JP2023527054A - Ｉ型インターフェロンシグナル伝達の阻害剤による心血管代謝疾患の治療 - Google Patents

Abstract

本開示は、Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤を用いる、患者における心血管代謝疾患の治療、又はその発現のリスク低減のための方法に関する。

Description

１ 背景
心血管リスク因子、心血管事象及び無症候性アテローム性動脈硬化症は全て、Ｉ型ＩＦＮ媒介性疾患を有する患者において、一般集団と比較して、より若年で起こる（非特許文献１）。早期アテローム性動脈硬化症に起因する心血管疾患（ＣＶＤ）は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）における罹患率及び死亡率の主因の一つである（非特許文献２、非特許文献３）。ＳＬＥは、閉経前女性における冠動脈疾患及び心筋梗塞のリスクを実質的に増加させる（非特許文献４）。

従来の心血管代謝疾患及び心肺疾患のリスク因子（例えば、喫煙、脂質異常症、糖尿病（ＤＭ）、高血圧、中心性肥満及び高ホモシステイン血症）は、ＳＬＥ患者におけるこのＣＶＤの増強を完全には説明することができない。免疫調節不全は、ＳＬＥにおける血管損傷に寄与する可能性が高い。しかし、ＳＬＥにおける急速進行型アテローム性動脈硬化症及び血管炎の根底にある正確な細胞及び分子機構は、不明確なままである。

全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）は、慢性で多システムの身体障害性の、病因が未知の自己免疫リウマチ疾患である。ＳＬＥの治療では、特に中等度又は重度の疾患を有する対象において、実質的に満たされていない医学的必要性がある。多くの対象において、長期予後は不良のままである。

ＳＬＥの治療に関連する有意な課題は、ＳＬＥの異質な臨床症状である（非特許文献５）。ＳＬＥにおいては、あらゆる臓器が冒されることがあり、最も一般的に、皮膚、関節、及び腎臓が含まれる（非特許文献６、非特許文献７、非特許文献８）。不完全な疾患制御が、進行性臓器障害、不良な生活の質、及び死亡率増加を引き起こし、ＳＬＥを有する全患者の約半数が診断から１０年以内に臓器障害を発現する（非特許文献９、非特許文献１０）。ＳＬＥの複数の系を通じた疾患活動性を改善するような医学的介入が依然として求められる。

ＳＬＥの臨床症状として、限定はされないが、全身症状、脱毛症、発疹、漿膜炎、関節炎、腎炎、血管炎、リンパ節腫脹、脾腫、溶血性貧血、認知機能障害及び他の神経系障害が挙げられる。ＳＬＥにおいて、入院、並びに慢性経口コルチコステロイド（ＯＣＳ）及び他の免疫抑制治療を含む薬物療法の副作用の増加が、疾患負荷に上乗せされる（非特許文献１１、非特許文献１２、非特許文献１３）。

ＳＬＥの治療のために現在用いられる治療法の全てが、周知の有害作用特性を有し、新たな標的化療法、特に、コルチコステロイドにおける要件を低減し得る薬剤及び細胞傷害性薬剤を同定するという医学的必要性がある。ヒドロキシクロロキンが円板状ループス及びＳＬＥにおける使用に認可されて以降、約５０年にわたり、米国食品医薬品局（Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）（ＦＤＡ）及び欧州医薬品庁（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ａｇｅｎｃｙ）（ＥＭＡ）によって認可されたＳＬＥに対する新たな治療（ベリムマブ）が唯一となっている。しかし、ベリムマブは、至る所で認可されておらず、摂取は中程度となっている。アザチオプリン、シクロホスファミド、及びミコフェノール酸モフェチル／ミコフェノール酸など、ＳＬＥを治療するために現在使用される多くの薬剤は、その疾患に対して認可されていない。さらに、これらの薬剤の全てが、十分に文書化された安全性の課題を有し、全ての患者におけるループスの全ての徴候に対して有効でない。抗マラリア剤（例えば、ヒドロキシクロロキン）及びコルチコステロイドを用いて、関節痛、関節炎、及び発疹を制御することができる。他の治療薬は、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）；発熱、関節痛、及び関節炎に対する鎮痛薬；並びに光線過敏を最小化するための局所日焼け止めを含む。コルチコステロイドを全く受けていない、中等度又は重度の疾患を有する対象を減らすことは困難なことが多く、それは、長期罹患率の原因になり、早期心血管死亡率に寄与し得る（非特許文献１２、非特許文献１４）。長期ケア（ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｃａｒｒｙ）に使用される５～１０ｍｇの少ない一日量のプレドニゾンであっても、白内障、骨粗鬆症、及び冠動脈疾患などの副作用のリスクを増加させた（非特許文献１２）。

ＣＶＤを有する患者における大動脈炎の直接的測定値は、陽電子放射断層撮影／コンピュータ断層撮影によって得ることができ、ＣＶＤの進行におけるリスクマーカーとして使用することができる（非特許文献１５）。動脈炎症における短期的変化は、長期アテローム性動脈硬化症疾患の進行と連関し、無症候性の、ＣＶＤリスクを評価するための早期バイオマーカーを測定することの有効性を提供する。しかし、これらの高度なイメージングモダリティは、全ての患者がアクセスすることはできない。さらに、従来の手法を用いてＳＬＥにおけるＣＶＤリスクの試験は、ループス診断時での疾患発生率／有病率及び比較的若い年齢を仮定すると、低い実現可能性を有する。

本発明は、上記問題の１つ又は複数を解決する。

Ｓｋａｍｒａ，Ｃ．；Ｒａｍｓｅｙ－Ｇｏｌｄｍａｎ，Ｒ．Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ｉｎｔ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｒｈｅｕｍｔｏｌ ２０１０，５ （１），７５－１００．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．２２１７／ｉｊｒ．０９．７３． Ｂｊｏｅｒｎａｄａｌ，Ｌ．；Ｙｉｎ，Ｌ．；Ｇｒａｎａｔｈ，Ｆ．；Ｋｌａｒｅｓｋｏｇ，Ｌ．；Ｅｋｂｏｍ，Ａ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｄｉｓｅａｓｅ ａ Ｈａｚａｒｄ ｄｅｓｐｉｔｅ Ｉｍｐｒｏｖｅｄ Ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：Ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ａ Ｓｗｅｄｉｓｈ Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ Ｂａｓｅｄ Ｓｔｕｄｙ １９６４－９５．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ ２００４，３１（４），７１３－７１９． Ｎｏｓｓｅｎｔ，Ｊ．；Ｃｉｋｅｓ，Ｎ．；Ｋｉｓｓ，Ｅ．；Ｍａｒｃｈｅｓｏｎｉ，Ａ．；Ｎａｓｓｏｎｏｖａ，Ｖ．；Ｍｏｓｃａ，Ｍ．；Ｏｌｅｓｉｎｓｋａ，Ｍ．；Ｐｏｋｏｒｎｙ，Ｇ．；Ｒｏｚｍａｎ，Ｂ．；Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ，Ｍ．；Ｖｌａｃｈｏｙｉａｎｎｏｐｏｕｌｏｓ，Ｐ．Ｇ．；Ｓｗａａｋ，Ａ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃａｕｓｅｓ ｏｆ Ｄｅａｔｈ ｉｎ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ ｉｎ Ｅｕｒｏｐｅ，２０００－－２００４：Ｒｅｌａｔｉｏｎ ｔｏ Ｄｉｓｅａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ｄａｍａｇｅ Ａｃｃｒｕａｌ．Ｌｕｐｕｓ ２００７，１６（５），３０９－３１７．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７７／０９６１２０３３０７０７７９８７． Ｗａｄｅ，Ｎ．Ｓ．；Ｍａｊｏｒ，Ａ．Ｓ．Ｔｈｅ Ｐｒｏｂｌｅｍ ｏｆ Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：Ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ａ Ｃｏｍｐｌｅｘ Ｃｏ－Ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ．Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ ２０１１，１０６（５），８４９－８５７．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１６０／ＴＨ１１－０５－０３３０． Ｐｏｎｓ－Ｅｓｔｅｌ，Ｇ．Ｊ．；Ａｌａｒｃｏｎ，Ｇ．Ｓ．；Ｓｃｏｆｉｅｌｄ，Ｌ．；Ｒｅｉｎｌｉｂ，Ｌ．；Ｃｏｏｐｅｒ，Ｇ．Ｓ．Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｔｈｅ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ｓｅｍｉｎ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ２０１０，３９（４），２５７－２６８．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｓｅｍａｒｔｈｒｉｔ．２００８．１０．００７． ＭｃＣａｕｌｉｆｆｅ，Ｄ．Ｐ．Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ｓｅｍｉｎ Ｃｕｔａｎ Ｍｅｄ Ｓｕｒｇ ２００１，２０（１），１４－２６．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０５３／ｓｄｅｒ．２００１．２３０９１． Ｕｖａ，Ｌ．；Ｍｉｇｕｅｌ，Ｄ．；Ｐｉｎｈｅｉｒｏ，Ｃ．；Ｆｒｅｉｔａｓ，Ｊ．Ｐ．；Ｍａｒｑｕｅｓ Ｇｏｍｅｓ，Ｍ．；Ｆｉｌｉｐｅ，Ｐ．Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ Ｄｉｓ ２０１２，２０１２，８３４２９１．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１５５／２０１２／８３４２９１． Ｚａｙａｔ，Ａ．Ｓ．；Ｍｄ Ｙｕｓｏｆ，Ｍ．Ｙ．；Ｗａｋｅｆｉｅｌｄ，Ｒ．Ｊ．；Ｃｏｎａｇｈａｎ，Ｐ．Ｇ．；Ｅｍｅｒｙ，Ｐ．；Ｖｉｔａｌ，Ｅ．Ｍ．Ｔｈｅ Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ｉｎ Ａｓｓｅｓｓｉｎｇ Ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌ Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：Ａ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｏｘｆｏｒｄ）２０１６，５５（３），４８５－４９４．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ／ｋｅｖ３４３． Ｓａ，Ｃ．；Ｅ，Ａ．；Ａ，Ｒ．；Ｄ，Ｉ．Ｄａｍａｇｅ ａｎｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ ａ ｇｒｏｕｐ ｏｆ Ｂｒｉｔｉｓｈ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｌｕｐｕｓ ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｕｐ ｆｏｒ ｏｖｅｒ １０ ｙｅａｒｓ ｈｔｔｐｓ：／／ｐｕｂｍｅｄ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／１９３５９３４３／（ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｆｅｂ ８，２０２１）．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ／ｋｅｐ０６２． Ｍｕｒｉｍｉ－Ｗｏｒｓｔｅｌｌ，Ｉ．Ｂ．；Ｌｉｎ，Ｄ．Ｈ．；Ｎａｂ，Ｈ．；Ｋａｎ，Ｈ．Ｊ．；Ｏｎａｓａｎｙａ，Ｏ．；Ｔｉｅｒｃｅ，Ｊ．Ｃ．；Ｗａｎｇ，Ｘ．；Ｄｅｓｔａ，Ｂ．；Ａｌｅｘａｎｄｅｒ，Ｇ．Ｃ．；Ｈａｍｍｏｎｄ，Ｅ．Ｒ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｏｒｇａｎ Ｄａｍａｇｅ ａｎｄ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：Ａ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｒｅｖｉｅｗ ａｎｄ Ｍｅｔａ－Ａｎａｌｙｓｉｓ．ＢＭＪ Ｏｐｅｎ ２０２０，１０（５），ｅ０３１８５０．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１３６／ｂｍｊｏｐｅｎ－２０１９－０３１８５０． Ｄｏｒｉａ，Ａ．；Ｂｒｉａｎｉ，Ｃ．Ｌｕｐｕｓ：Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ．Ｌｕｐｕｓ ２００８，１７（３），１６６－１７０．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７７／０９６１２０３３０７０８７６１２． Ｐｅｔｒｉ，Ｍ．Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｏｕｔｃｏｍｅｓ ｉｎ Ｌｕｐｕｓ．Ａｍ Ｊ Ｍａｎａｇ Ｃａｒｅ ２００１，７（１６ Ｓｕｐｐｌ），Ｓ４８０－４８５． Ｚｏｎａｎａ－Ｎａｃａｃｈ，Ａ．；Ｂａｒｒ，Ｓ．Ｇ．；Ｍａｇｄｅｒ，Ｌ．Ｓ．；Ｐｅｔｒｉ，Ｍ．Ｄａｍａｇｅ ｉｎ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄｓ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ２０００，４３（８），１８０１－１８０８．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／１５２９－０１３１（２００００８）４３：８＜１８０１：：ＡＩＤ－ＡＮＲ１６＞３．０．ＣＯ；２－Ｏ． Ｕｒｏｗｉｔｚ，Ｍ．Ｂ．；Ｂｏｏｋｍａｎ，Ａ．Ａ．；Ｋｏｅｈｌｅｒ，Ｂ．Ｅ．；Ｇｏｒｄｏｎ，Ｄ．Ａ．；Ｓｍｙｔｈｅ，Ｈ．Ａ．；Ｏｇｒｙｚｌｏ，Ｍ．Ａ．Ｔｈｅ Ｂｉｍｏｄａｌ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ Ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ １９７６，６０（２），２２１－２２５．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／０００２－９３４３（７６）９０４３１－９． Ｃａｒｌｕｃｃｉ，Ｐ．Ｍ．；Ｐｕｒｍａｌｅｋ，Ｍ．Ｍ．；Ｄｅｙ，Ａ．Ｋ．；Ｔｅｍｅｓｇｅｎ－Ｏｙｅｌａｋｉｎ，Ｙ．；Ｓａｋｈａｒｄａｎｄｅ，Ｓ．；Ｊｏｓｈｉ，Ａ．Ａ．；Ｌｅｒｍａｎ，Ｊ．Ｂ．；Ｆｉｋｅ，Ａ．；Ｄａｖｉｓ，Ｍ．；Ｃｈｕｎｇ，Ｊ．Ｈ．；Ｐｌａｙｆｏｒｄ，Ｍ．Ｐ．；Ｎａｑｉ，Ｍ．；Ｍｉｓｔｒｙ，Ｐ．；Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ－Ｃｒｕｚ，Ｇ．；Ｄｅｌｌ’Ｏｒｓｏ，Ｓ．；Ｎａｚ，Ｆ．；Ｓａｌａｈｕｄｄｉｎ，Ｔ．；Ｎａｔａｒａｊａｎ，Ｂ．；Ｍａｎｎａ，Ｚ．；Ｔｓａｉ，Ｗ．Ｌ．；Ｇｕｐｔａ，Ｓ．；Ｇｒａｙｓｏｎ，Ｐ．；Ｔｅａｇｕｅ，Ｈ．；Ｃｈｅｎ，Ｍ．Ｙ．；Ｓｕｎ，Ｈ．－Ｗ．；Ｈａｓｎｉ，Ｓ．；Ｍｅｈｔａ，Ｎ．Ｎ．；Ｋａｐｌａｎ，Ｍ．Ｊ．Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ Ｓｕｂｓｅｔｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｇｅｎｅ Ｓｉｇｎａｔｕｒｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｅ ｗｉｔｈ Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｒｏｎａｒｙ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｌｕｐｕｓ．ＪＣＩ Ｉｎｓｉｇｈｔ ２０１８，３（８）．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７２／ｊｃｉ．ｉｎｓｉｇｈｔ．９９２７６．

２ 概要
本発明は、それを必要とする患者における心血管代謝疾患を治療する、又はその発現のリスクを低減する方法であって、Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤を治療有効量で患者に投与することを含み、患者はＩ型ＩＦＮ媒介性疾患を有する、方法に関する。

本発明は、特に、ＳＬＥ患者における２つの第ＩＩＩ相、多施設、多国籍、無作為化、二重盲検、プラセボ対照臨床試験（ＮＣＴ０２４４６８９９及びＮＣＴ０２９６２９６０；ＴＵＬＩＰ Ｉ及びＴＵＬＩＰ ＩＩ）及びＳＬＥ患者における第ＩＩ相、多国籍、多施設、無作為化、二重盲検、プラセボ対照、並行群臨床試験（ＮＣＴ０２９６２９６０；ＭＵＳＥ）からのデータによって支持され、それらのデータ分析が初めて本明細書に提示される。これらのデータは、Ｉ型ＩＦＮ媒介性疾患を患う患者のＩ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤による治療が、心血管代謝疾患のバイオマーカーを正常レベルに戻すことを示す。心血管代謝疾患のこれらのバイオマーカーは、ＧｌｙｃＡ、好中球細胞外捕捉（ＮＥＴ）、コレステロール排出能（ＣＥＣ）、ＴＮＦ－α及び／又はＩＬ－１０を含む。

データは、Ｉ型ＩＦＮ媒介性疾患（例えば、ＳＬＥ）を患う患者のＩ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤（例えば、アニフロルマブ）による治療がこれらの患者における心血管疾患を治療することをさらに示す。

