JP2023524010A - 高効率遺伝子送達系 - Google Patents

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Abstract

本開示は、ウイルスベクター送達系が投与される対象における疾患または障害の治療における使用のためのウイルスベクター送達系、そしてウイルスベクター送達系を作製及び使用する方法を提供する。

Description

関連出願
本出願は、２０２０年４月２８日に出願された米国仮出願第６３／０１６，９６８号の利益を主張する。上記の出願の全体の教示は、参照することによって本明細書に援用される。
加齢の分野は、過去数十年で大きな進歩を遂げた。その調節が健康でいる期間及び寿命を増加させる多くの経路及び遺伝子、ならびに加齢を標的とする第１の治療物質が出現し始めている。しかしながら、加齢の研究からの大部分の解明は、適切な小分子薬物の欠如に起因して、重度の早期加齢疾患であっても臨床へと応用され得ない。さらに、マウス及び他の哺乳動物を使用する加齢の遺伝学についての研究は、当該研究が遺伝子導入動物の大きなコホートの生成、繁殖、及び加齢を要求するので、遅くそして費用のかかるままであった。
応用可能性の欠如ならびに研究の時間及び費用は、今日加齢の分野で見られる主な問題である。これらの問題は、従来の方法を使用して解決することができない。しかしながら、高度な遺伝子療法を使用して、加齢した動物において遺伝子を直接乱し患者の中へ老化保護遺伝子を送達することを介して、当該問題を解決することができる可能性がある。しかしながら、これは、遺伝子送達技術の現在の限定に起因して達成されない。
遺伝子（例えば老化保護遺伝子）を発現または過剰発現するための高効率アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベースの体全体の遺伝子療法の方法が本明細書において記載される。系は、全身性発現（例えば均一な全身性発現）のためのＡＡＶ発現系、例えば均一な全身性発現のための単一または複数のＡＡＶ発現系（ＤＡＥＵＳ）である。ＤＡＥＵＳが加齢した野生型マウスにおいて複数の老化保護遺伝子の過剰発現を達成し得ることが、本明細書において示される。ＤＡＥＵＳが、ＩＩ型ウォルフラム症候群マウスにおいてＣｉｓｄ２発現を完全にレスキューし、そしてこれらのマウスにおいて主要な早老性罹患率を遅らせ、好転させ得ることが、本明細書においてさらに示される。ＤＡＥＵＳは、他の使用の中でも、加齢の基礎生物学、早老症の治療、及び健康でいる期間及び／または寿命を延長するための老化保護遺伝子の過剰発現についての研究を加速させることを可能にする遺伝子療法プラットフォームである。
ウイルスベクター送達系が、本明細書において開示される。ウイルスベクター送達系は、単一遺伝子の送達のために操作された２つ以上のウイルス血清型を含む（すなわち同じ遺伝子は、２つ以上のウイルス血清型の各々によって送達される）。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、単一遺伝子を送達するために無限の数のウイルス血清型を含む。例えば、ウイルスベクター送達系は、少なくとも５、１０、２５、５０、７５、または１００のウイルス血清型を含み得るか、または２～２０または５～１０のウイルス血清型を含み得る。
いくつかの実施形態において、ウイルス血清型はアデノ随伴ウイルス血清型である（例えばＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ／８、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ１０、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ２２、及びＡＡＶＭＹＯなど）。いくつかの実施形態において、２つ以上のウイルス血清型の各々は、異なる細胞タイプまたは組織タイプについて指向性（ｔｒｏｐｈｉｃ）である（すなわち第１のウイルス血清型は第１の細胞タイプまたは組織タイプについて指向性であり、第２のウイルス血清型は第２の細胞タイプまたは組織タイプについて指向性である）。いくつかの実施形態において、少なくとも１つのウイルス血清型はＡＡＶ９である。いくつかの実施形態において、少なくとも１つのウイルス血清型はＰＨＰ．ｅＢである。ある特定の実施形態において、第１のウイルス血清型はＡＡＶ９であり、第２のウイルス血清型はＰＨＰ．ｅＢである。いくつかの実施形態において、ウイルス血清型は表１から選択される。
ウイルスベクター送達系は、ｍｉＲＮＡ標的部位をさらに含み得る。いくつかの実施形態において、ｍｉＲＮＡ標的部位は、組織標的（例えば大動脈、内皮、心筋骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、もしくは筋肉衛星細胞、またはより特異的には心臓、肝臓、筋肉、もしくは脳の組織）に基づいて選択される。いくつかの実施形態において、ｍｉＲＮＡ標的部位は、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１２４、ｍｉＲＮＡ－１２８、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、ｍｉＲＮＡ－２２３、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される。例えば、標的組織は心臓組織であり得、ｍｉＲＮＡ標的部位は、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、またはｍｉＲＮＡ－４９９であり得る。いくつかの実施形態において、標的組織は肝臓組織であり、ｍｉＲＮＡ標的部位は、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、及びｍｉＲＮＡ－２２３からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、標的組織は筋肉組織であり、ｍｉＲＮＡ標的部位は、ｍｉＲＮＡ－１またはｍｉＲＮＡ－１３３である。いくつかの実施形態において、標的組織は脳組織であり、ｍｉＲＮＡ標的部位は、ｍｉＲＮＡ－１２４またはｍｉＲＮＡ－１２８である。
ウイルスベクター送達系は、非サイレンシングプロモーターをさらに含み得る。いくつかの実施形態において、非サイレンシングプロモーターは、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも３０％、任意選択で少なくとも５０％のＲＮＡ発現を導く。いくつかの実施形態において、プロモーターは、Ｃｂｈ、ＣＡＧ、ＣＢ７、及びＣＢＡからなる群から選択される。ある特定の実施形態において、プロモーターはＣｂｈである。
いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、任意選択で自己相補的ベクター骨格をさらに含む。
いくつかの実施形態において、送達される遺伝子は表２から選択される。ある特定の実施形態において、遺伝子は、Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、遺伝子は老化保護遺伝子である。いくつかの実施形態において、遺伝子は、対象において治療を必要とする疾患または障害と関連する遺伝子（例えばその発現が、治療される疾患または障害において不在まであるかまたは低減された遺伝子）である。
