルペプチドの間で高い類似性で同定した（図７Ａ～図７Ｃ）。次に、これら６つのｓｃＦｖを、高（ＷＴ）、低、または非常に低レベルのＡＤＧＲＥ２を含む同じＡＭＬ細胞株ＭＯＬＭ１３を使用して、インビボモデルでテストした。ここでは、ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖＡＤＧＲＥ２－Ａは、ＡＤＧＲＥ２レベルが高い標的細胞に対しては最大の有効性を示し、ＡＤＧＲＥ２レベルが低い／非常に低い標的細胞に対してはそれぞれ低下／無効である有効性を示す、最も適切なインビボ応答パターンを示した。したがって、ＡＤＧＲＥ２－ＡをＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖとして、ＣＤ８ａシグナルペプチドと共に選択した。

実施例３－ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ
ヒトＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖは、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８Ｕ．１細胞と組換えヒトＣＬＥＣ１２Ａタンパク質で免疫したマウスから単離したリンパ球を融合することによって生成されたハイブリドーマによって産生される７４個の固有のヒト抗体から選択された。ＣＬＥＣ１２Ａ発現ＣＨＯ－Ｓ細胞への細胞上結合及び表面プラズモン共鳴アッセイを使用して、陽性クローンを選択した。ｓｃＦｖ選択の選択スキームを図９に示す。

１６個の異なるヒトＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ候補を、インビトロ１８時間ＣＡＲ細胞毒性アッセイ及びインビボ異種移植片モデルを使用して、２８ｚ１ＸＸＴＲＡＣ－ＣＡＲフォーマットで試験した。ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ同定の戦略とは異なり、ここでは、ｓｃＦｖの最終的な適用がＣＡＲではなくＣＣＲにあり、標的抗原レベルが高いことと低いこととの両方の文脈で考慮して、有効なｓｃＦｖを優先させた。したがって、ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖの高い標的感受性は毒性の増加とは関連しないと考えられる。Ｕ９３７（ＣＬＥＣ１２Ａ－ｈｉｇｈ）及びＭＯＬＭ１３（ＣＬＥＣ１２Ａ－ｌｏｗ）細胞株に関連した１６のｓｃＦｖのインビトロスクリーニングにより、９つの高分化能なＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖを同定した（図１０Ａ及び図１０Ｂ）。これらの９個のｓｃＦｖのその後のインビボスクリーニングにより、リードＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ（ＣＬＥＣ１２Ａ－Ａ）を同定した（図１１）。

実施例４－ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖとＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖのオフターゲット結合
ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ（ＡＤＧＲＥ２－Ａ）とＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ（ＣＬＥＣ１２Ａ－Ａ）のヒト原形質膜タンパク質に対するオフターゲット結合相互作用を、４段階のアプローチで実行した。すなわち、（１）スクリーニングのための精製組換えＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖ－Ｆｃ及びＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ－Ｆｃ試験タンパク質の最適濃度を決定するためのプレススクリーニング、（２）５，４７４個の全長ヒト原形質膜タンパク質、細胞表面に結合したヒト分泌タンパク質、及び３７１個のヒト細胞表面ヘテロ二量体を過剰発現する固定ＨＥＫ２９３細胞に対する試験タンパク質の結合をスクリーニングし、ライブラリーのヒットを同定、（３）固定細胞及び生細胞マイクロアレイを使用した確認的／特異的スクリーニング、（４）生細胞上でさらに同定された試験タンパク質特異的相互作用を調査するためのフローサイトメトリーに基づく後続研究、ならびに（５）陽性ヒットを確認するための細胞間結合アッセイ、である。以下の表は、ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖとＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖのオフバインディングデータをまとめている。

試験した５，８４５種類の原形質膜タンパク質から、精製されたＡＤＧＲＥ２－ｓｃＦｖ－Ｆｃタンパク質は、固定細胞マイクロアレイと生細胞マイクロアレイの両方で、その主要な標的細胞表面タンパク質であるＡＤＧＲＥ２のみに結合した。さらに、ＡＤＧＲＥ２－ｓｃＦｖ－Ｆｃは、他のＡＤＧＲＥタンパク質ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲＥ３、及びＡＤＧＲＥ５には結合しなかった。

ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ－Ｆｃは、その主たる標的であるＣＬＥＣ１２Ａと強い特異的相互作用を示した。また、固定細胞マイクロアレイ及び生細胞マイクロアレイの双方においてＳＥＣＴＭ１との相互作用は低いが検出可能であり、生細胞マイクロアレイのみのＲＴＮ３Ｒとの相互作用も有していた。精製されたＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ－Ｆｃを用いた用量滴定及びフローサイトメトリー実験を用いた追加試験では、ＳＥＣＴＭ１及びＲＴＮ４Ｒに対するＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖのＥＣ５０が、一次標的ＣＬＥＣ１２Ａに対してそれぞれ８００倍及び＞３７００倍を上回っていたことが実証された。また、ＣＬＥＣ１２ＡＣＣＲ発現Ｊｕｒｋａｔ細胞は、ＣＬＥＣ１２Ａを過剰発現するＨＥＫ２９３細胞と結合していたが、ＣＬＥＣ１２ＡＣＣＲ発現Ｊｕｒｋａｔ細胞は、ＳＥＣＴＭ１を過剰発現するＨＥＫ２９３細胞に対して非常に弱い～弱い結合を示した。併せて、これらのデータから、ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖ－ＦｃのＳＥＣＴＭ１及びＲＴＮ４Ｒへの結合が、生理学的に重要ではない可能性が示唆される。ＣＬＥＣ１２ＡＣＣＲの潜在的なオフターゲット結合は、ＡＤＧＲＥ２ＣＡＲの同時活性化がなければ細胞毒性を引き起こさず、新たな安全層が追加される（図１２）。

実施例５－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１の組み合わせＣＡＲ＋ＣＣＲターゲティングコンセプトの妥当性確認
図３及び図５に示される概略図に概説されるように、本開示の主題は、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１の組み合わせＣＡＲ＋ＣＣＲ設計が、低いＣＡＲ目標レベルを有する正常細胞を温存しつつ、ＡＭＬの効率的な除去を可能にするであろうという仮説を立てた。重要なことに、ＣＣＲ単独ではＣＡＲ介在性細胞溶解を補助及び増強するはずだが、個別に細胞溶解を誘発することはできない。このアプローチを、インビトロ及びインビボのモデルで検証した（図１２）。まず、標的細胞株を用いて、標的を発現しない（ＡＤＧＲＥ２－／ＣＬＥＣ１２Ａ－）、ＣＡＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２＋／ＣＬＥＣ１２Ａ－）、ＣＣＲ標的単独（ＡＤＧＲＥ２－／ＣＬＥＣ１２Ａ＋）、またはＣＡＲ及びＣＣＲ標的の双方（ＡＤＧＲＥ２＋／ＣＬＥＣ１２Ａ＋）でのインビトロモデルを確立した。また、ＣＣＲ標的単独ではインビトロ殺傷は誘発しなかったが、ＣＡＲ標的単独では殺傷も誘発し、これはＣＣＲ標的を標的細胞株で共発現させた場合にさらに増強された（図１２Ａ）。次に、ＡＤＧＲＥ２ＣＡＲシグナル伝達だけではＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗ細胞を完全に除去するには不十分であった（正常細胞のモデリング）が、ＡＤＧＲＥ２ＣＡＲとＣＬＥＣ１２ＡＣＣＲとの組み合わせのシグナル伝達により、完全かつ持続的なＡＭＬの寛解が可能であることがインビボで実証された（図１２Ｂ及び図１２Ｃ）。全体として、これらの結果は、ＡＭＬを効率的に除去しながら、ＣＡＲ標的の低いレベルを有する正常な細胞を温存するＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１の可能性を示している。

実施例６－ＳＦＧ－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１レトロウイルスベクター
ガンマレトロウイルスプラスミドＳＦＧ－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１（図１３）を構築し、プラスミドの同一性をＳａｎｇｅｒシーケンシング分析によって確認した。図１４に示すように、ガンマレトロウイルスベクターＳＦＧ－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、Ｐ２Ａ元素を介して連結された、ＡＤＧＲＥ２特異的ＣＡＲとＣＬＥＣ１２Ａ特異的ＣＣＲの両方を発現する。

