JP2024019483A - 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 - Google Patents
細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2024019483A JP2024019483A JP2023208559A JP2023208559A JP2024019483A JP 2024019483 A JP2024019483 A JP 2024019483A JP 2023208559 A JP2023208559 A JP 2023208559A JP 2023208559 A JP2023208559 A JP 2023208559A JP 2024019483 A JP2024019483 A JP 2024019483A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- carbon atoms
- group
- substituted
- cells
- cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 181
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 103
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 title claims abstract description 74
- 230000035899 viability Effects 0.000 title claims abstract description 41
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title abstract description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 215
- KQJSQWZMSAGSHN-JJWQIEBTSA-N celastrol Chemical compound C([C@H]1[C@]2(C)CC[C@@]34C)[C@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@]2(C)C4=CC=C1C3=CC(=O)C(O)=C1C KQJSQWZMSAGSHN-JJWQIEBTSA-N 0.000 claims abstract description 209
- KQJSQWZMSAGSHN-UHFFFAOYSA-N (9beta,13alpha,14beta,20alpha)-3-hydroxy-9,13-dimethyl-2-oxo-24,25,26-trinoroleana-1(10),3,5,7-tetraen-29-oic acid Natural products CC12CCC3(C)C4CC(C)(C(O)=O)CCC4(C)CCC3(C)C2=CC=C2C1=CC(=O)C(O)=C2C KQJSQWZMSAGSHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 183
- AQKDBFWJOPNOKZ-UHFFFAOYSA-N Celastrol Natural products CC12CCC3(C)C4CC(C)(C(O)=O)CCC4(C)CCC3(C)C2=CC=C2C1=CC(=O)C(=O)C2C AQKDBFWJOPNOKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 183
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims abstract description 45
- 230000004044 response Effects 0.000 claims abstract description 42
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 41
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims abstract description 38
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims abstract description 31
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims abstract description 28
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 25
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 332
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 143
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 126
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 92
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 91
- WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N GCG Natural products C=1C(O)=C(O)C(O)=CC=1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2CC1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 61
- WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N (-)-Epigallocatechin-3-o-gallate Chemical compound O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N 0.000 claims description 57
- BGNXCDMCOKJUMV-UHFFFAOYSA-N Tert-Butylhydroquinone Chemical compound CC(C)(C)C1=CC(O)=CC=C1O BGNXCDMCOKJUMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 56
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 55
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 53
- 239000004250 tert-Butylhydroquinone Substances 0.000 claims description 53
- 235000019281 tert-butylhydroquinone Nutrition 0.000 claims description 53
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 claims description 42
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 41
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 claims description 40
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 35
- HPXDQBYDTJMQHA-UHFFFAOYSA-N Gedunin Natural products CC1CC2C3(C)C=CC(=O)C(C)(C)C3CC(OC(=O)C)C2(C)C45OC4C(=O)OC(C15)c6cocc6 HPXDQBYDTJMQHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- YJXDGWUNRYLINJ-BHAPSIHVSA-N gedunin Chemical compound C=1([C@H]2[C@]3(C)CC[C@@H]4[C@@]5(C)C=CC(=O)C(C)(C)[C@@H]5C[C@H]([C@]4([C@]33O[C@@H]3C(=O)O2)C)OC(=O)C)C=COC=1 YJXDGWUNRYLINJ-BHAPSIHVSA-N 0.000 claims description 34
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 32
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims description 31
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims description 31
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 25
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 claims description 25
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 22
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims description 21
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 claims description 20
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 claims description 20
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 claims description 20
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 20
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 20
- 230000034994 death Effects 0.000 claims description 19
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 19
- -1 dramapimod Chemical compound 0.000 claims description 18
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 16
- QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N Carnosic acid Natural products CC([C@@H]1CC2)(C)CCC[C@]1(C(O)=O)C1=C2C=C(C(C)C)C(O)=C1O QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N 0.000 claims description 14
- XUSYGBPHQBWGAD-PJSUUKDQSA-N Carnosol Chemical compound CC([C@@H]1C2)(C)CCC[C@@]11C(=O)O[C@@H]2C2=C1C(O)=C(O)C(C(C)C)=C2 XUSYGBPHQBWGAD-PJSUUKDQSA-N 0.000 claims description 14
- MMFRMKXYTWBMOM-UHFFFAOYSA-N Carnosol Natural products CCc1cc2C3CC4C(C)(C)CCCC4(C(=O)O3)c2c(O)c1O MMFRMKXYTWBMOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 14
- 235000004654 carnosol Nutrition 0.000 claims description 14
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 claims description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 14
- VYGYNVZNSSTDLJ-HKCOAVLJSA-N monorden Natural products CC1CC2OC2C=C/C=C/C(=O)CC3C(C(=CC(=C3Cl)O)O)C(=O)O1 VYGYNVZNSSTDLJ-HKCOAVLJSA-N 0.000 claims description 14
- AECPBJMOGBFQDN-YMYQVXQQSA-N radicicol Chemical compound C1CCCC(=O)C[C@H]2[C@H](Cl)C(=O)CC(=O)[C@H]2C(=O)O[C@H](C)C[C@H]2O[C@@H]21 AECPBJMOGBFQDN-YMYQVXQQSA-N 0.000 claims description 14
- 229930192524 radicicol Natural products 0.000 claims description 14
- 210000001196 cardiac muscle myoblast Anatomy 0.000 claims description 13
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 13
- JAVFSUSPBIUPLW-QEWGJZFKSA-N Withanolide Natural products O=C1[C@@H](C)[C@H](C)C[C@H]([C@@H](C)[C@@H]2[C@@]3(C)[C@H]([C@@H]4[C@@H]([C@]5(C)[C@@H](CC4)CCCC5)CC3)CC2)O1 JAVFSUSPBIUPLW-QEWGJZFKSA-N 0.000 claims description 11
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 11
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 10
- GEZHEQNLKAOMCA-RRZNCOCZSA-N (-)-gambogic acid Chemical compound C([C@@H]1[C@]2([C@@](C3=O)(C\C=C(\C)C(O)=O)OC1(C)C)O1)[C@H]3C=C2C(=O)C2=C1C(CC=C(C)C)=C1O[C@@](CCC=C(C)C)(C)C=CC1=C2O GEZHEQNLKAOMCA-RRZNCOCZSA-N 0.000 claims description 9
- JCSGFHVFHSKIJH-UHFFFAOYSA-N 3-(2,4-dichlorophenyl)-4-(1-methyl-3-indolyl)pyrrole-2,5-dione Chemical compound C12=CC=CC=C2N(C)C=C1C(C(NC1=O)=O)=C1C1=CC=C(Cl)C=C1Cl JCSGFHVFHSKIJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- BOJKULTULYSRAS-OTESTREVSA-N Andrographolide Chemical compound C([C@H]1[C@]2(C)CC[C@@H](O)[C@]([C@H]2CCC1=C)(CO)C)\C=C1/[C@H](O)COC1=O BOJKULTULYSRAS-OTESTREVSA-N 0.000 claims description 9
- YJQPYGGHQPGBLI-UHFFFAOYSA-N Novobiocin Natural products O1C(C)(C)C(OC)C(OC(N)=O)C(O)C1OC1=CC=C(C(O)=C(NC(=O)C=2C=C(CC=C(C)C)C(O)=CC=2)C(=O)O2)C2=C1C YJQPYGGHQPGBLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- ASLUCFFROXVMFL-UHFFFAOYSA-N andrographolide Natural products CC1(CO)C(O)CCC2(C)C(CC=C3/C(O)OCC3=O)C(=C)CCC12 ASLUCFFROXVMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 claims description 9
- GEZHEQNLKAOMCA-UHFFFAOYSA-N epiisogambogic acid Natural products O1C2(C(C3=O)(CC=C(C)C(O)=O)OC4(C)C)C4CC3C=C2C(=O)C2=C1C(CC=C(C)C)=C1OC(CCC=C(C)C)(C)C=CC1=C2O GEZHEQNLKAOMCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- GEZHEQNLKAOMCA-GXSDCXQCSA-N gambogic acid Natural products C([C@@H]1[C@]2([C@@](C3=O)(C\C=C(/C)C(O)=O)OC1(C)C)O1)[C@H]3C=C2C(=O)C2=C1C(CC=C(C)C)=C1O[C@@](CCC=C(C)C)(C)C=CC1=C2O GEZHEQNLKAOMCA-GXSDCXQCSA-N 0.000 claims description 9
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 claims description 9
- QALPNMQDVCOSMJ-UHFFFAOYSA-N isogambogic acid Natural products CC(=CCc1c2OC(C)(CC=C(C)C)C=Cc2c(O)c3C(=O)C4=CC5CC6C(C)(C)OC(CC=C(C)/C(=O)O)(C5=O)C46Oc13)C QALPNMQDVCOSMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229960002950 novobiocin Drugs 0.000 claims description 9
- YJQPYGGHQPGBLI-KGSXXDOSSA-N novobiocin Chemical compound O1C(C)(C)[C@H](OC)[C@@H](OC(N)=O)[C@@H](O)[C@@H]1OC1=CC=C(C(O)=C(NC(=O)C=2C=C(CC=C(C)C)C(O)=CC=2)C(=O)O2)C2=C1C YJQPYGGHQPGBLI-KGSXXDOSSA-N 0.000 claims description 9
- 230000002633 protecting effect Effects 0.000 claims description 9
- QHKYPYXTTXKZST-UHFFFAOYSA-N SB-202190 Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C(C=2C=CN=CC=2)N1 QHKYPYXTTXKZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims description 8
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 8
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 8
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 claims description 8
- QELUYTUMUWHWMC-UHFFFAOYSA-N edaravone Chemical compound O=C1CC(C)=NN1C1=CC=CC=C1 QELUYTUMUWHWMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229950009041 edaravone Drugs 0.000 claims description 8
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 8
- PQZVBIJEPVKNOZ-PCLZMVHQSA-N (2R)-2-[(1S)-1-hydroxy-1-[(5R,6R,8R,9S,10R,13S,14R,17S)-5,6,14,17-tetrahydroxy-10,13-dimethyl-1-oxo-6,7,8,9,11,12,15,16-octahydro-4H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]ethyl]-4,5-dimethyl-2,3-dihydropyran-6-one Chemical class C1C(C)=C(C)C(=O)O[C@H]1[C@](C)(O)[C@@]1(O)[C@@]2(C)CC[C@@H]3[C@@]4(C)C(=O)C=CC[C@]4(O)[C@H](O)C[C@H]3[C@]2(O)CC1 PQZVBIJEPVKNOZ-PCLZMVHQSA-N 0.000 claims description 7
- LZENMJMJWQSSNJ-UHFFFAOYSA-N 3H-1,2-dithiole-3-thione Chemical compound S=C1C=CSS1 LZENMJMJWQSSNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- TXGZJQLMVSIZEI-UQMAOPSPSA-N Bardoxolone Chemical compound C1=C(C#N)C(=O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5[C@H]4C(=O)C=C3[C@]21C TXGZJQLMVSIZEI-UQMAOPSPSA-N 0.000 claims description 7
- DNJVYWXIDISQRD-UHFFFAOYSA-N Cafestol Natural products C1CC2(CC3(CO)O)CC3CCC2C2(C)C1C(C=CO1)=C1CC2 DNJVYWXIDISQRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 7
- DNJVYWXIDISQRD-JTSSGKSMSA-N cafestol Chemical compound C([C@H]1C[C@]2(C[C@@]1(CO)O)CC1)C[C@H]2[C@@]2(C)[C@H]1C(C=CO1)=C1CC2 DNJVYWXIDISQRD-JTSSGKSMSA-N 0.000 claims description 7
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 claims description 7
- FGVVTMRZYROCTH-UHFFFAOYSA-N pyridine-2-thiol N-oxide Chemical compound [O-][N+]1=CC=CC=C1S FGVVTMRZYROCTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229960002026 pyrithione Drugs 0.000 claims description 7
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 claims description 7
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 claims description 7
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 claims description 7
- YCGBUPXEBUFYFV-UHFFFAOYSA-N withaferin A Natural products CC(C1CC(=C(CO)C(=O)O1)C)C2CCC3C4CC5OC56C(O)C=CC(O)C6(C)C4CCC23C YCGBUPXEBUFYFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LAJRJVDLKYGLOO-NLISZJEWSA-N (3z,5r,7s,8s,11z,13r,15s,16s)-3,5,7,11,13,15-hexamethyl-8,16-bis(1,3-oxazol-5-ylmethyl)-1,9-dioxacyclohexadeca-3,11-diene-2,10-dione Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C[C@H](\C=C(C)/C(=O)O[C@@H](CC=2OC=NC=2)[C@@H](C)C[C@@H](C)\C=C(C)/C(=O)O1)C)C1=CN=CO1 LAJRJVDLKYGLOO-NLISZJEWSA-N 0.000 claims description 6
- MWTUOSWPJOUADP-XDJHFCHBSA-N (5z)-5-(4-hydroxy-6-oxo-3-propan-2-ylcyclohexa-2,4-dien-1-ylidene)-4-(1-methylindol-5-yl)-1,2,4-triazolidin-3-one Chemical compound O=C1C=C(O)C(C(C)C)=C\C1=C\1N(C=2C=C3C=CN(C)C3=CC=2)C(=O)NN/1 MWTUOSWPJOUADP-XDJHFCHBSA-N 0.000 claims description 6
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- DQFBYFPFKXHELB-UHFFFAOYSA-N Chalcone Natural products C=1C=CC=CC=1C(=O)C=CC1=CC=CC=C1 DQFBYFPFKXHELB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LAJRJVDLKYGLOO-UHFFFAOYSA-N Conglobatin A Natural products O1C(=O)C(C)=CC(C)CC(C)C(CC=2OC=NC=2)OC(=O)C(C)=CC(C)CC(C)C1CC1=CN=CO1 LAJRJVDLKYGLOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 claims description 6
- VHLJDTBGULNCGF-UHFFFAOYSA-N Limonin Natural products CC1(C)OC2CC(=O)OCC23C4CCC5(C)C(CC(=O)C6OC56C4(C)C(=O)CC13)c7cocc7 VHLJDTBGULNCGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- RCQBVCISWCRYBO-SOYDKUNTSA-N Lupenone Natural products CC(=C)[C@@H]1CC[C@]2(C)CC[C@@H]3[C@H](CC[C@H]4[C@@]3(C)CC[C@H]5C(C)(C)C(=O)CC[C@]45C)[C@@H]12 RCQBVCISWCRYBO-SOYDKUNTSA-N 0.000 claims description 6
- GRBHNQFQFHLCHO-UHFFFAOYSA-N Lupenonq Natural products C1CC(=O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C GRBHNQFQFHLCHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- YJPIGAIKUZMOQA-UHFFFAOYSA-N Melatonin Natural products COC1=CC=C2N(C(C)=O)C=C(CCN)C2=C1 YJPIGAIKUZMOQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 claims description 6
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 claims description 6
- 235000005513 chalcones Nutrition 0.000 claims description 6
- LAJRJVDLKYGLOO-ZCEOMKPZSA-N conglobatin Natural products C[C@@H]1C[C@H](C)[C@H](Cc2ocnc2)OC(=O)C(=C[C@H](C)C[C@H](C)[C@H](Cc3ocnc3)OC(=O)C(=C1)C)C LAJRJVDLKYGLOO-ZCEOMKPZSA-N 0.000 claims description 6
- WENNXORDXYGDTP-UOUCMYEWSA-N cycloastragenol Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O WENNXORDXYGDTP-UOUCMYEWSA-N 0.000 claims description 6
- WENNXORDXYGDTP-UHFFFAOYSA-N cyclosiversigenin Natural products O1C(C(C)(O)C)CCC1(C)C1C2(C)CCC34CC4(CCC(O)C4(C)C)C4C(O)CC3C2(C)CC1O WENNXORDXYGDTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 claims description 6
- 229950004161 ganetespib Drugs 0.000 claims description 6
- KBDSLGBFQAGHBE-MSGMIQHVSA-N limonin Chemical compound C=1([C@H]2[C@]3(C)CC[C@H]4[C@@]([C@@]53O[C@@H]5C(=O)O2)(C)C(=O)C[C@@H]2[C@]34COC(=O)C[C@@H]3OC2(C)C)C=COC=1 KBDSLGBFQAGHBE-MSGMIQHVSA-N 0.000 claims description 6
- GRBHNQFQFHLCHO-BHMAJAPKSA-N lupenone Chemical compound C1CC(=O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C GRBHNQFQFHLCHO-BHMAJAPKSA-N 0.000 claims description 6
- DRLFMBDRBRZALE-UHFFFAOYSA-N melatonin Chemical compound COC1=CC=C2NC=C(CCNC(C)=O)C2=C1 DRLFMBDRBRZALE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960003987 melatonin Drugs 0.000 claims description 6
- MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M sodium butyrate Chemical compound [Na+].CCCC([O-])=O MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- HXJUTPCZVOIRIF-UHFFFAOYSA-N sulfolane Chemical compound O=S1(=O)CCCC1 HXJUTPCZVOIRIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- DQFBYFPFKXHELB-VAWYXSNFSA-N trans-chalcone Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 DQFBYFPFKXHELB-VAWYXSNFSA-N 0.000 claims description 6
- DBRXOUCRJQVYJQ-CKNDUULBSA-N withaferin A Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@@H]2[C@]3(CC[C@@H]4[C@@]5(C)C(=O)C=C[C@H](O)[C@@]65O[C@@H]6C[C@H]4[C@@H]3CC2)C)C)C(C)=C(CO)C(=O)O1 DBRXOUCRJQVYJQ-CKNDUULBSA-N 0.000 claims description 6
- ALJIEVIJBAJISI-PLRJNAJWSA-N (2z)-2-[(4-acetylphenyl)hydrazinylidene]-2-(3,3-dimethyl-4h-isoquinolin-1-yl)acetamide Chemical compound C1=CC(C(=O)C)=CC=C1N\N=C(/C(N)=O)C1=NC(C)(C)CC2=CC=CC=C12 ALJIEVIJBAJISI-PLRJNAJWSA-N 0.000 claims description 5
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 claims description 5
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 claims description 5
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000005764 Peripheral Arterial Disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000030831 Peripheral arterial occlusive disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 5
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 5
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 5
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 claims description 5
- RJCWBNBKOKFWNY-IDPLTSGASA-N n-[(4as,6ar,6bs,8ar,12as,14ar,14bs)-11-cyano-2,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-10,14-dioxo-1,3,4,5,6,7,8,8a,14a,14b-decahydropicen-4a-yl]-2,2-difluoropropanamide Chemical compound C([C@@]12C)=C(C#N)C(=O)C(C)(C)[C@@H]1CC[C@]1(C)C2=CC(=O)[C@@H]2[C@@H]3CC(C)(C)CC[C@]3(NC(=O)C(F)(F)C)CC[C@]21C RJCWBNBKOKFWNY-IDPLTSGASA-N 0.000 claims description 5
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 claims description 5
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 5
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical compound CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000007682 pyridoxal 5'-phosphate Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011589 pyridoxal 5'-phosphate Substances 0.000 claims description 5
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 claims description 4
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 4
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 4
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 claims description 4
- 206010053219 non-alcoholic steatohepatitis Diseases 0.000 claims description 4
- SASUFNRGCZMRFD-WVKTXKMSSA-N withanolide Chemical compound C1C(C)=C(C)C(=O)O[C@@H]1[C@](C)(O)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@@H]3[C@@]4(C)C(=O)C=C[C@H](O)[C@@]54O[C@@H]5C[C@H]3[C@@H]2CC1 SASUFNRGCZMRFD-WVKTXKMSSA-N 0.000 claims description 4
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010063897 Renal ischaemia Diseases 0.000 claims description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 claims description 3
- 230000003611 immunoevasive effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 claims description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 2
- KXDAEFPNCMNJSK-UHFFFAOYSA-N Benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC=C1 KXDAEFPNCMNJSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 6
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims 4
- MDZCSIDIPDZWKL-UHFFFAOYSA-N CHIR-98014 Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(N)=NC(NCCNC=2N=C(C(=CN=2)N2C=NC=C2)C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)=C1 MDZCSIDIPDZWKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- NVGFSTMGRRADRG-IOJSEOPQSA-N chembl553939 Chemical compound CS(O)(=O)=O.O=C1CC(C)(C)CC2=C1C(C(F)(F)F)=NN2C(C=1)=CC=C(C(N)=O)C=1N[C@H]1CC[C@H](OC(=O)CN)CC1 NVGFSTMGRRADRG-IOJSEOPQSA-N 0.000 claims 3
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 claims 2
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 claims 2
- 206010056328 Hepatic ischaemia Diseases 0.000 claims 2
- 206010022680 Intestinal ischaemia Diseases 0.000 claims 2
- 208000032109 Transient ischaemic attack Diseases 0.000 claims 2
- 201000004810 Vascular dementia Diseases 0.000 claims 2
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 claims 2
- 206010062198 microangiopathy Diseases 0.000 claims 2
- 208000024691 pancreas disease Diseases 0.000 claims 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 claims 2
- 201000010875 transient cerebral ischemia Diseases 0.000 claims 2
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 claims 1
- 210000002660 insulin-secreting cell Anatomy 0.000 claims 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 claims 1
- 229930182877 withaferin Natural products 0.000 claims 1
- 102100031701 Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Human genes 0.000 abstract description 62
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 53
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 abstract description 50
- 101710113864 Heat shock protein 90 Proteins 0.000 abstract description 32
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 abstract description 28
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 abstract description 22
- 230000035882 stress Effects 0.000 abstract description 21
- 239000012190 activator Substances 0.000 abstract description 19
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 abstract description 19
- 230000004224 protection Effects 0.000 abstract description 18
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 abstract description 16
- 230000030833 cell death Effects 0.000 abstract description 15
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 14
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 abstract description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 13
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 12
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 7
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 4
- 101000588302 Homo sapiens Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Proteins 0.000 abstract description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 abstract description 3
- 208000037906 ischaemic injury Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 abstract description 2
- 102100034051 Heat shock protein HSP 90-alpha Human genes 0.000 abstract 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 abstract 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 85
- 108010071382 NF-E2-Related Factor 2 Proteins 0.000 description 58
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 57
- 229940030275 epigallocatechin gallate Drugs 0.000 description 55
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 54
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 51
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 51
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 38
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 31
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 24
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 23
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 23
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 23
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 22
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 20
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 19
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 18
- 108010018924 Heme Oxygenase-1 Proteins 0.000 description 17
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 16
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 16
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 16
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 15
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 14
- 101710163595 Chaperone protein DnaK Proteins 0.000 description 13
- 101710178376 Heat shock 70 kDa protein Proteins 0.000 description 13
- 101710152018 Heat shock cognate 70 kDa protein Proteins 0.000 description 13
- 102000004034 Kelch-Like ECH-Associated Protein 1 Human genes 0.000 description 13
- 108090000484 Kelch-Like ECH-Associated Protein 1 Proteins 0.000 description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 13
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 12
- 230000001120 cytoprotective effect Effects 0.000 description 12
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 12
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 11
- 239000003481 heat shock protein 90 inhibitor Substances 0.000 description 11
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 11
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 11
- 102100028006 Heme oxygenase 1 Human genes 0.000 description 10
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 10
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 10
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 9
- 101001079613 Rattus norvegicus Heme oxygenase 1 Proteins 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 9
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 9
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 9
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 8
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 8
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 8
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 8
- 101000958041 Homo sapiens Musculin Proteins 0.000 description 8
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 8
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 8
- 102000006587 Glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 7
- 108700016172 Glutathione peroxidases Proteins 0.000 description 7
- 102000002737 Heme Oxygenase-1 Human genes 0.000 description 7
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 7
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 7
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 7
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 7
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 7
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 7
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 6
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 6
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 6
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 6
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 6
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 6
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 6
