JP2024508672A - 新規抗ｃｄ２４抗体 - Google Patents

新規抗ｃｄ２４抗体 Download PDF

Info

Publication number
JP2024508672A
JP2024508672A JP2023547592A JP2023547592A JP2024508672A JP 2024508672 A JP2024508672 A JP 2024508672A JP 2023547592 A JP2023547592 A JP 2023547592A JP 2023547592 A JP2023547592 A JP 2023547592A JP 2024508672 A JP2024508672 A JP 2024508672A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
seq
chain variable
variable region
light chain
heavy chain
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2023547592A
Other languages
English (en)
Inventor
チェン，ペン
ホウ，ビン
デン，ミン
リウ，ユン
ルオ，ジアメイ
ユーウェン，ホイ
シャン，ボー
メイ，ジェイ
Original Assignee
アンテンジーン バイオロジクス リミテッド
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by アンテンジーン バイオロジクス リミテッド filed Critical アンテンジーン バイオロジクス リミテッド
Publication of JP2024508672A publication Critical patent/JP2024508672A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
    • G01N33/57492—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds localized on the membrane of tumor or cancer cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere in G01N2333/705

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

本開示は、抗ＣＤ２４抗体および抗ＣＤ２４／ＣＤ４７二重特異性抗体分子、それらをコードする単離されたポリヌクレオチド、それらを含む医薬組成物ならびにそれらの使用を提供する。【選択図】なし

Description

本開示は、概して、新規抗ＣＤ２４抗体に関する。
熱安定性抗原（ＨＳＡ）または小細胞肺癌クラスター４抗原としても知られている分化クラスター２４（ＣＤ２４、ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ２５０６３）は、３２アミノ酸のムチン様グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカー分子であり、これは高度にグリコシル化され、ＧＰＩ連結を介して細胞表面に固定される。ＣＤ２４は、感染、敗血症、肝損傷および慢性移植片対宿主病に対する有害な炎症反応を軽減するように自然免疫細胞（例えば、マクロファージ）上で発現するシアル酸結合Ｉｇ様レクチン１０（Ｓｉｇｌｅｃ－１０）と相互作用し得る（Ｐｉｒｒｕｃｃｅｌｌｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３６，３７７９－３７８４（１９８６）；Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ ９，８００－８０６（２０１４）；Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ １５２（３），４６７－４７８；Ｃｈｅｎ ＧＹ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２９，４２８－４３５（２０１１）；Ｃｈｅｎ ＧＹ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２３（５９２２），１７２２－１７２５（２００９）；およびＴｏｕｂａｉ Ｔ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ １２３（２２），３５１２－３５１３（２０１４））。Ｓｉｇｌｅｃ－１０へのＣＤ２４の結合により、Ｓｉｇｌｅｃ－１０の細胞質尾部における２つの免疫受容体チロシンベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）に関連するＳＨＰ－１および／またはＳＨＰ－２ホスファターゼによって媒介される阻害性シグナル伝達カスケードが誘導され、それによってｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）媒介炎症およびマクロファージによる細胞の貪食に必要な細胞骨格再構成が遮断される（Ｃｒｏｃｋｅｒ ＰＲ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．７，２５５－２６６（２００７）；Ａｂｒａｍ ＣＬ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｌｅｕｋｏ．ｃ Ｂｉｏｌ．１０２（３），６５７－６７５（２０１７）およびＤｉｅｔｒｉｃｈ Ｊ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６（４），２５１４－２５２１（２００１）１２－１４）。
ＣＤ２４の過剰発現は、免疫組織化学的研究に基づいて、限定されるものではないが、乳癌（８５％）、直腸癌（８４％）、卵巣癌（８３％）、膵臓癌（７２％）、膀胱癌（６２％）、胆管癌（５１％）、前立腺癌（４８％）および小細胞肺癌（４５％）を含む、様々な癌細胞において観察されている。２８件の研究のメタ分析により、ＣＤ２４がヒトの癌の６８％で過剰発現しており、ＣＤ２４の発現は、より高い自己再生能力、より多くの転移および予後不良と相関していることが明らかになった（Ｋｒｉｓｉａｎｓｅｎ Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ，１６１：１２１５－１２２１，２００２；Ｋｒｉｓｉａｎｓｅｎ Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，９：４９０６－４９１３，２００３；Ｋｒｉｓｉａｎｓｅｎ Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，８８：２３１－２３６，２００３；Ｋｒｉｓｔｉａｎｓｅｎ Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｓｔａｔｅ，５８：１８２－１９２，２００４；Ｈｏｃｏｂ Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｐａｎｃｒｅａｔｏｌｏｇｙ，４：４５４－４６０，２００４；Ｓａｍｕｅｌ Ｅ Ｄ，ＢｉｏＭｅｄ Ｃｅｎｔｒａｌ，３：３－１５，２００４；Ｍｉｎ－Ｃｈｅｎｇ Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ ｌｅｔｔｅｒ，１－６，２００５およびＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｐ．２００９，２２，１１４９－１１５６）。最近の研究により、ＣＤ２４により媒介される自然免疫系の阻害が、Ｓｉｇｌｅｃ－１０を発現するマクロファージによるクリアランスを回避する機構として癌細胞によって利用され得ることが示された（Ａｍｉｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．２０１９ Ａｕｇｕｓｔ；５７２（７７６９）：３９２－３９６）。
ＣＤ２４を標的とする治療薬の開発にもかかわらず、新規抗ＣＤ２４抗体が大いに必要である。
本開示を通じて、冠詞「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、本明細書において、冠詞の文法的対象の１つまたは１つより多く（すなわち、少なくとも１つ）を指すために使用される。例として、「１種の抗体」は、１種の抗体または１種より多い抗体を意味する。
本開示は、新規抗ＣＤ２４抗体分子、そのアミノ酸およびヌクレオチド配列ならびにその使用を提供する。
一態様では、本開示は、配列番号１、３、５、７、９、１１、１４、１６、１７、１８、１９、２１、２３、２５、２７、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、９５、９６、９７、１０４、１０５、１０６、１１３、１１４、１１５、１２６、１２７、１２８、１３６、１３７、１５０、１５１、１５２、１６０、１６１、１６２、１６８、１６９ １７０、２２２、２２３および２２４からなる群から選択される１、２もしくは３つの重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）配列ならびに／または配列番号２、４、６、８、１０、１２、１３、１５、２０、２２、２４、２６、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、９８、９９、１００、１０７、１０８、１１６、１１７、１２９、１３０、１３１、１３８、１３９、１４０、１４５、１５３、１５４、１５５、１６３、１７１、１７２、１７３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、２２５、２２６および２２７からなる群から選択される１、２もしくは３つの軽鎖ＣＤＲ配列を含む、単離された抗体またはその抗原結合断片を提供する。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、
ａ）配列番号１、配列番号３および配列番号５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｂ）配列番号７、配列番号９および配列番号１１から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｃ）配列番号７、配列番号１４および配列番号１１から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｄ）配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｅ）配列番号１９、配列番号２１および配列番号２３から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｆ）配列番号２５、配列番号２７および配列番号２８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｇ）配列番号２５、配列番号３０および配列番号２８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｈ）配列番号３２、配列番号３４および配列番号３６から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｉ）配列番号３８、配列番号４０および配列番号４２から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｊ）配列番号４４、配列番号４６および配列番号４８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｋ）配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｌ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｍ）配列番号１１３、配列番号１１４および配列番号１１５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｎ）配列番号１２６、配列番号１２７および配列番号１２８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｏ）配列番号２５、配列番号１３６および配列番号１３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｐ）配列番号１５０、配列番号１５１および配列番号１５２から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｑ）配列番号１６０、配列番号１６１および配列番号１６２から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
ｒ）配列番号１６８、配列番号１６９および配列番号１７０から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、ならびに
ｓ）配列番号２２２、配列番号２２３および配列番号２２４から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域
からなる群から選択される重鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、
ａ）配列番号２、配列番号４および配列番号６から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｂ）配列番号８、配列番号１０および配列番号１２から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｃ）配列番号１３、配列番号１０および配列番号１５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｄ）配列番号２０、配列番号２２および配列番号２４から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｅ）配列番号２６、配列番号２２および配列番号２４から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｆ）配列番号２９、配列番号２２および配列番号３１から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｇ）配列番号３３、配列番号３５および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｈ）配列番号３９、配列番号４１および配列番号４３から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｉ）配列番号４５、配列番号４７および配列番号４９から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｊ）配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｋ）配列番号１０７、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｌ）配列番号１３、配列番号１１６および配列番号１１７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｍ）配列番号１２９、配列番号１３０および配列番号１３１から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｎ）配列番号１３８、配列番号１３９および配列番号１４０から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｏ）配列番号２９、配列番号１４５および配列番号２４から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｐ）配列番号１５３、配列番号１５４および配列番号１５５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｑ）配列番号１６３、配列番号１５４および配列番号１５５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｒ）配列番号１７１、配列番号１７２および配列番号１７３から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｓ）配列番号１８４、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｔ）配列番号１８５、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｕ）配列番号１８６、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｖ）配列番号１８７、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｗ）配列番号１８８、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、ならびに
ｘ）配列番号２２５、配列番号２２６および配列番号２２７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域
からなる群から選択される軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、
ａ）配列番号１、配列番号３および配列番号５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２、配列番号４および配列番号６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｂ）配列番号７、配列番号９および配列番号１１から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号８、配列番号１０および配列番号１２から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｃ）配列番号７、配列番号１４および配列番号１１から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１３、配列番号１０および配列番号１５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｄ）配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１３、配列番号１０および配列番号１５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｅ）配列番号１９、配列番号２１および配列番号２３から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２０、配列番号２２および配列番号２４から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｆ）配列番号２５、配列番号２７および配列番号２８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２６、配列番号２２および配列番号２４から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｇ）配列番号２５、配列番号３０および配列番号２８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２９、配列番号２２および配列番号３１から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｈ）配列番号３２、配列番号３４および配列番号３６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号３３、配列番号３５および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
ｉ）配列番号３８、配列番号４０および配列番号４２から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号３９、配列番号４１および配列番号４３から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｊ）配列番号４４、配列番号４６および配列番号４８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号４５、配列番号４７および配列番号４９から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｋ）配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｌ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１０７、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｍ）配列番号１１３、配列番１１４および配列番号１１５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１３、配列番号１１６および配列番号１１７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｎ）配列番号１２６、配列番号１２７および配列番号１２８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１２９、配列番号１３０および配列番号１３１から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｏ）配列番号２５、配列番号１３６および配列番号１３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１３８、配列番号１３９および配列番号１４０から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｐ）配列番号２５、配列番号３０および配列番号２８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２９、配列番号１４５および配列番号２４から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｑ）配列番号１５０、配列番号１５１および配列番号１５２から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１５３、配列番号１５４および配列番号１５５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｒ）配列番号１６０、配列番号１６１および配列番号１６２から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１６３、配列番号１５４および配列番号１５５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｓ）配列番号１６８、配列番号１６９および配列番号１７０から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１７１、配列番号１７２および配列番号１７３から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｔ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８４、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｕ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８５、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｖ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８６、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｗ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８７、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
ｘ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８８、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、または
ｙ）配列番号２２２、配列番号２２３および配列番号２２４から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２２５、配列番号２２６および配列番号２２７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域
を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５０、配列番号５４、配列番号５８、配列番号６２、配列番号６６、配列番号７０、配列番号７４、配列番号７８、配列番号８２、配列番号８６、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１８、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４１、配列番号１４６、配列番号１５６、配列番号１６４、配列番号１７４、配列番号１７７、配列番号１７８、配列番号１７９、配列番号１８９、配列番号１９０、配列番号１９１、配列番号１９２、配列番号１９３、配列番号１９４およびそれらの少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、８８％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％）配列同一性のある相同配列からなる群から選択される重鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５２、配列番号５６、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号１０３、配列番号１１１、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１３４、配列番号１４３、配列番号１４８、配列番号１５８、配列番号１６６、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８１、配列番号１８２、配列番号１８３、配列番号１９５、配列番号１９６、配列番号１９７、配列番号１９８、配列番号１９９、配列番号２００、配列番号２０１、配列番号２０２、配列番号２０３、配列番号２２１およびそれらの少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、８８％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％）配列同一性のある相同配列からなる群から選択される軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、
ａ）配列番号５０を含む重鎖可変領域および配列番号５２を含む軽鎖可変領域、
ｂ）配列番号５４を含む重鎖可変領域および配列番号５６を含む軽鎖可変領域、
ｃ）配列番号５８を含む重鎖可変領域および配列番号６４を含む軽鎖可変領域、
ｄ）配列番号６２を含む重鎖可変領域および配列番号６４を含む軽鎖可変領域、
ｅ）配列番号６６を含む重鎖可変領域および配列番号６８を含む軽鎖可変領域、
ｆ）配列番号７０を含む重鎖可変領域および配列番号７２を含む軽鎖可変領域、
ｇ）配列番号７４を含む重鎖可変領域および配列番号７６を含む軽鎖可変領域、
ｈ）配列番号７８を含む重鎖可変領域および配列番号８０を含む軽鎖可変領域、
ｉ）配列番号８２を含む重鎖可変領域および配列番号８４を含む軽鎖可変領域、
ｊ）配列番号８６を含む重鎖可変領域および配列番号８８を含む軽鎖可変領域、
ｋ）配列番号１０１を含む重鎖可変領域および配列番号１０３を含む軽鎖可変領域、
ｌ）配列番号１０９を含む重鎖可変領域および配列番号１１１を含む軽鎖可変領域、
ｍ）配列番号１１８を含む重鎖可変領域および配列番号１２０もしくは配列番号２２１を含む軽鎖可変領域、
ｎ）配列番号１２２を含む重鎖可変領域および配列番号１２４を含む軽鎖可変領域、
ｏ）配列番号１３２を含む重鎖可変領域および配列番号１３４を含む軽鎖可変領域、
ｐ）配列番号１４１を含む重鎖可変領域および配列番号１４３を含む軽鎖可変領域、
ｑ）配列番号１４６を含む重鎖可変領域および配列番号１４８を含む軽鎖可変領域、
ｒ）配列番号１５６を含む重鎖可変領域および配列番号１５８を含む軽鎖可変領域、
ｓ）配列番号１６４を含む重鎖可変領域および配列番号１６６を含む軽鎖可変領域、
ｔ）配列番号１７４を含む重鎖可変領域および配列番号１７６を含む軽鎖可変領域、
ｕ）配列番号１７７を含む重鎖可変領域および配列番号１８０を含む軽鎖可変領域、
ｖ）配列番号１７８を含む重鎖可変領域および配列番号１８０を含む軽鎖可変領域、
ｗ）配列番号１７９を含む重鎖可変領域および配列番号１８０を含む軽鎖可変領域、
ｘ）配列番号１７７を含む重鎖可変領域および配列番号１８１を含む軽鎖可変領域、
ｙ）配列番号１７８を含む重鎖可変領域および配列番号１８１を含む軽鎖可変領域、
ｚ）配列番号１７９を含む重鎖可変領域および配列番号１８１を含む軽鎖可変領域、
ａａ）配列番号１７７を含む重鎖可変領域および配列番号１８２を含む軽鎖可変領域、
ｂｂ）配列番号１７８を含む重鎖可変領域および配列番号１８２を含む軽鎖可変領域、
ｃｃ）配列番号１７９を含む重鎖可変領域および配列番号１８２を含む軽鎖可変領域、
ｄｄ）配列番号１７７を含む重鎖可変領域および配列番号１８３を含む軽鎖可変領域、
ｅｅ）配列番号１７８を含む重鎖可変領域および配列番号１８３を含む軽鎖可変領域、
ｆｆ）配列番号１７９を含む重鎖可変領域および配列番号１８３を含む軽鎖可変領域、
ｇｇ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９５を含む軽鎖可変領域、
ｈｈ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９６を含む軽鎖可変領域、
ｉｉ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９７を含む軽鎖可変領域、
ｊｊ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９８を含む軽鎖可変領域、
ｋｋ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９９を含む軽鎖可変領域、
ｌｌ）配列番号１９０を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
ｍｍ）配列番号１９０を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
ｎｎ）配列番号１９０を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、
ｏｏ）配列番号１９０を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域、
ｐｐ）配列番号１９１を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
ｑｑ）配列番号１９１を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
ｒｒ）配列番号１９１を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、
ｓｓ）配列番号１９１を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域、
ｔｔ）配列番号１９２を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
ｕｕ）配列番号１９２を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
ｖｖ）配列番号１９２を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、
ｗｗ）配列番号１９２を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域、
ｘｘ）配列番号１９３を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
ｙｙ）配列番号１９３を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
ｚｚ）配列番号１９３を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、
ａａａ）配列番号１９３を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域、
ｂｂｂ）配列番号１９４を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
ｃｃｃ）配列番号１９４を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
ｄｄｄ）配列番号１９４を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、または
ｅｅｅ）配列番号１９４を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域
を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、１つまたは複数のアミノ酸残基置換または修飾をさらに含むが、ヒトＣＤ２４またはカニクイザルＣＤ２４に対する特異的結合親和性を保持する。
いくつかの実施形態では、置換は、１つもしくは複数のＣＤＲ配列中、および／またはＶＨもしくはＶＬ配列の１つもしくは複数にあるが、ＣＤＲ配列のいずれにもない。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、免疫グロブリン定常領域、任意選択で、ヒトＩｇの定常領域、または任意選択で、ヒトＩｇＧの定常領域をさらに含む。
いくつかの実施形態では、定常領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４の定常領域を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、キメラまたはヒト化である。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、ダイアボディー、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦｖ）２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド安定化ダイアボディー（ｄｓダイアボディー）、一本鎖抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体（二価ダイアボディー）、多重特異性抗体、ラクダ化単一ドメイン抗体、ナノボディー、ドメイン抗体および二価ドメイン抗体である。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性である。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ２４の第１および第２のエピトープと特異的に結合可能であるか、またはＣＤ２４および第２の抗原と特異的に結合可能である。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、ＦａｂまたはｓｃＦｖを介して第２の抗原に結合し、任意選択で、Ｆａｂを介してＣＤ２４に結合し、ｓｃＦｖを介して第２の抗原に結合する。
いくつかの実施形態では、二重特異性抗体分子は、ＶＬ（抗ＣＤ２４）－ＣＬのフォーマットの軽鎖に関連する、ＶＨ（抗ＣＤ２４）－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－スペーサー－第２の抗原結合ｓｃＦｖのフォーマットの重鎖を含む。
いくつかの実施形態では、第２の抗原は、任意選択で、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＰＤ－１、ＣＬＴＡ－４、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ３、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＴＧＦ β、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＩＣＡＭ－１、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７－Ｈ３、ＬＦＡ－１、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＣＤ３、ＣＤ１６、ＳＩＲＰα、Ｓｉｇｌｅｃ１０、ＬＩＬＲＢ２、Ｃｌｅｖｅｒ－１、Ｍａｃｒｏ、ＬＩＬＲＢ４、Ｓｉｇｌｅｃ１５、ＣＳＦ１Ｒ、ＰＳＧＬ－１、ＶＳＩＧ－４、Ｂ２ＭおよびＣＤ８３からなる群から選択される免疫関連標的である。
いくつかの実施形態では、第２の抗原は腫瘍抗原を含む。
いくつかの実施形態では、腫瘍抗原は、ＣＡ－１２５、ガングリオシドＧ（Ｄ２）、Ｇ（Ｍ２）およびＧ（Ｄ３）、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３３、ＣＤ４７、ＣＤ５２、Ｅｐ－ＣＡＭ、ＣＥＡ、ＣＬＤＮ１８．２、ボンベシン様ペプチド、ＰＳＡ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ３／ＨＥＲ３、ｅｒｂＢ４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ９、Ｋｉ－６７、癌関連ムチン、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲｓ（例えば、ＶＥＧＦＲ３）、エストロゲン受容体、ルイス－Ｙ抗原、ＴＧＦβ１、ＩＧＦ－１受容体、ＥＧＦα、ｃ－Ｋｉｔ受容体、トランスフェリン受容体、ＩＬ－２Ｒ、ＣＤＨ６、ＣＥＡ、ＦＯＬＲ１、ＴＲＯＰ２、ＰＴＫ７、ＳＬＩＴＲＫ６、ＣＤ１４２、ＮＥＣＴＩＮ－４、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＣＤ１４２、ＣＤ１２３、ＣＤ２２、ＣＤ７９ｂ、ＤＬＬ３、ＳＬＣファミリーまたはＣＯ１７－１Ａを含む。
いくつかの実施形態では、第２の抗原は、ＰＤ－Ｌ１、ＳＩＲＰα、ＣＤ４７およびＢ２Ｍからなる群から選択される免疫抑制分子である。
いくつかの実施形態では、腫瘍抗原はＣＤ４７である。
いくつかの実施形態では、抗体または抗原結合断片は、１つまたは複数のコンジュゲートと連結しており、任意選択で、コンジュゲートは、直接またはリンカーを介してのいずれかで共有結合によって結合している。
いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、クリアランス修飾剤、化学療法剤、毒素、放射性同位元素、ランタニド、発光標識、蛍光標識、酵素基質標識、ＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、チューブリン結合剤または他の抗癌薬を含む。
いくつかの実施形態では、抗体または抗原結合断片は、ＣＤ２４と特異的に結合可能であり、任意選択で、ＣＤ２４は、ヒトまたはカニクイザルに由来し、任意選択で、ＣＤ２４は、組換えＣＤ２４または細胞表面上に発現されたＣＤ２４である。
一態様では、本開示は、同一エピトープについて本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片と競合する抗体またはその抗原結合断片を提供する。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、同一エピトープについて、配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片と競合し、ＬＣＤＲ１が、配列番号１０７、１８４、１８５、１８６、１８７および１８８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ２が、配列番号１０８のアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ３が、配列番号３７のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、同一エピトープについて、配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびに配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３をそれぞれ含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片と競合する。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、非癌細胞よりも癌細胞に発現されたＣＤ２４と選択的に結合する。
一態様では、本開示は、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片および医薬上許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される医薬組成物は、第２の治療剤をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２の治療剤は、１つまたは複数の免疫抑制分子に対するアンタゴニストである。
いくつかの実施形態では、第２の治療剤はＣＤ４７アンタゴニストである。
いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＳＩＲＰα－Ｆｃ融合タンパク質もしくはその変異体または抗ＣＤ４７抗体もしくはその抗原結合断片である。
一態様では、本開示は、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片をコードする単離されたポリヌクレオチドを提供する。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される単離されたポリヌクレオチドは、配列番号５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、１０２、１１０、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９および２２０からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む。
一態様では、本開示は、本明細書において提供される単離されたポリヌクレオチドを含むベクターを提供する。
一態様では、本開示は、本明細書において提供されるベクターを含む宿主細胞を提供する。
一態様では、本開示は、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片を発現させる方法であって、本明細書において提供される宿主細胞を、本明細書において提供されるベクターが発現される条件下で培養することを含む方法を提供する。
一態様では、本開示は、ＣＤ２４活性の調節から恩恵を受けるであろう対象における疾患または状態を処置する方法であって、対象に、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片または本明細書において提供される医薬組成物の治療上有効な量を投与することを含む方法を提供する。
いくつかの実施形態では、疾患または状態は、ＣＤ２４関連疾患または状態である。
いくつかの実施形態では、疾患または状態は、癌、適応免疫疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患または感染性疾患である。
いくつかの実施形態では、癌は、肺癌、気管支癌、骨癌、肝臓および胆管癌、膵臓癌、乳癌、肝臓癌、卵巣癌、精巣癌、腎臓癌、膀胱癌、頭頸部癌、脊椎癌、脳癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮内膜癌、結腸癌、結腸直腸癌、直腸癌、肛門癌、食道癌、消化器癌、皮膚癌、前立腺癌、下垂体癌、胃癌、膣癌、甲状腺癌、神経膠芽腫、星状細胞腫、黒色腫、骨髄異形成症候群、肉腫、奇形腫、腺癌、白血病、骨髄腫ならびにリンパ腫である。いくつかの実施形態では、癌は化学療法抵抗性癌である。
いくつかの実施形態では、疾患または状態は、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＭＺＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、リヒター症候群、バーキットリンパ腫または濾胞性リンパ腫から選択される血液癌である。
いくつかの実施形態では、対象はヒトである。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される方法は、対象に第２の治療剤の治療上有効な量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、第２の治療剤は、１つまたは複数の免疫抑制分子に対するアンタゴニストである。
いくつかの実施形態では、第２の治療剤はＣＤ４７アンタゴニストである。
いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＳＩＲＰα－Ｆｃ融合タンパク質もしくはその変異体または抗ＣＤ４７抗体もしくはその抗原結合断片である。
いくつかの実施形態では、投与は、経口、経鼻、静脈内、皮下、舌下または筋肉内投与による。
一態様では、本開示は、ＣＤ２４を発現する細胞においてＣＤ２４活性を調節する方法であって、ＣＤ２４を発現する細胞を、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片に対して曝露することを含む方法を提供する。
一態様では、本開示は、サンプル中のＣＤ２４の存在または量を検出する方法であって、サンプルを、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片と接触させることと、サンプル中のＣＤ２４の存在または量を決定することとを含む方法を提供する。
一態様では、本開示は、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態を診断する方法であって、ａ）対象からサンプルを得ることと、ｂ）対象から得られたサンプルを、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片と接触させることと、ｃ）サンプル中のＣＤ２４の存在または量を決定することと、ｄ）ＣＤ２４の存在または量を、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態の存在または状況と相関させることとを含む方法を提供する。
一態様では、本開示は、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態を処置するための医薬の製造における、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片の使用を提供する。
いくつかの実施形態では、医薬は第２の治療剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２の治療剤は、１つまたは複数の免疫抑制分子に対するアンタゴニストである。
いくつかの実施形態では、第２の治療剤はＣＤ４７アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＳＩＲＰα－Ｆｃ融合タンパク質またはその変異体および抗ＣＤ４７抗体またはその抗原結合断片を含む。
一態様では、本開示は、ＣＤ２４関連疾患または状態を診断するための診断用試薬の製造における、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片の使用を提供する。