ＳＦＧプラスミドは、ネコＲＤ１１４エンベロープでシュードタイプ化されたレトロウイルスベクターを産生するＨＥＫ２９３ベースのパッケージング細胞株である２９３Ｖｅｃ－ＲＤ１１４細胞を一時的にトランスフェクトするために使用される。２９３Ｖｅｃ－ＲＤ１１４（商標）パッケージング細胞から採取したベクター上清は、その後、２９３Ｖｅｃ－ＧａｌＶ（商標）（テナガザル白血病ウイルスエンベロープタンパク質で偽型化された第２のＨＥＫ２９３ベースのパッケージング細胞株）を形質導入するために使用され、２９３Ｖｅｃ－ＧａｌＶ－ＳＦＧ－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１を発現する安定な生産者細胞集団を生成する。２９３Ｖｅｃ－ＧａｌＶ（商標）ＳＦＧ－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ベクタープロデューサー集団から単一クローンを単離し、いくつかのシードバンクを作成し、最良力価クローンを特徴付ける。最良のプロデューサー細胞株であるリードクローンは、シードバンクからマスターセルバンク（ＭＣＢ）を生成するために使用する。レトロウイルスベクターストック（ＶＳ）は、ＭＣＢの１バイアルから製造される。

実施例７－ＳＦＧ－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１を用いた自己Ｔ細胞のエクスビボ形質導入
活性化された自己患者由来末梢血Ｔ細胞に、ＧａＬＶ偽型化ＳＦＧ－ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１レトロウイルスベクターストックをエクスビボで形質導入する。ＣＤ８＋及びＣＤ４＋Ｔ細胞を、ＰｒｏｄｉｇｙＣｌｉｎｉＭＡＣＳｐｌｕｓ装置（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ）を使用してＣＤ８及びＣＤ４マイクロビーズを使用して確実に単離し、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）で活性化する。ＣＤ８＋及びＣＤ４＋Ｔ細胞の初期の陽性選択は、主に形質導入されたＴ細胞産物におけるＢリンパ球、形質細胞、及び単球の数を最小限に抑える。色素標識精製ＡＤＧＲＥ２またはＣＬＥＣ１２Ａポリペプチドを用いた蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）アッセイを行い、ＡＤＧＲＥ２ＣＡＲ及びＣＬＥＣ１２ＡＣＣＲの発現を測定し、形質導入効率を決定する。患者投与用の製品の形質導入効率は４％以上である。

実施例８－剤形、投与経路、及び投薬レジメン（頻度及び持続時間）
ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞は、凍結保存バッグ内に提供され、施設、例えば、病院施設で解凍され、重力を介して静脈内（ＩＶ）注入として投与される。用量漸増中に評価されるべき計画された用量レベルを、以下の表１９に記載する。

ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の開始用量は、２５×１０^６個のＣＡＲＴ細胞である。この用量は、ＣＤ１９ＣＡＲの承認された用量（アキシカブタジェンには２×１０^６ＣＡＲＴ細胞／ｋｇ、チサゲンレクロイセルには６～６０×１０^７ＣＡＲＴ細胞）よりも有意に低く、また、多発性骨髄腫（５０～８００×１０^６ＣＡＲＴ細胞）で現在調査されているＢＣＭＡＣＡＲの用量よりも低い。この用量漸増は、標準的な３＋３設計を使用する。ＲＰ２Ｄの同定に続いて、ＲＰ２Ｄ用量コホートを拡張することができる。

実施例９－臨床研究
本実施例は、Ｒ／ＲＡＭＬに罹患した成人患者における本明細書に開示されたＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の安全性及び活性を評価するための第１相、非盲検、用量漸増研究である。標準的な３＋３用量漸増スキームを使用して、最大耐量（ＭＴＤ）またはＭＴＤに達しない場合の最大投与量（ＭＡＤ）を決定する。ＭＴＤまたはＭＡＤが同定されると、コホートは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の安全性及び活性をさらに評価するために、追加の患者を含むように拡張される。

３～６人の患者のコホートにＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の用量を段階的に注入してＭＴＤを確立する。計画された４つの用量レベル、２５×１０^６、５０×１０^６、１００×１０^６、１５０×１０^６ＣＡＲＴ細胞が存在する。標準的な３＋３の用量漸増設計を用量２５×１０^６から開始して実施する。３～６人の患者を各コホートで治療し、コホートで患者の３３％未満が予期しない用量制限毒性（ＤＬＴ）を経験した場合、次のコホートに用量漸増を進める。任意の所与のコホートの患者３人中１人に許容できない毒性が見られた場合、そのコホートでは従来の用量漸増スキームを使用して最大６人の患者が治療される。任意の所与のコホートで６人のうちの２人が許容できない毒性を経験した場合には、Ｔ細胞のＭＴＤを超えて、以前のコホート用量レベルで確立されている。最初の用量レベルがＭＴＤを超える場合、３～６人の患者の後続のコホートを、１０×１０^６ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の－１用量レベルで処置する。

コンディショニングまたはリンパ枯渇化学療法。患者は、－４、－３、－２日目にフルダラビン２５ｍｇ／ｍ^２、－３、－２日目にシクロホスファミド５００ｍｇ／ｍ^２からなるプレコンディショニング化学療法を受け、続いて０日目にＣＡＲＴ細胞注入を受ける。

ブリッジング療法。治療医の判断により、ブリッジング療法が考慮される場合がある。ブリッジング療法は、白血球除去療法の後に投与することができ、ヒドロキシウレアを除き、コンディショニング化学療法の開始の少なくとも２４時間前まで継続することができるが、コンディショニング化学療法の投与の少なくとも１週間前に中止する必要がある。対象は、ブリッジング療法の終了後、コンディショニング化学療法の開始前、またはコンディショニング化学療法の投与前４８時間以内に再ステージングを受ける必要がある。

疾患反応の評価。骨髄生検は、反応評価のためにＣＡＲＴ細胞注入の２８～３５日目に採取し、ＥＬＮ基準によって評価する。

Ｄ２８－３５疾患反応評価後の治療経過。疾患反応評価に続いて、図１６に示すように、提案されたアルゴリズムに従って後続の治療が案内される。

毒性評価。各治験訪問では、国立がん研究所（ＮＣＩ）の有害事象共通用語規準（ＣＴＣＡＥ）バージョン５．０、及びサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）及び免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）に関するＡＳＴＣＴコンセンサスグレーディングに従って毒性をグレード付けする。

薬物動態評価。薬物動態測定のための血液試験は、投与前に、１日目、３日目、５日目、７日目、１４日目、２１日目、及び２８～３０日目に行われる。その後の血液サンプルは、２ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、９ヶ月、１２ヶ月及び２４ヶ月目に採取される。

ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の用量レベル。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の開始量は、２５×１０^６個のＣＡＲＴ細胞である。この用量は、ＣＤ１９ＣＡＲの承認された用量（アキシカブタジェンには２×１０^６ＣＡＲＴ細胞／ｋｇ、チサゲンレクロイセルには６～６０×１０^７ＣＡＲＴ細胞）よりも有意に低く、また、多発性骨髄腫（５０～８００×１０^６ＣＡＲＴ細胞）で現在調査されているＢＣＭＡＣＡＲの用量よりも低い。体重が７０ｋｇであると仮定すると、提案された開始用量は、２×１０^５ＣＡＲＴ細胞／ｋｇになり、他の自己のＡＭＬＣＡＲ開始用量と比較して同等である（またはわずかに低い）。

用量制限毒性（ＤＬＴ）。ＤＬＴは、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞輸注後２８日以内に発生した、有害事象共通用語規準（ＣＴＣＡＥ）バージョン５．０、またはサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）及び免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）に関するＡＳＴＣＴコンセンサスグレーディングガイドラインに基づく以下の有害事象（ＡＥ）のいずれかと定義される。すなわち、（ａ）７日以内にグレード２以下に回復しない重要臓器（ＣＲＳ及びＩＣＡＮＳを除く）に対するグレード３以上の非血液学的ＡＥ、（ｂ）グレード４の好中球減少症または血小板減少症、及び持続性ＡＭＬがない場合の２８日目の骨髄細胞率が５％未満。ベースライン（プレコンディショニング化学療法及びＴ細胞注入）で存在し、活動性疾患がない場合に３０日目まで持続する持続性血球減少症は、ＤＬＴとはみなさない、（ｃ）グレード３以上の注入反応、（ｄ）任意の期間のグレード３または４のＩＣＡＮＳ、（ｅ）任意の期間のグレード４ＣＲＳ、（ｆ）グレード４の腫瘍溶解症候群、（ｇ）グレード４の毛細管漏出症候群、ならびに（ｈ）ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞に関連する任意のグレード５イベント、である。