３ 図面の簡単な説明
ＢＩＬＡＧ－２００４インデックス ＳＬＥを有する患者において増加するＩ型ＩＦＮ経路及びＮＥＴ複合体 図２Ａは、中等度から重度のＳＬＥを有する、ＩＦＮＧＳ試験の低い（ｎ＝６５）及びＩＦＮＧＳ試験の高い（ｎ＝１９１）患者における、定量的Ｓｉｍｏａ（商標）イムノアッセイを用いて測定されたＩＦＮ－αタンパク質レベルを示す。破線は、健常ドナーにおける最大ＩＦＮ－αレベルを表す。ＨＤ高：０．５３ｐｇ／ｍＬ；ＬＬＯＱ：０．０７３ｐｇ／ｍＬ。図２Ｂは、２１－ＩＦＮＧＳに対してプロットされたＩＦＮ－α Ｓｉｍｏａ（商標）タンパク質レベルを示す（ｎ＝２５６）。図２Ｃは、ＩＦＮ－αタンパク質Ｓｉｍｏａ（商標）レベルに対してプロットされた好中球数を示す（ｎ＝２５１）。図２Ｄは、健常ドナー（ｎ＝２０）及び中等度から重度のＳＬＥを有する患者（ｎ＝１９０）において、捕捉ＥＬＩＳＡを用いて測定されたＮＥＴ複合体ＣｉｔＨ３－ＤＮＡ、ＭＰＯ－ＤＮＡ、及びＮＥ－ＤＮＡのレベルを示す。箱ひげ図は、各群の四分位を表す。Ｐ値は、図２Ａ及び図２Ｄの場合、両側マン・ホイットニーＵ検定を用いて、また図２Ｂ及び図２Ｃの場合、両側スピアマン順位相関を用いて計算された。ＡＵＣ又はスピアマン順位相関及びＰ値は、各プロットの上に示される。略称は次を含む：ＡＵＣ、曲線下面積；ＣｉｔＨ３、シトルリン化ヒストンＨ３；ＨＤ、健常ドナー；ＩＦＮ、インターフェロン；ＩＦＮＧＳ、ＩＦＮ遺伝子シグネチャー；ＬＬＯＱ、定量化の下限；ＭＰＯ、ミエロペルオキシダーゼ；ＮＥ、好中球エラスターゼ；ＮＥＴ、好中球細胞外捕捉；ＯＤ、光学密度；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス；ＷＢ、全血。 従来のＣＶＤリスク因子、ＩＬ－１０、好中球数、ＴＮＦ－α、及びＮＥＴ複合体の、ＳＬＥを有する患者におけるＩ型ＩＦＮ軸との連関 年齢、ＢＭＩ、ＨＤＬ－Ｃ、喫煙、総コレステロール、ＣＥＣ、ＩＬ－１０タンパク質、好中球数／μＬ全血、ＴＮＦ－αタンパク質、及び循環ＮＥＴ複合体（ＣｉｔＨ３－ＤＮＡ、ＭＰＯ－ＤＮＡ、及びＮＥ－ＤＮＡ）が、Ｉ型ＩＦＮ経路の３つの尺度：ＩＦＮ－αタンパク質、２１－ＩＦＮＧＳ、及びＩＦＮＧＳ試験状態（ＩＦＮＧＳ試験の高い対ＩＦＮＧＳ試験の低い）と比較された。スピアマン順位相関を用いて、パラメータの２１－ＩＦＮＧＳ及びＩＦＮ－αタンパク質との相関が分析された。ウエルチｔ検定を用いて、パラメータの、Ｌｏｇ２倍数変化として表される、ＩＦＮＧＳ試験状態との連関が分析された。Ｌｏｇ２倍数変化及びスピアマン順位相関は、９５％信頼区間によるフォレストプロットで表される。略称は次を含む：ＢＭＩ、肥満度指数；ＣｉｔＨ３、シトルリン化ヒストンＨ３；ＣＥＣ、コレステロール排出能；ＣＶＤ、心血管疾患；ＨＤＬ、高密度リポタンパク質；ＩＦＮ、インターフェロン；ＩＦＮＧＳ、ＩＦＮ遺伝子シグネチャー；ＩＬ、インターロイキン；ＭＰＯ、ミエロペルオキシダーゼ；ＮＥ、好中球エラスターゼ；ＮＥＴ、好中球細胞外捕捉；ｎ．ｓ．、有意でない；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス；ＴＮＦ、腫瘍壊死因子。 治療の１年後、Ｉ型ＩＦＮ経路阻害は循環ＮＥＴ複合体を有意に減少させた ＮＥＴ複合体ＣｉｔＨ３－ＤＮＡ、ＭＰＯ－ＤＮＡ、及びＮＥ－ＤＮＡのレベルが、３００ｍｇで投与される抗ＩＦＮＡＲ１抗体アニフロルマブ又はプラセボを受けた、中等度から重度のＳＬＥを有する患者において、１日目及び３６５日目、捕捉ＥＬＩＳＡを用いて測定された。箱ひげ図は、各群の四分位を表す。Ｐ値は、ウィルコクソン符号順位検定を用いて計算された。^＊ｐ＜０．０５，^＊＊ｐ≦０．０１。略称は次を含む：ＣｉｔＨ３、シトルリン化ヒストンＨ３；ＥＬＩＳＡ、酵素結合免疫吸着測定；ＩＦＮ、インターフェロン；ＩＦＮＡＲ１、ＩＦＮ－α及びβ受容体サブユニット１；ＭＰＯ、ミエロペルオキシダーゼ；ＮＥ、好中球エラスターゼ；ＮＥＴ、好中球細胞外捕捉；ＯＤ、光学密度；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス。 血清ＴＮＦ－α及びＩＬ－１０タンパク質が、ＳＬＥを有する患者においてベースラインで評価され、Ｉ型ＩＦＮ経路阻害後、減少した 図５Ａは、ＳＬＥを有する、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者及びＩＦＮＧＳ試験の高い患者における、Ｓｉｍｏａ（商標）定量的イムノアッセイを用いて測定されたＴＮＦ－αを示す。健常ドナー範囲は、破線を用いて示される（ＨＤ高：２．９ｐｇ／ｍＬ；ＨＤ低：０．６８ｐｇ／ｍＬ）。図５Ｂは、健常ドナー、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者、及びＩＦＮＧＳ試験の高い患者における、Ｓｉｍｏａ（商標）定量イムノアッセイを用いて測定されたＩＬ－１０タンパク質レベルを示す。図５Ａ及び図５Ｂの場合、箱ひげ図は、各群の四分位を表す。図５Ｃは、ＴＮＦ－αタンパク質レベルを示し、図５Ｄは、プラセボ又はアニフロルマブ３００ｍｇを受けた患者における、１日目、８５日目、１６９日目、及び３６５日目に測定されたＩＬ－１０タンパク質レベルを示す。ＴＮＦ－αタンパク質レベルは、プラセボを受けた４７～５８名の患者及びアニフロルマブを受けた６２～６６名の患者において測定された。ＩＬ－１０タンパク質は、プラセボを受けた４７～５８名の患者及びアニフロルマブを受けた６１～６６名の患者において測定された。図５Ｃ及び図５Ｄの場合、ベースラインからの百分率変化がＳＥＭでプロットされる。全てのＰ値は、両側マン・ホイットニーＵ検定を用いて計算された。^＊ｐ＜０．０５，^＊＊ｐ≦０．０１，^＊＊＊ｐ≦０．００１。略称は次を含む：ＨＤ，健常ドナー；ＩＦＮ，インターフェロン；ＩＦＮＧＳ，ＩＦＮ遺伝子シグネチャー；ＩＬ－１０、インターロイキン－１０；ＳＤ、標準偏差；ＳＥＭ、平均値の標準誤差；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス；ＴＮＦ、腫瘍壊死因子。 ＳＬＥを有する患者におけるベースライン時の損なわれたＣＥＣが、ＮＥＴ複合体レベルと相関し、Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害後、正常化された 図６Ａは、健常ドナー（ｎ＝２０）、ＩＦＮＧＳ試験の低いＳＬＥを有する患者（ｎ＝３８）、及びＩＦＮＧＳ試験の高いＳＬＥを有する患者（ｎ＝９１）からのＡｐｏ－Ｂが枯渇した血漿サンプルのＣＥＣを示す。図６Ｂは、ＳＬＥを有する患者（ｎ＝１２３）においてスピアマン順位相関を用いて評価された、ＣＥＣ並びにＮＥＴ複合体ＣｉｔＨ３－ＤＮＡ、ＭＰＯ－ＤＮＡ、及びＮＥ－ＤＮＡの間の連関を示す。図６Ｃは、プラセボ（ｎ＝１９）又は３００ｍｇで投与されるアニフロルマブ（ｎ＝２９）を受けた、ＣＥＣの異常を伴う中等度から重度のＳＬＥを有するＩＦＮＧＳ試験の高い患者からのＡｐｏ－Ｂが枯渇した血漿サンプル中のＳＥＭでプロットされたＣＥＣを示す（ＨＤ平均以下の２ＳＤ、０．９６）。参照として、健常ドナー（ｎ＝２０）におけるベースラインでのＣＥＣも示される。Ｐ値は、ウィルコクソン符号順位検定を用いて計算された。略称は次を含む：ＣＥＣ、コレステロール排出能；ＣｉｔＨ３、シトルリン化ヒストンＨ３；ＨＤ、健常ドナー；ＩＦＮ、インターフェロン；ＩＦＮＧＳ、ＩＦＮ遺伝子シグネチャー；ＭＰＯ、ミエロペルオキシダーゼ；ＮＥ、好中球エラスターゼ；ＮＥＴ、好中球細胞外捕捉；ＯＤ、光学密度；ＳＤ、標準偏差；ＳＥＭ、平均値の標準誤差；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス。 ＳＬＥを有する患者におけるＣＥＣの異常の同定 細胞脂質への放射性３Ｈ－コレステロールの取り込みを判定するため、ＣＥＣが液体シンチレーション計数によって測定された。アニフロルマブ３００ｍｇを受けた患者（ｎ＝７２；紫色の塗りつぶし）又はプラセボ（ｎ＝５７；灰色の塗りつぶし）又は健常ドナー（ｎ＝２０；黒線）におけるＣＥＣ百分率分布が示される。破線は、健常ドナーの平均以下の２標準偏差を表す。含まれる略称：ＣＥＣ、コレステロール排出能；ＨＤ、健常ドナー；ＳＤ、標準偏差；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス。 最大のＣＥＣの増加がベースラインでＣＥＣの最低四分位における患者に認められた 最大のＣＥＣの増加がベースラインでＣＥＣの最低四分位における患者に認められた。細胞脂質への放射性３Ｈ－コレステロールの取り込みの量を判定するため、ＣＥＣが液体シンチレーション計数によって測定された。図８Ａは、中等度から重度のＳＬＥを有する患者におけるＣＥＣ分布を示す。図８Ｂは、アニフロルマブを受けた、中等度から重度のＳＬＥを有する患者における１日目と比較した、３６５日目のＣＥＣ百分率変化中央値を示す。含まれる略称：ＣＥＣ、コレステロール排出能；Ｑ、四分位；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス。 プラセボ群における漸減ステロイドのＣＥＣに対する効果はない ＜１０ｍｇ／日で投与される経口コルチコステロイド（ｎ＝１２）、用量漸減のない経口コルチコステロイド（ｎ＝２４）、又は用量漸減の経口コルチコステロイド（ｎ＝８）を受けた、中等度から重度のＳＬＥを有する患者において、ＣＥＣが液体シンチレーション計数によって測定された。図９Ａは、ＳＬＥを有する各患者における１日目と比較した、３６５日目のＣＥＣを示す。図９Ｂは、９５％信頼区間でプロットされた、＜１０ｍｇ／日で投与される経口コルチコステロイド（ｎ＝１２）、用量漸減のない経口コルチコステロイド（ｎ＝２４）、又は用量漸減の経口コルチコステロイド（ｎ＝８）を受けた、ＳＬＥを有する患者におけるＣＥＣを示す。破線は、ＣＥＣの変化がないことを表す。含まれる略称：ＣＥＣ、コレステロール排出能；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス。 ＧｌｙｃＡはＳＬＥを有する患者においてベースラインで増加し、Ｉ型ＩＦＮ経路阻害後、減少した 図１０Ａは、健常ドナー（ｎ＝１０）又はＩＦＮＧＳ試験の高いＳＬＥを有する患者（ｎ＝５０）における、ＮＭＲスペクトロスコピーによるベースラインＧｌｙｃＡの測定を示し、ＡＵＣが示される。Ｐ値は、マン・ホイットニーＵ検定を用いて計算された。図１０Ｂは、３００ｍｇで投与されるアニフロルマブ（右、ｎ＝１０）、又はプラセボ（左、ｎ＝１１）を受けた、ＩＦＮＧＳ試験の高い、ＧｌｙｃＡの高い患者（ＨＤ平均を超える２ＳＤ、５００μＭ）における１日目及び３６５日目のＧｌｙｃＡレベルの測定を示す。Ｐ値は、ウィルコクソン符号順位検定を用いて計算された。箱ひげ図は、各群中の四分位を表す。略称は次を含む：ＡＵＣ、曲線下面積；ＣＥＣ、コレステロール排出能；ＨＤ、健常ドナー；ＩＦＮ、インターフェロン；ＩＦＮＧＳ、ＩＦＮ遺伝子シグネチャー；ＮＭＲ、核磁気共鳴；ｎ．ｓ．、有意でない；ＳＤ、標準偏差；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス。 ＳＬＥにおけるＩ型ＩＦＮシグナル伝達、好中球ＮＥＴ形成、及びアテローム性動脈硬化の病態形成 Ｉ型ＩＦＮプライミングが好中球を活性化し、ＮＥＴ形成を誘導した後の自己抗体含有免疫複合体の曝露；結果的に、ＮＥＴ形成がＳＬＥを有する患者において認められている。また、増強されたＮＥＴを形成する能力を有する好中球のサブセットのＬＤＧがＳＬＥを有する患者において増加する。ｐＤＣ及び他の免疫細胞は、ＮＥＴ及び免疫複合体によって活性化され、Ｉ型ＩＦＮが増加レベルで合成される。ＮＥＴ複合体において放出される自己核酸は、免疫寛容の低下、自己抗体産生、及び複雑な調節ループ内での免疫複合体形成を促進する。ＮＥＴ複合体中の成分は、ＨＤＬを酸化し、逆コレステロール輸送のプロセスを損なう。心血管代謝疾患マーカーである、損なわれたＣＥＣは、泡沫細胞として知られる脂質蓄積マクロファージの蓄積を引き起こす。泡沫細胞は、初期アテローム硬化性病変の特徴であり、ＳＬＥを有する患者において増加する、炎症促進性サイトカイン、ＴＮＦ－αを分泌する。Ｉ型ＩＦＮはまた、内皮機能障害を誘導し、アテローム性動脈硬化症に寄与する。ＳＬＥを有する患者のサブセットにおいて増加する、ＩＬ－１０は、ＳＬＥを有する患者において、内皮分化に干渉し、血管修復に対するＩ型ＩＦＮの効果を増強する。心血管代謝疾患及びＣＶＤリスクのマーカーである、ＧｌｙｃＡは、ＳＬＥを有する患者において増加する。早期アテローム性動脈硬化症に起因するＣＶＤは、ＳＬＥを有する患者における死亡率の主因の一つである。略称は次を含む：ＣＥＣ、コレステロール排出能；ＣＶＤ、心血管疾患；ＨＤＬ、高密度リポタンパク質；ＩＦＮ、インターフェロン；ＩＬ－１０、インターロイキン１０；ＬＤＧ、低密度顆粒球；ＮＥＴ、好中球細胞外捕捉；ｐＤＣ、形質細胞様樹状細胞；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス；ＴＮＦ、腫瘍壊死因子。 ＳＬＥ疾患活動性に関連する、ＣＥＣ、好中球数、及びＴＮＦ－αレベル 年齢、ＢＭＩ、ＨＤＬ－Ｃ、喫煙、総コレステロール、ＣＥＣ、ＩＬ－１０タンパク質、好中球数／μＬ全血、ＴＮＦ－αタンパク質、及び循環ＮＥＴ複合体（ＣｉｔＨ３－ＤＮＡ、ＭＰＯ－ＤＮＡ、及びＮＥ－ＤＮＡ）については、疾患活動性の２つの尺度：ＳＬＥＤＡＩ及びＣＬＡＳＩと比較して、Ｌｏｇ２倍数変化が示される。群比較のため、ウエルチｔ検定を用いて、統計学的有意性が評価された。含まれる略称：ＢＭＩ、肥満度指数；ＣＥＣ、コレステロール排出能；ＣｉｔＨ３、シトルリン化ヒストンＨ３；ＣＬＡＳＩ、皮膚エリテマトーデス疾患領域及び重症度指数；ＣＶＤ、心血管疾患；ＨＤＬ－Ｃ、高密度リポタンパク質数；ＩＬ、インターロイキン；ＭＰＯ、ミエロペルオキシダーゼ；ＮＥ、好中球エラスターゼ；ＮＥＴ、好中球細胞外捕捉；ｎ．ｓ．、有意でない；ＳＬＥ、全身性エリテマトーデス；ＳＬＥＤＡＩ、ＳＬＥ疾患活動性指数；ＴＮＦ、腫瘍壊死因子。 ＳＬＥ対象におけるインターフェロンシグネチャースコアの密度プロット ２つの分布モードが例示され、ＩＦＮ試験の高い亜集団及び低い亜集団の間の明確な分配を示す。 ＢＩＬＡＧ－２００４及びＳＬＥＤＡＩ－２Ｋを用いて評価されたベースラインの臓器ドメイン障害 ＢＩＬＡＧ－２００４（図８Ａ）及びＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ（図８Ｂ）を用いて評価されたベースラインの臓器ドメイン障害は、治療群間で類似した。ＢＩＬＡＧ－２００４，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｉｓｌｅｓ Ｌｕｐｕｓ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｇｒｏｕｐ－２００４；ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ，全身性エリテマトーデス疾患活動性指数２０００。ＢＩＬＡＧ－２００４スコアは、レベルＡ（重度／活動性疾患）からＥ（現在又は過去の疾患なし）に及ぶ。ＢＩＬＡＧ－２００４臓器ドメイン障害は、Ａ又はＢスコアと定義された。ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ臓器ドメイン障害は、任意のＳＬＥＤＡＩ－２Ｋの臓器系スコアと定義された。 長期にわたるＢＩＬＡＧ－２００４臓器ドメイン応答者 皮膚粘膜、筋骨格及び心肺のＢＩＬＡＧ－２００４ドメインにおけるアニフロルマブを支持する改善がそれぞれ、４週目、３２週目及び２８週目から認められた。ＢＩＬＡＧ－２００４、Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｉｓｌｅｓ Ｌｕｐｕｓ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｇｒｏｕｐ－２００４。ＢＩＬＡＧ－２００４臓器ドメイン応答者は、５２週目でのベースラインＡ又はＢスコアの低下と定義される。点は推定値である。推定値は、層別化されたコクラン－マンテル－ヘンツェルアプローチを用いて計算され、層別化因子は方法セクションに列記される通りである。^＊Ｐ＜０．０５；^＊＊Ｐ＜０．０１；^＊＊＊Ｐ＜０．００１（アニフロルマブ対プラセボの比較におけるコクラン－マンテル－ヘンツェルアプローチに基づく）。 長期にわたるＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ臓器ドメイン応答者 ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ臓器ドメイン応答者は、ベースラインのＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ臓器ドメインスコアにおける低下と定義される。ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ中枢神経系ドメインは、各治療群中の患者が不足していたことから、プロットされない。点は推定値である。推定値は、層別化されたコクラン－マンテル－ヘンツェルアプローチを用いて計算され、層別化因子は方法セクションに列記される通りである。^＊Ｐ＜０．０５；^＊＊Ｐ＜０．０１；^＊Ｐ＜０．００１（アニフロルマブ対プラセボの比較におけるコクラン－マンテル－ヘンツェルアプローチに基づく）。 送達装置 アニフロルマブは、プレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）（図１７Ａ）又は自動注入装置（ＡＩ）（図１７Ｂ）などの注射デバイス［１］［９］によって投与される。 自動注入装置 分解立体図（図１８Ａ）、組立図（図１８Ｂ）及び原体を充填した場合（図１８Ｃ）におけるアニフロルマブ又はその機能的変異体を投与するための自動注入装置。 アクセサリ付きプレフィルドシリンジ アニフロルマブ又はその機能的変異体のためのアクセサリ付きプレフィルドシリンジ（ＡＰＦＳ）。主なチューブが、組立形態（図１９Ａ）及び分解立体図（図１９Ｂ）で示される。追加的部品を有するＡＰＦＳが、組立形態（図１９Ｃ）及び分解立体図 図１９Ｄ）で示される。 送達装置用のパッケージング

４ 詳細な説明
４．１ 心血管代謝疾患の治療
本発明は、それを必要とする患者における心血管代謝疾患を治療するか、又はその発現のリスクを低減する方法であって、Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤を治療有効量で患者に投与することを含み、患者はＩ型ＩＦＮ媒介性疾患を有する、方法に関する。

Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤による治療前、患者は、健常対象と比較して、１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーの高レベルの発現を有し得る。治療は、患者における１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーの発現をベースラインから低減させ得る。

１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＧｌｙｃＡを含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、好中球細胞外捕捉（ＮＥＴ）を含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＴＮＦ－αを含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＩＬ－１０を含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＧｌｙｃＡ及びＮＥＴを含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＧｌｙｃＡ及びＴＮＦ－αを含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＧｌｙｃＡ及びＩＬ－１０を含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＧｌｙｃＡ、ＮＥＴ及びＩＬ－１０を含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＧｌｙｃＡ、ＮＥＴ及びＴＮＦ－αを含んでもよい。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、ＧｌｙｃＡ、ＮＥＴ、ＴＮＦ－α及びＩＬ－１０を含んでもよい。

Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤による治療前、患者は、健常対象と比較して、１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーの低レベルの発現を有し得る。治療は、患者における１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーの発現をベースラインから増加させ得る。１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーは、コレステロール排出能（ＣＥＣ）を含んでもよい。