- SUVMJBTUFCVSAD-UHFFFAOYSA-N sulforaphane Chemical compound CS(=O)CCCCN=C=S SUVMJBTUFCVSAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010063907 Glutathione Reductase Proteins 0.000 description 5
- 102100036442 Glutathione reductase, mitochondrial Human genes 0.000 description 5
- 102100023915 Insulin Human genes 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 102000008221 Superoxide Dismutase-1 Human genes 0.000 description 5
- 108010021188 Superoxide Dismutase-1 Proteins 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 5
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 5
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 102000046949 human MSC Human genes 0.000 description 5
- 238000002952 image-based readout Methods 0.000 description 5
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 150000002630 limonoids Chemical class 0.000 description 5
- WDRYRZXSPDWGEB-UHFFFAOYSA-N lonidamine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(C(=O)O)=NN1CC1=CC=C(Cl)C=C1Cl WDRYRZXSPDWGEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960003538 lonidamine Drugs 0.000 description 5
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 5
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 5
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 5
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 5
- YNVAHBUBGBLIEY-WGDLNXRISA-N (1e,4e)-1,5-bis(2-hydroxyphenyl)penta-1,4-dien-3-one Chemical compound OC1=CC=CC=C1\C=C\C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1O YNVAHBUBGBLIEY-WGDLNXRISA-N 0.000 description 4
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108700032225 Antioxidant Response Elements Proteins 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 101100372758 Danio rerio vegfaa gene Proteins 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102100023374 Forkhead box protein M1 Human genes 0.000 description 4
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 101000907578 Homo sapiens Forkhead box protein M1 Proteins 0.000 description 4
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 4
- 101150030763 Vegfa gene Proteins 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 4
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 4
- 238000011278 co-treatment Methods 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 4
- 230000037351 starvation Effects 0.000 description 4
- 238000011476 stem cell transplantation Methods 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 4
- SUVMJBTUFCVSAD-JTQLQIEISA-N 4-Methylsulfinylbutyl isothiocyanate Natural products C[S@](=O)CCCCN=C=S SUVMJBTUFCVSAD-JTQLQIEISA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- JENNIHMMVJDSJI-JNEFGXKCSA-N Dihydrocelastrol Chemical compound C([C@]1(C)CC[C@]23C)C[C@@](C)(C(O)=O)C[C@@]1(C)[C@]3(C)CC[C@]1(C)C2=CCC2=C1C=C(O)C(O)=C2C JENNIHMMVJDSJI-JNEFGXKCSA-N 0.000 description 3
- WZAUFGYINZYCKH-UHFFFAOYSA-N Dihydrocelastrol Natural products CC12CCC3(C)C4CC(C)(C(O)=O)CCC4(C)CCC3(C)C2=CCC2=C1C=C(O)C(O)=C2C WZAUFGYINZYCKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- 102100036407 Thioredoxin Human genes 0.000 description 3
- AVDSOVJPJZVBTC-UHFFFAOYSA-N [4-[2-carbamoyl-5-[6,6-dimethyl-4-oxo-3-(trifluoromethyl)-5,7-dihydroindazol-1-yl]anilino]cyclohexyl] 2-aminoacetate Chemical compound O=C1CC(C)(C)CC2=C1C(C(F)(F)F)=NN2C(C=1)=CC=C(C(N)=O)C=1NC1CCC(OC(=O)CN)CC1 AVDSOVJPJZVBTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 230000003293 cardioprotective effect Effects 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 3
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 210000001105 femoral artery Anatomy 0.000 description 3
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 3
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 3
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- RJCWBNBKOKFWNY-WRJQSCGBSA-N n-[(4as,6ar,6bs,8ar,12as)-11-cyano-2,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-10,14-dioxo-1,3,4,5,6,7,8,8a,14a,14b-decahydropicen-4a-yl]-2,2-difluoropropanamide Chemical compound C([C@@]12C)=C(C#N)C(=O)C(C)(C)[C@@H]1CC[C@]1(C)C2=CC(=O)C2C3CC(C)(C)CC[C@]3(NC(=O)C(F)(F)C)CC[C@]21C RJCWBNBKOKFWNY-WRJQSCGBSA-N 0.000 description 3
- 230000005937 nuclear translocation Effects 0.000 description 3
- 208000030613 peripheral artery disease Diseases 0.000 description 3
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 3
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 229960005559 sulforaphane Drugs 0.000 description 3
- 235000015487 sulforaphane Nutrition 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 3
- 108060008226 thioredoxin Proteins 0.000 description 3
- 229940094937 thioredoxin Drugs 0.000 description 3
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 3
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 3
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YNVAHBUBGBLIEY-UHFFFAOYSA-N 1,5-bis(2-hydroxyphenyl)penta-1,4-dien-3-one Chemical compound OC1=CC=CC=C1C=CC(=O)C=CC1=CC=CC=C1O YNVAHBUBGBLIEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LEBVLXFERQHONN-UHFFFAOYSA-N 1-butyl-N-(2,6-dimethylphenyl)piperidine-2-carboxamide Chemical compound CCCCN1CCCCC1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C LEBVLXFERQHONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NDFXSHIIGXVOKT-UHFFFAOYSA-N 6-n-[2-[[4-(2,4-dichlorophenyl)-5-(1h-imidazol-2-yl)pyrimidin-2-yl]amino]ethyl]-3-nitropyridine-2,6-diamine Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(N)=NC(NCCNC=2N=C(C(C=3NC=CN=3)=CN=2)C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)=C1 NDFXSHIIGXVOKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150099575 CDC37 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100507655 Canis lupus familiaris HSPA1 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000036364 Cullin Ring E3 Ligases Human genes 0.000 description 2
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N Geldanamycin Natural products C1C(C)CC(OC)C(O)C(C)C=C(C)C(OC(N)=O)C(OC)CCC=C(C)C(=O)NC2=CC(=O)C(OC)=C1C2=O JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- 108050008339 Heat Shock Transcription Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000039 Heat Shock Transcription Factor Human genes 0.000 description 2
- 101000617130 Homo sapiens Stromal cell-derived factor 1 Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 2
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N Pyridoxal Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 description 2
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960003150 bupivacaine Drugs 0.000 description 2
- 229960001889 buprenorphine hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- UAIXRPCCYXNJMQ-RZIPZOSSSA-N buprenorphine hydrochlorie Chemical compound [Cl-].C([C@]12[C@H]3OC=4C(O)=CC=C(C2=4)C[C@@H]2[C@]11CC[C@]3([C@H](C1)[C@](C)(O)C(C)(C)C)OC)C[NH+]2CC1CC1 UAIXRPCCYXNJMQ-RZIPZOSSSA-N 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 2
- 230000004640 cellular pathway Effects 0.000 description 2
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 2
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 2
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 2
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- KYYQMVUKYQCSQY-AATRIKPKSA-N gamendazole Chemical compound C12=CC(C(F)(F)F)=CC=C2C(/C=C/C(=O)O)=NN1CC1=CC=C(Cl)C=C1Cl KYYQMVUKYQCSQY-AATRIKPKSA-N 0.000 description 2
- QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N geldanamycin Chemical compound N1C(=O)\C(C)=C/C=C\[C@@H](OC)[C@H](OC(N)=O)\C(C)=C/[C@@H](C)[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H](C)CC2=C(OC)C(=O)C=C1C2=O QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 101150024875 hbb2 gene Proteins 0.000 description 2
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 2
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000010872 live dead assay kit Methods 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000007959 normoxia Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000003314 quadriceps muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000009168 stem cell therapy Methods 0.000 description 2
- 238000009580 stem-cell therapy Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- DIDKQVSNYGHFSZ-UHFFFAOYSA-N (2-hydroxy-2-methoxyethyl) hypofluorite Chemical compound COC(O)COF DIDKQVSNYGHFSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DXWHOKCXBGLTMQ-UHFFFAOYSA-N (20R,22R)-6alpha,7alpha-epoxy-5alpha,20-dihydroxy-1-oxowitha-2,24-dienolide Natural products C1C(C)=C(C)C(=O)OC1C(C)(O)C1C2(C)CCC3C4(C)C(=O)C=CCC4(O)C4OC4C3C2CC1 DXWHOKCXBGLTMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- GAYQZIFREDQBAB-UHFFFAOYSA-N 1-phenyl-2h-tetrazol-1-ium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=NN=N[NH+]1C1=CC=CC=C1 GAYQZIFREDQBAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCSKNASZPVZHEG-UHFFFAOYSA-N 3,6-dimethyl-1,4-dioxane-2,5-dione;1,4-dioxane-2,5-dione Chemical group O=C1COC(=O)CO1.CC1OC(=O)C(C)OC1=O LCSKNASZPVZHEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007788 Acute Liver Failure Diseases 0.000 description 1
- 206010000804 Acute hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 101000697844 Arabidopsis thaliana Thiosulfate sulfurtransferase 16, chloroplastic Proteins 0.000 description 1
- 200000000007 Arterial disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282817 Bovidae Species 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100124874 Caenorhabditis elegans hsf-1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L Carbenoxolone sodium Chemical compound [Na+].[Na+].C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C([O-])=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](OC(=O)CCC([O-])=O)C1(C)C BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 208000002330 Congenital Heart Defects Diseases 0.000 description 1
- 229930153442 Curcuminoid Natural products 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000010334 End Stage Liver Disease Diseases 0.000 description 1
- 102100037241 Endoglin Human genes 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 208000023281 Fallot tetralogy Diseases 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical compound C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 1
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 1
- 108010045100 HSP27 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100039165 Heat shock protein beta-1 Human genes 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021866 Hepatocyte growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101000881679 Homo sapiens Endoglin Proteins 0.000 description 1
- 101000898034 Homo sapiens Hepatocyte growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 1
- 101000935043 Homo sapiens Integrin beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 1
- 101000868152 Homo sapiens Son of sevenless homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000800116 Homo sapiens Thy-1 membrane glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 208000028547 Inborn Urea Cycle disease Diseases 0.000 description 1
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 1
- 102100025304 Integrin beta-1 Human genes 0.000 description 1
- 208000035478 Interatrial communication Diseases 0.000 description 1
- 201000002287 Keratoconus Diseases 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 1
- 102100032241 Lactotransferrin Human genes 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000019149 MAP kinase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040008097 MAP kinase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710127797 Macrophage colony-stimulating factor 1 Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067028 Mitochondrial Permeability Transition Pore Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010073713 Musculoskeletal injury Diseases 0.000 description 1
- 208000021908 Myocardial disease Diseases 0.000 description 1
- 101001055320 Myxine glutinosa Insulin-like growth factor Proteins 0.000 description 1
- LRGDIOBCNBFLCO-UHFFFAOYSA-N N1C(CC2CC=CC=C12)=O.C(C1=CC=CC=C1)(=O)N Chemical compound N1C(CC2CC=CC=C12)=O.C(C1=CC=CC=C1)(=O)N LRGDIOBCNBFLCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710161549 NADPH quinone oxidoreductase Proteins 0.000 description 1
- 229910003204 NH2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101710114687 Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010053159 Organ failure Diseases 0.000 description 1
- 206010031149 Osteitis Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 206010033546 Pallor Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000025584 Pericardial disease Diseases 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012095 PrestoBlue reagent Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 102100021669 Stromal cell-derived factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 206010071436 Systolic dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 208000000491 Tendinopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010043255 Tendonitis Diseases 0.000 description 1
- 201000003005 Tetralogy of Fallot Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 102100033523 Thy-1 membrane glycoprotein Human genes 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 206010046996 Varicose vein Diseases 0.000 description 1
- 208000001910 Ventricular Heart Septal Defects Diseases 0.000 description 1
- 208000033774 Ventricular Remodeling Diseases 0.000 description 1
- DXWHOKCXBGLTMQ-SFQAJKIESA-N Withanolide A Chemical compound C1C(C)=C(C)C(=O)O[C@H]1[C@](C)(O)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@@H]3[C@@]4(C)C(=O)C=CC[C@]4(O)[C@H]4O[C@H]4[C@H]3[C@@H]2CC1 DXWHOKCXBGLTMQ-SFQAJKIESA-N 0.000 description 1
- SXPKTVWCWZNDHQ-UHFFFAOYSA-N Withanolide A Natural products CC1=C(C)C(=O)OC(C1)C(CO)C2CCC3C4C5OC5C6(O)CC=CC(=O)C6(C)C4CCC23C SXPKTVWCWZNDHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000002293 adipogenic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 210000002565 arteriole Anatomy 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 208000013914 atrial heart septal defect Diseases 0.000 description 1
- 206010003664 atrial septal defect Diseases 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229950002483 bardoxolone Drugs 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009530 blood pressure measurement Methods 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 208000018339 bone inflammation disease Diseases 0.000 description 1
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 description 1
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229960001736 buprenorphine Drugs 0.000 description 1
- RMRJXGBAOAMLHD-IHFGGWKQSA-N buprenorphine Chemical compound C([C@]12[C@H]3OC=4C(O)=CC=C(C2=4)C[C@@H]2[C@]11CC[C@]3([C@H](C1)[C@](C)(O)C(C)(C)C)OC)CN2CC1CC1 RMRJXGBAOAMLHD-IHFGGWKQSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000001269 cardiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005961 cardioprotection Effects 0.000 description 1
- 229940045200 cardioprotective agent Drugs 0.000 description 1
- 239000012659 cardioprotective agent Substances 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000000269 carotid artery external Anatomy 0.000 description 1
- IVUMCTKHWDRRMH-UHFFFAOYSA-N carprofen Chemical compound C1=CC(Cl)=C[C]2C3=CC=C(C(C(O)=O)C)C=C3N=C21 IVUMCTKHWDRRMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003184 carprofen Drugs 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000002032 cellular defenses Effects 0.000 description 1
- 230000010094 cellular senescence Effects 0.000 description 1
- 230000004637 cellular stress Effects 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 description 1
- 230000009816 chondrogenic differentiation Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 208000011444 chronic liver failure Diseases 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 208000028831 congenital heart disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 208000021921 corneal disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 125000004663 dialkyl amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- BVTBRVFYZUCAKH-UHFFFAOYSA-L disodium selenite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Se]([O-])=O BVTBRVFYZUCAKH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 description 1
- 125000000567 diterpene group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 229940031098 ethanolamine Drugs 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000003885 eye ointment Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 238000010230 functional analysis Methods 0.000 description 1
- 229930014097 furanoid Natural products 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000009395 genetic defect Effects 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000018578 heart valve disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 1
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 1
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000011694 lewis rat Methods 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 201000002818 limb ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011551 log transformation method Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 1
- 238000003468 luciferase reporter gene assay Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000003738 lymphoid progenitor cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007898 magnetic cell sorting Methods 0.000 description 1
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 239000006148 magnetic separator Substances 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 230000007257 malfunction Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- LGRLWUINFJPLSH-UHFFFAOYSA-N methanide Chemical compound [CH3-] LGRLWUINFJPLSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002894 multi-fate stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000651 myofibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000002182 neurohumoral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009818 osteogenic differentiation Effects 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 230000014306 paracrine signaling Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 208000003278 patent ductus arteriosus Diseases 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010411 postconditioning Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 1
- 230000036316 preload Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 238000000575 proteomic method Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229960003581 pyridoxal Drugs 0.000 description 1
- 235000008164 pyridoxal Nutrition 0.000 description 1
- 239000011674 pyridoxal Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002254 renal artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- JUVIOZPCNVVQFO-HBGVWJBISA-N rotenone Chemical compound O([C@H](CC1=C2O3)C(C)=C)C1=CC=C2C(=O)[C@@H]1[C@H]3COC2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 JUVIOZPCNVVQFO-HBGVWJBISA-N 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000007781 signaling event Effects 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 229960001471 sodium selenite Drugs 0.000 description 1
- 235000015921 sodium selenite Nutrition 0.000 description 1
- 239000011781 sodium selenite Substances 0.000 description 1
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000002660 stem cell treatment Methods 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012385 systemic delivery Methods 0.000 description 1
- 238000009121 systemic therapy Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 201000004415 tendinitis Diseases 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000009495 transient activation Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 238000013520 translational research Methods 0.000 description 1
- 125000003866 trichloromethyl group Chemical group ClC(Cl)(Cl)* 0.000 description 1
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 238000005829 trimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001113 umbilicus Anatomy 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 208000030954 urea cycle disease Diseases 0.000 description 1
- 208000027185 varicose disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 208000037997 venous disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 201000003130 ventricular septal defect Diseases 0.000 description 1
- 231100000747 viability assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000003026 viability measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0221—Freeze-process protecting agents, i.e. substances protecting cells from effects of the physical process, e.g. cryoprotectants, osmolarity regulators like oncotic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/0231—Chemically defined matrices, e.g. alginate gels, for immobilising, holding or storing cells, tissue or organs for preservation purposes; Chemically altering or fixing cells, tissue or organs, e.g. by cross-linking, for preservation purposes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
- A61K31/164—Amides, e.g. hydroxamic acids of a carboxylic acid with an aminoalcohol, e.g. ceramides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
Abstract
【課題】細胞の生存能および/もしくは機能を向上させるための、または各種損傷から細胞、組織、移植片、もしくは器官をin vitro、ex vivo、もしくはin vivoで保護するための、化合物、組成物、および方法が記載されている。【解決手段】試薬および組成物は、熱ショック反応および/または抗酸化反応の活性化に基づくものであり、たとえば、セラストロールやセラストロールアナログなどのHSP90補因子阻害剤を含み、単独または補助剤(たとえば、NRF-2アクチベーター、抗酸化剤など)との組合せで使用される。治療の向上はまた、パラクリンエフェクター産生およびシグナリングの増加を含みうる。低酸素もしくは酸化ストレス誘導細胞死などの損傷もしくはストレスに対する細胞、組織、移植片、もしくは器官の耐性を向上させるための、ならびに/または移植もしくは輸液された細胞の生存能および保持性を向上させるための、方法も記載されている。虚血傷害(たとえば、心筋梗塞、虚血/再灌流傷害)および関連ストレッサー(低酸素、酸化ストレス、炎症、敗血/ショックなど)の治療処置または予防も提供される。【選択図】なし
Description
関連出願の相互参照
本出願は、2016年6月15日出願の米国仮特許出願第62/350,258号明細書(その全内容が参照により本明細書に組み込まれる)に基づく利益を主張する。
本出願は、2016年6月15日出願の米国仮特許出願第62/350,258号明細書(その全内容が参照により本明細書に組み込まれる)に基づく利益を主張する。
本発明は、in vitro、ex vivo、またはin vivoで細胞、細胞調製物、組織、移植片、または器官の状態をモジュレートするための試薬、組成物、および方法を提供する。本発明はまた、細胞の生存能および/もしくは機能を向上させるための、またはin vitro、ex vivo、もしくはin vivoで細胞、組織、移植片、もしくは器官を各種損傷から保護するための、試薬、組成物、および方法に関する。試薬および組成物は、セラストロールやセラストロールアナログなどのHSP90補因子阻害剤を単独または補助剤(たとえば、NRF-2アクチベーター、抗酸化剤など)との組合せのいずれかで含みうる。
本発明はとくに、虚血傷害および関連ストレッサー(低酸素症、酸化ストレス、炎症、ショックなど)の治療または予防に関する。本発明はまたとくに、細胞ベースおよび組織ベースの療法(たとえば、再生医学、移植片、移植など)に関する。
過去何十年もの間の心臓学の多くの技術的進歩にもかかわらず、虚血性心疾患は、依然として世界的に罹患および死亡の主な原因となっている。心筋梗塞(MI)後、虚血心の再灌流を行うと、フリーラジカル産生の大幅増加、炎症細胞浸潤、および局所pHの変化が原因でさらなるストレスが誘発される。心保護手段を所定の位置に配置すれば、最終梗塞サイズを有意に低減可能である。機械技術(冠脈クランピングによる虚血/再灌流(I/R)の繰返しショートサイクル)をはじめとする心臓のプレおよびポストコンディショニングが研究されてきたが、最も簡単かつより臨床移行可能な技術は薬理学的コンディショニングであろう。こうした状況では、心保護は、ミトコンドリア透過性遷移孔(mPTP)開口の阻害および酸化ストレスの低下によりI/R誘導細胞死を低減して梗塞領域の低減および心室機能の保持をもたらすことを含むであろう。
本出願人らは、H9c2ラット心筋芽細胞の低酸素培養物およびMIのラットモデルでセラストロール(植物トリテルペン)の効果を調べ、エコーカルジオグラフィーおよび組織学的解析により治療有効性を評価した。本出願人は、H9c2細胞においてセラストロールが何分か以内に反応性酸素種(ROS)形成をトリガーし、転写因子である熱ショック因子1(HSF1)の核移行を誘導して熱ショック反応(HSR)を引き起こすことにより、HSP70さらにはHSP32(ヘムオキシゲナーゼ-1、HO-1)をはじめとする熱ショックタンパク質(HSP)の発現の増加をもたらすことを発見した。セラストロールは、低酸素ストレス下でH9c2の生存性を向上させた。またセラストロールにより誘導された主要なエフェクターとしてのHSF1およびHO-1は、細胞および組織の保護を促進することが機能解析から明らかにされた。ラット虚血心筋において、セラストロール治療を毎日行ったところ、心機能が向上し、かつ14日目に有害な左心室リモデリングが低減した。セラストロールは、心保護HO-1の発現をトリガーし、かつ線維症および梗塞サイズを抑制した。梗塞周囲領域では、セラストロールは、筋線維芽細胞およびマクロファージの浸潤を低減するとともに、TGF-βおよびコラーゲンのアップレギュレーションを減衰させた。
本出願人らは、セラストロール治療が、心筋細胞の生存、傷害および有害なリモデリングの低減を促進して心機能を保持する、ことを初めて報告し、かつセラストロールが、心筋梗塞の治療に有益な影響を及ぼしうる虚血コンディショニングをミミックする新規な強力薬理学的心保護剤になりうる、と結論した(非特許文献1)。
本出願人はまた、傷害心筋を再増殖するためにin vitroおよびex vivoで幹細胞保護に及ぼすセラストロールの影響を調べた。実際には、各種疾患状態に対する組織工学および再生医学のための新規な治療法として幹細胞移植が提案されてきた。幹細胞ベースの療法は、虚血障害および虚血疾患の前臨床動物モデルで探究され、脳卒中、MI、末梢動脈疾患(PAD)などの虚血障害の早期臨床試験に使用されてきた。
炎症は、MI後に非常に急速に発生し、かつ常在細胞および循環白血球による高レベルのROSおよび壊死細胞デブリの検出により引き起こされる。これらの細胞は、傷害組織に向かって移動し、さらにROS、タンパク質分解酵素、炎症誘発性および細胞傷害性の拡散性因子を放出し、かつ壊死細胞の貪食および細胞外マトリックス(ECM)成分の破壊に関与する。障害細胞組織およびデブリの排除に重要であるが、過剰または慢性になる炎症は、梗塞拡大、有害なリモデリング、および患者のアウトカム不良を招く(非特許文献2)、(非特許文献3)、(非特許文献4)、(非特許文献5)。
心筋は一般に非常に限られた再生能しか有していないので、心筋細胞死により空いた空間は、心機能に悪影響を及ぼす線維性瘢痕により置き換えられる。したがって、幹細胞移植などの細胞ベースの治療戦略を用いた心筋再生の促進に関する研究に高い関心が寄せられている。これまでのところ、幹細胞の好影響のほとんどは、病変部位内における幹細胞の分化でも取込みでも細胞融合でもなく既存の組織へのパラクリン作用から生じるように思われる。移植細胞のパラクリンシグナリングは、アポトーシス、炎症、および線維症を低減することにより作用しうるとともに、血管新生および他の修復プロセスの発生を刺激しうる(非特許文献2)、(非特許文献3)。
幹細胞療法は、虚血心の治癒を改善し、傷害心筋を再増殖し、かつ心機能を回復する可能性を有する。それは従来の治療の限界を超える治療解決策を提供し、治癒剤を送達することが見込まれる。幹細胞療法に対する非常に大きな期待およびその可能性は十分に理解されており、動物モデルおよび臨床試験、たとえば、心不全治療のための自己CD133+幹細胞移植片のIMPACT-CABGおよびCOMPARE-AMIでは、実現可能性および安全性が実証されている(非特許文献6)、(非特許文献7)。とはいえ、心血管疾患に対する細胞療法を含む最近の試験では、一貫性のないデータを有するさまざまな結果が得られており、幹細胞の治療有効性を担う機序に関する未解決の問題への関心が再喚起されている。実際には、細胞療法の臨床有効性を低減する最も大きな障害は、とくに虚血組織の移植細胞の生存能および保持の不良である。細胞型にかかわらず、移植の何日か後の虚血心筋で生存しているのは移植細胞の1%未満である(非特許文献8)、(非特許文献9)。
本出願人は、セラストロールが迅速かつ強力に内因性細胞保護性を活性化するとともに虚血移植片マイクロ環境をミミックする低酸素条件および酸化条件に対する幹細胞の生存性を向上させることを発見した。本出願人は、細胞の保護および生存に関与するエフェクターおよび重要遺伝子:Hif1a、HO-1(HSP32)、HSP27、HSP70、およびVEGFのアップレギュレーションを伴うPI3K/Akt経路およびp44/42MAPK(ERK1/2)経路の劇的かつ迅速な活性化、さらには細胞質から核へのHsf1移行の増加を観察した。本出願人は、セラストロールによる幹細胞のプレコンディショニングが虚血性心血管疾患などの臨床用途の安全かつ効率的な療法でありうると結論した(非特許文献10)。
S.Der Sarkissian et al.,British J.Pharmacol.,2014,171:5265-5279
Steffens,S.,et al.Thrombosis and Haemostasis,(2009),102(2),240-247.