用量漸増。用量漸増の目的は、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞のＭＴＤ／ＭＡＤを決定することである。用量漸増は、以下の３＋３用量漸増ルールに従う。（ａ）対象は用量レベル当たり３人の対象からなるコホートに登録されており、コホート内の最初の対象と２番目の対象のＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の投与間隔は最低１０日である。（ｂ）３人の対象の初期コホートでＤＬＴが報告されない場合、用量漸増は次に高い用量レベルに進むことができる。（ｃ）１人の対象がＤＬＴを有する場合、コホートは最大６人の対象まで拡張される。追加のＤＬＴが観察されない場合、その用量レベルは許容可能であるとみなされ、次に高い用量レベルに用量漸増を進めることができる。（ｄ）ＤＬＴ以外の理由でＤＬＴ観察期間の終了前に治験治療を中止または治験から撤退した対象は、ＤＬＴについて評価不能とみなされ、置き換えられる。（ｅ）同じ用量レベルのコホートに登録された６人の登録対象のうち１人以上の対象がＤＬＴを有する場合、ＭＴＤは超過している。その用量コホートへのさらなる登録は停止される。３＋３用量漸増ルールに従ってＭＴＤを決定するために、より低い用量レベルの６人の対象が登録される。（ｆ）ＭＴＤを超えた用量レベルが以前の最高耐容用量レベルの２倍以上である場合、これら２つのレベルのほぼ中間にある別の用量レベルを登録して、３＋３用量漸増ルールに従ってＭＴＤを決定することができる。（ｇ）ＭＴＤは、６人の評価可能な対象に最大１人のＤＬＴが存在する最高用量レベルのコホートである。

用量拡張。用量拡大の目的は、安全性及び忍容性をさらに評価し、将来の発達を誘導及び支援する活動シグナルを特定することである。用量拡大におけるＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の用量は、用量拡大の間に確立されたＭＴＤ／ＭＡＤである。用量拡大段階の間、Ｒ／ＲＡＭＬを有する対象は、用量拡大段階におけるのと同じ方法で治療され、最大で約１２人の対象を含む。

治験薬。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞は、凍結保存バッグとして提供され、施設で解凍され、重力による静脈内（ＩＶ）注入として投与される。計画された用量レベルは、本明細書で説明される用量漸増の間に評価する。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞を０日目に投与する。

非治験薬。コンディショニング化学療法には、（ａ）各治療サイクルの－３日目及び－２日目にシクロホスファミド（ＣＹ）、５００ｍｇ／ｍ２ＩＶ、ならびに（ｂ）各治療サイクルの－４日目、－３日目及び－２日目にフルダラビン（ＦＬＵ）、２５ｍｇ／ｍ２ＩＶ、が含まれる。ＣＹ及びＦＬＵの用量及びスケジュールは、血球減少症及び医療的併存症に基づいて変更される場合がある。

調査評価項目。主要評価項目には、Ｒ／ＲＡＭＬ患者においてＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞が投与される場合のＤＬＴの発生率及び性質が含まれる。二次評価項目には、（ａ）ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の有害事象の発生率、性質及び重症度、（ｂ）ＥＬＮ応答基準に従う完全奏功（ＣＲ）、不完全血液学的回復（ＣＲｉ）、形態白血病遊離状態（ＭＬＦＳ）及び部分奏功（ＰＲ）を達成する対象の割合として定義される調査者評価客観的反応率（ＯＲＲ）、（ｃ）ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の初回投与（０日目）から進行性疾患（ＰＤ）まで、または何らかの理由による死亡日のいずれか早い方までの期間として定義される無増悪生存期間（ＰＦＳ）、（ｄ）研究治療の開始から１年後に生存している対象の割合として定義される１年全生存率（ＯＳ）、ならびに（ｅ）ＰＣＲ及びフローサイトメトリーによって評価される、１日目からＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の検出可能レベルの最終評価までの期間として定義される、ピーク膨張及び持続性である、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の細胞動態、が含まれる。探索的評価項目には、（ａ）ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の増殖及び持続時間とＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａ抗原発現とＣＡＲＴ細胞の表現型とのＯＲＲ及び／またはＰＦＳの関連、（ｂ）マルチパラメータフローサイトメトリー及び／またはＮＧＳによるＣＲまたはＣＲｉを達成した患者のＭＲＤ評価、（ｃ）ＣＡＲＴ細胞注入後の血清サイトカインの分析、（ｄ）ＣＡＲ－ＣＣＲ構築物に対する免疫原性の分析、ならびに（ｅ）再発とＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａの発現レベル、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の持続性及び表現型及び腫瘍内微小環境の変化との関連、が含まれる。

腫瘍反応評価基準。抗腫瘍応答は、ＡＭＬのＥＬＮ反応基準に従って評価される。資格／参加基準には、（ａ）ＩＣＦ署名時の年齢が１８歳以上であること、；（ｂ）難治性または再発性ＡＭＬで、標準的な治療選択肢を使い果たした、あるいは適格ではない、または耐性がない（以下の疾患状態が研究の対象となる：（１）導入化学療法の２コース後、または低メチル化剤または低用量シタラビンとベネトクラクスの併用療法の１コース後、ＥＬＮ基準によるＣＲ／ＣＲｉまたはＭＬＦＳを達成していない原発性難治性疾患、または（２）ＨＳＣＴを含む治療過程中または治療後に奏効（ＣＲまたはＣＲｉ）を達成した後の任意の時点でＡＭＬが再発する；（ｃ）検出可能なあらゆる程度の疾患が対象となる；（ｄ）ＥＣＯＧパフォーマンスステータス０または１；（ｅ）対象者が長期にわたる骨髄形成不全から救出するために同種異系ＨＳＣＴを受ける必要がある場合に細胞を提供できる適切な幹細胞ドナーを特定すること（ドナーは血縁関係有りまたは無しの適合した供給源、ハプロまたは脊髄由来であり得、標準基準に従って適切であることが判明している必要がある）；（ｆ）白血病臓器の関与によるものと考えられない限り、血清クレアチニン＜２．０ｍｇ／１００ｍｌ、直接ビリルビン＜２．０ｍｇ／１００ｍｌ、ＡＳＴ及び／またはＡＬＴ≦５×ＵＬＮとして定義される適切な臓器機能を有すること、が含まれる。除外基準には、（ａ）急性前骨髄球性白血病の診断；（ｂ）放射線学的に検出された、または症候性のＣＮＳ疾患またはＣＮＳ３疾患、すなわちＣＳＦ中に５／μｌ以上のＷＢＣが存在する（適切に治療されたＣＮＳ白血病の被験者が適格である）；（ｃ）室内空気の酸素飽和度＜９０％；（ｄ）ＩＣＦ署名後３ヶ月以内の同種ＨＳＣＴ歴、または全身移植片対宿主療法が継続的に必要な同種ＨＳＣＴ患者；（ｅ）最初の治験投薬前６ヶ月以内の脳卒中または心筋梗塞を含む、臨床的に重大な心血管疾患、またはニューヨーク心臓協会グレード２以上の不安定狭心症またはうっ血性心不全の存在、または心臓駆出率が４０％未満；（ｆ）制御されていない臨床的に重大な感染症；（ｇ）ＨＩＶの血清学的検査結果が陽性；（ｈ）血清学的検査（ＨＢＶｓＡｇまたはＨＣＶａｂ）またはＰＣＲ結果によって評価される、急性または慢性のＨＢＶまたはＨＣＶ感染；ならびに（ｉ）全身治療を必要とする活動性の二次悪性腫瘍。ただし、スクリーニング前に２年超の病気の証拠がなく、治癒目的で治療された悪性腫瘍を除く、が含まれる。停止規則には、（ａ）用量漸増の場合、停止規則は用量漸増規則に従う；（ｂ）用量拡大の場合、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞に関連すると考えられる、または関連する可能性があると考えられる患者の死亡、または少なくとも６人の対象が登録されている拡大コホートにおいて、試験中のいずれかの時点でＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞治療に関連する毒性が３０％以上の対象に発現し、それが他のＤＬＴとして適格であった場合、試験への登録が一時的に停止される、が含まれる。