治療前、患者は、心血管代謝疾患の発現のリスクを有すると同定され得る。該方法は、患者からのサンプル中の１つ又は複数のマーカーの量を決定することと；患者におけるマーカーの量が健常対象からのサンプル中のマーカーの量と比較して上昇する場合、患者を心血管代謝疾患の発現のリスクを有すると同定することと、を含んでもよく、ここでマーカーは、ＧｌｙｃＡ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１０及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。患者からのサンプルは、血液、血漿、血清、又は組織を含んでもよい。患者からのサンプル中のＧｌｙｃＡは、核磁気共鳴（ＮＭＲ）によって測定されてもよい。

Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤による治療前、患者は、健常対象と比較して増加したＩＦＮ－αの血清タンパク質レベルを有し得、Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤は、患者におけるＩＦＮ－αの血清タンパク質レベルをベースラインから低下させる。

任意の先行する請求項の方法では、心血管代謝疾患は、心血管疾患であり、任意選択的に、心血管疾患は、心筋炎、不整脈、弁機能不全、血管炎、大動脈炎、アテローム性動脈硬化症及び／又は冠状動脈炎である。心血管代謝疾患は、早期アテローム性動脈硬化症であってもよい。早期アテローム性動脈硬化症は、無症状であってもよい。Ｉ型ＩＦＮ媒介性疾患は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）であってもよい。患者は、中等度から重度のＳＬＥを有してもよい。

本発明はまた、本発明の方法のいずれかにおける使用のための医薬組成物であって、Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤を含む、医薬組成物に関する。

本開示に従って使用されるとき、別段の指示がない限り、全ての科学技術用語は、当業者によって共通に理解されている意味と同じ意味を有すると理解されるものとする。特に文脈によって必要とされない限り、単数形の用語は、複数形を含むものとし、複数形の用語は、単数形を含むものとする。

一部の実施形態では、本開示は、心血管代謝疾患の発現のリスクを有する患者における心血管代謝疾患の発現のリスクを低減するための方法であって、Ｉ型インターフェロン受容体阻害剤を患者に投与することと、糖タンパク質アセチル化の量が患者のベースラインレベルと比較して増加する場合、患者を心血管代謝疾患の発現のリスクを有すると同定することと、を含み、ここで患者は、患者からのサンプル中のマーカーの量を決定することによって、心血管代謝疾患の発現のリスクを有すると同定され、ここでマーカーは、糖タンパク質アセチル化である、方法を提供する。

一部の実施形態では、患者に投与される治療薬は、心血管代謝疾患マーカーの発現の、患者のベースラインレベルからの変化をもたらす。一部の実施形態では、治療薬は、糖タンパク質アセチル化の発現の、患者のベースラインレベルからの低下をもたらす。

一部の実施形態では、患者に投与される治療薬は、内皮機能障害の免疫メディエーターの、患者のベースラインレベルからの低下をもたらす。特定の実施形態では、免疫メディエーターは、ＴＮＦ－α及びＩＬ－１０の１つ又は複数である。

４．２ Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤
Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤は、Ｉ型ＩＦＮ受容体阻害剤（ＩＦＮＡＲ１）であってもよい。Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤は、増加したＩＦＮ－αの血清タンパク質レベルを有する患者の血漿中のＩＦＮ－αタンパク質レベルを低減させ得る。

「Ｉ型インターフェロン受容体阻害剤」は、インターフェロンα及びインターフェロンβなどのＩ型インターフェロンリガンドの受容体に対して拮抗的である分子を指す。そのような阻害剤は、患者への投与に続き、好ましくは、ＩＦＩ６、ＲＳＡＤ２、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、ＩＦＩ２７、ＭＸ１、ＩＦＩＴ１、ＨＥＲＣ５、ＩＳＧ１５、ＬＡＭＰ３、ＯＡＳ３、ＯＡＳ１、ＥＰＳＴ１、ＩＦＩＴ３、ＬＹ６Ｅ、ＯＡＳ２、ＰＬＳＣＲ１、ＳＩＧＬＥＣｌ、ＵＳＰ１８、ＲＴＰ４、及びＤＮＡＰＴＰ６からなる群から選択される、少なくとも１つ（好ましくは、少なくとも４つ）の薬力学的（ＰＤ）マーカー遺伝子の発現の減少を提供する。少なくとも４つの遺伝子は、好適には、ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２であってもよい。「Ｉ型インターフェロン受容体」は、任意選択的に、インターフェロンα／β受容体（ＩＦＮＡＲ）である。

一実施形態では、Ｉ型インターフェロン受容体阻害剤は、Ｉ型インターフェロン受容体遮断抗体である。１つのそのような実施形態では、Ｉ型インターフェロン受容体遮断抗体は、アニフロルマブである。アニフロルマブは、Ｉ型ＩＦＮのＩＦＮＡＲへの結合を阻害し、且つ全てのＩ型ＩＦＮの生物学的活性を阻害するモノクローナル抗体である。アニフロルマブに関する開示は、米国特許第７，６６２，３８１号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に見出すことができる。米国特許第７，６６２，３８１号明細書中で参照されるクローン１１Ｅ２は、アニフロルマブである。

例えば、Ｉ型インターフェロン受容体阻害剤は、Ｉ型ＩＦＮ活性を（受容体を阻害することによって）阻害する抗体又はその抗原結合断片であってもよい。（Ｉ型ＩＦＮ活性を阻害する）好適な抗体又はその抗原結合断片の例が、インターフェロンα／β受容体（ＩＦＮＡＲ）アンタゴニストである。

追加的又は代替的に、Ｉ型インターフェロン受容体阻害剤は、（例えば、Ｉ型インターフェロン受容体活性の薬理学的阻害のための）Ｉ型インターフェロン受容体の小分子阻害剤であってもよい。

Ｉ型インターフェロン受容体阻害剤は、Ｉ型ＩＦＮ活性を阻害する抗体又はその抗原結合断片であってもよい。特に好ましいＩ型インターフェロン受容体阻害剤は、抗体アニフロルマブ又はその機能的変異体である。アニフロルマブは、ＩＦＮＡＲ１（α、β、及びωインターフェロンの受容体）を標的にするモノクローナル抗体である。アニフロルマブに関する開示は、米国特許第７，６６２，３８１号明細書及び米国特許第９，９８８，４５９号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に見出すことができる。

したがって、一実施形態では、Ｉ型インターフェロン受容体阻害剤は、アニフロルマブ又はその機能的変異体である。

４．３ 送達装置
Ｉ型ＩＦＮ阻害剤は、アクセサリ付きプレフィルドシリンジ（ＡＰＦＳ）、自動注入装置（ＡＩ）、又はその組み合わせを使用し、皮下に投与されてもよい。そのような装置は、皮下用量の抗体を投与するのに十分に耐容性があり、信頼できることが見出されており、患者管理を最適化するためのさらなるオプションを提供する。当然ながら、そのような装置は、患者にとっての頻繁な来診の負担を低減し得る。好適なＡＰＦＳ装置の例が、Ｆｅｒｇｕｓｏｎ ｅｔ．ａｌ．（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている^１６。送達装置は、該用量の手動によるＳＣ投与を可能にするように設計された、単回使用のディスポーザブルシステムであってもよい。

本発明はまた、本発明の医薬組成物を含む注射デバイスに関する。注射デバイスは、プレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）であってもよい。注射デバイスは、アクセサリ付きプレフィルドシリンジ（ＡＦＰＳ）であってもよい。注射デバイスは、自動注射器であってもよい。

４．４ キット
本発明はまた、本発明の注射デバイス及び使用説明書を含むキットに関する。使用説明書は、注射デバイスを明記してもよく、且つ／又は医薬組成物は、ＳＬＥの治療における使用が意図される。使用説明書は、注射デバイス及び／又は医薬組成物が患者における心血管代謝疾患を治療するためであることを明記してもよい。使用説明書は、本発明の方法又は本発明の医薬組成物の任意の特徴を明示してもよい。キットは、パッケージングを含んでもよく、パッケージングは、注射デバイス及び使用説明書を保つように適応される。使用説明書は、注射デバイスに添付されてもよい。

４．５ Ｉ型ＩＦＮ遺伝子シグネチャー（ＩＦＮＧＳ）
患者は、健常対象、又はＩ型ＩＦＮ媒介性疾患を患っていない対象と比較して、高いインターフェロン遺伝子シグネチャーの発現を有し得る。Ｉ型インターフェロン遺伝子シグネチャーは、インターフェロンα誘導性タンパク質２７（ＩＦＩ２７）遺伝子、インターフェロン誘導性タンパク質４４（ＩＦＩ４４）インターフェロン誘導性タンパク質４４様（ＩＦＩ４４Ｌ）、及びＳ－アデノシルメチオニンドメイン含有２（ＲＳＡＤ２）ラジカルの発現の、健常対象、又はＩ型ＩＦＮ媒介性疾患を患っていない対象における発現レベルに対する上昇を含んでもよい。高いインターフェロン遺伝子シグネチャーの発現は、ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２の発現の、１つ又は複数の対照遺伝子の発現に対する増加によって決定されてもよい。

一部の実施形態では、本開示は、患者における心血管代謝疾患を治療する方法であって、Ｉ型インターフェロン受容体阻害剤を治療有効量で患者に投与することを含み、患者は高いインターフェロン遺伝子シグネチャーの発現を有する、方法を提供する。

Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ）の直接的測定には、課題が残っている。そうしたことから、ＩＦＮ遺伝子シグネチャー（ＩＦＮＧＳ）を用いて、ＩＦＮ誘導性遺伝子発現を低い又は高いレベルで有する患者が同定される。一部の実施形態では、ＩＦＮＧＳは、インターフェロンα誘導性タンパク質２７（ＩＦＩ２７）、インターフェロン誘導性タンパク質４４（ＩＦＩ４４）インターフェロン誘導性タンパク質４４様（ＩＦＩ４４Ｌ）、及びＳ－アデノシルメチオニンドメイン含有２（ＲＳＡＤ２）ラジカルを含む。ＩＦＮＧＳを含む遺伝子の上方調節又は過剰発現は、当該技術分野で周知の方法によって計算され得る。例えば、シグネチャーの過剰発現は、ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２における平均Ｃｔ（サイクル閾値）と３つの対照遺伝子；１８Ｓ、ＡＣＴＢ及びＧＡＰＤＨの平均Ｃｔの間の差として計算される。ＩＦＮＧＳの発現増加の程度は、ＩＦＮの高い患者及びＩＦＮの低い患者を同定するための倍数変化カットオフの同定を可能にする。一実施形態では、カットオフは、少なくとも約２である。別の実施形態では、カットオフは、少なくとも約２．５である。別の実施形態では、カットオフは、少なくとも約３である。別の実施形態では、カットオフは、少なくとも約３．５である。別の実施形態では、カットオフは、少なくとも約４である。別の実施形態では、カットオフは、少なくとも約４．５である。別の実施形態では、カットオフは、少なくとも３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、及び４．５から選択される。別の実施形態では、カットオフは、約２～約８の間である。ＩＦＮＧＳの発現増加の程度はまた、ＩＦＮの高い亜集団及びＩＦＮの低い亜集団を同定するためのΔＣｔカットオフの同定を可能にする。

Ｉ型ＩＦＮは、ＳＬＥの病因における中心的役割を担うと考えられ、この経路の阻害は、アニフロルマブによって標的にされる。Ｉ型ＩＦＮの発現と抗ＩＦＮ療法に対する応答の間の関係を理解するため、対象の疾患がＩ型ＩＦＮの活性化によって駆動されるか否かを知ることは必要である。しかし、Ｉ型ＩＦＮの直接的測定には、課題が残っている。そうしたことから、特定のｍＲＮＡマーカーのセットに対する標的タンパク質の過剰発現の効果を評価するため、転写物に基づくマーカーが開発された。これらのマーカーの発現は、全血中で容易に検出され、ＳＬＥにおける皮膚などの罹患組織における発現との相関を示す。ＳＬＥ対象における転写物スコアの二峰性分布は、ＩＦＮ試験の高い亜集団及び低い亜集団を定義することを支援する（図１３）。Ｉ型ＩＦＮ試験は、国際公開第２０１１０２８９３３Ａ１号パンフレット（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。Ｉ型ＩＦＮ遺伝子シグネチャーを用いて、対象がＩ型ＩＦＮ遺伝子シグネチャー（ＩＦＮＧＳ）試験の高い患者又はＩＦＮＧＳ試験の低い患者を有することを同定することができる。ＩＦＮＧＳ試験は、対象の全血中で、３つの参照遺伝子；１８Ｓ、ＡＣＴＢ及びＧＡＰＤＨと比較して、遺伝子ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２の発現を測定する。試験の結果は、低い又は高いレベルのＩＦＮ誘導性遺伝子発現を伴う２群に患者を分類する、予め確立されたカットオフと比較されるスコアである（図１３）。

遺伝子の発現は、ＲＴ－ＰＣＲによって測定されてもよい。遺伝子の検出に適したプライマー及びプローブは、国際公開第２０１１０２８９３３号パンフレット中に見出すことができる。ＩＦＮＧＳ試験における遺伝子発現の測定に適したキットは、Ｂｒｏｈａｗｎ ｅｔ ａｌ．（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の通り、ＱＩＡＧＥＮ ｔｈｅｒａｓｃｒｅｅｎ（登録商標）ＩＦＩＧｘ ＲＧＱ ＲＴ－ＰＣＲキット（ＩＦＩＧｘキット）である^１７。

４．６ 患者
患者は、ヒト患者であってもよい。患者は、成人であってもよい。患者は、増加したＩ型ＩＦＮ遺伝子シグネチャーを有する患者であってもよい。患者は、用量又は単位用量の投与前に、Ｉ型インターフェロンで刺激された遺伝子シグネチャー（ＩＦＮＧＳ）試験の高い患者であってもよい。患者は、全血中の遺伝子ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２の増加を有してもよい。該方法は、用量又は単位用量による治療前、患者をＩＦＮＧＳ－試験の高い患者として同定することを含んでもよい。該方法は、患者の全血中の遺伝子ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２の発現を測定することを含んでもよい。該方法は、対象の全血中の遺伝子ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２の発現をＲＴ－ＰＣＲによって測定することを含んでもよい。

４．７ 製剤
本開示の製剤は、インビボ投与に使用されるとき、無菌である必要がある。本開示の製剤は、例えば、無菌濾過又は放射線を含む、様々な滅菌方法によって滅菌されてもよい。一実施形態では、製剤は、予備滅菌された０．２２μｍフィルターでフィルター滅菌される。注射のための無菌組成物は、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，”２１ｓｔ ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）に記載のような通常の薬務に従って製剤化され得る。

一部の実施形態では、抗体は、経口、経鼻、肺、局所（頬側及び舌下を含む）、直腸、膣及び／又は非経口投与などの特定の投与経路に対して製剤化され得る。本明細書で用いられるとき、「非経口投与」及び「非経口的に投与される」という用語は、通常は、注射による、経腸及び局所投与以外の投与様式を指し、限定はされないが、静脈内、筋肉内、動脈内、くも膜下腔内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内、硬膜外、及び胸骨内注射、並びに注入を含む。局所又は経皮投与に適した本開示の製剤は、散剤、噴霧剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、溶液、パッチ剤、及び吸入剤を含む。抗体及び他の活性剤（ａｃｔｉｖｅｓ）は、無菌条件下で、薬学的に許容できる担体と、そして必要な場合がある、任意の保存剤、緩衝液、又は噴霧剤と混合されてもよい（例えば、米国特許第７，３７８，１１０号明細書；米国特許第７，２５８，８７３号明細書；及び米国特許第７，１３５，１８０号明細書；米国特許出願公開第２００４／００４２９７２号明細書及び米国特許出願公開第２００４／００４２９７１号明細書を参照されたい）。

対象への投与に適し、アニフロルマブを含む安定な製剤については、米国特許第１０１２５１９５Ｂ１号明細書（その全体が本明細書に組み込まれる）に詳述されている。

以下の実施例は、本開示の具体的な実施形態、及びそれらの様々な使用を例示する。それらは、あくまで説明を目的として記載され、決して本開示の範囲を限定するものとして解釈されるべきでない。

４．８ 投与計画及び投与方法
該方法は、静脈内用量のアニフロルマブ又はその機能的変異体を対象に静脈内投与することを含んでもよい。静脈内用量は、≧３００ｍｇのアニフロルマブ又はその機能的変異体であってもよい。静脈内用量は、≦１０００ｍｇであってもよい。静脈内用量は、約３００ｍｇ又は約１０００ｍｇであってもよい。静脈内用量は、３００ｍｇ～１０００ｍｇであってもよい。静脈内用量は、４週ごと（Ｑ４Ｗ）に投与されてもよい。

製剤は、単位剤形で提供することができ、薬学分野で公知の任意の方法によって調製することができる。本開示の製剤中の活性成分の実用量レベルは、患者への毒性を伴わずに、特定の患者、組成物、及び投与様式について所望の治療反応を達成するのに有効である活性成分の量（例えば、「治療有効量」）を得るため、変更されてもよい。用量はまた、連続注入を介して（例えば、ポンプを介して）投与され得る。投与用量はまた、投与経路に依存してもよい。例えば、皮下投与は、静脈内投与より高い用量を必要とし得る。

患者に投与されるべきアニフロルマブの用量は、部分的に、患者のサイズ（体重、体表面、又は臓器サイズ）及び状態（年齢及び一般健康）に応じて変化することになる。

一部の実施形態では、患者は、１回又は複数回の一定用量のアニフロルマブが投与され、用量は、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、又は３５０ｍｇである。一部の実施形態では、患者は、１回又は複数回の一定用量のアニフロルマブが投与され、用量は、３００ｍｇである。

一部の実施形態では、アニフロルマブは、２週の治療期間にわたり、４週の治療期間にわたり、６週の治療期間にわたり、８週の治療期間にわたり、１２週の治療期間にわたり、２４週の治療期間にわたり、又は１年以上の治療期間にわたり投与される。一部の実施形態では、アニフロルマブは、３週の治療期間にわたり、６週の治療期間にわたり、９週の治療期間にわたり、１２週の治療期間にわたり、２４週の治療期間にわたり、又は１年以上の治療期間にわたり投与される。特定の実施形態では、アニフロルマブは、少なくとも５２週間投与される。

一部の実施形態では、アニフロルマブは、１週ごと、２週ごと、４週ごと、６週ごと、８週ごと、１０週ごと、又は１２週ごとに投与される。

５ 定義
５．１ アニフロルマブ
アニフロルマブは、高い親和性及び特異性でＩＦＮＡＲに結合するモノクローナル抗体である。抗体は、ＩＦＮＡＲ遮断（拮抗）抗体であり、受容体のリガンド、即ち、インターフェロンα及びインターフェロンβなどのＩ型インターフェロンの活性を遮断する。したがって、アニフロルマブは、ＩＦＮＡＲシグナル伝達の下方制御、ひいてはＩＦＮ誘導性遺伝子の抑制をもたらす。

したがって、「アニフロルマブ」は、配列番号３、配列番号４、及び配列番号５のそれぞれのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む抗体（又はその機能的変異体）；並びに配列番号６、配列番号７、及び配列番号８のそれぞれのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む抗体（又はその機能的変異体）である。より詳細には、本明細書中で参照されるアニフロルマブは、配列番号１のＶＨ及び配列番号２のＶＬを含む抗体（又はその機能的変異体）である。