一態様では、本開示は、ＣＤ２４、任意選択で、組換えＣＤ２４、細胞表面に発現されたＣＤ２４またはＣＤ２４を発現する細胞の検出において有用な、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片を含むキットを提供する。
一態様では、本開示は、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、共刺激シグナル伝達領域およびＴＣＲシグナル伝達ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であって、抗原結合ドメインが、ＣＤ２４と特異的に結合し、本明細書において提供される抗原結合断片を含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を提供する。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、ＦａｂまたはｓｃＦｖである。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供されるＣＡＲは二重特異性である。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２４以外の第２の抗原またはＣＤ２４上の第２のエピトープとさらに特異的に結合可能である。いくつかの実施形態では、第２の抗原は腫瘍抗原である。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲシグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ、ＦｃｃＲＩγ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＭｙＤ８８、ＣＤ４０、ＣＤ２７８、ＴＬＲまたはそれらの組合せの細胞内シグナル領域配列からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、膜貫通領域は、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８またはＣＤ２８の膜貫通領域を含む。
一態様では、本開示は、本明細書において提供されるキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列を提供する。一態様では、本開示は、本明細書において提供される核酸配列を含む細胞を提供する。一態様では、本開示は、本明細書において提供される核酸配列を含むベクターを提供する。
一態様では、本開示は、本明細書において提供されるＣＡＲを発現するように遺伝子改変された細胞を提供する。
いくつかの実施形態では、細胞は免疫細胞であり、任意選択で、免疫細胞は、Ｔリンパ球、ＮＫ細胞、単球、マクロファージまたはＮＫＴリンパ球である。
一態様では、本開示は、哺乳動物においてＣＤ２４を発現する細胞または組織に対するＴ細胞媒介性免疫応答を刺激するための方法であって、哺乳動物に、本明細書において提供されるＣＡＲを発現するように遺伝子改変された細胞の有効量を投与することを含む方法を提供する。
一態様では、本開示は、ＣＤ２４関連疾患または状態を有する哺乳動物を処置する方法であって、哺乳動物に、本明細書において提供される細胞の有効量を投与し、それによって哺乳動物を処置することを含む方法を提供する。
いくつかの実施形態では、細胞は自己Ｔ細胞である。
いくつかの実施形態では、ＣＤ２４関連疾患または状態は、がんである。
いくつかの実施形態では、哺乳動物はヒト対象である。
一態様では、本開示は、それを必要とする対象におけるがんを処置する方法であって、グリコシル化またはシアル化ＣＤ２４にのみ結合する、好ましくは、ＣＤ２４のシアル酸にのみ結合する抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片を投与することを含む方法を提供する。
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片は、非癌細胞よりも癌細胞に発現されたＣＤ２４と選択的に結合する。
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片は、同一エピトープについて、配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体もしくはその抗原結合断片と競合し、ＬＣＤＲ１が、配列番号１０７、１８４、１８５、１８６、１８７および１８８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ２が、配列番号１０８のアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ３が、配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、または配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびに配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３をそれぞれ含む軽鎖可変領域を含む抗体もしくはその抗原結合断片と競合する。
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、ＬＣＤＲ１が、配列番号１０７、１８４、１８５、１８６、１８７および１８８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ２が、配列番号１０８のアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ３が、配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、または配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびに配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３をそれぞれ含む軽鎖可変領域を含む。
２９３Ｆブランク細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ２９３Ｆ－ｈＣＤ２４細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＭＣＦ７細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 Ｎａｌｍ１細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＣＨＯＫ１－ｈＣＤ２４細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＨＴ－２９細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＮＣＩ Ｈ１９７５細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 Ａ５４９細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 Ｎａｌｍ６細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体のＭＦＩを示す図である。 ＳＵ－ＤＨＬ６細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ヒトＢ細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体のＭＦＩを示す図である。 ＤｏＨＨ２細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＨＴ２９細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 Ｈｕｈ７細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体のＭＦＩを示す図である。 ＭＣＦ７細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ａ５４９細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＮＣＩ－Ｈ１９７５細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す。 ２９３Ｆ－ｈＣＤ２４細胞上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体および参照抗体ＳＮ３の食作用指数を示す図である。 ＨＴ－２９細胞上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体および参照抗体ＳＮ３の食作用指数を示す図である。 ＨＴ２９結腸直腸腫瘍細胞上での抗ＣＤ４７抗体ｈｕ５Ｆ９とキメラ抗ＣＤ２４抗体ｃｈＡｂ１１０Ｄ４Ｇ４との併用処置の食作用指数を示す図である。 ＨＴ２９結腸直腸腫瘍細胞上での抗ＣＤ４７抗体ｈｕ５Ｆ９とキメラ抗ＣＤ２４抗体ｃｈＡｂ１１１Ｆ３Ａ２との併用処置の食作用指数を示す図である。 ＨＴ２９結腸直腸腸腫瘍細胞上での抗ＣＤ４７抗体ｈｕ５Ｆ９とキメラ抗ＣＤ２４抗体ｃｈＡｂ８１Ａ１Ｆ８との併用処置の食作用指数を示す図である。 ＨＴ２９細胞上でのｈＩｇＧ４単独、ｃｈ８１Ａ１Ｆ８－ＩｇＧ４単独、二重特異性抗体（ｃｈ８１Ａ１Ｆ８－ＩｇＧ４＋Ｈｕ５Ｆ９由来ｓｃＦｖ）およびベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＨＴ２９細胞上でのｈＩｇＧ４単独、ｈｕ５Ｆ９単独、ｃｈ８１Ａ１Ｆ８－ＩｇＧ４単独、二重特異性抗体（ｃｈ８１Ａ１Ｆ８－ＩｇＧ４＋Ｈｕ５Ｆ９由来ｓｃＦｖ）および抗ＣＤ２４抗体ｃｈ８１Ａ１Ｆ８－ＩｇＧ４と抗ＣＤ４７抗体Ｈｕ５Ｆ９の組合せ（「Ｃｏｍｂｏ」）の食作用指数を示す図である。 ＨＴ－２９上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８およびヒト化８１Ａ１Ｆ８抗体のＭＦＩを示す図である。 Ｎａｌｍ６上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８およびヒト化８１Ａ１Ｆ８抗体のＭＦＩを示す図である。 ＨＴ－２９上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２およびヒト化１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２抗体のＭＦＩを示す図である。 Ｇａｔｏｒｐｒｉｍｅシステムを使用して測定した、キメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８およびヒト化８１Ａ１Ｆ８抗体のＫＤを示す図である。 ノイラミニダーゼまたは脱グリコシル化で消化した細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体および／またはベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ノイラミニダーゼまたは脱グリコシル化で消化した細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体および／またはベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ノイラミニダーゼまたは脱グリコシル化で消化した細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体および／またはベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ノイラミニダーゼまたは脱グリコシル化で消化した細胞上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体および／またはベンチマーク抗体ＳＮ３のＭＦＩを示す図である。 ＢＩＡｃｏｒｅによって測定した、ｍＦｃタグ付きヒトＣＤ２４上での本明細書において提供されるキメラ抗ＣＤ２４抗体および参照抗体ＳＷＡ１１のＫＤを示す図である。 ＢＩＡｃｏｒｅによって測定した、ｍＦｃタグ付きヒトＣＤ２４上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８および本明細書において提供されるヒト化８１Ａ１Ｆ８抗体のＫＤを示す図である。 ＥＬＩＳＡによって測定した、ｍＦｃタグ付きヒトＣＤ２４上での異なる濃度のキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８の正規化したＯＤ４５０を示す図である。 ＨＴ－２９細胞上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体、参照抗体ＳＷＡ１１および抗ＣＤ４７抗体ｈｕ５Ｆ９－ＩｇＧ４の食作用指数を示す図である。 Ｎａｌｍ６細胞上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体、参照抗体ＳＷＡ１１および抗ＣＤ４７抗体ｈｕ５Ｆ９－ＩｇＧ４の食作用指数を示す図である。 ＳＵ－ＤＨＬ－６細胞上での単独またはリツキシマブと組み合わせた、まれなＦｃ依存性機能を有する８１Ａ１Ｆ８－ＬＡＬＡＰＧ抗体の食作用指数を示す図である。 ＨＴ－２９細胞上での抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８単独、抗ＣＤ４７抗体Ｈｕ５Ｆ９単独および抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８と抗ＣＤ４７抗体Ｈｕ５Ｆ９の組合せの食作用指数を示す図である。 ＨＴ－２９細胞上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８およびヒト化８１Ａ１Ｆ８抗体によって誘導されたＡＤＣＣ効果を示す図である。 ｈＣＤ２４－ＭＣＦ７細胞上でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８およびヒト化８１Ａ１Ｆ８抗体によって誘導されたＣＤＣ効果を示す図である。 Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ同系マウスモデルにおけるキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８単独、オキサリプラチン単独およびキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８とオキサリプラチンの組合せの投与後の腫瘍体積を示す図である。 Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ同系マウスモデルにおけるキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８単独、オキサリプラチン単独およびキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８とオキサリプラチンの組合せの投与後の体重を示す図である。 Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ同系マウスモデルにおけるキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８単独、オキサリプラチン単独およびキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８とオキサリプラチンの組合せのｉｎ ｖｉｖｏ有効性試験の概要を示す図である。 Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ同系マウスモデルにおけるキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８およびオキサリプラチンの併用処置によって誘導されたＣＤ８／ＣＤ４比およびＭ１／Ｍ２マクロファージ比を示す図である。 ＭＣ３８－ｈＣＤ２４同系モデルにおける異なる投薬量でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａの投与後の腫瘍体積を示す図である。 ＭＣ３８－ｈＣＤ２４同系モデルにおける再チャレンジ後の異なる投薬量でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａおよびキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａの投与後の腫瘍体積を示す図である。 ＭＣ３８－ｈＣＤ２４同系モデルにおける異なる投薬量でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａの投与後の各マウスについての腫瘍成長曲線を示す図である。 異なる投薬量でのキメラ抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａのｉｎ ｖｉｖｏ有効性についての概要を示す図である。 単剤（８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ、オキサリプラチンまたはアテゾリズマブ）または併用戦略の投与後の腫瘍成長曲線を示す図である。 処置群の各マウスについての腫瘍成長曲線を示す図である。 単剤（８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ、オキサリプラチンまたはアテゾリズマブ）または併用戦略のｉｎ ｖｉｖｏ有効性についての概要を示す図である。 単剤（１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＩｇＧ２ａ、８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ、オキサリプラチンまたはアテゾリズマブ）または併用戦略の投与後の腫瘍成長曲線を示す図である。 単剤（１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＩｇＧ２ａ、８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ、オキサリプラチンまたはアテゾリズマブ）または併用戦略の投与後のマウスの体重を示す図である。 単剤（１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＩｇＧ２ａ、８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ、オキサリプラチンまたはアテゾリズマブ）または併用戦略のｉｎ ｖｉｖｏ有効性についての概要を示す図である。 ｃｍＣＤ２４－２９３Ｆ細胞上での本明細書において提供される抗ｃｍＣＤ２４抗体のＭＦＩを示す図である。 ｃｙｎｏＣＤ２４－２９３Ｆ細胞上での本明細書において提供される抗ｃｍＣＤ２４抗体の食作用指数を示す図である。 ｃｍＣＤ２４－２９３Ｆ細胞上での本明細書において提供される抗ｃｍＣＤ２４抗体によって誘導されたＡＤＣＣ効果を示す図である。 ｃｙｎｏＣＤ２４－２９３Ｆ細胞上での本明細書において提供される抗ｃｍＣＤ２４抗体によって誘導されたＣＤＣ効果を示す図である。
本開示の以下の説明は、単に、本開示の種々の実施形態を例示するよう意図される。そのようなものとして、論じられる特定の改変は、本開示の範囲に対する制限と解釈されてはならない。本開示の範囲から逸脱することなく、種々の等価物、変法および改変が行われ得ることは当業者には明らかであり、また、このような同等な実施形態は、本明細書に含まれるべきであるということが理解される。刊行物、特許および特許出願を含む本明細書において引用されたすべての参考文献は、参照によりその全文で本明細書に組み込まれる。
定義
用語「抗体」は、本明細書において、特異的抗原と結合する任意の免疫グロブリン、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多価抗体、二価特異性、一価抗体、多重特異的抗体または二重特異的抗体を含む。天然の無傷の抗体は、２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む。哺乳動物重鎖は、α、δ、ε、γおよびμとして分類され、各重鎖は、可変領域（ＶＨ）およびａ第１の、第２の、および第３の定常領域（それぞれ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３）からなり、哺乳動物軽鎖は、λまたはκとして分類され、各軽鎖は、可変領域（ＶＬ）および定常領域からなる。抗体は、「Ｙ」型を有し、Ｙのステムは、ジスルフィド結合を介して一緒に結合している２つの重鎖の第２および第３の定常領域からなる。Ｙの各アームは、単一軽鎖の可変および定常領域と結合している単一重鎖の可変領域および第１の定常領域を含む。軽鎖および重鎖の可変領域は、抗原結合に関与している。両鎖中の可変領域は、一般に、相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖ＣＤＲ、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３を含む重鎖ＣＤＲ）と呼ばれる３つの高度可変ループを含有する。本明細書において開示される抗体および抗原結合ドメインのＣＤＲ境界は、Ｋａｂａｔ、ＩＭＧＴ、ＡｂＭ、ＣｈｏｔｈｉａまたはＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉの慣習（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ，Ｂ．，Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．，Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３（４），９２７（１９９７）；Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．Ｄｅｃ ５；１８６（３）：６５１－６３（１９８５）；Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６，９０１（１９８７）；Ｎ．Ｒ．Ｗｈｉｔｅｌｅｇｇ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ｖ１３（１２），８１９－８２４（２０００）；Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．Ｄｅｃ ２１－２８；３４２（６２５２）：８７７－８３（１９８９）；Ｋａｂａｔ Ｅ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）；Ｍａｒｉｅ－Ｐａｕｌｅ Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２７：５５－７７（２００３）；Ｍａｒｉｅ－Ｐａｕｌｅ Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ，Ｉｍｍｕｎｏｍｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１（３），（２００５）；Ｍａｒｉｅ－Ｐａｕｌｅ Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｂ ｃｅｌｌｓ（ｓｅｃｏｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ），ｃｈａｐｔｅｒ ２６，４８１－５１４，（２０１５））によって定義または同定され得る。３つのＣＤＲは、ＣＤＲよりもより高度に保存され、超可変ループを支持するスキャフォールドを形成するフレームワーク領域（ＦＲ）として知られる、両端に位置するストレッチの間に挿入されている。重鎖および軽鎖の定常領域は、抗原結合に関与しないが、種々のエフェクター機能を示す。抗体は、その重鎖の定常領域のアミノ酸配列に基づいてクラスに割り当てられる。抗体の５種の主要なクラスまたはアイソタイプとして、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭがあり、これらは、α、δ、ε、γおよびμ重鎖それぞれの存在を特徴とする。主要な抗体クラスのうちいくつかは、ＩｇＧ１（γ１重鎖）、ＩｇＧ２（γ２重鎖）、ＩｇＧ３（γ３重鎖）、ＩｇＧ４（γ４重鎖）、ＩｇＡ１（α１重鎖）またはＩｇＡ２（α２重鎖）などのサブクラスに分割される。
用語「抗体分子」とは、本明細書において、少なくとも１つの抗体断片（ＣＤＲおよび／または可変領域配列など）を含む抗原結合タンパク質またはポリペプチドを指す。抗体分子として、例えば、モノクローナル抗体、抗体断片またはドメイン、抗体断片またはドメインを含む融合タンパク質、抗体断片またはドメインを含むポリペプチド複合体などが挙げられる。
用語「抗原結合ドメイン」（例えば、ＣＤ２４結合ドメイン）とは、本明細書において、１つもしくは複数のＣＤＲを含む抗体の一部から形成される抗体断片または抗原と結合するが無傷の天然抗体構造を含まない任意の他の抗体断片を指す。抗原結合ドメインの例として、制限するものではないが、ダイアボディー、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦｖ）２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド安定化ダイアボディー（ｄｓダイアボディー）、一本鎖抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体（二価ダイアボディー）、二重特異性抗体、多重特異性抗体、ラクダ化単一ドメイン抗体、ナノボディー、ドメイン抗体および二価ドメイン抗体が挙げられる。抗原結合ドメインは、親抗体が結合する同一抗原と結合可能である。特定の実施形態では、抗原結合ドメインは、１つまたは複数の異なるヒト抗体からのフレームワーク領域にグラフトされた特定のヒト抗体からの１つまたは複数のＣＤＲを含み得る。抗原結合ドメインのより詳細なフォーマットについては、Ｓｐｉｅｓｓ ｅｔ ａｌ，２０１５およびＢｒｉｎｋｍａｎ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，９（２），ｐｐ．１８２－２１２（２０１７）に記載されており、これらは参照によりその全文で本明細書に組み込まれる。
抗体に関して「Ｆａｂ」とは、ジスルフィド結合によって単一重鎖の可変領域および第１の定常領域と結合している単一軽鎖（可変および定常領域の両方）からなる抗体の部分を指す。
「Ｆａｂ’」とは、ヒンジ領域の部分を含むＦａｂ断片を指す。
「Ｆ（ａｂ’）２」とは、Ｆａｂ’の二量体を指す。
抗体に関して「断片ディフィカルト〔fragment difficult〕（Ｆｄ）」とは、軽鎖と結合してＦａｂを形成することができる重鎖断片のアミノ末端半分を指す。例えば、Ｆｄ断片はＶＨおよびＣＨ１ドメインからなり得る。
抗体に関して「Ｆｖ」とは、完全な抗原結合部位を有する抗体の最小断片を指す。Ｆｖ断片は、単一重鎖の可変領域と結合している単一軽鎖の可変領域からなる。ｄｓＦｖを含む多数のＦｖ設計が提供されており、２つのドメイン間の会合が導入されたジスルフィド結合によって増強され、ｓｃＦｖは、単一ポリペプチドとして一緒に２つのドメインに結合するようにペプチドリンカーを使用して形成され得る。対応する免疫グロブリン重鎖または軽鎖の可変ドメインおよび定常ドメインに会合した免疫グロブリン重鎖または軽鎖の可変ドメインを含むＦｖ構築物も作製されている。Ｆｖはまた、ダイアボディーおよびトリアボディーを形成するために多量体化されている（Ｍａｙｎａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｂｉｏｍｅｄ Ｅｎｇ ２ ３３９－３７６（２０００））。
「一本鎖Ｆｖ抗体」または「ｓｃＦｖ」とは、互いに直接またはペプチドリンカー配列を介して接続している軽鎖可変領域および重鎖可変領域からなる遺伝子操作された抗体を指す（Ｈｕｓｔｏｎ ＪＳ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、８５：５８７９（１９８８））。
「ｄｓＦｖ」とは、単一軽鎖の可変領域と単一重鎖の可変領域との間の連結がジスルフィド結合である、ジスルフィド安定化Ｆｖ断片を指す。いくつかの実施形態では、「（ｄｓＦｖ）２」または「（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）」は、３つのペプチド鎖：ジスルフィド橋を介して、ペプチドリンカー（例えば、長い可動性リンカー）によって連結され、それぞれ２つのＶＬ部分と結合している２つのＶＨ部分を含む。いくつかの実施形態では、ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’は、各ジスルフィド対形成された重鎖および軽鎖が、異なる抗原特異性を有する二重特異性である。
抗体に関して「Ｆｃ」とは、ジスルフィド結合を介して第２の重鎖の第２および第３の定常領域と結合している、第１の重鎖の第２および第３の定常領域からなる抗体の部分を指す。抗体のＦｃ部分は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）などの種々のエフェクター機能に関与するが、抗原結合における機能に関与しない。
「ラクダ化された単一ドメイン抗体」、「重鎖抗体」または「ＨＣＡｂ」とは、２つのＶＨドメインを含有し、軽鎖を含有しない抗体を指す（Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ Ｌ．ａｎｄ Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ Ｓ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｄｅｃ １０；２３１（１－２）：２５－３８（１９９９）；Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ Ｓ．，Ｊ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｊｕｎ；７４（４）：２７７－３０２（２００１）；ＷＯ９４／０４６７８；ＷＯ９４／２５５９１；米国特許第６，００５，０７９号）。重鎖抗体は、元々、ラクダ科〔Camelidae〕（ラクダ、ヒトコブラクダおよびラマ）に由来していた。ラクダ化抗体は、軽鎖を欠くが、信頼のおける抗原結合レパートリーを有する（Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．Ｊｕｎ ３；３６３（６４２８）：４４６－８（１９９３）；Ｎｇｕｙｅｎ ＶＫ．ｅｔ ａｌ．“Ｈｅａｖｙ－ｃｈａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ Ｃａｍｅｌｉｄａｅ；ａ ｃａｓｅ ｏｆ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ，”Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ．Ａｐｒ；５４（１）：３９－４７（２００２）；Ｎｇｕｙｅｎ ＶＫ．ｅｔ ａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．Ｍａｙ；１０９（１）：９３－１０１（２００３））。重鎖抗体の可変ドメイン（ＶＨＨドメイン）は、適応免疫応答によって生じた最小の既知抗原結合単位に相当する（Ｋｏｃｈ－Ｎｏｌｔｅ Ｆ．ｅｔ ａｌ．，ＦＡＳＥＢ Ｊ．Ｎｏｖ；２１（１３）：３４９０－８．Ｅｐｕｂ ２００７ Ｊｕｎ １５ （２００７））。
「ナノボディー」とは、重鎖抗体に由来するＶＨＨドメインおよび２つの定常ドメイン、ＣＨ２およびＣＨ３からなる抗体断片を指す。
「ダイアボディー」または「ｄＡｂ」は、２つの抗原結合部位を有する小さい抗体断片を含み、この断片は、同一ポリペプチド鎖中でＶＬドメインと接続しているＶＨドメイン（ＶＨ－ＶＬまたはＶＬ－ＶＨ）を含む（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．Ｊｕｌ １５；９０（１４）：６４４４－８（１９９３）；ＥＰ４０４０９７；ＷＯ９３／１１１６１を参照のこと）。同一鎖上の２つのドメイン間で対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することによって、ドメインが、別の鎖の相補的ドメインと対を形成するようにされ、それによって、２つの抗原結合部位を作製する。抗原結合部位は、同一または異なる抗原（またはエピトープ）を標的とし得る。
特定の実施形態では、「二重特異性ｄｓダイアボディー」は、２つの異なる抗原（またはエピトープ）を標的とするダイアボディーである。
特定の実施形態では、「ｓｃＦｖ二量体」とは、別のＶＨ－ＶＬ部分と二量体化されたＶＨ－ＶＬ（ペプチドリンカーによって連結された）を含み、その結果、一方の部分のＶＨが、もう一方の部分のＶＬと協調し、同一抗原（またはエピトープ）または異なる抗原（またはエピトープ）を標的とし得る２つの結合部位を形成する、二価ダイアボディーまたは二価ＳｃＦｖ（ＢｓＦｖ）である。
その他の実施形態では、「ｓｃＦｖ二量体」は、ＶＬ１－ＶＨ２（ペプチドリンカーによって連結された）と会合しているＶＨ１－ＶＬ２（同様にペプチドリンカーによって連結された）を含み、その結果、ＶＨ１およびＶＬ１が協調し、ＶＨ２およびＶＬ２が協調し、各協調対が異なる抗原特異性を有する二重特異性ダイアボディーである。
「ドメイン抗体」とは、重鎖の可変領域または軽鎖の可変領域のみを含有する抗体断片を指す。特定の例では、２つまたはそれ以上のＶＨドメインは、ペプチドリンカーと共有結合によって結合されて、二価または多価ドメイン抗体を作製する。二価ドメイン抗体の２つのＶＨドメインは、同一または異なる抗原を標的とし得る。
用語「キメラ」とは、本明細書において、ある種に由来する重鎖および／または軽鎖の一部ならびに別の種に由来する重鎖および／または軽鎖の残りを有する抗体または抗原結合ドメインを意味する。例示的例では、キメラ抗体は、ヒトに由来する定常領域およびマウスなどの非ヒト種に由来する可変領域を含み得る。いくつかの実施形態では、非ヒト動物は、哺乳動物、例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、モルモットまたはハムスターである。
用語「ヒト化」とは、本明細書において、抗体または抗原結合ドメインが、非ヒト動物に由来するＣＤＲ、ヒトに由来するＦＲ領域、適用可能な場合には、ヒトに由来する定常領域を含むことを意味する。
用語「作動可能に連結している」または「作動可能に連結された」とは、スペーサーもしくはリンカーまたは介在配列の有無にかかわらず、２つ以上の目的の生物学的配列が意図した様式で機能することを可能にする関係にあるような２つ以上の目的の生物学的配列の並置を指す。ポリペプチドに関して使用される場合、連結された生成物が意図した生物学的機能を有することを可能にするようにポリペプチド配列が連結されていることを意味することを意図する。例えば、抗体可変領域は、抗原結合活性を有する安定な生成物を提供するために、定常領域に作動可能に連結され得る。別の例として、抗原結合ドメインは、それらの間に介在配列を介して別の抗原結合ドメインに作動可能に連結され得、そのような介在配列はスペーサーであってもよいか、または抗体の定常領域などの非常により長い配列を含んでもよい。この用語はまた、ポリヌクレオチドに関しても使用され得る。一例として、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが調節配列（例えば、プロモーター、エンハンサー、サイレンサー配列など）に作動可能に連結している場合、ポリヌクレオチドからのポリペプチドの調節された発現を可能にするようにポリヌクレオチド配列が連結していることを意味することを意図する。
用語「融合」または「融合した」とは、アミノ酸配列（例えば、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質）に関して使用される場合、例えば、化学結合または組換え手段による、２つ以上のアミノ酸配列の、自然に存在しない単一アミノ酸への結合を指す。融合アミノ酸配列は、２つのコード化ポリヌクレオチド配列の遺伝子組換えによって生成することができ、組換えポリヌクレオチドを含む構築物を宿主細胞に導入する方法によって発現させることができる。
「抗原」とは、本明細書において、細胞培養物または動物における抗体の産生またはＴ細胞応答を刺激することができる化合物、組成物、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質または物質を指し、細胞培養物（ハイブリドーマなど）に加えられるか、または動物に注射もしくは吸収される組成物（癌特異的タンパク質を含むものなど）を含む。抗原は、異種抗原によって誘導されるものを含む、特定の体液性免疫または細胞性免疫の生成物（抗体など）と反応する。
用語「ＣＤ２４」は、本明細書において、任意の形態のＣＤ２４、例えば、１）天然の非プロセシングＣＤ２４分子、「全長」ＣＤ２４鎖または例えば、スプライス変異体もしくは対立遺伝子変異体を含むＣＤ２４の天然に存在する変異体、２）細胞におけるプロセシングに起因する任意の形態のＣＤ２４または３）組換え法によって作製されたＣＤ２４サブユニットの全長、断片（例えば、末端切断形態、細胞外／膜貫通型ドメイン）または修飾された形態（例えば、変異形態、グリコシル化／ＰＥＧ化、Ｈｉｓタグ／免疫蛍光融合された形態）を包含するものとする。
用語「抗ＣＤ２４抗体」、「抗ＣＤ２４結合ドメイン」または「ＣＤ２４結合ドメイン」とは、ＣＤ２４（例えば、ヒト、マウスまたはカニクイザルＣＤ２４）
と特異的に結合可能である抗体または抗原結合ドメインを指す。
用語「特異的結合」または「特異的に結合する」とは、本明細書において、例えば、抗体および抗原の間などの２つの分子間の非ランダム結合反応を指す。
組換えＣＤ２４または細胞の表面上に発現されたＣＤ２４への抗体の結合は、「半数最大有効濃度」（ＥＣ５０）値によって表すこともでき、これは、その最大効果（例えば、結合または阻害など）の５０％が観察される抗体の濃度を指す。ＥＣ５０値は、当技術分野で公知の方法、例えば、ＥＬＩＳＡなどのサンドイッチアッセイ、ウエスタンブロット、フローサイトメトリーアッセイおよびその他の結合アッセイによって測定できる。特定の実施形態では、本明細書において提供される抗体およびその断片は、フローサイトメトリーによって０．０５ｎＭ以下、０．０６ｎＭ以下、０．０７ｎＭ以下、０．０８ｎＭ以下、０．０９ｎＭ以下、０．１ｎＭ以下、０．２ｎＭ以下、０．３ｎＭ以下、０．４ｎＭ以下、０．５ｎＭ以下、０．６ｎＭ以下、０．７ｎＭ以下、０．８ｎＭ以下、０．９ｎＭ以下、１ｎＭ以下、２ｎＭ以下、３ｎＭ以下、４ｎＭ以下、５ｎＭ以下、６ｎＭ以下、７ｎＭ以下、８ｎＭ以下、９ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、２０ｎＭ以下、２５ｎＭ以下、３０ｎＭ以下、３５ｎＭ以下、４０ｎＭ以下、５０ｎＭ以下、６０ｎＭ以下、７０ｎＭ以下、８０ｎＭ以下、９０ｎＭ以下、１００ｎＭ以下、１１０ｎＭ以下、１２０ｎＭ以下、１２２ｎＭ以下、１２４ｎＭ以下、１２６ｎＭ以下、１２８ｎＭ以下、１３０ｎＭ以下、１３２ｎＭ以下、１３４ｎＭ以下、１３６ｎＭ以下、１３８ｎＭ以下、１４０ｎＭ以下、２００ｎＭ以下、２１０ｎＭ以下、２５０ｎＭ以下、３００ｎＭ以下または４００ｎＭ以下のＥＣ５０（すなわち、５０％結合濃度）で組換えヒトＣＤ２４と特異的に結合する。
「結合を遮断する」または「同一エピトープについて競合する」能力とは、本明細書において、抗体または抗原結合ドメインの、２つの分子（例えば、ヒトＣＤ２４およびＳｉｇｌｅｃ－１０）の間の結合相互作用を、任意の検出可能な程度に阻害する能力を指す。特定の実施形態では、２つの分子間の結合を遮断する抗体または抗原結合ドメインは、２つの分子間の結合相互作用を少なくとも８５％または少なくとも９０％阻害する。特定の実施形態では、この阻害は、８５％超または９０％超であり得る。
用語「エピトープ」は、本明細書において、抗体が結合する、抗原上の原子またはアミノ酸の特定の群を指す。エピトープは、連続アミノ酸（線状エピトープまたは連続エピトープとも呼ばれる）またはタンパク質の三次フォールディングによって並置された非連続アミノ酸（立体配置エピトープまたは立体構造エピトープとも呼ばれる）の両方から形成され得る。連続アミノ酸から形成されたエピトープは、典型的には、タンパク質上の一次アミノ酸残基に沿って線状に配置されており、連続アミノ酸の小さなセグメントは、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子と結合している抗原から消化され得るか、または変性溶媒に曝露されても保持され得るが、三次フォールディングによって形成されたエピトープは、典型的には、変性溶媒で処理すると喪失される。エピトープは、典型的には、少なくとも３個、より通常は少なくとも５個、約７個または約８～１０個のアミノ酸を独特の空間構造で含む。２種の抗体は、抗原について競合結合を示す場合には、抗原内の同一または密接に関連するエピトープと結合し得る。例えば、抗体または抗原結合ドメインが、参照抗体の抗原への結合を少なくとも８５％または少なくとも９０％または少なくとも９５％遮断する場合、抗体または抗原結合ドメインは、参照抗体と同じ／密接に関連したエピトープに結合すると考えられ得る。
「保存的置換」とは、アミノ酸配列に関して、アミノ酸残基を、同様の生理化学的特性を有する側鎖を有する異なるアミノ酸残基と置換することを指す。例えば、保存的置換は、疎水性側鎖を有するアミノ酸残基（例えば、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＬｅｕおよびＩｌｅ）の間で、中性親水性側鎖を有する残基（例えば、Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＡｓｎおよびＧｌｎ）の間で、酸性側鎖を有する残基（例えば、Ａｓｐ、Ｇｌｕ）の間で、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、Ｈｉｓ、ＬｙｓおよびＡｒｇ）の間で、または芳香族側鎖を有する残基（例えば、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＰｈｅ）の間で行われ得る。当技術分野で公知であるように、保存的置換は、通常、タンパク質のコンホメーション構造において重大な変化を引き起こさず、したがって、タンパク質の生物活性を保持し得る。
用語「相同体」および「相同な」とは、本明細書において、互換的であり、最適にアラインされた場合に別の配列に対して少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、８８％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％）の配列同一性を有する核酸配列（またはその相補鎖）またはアミノ酸配列を指す。
「配列同一性パーセント（％）」とは、アミノ酸配列（または核酸配列）に関して、配列をアラインし、必要に応じて、ギャップを導入して、同一アミノ酸（または核酸）の最大数を達成した後に、参照配列中のアミノ酸（または核酸）残基に対して同一である、候補配列中のアミノ酸（または核酸）残基のパーセントとして定義される。アミノ酸残基の保存的置換は、同一残基と考えられる場合も、考えられない場合もある。アミノ酸（または核酸）配列同一性パーセントを決定する目的のアラインメントは、例えば、ＢＬＡＳＴＮ、ＢＬＡＳＴｐ（Ｕ．Ｓ．Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）のウェブサイトで入手可能、Ａｌｔｓｃｈｕｌ Ｓ．Ｆ．ｅｔ ａｌ，Ｊ． Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２１５：４０３－４１０（１９９０）；Ｓｔｅｐｈｅｎ Ｆ．ｅｔ ａｌ，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，２５：３３８９－３４０２（１９９７）も参照のこと）、ＣｌｕｓｔａｌＷ２（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅのウェブサイトで入手可能、Ｈｉｇｇｉｎｓ Ｄ．Ｇ．ｅｔ ａｌ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：３８３－４０２（１９９６）；Ｌａｒｋｉｎ Ｍ．Ａ．ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ（Ｏｘｆｏｒｄ，Ｅｎｇｌａｎｄ），２３（２１）：２９４７－８（２００７）も参照のこと）およびＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの公的に入手可能なツールを使用することによって達成できる。当業者は、ツールによって提供されたデフォルトパラメータを使用してもよく、またはアラインメントのために必要に応じて、例えば、適したアルゴリズムを選択することなどによって、パラメータをカスタマイズしてもよい。
「エフェクター機能」とは、本明細書において、抗体のＦｃ領域の、そのエフェクター、例えばＣ１複合体、Ｆｃ受容体およびエフェクター細胞（例えば、マクロファージ）との結合に起因する生物学的活性を指す。例示的エフェクター機能として、抗体と、Ｃ１複合体上のＣ１ｑとの相互作用によって誘導される補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体のＦｃ領域の、エフェクター細胞上のＦｃ受容体との結合によって誘導される抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、および抗体のＦｃ領域の、食作用との結合によって誘導される抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）が挙げられる。Ｆｃ－ＣＨ２ドメイン内の保存された二分岐グリカンに関連する特定のグリカン構造が、ＡＤＣＣおよびＡＤＣＰを媒介するＦｃｙＲとの相互作用ならびにＣＤＣをもたらす最初の結合事象であるＣｌｑ結合との相互作用に強い影響を与え得ることが十分に確立されている（Ｒｅｕｓｃｈ Ｄ，Ｔｅｊａｄａ ＭＬ．Ｆｃ ｇｌｙｃａｎｓ ｏｆ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｓ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｑｕａｌｉｔｙ ａｔｔｒｉｂｕｔｅｓ．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ ２０１５；２５：１３２５－３４を参照のこと）。
状態の「処置すること」または「処置」とは、本明細書において、状態を予防することもしくは軽減すること、状態の発症もしくはその発生の速度を減速すること、状態の発生のリスクを低減すること、状態と関連する症状の発生を予防もしくは遅延すること、状態と関連する症状を低減もしくは終結させること、状態の完全または部分退縮をもたらすこと、状態を治癒することまたはそれらのいくつかの組合せを含む。
用語「対象」または「個体」または「動物」または「患者」とは、本明細書において、疾患または障害の診断、予後、改善、予防および／または処置を必要とする、哺乳動物または霊長類を含むヒトまたは非ヒト動物を指す。哺乳動物対象として、ヒト、飼育動物、家畜およびイヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマ、ブタ、ウシ、クマなどの動物園、競技用またはペットの動物が挙げられる。
用語「ベクター」とは、本明細書において、タンパク質をコードするポリヌクレオチドが、そのタンパク質の発現を引き起こすように作動可能に挿入され得る媒体を指す。ベクターは、宿主細胞内に運ぶ遺伝要素の発現を引き起こすように、宿主細胞を形質転換、形質導入またはトランスフェクトするために使用され得る。ベクターの例として、プラスミド、ファージミド、コスミド、および酵母人工染色体（ＹＡＣ）、細菌人工染色体（ＢＡＣ）またはＰ１由来人工染色体（ＰＡＣ）などの人工染色体、λファージまたはＭ１３ファージなどのバクテリオファージおよび動物ウイルスが挙げられる。ベクターとして使用される動物ウイルスのカテゴリーとして、レトロウイルス（レンチウイルスを含む）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルス）、ポックスウイルス、バキュロウイルス、パピローマウイルスおよびパポーバウイルス（例えば、ＳＶ４０）が挙げられる。ベクターは、プロモーター配列、転写開始配列、エンハンサー配列、選択可能要素およびリポーター遺伝子を含む、発現を制御するための種々のエレメントを含有し得る。さらに、ベクターは、複製起点を含有し得る。ベクターはまた、限定されるものではないが、ウイルス粒子、リポソームまたはタンパク質コーティングを含む、細胞へのその侵入を補助するための材料を含み得る。ベクターは、発現ベクターまたはクローニングベクターであり得る。