Jiang,B.et al.Journal of Cardiovascular Translational Research,(2010),3(4),410-416.
Sun,Y.et al.Cardiovascular Research,(2009),81(3),482-490.
Dobaczewski,M.,et al.Journal of Molecular and Cellular Cardiology,(2010),48(3),504-511.
Forcillo,J.et al.,The Canadian journal of cardiology.2013;29:441-7.
Mansour S et al.,Bone Marrow Res.2011;2011:385124.
Pagani FD.et al.,J Am Coll Cardiol.2003;41:879-88.
Toma C.et al.,Circulation.2002;105:93-8.
Der Sarkissian et al.,Pre-Conditioning of Stem Cells With Celastrol to Enhance their Therapeutic Potential,Circulation 2011;124:A14198
それにもかかわらず、虚血部位に化合物または組成物を投与することによりまたはプレコンディショニングされた細胞を介してin vitro、ex vivo、またはin vivoの状況で細胞の生存性および機能を向上させるための強力な化合物、組成物、および方法の重要な必要性が依然として存在する。
本明細書は、いくつかの文書(その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる)を参照する。
本発明は、その第1の態様では、熱ショック反応および抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物、熱ショックタンパク質90(HSP90)阻害およびケルヒ様ECH関連タンパク質1(KEAP-1)阻害を活性化する1種以上の化合物、熱ショック因子タンパク質1(HSF1)経路および核因子(エリスロイド由来2)様2(NRF2)経路を活性化する1種以上の化合物、熱ショックタンパク質(HSP)および抗酸化剤エフェクターを活性化する1種以上の化合物を含みうる組成物または医薬組成物を提供する。
本発明は、より特定の態様では、天然トリテルペン、合成トリテルペンアナログ、および/または補助剤からなる群から選択される1種以上の化合物を含みうる組成物または医薬組成物を提供する。
本発明を遂行するために使用しうる化合物としては、たとえば、セラストロール、セラストロールアナログ、ウィタノライドファミリーの化合物もしくはそのアナログ、リモノイドファミリーの化合物(たとえばゲデュニン)もしくはそのアナログ、バルドキソロン/CDDO化合物もしくはそのアナログ(たとえばCDDO-メチル)、クルクミノイド(たとえばクルクミン)もしくはそのアナログ、カルノソールもしくはそのアナログ、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)もしくはそのアナログ、ビス(2-ヒドロキシベンジリデン)アセトン(2HBA)もしくはそのアナログ、アセチレン系三環式ビス(シアノエノン)(TBE-31)もしくはそのアナログ、エピガロカテキンガレート(EGCG)もしくはそのアナログ、ガンボギン酸もしくはそのアナログ、ノボビオシンもしくはそのアナログ、ロニダミンもしくはそのアナログ、アンドログラホリドもしくはそのアナログ、エダラボンもしくはそのアナログ、アスコルビン酸もしくはそのアナログ、またはそれらの任意の組合せが挙げられうる。
より特定的には、本発明は、式I
(式中、
R1は、たとえば、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択しうるし、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択しうるし、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換(たとえば-CH2CH2OHなど)または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択しうるし、
nは、0、1、2、3、または4でありうるし、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択しうるし、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうるし、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうるし、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択しうる)
の1種以上の化合物を用いて行いうる。
R1は、たとえば、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択しうるし、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択しうるし、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換(たとえば-CH2CH2OHなど)または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択しうるし、
nは、0、1、2、3、または4でありうるし、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択しうるし、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうるし、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうるし、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択しうる)
の1種以上の化合物を用いて行いうる。
本発明によれば、化合物としては、たとえば、式Ia
(式中、
R1は、たとえば、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択しうるし、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択しうるし、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択しうるし、
nは、0、1、2、3、または4でありうるし、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択しうるし、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうるし、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうるし、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択しうる)
の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグが挙げられうる。
R1は、たとえば、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択しうるし、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択しうるし、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択しうるし、
nは、0、1、2、3、または4でありうるし、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択しうるし、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうるし、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうるし、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択しうる)
の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグが挙げられうる。
本発明によれば、式IまたはIaの化合物は、R1が、より特定的には、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択しうる、Raが、H、1~6個の炭素原子の置換もしくは非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換もしくは非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択しうる、RbおよびRcが、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換もしくは非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換もしくは非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択しうる、R2およびR3が、-H、-ORd、および=Oからなる群から独立して選択しうる、Rdが、Hもしくは1~3個の炭素原子の低級アルキル基でありうる、ならびに/またはR4が、-HもしくはCH3でありうる、ものを包含する。
さらに、本発明によれば、式IまたはIaの化合物は、R1が、より特定的には、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択しうる、Raが、Hおよび1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択しうる、RbおよびRcが、-H、-OH、および-CH2CH2OHからなる群から独立して選択しうる、R2およびR3が、-H、-OH、-OCH3、および=Oからなる群から独立して選択しうる、ならびに/またはR4が、-HもしくはCH3でありうる、ものを包含する。
そのうえさらに、本発明によれば、式IまたはIaの化合物は、R1が、より特定的には、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択しうる、Raが、Hおよび-CH3からなる群から選択しうる、RbおよびRcが、-H、-OH、および-CH2CH2OHからなる群から独立して選択しうる、R2およびR3が、-OHおよび=Oからなる群から独立して選択しうる、ならびに/またはR4が-Hでありうる、ものを包含する。
本発明に包含される化合物の例示的な実施形態は、R1がNRbRcである式IまたはIaのものを含む。
化合物の例示的な実施形態は、図23に提供され、たとえば、アナログ1、アナログ2、アナログ3、アナログ4、アナログ5、アナログ6、またはジヒドロセラストロールとして同定されるセラストロールアナログを含みうる。
本発明によりとくに企図されるセラストロールアナログとしては、アナログ1、アナログ2、アナログ3、アナログ4、およびジヒドロセラストロールが挙げられる。より特定的には、アナログ1が企図される。
いくつかの場合には、セラストロールはとくに、本発明のいくつかの態様から除外しうる。たとえば、心虚血治療または幹細胞保護の方法におけるセラストロール単独の組成物または単独化合物としてのその使用は、文献に開示されている(Der Sarkissian et al.,Pre-Conditioning of Stem Cells With Celastrol to Enhance their Therapeutic Potential, Circulation 2011;124:A14198、S.Der Sarkissian et al.,British J.Pharmacol.,2014,171:5265-5279)。
したがって、組成物、方法、および使用がセラストロールを含む場合、それは、好ましくは、セラストロール以外の式Iもしくは式Iaの化合物でありうるか、あるいは他の化合物、すなわち、式Iもしくは式Iaの化合物および/または補助剤との組合せで使用しうる。
代替的に、本発明は、セラストロールの対応するR1、R2、R3、もしくはR4基のものとは異なる本明細書に定義されるR1、R2、R3、もしくはR4基を有する式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグを用いて行いうる。
本発明の実施形態によれば、補助剤は、たとえば、2HBA、アンドログラホリド、アスコルビン酸、カフェストール、カルノソールバルドキソロン-イミダゾール(CDDO-im)、カルコン、N6-[2-[[4-(2,4-ジクロロフェニル)-5-(1H-イミダゾール-2-イル)-2-ピリミジニル]アミノ]エチル]-3-ニトロ-2,6-ピリジンジアミン(CHIR98014)、コングロバチン、クルクミン、シクロアストラゲノール、1,2-ジチオール-3-チオン(D3T)、ドラマピモド、エダラボン、EGCG、ガンボギン酸、ガネテスピブ、ゲデュニン、IQ-1、リモニン、ロニダミン、メラトニン、ベンズアミドテトラヒドロインドロン、N886、アルキルアミノビフェニルアミド、ノボビオシン、ピリドキサール5’-リン酸(P5’-P)、ピリチオン、ケルセチン、ラディシコール、レスベラトロール、N-(2-シアノ-3,12-ジオキソ-28-ノルオレアナ-1,9(11)-ジエン-17-イル)-2,2-ジフルオロ-プロパンアミドまたはオマベロキソロン(RTA-408)、4-(4-フルオロフェニル)-2-(4-ヒドロキシフェニル)-5-(4-ピリジル)-1H-イミダゾール(SB202190)、3-(2,4-ジクロロフェニル)-4-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)-1H-ピロール-2,5-ジオン(SB216763)、SNX-5422(PF-04929113)、ナトリウムブチレート、スルホラン、テトラブロモベンゾトリアゾール(TBB)、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)、バルプロ酸(valporic acid)、ウィタフェリンA、ウィタノライド、エルゴステロール、ルペノン、および任意のかかる補助剤のアナログでありうる。
より特定的には、補助剤としては、たとえば、tBHQ、カルノソール、クルクミン、2HBA、もしくはEGCG、またはそれらのアナログが挙げられうる。
本発明は、その追加の態様では、たとえば、a)単独または1種以上の補助剤との組合せのいずれかで式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグと、b)担体または薬学的に許容可能な担体もしくは賦形剤と、を含みうる組成物または医薬組成物を提供する。
本発明は、細胞(単離された細胞)、細胞調製物、組織(単離された組織)、移植片(単離された移植片)、または器官(単離された器官)の状態をモジュレートする方法を提供する。かかるモジュレーションは、生存能、または死、損傷、および/もしくはストレスに対する耐性、さらには機能、を向上させるようにまたは保持するように行いうる。かかるモジュレーションは、細胞死に対する回復力プロファイルを向上させるように、酸化および/もしくは低酸素ストレッサーに対する耐性をより向上させるように、ならびに/または限定されるものではないが熱ショックタンパク質、抗酸化タンパク質、成長因子をはじめとする各種タンパク質の分泌増強および/もしくは細胞老化に関連するペプチドメディエーターの有害発現の低減を含みうるタンパク質発現のプロファイルを向上させるように行いうる。
本方法は、細胞、細胞調製物、組織、移植片、または器官と、a)式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグを含みうる組成物、b)式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグと補助剤とを含みうる組合せ物、c)式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグまたはそれらの組合せ物に接触させるまたは接触させた個別細胞調製物、あるいはd)式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグまたはそれらの組合せ物に接触させた個別細胞調製物のセクレトームまたは細胞培地と、を接触させることを含みうる。
本発明は、追加の態様では、各種病理学的病態(たとえば、虚血、虚血/再灌流、ショック、敗血)または操作手順(たとえば、凍結/解凍サイクル、細胞のカプセル化、拡大、富化、および精製の工程、移植片の調製/製造など)で発生しうる損傷またはストレッサー(たとえば、酸化、低酸素、炎症、熱、浸透圧、機械的作用)から細胞、組織、移植片、または器官を保護する方法を提供する。
本方法は、細胞、組織、移植片、または器官と、熱ショック反応および抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物、HSP90阻害およびKEAP-1阻害の経路を活性化する1種以上の化合物、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する1種以上の化合物、HSPおよび抗酸化剤を活性化する1種以上の化合物を含む組成物と、を接触させることを含みうる。
本方法はまた、細胞、組織、移植片、または器官と、天然トリテルペン、合成トリテルペンアナログ、および/または補助剤からなる群から選択される1種以上の化合物を含む組成物と、を接触させることを含みうる。
本方法は、より特定的には、細胞、組織、移植片、または器官と、式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグを含む組成物と、を接触させることを含みうる。本発明によれば、本方法は、in vitro、ex vivo、in vivoで行いうる。
したがって、本発明によれば、本方法は、細胞調製物、組織、または器官で実施されるex vivo法でありうる。こうしてコンディショニングされた細胞調製物、組織、または器官は、続いて、必要とする哺乳動物(たとえばヒト哺乳動物)に投与/移植しうる。本方法はまた、必要とする哺乳動物(たとえば、虚血疾患に罹患しているもしくは罹患しやすい、手術もしくは医学的介入を受けている、または細胞および組織の損失を伴う変性疾患を有している哺乳動物)に、組成物、組合せ物、個別細胞調製物、またはセクレトームを投与することにより実施されるin vivo法でありうる。
変性疾患は、心筋症、肝疾患、たとえば、非アルコール性脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝炎(NAFLD/NASH)、肝硬変、肺疾患たとえば慢性閉塞性肺疾患(COPD)、骨関節炎、膵障害たとえば糖尿病、神経変性たとえばアルツハイマー病、パーキンソン病、認知症、筋萎縮性側索硬化症(ALS)疾患などを含みうる。
組成物、組合せ物、個別細胞調製物、またはセクレトームは、手術または医学的介入の直前、実施時、または直後に投与しうるとともに、たとえば全身的にまたは局所的に投与しうる。
本方法はまた、培養下または凍結前に細胞で実施されるin vitro法でありうる。
細胞、細胞調製物、組織、移植片、または器官は、それらの使用前に、たとえば少なくとも5~180分間の継続時間にわたり、化合物、組合せ物、個別細胞調製物、またはセクレトームに接触させうる。
本発明の実施形態によれば、式Iまたは式Iaの化合物は、10-6M~10-10Mの濃度で使用しうる。
本方法は、化合物、組合せ物、細胞調製物、またはセクレトームを局所的にまたは全身的に投与することを含みうる。たとえば、化合物、組合せ物、またはセクレトームを投与する場合、それらは、全身的に(たとえば静脈内に)または局所的に(たとえば外用として損傷部位に)投与しうる。細胞調製物を投与する場合、それは、好ましくは局所的に(たとえば、虚血が疑われる部位、細胞保護を必要とする部位などに)投与しうる。
細胞は、不死化細胞または初代細胞でありうる。細胞は、たとえば、幹細胞、心筋細胞、心筋芽細胞、筋細胞、腎細胞、膵細胞、肝細胞、ニューロン、内皮細胞、上皮細胞でありうる。
幹細胞は、胚性、複能性、または多能性の幹細胞でありうる。幹細胞の例示的な実施形態としては、間葉幹細胞、造血幹細胞、誘導多能性幹細胞が挙げられうる。本発明によれば、細胞は非癌細胞である。
細胞は、好ましくは、たとえばヒトなどの哺乳動物由来である。細胞は、同種異系幹細胞移植または自己幹細胞移植に好適でありうる。細胞は、供給業者から入手しうるかまたはドナーもしくは宿主から単離しうる。細胞は、特異的な望ましいマーカーに基づいて選択しうる。
本発明によれば、本方法は、細胞、組織、移植片、または器官と1種以上の補助剤とをさらに接触させることを含みうる。そのため、細胞、組織、移植片、または器官は、a)式Iもしくは式Iaの化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグ)およびb)補助剤の両方を混合一体化して含む組成物に接触させうるか、あるいは化合物および補助剤を交互に添加しうる。
細胞、組織、移植片、または器官はまた、式I、式Iaの化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグ)と補助剤とを逐次的に接触させうる。
本発明はさらに、その態様では、虚血疾患、たとえば、虚血性心血管疾患、脳卒中、心筋梗塞(MI)、末梢動脈疾患(PAD)など、または細胞および組織の損失または変性が起こる疾患、たとえば、糖尿病、肝疾患、肺疾患など、を予防または治療する方法を提供する。
本方法は、それを必要とする哺乳動物に、熱ショック反応活性化および抗酸化反応活性化を活性化する1種以上の化合物、HSP90阻害およびKEAP-1阻害の経路を活性化する1種以上の化合物、HSF1活性化およびNRF2経路を活性化する1種以上の化合物、HSPおよび抗酸化剤を活性化する1種以上の化合物を含む組成物、またはかかる組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームを、投与することを含みうる。
本方法はまた、それを必要とする哺乳動物に、熱ショック反応活性化および抗酸化反応活性化を活性化する1種以上の化合物、HSP90阻害およびKEAP-1阻害の経路を活性化する1種以上の化合物、HSF1およびNRF2の経路を活性化する1種以上の化合物、HSPおよび抗酸化剤を活性化する1種以上の化合物を含む組成物でプレコンディショニングされた幹細胞調製物を、投与することを含みうる。
そのほか、本方法は、必要とする哺乳動物に、天然トリテルペン、合成トリテルペンアナログ、および/または補助剤からなる群から選択される1種以上の化合物を含む組成物を、投与することを含みうる。
本方法はまた、必要とする哺乳動物に、天然トリテルペン、合成トリテルペンアナログ、および/または補助剤からなる群から選択される1種以上の化合物を含む組成物でプレコンディショニングされた幹細胞調製物を、投与することを含みうる。
本方法はまた、必要とする哺乳動物に、本明細書に記載の1種以上の化合物および/または補助剤を含む組成物で処理された幹細胞調製物のセクレトームまたは培養培地を、投与することを含みうる。
本方法は、より特定的には、それを必要とする哺乳動物に、a)式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグを含む組成物、b)式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグでプレコンディショニングされた幹細胞調製物、またはc)かかる組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームを、投与することを含みうる。
本発明によれば、本方法は、a)式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグと、b)補助剤と、の組合せを含む組成物の投与、かかる組合せを含む組成物でプレコンディショニングされた幹細胞の投与、またはかかる組合せでコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームの投与を包含する。
本発明の実施形態によれば、幹細胞調製物は、必要とする哺乳動物から単離された自己幹細胞調製物でありうる。本発明のさらなる実施形態によれば、幹細胞調製物は、哺乳動物ドナーから単離された同種異系幹細胞調製物でありうる。哺乳動物への投与に好適であるために、同種異系幹細胞調製物は、好ましくはHLA型が一致する。幹細胞調製物はまた、免疫特権性、低免疫原性、または免疫回避性でありうる。
本発明はまた、その追加の態様では、熱ショック反応活性化および抗酸化反応活性化を活性化する1種以上の化合物、HSP90阻害およびKEAP-1阻害の経路を活性化する1種以上の化合物、HSF1活性化およびNRF2経路を活性化する1種以上の化合物、HSP活性化および抗酸化反応活性化を活性化する1種以上の化合物を含む組成物により、あるいはかかる組成物でコンディショニングされた個別細胞調製物のセクレトームにより、プレコンディショニングされた細胞調製物または単離された細胞、組織、移植片、もしくは器官調製物を提供する。
本発明は、そのさらなる態様では、天然トリテルペン、合成トリテルペンアナログ、および/または補助剤からなる群から選択される1種以上の化合物を含む組成物でプレコンディショニングされた単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物を提供する。
より特定的には、本発明は、そのさらなる追加の態様では、式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグを含む組成物により、またはかかる組成物でコンディショニングされた個別細胞調製物のセクレトームにより、プレコンディショニングされた細胞調製物または単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物を提供する。
本発明によれば、単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物は、a)式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグと、b)補助剤と、の組合せを含む組成物でプレコンディショニングしうる。
本発明によれば、単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物は、a)式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグと、b)補助剤と、の組合せを含む組成物でプレコンディショニングされた細胞のセクレトームによりコンディショニングしうる。
本発明の実施形態によれば、組成物は、使用前に調製物から洗浄除去しうるか、または調製物の一部として残留しうる。
例示的な実施形態によれば、細胞調製物は、幹細胞調製物、たとえば、in vitroで処理された幹細胞または以前に全身治療を受けたドナーから採取された幹細胞でありうる。
本発明の他の実施形態によれば、細胞調製物は細胞懸濁液でありうる。本発明のさらなる実施形態によれば、細胞調製物は三次元スキャフォールドの形態でありうる。三次元スキャフォールドを得るために、細胞は、細胞凝集体として、マイクロ担体の存在下で、アルギネートマイクロカプセル化物上で、ヒドロゲル(たとえば、熱可逆ヒドロゲル、キトサン系ヒドロゲルなど)中で、自己集合ペプチドで構成されたナノ構造スキャフォールド(Meng,X.et al.,SpringerPlus,2014,3:80)中で培養しうる。
本発明はさらに、幹細胞、組織、移植片、または器官の移植時の細胞損傷を低減する方法に関する。本方法は、幹細胞、組織、移植片、または器官と、熱ショック反応活性化および抗酸化反応活性化を活性化する1種以上の化合物、HSP90阻害およびKEAP-1阻害の経路を活性化する1種以上の化合物、HSF1活性化およびNRF2経路を活性化する1種以上の化合物、HSP活性化および抗酸化反応活性化を活性化する1種以上の化合物を含む組成物、またはかかる組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームと、を接触させることを含みうる。
本発明はさらに、幹細胞、組織、移植片、または器官の移植時の細胞損傷を低減する方法に関する。本方法は、幹細胞、組織、移植片、または器官と、天然トリテルペン、合成トリテルペンアナログ、および/または補助剤からなる群から選択される1種以上の化合物を含む組成物と、を接触させることを含みうる。
より特定的には、本発明はさらに、幹細胞、組織、移植片、または器官の移植時の細胞損傷を低減する方法を提供する。本方法は、移植前および/または移植時および/または移植後に、幹細胞、組織、移植片、または器官と、式I、式Iaの少なくとも1種の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグを含む組成物、またはかかる組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームと、を接触させることを含む。
本発明の実施形態によれば、本方法は、a)式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグと、b)補助剤と、の組合せを投与することを含みうる。
さらなる態様では、本発明は、細胞、組織、移植片、または器官をストレスまたは損傷から保護するための、熱ショック反応活性化および抗酸化反応活性化を活性化する1種以上の化合物、HSP90阻害およびKEAP-1阻害の経路を活性化する1種以上の化合物、HSF1活性化およびNRF2経路を活性化する1種以上の化合物、HSP活性化および抗酸化反応活性化を活性化する1種以上の化合物の使用に関する。
