JP2023540629A - インターロイキン１５構築物及び使用方法 - Google Patents

Abstract

ＩＬ１５構築物、上記ＩＬ１５構築物を含む薬学的組成物、及びがん、感染症、または免疫障害等の疾患を治療するためのＩＬ１５構築物または組成物の使用が提供される。【選択図】なし

Description

インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物、及びがんの治療のための使用方法が本明細書に開示される。

ＩＬ１５は、元々Ｔ細胞成長因子として記載されるサイトカインである。サイトカインは、４αヘリックスバンドルファミリーに属し、その受容体は、シグナル伝達を担う２つのサブユニット（ＩＬ－２Ｒ／ＩＬ－１５Ｒβ及びγ鎖）からなる。これらの受容体は、例えば、活性化されたＴ細胞上で発現され、それらは、ピコモル濃度のＩＬ１５で活性化され得る。

治療剤として、ＩＬ１５は、Ｔ細胞、特にＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化に有望性を示すが、短い半減期、及び分子の迅速なクリアランスにより、患者への投薬に問題がある。現在、組換えＩＬ－１５の承認された使用はないが、いくつかの臨床試験が進行中である。

したがって、分子の優れた送達を提供する様式でＩＬ１５を腫瘍微小環境に直接送達することができるＩＬ１５構築物を提供する、当該技術分野において満たされていない必要性が存在する。

本開示は、ＩＬ１５構築物に関する。一実施形態において、ＩＬ１５構築物は、Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｆ）ＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、二価のＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号４（Ｍ１２３）に示されるホモ二量体、
（ｉｉ）配列番号５（Ｍ１３５）に示されるホモ二量体、
（ｉｉｉ）配列番号６（Ｍ１４０）に示されるホモ二量体、
（ｉｖ）配列番号７（Ｍ１４５）に示されるホモ二量体、
（ｖ）配列番号８（Ｍ１７５）に示されるホモ二量体、
（ｖｉ）配列番号９（Ｍ１７６）に示されるホモ二量体、
（ｖｉｉ）配列番号１０（Ｍ１７７）に示されるホモ二量体、
（ｖｉｉｉ）配列番号１１（Ｍ１７８）に示されるホモ二量体、
（ｉｘ）配列番号１２（Ｍ２０７）に示されるホモ二量体、
（ｘ）配列番号１３（Ｍ２３１）に示されるホモ二量体、
（ｘｉ）配列番号１４（Ｍ２３３）に示されるホモ二量体、
（ｘｉｉ）配列番号１５（Ｍ２３４）に示されるホモ二量体、
（ｘｉｉｉ）配列番号１６（Ｍ２３８）に示されるホモ二量体、
（ｘｉｖ）配列番号１７（Ｍ２３９）に示されるホモ二量体、
（ｘｖ）配列番号１８（Ｍ２４０）に示されるホモ二量体、
（ｘｖｉ）配列番号１９（Ｍ２４１）に示されるホモ二量体、
（ｘｖｉｉ）配列番号２０（Ｍ２４３）に示されるホモ二量体、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号２１（Ｍ２４４）に示されるホモ二量体、
（ｘｉｘ）配列番号２２（Ｍ２４５）に示されるホモ二量体、
（ｘｘ）配列番号２３（Ｍ２４６）に示されるホモ二量体、
（ｘｘｉ）配列番号２４（Ｍ２４７）に示されるホモ二量体、
（ｘｘｉｉ）配列番号２５（Ｍ２４８）に示されるホモ二量体、
（ｘｘｉｉｉ）配列番号２６（Ｍ２４９）に示されるホモ二量体、
（ｘｘｉｖ）配列番号２７（Ｍ３２７）に示されるホモ二量体、
（ｘｘｖ）配列番号２８（Ｍ３２８）に示されるホモ二量体、
（ｘｘｖｉ）配列番号２９（Ｍ３２９）に示されるホモ二量体、
（ｘｘｖｉｉ）配列番号３０（Ｍ３３０）に示されるホモ二量体、
（ｘｘｖｉｉｉ）配列番号３１（Ｍ３３１）に示されるホモ二量体、または
（ｘｘｉｘ）配列番号３２（Ｍ３３２）に示されるホモ二量体、を含む、インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子を含む
ａ）ｂ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ＩＬ１５ドメインと、
Ｎ末端からＣ末端に、
ｘ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｙ）ＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む第２の分子と、を含む、二価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、前記ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号３３（Ｍ４３）に示される第１の分子、及び配列番号３４（Ｍ２４）に示される第２の分子、
（ｉｉ）配列番号３５（Ｍ６１）に示される第１の分子、及び配列番号３６（Ｍ６０）に示される第２の分子、または
（ｉｉｉ）配列番号３７（Ｍ６２）に示される第１の分子、及び配列番号３８（Ｍ６０）に示される第２の分子と、を含む、二価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｆ）ＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、二価のＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号４０（Ｍ１４８）、及び配列番号４１（Ｍ１７４）に示されるホモ二量体を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）に結合したＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ｆ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｆ）ｇ）に結合した第３のリンカー（Ｌ３）と、
ｇ）ＩＬ１５ドメインと、を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
二価のＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号４２（Ｍ２３２）に示されるホモ二量体、
（ｉｉ）配列番号４３（Ｍ１００１）に示されるホモ二量体、
（ｉｉｉ）配列番号４４（Ｍ１００２）に示されるホモ二量体、
（ｖｉ）配列番号４５（Ｍ１００３）に示されるホモ二量体、
（ｖ）配列番号４６（Ｍ１００４）に示されるホモ二量体、
（ｖｉ）配列番号４７（Ｍ１００５）に示されるホモ二量体、または
（ｖｉｉ）配列番号４８（Ｍ１００６）に示されるホモ二量体、を含む、インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｆ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、配列番号４９（ＭＫ１０７）に示される第１の分子、及び配列番号５０（ＭＨ２）に示される第２の分子を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ｆ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｆ）ｇ）に結合した第３のリンカー（Ｌ３）と、
ｇ）ＩＬ１５ドメインと、
第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号６３（Ｍ１１１）に示される第１の分子、及び配列番号６４（ＭＨ２）に示される第２の分子、
（ｉｉ）配列番号６５（Ｍ２００１）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、または
（ｉｉｉ）配列番号６６（Ｍ２００２）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ｆ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｆ）ｇ）に結合した第３のリンカー（Ｌ３）と、
ｇ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号５１（ＭＫ１１４）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｉｉ）配列番号５３（ＭＫ１１５）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｉｉｉ）配列番号５４（ＭＫ１１７）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｉｖ）配列番号５５（ＭＫ１１８）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｖ）配列番号５６（ＭＫ１１９）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｖｉ）配列番号５７（ＭＫ１２０）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｖｉｉ）配列番号５８（ＭＫ１２１）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｖｉｉｉ）配列番号５９（ＭＫ１２３）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子と、
（ｉｘ）配列番号６０（ＭＫ１２４）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘ）配列番号６１（ＭＫ１２５）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｉ）配列番号６２（ＭＫ１２６）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｉｉ）配列番号６７（ＭＫ１３６）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｉｉｉ）配列番号６８（ＭＫ１３７）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｉｖ）配列番号６９（ＭＫ１３８）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｖ）配列番号７０（ＭＫ１３９）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｖｉ）配列番号７１（ＭＫ１４０）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｖｉｉ）配列番号７２（ＭＫ１４１）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号７３（ＭＫ１４６）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｘｉｘ）配列番号７４（ＭＫ１４５）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
（ｘｘ）配列番号７６（ＭＫ１４９）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
（ｘｘｉ）配列番号７７（ＭＫ１５０）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
（ｘｘｉｉ）配列番号７８（ＭＫ１５１）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
（ｘｘｉｉｉ）配列番号７９（ＭＫ１５２）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
（ｘｘｉｖ）配列番号８０（ＭＫ１５３）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
（ｘｘｖ）配列番号８１（ＭＫ１５４）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
（ｘｘｖｉ）配列番号８２（ＭＫ１５５）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、または
（ｘｘｖｉｉ）配列番号１７２（ＭＫ１５７）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ＩＬ１５ドメインと、
ｘ）第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｙ）ｚ）に結合したリンカー（Ｌ３）と、
ｚ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号８３（Ｍ１０９）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号８４（ＭＨ１１０）に示されるヘテロ二量体と、
（ｉｉ）配列番号８５（Ｍ２００３）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号８６（ＭＨ２００４）に示されるヘテロ二量体と、
（ｉｉｉ）配列番号８７（Ｍ２００３）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号８８（ＭＨ２００５）に示されるヘテロ二量体と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｘ）第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｙ）ｚ）に結合したリンカー（Ｌ３）と、
ｚ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号８９（Ｍ００５）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号９０（ＭＫ５）に示されるヘテロ二量体と、
（ｉｉ）配列番号９１（Ｍ２００６）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号９０（ＭＫ５）に示されるヘテロ二量体と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｘ）ｙ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｙ）ｚ）に結合したリンカー（Ｌ３）と、
ｚ）第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号９２（Ｍ００６）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号９３（ＭＫ６）に示されるヘテロ二量体と、
（ｉｉ）配列番号９４（Ｍ２００７）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号９３（ＭＫ６）に示されるヘテロ二量体と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ＩＬ１５ドメインと、
ｄ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｘ）ｙ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｙ）ｚ）に結合したリンカー（Ｌ３）と、
ｚ）第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む、第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体インターロイキン１５構築物が、配列番号９５（Ｍ１０８）に示される第１の分子、及び配列番号９６（ＭＨ４）に示される第２の分子、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｘ）ｙ）に結合した第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｙ）ｚ）に結合したリンカー（Ｌ３）と、
ｚ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
配列番号９７（Ｍ１１２）に示される第１の分子、及び配列番号９８（ＭＫ１１３）に示される第２の分子、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｆ）ＩＬ１５ドメインと、を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
二価のホモ二量体インターロイキン１５構築物が、配列番号９９（Ｍ００１）に示される配列、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される配列を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ｆ）に結合した第３のリンカーに結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｆ）ＩＬ１５ドメインと、を含む、一価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体インターロイキン１５構築物が、配列番号１０１（Ｍ００２）に示される配列、配列番号１０２（ＭＨ２）に示される配列、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される配列を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ＩＬ１５ドメインと、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、配列番号１０３（ＭＫ３）に示される配列と、
ｘ）ｙ）に結合した第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
ｙ）ｚ）に結合した第１のリンカー（Ｌ３）と、
ｚ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含み、
配列が、配列番号１０４（ＭＨ３）に示される、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する第１の腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、配列番号１０５（ＭＫ４）に示される配列と、
ｘ）ｙ）に結合した第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する第１の腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
ｙ）に示した第１のリンカー（Ｌ３）と、
ｚ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含み、
配列が、配列番号１０６（ＭＨ３）に示される、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ＩＬ１５ドメインと、
ｘ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｙ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む第２の分子と、
第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第３の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
配列番号１０７（ＭＫ１４３）に示される第１の分子と、配列番号１０８（ＭＨＫ１４４）に示される第２の分子と、及び配列番号５２（Ｈ７）に示される第３の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ＩＬ１５ドメインと、
ｆ）ｇ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第３のリンカー（Ｌ３）と、
ｇ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
（ｉ）配列番号１０９（ＭＫ１４２）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
（ｉｉ）配列番号１７３（ＭＫ１５６）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、または
（ｉｉｉ）配列番号１７４（ＭＫ１６５）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）にジスルフィド結合を介して連結される第１の分子としてのＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｂ）ｃ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｃ）ｄ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｄ）ｅ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
ｅ）ｆ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｆ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第３の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、配列番号１１０（ＭＫ１４７）に示される第１の分子、及び配列番号１１１（ＭＫ１４８）に示される第２の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第３の分子、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