語句「宿主細胞」とは、本明細書において、外因性ポリヌクレオチドおよび／またはベクターが導入されている細胞を指す。
「ＣＤ２４関連疾患または状態」とは、本明細書において、ＣＤ２４の発現または活性の増大または減少によって引き起こされる、増悪される、そうでなければ、関連している任意の疾患または状態を指す。いくつかの実施形態では、ＣＤ２４関連状態として、免疫関連障害、例えば、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患または感染性疾患などがある。
「癌」とは、本明細書において、悪性細胞成長または新生物、異常な増殖、浸潤または転移を特徴とする任意の医学的状態を指し、固形腫瘍および非固形癌（血液悪性腫瘍）、例えば、白血病の両方を含む。本明細書において、「固形腫瘍」とは、新生物および／または悪性細胞の固体塊を指す。癌または腫瘍の例として、血液悪性腫瘍、口腔癌（例えば、口唇、舌または咽頭）、消化器官（例えば、食道、胃、小腸、結腸、大腸または直腸）、腹膜、肝臓および胆汁道、膵臓、喉頭または肺などの呼吸器系（小細胞および非小細胞）、骨、結合組織、皮膚（例えば、黒色腫）、乳房、生殖器官（卵管、子宮、子宮頸部、精巣、卵巣または前立腺）、尿路（例えば、膀胱または腎臓）、脳ならびに甲状腺などの内分泌腺が挙げられる。特定の実施形態では、癌は、卵巣癌、乳癌、頭頸部癌、腎臓癌、膀胱癌、肝細胞癌および結腸直腸癌から選択される。特定の実施形態では、癌は、リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫およびＢ細胞リンパ腫から選択される。
用語「化学療法抵抗性癌」とは、本明細書において、化学療法の効果に反応しない癌の種類を指す。例えば、化学療法または異なる化学療法の組合せに反応していた癌が、突然成長し始めることを化学療法抵抗性癌と呼ぶことがある。
用語「医薬上許容される」は、指定された担体、ビヒクル、希釈剤、賦形剤（複数可）および／または塩が、一般に、製剤を含むその他の成分と化学的におよび／または物理的に適合しており、そのレシピエントと生理学的に適合していることを示す。
抗ＣＤ２４抗体
本開示は、抗ＣＤ２４抗体である３３Ｅ７Ｅ１２、７１Ａ４Ｆ１２、５６Ａ７Ｅ３、５８Ｆ１０－１Ｆ６、７３Ｈ５－１Ｇ２、１１０Ｄ４Ｇ４、８１Ａ１Ｆ８、１００Ｆ２Ｅ３、１１１Ｆ３Ａ２、８１Ａ７Ａ１０、１０７Ｄ１０Ｄ１１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２、１７３Ｂ１Ｃ１、１０７Ｄ１０Ｅ１１、１０９Ｇ１０Ａ６、９４Ｇ１２Ｄ１１、９２Ｆ５Ｂ８、１８５Ｂ１１Ｅ３、１６８Ｂ１１Ｅ２または１８８Ｈ６Ｄ３の１つまたは複数（例えば、１、２、３、４、５または６個）のＣＤＲ配列を含む抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片を提供する。特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片は、ＣＤ２４と特異的に結合可能である。任意選択で、ＣＤ２４はヒトまたはカニクイザルに由来する。特定の実施形態では、ＣＤ２４は、組換えＣＤ２４または細胞表面上に発現されたＣＤ２４である。
「３３Ｅ７Ｅ１２」とは、本明細書において、配列番号５０の重鎖可変領域および配列番号５２の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「７１Ａ４Ｆ１２」とは、本明細書において、配列番号５４の重鎖可変領域および配列番号５６の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「５６Ａ７Ｅ３」とは、本明細書において、配列番号５８の重鎖可変領域および配列番号６４の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「５８Ｆ１０－１Ｆ６」とは、本明細書において、配列番号６２の重鎖可変領域および配列番号６４の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「７３Ｈ５－１Ｇ２」とは、本明細書において、配列番号６６の重鎖可変領域および配列番号６８の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１１０Ｄ４Ｇ４」とは、本明細書において、配列番号７０の重鎖可変領域および配列番号７２の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８」とは、本明細書において、配列番号７４の重鎖可変領域および配列番号７６の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１００Ｆ２Ｅ３」とは、本明細書において、配列番号７８の重鎖可変領域および配列番号８０の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１１１Ｆ３Ａ２」とは、本明細書において、配列番号８２の重鎖可変領域および配列番号８４の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「８１Ａ７Ａ１０」とは、本明細書において、配列番号８６の重鎖可変領域および配列番号８８の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１０７Ｄ１０Ｄ１１」とは、本明細書において、配列番号１０１の重鎖可変領域および配列番号１０３の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２」とは、本明細書において、配列番号１０９の重鎖可変領域および配列番号１１１の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１７３Ｂ１Ｃ１」とは、本明細書において、配列番号１１８の重鎖可変領域および配列番号１２０または配列番号２２１の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１０７Ｄ１０Ｅ１１」とは、本明細書において、配列番号１２２の重鎖可変領域および配列番号１２４の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１０９Ｇ１０Ａ６」とは、本明細書において、配列番号１３２の重鎖可変領域および配列番号１３４の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「９４Ｇ１２Ｄ１１」とは、本明細書において、配列番号１４１の重鎖可変領域および配列番号１４３の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「９２Ｆ５Ｂ８」とは、本明細書において、配列番号１４６の重鎖可変領域および配列番号１４６の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１８５Ｂ１１Ｅ３」とは、本明細書において、配列番号１５６の重鎖可変領域および配列番号１５８の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１６８Ｂ１１Ｅ２」とは、本明細書において、配列番号１６４の重鎖可変領域および配列番号１６６の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
「１８８Ｈ６Ｄ３」とは、本明細書において、配列番号１７４の重鎖可変領域および配列番号１７６の軽鎖可変領域を有するマウスモノクローナル抗体を指す。
表１は、ＩＭＧＴナンバリングに従って、これらの２０個の抗ＣＤ２４抗体のＣＤＲ配列を示す。重鎖および軽鎖可変領域配列もまた、以下に提供する。
３３Ｅ７Ｅ１２、７１Ａ４Ｆ１２、５６Ａ７Ｅ３、５８Ｆ１０－１Ｆ６、７３Ｈ５－１Ｇ２、１１０Ｄ４Ｇ４、８１Ａ１Ｆ８、１００Ｆ２Ｅ３、１１１Ｆ３Ａ２、８１Ａ７Ａ１０、１０７Ｄ１０Ｄ１１１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２、１７３Ｂ１Ｃ１、１０７Ｄ１０Ｅ１１、１０９Ｇ１０Ａ６、９４Ｇ１２Ｄ１１、９２Ｆ５Ｂ８、１８５Ｂ１１Ｅ３、１６８Ｂ１１Ｅ２または１８８Ｈ６Ｄ３抗体の重鎖または軽鎖可変領域配列を以下に提供する。
３３Ｅ７Ｅ１２－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号５０）：
EVKLEESGGGLVQPGGSMKLSCFVSGFTFSNSWMNWVRQSPEKGLEWVAQI
QLKSDNYATRYVESVRGRFIISRDDSKSSVSLQMNNLRTEDTGIYYCSSGTDY
WGQGTTLTVSS
核酸配列（配列番号５１）：
GAAGTGAAGCTTGAGGAGTCTGGAGGAGGCTTGGTGCAACCTGGAGGAT
CCATGAAACTCTCCTGTTTTGTCTCTGGATTCACTTTCAGTAACTCCTGGA
TGAACTGGGTCCGCCAGTCTCCAGAGAAGGGGCTTGAGTGGGTTGCTCAG
ATTCAATTGAAATCTGATAATTATGCAACACGTTATGTGGAGTCTGTGAG
AGGGAGGTTCATCATCTCAAGAGATGATTCCAAAAGTAGTGTCTCCCTGC
AAATGAACAACTTAAGGACTGAAGACACTGGAATTTATTACTGTTCCTCT
GGGACCGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCA
３３Ｅ７Ｅ１２－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号５２）：
DVVMTQTPLALSVIIGQPASISCKSSQSLLFSNGKTYLNWLLQRPGQSPKRLIY
LVSNLDSGVPDRFTGSGSGTDFTLKIGRVEAEDLGVYYCVQGTHFPYTFGGG
TKLEIK
核酸配列（配列番号５３）：
GATGTTGTGATGACCCAGACTCCACTCGCTTTGTCGGTTATCATTGGACA
ACCAGCCTCTATCTCTTGCAAGTCAAGTCAGAGCCTCTTATTTAGTAATG
GAAAAACCTATTTGAATTGGTTATTACAGAGGCCAGGCCAGTCTCCAAAG
CGCCTAATCTATCTGGTGTCTAATCTGGACTCTGGAGTCCCTGACAGGTT
CACTGGCAGTGGATCAGGAACAGATTTTACACTGAAAATCGGCAGAGTGG
AGGCTGAAGATTTGGGAGTTTATTACTGCGTGCAAGGTACACATTTTCCA
TACACGTTCGGTGGGGGGACCAAGTTGGAAATAAAA
７１Ａ４Ｆ１２－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号５４）：
EVQLQQSGPELVKPGASVKIPCKASGYTFTAYNMDWVKQSHGMSLEWIGDI
NPNNGDTVYNQNFKGKATLTVDKSSSTAYMELRSLTSEDTAVYYCARRGSY
YYGSSHYALDFWGQGTSVSVSS
核酸配列（配列番号５５）：
GAGGTCCAGCTGCAACAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTC
AGTGAAGATACCCTGCAAGGCTTCTGGATACACATTCACTGCCTACAACA
TGGACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAATGAGCCTTGAGTGGATTGGAGAT
ATTAATCCTAACAATGGTGATACTGTCTACAACCAGAATTTCAAGGGCAA
GGCCACATTGACTGTAGACAAGTCCTCCAGCACAGCCTACATGGAACTCC
GCAGCCTGACATCTGAGGACACTGCAGTCTATTACTGTGCAAGAAGGGGG
TCCTATTACTACGGTAGTAGTCACTATGCTCTGGACTTCTGGGGTCAAGG
AACCTCAGTCTCCGTCTCCTCA
７１Ａ４Ｆ１２－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号５６）：
DIQMTQITSSLSASLGNRVTISCRASQDIRNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSR
LLSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQDNSLPRTFGGGTRLEIR
核酸配列（配列番号５７）：
GATATCCAGATGACACAGATTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAAA
CAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGGAATTATTTAA
ACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTAC
ACATCAAGATTACTCTCAGGAGTCCCATCACGGTTCAGTGGCAGTGGGTC
TGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATATTG
CCACTTACTTTTGCCAACAGGATAATTCGCTTCCTCGGACGTTCGGTGGA
GGCACCAGGCTGGAAATCAGA
５６Ａ７Ｅ３－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号５８）：
EVQLQQSGPELVKPGASVKIPCKASGYTFTAYNMDWVKQSHGMSLEWIGDI
NPINGGTIYNQNFEGKATLTVDKSSSTAYLELRSLTSEDTAVYYCARRGSYYY
GSSHYALDFWGQGTSVSVSS
核酸配列（配列番号５９）：
GAGGTCCAGCTGCAACAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTC
AGTGAAGATACCCTGCAAGGCTTCTGGATACACATTCACTGCCTACAACA
TGGACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAATGAGCCTTGAGTGGATTGGAGAT
ATTAATCCTATCAATGGTGGTACTATCTACAACCAGAATTTCGAGGGCAA
GGCCACATTGACTGTAGACAAGTCTTCCAGCACAGCCTACTTGGAACTCC
GCAGCCTGACATCTGAGGACACTGCAGTCTATTACTGTGCAAGAAGGGGG
TCCTATTACTACGGTAGTAGCCACTATGCTTTGGACTTCTGGGGTCAAGG
AACCTCAGTCTCCGTCTCCTCA
５６Ａ７Ｅ３－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号６４）：
DIQMTQITSSLSASLGDRVTITCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRL
LSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQDHTLPRTFGGGTKLEIR
核酸配列（配列番号６１）：
GATATCCAGATGACACAGATTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGA
CAGAGTCACCATCACTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGCAATTATTTAA
ACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTAC
ACATCAAGATTACTCTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTC
TGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATATTG
CCACTTACTTTTGCCAACAGGATCATACGCTTCCTCGGACGTTCGGTGGA
GGCACCAAGCTGGAAATCAGA
５８Ｆ１０－１Ｆ６－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号６２）：
EVQLRQSGPELVKPGAAVKISCKASGYSFTGYHMNWVKQSPEKSLEWIGEIN
PITSGITYNQIFKAKATLTVDKSSSTAYLQLKSLTSEDSAVYYCTRRDYGTSLD
YWGQGTTLTVSS
核酸配列（配列番号６３）：
GAGGTCCAGCTGCGGCAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTGC
GGTGAAGATATCCTGCAAGGCTTCTGGTTACTCATTCACTGGCTACCACA
TGAACTGGGTGAAGCAAAGTCCTGAAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGAGA
GATTAATCCTATCACTAGTGGTATTACCTACAACCAGATTTTCAAGGCCAA
GGCCACATTGACTGTAGACAAATCCTCCAGCACAGCCTACTTGCAGCTCA
AGAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTACTGTACAAGAAGGGAC
TACGGTACTAGCCTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTC
CTCA
５８Ｆ１０－１Ｆ６－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号６４）：
DIQMTQITSSLSASLGDRVTITCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRL
LSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQDHTLPRTFGGGTKLEIR
核酸配列（配列番号６５）：
GATATCCAGATGACACAGATTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGA
CAGAGTCACCATCACTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGCAATTATTTAA
ACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTAC
ACATCAAGATTACTCTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTC
TGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATATTG
CCACTTACTTTTGCCAACAGGATCATACGCTTCCTCGGACGTTCGGTGGA
GGCACCAAGCTGGAAATCAGA
７３Ｈ５－１Ｇ２－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号６６）：
QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTNYGVHWIRQSPGKGLEWLGVIW
RGGSTDYNAAFMSRLSITKDNSKSQVFFQMNSLQAADTAIYYCANNYGYDC
FAYWGQGTLVTVSA
核酸配列（配列番号６７）：
CAGGTGCAGCTGAAGCAGTCAGGACCTGGCCTAGTGCAGCCCTCACAGAG
CCTGTCCATAACCTGCACAGTCTCTGGTTTCTCATTAACTAACTATGGTG
TACACTGGATTCGCCAGTCTCCAGGAAAGGGTCTGGAGTGGCTGGGAGTG
ATATGGAGAGGTGGAAGCACAGACTACAATGCAGCTTTCATGTCCAGACT
GAGCATCACCAAGGACAACTCCAAGAGCCAAGTTTTCTTTCAAATGAACA
GTCTGCAAGCTGCTGACACTGCCATATATTACTGTGCCAACAACTATGGT
TACGACTGCTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACTGTCTCTGC
A
７３Ｈ５－１Ｇ２－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号６８）：
DVQITQSPSYLAASPGETITINCRASKSIIKYLAWYQEKPGKTNKLLIYSGSTLQ
SGIPSRFSGSGSGTDFTLTITSLEPEDFAMYYCQQHNEYPLTFGAGTRLELK
核酸配列（配列番号６９）：
GATGTCCAAATAACCCAGTCTCCATCTTATCTTGCTGCATCTCCTGGAGA
AACCATTACTATTAATTGCAGGGCAAGTAAGAGTATTATCAAATATTTAG
CCTGGTATCAAGAGAAACCTGGGAAAACTAATAAGCTTCTTATCTACTCT
GGATCCACTTTGCAATCTGGAATTCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATC
TGGTACAGATTTCACTCTCACCATCACTAGCCTGGAGCCTGAAGATTTTG
CAATGTATTACTGTCAACAGCATAATGAATACCCGCTCACGTTCGGTGCT
GGGACCAGGCTGGAGCTGAAA
１１０Ｄ４Ｇ４－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号７０）：
EVQLQQSGPGLVKPGASVKISCRASGYLFTGYYMNWVKQSPEKSLEWIGEIN
PNTGDPRYDQKFKAKATLTVDRSSSTAYMHLKSLTSEDSAVYFCARRDYGTS
LDYWGQGTTLTVTS
核酸配列（配列番号７１）：
GAGGTTCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGGGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTC
AGTGAAGATATCCTGCAGGGCTTCTGGTTACCTATTCACTGGCTACTACA
TGAACTGGGTGAAGCAAAGTCCTGAAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGAGA
GATTAATCCTAACACTGGTGATCCTAGATACGACCAGAAGTTTAAGGCCA
AGGCCACATTGACTGTAGACAGATCCTCCAGCACAGCCTACATGCACCTC
AAGAGCCTGACATCTGAAGACTCTGCAGTCTATTTCTGTGCCAGGAGGGA
CTACGGTACTAGCCTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCA
CCTCA
１１０Ｄ４Ｇ４－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号７２）：
DVQITQSPSYLAASPGETITINCRASKSISKYLAWYQEKPGKTNKLLIYSGSTL
QSGIPSRFSGSGSGSDFTLTISSLEPEDFAMYYCQQHNEYPLTFGAGTKLELK
核酸配列（配列番号７３）：
GATGTCCAGATAACCCAGTCTCCATCTTATCTTGCTGCATCTCCTGGAGA
AACCATTACTATTAATTGCAGGGCAAGTAAGAGCATTAGCAAATATTTAG
CCTGGTATCAAGAGAAACCTGGGAAAACTAATAAGCTTCTTATCTACTCT
GGATCCACTTTGCAATCTGGAATTCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATC
TGGTTCAGATTTCACTCTCACCATCAGTAGCCTGGAGCCTGAAGATTTTG
CAATGTATTACTGTCAACAGCATAATGAATATCCGCTCACGTTCGGTGCT
GGGACCAAGCTGGAGCTGAAA
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号７４）：
EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKATGYLFTGYYMNWVKQSPEKSLEWIGEIN
PNTGDTNNNQKFKAKATMTVDRSSSTAYMQLKRLTSEDSAVYYCVRRDYG
TSLDYWGQGTTLTVSS
核酸配列（配列番号７５）：
GAGGTTCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGTTGGTGAAGCCTGGGGCTTC
AGTGAAGATATCCTGCAAGGCTACTGGTTACTTATTCACTGGCTACTACA
TGAACTGGGTGAAACAAAGTCCTGAAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGAGA
GATCAATCCTAACACTGGTGATACTAACAACAACCAGAAGTTCAAGGCCA
AGGCCACAATGACTGTTGACAGATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAGCTC
AAGAGGCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTATTGTGTAAGAAGGGA
CTACGGTACTAGTCTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTC
CTCA
８１Ａ１Ｆ８－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号７６）：
DVQITQSPSYLAASPGETITINCRASKSINKYLAWYQEKPGKTNKLLIHSGSTL
QSGIPSRFSGSRSGTDFTLTISNLEPEDFAMYYCQQHNEYPITFGAGTKLELK
核酸配列（配列番号７７）：
GATGTCCAGATAACCCAGTCTCCATCTTATCTTGCTGCATCTCCTGGAGA
AACCATTACTATTAATTGCAGGGCAAGTAAGAGTATTAACAAATATTTAG
CCTGGTATCAAGAGAAACCTGGGAAAACTAATAAGCTTCTTATCCACTCT
GGATCCACTTTGCAATCTGGAATTCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTAGATC
TGGAACAGATTTCACTCTCACCATCAGTAACCTGGAGCCTGAAGATTTTG
CAATGTATTACTGTCAACAACATAATGAATATCCGATCACGTTCGGTGCT
GGGACCAAGCTGGAGCTGAAA
１００Ｆ２Ｅ３－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号７８）：
QVQLQQPGAELVRPGSSVKLSCKTSDYTFTSYWMDWVKQRPGQGLEWIGNI
YPSDSKTHSNQKFRDKATLTVDKSSSTAYMQLNSLTSEDSAVYYCARRGGY
YGYAMDYWGQGTSVTVSS
核酸配列（配列番号７９）：
CAGGTCCAACTGCAGCAGCCTGGGGCTGAACTGGTGAGGCCTGGGTCTTC
AGTGAAGCTGTCCTGCAAGACTTCTGACTACACCTTCACCAGCTACTGGA
TGGATTGGGTGAAGCAGAGGCCTGGACAAGGCCTTGAATGGATTGGTAAC
ATTTACCCTTCTGATAGTAAAACTCACTCCAATCAAAAGTTCAGGGACAA
GGCCACATTGACTGTAGACAAATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAGCTCA
ACAGCCTGACATCTGAAGACTCTGCGGTCTATTACTGTGCAAGAAGAGGT
GGTTACTACGGCTATGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCAC
CGTCTCCTCA
１００Ｆ２Ｅ３－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号８０）：
DIVMTQSPSSLSVSAGEKVTMSCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LIYGASIRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFGG
GTKLEIK
核酸配列（配列番号８１）：
GACATTGTGATGACACAGTCTCCATCCTCCCTGAGTGTGTCAGCAGGAGA
GAAGGTCACTATGAGCTGCAAGTCCAGTCAGAGTCTGTTAAATAGTGGAA
ATCAAGACAACTACTTGGCCTGGTACCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCT
AAACTGTTGATCTACGGGGCATCCATTAGGGAATCTGGGGTCCCTGATCG
CTTCACAGGCAGTGGATCTGGAACCGATTTCACTCTTACCATCAGTAGTG
TGCAGGCTGAAGACCTGGCAGTTTATTACTGTCAAAATGATCATAGTTAT
CCGTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGTTGGAAATAAAA
１１１Ｆ３Ａ２－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号８２）：
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLITYGVSWVRQPPGKGLEWLGVIWG
DGTTNYHSALKPRLTISKDDSKSQVLLKLNSLQTDDTATYYCANYYGYPFFA
YWGQGTLVTVSA
核酸配列（配列番号８３）：
CAGGTGCAGCTGAAGGAGTCAGGACCTGGCCTGGTGGCGCCCTCACAGAG
CCTGTCCATCACATGCACTGTCTCAGGATTCTCATTAATCACCTATGGTG
TAAGCTGGGTTCGCCAGCCTCCAGGAAAGGGTCTGGAGTGGCTGGGAGTA
ATATGGGGTGACGGGACCACAAATTATCATTCAGCTCTCAAACCCAGACT
GACCATCAGCAAGGATGACTCCAAGAGCCAAGTCCTCTTAAAATTGAACA
GTCTGCAAACTGATGACACAGCCACGTACTACTGTGCCAACTACTATGGT
TACCCCTTTTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACTGTCTCTGC
A
１１１Ｆ３Ａ２－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号８４）：
DIQMTQSSSSFSVSLGDRVTITCKASEDIYNRLAWYQQKPGSAPGVLISGATN
LVTGIPSRFSGSGSGKDYTLTITSLQTEDVATYYCQQYWSSPPTFGGGTKLEIK
核酸配列（配列番号８５）：
GACATCCAGATGACACAATCTTCATCCTCCTTTTCTGTATCTCTAGGAGAC
AGAGTCACCATTACTTGCAAGGCAAGTGAGGACATATATAATCGGTTAGC
CTGGTATCAACAGAAACCAGGAAGTGCTCCTGGGGTCTTAATATCTGGTG
CAACCAATTTGGTAACTGGGATTCCTTCAAGATTCAGTGGCAGTGGATCT
GGAAAGGATTACACTCTCACCATTACCAGTCTTCAGACTGAAGATGTTGC
TACTTATTACTGTCAACAGTATTGGAGTAGTCCTCCGACGTTCGGTGGAGG
CACCAAGCTGGAAATCAAA
８１Ａ７Ａ１０－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号８６）：
QVQLKESGPGLVAPLQSLSITCTVSGFSLSSYGVSWVRQLPGKGLEWLGVIW
GDGSTDYHSTLTSRLSFSKDNSESQVFLKLNSLQTDDTATYYCAIFYGYDEGF
AYWGQGTLVTVSA
核酸配列（配列番号８７）：
CAGGTGCAGCTGAAGGAGTCAGGACCTGGCCTGGTGGCGCCCTTACAGAG
CCTGTCCATCACATGCACTGTCTCAGGGTTCTCATTAAGCAGTTATGGTGT
AAGCTGGGTTCGCCAGCTTCCAGGAAAGGGTCTGGAGTGGCTGGGAGTAA
TATGGGGTGACGGGAGCACAGATTATCATTCAACTCTCACATCCAGACTG
AGCTTCAGCAAGGATAATTCCGAGAGCCAAGTTTTCTTAAAACTGAATAG
TCTGCAAACTGATGACACAGCCACATACTACTGTGCCATTTTCTATGGTTA
CGACGAAGGGTTTGCTTATTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACTGTCTCTG
CA
８１Ａ７Ａ１０－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号８８）：
ENVLTQSPAIMSAFLGEKVTMSCRASSTVNYMYWYQQKSDASPKVWIYYTS
RLAPGVPARFSGSGSGNSFSLTISSMEGEDAATYYCQQFTSSPLTFGAGTKLEL
R
核酸配列（配列番号８９）：
GAAAATGTGCTCACCCAGTCTCCAGCAATCATGTCTGCATTTCTAGGGGA
GAAGGTCACCATGAGCTGCAGGGCCAGCTCAACTGTAAATTACATGTACT
GGTACCAGCAGAAGTCAGATGCCTCCCCCAAAGTTTGGATTTATTACACA
TCCAGGTTGGCTCCTGGAGTCCCAGCTCGCTTCAGTGGCAGTGGGTCTGG
GAACTCTTTTTCTCTCACAATCAGCAGCATGGAGGGTGAAGATGCTGCCA
CTTATTACTGCCAGCAGTTTACTAGTTCCCCGCTCACGTTCGGTGCTGGGA
CCAAGCTGGAGCTGAGA
１０７Ｄ１０Ｄ１１－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１０１）：
QIQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLSSYGVNWVRQSPGKGLEWLGMIWS
GGNTDYNAAFISRVSFTKDNSKSQVFFTMNSLQADDTAIYYCARIWYYGMD
YWGQGTSVTVSS
核酸配列（配列番号１０２）：
CAGATACAGCTGAAGCAGTCAGGACCTGGCCTAGTGCAGCCCTCACAGAG
TCTGTCCATCACCTGCACAGTCTCTGGTTTCTCATTAAGTAGTTATGGTGT
AAATTGGGTTCGCCAGTCTCCAGGAAAGGGTCTGGAATGGCTGGGAATGA
TATGGAGTGGTGGAAACACAGACTATAATGCAGCTTTCATATCCAGAGTG
AGCTTCACCAAGGACAATTCCAAGAGCCAAGTTTTCTTTACAATGAACAG
TCTGCAAGCTGATGACACAGCCATATATTACTGTGCCAGAATATGGTACT
ATGGTATGGACTACTGGGGTCAGGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA
１０７Ｄ１０Ｄ１１－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１０３）：
DIVMTQSQKFMSTTVGDRVSITCKASQNVGTAVAWFQQKPGQSPKILIYSASI
RYPGVPDRFTGSGSGTDFTLTTSNVQSEDLADYFCLQYITFPRTFGGGTKLYIK
核酸配列（配列番号１１０）：
GACATTGTGATGACCCAGTCTCAAAAATTCATGTCCACAACAGTAGGAGA
CAGGGTCAGCATCACCTGCAAGGCCAGTCAGAATGTGGGTACTGCTGTAG
CCTGGTTTCAACAGAAACCAGGACAATCTCCTAAAATACTGATTTATTCA
GCATCCATTCGCTACCCTGGAGTCCCTGATCGCTTCACAGGCAGTGGATCT
GGGACAGATTTCACTCTCACCACTAGCAATGTGCAGTCTGAAGACCTGGC
AGATTATTTCTGTCTGCAATATATCACCTTTCCTCGGACGTTCGGTGGAGG
CACCAAGCTGTATATCAAA
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１０９）：
QVQLLQPGAELVRPGSSVKLSCKASDYTFTSYWMDWVKQRPGQGLEWIGNI
YPSDSKTHYNQKFKDKATLTVDKSSSTAYMQLNSLTSEDSAVYYCARRGGY
YAYAMDYWGQGTSVTVSS
核酸配列（配列番号２０４）：
CAGGTGCAGCTGCTGCAGCCCGGCGCTGAGCTGGTGAGACCCGGAAGCA
GCGTGAAGCTGAGCTGCAAAGCCAGCGACTACACATTCACAAGCTACTGG
ATGGACTGGGTGAAACAGAGACCTGGCCAGGGACTGGAATGGATTGGAA
ACATCTACCCCAGTGACAGCAAGACCCACTACAACCAGAAGTTCAAGGAC
AAAGCCACCCTGACCGTGGACAAGAGCAGCAGCACCGCCTACATGCAGCT
GAACAGCCTGACCAGCGAAGACAGCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAAGA
GGCGGCTACTACGCCTATGCCATGGACTACTGGGGGCAGGGAACCAGCGT
GACCGTGAGCAGC
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１１１）：
DIVMTQSPSSLSVSAGEKVTMRCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LLYGARIRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFG
GGTKVEIK
核酸配列（配列番号２０５）：
GACATTGTGATGACCCAGAGCCCCAGCAGCCTGAGCGTGAGCGCCGGAG
AAAAAGTGACCATGAGATGCAAGAGCAGCCAGAGCCTGCTGAACAGCGG
GAACCAGGACAACTACCTGGCCTGGTATCAACAGAAGCCCGGCCAGCCCC
CCAAACTGCTGCTGTATGGAGCCAGAATCAGAGAGAGCGGCGTGCCCGAC
AGATTCATCGGCAGCGGCAGCGGAACCGACTTCACCCTGACCATCAGCAG
CGTGCAGGCTGAGGACCTGGCCGTGTACTACTGCCAGAACGACCACAGCT
ACCCCTATACCTTTGGAGGCGGCACCAAGGTGGAGATCAAA
１７３Ｂ１Ｃ１－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１１８）：
QVQLQQSGAELARPGASVKMSCKASGYTFTSNTMHWVKQRPGQGLEWIGYI
NPGSAYTNYNQKFNDKATLTADKSSSTASMQLSSLTSEDSAVYYCARLATYY
DNDGYAMDYWGQGTSVTVSS
核酸配列（配列番号２０６）：
CAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGGGCTGAACTGGCAAGACCTGGTGCCTC
AGTGAAGATGTCCTGCAAGGCTTCTGGCTACACCTTTACTAGCAACACGA
TGCACTGGGTAAAACAGAGGCCTGGACAGGGTCTGGAATGGATTGGATAC
ATTAATCCTGGCAGTGCTTATACTAACTACAATCAGAAGTTCAATGACAA
GGCCACATTGACTGCAGACAAGTCCTCCAGCACAGCCTCCATGCAACTGA
GCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTACTGTGCAAGACTCGCG
ACCTACTATGATAACGACGGATATGCTATGGACTATTGGGGTCAAGGAAC
CTCAGTCACCGTCTCCTCA
１７３Ｂ１Ｃ１－ＶＬ（１）
アミノ酸配列（配列番号１２０）：
DIQMTQSTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSK
LHSGVPSRFSGSGSGTDFSLTITNLEQEDFATYFCQQGHTLPWTFGGGTKLEIK
核酸配列（配列番号２０７）：
GACATCCAGATGACACAGTCTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGAC
AGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGTAATTATTTAAA
CTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACA
CATCAAAATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCT
GGAACAGATTTTTCTCTCACCATTACCAACCTGGAGCAAGAAGATTTTGCC
ACTTACTTTTGCCAACAGGGTCATACGCTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGC
ACCAAACTGGAGATCAAA
１７３Ｂ１Ｃ１－ＶＬ（２）
アミノ酸配列（配列番号２２１）：
DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSK
LHSGVPSRFSGSGSGTDFSLTITNLEQEDFATYFCQQGHTLPWTFGGGTKLEIK
核酸配列（配列番号２０８）：
GATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGAC
AGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGTAATTATTTAAA
CTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACA
CATCAAAATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCT
GGAACAGATTTTTCTCTCACCATTACCAACCTGGAGCAAGAAGATTTTGCC
ACTTACTTTTGCCAACAGGGTCATACGCTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGC
ACCAAACTGGAGATCAAA
１０７Ｄ１０Ｅ１１－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１２２）：
EVQLQQSGTGLVKPGTSVKLSCKASGYSFTSYWITWVKQRPGQGLEWIGDIS
PAGGGRNYNERFKNKATLTVDASSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCVRGDSTV
DLDYWGQGTTLTVSS
核酸配列（配列番号２２８）：
GAGGTTCAGCTGCAGCAGTCTGGGACTGGACTTGTGAAGCCTGGGACTTC
AGTGAAGTTGTCCTGCAAGGCTTCTGGCTACAGCTTCACCAGCTACTGGAT
AACCTGGGTGAAACAGAGGCCTGGACAAGGCCTTGAGTGGATTGGAGAT
ATTTCTCCTGCTGGTGGTGGTCGTAACTACAATGAGAGATTCAAGAACAA
GGCCACACTGACTGTAGACGCATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAGCTCA
GCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCGGTCTATTACTGTGTAAGAGGTGAT
AGTACGGTAGACTTAGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTC
CTCA
１０７Ｄ１０Ｅ１１－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１２４）：
DIVMTQAAPSVPVTPGESVSISCRSSKSLLHSNGNTYLYWFLQRPGQSPQLLIY
RVSNLASGVPDRFSGSGSGTAFTLRISRVEAEDVGVYYCMQHLEYPYTFGGG
TKLEIK
核酸配列（配列番号２２９）：
GATATTGTGATGACTCAGGCTGCACCCTCTGTACCTGTCACTCCTGGAGAG
TCAGTATCCATCTCCTGCAGGTCTAGTAAGAGTCTCCTGCATAGTAATGGC
AACACTTACTTGTATTGGTTCCTGCAGAGGCCAGGCCAGTCTCCTCAGCTC
CTGATATATCGGGTGTCCAACCTTGCCTCAGGAGTCCCAGACAGGTTCAG
TGGCAGTGGGTCAGGGACTGCTTTCACACTGAGAATCAGTAGAGTGGAGG
CTGAGGATGTGGGTGTTTATTACTGTATGCAACATCTAGAATATCCGTACA
CGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA
１０９Ｇ１０Ａ６－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１３２）：
EVLLQQSGPELVKPGASVKIPCKASGYGFTDYNMDWIKQSHGKSLEWIGDIN
PHNGDTIYNQKFKGKAKLTVDKSSTTAYMELRSLASEDTAVYYCARRGAYY
YGSSHYALDFWGQGTSVTVSS
核酸配列（配列番号２０９）：
GAGGTCCTGCTGCAACAGTCTGGACCTGAACTGGTGAAGCCTGGGGCTTC
AGTGAAGATACCCTGCAAGGCTTCTGGATACGGATTCACTGACTACAACA
TGGACTGGATAAAACAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGAGA
TATTAATCCTCACAATGGTGATACTATCTACAACCAGAAGTTCAAGGGCA
AGGCCAAATTGACTGTAGACAAGTCCTCCACCACTGCCTACATGGAACTC
CGCAGCCTGGCATCTGAGGACACCGCAGTCTATTACTGTGCAAGGAGGGG