アニフロルマブの定常領域は、アニフロルマブが少なくとも１つのＦｃリガンドに対して非修飾抗体と比較して低下した親和性を示すように修飾されている。アニフロルマブは、Ｋａｂａｔ（１９９１，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ９１－３２４２，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ，Ｖａ．）に記載のＥＵインデックスによる付番として、Ｌ２３４Ｆのアミノ酸置換をＦｃ領域内に含む、ＩＦＮＡＲ１に対して特異的な修飾されたＩｇＧクラスのモノクローナル抗体である。アニフロルマブは、Ｋａｂａｔ（１９９１，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ９１－３２４２，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ，Ｖａ．）に記載のＥＵインデックスによる付番として、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ及び／又はＰ３３１Ｓのアミノ酸置換をＦｃ領域内に含む、ＩＦＮＡＲ１に特異的な修飾されたＩｇＧクラスのモノクローナル抗体である。アニフロルマブは、配列番号９の軽鎖定常領域を含む抗体である。アニフロルマブは、配列番号１０の重鎖定常領域を含む抗体である。アニフロルマブは、配列番号９の軽鎖定常領域及び配列番号１０の重鎖定常領域を含む抗体である。アニフロルマブは、配列番号１１の重鎖を含む抗体である。アニフロルマブは、配列番号１２の軽鎖を含む抗体である。アニフロルマブは、配列番号１１の重鎖及び配列番号１２の軽鎖を含む抗体である。

本発明は、列挙されたＣＤＲ配列又は可変重鎖及び可変軽鎖配列（参照（アニフロルマブ）抗体）、並びにそれらの機能的変異体を有する、本明細書で定義される抗体を包含する。「機能的変異体」は、参照（アニフロルマブ）抗体と同じ標的抗原に結合する。機能的変異体は、参照抗体と比較されるとき、標的抗原に対して異なる親和性を有してもよいが、実質的に同じ親和性が好ましい。アニフロルマブの機能的変異体は、アニフロルマブと同じ機能を実施する配列変異体である。アニフロルマブの機能的変異体は、アニフロルマブと同じ標的に結合し、アニフロルマブと同じエフェクター機能を有する変異体である。機能的アニフロルマブ変異体は、アニフロルマブの抗原結合断片並びにアニフロルマブの抗体及び免疫グロブリン誘導体を含む、機能的変異体は、バイオシミラー及び互換可能な産物を含む。バイオシミラー及び互換可能な産物という用語は、ＦＤＡ及びＥＭＡによって定義される。バイオシミラーという用語は、承認された（例えば、ＦＤＡで承認された）生物学的産物（参照産物、例えば、アニフロルマブ）と構造の観点で高度に類似し、且つ薬物動態、安全性及び有効性の観点で参照産物との臨床的に有意な差異を有しない生物学的産物を指す。バイオシミラーの臨床的に有意な差異の存在は、ヒト薬物動態（曝露）及び薬力学的（応答）試験並びに臨床免疫原性の評価において評価されてもよい。互換可能な産物は、任意の所与の患者において参照産物と同じ臨床結果をもたらすことが想定されるバイオシミラーである。

参照（アニフロルマブ）抗体の機能的変異体は、１つ又は複数のＣＤＲで、対応する参照ＣＤＲ配列と比較されるとき、配列変異を示し得る。したがって、抗体の機能的変異体は、ＣＤＲの機能的変異体を含んでもよい。「機能的変異体」という用語がＣＤＲ配列との関連で使用される場合、これは、ＣＤＲが、対応する参照ＣＤＲ配列と比較されるとき、最大で２つ、好ましくは最大で１つのアミノ酸差異を有し、残りの５つのＣＤＲ（又はその変異体）と組み合わされる場合、変異体抗体が、参照（アニフロルマブ）抗体と同じ標的抗原に結合し、好ましくは、参照（アニフロルマブ）抗体と同じ標的抗原に対する親和性を示すことを可能にすることを意味する。

理論によって拘束されることを望まないが、アニフロルマブがＩＦＮＡＲを標的にする（例えば、遮断又はアンタゴナイズする）ことから、アニフロルマブは、Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ）によって開始されるシグナル伝達を遮断することによって疾患（ループス腎炎など）を治療すると考えられる。Ｉ型ＩＦＮは、（例えば、Ｉ型インターフェロン応答を協調させることによる）炎症の重要なドライバーであり、それ故、免疫系における中心的役割を担うことが知られている。しかし、Ｉ型ＩＦＮ－シグナル伝達の調節不全は、異常な（例えば、異常に高い）レベルの炎症、及び自己免疫を引き起こし得る。Ｉ型ＩＦＮインターフェロンのそのような調節不全は、多数の自己免疫疾患において報告されている、

参照（アニフロルマブ）抗体の変異体は、配列番号３と比較されるとき、最大で２つのアミノ酸差異を有する重鎖ＣＤＲ１；配列番号４と比較されるとき、最大で２つのアミノ酸差異を有する重鎖ＣＤＲ２；配列番号５と比較されるとき、最大で２つのアミノ酸差異を有する重鎖ＣＤＲ３；配列番号６と比較されるとき、最大で２つのアミノ酸差異を有する軽鎖ＣＤＲ１；配列番号７と比較されるとき、最大で２つのアミノ酸差異を有する軽鎖ＣＤＲ２；及び配列番号８と比較されるとき、最大で２つのアミノ酸差異を有する軽鎖ＣＤＲ３を含んでもよく、変異体抗体は、アニフロルマブの標的（例えば、ＩＦＮＡＲ）に、好ましくは、同じ親和性で結合する。

参照（アニフロルマブ）抗体の変異体は、配列番号３と比較されるとき、最大で１つのアミノ酸差異を有する重鎖ＣＤＲ１；配列番号４と比較されるとき、最大で１つのアミノ酸差異を有する重鎖ＣＤＲ２；配列番号５と比較されるとき、最大で１つのアミノ酸差異を有する重鎖ＣＤＲ３；配列番号６と比較されるとき、最大で１つのアミノ酸差異を有する軽鎖ＣＤＲ１；配列番号７と比較されるとき、最大で１つのアミノ酸差異を有する軽鎖ＣＤＲ２；及び配列番号８と比較されるとき、最大で１つのアミノ酸差異を有する軽鎖ＣＤＲ３を含んでもよく、変異体抗体は、アニフロルマブの標的（例えば、ＩＦＮＡＲ）に、任意選択的に、同じ親和性で結合する。

変異体抗体は、対応する参照（アニフロルマブ）抗体と比較されるとき、そのＣＤＲにおいて、ＣＤＲあたり最大で２つ（任意選択的に、最大で１つ）のアミノ酸差異があるという条件で、全体で最大で５、４又は３つのアミノ酸差異を有してもよい。変異体抗体は、対応する参照（アニフロルマブ）抗体と比較されるとき、そのＣＤＲにおいて、ＣＤＲあたり最大で２つのアミノ酸差異があるという条件で、全体で最大で２つ（任意選択的に、最大で１つ）のアミノ酸差異を有してもよい。変異体抗体は、対応する参照（アニフロルマブ）抗体と比較されるとき、そのＣＤＲにおいて、ＣＤＲあたり最大で１つのアミノ酸差異があるという条件で、全体で最大で２つ（任意選択的に、最大で１つ）のアミノ酸差異を有してもよい。

アミノ酸差異は、アミノ酸置換、挿入又は欠失であってもよい。アミノ酸差異は、本明細書に記載のような保存的アミノ酸置換であってもよい。

変異体抗体は、対応する参照（アニフロルマブ）抗体と比較されるとき、そのフレームワーク領域において、フレームワーク領域あたり最大で２つ（任意選択的に、最大で１つ）のアミノ酸差異があるという条件で、全体で最大で５、４又は３つのアミノ酸差異を有してもよい。任意選択的に、変異体抗体は、対応する参照（アニフロルマブ）抗体と比較されるとき、そのフレームワーク領域において、フレームワーク領域あたり最大で２つのアミノ酸差異があるという条件で、全体で最大で２つ（任意選択的に、最大で１つ）のアミノ酸差異を有する。任意選択的に、変異体抗体は、対応する参照（アニフロルマブ）抗体と比較されるとき、そのフレームワーク領域において、フレームワーク領域あたり最大で１つのアミノ酸差異があるという条件で、全体で最大で２つ（任意選択的に、最大で１つ）のアミノ酸差異を有する。

したがって、変異体抗体は、本明細書に記載のような可変重鎖及び可変軽鎖を含んでもよく、ここで重鎖は、本明細書中の重鎖配列と比較されるとき、最大で１４のアミノ酸差異（各ＣＤＲにおいて最大で２つのアミノ酸差異及び各フレームワーク領域において最大で２つのアミノ酸差異）を有し；軽鎖は、本明細書中の軽鎖配列と比較されるとき、最大で１４のアミノ酸差異（各ＣＤＲにおいて最大で２つのアミノ酸差異及び各フレームワーク領域において最大で２つのアミノ酸差異）を有し；変異体抗体は、参照（アニフロルマブ）抗体と同じ標的抗原（例えば、ＩＦＮＡＲ）に、好ましくは、同じ親和性で結合する。

変異体重鎖又は軽鎖は、参照重鎖又は軽鎖の「機能的等価物」と称されてもよい。変異体抗体は、本明細書に記載のような可変重鎖及び可変軽鎖を含んでもよく、ここで重鎖は、本明細書中の重鎖配列と比較されるとき、最大で７つのアミノ酸差異（各ＣＤＲにおいて最大で１つのアミノ酸差異及び各フレームワーク領域において最大で１つのアミノ酸差異）を有し；軽鎖は、本明細書中の軽鎖配列と比較されるとき、最大で７つのアミノ酸差異（各ＣＤＲにおいて最大で１つのアミノ酸差異及び各フレームワーク領域において最大で１つのアミノ酸差異）を有し；変異体抗体は、参照（アニフロルマブ）抗体と同じ標的抗原（例えば、ＩＦＮＡＲ）に、好ましくは、同じ親和性で結合する。

「アニフロルマブ」という用語は、好ましくは、その抗原結合断片を包含する。「抗原結合断片」という用語は、アニフロルマブに対する抗原（ＩＦＮＡＲ）に特異的に結合する能力を保持する、アニフロルマブの１つ又は複数の断片を指す。抗原結合断片の例として、以下：Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｄＡｂ断片、及びｓｃＦｖが挙げられる。

５．２ 心血管代謝疾患
本明細書で用いられるとき、「心血管代謝疾患」は、心臓系及び／又は代謝系の疾患を指す。一部の実施形態では、心血管代謝疾患は、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、脈管障害、インスリン抵抗性、耐糖能障害、脂質異常症、高血圧、又は中心脂肪症である。

本明細書で用いられるとき、「ベースラインレベル」は、治療前（ｐｒｅ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）又は治療前（ｂｅｆｏｒｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）の患者におけるレベルを指す。

５．３ 臨床試験
５．３．１ 第２相／第ＩＩ相／中枢的試験
第ＩＩ相試験では、有効性に関する予備的データが収集される。第２相試験では、研究者は、薬剤を、薬剤が開発されつつある疾患又は病態を有する患者の集団に投与する。これらの試験は、典型的に、数百名の患者を含むが、薬剤が有利となるか否かを示すには十分に大きい規模ではない。その代わり、第２相試験は、研究者にさらなる安全性データを提供する。研究者は、これらのデータを使用し、研究課題を洗練し、研究方法を開発し、新しい第３相研究プロトコルを設計する。

５．３．２ 第３相／第ＩＩＩ相／中枢的試験又は治験
研究者は、産物が特定の集団に治療的利益をもたらすか否かを明らかにするため、第３相試験を設計する。時として中枢的試験として知られるこれらの試験は、３００～３，０００名の参加者を含む。第３相試験は、安全性データの大部分を提供する。以前の試験では、大して一般的でない副作用が検出されなくなっている可能性がある。これらの試験は、持続期間がより大規模で且つより長期的であることから、結果は、長期的又はまれな副作用を示す可能性がより高い。ＥＭＡ及びＦＤＡなどの規制機関は、通常、新たな薬物療法を承認する前に、産物が、安全であり、且つ利用可能な薬物療法と少なくとも同程度に有効であること（より有効でない場合）を実証する第ＩＩＩ相臨床試験を必要とする。第ＩＩＩ相臨床試験は、通常、第ＩＩ相臨床試験の成功に後続する場合であっても失敗する。

５．４ エンドポイント
５．４．１ ＢＩＬＡＧ－２００４（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｉｓｌｅｓ Ｌｕｐｕｓ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｇｒｏｕｐ－２００４）
ＢＩＬＡＧ－２００４は、臨床症状の重症度変化を取得することができる、９つの臓器系（全身、皮膚粘膜、精神神経、筋骨格、心肺、胃腸、眼部、腎臓及び血液）によるトランスレーショナルな指標である（図１）。それは、設計による順序尺度を有し、グローバルスコアを有せず；むしろ、直前４週をそれらに先行する４週と比較することによって、異なる臓器系を通じた疾患活動性を一目で分かるように記録する。それは、医師の治療意図の原則に基づき、疾患活動性をＡからＥにかけての５つの異なるレベルに大別する：
・グレードＡは、免疫抑制薬及び／又は＞２０ｍｇ／日の用量のプレドニゾン若しくは等価物を必要とする非常に活動性の高い疾患を表す
・グレードＢは、より低い用量のコルチコステロイド、局所ステロイド、局所免疫抑制剤、抗マラリア剤、又はＮＳＡＩＤを必要とする中等度の疾患活動性を表す
・グレードＣは、軽度安定状態を指す
・グレードＤは、疾患活動性がないが、系が以前に罹患していることを意味する
・グレードＥは、現在又は以前の疾患活動性がないことを示す

ＢＩＬＡＧ－２００４は、治療意図の原則に基づいて開発されたが、治療は、スコアリング指標に対する関連性を有しない。活動性徴候の存在のみがスコアリングに影響する。

心肺ドメインスコアにおいて、ＢＩＬＡＧ－２００４インデックスは、表５－２に定義される通り、心筋炎－軽度；心筋炎／心内膜炎＋心不全；不整脈；新たな弁機能不全、胸膜炎／心膜炎、心タンポナーデ、呼吸困難を伴う胸水貯留、肺出血／血管炎、間質性肺胞炎／間質性肺炎、縮小肺症候群、大動脈炎及び冠状動脈炎を記録する（図１）。

５．４．２ ＢＩＣＬＡ（ＢＩＬＡＧに基づく複合ループス評価）
ＢＩＣＬＡは、疾患活動性指数の専門家コンセンサスによって最初に得られた複合指標である。ＢＩＣＬＡ応答は、（１）エントリー時、中等度又は重度の疾患活動性を有する全ての身体系におけるベースラインＢＩＬＡＧスコアの改善の少なくとも１つのグラデーション（例えば、全Ａ（重度疾患）スコアのＢ（中等度）、Ｃ（軽度）、又はＤ（活動性なし）への減少及び全ＢスコアのＣ又はＤへの減少）；（２）新たなＢＩＬＡＧ Ａの不在又は２つ以上の新たなＢＩＬＡＧ Ｂスコア；（３）全ＳＬＥＤＡＩスコアのベースラインからの悪化なし；（４）医師のグローバル評価における有意な悪化なし（≦１０％）；及び（５）治療失敗（非プロトコル治療の開始）なしと定義される。

特に、対象は、以下の基準：
ａ）１つの新しいＢＩＬＡＧ－２００４ Ａ又は２つ以上の新しいＢＩＬＡＧ－２００４ Ｂの項目によって定義される通り、全てのベースラインＢＩＬＡＧ－２００４ ＡのＢ／Ｃ／Ｄへの減少、ベースラインＢＩＬＡＧ－２００４ ＢのＣ／Ｄへの減少、及び他の臓器系におけるＢＩＬＡＧ－２００４の悪化なし；
ｂ）ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋにおける＞０ポイントのベースラインからの増加と定義される、ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋにおけるベースラインからの悪化なし；
ｃ）３ポイントのＰＧＡ ＶＡＳでの≧０．３０ポイントの増加によって定義される、対象のループス疾患活動性におけるベースラインからの悪化なし；
ｄ）治験薬の中断又は評価前のプロトコルで許容された閾値を超える制限付きの薬物療法の使用がないこと
が満たされる場合、ＢＩＣＬＡ応答者である。

５．４．３ ＣＬＡＳＩ（皮膚エリテマトーデス疾患領域及び重症度指数）
ＣＬＡＳＩは、ＳＬＥの皮膚病変を評価するために用いられる検証された指数であり、２つの別々のスコアであって、第１が疾患の炎症性活性を要約し；第２が疾患によって冒される損傷の尺度であるスコアからなる。活動性スコアでは、紅斑、鱗屑／肥大、粘膜病変、最近の毛髪減少、及び非瘢痕性脱毛症が考慮される。損傷スコアは、色素沈着異常、瘢痕化／萎縮／脂肪織炎、及び頭皮の瘢痕化を表す。対象は、彼らの色素沈着異常が１２か月以上続いたか否かが尋ねられ、その場合、色素沈着異常スコアが疑われる。上記パラメータの各々は、１３の異なる解剖学的位置で測定され、具体的には、それらが最も多くは皮膚エリテマトーデス（ＣＬＥ）に関与することから含められる。各領域内の最も重度の病変が測定される。

５．４．４ ＳＲＩ（≧４の全身性エリテマトーデス応答者指数）
対象は、以下の基準：
・ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋにおける≧４ポイントのベースラインからの減少；
・１以上又は２以上のＢＩＬＡＧ－２００４ Ａによって定義される、新たな冒された臓器系がない
・ＢＩＬＡＧ－２００４ Ｂの項目がＢＩＬＡＧ－２００４を用いてベースラインと比較される；
・３ポイントのＰＧＡ ＶＡＳでの≧０．３０ポイントの増加によって定義される、対象のループス疾患活動性におけるベースラインからの悪化なし
の全てが満たされた場合、ＳＲＩ（４）を達成する。

ＳＲＩ（Ｘ）（Ｘ＝５、６、７、又は８）は、以下の基準：
・ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋにおける≧Ｘポイントのベースラインからの減少；
・１以上又は２以上のＢＩＬＡＧ－２００４ Ａによって定義される、新たな冒された臓器系がない、
・より多くのＢＩＬＡＧ－２００４ Ｂの項目がＢＩＬＡＧ－２００４を用いてベースラインと比較される；
・３ポイントのＰＧＡ ＶＡＳでの≧０．３０ポイントの増加によって定義される、対象のループス疾患活動性におけるベースラインからの悪化なし
を満たす対象の割合によって定義される。

５．４．５ ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ（全身性エリテマトーデス疾患活動性指数２０００）
ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ疾患活動性指数は、臓器徴候のリストであって、各々が定義を有するものからなる。認定治験責任医師又は指定医師は、ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ評価を完了し、各徴候が直近４週間以内に「存在する」又は「存在しない」のいずれかを判定することになる。評価はまた、ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋの実験室カテゴリーの評価のための血液及び尿の収集を含む。

ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ評価は、２４のループスに関連する項目からなる。それは加重装置であり、そこでは記述子に対して特定臓器の「重量」が乗じられる。例えば、腎臓の記述子に対して４が乗じられ、中枢神経の記述子に対して８が乗じられ、これらの重み付けられた臓器徴候は、最終スコアに合計される。ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋスコア範囲は、０～１０５ポイントであり、０は不活動性疾患を示す。ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋスコアは、ループス疾患活動性の有効な、信頼できる、高感度な臨床的評価である。臨床検査値のための来診前、３０日の時間枠を用いて計算されたＳＬＥＤＡＩ－２Ｋが、窓が１０日であるＳＬＥＤＡＩ－２Ｋと類似することが示されている^１８。

５．５ 治療
本明細書で用いられるとき、「治療」又は「治療する」という用語は、治療的処置及び予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）又は予防的（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）処置の双方を指す。治療を必要とする者は、心血管代謝疾患を有する患者及び心血管代謝疾患を有する傾向がある者又は心血管代謝疾患が予防されるべきである者を含む。一部の実施形態では、本明細書で開示される方法を用いて、心血管代謝を治療することができる。本開示は、心血管代謝疾患に加えて、心血管代謝疾患に関連する疾患などの他の疾患に適用されてもよい。