Ｎ末端からＣ末端に、
ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
ｅ）ｆ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
ｆ）ｇ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第３のリンカー（Ｌ３）と、
ｇ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物であって、
一価のヘテロ二量体インターロイキン１５構築物が、配列番号１７５（ＭＫ１４）に示される配列、配列番号１０２（ＭＨ２）に示される配列、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される配列を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。

少なくとも１つの追加のＩＬ１５構築物と組み合わせた、ＩＬ１５構築物を含む、薬学的組成物。

有効量のＩＬ１５構築物を、必要とする患者に投与することを含む、がんの治療方法。

がんが、胃癌、結腸癌、膵臓癌、乳癌、頭頚部癌、腎臓癌、肝臓癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、皮膚癌、中皮腫、リンパ腫、白血病、骨髄腫及び肉腫である、方法。

ＩＬ１５構築物が、別の治療剤と組み合わせて投与される、方法。

治療剤が、免疫チェックポイント剤である、方法。

免疫チェックポイント剤が、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ３、ＬＡＧ－３、ＯＸ４０、またはＴＩＧＩＴ抗体である、方法。

有効量の免疫細胞を患者に投与前、投与中、または投与後に、ＩＬ１５構築物を投与することを含む、免疫細胞の生存を増加させる方法。

免疫細胞がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する、方法。

免疫細胞がＮＫ細胞である、方法。

免疫細胞がＴ細胞である、方法。

二価のＩＬ１５構築物Ａを示す。 二価のＩＬ１５構築物Ｂを示す。 二価のＩＬ１５構築物Ｃを示す。 二価のＩＬ１５構築物Ｄを示す。 一価の構築物Ｅ１及びＥ２を示す。 一価の構築物Ｅ３を示す。 一価の構築物Ｆ１、Ｆ２、及びＦ３を示す。 一価の構築物Ｇ１及びＧ２を示す。 二価の構築物Ｈ１及び一価の構築物Ｈ２を示す。 一価の構築物Ｋ１及びＫ２を示す。 一価の構築物Ｍを示す。 一価の構築物Ｎを示す。 一価の構築物Ｐを示す。 一価の構築物Ｑを示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 細胞ベースのｐＳＴＡＴ５活性化アッセイの結果を示す。 ＩＬ１５構築物が細胞増殖アッセイにおいて活性を有することを説明する。 図２７Ａは、ＩＬ１５構築物の最大耐量のグラフによる投薬スキームを示す。図２７Ｂは、ＩＬ１５構築物で処置したマウスの生存曲線のグラフによる投薬スキームを示す。図２７Ｃは、マウスの体重変化のグラフによる投薬スキームを示す。 図２８Ａは、最大耐量レベルでは、ＭＫ１３７／ＭＨ７のＣｍａｘ及び曝露は、ＩＣＲマウスにおいて関連するＩＬ－１５濃度に関してＰ２２３３９よりも５３及び９８倍高かったことを示す。図２８Ｂは、最大耐量レベルでは、ＭＫ１３７／ＭＨ７のＣｍａｘ及び曝露は、ＩＣＲマウスにおいて関連するＩＬ－１５濃度に関してＰ２２３３９よりも５３及び９８倍高かったことを示す。 図２９Ａは、末梢血液細胞及び腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）に対するＭＫ１３７／ＭＨ７の用量依存性薬力学的効果を説明する。図２９Ｂは、末梢血液細胞及び腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）に対するＭＫ１３７／ＭＨ７の用量依存性薬力学的効果を説明する。 ＨＴ２９／ＨＨ異種移植片マウスモデルにおけるＭＫ１３７／ＭＨ７のＰＤ／ＰＫ特性を示し、ＭＫ１３７／ＭＨ７は、より大きな治療ウインドウを説明する。 ＨＴ２９／ＨＨ異種移植片マウスモデルにおけるＭＫ１３７／ＭＨ７のＰＤ／ＰＫ特性を示し、ＭＫ１３７／ＭＨ７は、より大きな治療ウインドウを説明する。

定義
本書類の別の箇所で特に定義されない限り、本明細書で使用される他のすべての技術的及び科学的用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有する。

添付の特許請求の範囲を含めて、本明細書で使用される場合、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」等の単数形の単語は、文脈が明らかにそうではないと指示しない限り、それらの対応する複数への参照を含む。

「または」という用語は、文脈が明らかにそうではないと指示しない限り、「及び／または」という用語を意味するために使用され、「及び／または」と同義に使用される。

本明細書で使用される「抗がん剤」という用語は、細胞傷害剤、化学療法剤、放射線療法及び放射線療法剤、標的化抗がん剤、及び免疫療法剤を含むがこれらに限定されない、がん等の細胞増殖性障害を治療するために使用することができる任意の薬剤を指す。

「インターロイキン１５」または「ＩＬ１５」という用語は、Ｔリンパ球の増殖を刺激するサイトカインである。ヒトＩＬ１５（配列番号１）のアミノ酸配列は、受託番号Ｘ９４２２３としても見出すことができる。
配列番号１
ＭＲＩＳＫＰＨＬＲＳＩＳＩＱＣＹＬＣＬＬＬＮＳＨＦＬＴＥＡＧＩＨＶＦＩＬＧＣＦＳＡＧＬＰＫＴＥＡＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩ
ＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮ
ＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ

「インターロイキン－１５受容体アルファ」または「ＩＬ１５Ｒａ」という用語は、ＩＬ１５に対する高親和性受容体である。ＩＬ１５Ｒａのアミノ酸配列（配列番号２）は、受託番号ＣＲ５４２０２３としても見出すことができる。
配列番号２
ＭＡＰＲＲＡＲＧＣＲＴＬＧＬＰＡＬＬＬＬＬＬＬＲＰＰＡＴＲＧＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＤＰＡＬＶＨＱＲＰＡＰＰＳＴＶＴＴＡＧＶＴＰＱＰＥＳＬＳＰＳＧＫＥＰＡＡＳＳＰＳＳＮＮＴＡＡＴＴＡＡＩＶＰＧＳＱＬＭＰＳＫＳＰＳＴＧＴＴＥＩＳＳＨＥＳＳＨＧＴＰＳＱＴＴＡＫＮＷＥＬＴＡＳＡＳＨＱＰＰＧＶＹＰＱＧＨＳＤＴＴＶＡＩＳＴＳＴＶＬＬＣＧＬＳＡＶＳＬＬＡＣＹＬＫＳＲＱＴＰＰＬＡＳＶＥＭＥＡＭＥＡＬＰＶＴＷＧＴＳＳＲＤＥＤＬＥＮＣＳＨＨＬ

「インターロイキン－２受容体ベータ」または「ＩＬ２Ｒｂ」という用語は、受容体媒介性エンドサイトーシスに関与するベータサブユニット受容体であり、ＩＬ２の有糸分裂シグナルを伝達する。それは、ＩＬ１５Ｒａとも関連しており、ＩＬ１５による好中球食作用の刺激に関与している。ヒトＩＬ２Ｒｂのアミノ酸配列（配列番号３）は、受託番号ＣＲ４５６５０６としても見出すことができる。
配列番号３
ＭＡＡＰＡＬＳＷＲＬＰＬＬＩＬＬＬＰＬＡＴＳＷＡＳＡＡＶＮＧＴＳＱＦＴＣＦＹＮＳＲＡＮＩＳＣＶＷＳＱＤＧＡＬＱＤＴＳＣＱＶＨＡＷＰＤＲＲＲＷＮＱＴＣＥＬＬＰＶＳＱＡＳＷＡＣＮＬＩＬＧＡＰＤＳＱＫＬＴＴＶＤＩＶＴＬＲＶＬＣＲＥＧＶＲＷＲＶＭＡＩＱＤＦＫＰＦＥＮＬＲＬＭＡＰＩＳＬＱＶＶＨＶＥＴＨＲＣＮＩＳＷＥＩＳＱＡＳＨＹＦＥＲＨＬＥＦＥＡＲＴＬＳＰＧＨＴＷＥＥＡＰＬＬＴＬＫＱＫＱＥＷＩＣＬＥＴＬＴＰＤＴＱＹＥＦＱＶＲＶＫＰＬＱＧＥＦＴＴＷＳＰＷＳＱＰＬＡＦＲＴＫＰＡＡＬＧＫＤＴＩＰＷＬＧＨＬＬＶＧＬＳＧＡＦＧＦＩＩＬＶＹＬＬＩＮＣＲＮＴＧＰＷＬＫＫＶＬＫＣＮＴＰＤＰＳＫＦＦＳＱＬＳＳＥＨＧＧＤＶＱＫＷＬＳＳＰＦＰＳＳＳＦＳＰＧＧＬＡＰＥＩＳＰＬＥＶＬＥＲＤＫＶＴＱＬＬＬＱＱＤＫＶＰＥＰＡＳＬＳＳＮＨＳＬＴＳＣＦＴＮＱＧＹＦＦＦＨＬＰＤＡＬＥＩＥＡＣＱＶＹＦＴＹＤＰＹＳＥＥＤＰＤＥＧＶＡＧＡＰＴＧＳＳＰＱＰＬＱＰＬＳＧＥＤＤＡＹＣＴＦＰＳＲＤＤＬＬＬＦＳＰＳＬＬＧＧＰＳＰＰＳＴＡＰＧＧＳＧＡＧＥＥＲＭＰＰＳＬＱＥＲＶＰＲＤＷＤＰＱＰＬＧＰＰＴＰＧＶＰＤＬＶＤＦＱＰＰＰＥＬＶＬＲＥＡＧＥＥＶＰＤＡＧＰＲＥＧＶＳＦＰＷＳＲＰＰＧＱＧＥＦＲＡＬＮＡＲＬＰＬＮＴＤＡＹＬＳＬＱＥＬＱＧＱＤＰＴＨＬＶ

本明細書で使用される「投与」、「投与すること」、「治療すること」、及び「治療」という用語は、動物、ヒト、実験対象、細胞、組織、器官、または生体液に適用される場合、動物、ヒト、対象、細胞、組織、器官、または生体液への外因性医薬品、治療剤、診断剤、または組成物の接触を意味する。細胞の処理は、試薬の細胞への接触、ならびに細胞と接触する流体への試薬の接触を包含する。「投与」及び「処理」という用語はまた、インビトロ及びエクスビボ処理、例えば、試薬、診断剤、結合化合物、または別の細胞による、細胞の処理を意味する。本明細書における「対象」という用語には、任意の生物、好ましくは動物、より好ましくは哺乳動物（例えば、ラット、マウス、イヌ、ネコ、ウサギ）、及び最も好ましくはヒトが含まれる。一態様において、任意の疾患または障害を処置することは、疾患または障害を緩和すること（すなわち、疾患またはその臨床症状のうちの少なくとも１つの発症を遅らせる、または阻止する、または減少させること）を指す。別の態様において、「治療する」、「治療すること」、または「治療」は、患者によって識別できない可能性のあるものを含む少なくとも１つの物理的パラメータを緩和または改善することを指す。更に別の態様において、「治療する」、「治療すること」、または「治療」は、疾患または障害を、物理的（例えば、識別可能な症状の安定化）、生理学的（例えば、物理的パラメータの安定化）のいずれか、またはその両方で調節することを指す。更に別の態様において、「治療する」、「治療すること」、または「治療」は、疾患または障害の発症または発達または進行を予防または遅延させることを指す。