本明細書において開示されるウイルスベクター送達系を含む医薬組成物も、本明細書において開示される。本明細書において開示される医薬組成物またはウイルスベクター送達系を投与することを含む対象における疾患または障害を治療または予防する方法も、本明細書において開示される。
同じ遺伝子を対象の複数の（２つ以上）細胞タイプまたは組織タイプへ比較的同時に送達及び発現する方法、そして疾患または障害を治療または予防する方法が、本明細書において開示される。方法は、単一遺伝子の送達のために操作された少なくとも１つのウイルス血清型、少なくとも２つのウイルス血清型、少なくとも３つのウイルス血清型、少なくとも４つのウイルス血清型、または少なくとも５つのウイルス血清型を含むウイルスベクター送達系を対象へ投与することを含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、単一遺伝子を送達するために無限の数のウイルス血清型を含む。
いくつかの実施形態において、疾患または障害は、加齢関連の疾患または障害（例えば早老症、ウォルフラム症候群、神経変性障害、神経血管障害、骨格筋病態、カウデン症候群、バナヤン・ライリー・ルバルカバ症候群、プロテウス症候群、プロテウス様症候群、及び他のＰＴＥＮ病（ＰＴＥＮ－ｏｐａｔｈｙ）、ウェルナー症候群、ブルーム症候群、ロスムンド・トムソン症候群、コケイン症候群、色素性乾皮症、硫黄欠乏性毛髪発育異常症、色素性乾皮症・コケイン症候群の合併型、拘束性皮膚障害、糖尿病、肥満、心血管性疾患、がん、眼の変性、肝不全、ならびに加齢黄斑変性症）である。いくつかの実施形態において、疾患または障害は、２つ以上の組織標的への遺伝子の投与から利益を得るであろう。ある特定の実施形態において、疾患または障害は、ＩＩ型ウォルフラム症候群である。
いくつかの実施形態において、遺伝子は、対象中の２つ以上の組織において発現される。遺伝子は、対象中の２つ以上の組織にわたって均一に発現または過剰発現され得る。いくつかの実施形態において、遺伝子は対象中の組織のうちの少なくとも５０％へ送達され、いくつかの実施形態において、対象中で少なくとも４か月間発現される。
単一遺伝子の送達のために操作された２つ以上のＡＡＶ血清型、非サイレンシングプロモーター、少なくとも１つのｍｉＲＮＡ標的部位、遺伝子、及び任意選択で自己相補的骨格を含むウイルスベクター送達系も、本明細書において開示される。
いくつかの実施形態において、ＡＡＶ血清型は、ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢである。いくつかの実施形態において、遺伝子は、Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮからなる群から選択され、好ましくはＣｉｓｄ２である。
本明細書において開示されるウイルスベクター送達系を対象へ投与することを含む、疾患または障害（例えばＩＩ型ウォルフラム症候群）を治療する方法を、本明細書において開示する。
対象の寿命を延長する方法も、本明細書において開示される。例えば、寿命は、本明細書において記載されるウイルスベクター送達系、または本明細書において記載されるウイルスベクター送達系を含む医薬組成物（例えば単一遺伝子の送達のために操作された少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、またはそれ以上のウイルス血清型を含むウイルスベクター送達系）を投与することによって延長され得る。
有効量のＣｉｓｄ２をＩＩ型ウォルフラム症候群を患う対象へ投与することを含むＩＩ型ウォルフラム症候群を治療する方法が、本明細書においてさらに記載される。
いくつかの実施形態において、Ｃｉｓｄ２は、遺伝子療法を介して（例えばウイルスベクター送達系または当業者に公知の他の遺伝子療法を介して）対象へ投与される。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、少なくとも１つのウイルス血清型、少なくとも２つのウイルス血清型、少なくとも３つのウイルス血清型、少なくとも４つのウイルス血清型、少なくとも５つのウイルス血清型を含む。
対象へ投与されたベクターの量と１つまたは複数の標的組織中のもたらされた遺伝子導入レベルとの間の関係性を特徴づける用量－応答曲線を得ることと；対象へ投与されたベクターの量と１つまたは複数の標的組織中のもたらされた遺伝子導入レベルとの間の関係性を特徴づける線形方程式または非線形方程式を得ることと；遺伝子送達系の要求する用量を内挿または外挿して、１つまたは複数の標的組織において定義されたレベルの遺伝子導入を達成することと、を含む、対象の１つまたは複数の標的組織における遺伝子導入の前決定されたレベルを同定する方法も、本明細書において記載される。
対象へ投与されたベクターの量と１つまたは複数の標的組織中のもたらされた導入遺伝子発現レベルとの間の関係性を特徴づける用量－応答曲線を得ることと；対象へ投与されたベクターの量と１つまたは複数の標的組織中のもたらされた導入遺伝子発現レベルとの間の関係性を特徴づける線形方程式または非線形方程式を得ることと；遺伝子送達系の要求する用量を内挿または外挿して、１つまたは複数の標的組織において定義されたレベルの導入遺伝子発現を達成することと、を含む、対象の１つまたは複数の標的組織における導入遺伝子発現の前決定されたレベルを同定する方法が、本明細書においてさらに記載される。
いくつかの実施形態において、遺伝子送達系は、少なくとも１つのウイルス血清型、少なくとも２つのウイルス血清型、少なくとも３つのウイルス血清型、少なくとも４つのウイルス血清型、少なくとも５つのウイルス血清型を含む。いくつかの実施形態において、ウイルス血清型はアデノ随伴ウイルス血清型である（例えばＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ／８、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ１０、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ２２、ＡＡＶＭＹＯなど）。いくつかの実施形態において、ウイルス血清型は表１から選択される。いくつかの実施形態において、１つまたは複数の標的組織は、単一組織または２つ以上の組織を含む。いくつかの実施形態において、１つまたは複数の標的組織は、大動脈、内皮、心筋、骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、ならびに筋肉衛星細胞からなる群から選択される。
本特許または出願ファイルは、カラーで作成された少なくとも１つの図面を含有する。カラー図面を含めた本特許または特許出願公開のコピーは、請求及び必要な料金の支払いに応じて官庁によって提供されるだろう。