統計手法。一般的に、臨床データはコホートごとに、記述統計（ｎ、平均、標準偏差、標準誤差、中央値、第１四分位数（Ｑ１）、第３四分位数（Ｑ３）、連続変数の最小及び最大ならびに分類変数の頻度及び割合）を用いて、レジメンごとに別々に要約される。カテゴリカルデータを提示する場合には、頻度カウントがゼロのときに割合を抑制する。ゼロでない割合は小数第１位に丸めるが、１００％は小数第１位なしに表示する。選択された評価では、信頼区間（ＣＩ）が表示される。イベントまでの時間の変数は、カプラン・マイヤー法を用いて要約される。

実施例１０－抗ＡＤＧＲＥ２抗体及びｓｃＦｖの同定と特性評価
本実施例は、抗ＡＤＧＲＥ２抗体及びｓｃＦｖの結合親和性の導出及び特徴付けを実証する。抗体は、マウスリファレンス１クローンの２４のヒト化配列を含むハイブリドーマ技術を用いて開発した。抗体は、組み換えタンパク質変異体としての発現、ＦＡＣＳで測定したＡＤＧＲＥ２過剰発現マウスリンパ腫ＥＬ４細胞への結合、及び免疫原性スコアに基づいて選択し、一連のＡＤＧＲＥ２結合親和性を表す１８個のヒト化組み換え抗体を選択した。リファレンス１の抗ＡＤＧＲＥ２抗体のアミノ酸配列は、エンドプロテアーゼ消化とその後のＬＣ－ＭＳ／ＭＳによるペプチドプールの分析とによって決定した。簡単に説明すると、抗体の重鎖及び軽鎖を、還元条件下でＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分離した。クマシーブルーでの染色後、それぞれのバンドをゲルから切り出し、ＡｓｐＮ、キモトリプシン、トリプシン及びエラスターゼエンドペプチダーゼで消化した。さらに、抗体をペプシンによって溶液中で消化させた。消化により生成されたペプチドのプールをオービトラップアナライザ（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳＱ－Ｅｘａｃｔｉｖｅ，ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）で分析した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳデータを、ＰＥＡＫＳＡＢ抗体シーケンシングソフトウェアを使用して処理した。リファレンス１の抗ＡＤＧＲＥ２ＶＨ及びＶＬコード配列を、それぞれの抗体鎖配列から誘導し、ＩｇＧ２定常領域でクローニングした。組み換えリファレンス１抗体をＨＥＫ２９３細胞で発現させ、精製抗体を、ＡＤＧＲＥ２の細胞外ドメインを含む組み換え産生タンパク質を用いた表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）Ｋ_Ｄ分析及びＥＣ５０測定により、ＡＤＧＲＥ２を発現する細胞との結合のために、市販のリファレンス１抗体と比較した。その後の抗体スクリーニング作業では、精製組み換えリファレンス１抗体をリファレンス抗体として使用した。

実施例１１－抗ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖの細胞上結合
この実施例では、フローサイトメトリーによって測定した抗ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖの細胞上結合を示す。抗ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖの細胞上結合を、ＡＤＧＲＥ２を過剰発現するＥ４細胞に対するフローサイトメトリーによって評価した。各ｓｃＦｖをＡＤＧＲＥ２への結合について試験し、リファレンス１ｍＡｂと比較した。簡潔にいえば、１ウェルあたり１００，０００個の細胞を９６ウェルＶ底板に播種し、ｓｃＦｖを２００ｎＭｓｃＦｖに希釈し、次いで１：４で０．０１ｎＭまで連続的に希釈した。ｓｃＦｖの用量依存的滴定により、組み換えｓｃＦｖのＡＤＧＲＥ２へのフォールディング及び結合を検証した。ヒト化プロセスに起因する親和性の変動によって引き起こされる可能性のあるインビボで見られる差異をより適切に解釈するために、ＥＣ_５０親和性を比較した。データは、Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用し、４パラメータ回帰を使用して分析した。近似ＥＣ_５０値を、式：Ｙ＝Ｂｏｔｔｏｍ＋（Ｔｏｐ－Ｂｏｔｔｏｍ）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＥＣ_５０－Ｘ）＊ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ））を用いて決定した。ここで適合パラメータは次のように定義される。すなわち、達成可能な最小結合を示す下側プラトーであるＢｏｔｔｏｍ、達成可能な最大結合を示す上部プラトーであるＴｏｐ、用量反応曲線の変曲点であり、最大反応の半分を生じる濃度としても知られているＬｏｇＥＣ５０、用量反応曲線の傾きであるＨｉｌｌ－Ｓｌｏｐｅ、である。

表２０に示すように、曲線から計算されたＥＣ_５０値は、各抗体が１０．２～９３．８の親和性で細胞に結合することを示している。全体として、結果は、試験したヒト化ｓｃＦｖが、リファレンス１標準に匹敵するＥＣ_５０値を有することを示した。

実施例１２－抗ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖのインシリコ免疫原性分析
この実施例は、インシリコ免疫原性分析を例示する。簡単に説明すると、マウスリファレンス１ｓｃＦｖ配列を、様々な予測データベースＩＥＤＢ、ＳＭＮ－Ａｌｉｇｎ、ＮＮ－Ａｌｉｇｎに基づいて、ヒトＭＨＣＩ及びＭＨＣＩＩ提示予測ソフトウェアによってヒト化ｓｃＦｖを使用して分析した。

表２１に示すように、抗体の免疫原性は、ＭＨＣＩまたはＭＨＣＩＩの結合、あるいはＭＨＣＩとＭＨＣＩＩの両方への結合に基づいて特徴付けた。全体として、データは、試験した全てのヒト化抗体の免疫原性が低いと予測する。

実施例１３－抗ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖのオフターゲットスクリーニングパネルアッセイ
この実施例は、オフターゲット結合アッセイにおける抗ＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖの特異性を示す。簡単に言えば、ヒト化ｓｃＦｖ変異体をオフターゲット結合について試験した。３つの例示的なＡＤＧＲＥ２ｓｃＦｖクローンを「カットダウンアッセイ」で実行して、３０００個を超えるヒト受容体への結合をスクリーニングした。カットダウンアッセイでは、結合が高いほど相互作用の現実性が高くなる。一般に、「Ｖ．ｗｅａｋ」とラベル付けされたヒットは、実際の相互作用である可能性は低い。結果は、試験した全てのクローンがオフターゲット結合を示さないことを示した。したがって、これらのクローンはＡＤＧＲＥ２に対して高度に特異的であることが判明した。

実施例１４－抗ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖのＣｌｅｃ１２Ａ結合の特性評価
本実施例は、抗ＣＬＥＣ１２Ａ抗体の結合親和性の導出及び特徴付けを実証する。Ｃｌｅｃ１２Ａ抗体の選択及びスクリーニングのために、ハイブリドーマ技術を使用した。選択は、ＣＨＯ－Ｓ細胞を過剰発現するＣｌｅｃ１２Ａに対して実行した。抗体は様々な配列に対して選択した。一連の可溶性及び細胞上のＣｌｅｃ１２Ａ結合親和性について、７４個の抗体から１６個の抗体を選択した。Ｃｌｅｃ１２Ａ抗体の結合親和性をＢｉａｃｏｒｅ分析によって決定した。

また、本実施例は、抗ＣＬＥＣ１２Ａ抗体の非特異的結合を評価する。抗ＣＬＥＣ１２Ａ抗体が非特異的膜タンパク質に結合する可能性を評価するために、４つのリード抗体に由来するｓｃＦｖを表面膜タンパク質（ＳＭＰ）アッセイで評価した（図１７Ａ）。使用したＳＭＰアッセイは、プレート上にコーティングされたヒトＨＥＫ－２９３細胞膜または昆虫ＳＦ９細胞膜を用いたＥＬＩＳＡベースのアッセイであり、試験抗体によるこれらの膜への非特異的結合を試験した。内部対照の高及び低非特異的結合抗体を含めた。使用した高非特異結合対照であるｓｃ２０９は、臨床においてオフターゲット毒素を有する抗体であったが、低非特異結合対照である５ｆ９は、臨床においてオフターゲット毒素を示さなかった（図１７Ｂ）。