本開示の文脈における「対象」という用語は、哺乳動物、例えば、霊長類、好ましくは高等霊長類、例えば、ヒト（例えば、本明細書に記載の障害を有するか、または有するリスクがある患者）である。

本明細書における「がん」または「腫瘍」という用語は、当該技術分野で理解される最も広い意味を有し、典型的には調節されていない細胞増殖を特徴とする哺乳動物における生理学的状態を指す。本開示の文脈において、がんは、特定の種類または位置に限定されない。

「腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）」という用語は、標的腫瘍上に発現される抗原であり、抗体または抗体の抗原結合断片は、そのＴＡＡに向けられ、特異的に結合する。例えば、本明細書に記載のＴＡＡは、ＰＤ－Ｌ１であり、この抗原に対して提起された抗体は、ＷＯ２０１６／０００６１９に開示されている。

本開示の文脈において、アミノ酸配列に言及する場合、「保存的置換」という用語は、元のアミノ酸の、ＩＬ１５構築物の化学的、物理的及び／または機能的特性、例えば、ＩＬ１５シグナル伝達経路に結合し活性化する能力を実質的に改変しない新しいアミノ酸による置換を意味する。具体的には、アミノ酸の一般的な保存的変換は当該技術分野で周知であり、以下に示す。

本明細書で使用される「ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅ」技術という用語は、１つのポリペプチド内に空間的隆起（ｋｎｏｂ）を導入し、他のポリペプチド内にソケットまたは空洞（ｈｏｌｅ）を導入する（それらが相互作用する界面において）ことによって、インビトロまたはインビボのいずれかで２つのポリペプチドの対合を一緒に指示するアミノ酸を指す。例えば、ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅは、抗体のＦｃ：Ｆｃ結合界面、ＣＬ：ＣＨＩ界面、またはＶＨ／ＶＬ界面に導入されている（例えば、ＵＳ２０１１／０２８７００９、ＵＳ２００７／０１７８５５２、ＷＯ９６／０２７０１１、ＷＯ９８／０５０４３１、及びＺｈｕ ｅｔ ａｌ．、１９９７、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ６：７８１－７８８を参照されたい）。いくつかの実施形態において、ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅは、特定のＩＬ１５構築物の発現中に、２つの異なる重鎖が一緒なるに正しい対合を保証する。例えば、Ｆｃ領域にｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅアミノ酸を有するＩＬ１５構築物は、ＩＬ１５構築物の第１の分子及びＩＬ１５構築物の第２の分子を更に含み得、これらの２つの分子は、少なくとも部分的に、ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅ相互作用を通じて組み立てられる。

本明細書で使用される「ｋｎｏｂ」という用語は、「ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅ」技術の文脈では、ポリペプチドが別のポリペプチドと相互作用する界面において、ポリペプチド内に隆起（ｋｎｏｂ）を導入するアミノ酸の変化を指す。いくつかの実施形態において、他のポリペプチドは、ｈｏｌｅ突然変異を有する。

本明細書で使用される「ｈｏｌｅ」という用語は、「ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅ」技術の文脈では、ポリペプチドが別のポリペプチドと相互作用する界面において、ポリペプチド内にソケットまたは空洞（ｈｏｌｅ）を導入するアミノ酸の変化を指す。いくつかの実施形態において、他のポリペプチドは、ｋｎｏｂ突然変異を有する。

パーセント配列同一性及び配列類似性を決定するのに適したアルゴリズムの例は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ，Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２，１９７７、及びＡｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０，１９９０にそれぞれ記載される、ＢＬＡＳＴアルゴリズムである。ＢＬＡＳＴ分析を行うためのソフトウェアは、アメリカ国立生物工学情報センター（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）を通じて一般に入手可能である。このアルゴリズムは、第１に、データベース配列において同じ長さのワードと整列するときに、一致するかまたは何らかの正値の閾値スコアＴを満たすクエリ配列における長さＷの短いワードを特定することによって、高スコアの配列対（ＨＳＰ）を特定することを含む。Ｔは、近傍ワードスコア閾値と称される。これらの初期の近隣ワードヒットは、それらを含むより長いＨＳＰを見つけるための検索を開始するための値として機能する。ワードヒットは、累積アライメントスコアを増加させることができる限り、各配列に沿って両方向に延びる。累積スコアは、ヌクレオチド配列について、パラメータＭ（マッチする残基の対についての報酬スコア、常に＞０）及びＮ（ミスマッチする残基についてのペナルティスコア、常に＜０）を使用して計算される。アミノ酸配列については、スコア化マトリックスを使用して累積スコアを算出する。各方向の単語ヒットの拡張は、累積アライメントスコアがその最大達成値から量Ｘだけ減少するか、１つ以上の負のスコア残基アライメントの累積に起因して累積スコアがゼロまたはゼロ以下になるか、または配列のいずれかの終わりに達した場合に停止される。ＢＬＡＳＴアルゴリズムパラメータＷ、Ｔ、及びＸは、アライメントの感度及び速度を決定する。ＢＬＡＳＴＮプログラム（ヌクレオチド配列について）は、デフォルトとして、１１の単語長（Ｗ）、１０の期待値（Ｅ）、Ｍ＝５、Ｎ＝４、及び両鎖の比較を使用する。アミノ酸配列については、ＢＬＡＳＴプログラムは、デフォルトとして、３の単語長、１０の期待値（Ｅ）、及び５０のＢＬＯＳＵＭ６２スコアリングマトリックス（Ｈｅｎｉｋｏｆｆ ａｎｄ Ｈｅｎｉｋｏｆｆ，（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８９：１０９１５）アライメント（Ｂ）、１０の期待値（Ｅ）、Ｍ＝５、Ｎ＝４、及び両鎖の比較を使用する。

ＢＬＡＳＴアルゴリズムはまた、２つの配列間の類似性の統計分析を行う（例えば、Ｋａｒｌｉｎ ａｎｄ Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：５８７３－５７８７，１９９３を参照されたい）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムが提供する類似性の１つの尺度は、最小合計確率（Ｐ（Ｎ））であり、これは、２つのヌクレオチドまたはアミノ酸配列の間の一致が偶然に起こり得る確率の指標を提供する。例えば、核酸は、試験核酸と参照核酸とを比較した際の最小合計確率が約０．２未満、より好ましくは約０．０１未満、最も好ましくは約０．００１未満である場合に、参照配列に類似しているとみなされる。

２つのアミノ酸配列間のパーセント同一性は、Ｅ．Ｍｅｙｅｒｓ及びＷ．Ｍｉｌｌｅｒのアルゴリズム（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．４：１１－１７，（１９８８））を使用して決定することもでき、これはＰＡＭ１２０ウエイト残基テーブル、１２のギャップ長ペナルティ及び４のギャップペナルティを使用して、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれている。加えて、２つのアミノ酸配列間のパーセント同一性は、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４４－４５３，（１９７０）を使用して決定でき、ＢＬＯＳＵＭ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックスのいずれかを使用したＧＣＧソフトウェアパッケージ中のＧＡＰプログラムに取り込まれているアルゴリズム、及び１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップウエイト及び１、２、３、４、５または６の長さウエイトである。

「核酸」という用語は、本明細書で「ポリヌクレオチド」という用語と同義に使用され、一本鎖または二本鎖のいずれかの形態でのデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド及びそのポリマーを指す。この用語は、既知のヌクレオチド類似体または修飾された骨格残基または結合を含有する核酸を包含し、これらは、合成物、天然存在物、及び非天然存在物であり、参照核酸と同様の結合特性を有し、参照ヌクレオチドと同様の方法で代謝される。かかる類似体の例としては、限定されないが、ホスホロチオエート、ホスホラミデート、メチルホスホネート、キラルメチルホスホネート、２－Ｏ－メチルリボヌクレオチド、ペプチド核酸（ＰＮＡ）が挙げられる。

「作用可能に連結された」または核酸の関連では、２つ以上のポリヌクレオチド（例えば、ＤＮＡ）セグメント間の機能的関係を指す。典型的には、転写調節配列と転写配列との機能的関係を指す。例えば、プロモーターまたはエンハンサー配列は、適切な宿主細胞または他の発現系におけるコード配列の転写を刺激または調節する場合、コード配列に作動可能に連結される。一般に、転写配列に作動可能に連結されているプロモーター転写調節配列は、転写配列に物理的に連続しており、すなわち、それらはシス作動性である。しかしながら、エンハンサー等のいくつかの転写調節配列は、それらが増強するコード配列に物理的に連続しているか、または近接して位置する必要はない。

「リンカー」、「リンクされた」、「～にリンクされた」、または「リンカーされた」という用語は、２つのポリペプチドの間に挿入され、したがってそれらを一緒に結合する、少なくとも２つのアミノ酸のポリペプチド（タンパク質）を指す。リンカーは、切断可能ではないか、またはプロテアーゼ活性化可能な（切断可能な）部分を有することができる。リンカーの例を以下の表３及び表４に示す。

いくつかの態様において、本開示は、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とともに製剤化される、本明細書に記載のＩＬ１５構築物を含む組成物、例えば、薬学的に許容される組成物を提供する。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、生理学的に適合性である任意の及びすべての溶媒、分散媒体、等張剤及び吸収遅延剤等を含む。賦形剤は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、直腸、脊髄、または表皮投与（例えば、注射または注入による）に好適であり得る。

本明細書に開示される組成物は、様々な形態であることができる。これらには、例えば、液体溶液（例えば、注射及び注入溶液）、分散液または懸濁液、リポソーム、及び坐剤等の液体、半固体及び固体剤形が含まれる。好適な形態は、意図される投与様式及び治療的適用に依存する。典型的な好適な組成物は、注射液または注入液の形態である。１つの好適な投与様式は、非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）である。いくつかの実施形態において、ＩＬ１５構築物は、静脈内注入または注射によって投与される。ある特定の実施形態において、ＩＬ１５構築物は、筋肉内または皮下注射によって投与される。

本明細書で使用される「治療有効量」という用語は、疾患、または疾患もしくは障害の臨床症状のうちの少なくとも１つを治療するために対象に投与するときに、疾患、障害、または症状に対してそのような治療を行うのに十分であるＩＬ１５構築物の量を指す。「治療有効量」は、ＩＬ１５構築物、疾患、障害、及び／または疾患もしくは障害の症状、疾患、障害、及び／または疾患または障害の症状の重症度、治療される対象の年齢、及び／または治療される対象の体重によって変化し得る。任意の所与の事例における適切な量は、当業者には明らかであり得るか、または日常的な実験によって決定することができる。併用療法の場合、「治療有効量」とは、疾患、障害または状態の有効な治療のための併用物の総量を指す。