GGCATATTACTACGGTAGTAGCCACTATGCTCTGGACTTCTGGGGTCAAG
GAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA
１０９Ｇ１０Ａ６－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１３４）：
DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDITNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSR
LFSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLKREDIATYFCQQGNTLPWTFGGGTKLEIK
核酸配列（配列番号２１０）：
GATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGAC
AGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTACCAATTATTTAAA
CTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACA
CATCAAGATTATTCTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCT
GGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGAAACGAGAAGATATTGC
CACTTACTTTTGCCAACAGGGTAATACGCTTCCGTGGACGTTCGGTGGAG
GCACCAAGCTGGAAATCAAA
９４Ｇ１２Ｄ１１－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１４１）：
EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKASGYLFTGYYMNWVKQSPEKSLEWIGEIN
PNKGDSNLNQNFKAKATLTVDKSSSTAYMQFKSLTFEDSAVYFCVRRDYGTS
LDHWGQGTTLTVSS
核酸配列（配列番号２１１）：
GAGGTTCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTC
AGTGAAGATATCCTGCAAGGCCTCTGGTTACTTATTCACTGGCTACTACAT
GAACTGGGTGAAACAAAGTCCTGAAAAGAGTCTTGAGTGGATTGGAGAG
ATTAATCCTAACAAAGGTGATAGTAATCTCAACCAGAATTTCAAGGCCAA
GGCCACATTGACTGTTGACAAATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAGTTCA
AGAGCCTGACATTTGAGGACTCTGCAGTCTATTTCTGTGTAAGAAGGGAC
TACGGCACTAGTCTTGACCACTGGGGCCAAGGCACGACTCTCACAGTCTC
CTCA
９４Ｇ１２Ｄ１１－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１４３）：
DVQITQSPSYLATSPGETITINCRASKSISKYLAWYQEKPGKTKKLLIYSGSTL
HTAIPSRFSGRGFGTDFTLTISSLEPEDFAMYYCQQHNEYPITFGGGTKLELK
核酸配列（配列番号２１２）：
GATGTCCAGATAACCCAGTCTCCATCTTATCTTGCTACATCTCCTGGAGAA
ACCATTACTATTAATTGCAGGGCAAGTAAGAGTATTAGCAAATATTTAGC
CTGGTATCAAGAGAAACCTGGGAAAACTAAGAAGCTTCTTATCTACTCTG
GATCCACTTTGCATACTGCAATTCCATCAAGGTTCAGTGGCCGTGGATTTG
GTACAGATTTCACTCTCACCATCAGTAGCCTGGAGCCTGAAGATTTTGCAA
TGTATTACTGTCAACAGCATAATGAATACCCAATCACATTCGGTGGTGGG
ACCAAGCTGGAGCTGAAA
９２Ｆ５Ｂ８－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１４６）：
EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKATGYLFTGYYMNWVKQSPEKSLEWIGEIN
PNTGDTNNNQKFKAKATMTVDRSSSTAYMQLKSLTSEDSAVYYCVRRDYGT
SLDYWGQGTTLTVSS
核酸配列（配列番号２１３）：
GAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGTTGGTGAAGCCTGGGGCTTC
AGTGAAGATATCCTGCAAGGCTACTGGTTACTTATTCACTGGCTACTACAT
GAACTGGGTGAAGCAAAGTCCTGAAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGAGAG
ATCAATCCTAACACTGGTGATACTAACAACAACCAGAAGTTCAAGGCCAA
GGCCACAATGACTGTTGACAGATCCTCCAGTACAGCCTACATGCAGCTCA
AGAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTATTGTGTAAGAAGGGAC
TACGGTACTAGCCTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTC
CTCA
９２Ｆ５Ｂ８－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１４８）：
DVQITQSPSYLAASPGETITINCRASKSINKYLAWYQEKPGKTNKLLIHSGSTL
HSGIPSRFSGSRSGTDFTLTISNLEPEDFAMYYCQQHNEYPLTFGAGTKLELK
核酸配列（配列番号２１４）：
GATGTCCAGATAACCCAGTCTCCATCTTATCTTGCTGCATCTCCTGGAGAA
ACCATTACTATTAATTGCAGGGCAAGTAAGAGTATTAACAAATATTTAGC
CTGGTATCAAGAGAAACCTGGGAAAACTAATAAGCTTCTTATCCACTCTG
GATCCACTTTGCACTCTGGAATTCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTAGATCTG
GAACAGATTTCACTCTCACCATCAGTAACCTGGAGCCTGAAGATTTTGCA
ATGTATTACTGTCAACAACATAATGAATACCCGCTCACGTTCGGTGCTGG
GACCAAGCTGGAGCTGAAA
１８５Ｂ１１Ｅ３－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１５６）：
QVQLQQSGAELARPGASVKMSCKASGYTFTSNTMHWVKQRPGQGLEWIGYI
NPGSAYTNYNQKFNDKATLTADKSSSTASMQLSSLTSEDSAVYYCARLATYY
DNDGYAMDYWGQGTSVTVSS
核酸配列（配列番号２１５）：
CAGGTGCAGCTGCAGCAGAGCGGCGCCGAGCTGGCTAGACCCGGAGCTTC
CGTGAAGATGAGCTGCAAAGCCAGCGGCTACACATTCACATCCAACACAA
TGCACTGGGTGAAACAGAGGCCTGGCCAGGGACTGGAGTGGATTGGGTA
CATCAACCCCGGCAGCGCCTACACCAACTACAACCAGAAATTCAATGACA
AAGCCACACTGACCGCCGACAAAAGCAGCAGCACAGCCAGCATGCAGCT
GAGCAGCCTGACCTCCGAGGACAGCGCTGTGTACTACTGCGCCAGACTGG
CCACCTACTACGACAACGACGGATACGCCATGGATTACTGGGGACAGGGA
ACCAGCGTGACCGTGAGCAGC
１８５Ｂ１１Ｅ３－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１５８）：
ENVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVNYMYWYQQRSSTSPKLWIYGTSK
LASGVPGRFSGSGSGNSYSLTISSMEAEDVATYYCFQGSGYPYTFGGGTKLEI
K
核酸配列（配列番号２１６）：
GAGAATGTGCTGACCCAGAGCCCCGCCATCATGAGTGCCAGCCCAGGAGA
GAAGGTGACAATGACATGCAGCGCCAGCAGCAGCGTGAATTACATGTACT
GGTACCAGCAGAGAAGCAGCACCAGCCCCAAGCTGTGGATCTACGGCAC
CAGCAAGCTGGCCAGCGGAGTGCCCGGCAGATTCTCCGGAAGTGGAAGC
GGAAATAGCTACAGCCTGACTATCAGCAGCATGGAGGCCGAAGATGTTGC
TACCTACTACTGCTTTCAGGGCAGCGGCTACCCCTACACCTTCGGCGGCGG
CACCAAGCTGGAGATCAAG
１６８Ｂ１１Ｅ２－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１６４）：
QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTSYGVSWVRQPPGKGLEWLGVIW
GDGNTNYHSALISRLSISKDNSKSQVFLKLNSLQTDDTATYYCANLYVLFAY
WGQGTLVTVSA
核酸配列（配列番号２１７）：
CAGGTGCAGCTGAAGGAAAGCGGCCCCGGCCTGGTGGCCCCATCTCAGAG
TCTGAGCATCACCTGCACAGTGAGCGGCTTCAGCCTGACAAGCTACGGCG
TGAGCTGGGTGAGACAGCCCCCCGGAAAGGGCCTGGAATGGCTGGGCGT
GATTTGGGGCGACGGCAACACAAACTACCACAGCGCCCTGATCAGCAGAC
TGAGCATCAGCAAGGACAATAGCAAGAGCCAGGTGTTCCTGAAGCTGAA
CAGCCTGCAGACCGACGACACCGCCACCTACTACTGCGCCAACCTGTACG
TGCTGTTCGCCTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACCGTGAGCGCT
１６８Ｂ１１Ｅ２－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１６６）：
ENVLTQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVSYMHWYQQKSSTSPKLWIYGTSK
LASGVPGRFSGSGSGNSYSLTISSMEAEDVATYYCFQGSGYPYTFGGGTKLEI
K
核酸配列（配列番号２１８）：
GAGAATGTGCTGACCCAGAGCCCCGCCATCATGAGTGCCAGCCCAGGAGA
GAAGGTGACAATGACATGCAGCGCCAGCAGCAGCGTGAGTTACATGCACT
GGTACCAGCAGAAGAGCAGCACCAGCCCCAAACTGTGGATCTACGGGAC
CAGCAAGCTGGCCAGCGGAGTGCCCGGAAGATTCAGTGGCAGCGGAAGC
GGCAATAGCTACAGCCTGACTATCAGCAGCATGGAGGCCGAAGATGTTGC
TACCTACTACTGTTTTCAGGGAAGCGGCTACCCATACACCTTCGGGGGGG
GGACCAAGCTGGAAATCAAG
１８８Ｈ６Ｄ３－ＶＨ
アミノ酸配列（配列番号１７４）：
QVQLQQPGTELVKPGASVKLSCKASGYTFTNYWIHWVKQRPGQGLEWIGDI
NPTNGGTNYNEKFKTKAILTVDRSSSTAYMQVSSLTSEDSAVYYCARSGGYD
FDYWGQGTTLTVSS
核酸配列（配列番号２１９）：
CAGGTGCAGCTGCAGCAGCCAGGCACAGAGCTGGTGAAGCCCGGCGCCA
GCGTGAAACTGAGCTGCAAAGCCAGCGGCTACACCTTCACAAACTACTGG
ATTCATTGGGTGAAGCAGAGGCCTGGCCAGGGACTGGAGTGGATCGGCG
ACATTAACCCCACAAACGGAGGCACAAACTACAACGAGAAATTCAAGAC
CAAAGCCATCCTGACCGTGGACAGAAGCAGTAGCACAGCCTACATGCAG
GTGAGCAGCCTGACCAGCGAGGACAGCGCCGTGTACTATTGCGCCAGAAG
CGGCGGCTACGACTTCGACTACTGGGGCCAGGGCACCACCCTGACCGTGA
GCAGC
１８８Ｈ６Ｄ３－ＶＬ
アミノ酸配列（配列番号１７６）：
DVVMTQTPLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLDSDGKTYLNWLLQRPGQSPKRLI
YLVSKLDSGVPDRFTGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCWQGTYFPLTFGA
GTKLELK
核酸配列（配列番号２２０）：
GACGTGGTGATGACCCAGACCCCCCTGACACTGAGCGTGACCATCGGACA
GCCCGCCAGCATCAGCTGCAAGAGCAGCCAGAGCCTGCTGGACAGCGAC
GGAAAAACATATCTGAATTGGCTGCTGCAGAGGCCTGGCCAGAGCCCCAA
AAGACTGATCTACCTGGTGAGCAAGCTGGACAGCGGGGTGCCCGACAGAT
TCACCGGCAGCGGAAGCGGCACCGACTTCACCCTGAAGATCTCCAGAGTG
GAAGCCGAGGACCTGGGCGTGTACTACTGCTGGCAGGGAACCTACTTCCC
CCTGACCTTTGGAGCCGGCACCAAGCTGGAACTGAAG
ＣＤＲは、抗原結合と関与しているとわかっているが、６ＣＤＲのすべてが、不可欠である、または不変であるのではないということがわかっている。言い換えれば、抗ＣＤ２４抗体３３Ｅ７Ｅ１２、７１Ａ４Ｆ１２、５６Ａ７Ｅ３、５８Ｆ１０－１Ｆ６、７３Ｈ５－１Ｇ２、１１０Ｄ４Ｇ４、８１Ａ１Ｆ８、１００Ｆ２Ｅ３、１１１Ｆ３Ａ２、８１Ａ７Ａ１０、１０７Ｄ１０Ｄ１１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２、１７３Ｂ１Ｃ１、１０７Ｄ１０Ｅ１１、１０９Ｇ１０Ａ６、９４Ｇ１２Ｄ１１、９２Ｆ５Ｂ８、１８５Ｂ１１Ｅ３、１６８Ｂ１１Ｅ２または１８８Ｈ６Ｄ３中の１つまたは複数のＣＤＲを置き換える、または変更する、または修飾するが、ＣＤ２４に対する特異的結合親和性を実質的に保持することが可能である。
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体および抗原結合断片は、抗ＣＤ２４抗体３３Ｅ７Ｅ１２、７１Ａ４Ｆ１２、５６Ａ７Ｅ３、５８Ｆ１０－１Ｆ６、７３Ｈ５－１Ｇ２、１１０Ｄ４Ｇ４、８１Ａ１Ｆ８、１００Ｆ２Ｅ３、１１１Ｆ３Ａ２、８１Ａ７Ａ１０、１０７Ｄ１０Ｄ１１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２、１７３Ｂ１Ｃ１、１０７Ｄ１０Ｅ１１、１０９Ｇ１０Ａ６、９４Ｇ１２Ｄ１１、９２Ｆ５Ｂ８、１８５Ｂ１１Ｅ３、１６８Ｂ１１Ｅ２または１８８Ｈ６Ｄ３のうちの１種の重鎖ＣＤＲ３配列を含む。特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体および抗原結合断片は、配列番号１、３、５、７、９、１１、１４、１６、１７、１８、１９、２１、２３、２５、２７、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、９７、１０４、１０５、１０６、１１３、１１４、１１５、１２６、１２７、１２８、１３６、１３７、１５０、１５１、１５２、１６０、１６１、１６２、１６８、１６９、１７０、２２２、２２３および２２４からなる群から選択される重鎖ＣＤＲ３配列を含む。重鎖ＣＤＲ３領域は、抗原結合部位の中心に位置し、したがって、抗原と最も接触し、抗体の抗原に対する親和性に最も自由なエネルギーを提供すると考えられる。また、重鎖ＣＤＲ３は、複数の多様化機序（Ｔｏｎｅｇａｗａ Ｓ．Ｎａｔｕｒｅ．３０２：５７５－８１）によって長さ、アミノ酸組成およびコンホメーションの点で、抗原結合部位のうち群を抜いて最も多様なＣＤＲであると考えられる。重鎖ＣＤＲ３の多様性は、ほとんどの抗体特異性（Ｘｕ ＪＬ，Ｄａｖｉｓ ＭＭ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１３：３７－４５）ならびに望ましい抗原結合親和性（Ｓｃｈｉｅｒ Ｒ，ｅｔｃ．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２６３：５５１－６７）をもたらすのに十分である。
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗体および／またはその抗原結合断片は、抗体および／またはその抗原結合断片が、ＣＤ２４と特異的に結合できる限り、適したフレームワーク領域（ＦＲ）配列を含む。表１に提供されるＣＤＲ配列は、マウス抗体から得られるが、それらは、当技術分野で公知の適した方法、例えば、組換え技術を使用して任意の適した種、例えば、中でもマウス、ヒト、ラット、ウサギの任意の適したＦＲ配列にグラフトできる。
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗体および／またはその抗原結合断片は、ヒト化される。ヒト化抗体または抗原結合断片は、ヒトにおけるその低減された免疫原性において望ましい。ヒト化抗体は、非ヒトＣＤＲ配列が、ヒトまたは実質的にヒトＦＲ配列にグラフトされるので、その可変領域においてキメラである。抗体または抗原結合断片のヒト化は、ヒト免疫グロブリン遺伝子において非ヒト（マウスなど）ＣＤＲ遺伝子を、対応するヒトＣＤＲ遺伝子と置換することによって本質的に実施できる（例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４－１５３６を参照のこと）。
当技術分野で公知の方法を使用して、適したヒト重鎖および軽鎖可変ドメインを選択して、この目的を達成できる。例示的例では、「ベストフィット」アプローチを使用でき、非ヒト（例えば、げっ歯類）抗体可変ドメイン配列を、既知ヒト可変ドメイン配列のデータベースに対してスクリーニングまたはＢＬＡＳＴし、非ヒトクエリー配列に対して最も近いヒト配列を同定し、非ヒトＣＤＲ配列をグラフトするためのヒトスキャフォールドとして使用する（例えば、Ｓｉｍｓ ｅｔ ａｌ、（１９９３）Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｍｏｔ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１を参照のこと）。あるいは、すべてのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワークを、非ヒトＣＤＲのグラフトのために使用してもよい（例えば、Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８９：４２８５；Ｐｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３を参照のこと）。特定の実施形態では、本明細書において提供されるヒト化抗体または抗原結合断片は、非ヒトであるＣＤＲ配列を除いて、実質的にすべてのヒト配列から構成されている。いくつかの実施形態では、可変領域ＦＲおよび存在する場合には定常領域は、完全に、または実質的に、ヒト免疫グロブリン配列に由来する。ヒトＦＲ配列およびヒト定常領域配列、例えば、あるヒト抗体に由来するＦＲ配列および別のヒト抗体に由来する定常領域は、異なるヒト免疫グロブリン遺伝子に由来する場合もある。
本開示はまた、ヒト化抗ＣＤ２４抗体８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ１１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ１１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ１１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ２１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ２１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ２１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ３１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ３１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ３１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ４１、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ４１または８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ４１；または１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ２、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ３、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ４、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ５、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ２、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ３、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ４、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ２、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ３、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ４、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ２、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ３、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ４、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ２、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ３、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ４、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ１、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ２、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ３または１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ４の１つまたは複数（例えば、１、２、３、４、５または６個）のＣＤＲ配列を含む抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片を提供する。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ１１」とは、本明細書において、配列番号１７７の重鎖可変領域および配列番号１８０の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ１１」とは、本明細書において、配列番号１７８の重鎖可変領域および配列番号１８０の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ１１」とは、本明細書において、配列番号１７９の重鎖可変領域および配列番号１８０の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ２１」とは、本明細書において、配列番号１７７の重鎖可変領域および配列番号１８１の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ２１」とは、本明細書において、配列番号１７８の重鎖可変領域および配列番号１８１の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ２１」とは、本明細書において、配列番号１７９の重鎖可変領域および配列番号１８１の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ３１」とは、本明細書において、配列番号１７７の重鎖可変領域および配列番号１８２の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ３１」とは、本明細書において、配列番号１７８の重鎖可変領域および配列番号１８２の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ３１」とは、本明細書において、配列番号１７９の重鎖可変領域および配列番号１８２の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ４１」とは、本明細書において、配列番号１７７の重鎖可変領域および配列番号１８３の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ４１」とは、本明細書において、配列番号１７８の重鎖可変領域および配列番号１８３の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ４１」とは、本明細書において、配列番号１７９の重鎖可変領域および配列番号１８３の軽鎖可変領域を含む８１Ａ１Ｆ８マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ１」とは、本明細書において、配列番号１８９の重鎖可変領域および配列番号１９５の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ２」とは、本明細書において、配列番号１８９の重鎖可変領域および配列番号１９６の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ３」とは、本明細書において、配列番号１８９の重鎖可変領域および配列番号１９７の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ４」とは、本明細書において、配列番号１８９の重鎖可変領域および配列番号１９８の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ５」とは、本明細書において、配列番号１８９の重鎖可変領域および配列番号１９９の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ１」とは、本明細書において、配列番号１９０の重鎖可変領域および配列番号２００の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ２」とは、本明細書において、配列番号１９０の重鎖可変領域および配列番号２０１の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ３」とは、本明細書において、配列番号１９０の重鎖可変領域および配列番号２０２の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ４」とは、本明細書において、配列番号１９０の重鎖可変領域および配列番号２０３の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ１」とは、本明細書において、配列番号１９１の重鎖可変領域および配列番号２００の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ２」とは、本明細書において、配列番号１９１の重鎖可変領域および配列番号２０１の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ３」とは、本明細書において、配列番号１９１の重鎖可変領域および配列番号２０２の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ４」とは、本明細書において、配列番号１９１の重鎖可変領域および配列番号２０３の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ１」とは、本明細書において、配列番号１９２の重鎖可変領域および配列番号２００の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ２」とは、本明細書において、配列番号１９２の重鎖可変領域および配列番号２０１の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ３」とは、本明細書において、配列番号１９２の重鎖可変領域および配列番号２０２の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ４」とは、本明細書において、配列番号１９２の重鎖可変領域および配列番号２０３の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ１」とは、本明細書において、配列番号１９３の重鎖可変領域および配列番号２００の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ２」とは、本明細書において、配列番号１９３の重鎖可変領域および配列番号２０１の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ３」とは、本明細書において、配列番号１９３の重鎖可変領域および配列番号２０２の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ４」とは、本明細書において、配列番号１９３の重鎖可変領域および配列番号２０３の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ１」とは、本明細書において、配列番号１９４の重鎖可変領域および配列番号２００の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ２」とは、本明細書において、配列番号１９４の重鎖可変領域および配列番号２０１の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ３」とは、本明細書において、配列番号１９４の重鎖可変領域および配列番号２０２の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
「１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ４」とは、本明細書において、配列番号１９４の重鎖可変領域および配列番号２０３の軽鎖可変領域を含む１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２マウス／キメラに基づくヒト化抗体を指す。
表２は、ＩＭＧＴナンバリングに従うこれらの３７個のヒト化抗ＣＤ２４抗体のＣＤＲ配列を示す。重鎖および軽鎖可変領域配列もまた、以下に提供する。
これらのヒト化抗体の重鎖または軽鎖可変領域配列を以下に提供する。
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ１１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７７）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQGLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTMTVDRSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCVRRD
YGTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８０）：
DVQITQSPSSLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ１１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７８）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQGLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTMTVDRSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCVRRD
YGTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８０）：
DVQITQSPSSLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ１１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７９）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQRLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTITVDRSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCVRRDY
GTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８０）：
DVQITQSPSSLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ２１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７７）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQGLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTMTVDRSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCVRRD
YGTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８１）：
DVQITQSPSFLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ２１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７８）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQGLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTMTVDRSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCVRRD
YGTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８１）：
DVQITQSPSFLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ２１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７９）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQRLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTITVDRSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCVRRDY
GTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８１）：
DVQITQSPSFLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ３１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７７）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQGLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTMTVDRSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCVRRD
YGTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８２）：
DVQITQSPSSLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKVPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ３１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７８）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQGLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTMTVDRSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCVRRD
YGTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８２）：
DVQITQSPSSLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKVPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ３１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７９）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQRLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTITVDRSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCVRRDY
GTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８２）：
DVQITQSPSSLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKVPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ１１／ＶＬ４１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７７）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQGLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTMTVDRSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCVRRD
YGTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８３）：
DVQITQSPSTLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ２１／ＶＬ４１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７８）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQGLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTMTVDRSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCVRRD
YGTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８３）：
DVQITQSPSTLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ３１／ＶＬ４１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１７９）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTGYYMNWVRQAPGQRLEWMG
EINPNTGDTNNNQKFKARVTITVDRSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCVRRDY
GTSLDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１８３）：
DVQITQSPSTLSASVGDRVTITCRASKSINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHSGSTL
QSGVPSRFSGSRSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQHNEYPITFGQGTKLEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１８９）：
QVQLLQPGAELVRPGSSVKLSCKASDYTFTSYWMDWVKQRPGQGLEWIGNI
YPSDSKTHYNQKFKDKATLTVDKSSSTAYMQLNSLTSEDSAVYYCARRGGY
YAYAMDYWGQGTSVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１９５）：
DIVMTQSPSSLSVSAGEKVTMRCKSSQSLLQSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LLYGARIRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFG
GGTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ２
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１８９）：
QVQLLQPGAELVRPGSSVKLSCKASDYTFTSYWMDWVKQRPGQGLEWIGNI
YPSDSKTHYNQKFKDKATLTVDKSSSTAYMQLNSLTSEDSAVYYCARRGGY
YAYAMDYWGQGTSVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１９６）：
DIVMTQSPSSLSVSAGEKVTMRCKSSQSLLNAGNQDNYLAWYQQKPGQPPK
LLLYGARIRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFG
GGTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ３
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１８９）：
QVQLLQPGAELVRPGSSVKLSCKASDYTFTSYWMDWVKQRPGQGLEWIGNI
YPSDSKTHYNQKFKDKATLTVDKSSSTAYMQLNSLTSEDSAVYYCARRGGY
YAYAMDYWGQGTSVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１９７）：
DIVMTQSPSSLSVSAGEKVTMRCKSSQSLLSSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LLYGARIRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFG
GGTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ４
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１８９）：
QVQLLQPGAELVRPGSSVKLSCKASDYTFTSYWMDWVKQRPGQGLEWIGNI
YPSDSKTHYNQKFKDKATLTVDKSSSTAYMQLNSLTSEDSAVYYCARRGGY
YAYAMDYWGQGTSVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１９８）：
DIVMTQSPSSLSVSAGEKVTMRCKSSQSLLYSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LLYGARIRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFG
GGTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＶＨ／ｍＶＬ－Ｖ５
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１８９）：
QVQLLQPGAELVRPGSSVKLSCKASDYTFTSYWMDWVKQRPGQGLEWIGNI
YPSDSKTHYNQKFKDKATLTVDKSSSTAYMQLNSLTSEDSAVYYCARRGGY
YAYAMDYWGQGTSVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号１９９）：
DIVMTQSPSSLSVSAGEKVTMRCKSSQSLLASGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LLYGARIRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFG
GGTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９０）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRG
GYYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２００）：
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LIYGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ２