他のさらなる態様では、本発明は、細胞、組織、移植片、または器官をストレスまたは損傷から保護するための、天然トリテルペン、合成トリテルペンアナログ、および/または補助剤からなる群から選択される1種以上の化合物の使用に関する。
より特定の態様では、本発明は、細胞、組織、移植片、または器官をストレスまたは損傷から保護するための、式I、式Iaの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグの使用に関する。
本発明の追加の態様によれば、本発明は、a)式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグと、b)補助剤と、の組合せの使用に関する。
さらなる追加の態様では、本発明は、手術または医学的介入を必要とするまたは細胞ストレスもしくは細胞損傷を受けやすい患者を治療する方法を提供する。
本発明の実施形態によれば、本方法は、本明細書に定義される1種以上の化合物を含む組成物を投与することを含みうる。
本発明のより特定的な実施形態によれば、本方法は、手術または医学的介入の前および/または実施時に、式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグを含む組成物を投与することを含みうる。
その本発明のさらなる実施形態では、本方法は、a)式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグと、b)補助剤と、の組合せを投与することを含みうる。
本発明によれば、組成物は、局所的に、たとえば、手術または医学的介入の部位に投与しうる。本発明の他の実施形態によれば、組成物は全身投与しうる。
本発明によれば、化合物または組成物は、必要とする哺乳動物の細胞損傷を受けやすい部位に直接投与しうる。そのため、化合物または組成物は、細胞損傷を予防または治療するために投与しうる。
本発明はまた、式I、式Iaの化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグを含む第1のバイアルと、細胞を含む第2のバイアルと、を含みうるキットに関する。
本発明のさらなる実施形態によれば、キットは、補助剤の入った第3のバイアルを含みうる。本発明の実施形態によれば、細胞は幹細胞でありうる。
本発明はまた、異なる成分がプレ混合されているキットに関する。
本発明はまた、必要とする哺乳動物に組成物、組合せ物、個別細胞調製物、またはセクレトームをin vivo投与するのに好適なデバイスを提供する。デバイスは、たとえば、プレ充填されたシリンジ、または組成物、組合せ物、個別細胞調製物、もしくはセクレトームを収容しうるコンパートメントを有するシリンジでありうる。
本発明はまた、細胞、組織の調製に好適なデバイスを提供する。デバイスは、たとえば、組成物、組合せ物、個別細胞調製物、またはセクレトームを収容しうる細胞の選別用または細胞の培養もしくは拡大用のデバイスたとえばバイオリアクターでありうる。
本発明の追加の態様はまた、以下の項目1~31に提供される。
1. 細胞死に対する細胞の耐性を向上させる方法であって、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する有効量の1種以上の化合物と細胞とを接触させる工程を含む前記方法。
2. 細胞死に対する回復力プロファイルが向上した、酸化および/または低酸素ストレッサーに対する耐性がより向上した、ならびに/あるいは熱ショックタンパク質、抗酸化タンパク質、および/もしくは成長因子、抗炎症性サイトカイン、ケモカインの少なくとも1つの分泌増強および/または老化関連タンパク質などの有害ペプチドメディエーターの発現低減を含むタンパク質発現のプロファイルが向上した、コンディショニングされた細胞集団を生成する方法であって、細胞と、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する有効量の1種以上の化合物と、を接触させる工程を含む前記方法。
3. 移植または輸液された細胞の生存能および保持性を向上させる方法であって、移植または輸液の前および/または後に、細胞と、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する有効量の1種以上の化合物と、を接触させる工程を含む前記方法。
4. 前記方法が移植または輸液の前にex vivoまたはin vitroで細胞に接触させることを含む、本明細書に示される項目に記載の方法。前記方法がin vivoで細胞に接触させることを含む、本明細書に示される項目に記載の方法。
5. 前記方法が移植または輸液の前/後にin vivoで細胞に接触させることを含む、本明細書に示される項目に記載の方法。
6. 細胞の移植または輸液を必要とする被験体を治療する方法であって、(a)移植される細胞と、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する有効量の1種以上の化合物と、を接触させることと、(b)前記被験体において(a)の細胞を移植または輸液することと、を含む前記方法。
7. 移植後に、移植または輸液された細胞と、有効量の前記1種以上の化合物と、を接触させることをさらに含む、本明細書に示される項目に記載の方法。
8. 前記被験体が器官または組織の虚血または変性に罹患している、および/または前記器官または組織の虚血が心虚血である、本明細書に示される項目に記載の方法。変性は、膵細胞、心細胞、筋細胞、ニューロン、腎細胞、肝細胞などの損失を含む。
10. 前記被験体が心筋梗塞(MI)に罹患している、本明細書に示される項目に記載の方法。
11. 1種以上の化合物の少なくとも1つがHSP90阻害剤である、本明細書に示される項目に記載の方法。
12. HSP90阻害剤がHSP90のN末端またはC末端の阻害剤、より特定的にはHSP90補因子阻害剤である、本明細書に示される項目に記載の方法。
13. 1種以上の化合物の少なくとも1つがNRF2誘導活性または抗酸化活性を有する、本明細書に示される項目に記載の方法。
14. 前記1種以上の化合物が、セラストロールもしくはそのアナログ、ウィタノライドファミリーの化合物もしくはそのアナログ、リモノイドファミリーの化合物(たとえばゲデュニン)もしくはそのアナログ、バルドキソロン/CDDO化合物もしくはそのアナログ(たとえばCDDO-メチル)、クルクミノイド(たとえばクルクミン)もしくはそのアナログ、カルノソールもしくはそのアナログ、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)もしくはそのアナログ、ビス(2-ヒドロキシベンジリデン)アセトン(2HBA)もしくはそのアナログ、アセチレン系三環式ビス(シアノエノン)(TBE-31)もしくはそのアナログ、エピガロカテキンガレート(EGCG)もしくはそのアナログ、ガンボギン酸もしくはそのアナログ、ノボビオシンもしくはそのアナログ、ロニダミンもしくはそのアナログ、アンドログラホリドもしくはそのアナログ、エダラボンもしくはそのアナログ、アスコルビン酸もしくはそのアナログ、ガメンダゾールもしくはそのアナログ、スルフォラファンもしくはそのアナログ、スルホキシチオカルバメートアルキン(STCA)もしくはそのアナログ、またはそれらの任意の組合せを含む、本明細書に示される項目に記載の方法。
15. 前記1種以上の化合物が、(i)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)EGCGもしくはそのアナログ、(ii)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)tBHQもしくはそのアナログ、(iii)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)2HBAもしくはそのアナログ、(iv)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)クルクミンもしくはそのアナログ、(v)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)カルノソールもしくはそのアナログ、(vi)(a)ゲデュニンもしくはそのアナログ、および(b)EGCGもしくはそのアナログ、または(vii)(a)ゲデュニンもしくはそのアナログ、および(b)tBHQもしくはそのアナログ、(viii)(a)ゲデュニンもしくはそのアナログ、および(b)2HBAもしくはそのアナログ、(ix)(a)ゲデュニンもしくはそのアナログ、および(b)クルクミンもしくはそのアナログ、(x)(a)ゲデュニンもしくはそのアナログ、および(b)カルノソールもしくはそのアナログを含む、本明細書に示される項目に記載の方法。
16. 細胞が幹/多能性/前駆細胞または分化細胞である、本明細書に示される項目に記載の方法。
17. 幹/多能性/前駆細胞が間葉幹細胞、CD34+細胞、またはCD133+細胞である、本明細書に示される項目に記載の方法。
18. 細胞が分化細胞である、本明細書に示される項目に記載の方法。
19. 細胞が組織または器官に存在する、本明細書に示される項目に記載の方法。
20. 前記接触させることが、培養培地中への単回用量または複数回用量の1種以上の化合物の添加を含む、本明細書に示される項目に記載の方法。
21. 前記接触させることが、被験体に単回用量または複数回用量の1種以上の化合物を投与することを含む、本明細書に示される項目に記載の方法。
22. 細胞死に対する細胞の耐性の向上ならびに/または移植もしくは輸液された細胞の生存能および保持性の向上に有用でありうる1種以上の化合物を同定する方法であって、(i)細胞と前記1種以上の化合物とを接触させることと、(ii)前記細胞においてHSF1経路およびNRF2経路が活性化されるかを決定することであって、前記経路の活性化が、前記1種以上の化合物が細胞死に対する細胞の耐性の向上および/もしくは接触させた細胞の生存能および保持性の向上に有用でありうる指標となる、ならびに/または前記1種以上の化合物が細胞の機能の向上および/もしくは接触させた細胞のパラクリンセクレトームの改善に有用でありうる指標となる、決定することと、を含む前記方法。
23. 細胞が幹/前駆細胞または分化細胞である、本明細書に示される項目に記載の方法。
24. 幹/前駆細胞が間葉幹細胞、CD34+細胞、またはCD133+細胞である、本明細書に示される項目に記載の方法。
25. 細胞が分化細胞である、本明細書に示される項目に記載の方法。
26. 細胞が組織または器官に存在する、本明細書に示される項目に記載の方法。
27. 前記細胞においてHSF1およびNRF2の経路が活性化されるかを決定する工程が、HSF1および/またはNRF2の転写制御下で1つ以上の遺伝子の発現を測定することを含み、前記1つ以上の遺伝子の発現の増加が、HSF1および/またはNRF2の経路が活性化される指標となる、本明細書に示される項目に記載の方法。
28. HSF1またはNRF2の活性化後に発現された前記1つ以上の遺伝子が、熱ショックタンパク質(HSP)(たとえば、HSP90、HSP70)、グルタチオンS-トランスフェラーゼ、NADPH-キノンオキシドレダクターゼ1(NQO1)、成長因子(たとえば、VEGF、FGF2、HGF、IGF)、ヘムオキシゲナーゼ1(HO1)、スーパーオキシドジスムターゼ1~3(SOD1~3)、チオレドキシン(TRX)、カタラーゼ(CAT)、および/またはグルタチオンペルオキシダーゼ(GPx)である、本明細書に示される項目に記載の方法。
29. 前記細胞においてNRF2経路が活性化されるかを決定する工程が、1つ以上の炎症誘発性遺伝子の発現を測定することを含み、前記1つ以上の遺伝子の発現の減少が、HSF1および/またはNRF2の経路が活性化される指標となる、本明細書に示される項目に記載の方法。
30. 前記1つ以上の炎症性遺伝子がIL-1βおよび/またはTNFαである、本明細書に示される項目に記載の方法。
31. 前記方法が、低酸素および/または酸化、低酸素/再酸素化のストレス条件下で前記細胞の死を測定することを含む、本明細書に示される項目に記載の方法。
本発明によれば、HSP90阻害剤の代表的な実施形態は、たとえば、セラストロールまたは式Iのアナログを含みうる。
他の態様では、本発明は、1種以上の保護化合物との組合せでセラストロールまたは式Iのアナログを含む組成物に関する。
本発明によれば、1種以上の保護化合物は、NRF2アクチベーターや抗酸化剤などの補助剤でありうるとともに、たとえば、セラストロール、2HBA、アンドログラホリド、アスコルビン酸、カフェストール、カルノソールバルドキソロン-イミダゾール(CDDO-im)、カルコン、N6-[2-[[4-(2,4-ジクロロフェニル)-5-(1H-イミダゾール-2-イル)-2-ピリミジニル]アミノ]エチル]-3-ニトロ-2,6-ピリジンジアミン(CHIR98014)、コングロバチン、クルクミン、シクロアストラゲノール、1,2-ジチオール-3-チオン(D3T)、ドラマピモド、エダラボン、EGCG、ガンボギン酸、ガネテスピブ、ゲデュニン、IQ-1、リモニン、ロニダミン、メラトニンベンズアミドテトラヒドロインドロン、N886、アルキルアミノビフェニルアミド、ノボビオシン、ピリドキサール5’-リン酸(P5’-P)、ピリチオン、ケルセチン、ラディシコール、レスベラトロール、N-(2-シアノ-3,12-ジオキソ-28-ノルオレアナ-1,9(11)-ジエン-17-イル)-2,2-ジフルオロ-プロパンアミドまたはオマベロキソロン(RTA-408)、4-(4-フルオロフェニル)-2-(4-ヒドロキシフェニル)-5-(4-ピリジル)-1H-イミダゾール(SB202190)、3-(2,4-ジクロロフェニル)-4-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)-1H-ピロール-2,5-ジオン(SB216763)、SNX-5422(PF-04929113)、ナトリウムブチレート、スルホラン、テトラブロモベンゾトリアゾール(TBB)、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)、バルプロ酸(valporic acid)、ウィタフェリンA、ウィタノライド、エルゴステロール、ルペノン、および任意のかかる補助剤のアナログを含みうる。
さらなる態様では、本発明は、本明細書に記載の組成物との接触後に向上した特性を有しうる生細胞を含有する細胞調製物に関する。向上した特性としては、向上した機能、細胞保護に関連する遺伝子の発現の増加、向上した生存能、向上した生存性、各種病理学的病態(たとえば、虚血、虚血/再灌流、敗血症性ショック)または操作手順(たとえば、凍結/解凍サイクル、細胞のカプセル化、拡大、富化、および精製の工程、移植片の調製/製造など)で発生しうるストレッサー(たとえば、酸化、低酸素、炎症、熱、浸透圧、機械的作用)による細胞損傷に対する耐性の増加が挙げられうる。
細胞調製物は、幹細胞、たとえば、虚血による損傷の予防または修復に好適なものを含みうる。幹細胞は、供給業者から入手しうるか、治療を必要とする個体(すなわち自己)または適合ドナー(すなわち同種異系)から単離しうる。
本発明の実施形態によれば、細胞調製物または組織調製物は、本明細書に記載の組成物または試薬でプレコンディショニングしうる。本発明のさらなる実施形態によれば、本明細書に記載の組成物または試薬を含有する細胞調製物は、培地を含みうる。
本発明の他の目的、利点、および特徴は、添付の図面を参照して単なる例として与えられたその具体的な実施形態の以下の非制限的な説明を読めば、より明確になるであろう。
添付の図面は以下の通りである。
本出願では、本出願人は、セラストロールが、さまざまな損傷から細胞および組織を保護するのに有用でありうるとともに、移植片や器官などの複合組織の一部である細胞の生存性を向上させうることを示した。たとえば、セラストロール単独または補助剤との組合せでプレコンディショニングされた幹細胞は、ストレスおよび/または損傷から細胞を保護するとともに、パラクリンメディエーターおよび成長因子の分泌を刺激して細胞の治療プロファイルを向上させる。
本出願人はまた、類似または増加した細胞保護効果を有するセラストロール(Celastol)アナログを同定するとともに、セラストロールおよび/またはセラストロールアナログとの併用で相乗的または相加的な細胞保護効果を有するいくつか治療剤の組合せを同定した。
細胞保護HPSのアップレギュレーションをもたらすHSRおよび抗酸化反応の誘導のセラストロール機序は、図37に模式化される。
より特定的には、セラストロールの作用機序は、1)迅速かつ一過性の細胞防衛機序の活性化を含む。より特定的には、セラストロールは、転写因子核因子エリスロイド2関連因子2(NRF2)のリプレッサーKEAP1の活性をモジュレートすることにより、核へのNRF2の移行を可能にするとともに、ARE(抗酸化反応エレメント)に結合して保護抗酸化メディエーターおよびHO1(HSP32)などの酵素の転写を活性化する。
セラストロールの作用機序はまた、2)長期の保護および生存を保証する細胞経路の活性化を含む。すなわち、セラストロールは、HSP90の本質的なコシャペロンすなわちCdc37をアンタゴナイズすることにより、HSF1をそのシャペロンリプレッサーHSP90から解離させる。こうしてHSF1のリン酸化、三量体化、核移行、およびHSE(熱ショックエレメント)への結合が起こり、それによりHSP27、HSP32、およびHSP70をはじめとする細胞保護熱ショックタンパク質(HSP)のde novo転写が誘導される。
セラストロールの作用機序は、3)保護シグナリングの誘導/増幅をさらに含みうる。すなわち、セラストロールは、ROSの産生を刺激することにより上記の機序を活性化しうるとともに、それにより保護シグナリング経路の活性化を引き起こす。
本発明の記載に関連した(とくに特許請求の範囲に関連した)「a」および「an」および「the」という用語ならびに類似の参照語の使用は、とくに本明細書に指定がない限りまたは文脈上明らかな矛盾がない限り、単数形および複数形の両方を包含するものと解釈すべきである。
「comprising(~を含む)」、「having(~を有する)」、「including(~を含む)」および「containing(~を含有する)」という用語は、とくに断りのない限り、オープンエンドの用語として解釈すべきである(すなわち、「including,but not limited to(限定されるものではないが、~を含む)」を意味する)。
本明細書における値の範囲の列挙は、とくに本明細書に指定がない限り、この範囲内に含まれる個々の各値を個別に参照する簡略表記法として機能することが単に意図され、個々の各値は、あたかも本明細書に個別に列挙されたがごとく本明細書に組み込まれる。範囲内の値のサブセットもすべて、あたかも本明細書に個別に列挙されたがごとく本明細書に組み込まれる。
同様に、本明細書では、各種置換基およびこれらの置換基に対して挙げられた各種基を有する一般化学構造は、任意の置換基に対する任意の基の組合せにより得られるあらゆる分子を個別に参照する簡略表記法として機能することが意図される。各個別分子は、あたかも本明細書に個別に列挙されたがごとく本明細書に組み込まれる。さらに、一般化学構造内の分子のサブセットはすべて、および同一の化合物ファミリーに属する構造/分子もすべて、あたかも本明細書に個別に列挙されたがごとく本明細書に組み込まれる。
本明細書に開示される実施形態および特徴のいずれの組合せおよび部分的組合せもすべて、本発明に包含される。
本明細書では、「about(約)」という用語はその通常の意味を有する。「about(約)」という用語は、値がその値を決定するために利用されるデバイスもしくは方法に固有の誤差の変動を含むことまたは列挙された値に近い値、たとえば、列挙された値(もしくは値の範囲)の10%以内もしくは5%以内の値を包含することを示唆するために用いられる。
本明細書に記載の方法はすべて、とくに本明細書に指定がない限りまたは文脈上明らかな矛盾がない限り、任意の好適な順序で実施可能である。
本明細書に提供されるいずれの例または例示的表現(たとえば、「such as(~などの)」)の使用もすべて、単に本発明をより良く例示することが意図されたものであり、とくに特許請求されない限り本発明の範囲に限定を課すものではない。
とくに定義がない限り、本明細書で用いられる科学技術用語はすべて、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されているものと同一の意味を有する。
本発明は、細胞死に対する細胞の耐性(たとえば、酸化および/または低酸素ストレス誘導死、熱、酸化、H2O2、低酸素、カプセル化などをはじめとする他の物理的または化学的または機械的なストレッサーに対する耐性)を向上させる方法を提供する。前記方法は、細胞と、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する有効量の1種以上の化合物と、を接触させる工程を含む。本発明は、細胞死に対する細胞の耐性を向上させるためのおよび細胞の機能を向上させるための、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する1種以上の化合物の使用を提供する。
本発明はまた、移植または輸液された細胞の生存能および保持性を向上させる方法を提供する。前記方法は、移植または輸液の前および/または後に、細胞と、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する有効量の1種以上の化合物と、を接触させる工程を含む。
本発明はまた、幹細胞の治療プロファイルおよび機能を向上させる方法(移植片マイクロ環境のパラクリン寛解のための、成長因子、抗酸化酵素、熱ショックタンパク質、ケモカイン、および抗炎症性サイトカインをはじめとする有益なタンパク質の活性化)を提供する。前記方法は、幹細胞と、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する有効量の1種以上の化合物と、を接触させる工程を含む。
本発明はまた、細胞死(たとえば、低酸素および/もしくは酸化および/もしくは低酸素/再酸素化のストレスにより誘導される細胞死)に対する細胞の耐性の向上ならびに/または移植もしくは輸液された細胞の生存能および保持性の向上に有用でありうる1種以上の化合物を同定する方法を提供する。前記方法は、(i)細胞と前記1種以上の化合物とを接触させることと、(ii)HSF1経路およびNRF2経路が前記細胞において活性化されるかを決定することと、を含み、前記経路の活性化は、前記1種以上の化合物が細胞死に対する細胞の耐性の向上ならびに/または移植もしくは輸液された細胞の生存能および保持性の向上に有用でありうる指標となる。
本発明はまた、細胞の移植または輸液を必要とする被験体を治療する方法を提供する。前記方法は、(a)移植される細胞と、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する有効量の1種以上の化合物と、を接触させることと、(b)前記被験体において(a)の細胞を移植または輸液することと、を含む。
「熱ショック因子タンパク質1(HSF1)経路を活性化する化合物」という表現は、シャペロンリプレッサーHSP90複合体からのHSF1の放出の直接的もしくは間接的な増加および/またはその核への移行の活性化またはその細胞内含有量の増加によりHSF1媒介転写を増加させることが可能な任意の作用剤(低分子、ペプチド、タンパク質、抗体、オリゴマーなど)を意味する。それは、HSP90のコシャペロン、たとえば、Cdc37およびp23をアンタゴナイズして、HSF1の解離/活性化またはHSF1タンパク質自体をもたらす作用剤を含む。
「核因子(エリスロイド由来2)様2(NRF2)経路を活性化する化合物」という表現は、リプレッサーのケルヒ様ECH関連タンパク質1(KEAP1)からのNRF2の放出の直接的もしくは間接的な増加および/またはその核への移行の活性化またはその細胞内含有量の増加によりNRF2媒介転写を増加させることが可能な任意の作用剤(低分子、ペプチド、抗体、オリゴマーなど)を意味する。KEAP1は、NRF2との相互作用を媒介する6つのケルヒリピート(残基327~372、373~423、424~470、471~517、518~564、および565~611)を含む。NRF2の残基69~84、より特定的には残基76~84(保存ETGEモチーフを包含する)は、KEAP1との相互作用に関与する。NRF2経路を活性化する化合物の例としては、セラストロール、tBHQ、CDDO、カルノソール、アンドログラホリド、カフェストール、スルフォラファン、クルクミン、EGCG、ピリチオン、レスベラトロール、ゲデュニン、ケルセチン、ビス(2-ヒドロキシベンジリデン)アセトン(2-HBA)またはHBB2、1,2-ジチオール-3-チオン(D3T)、アセチレン系三環式ビス(シアノエノン)(TBE31)、アントテコール、ウィタノライド(Whitanolides)、およびそれらのアナログまたはアルカロイドのメンバー、キノンおよびキノンメチド、ガンボギン酸、リモノイド、ロテノイド、テルペノイド、フラノイド、カテキン、アルケニル、炭水化物、フラボノイド、または芳香族ファミリーが挙げられる。
実施形態では、本方法は、HSF1経路およびNRF2経路の両方を活性化する1種の化合物の使用を含む。他の実施形態では、本方法は、HSF1経路およびNRF2経路を活性化する2種以上の分子、たとえば、HSF1経路を活性化する第1の化合物とNRF2経路を活性化する第2の化合物、またはHSF1およびNRF2の経路を活性化する第1の化合物とNRF2経路のみを活性化する第2の化合物などの使用を含む。
実施形態では、1種以上の化合物は、セラストロールもしくはそのアナログ、ウィタノライドファミリーの化合物(たとえば、ウィタノライドA、ウィタフェリンA)もしくはそのアナログ、リモノイドファミリーの化合物(たとえばゲデュニン)もしくはそのアナログ、クルクミノイド(たとえばクルクミン)もしくはそのアナログ、スルフォラファンもしくはそのアナログ、スルホキシチオカルバメートアルキン(STCA)もしくはそのアナログ、ノボビオシンもしくはそのアナログ、ロニダミンもしくはそのアナログ、ガメンダゾールもしくはそのアナログ、バルドキソロン/CDDO化合物(たとえば、CDDO-im)もしくはそのアナログ、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)もしくはそのアナログ、(1E,4E)-1,5-ビス(2-ヒドロキシフェニル)-1,4-ペンタジエン-3-オン(HBB2)またはそのアナログ、アセチレン系三環式ビス(シアノエノン)(TBE-31)もしくはそのアナログ、エピガロカテキンガレート(EGCG)もしくはそのアナログ、またはそれらの任意の組合せを含む。本明細書で用いられる「アナログ」という用語は、参照化合物の基本構造または骨格構造を有するがHSF1経路および/またはNRF2経路の生物学的活性を消失しない1つ以上の修飾(たとえば、結合次数、1つ以上の原子および/または原子団の不在または存在、ならびにそれらの組合せ)を含む化合物を意味する。たとえば、セラストロールアナログ(五環式トリテルペン化合物)は、Klaic et al.,ACS Chem Biol.2012 May 18;7(5):928-937およびPCT国際公開第2015/148802号パンフレットに記載されている。
実施形態では、1種以上の化合物の少なくとも1つは、HSP90阻害剤、HSP90のN末端またはC末端の阻害剤、好ましくはHSP90補因子阻害剤である。
実施形態では、1種以上の化合物の少なくとも1つは、NRF2誘導活性を有する。
実施形態では、単独で使用される化合物の活性と比べて向上した(たとえば相乗的)活性を示す化合物の組合せが使用される。化合物の組合せの例としては、(i)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)EGCGもしくはそのアナログ、(ii)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)tBHQもしくはそのアナログ、(iii)(a)ゲデュニンもしくはそのアナログ、および(b)EGCGもしくはそのアナログ、(iv)(a)ゲデュニンもしくはそのアナログ、および(b)tBHQもしくはそのアナログ、(v)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)2HBAもしくはそのアナログ、(vi)(a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)クルクミンもしくはそのアナログ、または(vii)a)セラストロールもしくはそのアナログ、および(b)カルノソールもしくはそのアナログが挙げられる。
本明細書で用いられる場合、「補助剤」という用語は、細胞の生存性、生存能、またはストレスもしくは損傷に対する耐性を向上させうる作用剤を意味する。「補助剤」は、たとえば細胞表現型をモジュレートしうるとともに、抗酸化剤およびNRF2アクチベーターを含みうる。補助剤としては、たとえば、2HBA、アンドログラホリド、アスコルビン酸、カフェストール、カルノソールバルドキソロン-イミダゾール(CDDO-im)、カルコン、N6-[2-[[4-(2,4-ジクロロフェニル)-5-(1H-イミダゾール-2-イル)-2-ピリミジニル]アミノ]エチル]-3-ニトロ-2,6-ピリジンジアミン(CHIR98014)、コングロバチン、クルクミン、シクロアストラゲノール、1,2-ジチオール-3-チオン(D3T)、ドラマピモド、エダラボン、EGCG、ガンボギン酸、ガネテスピブ、ゲデュニン、IQ-1、リモニン、ロニダミド、メラトニン、ベンズアミドテトラヒドロインドロン、N886、アルキルアミノビフェニルアミド、ノボビオシン、ピリドキサール5’-リン酸(P5’-P)、ピリチオン、ケルセチン、ラディシコール、レスベラトロール、N-(2-シアノ-3,12-ジオキソ-28-ノルオレアナ-1,9(11)-ジエン-17-イル)-2,2-ジフルオロ-プロパンアミドまたはオマベロキソロン(RTA-408)、4-(4-フルオロフェニル)-2-(4-ヒドロキシフェニル)-5-(4-ピリジル)-1H-イミダゾール(SB202190)、3-(2,4-ジクロロフェニル)-4-(1-メチル-1H-インドール-3-イル)-1H-ピロール-2,5-ジオン(SB216763)、SNX-5422(PF-04929113)、ナトリウムブチレート、スルホラン、テトラブロモベンゾトリアゾール(TBB)、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)、バルプロ酸(valporic acid)、ウィタフェリンA、エルゴステロール、ルペノン、および任意のかかる補助剤のアナログが挙げられる。