「併用療法」という用語は、本開示に記載される治療的状態または障害を治療するための２つ以上の治療剤の投与を指す。かかる投与は、実質的に同時の様式でのこれらの治療剤の同時投与を包含する。かかる投与はまた、各活性成分について、複数の容器内または別々の容器内（例えば、カプセル、粉末、及び液体）での同時投与を包含する。粉末及び／または液体は、投与前に所望の用量に再構成または希釈され得る。更に、このような投与は、ほぼ同じ時間または異なる時間のいずれかで、各種の治療剤を順次使用することも包含する。いずれの場合においても、治療レジメンは、本明細書に記載の状態または障害の治療において薬物併用の有益な効果を提供する。

本明細書で使用される場合、「と組み合わせて」という語句は、ＩＬ１５構築物が、追加の治療剤の投与と同時に、その直前に、またはその直後に、対象に投与されることを意味する。ある特定の実施形態において、ＩＬ１５構築物は、追加の治療剤との共製剤として投与される。

本開示は、ＩＬ１５シグナル伝達経路に結合し、活性化するＩＬ１５構築物を提供する。更に、本開示は、所望の薬物動態特性及び他の所望の属性を有し、したがって、がんの可能性を低減するために、またはがんを治療するために使用することができるＩＬ１５構築物を提供する。本開示は、がん及び関連する障害の予防及び治療のために、ＩＬ１５構築物を含む薬学的組成物、ならびにそのようなＩＬ１５構築物の薬学的組成物を作製及び使用する方法を更に提供する。

本開示の他のＩＬ１５構築物としては、アミノ酸またはアミノ酸をコードする核酸が変化しているが、表２に記載の配列と少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％のパーセント同一性を有するものが挙げられる。いくつかの態様において、それは、実質的に同じ治療活性を保持しながら、表２に記載の配列と比較して、１、２、３、４または５個までのアミノ酸が変化しているアミノ酸配列の変化を含む。

リンカー
ＩＬ１５構築物のポリペプチド鎖のドメイン及び／または領域は、様々な長さのリンカー領域を含有することができることもまた理解される。いくつかの実施形態において、ＩＬ１５構築物ドメインは、リンカー領域によって互いに分離される。例えば、ＩＬ１５Ｒａ－（リンカー）－ＩＬ１５。いくつかの態様において、リンカーは、プロテアーゼ活性化可能な（切断可能な）部分を含有することができる。

いくつかの実施形態において、アミノ酸グリシン及びセリンは、リンカー（「ＧＳ」リンカー）のアミノ酸を含む。別の実施形態において、リンカーは、限定されないが、表３またはそれらの任意の組み合わせのリンカーであり得る。

他の実施形態において、リンカーは、プロテアーゼ活性化可能な（切断可能な）部分を含む。ある特定の実施形態において、プロテアーゼ活性化可能な部分は、限定するものではないが、表４のリンカーまたはそれらの任意の組み合わせであり得る。表５は、代表的な構築物の文脈におけるプロテアーゼ活性化可能な部分の配置を示す。

Ｆｃ領域
更に他の態様において、少なくとも１つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基で置き換えてエフェクター機能を改変することにより、Ｆｃ領域が改変される。例えば、１つ以上のアミノ酸は、Ｆｃ領域がエフェクターリガンドに対する改変された親和性を有するように、異なるアミノ酸残基で置き換えることができる。親和性が改変されるエフェクターリガンドは、例えば、Ｆｃ受容体または補体のＣ１成分であり得る。このアプローチについては、例えば、米国特許第５，６２４，８２１号及び同第５，６４８，２６０号（いずれもＷｉｎｔｅｒら）に記載されている。

別の態様において、Ｆｃ領域が改変されたＣ１ｑ結合及び／または低減もしくは消失された補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を有するように、１つ以上のアミノ酸残基が、１つ以上の異なるアミノ酸残基に置き換えられ得る。このアプローチについては、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号（Ｉｄｕｓｏｇｉｅら）に記載されている。

更に別の態様において、１つ以上のアミノ酸残基が変更され、それにより、補体を固定するＦｃ領域の能力が改変される。このアプローチは、例えば、Ｂｏｄｍｅｒらによる公開第ＷＯ９４／２９３５１号に記載される。特定の態様において、本開示のＩＬ１５構築物の１つ以上のアミノ酸は、ＩｇＧ１サブクラス及びカッパアイソタイプについての１つ以上のアロタイプのアミノ酸残基によって置き換えられる。アロタイプのアミノ酸残基には、限定されないが、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、及びＩｇＧ３サブクラスの重鎖の定常領域、ならびにＪｅｆｆｅｒｉｓ ｅｔ ａｌ．，ＭＡｂ．１：３３２－３３８（２００９）によって記述されるカッパアイソタイプの軽鎖の定常領域も含まれる。

別の態様において、ＡＤＣＣの低減が所望される場合、ＩｇＧ４のＦｃ領域は、多くの以前の報告において、適度なＡＤＣＣのみを有し、ＣＤＣエフェクター機能をほとんど有しないことが示された（Ｍｏｏｒｅ ＧＬ，ｅｔ ａｌ．２０１０ ＭＡｂｓ，２：１８１－１８９）。しかしながら、天然のＩｇＧ４は、酸性緩衝液中または昇温等のストレス条件において安定性が低いことが見出された（Ａｎｇａｌ，Ｓ．１９９３ Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，３０：１０５－１０８、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ，Ｗ．ｅｔ ａｌ，１９９８ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３７：９２６６－９２７３、Ａａｌｂｅｒｓｅ ｅｔ ａｌ．２００２ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１０５：９－１９）。低減されたＡＤＣＣは、ＩＬ５構築物を、ＦｃγＲ結合またはＣ１ｑ結合活性を低減する改変の組み合わせによって操作されたＩｇＧ４ Ｆｃに動作可能に結合し、それによってＡＤＣＣ及びＣＤＣエフェクター機能を低減または排除することによって達成することができる。生物学的治療剤としてのＩＬ１５構築物の物理化学的特性を考慮すると、ＩｇＧ４のより望ましくない内在的特性の１つは、溶液中におけるその２つの重鎖の動的分離である（Ｖａｎ ｄｅｒ Ｎｅｕｔ Ｋｏｌｆｓｃｈｏｔｅｎ Ｍ，ｅｔ ａｌ．２００７ Ｓｃｉｅｎｃｅ，３１７：１５５４－１５７）。２２８位（ＥＵ番号付けシステム）におけるセリンのプロリンへの突然変異は、ＩｇＧ４重鎖分離に対して阻害されるように見えた（Ａｎｇａｌ，Ｓ．１９９３ Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，３０：１０５－１０８、Ａａｌｂｅｒｓｅ ｅｔ ａｌ．２００２ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１０５：９－１９）。ヒンジ及びγＦｃ領域内のアミノ酸残基のいくつかは、Ｆｃγ受容体とのＦｃ領域相互作用に影響を及ぼすことが報告された（Ｃｈａｐｐｅｌ Ｓ Ｍ，ｅｔ ａｌ．１９９１ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：９０３６－９０４０、Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ，Ｊ． ｅｔ ａｌ．，１９９５ ＦＡＳＥＢ Ｊ，９：１１５－１１９、Ａｒｍｏｕｒ，Ｋ．Ｌ． ｅｔ ａｌ．，１９９９ Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２９：２６１３－２６２４、Ｃｌｙｎｅｓ，Ｒ．Ａ． ｅｔ ａｌ，２０００ Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，６：４４３－４４６、Ａｒｎｏｌｄ Ｊ．Ｎ．，２００７ Ａｎｎｕ Ｒｅｖ ｉｍｍｕｎｏｌ，２５：２１－５０）。更に、ヒト集団において稀に生じるいくつかのＩｇＧ４アイソフォームはまた、異なる物理化学的特性を誘発することができる（Ｂｒｕｓｃｏ，Ａ． ｅｔ ａｌ．１９９８ Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔ，２５：３４９－５５、Ａａｌｂｅｒｓｅ ｅｔ ａｌ．２００２ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１０５：９－１９）。低いＡＤＣＣ及びＣＤＣを有するが良好な安定性を有するＩＬ１５構築物を生成するために、ヒトＩｇＧ４のヒンジ及びＦｃ領域を修飾し、いくつかの改変を導入することが可能である。これらの修飾ＩｇＧ４ Ｆｃ分子は、Ｌｉらによる配列番号８３－８８、米国特許第８，７３５，５５３号に見出すことができる。
Ｆｃドメインは、アミノ酸変化を介して修飾して、「ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅ」技術を提供し、インビトロまたはインビボのいずれかで２つのポリペプチドのペアリングを一緒に指示することができる。例えば、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃにおける「ｋｎｏｂ－ｉｎ－ｈｏｌｅ」突然変異を導入して、ヘテロ二量体形成を促進した（Ｒｉｄｇｗａｙ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔ．Ｅｎｇ．１９９６ ９：６１７－６２１）。加えて、抗体のＦｃ：Ｆｃ結合界面、ＣＬ：Ｃｈｉ界面、またはＶＨ／ＶＬ界面にｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅを導入した（例えば、ＵＳ２０１１／０２８７００９、ＵＳ２００７／０１７８５５２、ＷＯ９６／０２７０１１、ＷＯ９８／０５０４３１、及びＺｈｕ ｅｔ ａｌ．、１９９７、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ６：７８１－７８８を参照されたい）。いくつかの実施形態において、ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅは、２つの異なる重鎖の正しい対合を保証して、特定のＩＬ１５構築物を生成する。

ＩＬ１５構築体の生成
ＩＬ１５構築物は、限定されないが、組換え発現または化学合成を含む、当該技術分野で既知の任意の手段によって生成され得る。組換え発現は、当該技術分野で既知の任意の適切な宿主細胞、例えば、哺乳動物宿主細胞、細菌宿主細胞、酵母宿主細胞、昆虫宿主細胞等に由来し得る。

本開示において、ＩＬ１５構築物を生成するための発現ベクター及び宿主細胞も提供される。発現ベクターの選択は、ベクターが発現されることが意図される宿主細胞に依存する。典型的には、発現ベクターは、ＩＬ１５構築物をコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結されるプロモーター及び他の調節配列（例えば、エンハンサー）を含有する。いくつかの態様において、誘導性プロモーターは、誘導条件の制御下にある場合以外に挿入された配列の発現を防止するために使用される。誘導性プロモーターとしては、例えば、アラビノース、ｌａｃＺ、メタロチオネインプロモーター、または熱ショックプロモーターが挙げられる。形質転換された生物の培養物は、発現産物が宿主細胞によってより良好に許容されるコード配列のために集団を偏らせることなく、非誘導条件下で増殖させることができる。プロモーターに加えて、他の調節エレメントも、ＩＬ１５構築物の効率的な発現のために必要とされ、または所望され得る。これらのエレメントは、典型的には、ＡＴＧ開始コドン及び隣接リボソーム結合部位または他の配列を含む。加えて、発現の効率は、使用中の細胞系に適切なエンハンサーを含めることによって高めることができる（例えば、Ｓｃｈａｒｆ ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｐｒｏｂｌ．Ｃｅｌｌ Ｄｉｆｆｅｒ．２０：１２５，１９９４、及びＢｉｔｔｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１５３：５１６，１９８７を参照されたい）。例えば、ＳＶ４０エンハンサーまたはＣＭＶエンハンサーを使用して、哺乳類宿主細胞における発現を増加させることができる。