全体として、結果は、抗ＣＬＥＣ１２Ａ抗体ＣＬＥＣ１２－Ｃ、ＣＬＥＣ１２－Ｄ及びＣＬＥＣ１２Ａによる非特異的結合が低いことを示した（図１７Ｂ）

実施例１５－抗ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖのオフターゲットスクリーニングパネルアッセイ
この実施例は、オフターゲット結合アッセイにおける抗ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖの特異性を示す。簡単に言えば、抗ＣＬＥＣ１２ＡｓｃＦｖがＣｌｅｃ１２Ａばかりでなく他の膜タンパク質にも特異的であるかを試験するために、オフターゲット結合アッセイを行った。２つの選択したＣｌｅｃ１２ＡｓｃＦｖクローンを「カットダウンアッセイ」で実行して、３０００個を超えるヒト受容体の結合をスクリーニングした。カットダウンアッセイでは、結合が高いほど、相互作用が実際に存在する可能性が高くなる。一般に、「Ｖ．ｗｅａｋ」とラベル付けされたヒットは、実際の相互作用である可能性は低い。ｓｃＦｖＣＬＥＣ１２Ａ－Ａは、Ｃｌｅｃ１２Ａ以外の受容体またはこのアッセイでアーチファクトとして現れる受容体に対して非特異的相互作用を示さなかった。このカットダウンアッセイを用いて、オフターゲットアッセイ用のクローンをスクリーニングした。選択されたｓｃＦｖ－Ｆｃクローンは、追加のスクリーニング及び確認アッセイにおいてより包括的に試験されている。

実施例１６－前臨床研究
ＣＡＲＴ細胞療法は、様々なＢ細胞に関連する血液悪性腫瘍において強力な治療オプションを提供する。有効性に関する主要な課題の１つは、抗原密度が低い腫瘍細胞の回避であり、これはＣＡＲ療法で治療されるいくつかの悪性腫瘍で臨床的に観察されている。標的抗原発現のクローン変動を含む表現型の不均一性に対処するには、ＣＡＲ設計の新しい概念が必要である。図１８Ａは、ブール論理のＯＲゲート及びＡＮＤゲートの概念ならびにＩＦ－ＴＨＥＮゲート式ＣＡＲ発現を含む、以前に報告された組み合わせＣＡＲ概念を示す。

本発明者らは、標的の不均一性及び低抗原回避によるＡＭＬ耐性を克服することができる組み合わせＣＡＲ概念を開発した。低抗原再発は、相乗効果を発揮し、それぞれの標的の選択に合わせて調整される組み合わせシグナル伝達を備えた新規キメラ受容体設計によって予防することができる。

ＡＭＬ対正常造血におけるフローサイトメトリー抗原発現プロファイリングを、ＡＭＬにおける以前に発見されたいくつかのＣＡＲ標的候補に対して行った。理想的な組み合わせＣＡＲ設計を同定するためのプラットフォームを提供するために、ＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａの抗原レベルが上方または下方制御されているヒトＡＭＬ細胞株に基づくインビトロ及びインビボモデルを確立して、ＡＭＬ標的の不均一性と低抗原回避とを模倣した。バイシストロン性γ－レトロウイルスベクターを用いて、ＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａを標的とした異なる組み合わせＣＡＲフォーマットをスクリーニングした。

ＡＤＧＲＥ２は、分子不均一なＡＭＬ患者集団におけるＡＭＬバルク細胞及び白血病幹細胞（ＬＳＣ）に対するその高陽性率のためにＣＡＲ標的として選択した（図１Ａ及び１Ｂ）。ＡＤＧＲＥ２－ＡｓｃＦｖを含む細胞外抗原結合ドメインを含むＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲの親和性を測定し、ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗ正常細胞の温存を可能にする理想的な死滅閾値を達成するためにＣＤ３ゼータシグナル伝達を微調整した。次に、本発明者らは、潜在的なＣＡＲ標的抗原低ＡＭＬ回避を軽減するための第２のＡＭＬ関連抗原の同時標的化の可能性を調査した。ＣＬＥＣ１２Ａは、正常な造血及び他の生命組織におけるその重複しない発現プロファイルのために、適切な共標的として同定した（図４Ａ～図４Ｃ）。

ＡＤＧＲＥ２－ＡｓｃＦｖを含む細胞外抗原結合ドメインと、ＣＬＥＣ１２Ａ－ＡｓｃＦｖを含む細胞外抗原結合ドメインを含むＣＬＥＣ１２Ａ標的化キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）とを有するＡＤＧＲＥ２標的化２８ｚ１ＸＸ－ＣＡＲを含む新規組み合わせＣＡＲ構築物であるＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１を開発した。さらに、ＡＤＧＲＥ２－ＡｓｃＦｖを含む細胞外抗原結合ドメインと、ＣＬＥＣ１２Ａ－ＡｓｃＦｖを含む細胞外抗原結合ドメインを含むＣＬＥＣ１２Ａ標的化ＢＢｚ－ＣＡＲとを含むＡＤＧＲＥ２標的化２８ｚ１ＸＸ－ＣＡＲを含む構築物も開発した。

ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」と記載されたゲーティング戦略に基づいて動作する（図１８Ｂ）：高ＣＡＲ標的発現は単独で死滅を引き起こすが、低ＣＡＲ標的発現は、ＣＣＲ標的が存在しない限りは、それを引き起こさない。さらなるＣＣＲ相互作用により、アビディティー及び共刺激の向上によってＣＡＲ媒介殺傷の閾値が低下し、双方の抗原を発現する標的細胞に意図的に限定されるより高いＣＡＲ感度が可能になる。

ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１に関連して、ＡＤＧＲＥ２陽性／ＣＬＥＣ１２Ａ陰性及びＡＤＧＲＥ２陽性／ＣＬＥＣ１２Ａ陽性細胞は細胞溶解を誘発したが、ＡＤＧＲＥ２陰性／ＣＬＥＣ１２Ａ陽性細胞及びＡＤＧＲＥ２陰性／ＣＬＥＣ１２Ａ陰性細胞は免れた。重要なことに、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、ＡＤＧＲＥ２陽性／ＣＬＥＣ１２Ａ陰性細胞と比較して、ＡＤＧＲＥ２陽性／ＣＬＥＣ１２Ａ陽性細胞をより効率的に死滅させることを媒介した（図１９Ａ）。

抗原回避をモデル化するために、様々なレベルのＡＤＧＲＥ２を持つＡＭＬ細胞株を使用すると、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲと比較して、ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗ／ＣＬＥＣ１２Ａ－ｌｏｗ及びＡＤＧＲＥ２－ｖｅｒｙ－ｌｏｗ／ＣＬＥＣ１２Ａ－ｌｏｗＡＭＬ標的細胞に対して優れた殺傷能力を示した（図１９Ｂ）。

低レベルのＡＤＧＲＥ２を有する改変ＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株変異体のＮＳＧインビボ異種移植モデルを使用して抗原回避をモデル化したところ、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＣＲを介した補助を欠くＣＬＥＣ１２Ａ標的ＣＣＲなしで、ＡＤＧＲＥ２－ＡｓｃＦｖ単独を含む細胞外抗原結合ドメインを含むＡＤＧＲＥ２標的ＣＡＲよりも優れていることが判明した。重要なことに、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗＭＯＬＭ１３の設定において、その他が同一である択一的なデュアルＣＡＲバージョン（ＯＲゲートＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ＋ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＡＲ）よりも優れており、全体的なシグナル伝達を微調整することの重要性をさらに強調している（図２０）。インビボでの高い活性は、集団全体のＡＭＬ不均一性を反映する広範囲のＡＤＧＲＥ２及びＣＬＥＣ１２Ａレベルを有する多様なＡＭＬ細胞株に対しても確認された（図２０）。

臨床的に重要なＣＡＲＴ細胞の用量では、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、ＭＯＬＭ１３（ＡＤＧＲＥ２－ｈｉｇｈ／ＣＬＥＣ１２Ａ－ｌｏｗ）及びＵ９３７（ＡＤＧＲＥ２－ｌｏｗ／ＣＬＥＣ１２Ａ－ｈｉｇｈ）の異種移植モデルにおいて、完全かつ持続的な寛解を誘導した。具体的には、ＡＤＧＲＥ２－ｈｉｇｈ（ＷＴ）及びＣＬＥＣ１２Ａ－ｈｉｇｈ抗原レベルを有するＭＯＬＭ１３ＡＭＬ細胞株変異体を使用するＮＳＧ異種移植片モデルにおいて、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞を低用量に滴定し、完全かつ持続的な寛解を誘発するために、１×１０^５ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１Ｔ細胞を最小有効用量として確定した（図２０）。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞は、７０日間を超えて機能的に持続し、単回ＣＡＲＴ細胞用量は、ＡＭＬ再チャレンジを介してモデル化された再発を強力に回避することが判明した（図２１）。