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９０）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRG
GYYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０１）：
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYLQKPGQSPQLLI
YGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ３
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９０）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRG
GYYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０２）：
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQAPRL
LIYGARIRESGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDLAVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ１／ｈＶＬ４
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９０）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRG
GYYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０３）：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGKAPKL
LIYGARIRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９１）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQRLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTITVDKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２００）：
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LIYGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ２
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９１）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQRLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTITVDKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０１）：
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYLQKPGQSPQLLI
YGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ３
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９１）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQRLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTITVDKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０２）：
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQAPRL
LIYGARIRESGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDLAVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ２／ｈＶＬ４
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９１）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQRLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTITVDKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０３）：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGKAPKL
LIYGARIRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９２）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２００）：
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LIYGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ２
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９２）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０１）：
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYLQKPGQSPQLLI
YGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ３
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９２）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０２）：
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQAPRL
LIYGARIRESGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDLAVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ３／ｈＶＬ４
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９２）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０３）：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGKAPKL
LIYGARIRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９３）：
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTITVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２００）：
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LIYGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ２
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９３）：
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTITVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０１）：
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYLQKPGQSPQLLI
YGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ３
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９３）：
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTITVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０２）：
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQAPRL
LIYGARIRESGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDLAVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ４／ｈＶＬ４
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９３）：
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTITVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRGG
YYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０３）：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGKAPKL
LIYGARIRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ１
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９４）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARRG
GYYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２００）：
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQPPKL
LIYGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDLAVYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ２
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９４）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARRG
GYYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０１）：
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYLQKPGQSPQLLI
YGARIRESGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ３
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９４）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARRG
GYYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０２）：
EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGQAPRL
LIYGARIRESGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDLAVYYCQNDHSYPYTFGGG
TKVEIK
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｈＶＨ５／ｈＶＬ４
ＶＨアミノ酸配列（配列番号１９４）：
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASDYTFTSYWMDWVRQAPGQGLEWMG
NIYPSDSKTHYNQKFKDRVTMTVDKSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARRG
GYYAYAMDYWGQGTLVTVSS
ＶＬアミノ酸配列（配列番号２０３）：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLNSGNQDNYLAWYQQKPGKAPKL
LIYGARIRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLATYYCQNDHSYPYTFGG
GTKVEIK
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体およびその断片は、免疫グロブリン定常領域をさらに含む。いくつかの実施形態では、免疫グロブリン定常領域は、重鎖および／または軽鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、ＣＨ１、ヒンジおよび／またはＣＨ２－ＣＨ３領域を含む。特定の実施形態では、重鎖定常領域は、Ｆｃ領域を含む。特定の実施形態では、軽鎖定常領域は、ＣκまたはＣλを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片は、免疫グロブリン（Ｉｇ）、任意選択でヒトＩｇ、任意選択でヒトＩｇＧの定常領域を有する。いくつかの実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４の定常領域を含む。
ヒトＩｇＧアイソタイプ（成熟ガンマグロブリンクラスＧ抗体のサブクラス；ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４）は、エフェクター機能を動員する異なる能力を示す。例えば、ＡＤＣＣはＩｇＧ１およびＩｇＧ３によって促進され、ＡＤＣＰはＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４によって促進され、ＣＤＣはＩｇＧ１およびＩｇＧ３によって促進される。このようなエフェクター機能のアイソタイプに特異的な関与は、異なる免疫細胞上のＦｃ受容体に対する選択性およびＣ１ｑに結合し、それによって膜攻撃複合体（ＭＡＣ）の構築を活性化する能力に基づく。様々なアイソタイプの中でも、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ／ｃおよびＦｃγＲＩＩＩａ／ｂを含む、Ｆｃγ受容体に対する相対親和性は、ＩｇＧ１およびＩｇＧ３に対して高い。しかしながら、ＩｇＧ２に対するＦｃγの親和性は、ＦｃγＲＩＩａ Ｈ１３１多型を除いてかなり低く、ＩｇＧ４はＦｃγＲＩに対して測定可能な親和性のみ有する。
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片は、ＡＤＣＣ、ＣＤＣもしくはＡＤＣＰを誘導し得るＩｇＧ１アイソタイプの定常領域またはエフェクター機能が減少もしくは枯渇したＩｇＧ４もしくはＩｇＧ２アイソタイプの定常領域を含む。ＡＤＣＣおよびＣＤＣなどのエフェクター機能は、ＣＤ２４を発現する細胞に対して細胞毒性を引き起こし得る。エフェクター機能は、Ｆｃ受容体結合アッセイ、Ｃ１ｑ結合アッセイおよび細胞溶解アッセイなどの様々なアッセイを使用して評価され得る。
抗体変異体
本開示はまた、本明細書において提供される抗体および／またはその抗原結合断片の種々の変異体を包含する。特定の実施形態では、本開示は、本明細書において提供される例示的抗体の種々の種類の変異体、すなわち、３３Ｅ７Ｅ１２、７１Ａ４Ｆ１２、５６Ａ７Ｅ３、５８Ｆ１０－１Ｆ６、７３Ｈ５－１Ｇ２、１１０Ｄ４Ｇ４、８１Ａ１Ｆ８、１００Ｆ２Ｅ３、１１１Ｆ３Ａ２、８１Ａ７Ａ１０または１０７Ｄ１０Ｄ１１を包含する。
特定の実施形態では、抗体変異体は、表１に提供されるような１つまたは複数のＣＤＲ配列中の１つまたは複数の修飾または置換、１つまたは複数のＦＲ配列、本明細書において提供される重鎖または軽鎖可変領域配列および／または定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む。このような変異体は、その親抗体のＣＤ２４に対する特異的結合親和性を保持するが、修飾（複数可）または置換（複数可）によって付与される１つまたは複数の望ましい特性を有する。例えば、抗体変異体は、改善された抗原結合親和性、改善されたグリコシル化パターン、低減されたグリコシル化のリスク、低減された脱アミノ化、低減されたまたは枯渇したエフェクター機能（複数可）、改善されたＦｃＲｎ受容体結合、増大された薬物動態半減期、ｐＨ感受性および／またはコンジュゲーション（例えば、１個または複数の導入されたシステイン残基）に対する適合性を有し得る。
当技術分野で公知の方法、例えば、「アラニンスキャニング突然変異誘発」を使用して、親抗体配列を、スクリーニングして、修飾または置換される適したまたは好ましい残基を同定してもよい（例えば、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４４：１０８１－１０８５を参照のこと）。手短には、標的残基（例えば、電荷を有する残基、例えば、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、ＬｙｓおよびＧｌｕ）を同定し、中性または負電荷を有するアミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）によって置き換えることができ、修飾された抗体を製造し、興味深い特性についてスクリーニングする。特定のアミノ酸位置の置換が、興味深い機能的変化を実証する場合には、その位置を修飾または置換にとって有望な残基と同定できる。同定された有望な残基を、異なる種類の残基（例えば、システイン残基、正電荷を有する残基等）と置換することによってさらに評価してもよい。
親和性変異体
親和性変異体は、表１に提供されるような１つまたは複数のＣＤＲ配列中の修飾または置換、１つまたは複数のＦＲ配列または本明細書において提供される重鎖または軽鎖可変領域配列を含有し得る。親和性変異体は、その親抗体のＣＤ２４に対する特異的結合親和性を保持する、または親抗体を上回る．改善されたＣＤ２４特異的結合親和性をさらに有する。特定の実施形態では、ＣＤＲ配列、ＦＲ配列または可変領域配列中の少なくとも１つの（またはすべて）の置換は、保存的置換を含む。
当業者ならば、表１に提供されるＣＤＲ配列およびＦＲ配列において、１個または複数のアミノ酸残基が置換されてもよいが、得られた抗体または抗原結合断片は、ＣＤ２４との結合親和性を依然として保持する、または改善された結合親和性をさらに有するということは理解するであろう。当技術分野で公知の種々の方法を使用して、この目的を達成できる。例えば、ファージディスプレイ技術を用いて、抗体変異体（ＦａｂまたはｓｃＦｖ変異体など）のライブラリーを作製し、発現させ、次いで、ヒトＣＤ２４との結合親和性についてスクリーニングできる。別の例のために、コンピュータソフトウェアを使用して、抗体のヒトＣＤ２４との結合を実質的にシミュレートし、結合面を形成する抗体上のアミノ酸残基を同定できる。このような残基は、結合親和性の低減を防ぐために置換において避けられる場合もあり、より強い結合を提供するために置換の標的とされる場合もある。
特定の実施形態では、本明細書において提供されるヒト化抗体または抗原結合断片は、１つもしくは複数のＣＤＲ配列および／または１つもしくは複数のＦＲ配列中に１つまたは複数のアミノ酸残基置換を含む。特定の実施形態では、親和性変異体は、ＣＤＲ配列および／またはＦＲ配列中に合計１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１つ以下の置換を含む。
特定の実施形態では、抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片は、表１に列挙されるもの（単数または複数）に対して少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、８８％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％）の配列同一性を有する１、２または３つのＣＤＲ配列を含み、一方で、その親抗体と同様の、またはさらに高いレベルでＣＤ２４に対する結合親和性を保持する。
特定の実施形態では、抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片は、表１に列挙されるもの（単数または複数）に対して少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、８８％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％）の配列同一性を有する１つまたは複数の可変領域配列を含み、一方で、その親抗体と同様の、またはさらに高いレベルでＣＤ２４に対する結合親和性を保持する。いくつかの実施形態では、表１に列挙されるもの（単数または複数）から選択される配列において、合計１～１０個のアミノ酸が置換、挿入または欠失されている。いくつかの実施形態では、置換、挿入または欠失は、ＣＤＲの外側の領域において（すなわち、ＦＲにおいて）生じる。
グリコシル化変異体
本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体および抗原結合断片はまた、グリコシル化変異体を包含し、これは、抗体または抗原結合断片のグリコシル化の程度を増大または減少するために得ることができる。
抗体またはその抗原結合断片は、炭水化物部分（例えば、オリゴ糖構造）が結合され得る側鎖を有する、１個または複数のアミノ酸残基を含み得る。抗体のグリコシル化は、通常、Ｎ結合型またはＯ結合型のいずれかである。Ｎ結合型とは、炭水化物部分の、アスパラギン残基、例えば、アスパラギン－Ｘ－セリンおよびアスパラギン－Ｘ－トレオニン（式中、Ｘは、プロリンを除く任意のアミノ酸である）などのトリペプチド配列中のアスパラギン残基の側鎖との結合を指す。Ｏ結合型グリコシル化とは、糖Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトースまたはキシロースのうち１種の、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的には、セリンまたはトレオニンとの結合を指す。天然グリコシル化部位の除去は、例えば、上記のトリペプチド配列のうち１種（Ｎ結合型グリコシル化部位について）または配列中に存在するセリンもしくはトレオニン残基（Ｏ結合型グリコシル化部位について）が置換されるようにアミノ酸配列を変更することによって好都合に達成できる。新規グリコシル化部位は、このようなトリペプチド配列またはセリンもしくはトレオニン残基を導入することによって同様の方法で作製できる。
システインが遺伝子操作された変異体
本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体および抗原結合断片はまた、システインが遺伝子操作された変異体を包含し、これは、１個または複数の導入された遊離システインアミノ酸残基を含む。
遊離システイン残基は、ジスルフィド橋の一部ではないものである。システインが遺伝子操作された変異体は、例えば、マレイミドまたはハロアセチルを介した、例えば、中でも、遺伝子操作されたシステインの部位での細胞傷害性および／またはイメージング化合物、標識または放射性同位体とのコンジュゲーションにとって有用である。遊離システイン残基を導入するために抗体または抗原結合断片を遺伝子操作する方法は、当技術分野で公知である、例えば、ＷＯ２００６／０３４４８８を参照のこと。
Ｆｃ変異体
本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体および抗原結合断片はまた、そのＦｃ領域および／またはヒンジ領域に１個または複数のアミノ酸残基修飾または置換を含むＦｃ変異体を包含する。
特定の実施形態では、抗ＣＤ２４抗体または抗原結合断片は、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）とのｐＨ依存性結合を改善する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。このような変異体は、リソソームにおける分解から逃れ、次いで、転座され、細胞の外に放出されることを可能にする酸性ｐＨでＦｃＲｎと結合するので、薬物動態半減期の拡大を有し得る。抗体およびその抗原結合断片を遺伝子操作して、ＦｃＲｎとの結合親和性を改善する方法は、当技術分野で周知である、例えば、Ｖａｕｇｈｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，６（１）：６３－７３，１９９８；Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，Ｒ．ｅｔ ａｌ，Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｖｏｌｕｍｅ １，Ｃｈａｐｔｅｒ ２７：Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｃ ｒｅｇｉｏｎ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ＰＫ，ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，２０１０；Ｙｅｕｎｇ，Ｙ．ｅｔ ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，７０：３２６９－３２７７（２０１０）；ａｎｄ Ｈｉｎｔｏｎ，Ｐ．ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７６：３４６－３５６（２００６）を参照のこと。
特定の実施形態では、抗ＣＤ２４抗体または抗原結合断片は、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を変更する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのある特定のアミノ酸残基を、置換して、増強されたＡＤＣＣ活性を提供できる。あるいはまたはさらに、抗体上の炭水化物構造を変更して、ＡＤＣＣ活性を増強できる。抗体エンジニアリングによってＡＤＣＣ活性を変更する方法は、当技術分野で記載されている、例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ ＲＬ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２００１．２７６（９）：６５９１－６０４；Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ＥＥ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０００．１６４（８）：４１７８－８４；Ｓｔｅｕｒｅｒ Ｗ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９５，１５５（３）：１１６５－７４；Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ＥＥ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１，１６６（４）：２５７１－５；Ｌａｚａｒ ＧＡ．ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ，２００６，１０３（１１）：４００５－４０１０；Ｒｙａｎ ＭＣ．ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．，２００７，６：３００９－３０１８；Ｒｉｃｈａｒｄｓ ＪＯ，．ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．２００８，７（８）：２５１７－２７；Ｓｈｉｅｌｄｓ Ｒ．Ｌ．ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ，２００２，２７７：２６７３３－２６７４０；Ｓｈｉｎｋａｗａ Ｔ．ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ，２００３，２７８：３４６６－３４７３を参照のこと。
特定の実施形態では、抗ＣＤ２４抗体または抗原結合断片は、例えば、Ｃ１ｑ結合および／またはＣＤＣを改善または減少することによって補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を変更する１つまたは複数のアミノ酸置換（複数可）を含む（例えば、ＷＯ９９／５１６４２；Ｄｕｎｃａｎ ＆ Ｗｉｎｔｅｒ Ｎａｔｕｒｅ ３２２：７３８－４０（１９８８）；米国特許第５，６４８，２６０号；米国特許第５，６２４，８２１号を参照のこと）およびＦｃ領域変異体のその他の例に関するＷＯ９４／２９３５１。
特定の実施形態では、抗ＣＤ２４抗体または抗原結合断片は、ヘテロ二量体化を容易にするおよび／または促進するためにＦｃ領域の界面における１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。これらの修飾は、第１のＦｃポリペプチドへの隆起および第２のＦｃポリペプチドへの空洞の導入を含み、ここでは、第１および第２のＦｃポリペプチドの相互作用を促進して、ヘテロ二量体または複合体を形成するために、隆起を空洞中に位置付けることができる。これらの修飾を有する抗体を作製する方法は、当技術分野で公知である、例えば、米国特許第５，７３１，１６８号に記載されている。
抗原結合断片
抗ＣＤ２４抗原結合断片も本明細書において提供される。種々の種類の抗原結合断片が、当技術分野で公知であり、例えば、そのＣＤＲおよびＦＲ配列が表１に示されている例示的抗体、その種々の変異体（例えば、親和性変異体、グリコシル化変異体、Ｆｃ変異体、システインが遺伝子操作された変異体など）を含む、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗体をベースとして開発することができる。
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗ＣＤ２４抗原結合断片は、ラクダ化された単一ドメイン抗体、ダイアボディー、一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体、ＢｓＦｖ、ｄｓＦｖ、（ｄｓＦｖ）２、ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’、Ｆｖ断片、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、二重特異性抗体、ｄｓダイアボディー、ナノボディー、ドメイン抗体、単一ドメイン抗体または二価ドメイン抗体である。
このような抗原結合断片の製造のために種々の技術を使用できる。例示的方法として、無傷の抗体の酵素的消化（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ２４：１０７－１１７（１９９２）；ａｎｄ Ｂｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照のこと）、大腸菌〔E.Coli〕などの宿主細胞による組換え発現（例えば、Ｆａｂ、ＦｖおよびＳｃＦｖ抗体断片のため）、上記で論じられるようなファージディスプレイライブラリーからのスクリーニング（例えば、ＳｃＦｖのための）およびＦ（ａｂ’）２断片を形成するための２つのＦａｂ’－ＳＨ断片の化学的カップリング（Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：１６３－１６７（１９９２））が挙げられる。抗体断片の製造のためのその他の技術は、当業者には明らかであろう。
特定の実施形態では、抗原結合断片は、ｓｃＦｖである。ｓｃＦｖの作製は、例えば、ＷＯ９３／１６１８５；米国特許第５，５７１，８９４号および同５，５８７，４５８号に記載されている。ｓｃＦｖを、アミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかでエフェクタータンパク質と融合して、融合タンパク質を提供してもよい（例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、ｅｄ．Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋを参照のこと）。
二重特異性抗体、多価抗体
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、二価、四価、六価または多価である。特定の実施形態では、本明細書において提供される抗体および／またはその抗原結合断片は、単一特異性または二重特異性である。
用語「価」とは、本明細書において、所与の分子中の指定された数の抗原結合部位の存在を指す。そのようなものとして、用語「二価」、「四価」および「六価」は、抗原結合分子中の、それぞれ、２つの結合部位、４つの結合部位および６つの結合部位の存在を示す。二価分子は、２つの結合部位が両方とも、同一抗原または同一エピトープの特異的結合のためのものである場合に、単一特異性であり得る。同様に、三価分子は、例えば、２つの結合部位が第１の抗原（またはエピトープ）について単一特異性であり、第３の結合部位が、第２の抗原（またはエピトープ）について特異的である場合に二重特異性であり得る。
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、単一特異性であるが、同一抗原またはエピトープに対して特異的である少なくとも２つの結合部位を有する、二価、三価または四価であり得る。これは、特定の実施形態では、一価対応物よりも強力な、抗原またはエピトープとの結合を提供する。特定の実施形態では、二価抗原結合部分では、結合部位の第１の価および第２の価は構造的に同一である（すなわち、同一配列を有する）、または構造的に異なっている（すなわち、同一特異性であるが異なる配列を有する）。
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片は、二重特異性である。いくつかの実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体およびその抗原結合断片は、ＣＤ２４の第１および第２のエピトープに結合し、ＣＤ２４の第１および第２のエピトープは異なる。
いくつかの実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ２４の第１のエピトープおよびＣＤ２４以外の抗原の第２のエピトープに結合する。
本明細書において提供される二重特異性抗体分子は、当技術分野で公知の任意の適した二重特異性フォーマットであり得る。当技術分野で公知の参照二重特異性抗体フォーマットの例として、限定されるものではないが、（ｉ）対称Ｆｃを有する二重特異性抗体、（ｉｉ）非対称Ｆｃを有する二重特異性抗体、（ｉｉｉ）さらなる抗原結合部分が付加された通常の抗体、（ｉｖ）二重特異性抗体断片、（ｖ）さらなる抗原結合部分が付加された通常の抗体断片、（ｖｉ）ヒトアルブミンまたはヒトアルブミン結合ペプチドが付加された二重特異性抗体が挙げられる。
二重特異性ＩｇＧ様抗体（ＢｓＩｇＧ）は、各抗原に対して一価であり、単一の宿主細胞内で２つの軽鎖および２つの重鎖を共発現させることによって産生され得る。付加したＩｇＧは、軽鎖または重鎖のアミノ末端またはカルボキシル末端にさらなる抗原結合ユニットを付加することによって二重特異性ＩｇＧを形成するように操作される。さらなる抗原結合ユニットは、ＤＶＤ－Ｉｇなどの単一ドメイン抗体（不対のＶＬまたはＶＨ）、対となった抗体可変ドメイン（例えば、ＦｖまたはｓｃＦｖ）または操作されたタンパク質スキャフォールドであり得る。
二重特異性抗体断片は、抗体に由来するが、抗体定常ドメインの一部またはすべてを欠いている抗原結合断片である。このような二重特異性抗体断片の例として、例えば、単一ドメイン抗体、Ｆｖ、Ｆａｂおよびダイアボディーなどが挙げられる。
特定の実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体分子は、全ＩｇＧまたはＩｇＧ様分子などの「全」抗体のフォーマット、およびタンデム一本鎖可変断片分子（ｔａＦｖ）、ダイアボディー（Ｄｂ）、一本鎖ダイアボディー（ｓｃＤｂ）およびそれらの様々な他の誘導体（Ｂｙｒｎｅ Ｈ．ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ，３１（１１）：６２１－６３２に記載されている二重特異性抗体フォーマットを参照のこと）などの小さな組換えフォーマットに基づく。二重特異性抗体の例は、限定されるものではないが、クアドローマ、化学的に結合したＦａｂ（抗原結合断片）およびＢｉＴＥ（二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー）を含むフォーマットに基づく。
特定の実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体分子は、Ｔｒｉｏｍａｂ；ハイブリッドハイブリドーマ（クアドローマ）；多重特異性アンチカリンプラットフォーム（Ｐｉｅｒｉｓ）；ダイアボディー；一本鎖ダイアボディー；タンデム一本鎖Ｆｖ断片；ＴａｎｄＡｂ、三重特異性Ａｂ（Ａｆｆｉｍｅｄ）；Ｄａｒｔｓ（デュアルアフィニティーリターゲティング；Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）；二重特異性Ｘｍａｂ（Ｘｅｎｃｏｒ）；二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（Ｂｉｔｅｓ；Ａｍｇｅｎ；５５ｋＤａ）；トリプルボディー；トリボディー（Ｆａｂ－ｓｃＦｖ）融合タンパク質（ＣｒｅａｔｉｖｅＢｉｏｌａｂｓ）多機能組換え抗体誘導体；デュオボディー〔Duobody〕プラットフォーム（Ｇｅｎｍａｂ）；ドック・ロック〔Dock and lock〕プラットフォーム；ノブ・イントゥ・ホール（ＫＩＨ）プラットフォーム；ヒト化二重特異性ＩｇＧ抗体（ＲＥＧＮ１９７９）（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）；Ｍａｂ２二重特異性抗体（Ｆ－Ｓｔａｒ）；ＤＶＤ－Ｉｇ（二重可変ドメイン免疫グロブリン）（Ａｂｂｖｉｅ）；カッパ－ラムダ体；ＴＢＴＩ（四価二重特異性タンデムＩｇ）；およびＣｒｏｓｓＭａｂから選択される二重特異性フォーマットである。
特定の実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体分子は、ＣｒｏｓｓＭａｂを含むＢｓＩｇＧ；ＤＡＦ（ツーインワン）；ＤＡＦ（フォーインワン）；ＤｕｔａＭａｂ；ＤＴ－ＩｇＧ；ノブ・イン・ホール共通ＬＣ；ノブ・イン・ホールアセンブリ；チャージペア；Ｆａｂアーム交換；ＳＥＥＤｂｏｄｙ；Ｔｒｉｏｍａｂ；ＬＵＺ－Ｙ；Ｆｃａｂ；カッパ－ラムダボディー；および直交Ｆａｂから選択される二重特異性フォーマットである。二重特異性抗体フォーマットの詳細な説明については、参照によりその全文で本明細書に組み込まれる、Ｓｐｉｅｓｓ Ｃ．，Ｚｈａｉ Ｑ．ａｎｄ Ｃａｒｔｅｒ Ｐ．Ｊ．（２０１５）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７：９５－１０６を参照のこと。
特定の実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体分子は、ＤＶＤ－ＩｇＧ；ＩｇＧ（Ｈ）－ｓｃＦｖ；ｓｃＦｖ－（Ｈ）ＩｇＧ；ＩｇＧ（Ｌ）－ｓｃＦｖ；ｓｃＦＶ－（Ｌ）ＩｇＧ；ＩｇＧ（Ｌ，Ｈ）－Ｆｖ；ＩｇＧ（Ｈ）－Ｖ；Ｖ（Ｈ）－ＩｇＧ；ＩｇＧ（Ｌ）－Ｖ；Ｖ（Ｌ）－ＩｇＧ；ＫＩＨ ＩｇＧ－ｓｃＦａｂ；２ｓｃＦｖ－ＩｇＧ；ＩｇＧ－２ｓｃＦｖ；ｓｃＦｖ４－Ｉｇ；ｓｃＦｖ４－Ｉｇ；Ｚｙｂｏｄｙ；およびＤＶＩ－ＩｇＧ（フォーインワン）（同上を参照のこと）を含むさらなる抗原結合部分を有するＩｇＧ付加抗体から選択される二重特異性フォーマットである。
特定の実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体分子は、ナノボディー；ナノボディー－ＨＡＳ；ＢｉＴＥ；ダイアボディー；ＤＡＲＴ；ＴａｎｄＡｂ；ｓｃダイアボディー；ｓｃ－ダイアボディー－ＣＨ３；ダイアボディー－ＣＨ３；トリプルボディー；ミニ抗体；ミニボディー；ＴｒｉＢｉミニボディー；ｓｃＦｖ－ＣＨ３ ＫＩＨ；Ｆａｂ－ｓｃＦｖ；ｓｃＦｖ－ＣＨ－ＣＬ－ｓｃＦｖ；Ｆ（ａｂ’）２；Ｆ（ａｂ’）２－ｓｃＦｖ２；ｓｃＦｖ－ＫＩＨ；Ｆａｂ－ｓｃＦｖ－Ｆｃ；四価ＨＣＡｂ；ｓｃダイアボディー－Ｆｃ；ダイアボディー－Ｆｃ；タンデムｓｃＦｖ－Ｆｃ；およびイントラボディー（同上を参照のこと）を含む二重特異性抗体フラグメントから選択されるフォーマットである。
特定の実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体分子は、ドック・ロック；ＩｍｍＴＡＣ；ＨＳＡｂｏｄｙ；ｓｃダイアボディー－ＨＡＳ；およびタンデムｓｃＦｖ－トキシン（同上を参照のこと）などの二重特異性フォーマットである。
特定の実施形態では、本明細書において提供される二重特異性抗体分子は、ＩｇＧ－ＩｇＧ；Ｃｏｖ－Ｘ－Ｂｏｄｙ；およびｓｃＦｖ１－ＰＥＧ－ｓｃＦｖ２（同上を参照）を含む二重特異性抗体コンジュゲートから選択されるフォーマットに基づく。
特定の実施形態では、第２の抗原結合ドメインは、ＣＤ２４結合ドメインのＮ末端またはＣ末端に作動可能に連結される。特定の実施形態では、ＣＤ２４結合ドメインは、第２の抗原結合ドメインのＮ末端またはＣ末端に作動可能に連結される。
作動可能な連結は、直接的な化学結合による連結またはスペーサーもしくは介在配列を介する間接的な連結であり得る。用語「スペーサー」とは、本明細書において、１、２、３、４もしくは５個のアミノ酸残基または５から１５、２０、３０、５０個もしくはそれ以上の間の長さを有し、ペプチド結合によって結合した人工アミノ酸配列を指し、ｓｃＦｖおよびＦａｂまたはＩｇＧなどの１つまたは複数の結合ドメインを連結するように使用される。スペーサーは、ｓｃＦｖ内のペプチドリンカーと同一であってもよいか、または異なっていてもよい。特定の実施形態では、スペーサーは、配列番号９０、９１、９２および９３の１、２、３、４個またはそれ以上の連続または直列反復を含む。特定の実施形態では、スペーサーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号９０）を含む。特定の実施形態では、スペーサーは、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号９１）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号９２）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号９３）を含む。介在配列は、本明細書において、ＣＤ２４結合ドメインと第２の抗原結合ドメインの両方がそのそれぞれに結合可能な限り、ＣＤ２４結合ドメインと第２の抗原結合ドメインの間に位置する任意のアミノ酸配列であり得る。示した例では、介在配列は、重鎖定常領域または軽鎖定常領域を含み得る。
特定の実施形態では、第２の抗原結合ドメインはｓｃＦｖを含み、ＣＤ２４結合ドメインはＦａｂまたはＩｇＧを含む。特定の実施形態では、第２の抗原結合ｓｃＦｖは、ＣＤ２４結合ＦａｂもしくはＩｇＧの重鎖のＮ末端もしくはＣ末端（例えば、ＣＤ２４結合Ｆａｂの後の重鎖定常領域のＣ末端）、またはＣＤ２４結合ＦａｂもしくはＩｇＧの軽鎖のＮ末端もしくはＣ末端、またはそれらの任意の組合せに作動可能に連結され得、その逆も同様である。
示した例では、二重特異性抗体分子は、ＶＨ（抗ＣＤ２４）－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－スペーサー－第２の抗原結合ｓｃＦｖまたは第２の抗原結合ｓｃＦｖ－スペーサー－ＶＨ（抗ＣＤ２４）－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３のフォーマットの重鎖およびＶＬ（抗ＣＤ２４）－ＣＬのフォーマットの軽鎖を含み得る。ＶＨ（抗ＣＤ２４）およびＶＬ（抗ＣＤ２４）とは、本明細書において、それぞれ、ＣＤ２４結合ドメインの重鎖および軽鎖可変ドメインを指し、第２の抗原結合ｓｃＦｖとは、第２の抗原結合ドメインのｓｃＦｖを指し、ＣＬとは、軽鎖定常領域を指し、ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３は、集合的に重鎖定常領域である。
別の例示的例では、二重特異性抗体分子は、第２の抗原結合ｓｃＦｖ－スペーサー－ＶＬ（抗ＣＤ２４）－ＣＬまたはＶＬ（抗ＣＤ２４）－ＣＬ－スペーサー－第２の抗原結合ｓｃＦｖのフォーマットの軽鎖およびＶＨ（抗ＣＤ２４）－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３のフォーマットの重鎖も同様に含み得る。
特定の実施形態では、ＣＤ２４結合ドメインはｓｃＦｖを含み、第２の抗原結合ドメインはＦａｂまたはＩｇＧを含む。特定の実施形態では、ＣＤ２４結合ドメインｓｃＦｖは、第２の抗原結合ＦａｂもしくはＩｇＧの重鎖のＮ末端もしくはＣ末端（例えば、ＣＤ２４結合Ｆａｂの後の重鎖定常領域のＣ末端）、または第２の抗原結合ＦａｂもしくはＩｇＧの軽鎖のＮ末端もしくはＣ末端、またはそれらの任意の組合せに作動可能に連結され得、その逆も同様である。
例示的例では、二重特異性抗体分子は、第２の抗原結合ＶＨ－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－スペーサー－ｓｃＦｖ（抗ＣＤ２４）またはｓｃＦｖ（抗ＣＤ２４）－スペーサー－第２の抗原結合ＶＨ－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３のフォーマットの重鎖および第２の抗原結合ＶＬ－ＣＬのフォーマットの軽鎖も同様に含み得る。別の例示的例では、二重特異性抗体分子は、ｓｃＦｖ（抗ＣＤ２４）－スペーサー－第２の抗原結合ＶＬ－ＣＬまたは第２の抗原結合ＶＬ－ＣＬ－スペーサー－ｓｃＦｖ（抗ＣＤ２４）のフォーマットの軽鎖および第２の抗原結合ＶＨ－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３のフォーマットの重鎖も同様に含み得る。
本明細書において提供される二重特異性抗体分子では、第２の抗原結合ドメインは、一価（すなわち、１つのｓｃＦｖもしくはＦａｂ）もしくは多価（例えば、１つより多いｓｃＦｖもしくはＦａｂ）であってもよく、および／またはＣＤ２４結合ドメインは、一価もしくは多価であってもよい。
特定の実施形態では、第２の抗原は免疫関連標的であり、任意選択で、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＰＤ－１、ＣＬＴＡ－４、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ３、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＴＧＦ β、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＩＣＡＭ－１、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７－Ｈ３、ＬＦＡ－１、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＣＤ３、ＣＤ１６、ＳＩＲＰα、Ｓｉｇｌｅｃ１０、ＬＩＬＲＢ２、Ｃｌｅｖｅｒ－１、Ｍａｃｒｏ、ＬＩＬＲＢ４、Ｓｉｇｌｅｃ１５、ＣＳＦ１Ｒ、ＰＳＧＬ－１、ＶＳＩＧ－４、Ｂ２ＭおよびＣＤ８３からなる群から選択される。