ＩＬ１５構築物を保有及び発現するための宿主細胞は、原核細胞であっても真核細胞であってもよい。Ｅ．ｃｏｌｉは、本開示のポリヌクレオチドのクローニング及び発現に有用な１つの原核宿主である。使用に適した他の微生物宿主としては、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ等の桿菌、及びＳａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、及び種々のＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ種等の他の腸内細菌科が挙げられる。これらの原核宿主において、発現ベクターを作製することもでき、これは典型的には、宿主細胞（例えば、複製起点）に適合する発現制御配列を含有する。加えて、ラクトースプロモーター系、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系、ベータラクタマーゼプロモーター系、またはファージラムダ由来のプロモーター系等、任意の数の様々な既知のプロモーターが存在するであろう。プロモーターは、典型的には、任意選択的にオペレーター配列によって発現を制御し、転写及び翻訳を開始及び完了するための、リボソーム結合部位配列等を有する。酵母等の他の微生物も、ＩＬ１５構築物を発現するために使用することができる。バキュロウイルスベクターと組み合わせた昆虫細胞も使用することができる。

他の態様において、哺乳動物宿主細胞を使用して、本開示のＩＬ１５構築物を発現及び産生することができる。例えば、それらは、外因性発現ベクターを有する哺乳動物細胞株であってもよい。これらには、任意の正常な致死または正常または異常な不死の動物またはヒト細胞が含まれる。例えば、ＣＨＯ細胞株、様々なＣＯＳ細胞株、及びＨＥＫ２９３細胞を含む、インタクトなポリペプチドを分泌することができるいくつかの好適な宿主細胞株が開発されている。ポリペプチドを発現するための哺乳類組織細胞培養物の使用は、概して、例えば、Ｗｉｎｎａｃｋｅｒ，Ｆｒｏｍ Ｇｅｎｅｓ ｔｏ Ｃｌｏｎｅｓ，ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，ＮＹ，Ｎ．Ｙ．，１９８７において議論される。哺乳類宿主細胞の発現ベクターは、複製起点、プロモーター、及びエンハンサー等の発現制御配列（例えば、Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．８９：４９－６８，１９８６を参照されたい）、及びリボソーム結合部位、ＲＮＡスプライス部位、ポリアデニル化部位、及び転写ターミネーター配列等の必要なプロセシング情報部位を含む。これらの発現ベクターは、通常、哺乳動物遺伝子または哺乳動物ウイルスに由来するプロモーターを含有する。好適なプロモーターは、構成的、細胞型特異的、ステージ特異的、及び／または調節可能（ｍｏｄｕｌａｔａｂｌｅ）または調節可能（ｒｅｇｕｌａｔａｂｌｅ）であり得る。有用なプロモーターとしては、メタロチオネインプロモーター、構成的アデノウイルス主要後期プロモーター、デキサメタゾン誘導性ＭＭＴＶプロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＭＲＰポリＩＩＩプロモーター、構成的ＭＰＳＶプロモーター、テトラサイクリン誘導性ＣＭＶプロモーター（ヒト最初期ＣＭＶプロモーター等）、構成的ＣＭＶプロモーター、及び当該技術分野において知られているプロモーター－エンハンサーの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

治療方法
本開示のＩＬ１５構築物は、がん、感染症または免疫障害の治療方法を含むがこれらに限定されない様々な用途において有用である。

一態様において、本開示は、がんの治療方法を提供する。ある特定の態様において、方法は、有効量のＩＬ１５構築物を必要とする患者に投与することを含む。がんとしては、胃癌、結腸癌、膵臓癌、乳癌、頭頚部癌、腎臓癌、肝臓癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、皮膚癌、中皮腫、リンパ腫、白血病、骨髄腫及び肉腫が挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書に開示されるＩＬ１５構築物は、非経口、肺内、及び鼻腔内を含む任意の好適な手段によって投与することができ、所望の場合、局所治療、病変内投与を含む。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与が含まれる。投薬は、投与が短期であるか、または長期であるかに部分的に依存して、任意の適した経路、例えば、静脈内または皮下注射等の注入によることができる。限定されないが、様々な時点での単回または複数回投与、ボーラス投与、及びパルス注入を含む様々な投薬スケジュールが本明細書において企図される。

本開示のＩＬ１５構築物は、良好な医療行為と一致する様式で製剤化、投薬、及び投与することができる。この文脈における考慮の要因には、治療されている特定の障害、治療されている特定の哺乳動物、個々の患者の臨床的病態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与のスケジュール管理、及び医療従事者に既知の他の要因が含まれる。ＩＬ１５構築物は、必要ではないが、問題の障害を予防または治療するために現在使用されている１つ以上の薬剤とともに任意選択的に製剤化される。かかる他の薬剤の有効量は、製剤中に存在するＩＬ１５構築物の量、障害または治療の種類、及び上記で議論された他の要因に依存する。これらは、一般に、本明細書に記載されるのと同じ投薬量、投与経路により、または本明細書に記載される投薬量の約１～９９％、または適切であると経験的／臨床的に決定される任意の投薬量で、任意の経路によって、使用される。

疾患の予防または治療のために、本開示のＩＬ１５構築物の適切な投薬量は、治療される疾患の種類、疾患の重症度及び経過、ＩＬ１５構築物が予防的または治療的目的のために投与されるかどうか、以前の治療、患者の臨床経歴及びＩＬ１５構築物に対する応答、ならびに主治医の裁量に依存する。ＩＬ１５構築物は、一度にまたは一連の治療にわたって患者に好適に投与される。疾患の種類及び重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇのＩＬ１５構築物は、例えば、１回以上の別個の投与によるか、または連続注入によるかにかかわらず、患者への投与のための初期候補投薬量であり得る。１つの典型的な１日の投薬量は、上述の要因に応じて、約１μｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。病態に依存する、数日間またはより長い日数にわたる反復投与について、治療は、一般に、疾患症状の所望の抑制が生じるまで持続されるであろう。そのような用量は、断続的に、例えば、毎週または３週間毎に（例えば、患者が約２～約２０回、または例えば、約６回のＩＬ１５構築物の用量を受けるように）投与することができる。最初により高い負荷用量、続いて１つ以上のより低い用量を投与することができる。しかしながら、他の投薬レジメンが有用であり得る。この治療法の進行は、従来の技術及びアッセイによって容易に監視される。

併用療法
一態様において、本開示のＩＬ１５構築物は、他の治療剤と併用することができる。本開示のＩＬ１５構築物とともに使用することができる他の治療剤としては、化学療法剤（例えば、パクリタキセルまたはパクリタキセル剤（例えば、Ａｂｒａｘａｎｅ（登録商標））、ドセタキセル、カルボプラチン、トポテカン、シスプラチン、イリノテカン、ドキソルビシン、レナリドミド、５－アザシチジン、イホスファミド、オキサリプラチン、ペメトレキセド二ナトリウム、シクロホスファミド、エトポシド、デシタビン、フルダラビン、ビンクリスチン、ベンダムスチン、クロラムビル、ブスルファン、ゲムカビン、メルファン、ペンタチンタチン、ミトキストロン、ピセトレキセトリウム二ナトリウム）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、エルロチニブ）、マルチキナーゼ阻害剤（例えば、シトラバチニブ）、ＣＤ－２０標的化剤（例えば、リツキシマブ、オファツムマブ）、ＣＤ５２標的化剤（例えば、アレムツズマブ）、プレドニソロン、レナリドミン、Ｂｃｌ－２阻害剤（例えば、オブレメセンナトリウム）、オーロラキナーゼ阻害剤、プロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、ＭＥＫ阻害剤（例えば、ＡＢＴ－３４８）、ＪＡＫ－２阻害剤（例えば、ＩＮＣＢ０１８４２４）、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、テムシロリムス、エベロリムス）、ＢＣＲ／ＡＢＬ阻害剤（イマチニブ）が含まれるが、これらに限定されない。

一態様において、本開示のＩＬ１５構築物は、免疫チェックポイント剤と組み合わせて投与される。限定するものではないが、免疫チェックポイント剤は、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ３、ＬＡＧ－３、ＯＸ４０、またはＴＩＧＩＴ抗体であり得る。一態様において、抗ＰＤ１抗体は、チスレリズマブであり得る。一態様において、抗ＰＤ１抗体は、オシペリマブまたはチスレリズマブ及びオシペリマブの組み合わせであり得る。

別の態様において、ＩＬ１５は、細胞療法において投与され、細胞療法の患者への投与の前、その間、またはその後に投与されるとき、Ｔ細胞またはＮＫ細胞等の免疫細胞に有益な効果を提供する。抗ＣＤ１９キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含有するＮＫ細胞については、ＮＫ細胞の機能及び持続性を支持するためにＩＬ１５融合導入遺伝子を導入した（Ｋａｕｆｍａｎ ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ ２０１８ ｖ．３２，ｓｕｐｐ．１，４５４１）。ＮＫ細胞に導入されたＥＧＦＲ ＣＡＲを、ＩＬ１５構築物と組み合わせて投与して、膠芽腫モデルにおける効力を促進した（Ｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ，Ｒｅｓ．，２０２１ ８１（１３）３６３５－４８）。ＣＤ１２３ＣＡＲを形質導入したＮＫ９２細胞を、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を標的にするように設計した。レトロウイルスベクターを使用して、インビボでのＮＫ細胞持続性の増加を可能にするヒトＩＬ－１５の構成的発現のための導入遺伝子カセットを導入した（Ｍｏｒｇａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｖｉｒｕｓｅｓ ２０２１ １３（７）：１３６５）。

薬学的組成物及び製剤
ＩＬ１５構築物を含む、薬学的製剤を含む組成物も提供される。ある特定の実施形態において、組成物は、１つ以上のＩＬ１５構築物、または１つ以上のＩＬ１５構築物をコードする配列を含む１つ以上のポリヌクレオチドを含む。これらの組成物は、当該技術分野で周知である、緩衝液を含む薬学的に許容される賦形剤等の好適な担体を更に含むことができる。

本明細書に記載のＩＬ１５構築物の薬学的組成物は、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で、所望の純度を有するかかるＩＬ１５構築物を１つ以上の任意選択の薬学的に許容される担体と混合することによって調製される（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））。薬学的に許容される担体は、一般に、使用される投薬量及び濃度でレシピエントに対して無毒であり、以下を含むが、これらに限定されない：リン酸、クエン酸、及び他の有機酸等の緩衝剤、アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤、保存剤（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、ヘキサメトニウムクロリド、ベンザルコニウムクロリド、ベンゼトニウムクロリド、フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール、メチルまたはプロピルパラベン等のアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール、及びｍ－クレゾール）、低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド、タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン、ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジン等のアミノ酸、単糖類、二糖類、及びグルコース、マンコース、またはデキストリンを含む他の炭化水素、ＥＤＴＡ等のキレート剤、スクロース、マンニトール、トレハロース、またはソルビトール等の糖、ナトリウム等の塩形成カウンターイオン、金属複合体（例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体）、及び／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン性界面活性剤。本明細書における例示的な薬学的に許容される担体として、可溶性中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ヒト可溶性ＰＨ－２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）等の間質性薬物分散剤が更に含まれる。ｒＨｕＰＨ２０を含む、ある特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰ及び使用方法は、米国特許第７，８７１，６０７号及び２００６／０１０４９６８に記載されている。一態様において、ｓＨＡＳＥＧＰは、コンドロイチナーゼ等の１つ以上の更なるグリコサミノグリカナーゼと組み合わせられる。