マウスにおけるＣｉｓｄ２欠損の結果を実証する。Ａは、オスのマウスにおけるＣｉｓｄ２による寿命の用量依存的調節を示す。Ｃｉｓｄ２ノックアウトマウスにおいて、Ｃｉｓｄ２欠損は寿命を短縮し、早期加齢を引き起こす。これとは対照的に、持続的レベルのＣｉｓｄ２発現は寿命を延長し、Ｃｉｓｄ２導入遺伝子マウスの生存率を増加させる。Ｗｕ，ｅｔ ａｌ．Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．２１，３９５６－３９６８（２０１２）を参照されたい。Ｂは、Ｃｉｓｄ２－／－マウスにおける体重の減少、寿命の短縮、ならびに眼及び皮膚の加齢症状を示す画像を提供する。Ｃｉｓｄ２－／－マウスの早期脱色及び白髪が頭の上部及び肩で観察され、眼球突出及び立ち耳も示される。Ｃｈｅｎ，ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．２３，１１８３－１１９４（２００９）を参照されたい。 ｓｓＡＡＶ９の概要を提供する。ｓｓＡＡＶ９ベクター概要を提供する。 ｓｓＡＡＶ９の概要を提供する。約１ｅ１２ｖｇ／マウスの用量でのｓｓＡＡＶ９ ＤＮＡの体内分布を示す（ｓｓＡＡＶ９－Ａｔｇ５及びｓｓＡＡＶ９－Ｃｉｓｄ２は、ｓｓＡＡＶ９として表示した）。 ｓｓＡＡＶ９の概要を提供する。Ｃｉｓｄ２についてのタンパク質レベルの全体的な過剰発現の欠如を示す。８週齢の野生型のＣ５７ＢＬ６／Ｊマウスに注射し、注射の２８日後に安楽死させた。Ｃｉｓｄ２のレベルをＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを介して決定した。 ｓｓＡＡＶ９の概要を提供する。Ａｔｇ５についてのタンパク質レベルの全体的な過剰発現の欠如を示す。８週齢の野生型のＣ５７ＢＬ６／Ｊマウスに注射し、注射の２８日後に安楽死させた。Ａｔｇ５のレベルをＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを介して決定した。 従来のｓｓＡＡＶ９ベクターを使用して、若返り遺伝子Ｏｃｔ４－Ｓｏｘ２－Ｋｌｆ４の不十分な全身性過剰発現を実証する（Ｌｕ ｅｔ ａｌ ２０１９を参照）。ＯＳＫ－ＡＡＶ９の静脈内送達後の野生型マウス及びＯＳＫ遺伝子導入（ＴＧ）マウスの肝臓におけるＳｏｘ２発現を示す。 従来のｓｓＡＡＶ９ベクターを使用して、若返り遺伝子Ｏｃｔ４－Ｓｏｘ２－Ｋｌｆ４の不十分な全身性過剰発現を実証する（Ｌｕ ｅｔ ａｌ ２０１９を参照）。４週間のモニタリング後の次の９か月間における、ドキシサイクリン有りまたは無しの野生型マウス及びＡＡＶ媒介性ＯＳＫ発現マウス（合計で１．０×１０＾１２遺伝子コピー）の体重を示す（それぞれｎ＝５、３、６、４）。 従来のｓｓＡＡＶ９ベクターを使用して、若返り遺伝子Ｏｃｔ４－Ｓｏｘ２－Ｋｌｆ４の不十分な全身性過剰発現を実証する（Ｌｕ ｅｔ ａｌ ２０１９を参照）。組織分布の測定のために使用されるＡＡＶ－ＵＢＣ－ｒｔＴＡ及びＡＡＶ－ＴＲＥ－Ｌｕｃベクターを示す。 従来のｓｓＡＡＶ９ベクターを使用して、若返り遺伝子Ｏｃｔ４－Ｓｏｘ２－Ｋｌｆ４の不十分な全身性過剰発現を実証する（Ｌｕ ｅｔ ａｌ ２０１９を参照）。ＡＡＶ９－ＵＢＣ－ｒｔＴＡ及びＡＡＶ９－ＴＲＥ－Ｌｕｃ（合計で１．０×１０＾１２遺伝子コピー）を後眼窩注射した２か月後の野生型マウスのルシフェラーゼ画像化を示す。ドキシサイクリンを、右側で示したマウスへ７日間飲料水（１ｍｇ／ｍＬ）中で送達した。 従来のｓｓＡＡＶ９ベクターを使用して、若返り遺伝子Ｏｃｔ４－Ｓｏｘ２－Ｋｌｆ４の不十分な全身性過剰発現を実証する（Ｌｕ ｅｔ ａｌ ２０１９を参照）。ＡＡＶ９－ＵＢＣ－ｒｔＴＡ及びＡＡＶ９－ＴＲＥ－Ｌｕｃを後眼窩注射した２か月後に続いてドキシサイクリンにより７日間処理した、眼（Ｅｙ）、脳（Ｂｒ）、脳下垂体（Ｐｉ）、心臓（Ｈｅ）、胸腺（Ｔｈ）、肺（Ｌｕ）、肝臓（Ｌｉ）、腎臓（Ｋｉ）、脾臓（Ｓｐ）、膵臓（Ｐａ）、精巣（Ｔｅ）、脂肪（Ａｄ）、筋肉（Ｍｕ）、脊髄（ＳＣ）、胃（Ｓｔ）、小腸（Ｉｎ）、及び盲腸（Ｃｅ）のルシフェラーゼ画像化を示す。ルシフェラーゼシグナルは主として肝臓にある。より長い曝露時間の同じ組織の画像化と（図３Ｅの続き）から、膵臓において低いレベルのルシフェラーゼシグナルが明らかにされた（肝臓を除去した）。 従来のｓｓＡＡＶ９ベクターを使用して、若返り遺伝子Ｏｃｔ４－Ｓｏｘ２－Ｋｌｆ４の不十分な全身性過剰発現を実証する（Ｌｕ ｅｔ ａｌ ２０１９を参照）。ＡＡＶ９－ＵＢＣ－ｒｔＴＡ及びＡＡＶ９－ＴＲＥ－Ｌｕｃを後眼窩注射した２か月後に続いてドキシサイクリンにより７日間処理した、眼（Ｅｙ）、脳（Ｂｒ）、脳下垂体（Ｐｉ）、心臓（Ｈｅ）、胸腺（Ｔｈ）、肺（Ｌｕ）、肝臓（Ｌｉ）、腎臓（Ｋｉ）、脾臓（Ｓｐ）、膵臓（Ｐａ）、精巣（Ｔｅ）、脂肪（Ａｄ）、筋肉（Ｍｕ）、脊髄（ＳＣ）、胃（Ｓｔ）、小腸（Ｉｎ）、及び盲腸（Ｃｅ）のルシフェラーゼ画像化を示す。ルシフェラーゼシグナルは主として肝臓にある。より長い曝露時間の同じ組織の画像化と（図３Ｅの続き）から、膵臓において低いレベルのルシフェラーゼシグナルが明らかにされた（肝臓を除去した）。 一本鎖骨格及び様々なＡＡＶ血清型を使用して、異なる組織におけるウイルスＤＮＡ及びルシフェラーゼ発現を実証する。すべての血清型は、主要な組織間でＤＮＡロード及び発現レベルにおいて１００倍越の大きな変動を示す（Ｚｉｎｃａｒｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ ２００８を参照）。アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）血清型１－９のルシフェラーゼタンパク質発現プロファイルを提供する。ルシフェラーゼ活性のレベル［ｍｇタンパク質あたりの相対発光単位（ＲＬＵ）で］を、ＡＡＶ１～９の１×１０ｅ１１粒子を成体マウスの中へ静脈注射した１００日後に、選択した組織において決定した。データを平均値±標準誤差として提示する。 一本鎖骨格及び様々なＡＡＶ血清型を使用して、異なる組織におけるウイルスＤＮＡ及びルシフェラーゼ発現を実証する。すべての血清型は、主要な組織間でＤＮＡロード及び発現レベルにおいて１００倍越の大きな変動を示す（Ｚｉｎｃａｒｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ ２００８を参照）。選択した組織におけるベクターゲノムのコピー数を提供する。ルシフェラーゼゲノムのコピー数／μｇのゲノムＤＮＡ。１×１０ｅ１１粒子のアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）血清型１～９を尾静脈注射した１００日後の、選択された組織におけるウイルスゲノムの持続性である。ゲノムＤＮＡを示された組織から単離し、１００ｎｇの各々を三重で使用してベクターゲノムコピーを決定した。有意レベルを一元配置分散分析を使用して決定した。データを平均値±標準誤差として示す。＊ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ８に対して、＜０．０５。＃すべてに対して、Ｐ＜０．０５。＊＊全てに対して、Ｐ＜０．０５。 ＤＡＥＵＳ系の概要を提供する。ベクター送達系を示す。 ＤＡＥＵＳ系の概要を提供する。１匹のマウスあたり２ｅ１２ｖｇの用量でＡＡＶ９、ＰＨＰ．ｅＢ、またはＡＡＶ９＋ＰＨＰ．ｅＢの両方を使用する、ＡＡＶ ＤＮＡ体内分布を示す。ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢが別々に使用された場合の、ウイルスＤＮＡにおける高い組織間変動に注目されたい。１８か月齢のオスのＣ５７ＢＬ６／Ｊマウスに注射し、注射の２８日後に安楽死させた。ウイルスＤＮＡをｑＰＣＲを介して測定した。 ＤＡＥＵＳ系の概要を提供する。１匹のマウスあたり２ｅ１２ｖｇの用量でＡＡＶ９、ＰＨＰ．ｅＢ、またはＡＡＶ９＋ＰＨＰ．ｅＢの両方を使用する、ＧＦＰ発現を示す。ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢが別々に使用された場合の、ＧＦＰ発現における高い組織間変動に注目されたい。１８か月齢のオスのＣ５７ＢＬ６／Ｊマウスに注射し、注射の２８日後に安楽死させた。