５．６ 投与
本明細書で用いられるとき、「投与」又は「投与する」という用語は、所望の効果を達成するため、１つ又は複数の化合物を、任意の適切な経路によって提供し、接触させ、且つ／又は送達することを指す。投与は、限定はされないが、経口、舌下、非経口（例えば、静脈内、皮下、皮内、筋肉内、関節内、動脈内、関節滑液嚢内、胸骨内、くも膜下腔内、病変内、又は頭蓋内注射）、経皮、局所、頬側、直腸、膣、経鼻、点眼、吸入経由、及びインプラントを含んでもよい。

５．７ バイオマーカー
５．７．１ コレステロール排出能（ＣＥＣ）
コレステロール排出能（ＣＥＣ）では、個体のＨＤＬの、マクロファージなどのコレステロールドナー細胞からのコレステロール排出を促進する能力が測定される。損なわれたＣＥＣは、炎症促進性サイトカインを分泌し、アテローム性動脈硬化症の特徴である、アテローム硬化性病変における脂質蓄積マクロファージの蓄積を促進する。一部の実施形態では、患者に投与される治療薬は、患者のベースラインレベルからのコレステロール排出能の増加をもたらす。

５．７．２ 好中球は好中球細胞外捕捉（ＮＥＴ）を放出する
好中球は、細胞死関連プロセスにおいて好中球細胞外捕捉（ＮＥＴ）を放出し、この現象は、アテローム生成促進効果を有する。ＮＥＴ自己抗原を含有する免疫複合体は、形質細胞様樹状細胞及び他の自然免疫細胞を、Ｉ型ＩＦＮの合成を異常に増強するように誘導する。一部の実施形態では、患者に投与される治療薬は、好中球細胞外捕捉形成の、患者のベースラインレベルからの低下をもたらす。

５．７．３ 糖タンパク質アセチル化（ＧｌｙｃＡ）
糖タンパク質アセチル化（ＧｌｙｃＡ）は、全身性炎症のバイオマーカーである。ＧｌｙｃＡは、偶発的な心血管疾患（ＣＶＤ）^{１９，２０}、特にアテローム性動脈硬化^{２１，２２}、及び心血管代謝（ＣＭ）疾患^２３に関連する。ＧｌｙｃＡは、血清中又は血漿中で測定される、核磁気共鳴（ＮＭＲ）シグナルであり、主に、α１－酸糖タンパク質、ハプトグロビン、α１アンチトリプシン、α１抗キモトリプシン及びトランスフェリンといった急性期タンパク質のグリコシル化に反映する^２２。

５．８ ステロイド
ステロイド、特に経口コルチコステロイド（ＯＣＳ、グルココルチコイド）は、プレドニゾン、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン及びトリアムシノロンを含む。経口プレドニゾンの等価用量の例が、表５－３に示される。

以下の実施例は、本開示の具体的な実施形態、及びそれらの様々な使用を例示する。それらは、あくまで説明を目的として記載され、決して本開示の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。

６ 実施例１：診療所におけるアニフロルマブ
アニフロルマブの安全性は、８つの盲検又は非盲検の静脈内（ＩＶ）及び皮下（ＳＣ）試験において評価されている：ＳＬＥを有する患者における６つの試験（試験０５、試験０４、試験１０１３、試験１１４５、及び試験０８）、全身性硬化症（ＳＳｃ）を有する患者における１つの試験（試験ＭＩ－ＣＰ１８０）、及び健常ボランティアにおける１つの試験（試験０６）（表６－１）。これらの試験の中の２つ（試験０８及び０６）において、ＳＣアニフロルマブ投与が用いられた。２つの試験は進行中である：ＳＬＥを有する患者における１つの試験（試験０９）及びループス腎炎（ＬＮ）を有する患者における１つの試験（試験０７）。

試験１０１３は、Ｆｕｒｉｅ ｅｔ ａｌ．２０１７（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）にさらに詳細に記載されている^２５。試験０４は、Ｆｕｒｉｅ ｅｔ ａｌ．２０１９（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）にさらに詳細に記載されている^２６。試験０５の結果は、Ｍｏｒａｎｄ ｅｔ ａｌ．２０２０（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に提示されている^２７。ＳＬＥにおける静脈内アニフロルマブの臨床的有効性についての証拠の完全な要約は、Ｔａｎａｋａ ｅｔ ａｌ．，２０２０（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に提示されている^２８。

７ 実施例２：ＳＬＥにおけるＩ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害による心血管代謝疾患マーカーの調節
７．１ 導入
発明者は、Ｉ型ＩＦＮ受容体遮断抗体アニフロルマブの、プラセボと比較して、好中球細胞外捕捉（ＮＥＴ）形成を低下させ、心血管代謝疾患マーカーを調節する能力を評価した。

７．２ 材料及び方法
７．２．１ 患者及びサンプル収集
血液サンプルは、第２ｂ相ＭＵＳＥ無作為化二重盲検試験（ＮＣＴ０１４３８４８９）に登録された、ＳＬＥ疾患活動性指数２０００（ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ）による評価として中等度から重度の全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を有する１８～６５歳の成人から取得された^２９。患者は、標準的療法と並行して、アニフロルマブ３００ｍｇ（ｎ＝９９）、アニフロルマブ１，０００ｍｇ（ｎ＝１０４）、又はプラセボ（ｎ＝１０２）の静脈内注入を４週ごとに受けるために１：１：１に無作為化され、４８週目、最終用量が投与された。ＭＵＳＥ試験の０日目、１６９日目、及び３６５日目、空腹時患者から血漿／血清が収集された。インターフェロン遺伝子シグネチャー（ＩＦＮＧＳ）試験状態が無作為化前に測定され、無作為化後、経口コルチコステロイドの漸減が可能になった（Ｆｕｒｉｅ ｅｔ ａｌ．，２０１７）。ＭＵＳＥ試験における組み入れ及び除外基準並びに患者人口統計についての詳細は、公表されている（Ｆｕｒｉｅ ｅｔ ａｌ．，２０１７）。

７．２．２ 好中球数の測定
１日目、患者から血液サンプルが投与前に収集され、好中球数が、検証方法を用いて実施された鑑別を伴う完全血球数から得られた（Ｃａｓｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｌｕｐｕｓ Ｓｃｉ．Ｍｅｄ．５（１）：ｅ０００２８６（２０１８））。

７．２．３ ＩＦＮ標的遺伝子発現
ＩＦＮＧＳ試験の場合、分析的に検証された４つの遺伝子（ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２）のＩＦＮＧＳ試験が、以前に公表された通り（Ｆｕｒｉｅ ｅｔ ａｌ．，２０１７）、定量ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）によって全血中で実施され、ＩＦＮＧＳ試験状態が判定された。患者は、ベースラインで、二峰性分布のトラフにおける所定のΔＣｔに基づくカットオフポイントを用いて、ＩＦＮＧＳ試験の高いカテゴリー及びＩＦＮＧＳ試験の低いカテゴリーに分離された（図１３）。

前述の通り、２１－ＩＦＮＧＳが、２１遺伝子のｑＰＣＲアッセイを用いて生成され、ＳＬＥを有する患者におけるＩ型インターフェロン（ＩＦＮ）シグナル伝達の調節不全の程度が測定された（Ｙａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ ｐｉｉ：３７４３１２（２００９））。

７．２．４ 好中球細胞外捕捉（ＮＥＴ）複合体の測定
患者血清中のＮＥＴレムナントが、以前に公表された通り（Ｌｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．２２（２）：１４６－５３（２０１６））、ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）－ＤＮＡ、好中球エラスターゼ（ＮＥ）－ＤＮＡ、又はシトルリン化ヒストンＨ３（ＣｉｔＨ３）－ＤＮＡの複合体を検出する捕捉酵素結合免疫吸着測定（ＥＬＩＳＡ）を用いて定量化された。ＭＰＯ－ＤＮＡの検出の場合、高結合性の９６ウェルＥＬＩＳＡプレートが、細胞死検出キット（Ｒｏｃｈｅ）コーティングバッファー中で、マウス抗ヒトＭＰＯ抗体（クローン４Ａ４；ＡｂＤ Ｓｅｒｏｔｅｃ）とともに４℃で一晩インキュベートされた。非特異的結合部位が１％ウシ血清アルブミンでブロックされ、ブロッキング緩衝液で希釈された血漿サンプルが４℃で一晩インキュベートされた。洗浄後、抗ＤＮＡペルオキシダーゼ（Ｒｏｃｈｅ）検出抗体が室温で１．５時間インキュベートされた。停止試薬（Ｓｉｇｍａ）の前に、３，３’，５，５’－テトラメチルベンジジン基質（Ｓｉｇｍａ）が添加され、吸光度が４５０ｎｍで測定された。同様に、ＮＥ－ＤＮＡ及びＣｉｔＨ３－ＤＮＡが、ウサギ抗ヒトＮＥ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）又はウサギ抗ヒトＣｉｔＨ３（Ａｂｃａｍ ａｂ５１０３）捕捉抗体をそれぞれ用いて検出され、それに続き、モノクローナルマウス抗二本鎖ＤＮＡ一次抗体（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）及び抗マウス免疫グロブリンＧ西洋わさびペルオキシダーゼ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）二次抗体とともに１時間インキュベートされた。

７．２．５ ＬＤＧ遺伝子シグネチャー分析
ＰＡＸｇｅｎｅ全血ＲＮＡチューブが、ＲＮＡ配列決定のための輸送前に－８０℃で貯蔵された（Ｃｏｖａｎｃｅ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）。標準のＲＮＡ調製方法を用いてＲＮＡ抽出後、Ａｇｉｌｅｎｔバイオアナライザーを用いて測定されたＲＮＡ完全性数スコア＞５．０を有するサンプルが、下流適用のために選択された。グロビンメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）が、ＧＬＯＢＩＮｃｌｅａｒ（商標）キット（Ａｍｂｉｏｎ）を用いて枯渇させた後、Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＴｒｕＳｅｑ Ｓｔｒａｎｄｅｄ ｍＲＮＡキットを用いてｍＲＮＡ選択及びライブラリー調製がなされた。ハイスループット配列決定が、Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＨｉＳｅｑ ４０００を用いて実施された。配列リードの品質がＦａｓｔＱＣによって評価され、アダプタープライマーがＴｒｉｍｍｏｍａｔｉｃ ｖ０．３２を用いて調整された（Ｂｏｌｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ３０（１５）：２１１４－２０（２０１４））。対合末端リードがＳＴＡＲ２．５を用いてヒトゲノムＧＲＣｈ３８にマッピングされ（Ｄｏｂｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ２９（１）：１５－２１（２０１３））、リード数がＨＴＳｅｑ－ｃｏｕｎｔ－０．６．１を用いて計数された（Ａｎｄｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ３１（２）：１６６－６９（２０１５））。遺伝子が含められた全サンプルを通じて、＞５０のマッピングされたリードを有する場合、それらは評価用に含められた。差次的に発現された遺伝子がＤＥＳｅｑ２によって選択され（Ｌｏｖｅ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｅ Ｂｉｏｌ．１５：５５０（２０１４））、それらはまた、マッピングされた１００万のフラグメントにつき、フラグメント／キロベースエクソンを計算するため、カスタムスクリプトと併用された。複合的なＬＤＧ遺伝子シグネチャーが、前述の通り、ＡＺＵ１、ＭＰＯ、ＣＴＳＧ、ＰＲＴＮ３、ＥＬＡＮＥ、及びＤＥＦＡ３のリード／キロベース百万値から、Ｚスコアとして計算された^１５。ＬＤＧ遺伝子シグネチャー^３０の変化が、ベースラインでＺスコア＞中央値Ｚスコアを有する患者において、３６５日目の一致したＺスコアを１日目と比較することによって得られた。

７．２．６ 血清タンパク質の測定
血清サンプルは、Ｍｙｒｉａｄ ＲＢＭへの輸送前に－８０℃で貯蔵された（Ａｕｓｔｉｎ，ＴＸ，ＵＳＡ）。血清ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－β、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１０、及び腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）が、Ｓｉｍｏａ（商標）イムノアッセイ（Ｍｙｒｉａｄ ＲＢＭ、Ｓｉｍｏａ（商標）技術に基づき、Ｍｙｒｉａｄ ＲＢＭによって開発された超高感度イムノアッセイ、２０１８年（ｍｙｒｉａｄｒｂｍ．ｃｏｍ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ－ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ｕｌｔｒａｓｅｎｓｉｔｉｖｅ－ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓから利用可能）を用いて定量化された。全ての他の血清タンパク質は、Ｌｕｍｉｎｅｘ定量的イムノアッセイを用いて、標準的手順に従って測定された。

７．２．７ コレステロール排出能（ＣＥＣ）の測定
高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）ＣＥＣアッセイが、マウスマクロファージ細胞株から得られたＪ７７４細胞を用いて、公表された方法に基づいて実施された（Ｍｅｈｔａ ｅｔ ａｌ．，Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ２２４（１）：２１８－２１（２０１２））。つまり、３×１０５個のＪ７７４細胞／ウェルが蒔かれ、３Ｈ－コレステロール／ｍＬの２μＣｉで放射性標識された。ＡＴＰ結合カセットトランスポーターＡ１が、０．３ｍＭの８－（４－クロロフェニルチオ）－ｃＡＭＰとの１６時間のインキュベーションによって上方制御された。アポリポタンパク質Ｂ（ＡｐｏＢ）枯渇血漿（２．８％）が、４時間かけて排出培地に添加された。液体シンチレーション計数を用いて、細胞からの放射性コレステロールの排出が定量された。排出は、以下の式：（２．８％のａｐｏＢが枯渇した対象血漿を含有する培地中の３Ｈ－コレステロールのμＣｉ－血漿を含まない培地中の３Ｈ－コレステロールのμＣｉ／２．８％のａｐｏＢが枯渇したプールされた対照血漿を含有する培地中の３Ｈ－コレステロールのμＣｉ－プールされた対照の血漿を含まない培地中の３Ｈ－コレステロールのμＣｉ）を用いて計算された。ＣＥＣの欠損が、健常成人ボランティア５名から得られた血漿中の平均ＣＥＣ以下の２標準偏差である値に基づいて同定された（図７）。全てのアッセイが、二通りに実施された。

７．２．８ ＧｌｙｃＡ及びＬｉｐｏＰｒｏｆｉｌｅ（登録商標）核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光
Ｏｔｖｏｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．６１（５）：７１４－２３（２０１５）の通り、血漿が、臭化ナトリウム中、１．２２ｇ／ｍＬの密度に調整され、遠心分離され、リポタンパク質及びタンパク質画分に分離された（８４，０００ｇ、４℃で４８時間）。２つの画分が、ＮＭＲ希釈剤（５０ｍＭのリン酸ナトリウム、１２０ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭのＮａ_２ＥＤＴＡ、１ｍＭのＣａＣｌ_２、ｐＨ７．４）に対して透析され、濃度調整後、１０ｋＤａのＣｅｎｔｒｉｃｏｎ限外濾過膜（Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）による遠心継代がなされ、所望の分子量分画が得られた。標準の０．０１ＭのＮ－アセチルグルコサミンサンプルが、ＮＭＲ希釈剤で調製された。ＧｌｙｃＡ及び他の脂質パラメータが、ＮＭＲ ＬｉｐｏＰｒｏｆｉｌｅ試験スペクトルを用いて、血漿中でＮＭＲスペクトロスコピー（ＬａｂＣｏｒｐ）によって測定された（Ｏｔｖｏｓ ｅｔ ａｌ．，２０１５；ＬａｂＣｏｒｐ，ＧｌｙｃＡ ＴＥＳＴ：１２３８５０，２０１８，ｌａｂｃｏｒｐ．ｃｏｍ／ｔｅｓｔ－ｍｅｎｕ／２６１３１／ｇｌｙｃａから利用可能）。高いＧｌｙｃＡ及び脂質カットオフが、健常ドナーにおける中央値からの２標準偏差として決定された。

７．２．９ インスリン抵抗性
血清インスリン濃度が、ヒトインスリンＥＬＩＳＡキット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ，＃ＫＡＱ１２５１）を用いて決定された。血清グルコース濃度は、ＬａｂＣｏｒｐ（ＬａｂＣｏｒｐ、グルコース試験：００１０３２．２０１９；ｗｗｗ．ｌａｂｃｏｒｐ．ｃｏｍ／ｔｅｓｔ－ｍｅｎｕ／２６０２６／ｇｌｕｃｏｓｅから利用可能）によって実施された、検証された臨床化学パネルの一部として、酵素アッセイを介して決定された。インスリン抵抗性（ＩＲ）は、ＨＯＭＡ２ Ｃａｌｃｕｌａｔｏｒ（Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｔｒｉａｌｓ Ｕｎｉｔ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｏｘｆｏｒｄ，ＨＯＭＡ２ Ｃａｌｃｕｌａｔｏｒ；ｗｗｗ．ｄｔｕ．ｏｘ．ａｃ．ｕｋ／ｈｏｍａｃａｌｃｕｌａｔｏｒ／から利用可能）を用いて、インスリン及びグルコース濃度から計算された。

７．２．１０ 統計学
両側マン・ホイットニーＵ検定を用いて、ＳＬＥを有する患者におけるＣＥＣ、ＧｌｙｃＡ、ＩＬ－１０、ＩＲ、好中球数、ＮＥＴ複合体、及びＴＮＦ－αが、健常ドナーと比較して分析され、またアニフロルマブ３００ｍｇ対プラセボの比較がなされた。スピアマン順位相関を用いて、血管炎症マーカー、好中球数、及びＮＥＴ複合体の、２１－ＩＦＮＧＳ分析及びＩＦＮ－αタンパク質測定との連関が分析された。群比較のためのウエルチｔ検定を用いて、血管炎症マーカー、好中球数、及びＮＥＴ複合体の、ＩＦＮＧＳ試験状態、ＳＬＥＤＡＩスコア、及び皮膚エリテマトーデス疾患領域及び重症度指数（ＣＬＡＳＩ）スコアとの連関が分析された。符号順位検定を用いて、アニフロルマブ３００ｍｇ又はプラセボによる治療後の上記マーカーにおけるベースラインからの変化が比較された。ＲＳｔｕｄｉｏ １．１．３８３を用いて、全ての統計学的解析が実施された。

７．３ 結果
７．３．１ ＳＬＥ患者におけるＩＦＮ－αのＩＦＮＧＳとの連関
超高感度イムノアッセイを用いて、ＩＦＮ－α及びＩＦＮ－βの血清タンパク質レベルのＩ型ＩＦＮＧＳとの連関が分析された。ＩＦＮ－αは、ＩＦＮＧＳ試験の高い９６．３％（１８４／１９１）及びＩＦＮＧＳ試験の低い３２．３％（２１／６５）を含む、患者の大半（８０．１％、２０５／２５６）におけるベースラインの血清サンプル中で数量化可能であった（図２Ａ）。それに対し、ＩＦＮ－βは、患者のわずか２．０％（５／２５６）において数量化可能であり、ＩＦＮ－αがループスにおける循環中の支配的なＩ型ＩＦＮタンパク質であることが示された。

ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者より有意に高い血清ＩＦＮ－αタンパク質濃度を有した（曲線下面積（ＡＵＣ）＝０．９２、ｐ＜０．００１）。ＩＦＮＧＳ試験の高い患者におけるＩＦＮ－αタンパク質レベル中央値は、健常ドナーの最大レベルより高かった（図２Ａ）。４遺伝子のＩＦＮＧＳ試験では、患者が２つの異なるサブグループに大別される一方で、２１遺伝子のＩＦＮＧＳパネル（２１－ＩＦＮＧＳ）では、連続的な２１－ＩＦＮＧＳスコアが得られる。血清ＩＦＮ－αタンパク質レベルがＳＬＥにおける全血２１－ＩＦＮＧＳと相関し（スピアマン順位相関［Ｒ］＝０．８１、ｐ＜０．００１；図２Ｂ）、ＩＦＮ－αのループスのＩＦＮ遺伝子シグネチャーへの直接的寄与が支持された。

ＩＦＮ－αタンパク質及び２１－ＩＦＮＧＳの双方と有意に相関するタンパク質は、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）、インターロイキン（ＩＬ）－１０、アンジオポエチン２、ＶＣＡＭ－１、ＭＩＰ－３β、ＭＣＰ－１、プログラニュリン、ＩＰ－１０、及びヴォン・ヴィレブランド因子を含む、多くのアテローム性動脈硬化及び血管機能障害に関連するタンパク質を含んだ（表７－１）。

実施例２：Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害がＳＬＥにおけるＮＥＴレベルを調節する
Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達、好中球調節不全、及び関連する生物学の間の関係を理解するため、ＩＦＮ－αタンパク質及び２１－ＩＦＮＧＳの相関が、血清中の他の分析物とともに評価された（表７－２）。全血好中球数が血清ＩＦＮ－αタンパク質レベル（Ｒ＝－０．２９、ｐ＜０．００１；図２Ｃ）及び２１－ＩＦＮＧＳと負に相関した一方で、ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者と比較して有意に少ない好中球を有した。これらの結果は、好中球とＩ型ＩＦＮ経路活性の複数の尺度の間の直接的連関を支持する。

循環ＮＥＴ複合体（シトルリン化ヒストンＨ３［ＣｉｔＨ３］、ＭＰＯ、及び好中球エラスターゼ［ＮＥ］－ＤＮＡ）のレベルが、ＳＬＥにおいて健常ドナーと比較して評価され（図２Ｄ）、好中球数と負に相関した（表７－２）。ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者と比較して有意に増加したＣｉｔＨ３－ＤＮＡ ＮＥＴレムナントを有し（ｐ＝０．０３０）、ＣｉｔＨ３－ＤＮＡ及び２１－ＩＦＮＧＳ及びＩＦＮ－αタンパク質の間の相関が認められた（表７－２）。また、他のＮＥＴレムナント（ＭＰＯ－ＤＮＡ及びＮＥ－ＤＮＡ）の評価とＩ型ＩＦＮの尺度の間で、類似した連関が認められた。したがって、ＳＬＥにおける循環ＮＥＴの増加は、好中球数の減少及びＩ型ＩＦＮ活性の増加に関連する。

Ｉ型ＩＦＮ経路のＮＥＴ及び好中球との統計的相関が図３に示される。ループス疾患活動性との連関が図７に示される。増加したＳＬＥＤＡＩスコアを有する患者は、低下したＳＬＥＤＡＩスコアを有する患者と比較して、有意に減少したＣＥＣ、減少した好中球数、及び増加したＴＮＦ－αを有した（ＣＥＣ：ｐ＝０．０３０６６；好中球数：ｐ＝０．０００２２４；ＴＮＦ－α：ｐ＝８．２７Ｅ－４）。また、増加したＣＬＡＳＩスコアを有する患者は、低下したＣＬＡＳＩスコアを有する患者と比較して、減少した好中球数及び増加したＴＮＦ－αを有した（好中球数：ｐ＝０．００５３３；ＴＮＦ－α：ｐ＝０．００２）。また、増加したＳＬＥＤＡＩスコアを有する患者は、低下したＳＬＥＤＡＩスコアを有する患者と比較して、有意により高齢であり、増加したＨＤＬ数を有した（年齢：ｐ＝６．６６Ｅ－５；ＨＤＬ：ｐ＝０．０４２１）。ＮＥＴ複合体又はＧｌｙｃＡとＳＬＥ疾患活動性の間の連関は有意でなかった。まとめると、これらの結果は、ＮＥＴ複合体のＩ型ＩＦＮ経路との連関を示すが、ＳＬＥ疾患活動性の程度との連関を示さない。

ＮＥＴとＩ型ＩＦＮ経路の間の連関を仮定すると、１日目及び３６５日目、抗ＩＦＮＡＲ１抗体アニフロルマブ又はプラセボを受けた患者におけるＮＥＴ複合体について検討された（図４）。特に、ＮＥＴ複合体レベル中央値は、３６５日目、アニフロルマブを受けた患者において有意に低下した。プラセボ患者は、増加したＣｉｔＨ３－ＤＮＡレベルを有した（が、他のＮＥＴ複合体は該当しない）（ｐ＝０．００６）。アニフロルマブを受けた患者において、ＬＤＧ関連遺伝子シグネチャーの変化は認められなかった^１５。これらの結果は、Ｉ型ＩＦＮ経路阻害が循環ＮＥＴを有意に減少させ、循環ＬＤＧの減少が明白でなかったが、ＬＤＧシグネチャーが他の好中球によって希釈されている可能性があることを示す。

７．３．２ 血管機能不全に関連するサイトカインはアニフロルマブによって調節される
Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達及びＮＥＴ形成は、脈管構造に直接的に影響し、ＳＬＥにおいて上方制御された。血清ＴＮＦ－αは、ＩＦＮＧＳ試験の高い患者において、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者と比較して増加した（ｐ＜０．００１；図５Ａ）。ＩＦＮＧＳ試験の高い患者におけるＴＮＦ－α濃度中央値は、健常ドナーの範囲を上回ったが、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者ではそうでなかった。ＴＮＦ－α、２１－ＩＦＮＧＳ、及びＩＦＮ－αタンパク質は、ＳＬＥにおいて有意に相関した（図３、表７－２）。ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者と比較して、増加したＩＬ－１０を有した（ｐ＝４．４Ｅ－１０；図５Ｂ）。ＴＮＦ－αと同様、血清ＩＬ－１０レベルは、２１－ＩＦＮＧＳ（Ｒ＝０．５０６、ｐ＜Ｅ－１４）及び血清ＩＦＮ－αタンパク質レベル（Ｒ＝０．５４９、ｐ＜Ｅ－１４；図３、表７－２）と相関した。ＴＮＦ－α及びＩＬ－１０レベルは相関された（Ｒ＝０．７３２、ｐ＜Ｅ－１４；表７－２）。まとめると、これらの結果は、ＳＬＥにおける血管機能不全の３つの推定上の主要なメディエーターの、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１０、及びＩ型ＩＦＮシグナル伝達の間の連関を示す。

ＴＮＦ－α及びＩＬ－１０は、様々な時点で、アニフロルマブ後、ＩＦＮＧＳ試験の高い患者において、プラセボと比較して有意に減少した（図５Ｃ～Ｄ）。ＩＦＮＧＳ試験の低い患者ではなく、ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＬ－１０レベルが、アニフロルマブで、１６９日目（ｐ＝０．０３７）及び３６５日目（ｐ＝０．０１６）、プラセボと比較して減少した。全体的に、アニフロルマブは、ＴＮＦ－α及びＩＬ－１０レベルを有意に低下させた。

７．３．３ Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害は心血管代謝疾患マーカーを調節する
ＮＥＴがＨＤＬを酸化し、ＣＥＣに影響し得ると仮定すると、これらのパラメータに対するアニフロルマブによるＮＥＴ阻害の影響が評価された。ベースラインＣＥＣ値は、ＳＬＥにおけるＩＦＮＧＳ試験の低い患者及び試験の高い患者の双方において、健常ドナーと比較して有意に減少され、ＨＤＬ機能のアテローム生成促進的な調節不全が示唆された（図６Ａ）。複数の炎症促進性及びアテローム生成促進的タンパク質がＩ型ＩＦＮ経路に連関した一方で（表７－１）、ＣＥＣとＩＦＮＧＳ試験状態の間、このコホートにおける血清ＩＦＮ－α、又は２１－ＩＦＮＧＳに連関が認められなかった（図３、表７－２）。それに対し、ＣＥＣ及び循環ＮＥＴ複合体レベルの間に有意な負の相関が認められ（図６Ｂ）、それは好中球媒介酸化に起因する異常なＨＤＬ機能に一致した。

アニフロルマブが損なわれた（健常ドナーの平均以下の≧２標準偏差［ＳＤ］）ＣＥＣを改善し得るか否かを検討するため、それら患者のＣＥＣレベルが治療の前と後で測定された（図７）。アニフロルマブを受けたＩＦＮＧＳ試験の高い患者においては、ＩＦＮＧＳ試験の低い又はプラセボ群と異なり、ＣＥＣは、３６５日目、ベースラインと比較して有意に増加した（１７．３％）（ｐ＜０．００１；図６Ｃ）。この効果は、ベースラインで最高のＣＥＣ障害を有する患者においてより明白であった（図８）。ＣＥＣは、コルチコステロイドの漸減単独によって不変であった（図９）。

リポタンパク質レベルが、ＩＦＮＧＳ試験の高いＳＬＥにおいて、ＮＭＲによって定量化された（粒子の数及びサイズを含む）。ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ－Ｃ）、Ｈ３Ｐサイズ範囲内のＨＤＬ、ＨＤＬ粒子数（ｃＨＤＬＰ）、中程度のｃＨＤＬＰ、アポリポタンパク質Ａ－１、及び巨大なトリグリセリドリッチリポタンパク質粒子（ＴＲＬＰ）が、ＳＬＥ患者において、健常ドナーの場合よりも有意に低かった一方で、中程度のＴＲＬＰは、有意により高かった（表７－３）。統計学的有意性がマン・ホイットニーＵ検定を用いて評価され；太線上のパラメータは、ｐ＜０．０５を示す。

ＨＤＬ－Ｃ及び総コレステロール間のＩＦＮ－αタンパク質との相関が、２１－ＩＦＮＧＳ、及びＩＦＮＧＳ試験を用いて評価された。ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者と比較して、総コレステロール及びＨＤＬ－Ｃの低下したレベルを有した（図３）。総コレステロール及びＨＤＬ－Ｃは、２１－ＩＦＮＧＳ及びＩＦＮ－αと負に相関した。また、肥満度指数（ＢＭＩ）及び年齢のような従来のＣＶＤリスク因子は、Ｉ型ＩＦＮの尺度と逆連関した。ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者と比較して、有意に減少した肥満度指数（ＢＭＩ）を有した（ｐ＝０．０００１３６）。ＢＭＩはまた、ＩＦＮの２１遺伝子シグネチャー及びＩＦＮ－αタンパク質と負に相関した（ＩＦＮの２１遺伝子シグネチャー：Ｒ＝－０．１７３０３、ｐ＝０．００２５０８；ＩＦＮ－α：Ｒ＝－０．１４５１７、ｐ＝０．０１４４）。ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者より若年であり、年齢もまた、ＩＦＮの２１遺伝子シグネチャー及びＩＦＮ－αタンパク質と負に相関した（ＩＦＮＧＳ試験状態：ｐ＝０．００５２７；ＩＦＮの２１遺伝子シグネチャー：Ｒ＝－０．２５５１７、ｐ＝６．８６Ｅ－６；ＩＦＮ－α：Ｒ＝－０．２９１８、ｐ＝０．０００１７９）。喫煙状態とＩ型ＩＦＮ尺度の間に連関は認められなかった。これらの結果は、ＩＦＮＧＳ試験の高い患者が、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者と比較して、減少した従来のＣＶＤリスク因子（年齢、ＢＭＩ、総コレステロール）を有したが、血管機能不全及び好中球調節不全の免疫マーカーの増加並びにＨＤＬ－Ｃのレベル低下を有したことを示し、従来のＣＶＤリスク因子単独によって予測されないＣＶＤリスクの増加が示唆される。

リポタンパク質／脂質パラメータとＩ型ＩＦＮ経路の間の連関をさらに検討するため、脂質パラメータに対するアニフロルマブの効果が評価され、そこではベースラインの脂質異常を有する患者が≧１０名であった（測定値≧健常ドナーの平均からの２ＳＤ；表５－１）。脂質パラメータは、ＳＬＥを有する患者において、ＮＭＲ ＬｉｐｏＰｒｏｆｉｌｅ（登録商標）によって評価され、３６５日目、１日目と比較した中央値変化が計算された。符号順位検定を用いて、長期的な中央値変化が比較された。Ｈ３Ｐサイズ範囲内の減少したベースラインＨＤＬを有する患者において、Ｈ３Ｐレベルは、アニフロルマブ（ｐ＝０．０２２３）後、ベースラインから有意に増加したが、プラセボではそうでなかった。中程度のＴＲＬＰ、小さいＴＲＬＰ、又は微小なＴＲＬＰにおいて、治療に特異的な変化は有意でなかった。

ＩＲがベースラインでのＩ型ＩＦＮ尺度と相関するか否かが分析された。全患者の分析は、ＩＲ状態にかかわらず、ＩＦＮＧＳ試験の高い患者間又は試験の低い患者間のＩＲにおいて有意差を示さなかった。相関は、ＩＲとＩＦＮ－α又は２１－ＩＦＮＧＳの間で検出されなかった（表７－１）。しかし、早期ＩＲ（＞１．９［４９］）を有した患者数名の中で、ＩＦＮＧＳ試験の高い患者は、ＩＦＮＧＳ試験の低い患者より高いＩＲを有した（ｐ＝０．０４６）。ＩＲの上位四分位（ＩＲ≧３．９）の患者であっても、アニフロルマブ後、プラセボと比較して、ベースラインからのＩＲ変化百分率の低下は認められなかった。全体的に、これらの結果は、ＳＬＥにおけるＩＲの調節におけるＩ型ＩＦＮ経路阻害の役割を支持しないが、ＩＲについてさらに強化されたコホートにおいてこの関係を精査する場合に貴重であり得る。

ＧｌｙｃＡレベルは、ＩＦＮＧＳ試験の高い患者において、健常ドナーと比較して有意に増加した（ＡＵＣ＝０．８４、ｐ＜０．００１；図１０Ａ）。ベースラインで増加したＧｌｙｃＡを有するＩＦＮＧＳ試験の高い患者におけるＧｌｙｃＡレベルに対するアニフロルマブ治療の効果が検討された。意外にも、ＧｌｙｃＡレベルは、３６５日までにアニフロルマブによって有意に減少した（ｎ＝１０、ｐ＝０．００６）が、プラセボではそうならなかった（ｎ＝１１；図１０Ｂ）。これらの結果は、ＳＬＥにおけるＩ型ＩＦＮシグナル伝達阻害が、ＧｌｙｃＡを健常ドナーレベルへと有意に正常化したことを示す。

認められたＣＥＣの正常化と同様、Ｉ型ＩＦＮ経路阻害がＳＬＥにおけるＧｌｙｃＡレベルを低下させることが見出された。ＧｌｙｃＡは、以前に好中球遺伝子ネットワークに関連したが、ＧｌｙｃＡ ＮＭＲシグナルに対する主要なタンパク質の寄与体（α１－酸糖タンパク質及びハプトグロビン）は、好中球顆粒から合成され、分泌され得る３１。これらの観察結果は、ＳＬＥにおける異常なＩ型ＩＦＮ産生、心血管代謝調節不全、及び血管損傷を引き起こす病原性好中球エフェクター機能の中心に置かれたモデルを支持する（図１１）。これらの知見は、血管損傷が不変のＩＦＮ－αシグナル伝達の下流効果によって駆動される複数の機構を通じて起こる場合のモデルをさらに支持する。

ＳＬＥにおけるＣＶＤリスクの従来の手法を用いる試験は、ループス診断時の疾患発生率／有病率及び比較的若年齢を仮定すると、低い実現可能性を有する。介入に対する患者を選択するためのＣＶＤリスクの有意なバイオマーカーの同定は、そのような課題に対処するのに有望な手法である。本開示は、有利には、ＳＬＥ関連ＣＶＤリスク（増強されたＮＥＴ形成、損なわれたＣＥＣ、及び増加したＧｌｙｃＡ）との直接的な生理学的関連を有するいくつかの無症候性マーカーが、より早期のＣＶＤ検出並びにＣＶＤリスク及び脈管障害の改善された症状モニタリングを促進するための実用的ツールである可能性を有する、アニフロルマブによって有意に調節されることを示す。

８ 実施例４：ＳＬＥ患者における心血管疾患を治療する場合のアニフロルマブの有効性
８．１ 導入
ＴＵＬＩＰ－１及びＴＵＬＩＰ－２試験の設計における類似性は、各試験単独の場合より可能な限り高い検出力による各臓器系の評価のためのデータのプーリングを容易にした。ＴＵＬＩＰ－１及びＴＵＬＩＰ－２試験からのプールされたデータのこの事後分析において、各ＳＬＥ臓器ドメインの疾患活動性に対するアニフロルマブの効果を評価した。

８．２ 方法
８．２．１ 患者及び試験設計
これは、経口グルココルチコイド、抗マラリア剤及び／又は免疫抑制剤による標準的療法にもかかわらず中等度から重度のＳＬＥを有した患者が、無作為化され、４週ごとに４８週間にわたり、アニフロルマブ３００ｍｇ又はプラセボの静脈内投与を受けた、５２週のＴＵＬＩＰ－１及びＴＵＬＩＰ－２試験からのプールされたデータの事後分析であった。

試験設計及び方法は、以前に詳述されている^{２６，２７}。要するに、全患者は、１８～７０歳であり、米国リウマチ学会（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ）のＳＬＥ分類基準を満たした。活動性重度の精神神経ＳＬＥ又は重度のループス腎炎を有する患者は除外された。経口グルココルチコイドを８週目～４０週目の間に≦７．５ｍｇ／日に漸減させる強制的試みが、ベースラインで≧１０ｍｇ／日のプレドニゾン又は等価物を受けている患者にとって必要であり；ベースラインでより低い用量を受けている患者に対しても漸減が許容された。全患者において、グルココルチコイド用量は、４０週目から５２週目にかけて安定であることが求められた。

８．２．２ 試験エンドポイント及び評価
臓器ドメイン障害は、ＢＩＬＡＧ－２００４１７を用いて評価され、ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ．１８ ＢＩＬＡＧ－２００４の応答は、ベースラインのＡ（重度疾患）からＢ（中等度）、Ｃ（軽度）、若しくはＤ（現在の疾患なし）への減少、又はベースラインのＢからＣ若しくはＤへの減少と定義された。所与の臓器ドメインにおいて、ベースラインから５２週目にかけて、１ステップ（例えば、ＡからＢ又はＢからＣへ）、２ステップ（例えば、ＡからＣ又はＢからＤへ）、及び最大の３ステップ（即ち、ＡからＤへ）改善した患者の割合が評価された。ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋの改善は、ベースラインスコア＞０を有する患者におけるドメインスコアの減少と定義された。ＢＩＬＡＧ－２００４及びＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ双方において、プロトコルで許容された閾値を超える制限付きの薬物療法で治療された患者又は治験薬を中断した患者は、不応答者として分類された。

平均血液学的値及び血清学的値の変化に加えて、ベースラインで異常な（低い又は高い）値を有し、５２週目に正常値に変化させた患者の百分率が評価された。試験治療を中断したか又は５２週目データが欠けていた患者は、正規化されないと仮定された。