例示的な凍結乾燥製剤は、米国特許第６，２６７，９５８号に記載されている。水性製剤としては、米国特許第６，１７１，５８６号及びＷＯ２００６／０４４９０８に記載されているものが挙げられ、後者の製剤は、ヒスチジン－酢酸緩衝液を含む。

持続放出製剤を調製することができる。持続放出製剤の好適な例としては、マトリックスが成形品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である、ＩＬ１５構築物を含有する固体疎水性ポリマーの半透過性マトリックスが挙げられる。インビボ投与のために使用される製剤は、一般に滅菌されている。滅菌性は、例えば、滅菌濾過膜を介した濾過によって容易に達成され得る。

実施例１：異なるＩＬ１５構築物で処理したＨＨ細胞株におけるホスホリルＳＴＡＴ５の評価
ＨＨ細胞は、ＡＴＣＣ（ＣＲＬ－２１０５）から得たヒトＴリンパ球／白血病細胞株である。新しい培地の添加または置き換えによって培養物を維持した。細胞培養を２×１０５細胞／ｍＬで開始し、培地を２～３日毎に更新しながら、１×１０５～１×１０６細胞／ｍＬを維持した。使用したＩＬ１５は、改変されていないＩＬ１５であった。Ｐ２２３３９は、ＩＬ１５Ｒａのｓｕｓｈｉドメインに連結され、Ｆｃに連結されたＩＬ１５の２つの分子からなる、公開されたＩＬ１５構築物である（Ｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．２０１８ ８：７６７５を参照されたい）。
ＩＬ－１５刺激
１．細胞を、ＰＢＳ＋０．５％ＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ ＭＯ）緩衝液中に再懸濁し、Ｕ９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ（商標）＃３７９９）に５×１０４個の細胞／２５μｌ／ウェルで播種した。
２．試験プレートを、１０００ｎＭから開始する６×溶液として、ＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ ＃１４１９０２５０、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ ＭＤ）＋０．５％のＢＳＡ緩衝液中で調製した（最終濃度）。１１用量のための４回の連続希釈。溶媒をビヒクルとして調製する。
３．各試験ウェルに５μｌの調製された化合物溶液を入れ、３７℃、５％ＣＯ２で１５分間インキュベートした。
ＣｉｓＢｉｏ（商標）（ＣｉｓＢｉｏ ＃６４ＡＴ５ＰＥＧ）からのＨＴＲＦ Ｐｈｏｓｐｈｏ－ＳＴＡＴ５（Ｔｙｒ６９４）Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔを使用して、Ｐｈｏｓｐｈｏ－ＳＴＡＴ５（Ｔｙｒ６９４）を試験した。
４．細胞処理後、１０μＬの補充された溶解緩衝液（４×）を添加し、振盪下にて室温で少なくとも６０分間インキュベートした。
５．細胞が溶解したら、１６μＬの細胞溶解物をＣｉｓｂｉｏ ９６ウェルＨＴＲＦ検出プレート（Ｃｉｓｂｉｏ ６６ＰＬ９６０２５）に移し、４μＬの予め混合されたＨＴＲＦ抗体を各ウェルに添加した。
６．プレートをプレートシーラーで覆い、室温で一晩インキュベートした。
７．プレートを読み取り、蛍光発光を２つの異なる波長（６６５ｎｍ及び６２０ｎｍ）で取得した。

このアッセイは、特定の構築物の活性についての洞察を提供した。図１５において、二価の構築物ＢであるＭ４３構築物は、切断プロテアーゼであるマトリプターゼの存在下で、ＩＬ１５及びＰ２２３３９と同様のレベル及び曲線でｐＳＴＡＴ５活性化を示した。対照的に、マトリプターゼ切断されないＭ４３は、ほとんど活性を示さなかった。二価の構築物ＣであるＭ１０１構築物は、切断前及び切断後には、ＩＬ１５によって示されるｐＳＴＡＴ５活性化のレベルに達しなかったが、ほとんど活性を示さなかった。このデータを図１６に示す。構築物Ａ形式であるＭ１３５は、マトリックスメタロプロテアーゼ２（ＭＭＰ２）プロテアーゼが存在しないときにほとんど活性を示さなかった。ＭＭＰ２の存在下で、Ｍ１３５は、低濃度ではＰ２２３３９と同様の活性を示したが、高濃度では同様の活性を示さなかった（図１７）。しかしながら、Ｍ１７６（構築物Ａ）は、ＭＭＰ２の存在下では、Ｐ２２３３９と非常に類似した活性化曲線を示した（図１８）。Ｍ１７８（構築物Ａ）は、マトリックスメタロプロテアーゼ９（ＭＭＰ９）の存在下で高い活性を示し、マトリックスメタロプロテアーゼ１４（ＭＭＰ１４）の存在下で中度の活性を示し、この特定の構築物においてＭＭＰ１４がＭＭＰ９ほど有効なプロテアーゼではなかったことを示した（図１９）。ＭＭＰ２の存在下でＭ１８１（構築物Ａ）は非常に高いｐＳＴＡＴ５活性を有し、ＭＭＰ２が存在しない場合、活性は非常に低かった（図２０）。異なるタイプの構築物を使用すると、ＭＫ１０７（構築物Ｅ１）は、ＭＭＰ２が存在しないときに、非常に低い活性を有するＭＭＰ２の存在下で非常に高いｐＳＴＡＴ５活性を有した（図２１）。同様の結果がＭＫ１３７／ＭＨ７構築物（構築物Ｅ３）で見られ、メタロプロテアーゼが存在しない場合は活性が非常に低かったが、ＭＭＰ２が存在する場合は活性が非常に高かった（図２２）。図２３（ＭＫ１４２、構築物Ｎ）及び図２４（ＭＫ６、構築物Ｆ３）では、メタロプロテアーゼの非存在下において高濃度で試験した場合、構築物は部分的な活性を示したが、ＭＭＰ２の存在下で低濃度では高い活性を示した。ＭＫ１５６（構築物Ｎ）は、ＭＭＰ２の存在下で良好な活性を示し、プロテアーゼの不在下では高濃度で活性を示した。このデータを図２５に示す。

実施例２：Ｍ０７ｅ細胞増殖アッセイ
Ｍ０７ｅ細胞
Ｍ０７ｅ細胞は、ヒト巨核球株である。Ｍ０７ｅ細胞は、Ｎａｎｊｉｎｇ ＣｏＢｉｏｅｒ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｃｏ．，Ｌｔｄ社（ＣＯＢＩＯＥＲ ＃ＣＢＰ６０７９１）から入手した。細胞培養物を、新しい培地を添加または交換することによって、１０％ＦＢＳ及びＧＭ－ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）またはＩＬ－２（１０ｎｇ／ｍｌ）でＲＰＭＩ１６４０に維持した。アッセイ培養を２×１０５細胞／ｍＬで開始し、１×１０５細胞～１×１０６細胞／ｍＬで維持した。Ｍ－０７ｅ細胞は、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－アルファ、ＩＦＮ－ベータ、ＩＦＮ－ガンマ、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１５、ＮＧＦ、ＳＣＦ、ＴＮＦ－アルファ及びＴＰＯの存在下で増殖する。ＩＬ１５試薬を実施例１に記載のように得た。ＩＬ－２はＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓから入手した（＃２０２－ＩＬ）。
ＩＬ－１５刺激細胞増殖
１．細胞を収集し、サイトカイン無しで１６４０＋１０％ＦＢＳに再懸濁し、９６ウェルプレートに０．８～１×１０４細胞／９０μｌ／ウェルで播種した。
２．アッセイ培養物を、１０００ｎＭから開始する１０×溶液として、ＰＢＳ＋０．５％のＢＳＡ緩衝液中で調製した（最終濃度）。９用量のための４回連続希釈。ＰＢＳを希釈剤として使用した。
３．調製した１０μｌの１０×化合物溶液を各試験ウェルに２重に分配する。３７℃、５％ＣＯ２で７２～９６時間インキュベートする。
４．発光の読み出しは、マトリプターゼ有り、または無しで、Ｐ２２３３９またはＭ１８１構築物で処理した場合のＭ０７ｅ増殖の指標を提供した。

図２６に示すように、Ｍ１８１構築物（構築物Ａ）は、タンパク質分解的に処理されていないときに、ごくわずかな増殖活性を有した。対照的に、Ｍ１８１構築物をマトリプターゼで処理した場合、Ｍ１８１構築物は、Ｐ２２３３９ ＩＬ１５構築物と非常に類似した活性を示した。

実施例３：ＩＣＲマウスにおけるＭＫ１３７／ＭＨ７の最大許量決定
Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，ＬｔｄからＩＣＲマウスを得た。雌ＩＣＲマウスを体重に応じて群あたり６匹の１３群に無作為化した。ＩＣＲマウスにおける各薬物の一般的な毒性効果をモニタリングするために、７つの群からのマウスに、単回用量のビヒクル（１０ｍＭヒスチジン、１０ｍＭ酢酸、２４０ｍＭスクロース、０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０、ｐＨ５．５）または０．３、１及び３ｍｇ／ｋｇのＰ２２３３９または１０、３０及び１００ｍｇ／ｋｇのＭＫ１３７／ＭＨ７を腹腔内注射した。体重は毎日記録され、マウスも研究中を通じて毒性の臨床的徴候について毎日監視された。

各薬物の薬物動態（ＰＫ）を評価するために、他の６つの群のマウスに、単回用量の０．３、１及び３ｍｇ／ｋｇのＰ２２３３９及び１０、３０及び１００ｍｇ／ｋｇのＭＫ１３７／ＭＨ７を同時に腹腔内注射した。これの概略図を図２７Ａに示す。投与前及び投与後０．５、２、８、２４、４８、７２、９６、１２０、１４４、及び１６８時間に、イソフルラン／酸素麻酔下で後眼窩洞から血液試料を収集した。異なる用量及び時点での血清中のＰ２２３３９及びＭＫ１３７／ＭＨ７の濃度をＥＬＩＳＡによって測定した。抗ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ抗体を捕捉抗体、抗ヒトＩＬ１５Ｒａ抗体を検出抗体とする。

全７８匹のマウスの生存時間を記録し、各薬物の最大耐量（ＭＴＤ）を決定した。この結果を図２７Ｂに示し、ＭＫ１３７／ＭＨ７構築物で処置したマウスは、より良好な生存曲線及び限定された体重減少を有し（図２７Ｃ）、ＭＫ１３７／ＭＨ７構築物がＰ２２３３９よりも良好な忍容性であることを示す。図２７Ｂ内では、死亡したマウスのみが、３ｍｐｋでのＰ２２３３９及び１００ｍｐｋでのＭＫ１３７／ＭＨ７の用量と関連付けられ、残りの用量は許容された。これらの結果から、ＭＫ１３７／ＭＨ７の単回ボーラス注射としてのＭＴＤは３０ｍｇ／ｋｇであり、Ｐ２２３３９のＭＴＤの１ｍｇ／ｋｇよりもはるかに高い。ＭＫ１３７／ＭＨ７は、Ｐ２２３３９よりもＴ１／２が延長され、ＡＵＣがより高い、より優れたＰＫプロファイルを示し、Ｐ２２３３９よりもはるかに大きな治療ウインドウを有することを示した。これらの結果を図２８Ａ～Ｂに示す。