特定の実施形態では、第２の抗原は、腫瘍関連抗原またはそのエピトープである。用語「腫瘍関連抗原」とは、用語「腫瘍抗原」と互換的に使用され、腫瘍細胞表面上に存在するか、または提示され得、腫瘍細胞上または腫瘍細胞内に位置する抗原を指す。いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、腫瘍細胞によってのみ提示されることができ、正常な、すなわち、非腫瘍細胞によって提示されない。いくつかのその他の実施形態では、腫瘍関連抗原は、腫瘍細胞上でもっぱら発現されることができ、または非腫瘍細胞と比較して腫瘍特異的変異を表し得る。いくつかのその他の実施形態では、腫瘍関連抗原は、腫瘍細胞および非腫瘍細胞の両方で見られ得るが、非腫瘍細胞と比較した場合に腫瘍細胞で過剰発現されるか、または非腫瘍組織と比較して腫瘍組織のあまり緻密ではない構造のために腫瘍細胞において抗体結合にとって近づきやすい。
いくつかの実施形態では、腫瘍抗原は、ＣＡ－１２５、ガングリオシドＧ（Ｄ２）、Ｇ（Ｍ２）およびＧ（Ｄ３）、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３３、ＣＤ４７、ＣＤ５２、Ｅｐ－ＣＡＭ、ＣＥＡ、ＣＬＤＮ１８．２、ボンベシン様ペプチド、ＰＳＡ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ３／ＨＥＲ３、ｅｒｂＢ４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ９、Ｋｉ－６７、癌関連ムチン、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲｓ（例えば、ＶＥＧＦＲ３）、エストロゲン受容体、ルイス－Ｙ抗原、ＴＧＦβ１、ＩＧＦ－１受容体、ＥＧＦα、ｃ－Ｋｉｔ受容体、トランスフェリン受容体、ＩＬ－２Ｒ、ＣＤＨ６、ＣＥＡ、ＦＯＬＲ１、ＴＲＯＰ２、ＰＴＫ７、ＳＬＩＴＲＫ６、ＣＤ１４２、ＮＥＣＴＩＮ－４、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＣＤ１４２、ＣＤ１２３、ＣＤ２２、ＣＤ７９ｂ、ＤＬＬ３、ＳＬＣファミリーまたはＣＯ１７－１Ａからなる群から選択される。
特定の実施形態では、第２の抗原は、ＰＤ－Ｌ１、ＳＩＲＰα、ＣＤ４７およびＢ２Ｍからなる群から選択される免疫抑制分子である。
特定の実施形態では、第２の抗原はＣＤ４７である。
いくつかの実施形態では、ＣＤ４７結合ｓｃＦｖは、ＣＤ２４結合Ｆａｂに続く重鎖定常領域のＣ末端に作動可能に連結されている。
特定の実施形態では、二重特異性抗体分子は、ＶＬ（抗ＣＤ２４）－ＣＬのフォーマットの軽鎖と関連する、ＶＨ（抗ＣＤ２４）－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－スペーサー－ｓｃＦｖ（抗ＣＤ４７）のフォーマットの重鎖を含む。
特定の実施形態では、ＣＤ４７結合ｓｃＦｖは、５Ｆ９由来ｓｃＦｖであり、配列番号９４(QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYNMHWVRQAPGQRLEWMGTIYPGNDDTSYNQKFKDRVTITADTSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGGYRAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSIVYSNGNTYLGWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPYTFGQGTKLEIK)のアミノ酸配列を含む。
腫瘍関連抗原のその他の例示的例として、ＣＤ１０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＣＤ３４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ１２３、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４５、ＣＤ１３３、Ｆｍｓ様チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ－３、ＣＤ１３５）、硫酸コンドロイチンプロテオグリカン４（ＣＳＰＧ４、黒色腫関連硫酸コンドロイチンプロテオグリカン）、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＩＧＦＲ、ＩＬ３Ｒ、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）、ＣＤＣＰ１、Ｄｅｒｌｉｎ１、テネイシン、ｆｒｉｚｚｌｅｄ １－１０、血管性抗原ＶＥＧＦＲ２（ＫＤＲ／ＦＬＫ１）、ＶＥＧＦＲ３（ＦＬＴ４、ＣＤ３０９）、ＰＤＧＦＲ－α（ＣＤ１４０ａ）、ＰＤＧＦＲ－β（ＣＤ１４０ｂ）、エンドグリン、ＣＬＥＣ１４、ＣＬＥＣ１２ａ、Ｔｅｍ１－８およびＴｉｅ２が挙げられる。さらなる例として、Ａ３３、キャンパス－１（ＣＤｗ５２）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、カルボアンヒドラーゼ〔Carboanhydrase〕ＩＸ（ＭＮ／ＣＡ ＩＸ）、ｄｅ２－７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＥｐＣＡＭ、葉酸結合タンパク質、Ｇ２５０、ｃ－Ｋｉｔ（ＣＤ１１７）、ＣＳＦ１Ｒ（ＣＤ１１５）、ＨＬＡ－ＤＲ、ＩＬ－２受容体、ＩＬ３Ｒ、ＭＣＳＰ（黒色腫関連細胞表面硫酸コンドロイチンプロテオグリカン）、Ｍｕｃ－１、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）およびタグ－７２を挙げることができる。
本明細書において提供される二重特異性抗体および抗原結合断片は、当技術分野で公知の任意の適した方法で作製できる。従来のアプローチでは、異なる抗原特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖－軽鎖対を、宿主細胞において同時発現させ、組換え法で二重特異性抗体を製造し（例えば、Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｃｕｅｌｌｏ、Ｎａｔｕｒｅ、３０５：５３７（１９８３）を参照のこと）、続いて、アフィニティークロマトグラフィーによって精製できる。
また、組換えアプローチを使用してもよく、ここでは、２つの特異性の抗体重鎖可変ドメインをコードする配列を、それぞれ免疫グロブリン定常ドメイン配列と融合し、続いて、発現ベクターに挿入し、それを、二重特異性抗体の組換え発現のために適した宿主細胞に軽鎖配列の発現ベクターとともに同時トランスフェクトする（例えば、ＷＯ９４／０４６９０；Ｓｕｒｅｓｈ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１２１：２１０（１９８６）を参照のこと）。同様に、ｓｃＦｖ二量体もまた、組換え構築し、宿主細胞から発現させることができる（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照のこと）。
別の方法では、遺伝子融合によって、ＦｏｓおよびＪｕｎタンパク質からのロイシンジッパーペプチドを、２種の異なる抗体のＦａｂ’タンパク質に連結することができる。連結された抗体は、ヒンジ領域で４つの半抗体（すなわち、モノマー）に還元され、次いで、再酸化されてヘテロ二量体を形成する（Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７－１５５３（１９９２））。
２つの抗原結合ドメインをコンジュゲートまたは架橋して、二重特異性抗体または抗原結合断片形成してもよい。例えば、１つの抗体をビオチンと、一方で、もう一方の抗体をアビジンとカップリングでき、ビオチンおよびアビジン間の強力な会合は、２つ抗体と一緒に複合体を形成し、二重特異性抗体を形成する（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、ＷＯ９１／００３６０、ＷＯ９２／００３７３およびＥＰ０３０８９を参照のこと）。別の例のために、２つの抗体または抗原結合断片を、例えば、米国特許第４，６７６，９８０号に開示されるような当技術分野で公知の従来法によって架橋することができる。
二重特異性抗原結合断片は、二重特異性抗体から、例えば、タンパク質分解による切断によって、または化学的連結によって作製してもよい。例えば、抗体の抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ’）を調製し、Ｆａｂ’－チオール誘導体に変換し、次いで、異なる抗原特異性を有する別の変換されたＦａｂ’誘導体と混合し、反応させて、二重特異性抗原結合断片を形成してもよい（例えば、Ｂｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２９：８１（１９８５）を参照のこと）。
特定の実施形態では、二重特異性抗体または抗原結合断片を、ノブ・イントゥ・ホール〔knob-into-hole〕会合が形成されて、２つの異なる抗原結合部位のヘテロ二量体化を促進できるように界面で遺伝子操作してもよい。「ノブ・イントゥ・ホール」とは、本明細書において、一方のポリペプチドが、嵩高い側鎖を有するアミノ酸残基（例えば、チロシンまたはトリプトファン）の存在のために隆起（すなわち、「ノブ」）を有し、もう一方のポリペプチドが、空洞（すなわち、「ホール」）を有し、２種のポリペプチドの相互作用を促進して、ヘテロ二量体または複合体を形成するように、小側鎖アミノ酸残基残基（例えば、アラニンまたはトレオニン）および隆起が、空洞中に配置することができるポリペプチド（ＣＨ３ドメインなど）間の相互作用を指す。ノブ・イントゥ・ホールを用いてポリペプチドを作製する方法は、当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第５，７３１，１６８号に記載される。
コンジュゲート
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片は、１つまたは複数のコンジュゲートと連結しており、任意選択で、コンジュゲートが、直接またはリンカーを介してのいずれかで共有結合によって結合している。コンジュゲートは、抗体またはその抗原結合断片と結合することができる非タンパク質性部分である。種々のコンジュゲートを、本明細書において提供される抗体または抗原結合断片と連結してもよいということが考慮される（例えば、“Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｖａｃｃｉｎｅｓ”，Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ ｔｏ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｊ．Ｍ．Ｃｒｕｓｅ ａｎｄ Ｒ．Ｅ．Ｌｅｗｉｓ，Ｊｒ．（ｅｄｓ．），Ｃａｒｇｅｒ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，（１９８９）を参照のこと）。これらのコンジュゲートを、その他の方法の中でも、共有結合、親和性結合、インターカレーション、配位結合、複合体形成、会合、ブレンドまたは付加によって抗体または抗原結合断片と連結してもよい。いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、クリアランス修飾剤、化学療法剤、毒素、放射性同位元素、ランタニド、発光標識、蛍光標識、酵素基質標識、ＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、チューブリン結合剤または他の抗癌薬を含む。
特定の実施形態では、本明細書において開示される抗体および抗原結合断片を、１つまたは複数のコンジュゲートとの結合に利用され得るエピトープ結合部分の外側に指定の部位を含有するように遺伝子操作してもよい。例えば、このような部位は、コンジュゲートとの共有結合を容易にするために、１つまたは複数の反応性アミノ酸残基、例えば、システインまたはヒスチジン残基などを含み得る。
特定の実施形態では、抗体を、コンジュゲートと間接的に、または別のコンジュゲートを介して連結してもよい。例えば、抗体または抗原結合断片を、ビオチンにコンジュゲートしてもよく、次いで、アビジンにコンジュゲートされている第２のコンジュゲートに間接的にコンジュゲートしてもよい。コンジュゲートは、毒素（例えば、化学療法剤）、検出可能な標識（例えば、放射性同位元素、ランタニド、発光標識、蛍光標識または酵素－基質標識）であり得る。
「毒素」は、細胞にとって有害である、または細胞に損傷を与え得る、もしくは死滅させ得る任意の薬剤であり得る。毒素の例として、制限するものではないが、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラセンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１－デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシンおよびその類似体、代謝拮抗物質（例えば、メトトレキサート、６－メルカププリン、６－チオグアニン、シタラビン、５－フルオロウラシルデカルバジン）、アルキル化剤（例えば、メクロレタミン、チオエパクロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣおよびシス－ジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン（以前は、ダウノマイシン）およびドキソルビシン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（以前は、アクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシンおよびアントラマイシン（ＡＭＣ））および抗有糸分裂剤（例えば、ビンクリスチンおよびビンブラスチン）が挙げられる。
検出可能な標識の例として、蛍光標識（例えば、フルオレセイン、ローダミン、ダンシル、フィコエリトリンまたはテキサスレッド）、酵素基質標識（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ルシフェラーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、糖類オキシダーゼまたはβ－Ｄ－ガラクトシダーゼ）、放射性同位元素（例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓ、３Ｈ、１１１Ｉｎ、１１２Ｉｎ、１４Ｃ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、８６Ｙ、８８Ｙ、９０Ｙ、１７７Ｌｕ、２１１Ａｔ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１５３Ｓｍ、２１２Ｂｉおよび３２Ｐ、その他のランタニド、発光標識）、発色団部分、ジゴキシゲニン、ビオチン／アビジン、ＤＮＡ分子または検出用金を挙げることができる。
特定の実施形態では、コンジュゲートは、抗体の半減期を増大するのに役立つ薬物動態修飾部分であり得る。例示的例として、水溶性ポリマー、例えば、ＰＥＧ、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマーなどが挙げられる。ポリマーは、任意の分子量のものであってよく、分岐していても、非分岐であってもよい。抗体と結合しているポリマーの数は、変わることがあり、１つより多いポリマーが結合される場合には、同一分子である場合も、異なる分子である場合もある。
特定の実施形態では、コンジュゲートは、磁性ビーズなどの精製部分であり得る。
特定の実施形態では、本明細書において提供される抗体および／またはその抗原結合断片は、コンジュゲートの基材として使用される。
ポリヌクレオチドおよび組換え法
本開示は、抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片をコードする単離されたポリヌクレオチドを提供する。特定の実施形態では、本明細書において提供される例示的抗体の可変領域をコードする、単離されたポリヌクレオチドは、配列番号５１、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５７、配列番号５９、配列番号６１、配列番号６３、配列番号６５、配列番号６７、配列番号６９、配列番号７１、配列番号７３、配列番号７５、配列番号７７、配列番号７９、配列番号８１、配列番号８３、配列番号８５、配列番号８７、配列番号８９、配列番号１０２、配列番号１１０、配列番号２０４、配列番号２０５、配列番号２０６、配列番号２０７、配列番号２０８、配列番号２０９、配列番号２１０、配列番号２１１、配列番号２１２、配列番号２１３、配列番号２１４、配列番号２１５、配列番号２１６、配列番号２１７、配列番号２１８、配列番号２１９、配列番号２２８、配列番号２２９および／または配列番号２２０で示されるような、１つまたは複数のヌクレオチド配列を含む。モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来手順を使用して（例えば、抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子と特異的に結合可能であるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離され、シーケンシングされる。コードするＤＮＡはまた、合成法によって得ることもできる。
抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片をコードする単離されたポリヌクレオチド（例えば、配列番号５１、配列番号５３、配列番号５５、配列番号５７、配列番号５９、配列番号６１、配列番号６３、配列番号６５、配列番号６７、配列番号６９、配列番号７１、配列番号７３、配列番号７５、配列番号７７、配列番号７９、配列番号８１、配列番号８３、配列番号８５、配列番号８７、配列番号８９、配列番号１０２、配列番号１１０、配列番号２０４、配列番号２０５、配列番号２０６、配列番号２０７、配列番号２０８、配列番号２０９、配列番号２１０、配列番号２１１、配列番号２１２、配列番号２１３、配列番号２１４、配列番号２１５、配列番号２１６、配列番号２１７、配列番号２１８、配列番号２１９、配列番号２２８、配列番号２２９および／または配列番号２２０に示されるような配列を含む）を、当技術分野で公知の組換え技術を使用して、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）のために、または発現のためにベクター中に挿入できる。多数のベクターが入手可能である。ベクター構成成分は、一般に、それだけには限らないが、以下：シグナル配列、複製起点、１種または複数のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター（例えば、ＳＶ４０、ＣＭＶ、ＥＦ－１α）および転写終結配列のうち１つまたは複数を含む。
いくつかの実施形態では、ベクター系として、哺乳動物、細菌、酵母系などが挙げられ、それだけには限らないが、ｐＡＬＴＥＲ、ｐＢＡＤ、ｐｃＤＮＡ、ｐＣａｌ、ｐＬ、ｐＥＴ、ｐＧＥＭＥＸ、ｐＧＥＸ、ｐＣＩ、ｐＣＭＶ、ｐＥＧＦＰ、ｐＥＧＦＴ、ｐＳＶ２、ｐＦＵＳＥ、ｐＶＩＴＲＯ，ｐＶＩＶＯ、ｐＭＡＬ、ｐＭＤ１８－Ｔ、ｐＭＯＮＯ、ｐＳＥＬＥＣＴ、ｐＵＮＯ、ｐＤＵＯ、Ｐｓｇ５Ｌ、ｐＢＡＢＥ、ｐＷＰＸＬ、ｐＢＩ、ｐ１５ＴＶ－Ｌ、ｐＰｒｏ１８、ｐＴＤ、ｐＲＳ４２０、ｐＬｅｘＡ、ｐＡＣＴ２．２などといったプラスミドならびにその他の実験室および市販のベクターを含む。適したベクターとして、プラスミドまたはウイルスベクター（例えば、複製欠損レトロウイルス、アデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルス）を挙げることができる。
抗体または抗原結合断片をコードするポリヌクレオチド配列を含むベクターを、クローニングまたは遺伝子発現のために宿主細胞に導入できる。本明細書においてベクター中のＤＮＡをクローニングまたは発現させるための適した宿主細胞として、上記の原核生物、酵母またはより高度の真核生物細胞がある。この目的のために適した原核生物として、グラム陰性またはグラム陽性生物などの真正細菌、例えば、エシェリキア属〔Escherichia〕、例えば、大腸菌〔E.coli〕、エンテロバクター属〔Enterobacter〕、エルウィニア属〔Erwinia〕、クレブシエラ属〔Klebsiella〕、プロテウス属〔Proteus〕、サルモネラ属〔Salmonella〕、例えば、サルモネラ・チフィリウム〔Salmonella typhimurium〕、セラチア属〔Serratia〕、例えば、セラチア・マルセッセンス〔Serratia marcescans〕および赤痢菌属〔Shigella〕ならびにＢ．スブチリス〔subtilis〕およびＢ．リケニフォルミス〔licheniformis〕などのバチルス属〔Bacilli〕、Ｐ．エルジノーサ〔aeruginosa〕などのシュードモナス属〔Pseudomonas〕およびストレプトマイセス属〔Streptomyces〕などの腸内細菌科〔Enterobacteriaceae〕が挙げられる。
原核生物に加えて、糸状菌または酵母などの真核細胞微生物は、抗ＣＤ２４抗体をコードするベクターの適したクローニングまたは発現宿主である。サッカロミセス・セレビシエ〔Saccharomyces cerevisiae〕または一般的なパン酵母は、下等真核細胞宿主微生物の中で最もよく使用されている。しかし、シゾサッカロミセス・ポンベ〔Schizosaccharomyces pombe〕；例えば、Ｋ．ラクチス〔lactis〕、Ｋ．フラギリス〔fragilis〕（ＡＴＣＣ１２，４２４）、Ｋ．ブルガリクス〔bulgaricus〕（ＡＴＣＣ１６，０４５）、Ｋ．ウィッカーアミー〔wickeramii〕（ＡＴＣＣ２４，１７８）、Ｋ．ワルチー〔waltii〕（ＡＴＣＣ５６，５００）、Ｋ．ドロソフィラルム〔drosophilarum〕（ＡＴＣＣ３６，９０６）、Ｋ．サーモトレランス〔thermotolerans〕およびＫ．マーキシアヌス〔marxianus〕などのクリベロミセス属〔Kluyveromyces〕宿主；ヤロウイア属〔yarrowia〕（ＥＰ４０２，２２６）；ピキア・パストリス〔Pichia pastoris〕（ＥＰ１８３，０７０）；カンジダ属〔Candida〕；トリコデルマ・リーゼイ〔Trichoderma reesia〕（ＥＰ２４４，２３４）；アカパンカビ〔Neurospora crassa〕；シュワニオミセス・オクシデンタリス〔Schwanniomyces occidentalis〕などのシュワニオミセス属〔Schwanniomyces〕；および例えば、アカパンカビ属〔Neurospora〕、アオカビ属〔Penicillium〕、トリポクラジウム属〔Tolypocladium〕ならびにＡ．ニデュランス〔A.nidulans〕およびクロコウジカビ〔A.niger〕などのアスペルギルス属〔Aspergillus〕宿主などの糸状菌などの、いくつかのその他の属、種および株が一般に入手可能であり、本明細書において有用である。
本明細書において提供されるグリコシル化抗体または抗原断片の発現に適した宿主細胞は、多細胞生物に由来する。脊椎動物細胞の例として、植物および昆虫細胞が挙げられる。多数のバキュロウイルス株および変異体ならびにヨトウガ〔Spodoptera frugiperda〕（イモムシ）、ネッタイシマカ〔Aedes aegypti〕（蚊）、ヒトスジシマカ〔Aedes albopictus〕（蚊）、キイロショウジョウバエ〔Drosophila melanogaster〕（ショウジョウバエ〔fruiffly〕）およびカイコ〔Bombyx mori〕などの宿主に由来する対応する許容昆虫宿主細胞が同定されている。トランスフェクションのための種々のウイルス株、例えば、オートグラファ・カリフォルニカ〔Autographa californica〕ＮＰＶのＬ－１変異体およびカイコ〔Bombyx mori〕ＮＰＶのＢｍ－５株が公的に入手可能であり、このようなウイルスは、本明細書において、本発明に従って、特に、ヨトウガ〔Spodoptera frugiperda〕細胞のトランスフェクションのためにウイルスとして使用され得る。ワタ、トウモロコシ、ジャガイモ、ダイズ、ペチュニア、トマトおよびタバコの植物細胞培養物も宿主として使用され得る。
しかし、関心は、脊椎動物細胞において最大であり、培養（組織培養）での脊椎動物細胞の増殖は、日常的な手順となった。有用な哺乳動物宿主細胞株の例として、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ－７、ＡＴＣＣ ＣＲＬ１６５１）；ヒト胚性腎臓株（２９３または懸濁培養における成長のためにサブクローニングされた２９３細胞、Ｇｒａｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７））；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ１０）；チャイニーズハムスター卵巣細胞／－ＤＨＦＲ（ＣＨＯ、Ｕｒｌａｕｂ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４２１６（１９８０））；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３－２５１（１９８０））；サル腎臓細胞（ＣＶ１ ＡＴＣＣ ＣＣＬ７０）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６、ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１５８７）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ２）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ３４）；バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ ３Ａ、ＡＴＣＣ ＣＲＬ１４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ ＣＣＬ７５）；ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２、ＨＢ ８０６５）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２、ＡＴＣＣ ＣＣＬ５１）；ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４－６８（１９８２））；ＭＲＣ５細胞；ＦＳ４細胞；およびヒト肝細胞腫株（Ｈｅｐ Ｇ２）がある。
宿主細胞は、抗ＣＤ２４抗体生成のために上記の発現またはクローニングベクターを用いて形質転換され、プロモーターを誘導し、形質転換体を選択するか、または所望の配列をコードする遺伝子を増幅するために必要に応じて修飾された従来の栄養培地で培養される。別の実施形態では、抗体は、当技術分野で公知の相同組換えによって生成され得る。
本明細書において提供される抗体または抗原結合断片を生成するために使用される宿主細胞は、種々の培地で培養され得る。ＨａｍのＦ１０（Ｓｉｇｍａ）、最小必須培地（ＭＥＭ）（Ｓｉｇｍａ）、ＲＰＭＩ－１６４０（Ｓｉｇｍａ）およびダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）（Ｓｉｇｍａ）などの市販の培地は、宿主細胞を培養するのに適している。さらに、Ｈａｍら、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．第５８巻：４４頁（１９７９年）、Ｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．５８：４４（１９７９）、Ｂａｒｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０２：２５５（１９８０）、米国特許第４，７６７，７０４号；同４，６５７，８６６号；同４，９２７，７６２号；同４，５６０，６５５号；または同５，１２２，４６９号；ＷＯ９０／０３４３０；ＷＯ８７／００１９５；または再発行米国特許第３０，９８５号に記載される培地のいずれも、宿主細胞のための培養培地として使用され得る。これらの培地のいずれも、必要に応じて、ホルモンおよび／またはその他の増殖因子（インスリン、トランスフェリンまたは上皮成長因子など）、塩（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウムおよびリン酸など）、バッファー（ＨＥＰＥＳなど）、ヌクレオチド（アデノシンおよびチミジンなど）、抗生物質（ＧＥＮＴＡＭＹＣＩＮ（商標）薬など）、微量元素（マイクロモル範囲の最終濃度で通常存在する無機化合物として定義される）およびグルコースまたは同等のエネルギー供給源を用いて補給され得る。任意のその他の必要な栄養補助剤もまた、当業者に公知であろう適当な濃度で含まれ得る。温度、ｐＨなどといった培養状態は、発現のために選択された宿主細胞とともにこれまでに使用されたものであり、当業者には明らかとなろう。
組換え技術を使用する場合には、抗体は、細胞膜周辺腔において細胞内で生成され得る、または培地中に直接分泌され得る。抗体が細胞内で生成される場合には、第１のステップとして、微粒子状細片、宿主細胞または溶解した断片のいずれかが例えば、遠心分離または限外濾過によって除去される。Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：１６３－１６７（１９９２）には、大腸菌〔E.coli〕の細胞膜周辺腔に分泌される抗体を単離するための手順が記載されている。手短には、細胞ペーストが、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡおよびフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）の存在下で約３０分かけて解凍される。細胞細片は、遠心分離によって除去され得る。抗体が培地中に分泌される場合には、このような発現系から得られた上清は、一般に、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外濾過ユニットを使用してまず濃縮される。タンパク質分解を阻害するために、ＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害剤が前記のステップのいずれにも含まれることがあり、外来性の混入物質の成長を防ぐために、抗生物質が含まれることがある。
細胞から調製される抗ＣＤ２４抗体およびその抗原結合断片は、例えば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、ＤＥＡＥ－セルロースイオン交換クロマトグラフィー、硫酸アンモニウム沈殿、塩析およびアフィニティークロマトグラフィーを使用して精製することができ、アフィニティークロマトグラフィーが好ましい精製技術である。
特定の実施形態では、固層で固定化されたプロテインＡは、抗体およびその抗原結合断片の免疫親和性精製のために使用される。親和性リガンドとしてのプロテインＡの適合性は、抗体中に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種およびアイソタイプに応じて変わる。プロテインＡは、ヒトγ１、γ２またはγ４重鎖をベースとする抗体を精製するために使用され得る（Ｌｉｎｄｍａｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．６２：１－１３（１９８３））。プロテインＧは、すべてのマウスアイソタイプに対して、およびヒトγ３に対して推奨される（Ｇｕｓｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．５：１５６７ １５７５（１９８６））。親和性リガンドが付着されるマトリックスは、最も多くはアガロースであるが、その他のマトリックスが利用可能である。コントロールドポアガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼンなどの機械的に安定なマトリックスは、アガロースを用いて達成され得るものよりも迅速な流速およびより短い処理時間を可能にする。抗体がＣＨ３ドメインを含む場合には、精製にはＢａｋｅｒｂｏｎｄ ＡＢＸ．ＴＭ．樹脂（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ、ニュージャージー州、フィリップスバーグ）が有用である。イオン交換カラムでの分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカでのクロマトグラフィー、ヘパリンＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（商標）でのクロマトグラフィー、陰イオンまたは陽イオン交換樹脂（ポリアスパラギン酸カラムなど）でのクロマトグラフィー、等電点電気泳動、ＳＤＳ－ＰＡＧＥおよび硫酸アンモニウム沈殿などのタンパク質精製のためのその他の技術も、回収されるべき抗体に応じて利用可能である。
任意の予備的精製ステップ（単数または複数）後に、対象の抗体および混入物質を含む混合物は、約２．５～４．５の間のｐＨの溶出バッファーを使用する、好ましくは、低塩濃度（例えば、約０～０．２５Ｍの塩）で実施される低ｐＨ疎水性相互作用クロマトグラフィーに付され得る。
ＣＡＲ
別の態様では、本開示はまた、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、共刺激シグナル伝達領域およびＴＣＲシグナル伝達ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）も提供し、抗原結合ドメインはＣＤ２４と特異的に結合し、本明細書において提供されている抗原結合断片を含む。特定の実施形態では、抗原結合断片はＦａｂまたはｓｃＦｖである。特定の実施形態では、本明細書において提供されるＣＡＲは二重特異性である。ＣＡＲは、ＣＤ２４以外の第２の抗原またはＣＤ２４上の第２のエピトープとさらに特異的に結合可能である。特定の実施形態では、第２の抗原は、上述のような腫瘍抗原、腫瘍関連抗原または免疫関連標的である。ＴＣＲシグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ、ＦｃｃＲＩγ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＭｙＤ８８、ＣＤ４０、ＣＤ２７８、ＴＬＲまたはそれらの組合せの細胞内シグナル領域配列からなる群から選択され得る。膜貫通領域は、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８またはＣＤ２８の膜貫通領域を含み得る。特定の実施形態では、第２の抗原は、ＰＤ－Ｌ１、ＳＩＲＰα、ＣＤ４７またはＢ２Ｍなどの免疫抑制分子である。
別の態様では、本開示はまた、上述のＣＡＲをコードする核酸配列およびそのような核酸配列を含む細胞もしくはベクターまたは本明細書において提供されるＣＡＲを発現するように遺伝子改変された細胞も提供する。細胞は、免疫細胞であってもよく、任意選択で、免疫細胞は、Ｔリンパ球、ＮＫ細胞、単球、マクロファージまたはＮＫＴリンパ球である。
医薬組成物
本開示は、抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片および１種または複数の医薬上許容される担体を含む医薬組成物をさらに提供する。
本明細書において開示される医薬組成物において使用するための医薬上許容される担体として、例えば、医薬上許容される液体、ゲルまたは固体担体、水性ビヒクル、非水性ビヒクル、抗菌剤、等張化剤、バッファー、抗酸化剤、麻酔剤、懸濁剤／分配剤、封鎖剤またはキレート化剤、希釈剤、アジュバント、賦形剤または非毒性補助物質、当技術分野で公知のその他の成分またはそれらの種々の組合せを挙げることができる。
適した成分として、例えば、抗酸化剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、バッファー、保存料、滑沢剤、香味料、増粘剤、着色剤、乳化剤または糖およびシクロデキストリンなどの安定化剤を挙げることができる。適した抗酸化剤として、例えば、メチオニン、アスコルビン酸、ＥＤＴＡ、チオ硫酸ナトリウム、白金、カタラーゼ、クエン酸、システイン、チオグリセロール、チオグリコール酸、チオソルビトール、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエンおよび／または没食子酸プロピルを挙げることができる。本明細書において開示されるように、本明細書において提供されるような抗体または抗原結合断片およびコンジュゲートを含む組成物中に、メチオニンなどの１種または複数の抗酸化剤を含めることによって、抗体または抗原結合断片の酸化が減少される。この酸化の低減は、結合親和性の喪失を防ぐまたは低減し、それによって、抗体安定性を改善し、有効期間を最大化する。したがって、特定の実施形態では、本明細書において開示されるような１種または複数の抗体または抗原結合断片およびメチオニンなどの１種または複数の抗酸化剤を含む組成物が提供される。抗体または抗原結合断片を、メチオニンなどの１種または複数の抗酸化剤と混合することによって、酸化を防ぐための、有効期間を延長するための、および／または本明細書において提供されるような抗体もしくは抗原結合断片の有効性を改善するための方法がさらに提供される。
さらに例示するために、医薬上許容される担体として、例えば、塩化ナトリウム注射、リンゲル注射、等張性デキストロース注射、滅菌水注射またはデキストロースおよび乳酸リンゲル注射などの水性ビヒクル、植物起源の硬化油、ココナッツオイル、トウモロコシオイル、ゴマ油またはピーナッツオイルなどの非水性ビヒクル、静菌性または静真菌性濃度の抗菌剤、塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの等張性剤、リン酸またはクエン酸バッファーなどのバッファー、重硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤、塩酸プロカインなどの局所麻酔、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはポリビニルピロリドンなどの懸濁剤および分散剤、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ－８０）などの乳化剤、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）またはＥＧＴＡ（エチレングリコール四酢酸）などの封鎖剤またはキレート化剤、エチルアルコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸または乳酸を挙げることができる。担体として利用される抗菌剤を、複数回用量容器中の医薬組成物に添加してもよく、これとして、フェノールまたはクレゾール、水銀剤、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチルおよびプロピルｐ－ヒドロキシ安息香酸エステル、チメロサール、塩化ベンズアルコニウムおよび塩化ベンゼトニウムが挙げられる。適した賦形剤として、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、グリセロールまたはエタノールを挙げることができる。適した非毒性補助物質として、例えば、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定化剤、溶解促進剤、または酢酸ナトリウム、モノラウリン酸ソルビタン、オレイン酸トリエタノールアミンもしくはシクロデキストリンなどの薬剤を挙げることができる。
医薬組成物は、液体溶液、懸濁液、エマルジョン、丸剤、カプセル剤、錠剤、持続放出製剤または散剤であり得る。経口製剤はとして、医薬等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどといった標準担体を挙げることができる。
特定の実施形態では、医薬組成物は、注射用組成物に製剤化される。注射用医薬組成物は、例えば、液体溶液、懸濁液、エマルジョンまたは液体溶液、懸濁液またはエマルジョンを作製するのに適した固体形態などの任意の従来の形態で調製され得る。注射のための調製物として、注射用に準備された滅菌および／または非発熱性溶液、皮下錠剤を含む、使用直前に溶媒と組み合わされるべく準備された凍結乾燥散剤などの滅菌乾燥可溶性製剤、注射用に準備された滅菌懸濁液、使用直前にビヒクルと組み合わされるべく準備された滅菌乾燥不溶性製剤、ならびに滅菌および／または非発熱性エマルジョンを挙げることができる。溶液は、水性であっても、非水性であってもよい。
特定の実施形態では、単位用量非経口調製物は、アンプル、バイアルまたはニードルを備えたシリンジ中にパッケージングされる。非経口投与用のすべての調製物は、当技術分野で公知であり、実施されるように滅菌および非発熱性でなくてはならない。
特定の実施形態では、滅菌、凍結乾燥散剤は、適した溶媒中に本明細書において開示されるような抗体または抗原結合断片を溶解することによって調製される。溶媒は、散剤または散剤から調製された再構成された溶液の安定性またはその他の薬理学的成分を改善する賦形剤を含有し得る。使用され得る賦形剤として、それだけには限らないが、水、デキストロース、ソルビトール〔sorbital〕、フルクトース、コーンシロップ、キシリトール、グリセリン、グルコース、スクロースまたはその他の適した薬剤が挙げられる。溶媒は、クエン酸、リン酸ナトリウムまたはリン酸カリウムなどのバッファーまたは、一実施形態ではおよそ中性のｐＨの、当業者に公知のその他のこのようなバッファーを含有し得る。当業者に公知の溶液のその後の滅菌濾過と、それに続く標準状態下での凍結乾燥によって、望ましい製剤が提供される。一実施形態では、得られた溶液は、凍結乾燥のためにバイアル中に配分される。各バイアルは、抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片またはその組成物の単一投与量または複数回投与量を含有し得る。バイアルに用量または用量のセットに必要なものを上回る少量（例えば、約１０％）を過剰充填することは、正確なサンプル引き出しおよび正確な投薬を促進するために許容される。凍結乾燥散剤は、約４℃～室温などの適当な状態下で保存され得る。
注射水を用いる凍結乾燥散剤の再構成は、非経口投与において使用するための製剤を提供する。一実施形態では、再構成のために滅菌および／または非発熱性水またはその他の液体の適した担体が、凍結乾燥散剤に付加される。正確な量は、与えられている選択された療法に応じて変わり、経験的に決定され得る。
使用方法
本開示はまた、本明細書において提供されるような抗体または抗原結合断片の治療上有効な量を、それを必要とする対象に投与し、それによってＣＤ２４関連疾患または状態を処置または予防することを含む治療方法も提供する。いくつかの実施形態では、ＣＤ２４関連疾患または状態は、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患、適応免疫疾患または感染性疾患である。
癌の例として、それだけには限らないが、非小細胞肺癌（扁平上皮／非扁平上皮）、小細胞肺癌、腎細胞癌、結腸直腸癌、結腸癌、卵巣癌、乳癌（基底乳癌腫、乳管癌腫および小葉乳癌腫を含む）、膵臓癌、胃癌腫、膀胱癌、食道癌、中皮腫、黒色腫、頭頸部癌、甲状腺癌、肉腫、前立腺癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、胸腺癌腫、黒色腫、骨髄腫、菌状息肉腫、メルケル細胞癌、肝細胞癌腫（ＨＣＣ）、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫およびその他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、リンパ系腫瘍、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌腫、甲状腺髄様癌腫、乳頭様甲状腺癌腫、褐色細胞腫脂腺癌、乳頭癌、乳頭状腺癌、髄様癌、気管支原性肺癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、セミノーマ、古典的ホジキンリンパ腫（ＣＨＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫、Ｔ細胞／組織球に富むＢ細胞リンパ腫、急性リンパ性白血病、急性骨髄球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄球性（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、真性赤血球増加症、肥満細胞由来腫瘍、ＥＢＶ陽性および陰性ＰＴＬＤおよびびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、形質芽球性リンパ腫、節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、上咽頭癌腫、ＨＨＶ８関連原発性滲出リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、ヘアリー細胞白血病および脊髄形成異常症、原発性ＣＮＳリンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫および網膜芽細胞腫が挙げられる。
特定の実施形態では、癌は、肺癌、気管支癌、骨癌、肝臓および胆管癌、膵臓癌、乳癌、肝臓癌、卵巣癌、精巣癌、腎臓癌、膀胱癌、頭頸部癌、脊椎癌、脳癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮内膜癌、結腸癌、結腸直腸癌、直腸癌、肛門癌、食道癌、消化器癌、皮膚癌、前立腺癌、下垂体癌、胃癌、膣癌、甲状腺癌、神経膠芽腫、星状細胞腫、黒色腫、骨髄異形成症候群、肉腫、奇形腫、腺癌、白血病、骨髄腫ならびにリンパ腫である。特定の実施形態では、癌は化学療法抵抗性である。
特定の実施形態では、疾患または状態は、Ｂ細胞リンパ腫から選択される血液癌である。Ｂ細胞リンパ腫の例として、限定されるものではないが、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＭＺＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、リヒター症候群、バーキットリンパ腫または濾胞性リンパ腫が挙げられる。
自己免疫疾患として、それだけには限らないが、後天性免疫不全症候群（自己免疫成分を有するウイルス疾患であるＡＩＤＳ）、円形脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質症候群、自己免疫性アジソン病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性リンパ増殖性症候群（ＡＬＰＳ）、自己免疫性血小板減少性紫斑病（ＡＴＰ）、ベーチェット病、心筋症、セリアックスプルーヘルペス状皮膚炎；慢性疲労免疫機能障害症候群（ＣＦＩＤＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＰＤ）、瘢痕性類天疱瘡、寒冷凝集素病、クレスト症候群、クローン病、デゴス病、皮膚筋炎－若年性、円板状ループス、本態性混合型クリオグロブリン血症、線維筋痛症－線維筋炎、グレーブス病、ギランバレー症候群、橋本甲状腺炎、特発性肺線維症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ腎症、インスリン依存性糖尿病、若年性慢性関節炎（スチル病）、若年性関節リウマチ、メニエール病、混合型結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力症、悪性貧血、結節性多発性動脈炎、多発性軟骨炎、多腺性症候群、リウマチ性多発性筋痛、多発性筋炎および皮膚筋炎、原発性無γグロブリン血症、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、乾癬の関節炎、レイノー現象、ライター症候群、リウマチ熱、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症（進行性全身性硬化症（ＰＳＳ）、全身性硬化症（ＳＳ）としても知られる）、シェーグレン症候群、スティフ・マン症候群、全身性エリテマトーデス、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨大細胞動脈炎、潰瘍性大腸炎、ブドウ膜炎、白斑およびウェジナー肉芽腫症が挙げられる。