ＧＦＰのタンパク質レベルをＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを介測定した。 ｓｓＡＡＶ９（左側パネル）またはｓｃＡＡＶ９－ｍｉＲ１２２注射（右側パネル）をした７日後の、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）レベルを示す。ＡＬＴレベルの上昇は、肝損傷を暗示する。左側：ｓｓＡＡＶ９－Ｃｉｓｄ２注射されたマウスにおけるＡＬＴレベルの上昇は、毒性を回避するために肝臓における発現を低下させる戦略が必要であることを指摘した。Ａｔｇ５がこのベクターにより過剰発現することに成功しなかったので、ｓｓＡＡＶ９－Ａｔｇ５注射マウスにおけるＡＬＴの上昇が無いことに注目されたい。右側：発現ベクターへのｍｉＲ１２２標的部位の添加は、よりフレイルな加齢したマウス及びより強力なベクターの使用にもかかわらずＡＬＴ増加を低減する。左側：８週齢の野生型オスのＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスに、８ｅ１１ｖｇ／マウス（Ａｔｇ５）及び５ｅ１１ｖｇ／マウス（Ｃｉｓｄ２）の用量で後眼窩注射した。右側：１８か月齢の野生型オスのＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスに、ｓｃＡＡＶ９－Ａｔｇ５／Ｃｉｓｄ２／ＧＦＰを４ｅ１１ｖｇ／マウスを後眼窩注射した。使用したビヒクルは、最終的な製剤バッファーであった。ＡＬＴ血清レベルを、注射の７日後にＵＭａｓｓ Ｍｏｕｓｅ Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒによって測定した。 Ｃｉｓｄ２のｓｃＡＡＶ９ ｖｓ ＤＡＥＵＳの過剰発現を示す。ＡＡＶ９単独は、全身性過剰発現を達成するのに不十分である。左側：８週齢のオスのＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスに、４ｅ１１ｖｇ／マウスのｓｃＡＡＶ９－Ｃｉｓｄ２を後眼窩注射した。右側：１８か月齢のマウスに、合計で４ｅ１１または２ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を後眼窩注射した。マウスを注射の２８日後に安楽死させ、Ｃｉｓｄ２レベルをＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを使用して測定した。 Ａｔｇ５のｓｃＡＡＶ９ ｖｓ ＤＡＥＵＳの過剰発現を示す。ＡＡＶ９単独は、全身性過剰発現を達成するのに不十分である。左側：１８か月齢のオスのＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスに、２ｅ１２ｖｇ／マウスのｓｃＡＡＶ９－Ａｔｇ５を後眼窩注射した。右側：１８か月齢のマウスに、８ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－Ａｔｇ５を後眼窩注射した。マウスを注射の２８日後に安楽死させ、Ａｔｇ５レベルをＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを使用して測定した。 ＰＴＥＮのＤＡＥＵＳ過剰発現を実証する。１８か月齢のオス及びメスのマウス（５０：５０の比）に、合計で４ｅ１１または２ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮを後眼窩注射した。マウスを注射の２８日後に安楽死させ、ＰＴＥＮレベルをＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを使用して測定した。 脳、心臓、肝臓及び前脛骨筋についてのＡＡＶ遺伝子導入に対するＡＡＶ用量の用量－応答曲線を提供する。５週齢のオスのＣ５７ＢＬ６－Ｊマウスに、以下の血清型及び組み合わせ：（１）ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２；（２）ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲＳｃｒ（配列中、ｍｉＲＮＡ標的部位をスクランブル化して、その機能を除去した）；（３）ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２；及び（４）ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲＳｃｒと一緒にｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２を、１群あたりＮ＝３のマウスで、およそ１ｋｇあたり５ｅ１２、２ｅ１３、５ｅ１３、及び２ｅ１４のＡＡＶベクターゲノムの用量で注射した。 期待された遺伝子導入レベルｖｓ観察された遺伝子導入レベルの回帰分析を提供する。図１０からの群（１）及び群（３）のマウスにおいて観察された遺伝子導入レベルを、各々の組織について個別に合計し、図１０の群（４）のマウスにおける観察された遺伝子導入レベルに比較した。相互作用がＡＡＶ９とＰＨＰ．ｅＢとの間に存在しないならば、すべての組織についての群１及び３からの遺伝子導入の合計（期待された）は、それぞれのすべての組織についての群４における遺伝子導入レベル（観察された）と厳密に一致するはずである。期待された遺伝子導入レベルｖｓ観察された遺伝子導入レベルの回帰分析は、期待値が観察値に一致し、高度に相関することを示した。 脳、心臓、肝臓、及び前脛骨筋（ＴＡ）についての予測された遺伝子導入パターン及び観察された遺伝子導入パターンの比較を提供する。５週齢のオスのＣ５７ＢＬ６－Ｊのマウスの５つの群に、ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢの異なる組み合わせ：（１）１．４ｅ１４ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋１．９ｅ１３ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２；（２）１．９ｅ１４ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋４．８ｅ１２ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２；（３）４．８ｅ１３ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋１．９ｅ１４ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２；（４）２．４ｅ１３ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋９．５ｅ１２ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２；及び（５）４．８ｅ１２ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋４．８ｅ１３ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２を、１群あたりＮ＝３のマウスで後眼窩注射した。予測された遺伝子導入パターンと観察された遺伝子導入パターンとの間の高い一致が観察された。 