本明細書で用いられる場合、「セクレトーム」という用語は、生物細胞、組織、器官、および生物により分泌される有機分子および/または無機元素を意味する。
本明細書で用いられる場合、「細胞の状態をモジュレートする」という表現は、細胞表現型、ある特定の遺伝子の発現パターン、またはある特定のタンパク質の分泌パターンの変化を意味する。
本明細書で用いられる1~6個の炭素原子の直線状アルキル基(すなわち、C1~C6アルキル)という表現は、直線状または分岐状の部分を有するかつ1~6個の炭素原子を含有する飽和1価炭化水素基を意味する。「分岐状アルキル基」という用語は、1つ以上の第3級または第4級炭素原子を含むアルキル基を意味する。アルキル基は、置換(OH、NH2、I、F、Cl、Br、CN)または非置換でありうる。かかる基の例としては、限定されるものではないが、メチル、エチル、プロピル、iso-プロピル、n-ブチル、iso-ブチル、およびtert-ブチルが挙げられる。
本明細書で用いられる場合、「置換」という用語は、基の1つ以上の水素原子が、独立して、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、ヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシ、クロロメチル、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、メトキシエチルなどから選択される置換基で置き換えられた基を意味する。
本明細書で用いられる場合、「1~3個の炭素原子の低級アルキル基」という用語は、メチル、エチル、プロピルを意味する。
実施形態では、1種以上の化合物は、1種以上の薬学的に許容される担体、賦形剤、および/または希釈剤をさらに含む医薬組成物中に存在する。本明細書で用いられる場合、「薬学的に許容可能」(または「生物学的に許容可能」)とは、in vivoで毒性のまたは有害な生物学的作用が不在である(または限られる)ことにより特徴付けられる材料を意味する。それは、過剰な毒性、炎症、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴うことなく、妥当な便益/リスク比に見合って、健全な医学的判断の範囲内で、被験体(たとえば、ヒト、動物)の生物学的流体および/または組織および/または器官に接触させて使用するのに好適な化合物、組成物、および/または投与製剤を意味する。
「薬学的に許容される担体、賦形剤、および/または希釈剤」という用語は、医薬組成物の調製に通常使用される添加剤を意味し、たとえば、溶媒、分散媒、生理食塩水溶液、界面活性剤、可溶化剤、滑沢剤、乳化剤、コーティング剤、抗細菌剤および抗真菌剤、キレート化剤、pH調整剤、無痛化剤、緩衝剤、還元剤、抗酸化剤、等張化剤、吸収遅延剤などを含む(たとえば、Rowe et al.,Handbook of Pharmaceutical Excipients,Pharmaceutical Press;6th edition,2009を参照されたい)。
実施形態では、1種以上の化合物は、細胞移植/組織工学のためのスキャフォールド材料、たとえば、幹細胞用のスキャフォールドとして通常使用されるバイオ材料、ポリマー、および/またはマトリックスとの組合せ/混合を行いうる。
1種以上の化合物は、任意の従来の経路を介した投与、たとえば、静脈内、経口、経真皮、腹腔内、皮下、経粘膜、筋肉内、鼻腔内、肺内、非経口、または局所の投与に供すべく製剤化されうる。かかる製剤の調製は、当技術分野で周知である(たとえば、Remington:The Science and Practice of Pharmacy,Lippincott Williams & Wilkins;21st edition,2005を参照されたい)。
また、以下の実施例に示されるように、1種以上の化合物で処理された細胞の培地(たとえばセクレトーム)は、死からの保護を付与しうるので、実施形態では、本明細書に記載の方法は、1種以上の化合物の存在下で細胞集団(たとえば、間葉幹細胞、CD133+細胞、膵細胞、腎細胞、上皮および内皮細胞)を培養することと、前記培養物から培地または上清を捕集することと、前記培地または上清の存在下で細胞を接触させることと、を含む。
実施形態では、細胞は、幹/多能性/前駆細胞または分化細胞、たとえば、造血幹細胞(HSC)、造血前駆細胞(HPC)、多能性前駆細胞(MPP)、リンパ球前駆細胞、ミエロイド前駆細胞、間葉幹細胞(MSC)、脂肪由来幹細胞(ADSC)などである。他の実施形態では、細胞は分化細胞である。
細胞の出発集団は、好適な細胞を含有する身体または身体の器官から得られうる。捕集された細胞は、当業者に公知の方法により、たとえば、ある特定のマーカー(たとえば、CD34+、CD133+)の発現に基づいて、ある特定の特性を有する細胞を富化しうる。さらに、出発細胞集団は、直接使用しうるか、またはより後の時点で使用するために凍結貯蔵しうる。そのため、最初に、細胞集団を、プラスチック製品への接着または特異的細胞マーカーに基づく細胞のネガティブ選択および/もしくはポジティブ選択を含む富化工程または精製工程に付して、出発細胞集団の提供、たとえば、MSCが富化された出発細胞集団の提供を行いうる。特異的細胞マーカーに基づいて前記出発細胞集団を単離する方法は、蛍光標示式細胞分取(FACS)技術または特異的細胞表面マーカーと相互作用する抗体もしくはリガンドが結合された固体もしくは不溶性基材を使用しうる。たとえば、抗体を含有する固体基材(たとえば、ビーズカラム、フラスコ、磁気粒子)に細胞を接触させ、そしていずれの非結合細胞も除去する。磁性または常磁性のビーズを含む固体基材を使用する場合、ビーズに結合された細胞は、磁気分離器を用いて容易に単離可能である(たとえば、磁気細胞選別、MACS(登録商標)、Miltenyi Biotec(登録商標)のCliniMacs(登録商標)製品系列)。
細胞は、たとえば大規模製造用バイオリアクターの通常の培養条件で、細胞の維持、成長、または増殖のいずれかに好適な培地中で培養しうる。細胞集団の培養条件は、さまざまな因子とくに出発細胞集団に依存して異なるであろう。好適な培養培地および条件は、当技術分野で周知である。本発明の方法は、組成に関連して、天然培地、半合成培地、または合成培地で行いうるとともに、形状に関連して、固形培地、半固形培地、または液状培地でありうる。また、細胞培養に使用される任意の栄養培地または規定培地でありうるとともに、1種以上の好適な因子が追加されうる。かかる培地は、典型的には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、リン、塩素、アミノ酸、ビタミン、サイトカイン、ホルモン、抗生物質、血清、脂肪酸、糖などを含む。培養時、必要に応じて、他の化学成分または生体成分を単独でまたは組合せで導入しうる。培地に導入されるかかる成分は、ウシ胎仔血清、ヒト血清、ウマ血清、インスリン、トランスフェリン、ラクトフェリン、コレステロール、エタノールアミン、亜セレン酸ナトリウム、モノチオグリセロール、2-メルカプトエタノール、ウシ血清アルブミン、ナトリウムピルベート、ポリエチレングリコール、各種ビタミン、各種アミノ酸、寒天、アガロース、コラーゲン、メチルセルロース、各種サイトカイン、各種成長因子などでありうる。培地は、化学的規定、血清フリー、および/またはゼノフリーでありうる。
1種以上の化合物による処理時または処理後、維持、成長、および/または増殖に好適な条件下で、細胞を培養しうる。
上記の効果を媒介するために使用される1種以上の化合物の量は、当業者により決定しうる。実施形態では、濃度は、約1nM~約1mM、約10nM~100μM、または約100nM~約10μMである。10-5M~10-10M(1μM~10μM、5μM~10mMを個別に含む)の濃度もまた、本発明により包含される。
実施形態では、上記の接触させることは、培養培地に単回用量または複数回用量の1種以上の化合物を添加することを含む。
化合物による処理は、in vivoで患者に、および細胞、組織、器官に施しうるとともに、次いで、以上に記載したように捕集しうる。
次いで、細胞集団を洗浄して1種以上の化合物および/または細胞培養物の任意の他の成分を取り出し、そして適切な細胞懸濁培地中に再懸濁し、ウォッシュアウトするかまたは短期使用のために接触維持するかまたは凍結保存に好適な培地などの長期貯蔵培地中に維持しうる。
細胞、より特定的には幹細胞の移植/輸液が奏効しうる被験体としては、心不全、狭心症、心筋梗塞(たとえば、心臓/心虚血)、不整脈、弁膜性心疾患、心筋/心膜疾患、先天性心疾患(たとえば、心房中隔欠損症、心室中隔欠損症、動脈管開存症、ファロー四徴症)、動脈疾患(たとえば、動脈硬化症、動脈瘤など)、静脈疾患(たとえば、静脈瘤)、重篤な肢または器官虚血(肝虚血など)、変形性関節疾患、骨関節炎、関節リウマチ、骨障害(たとえば、骨炎、骨粗鬆症、骨関節炎、骨肉腫)、皮膚障害(たとえば、乾癬、湿疹、皮膚癌)、角膜疾患(たとえば、円錐角膜、角膜炎)、肝疾患(たとえば、急性および慢性の肝不全、肝炎、尿素サイクル障害をはじめとする遺伝子欠損)、肺疾患(たとえば、COPD、ARDS、肺炎)、腎疾患(たとえば、CKD)、筋骨格傷害、腱炎、全身性疾患(たとえば、敗血症)、癌、障害、CNS疾患をはじめとする変性疾患(たとえば、アルツハイマー病、パーキンソン病、認知症、ALS)、および脊髄傷害に罹患している被験体が挙げられうる。
1種以上の化合物は、上述した疾患/障害/病態の治療に使用される他の療法/薬剤と組み合わせて使用しうる。1種以上の化合物は、任意の従来の剤形で投与または共投与しうる(たとえば、逐次的に、同時に、異なる時間に)。本発明との関連での共投与とは、改善された臨床アウトカムを達成するための協調治療の過程における2種以上の治療剤の投与を意味する。かかる共投与はまた、共延性でありうる。すなわち、時間のオーバーラップ期間中に生じうる。たとえば、1種以上の化合物は、追加の活性剤または療法を施す前、施すと同時、施す前かつ施した後、または施した後に被験体に投与しうる。活性剤(たとえば、1種以上の化合物および追加の活性剤)は、実施形態では、単一の組成物で組合せ/製剤化を行いうるので、同時に投与しうる。
任意の好適量の1種以上の化合物またはそれを含む医薬組成物は、被験体に投与しうる。投与量および投与頻度は、投与モードをはじめとする多くの因子に依存するであろう。所与の疾患または病態の予防、治療、または重症度低減を行う場合、1種以上の化合物/組成物の適切な投与量は、治療される疾患または病態のタイプ、疾患または病態の重症度および経過、化合物/組成物が予防または治療のいずれの目的で投与されるか、以前の療法、患者の臨床歴および化合物/組成物に対する反応、ならびに担当医の自由裁量に依存するであろう。化合物/組成物は、好適には、一度にまたは一連の処理にわたり患者に投与される。好ましくは、in vitroで用量-反応曲線を決定し、次いで、ヒトで試験する前に有用動物モデルで決定することが望ましい。本発明は、化合物およびそれを含む組成物の投与量を提供する。たとえば、疾患のタイプおよび重症度に依存して、1日当たり約1μg/kg~1000mg/kg体重(mg/kg)である。さらに、有効用量は、約0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg、0.4mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg、60mg/kg、70mg/kg、75mg/kg、80mg/kg、90mg/kg、100mg/kg、125mg/kg、150mg/kg、175mg/kg、または200mg/kgでありうるとともに、25mg/kgの増分で1000mg/kgまで増加させうるか、または上記の値の任意の2つの間の範囲内でありうる。典型的な一日投与量は、以上に挙げた因子に依存して、約1μg/kg~100mg/kgの範囲内でありうる。数日間またはそれ以上にわたり繰返し投与を行う場合、病態に依存して、疾患症状の所望の抑制または臨床エンドポイントが得られるまで、治療を継続する。1種以上の化合物は、適切な頻度で、たとえば、1回、1日1回、1週間に2回、毎週、2週間に1回、毎月投与しうる。しかしながら、他の投与レジメンが有用でありうる。この療法の進行状況は、従来の技術およびアッセイにより容易にモニターされる。実際の用量は、各患者に特有の臨床因子に基づいて、担当医が注意深く選択調整しなければならないので、これらは、単なるガイドラインである。最適用量は、当技術分野で公知の方法により決定されるであろう。また、患者の年齢などの因子および他の臨床関連因子により影響されるであろう。それに加えて、患者は、他の疾患または病態に対する投薬を受けうる。
同様に、プレコンディショニングされた細胞を患者に投与する場合、輸液される細胞の数は、性別、年齢、体重、疾患または障害のタイプ、障害のステージ、細胞集団中の所望の細胞のパーセント、治療効果を得るのに必要とする細胞の量などの因子を考慮するであろう。特定の一実施形態では、組成物は、静脈内注入により投与され、少なくとも約1×104細胞/kgまたは少なくとも約1×105細胞/kg、たとえば、約1×104細胞/kg~約1×108細胞/kg、または約1×104細胞/kg~約1×107細胞/kgを含む。
本明細書に記載の方法を用いて治療しうる被験体は、限定されるものではないが、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、モルモット、ラット、サル、または他のウシ科動物、ヒツジ科動物、ウマ科動物、イヌ科動物、ネコ科動物、齧歯動物、もしくはネズミ科動物の種、霊長動物をはじめとする哺乳動物、好ましくは男性または女性のヒトである。
本明細書に記載の方法の他の用途としては、たとえば、組織、移植片(たとえば、血管移植片)、およびex vivo器官灌流(たとえば、肺灌流(EVLP))の保持が挙げられる。
本発明を実施するための形態
本発明は、限定されるものではないが以下の実施例によりさらに詳細に例示される。
本発明は、限定されるものではないが以下の実施例によりさらに詳細に例示される。
実施例1:細胞コンディショニング剤としてのHSP90コシャペロン阻害剤
in vivo細胞生存能を保証可能であるコンディショニング化合物を同定する試みの中で、セラストロールを用いた予備証拠に基づいて、文献およびSigma-Aldrich(登録商標)構造検索オンラインツールを介して同定された構造類似性を有する12種を超える化合物をスクリーニングした。低酸素ストレスにチャレンジされたヒトMSCの生存能を向上させる化合物の能力を測定した。スクリーニングされた分子は、そのほとんどが天然化合物であり、トリテルペノイド、リモノイド、ウィタノライド、ステロール、イソプレノイド/ジテルペン、およびフラボノイドとして分類可能である。HSP909のNT領域のATP結合ポケットを直接標的とするラディシコール(NT阻害剤)などの古典的HSP90阻害剤もまた、スクリーニングに加えた。スクリーニングは、低酸素ストレス時の細胞の生存能の向上(図1:A、B)およびレポーターベースのアッセイから分かるHSP発現の誘導能(図1C)に関して化合物のさまざまな有効性を示した。セラストロールと構造類似性を共有するウィタノライドおよびゲデュニンをはじめとする上位にスコア付けされた化合物のいくつかでは、これらの効率的コンディショニング化合物の多くは、HSP90コシャペロン相互作用を標的とするHSP90モジュレーターファミリーに属することが、新たな証拠から示される10 11 12。
9Roe SM.Et al.,J Med Chem 1999 Jan 28;42(2):260-6.
10Patwardhan C.A.et al.,J Biol Chem.2013 Mar 8;288(10):7313-25.
11Sreeramulu S.et al.,Angew Chem Int Ed Engl.2009;48(32):5853-5.
12Gu M.,et al.Invest New Drugs.2014 Feb;32(1):68-74.
in vivo細胞生存能を保証可能であるコンディショニング化合物を同定する試みの中で、セラストロールを用いた予備証拠に基づいて、文献およびSigma-Aldrich(登録商標)構造検索オンラインツールを介して同定された構造類似性を有する12種を超える化合物をスクリーニングした。低酸素ストレスにチャレンジされたヒトMSCの生存能を向上させる化合物の能力を測定した。スクリーニングされた分子は、そのほとんどが天然化合物であり、トリテルペノイド、リモノイド、ウィタノライド、ステロール、イソプレノイド/ジテルペン、およびフラボノイドとして分類可能である。HSP909のNT領域のATP結合ポケットを直接標的とするラディシコール(NT阻害剤)などの古典的HSP90阻害剤もまた、スクリーニングに加えた。スクリーニングは、低酸素ストレス時の細胞の生存能の向上(図1:A、B)およびレポーターベースのアッセイから分かるHSP発現の誘導能(図1C)に関して化合物のさまざまな有効性を示した。セラストロールと構造類似性を共有するウィタノライドおよびゲデュニンをはじめとする上位にスコア付けされた化合物のいくつかでは、これらの効率的コンディショニング化合物の多くは、HSP90コシャペロン相互作用を標的とするHSP90モジュレーターファミリーに属することが、新たな証拠から示される10 11 12。
9Roe SM.Et al.,J Med Chem 1999 Jan 28;42(2):260-6.
10Patwardhan C.A.et al.,J Biol Chem.2013 Mar 8;288(10):7313-25.
11Sreeramulu S.et al.,Angew Chem Int Ed Engl.2009;48(32):5853-5.
12Gu M.,et al.Invest New Drugs.2014 Feb;32(1):68-74.
実施例2:セラストロールはin vivo移植細胞保持性を向上させるとともにパラクリン分泌を増強する
セラストロールは、移植細胞のin vivo生存能および保持性を向上させることが、以下に記載の結果から示される。簡潔に述べると、ラットMSCをコンディショニング化合物によりサスペンジョン状態で60分間処理した。次いで、細胞を洗浄し、蛍光セルトラッカーで標識し、そしてt=0でラット虚血左後肢に注射した。ART製のOptix(商標)MX3分子イメージングシステムを用いて9日目までin vivoで移植細胞を撮像した(図2:A、B)。プレ処理幹細胞のin vivo生存能および保持性の向上が結果から示され、レーザードップラースキャニングから分かる血流再建の向上傾向が説明される(図3)。ヒトMSCのセラストロール処理は、培養培地中で熱ショックタンパク質(HSP90aは7,0倍、HSP90bは2,2倍、HO1は2,2倍、HSP70は1,8倍)、成長因子およびサイトカイン(MCSFは24,4倍、HGFは2,1倍)、ならびに抗酸化反応関連遺伝子(GSHは2,8倍、TRXは2,5倍、CATは1,7倍)のレベルの増加から分かるように、幹細胞機能を維持および向上させることが、プロテオミクス分析から示される(図4)。
セラストロールは、移植細胞のin vivo生存能および保持性を向上させることが、以下に記載の結果から示される。簡潔に述べると、ラットMSCをコンディショニング化合物によりサスペンジョン状態で60分間処理した。次いで、細胞を洗浄し、蛍光セルトラッカーで標識し、そしてt=0でラット虚血左後肢に注射した。ART製のOptix(商標)MX3分子イメージングシステムを用いて9日目までin vivoで移植細胞を撮像した(図2:A、B)。プレ処理幹細胞のin vivo生存能および保持性の向上が結果から示され、レーザードップラースキャニングから分かる血流再建の向上傾向が説明される(図3)。ヒトMSCのセラストロール処理は、培養培地中で熱ショックタンパク質(HSP90aは7,0倍、HSP90bは2,2倍、HO1は2,2倍、HSP70は1,8倍)、成長因子およびサイトカイン(MCSFは24,4倍、HGFは2,1倍)、ならびに抗酸化反応関連遺伝子(GSHは2,8倍、TRXは2,5倍、CATは1,7倍)のレベルの増加から分かるように、幹細胞機能を維持および向上させることが、プロテオミクス分析から示される(図4)。
簡潔に述べると、セラストロール(10E-6M~10E-8M)または媒体(ジメチルスルホキシド(DMSO))のいずれかを含有する低血清培地(αMEM 1×、1%(ウシ胎児血清(FBS)、1%ペニシリン―ストレプトマイシン(P-S))と共にラットMSCを1時間インキュベートした。次いで、培地を吸引し、培地(αMEM 1×、1%FBS、1%P-S)を3回交換して細胞を洗浄する。細胞をトリプシン処理し、蛍光イメージング(Optix MX2)で検出可能にする製造業者のプロトコルに従ってVybrant CFDA(Thermo Fisher Scientific)で染色する。次いで、Countess II FL自動セルカウンター(Thermo Fisher Scientific)を用いて細胞をカウントし、26G針およびシリンジを用いて全体積200μl中の生存可能な300万MSCをラット虚血後肢モデルの5つの異なる点に注射する。
スプラーグ・ドーリーラット(CD CRL:Charles River)を麻酔し(イソフルラン2.5~3.0%(Abbott Laboratories,Abbott Park,IL)、1L/min酸素)、ブピバカイン(bupivicaine)を大腿(2mg/kg sc qd)の切開部位に注射する。左総大腿動脈を透明化し、伏在動脈の遠位部およびすべて側副枝および静脈を切除する。鼡径靭帯と膝との間の動脈の近位部および遠位部を切除する。そのため、大腿動脈の枝はいずれも側副枝を形成できない。各動物の右下肢をインタクトな状態に保持し、対照として機能させる。Vicryl 5-0を用いて創傷を閉じる。動物に塩酸ブプレノルフィン(0.05mg/kg s.c. bid 3日間)を投与し、Diamondソフトリター上のケージに配置する。外科手順の翌日、PBSまたは媒体もしくは実験化合物で前処理されたMSCを注射する。動物を麻酔し(イソフルラン2.5~3.0%(Abbott Laboratories,Abbott Park,IL)、1L/min酸素)、26G針およびシリンジを用いて四頭筋の5つの異なる点に細胞を直接注射する。
ART製のOptix(商標)MX3分子イメージングシステムを用いて9日目までin vivoで移植細胞を撮像し、並行的に、ラットの後肢のドップラースキャニング(Moor instruments)を行うことにより、コンディショニングされたrMSCの移植後、ラット下肢の虚血モデル(n=3)で血流(膝下)の回復を調べた。
セラストロールでコンディショニングされた細胞は、媒体で処理された細胞と比較して、ラット虚血後肢に移植された幹細胞の生存能および保持性を向上させ、かつ罹患肢の血流の漸進的回復(対数パターンに見られる)を改善する。
実施例3:幹細胞ファーマコオプティマイザーの同定
幹細胞ファーマコオプティマイザーの同定基準
幹細胞ファーマコオプティマイザーの同定基準は、以下の2つの主要条件を好ましく満たす処理の能力に依拠する。
1. 細胞の処理は、虚血組織で観測される低酸素および/または酸化マイクロ環境においてとくに幹細胞移植との関連でin vivo生存能および保持プロファイルの向上を好ましくもたらす。
2. 細胞の処理は、正常な細胞表現型および/または機能の維持をできる限り好ましく可能にする。しかしながら、きわめて望ましいファーマコオプティマイザーはまた、有益または治療的な表現型を促進する細胞機能を向上させうる。組織修復がパラクリン活性を含む幹細胞の場合には、ファーマコオプティマイザーは、有益なタンパク質の分泌増強および/または有害なタンパク質の産生低減を好ましく行いうるとともに、それにより、移植片環境に対して有利なバランスおよび効果が得られる。
幹細胞ファーマコオプティマイザーの同定基準
幹細胞ファーマコオプティマイザーの同定基準は、以下の2つの主要条件を好ましく満たす処理の能力に依拠する。
1. 細胞の処理は、虚血組織で観測される低酸素および/または酸化マイクロ環境においてとくに幹細胞移植との関連でin vivo生存能および保持プロファイルの向上を好ましくもたらす。
2. 細胞の処理は、正常な細胞表現型および/または機能の維持をできる限り好ましく可能にする。しかしながら、きわめて望ましいファーマコオプティマイザーはまた、有益または治療的な表現型を促進する細胞機能を向上させうる。組織修復がパラクリン活性を含む幹細胞の場合には、ファーマコオプティマイザーは、有益なタンパク質の分泌増強および/または有害なタンパク質の産生低減を好ましく行いうるとともに、それにより、移植片環境に対して有利なバランスおよび効果が得られる。
候補幹細胞ファーマコオプティマイザーの試験方法
第1の主要条件を試験するために、MSC(ラットまたはヒトのいずれかの起源)を候補ファーマコオプティマイザーで処理し、洗浄し、虚血移植片マイクロ環境に存在する主要な致死ストレッサーをミミックする低酸素/血清飢餓(<1%O2低酸素チャンバー内の低血清培地中に48~72時間)または酸化ストレス(0~2mM H2O2でスパイクされた培地中で1時間インキュベーション)に付した。LIVE/DEAD生存能/細胞傷害キット(Life Technologies(商標))を用いて細胞の生存状態を評価し、Harmony自動解析ソフトウェア(Perkin Elmer(商標))を備えたOperettaハイコンテントスクリーニング(HCS)機器により結果を定量する。
第1の主要条件を試験するために、MSC(ラットまたはヒトのいずれかの起源)を候補ファーマコオプティマイザーで処理し、洗浄し、虚血移植片マイクロ環境に存在する主要な致死ストレッサーをミミックする低酸素/血清飢餓(<1%O2低酸素チャンバー内の低血清培地中に48~72時間)または酸化ストレス(0~2mM H2O2でスパイクされた培地中で1時間インキュベーション)に付した。LIVE/DEAD生存能/細胞傷害キット(Life Technologies(商標))を用いて細胞の生存状態を評価し、Harmony自動解析ソフトウェア(Perkin Elmer(商標))を備えたOperettaハイコンテントスクリーニング(HCS)機器により結果を定量する。
第2の主要条件を試験するために、MSCを候補ファーマコオプティマイザーで1時間処理し、続いて、3時間のウォッシュアウト時間を設けた。細胞mRNAを抽出し、リアルタイムPCRにより対象遺伝子の発現を定量した。追加のMSC培養では、細胞を1時間処理し、洗浄し、低血清培地中で24時間培養した。次いで、MSCにより分泌されたパラクリン因子を含有する培地をH9c2心筋芽細胞細胞系に接触させて配置した。次いで、H9c2細胞を低酸素/血清飢餓(<1%O2低酸素チャンバー内の低血清培地中に48時間)または酸化ストレス(0~1mM H2O2でスパイクされた培地中で1時間インキュベーション)に付した。以上に詳述したLIVE/DEADアッセイを用いてH9c2細胞の生存状態を評価した。
コンディショニングされたMSCの保護およびコンディショニングされたMSC培地でインキュベートしたときにパラクリン機序によりH9c2に与えられる保護を担う機序を同定するために、2つの主要な細胞経路、すなわち、HSP90標的化を介する熱ショック経路(HSF1活性化)および/または核因子(エリスロイド由来2)様2(NRF2)経路を標的とするコンディショニング剤として各種分子を選択した。
試験化合物(図5):
・セラストロール:強力なHSF1アクチベーター(HSP90補因子阻害)、NRF2アクチベーター
・ゲデュニン:HSF1アクチベーター(HSP90補因子阻害)、NRF2アクチベーター
・ラディシコール:HSF1アクチベーター(HSP90古典的ATP阻害剤)、NRF2活性の報告なし
・EGCG:HSF1活性化の報告なし(HSP90-CT阻害)、NRF2アクチベーター
・tBHQ:HSF1活性化の報告なし、NRF2アクチベーター
・セラストロール:強力なHSF1アクチベーター(HSP90補因子阻害)、NRF2アクチベーター
・ゲデュニン:HSF1アクチベーター(HSP90補因子阻害)、NRF2アクチベーター
・ラディシコール:HSF1アクチベーター(HSP90古典的ATP阻害剤)、NRF2活性の報告なし
・EGCG:HSF1活性化の報告なし(HSP90-CT阻害)、NRF2アクチベーター
・tBHQ:HSF1活性化の報告なし、NRF2アクチベーター
図6~9に報告されるこれらの実験の結果は、以下のようにまとめうる。
・HSF1誘導可能な化合物(セラストロール、ゲデュニン、ラディシコール)は、低酸素誘導死から細胞を保護する(図6)。
・HSP90補因子阻害剤(セラストロール、ゲデュニン)は、パラクリン有効性のメディエーターを生成する(図6、7)。
・HSP90NT阻害剤(ラディシコール)は、パラクリン有効性のメディエーターを生成しない(図7)。
・HSP90CT阻害剤(EGCG)は、処理された細胞を低酸素から保護しないが、セラストロール誘導保護に関して相加効果を生じる。(図6)。