要約すると、これらのデータは、「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」ゲートＣＡＲ＋ＣＣＲＴ細胞（ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１）が単一ＣＡＲＴ細胞（ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ）及びデュアルＣＡＲＴ細胞（ＡＤＧＲＥ２－ＣＡＲ＋ＣＬＥＣ１２Ａ－ＣＡＲ）よりも優れたパフォーマンスを発揮できるという前臨床証拠を提供する。ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１は、ＡＭＬでは一般的に見られるが、重要な正常細胞では限定されている合理的に選択された組み合わせ標的抗原シグネチャの検出を介して、抗白血病有効性を高め、抗原低ＡＭＬ回避を防いだ。表現型を代表するＡＭＬ異種移植モデルと臨床的に関連するＴ細胞用量を使用して、ＡＤＣＬＥＣ．ｓｙｎ１ＣＡＲＴ細胞の高い治療可能性が実証され、「ＩＦ－ＢＥＴＴＥＲ」ゲート制御ＣＡＲコンセプトの第１相試験への臨床応用がさらに裏付けられた。

本開示の主題及びその利点のいくつかは詳細に説明されているが、本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく、様々な変更、置換及び変更を本明細書において行うことができることを理解されたい。さらに、本願の範囲は、本明細書に記載されたプロセス、機械、製造、及び物質の組成、ならびに方法の特定の実施形態に限定されることは意図されていない。当業者であれば、本開示の主題の開示から容易に理解できるように、本明細書に記載された対応する実施形態と実質的に同じ機能を実行するか、または実質的に同じ結果を達成する、現在存在する、または今後開発されるプロセス、機械、製造、物質の組成、または方法を、本開示の主題に従って利用することができる。したがって、添付の特許請求の範囲は、そのようなプロセス、機械、製造、物質の組成、または方法をその範囲内に含むことを意図している。

様々な特許、特許出願、刊行物、製品の説明、プロトコル、及び配列受託番号が本出願全体にわたって引用されており、それらの開示は、あらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