炎症性障害として、例えば、慢性および急性炎症性障害が挙げられる。炎症性障害の例として、アルツハイマー病、喘息、アトピー性アレルギー、アレルギー、アテローム性動脈硬化症、気管支喘息、湿疹、糸球体腎炎、移植片対宿主病、溶血性貧血、変形性関節症、敗血症、卒中、組織および臓器の移植、脈管炎、糖尿病性網膜症および人工呼吸器誘発肺損傷が挙げられる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２４関連状態は、炎症性疾患、例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、腸管粘膜炎症、大腸炎と関連する消耗性疾患、多発性硬化症、ウイルス感染、関節リウマチ、変形性関節症、クローン病および炎症性腸疾患、乾癬、全身性強皮症、自己免疫性糖尿病などである。
感染性疾患として、それだけには限らないが、真菌感染、寄生虫／原虫感染または慢性ウイルス感染、例えば、マラリア、コクシジオイオドマイコシス・イミティス〔coccidioiodmycosis immitis〕、ヒストプラスマ症、爪真菌症、アスペルギルス症、ブラストミセス症、カンジジアシス・アルビカンス〔candidiasis albicans〕、パラコクシジオイデス症、微胞子虫症、アカントアメーバ角膜炎、アメーバ症、回虫症、バベシア症、バランチジウム症、バイリサスカリアシス〔Baylisascariasis〕、シャーガス病、肝吸虫症、コクリオミイヤ属〔Cochliomyia〕、クリプトスポリジウム症、裂頭条虫症、メジナ虫症、エキノコッカス症、象皮症、腸蟯虫症、肝蛭症、肥大吸虫症、フィラリア症、ジアルジア症、顎口虫症、膜様条虫症、イソスポーラ症、片山熱、リーシュマニア症、ライム病、横川吸虫症、ハエ幼虫症、オンコセルカ症、シラミ寄生症、疥癬、住血吸虫症、睡眠病、糞線中症、条虫症、トキソカラ症、トキソプラズマ症、旋毛虫症、鞭虫症、トリパノソーマ症、蠕虫感染、Ｂ型肝炎（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎（ＨＣＶ）、ヘルペスウイルス、エプスタイン－バーウイルス、ＨＩＶ、サイトメガロウイルス、Ｉ型単純ヘルペスウイルス、ＩＩ型単純ヘルペスウイルス、ヒトパピローマウイルス、アデノウイルス、ヒト免疫不全ウイルスＩ、ヒト免疫不全ウイルスＩＩ、カポジウエスト肉腫関連ヘルペスウイルス伝染病、シンリングウイルス（トルクテノウイルス〔Torquetenovirus〕）、ヒトＴリンパ増殖性ウイルスＩ、ヒトＴリンパ増殖性ウイルスＩＩ、水痘帯状疱疹、ＪＣウイルスまたはＢＫウイルスの感染が挙げられる。
特定の実施形態では、対象はヒトである。
別の態様では、ＣＤ２４活性の調節から恩恵を受けるであろう対象における疾患または状態を処置する方法であって、それを必要とする対象に、本明細書において提供される抗体または抗原結合断片の治療上有効な量を投与することを含む方法が提供される。用語「疾患または状態」は、本明細書において、用語「ＣＤ２４関連疾患または状態」と互換的に使用され得る。
本明細書において提供されるような抗体または抗原結合断片の治療上有効な量は、当技術分野で公知の種々の因子、例えば、対象の体重、年齢、過去の病歴、現在の薬物適用、健康の状態および交差反応の可能性、アレルギー、感受性および有害な副作用、ならびに投与経路および疾患発達の程度などに応じて変わる。投与量は、これらおよびその他の状況または必要条件によって示されるように、当業者（例えば、医師または獣医師）によって比例的に低減または増大され得る。
特定の実施形態では、本明細書において提供されるような抗体または抗原結合断片は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ（例えば、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約３５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約４５ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約５５ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約６５ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約８５ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、約９５ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇ）の治療上有効な投与量で投与され得る。これらの実施形態のうち特定のものでは、抗体または抗原結合断片は、約５０ｍｇ／ｋｇ以下の投与量で投与され、これらの実施形態のうち特定のものでは、投与量は、１０ｍｇ／ｋｇ以下、５ｍｇ／ｋｇ以下、３ｍｇ／ｋｇ以下、１ｍｇ／ｋｇ以下、０．５ｍｇ／ｋｇ以下または０．１ｍｇ／ｋｇ以下である。特定の実施形態では、投薬量は、治療過程にわたって変化し得る。例えば、特定の実施形態では、初期投薬量は、その後の投薬量よりも高い場合がある。特定の実施形態では、投薬量は、対象の反応に応じて処置過程にわたって変わり得る。
投与計画は、最適な望ましい応答（例えば、治療的応答）を提供するように調整され得る。例えば、単回用量が投与される場合も、または数回の分割用量が経時的に投与される場合もある。
本明細書において開示される抗体および抗原結合断片は、例えば、非経口（例えば、皮下、腹腔内、静脈内注入を含む静脈内、筋肉内または皮内注射）または非経口ではない（例えば、経口、鼻腔内、眼球内、舌下、直腸内または局所）経路などの当技術分野で公知の任意の経路によって投与され得る。
いくつかの実施形態では、本明細書において開示される抗体または抗原結合断片は、単独で、または１種もしくは複数のさらなる治療手段または薬剤と組み合わせて投与され得る。いくつかの実施形態では、本明細書において開示される抗体または抗原結合断片は、単独で、または第２の治療薬と組み合わせて投与され得る。例えば、本明細書において開示される抗体または抗原結合断片は、第２の治療剤、例えば、化学療法剤または抗癌剤と組み合わせて投与され得る。特定の実施形態では、本明細書において開示される抗体または抗原結合断片は、１つまたは複数の免疫抑制分子、例えば、ＣＤ４７、ＳＩＲＰα、ＰＤ－Ｌ１または主要組織適合複合体クラスＩ（Ｂ２Ｍ）のベータ－２ミクログロブリンサブユニットのアンタゴニストと組み合わせて投与され得る。用語「アンタゴニスト」とは、本明細書において、免疫抑制シグナルの誘発を阻止するために、ＣＤ４７、ＳＩＲＰα、ＰＤ－Ｌ１またはＢ２Ｍのそれらのそれぞれの結合パートナーへの結合を遮断または阻害する任意の小分子、低分子もしくはマイクロＲＮＡまたは抗体もしくはその抗原結合断片を指すことができる。特定の実施形態では、本明細書において開示される抗体または抗原結合断片は、ＳＩＲＰα－Ｆｃ融合タンパク質またはその変異体、抗ＣＤ４７抗体またはその抗原結合断片などのＣＤ４７アンタゴニストと組み合わせて投与される。特定の実施形態では、本明細書において開示される抗体または抗原結合断片は、可溶性ＣＤ４７またはその変異体、抗ＳＩＲＰα抗体またはその抗原結合断片などのＳＩＲＰαアンタゴニストと組み合わせて投与される。
用語「抗ＣＤ４７抗体」とは、限定されるものではないが、ＵＳ９３８２３２０Ｂ２に開示されているＨｕ５Ｆ９を含む、任意の既知の抗ＣＤ４７抗体またはその抗原結合断片を指すことができる。Ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４も使用され、これは抗ヒトＣＤ４７抗体であり、その相補性決定領域（ＣＤＲ）をヒトＩｇＧ４フォーマットにグラフトすることによってヒト化され、ヒト化５Ｆ９抗体（Ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４）が得られる（Ｌｉｕ Ｊ．ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１５，１０：ｅ０１３７３４５）。
これらの実施形態の特定のものでは、１種または複数のさらなる治療薬と組み合わせて投与される本明細書において開示される抗体または抗原結合断片は、１種または複数のさらなる治療薬と同時に投与されてもよく、これらの実施形態の特定のものでは、抗体または抗原結合断片およびさらなる治療薬（複数可）は、同一医薬組成物の一部として投与されてもよい。しかし、別の治療薬と「組み合わせて」投与される抗体または抗原結合断片は、薬剤と同時に、または薬剤と同一組成物中で投与されなくてもよい。別の薬剤に先立って、またはその後に投与される抗体または抗原結合断片は、抗体または抗原結合断片および第２の薬剤が、異なる経路によって投与される場合でさえ、その語句が本明細書において使用される場合、その薬剤と「組み合わせて」投与されると考えられる。可能であれば、本明細書において開示される抗体または抗原結合断片と組み合わせて投与されるさらなる治療薬は、さらなる治療薬の添付文書に列挙されるスケジュールに従って、またはＰｈｙｓｉｃｉａｎｓ’ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ２００３年（Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，５７ｔｈ Ｅｄ；Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ Ｃｏｍｐａｎｙ；ＩＳＢＮ：１５６３６３４４５７；５７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２００２））もしくは当技術分野で周知のプロトコールに従って投与される。
いくつかの実施形態では、本開示は、サンプル中のＣＤ２４の存在または量を検出する方法であって、サンプルを、抗体またはその抗原結合断片と接触させることと、サンプル中のＣＤ２４の存在または量を決定することとを含む方法をさらに提供する。
いくつかの実施形態では、本開示は、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態を診断する方法であって、ａ）対象からサンプルを得ることと、ｂ）対象から得られたサンプルを、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片と接触させることと、ｃ）サンプル中のＣＤ２４の存在または量を決定することと、ｄ）ＣＤ２４の存在を、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態と相関させることとを含む方法をさらに提供する。
いくつかの実施形態では、本開示は、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態を処置するための医薬の製造における、ＣＤ２４関連疾患または状態を診断するための診断用試薬の製造における、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片の使用も提供する。
別の態様では、本開示はまた、ＣＤ２４を発現する細胞においてＣＤ２４活性を調節する方法であって、ＣＤ２４を発現する細胞を、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片に対して曝露することを含む方法も提供する。
別の態様では、本開示はまた、サンプル中のＣＤ２４の存在または量を検出する方法であって、サンプルを、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片と接触させることと、サンプル中のＣＤ２４の存在または量を決定することとを含む方法も提供する。
別の態様では、本開示はまた、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態を診断する方法であって、ａ）対象からサンプルを得ることと、ｂ）対象から得られたサンプルを、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片と接触させることと、ｃ）サンプル中のＣＤ２４の存在または量を決定することと、ｄ）ＣＤ２４の存在または量を、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態の存在または状況と相関させることとを含む方法も提供する。
別の態様では、本開示はまた、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態を処置するための医薬の製造における、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片の使用も提供する。医薬は第２の治療剤、例えば、ＣＤ４７アンタゴニストをさらに含み、任意選択で、ＣＤ４７アンタゴニストは、ＳＩＲＰα－Ｆｃ融合タンパク質もしくはその変異体、または抗ＣＤ４７抗体もしくはその抗原結合断片である。
別の態様では、本開示はまた、ＣＤ２４関連疾患または状態を診断するための診断用試薬の製造における、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片の使用も提供する。
別の態様では、本開示はまた、ＣＤ２４、任意選択で、組換えＣＤ２４、細胞表面に発現されたＣＤ２４またはＣＤ２４を発現する細胞の検出において有用な、本明細書において提供される抗体またはその抗原結合断片を含むキットも提供する。用語「組換え」とは、本明細書において、生体分子をその天然の状態以外のものにする１つまたは複数の分子生物学的技術を使用した、ポリヌクレオチドまたはポリペプチド分子などの１つまたは複数の生体分子の人為的操作を指す。
別の態様では、本開示はまた、哺乳動物においてＣＤ２４を発現する細胞または組織に対するＴ細胞媒介性免疫応答を刺激するための方法であって、哺乳動物に、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、共刺激シグナル伝達領域およびＴＣＲシグナル伝達ドメインを含むＣＡＲを発現するように遺伝子改変された細胞の有効量を投与することを含み、抗原結合ドメインがＣＤ２４と特異的に結合し、本明細書において提供される抗原結合断片を含む方法も提供する。特定の実施形態では、抗原結合断片はＦａｂまたはｓｃＦｖである。特定の実施形態では、本明細書において提供されるＣＡＲは二重特異性である。ＣＡＲは、ＣＤ２４以外の第２の抗原またはＣＤ２４上の第２のエピトープとさらに特異的に結合可能である。特定の実施形態では、第２の抗原は上述の腫瘍抗原である。ＴＣＲシグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ、ＦｃｃＲＩγ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＭｙＤ８８、ＣＤ４０、ＣＤ２７８、ＴＬＲまたはそれらの組合せの細胞内シグナル領域配列からなる群から選択され得る。膜貫通領域は、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８またはＣＤ２８の膜貫通領域を含み得る。特定の実施形態では、第２の抗原は、免疫抑制分子、例えば、ＰＤ－Ｌ１、ＳＩＲＰα、ＣＤ４７またはＢ２Ｍである。
別の態様では、本開示はまた、ＣＤ２４関連疾患または状態を有する哺乳動物を処置するための方法であって、哺乳動物に、本明細書において提供されるＣＡＲ（例えば、自己Ｔ細胞）を発現するように遺伝子改変された細胞の有効量を投与し、それによって哺乳動物を処置することを含む方法も提供する。特定の実施形態において、ＣＤ２４関連疾患または状態は癌である。特定の実施形態において、哺乳動物はヒト対象である。
以下の実施例は、特許請求された本発明をより良好に例示するために提供され、本発明の範囲を制限すると解釈されてはならない。以下に記載されるすべての特定の組成物、材料および方法は、全体で、または一部で本発明の範囲内に入る。これらの特定の組成物、材料および方法は、本発明を制限するものではなく、単に、本発明の範囲内に入る特定の実施形態を例示するものである。当業者は、発明の能力を行使することなく、本発明の範囲から逸脱することなく、同等の組成物、材料および方法を開発し得る。本発明の範囲内にとどまりながら本明細書に記載される手順において多数の変法を行うことができるということが理解されよう。このような変法が本発明の範囲内に含まれることは本発明者らの意図である。
［実施例１］
ハイブリドーマ開発
１．方法
１．１ 免疫化および血清力価測定
１．１．１ 免疫原および免疫化戦略
細胞免疫化：ヒトＣＤ２４を過剰発現する細胞（ＨＥＫ２９３Ｆ－ｈＣＤ２４）
遺伝子免疫化：全長ヒトＣＤ２４発現構築物
タンパク質免疫化：組換えヒトＣＤ２４タンパク質
Ｂａｌｂ／ｃおよびＳＪＬマウスを表２に示すように免疫化した。一次免疫に続いて、動物がハイブリドーマ開発に適した十分な抗血清力価を発生するまで数回のブーストを行った。血清レベルでの性能および免疫応答を比較するために、すべての免疫化戦略を並行して実行した。
１．１．２ 免疫化スケジュール
１．１．３ 試験ブリード抗血清解析
スクリーニング：試験ブリードを実施し、ヒトＣＤ２４を安定して過剰発現する２９３Ｆ細胞株（２９３Ｆ－ｈＣＤ２４）およびＭＣＦ７細胞に対してＦＡＣＳを使用して試験することによって評価した。
１．２ ハイブリドーマの作製およびスクリーニング
１．２．１ 細胞融合およびスクリーニング
融合：試験ブリードＦＡＣＳによって決定されるように、免疫化に最もよく応答したマウスに対して脾細胞融合を実施した。脾臓およびリンパ節からのリンパ球を、最適化した電気融合プロトコールを使用してＳｐ２／０－Ａｇ１４細胞株に融合した。計画の成功を確実にするために、複数の融合を実施した。
スクリーニングおよび拡大：融合体を９６ウェルプレートのスタックにプレーティングした（ウェル当たり１０４～１０５個）。プレートを成長についてモニタリングし、毎週給餌した。細胞成長のあるウェルを、Ａｃｕｍｅｎおよび／または他の実行可能なアッセイを用いて１０～１４日の一次スクリーニングアッセイによってスクリーニングした。各標的化抗原について複数の融合を実施し、Ａｃｕｍｅｎによってスクリーニングした。一次スクリーニングから２９３Ｆ－ｈＣＤ２４との陽性結合を示した陽性親クローンを、二次スクリーニングのために２４ウェルプレートに拡大させた。
追加の抗体スクリーニング：一次スクリーニングに続いて、２４ウェルプレートに拡大させた陽性親クローンを、以下のハイブリドーマスクリーニングファンネルに記載されるアッセイによって再度スクリーニングした。
サブクローニングに進むために、目的のハイブリドーマを選択した。
１．２．２ ハイブリドーマのサブクローニング、スクリーニングおよび凍結保存
サブクローニング：次いで、上記のスクリーニングファンネルからの所望の反応性およびアイソタイプを有する親ハイブリドーマを、モノクローンが得られるまで複数回の限界希釈または単一細胞選別によってサブクローニングした。
スクリーニングおよび拡大：サブクローニングプレートを、Ａｃｕｍｅｎアッセイによってスクリーニングし、良好な結合能力を有するサブクローンを、確認試験のために２４ウェルに拡大させた。これらのサブクローンの特異性および交差反応性をＦＡＣ分析によって確認した。簡潔に述べると、親２９３Ｆ細胞、２９３Ｆ－ｈＣＤ２４、乳癌細胞（ＭＣＦ７、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８）、膀胱癌細胞（５６３７）、慢性骨髄性白血病細胞（Ｎａｌｍ１）、ＣＫＯＫ１－ｈＣＤ２４細胞、結腸直腸癌細胞（ＨＴ２９）、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）および肺癌細胞（Ｈ１９７５およびＡ５４９）を、それぞれ各サブクローンによって産生された抗体とインキュベートした。蛍光色素がコンジュゲートした二次抗体を使用して、一次抗体の細胞との結合を検出した。蛍光強度中央値（ＭＦＩ）を、ＦＡＣ分析によって測定した。
凍結保存－所望のサブクローン細胞株を配列決定し、凍結保存のために培養フラスコ内でさらに拡大させた。０．５～１．０×１０７個の細胞／バイアルで細胞株当たり４～６個のバイアルを最初に凍結保存した。必要に応じて、選択された最も価値のある細胞株に対してマスターセルバンクおよびワーキングセルバンクを確立することができた。
２．結果
本発明者らは、ヒトＣＤ２４タンパク質（２９３Ｆ－ｈＣＤ２４）を安定して過剰発現する２９３Ｆ細胞との陽性の結合を示す、特有の配列を有する多数の抗体を発見した。２９３Ｆ細胞、２９３Ｆ－ｈＣＤ２４、乳癌細胞（ＭＣＦ７、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８）、膀胱癌細胞（５６３７）、慢性骨髄性白血病細胞（Ｎａｌｍ１）、ＣＫＯＫ１－ｈＣＤ２４細胞、結腸直腸癌細胞（ＨＴ２９）、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）および肺癌細胞（Ｈ１９７５およびＡ５４９）を染色する抗体のＦＡＣＳ ＭＦＩを以下の表６にまとめた。２つのクローン１１０Ｄ４Ｇ４および８１Ａ１Ｆ８もまた、ＤＬＢＣＬ細胞ＯＣＩ－ＬＹ１、ＯＣＩ－ＬＹ７およびＳＵ－ＤＨＬ－１０細胞も染色するために適用した（表７）。
ＳＮ３と比較して、本発明者らの抗体のいくつかは、試験した細胞上ではるかに高いＭＦＩを示した。本発明者らの抗体のほとんどは、ＣＤ２４低発現ＭＣＦ７細胞上でより強いシグナルを示した。
［実施例２］
抗体の特性評価：親和性
１．方法
１．１ ヒトＣＤ２４に対する細胞ベースの結合親和性
表１から抗体のいくつかの配列を選択して、ヒトＩｇＧ４キメラ抗体を作製および産生した。これらの抗体およびベンチマーク抗体であるＳＮ３（例えば、Ｔ Ｆｕｋｕｋａｗａ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ．１９８６ Ｏｃｔ；１４（９）：８５０－５を参照のこと）と、２９３Ｆ－ｈＣＤ２４細胞およびヒト乳癌細胞（ＭＣＦ７、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８）、膀胱癌細胞（５６３７）、慢性骨髄性白血病細胞（Ｎａｌｍ１）、ＣＫＯＫ１－ｈＣＤ２４細胞、結腸直腸癌細胞（ＨＴ２９）、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）および肺癌細胞（Ｈ１９７５およびＡ５４９）との結合親和性を、ＦＡＣ解析によって決定した。ＦＡＣ解析のプロトコールは以下のように説明される。
ａ．ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｅｎｚｙｍｅ（１×）を使用して細胞を消化した。回収した細胞を４００ｇで５分間遠心分離し、上清を捨てた。
ｂ．４００ｇで５分間遠心分離し、上清を捨てることにより、冷ＦＡＣＳバッファーで細胞を２回洗浄した。
ｃ．細胞を再懸濁し、２＊１０５個の細胞／ウェルを５０ｕｌのＦＡＣＳバッファー中のアッセイプレートに播種し、次いで５０μｌの一次抗体を添加した（一次抗体最終濃度：５０．００、１６．６７、５．５６、１．８５、０．６２、０．２１、０．０７、０．０２、０．０１、０．００μｇ／ｍｌ）。４０℃で１時間インキュベートする。
ｄ．ステップｂの条件を使用することによって細胞を２回洗浄した。細胞を１００μｌ／ウェルで希釈した二次抗体で再懸濁し、暗所において４℃で１時間インキュベートした。
ｅ．ステップｂの条件を使用することによって細胞を２回洗浄した。細胞を１００μｌ／ウェルの冷ＦＡＣＳバッファーで再懸濁した。ＦＡＣＳ解析のために細胞を暗所に維持した。
２．結果
２９３Ｆ－ｈＣＤ２４細胞およびヒト乳癌細胞株、乳癌細胞（ＭＣＦ７およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８）、膀胱癌細胞（５６３７）、慢性骨髄性白血病細胞（Ｎａｌｍ１）、急性リンパ芽球性白血病細胞（Ｎａｌｍ６）、ＣＫＯＫ１－ｈＣＤ２４細胞、結腸直腸癌細胞（ＨＴ２９）、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）、肺癌細胞（ＮＣＩ－Ｈ１９７５およびＡ５４９）、Ｂ細胞リンパ腫細胞（ＳＵ－ＤＨＬ６およびＤｏＨＨ２）、ヒトＢ細胞および肝細胞癌細胞（Ｈｕｈ７）に対する本明細書において提供される抗体の結合親和性を試験した。いくつかは、ベンチマーク抗体ＳＮ３と同等であった。しかしながら、本発明者らのｍＡｂ－１１０Ｄ４Ｇ４およびｍＡｂ－８１Ａ７Ｆ８は、ＳＮ３のものよりもはるかに良好な挙動を示した（表８Ａ～８Ｂ）。
ＳＮ３と比較して、ＣＤ２４低発現細胞ＭＣＦ７およびＡ５４９上のいくつかの抗体（１１０Ｄ４Ｇ４、８１Ａ１Ｆ８）の最大ＭＦＩ（５０ｕｇ／ｍｌの一次抗体濃度）は、ＳＮ３のものよりも高かった。（表８および表９）。
本発明者らの抗体のいくつか（１１０Ｄ４Ｇ４－ｈＩｇＧ４、８１Ａ１Ｆ８－ｈＩｇＧ４）は、ＳＮ３と比較して、ＣＤ２４低発現細胞ＭＣＦ７およびＡ５４９に対してより感受性が高く（図１）、より高い最大ＭＦＩおよびより高いまたは同等の結合親和性を有した（表８Ａ～８Ｂ、図１）。
表１０は、２９３Ｆ細胞、２９３Ｆ－ｈＣＤ２４、乳癌細胞（ＭＣＦ７、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８）、膀胱癌細胞（５６３７）、慢性骨髄性白血病細胞（Ｎａｌｍ１）、ＣＫＯＫ１細胞、ＣＫＯＫ１－ｈＣＤ２４細胞、結腸直腸癌細胞（ＨＴ２９）、卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）および肺癌細胞（Ｈ１９７５およびＡ５４９）に対する抗体の結合親和性を示す。接頭辞「ｃｈ－」はキメラを意味し、ｈＩｇＧ１はヒトＩｇＧ１アイソタイプの重鎖定常領域を表し、ｈＩｇＧ４はヒトＩｇＧ４アイソタイプの重鎖定常領域を表す。
図１Ｊ～１Ｒは、急性リンパ芽球性白血病細胞（Ｎａｌｍ６）、Ｂ細胞リンパ腫細胞（ＳＵ－ＤＨＬ６およびＤｏＨＨ２）、ヒトＢ細胞、結腸直腸癌細胞（ＨＴ２９）、肝細胞癌細胞（Ｈｕｈ７）、乳癌細胞（ＭＣＦ７）および肺癌細胞（ＮＣＩ－Ｈ１９７５およびＡ５４９）に対する抗体の結合親和性を示す。
［実施例３］
抗体の特性評価：食作用
１．方法
Ｅａｓｙｓｅｐ（商標）ヒトＣＤ１４陽性選択キットＩＩ（ＳｔｅｍＣｅｌｌ、１７８５８）を使用して、単球をＰＢＭＣから分離した。単球由来マクロファージ（ＭＤＭ）を、１０％ＦＢＳおよび１００ｎｇ／ｍＬのｒｈＭ－ＣＳＦを補充したＲＰＭＩ １６４０培地で７日間単球を培養することによって誘導した。培地の半分を交換し、３～４日ごとにサイトカインを供給する。１００ｎｇ／ｍＬのｒｈＴＧＦ－βおよびｒｈＩＬ－１０を添加し、さらに５日間培養する。培地の半分を交換し、３～４日ごとにサイトカインを添加する。
ＨＴ－２９細胞（ヒト結腸直腸腺癌細胞株）を、操作原稿に従って蛍光増強リガンド（ＣＦＳＥ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃ３４５５４）で標識した（１＊１０＾６／ｍｌの細胞を２μＭのＣＦＳＥで標識し、細胞インキュベータ内で３７℃で２０分間インキュベートする）。１００μＬの４０，０００個の細胞／ウェルを９６ウェルＵ底滅菌プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ｃａｔ：３８９４）に播種する。その後、表６に列挙した５０μＬの段階希釈した抗体を各ウェルに添加し、プレートを３７℃、５％ＣＯ２で２時間インキュベートした。一方、ＭＤＭ細胞を回収し、ＲＰＭＩ１６４０培地（Ｇｉｂｃｏ、Ｃａｔ Ｎｏ．＃１１８３５－０３０）＋１０％ＦＢＳに１＊１０＾６／ｍｌまで再懸濁した。上述のＭＤＭ細胞をトリプシンによって解離し、完全１６４０培地に１０６個の細胞／ｍＬで再懸濁した。上述の５０μＬのＭＤＭ（４００００個の細胞）をアッセイプレートの各ウェルに供給した。３７℃、５％ＣＯ２で２時間インキュベートした後、細胞混合物を洗浄し、細胞を抗ＣＤ１１ｂ－ＡＰＣで４℃で２０分間染色した。細胞を洗浄し、フローサイトメーターでサンプルを解析した。
２．結果
２．１ 抗ＣＤ２４抗体は、ＨＴ－２９結腸直腸癌細胞の貪食を増強することができた。
本発明者らの抗体はすべて、ＨＴ－２９細胞に対する食作用効果を増強した。本発明者らの抗体は、ＨＴ－２９細胞上でより高い最大食作用指数（食細胞指数＝（貪食された細胞を含むマクロファージの数／カウントされたマクロファージの総数）×１００）を示し、それらのうちの４つはベンチマーク抗体であるＳＮ３と比較して低いＥＣ５０を示した（表１１、図２）。食作用アッセイは、上述の方法に従って実施した。マクロファージおよび腫瘍細胞のエフェクター対標的細胞比（Ｅ：Ｔ）（Ｅ／Ｔ比）は１：１であった。
本発明者らのキメラ抗体のいくつかもまた、ｈＣＤ２４を過剰発現するＨＥＫ２９３Ｆ細胞および結腸直腸癌（ＣＲＣ）細胞株ＨＴ－２９に対する食作用効果を増強した。これらの細胞に対してより高い最大食作用指数を示したものもあれば、参照抗体であるＳＮ３と比較してはるかに強いＥＣ５０を示したものもある。ｈＩｇＧ１型キメラ抗体はＡＤＣＰを誘導し、その結果、はるかに良好な食作用効果を検出することができた（表１１、図２）。
２．２ 抗ＣＤ２４抗体と抗ＣＤ４７抗体との組合せ
抗ＣＤ４７と本発明者らの抗ＣＤ２４キメラ抗体（ｃｈＡｂ１１０Ｄ４Ｇ４、ｃｈＡｂ１１１Ｆ３Ａ２およびｃｈＡｂ８１Ａ１ Ｆ８）との組合せを試験した。ＨＴ２９結腸直腸腫瘍細胞を標的細胞として選択した。
キメラ抗体ｃｈＡｂ１１０Ｄ４Ｇ４、ｃｈＡｂ１１１Ｆ３Ａ２およびｃｈＡ８１Ａ１Ｆ８を適用して、異なる濃度の抗ＣＤ４７抗体（図３ではｈｕ５Ｆ９、ｈｕ５Ｆ９－ｈＩｇＧ４またはｈｕ５Ｆ９－Ｇ４を互換的に使用する）と組み合わせて、全食作用効果を検出した。抗ＣＤ２４キメラ抗体の抗体濃度は０．１ｎＭとして設定し、ｈｕ５Ｆ９濃度は０．００３３ｎＭ、０．０１３ｎＭ、０．０５２ｎＭおよび０．２０８ｎＭとして設定した。抗ＣＤ２４と抗ＣＤ４７の組合せは、食作用指数を改善した。図３は、抗ＣＤ２４抗体と抗ＣＤ４７抗体との組合せが、抗ＣＤ４７抗体単独よりも有意に良好な食作用効果を誘導したことを示す。
２．３ 二重特異性抗体（ＩｇＧ＋ｓｃＦｖフォーマット）を食作用アッセイのために調査した。
ＩｇＧ－ｓｃＦｖフォーマットの二重特異性抗体を、それぞれ、ＶＬ－ＣＬのフォーマットの軽鎖に関連する、ＶＨ－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－スペーサー－ｓｃＦｖのフォーマットの２つの重鎖を含む、ｃｈＡｂ８１Ａ１Ｆ８－ＩｇＧ４およびＨｕ５Ｆ９由来ｓｃＦｖを用いて構築した。この二重特異性抗体の親和性を試験し、次いで食作用アッセイも実施した（図４を参照のこと）。すべての抗体濃度は、最大食作用に十分な１００ｎＭとして設定した。Ｅ／Ｔ比は１：５および１：１として設定した。二重特異性抗体は、ｈｕ５Ｆ９と比較して改善された食作用を示し、Ｅ／Ｔ比が１：５の場合、組合せ群はほぼ１００％の食作用を示した。図４に示されるように、二重特異性抗体および抗ＣＤ２４抗体と抗ＣＤ４７抗体の組合せを、食作用アッセイによって試験した。最大指数は、以前のアッセイのようにＥ／Ｔ比が１：１の場合は８５％に達し、Ｅ／Ｔ比が１：５の場合は９８％に達することができた。二重特異性抗体は非常に優れた食作用能力を示した。
［実施例４］
抗体のヒト化
８１Ａ１Ｆ８および１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２のヒト化を、以下のステップを用いて実施した：１）マウス抗体ＶＨおよびＶＬドメインのモデリング、２）一連の好ましいヒト生殖系列配列とのアラインメント、３）非ヒトＣＤＲとヒトＦＲとの間の競合の評価、および最終産物における親和性の喪失を防ぐための復帰変異の設計、ならびに４）好ましい生殖系列骨格へのＣＤＲグラフト。５つの異なるヒト化配列を作製し、その後、すべてのヒト化変異体および哺乳動物発現系のキメラのクローニングおよび小規模産生を行った。
［実施例５］
ヒト化抗体の特性評価：親和性
ヒト化変異体８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ－１１／ＶＬ－２１（８１Ａ１Ｆ８－１１２１）、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ－２１／ＶＬ－２１（８１Ａ１Ｆ８－２１２１）、８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ－１１／ＶＬ－４１（８１Ａ１Ｆ８－１１４１）および８１Ａ１Ｆ８－ＶＨ－２１／ＶＬ－４１（８１Ａ１Ｆ８－２１４１）を、ＣＤ２４陽性細胞ＨＴ－２９およびＮａｌｍ６を使用した細胞ベースの結合アッセイによって試験した。１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２のヒト化変異体を、ＣＤ２４陽性細胞ＨＴ－２９を使用した細胞ベースの結合アッセイによって試験した。
簡潔に述べると、ＨＴ－２９またはＮａｌｍ６細胞を、ＰＢＳを使用して３回洗浄し、最初にヒト化変異体とインキュベートした。３回洗浄した後、二次抗体を細胞とインキュベートした。サンプルのＭＦＩをフローサイトメトリーで解析し、細胞ベースの親和性を計算した。
８１Ａ１Ｆ８の上述のヒト化抗体のＨＴ２９およびＮａｌｍ６に対する結合親和性は、それぞれ、図５Ａおよび図５Ｂに示されるようにキメラ８１Ａ１Ｆ８と同等であった。
上述の１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２のヒト化抗体のＨＴ２９に対する結合親和性を図５Ｃに示した。
８１Ａ１Ｆ８のヒト化抗体のタンパク質に基づくＫＤを、Ｇａｔｏｒｐｒｉｍｅシステム（抗原としてｈＣＤ２４－Ｆｃタンパク質）を用いて試験し、ＫＤデータを図５Ｄに示した。
［実施例６］
ＣＤ２４のグリコシル化／シアル化エピトープ
本明細書において提供される抗体によって認識されるエピトープパターンを試験した。本明細書において提供される抗体のいくつかは、ＣＤ２４のグリコシル化またはシアル化修飾エピトープを認識することが見出された。
ＨＴ－２９、Ｎａｌｍ６、ＨＥＫ２９３Ｔ－ｈＣＤ２４およびＭＣＦ７－ｈＣＤ２４細胞を、ノイラミニダーゼまたは脱グリコシル化ミックスキットにより消化した。ＰＢＳ対照と比較して、８１Ａ１Ｆ８および１１０Ｄ４Ｇ４は標的細胞に対する親和性を維持し、ＭＦＩシグナルは低下しなかった。しかしながら、８１Ａ７Ａ１０、１１１Ｆ３Ａ２、１００Ｆ２Ｅ３、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２および１０７Ｄ１０Ｄ１１のＭＦＩは、図６Ａおよび図６Ｂに示されるように、標的細胞をノイラミニダーゼまたは脱グリコシル化ミックスで処理した後、大幅に減少した。ベンチマーク抗体ＳＮ３も、以前に報告されたグリコシル化エピトープを認識した。図６Ｃおよび図６Ｄに示されるように、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２は高い親和性でＨＴ－２９細胞と結合したが、２９３Ｔ－ｈＣＤ２４とは全く結合できなかった。１０７Ｄ１０Ｄ１１は、低い親和性で２９３Ｔ－ｈＣＤ２４と結合した。しかしながら、ＳＮ３は２９３Ｔ－ｈＣＤ２４およびＨＴ－２９と正常に結合した。
［実施例７］
ＳＰＲによる抗ＣＤ２４ ｍＡｂおよびヒト化抗体に対する親和性試験
ｍＦｃタグ付きヒトＣＤ２４（ｈＣＤ２４－ｍＦｃ－ビオチン）に対する抗体の親和性を、ＢＩＡｃｏｒｅ ８Ｋ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）によって決定した。０．８または２．５μｇ／ｍｌのｈＣＤ２４－ｍＦｃ－ビオチンを、１０μｌ／分の流速で１２０秒間シリーズＳセンサーチップＳＡに固定化して、約１２００ＲＵの固定化レベルに達した。抗体を、濃度勾配（１．５６～５０ｎＭ）で室温、３０μｌ／分の流速で注入した。接触時間は１８０秒に設定し、解離時間は４００秒であった。各サイクルの終わりに、１０ｍＭのグリシンｐＨ１．５を注入して、試験した抗体を表面から除去した。最後に、ＢＩＡｃｏｒｅ Ｉｎｓｉｇｈｔ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅを使用して結合動態を計算し、１：１結合モデルを曲線フィッティングに使用した。本明細書において提供されるいくつかの抗ＣＤ２４ ｍＡｂについてのＳＰＲ解析の結果を図７Ａに示した。ヒト化８１Ａ１Ｆ８候補に対するＳＰＲ解析の結果を図７Ｂに示した。
［実施例８］
８１Ａ１Ｆ８についてのＥＬＩＳＡに基づく受容体結合アッセイ
１．方法
ヒトＣＤ２４－ｍＦｃタンパク質をプレート上にコーティングした。ビオチン化ヒトＳｉｇＬｅｃ１０タンパク質（ＳＩＧ－ＨＭ５１０Ｂ、Ｋａｃｔｕｓ）を異なる濃度の８１Ａ１Ｆ８と一緒に混合し、次いでプレートに加えた。本発明者らが利用した結合バッファーは、１％のＴｒｉｔｏｎ－Ｘ、０．３ｍＭのＭｎＣｌ２、１ｍＭのＣａＣｌ２、２５ｍＭのＴｒｉｓ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｇＣｌ２、ｐＨ７．６であった。サンプルを１×ＰＢＳバッファーで３回洗浄した。サンプルのシグナルを検出し、元のＳｉｇＬｅｃ－１０読み取り値で正規化した。
２．結果
異なる濃度の８１Ａ１Ｆ８についてのＥＬＩＳＡに基づく受容体結合アッセイの結果を図８に示した。
［実施例９］
８１Ａ１Ｆ８およびそのヒト化変異体についてのｉｎ ｖｉｔｒｏ有効性アッセイ
１．食作用アッセイ
実施例３で述べたように、ヒト単球を分離し、誘導した。
ＡおよびＢ：標的腫瘍細胞（ＨＴ－２９およびＮａｌｍ６）の食作用を、抗ＣＤ２４ ｍＡｂ（ｈＩｇＧ４ Ｆｃ）およびベンチマーク抗体ＳＷＡ１１ならびに抗ＣＤ４７ ｍＡｂ ５Ｆ９－ＩｇＧ４を使用して実施した。結果を図９Ａおよび図９Ｂに示した。
Ｃ：まれなＦｃ依存性機能を有する８１Ａ１Ｆ８－ＬＡＬＡＰＧをリツキシマブと組み合わせて、リツキシマブのＡＤＣＰ効果を増強できるかどうかを調べた。本発明者らは、相加効果を検出できることを見出した（図９Ｃを参照のこと）。
Ｄ：８１Ａ１Ｆ８－ｈＩｇＧ４キメラ抗体はまた、組み合わせて投与した場合、抗ＣＤ４７抗体ｈｕ５Ｆ９の食作用効果を増強した（図９Ｄを参照のこと）。
２．ＡＤＣＣおよびＣＤＣアッセイ
Ａ：８１Ａ１Ｆ８およびそのヒト化変異体のＡＤＣＣ効果を、標的細胞ＨＴ－２９に対して試験した。ＨＴ－２９細胞をＰＢＭＣとインキュベートした。異なる濃度の８１Ａ１Ｆ８およびヒト化変異体８１Ａ１Ｆ８－１１４１および８１Ａ１Ｆ８－２１４１をサンプルに加えた。標的細胞の溶解を、ＬＤＨキットを介して試験した。図１０Ａに示されるように、ＡＤＣＣ効果は、ｈＩｇＧ１アイソタイプ抗体によってのみ誘導され得る。
Ｂ：８１Ａ１Ｆ８およびそのヒト化変異体のＣＤＣ効果を、標的細胞ｈＣＤ２４－ＭＣＦ７に対して試験した。異なる濃度の抗体を標的細胞および補体系とインキュベートした。図１０Ｂに示されるように、標的細胞の９０％を超える溶解を高濃度の８１Ａ１Ｆ８抗体変異体において検出することができた。
［実施例１０］
抗ＣＤ２４抗体のｉｎ ｖｉｖｏ有効性アッセイ
８１Ａ１Ｆ８のｉｎ ｖｉｖｏ有効性を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ同系マウスモデルにおいて試験した。簡潔に述べると、１００万個のＭＣ３８－ｈＣＤ２４細胞を６～８週齢の雌のＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスの皮下に移植した。平均腫瘍体積が約６０ｍｍ３に達したとき、マウスをランダムにグループ化し、以下に示すように処置した。ｈＩｇＧ４アイソタイプ抗体を、単剤（１０ｍｐｋ、Ｑ３Ｄ）またはオキサリプラチンとの併用（６ｍｐｋ、ＱＷ）で試験した。腫瘍体積およびマウスの体重を週に２回測定した。８１Ａ１Ｆ８のｉｎ ｖｉｖｏ有効性を図１１Ａ～図１１Ｄに示した。
すべての処置群が腫瘍成長阻害を示した（図１１Ａを参照のこと）。オキサリプラチンと併用すると、８１Ａ１Ｆ８－ｈＩｇＧ４ははるかに優れた有効性を示し、相乗効果を観察することができた。すべてのマウスの体重は減少しなかった（図１１Ｂを参照のこと）。ｉｎ ｖｉｖｏ有効性試験の概要を図１１Ｃに示した。腫瘍浸潤リンパ球を腫瘍組織から単離し、フローサイトメトリーにより解析した。図１１Ｄは、８１Ａ１Ｆ８－ｈＩｇＧ４とオキサリプラチンの組合せで処置した場合、対照（ＣＴＲＬ）と比較して、ＣＤ８／ＣＤ４比ならびにＭ１／Ｍ２マクロファージ比が大幅に増加したことを示した。
ＭＣ３８－ｈＣＤ２４同系モデルに対する８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａ（ヒトＩｇＧ１のホモログ）のｉｎ ｖｉｖｏ有効性も評価した。投薬量－有効性試験を実施すると、本発明者らは、８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａの投与後に６匹のマウスのうち４匹に腫瘍がなかったので、６ｍｐｋの投薬量が最良の有効性を示すことを見出した（図１２Ａを参照のこと）。
ＭＣ３８－Ｈｃｄ２４細胞を再度接種することによって再チャレンジアッセイを実施すると、腫瘍が成長することができた。しかしながら、処置群では腫瘍は再発せず、８１Ａ１Ｆ８処置後に免疫記憶が形成されたことが示された（図１２Ｂを参照のこと）。
図１２Ｃは、ビヒクル対照または８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａで処置した各マウスについての腫瘍成長曲線を示した。
図１２Ｄは、８１Ａ１Ｆ８－ｍＩｇＧ２ａ（「ＡＴＧ０３１－ｍＡｂ０１１－ｍＩｇＧ２ａ」とも呼ばれる）のｉｎ ｖｉｖｏ有効性についての概要を示した。
ヒト化８１Ａ１Ｆ８（８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ）のｉｎ ｖｉｖｏ有効性も試験した。簡潔に述べると、ＭＣ３８－ｈＣＤ２４腫瘍細胞を接種した。平均腫瘍体積が約１２０ｍｍ３に達すると、マウスをグループ分けし、単剤（８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ、オキサリプラチンまたはアテゾリズマブ）または併用戦略で処置した。試験したヒト化８１Ａ１Ｆ８（８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ）の腫瘍阻害効果を図１３Ａ～図１３Ｃに示し、図１３Ａは、薬物投与後の腫瘍成長曲線を示し、図１３Ｂは、処置群の各マウスについての腫瘍成長曲線を示し、図１３Ｃは、８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａのｉｎ ｖｉｖｏ有効性についての概要を示した。
１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＩｇＧ２ａについてのｉｎ ｖｉｖｏ有効性アッセイも試験した。簡潔に述べると、ＭＣ３８－ｈＣＤ２４腫瘍細胞を上述のように接種した。平均腫瘍体積が約１２０ｍｍ３に達すると、１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＩｇＧ２ａ、８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ、オキサリプラチンおよびアテゾリズマブまたはそれらの組合せをマウスに投与した。試験した１０１Ｈ９Ｇ９Ａ２－ｍＩｇＧ２ａおよびヒト化８１Ａ１Ｆ８（８１Ａ１Ｆ８－２１４１－ｍＩｇＧ２ａ）の腫瘍阻害効果を図１４Ａ～図１４Ｃに示し、図１４Ａは、示されるようにグループ化されたマウスの腫瘍体積曲線を示し、図１４Ｂはマウスの体重を示し、図１４Ｃは、異なる処置の有効性の概要を示した。
［実施例１１］
カニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）ＣＤ２４（ｃｍＣＤ２４）抗体の発見
Ｂａｌｂ／ｃおよびＳＪＬマウスを、ｃｍＣＤ２４－Ｆｌａｇを過剰発現する２９３Ｆ細胞で免疫化し、カニクイザルＣＤ２４を認識する２つの抗体を同定した。細胞ベースの結合データを図１５に示した。
抗ｃｍＣＤ２４抗体のｉｎ ｖｉｔｒｏ有効性研究を実施し、その結果を図１６Ａ～図１６Ｃに示し、図１６Ａは、本明細書において提供される抗ｃｍＣＤ２４抗体の食作用アッセイからの結果を示し、図１６Ｂは、本明細書において提供される抗ｃｍＣＤ２４抗体のＡＤＣＣ効果を示し、図１６Ｃは、本明細書において提供される抗ｃｍＣＤ２４抗体のＣＤＣ効果を示した。

Claims (76)

  1. 配列番号１、３、５、７、９、１１、１４、１６、１７、１８、１９、２１、２３、２５、２７、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、９５、９６、９７、１０４、１０５、１０６、１１３、１１４、１１５、１２６、１２７、１２８、１３６、１３７、１５０、１５１、１５２、１６０、１６１、１６２、１６８、１６９、１７０、２２２、２２３および２２４からなる群から選択される１、２もしくは３つの重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）配列および／または配列番号２、４、６、８、１０、１２、１３、１５、２０、２２、２４、２６、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、９８、９９、１００、１０７、１０８、１１６、１１７、１２９、１３０、１３１、１３８、１３９、１４０、１４５、１５３、１５４、１５５、１６３、１７１、１７２、１７３、１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、２２５、２２６および２２７からなる群から選択される１、２もしくは３つの軽鎖ＣＤＲ配列を含む、単離された抗体またはその抗原結合断片。
  2. ａ）配列番号１、配列番号３および配列番号５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｂ）配列番号７、配列番号９および配列番号１１から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｃ）配列番号７、配列番号１４および配列番号１１から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｄ）配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｅ）配列番号１９、配列番号２１および配列番号２３から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｆ）配列番号２５、配列番号２７および配列番号２８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｇ）配列番号２５、配列番号３０および配列番号２８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｈ）配列番号３２、配列番号３４および配列番号３６から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｉ）配列番号３８、配列番号４０および配列番号４２から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｊ）配列番号４４、配列番号４６および配列番号４８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｋ）配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｌ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｍ）配列番号１１３、配列番号１１４および配列番号１１５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｎ）配列番号１２６、配列番号１２７および配列番号１２８から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｏ）配列番号２５、配列番号１３６および配列番号１３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｐ）配列番号１５０、配列番号１５１および配列番号１５２から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｑ）配列番号１６０、配列番号１６１および配列番号１６２から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、
    ｒ）配列番号１６８、配列番号１６９および配列番号１７０から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域、ならびに
    ｓ）配列番号２２２、配列番号２２３および配列番号２２４から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域