・NRF2アクチベーター(EGCG、ゲデュニン、セラストロール)は、処理された細胞を酸化ストレス誘導死から保護する。EGCGは、セラストロール誘導保護に関して相加効果を生じる(図8)。
・セラストロール以外のNRF2アクチベーター(EGCG、tBHQ、ゲデュニン)は、酸化ストレス誘導死からの保護のためのパラクリンメディエーターを生成する(図9)。
・HSF1誘導可能な化合物(セラストロール、ゲデュニン、ラディシコール)は、低酸素誘導死から細胞を保護する(図6)。
・HSP90補因子阻害剤(セラストロール、ゲデュニン)は、パラクリン有効性のメディエーターを生成する(図6、7)。
・HSP90NT阻害剤(ラディシコール)は、パラクリン有効性のメディエーターを生成しない(図7)。
・HSP90CT阻害剤(EGCG)は、処理された細胞を低酸素から保護しないが、セラストロール誘導保護に関して相加効果を生じる。(図6)。
・NRF2アクチベーター(EGCG、ゲデュニン、セラストロール)は、処理された細胞を酸化ストレス誘導死から保護する。EGCGは、セラストロール誘導保護に関して相加効果を生じる(図8)。
・セラストロール以外のNRF2アクチベーター(EGCG、tBHQ、ゲデュニン)は、酸化ストレス誘導死からの保護のためのパラクリンメディエーターを生成する(図9)。
まとめると、細胞生存能の向上に最適なファーマココンディショニング処理は、HSF1誘導可能なHSP90補因子阻害剤の活性(直接的パラクリン効果を介する低酸素誘導死に対する回復力)と抗酸化NRF2経路インデューサーの活性(直接的パラクリン効果を介する酸化ストレス誘導死に対する回復力)とを組み合わせたものであることが、これらの結果から実証される。EGCGは、セラストロール刺激細胞保護を強化するということが発見された。
生存能向上(幹細胞ファーマコオプティマイザー選択の第1の基準)に加えて、発現プロファイルの向上(幹細胞ファーマコオプティマイザー選択の第2の基準)を、HSP、成長因子(GF)、抗酸化タンパク質/酵素、および炎症に関与するサイトカインのmRNA発現の定量を介して、評価した。単独および組合せの処理を試験した。
試験した組合せ処理-第1の実験:
セラストロール(1μM)またはゲデュニン(1μM)+EGCG(1μM、10μM)またはTBHQ(1μM、5μM)
セラストロール(1μM)またはゲデュニン(1μM)+EGCG(1μM、10μM)またはTBHQ(1μM、5μM)
図10~21に報告されるこれらの実験の結果は、以下のようにまとめうる。
HSPの発現
・EGCGおよびtBHQは、セラストロール誘導HSP70およびHSP32発現の相乗的増加を生じる(図10、11)。2つの他のrMSC細胞系では、EGCGはまた、セラストロール誘導HSP70発現の相乗的増加を生じたが、tBHQは、セラストロール誘導変化に効果がなかった。
・EGCGは、ヒトMSCにおいてセラストロール誘導HSP70およびHSP32発現の相乗的用量依存増加を生じる(図12、13)。
・EGCGおよびtBHQは、セラストロール誘導HSP70およびHSP32発現の相乗的増加を生じる(図10、11)。2つの他のrMSC細胞系では、EGCGはまた、セラストロール誘導HSP70発現の相乗的増加を生じたが、tBHQは、セラストロール誘導変化に効果がなかった。
・EGCGは、ヒトMSCにおいてセラストロール誘導HSP70およびHSP32発現の相乗的用量依存増加を生じる(図12、13)。
成長因子(GF)の発現
・EGCGは、FGF2およびVEGFのセラストロール刺激発現を相乗的に増強するが、TBHQは、FGF2およびVEGFの両方のセラストロール発現およびゲデュニン発現をそれぞれ増加および減少させる(図14、15)。
・EGCGは、FGF2およびVEGFのセラストロール刺激発現を相乗的に増強するが、TBHQは、FGF2およびVEGFの両方のセラストロール発現およびゲデュニン発現をそれぞれ増加および減少させる(図14、15)。
抗酸化因子の発現
・EGCGは、CAT、GPx、GR、およびSOD1のセラストロール刺激発現を相乗的に増強する(図16、17、18、19)。
・tBHQは、CAT、GPx、GRのセラストロール刺激発現を相乗的に増強し(低用量tBHQ)、SOD1発現に効果がない。
・EGCGは、CAT、GPx、GR、およびSOD1のセラストロール刺激発現を相乗的に増強する(図16、17、18、19)。
・tBHQは、CAT、GPx、GRのセラストロール刺激発現を相乗的に増強し(低用量tBHQ)、SOD1発現に効果がない。
炎症性サイトカインの発現
・セラストロールおよびゲデュニンは、EGCGおよびtBHQによるIL1β誘導発現をダウンレギュレートする(図20)。
・EGCGおよびtBHQは、TNFαのセラストロールおよびゲデュニン誘導ダウンレギュレーションを増強する(図21)。
・セラストロールおよびゲデュニンは、EGCGおよびtBHQによるIL1β誘導発現をダウンレギュレートする(図20)。
・EGCGおよびtBHQは、TNFαのセラストロールおよびゲデュニン誘導ダウンレギュレーションを増強する(図21)。
まとめると、EGCGは、幹細胞機能に有利な因子のセラストロール刺激発現を相乗的に増強することが、これらの結果から示される。理論により拘束されることを望むものではないが、これは、セラストロール効果の向上のために未知のセラストロール機能リプレッサーまたはHSP90コンフォメーション安定化がEGCGにより阻害されることに起因しうる。相乗効果が少なくとも部分的にはNRF2メディエーターの活性化および/または細胞レドックスバランスの正常化に続いて起こりうることも、除外できない。実際には、HSP90阻害活性をまったく有していないtBHQは、MSCの少なくとも1つのラット系でセラストロール刺激発現に対して相乗効果または相加効果を示す。最後に、セラストロールまたはゲデュニンとのEGCGおよびtBHQの共処理はさらに、炎症性サイトカインをダウンレギュレートする。
生存能および発現の結果の編集を図22Aおよび22Bに示す。好適な移植片マイクロ環境を提供する最適なファーマココンディショニング処理は、以下を組み合わせたものであるという証拠が、これらの結果から提供される。
1. 低酸素誘導死に対して細胞生存能を向上させるとともに各種有益なパラクリン因子(HSP、GF、抗酸化分子)の発現増加および炎症性メディエーターの発現低減を促進することが示されたHSP90阻害剤効果(HSF1誘導可能なHSP90補因子阻害)、および
2. 酸化ストレス誘導死に対する耐性を向上させるとともにある特定の有益なパラクリン因子の発現増強(相加的または相乗的)および/または炎症性サイトカインメディエーターのさらなるダウンレギュレーションを行うことが示されたNRF2活性(潜在的HSP90CT阻害を有する)
1. 低酸素誘導死に対して細胞生存能を向上させるとともに各種有益なパラクリン因子(HSP、GF、抗酸化分子)の発現増加および炎症性メディエーターの発現低減を促進することが示されたHSP90阻害剤効果(HSF1誘導可能なHSP90補因子阻害)、および
2. 酸化ストレス誘導死に対する耐性を向上させるとともにある特定の有益なパラクリン因子の発現増強(相加的または相乗的)および/または炎症性サイトカインメディエーターのさらなるダウンレギュレーションを行うことが示されたNRF2活性(潜在的HSP90CT阻害を有する)
興味深いことに、本出願人は、2HBA、tBHQ、およびEGCGがまた、セラストロールと組み合わせたとき、酸化ストレス(1mM H2O2中で1時間インキュベーション)によりチャレンジされたH9c2心筋芽細胞の生存能を向上させる際に相乗的な向上をもたらすことを見いだした(図8B)。
実施例4:幹細胞ファーマコオプティマイザーとしてのセラストロールアナログの同定
実施例3に記載のものに類似した方法を用いて、本出願人は、図23で例証されたものを含めていくつかのセラストロールアナログを試験し、幹細胞ファーマコオプティマイザーとして作用する能力を有するいくつかを同定した(図24、25A、25B、26A~26D)。
実施例3に記載のものに類似した方法を用いて、本出願人は、図23で例証されたものを含めていくつかのセラストロールアナログを試験し、幹細胞ファーマコオプティマイザーとして作用する能力を有するいくつかを同定した(図24、25A、25B、26A~26D)。
本出願人はまた、セラストロールまたはセラストロールアナログと潜在的補助剤(たとえば、NRF-2アクチベーターおよび/または抗酸化剤、図24)とのいくつかの組合せ処理を試験し、HSP、成長因子(GF)、抗酸化タンパク質/酵素、サイトカイン、マトリックスリモデリングタンパク質の発現に対して相乗効果(S)または相加効果(A)を有するいくつかの組合せを同定した(図25A、25B、および図26A~26D)。これらのデータから分かるように、アナログ3、アナログ1、ジヒドロセラストロール、およびセラストロールは、最良クラスのHSP90阻害剤であり、2HBA、EGCG、クルクミン、tBHQ、およびカルノソールは、トップクラスの補助剤として同定された。
そのほか、セラストロールと2HBA、EGCG、tBHQ、またはクルクミンとの組合せによるヒト間葉幹細胞(hMSC)の1時間処理は、48時間の通常培養後、VEGFタンパク質の相加的~相乗的な増加をもたらすが、梗塞マイクロ環境で見られる低酸素条件での同一細胞の48時間培養は、VEGFタンパク質のさらに多くの発現をもたらす(図26F)。セラストロールと2HBAおよびEGCG補助剤との組合せにより1時間処理してから正常酸素または低酸素の条件で3時間のウォッシュアウト時間を設けたH9c2心筋芽細胞でも、同一の観測結果、すなわち、HO-1抗酸化剤およびVEGFa血管形成因子のmRNA発現の増加が本質的に見られる(図26E)。
実施例5:セラストロールは凍結保存後のrMSC生存能を向上させる
適正凍結保存は、凍結保存プロトコルが移植前に許容可能な解凍後生存能(≧70%)をもたらすことを実証する必要がある細胞処理実験室の重要な側面である。たとえば、凍結保存は、解凍肝細胞の著しい変化を誘導し、その生存能、付着、および機能を損なうことが、研究から実証されている。凍結保存前のセラストロールによるrMSCの1時間プレコンディショニングは、解凍後rMSC生存能を向上させることが、図27Aに提示された結果から示される。
適正凍結保存は、凍結保存プロトコルが移植前に許容可能な解凍後生存能(≧70%)をもたらすことを実証する必要がある細胞処理実験室の重要な側面である。たとえば、凍結保存は、解凍肝細胞の著しい変化を誘導し、その生存能、付着、および機能を損なうことが、研究から実証されている。凍結保存前のセラストロールによるrMSCの1時間プレコンディショニングは、解凍後rMSC生存能を向上させることが、図27Aに提示された結果から示される。
雄ラット(175~200g)後肢(hidlimb)骨髄から間葉幹細胞(MSC)を単離し、記載のように拡大させる。簡潔に述べると、Ficoll-Paque(Amersham)グラジエント遠心分離により骨髄単核細胞(BMNC)を単離し、10%FBS(Gibco)および1%ペニシリン-ストレプトマイシン(P-S:Invitrogen15140)を有する最少必須培地α1×(αMEM 1×:Gibco12571)中で培養する。48時間後、非付着細胞を廃棄し、新しい培地で細胞を洗浄する。ポリスチレン表面への優先的付着に基づいて造血細胞からMSCを分離する。MSCの複分化能は、特異的培養条件および染色を用いてin vitro脂肪生成および骨形成/軟骨形成分化アッセイにより確認される。免疫表現型の決定は、CD29、CD34、CD45、CD90、CD105(Coulter Immunology,Hialeah,FL,USA)などの表面抗原に対するモノクローナル抗体を用いてマルチパラメーターフローサイトメトリー(FACScan(登録商標)、Becton Dickinson、Mountain View,CA,USA)により実施する。in vitro実験では、MSCは第4~第10継代で使用されよう。
細胞生存能プロトコル(凍結/解凍サイクル)
10%血清培地(αMEM 1×、10%FBS、1%P-S)中にMSCを再懸濁させ、マルチチャネルピペットを用いて4000細胞/ウェルの密度で96ウェルプレート中にプレーティングし、そして37Cでインキュベートする。各実験および対照の条件は、トリプリケートでプレーティングされる。翌日、培地を穏やかに吸引し、セラストロール(10E-6M)または媒体(DMSO)のいずれかを含有する低血清培地(αMEM 1×、1%FBS、1%P-S)と1時間交換する。次いで、培地を吸引し、培地(αMEM 1×、1%FBS、1%P-S)を3回交換して細胞を洗浄する。細胞をトリプシン処理し、Countess II FL自動セルカウンター(Thermo Fisher Scientific)を用いてカウントする。
10%血清培地(αMEM 1×、10%FBS、1%P-S)中にMSCを再懸濁させ、マルチチャネルピペットを用いて4000細胞/ウェルの密度で96ウェルプレート中にプレーティングし、そして37Cでインキュベートする。各実験および対照の条件は、トリプリケートでプレーティングされる。翌日、培地を穏やかに吸引し、セラストロール(10E-6M)または媒体(DMSO)のいずれかを含有する低血清培地(αMEM 1×、1%FBS、1%P-S)と1時間交換する。次いで、培地を吸引し、培地(αMEM 1×、1%FBS、1%P-S)を3回交換して細胞を洗浄する。細胞をトリプシン処理し、Countess II FL自動セルカウンター(Thermo Fisher Scientific)を用いてカウントする。
細胞凍結:以上に記載のトリプシン処理工程およびカウンティング工程の後、細胞を所望の密度でアリコートし、細胞濃厚液にDMSOを添加し(最終希釈1:10)、そしてあらかじめラベルが付けられたクライオバイアルに移した。凍結容器内にクライオバイアルを配置し、-80℃に一晩移行し、その後、-150℃に移行する。
細胞解凍:あらかじめ加温された培養培地を凍結アリコートの上に注加することにより、凍結細胞を再び加温する。バイアルを遠心し(200×g、3min)、上清を吸引し、そしてあらかじめ加温された10%血清培地(αMEM 1×、10%FBS、1%P-S)中に細胞を再懸濁させる。トリパンブルー希釈液を細胞アリコートに添加し、Countess II FL自動セルカウンター(Thermo Fisher Scientific)を用いて生存能を測定する。
実施例6:セラストロールはin vivoで酸化ストレス誘導死に対する耐性を向上させる
セラストロールの1または2回のいずれかの腹腔内注射(1mg/kg、12時間インターバル)によるスプラーグ・ドーリーラットのin vivoコンディショニングは、酸化ストレス誘導死(詳細は以下を参照)に耐えるように骨髄細胞を用量依存的にコンディショニングすることが、図27Bに提示された結果から示される。
セラストロールの1または2回のいずれかの腹腔内注射(1mg/kg、12時間インターバル)によるスプラーグ・ドーリーラットのin vivoコンディショニングは、酸化ストレス誘導死(詳細は以下を参照)に耐えるように骨髄細胞を用量依存的にコンディショニングすることが、図27Bに提示された結果から示される。
間葉幹細胞(MSC)は実施例5に記載のように単離される。
in vivoコンディショニング
スプラーグ・ドーリーラット(CD CRL、Charles River)に12時間のインターバルでセラストロール(1mg/kg)または媒体の1または2回の腹腔内注射を行う。次いで、ラットを屠殺し、以上に記載のようにMSCを単離した。10%血清培地(αMEM 1×、10%FBS、1%P-S)中に再懸濁させることによりMSCを培養下に配置し、マルチチャネルピペットを用いて4000細胞/ウェルの密度で96ウェルプレート中にプレーティングし、そして37Cでインキュベートした。各実験および対照の条件は、トリプリケートでプレーティングされる。
スプラーグ・ドーリーラット(CD CRL、Charles River)に12時間のインターバルでセラストロール(1mg/kg)または媒体の1または2回の腹腔内注射を行う。次いで、ラットを屠殺し、以上に記載のようにMSCを単離した。10%血清培地(αMEM 1×、10%FBS、1%P-S)中に再懸濁させることによりMSCを培養下に配置し、マルチチャネルピペットを用いて4000細胞/ウェルの密度で96ウェルプレート中にプレーティングし、そして37Cでインキュベートした。各実験および対照の条件は、トリプリケートでプレーティングされる。
次いで、0mM、0,5mM、0,75mM、または1mM過酸化水素(ACP Chemicals、H7000)を含有する1%血清培地を用いたインキュベーションにより、細胞に60分間チャレンジする。次いで、αMEM 1×温培地で細胞を穏やかに2回洗浄し、製造業者のプロトコルに従ってLIVE/DEADキット(Thermo Fisher Scientific)で染色する。Harmonyハイコンテントイメージング・解析ソフトウェアのバージョン4.1が動作するハイコンテントスクリーニング(HCS)システムOperetta(Perkin Elmer,Waltham,MA)を用いて、画像をキャプチャーし解析する。セラストロールの1または2回のいずれかの注射によるスプラーグ・ドーリーラットのin vivo処理は、酸化ストレス誘導死に耐えるように骨髄細胞を用量依存的にコンディショニングすることが、本明細書に提示された結果から示される。
実施例7:セラストロールは内皮層の生存能を維持する
ブタ頸動脈を採取し、閉環および半円開環の構造に切除し、ハンクス平衡塩溶液(HBSS)中または10E-6Mの最終濃度でセラストロールを含有するHBSS中に一晩配置した。製造業者のプロトコルに従ってLIVE/DEADキット(Thermo Fisher Scientific)で頸動脈環を染色した。20×液浸対物レンズを用いて共焦点顕微鏡法(Olympus、FV1000MPE/BK61WF)により組織を撮像した。頸動脈内皮表面のZスタックも得た。図28は、セラストロールを用いない陰性対照と比較してセラストロールを用いたときの内皮層の生存能および健全性の保持を示し、矢印は、死細胞および内皮層健全性損失を指している(図28)。
ブタ頸動脈を採取し、閉環および半円開環の構造に切除し、ハンクス平衡塩溶液(HBSS)中または10E-6Mの最終濃度でセラストロールを含有するHBSS中に一晩配置した。製造業者のプロトコルに従ってLIVE/DEADキット(Thermo Fisher Scientific)で頸動脈環を染色した。20×液浸対物レンズを用いて共焦点顕微鏡法(Olympus、FV1000MPE/BK61WF)により組織を撮像した。頸動脈内皮表面のZスタックも得た。図28は、セラストロールを用いない陰性対照と比較してセラストロールを用いたときの内皮層の生存能および健全性の保持を示し、矢印は、死細胞および内皮層健全性損失を指している(図28)。
実施例8:セラストロールは細胞保護メディエーターを誘導する
セラストロールは、各種細胞型で同じように細胞保護メディエーター(生存キナーゼ:pAkt/Akt、pERK/ERK、抗酸化HO1、熱ショック反応タンパク質:HSF1、HSP70)およびタンパク質発現動態を誘導する(10-6M用量で5~120minの試験時間の処理、0~24時間のいずれかの回復、および続いて10-6Mセラストロールで1時間処理)。図29Aおよび29Bは、各種ラットおよびヒト細胞系(H9c2ラット心筋芽細胞、ヒトおよびラットMSC、ラット新生仔心筋細胞、INS-1インスリン産生ラットβ細胞系)で実施されたウェスタンブロットおよび生存能アッセイを表す。
セラストロールは、各種細胞型で同じように細胞保護メディエーター(生存キナーゼ:pAkt/Akt、pERK/ERK、抗酸化HO1、熱ショック反応タンパク質:HSF1、HSP70)およびタンパク質発現動態を誘導する(10-6M用量で5~120minの試験時間の処理、0~24時間のいずれかの回復、および続いて10-6Mセラストロールで1時間処理)。図29Aおよび29Bは、各種ラットおよびヒト細胞系(H9c2ラット心筋芽細胞、ヒトおよびラットMSC、ラット新生仔心筋細胞、INS-1インスリン産生ラットβ細胞系)で実施されたウェスタンブロットおよび生存能アッセイを表す。
より特定的には、10%FBSを含有する完全培地(濾過溶液:1mM Naピルベート+50μM bメルカプトエタノール、10mM超高純度Hepes、2mM L-グルタミンが追加されたRPMI)中でINS-1細胞を培養した。細胞をトリプシン処理し(0,25%トリプシン-EDTA)、1500RPMで5分間遠心分離し、1%FBSが追加された完全INS培地中に再懸濁させる。血球計を用いて細胞をカウントし、9mlの1%FBS完全INS培地と、DMSO中に再懸濁させた2,5μlまたは5,0μlの1mM Hsp90阻害剤(セラストロール:Cayman Chemical70950、ゲルダナマイシン:Cayman Chemical13355、またはラディシコール:Cayman Chemical13089)と、を含有するSarstedtチューブ内に1~200万細胞を再懸濁させる。同様に対照サンプルを調製するが、Hsp90阻害剤を2,5μlまたは5,0μlのいずれかのDMSO媒体で置き換える。1%FBS完全INS培地を用いて細胞懸濁液の体積を10mlの最終体積になるように仕上げる。数回反転させて懸濁液を穏やかに混合し、チューブを37Cに30分間配置する。15分後、反転を繰り返す。次いで、チューブを1500RPMで5分間遠心し、培地を穏やかに吸引し、12mlの温RPMI溶液で細胞を洗浄する。回転および洗浄サイクルをさらに2回繰り返した後、それぞれ1または2百万細胞を含有するペレットに対して1%FBSを含有する2,5mlまたは5,0mlの完全INS培地を用いて細胞を再懸濁させる。次いで、マルチチャネルピペットを用いて、それぞれ40,000細胞を含有する100μlの細胞懸濁液アリコートを96ウェルプレート中にプレーティングする。各実験および対照条件は、クォドラプルでプレーティングされ、正常酸素または低酸素の条件で6時間インキュベートされる。培養プレートを気密低酸素チャンバー(Billups-Rothenberg)内に配置することにより低酸素(<1%酸素)を達成し、5%CO2と95%N2残部とのガス混合物を用いて15~20リットル/minの流量で10分間フラッシュする。6時間のインキュベーション後、低酸素チャレンジ培養および正常酸素対照培養の培地を90μlの10%FBS完全INS培地と交換し、10μlのPrestoBlue試薬を各ウェルに添加する。60分間のインキュベーション後、プレートリーダーを用いて蛍光取得により生存能を定量する。
セラストロールによるINS-1細胞の短時間プレコンディショニングは、致死低酸素ストレスによりチャレンジしたとき、細胞生存能を保護することが、これらのデータから示される(図29C)。
実施例9:セラストロールはLPSにより誘導される致死的血圧低下からラットをレスキューする
ラットにおける梗塞サイズの減少および心機能の保持に関するセラストロールの効果に加えて、本出願人は、処置ラットにおいて血圧のモジュレーションを観察した。損傷(すなわち、虚血、酸化、炎症、壊死)に対する器官および組織の保持ならびに全身の圧力/灌流の保持に関する本明細書に記載の化合物および組合せ物の潜在能力を考慮すると、これらの病態に関連する器官不全および死亡の割合が高いことから、それらショックモデル(すなわち、敗血性、心原性)で使用することが望ましいであろう。実際に、米国では、年間750,000件を超える重篤な敗血症の症例が25~30%の死亡率で診断されており(Crit Care Med 29(7):1303Y1310,2001)、危機的な症状の心機能不全を含めて複数の器官の機能不全が原因とされる(Circulation 116(7):793Y802,2007)。我々は、ラットにおいて細菌リポ多糖(LPS)により誘導される敗血症性ショックモデルまたは内毒素モデルのいずれかの追加を提案する(Life Sci.,1997;60(15):1223-30)。
ラットにおける梗塞サイズの減少および心機能の保持に関するセラストロールの効果に加えて、本出願人は、処置ラットにおいて血圧のモジュレーションを観察した。損傷(すなわち、虚血、酸化、炎症、壊死)に対する器官および組織の保持ならびに全身の圧力/灌流の保持に関する本明細書に記載の化合物および組合せ物の潜在能力を考慮すると、これらの病態に関連する器官不全および死亡の割合が高いことから、それらショックモデル(すなわち、敗血性、心原性)で使用することが望ましいであろう。実際に、米国では、年間750,000件を超える重篤な敗血症の症例が25~30%の死亡率で診断されており(Crit Care Med 29(7):1303Y1310,2001)、危機的な症状の心機能不全を含めて複数の器官の機能不全が原因とされる(Circulation 116(7):793Y802,2007)。我々は、ラットにおいて細菌リポ多糖(LPS)により誘導される敗血症性ショックモデルまたは内毒素モデルのいずれかの追加を提案する(Life Sci.,1997;60(15):1223-30)。
簡潔に述べると、イソフルラン2.5~3.0%(Abbott Laboratories,Abbott Park,Ill.)、1L/min酸素でSDラットを麻酔し、低体温症を予防するために加熱ブランケット上に配置する。gelco#20カニューレを左外頸動脈に挿入し、圧力センサーにリレーする。代替的に、サイズに依存して、カニューレを左大腿動脈に挿入する。ラットを2%イソフルラン、1L/min酸素で保持し、基礎圧測定値を収集する。頸静脈を介するLPS(20~50mg/Kg)のi.v.注射およびセラストロール(1mg/Kg)のi.p.注射に反応する圧力動態を決定する。動物においてLPSの用量がさまざまでありうるとともに動物の年齢にも依存しうることは、特筆に値する(Infection and immunity,Mar 1996,Vol.64,no.3,p769)。我々の実験では、両方のラットに10mg/kgでLPSの第1のボーラスを投与した。両方のラットで一過性の血圧(BP)低下が起こった後、BPは安定化し、ベースライン値を取り戻した。次いで、300μlのセラストロール(1mg/Kg)または媒体(10%DMSO、70%Cremophor EL/エタノール(3:1)、20%PBS)のi.p.ボーラス注射のいずれかを個別ラットで実施した(図30の矢印を参照されたい。両方のラットに10mg/kgボーラスLPSの再注射を行う前、媒体処置ラットでは致死的血圧低下を生じるが、1回のセラストロール注射を行ったラットでは血圧が維持される(図30))。
実施例10:セラストロールはラットの腎臓においてHsp32(HO-1)の発現を誘導する
本出願人は以前に、ラット虚血心筋においてセラストロールが心筋細胞の生存、傷害および有害なリモデリングの低減を促進して心機能を保持することを示した。本出願人は、この保護効果が他のタイプの虚血疾患で観察可能であるかを調べた。
本出願人は以前に、ラット虚血心筋においてセラストロールが心筋細胞の生存、傷害および有害なリモデリングの低減を促進して心機能を保持することを示した。本出願人は、この保護効果が他のタイプの虚血疾患で観察可能であるかを調べた。
1L/minの酸素中の2.0%~3.0%のイソフルラン(Abbott Laboratories)でラットを麻酔し、加熱パッド上に仰臥位で配置した。外頸静脈を介して1mg/kgの用量で媒体溶液またはセラストロール((Cayman Chemical 70950)0,2μM濾過滅菌媒体:DMSO(Sigma 154938)(全体積の4%)、PBS 1×(全体積の96%)中に再懸濁された50mMストック溶液)の単回ボーラス注射をラットに行う。ラットを剃毛し、眼軟膏剤を角膜に適用し、胸骨の基底から始めて臍までの3~4cmの切開部位にブピバカイン(2mg/kg s.c.)を注射する。開創器を用いて切開部を開状態に維持し、無菌生理食塩水で湿らせたガーゼで腸を包む。左腎臓(KL)を分離し、血管クリップで腎動脈を閉塞する。腸を腹腔内に再配置し、一時的3-0縫合糸(Ethicon)で皮膚を閉じる。ラットに塩酸ブプレノルフィン(0.05mg/kg s.c.)を投与し、30分間の虚血の間、1L/minの酸素中1.0%~2.0%イソフルラン(Abbott Laboratories)に維持し、クリップの除去後に追加の45分間の再灌流を行う。40mM KCl追加生理食塩水の灌流によりラットを瀉血し、器官を摘出し、冷リン酸緩衝生理食塩水(PBS1X)で濯ぎ、PBSで緩衝された10%ホルマリン中に一晩保存し、組織学的/免疫組織学的切片を得るためにパラフィン包埋し、またはウェスタンブロット発現解析のために液体窒素中でスナップ凍結する。
セラストロール(1mg/kg)の1回の注射でラットの腎臓において60分以内にHsp32(HO-1)の発現が誘導されることが、本明細書に提示されたウェスタンブロット解析の結果から実証される(図31)。さらに、セラストロールは、腎虚血を起こしているラット(KR)の非結紮対照腎臓においてHsp70の発現を増加させることから、感受性および細胞保護反応の増加が示唆される。この現象はとくに興味深い。なぜなら、全身神経液性保護メディエーターが発生する可能性があるリモートコンディショニングに類似して臨床介入時に全身細胞保護が付与される可能性があり、潜在的関連合併症(たとえば、外科手順から発生する脳卒中)が低減することが示唆されるからである。
実施例11:細胞生存能ならびにストレスおよび損傷からの保護に対するセラストロールおよびセラストロールアナログの効果
本出願人は、心筋梗塞のラットモデルにおいてH9c2ラット心筋芽細胞の低酸素培養に対するセラストロールまたはセラストロールアナログの効果を試験した。セラストロールまたはセラストロールアナログと補助剤との組合せは、同様に試験しうる。
本出願人は、心筋梗塞のラットモデルにおいてH9c2ラット心筋芽細胞の低酸素培養に対するセラストロールまたはセラストロールアナログの効果を試験した。セラストロールまたはセラストロールアナログと補助剤との組合せは、同様に試験しうる。
in vitro試験