Claims

ＡＤＧＲＥ２に結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内ドメインを含むキメラ受容体であって、前記細胞外抗原結合ドメインが、
ａ）配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変領域、及び／または
ｂ）配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変領域、を含む、前記キメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、またはＦ（ａｂ）_２を含む、請求項１に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む、請求項２に記載のキメラ受容体。
前記ｓｃＦｖはヒト化ｓｃＦｖである、請求項３に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項１～５のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項１～６のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、または配列番号１４６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む、請求項１～７のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４６、または配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１～８のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１～９のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、または配列番号１４７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む、請求項１～１０のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４７、または配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１１のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１２のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、または配列番号１４６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、または配列番号１４７で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４６、または配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４０、配列番号４４、配列番号４７、または配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１４のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
ａ）前記重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）前記重鎖可変領域は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）前記重鎖可変領域は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を含む、
ｄ）前記重鎖可変領域は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含む、
ｅ）前記重鎖可変領域は、配列番号５２で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号５３で表されるアミノ酸配列を含む、
ｆ）前記重鎖可変領域は、配列番号５５で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号５６で表されるアミノ酸配列を含む、または
ｇ）前記重鎖可変領域は、配列番号１４６で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１４７で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１５のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
ａ）前記重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）前記重鎖可変領域は、配列番号４３で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４４で表されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）前記重鎖可変領域は、配列番号４６で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４７で表されるアミノ酸配列を含む、または
ｄ）前記重鎖可変領域は、配列番号４９で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号５０で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１６のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む、請求項１～１７のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインは、前記重鎖可変領域と前記軽鎖可変領域との間にリンカーを含む、請求項１～１８のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記リンカーが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、または配列番号１４９で表されるアミノ酸配列からなる、請求項１９に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域及び前記軽鎖可変領域は、Ｎ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される、請求項１～２０のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号４１、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、または配列番号１４８で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる、請求項１～２１のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号４１、配列番号４５、配列番号４８、または配列番号５１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる、請求項１～２２のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号４１で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる、請求項１～２３のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインは、約１０^－８Ｍ未満、約１０^－９Ｍ未満、約１０^－１０Ｍ未満、約１０^－１１Ｍ未満、約１０^－１２Ｍ未満、または約１０^－１３Ｍ未満の解離定数（Ｋ_Ｄ）でＡＤＧＲＥ２に結合する、請求項１～２４のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインは、約１ｎＭ～約１００ｎＭのＥＣ５０でＡＤＧＲＥ２に結合する、請求項１～２５のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記ＥＣ５０が約１０ｎＭ～約９５ｎＭである、請求項２６に記載のキメラ受容体。
前記ＥＣ５０が約２５ｎＭ～約７５ｎＭである、請求項２６に記載のキメラ受容体。
前記膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド、ＣＤ２８ポリペプチド、ＣＤ３ζポリペプチド、ＣＤ４ポリペプチド、４－１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＣＴＬＡ－４ポリペプチド、ＰＤ－１ポリペプチド、ＬＡＧ－３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、またはＢＴＬＡポリペプチドを含む、請求項１～２８のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記膜貫通ドメインはＣＤ２８ポリペプチドを含む、請求項２９に記載のキメラ受容体。
前記細胞内ドメインはＣＤ３ζポリペプチドを含む、請求項１～３０のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記ＣＤ３ζポリペプチドが、改変ＣＤ３ζポリペプチドである、請求項３１に記載のキメラ受容体。
前記改変ＣＤ３ζポリペプチドは、天然ＩＴＡＭ１、２つの機能喪失変異からなるＩＴＡＭ２変異体、及び２つの機能喪失変異からなるＩＴＡＭ３変異体を含む、請求項３２に記載のキメラ受容体。
前記天然ＩＴＡＭ１が、配列番号１５で表されるアミノ酸配列からなる、請求項３３に記載のキメラ受容体。
前記ＩＴＡＭ２変異体が、配列番号２１で表されるアミノ酸配列からなる、請求項３３または請求項３４に記載のキメラ受容体。
前記ＩＴＡＭ３変異体が、配列番号２５で表されるアミノ酸配列からなる、請求項３３～３５のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記改変ＣＤ３ζポリペプチドが、配列番号２７で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる、請求項３２～３６のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞内ドメインは、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、請求項３１～３７のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチド、４－１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ－１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを含む、請求項３８に記載のキメラ受容体。
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチドを含む、請求項３９に記載のキメラ受容体。
前記キメラ受容体が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）、またはＴＣＲ様融合分子である、請求項１～４０のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記キメラ受容体がＣＡＲである、請求項４１に記載のキメラ受容体。
ＣＬＥＣ１２Ａに結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内ドメインを含むキメラ受容体であって、前記細胞外抗原結合ドメインが、
ａ）重鎖可変領域であって、
ｉ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｉ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｉｉ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｖ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉ）配列番号１０９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉｉ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉｉｉ）配列番号１２０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、あるいは
ｉｘ）配列番号１２９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む前記重鎖可変領域、及び／または
ｂ）軽鎖可変領域であって、
ｉ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｉ）配列番号８４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｉｉ）配列番号９２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｉｖ）配列番号９９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉ）配列番号１１０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉｉ）配列番号１１５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、
ｖｉｉｉ）配列番号１２３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、あるいは
ｉｘ）配列番号１３２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む前記軽鎖可変領域、を含む、前記キメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、またはＦ（ａｂ）_２を含む、請求項４３に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインが、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む、請求項４４に記載のキメラ受容体。
前記ｓｃＦｖはヒトｓｃＦｖである、請求項４５に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域が、
ａ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｂ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｃ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｄ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｅ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｆ）配列番号１０９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｇ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｈ）配列番号１２０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、または
ｉ）配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む、請求項４３～４６のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域が、
ａ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｂ）配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｃ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、または
ｄ）配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む、請求項４３～４７のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項４３～４８のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域が、
ａ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｂ）配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｃ）配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｄ）配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｅ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｆ）配列番号１１０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｇ）配列番号１１５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｈ）配列番号１２３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、または
ｉ）配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む、請求項４３～４９のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域が、
ａ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｂ）配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｃ）配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、または
ｄ）配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む、請求項４３～５０のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項４３～５１のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
ａ）前記重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｂ）前記重鎖可変領域は、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｃ）前記重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｄ）前記重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｅ）前記重鎖可変領域は、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１０５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｆ）前記重鎖可変領域は、配列番号１０９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１１０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｇ）前記重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１１５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１１６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｈ）前記重鎖可変領域は、配列番号１２０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１２３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１２４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１２５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、または
ｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号１２９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１３０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１３２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号１３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項４３～５２のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
ａ）前記重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｂ）前記重鎖可変領域は、配列番号８１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号８４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号８５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、
ｃ）前記重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号９２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、または