８．２．３ 統計学的解析
類似するＴＵＬＩＰ－１及びＴＵＬＩＰ－２試験の設計は、結果をプールすることを可能にした。ＢＩＬＡＧ－２００４及びＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ臓器ドメイン応答者の割合、長期にわたるＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ臓器ドメイン応答者、長期にわたるＣＬＡＳＩ－Ａ応答者、及び関節数のベースラインからの≧５０％の減少が、スクリーニング時のＳＬＥＤＡＩ－２Ｋスコアの（ＴＵＬＩＰ試験における場合に一致する）層別化因子、スクリーニング時のＩ型ＩＦＮ遺伝子シグネチャー試験状態、及び１日目の経口グルココルチコイド用量とともに、層別化されたコクラン－マンテル－ヘンツェルアプローチを用いて計算された。報告された両側Ｐ値及び９５％信頼区間（ＣＩ）は、この手法に基づく。全ての報告されたＰ値は、名目である。プールされたＴＵＬＩＰデータの評価において、ＴＵＬＩＰ－１データは、ＴＵＬＩＰ－２改訂の制限付きの薬物療法の分析規則に従って分析された。欠けているデータは、初回訪問における欠けているデータでの直近の観察の繰り越しを用いて補完され；欠けているデータを伴う後の訪問は、補完されなかった。

８．３ 結果
８．３．１ ベースライン特徴
データは、７２６名の患者用にプールされた；３６０名がアニフロルマブ３００ｍｇを受け（各試験における患者が１８０名）、３６６名がプラセボを受けた（ＴＵＬＩＰ－１及びＴＵＬＩＰ－２における各患者が１８４名及び１８２名）。ＳＬＥにおけるベースライン人口統計及びバックグラウンド治療は、群間で同等であった（表８－１）。

登録された７２６名の患者のうち、平均年齢は４１．８歳であり；９２．８％は女性であり、６６．０％は白人であった。ベースラインで、患者の８２．０％（５９５／７２６）は、経口グルココルチコイドを受けていて、彼らのアニフロルマブ群の５２．８％（１９０／３６０）及びプラセボ群の５０．５％（１８５／３６６）は、≧１０ｍｇ／日（プレドニゾン又は等価物）を受けていた。ＢＩＬＡＧ及びＳＬＥＤＡＩ－２Ｋで測定された、ベースラインの疾患活動性レベルは、プールされた治療群間で類似し、それは少なくとも１つのＢＩＬＡＧ Ａドメインスコアを有する全患者の約１１名及び約半数の平均ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋであった（表８－１）。

ＢＩＬＡＧ－２００４及びＳＬＥＤＡＩ－２Ｋを用いて評価されたベースラインの臓器ドメイン障害は、治療群間で類似した（図１４Ａ及び図１４Ｂ）。ベースラインで最も共通に冒された臓器ドメインは、皮膚粘膜（ＢＩＬＡＧ－２００４ ８６．４％［６２７／７２６］；ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ ９６．３％［６９９／７２６］）及び筋骨格（ＢＩＬＡＧ－２００４ ８８．８％［６４５／７２６］；ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ ９４．２％［６８４／７２６］）であった図１４Ａ及び図１４Ｂ）。最も共通に冒されたＢＩＬＡＧ－２００４ドメイン、筋骨格及び皮膚粘膜において、患者の大半が、ＢＩＬＡＧ Ａ（筋骨格３１．５％［２２９／７２６］、皮膚粘膜２１．９％［１５９／７２６］）又はＢＩＬＡＧ Ｂ（筋骨格５７．３％［４１６／７２６］；皮膚粘膜６４．５％［４６８／７２６］）スコアの全頻度によって示される通り、ベースラインで重度又は中等度の疾患活動性を有した。

８．３．２ ＢＩＬＡＧ－２００４心肺臓器ドメインにおける有効性
皮膚粘膜、筋骨格及び心肺ＢＩＬＡＧ－２００４ドメインにおいてアニフロルマブを支持するような改善が、それぞれ、４週目、３２週目及び２８週目から認められた（図１５）。

８．３．３ ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ心肺及び血管臓器ドメインにおける有効性
５２週目、プラセボを受けた患者より有意にアニフロルマブで治療された患者は、ベースラインで最も頻繁に冒されるＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ臓器ドメイン：皮膚粘膜（５４．７％［１９０／３４８］対３９．４％［１３８／３５１］；名目Ｐ＜０．００１）、筋骨格（４８．８％［１６４／３３５］対４０．４％［１４１／３４９］；名目Ｐ＜０．０５）名目Ｐ＜０．０５）において改善を有した（図１６）。アニフロルマブとプラセボを受けたより高い割合の患者が、５２週目、血管及び心肺ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋドメインにおいて改善を有した（図１６）。

８．３．４ 実験室マーカー－血液学及び血清学
アニフロルマブ群及びプラセボ群における患者は、ベースラインで同様の平均血液学的値を有した（表８－２）。

５２週目、アニフロルマブ対プラセボを支持する治療効果が、ヘモグロビン（０．５［１０．５９］対－２．７［１１．３３］ｇ／Ｌ）及び血小板（２４．３［５８．２］対３．２［４９．８］×１０９／Ｌ）における平均（ＳＤ）増加において認められた。アニフロルマブ群において、ベースラインで白血球減少症を有する患者の６．４％（２３／３６０）が、プラセボを受けた患者の３．０％（１１／３６６）に対して、正常化を示した。

ベースラインで抗ｄｓＤＮＡ陽性であった患者の中で、抗ｄｓＤＮＡ抗体の平均（ＳＤ）レベルが、アニフロルマブ治療により、プラセボにおける増加と比較して減少した（－２５．０［２３８．４］対２８．０［４９８．５］Ｕ／ｍＬ；表３）。したがって、アニフロルマブを受けた患者の７．８％（１３／１６７）が、プラセボを受けた患者の５．８％（９／１５５）に対して、５２週目までに抗ｄｓＤＮＡ陰性に変化した（表８－３）。

５２週目、平均（ＳＤ）補体Ｃ３レベルにおけるベースラインからのより大きな改善が認められ、アニフロルマブ（０．１３［０．１８］）対プラセボ（０．０４［０．１６］Ｕ／ｍＬ）であった（表８－３）。ベースラインで低いＣ３を有する患者の、アニフロルマブ治療患者の１６．２％（２１／１３０）及びプラセボ治療患者の９．５％（１３／１３７）において、正常化が認められた。同様に、アニフロルマブを受けた患者の、プラセボに対するよりも多数において、低いベースラインＣ４の正常化が起こった（２２．６％［１９／８４］対７．１％［６／８５］）。

８．４ 考察
ＴＵＬＩＰ－１及びＴＵＬＩＰ－２試験からのプールされたデータのこの事後分析において、プラセボと比較して、アニフロルマブ治療は、中等度から重度のＳＬＥを有する患者の心肺及び血管臓器ドメインにおけるより大きい改善に連関した。アニフロルマブ治療はまた、プラセボと比較してより多い頻度で、血液学的及び血清学的な正常化をもたらした。

ＴＵＬＩＰ－１及びＴＵＬＩＰ－２試験の結果は、アニフロルマブで治療された患者が、プラセボを受けた患者と比較してより高いＢＩＣＬＡ応答者率を有することを以前に示した。また、本分析は、意外にも、心肺及び心血管臓器ドメインにおけるＢＩＬＡＧ－２００４及びＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ活動性評価の間の一貫性を示す。

血清学的活性は、免疫系活性化を示し、典型的に、ＳＬＥ疾患活動性に連関する。プラセボ治療患者と比較してより多くのアニフロルマブ治療患者が、抗ｄｓＤＮＡ抗体並びに補体Ｃ３及びＣ４レベルを正常化することができた。これらの結果は、血清学的マーカーに対するアニフロルマブの効果が、ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ免疫学的ドメインにおける、アニフロルマブで治療された患者で認められた、プラセボと比較してより大きな改善に一致することを示唆する。

結論として、第３相ＴＵＬＩＰ－１及びＴＵＬＩＰ－２試験からのプールされたデータにおいて、中等度から重度のＳＬＥを有する患者におけるアニフロルマブ治療が、ＢＩＬＡＧ－２００４及びＳＬＥＤＡＩ－２Ｋドメインスコアによる測定としての、プラセボと比較して、心血管及び心肺臓器系を通じた改善に連関した。それ故、これらのデータは、意外にも、Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害がＳＬＥ患者における心血管疾患を治療することを実証する。

９ 実施例５：注射デバイス
アニフロルマブは、プレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）（図１７Ａ）又は自動注入装置（ＡＩ）（図１７Ｂ）などの注射デバイス［１］［９］によって投与される。

９．１ 自動注入装置
アニフロルマブは、自動注入装置［１］によって投与されてもよい。自動注入装置は、分解立体図（図１８Ａ）及び組立図（図１８Ｂ）で示される。ラベル［４］は、自動注入装置［１］の周囲にラップされるか又はそれに貼付される（図１８Ｃ）。自動注入装置は、自動注入装置ハウジング［３］、キャップ及びキャップリムーバー［２］及び駆動ユニット［５］を有する。液体のアニフロルマブ製剤の単位用量［６］は、自動注入装置ハウジング［３］内に含まれる。単位用量［６］は、視界窓［７］を通じて見ることができる。

９．２ アクセサリ付きプレフィルドシリンジ
アニフロルマブは、アクセサリ付きプレフィルドシリンジ（ＡＰＦＳ）［８］によって投与されてもよい。ＡＰＦＳ［８］は、図１９Ａにおける組立形態で、また図１９Ｂにおける分解立体図で示される一次容器［９］内に含まれる単位用量のアニフロルマブ［６］を含む。一次容器［９］は、プランジャーストッパー［１６］を有する。一次容器は、０．８ｍｌの名目上の充填体積［１７］を有するが、０．８ｍｌよりやや多いものを含んでもよい。一次容器［９］内の空間の残りは、気泡［１８］によって占められる。気泡［１８］は、３～５ｍｍ、任意選択的に、４ｍｍのサイズを有してもよい。一次容器［９］は、規定されたストッパー位置［１９］を有する。

アクセサリ付きプレフィルドシリンジ（ＡＰＦＳ）の一次容器［９］は、ニードルガード［１２］、フィンガーフランジ［１１］及びプランジャーロッド［１３］を含む、ＰＦＳアセンブリ［８］内に提供される（図１９Ｃ、図１９Ｄ）。ラベル［１４］は、ＰＦＳアセンブリ［８］内の一次容器［９］とともに提供される。ラベル［１４］は、シリンジ［９］周囲のラベル配置位置［１５］においてラップされる。

９．３ パッケージング
注射デバイス［１］［８］は、キット［２０］内に提供される（図２０）。ラベル［４］［１４］は、パッケージング中のＡＰＦＳ又は自動注入装置とともに提供される。ラベルは、注射デバイス［１］，［８］の使用説明書を含む。パッケージングは、タンパーシールを含む。