図１２中で同定されたＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢの異なる組み合わせについての、脳、心臓、肝臓、及び前脛骨筋（ＴＡ））における予測された遺伝子導入レベル及び観察された遺伝子導入レベルの高い相関性を示す線形回帰分析を提供する。 ５か月の年齢でのＣｉｓｄ２ノックアウトマウス及びそれらの症状を示す。統計的有意差を、Ｔｕｋｅｙの事後検定による二元配置ＡＮＯＶＡを介して査定した。 ５か月の年齢でのＣｉｓｄ２ノックアウトマウス及びそれらの症状を示す。統計的有意差を、Ｔｕｋｅｙの事後検定による二元配置ＡＮＯＶＡを介して査定した。 ＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２の効果を実証する。Ｃｉｓｄ２ノックアウトのＩＩ型ウォルフラム症候群マウスにおける均一な形質導入を示す。 ＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２の効果を実証する。Ｃｉｓｄ２ノックアウトのＩＩ型ウォルフラム症候群マウスにおけるＣｉｓｄ２発現のレスキューを示す。 ＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２の効果を実証する。全用量で４ｅ１１のＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を注射した２～４か月齢のＣｉｓｄ２ノックアウトマウスにおける体重のレスキューを示す。注射した１５５日後に体重をアッセイし、各々のマウスについて注射前の体重へ正規化した。オス及びメスのマウスをおよそ１：１比で使用した。統計的有意差を、Ｔｕｋｅｙの事後検定による二元配置ＡＮＯＶＡを介して査定した。 ＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２の効果を実証する。全用量で４ｅ１１のＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を注射した２～４か月齢のＣｉｓｄ２ノックアウトマウスにおけるフレイルからの保護を示す。フレイルを、Ｃｉｓｄ２ノックアウトマウス、ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を注射したＣｉｓｄ２ノックアウトマウス、及びそれらの野生型の同腹仔について、注射の４か月後にアッセイした。オス及びメスのマウスをおよそ１：１比で使用した。統計的有意差を、Ｔｕｋｅｙの事後検定による一元配置ＡＮＯＶＡを介して査定した。 様々な年齢（老齢（７か月）、若年（２～４か月）、及び新生仔（Ｐ５～Ｐ８））のＣｉｓｄ２ノックアウトマウスについてのＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２の投与からの効果の査定のためのタイムラインを示す。 約Ｐ５～Ｐ８日齢（新生仔）のＣｉｓｄ２ノックアウトマウスへＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２またはビヒクルを投与した結果を、野生型マウスへビヒクルを投与したものに比較して提供する。データは、マウスの注射後の生存、フレイル、体重変化、スピード、及び運動の時間を測定する。新生仔マウスを、角膜の瘢痕化または不透明度についてさらに観察した。 約Ｐ５～Ｐ８日齢（新生仔）のＣｉｓｄ２ノックアウトマウスへＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２またはビヒクルを投与した結果を、野生型マウスへビヒクルを投与したものに比較して提供する。データは、マウスの注射後の生存、フレイル、体重変化、スピード、及び運動の時間を測定する。新生仔マウスを、角膜の瘢痕化または不透明度についてさらに観察した。 約２～４か月日齢（若年）のＣｉｓｄ２ノックアウトマウスへＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２またはビヒクルを投与した結果を、野生型マウスへビヒクルを投与したものに比較して提供する。データは、マウスの注射後の生存、フレイル、体重変化、グリッドハング能力、及びビーム横断の挑戦を測定する。 約２～４か月日齢（若年）のＣｉｓｄ２ノックアウトマウスへＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２またはビヒクルを投与した結果を、野生型マウスへビヒクルを投与したものに比較して提供する。データは、マウスの注射後の生存、フレイル、体重変化、グリッドハング能力、及びビーム横断の挑戦を測定する。 約７か月齢（老齢）のＣｉｓｄ２ノックアウト（ＫＯ）マウスへＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２（またはビヒクル）を投与した結果を提供する。写真は感染の４０、６４、及び１２５日後（ＤＰＩ）のマウスを示し、グラフは、ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を投与されたマウスの体重増加及び生存をビヒクルのみ（ＦＦＢ）を投与されたマウスへ比較して示す。マウスに合計で３ｅ１１のＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を後眼窩注射し、次いで注射後１２５日（ＤＰＩ）間フォローした。ビヒクル注射マウスは注射の２３日後に死亡した。 野生型マウスにおける、ＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ、ＤＡＥＵＳ－Ａｔｇ５、及びＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を過剰発現する結果を示す。１８か月齢の野生型のオス及びメス（１：１の比）のＣ５７ＢＬ６／Ｊマウスに、１ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ、２ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２、または８ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－Ａｔｇ５のいずれかを注射した。マウスを注射の１か月後に安楽死させ、ＰＴＥＮ、Ｃｉｓｄ２、及びＡｔｇ５のタンパク質レベルをそれぞれＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを使用して測定した。分離した２つの実験を各々について遂行し、個別のグラフで示す。 野生型マウスにおける、ＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ、ＤＡＥＵＳ－Ａｔｇ５、及びＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を過剰発現する結果を示す。１８か月齢の野生型のオス及びメス（１：１の比）のＣ５７ＢＬ６／Ｊマウスに、１ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ、２ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２、または８ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－Ａｔｇ５のいずれかを注射した。