ｄ）前記重鎖可変領域は、配列番号８９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号９８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号９９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号１５１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項４３～５３のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項４３～５４のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号７５、配列番号８６、配列番号９５、配列番号１００、配列番号１０６、配列番号１１１、配列番号１１７、配列番号１２６、または配列番号１３５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む、請求項４３～５５のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号７５、配列番号８６、配列番号９５、配列番号１００、配列番号１０６、配列番号１１１、配列番号１１７、配列番号１２６、または配列番号１３５で表されるアミノ酸配列を含む、請求項４３～５６のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号７５、配列番号８６、配列番号９５、または配列番号１００で表されるアミノ酸配列を含む、請求項４３～５７のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含む、請求項４３～５８のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号７６、配列番号８７、配列番号９６、配列番号１０１、配列番号１０７、配列番号１１２、配列番号１１８、配列番号１２７、または配列番号１３６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む、請求項４３～５９のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号７６、配列番号８７、配列番号９６、配列番号１０１、配列番号１０７、配列番号１１２、配列番号１１８、配列番号１２７、または配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を含む、請求項４３～６０のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号７６、配列番号８７、配列番号９６、または配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を含む、請求項４３～６１のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む、請求項６３～６２のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
ａ）前記重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）前記重鎖可変領域は、配列番号８６で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号８７で表されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）前記重鎖可変領域は、配列番号９５で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号９６で表されるアミノ酸配列を含む、
ｄ）前記重鎖可変領域は、配列番号１００で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を含む、
ｅ）前記重鎖可変領域は、配列番号１０６で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１０７で表されるアミノ酸配列を含む、
ｆ）前記重鎖可変領域は、配列番号１１１で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１１２で表されるアミノ酸配列を含む、
ｇ）前記重鎖可変領域は、配列番号１１７で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１１８で表されるアミノ酸配列を含む、
ｈ）前記重鎖可変領域は、配列番号１２６で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１２７で表されるアミノ酸配列を含む、または
ｉ）前記重鎖可変領域は、配列番号１３５で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１３６で表されるアミノ酸配列を含む、請求項４３～６３のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
ａ）前記重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む、
ｂ）前記重鎖可変領域は、配列番号８６で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号８７で表されるアミノ酸配列を含む、
ｃ）前記重鎖可変領域は、配列番号９５で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号９６で表されるアミノ酸配列を含む、または
ｄ）前記重鎖可変領域は、配列番号１００で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１０１で表されるアミノ酸配列を含む、請求項４３～６４のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む、請求項４３～６５のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインは、前記重鎖可変領域と前記軽鎖可変領域との間にリンカーを含む、請求項４３～６６のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記リンカーが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、または配列番号１４９で表されるアミノ酸配列からなる、請求項６７に記載のキメラ受容体。
前記重鎖可変領域及び前記軽鎖可変領域は、Ｎ末端からＣ末端へＶ_Ｈ－Ｖ_Ｌに配置される、請求項４３～６８のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号７９、配列番号８８、配列番号９７、配列番号１０２、配列番号１０８、配列番号１１３、配列番号１１９、配列番号１２８、または配列番号１３７で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる、請求項４３～６９のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号７９、配列番号８８、配列番号９７、または配列番号１０２で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる、請求項４３～７０のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含むか、またはｓｃＦｖであり、このｓｃＦｖは配列番号７９で表されるアミノ酸配列を含むか、またはそのアミノ酸配列からなる、請求項４３～７１のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインは、約１０^－８Ｍ未満、約１０^－９Ｍ未満、約１０^－１０Ｍ未満、約１０^－１１Ｍ未満、約１０^－１２Ｍ未満、または約１０^－１３Ｍ未満の解離定数（Ｋ_Ｄ）でＣＬＥＣ１２Ａに結合するｓｃＦｖを含むか、またはそのｓｃＦｖである、請求項４３～７２のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記Ｋ_Ｄが、約０．１ｐＭ以下である、請求項７３に記載のキメラ受容体。
前記Ｋ_Ｄが、約０．０５ｐＭ～約０．５ｐＭである、請求項７３に記載のキメラ受容体。
前記Ｋ_Ｄが、約０．１ｎＭ～約５．０ｎＭである、請求項７３に記載のキメラ受容体。
前記Ｋ_Ｄが、約０．３ｎＭ～約３．５ｎＭである、請求項７６に記載のキメラ受容体。
前記細胞外抗原結合ドメインが、約１ｎＭ～約１００ｎＭのＥＣ５０でＣＬＥＣ１２Ａに結合するｓｃＦｖを含むか、またはそのｓｃＦｖである、請求項４３～７７のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記膜貫通ドメインは、ＣＤ８ポリペプチド、ＣＤ２８ポリペプチド、ＣＤ３ζポリペプチド、ＣＤ４ポリペプチド、４－１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＣＴＬＡ－４ポリペプチド、ＰＤ－１ポリペプチド、ＬＡＧ－３ポリペプチド、２Ｂ４ポリペプチド、またはＢＴＬＡポリペプチドを含む、請求項４３～７８のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記膜貫通ドメインはＣＤ８ポリペプチドを含む、請求項７９に記載のキメラ受容体。
前記キメラ受容体が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、キメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）、またはＴＣＲ様融合分子である、請求項４３～８０のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記キメラ受容体がキメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）である、請求項８１に記載のキメラ受容体。
前記細胞内ドメインはＣＤ３ζポリペプチドを含まない、請求項４３～８２のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記細胞内ドメインは、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域を含む、請求項４３～８３のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２８ポリペプチド、４－１ＢＢポリペプチド、ＯＸ４０ポリペプチド、ＩＣＯＳポリペプチド、ＤＡＰ－１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせを含む、請求項８４に記載のキメラ受容体。
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達領域は、４－１ＢＢポリペプチドを含む、請求項８５に記載のキメラ受容体。
前記キメラ受容体は、ベクターから発現される、請求項１～８６のいずれか１項に記載のキメラ受容体。
前記ベクターが、ウイルスベクターである、請求項８７に記載のキメラ受容体。
前記ウイルスベクターは、レトロウイルスベクターである、請求項８８に記載のキメラ受容体。
請求項１～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体を含む、細胞。
ａ）請求項１～４２及び８７～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体である第１のキメラ受容体と、ｂ）請求項４３～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体である第２のキメラ受容体とを含む、細胞。
前記第１のキメラ受容体がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であり、ｂ）前記第２のキメラ受容体がキメラ共刺激受容体（ＣＣＲ）である、請求項９１に記載の細胞。
前記ＣＡＲが、ＡＤＧＲＥ２に結合し、かつ
ａ）配列番号３３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変領域、及び／または
ｂ）配列番号３６で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変領域、を含む、細胞外抗原結合ドメインを含む、請求項９２に記載の細胞。
前記重鎖可変領域は、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３５で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号３６で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３７で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３８で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項９３に記載の細胞。
ａ）前記重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含み、及び／または
ｂ）前記軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む、請求項９３または請求項９４に記載の細胞。
前記重鎖可変領域は、配列番号３９で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号４０で表されるアミノ酸配列を含む、請求項９５に記載の細胞。
前記ＣＣＲが、ＣＬＥＣ１２Ａに結合し、かつ
ａ）配列番号６９で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変領域、及び／または
ｂ）配列番号７２で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列またはその保存的改変を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変領域、を含む、細胞外抗原結合ドメインを含む、請求項９２～９６のいずれか１項に記載の細胞。
前記重鎖可変領域は、配列番号６９で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７０で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７１で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号７２で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７３で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号７４で表されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む、請求項９７に記載の細胞。
ａ）前記重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含み、及び／または
ｂ）前記軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列と少なくとも約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一または相同であるアミノ酸配列を含む、請求項９７または請求項９８に記載の細胞。
前記重鎖可変領域は、配列番号７５で表されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号７６で表されるアミノ酸配列を含む、請求項９５に記載の細胞。
前記細胞は、前記キメラ受容体を形質導入される、請求項９０～１００のいずれか１項に記載の細胞。
前記キメラ受容体は、前記細胞の表面上に構成的に発現される、請求項９０～１０１のいずれか１項に記載の細胞。
前記細胞が免疫応答性細胞である、請求項９０～１０２のいずれか１項に記載の細胞。
前記細胞が、リンパ系の細胞または骨髄系の細胞である、請求項９０～１０３のいずれか１項に記載の細胞。
前記細胞は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、リンパ系細胞が分化し得る幹細胞、及び骨髄系細胞が分化し得る幹細胞からなる群から選択される、請求項９０～１０４のいずれか１項に記載の細胞。
前記細胞がＴ細胞である、請求項９０～１０５のいずれか１項に記載の細胞。
前記Ｔ細胞は、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、メモリーＴ細胞、制御性Ｔ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、ナチュラルキラーＴ細胞、粘膜関連インバリアントＴ細胞、及びγδ型Ｔ細胞からなる群から選択される、請求項１０５または請求項１０６に記載の細胞。
前記細胞がナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である、請求項９０～１０５のいずれか１項に記載の細胞。
前記ＮＫ細胞が幹細胞に由来する、請求項１０８に記載の細胞。
前記幹細胞が多能性幹細胞である、請求項１０５または請求項１０９に記載の細胞。
前記多能性幹細胞が、胚様幹細胞または人工多能性幹細胞である、請求項１１０に記載の細胞。
請求項１～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体をコードする、核酸分子。
請求項１～４２及び８７～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体をコードする、核酸分子。
請求項４３～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体をコードする、核酸分子。
前記キメラ受容体に作動可能に連結されたプロモーターをさらに含む、請求項１１２～１１４のいずれか１項に記載の核酸分子。
前記プロモーターが、内因性または外因性である、請求項１１５に記載の核酸分子。
前記外因性プロモーターは、伸長因子（ＥＦ）－１プロモーター、サイトメガロウイルス前初期プロモーター（ＣＭＶ）プロモーター、シミアンウイルス４０初期プロモーター（ＳＶ４０）プロモーター、ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）プロモーター、メタロチオネインプロモーター、及びユビキチンＣプロモーターからなる群から選択される、請求項１１６に記載の核酸分子。
前記プロモーターが、誘導プロモーターである、請求項１１７に記載の核酸分子。
前記誘導プロモーターは、ＮＦＡＴ転写応答エレメント（ＴＲＥ）プロモーター、ＣＤ６９プロモーター、ＣＤ２５プロモーター、ＩＬ－２プロモーター、４－１ＢＢプロモーター、ＰＤ１プロモーター、及びＬＡＧ３プロモーターからなる群から選択される、請求項１１８に記載の核酸分子。
前記プロモーターが、内因性プロモーターである、請求項１１６に記載の核酸分子。
前記内因性プロモーターが、ＴＣＲアルファプロモーター、ＴＣＲベータプロモーター、及びベータ２－ミクログロブリンプロモーターから選択される、請求項１２０に記載の核酸分子。
請求項１１３及び１１４～１２１のいずれか１項に記載の核酸分子である第１の核酸分子と、請求項１１４～１２１のいずれか１項に記載の核酸分子である第２の核酸分子とを含む、核酸組成物。
請求項１１２～１２１のいずれか１項に記載の核酸分子を含む、ベクター。
請求項１２２に記載の核酸組成物を含む、ベクター。
前記ベクターが、ウイルスベクターである、請求項１２３または請求項１２４に記載のベクター。
前記ウイルスベクターが、レトロウイルスベクターである、請求項１２５に記載のベクター。
請求項１１２～１２１のいずれか１項に記載の核酸分子を含む、細胞。
請求項１２２に記載の核酸組成物を含む、細胞。
請求項１２３～１２６のいずれか１項に記載のベクターを含む、細胞。
前記細胞がＴ細胞である、請求項１２７～１２９のいずれか１項に記載の細胞。
前記細胞がナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である、請求項１２７～１２９のいずれか１項に記載の細胞。
前記ＮＫ細胞が幹細胞に由来する、請求項１３１に記載の細胞。
請求項９０～１１１及び１２７～１３２のいずれか１項に記載の細胞を含む、組成物。
薬学的に許容される担体をさらに含む薬学的組成物である、請求項１３３に記載の組成物。
約２５×１０^６～約１５０×１０^６個の細胞を含む、請求項１３３または請求項１３４に記載の組成物。
約２５×１０^６～約５０×１０^６個の細胞を含む、請求項１３３～１３５のいずれか１項に記載の組成物。
約２．５×１０^６個の細胞を含む、請求項１３３～１３６のいずれか１項に記載の組成物。
対象における腫瘍負荷を軽減する方法であって、請求項９０～１１１及び１２７～１３２のいずれか１項に記載の細胞、または請求項１３３～１３７のいずれか１項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
前記方法は、前記対象における腫瘍細胞の数を減少させ、腫瘍サイズを減少させ、及び／または前記腫瘍を根絶する、請求項１３８に記載の方法。
腫瘍を有する対象の生存期間を増加または延長させる方法であって、前記対象に、請求項９０～１１１及び１２７～１３２のいずれか１項に記載の細胞、または請求項１３３～１３７のいずれか１項に記載の組成物を投与することを含む、前記方法。
対象における腫瘍の治療及び／または予防を行う方法であって、請求項９０～１１１及び１２７～１３２のいずれか１項に記載の細胞、または請求項１３３～１３７のいずれか１項に記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
前記腫瘍が、ＡＤＧＲＥ２及び／またはＣＬＥＣ１２Ａを発現する、請求項１３８～１４１のいずれか１項に記載の方法。
前記腫瘍が、がんである、請求項１３８～１４２のいずれか１項に記載の方法。
前記腫瘍が、血液癌である、請求項１３８～１４３のいずれか１項に記載の方法。
前記腫瘍は、多発性骨髄腫、白血病、リンパ腫、及び骨髄性悪性腫瘍からなる群から選択される、請求項１４４に記載の方法。
前記白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）、混合表現型急性白血病（ＭＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、及びＢ細胞前リンパ球性白血病からなる群から選択される、請求項１４５に記載の方法。
前記白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である、請求項１４６に記載の方法。
前記ＡＭＬは、再発性／難治性の急性骨髄性白血病（Ｒ／ＲＡＭＬ）である、請求項１４７に記載の方法。
前記骨髄性悪性腫瘍は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性新生物（ＭＰＮ）、骨髄／リンパ系新生物（例えば、好酸球増加及び血小板由来成長因子受容体アルファ（ＰＤＧＦＲＡ）、血小板由来成長因子受容体ベータ（ＰＤＧＦＲＢ）、もしくは線維芽細胞成長因子受容体１（ＦＧＦＲ１）の再構成、またはＰＣＭ１－ＪＡＫ２を伴う骨髄／リンパ系新生物）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍、Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫、及びＴリンパ芽球性白血病／リンパ腫からなる群から選択される、請求項１４５に記載の方法。
前記骨髄性悪性腫瘍は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を含む、請求項１４９に記載の方法。
前記対象が、ヒト対象である、請求項１３８～１５０のいずれか１項に記載の方法。
請求項１～９０のいずれか１項に記載のキメラ受容体を含む細胞を作製する方法であって、請求項１～９０のいずれか１項に記載のキメラ受容体をコードする核酸分子を前記細胞に導入することを含む、前記方法。
請求項１～４２及び８７～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体と、請求項４３～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体とを含む細胞を作製する方法であって、請求項１～４２及び８７～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体と、請求項４３～８９のいずれか１項に記載のキメラ受容体とをコードする核酸分子を前記細胞に導入することを含む、前記方法。