実施例４：末梢血液細胞及び腫瘍浸潤リンパ球に対するＭＫ１３７／ＭＨ７の用量依存性薬力学的効果
メスのＣ５７ＢＬ／６マウスに、１ｘ１０７のＧＬ２６１細胞を皮下接種した。腫瘍体積が約１００～２００ｍｍ３に達したとき、動物を、各群当たり７動物となるように腫瘍体積に従って無作為化した。マウスに、単回用量のビヒクル（１０ｍＭのヒスチジン、１０ｍＭの酢酸、２４０ｍＭのスクロース、０．０２％のＴｗｅｅｎ２０、ｐＨ５．５）または０．２５ｍｇ／ｋｇのＰ２２３３９または１０及び３０ｍｇ／ｋｇのＭＫ１３７／ＭＨ７を腹腔内注射した。処置の５日後に、二酸化炭素を使用してマウスを安楽死させ、５匹のマウスを試料収集のために選択した。

血液試料を収集し、更なる抗体染色に直接使用した。腫瘍試料を、ハサミを使用して小片にミンチし、続いて酵素消化して、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を単離した。次いで、血液細胞及びＴＩＬを特定のバイオマーカーに対する蛍光コンジュゲート抗体で染色し、ＮＫ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、及びＴｒｅｇ細胞を同定し、フローサイトメーターを使用して更なる分析を行った。

１０ｍｐｋでのＭＫ１３７／ＭＨ７は、リンパ球におけるＮＫパーセンテージの増加に関して、ＴＩＬにおいて有意なインビボＰＤ効果を示したが、末梢血液細胞においては示さなかった。図２９Ａ～Ｂは、末梢血液細胞及びＴＩＬに対するＰ２２３３９及びＭＫ１３７／ＭＨ７のＰＤ効果を示す。このデータは、ＭＫ１３７／ＭＨ７が腫瘍において有意なＰＤ効果を示したが、１０ｍｐｋの末梢血液においては示さず、ＭＫ１３７／ＭＨ７に対する大きな治療ウインドウを示す。

実施例５：ＨＴ２９＋ＨＨ異種移植片モデルにおけるＭＫ１３７／ＭＨ７のＰＫ／ＰＤ相関
ＮＣＧマウスは、機能的Ｔ細胞、Ｂ細胞及びＮＫ細胞を欠き、マクロファージ及び樹状細胞機能を低下させたトリプル免疫不全マウスである。このような特徴は、これらのマウスを免疫腫瘍学の研究のための良いモデルとする。雌ＮＣＧマウスをＪｉａｎｇｓｕ ＧｅｍＰｈａｒｍａｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から入手し、マトリックスメタロプロテアーゼの発現が高い３×１０６個のＨＴ２９（ヒト結腸腺癌）細胞と、ＩＬ１５に対するｐＳＴＡＴ５応答により選択した１×１０６個のＨＨ（ヒト白血病／リンパ腫）細胞との混合物を皮下接種した。平均腫瘍サイズが４００～６００ｍｍ３に達したときに、動物を各群で３匹または４匹のマウスで無作為化した。ビヒクル（１０ｍＭヒスチジン、１０ｍＭ酢酸、２４０ｍＭスクロース、０．０２％Ｔｗｅｅｎ２０、ｐＨ５．５）、Ｐ２２３３９、ＭＫ１３７／ＭＨ７またはＭＫ１３８／ＭＨ７（非切断）の単回用量を腹腔内投与して、血清ＰＫとＩＬ１５誘導性腫瘍ＰＤとの相関関係を試験し、ＨＴ２９＋ＨＨ腫瘍組織中のＨＨ細胞からのｐＳＴＡＴ５シグナル伝達を測定した。

血清インタクトＭＫ１３７／ＭＨ７及びＭＫ１３８／ＭＨ７をＥＬＩＳＡによって検出した。ＭＫ１３７／ＭＨ７またはＭＫ１３８／ＭＨ７から放出された血清ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒαを、処置後の異なる時点でＮＣＧマウスから得た血清にスパイクしたＨＨ細胞におけるそれらのｐＳＴＡＴ５誘導レベルを介してＭＳＤによって測定した。血清Ｐ２２３３９レベルを、記載されているように、ＥＬＩＳＡ及びＭＳＤの両方によって検査した。ＭＫ１３７／ＭＨ７、ＭＫ１３８／ＭＨ７、及びＰ２２３３９の腫瘍ＰＤを、ＨＴ２９＋ＨＨ腫瘍溶解物中のＨＨ細胞からのｐＳＴＡＴ５シグナル伝達を測定することによって、処置後の異なる時点でＭＳＤによって評価した。

ＩＲＣマウスを用いて上記実施例３で決定した最大耐量（ＭＴＤ）を用いて、ＨＴ２９＋ＨＨ異種移植片モデルにおけるＰ２２３３９及びＭＫ１３８／ＭＨ７のＰＫ／ＰＤ相関を試験した。図３０に示すように、ＭＫ１３８／ＭＨ７は、ＰＫ／ＰＤにおいてＰ２２３３９分子よりも優れており、より大きなシグナル伝達及びより大きな治療ウインドウを示す。

ＭＫ１３７／ＭＨ７とＰ２２３３９構築物との間のＩＬ１５の等モル量を計算することが可能であり、したがってそれに基づいてこれらの分子を投薬することが可能である。ＨＴ２９＋ＨＨ異種移植片モデルに等価なＭＫ１３７／ＭＨ７（５ｍｐｋ）及びＰ２２３３９（２．５ｍｐｋ）用量を投与した場合、ＥＬＩＳＡにより測定した場合と同様のＰＤが腫瘍微小環境において得られた（図３１）。しかしながら、マウスの血清中でＩＬ１５の量を測定した場合、ＭＫ１３７／ＭＨ７は、Ｐ２２３３９とは対照的に、ＩＬ１５を血液中にほとんど放出しない。これにより、ＭＫ１３７／ＭＨ７の活性が全身性ではなく腫瘍により制限されるため、Ｐ２２３３９よりも良好な安全性プロファイルを有することが示される。対照としての非切断ＭＫ１３８／ＭＨ７は、このモデルにおいて活性を有しなかった。ＨＴ２９＋ＨＨモデルによると、２．５ｍｐｋのＰ２２３３９は５ｍｐｋのＭＫ１３７／ＭＨ７と同様のＰＤを示した。実施例３のＩＣＲマウスの毒性試験によって示されるように、Ｐ２２３３９及びＭＫ１３７／ＭＨ７のＭＴＤは、それぞれ１ｍｐｋ及び３０ｍｐｋである。これらのデータは、ＭＫ１３７／ＭＨ７がＰ２２３３９よりも広い治療ウインドウを有することを示している。

実施例６：組み合わせたＩＬ１５構築物
本明細書では、切断可能なリンカーを有するいくつかの様々なＩＬ１５構築物を開示する。開示された１つのＩＬ１５が、少なくとも１つの他のＩＬ１５構築物と組み合わされた、ＩＬ１５構築物の組み合わせを作製することが可能であろう。これは、腫瘍微小環境における異なる量のプロテアーゼ発現を説明するであろう。例えば、大量の特定のプロテアーゼを発現する腫瘍は、１つのＩＬ１５構築物中のプロテアーゼ活性化可能な部分を非常に迅速に切断し、高発現ではない第２のプロテアーゼは、第２のプロテアーゼ活性化可能な部分を切断し、結果として、より遅いＩＬ１５活性化をもたらす。所望される場合、ＩＬ１５構築物のこの組み合わせは、より多くの送達されたＩＬ１５構築物が腫瘍微小環境においてより長く保持されることを可能にすることができる。これは、ＩＬ１５の送達に関連する問題のうちの１つ、すなわち、全身ＩＬ１５投与に関連する非常に短い半減期の問題を解決することができる。

Claims (28)