細胞培養および刺激:
低酸素チャレンジおよび酸化チャレンジに対する生存性に関連して、H9c2心筋芽細胞を低酸素/血清飢餓(<1%O2低酸素チャンバー内の低血清培地中に48時間)または酸化ストレス(0~1mM H2O2でスパイクされた培地中で1時間インキュベーション)に付す。LIVE/DEADアッセイを用いてH9c2細胞の生存状態を評価した。
細胞培養および刺激:
低酸素チャレンジおよび酸化チャレンジに対する生存性に関連して、H9c2心筋芽細胞を低酸素/血清飢餓(<1%O2低酸素チャンバー内の低血清培地中に48時間)または酸化ストレス(0~1mM H2O2でスパイクされた培地中で1時間インキュベーション)に付す。LIVE/DEADアッセイを用いてH9c2細胞の生存状態を評価した。
次いで、低酸素/再酸素化チャレンジを実施する。簡潔に述べると、すでに報告したようにラットH9c2心筋芽細胞において生存能解析を実施した。低酸素/再酸素化ストレスでは、血清飢餓状態で低酸素条件(<1%O2)に配置されたグルコースなしDMEM(Life Technologies)中で細胞を18時間培養した。再酸素化(正常酸素条件)時、高グルコース1%FBSのDMEM中でセラストロール(10-10~10-6mol/L、Cayman Chemical,Ann Arbor,MI)、セラストロールアナログ、または媒体(ジメチルスルホキシド(DMSO)、Sigma-Aldrich Canada,Oakville,ON、最終濃度<1%v/v)で細胞を1時間処理し、次いで、高グルコースDMEM中で再酸素化をさらに5時間継続した。
セラストロール(1μM)(供給業者から購入したセラストロール1c、合成アナログを生成するために使用したセラストロール2および3)ならびにセラストロールアナログアナログ3(1μM)、アナログ1(1μM)、アナログ2(1μM)、およびアナログ4(1μM)は、低酸素ストレスおよび低酸素/再酸素化ストレスからH9c2心筋芽細胞を保護するのに有効であることが、図32に提示された結果から示される。
実施例12:虚血疾患の治療に使用されるセラストロールおよびセラストロールアナログ
すべてのex vivoおよびin vivo実験でルイスラット(250~300g、Charles River,St Constant,QC)を使用した。動物はすべて、実験動物管理使用ガイド(Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)に従って扱った。
すべてのex vivoおよびin vivo実験でルイスラット(250~300g、Charles River,St Constant,QC)を使用した。動物はすべて、実験動物管理使用ガイド(Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)に従って扱った。
ex vivo試験
分離された灌流心臓調製物:
次の群、すなわち、媒体(n=6)、セラストロールまたはセラストロールアナログ10-8、10-7、または10-6mol/L(n=各5)にラットをランダムに帰属した。イソフルラン麻酔下で、ラットにヘパリン(I.P、1000I.U、Novartis,Dorval,QC)を注入し、心臓を摘出し、氷冷クレブス緩衝液(mmol/l単位:NaCl 113、KCl 4.5、NaH2PO4 1.6、CaCl2 1.25、MgCl2+6H2O 1、D-グルコース 5.5、NaHCO3 25)にただちに浸漬した。5%CO2および残部のO2でバブリングした37℃のクレブス緩衝液を用いて、60~70mmHgの一定大動脈圧でLangendorffシステム(Radnoti,Monrovia,CA)により、心臓の逆灌流を行った。圧力トランスデューサーに接続されたラテックスバルーンを左心室(LV)に挿入し、15mmHg(LVプレロード)に調整した。心臓を300bpmにペース調整し、20分間安定化させた。
分離された灌流心臓調製物:
次の群、すなわち、媒体(n=6)、セラストロールまたはセラストロールアナログ10-8、10-7、または10-6mol/L(n=各5)にラットをランダムに帰属した。イソフルラン麻酔下で、ラットにヘパリン(I.P、1000I.U、Novartis,Dorval,QC)を注入し、心臓を摘出し、氷冷クレブス緩衝液(mmol/l単位:NaCl 113、KCl 4.5、NaH2PO4 1.6、CaCl2 1.25、MgCl2+6H2O 1、D-グルコース 5.5、NaHCO3 25)にただちに浸漬した。5%CO2および残部のO2でバブリングした37℃のクレブス緩衝液を用いて、60~70mmHgの一定大動脈圧でLangendorffシステム(Radnoti,Monrovia,CA)により、心臓の逆灌流を行った。圧力トランスデューサーに接続されたラテックスバルーンを左心室(LV)に挿入し、15mmHg(LVプレロード)に調整した。心臓を300bpmにペース調整し、20分間安定化させた。
Power lab 8/30ポリグラフ(ADinstruments,Colorado Springs,CO)を用いて心室内圧を連続測定し、LabChart pro v.7.3.7(ADinstruments)を用いて記録および解析を行った。
セラストロール、セラストロールアナログ、または媒体(DMSO)が再灌流の開始時に心臓に接触することを保証するために、心臓ペースおよび灌流を30分間停止することにより達成される全温虚血の誘導時に系をプライムした。セラストロール(10-8、10-7、または10-6mol/L)または媒体を含むクレブス緩衝液を用いて再灌流を10分間開始し、次いで、120分間の全再灌流時間にわたり継続した(クレブス緩衝液)。
安定化の終了時、5分間の再灌流時、次いで、合計60分間にわたり15分ごとに、心臓流出液を5分間捕集した。体積を測定し、解析までサンプルを-80℃に維持した。
再灌流の終了時、心臓を横方向にスライスし(1~2mm)、37℃のリン酸緩衝生理食塩水pH7.4(TTC、Sigma-Aldrich Canada)中の5%2,3,5-トリフェニル-テトラゾリウムクロリドで20分間染色した15。スライスを秤量し、次いで、AxioCam ERc 5sカメラに結合されたStemi 508立体顕微鏡を用いて画像を取得し、Zen 2.3イメージングソフトウェア(Carl Zeiss Canada,Toronto,ON)で処理した。ImageJ 1.51hフリーウェア(NIH,Bethesda,MD)を用いて解析を行った。梗塞領域を心臓組織スライスの重量に規格化した。遺伝子およびタンパク質発現のために1スライス/心臓をスナップ凍結した。
全心温虚血後の再灌流による媒体(DMSO)処理と比較したA、B)+/-dP/dt、C)発生圧(最大圧-最低圧)、D)拡張末期圧(EDP)、およびE)収縮指数の変化より示されるように、セラストロール(10-7mol/L最良用量)およびアナログ1(10-8mol/L用量)は、I/R誘導収縮期機能不全から心臓を保護することが、図33A~Hに提示された結果から示唆される。F)冠脈予備血流(CRF)は処理で維持され、G)高感度トロポニンT(TNT-hs)放出およびH)TTC染色により測定される梗塞領域は、I/R傷害後の媒体(DMSO)処理心臓と比較してセラストロールおよびアナログの処理群では有意に低減した。
in vivo試験
次の群、すなわち、シャム(n=6)、媒体(n=8)、セラストロール1mg/Kg(n=6)、またはセラストロールアナログにラットをランダムに帰属した。2%イソフルラン麻酔下で、12MHzトランスデューサーを備えたSonos 5500イメージングシステム(Philips,Philips Healthcare,Andover,MA,USA)を用いて、ベースラインエコーカルジオグラフィーを記載のように行った12。測定結果はすべて、処理を盲検化して同じ経験を積んだ観測者により取得した。各測定に対して、3~5心周期を解析して平均した。
次の群、すなわち、シャム(n=6)、媒体(n=8)、セラストロール1mg/Kg(n=6)、またはセラストロールアナログにラットをランダムに帰属した。2%イソフルラン麻酔下で、12MHzトランスデューサーを備えたSonos 5500イメージングシステム(Philips,Philips Healthcare,Andover,MA,USA)を用いて、ベースラインエコーカルジオグラフィーを記載のように行った12。測定結果はすべて、処理を盲検化して同じ経験を積んだ観測者により取得した。各測定に対して、3~5心周期を解析して平均した。
エコーカルジオグラフィー後、動物にチューブを挿入し、機械的にベンチレートし、次いで、ブピバカイン2mg/kgを注射し、そして左胸を開いて心臓を露出させた。5-0絹糸スリップノットを用いて、左前下行枝の閉塞を行った。視覚的ブランチングおよびエレクトロカルジオグラフィー変化により心筋虚血を確認した。シャム動物では、縫合糸で結紮しなかった。30分後、縫合糸閉塞を解除した。セラストロール、セラストロールアナログ、または媒体は、急性全身送達のために心室内に注射し、次いで、胸部を閉じた。手術の終了時、ブプレノルフィン(0,05mg/Kg sc)およびカルプロフェン(5mg/Kg sc)を注射した。回復のために動物を24時間放置し、次いで、第2のエコーカルジオグラフィーを行った。動物を屠殺し、心臓組織をスナップ凍結し、ヘパリン処理されたチューブに血液を採取し、次いで、4℃で遠心分離した。血漿をスナップ凍結で、採取し、解析まで-80℃に維持した。
セラストロール(1mg/Kg)およびアナログ1(1mg/Kg)は、媒体(DMSO)処置動物と比較してA)駆出率(EF)、B)心拍出量(CO)、C)内径短縮率(FS)、およびD)心拍出量(SV)を維持することによりI/R傷害後の心機能を保護し、かつセラストロールのこうしたin vivo保護効果は、心保護HSP70およびHO-1の組織発現の著しい向上に関連することが、図34の結果から示唆される。
統計解析
データは、平均値±標準誤差または95%信頼区間のメジアンとして表される。繰返しのない測定の群比較には、ANOVA検定を使用した。繰返し測定では、線形混合効果モデルを群比較に使用した(SASソフトウェア、バージョン9.3のMIXED手順、SAS Institute,Cary,NC,USA)。群間差を評価した。指数や比などの非正規分布測定では、測定結果のlog変換を使用した。血行動態測定では、200測定程度/ラット/時間点をモデルで使用したので、それに応じて各単一測定に加重した(すなわち1/200)。すべての解析で、P<0.05を統計的に有意であるとみなした。
データは、平均値±標準誤差または95%信頼区間のメジアンとして表される。繰返しのない測定の群比較には、ANOVA検定を使用した。繰返し測定では、線形混合効果モデルを群比較に使用した(SASソフトウェア、バージョン9.3のMIXED手順、SAS Institute,Cary,NC,USA)。群間差を評価した。指数や比などの非正規分布測定では、測定結果のlog変換を使用した。血行動態測定では、200測定程度/ラット/時間点をモデルで使用したので、それに応じて各単一測定に加重した(すなわち1/200)。すべての解析で、P<0.05を統計的に有意であるとみなした。
実施例13:セラストロールおよびセラストロールアナログはHSRおよびAREエレメントの制御下にある遺伝子の発現をモジュレートする
96ウェルプレートのDMEM 10%FBS完全培地中に5,000細胞/ウェルの密度でH9c2ラット心筋芽細胞を播種し、製造業者のプロトコルに従ってリポフェクタミンを用いてCignalレポーターアッセイ熱ショック反応および抗酸化反応キット(SABiosciences、Qiagen)によりトランスフェクトした。翌日、セラストロール、アナログ、および他の各種化合物をDMEM 1%FBS培地中10E-5~10E-10Mの用量範囲でトリプリケートでウェルに4時間添加し、続いて、3時間のウォッシュアウト時間完全培地を設け、その後、デュアルルシフェラーゼアッセイ(Promega)を用いてシグナリング活性を測定した。セラストロール(供給業者から購入したセラストロール1c、合成アナログを生成するために使用したセラストロール2および3)ならびにセラストロールアナログのアナログ1、アナログ3、およびアナログ4は、熱ショック反応エレメント(HSR)または抗酸化反応エレメント(ARE)により部分的に制御されるレポーター遺伝子の発現を刺激する効力および効率が最高クラスの試験化合物であることが、図35にまとめられた結果から示される。
96ウェルプレートのDMEM 10%FBS完全培地中に5,000細胞/ウェルの密度でH9c2ラット心筋芽細胞を播種し、製造業者のプロトコルに従ってリポフェクタミンを用いてCignalレポーターアッセイ熱ショック反応および抗酸化反応キット(SABiosciences、Qiagen)によりトランスフェクトした。翌日、セラストロール、アナログ、および他の各種化合物をDMEM 1%FBS培地中10E-5~10E-10Mの用量範囲でトリプリケートでウェルに4時間添加し、続いて、3時間のウォッシュアウト時間完全培地を設け、その後、デュアルルシフェラーゼアッセイ(Promega)を用いてシグナリング活性を測定した。セラストロール(供給業者から購入したセラストロール1c、合成アナログを生成するために使用したセラストロール2および3)ならびにセラストロールアナログのアナログ1、アナログ3、およびアナログ4は、熱ショック反応エレメント(HSR)または抗酸化反応エレメント(ARE)により部分的に制御されるレポーター遺伝子の発現を刺激する効力および効率が最高クラスの試験化合物であることが、図35にまとめられた結果から示される。
本発明をその特定の実施形態により以上で説明してきたが、それは、添付の特許請求の範囲に規定される本発明の趣旨および性質から逸脱することなく変更可能である。特許請求の範囲では、「comprising(~を含む)」という単語は、「including,but not limited to(限定されるものではないが、~を含む)」という語句と実質的に等価なオープンエンドの用語として用いられる。単数形の「a」、「an」、および「the」は、とくに文脈上明確な規定がない限り、対応する複数形の参照語を含む。
Claims (95)
- 熱ショック反応および/または抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物を含む組成物または医薬組成物。
- a)式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグと、b)1種以上の補助剤と、c)担体または薬学的に許容される担体と、を含む組成物または医薬組成物。 - 前記化合物が式Ia
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
を含む、請求項2に記載の組成物または医薬組成物。 - R1が、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択され、Raが、H、1~6個の炭素原子の置換もしくは非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換もしくは非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、RbおよびRcが、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換もしくは非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換もしくは非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、R2およびR3が、-H、-ORd、および=Oからなる群から独立して選択され、Rdが、Hもしくは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、および/またはR4が、-HまたはCH3である、請求項2または3に記載の組成物または医薬組成物。
- R1が、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択され、Raが、Hおよび1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択され、RbおよびRcが、-H、-OH、および-CH2CH2OHからなる群から独立して選択され、R2およびR3が、-H、-OH、-OCH3、および=Oからなる群から独立して選択され、および/またはR4が、-HまたはCH3である、請求項1~4のいずれか一項に記載の組成物または医薬組成物。
- R1が、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択され、Raが、Hおよび-CH3からなる群から選択され、RbおよびRcが、-H、-OH、および-CH2CH2OHからなる群から独立して選択され、R2およびR3が、-OHおよび=Oからなる群から独立して選択され、および/またはR4が-Hである、請求項1~5のいずれか一項に記載の組成物または医薬組成物。
- 前記補助剤が、2HBA、アンドログラホリド、アスコルビン酸、カフェストール、カルノソール、CDDO、カルコン、CHIR98014、コングロバチン、クルクミン、シクロアストラゲノール、1,2-ジチオール-3-チオン(D3T)、ドラマピモド、エダラボン、EGCG、ガンボギン酸、ガネテスピブ、ゲデュニン、IQ-1、リモニン、ロニダミド、メラトニン、ベンズアミドテトラヒドロインドロン、N886、アルキルアミノビフェニルアミド、ノボビオシン、ピリドキサール5’-リン酸(P5’-P)、ピリチオン、ケルセチン、ラディシコール、レスベラトロール、RTA-408、SB202190、SB216763、SNX-5422、ナトリウムブチレート、スルホラン、テトラブロモベンゾトリアゾール(TBB)、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)、バルプロ酸(valporic acid)、ウィタフェリンAまたはウィタノライド、エルゴステロール、ルペノン、およびそれらのアナログである、請求項2または6に記載の組成物または医薬組成物。
- 前記補助剤が、tBHQ、カルノソール、クルクミン、2HBA、またはEGCGである、請求項2または6に記載の組成物または医薬組成物。
- 前記化合物がセラストロールである、請求項2~8のいずれか一項に記載の組成物または医薬組成物。
- 前記化合物が
- 前記化合物が
- 前記化合物が
- 前記化合物が
- 前記化合物が
- 生存能、または死、損傷、もしくはストレスに対する耐性、さらには機能を増加させるようにまたは保存するように、細胞、細胞調製物、組織、移植片、または器官の状態をモジュレートする方法であって、前記細胞、細胞調製物、組織、移植片、または器官と、a)式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグを含む組成物、b)式Iの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグと、補助剤と、を含む組合せ物、c)式Iの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグ、またはそれらの組合せに接触させた個別細胞調製物、あるいはd)式Iの前記1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグ、またはそれらの組合せに接触させた個別細胞調製物のセクレトームと、を接触させることを含む方法。 - 前記化合物が式Ia
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
を含む、請求項15に記載の方法。 - R1が、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択され、Raが、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、RbおよびRcが、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、R2およびR3が、-H、-ORd、および=Oからなる群から独立して選択され、Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、および/またはR4が、-HまたはCH3である、請求項15または16に記載の方法。
- R1が、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択され、Raが、Hおよび1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択され、RbおよびRcが、-H、-OH、および-CH2CH2OHからなる群から独立して選択され、R2およびR3が、-H、-OH、-OCH3、および=Oからなる群から独立して選択され、および/またはR4が、-HまたはCH3である、請求項15~17のいずれか一項に記載の方法。
- R1が、-ORaおよび-NRbRcからなる群から選択され、Raが、Hおよび-CH3からなる群から選択され、RbおよびRcが、-H、-OH、および-CH2CH2OHからなる群から独立して選択され、R2およびR3が、-OHおよび=Oからなる群から独立して選択され、および/またはR4が-Hである、請求項15~18のいずれか一項に記載の方法。
- 前記補助剤が、2HBA、アンドログラホリド、アスコルビン酸、カフェストール、カルノソール、CDDO、カルコン、CHIR98014、コングロバチン、クルクミン、シクロアストラゲノール、1,2-ジチオール-3-チオン(D3T)、ドラマピモド、エダラボン、EGCG、ガンボギン酸、ガネテスピブ、ゲデュニン、IQ-1、リモニン、ロニダミド、メラトニン、ベンズアミドテトラヒドロインドロン、N886、アルキルアミノビフェニルアミド、ノボビオシン、ピリドキサール5’-リン酸(P5’-P)、ピリチオン、ケルセチン、ラディシコール、レスベラトロール、RTA-408、SB202190、SB216763、SNX-5422、ナトリウムブチレート、スルホラン、テトラブロモベンゾトリアゾール(TBB)、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)、バルプロ酸(valporic acid)、ウィタフェリンAまたはウィタノライド、エルゴステロール、ルペノン、またはそれらのアナログである、請求項15~19のいずれか一項に記載の方法。
- 前記補助剤が、tBHQ、カルノソール、クルクミン、2HBA、またはEGCGである、請求項15~19のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物がセラストロールである場合、それは補助剤との組合せ状態である、請求項15~19のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物が
- 前記化合物が
- 前記化合物が
- 前記化合物が
- 前記化合物が
- 式Iの前記化合物が、セラストロールの対応するR1、R2、R3、またはR4基とは異なるR1、R2、R3、またはR4基を含む、請求項15~21のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、in vitro、ex vivo、またはin vivoで実施される、請求項15~28のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、細胞調製物、組織、または器官でex vivoで実施される、請求項29に記載の方法。
- 前記細胞調製物が幹細胞を含む、請求項30に記載の方法。
- 前記幹細胞が、間葉幹細胞、CD34+細胞、CD133+細胞もしくは幹細胞、多能性細胞、前駆細胞、または成人分化細胞である、請求項31に記載の方法。
- 前記幹細胞が、必要とする哺乳動物から単離された自己幹細胞である、請求項32に記載の方法。
- 前記幹細胞が、哺乳動物ドナーから単離された同種異系幹細胞である、請求項32に記載の方法。
- 前記哺乳動物ドナー由来の前記同種異系幹細胞が、必要とする前記哺乳動物に対してHLA型一致、免疫特権性、低免疫原性、または免疫回避性である、請求項34に記載の方法。
- 前記細胞調製物、組織、または器官が、哺乳動物における移植に好適である、請求項30に記載の方法。
- 前記方法が、必要とする哺乳動物に前記組成物、組合せ物、個別細胞調製物、セクレトーム、または細胞培地を投与することによりin vivoで実施される、請求項29に記載の方法。
- 必要とする前記哺乳動物が、虚血疾患または変性疾患に罹患しているかまたは罹患しやすい、請求項37に記載の方法。
- 前記虚血疾患が、脳卒中、心筋梗塞(MI)、末梢動脈疾患(PAD)、一過性脳虚血発作、微小血管症、脳虚血、腸虚血、肝虚血、肺虚血、腎虚血、または血管性認知症である、請求項38に記載の方法。
- 前記変性疾患が、心筋症、肝疾患たとえばNAFLD/NASH、肝硬変、肺疾患たとえばCOPD、骨関節炎、膵障害たとえば糖尿病、神経変性たとえばアルツハイマー病、パーキンソン病、認知症、ALS疾患である、請求項38に記載の方法。
- 必要とする前記哺乳動物が、手術または医学的介入を受けている患者である、請求項37に記載の方法。
- 前記投与が、全身的または局所的に実施される、請求項37~41のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、凍結前またはコンディショニング時に細胞でin vitroで実施される、請求項29に記載の方法。
- 前記細胞、細胞調製物、組織、移植片、または器官が、それらの使用前に5~180分間の継続時間にわたり、前記化合物、組合せ物、個別細胞調製物、またはセクレトームに接触される、請求項15~43のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物が、10-6M~10-10Mの濃度で使用される、請求項15~44のいずれか一項に記載の方法。
- ストレスまたは損傷から細胞、組織、移植片、または器官を保護する方法であって、前記方法が、前記細胞、組織、移植片、または器官と、熱ショック反応活性化および/もしくは抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物を含む組成物、または前記組成物に接触させた細胞調製物のセクレトームと、を接触させることを含む、方法。
- ストレスまたは損傷から細胞、組織、移植片、または器官を保護する方法であって、前記細胞、組織、移植片、または器官と、式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグを含む組成物、または前記組成物に接触させた細胞調製物のセクレトームと、を接触させることを含む方法。 - 前記化合物が式Ia
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
を含む、請求項47に記載の方法。 - 前記方法がin vitroまたはex vivoで実施される、請求項47または48に記載の方法。
- 前記細胞が、幹細胞、分化細胞、前駆細胞、または成体細胞である、請求項47~49のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞、組織、移植片、または器官が、使用前に5~180分間の継続時間にわたり、前記化合物に接触される、請求項47~50のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物が10-6M~10-10Mの濃度で使用される、請求項47~51のいずれか一項に記載の方法。
- 前記化合物が、投与前に前記細胞、組織、移植片、または器官から洗浄除去される、請求項47~52のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組成物が1種以上の補助剤をさらに含む、請求項47~53のいずれか一項に記載の方法。
- 虚血疾患、変性疾患を予防または治療する方法であって、それを必要とする哺乳動物に、熱ショック反応活性化および/もしくは抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物を含む組成物、または前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームを投与することを含む方法。
- 虚血疾患を予防または治療する方法であって、それを必要とする哺乳動物に、a)式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグを含む組成物、またはb)式Iの1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、もしくはプロドラッグでプレコンディショニングされた幹細胞調製物、またはc)前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトーム
を投与することを含む方法。 - 前記化合物が式Ia
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
を含む、請求項56に記載の方法。 - 前記組成物が1種以上の補助剤をさらに含む、請求項56または57に記載の方法。
- 前記補助剤が、2HBA、アンドログラホリド、アスコルビン酸、カフェストール、カルノソール、CDDO、カルコン、CHIR98014、コングロバチン、クルクミン、シクロアストラゲノール、1,2-ジチオール-3-チオン(D3T)、ドラマピモド、エダラボン、EGCG、ガンボギン酸、ガネテスピブ、ゲデュニン、IQ-1、リモニン、ロニダミド、メラトニン、ベンズアミドテトラヒドロインドロン、N886、アルキルアミノビフェニルアミド、ノボビオシン、ピリドキサール5’-リン酸(P5’-P)、ピリチオン、ケルセチン、ラディシコール、レスベラトロール、RTA-408、SB202190、SB216763、SNX-5422、ナトリウムブチレート、スルホラン、テトラブロモベンゾトリアゾール(TBB)、tert-ブチルヒドロキノン(tBHQ)、バルプロ酸(valporic acid)、ウィタフェリンAまたはウィタノライド、エルゴステロール、ルペノン、およびそれらのアナログである