マウスを注射の１か月後に安楽死させ、ＰＴＥＮ、Ｃｉｓｄ２、及びＡｔｇ５のタンパク質レベルをそれぞれＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを使用して測定した。分離した２つの実験を各々について遂行し、個別のグラフで示す。 ＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ／Ｃｉｓｄ２／ＧＦＰまたはビヒクルにより処理した、２４か月齢の野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの寿命を示す。等しい数のオス及びメスのマウスに、ビヒクル（ＦＦＢ）（Ｎ＝１４）、１ｅ１２ｖｇ／マウス（ＰＴＥＮ）（Ｎ＝８）のＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ、１ｅ１２ｖｇ／マウス（ＧＦＰ）（Ｎ＝５）のＤＡＥＵＳ－ＧＦＰ、または２ｅ１２ｖｇ／マウス（Ｃｉｓｄ２）（Ｎ＝６）のＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を後眼窩注射した。生存を、すべての群と一緒に（上部左側のパネル）、または個別にＦＦＢ群に比較して（残り）、プロットした。ＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ処理マウスは、ビヒクル処理マウスに比較して、全体的な生存期間中央値の７％の増加及び注射後の生存期間中央値の３７％の増加を示した。ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２処理マウスは、ＦＦＢ処理マウスに比較して、全体的な生存期間中央値の７％の増加及び注射後の生存期間中央値の３８％の増加を示した。
長期的で効率的且つ体全体の遺伝子発現を可能にする遺伝子療法の方法が、本明細書において開示される。１つまたは複数の遺伝子の送達のためのウイルスベクター送達系も、本明細書において開示される。本明細書において記載されるウイルスベクター送達系は、対象内の大多数の組織の中へ遺伝子を送達し、これらの組織にわたって均一な遺伝子発現を提供し、長期的且つ安定的な遺伝子発現を提供し、野生型レベルを超える過剰発現を達成するように遺伝子の強く効率的な発現を提供し、個別の細胞間で一様に分布する遺伝子発現を提供する。遺伝子療法（例えばウイルスベクター送達系）を利用して、対象の１つまたは複数の組織へ遺伝子（例えばＣｉｓｄ２、Ａｔｇ５、またはＰＴＥＮ）を送達することによって、１つまたは複数の疾患（例えばＩＩ型ウォルフラム症候群）を治療もしくは予防するか、または対象の寿命を延長する方法も、本明細書において開示される。
別段定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語及び科学用語は、当業者によって共通して理解される意味を有する。以下の参照文献は、本明細書において使用される多くの用語の一般的な定義を当業者に提供する。Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（２ｎｄ ｅｄ．１９９４）；Ｔｈｅ Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｗａｌｋｅｒ ｅｄ．，１９８８）；Ｔｈｅ Ｇｌｏｓｓａｒｙ ｏｆ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｒ．Ｒｉｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ（１９９１）；及びＨａｌｅ ＆ Ｍａｒｈａｍ，Ｔｈｅ Ｈａｒｐｅｒ Ｃｏｌｌｉｎｓ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９１）。
標準的な技法は、組み換えＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成、組織培養及び形質転換、タンパク質精製などのために使用され得る。酵素反応及び精製技法は、製造者の仕様書に従って、または当該技術分野において一般的に行われるようにもしくは本明細書において記載されるように、遂行され得る。以下の手順及び技法は、概して、当技術分野において周知の従来の方法に従って、ならびに本明細書を通して引用され論じられる様々な一般的な参照文献及びより具体的な参照文献中で記載されるように、遂行され得る。例えばＳａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕｅｌ，３．ｓｕｐ．ｒｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（それは、任意の目的のために参照することによって本明細書に援用される）を参照されたい。具体的な定義が提供されない限り、本明細書において記載される分析化学、有機化学、ならびに医用化学及び医薬品化学に関連して使用される命名法、ならびにそれらの実験室での手順及び技法は、当技術分野において周知であり一般に使用されるものである。標準的な技法は、化学合成、化学分析、医薬品調製、製剤化、及び送達、ならびに患者の治療のために使用され得る。
本出願は、ウイルスベクター送達系により形質導入された対象において、標的環境（例えば細胞、細胞の集団、組織、器官、またはその組み合わせ）へ遺伝子を送達することが可能なウイルスベクター送達系を提供する。例えば、ウイルスベクター送達系は、対象の大動脈、内皮、心筋、骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、ならびに筋肉衛星細胞への遺伝子の送達に使用され得る。ある特定の態様において、ウイルスベクター送達系は、対象の脳、心臓、肝臓、及び／または筋肉（例えば腹横筋または大腿四頭筋）への遺伝子の送達に使用され得る。対象における標的環境（例えば脳、心臓、肝臓、筋肉、またはその組み合わせ）へウイルスベクターを向けることが可能なペプチド、ペプチドを含むウイルスベクターカプシドタンパク質、ペプチドを含むカプシドタンパク質を有するウイルスベクターを含む組成物（例えば医薬組成物）、及びペプチド及びウイルスベクターのカプシドタンパク質をコードする核酸配列も、本明細書において開示される。加えて、ウイルスベクターを作製及び使用する方法を開示する。いくつかの実施形態において、ウイルスベクターは、１つまたは複数の疾患及び障害（例えば加齢に関連する疾患及び障害）の予防及び／または治療に使用される。
ベクター送達系（例えばウイルスベクター送達系）が、本明細書において開示される。ウイルスベクター送達系は、単一遺伝子を送達するための１つまたは複数のウイルス血清型を含み得、ある特定の態様において、単一遺伝子を送達するための２つ以上のウイルス血清型を含み得る。ウイルスベクター送達系は、単一導入遺伝子を対象へ送達するために無限の数のウイルス血清型を含み得る。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、少なくとも１、２、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または１００のウイルス血清型を含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０のウイルス血清型を含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、１～１０、２～８、５～１０、または５～８のウイルス血清型を含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、１つのウイルス血清型を含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、２つのウイルス血清型を含む。いくつかの実施形態において、第１のウイルス血清型は、第１の標的組織へ遺伝子を送達する。第２のウイルス血清型は、第１の標的組織へ及び／または第２の標的組織へ同じ遺伝子を送達する。いくつかの態様において、第３、第４、第５、第６、第７、第８、第９、及び／または第１０のウイルス血清型は、１つまたは複数の組織へ遺伝子を送達する。いくつかの実施形態において、ウイルス血清型は、同時に、近接して、または逐次的に投与される。