1. 少なくとも１つのＩＬ１５分子と、少なくとも１つのＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、少なくとも１つのプロテアーゼ活性化可能な部分と、少なくとも１つのＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む、インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
2. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、
   ａ）ｂ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
   ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
   ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
   ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
   ｅ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
   ｆ）ＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、前記二価のＩＬ１５構築物が、
   （ｉ）配列番号４（Ｍ１２３）に示されるホモ二量体、
   （ｉｉ）配列番号５（Ｍ１３５）に示されるホモ二量体、
   （ｉｉｉ）配列番号６（Ｍ１４０）に示されるホモ二量体、
   （ｉｖ）配列番号７（Ｍ１４５）に示されるホモ二量体、
   （ｖ）配列番号８（Ｍ１７５）に示されるホモ二量体、
   （ｖｉ）配列番号９（Ｍ１７６）に示されるホモ二量体、
   （ｖｉｉ）配列番号１０（Ｍ１７７）に示されるホモ二量体、
   （ｖｉｉｉ）配列番号１１（Ｍ１７８）に示されるホモ二量体、
   （ｉｘ）配列番号１２（Ｍ２０７）に示されるホモ二量体、
   （ｘ）配列番号１３（Ｍ２３１）に示されるホモ二量体、
   （ｘｉ）配列番号１４（Ｍ２３３）に示されるホモ二量体、
   （ｘｉｉ）配列番号１５（Ｍ２３４）に示されるホモ二量体、
   （ｘｉｉｉ）配列番号１６（Ｍ２３８）に示されるホモ二量体、
   （ｘｉｖ）配列番号１７（Ｍ２３９）に示されるホモ二量体、
   （ｘｖ）配列番号１８（Ｍ２４０）に示されるホモ二量体、
   （ｘｖｉ）配列番号１９（Ｍ２４１）に示されるホモ二量体、
   （ｘｖｉｉ）配列番号２０（Ｍ２４３）に示されるホモ二量体、
   （ｘｖｉｉｉ）配列番号２１（Ｍ２４４）に示されるホモ二量体、
   （ｘｉｘ）配列番号２２（Ｍ２４５）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘ）配列番号２３（Ｍ２４６）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘｉ）配列番号２４（Ｍ２４７）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘｉｉ）配列番号２５（Ｍ２４８）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘｉｉｉ）配列番号２６（Ｍ２４９）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘｉｖ）配列番号２７（Ｍ３２７）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘｖ）配列番号２８（Ｍ３２８）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘｖｉ）配列番号２９（Ｍ３２９）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘｖｉｉ）配列番号３０（Ｍ３３０）に示されるホモ二量体、
   （ｘｘｖｉｉｉ）配列番号３１（Ｍ３３１）に示されるホモ二量体、または
   （ｘｘｉｘ）配列番号３２（Ｍ３３２）に示されるホモ二量体、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
3. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子を含む
   ａ）ｂ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
   ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
   ｃ）ＩＬ１５ドメインと、
   Ｎ末端からＣ末端に、
   ｘ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
   ｙ）ＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む第２の分子と、を含む、二価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、前記ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
   （ｉ）配列番号３３（Ｍ４３）に示される第１の分子、及び配列番号３４（Ｍ２４）に示される第２の分子、
   （ｉｉ）配列番号３５（Ｍ６１）に示される第１の分子、及び配列番号３６（Ｍ６０）に示される第２の分子、または
   （ｉｉｉ）配列番号３７（Ｍ６２）に示される第１の分子、及び配列番号３８（Ｍ６０）に示される第２の分子、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
4. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、
   ａ）ｂ）に結合したＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
   ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
   ｃ）ｄ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
   ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
   ｅ）ｆ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
   ｆ）ｇ）に結合した第３のリンカー（Ｌ３）と、
   ｇ）ＩＬ１５ドメインと、を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、
   前記二価のＩＬ１５構築物が、
   （ｉ）配列番号４２（Ｍ２３２）に示されるホモ二量体、
   （ｉｉ）配列番号４３（Ｍ１００１）に示されるホモ二量体、
   （ｉｉｉ）配列番号４４（Ｍ１００２）に示されるホモ二量体、
   （ｖｉ）配列番号４５（Ｍ１００３）に示されるホモ二量体、
   （ｖ）配列番号４６（Ｍ１００４）に示されるホモ二量体、
   （ｖｉ）配列番号４７（Ｍ１００５）に示されるホモ二量体、または
   （ｖｉｉ）配列番号４８（Ｍ１００６）に示されるホモ二量体、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
5. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
   ａ）ｂ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
   ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
   ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
   ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
   ｅ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
   ｆ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
   第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、前記ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、配列番号４９（ＭＫ１０７）に示される第１の分子、及び配列番号５０（ＭＨ２）に示される第２の分子を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
6. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
   ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
   ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
   ｃ）ｄ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
   ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
   ｅ）ｆ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
   ｆ）ｇ）に結合した第３のリンカー（Ｌ３）と、
   ｇ）ＩＬ１５ドメインと、
   第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、前記一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
   （ｉ）配列番号６３（Ｍ１１１）に示される第１の分子、及び配列番号６４（ＭＨ２）に示される第２の分子、
   （ｉｉ）配列番号６５（Ｍ２００１）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、または
   （ｉｉｉ）配列番号６６（Ｍ２００２）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
7. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
   ａ）ｂ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
   ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
   ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
   ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
   ｅ）ｆ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
   ｆ）ｇ）に結合した第３のリンカー（Ｌ３）と、
   ｇ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
   第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、前記ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
   （ｉ）配列番号５１（ＭＫ１１４）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｉｉ）配列番号５３（ＭＫ１１５）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｉｉｉ）配列番号５４（ＭＫ１１７）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｉｖ）配列番号５５（ＭＫ１１８）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｖ）配列番号５６（ＭＫ１１９）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｖｉ）配列番号５７（ＭＫ１２０）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｖｉｉ）配列番号５８（ＭＫ１２１）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｖｉｉｉ）配列番号５９（ＭＫ１２３）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子と、
   （ｉｘ）配列番号６０（ＭＫ１２４）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘ）配列番号６１（ＭＫ１２５）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｉ）配列番号６２（ＭＫ１２６）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｉｉ）配列番号６７（ＭＫ１３６）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｉｉｉ）配列番号６８（ＭＫ１３７）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｉｖ）配列番号６９（ＭＫ１３８）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｖ）配列番号７０（ＭＫ１３９）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｖｉ）配列番号７１（ＭＫ１４０）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｖｉｉ）配列番号７２（ＭＫ１４１）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｖｉｉｉ）配列番号７３（ＭＫ１４６）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
   （ｘｉｘ）配列番号７４（ＭＫ１４５）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
   （ｘｘ）配列番号７６（ＭＫ１４９）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
   （ｘｘｉ）配列番号７７（ＭＫ１５０）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
   （ｘｘｉｉ）配列番号７８（ＭＫ１５１）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
   （ｘｘｉｉｉ）配列番号７９（ＭＫ１５２）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
   （ｘｘｉｖ）配列番号８０（ＭＫ１５３）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
   （ｘｘｖ）配列番号８１（ＭＫ１５４）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、
   （ｘｘｖｉ）配列番号８２（ＭＫ１５５）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、または
   （ｘｘｖｉｉ）配列番号１７２（ＭＫ１５７）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
8. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
   ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
   ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
   ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
   ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
   ｅ）ＩＬ１５ドメインと、
   ｘ）第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
   ｙ）ｚ）に結合したリンカー（Ｌ３）と、
   ｚ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、
   前記一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
   （ｉ）配列番号８３（Ｍ１０９）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号８４（ＭＨ１１０）に示されるヘテロ二量体と、
   （ｉｉ）配列番号８５（Ｍ２００３）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号８６（ＭＨ２００４）に示されるヘテロ二量体と、
   （ｉｉｉ）配列番号８７（Ｍ２００３）に示されるヘテロ二量体、及び配列番号８８（ＭＨ２００５）に示されるヘテロ二量体と、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
9. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
   ａ）ｂ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
   ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
   ｃ）ＩＬ１５ドメインと、
   ｄ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
   ｘ）ｙ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
   ｙ）ｚ）に結合したリンカー（Ｌ３）と、
   ｚ）第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、
   前記一価のヘテロ二量体１５構築物が、配列番号９５（Ｍ１０８）に示される第１の分子、及び配列番号９６（ＭＨ４）に示される第２の分子、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
10. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
    ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
    ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
    ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
    ｅ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
    ｘ）ｙ）に結合した第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
    ｙ）ｚ）に結合したリンカー（Ｌ３）と、
    ｚ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、
    前記一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
    配列番号９７（Ｍ１１２）に示される第１の分子、及び配列番号９８（ＭＫ１１３）に示される第２の分子を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
11. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、
    ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
    ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｃ）ｄ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
    ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
    ｅ）ｆ）に結合した第３のリンカー（Ｌ３）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
    ｆ）ＩＬ１５ドメインと、を含む、二価のホモ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、
    前記二価のホモ二量体インターロイキン１５構築物が、配列番号９９（Ｍ００１）に示される配列、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される配列を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
12. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、
    ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
    ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｃ）ｄ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
    ｄ）ｅ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第２のリンカー（Ｌ２）と、
    ｅ）ｆ）に連結された第３のリンカー（Ｌ３）に連結されたＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
    ｆ）ＩＬ１５ドメインと、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、
    前記一価のヘテロ二量体インターロイキン１５構築物が、配列番号１０１（Ｍ００２）に示される配列、配列番号１０２（ＭＨ２）に示される配列、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される配列を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
13. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、
    ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
    ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
    ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
    ｅ）ＩＬ１５ドメインと、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、
    前記一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、配列番号１０３（ＭＫ３）に示される配列、及び
    ｘ）ｙ）に結合した第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
    ｙ）ｚ）に結合した第１のリンカー（Ｌ３）と、
    ｚ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含み、
    前記配列が、配列番号１０４（ＭＨ３）に示される、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
14. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、
    ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する第１の腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
    ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
    ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
    ｅ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン（ＩＬ１５）構築物を含み、
    前記一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、配列番号１０５（ＭＫ４）に示される配列、及び
    ｘ）ｙ）に結合した第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する第１の腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
    ｙ）に示される第１のリンカー（Ｌ３）と、
    ｚ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含み、
    前記配列が、配列番号１０６（ＭＨ３）に示される、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
15. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
    ａ）ｂ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
    ｂ）ｃ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｃ）ＩＬ１５ドメインと、
    ｘ）ＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
    ｙ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、を含む第２の分子と、
    第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第３の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、前記ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
    配列番号１０７（ＭＫ１４３）に示される第１の分子、配列番号１０８（ＭＫ１４４）に示される第２の分子、及び配列番号５２（Ｈ７）に示される第３の分子、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
16. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、第１の分子として、
    ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
    ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
    ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
    ｅ）ＩＬ１５ドメインと、
    ｆ）ｇ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第３のリンカー（Ｌ３）と、
    ｇ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
    第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、前記一価のヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、
    （ｉ）配列番号１０９（ＭＫ１４２）に示される第１の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第２の分子、
    （ｉｉ）配列番号１７３（ＭＫ１５６）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、または
    （ｉｉｉ）配列番号１７４（ＭＫ１６５）に示される第１の分子、及び配列番号７５（ＭＨ８）に示される第２の分子、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
17. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、
    ａ）ｂ）にジスルフィド結合を介して連結される、第１の分子としてのＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
    ｂ）ｃ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
    ｃ）ｄ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｄ）ｅ）に結合したインターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、
    ｅ）ｆ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
    ｆ）第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域と、
    第２のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む第２の分子と、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、前記ヘテロ二量体ＩＬ１５構築物が、配列番号１１０（ＭＫ１４７）に示される第１の分子、及び配列番号１１１（ＭＫ１４８）に示される第２の分子、及び配列番号５２（ＭＨ７）に示される第３の分子、を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
18. 前記構築物が、Ｎ末端からＣ末端に、
    ａ）ｂ）に結合した第１のＩｇＧ１ Ｆｃ領域を有する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）結合抗体と、
    ｂ）ｃ）に結合した第１のリンカー（Ｌ１）と、
    ｃ）ｄ）に結合したＩＬ１５受容体アルファ（ＩＬ１５Ｒａ）ドメインと、
    ｄ）ｅ）に結合した第２のリンカー（Ｌ２）と、
    ｅ）ｆ）に結合したＩＬ１５ドメインと、
    ｆ）ｇ）に結合したプロテアーゼ活性化可能な部分を含有する第３のリンカー（Ｌ３）と、
    ｇ）インターロイキン２受容体ベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインと、を含む、一価のヘテロ二量体インターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物を含み、
    前記一価のヘテロ二量体インターロイキン１５構築物が、配列番号１７５（ＭＫ１４）に示される配列、配列番号１０２（ＭＨ２）に示される配列、及び配列番号１００（ＭＨ３３３ ＬＣ）に示される配列を含む、請求項１に記載のインターロイキン１５（ＩＬ１５）構築物。
19. 少なくとも１つの追加のＩＬ１５構築物と組み合わせた、請求項１～１８のいずれか１項に記載のＩＬ１５構築物を含む、薬学的組成物。
20. 請求項１～１６のいずれか１項に記載の有効量のＩＬ１５構築物を、必要とする患者に投与することを含む、がんの治療方法。
21. 前記がんが、胃癌、結腸癌、膵臓癌、乳癌、頭頚部癌、腎臓癌、肝臓癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、皮膚癌、中皮腫、リンパ腫、白血病、骨髄腫及び肉腫である、請求項２０に記載の方法。
22. 前記ＩＬ１５構築物が、別の治療剤と組み合わせて投与される、請求項２０に記載の方法。
23. 前記治療剤が、免疫チェックポイント剤である、請求項２２に記載の方法。
24. 前記免疫チェックポイント剤が、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＴＩＭ３、ＬＡＧ－３、ＯＸ４０、またはＴＩＧＩＴ抗体である、請求項２３に記載の方法。
25. 有効量の免疫細胞を患者に投与前、投与中、または投与後に、請求項１～１８のいずれか１項に記載のＩＬ１５構築物を投与することを含む、免疫細胞の生存を増加させる方法。
26. 前記免疫細胞がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する、請求項２５に記載の方法。
27. 前記免疫細胞がＮＫ細胞である、請求項２６に記載の方法。
28. 前記免疫細胞がＴ細胞である、請求項２６に記載の方法。