、請求項58に記載の方法。 - 前記補助剤が、tBHQ、カルノソール、クルクミン、2HBA、またはEGCGである、請求項59に記載の方法。
- 前記幹細胞調製物が、必要とする哺乳動物から単離された自己幹細胞調製物である、請求項56~60のいずれか一項に記載の方法。
- 前記幹細胞調製物が、哺乳動物ドナーから単離された同種異系幹細胞調製物である、請求項56~60のいずれか一項に記載の方法。
- 前記哺乳動物ドナー由来の同種異系幹細胞調製物が、必要とする哺乳動物に対してHLA型一致、免疫特権性、低免疫原性、または免疫回避性である、請求項62に記載の方法。
- 前記虚血疾患が、脳卒中、心筋梗塞(MI)、または末梢動脈疾患(PAD)、一過性脳虚血発作、微小血管症、脳虚血、腸虚血、肝虚血、肺虚血、腎虚血、血管性認知症である、請求項56~63のいずれか一項に記載の方法。
- 前記変性疾患が、心筋症、肝疾患たとえばNAFLD/NASH、肝硬変、肺疾患たとえばCOPD、骨関節炎、膵障害たとえば糖尿病、神経変性たとえばアルツハイマー病、パーキンソン病、認知症、ALS疾患である、請求項56~63のいずれか一項に記載の方法。
- 熱ショック反応活性化および/または抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物を含む組成物でプレコンディショニングされた単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の1種以上の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグを含む組成物でプレコンディショニングされた単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。 - 前記化合物が式Iaを含む、請求項67に記載の単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 前記細胞が幹細胞である、請求項67または68に記載の単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 前記幹細胞が間葉幹細胞または造血幹細胞である、請求項69に記載の単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 前記組成物が1種以上の補助剤をさらに含む、請求項67~70のいずれか一項に記載の単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 前記化合物が前記調製物の一部である、請求項67~71のいずれか一項に記載の単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 前記細胞調製物が三次元構造の形態であるかまたはスキャフォールドに一体化されている、請求項67~72のいずれか一項に記載の単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 前記細胞調製物が、医学的に許容されるバイオゲル中にカプセル化されている、請求項67~72のいずれか一項に記載の単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 前記医学的に許容されるバイオゲルが感熱性ヒドロゲルである、請求項74に記載の単離された細胞、組織、移植片、または器官調製物。
- 幹細胞、組織、移植片、または器官の移植時の細胞損傷を低減する方法であって、前記幹細胞、組織、移植片、または器官と、熱ショック反応活性化および/もしくは抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物を含む組成物、または前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームもしくは細胞培地と、を接触させることを含む方法。
- 幹細胞、組織、移植片、または器官の移植時の細胞損傷を低減する方法であって、移植前および/または移植時および/または移植後に、前記幹細胞、組織、移植片、または器官と、式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の少なくとも1種の化合物を含む組成物、または前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームと、を接触させることを含む方法。 - 前記移植に続いて前記幹細胞、組織、移植片、または器官と前記組成物とを接触させることをさらに含む、請求項77に記載の方法。
- 前記組成物が1種以上の補助剤をさらに含む、請求項77または78に記載の方法。
- ストレスまたは損傷から細胞、組織、移植片、または器官を保護するための、熱ショック反応活性化および/または抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物の使用。
- ストレスまたは損傷から細胞、組織、移植片、または器官を保護するための、式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の化合物、その薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、またはプロドラッグの使用。 - 前記細胞が不死化細胞または初代細胞である、請求項81に記載の使用。
- 前記細胞がヒト由来である、請求項81または82に記載の使用。
- 前記細胞が、幹細胞、前駆細胞、心筋細胞、または心筋芽細胞、インスリン分泌細胞である、請求項81~83のいずれか一項に記載の使用。
- 前記幹細胞が間葉幹細胞または造血幹細胞である、請求項84に記載の使用。
- 前記細胞、組織、移植片、または器官が移植に使用するためのものである、請求項81~85のいずれか一項に記載の使用。
- 前記組成物が1種以上の補助剤をさらに含む、請求項81~85のいずれか一項に記載の使用。
- 手術または医学的介入を必要とする患者を治療する方法であって、熱ショック反応活性化および/もしくは抗酸化反応を活性化する1種以上の化合物を含む組成物、または前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームもしくは細胞培地を投与することを含む方法。
- 手術または医学的介入を必要とする患者を治療する方法であって、前記手術または医学的介入の前および/または実施時および/または後に、式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の化合物を含む組成物または前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームを投与することを含む方法。 - 前記組成物が手術または医学的介入の部位に局所的に投与される、請求項89に記載の方法。
- 前記組成物が全身投与される、請求項89に記載の方法。
- 式I
R1は、-H、-F、-Cl、-Br、-I、-CN、-アリール、アルキル、イミダゾール、-ORa、-NRbRc、-(CH2)nOH、および-(CH2)nNH2からなる群から選択され、
Raは、H、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から選択され、
RbおよびRcは、-H、-OH、-OCH3、1~6個の炭素原子の置換または非置換の直線状アルキル基、3~6個の炭素原子の置換または非置換の分岐状アルキル基、および保護基からなる群から独立して選択され、
nは、0、1、2、3、または4であり、
R2およびR3は、-H、-ORd、=O、-C(=O)OH、-C(=O)ORx、および-C(=O)Rxからなる群から独立して選択され、
Rdは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
Rxは、Hまたは1~3個の炭素原子の低級アルキル基であり、
R4は、-H、-OH、および1~3個の炭素原子の低級アルキル基からなる群から選択される)
の化合物を単独または補助剤との混合のいずれかで含む第1のバイアルと、幹細胞を含む第2のバイアルと、を含むキット。 - 細胞、組織、移植片、または器官を含む容器をさらに含む、請求項92に記載のキット。
- 請求項1~14のいずれか一項に記載の組成物、前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物、または前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームもしくは細胞培地のin vivo投与に好適なデバイスであって、前記組成物、細胞調製物、またはセクレトームが充填されたコンパートメントを含むデバイス。
- 細胞のコンディショニング、製造に好適なデバイスであって、たとえば、前記組成物または前記組成物でコンディショニングされた細胞調製物のセクレトームもしくは細胞培地を用いた細胞選別または拡大バイオリアクターであり、前記組成物、細胞調製物、またはセクレトームが充填されたコンパートメントを含むデバイス。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662350258P | 2016-06-15 | 2016-06-15 | |
US62/350,258 | 2016-06-15 | ||
PCT/CA2017/000151 WO2017214709A1 (en) | 2016-06-15 | 2017-06-15 | Reagents, compositions and methods for improving viability and function of cells, tissues and organs |
JP2019518343A JP7009463B2 (ja) | 2016-06-15 | 2017-06-15 | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 |
JP2022003014A JP2022062037A (ja) | 2016-06-15 | 2022-01-12 | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022003014A Division JP2022062037A (ja) | 2016-06-15 | 2022-01-12 | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2024019483A true JP2024019483A (ja) | 2024-02-09 |
Family
ID=60663810
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019518343A Active JP7009463B2 (ja) | 2016-06-15 | 2017-06-15 | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 |
JP2022003014A Pending JP2022062037A (ja) | 2016-06-15 | 2022-01-12 | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 |
JP2023208559A Pending JP2024019483A (ja) | 2016-06-15 | 2023-12-11 | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019518343A Active JP7009463B2 (ja) | 2016-06-15 | 2017-06-15 | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 |
JP2022003014A Pending JP2022062037A (ja) | 2016-06-15 | 2022-01-12 | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11446265B2 (ja) |
EP (1) | EP3471733A4 (ja) |
JP (3) | JP7009463B2 (ja) |
CN (1) | CN109803664A (ja) |
AU (1) | AU2017285486B2 (ja) |
CA (1) | CA3027682A1 (ja) |
WO (1) | WO2017214709A1 (ja) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP7404246B2 (ja) * | 2018-02-14 | 2023-12-25 | ソシエテ・デ・プロデュイ・ネスレ・エス・アー | フォン・ヴィレブランド因子のレベルを調節する化合物、及び血液疾患の治療におけるそれらの使用 |
EP4364804A2 (en) | 2018-08-20 | 2024-05-08 | Janssen Pharmaceutica NV | Inhibitors of keap1-nrf2 protein-protein interaction |
WO2021055985A1 (en) * | 2019-09-22 | 2021-03-25 | Cellerant Therapeutics, Inc. | Ipsc-derived, hypoimmunogenic, myeloid progenitor cells |
CN111202737B (zh) * | 2020-03-20 | 2022-08-05 | 中国药科大学 | 雷公藤红素酰胺衍生物在制备治疗自身性免疫疾病药物的应用 |
CN111704647B (zh) * | 2020-06-15 | 2021-10-22 | 中国人民解放军海军军医大学 | 一类三萜类衍生物及其作为程序性细胞坏死抑制剂的用途 |
US20220023345A1 (en) * | 2020-07-22 | 2022-01-27 | Caladrius Biosciences, Inc. | Compositions Comprising CD34+ Cells and Methods for Repairing a Lung Injury After Severe Virus Infection |
CN112375802A (zh) * | 2020-11-06 | 2021-02-19 | 中国科学院城市环境研究所 | 评价白藜芦醇干预肺上皮细胞多环芳烃毒性效应的试剂或试剂盒及其应用和检测 |
CN113057957A (zh) * | 2021-03-30 | 2021-07-02 | 福建中医药大学 | 葛杜宁及其衍生物在制备抗氧化药物和/或化妆品及治疗类风湿性关节炎药物中的用途 |
WO2022212878A1 (en) * | 2021-04-01 | 2022-10-06 | The Regents Of The University Of California | Human pluripotent stem cell-derived secretome as a biologic for prevention and treatment of neurodegenerative and apoptotic diseases |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1112181C (zh) * | 2000-05-26 | 2003-06-25 | 北京大学 | 雷公藤属植物提取物在制备预防和治疗神经系统疾病药上的应用 |
AU2006272497B2 (en) * | 2005-07-27 | 2012-07-19 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Small compounds that correct protein misfolding and uses thereof |
AU2006272586A1 (en) | 2005-07-27 | 2007-02-01 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Use of heat shock to treat ocular disease |
WO2008013985A2 (en) | 2006-07-27 | 2008-01-31 | University Of Florida | Use of heat shock activators for tissue regeneration |
TW200824678A (en) * | 2006-08-11 | 2008-06-16 | Combinatorx Inc | Methods and compositions for the treatment of neurodegenerative disorders |
CN101686951A (zh) * | 2006-11-13 | 2010-03-31 | 纽约市哥伦比亚大学托管会 | 治疗糖尿病的选择性蛋白酶体抑制物 |
WO2009067245A2 (en) | 2007-11-20 | 2009-05-28 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Compositions and methods for tissue repair |
CN101288671B (zh) * | 2008-04-17 | 2010-12-01 | 首都医科大学 | 雷公藤单体化合物在提高腺相关病毒载体介导的基因表达效率及其对神经退行性疾病的辅助治疗中的用途 |
JP2012511048A (ja) * | 2008-12-08 | 2012-05-17 | ノースウェスタン ユニバーシティ | Hsf−1の改変方法 |
US20100209399A1 (en) * | 2009-02-13 | 2010-08-19 | Celavie Biosciences, Llc | Brain-derived stem cells for repair of musculoskeletal system in vertebrate subjects |
CN101756956A (zh) * | 2009-03-25 | 2010-06-30 | 赵亚力 | 儿茶素在制备逆转录病毒整合酶抑制剂中的应用 |
CN103524592B (zh) | 2013-09-27 | 2015-08-05 | 安徽医科大学 | 一种雷公藤红素衍生物、该衍生物的生物盐及其制备方法与用途 |
BR112016021985B1 (pt) * | 2014-03-26 | 2022-08-30 | The General Hospital Corporation | Formulação farmacêutica |
CA3002924A1 (en) * | 2015-10-23 | 2017-04-27 | Erx Pharmaceuticals Inc. | Analogs of celastrol |
-
2017
- 2017-06-15 WO PCT/CA2017/000151 patent/WO2017214709A1/en unknown
- 2017-06-15 CN CN201780049693.5A patent/CN109803664A/zh active Pending
- 2017-06-15 AU AU2017285486A patent/AU2017285486B2/en active Active
- 2017-06-15 EP EP17812341.0A patent/EP3471733A4/en active Pending
- 2017-06-15 JP JP2019518343A patent/JP7009463B2/ja active Active
- 2017-06-15 US US16/309,474 patent/US11446265B2/en active Active
- 2017-06-15 CA CA3027682A patent/CA3027682A1/en active Pending
-
2022
- 2022-01-12 JP JP2022003014A patent/JP2022062037A/ja active Pending
- 2022-07-21 US US17/870,476 patent/US20230024103A1/en active Pending
-
2023
- 2023-12-11 JP JP2023208559A patent/JP2024019483A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3471733A4 (en) | 2020-02-05 |
AU2017285486B2 (en) | 2023-04-27 |
US11446265B2 (en) | 2022-09-20 |
JP2022062037A (ja) | 2022-04-19 |
CN109803664A (zh) | 2019-05-24 |
WO2017214709A1 (en) | 2017-12-21 |
JP2019523784A (ja) | 2019-08-29 |
EP3471733A1 (en) | 2019-04-24 |
CA3027682A1 (en) | 2017-12-21 |
AU2017285486A1 (en) | 2019-02-07 |
US20210169830A1 (en) | 2021-06-10 |
WO2017214709A8 (en) | 2018-12-13 |
US20230024103A1 (en) | 2023-01-26 |
JP7009463B2 (ja) | 2022-01-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2024019483A (ja) | 細胞、組織、および器官の生存能および機能を向上させるための試薬、組成物、および方法 | |
Burger et al. | Human endothelial colony-forming cells protect against acute kidney injury: role of exosomes | |
Tsubokawa et al. | Impact of anti-apoptotic and anti-oxidative effects of bone marrow mesenchymal stem cells with transient overexpression of heme oxygenase-1 on myocardial ischemia | |
Gaebel et al. | Cell origin of human mesenchymal stem cells determines a different healing performance in cardiac regeneration | |
Lee et al. | Enhanced therapeutic neovascularization by CD31-expressing cells and embryonic stem cell-derived endothelial cells engineered with chitosan hydrogel containing VEGF-releasing microtubes | |
Shantsila et al. | Endothelial progenitor cells in cardiovascular disorders | |
Angoulvant et al. | Mesenchymal stem cell conditioned media attenuates in vitro and ex vivo myocardial reperfusion injury | |
Pan et al. | Bone marrow mesenchymal stem cells ameliorate hepatic ischemia/reperfusion injuries via inactivation of the MEK/ERK signaling pathway in rats | |
Ballard et al. | Stem cells and the regeneration of the aging cardiovascular system | |
Slegtenhorst et al. | Mechanisms and consequences of injury and repair in older organ transplants | |
Amer et al. | Role of adipose tissue derived stem cells differentiated into insulin producing cells in the treatment of type I diabetes mellitus | |
Mahmoud et al. | Impact of diabetes mellitus on human mesenchymal stromal cell biology and functionality: implications for autologous transplantation | |
Chen et al. | Ischemia postconditioning and mesenchymal stem cells engraftment synergistically attenuate ischemia reperfusion-induced lung injury in rats | |
Tian et al. | Mesenchymal stem cells improve mouse non-heart-beating liver graft survival by inhibiting Kupffer cell apoptosis via TLR4-ERK1/2-Fas/FasL-caspase3 pathway regulation | |
US9533010B2 (en) | Compositions and methods for treating progressive myocardial injury due to a vascular insufficiency | |
Sheng et al. | Transplantation of stromal vascular fraction as an alternative for accelerating tissue expansion | |
Wu et al. | Exosomes derived from human umbilical cord mesenchymal stem cells alleviate acetaminophen-induced acute liver failure through activating ERK and IGF-1R/PI3K/AKT signaling pathway | |
Song et al. | Transfection of HGF gene enhances endothelial progenitor cell (EPC) function and improves EPC transplant efficiency for balloon-induced arterial injury in hypercholesterolemic rats | |
Tracy et al. | State of the field: cellular and exosomal therapeutic approaches in vascular regeneration | |
Kawashiri et al. | Impact of enhanced production of endogenous heme oxygenase-1 by pitavastatin on survival and functional activities of bone marrow–derived mesenchymal stem cells | |
Kannappan et al. | p53 modulates the fate of cardiac progenitor cells ex vivo and in the diabetic heart in vivo | |
Gopinath et al. | Human umbilical cord blood derived stem cells repair doxorubicin-induced pathological cardiac hypertrophy in mice | |
Hwang et al. | Chemical and physical approaches to extend the replicative and differentiation potential of stem cells | |
WO2021200299A1 (ja) | 細胞老化抑制剤、生体組織修復促進剤、遺伝子発現調節剤及び製造方法 | |
Schoenfeld et al. | The existence of myocardial repair: mechanistic insights and enhancements |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231227 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20231227 |