本明細書において記載されるウイルスベクター送達系における使用に好適なウイルスとしては、例えばアデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レトロウイルス（例えばレンチウイルス）、ワクシニアウイルス及び他のポックスウイルス、ヘルペスウイルス（例えば単純ヘルペスウイルス）、ならびに他のものが挙げられる。ウイルスは、宿主細胞の中へ導入された場合に、感染性ウイルスの産生のために十分なウイルス遺伝子情報を含有していても含有していなくてもよく、すなわち、ウイルスベクターは複製可能または複製欠損性であり得る。
いくつかの実施形態において、ウイルスはアデノ随伴ウイルスである。アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、小さな（２０ｎｍ）複製欠損性の非エンベロープウイルスである。ＡＡＶゲノムは、約４．７キロベース長の一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）である。ゲノムは、ＤＮＡ鎖の両末端で逆方向末端反復（ＩＴＲ）、ならびに２つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）：ｒｅｐ及びｃａｐを含む。ＡＡＶゲノムは、１９番染色体上の特定の部位の中へ最も頻繁に組み込まれる。ゲノムの中へのランダム取り込みは、ごくわずかな頻度で起こる。組み込み能力は、ベクターから少なくともｒｅｐ ＯＲＦの一部分を除去することによって取り除かれ、エピソームのままで、少なくとも非分裂細胞において持続発現を提供するベクターをもたらし得る。ＡＡＶを遺伝子導入ベクターとして使用するために、所望されるタンパク質またはＲＮＡをコードする（例えばプロモーターへ作動可能に連結されたポリペプチドまたはＲＮＡをコードする）核酸配列を含む核酸は、ＡＡＶゲノムの逆方向末端反復（ＩＴＲ）の間に挿入される。アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、及び例えば遺伝子療法のためのベクターとしての使用は、Ｓｎｙｄｅｒ，ＲＯ ａｎｄ Ｍｏｕｌｌｉｅｒ，Ｐ．，Ａｄｅｎｏ－Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｖｉｒｕｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．８０７．Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，２０１１中でも考察される。
いくつかの実施形態において、ウイルスは、ＡＡＶ血清型１、２、３、３Ｂ、４、５、６、７、８、９、１０、１１、Ａｎｃ８０、またはＰＨＰ．ｅＢである（米国特許出願第２０１７／０１６６９２６号中で開示され、参照することによって本明細書に援用される）。任意のＡＡＶ血清型または修飾されたＡＡＶ血清型が適宜使用され得、限定されない。
別の好適なＡＡＶは、例えばＡｎｃ８０（すなわちＡｎｃ８０Ｌ６５）（国際公開第２０１５０５４６５３）またはｒｈｌＯ（国際公開第２００３／０４２３９７号）であり得る。さらに他のＡＡＶ供給源としては、例えばＰＨＰ．Ｂ、ＰＨＰ．Ｓ、ｈｕ３７（例えば米国特許出願第７，９０６，１１１号；米国特許出願第２０１１／０２３６３５３号を参照）、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ６．２、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８（米国特許出願第７，７９０，４４９号；米国特許出願第７，２８２，１９９号）、ＡＡＶ９（米国特許出願第７，９０６，１１１号；米国特許出願第２０１１／０２３６３５３号）、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ／８、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ１０、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ２２、ＡＡＶＭＹＯ、及び他のものが挙げられ得る。これら及び他の好適なＡＡＶの配列、そしてＡＡＶベクターを生成する方法については、例えば国際公開第２００３／０４２３９７号；国際公開第２００５／０３３３２１号、国際公開第２００６／１１０６８９号；米国特許出願第７，７９０，４４９号；米国特許出願第７，２８２，１９９号；米国特許出願第７，５８８，７７２号を参照されたい。ＡＡＶの他の例としては、表１中でリストされるものが挙げられる。さらに他のＡＡＶは、選択されたＡＡＶカプシドの組織優先性を任意選択で考慮に入れて選択され得る。ある特定の実施形態において、ウイルスベクター送達系は、ウイルス血清型ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢを含む。
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組み換えＡＡＶベクター（ＡＡＶウィルス粒子）は、ＡＡＶカプシド内にパッケージングされた、５’ＡＡＶ ＩＴＲ、本明細書において記載される発現カセット、及び３’ＡＡＶ ＩＴＲを含有する核酸分子を含み得る。本明細書において記載される時、発現カセットは各々の発現カセット内のオープンリーディングフレーム（複数可）のための調節エレメントを含有し、核酸分子は任意選択で追加の調節エレメントを含有し得る。
ＡＡＶベクターは、全長ＡＡＶ ５’逆方向末端反復（ＩＴＲ）及び全長３’ＩＴＲを含有し得る。ＡＩＴＲと称される５’ＩＴＲの短縮バージョンは記載され、それはＤ－配列及び末端分離部位（ｔｒｓ）が欠失される。「ｓｃ」という略語は、自己相補的であることを指す。「自己相補的ＡＡＶ」は、組み換えＡＡＶ核酸配列によって保有されるコード領域が、分子内二本鎖ＤＮＡ鋳型を形成するようにデザインされたコンストラクトを指す。感染に際して、第２鎖の細胞媒介性合成を待機するのではなく、ｓｃＡＡＶの２つの相補的な半分は会合して、即時の複製及び転写についての準備ができている１つの二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）単位を形成するだろう。例えばＤ Ｍ ＭｃＣａｒｔｙ ｅｔ ａｌ，“Ｓｅｌｆ－ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ａｄｅｎｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｖｉｒｕｓ（ｓｃＡＡＶ）ｖｅｃｔｏｒｓ ｐｒｏｍｏｔｅ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙ ｏｆ ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ，（Ａｕｇｕｓｔ ２００１），Ｖｏｌ ８，Ｎｕｍｂｅｒ １６，Ｐａｇｅｓ １２４８－１２５４を参照されたい。自己相補的ＡＡＶは、例えば米国特許出願第６，５９６，５３５号；同第７，１２５，７１７号；及び同７，４５６，６８３号（その各々は、参照することによってその全体が本明細書に援用される）中で記載される。