    からなる群から選択される重鎖可変領域を含む、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  3. ａ）配列番号２、配列番号４および配列番号６から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｂ）配列番号８、配列番号１０および配列番号１２から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｃ）配列番号１３、配列番号１０および配列番号１５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｄ）配列番号２０、配列番号２２および配列番号２４から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｅ）配列番号２６、配列番号２２および配列番号２４から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｆ）配列番号２９、配列番号２２および配列番号３１から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｇ）配列番号３３、配列番号３５および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｈ）配列番号３９、配列番号４１および配列番号４３から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｉ）配列番号４５、配列番号４７および配列番号４９から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｊ）配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｋ）配列番号１０７、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｌ）配列番号１３、配列番号１１６および配列番号１１７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｍ）配列番号１２９、配列番号１３０および配列番号１３１から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｎ）配列番号１３８、配列番号１３９および配列番号１４０から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｏ）配列番号２９、配列番号１４５および配列番号２４から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｐ）配列番号１５３、配列番号１５４および配列番号１５５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｑ）配列番号１６３、配列番号１５４および配列番号１５５から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｒ）配列番号１７１、配列番号１７２および配列番号１７３から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｓ）配列番号１８４、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｔ）配列番号１８５、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｕ）配列番号１８６、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｖ）配列番号１８７、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｗ）配列番号１８８、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、ならびに
    ｘ）配列番号２２５、配列番号２２６および配列番号２２７から選択される１、２または３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域
    からなる群から選択される軽鎖可変領域を含む、先行する請求項のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片。
  4. ａ）配列番号１、配列番号３および配列番号５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２、配列番号４および配列番号６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｂ）配列番号７、配列番号９および配列番号１１から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号８、配列番号１０および配列番号１２から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｃ）配列番号７、配列番号１４および配列番号１１から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１３、配列番号１０および配列番号１５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｄ）配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１３、配列番号１０および配列番号１５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｅ）配列番号１９、配列番号２１および配列番号２３から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２０、配列番号２２および配列番号２４から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｆ）配列番号２５、配列番号２７および配列番号２８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２６、配列番号２２および配列番号２４から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｇ）配列番号２５、配列番号３０および配列番号２８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２９、配列番号２２および配列番号３１から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｈ）配列番号３２、配列番号３４および配列番号３６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号３３、配列番号３５および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖可変領域、
    ｉ）配列番号３８、配列番号４０および配列番号４２から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号３９、配列番号４１および配列番号４３から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｊ）配列番号４４、配列番号４６および配列番号４８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号４５、配列番号４７および配列番号４９から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｋ）配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｌ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１０７、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｍ）配列番号１１３、配列番１１４および配列番号１１５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１３、配列番号１１６および配列番号１１７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｎ）配列番号１２６、配列番号１２７および配列番号１２８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１２９、配列番号１３０および配列番号１３１から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｏ）配列番号２５、配列番号１３６および配列番号１３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１３８、配列番号１３９および配列番号１４０から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｐ）配列番号２５、配列番号３０および配列番号２８から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２９、配列番号１４５および配列番号２４から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｑ）配列番号１５０、配列番号１５１および配列番号１５２から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１５３、配列番号１５４および配列番号１５５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｒ）配列番号１６０、配列番号１６１および配列番号１６２から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１６３、配列番号１５４および配列番号１５５から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｓ）配列番号１６８、配列番号１６９および配列番号１７０から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１７１、配列番号１７２および配列番号１７３から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｔ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８４、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｕ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８５、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｖ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８６、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｗ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８７、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、
    ｘ）配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１８８、配列番号１０８および配列番号３７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域、または
    ｙ）配列番号２２２、配列番号２２３および配列番号２２４から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含む重鎖可変領域ならびに配列番号２２５、配列番号２２６および配列番号２２７から選択される１、２もしくは３つのＣＤＲ配列を含むカッパ軽鎖可変領域
    を含む、先行する請求項のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片。
  5. 配列番号５０、配列番号５４、配列番号５８、配列番号６２、配列番号６６、配列番号７０、配列番号７４、配列番号７８、配列番号８２、配列番号８６、配列番号１０１、配列番号１０９、配列番号１１８、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４１、配列番号１４６、配列番号１５６、配列番号１６４、配列番号１７４、配列番号１７７、配列番号１７８、配列番号１７９、配列番号１８９、配列番号１９０、配列番号１９１、配列番号１９２、配列番号１９３、配列番号１９４およびそれらの少なくとも８０％配列同一性のある相同配列からなる群から選択される重鎖可変領域を含む、先行する請求項のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片。
  6. 配列番号５２、配列番号５６、配列番号６４、配列番号６８、配列番号７２、配列番号７６、配列番号８０、配列番号８４、配列番号８８、配列番号１０３、配列番号１１１、配列番号１２０、配列番号１２４、配列番号１３４、配列番号１４３、配列番号１４８、配列番号１５８、配列番号１６６、配列番号１７６、配列番号１８０、配列番号１８１、配列番号１８２、配列番号１８３、配列番号１９５、配列番号１９６、配列番号１９７、配列番号１９８、配列番号１９９、配列番号２００、配列番号２０１、配列番号２０２、配列番号２０３、配列番号２２１およびそれらの少なくとも８０％配列同一性のある相同配列からなる群から選択される軽鎖可変領域を含む、先行する請求項のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片。
  7. ａ）配列番号５０を含む重鎖可変領域および配列番号５２を含む軽鎖可変領域、
    ｂ）配列番号５４を含む重鎖可変領域および配列番号５６を含む軽鎖可変領域、
    ｃ）配列番号５８を含む重鎖可変領域および配列番号６４を含む軽鎖可変領域、
    ｄ）配列番号６２を含む重鎖可変領域および配列番号６４を含む軽鎖可変領域、
    ｅ）配列番号６６を含む重鎖可変領域および配列番号６８を含む軽鎖可変領域、
    ｆ）配列番号７０を含む重鎖可変領域および配列番号７２を含む軽鎖可変領域、
    ｇ）配列番号７４を含む重鎖可変領域および配列番号７６を含む軽鎖可変領域、
    ｈ）配列番号７８を含む重鎖可変領域および配列番号８０を含む軽鎖可変領域、
    ｉ）配列番号８２を含む重鎖可変領域および配列番号８４を含む軽鎖可変領域、
    ｊ）配列番号８６を含む重鎖可変領域および配列番号８８を含む軽鎖可変領域、
    ｋ）配列番号１０１を含む重鎖可変領域および配列番号１０３を含む軽鎖可変領域、
    ｌ）配列番号１０９を含む重鎖可変領域および配列番号１１１を含む軽鎖可変領域、
    ｍ）配列番号１１８を含む重鎖可変領域および配列番号１２０もしくは配列番号２２１を含む軽鎖可変領域、
    ｎ）配列番号１２２を含む重鎖可変領域および配列番号１２４を含む軽鎖可変領域、
    ｏ）配列番号１３２を含む重鎖可変領域および配列番号１３４を含む軽鎖可変領域、
    ｐ）配列番号１４１を含む重鎖可変領域および配列番号１４３を含む軽鎖可変領域、
    ｑ）配列番号１４６を含む重鎖可変領域および配列番号１４８を含む軽鎖可変領域、
    ｒ）配列番号１５６を含む重鎖可変領域および配列番号１５８を含む軽鎖可変領域、
    ｓ）配列番号１６４を含む重鎖可変領域および配列番号１６６を含む軽鎖可変領域、
    ｔ）配列番号１７４を含む重鎖可変領域および配列番号１７６を含む軽鎖可変領域、
    ｕ）配列番号１７７を含む重鎖可変領域および配列番号１８０を含む軽鎖可変領域、
    ｖ）配列番号１７８を含む重鎖可変領域および配列番号１８０を含む軽鎖可変領域、
    ｗ）配列番号１７９を含む重鎖可変領域および配列番号１８０を含む軽鎖可変領域、
    ｘ）配列番号１７７を含む重鎖可変領域および配列番号１８１を含む軽鎖可変領域、
    ｙ）配列番号１７８を含む重鎖可変領域および配列番号１８１を含む軽鎖可変領域、
    ｚ）配列番号１７９を含む重鎖可変領域および配列番号１８１を含む軽鎖可変領域、
    ａａ）配列番号１７７を含む重鎖可変領域および配列番号１８２を含む軽鎖可変領域、
    ｂｂ）配列番号１７８を含む重鎖可変領域および配列番号１８２を含む軽鎖可変領域、
    ｃｃ）配列番号１７９を含む重鎖可変領域および配列番号１８２を含む軽鎖可変領域、
    ｄｄ）配列番号１７７を含む重鎖可変領域および配列番号１８３を含む軽鎖可変領域、
    ｅｅ）配列番号１７８を含む重鎖可変領域および配列番号１８３を含む軽鎖可変領域、
    ｆｆ）配列番号１７９を含む重鎖可変領域および配列番号１８３を含む軽鎖可変領域、
    ｇｇ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９５を含む軽鎖可変領域、
    ｈｈ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９６を含む軽鎖可変領域、
    ｉｉ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９７を含む軽鎖可変領域、
    ｊｊ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９８を含む軽鎖可変領域、
    ｋｋ）配列番号１８９を含む重鎖可変領域および配列番号１９９を含む軽鎖可変領域、
    ｌｌ）配列番号１９０を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
    ｍｍ）配列番号１９０を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
    ｎｎ）配列番号１９０を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、
    ｏｏ）配列番号１９０を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域、
    ｐｐ）配列番号１９１を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
    ｑｑ）配列番号１９１を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
    ｒｒ）配列番号１９１を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、
    ｓｓ）配列番号１９１を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域、
    ｔｔ）配列番号１９２を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
    ｕｕ）配列番号１９２を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
    ｖｖ）配列番号１９２を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、
    ｗｗ）配列番号１９２を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域、
    ｘｘ）配列番号１９３を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
    ｙｙ）配列番号１９３を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
    ｚｚ）配列番号１９３を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、
    ａａａ）配列番号１９３を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域、
    ｂｂｂ）配列番号１９４を含む重鎖可変領域および配列番号２００を含む軽鎖可変領域、
    ｃｃｃ）配列番号１９４を含む重鎖可変領域および配列番号２０１を含む軽鎖可変領域、
    ｄｄｄ）配列番号１９４を含む重鎖可変領域および配列番号２０２を含む軽鎖可変領域、または
    ｅｅｅ）配列番号１９４を含む重鎖可変領域および配列番号２０３を含む軽鎖可変領域
    を含む、先行する請求項のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片。
  8. １つまたは複数のアミノ酸残基置換または修飾をさらに含むが、ヒトＣＤ２４またはカニクイザルＣＤ２４に対する特異的結合親和性を保持する、先行する請求項のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片。
  9. 置換が、１つもしくは複数のＣＤＲ配列中、および／またはＶＨもしくはＶＬ配列の１つもしくは複数にあるが、ＣＤＲ配列のいずれにもない、先行する請求項のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  10. 免疫グロブリン定常領域、任意選択で、ヒトＩｇの定常領域、または任意選択で、ヒトＩｇＧの定常領域をさらに含む、先行する請求項のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片。
  11. 定常領域が、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４の定常領域を含む、請求項１０に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  12. キメラまたはヒト化である、先行する請求項のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  13. ダイアボディー、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦｖ）２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド安定化ダイアボディー（ｄｓダイアボディー）、一本鎖抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体（二価ダイアボディー）、多重特異性抗体、ラクダ化単一ドメイン抗体、ナノボディー、ドメイン抗体および二価ドメイン抗体である、先行する請求項のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  14. 二重特異性である、先行する請求項のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片。
  15. ＣＤ２４の第１および第２のエピトープと特異的に結合可能であるか、またはＣＤ２４および第２の抗原と特異的に結合可能である、請求項１４に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  16. Ｆａｂを介してＣＤ２４に結合し、ｓｃＦｖを介して第２の抗原に結合する、請求項１５に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  17. 第２の抗原結合ｓｃＦｖが、ＣＤ２４結合Ｆａｂに続く重鎖定常領域のＣ末端に作動可能に連結されている、請求項１６に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  18. 二重特異性抗体分子が、ＶＬ（抗ＣＤ２４）－ＣＬのフォーマットの軽鎖に関連する、ＶＨ（抗ＣＤ２４）－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－スペーサー－第２の抗原結合ｓｃＦｖのフォーマットの重鎖を含む、請求項１７に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  19. 第２の抗原が、任意選択で、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＰＤ－１、ＣＬＴＡ－４、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ３、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＴＧＦ β、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＩＣＡＭ－１、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７－Ｈ３、ＬＦＡ－１、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＣＤ３、ＣＤ１６、ＳＩＲＰα、Ｓｉｇｌｅｃ１０、ＬＩＬＲＢ２、Ｃｌｅｖｅｒ－１、Ｍａｃｒｏ、ＬＩＬＲＢ４、Ｓｉｇｌｅｃ１５、ＣＳＦ１Ｒ、ＰＳＧＬ－１、ＶＳＩＧ－４、Ｂ２ＭおよびＣＤ８３からなる群から選択される免疫関連標的である、請求項１５から１８のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  20. 第２の抗原が腫瘍抗原を含む、請求項１６に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  21. 腫瘍抗原が、ＣＡ－１２５、ガングリオシドＧ（Ｄ２）、Ｇ（Ｍ２）およびＧ（Ｄ３）、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３３、ＣＤ４７、ＣＤ５２、Ｅｐ－ＣＡＭ、ＣＥＡ、ＣＬＤＮ１８．２、ボンベシン様ペプチド、ＰＳＡ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ３／ＨＥＲ３、ｅｒｂＢ４、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ４４ｖ９、Ｋｉ－６７、癌関連ムチン、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ（例えば、ＶＥＧＦＲ３）、エストロゲン受容体、ルイス－Ｙ抗原、ＴＧＦβ１、ＩＧＦ－１受容体、ＥＧＦα、ｃ－Ｋｉｔ受容体、トランスフェリン受容体、ＩＬ－２Ｒ、ＣＤＨ６、ＣＥＡ、ＦＯＬＲ１、ＴＲＯＰ２、ＰＴＫ７、ＳＬＩＴＲＫ６、ＣＤ１４２、ＮＥＣＴＩＮ－４、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＣＤ１４２、ＣＤ１２３、ＣＤ２２、ＣＤ７９ｂ、ＤＬＬ３、ＳＬＣファミリーまたはＣＯ１７－１Ａを含む、請求項２０に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  22. 腫瘍抗原がＣＤ４７である、請求項２１に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  23. ＶＬ（抗ＣＤ２４）－ＣＬのフォーマットの軽鎖と関連する、ＶＨ（抗ＣＤ２４）－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３－スペーサー－ｓｃＦｖ（抗ＣＤ４７）のフォーマットの重鎖を含む、請求項２２に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  24. 抗体または抗原結合断片が、１つまたは複数のコンジュゲートと連結しており、任意選択で、コンジュゲートが、直接またはリンカーを介してのいずれかで共有結合によって結合している、先行する請求項のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  25. コンジュゲートが、クリアランス修飾剤、化学療法剤、毒素、放射性同位元素、ランタニド、発光標識、蛍光標識、酵素基質標識、ＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、チューブリン結合剤または他の抗癌薬を含む、請求項２４に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  26. 抗体または抗原結合断片が、ＣＤ２４と特異的に結合可能であり、任意選択で、ＣＤ２４が、ヒトまたはカニクイザルに由来し、任意選択で、ＣＤ２４が、組換えＣＤ２４または細胞表面上に発現されたＣＤ２４である、先行する請求項のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  27. 同一エピトープについて、先行する請求項のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片と競合する抗体またはその抗原結合断片。
  28. 同一エピトープについて、配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片と競合し、ＬＣＤＲ１が、配列番号１０７、１８４、１８５、１８６、１８７および１８８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ２が、配列番号１０８のアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ３が、配列番号３７のアミノ酸配列を含む、請求項２７に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  29. 同一エピトープについて、配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびに配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３をそれぞれ含む軽鎖可変領域を含む抗体またはその抗原結合断片と競合する、請求項２７に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  30. 非癌細胞よりも癌細胞に発現されたＣＤ２４と選択的に結合する、請求項２８または２９に記載の抗体またはその抗原結合断片。
  31. 先行する請求項のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
  32. 第２の治療剤をさらに含み、任意選択で、第２の治療剤が、１つまたは複数の免疫抑制分子または抗癌剤（例えば、オキサリプラチン、アテゾリズマブ、リツキシマブ）に対するアンタゴニストである、請求項３１に記載の医薬組成物。
  33. 第２の治療剤がＣＤ４７アンタゴニストであり、任意選択で、ＣＤ４７アンタゴニストが、ＳＩＲＰα－Ｆｃ融合タンパク質もしくはその変異体または抗ＣＤ４７抗体もしくはその抗原結合断片である、請求項３２に記載の医薬組成物。
  34. 請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片をコードする単離されたポリヌクレオチド。
  35. 配列番号５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、１０２、１１０、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、２１７、２１８、２１９および２２０からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項３４に記載の単離されたポリヌクレオチド。
  36. 請求項３５または３５に記載の単離されたポリヌクレオチドを含むベクター。
  37. 請求項３６に記載のベクターを含む宿主細胞。
  38. 請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片を発現させる方法であって、請求項３７に記載の宿主細胞を、請求項３６に記載のベクターが発現される条件下で培養することを含む、方法。
  39. ＣＤ２４活性の調節から恩恵を受けるであろう対象における疾患または状態を処置する方法であって、対象に、請求項１から２６のいずれかに記載の抗体もしくはその抗原結合断片または請求項３１から３３のいずれか一項に記載の医薬組成物の治療上有効な量を投与することを含む、方法。
  40. 疾患または状態が、ＣＤ２４関連疾患または状態である、請求項３９に記載の方法。
  41. 疾患または状態が、癌、適応免疫疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患または感染性疾患である、請求項３９に記載の方法。
  42. 癌が、肺癌、気管支癌、骨癌、肝臓および胆管癌、膵臓癌、乳癌、肝臓癌、卵巣癌、精巣癌、腎臓癌、膀胱癌、頭頸部癌、脊椎癌、脳癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮内膜癌、結腸癌、結腸直腸癌、直腸癌、肛門癌、食道癌、消化器癌、皮膚癌、前立腺癌、下垂体癌、胃癌、膣癌、甲状腺癌、神経膠芽腫、星状細胞腫、黒色腫、骨髄異形成症候群、肉腫、奇形腫、腺癌、白血病、骨髄腫ならびにリンパ腫であり、任意選択で、癌が化学療法抵抗性である、請求項４１に記載の方法。
  43. 疾患または状態が、Ｂ細胞リンパ腫、任意選択で、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＭＺＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、リヒター症候群、バーキットリンパ腫または濾胞性リンパ腫から選択される血液癌である、請求項４１に記載の方法。
  44. 対象がヒトである、請求項３９に記載の方法。
  45. 対象に第２の治療剤の治療上有効な量を投与することを含み、任意選択で、第２の治療剤が、１つまたは複数の免疫抑制分子に対するアンタゴニストである、請求項３９に記載の方法。
  46. 第２の治療剤がＣＤ４７アンタゴニストであり、任意選択で、ＣＤ４７アンタゴニストが、ＳＩＲＰα－Ｆｃ融合タンパク質もしくはその変異体または抗ＣＤ４７抗体もしくはその抗原結合断片である、請求項４５に記載の方法。
  47. 投与が、経口、経鼻、静脈内、皮下、舌下または筋肉内投与による、請求項３９から４６のいずれかに記載の方法。
  48. ＣＤ２４を発現する細胞においてＣＤ２４活性を調節する方法であって、ＣＤ２４を発現する細胞を、請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片に対して曝露することを含む、方法。
  49. サンプル中のＣＤ２４の存在または量を検出する方法であって、サンプルを、請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片と接触させることと、サンプル中のＣＤ２４の存在または量を決定することとを含む、方法。
  50. 対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態を診断する方法であって、ａ）対象からサンプルを得ることと、ｂ）対象から得られたサンプルを、請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片と接触させることと、ｃ）サンプル中のＣＤ２４の存在または量を決定することと、ｄ）ＣＤ２４の存在または量を、対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態の存在または状況と相関させることとを含む、方法。
  51. 対象におけるＣＤ２４関連疾患または状態を処置するための医薬の製造における、請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片の使用。
  52. 医薬が、第２の治療剤をさらに含み、任意選択で、第２の治療剤が、１つまたは複数の免疫抑制分子に対するアンタゴニストである、請求項５１に記載の使用。
  53. 第２の治療剤がＣＤ４７アンタゴニストであり、任意選択で、ＣＤ４７アンタゴニストが、ＳＩＲＰα－Ｆｃ融合タンパク質もしくはその変異体または抗ＣＤ４７抗体もしくはその抗原結合断片である、請求項５２に記載の使用。
  54. ＣＤ２４関連疾患または状態を診断するための診断用試薬の製造における、請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合断片の使用。
  55. ＣＤ２４、任意選択で、組換えＣＤ２４、細胞表面に発現されたＣＤ２４またはＣＤ２４を発現する細胞の検出において有用な、請求項１から２６のいずれかに記載の抗体またはその抗原結合断片を含むキット。
  56. 抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、共刺激シグナル伝達領域およびＴＣＲシグナル伝達ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であって、抗原結合ドメインが、ＣＤ２４と特異的に結合し、請求項１から２６のいずれか一項に記載の抗原結合断片を含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）。
  57. 抗原結合断片が、ＦａｂまたはｓｃＦｖである、請求項５６に記載のＣＡＲ。
  58. 二重特異性である、請求項５６または５７に記載のＣＡＲ。
  59. ＣＡＲが、ＣＤ２４以外の第２の抗原またはＣＤ２４上の第２のエピトープとさらに特異的に結合可能である、請求項５８に記載のＣＡＲ。
  60. 第２の抗原が腫瘍抗原である、請求項５９に記載のＣＡＲ。
  61. ＴＣＲシグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζ、ＦｃｃＲＩγ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＣＤ１３４、ＭｙＤ８８、ＣＤ４０、ＣＤ２７８、ＴＬＲまたはそれらの組合せの細胞内シグナル領域配列からなる群から選択される、請求項５６に記載のＣＡＲ。
  62. 膜貫通領域が、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８またはＣＤ２８の膜貫通領域を含む、請求項５６に記載のＣＡＲ。
  63. 請求項５６から６２のいずれか一項に記載のキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列。
  64. 請求項６３に記載の核酸配列を含む細胞。
  65. 請求項５６から６２のいずれか一項に記載のＣＡＲを発現するように遺伝子改変された細胞。
  66. 細胞が免疫細胞であり、任意選択で、免疫細胞が、Ｔリンパ球、ＮＫ細胞、単球、マクロファージまたはＮＫＴリンパ球である、請求項６５に記載の細胞。
  67. 請求項６３に記載の核酸配列を含むベクター。
  68. 哺乳動物においてＣＤ２４を発現する細胞または組織に対するＴ細胞媒介性免疫応答を刺激するための方法であって、哺乳動物に、請求項５６から６２のいずれか一項に記載のＣＡＲを発現するように遺伝子改変された細胞の有効量を投与することを含む、方法。
  69. ＣＤ２４関連疾患または状態を有する哺乳動物を処置する方法であって、哺乳動物に請求項６５に記載の細胞の有効量を投与し、それによって哺乳動物を処置することを含む、方法。
  70. 細胞が自己Ｔ細胞である、請求項６９に記載の方法。
  71. ＣＤ２４関連疾患または状態が、がんである、請求項６９に記載の方法。
  72. 哺乳動物がヒト対象である、請求項６９に記載の方法。
  73. それを必要とする対象におけるがんを処置する方法であって、グリコシル化またはシアル化ＣＤ２４にのみ結合する、好ましくは、ＣＤ２４のシアル酸にのみ結合する抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片を投与することを含む、方法。
  74. 抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片が、非癌細胞よりも癌細胞に発現されたＣＤ２４と選択的に結合する、請求項７３に記載の方法。
  75. 抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片が、同一エピトープについて、配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体もしくはその抗原結合断片と競合し、ＬＣＤＲ１が、配列番号１０７、１８４、１８５、１８６、１８７および１８８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ２が、配列番号１０８のアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ３が、配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、または配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびに配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３をそれぞれ含む軽鎖可変領域を含む抗体もしくはその抗原結合断片と競合する、請求項７４に記載の方法。
  76. 抗ＣＤ２４抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１０４、配列番号１０５および配列番号１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、ＬＣＤＲ１が、配列番号１０７、１８４、１８５、１８６、１８７および１８８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ２が、配列番号１０８のアミノ酸配列を含み、ＬＣＤＲ３が、配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、または配列番号９５、配列番号９６および配列番号９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域ならびに配列番号９８、配列番号９９および配列番号１００のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３をそれぞれ含む軽鎖可変領域を含む、請求項７５に記載の方法。
JP2023547592A 2021-02-08 2022-02-08 新規抗ｃｄ２４抗体 Pending JP2024508672A (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNPCT/CN2021/076075 2021-02-08
CN2021076075 2021-02-08
CN202210088172 2022-01-25
CN202210088172.3 2022-01-25
PCT/US2022/015711 WO2022170280A2 (en) 2021-02-08 2022-02-08 Novel anti-cd24 antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2024508672A true JP2024508672A (ja) 2024-02-28

Family

ID=82741874

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2023547592A Pending JP2024508672A (ja) 2021-02-08 2022-02-08 新規抗ｃｄ２４抗体

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20240052052A1 (ja)
EP (1) EP4288099A2 (ja)
JP (1) JP2024508672A (ja)
KR (1) KR20230143177A (ja)
CN (1) CN117412770A (ja)
AU (1) AU2022217072A1 (ja)
CA (1) CA3210934A1 (ja)
CO (1) CO2023011463A2 (ja)
IL (1) IL304898A (ja)
MX (1) MX2023009238A (ja)
TW (1) TW202241956A (ja)
WO (1) WO2022170280A2 (ja)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20080002341A (ko) * 2006-06-30 2008-01-04 재단법인서울대학교산학협력재단 Ｃｄ２４를 표적으로 하는 암 억제방법
CA2705353C (en) * 2007-11-14 2017-07-25 The Medical Research, Infrastructure, And Health Services Fund Of The Tel Aviv Medical Center Methods of treating cancer using anti cd24 antibodies
JP6476170B2 (ja) * 2014-04-28 2019-03-06 医化学創薬株式会社 抗ｍｕｃ１抗体又はその抗原結合性断片及びその用途
US20170158753A1 (en) * 2014-06-25 2017-06-08 Integrated Biotherapeutics, Inc. Monoclonal antibodies directed against envelope glycoproteins from multiple filovirus species
CN112424441B (zh) * 2018-05-14 2023-05-09 昂科医药 抗cd24组合物及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
KR20230143177A (ko) 2023-10-11
TW202241956A (zh) 2022-11-01
US20240052052A1 (en) 2024-02-15
MX2023009238A (es) 2023-08-16
WO2022170280A2 (en) 2022-08-11
AU2022217072A1 (en) 2023-10-05
AU2022217072A9 (en) 2024-01-18
EP4288099A2 (en) 2023-12-13
WO2022170280A3 (en) 2022-09-09
CA3210934A1 (en) 2022-08-11
CO2023011463A2 (es) 2023-09-18
IL304898A (en) 2023-10-01
CN117412770A (zh) 2024-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2018147245A1 (ja) 抗ｇｐｒｃ５ｄ抗体及び該抗体を含む分子
TWI820041B (zh) 新型抗CD3ε抗體
WO2021032078A1 (en) Novel anti-sirpa antibodies
WO2019179391A1 (en) Novel bispecific pd-1/ctla-4 antibody molecules
WO2020156405A1 (en) Novel bispecific cd3/cd20 polypeptide complexes
WO2019179422A1 (en) Novel bispecific pd-1/lag-3 antibody molecules
WO2020192709A1 (en) Novel bispecific polypeptide complexes
WO2022237820A1 (en) Novel anti-cd276 antibodies and the uses thereof
US20240052052A1 (en) Novel anti-cd24 antibodies
WO2019179421A1 (en) Novel bispecific pd-1/ctla-4 antibody molecules
US20230203159A1 (en) Novel anti-cd3epsilon antibodies
WO2024099295A1 (en) Novel multi-specific antibodies and uses thereof
WO2024131956A1 (zh) 靶向gprc5d的多特异性多肽复合物
WO2023227062A1 (en) Novel anti-gprc5d antibodies, bispecific antigen binding molecules that bind gprc5d and cd3, and uses thereof
KR20240039006A (ko) 신규 항-sirpa 항체
KR20240039005A (ko) 신규 다중-특이적 분자
TW202317618A (zh) 新型抗ｃｄ２７６抗體及其用途