参考文献
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（８） Ｚａｙａｔ，Ａ．Ｓ．；Ｍｄ Ｙｕｓｏｆ，Ｍ．Ｙ．；Ｗａｋｅｆｉｅｌｄ，Ｒ．Ｊ．；Ｃｏｎａｇｈａｎ，Ｐ．Ｇ．；Ｅｍｅｒｙ，Ｐ．；Ｖｉｔａｌ，Ｅ．Ｍ．Ｔｈｅ Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ｉｎ Ａｓｓｅｓｓｉｎｇ Ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌ Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：Ａ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｏｘｆｏｒｄ）２０１６，５５（３），４８５－４９４．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ／ｋｅｖ３４３．
（９） Ｓａ，Ｃ．；Ｅ，Ａ．；Ａ，Ｒ．；Ｄ，Ｉ．Ｄａｍａｇｅ ａｎｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ ａ ｇｒｏｕｐ ｏｆ Ｂｒｉｔｉｓｈ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｌｕｐｕｓ ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｕｐ ｆｏｒ ｏｖｅｒ １０ ｙｅａｒｓ ｈｔｔｐｓ：／／ｐｕｂｍｅｄ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／１９３５９３４３／（ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｆｅｂ ８，２０２１）．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ／ｋｅｐ０６２．
（１０） Ｍｕｒｉｍｉ－Ｗｏｒｓｔｅｌｌ，Ｉ．Ｂ．；Ｌｉｎ，Ｄ．Ｈ．；Ｎａｂ，Ｈ．；Ｋａｎ，Ｈ．Ｊ．；Ｏｎａｓａｎｙａ，Ｏ．；Ｔｉｅｒｃｅ，Ｊ．Ｃ．；Ｗａｎｇ，Ｘ．；Ｄｅｓｔａ，Ｂ．；Ａｌｅｘａｎｄｅｒ，Ｇ．Ｃ．；Ｈａｍｍｏｎｄ，Ｅ．Ｒ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｏｒｇａｎ Ｄａｍａｇｅ ａｎｄ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：Ａ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｒｅｖｉｅｗ ａｎｄ Ｍｅｔａ－Ａｎａｌｙｓｉｓ．ＢＭＪ Ｏｐｅｎ ２０２０，１０（５），ｅ０３１８５０．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１３６／ｂｍｊｏｐｅｎ－２０１９－０３１８５０．
（１１） Ｄｏｒｉａ，Ａ．；Ｂｒｉａｎｉ，Ｃ．Ｌｕｐｕｓ：Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ．Ｌｕｐｕｓ ２００８，１７（３），１６６－１７０．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７７／０９６１２０３３０７０８７６１２．
（１２） Ｐｅｔｒｉ，Ｍ．Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｏｕｔｃｏｍｅｓ ｉｎ Ｌｕｐｕｓ．Ａｍ Ｊ Ｍａｎａｇ Ｃａｒｅ ２００１，７（１６ Ｓｕｐｐｌ），Ｓ４８０－４８５．
（１３） Ｚｏｎａｎａ－Ｎａｃａｃｈ，Ａ．；Ｂａｒｒ，Ｓ．Ｇ．；Ｍａｇｄｅｒ，Ｌ．Ｓ．；Ｐｅｔｒｉ，Ｍ．Ｄａｍａｇｅ ｉｎ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄｓ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ２０００，４３（８），１８０１－１８０８．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／１５２９－０１３１（２００００８）４３：８＜１８０１：：ＡＩＤ－ＡＮＲ１６＞３．０．ＣＯ；２－Ｏ．
（１４） Ｕｒｏｗｉｔｚ，Ｍ．Ｂ．；Ｂｏｏｋｍａｎ，Ａ．Ａ．；Ｋｏｅｈｌｅｒ，Ｂ．Ｅ．；Ｇｏｒｄｏｎ，Ｄ．Ａ．；Ｓｍｙｔｈｅ，Ｈ．Ａ．；Ｏｇｒｙｚｌｏ，Ｍ．Ａ．Ｔｈｅ Ｂｉｍｏｄａｌ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ Ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ １９７６，６０（２），２２１－２２５．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／０００２－９３４３（７６）９０４３１－９．
（１５） Ｃａｒｌｕｃｃｉ，Ｐ．Ｍ．；Ｐｕｒｍａｌｅｋ，Ｍ．Ｍ．；Ｄｅｙ，Ａ．Ｋ．；Ｔｅｍｅｓｇｅｎ－Ｏｙｅｌａｋｉｎ，Ｙ．；Ｓａｋｈａｒｄａｎｄｅ，Ｓ．；Ｊｏｓｈｉ，Ａ．Ａ．；Ｌｅｒｍａｎ，Ｊ．Ｂ．；Ｆｉｋｅ，Ａ．；Ｄａｖｉｓ，Ｍ．；Ｃｈｕｎｇ，Ｊ．Ｈ．；Ｐｌａｙｆｏｒｄ，Ｍ．Ｐ．；Ｎａｑｉ，Ｍ．；Ｍｉｓｔｒｙ，Ｐ．；Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ－Ｃｒｕｚ，Ｇ．；Ｄｅｌｌ’Ｏｒｓｏ，Ｓ．；Ｎａｚ，Ｆ．；Ｓａｌａｈｕｄｄｉｎ，Ｔ．；Ｎａｔａｒａｊａｎ，Ｂ．；Ｍａｎｎａ，Ｚ．；Ｔｓａｉ，Ｗ．Ｌ．；Ｇｕｐｔａ，Ｓ．；Ｇｒａｙｓｏｎ，Ｐ．；Ｔｅａｇｕｅ，Ｈ．；Ｃｈｅｎ，Ｍ．Ｙ．；Ｓｕｎ，Ｈ．－Ｗ．；Ｈａｓｎｉ，Ｓ．；Ｍｅｈｔａ，Ｎ．Ｎ．；Ｋａｐｌａｎ，Ｍ．Ｊ．Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ Ｓｕｂｓｅｔｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｇｅｎｅ Ｓｉｇｎａｔｕｒｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｅ ｗｉｔｈ Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｒｏｎａｒｙ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｌｕｐｕｓ．ＪＣＩ Ｉｎｓｉｇｈｔ ２０１８，３（８）．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７２／ｊｃｉ．ｉｎｓｉｇｈｔ．９９２７６．
（１６） Ｆｅｒｇｕｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．；Ｍａｎｓｕｒ，Ａ．Ｈ．；Ｊａｃｏｂｓ，Ｊ．Ｓ．；Ｈｅｂｅｒｔ，Ｊ．；Ｃｌａｗｓｏｎ，Ｃ．；Ｔａｏ，Ｗ．；Ｗｕ，Ｙ．；Ｇｏｌｄｍａｎ，Ｍ．Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ａｎ Ａｃｃｅｓｓｏｒｉｚｅｄ Ｐｒｅ－Ｆｉｌｌｅｄ Ｓｙｒｉｎｇｅ ｆｏｒ Ｈｏｍｅ－Ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ Ｂｅｎｒａｌｉｚｕｍａｂ ｉｎ Ｓｅｖｅｒｅ Ａｓｔｈｍａ．Ｊ Ａｓｔｈｍａ Ａｌｌｅｒｇｙ ２０１８，１１，６３－７２．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．２１４７／ＪＡＡ．Ｓ１５７７６２．
（１７） Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｋｉｔ Ａｓ ａ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｔｅｓｔ ｆｏｒ Ａｎｉｆｒｏｌｕｍａｂ：Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｕｓｅ ｉｎ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ．ＡＣＲ Ｍｅｅｔｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ．
（１８） Ｔｏｕｍａ，Ｚ．；Ｕｒｏｗｉｔｚ，Ｍ．；Ｇｌａｄｍａｎ，Ｄ．ＳＬＥＤＡＩ－２Ｋ ｆｏｒ ａ ３０－Ｄａｙ Ｗｉｎｄｏｗ．Ｌｕｐｕｓ ２０１０，１９（１），４９－５１．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７７／０９６１２０３３０９３４６５０５．
（１９） Ｇｒｕｐｐｅｎ，Ｅ．Ｇ．；Ｒｉｐｈａｇｅｎ，Ｉ．Ｊ．；Ｃｏｎｎｅｌｌｙ，Ｍ．Ａ．；Ｏｔｖｏｓ，Ｊ．Ｄ．；Ｂａｋｋｅｒ，Ｓ．Ｊ．Ｌ．；Ｄｕｌｌａａｒｔ，Ｒ．Ｐ．Ｆ．ＧｌｙｃＡ，ａ Ｐｒｏ－Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ，ａｎｄ Ｉｎｃｉｄｅｎｔ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ Ｃ－Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ Ｒｅｎａｌ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ．ＰＬＯＳ ＯＮＥ ２０１５，１０（９），ｅ０１３９０５７．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．０１３９０５７．
（２０） Ｃｏｎｎｅｌｌｙ，Ｍ．Ａ．；Ｏｔｖｏｓ，Ｊ．Ｄ．；Ｓｈａｌａｕｒｏｖａ，Ｉ．；Ｐｌａｙｆｏｒｄ，Ｍ．Ｐ．；Ｍｅｈｔａ，Ｎ．Ｎ．ＧｌｙｃＡ，ａ Ｎｏｖｅｌ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｉｓｋ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０１７，１５（１）．
（２１） Ｆａｓｈａｎｕ，Ｏ．Ｅ．；Ｏｙｅｎｕｇａ，Ａ．Ｏ．；Ｚｈａｏ，Ｄ．；Ｔｉｂｕａｋｕｕ，Ｍ．；Ｍｏｒａ，Ｓ．；Ｏｔｖｏｓ，Ｊ．Ｄ．；Ｓｔｅｉｎ，Ｊ．Ｈ．；Ｍｉｃｈｏｓ，Ｅ．Ｄ．ＧｌｙｃＡ，ａ Ｎｏｖｅｌ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｍａｒｋｅｒ ａｎｄ Ｉｔｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｗｉｔｈ Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ Ａｒｔｅｒｉａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｃａｒｏｔｉｄ Ｐｌａｑｕｅ：Ｔｈｅ Ｍｕｌｔｉ－Ｅｔｈｎｉｃ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．Ａｎｇｉｏｌｏｇｙ ２０１９，７０ （８），７３７－７４６．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１７７／０００３３１９７１９８４５１８５．
（２２） Ｏｒｍｓｅｔｈ，Ｍ．Ｊ．；Ｃｈｕｎｇ，Ｃ．Ｐ．；Ｏｅｓｅｒ，Ａ．Ｍ．；Ｃｏｎｎｅｌｌｙ，Ｍ．Ａ．；Ｓｏｋｋａ，Ｔ．；Ｒａｇｇｉ，Ｐ．；Ｓｏｌｕｓ，Ｊ．Ｆ．；Ｏｔｖｏｓ，Ｊ．Ｄ．；Ｓｔｅｉｎ，Ｃ．Ｍ．Ｕｔｉｌｉｔｙ ｏｆ ａ Ｎｏｖｅｌ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｍａｒｋｅｒ，ＧｌｙｃＡ，ｆｏｒ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ｃｏｒｏｎａｒｙ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｅｓ Ｔｈｅｒ ２０１５，１７（１）．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１８６／ｓ１３０７５－０１５－０６４６－ｘ．
（２３） Ｃｈｕｎｇ，Ｓ．Ｔ．；Ｍａｔｔａ，Ｓ．；Ｍｅｙｅｒｓ，Ａ．；Ｃｒａｖａｌｈｏ，Ｃ．Ｋ．；Ｖｉｌｌａｌｏｂｏｓ－Ｐｅｒｅｚ，Ａ．；Ｍａｂｕｎｄｏ，Ｌ．；Ｃｏｕｒｖｉｌｌｅ，Ａ．Ｂ．；Ｓａｍｐｓｏｎ，Ｍ．Ｌ．；Ｏｔｖｏｓ，Ｊ．Ｄ．；Ｍａｇｇｅ，Ｓ．Ｎ．１２４３－Ｐ：ＮＭＲ－Ｄｅｒｉｖｅｄ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ Ｉｄｅｎｔｉｆｙ Ｃａｒｄｉｏｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｉｓｋ ｉｎ Ｙｏｕｔｈ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ ２０２０，６９（Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ １）．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．２３３７／ｄｂ２０－１２４３－Ｐ．
（２４） Ｔｕｍｍａｌａ，Ｒ．；Ｒｏｕｓｅ，Ｔ．；Ｂｅｒｇｌｉｎｄ，Ａ．；Ｓａｎｔｉａｇｏ，Ｌ．Ｓａｆｅｔｙ，Ｔｏｌｅｒａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ Ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ａｎｄ Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ Ａｎｉｆｒｏｌｕｍａｂ ｉｎ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ．Ｌｕｐｕｓ Ｓｃｉ Ｍｅｄ ２０１８，５（１），ｅ０００２５２．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１３６／ｌｕｐｕｓ－２０１７－０００２５２．
（２５） Ｆｕｒｉｅ，Ｒ．；Ｋｈａｍａｓｈｔａ，Ｍ．；Ｍｅｒｒｉｌｌ，Ｊ．Ｔ．；Ｗｅｒｔｈ，Ｖ．Ｐ．；Ｋａｌｕｎｉａｎ，Ｋ．；Ｂｒｏｈａｗｎ，Ｐ．；Ｉｌｌｅｉ，Ｇ．Ｇ．；Ｄｒａｐｐａ，Ｊ．；Ｗａｎｇ，Ｌ．；Ｙｏｏ，Ｓ．；Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒｓ，ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃ．Ｓ．Ａｎｉｆｒｏｌｕｍａｂ，ａｎ Ａｎｔｉ－Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－α Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ，ｉｎ Ｍｏｄｅｒａｔｅ－ｔｏ－Ｓｅｖｅｒｅ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ＆Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｈｏｂｏｋｅｎ，Ｎ．ｊ．）２０１７，６９（２），３７６．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１００２／ａｒｔ．３９９６２．
（２６） Ｆｕｒｉｅ，Ｒ．Ａ．；Ｍｏｒａｎｄ，Ｅ．Ｆ．；Ｂｒｕｃｅ，Ｉ．Ｎ．；Ｍａｎｚｉ，Ｓ．；Ｋａｌｕｎｉａｎ，Ｋ．Ｃ．；Ｖｉｔａｌ，Ｅ．Ｍ．；Ｆｏｒｄ，Ｔ．Ｌ．；Ｇｕｐｔａ，Ｒ．；Ｈｉｅｐｅ，Ｆ．；Ｓａｎｔｉａｇｏ，Ｍ．；Ｂｒｏｈａｗｎ，Ｐ．Ｚ．；Ｂｅｒｇｌｉｎｄ，Ａ．；Ｔｕｍｍａｌａ，Ｒ．Ｔｙｐｅ Ｉ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ａｎｉｆｒｏｌｕｍａｂ ｉｎ Ａｃｔｉｖｅ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ（ＴＵＬＩＰ－１）：Ａ Ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，Ｐｈａｓｅ ３ Ｔｒｉａｌ．Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ ２０１９，１（４），ｅ２０８－ｅ２１９．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／Ｓ２６６５－９９１３（１９）３００７６－１．
（２７） Ｍｏｒａｎｄ，Ｅ．Ｆ．；Ｆｕｒｉｅ，Ｒ．；Ｔａｎａｋａ，Ｙ．；Ｂｒｕｃｅ，Ｉ．Ｎ．；Ａｓｋａｎａｓｅ，Ａ．Ｄ．；Ｒｉｃｈｅｚ，Ｃ．；Ｂａｅ，Ｓ．－Ｃ．；Ｂｒｏｈａｗｎ，Ｐ．Ｚ．；Ｐｉｎｅｄａ，Ｌ．；Ｂｅｒｇｌｉｎｄ，Ａ．；Ｔｕｍｍａｌａ，Ｒ．Ｔｒｉａｌ ｏｆ Ａｎｉｆｒｏｌｕｍａｂ ｉｎ Ａｃｔｉｖｅ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ． Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０２０，３８２（３），２１１－２２１．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１９１２１９６．
（２８） Ｔａｎａｋａ，Ｙ．；Ｔｕｍｍａｌａ，Ｒ．Ａｎｉｆｒｏｌｕｍａｂ，ａ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ ｔｈｅ Ｔｙｐｅ Ｉ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｓｕｂｕｎｉｔ １，ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ：Ａｎ Ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｆｒｏｍ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ．Ｍｏｄｅｒｎ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ ２０２０，０（０），１－１２．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０８０／１４３９７５９５．２０２０．１８１２２０１．
（２９） Ｆｕｒｉｅ，Ｒ．Ａ．；Ｌｅｏｎ，Ｇ．；Ｔｈｏｍａｓ，Ｍ．；Ｐｅｔｒｉ，Ｍ．Ａ．；Ｃｈｕ，Ａ．Ｄ．；Ｈｉｓｌｏｐ，Ｃ．；Ｍａｒｔｉｎ，Ｒ．Ｓ．；Ｓｃｈｅｉｎｂｅｒｇ，Ｍ．Ａ．；ＰＥＡＲＬ－ＳＣ Ｓｔｕｄｙ．Ａ Ｐｈａｓｅ ２，Ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，Ｐｌａｃｅｂｏ－Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌ ｏｆ Ｂｌｉｓｉｂｉｍｏｄ，ａｎ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ Ｂ Ｃｅｌｌ Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｆａｃｔｏｒ，ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｍｏｄｅｒａｔｅ－ｔｏ－Ｓｅｖｅｒｅ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ，ｔｈｅ ＰＥＡＲＬ－ＳＣ Ｓｔｕｄｙ．Ａｎｎ Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ ２０１５，７４（９），１６６７－１６７５．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１３６／ａｎｎｒｈｅｕｍｄｉｓ－２０１３－２０５１４４．
（３０） Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ，Ｅ．；Ｙａｌａｖａｒｔｈｉ，Ｓ．；Ｂｅｒｔｈｉｅｒ，Ｃ．Ｃ．；Ｈｏｄｇｉｎ，Ｊ．Ｂ．；Ｋｈａｎｄｐｕｒ，Ｒ．；Ｌｉｎ，Ａ．Ｍ．；Ｒｕｂｉｎ，Ｃ．Ｊ．；Ｚｈａｏ，Ｗ．；Ｏｌｓｅｎ，Ｓ．Ｈ．；Ｋｌｉｎｋｅｒ，Ｍ．；Ｓｈｅａｌｙ，Ｄ．；Ｄｅｎｎｙ，Ｍ．Ｆ．；Ｐｌｕｍａｓ，Ｊ．；Ｃｈａｐｅｒｏｔ，Ｌ．；Ｋｒｅｔｚｌｅｒ，Ｍ．；Ｂｒｕｃｅ，Ａ．Ｔ．；Ｋａｐｌａｎ，Ｍ．Ｊ．Ｎｅｔｔｉｎｇ Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ Ｉｎｄｕｃｅ Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｄａｍａｇｅ，Ｉｎｆｉｌｔｒａｔｅ Ｔｉｓｓｕｅｓ，ａｎｄ Ｅｘｐｏｓｅ Ｉｍｍｕｎｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｉｎ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｌｕｐｕｓ Ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１１，１８７（１），５３８－５５２．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．４０４９／ｊｉｍｍｕｎｏｌ．１１００４５０．
（３１） Ｒｉｔｃｈｉｅ，Ｓ．Ｃ．；Ｗｕｅｒｔｚ，Ｐ．；Ｎａｔｈ，Ａ．Ｐ．；Ａｂｒａｈａｍ，Ｇ．；Ｈａｖｕｌｉｎｎａ，Ａ．Ｓ．；Ｆｅａｒｎｌｅｙ，Ｌ．Ｇ．；Ｓａｒｉｎ，Ａ．－Ｐ．；Ｋａｎｇａｓ，Ａ．Ｊ．；Ｓｏｉｎｉｎｅｎ，Ｐ．；Ａａｌｔｏ，Ｋ．；Ｓｅｐｐａｌａ，Ｉ．；Ｒａｉｔｏｈａｒｊｕ，Ｅ．；Ｓａｌｍｉ，Ｍ．；Ｍａｋｓｉｍｏｗ，Ｍ．；Ｍａｎｎｉｓｔｏｅ，Ｓ．；Ｋａｈｏｅｎｅｎ，Ｍ．；Ｊｕｏｎａｌａ，Ｍ．；Ｒｉｐａｔｔｉ，Ｓ．；Ｌｅｈｔｉｍａｋｉ，Ｔ．；Ｊａｌｋａｎｅｎ，Ｓ．；Ｐｅｒｏｌａ，Ｍ．；Ｒａｉｔａｋａｒｉ，Ｏ．；Ｓａｌｏｍａａ，Ｖ．；Ａｌａ－Ｋｏｒｐｅｌａ，Ｍ．；Ｋｅｔｔｕｎｅｎ，Ｊ．；Ｉｎｏｕｙｅ，Ｍ．Ｔｈｅ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ ＧｌｙｃＡ Ｉｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｒｅｄｉｃｔｓ Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｒｉｓｋ ｏｆ Ｓｅｖｅｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｃｅｌｌ Ｓｙｓｔ ２０１５，１（４），２９３－３０１．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｃｅｌｓ．２０１５．０９．００７．

Claims (43)

1. それを必要とする患者における心血管代謝疾患を治療するか、又はその発現のリスクを低減するための方法であって、Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の阻害剤を治療有効量で前記患者に投与することを含み、前記患者はＩ型ＩＦＮ媒介性疾患を有する、方法。
2. Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の前記阻害剤による治療前、前記患者が、健常対象と比較して、前記１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーの高いレベルの発現を有し、且つ治療が、前記患者における前記１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーの発現をベースラインから低減させる、請求項１に記載の方法。
3. 前記１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーが、ＧｌｙｃＡを含む、請求項２に記載の方法。
4. 前記１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーが、好中球細胞外捕捉（ＮＥＴ）を含む、請求項２又は３に記載の方法。
5. 前記１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーが、ＴＮＦ－α及び／又はＩＬ－１０を含む、請求項２～４のいずれか一項に記載の方法。
6. Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の前記阻害剤による治療前、前記患者が、健常対象と比較して、前記１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーの低いレベルの発現を有し、且つ治療が、前記患者における前記１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーの発現をベースラインから増加させる、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記１つ又は複数の心血管代謝疾患マーカーが、コレステロール排出能（ＣＥＣ）を含む、請求項６に記載の方法。
8. 治療前、前記患者が、心血管代謝疾患の発現のリスクを有すると同定される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
9. ａ）前記患者からのサンプル中の、１つ又は複数のマーカーの量を決定することと；
   ｂ）マーカーの前記量が、前記患者において、健常対象からのサンプル中の前記マーカーの量と比較して上昇する場合、前記患者を心血管代謝疾患の発現のリスクを有すると同定することと、
   を含み、前記マーカーが、ＧｌｙｃＡ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１０及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
10. 前記患者からの前記サンプルが、血液、血漿、血清、又は組織を含む、請求項９に記載の方法。
11. 前記患者からの前記サンプル中のＧｌｙｃＡが、核磁気共鳴（ＮＭＲ）によって測定される、請求項９又は１０に記載の方法。
12. Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の前記阻害剤による治療前、前記患者が、健常対象と比較して、上昇したＩＦＮ－αの血清タンパク質レベルを有し、且つＩ型ＩＦＮシグナル伝達の前記阻害剤が、前記患者におけるＩＦＮ－αの前記血清タンパク質レベルをベースラインから低下させる、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
13. Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の前記阻害剤が、Ｉ型ＩＦＮ受容体阻害剤（ＩＦＮＡＲ１）である、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記ＩＦＮＡＲ１阻害剤が、ＩＦＮＡＲ１に特異的なヒトモノクローナル抗体、任意選択的に、修飾されたＩｇＧ１クラスヒトモノクローナル抗体である、請求項１３に記載の方法。
15. 前記抗体が、
    ａ）配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域の相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）；
    ｂ）配列番号４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域の相補性決定領域２（ＨＣＤＲ２）；
    ｃ）配列番号５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域の相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）；
    ｄ）配列番号６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域の相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）；
    ｅ）配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域の相補性決定領域２（ＬＣＤＲ２）；及び
    ｆ）配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域の相補性決定領域３（ＬＣＤＲ３）
    を含む、請求項１４に記載の方法。
16. 前記抗体が、（ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むヒト重鎖可変領域；（ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を含むヒト軽鎖可変領域；（ｃ）配列番号９のアミノ酸配列を含むヒト軽鎖定常領域；及び（ｄ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むヒト重鎖定常領域を含む、請求項１４又は１５に記載の方法。
17. 前記抗体が、Ｋａｂａｔに記載のＥＵインデックスによる付番として、前記Ｆｃ領域内にＬ２３４Ｆのアミノ酸置換を含み、前記抗体が、少なくとも１つのＦｃリガンドに対して、非修飾抗体と比較して低減した親和性を示す、請求項１４～１６のいずれか一項に記載の方法。
18. 前記抗体が、（ａ）配列番号１１のアミノ酸配列を含むヒト重鎖；及び（ｂ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むヒト軽鎖を含む、請求項１４～１７のいずれか一項に記載の方法。
19. Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の前記阻害剤が、アニフロルマブ又はその機能的変異体である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
20. 静脈内用量のアニフロルマブ又はその前記機能的変異体を前記対象に静脈内投与することを含む、請求項１９に記載の方法。
21. 前記静脈内用量が、≧３００ｍｇのアニフロルマブ又はその前記機能的変異体である、請求項２０に記載の方法。
22. 前記静脈内用量が、≦１０００ｍｇである、請求項２０又は２１に記載の方法。
23. 前記静脈内用量が、約３００ｍｇ又は約１０００ｍｇである、請求項２１に記載の方法。
24. 前記静脈内用量が、４週ごと（Ｑ４Ｗ）に投与される、請求項２０～２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 前記患者が、健常対象と比較して、高いインターフェロン遺伝子シグネチャーの発現を有する、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。
26. 前記Ｉ型インターフェロン遺伝子シグネチャーが、健常対象と比較して、前記遺伝子のインターフェロンα誘導性タンパク質２７（ＩＦＩ２７）、インターフェロン誘導性タンパク質４４（ＩＦＩ４４）インターフェロン誘導性タンパク質４４様（ＩＦＩ４４Ｌ）、及びＳ－アデノシルメチオニンドメイン含有２（ＲＳＡＤ２）ラジカルの発現上昇を含む、請求項２５に記載の方法。
27. 前記高いインターフェロン遺伝子シグネチャーの発現は、ＩＦＩ２７、ＩＦＩ４４、ＩＦＩ４４Ｌ、及びＲＳＡＤ２の、１つ又は複数の対照遺伝子の発現と比較して増加した発現によって決定される、請求項２５又は２６に記載の方法。
28. 前記心血管代謝疾患が、心血管疾患であり、任意選択的に、前記心血管疾患が、心筋炎、不整脈、弁機能不全、血管炎、大動脈炎、アテローム性動脈硬化症及び／又は冠状動脈炎を含む、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
29. 前記心血管代謝疾患が、早期アテローム性動脈硬化症である、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。
30. 前記早期アテローム性動脈硬化症が、無症状である、請求項２９に記載の方法。
31. 前記Ｉ型ＩＦＮ媒介性疾患が、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）である、請求項１～３０のいずれか一項に記載の方法。
32. 前記Ｉ型ＩＦＮ媒介性疾患が、中等度から重度のＳＬＥである、請求項３１に記載の方法。
33. Ｉ型ＩＦＮシグナル伝達の前記阻害剤を含む、請求項１～３２のいずれか一項に記載の方法における使用のための医薬組成物。
34. 請求項３３に記載の医薬組成物を含む注射デバイス。
35. プレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）である、請求項３４に記載の注射デバイス。
36. アクセサリ付きプレフィルドシリンジ（ＡＦＰＳ）である、請求項３５に記載の注射デバイス。
37. 自動注射器である、請求項３５に記載の注射デバイス。
38. 請求項３４～３７のいずれか一項に記載の注射デバイス及び使用説明書を含む、キット。
39. 前記使用説明書が、前記医薬組成物の皮下投与又は前記患者への単位用量についての使用説明書を含む、請求項３８に記載のキット。
40. 前記使用説明書が、前記注射デバイス及び／又は医薬組成物が、ＳＬＥの前記治療における使用のためであることを特定する、請求項３５又は３９に記載のキット。
41. 前記使用説明書が、前記注射デバイス及び／又は医薬組成物が、心血管代謝疾患を治療するためであることを特定する、請求項３５～４０のいずれか一項に記載のキット。
42. パッケージングを含み、前記パッケージングが、前記注射デバイス及び前記使用説明書を保持するように適応される、請求項３５～４１のいずれか一項に記載のキット。
43. 前記使用説明書が、前記注射デバイスに添付される、請求項３５～４２のいずれか一項に記載のキット。

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