シュードタイプＡＡＶが産生される場合、ＩＴＲは、カプシドのＡＡＶ供給源とは異なる供給源から選択される。例えば、ＡＡＶ２ ＩＴＲは、選択された細胞受容体、標的組織、またはウイルス標的についての特定の効率を有するＡＡＶカプシドと共に使用するために選択され得る。一実施形態において、ＡＡＶ２からのＩＴＲ配列、またはその欠失バージョン（ＡＩＴＲ）は、便宜上、そして規制認可を加速するために使用される。しかしながら、他のＡＡＶ供給源からのＩＴＲが選択されてもよい。ＩＴＲの供給源がＡＡＶ２からであり、ＡＡＶカプシドが別のＡＡＶ供給源からである場合、もたらされたベクターはシュードタイプであると称され得る。しかしながら、ＡＡＶ ＩＴＲの他の供給源が利用されてもよい。
対象への送達に好適なＡＡＶウイルスベクターを生成及び単離する方法は、当技術分野において公知である。例えば米国特許出願第７７９０４４９号；米国特許７２８２１９９；国際公開第２００３／０４２３９７号；国際公開第２００５／０３３３２１号、国際公開第２００６／１１０６８９号；及び米国特許第７５８８７７２Ｂ２号を参照されたい。１つの系において、産生細胞株は、ＩＴＲが隣接する導入遺伝子をコードするコンストラクト、ならびにｒｅｐ及びｃａｐをコードするコンストラクト（複数可）により一過性にトランスフェクションされる。第２の系において、安定的にｒｅｐ及びｃａｐを供給するパッケージング細胞株は、ＩＴＲが隣接する導入遺伝子をコードするコンストラクトにより（一過性にまたは安定的に）トランスフェクションされる。これらの系の各々において、ＡＡＶビリオンは、ヘルパーアデノウイルスまたはヘルペスウイルスによる感染に応答して産生され、ｒＡＡＶを混入ウイルスから分離することが要求される。より最近では、ＡＡＶを回収するためにヘルパーウイルスによる感染を要求しない系が開発されており、要求されるヘルパー機能（すなわちアデノウイルスＥｌ、Ｅ２ａ、ＶＡ、Ｅ４、ヘルペスウイルスＵＬ５、ＵＬ８、ＵＬ５２、ＵＬ２９、及びヘルペスウイルスポリメラーゼ）は、系によってもトランスで供給される。これらのより新しい系において、要求されるヘルパー機能をコードするコンストラクトにより細胞を一過性にトランスフェクションすることによってヘルパー機能は供給され得るか、または細胞はヘルパー機能をコードする遺伝子を安定的に含有するように操作され得、その発現は転写時にまたは転写後のレベルで制御され得る。さらに別の系において、ＩＴＲが隣接する導入遺伝子及びｒｅｐ／ｃａｐ遺伝子は、バキュロウイルスベースのベクターによる感染によって昆虫細胞の中へ導入される。これらの産生系の総説については、一般的には例えばＺｈａｎｇ ｅｔ ａｌ，２００９，“Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ－ ａｄｅｎｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｖｉｒｕｓ ｈｙｂｒｉｄ ｆｏｒ ｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ａｄｅｎｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｖｉｒｕｓ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２０：９２２－９２９（その各々の内容は、参照することによってその全体が本明細書に援用される）を参照されたい。これら及び他のＡＡＶ産生系を作製及び使用する方法は、以下の米国特許（それらの内容は、参照することによってその全体が本明細書に援用される）：米国特許出願第５，１３９，９４１号；同第５，７４１，６８３号；同第６，０５７，１５２号；同第６，２０４，０５９号；同第６，２６８，２１３号；同第６，４９１，９０７号；同第６，６６０，５１４号；同第６，９５１，７５３号；同第７，０９４，６０４号；同第７，１７２，８９３号；同第７，２０１，８９８号；同第７，２２９，８２３号；及び同第７，４３９，０６５号中でも記載される。
別の実施形態において、他のウイルスベクターは使用され得、組み込み型ウイルス（例えばヘルペスウイルスまたはレンチウイルス）が挙げられるが、他のウイルスは選択され得る。好適には、これらの他のベクターのうちの１つが生成される場合、それは複製欠損ウイルスベクターとして産生される。「複製欠損ウイルス」または「ウイルスベクター」は、関心のある遺伝子を含有する発現カセットがウイルスカプシドまたはエンベロープ中にパッケージングされた合成または人工のウイルス粒子を指し、ウイルスカプシドまたはエンベロープ内にさらにパッケージングされた任意のウイルスゲノム配列は、複製欠損性であり；すなわち、それらは子孫ビリオンを生成し得ないが、標的細胞を感染させる能力を保持し得る。一実施形態において、ウイルスベクターのゲノムは、複製に要求される酵素をコードする遺伝子を含まない（ゲノムは、人工ゲノムの増幅及びパッケージングのために要求されるシグナルが隣接する関心のある導入遺伝子のみを含有する「ガットレス」であるように操作され得る）が、これらの遺伝子は産生の間に供給され得る。
１つまたは複数のウイルスは、哺乳動物細胞における発現を指令することが可能なプロモーター（哺乳動物細胞に感染する例えばサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、レトロウイルス、シミアンウイルス（例えばＳＶ４０）、パピローマウイルス、ヘルペスウイルス、もしくは他のウイルスからの好適なウイルスプロモーター、または例えばＥＦ１ａｌｐｈａ、ユビキチン（例えばユビキチンＢまたはＣ）、グロビン、アクチン、ホスホグリセレートキナーゼ（ＰＧＫ）など等の遺伝子からの哺乳動物プロモーター、またはＣＡＧプロモーター（ＣＭＶ早期エンハンサーエレメント及びニワトリβアクチンプロモーターの組み合わせ）等の複合プロモーター等）を含有し得る。いくつかの実施形態において、ヒトプロモーターが使用され得る。いくつかの実施形態において、プロモーターは、特定の細胞タイプ（例えば標的とされる細胞の集団）における発現を指令する。いくつかの実施形態において、プロモーターは、本明細書において記載される任意の細胞の集団における発現を選択的に指令する。いくつかの実施形態において、プロモーターは、非サイレンシングプロモーターである。いくつかの実施形態において、プロモーターは、ニワトリβ－アクチンハイブリッド（Ｃｂｈ）、ＣＡＧ、ＣＢ７、及びＣＢＡからなる群から選択される。ある特定の実施形態において、非サイレンシングプロモーターは、Ｃｂｈである。いくつかの実施形態において、非サイレンシングプロモーターは、細胞にわたって高度で長期的で均一な発現を指令する。例えば、非サイレンシングプロモーター（例えばＣｂｈ）は、ＣＭＶの少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、または７０％で、少なくとも１、２、３、４、５、６、または７か月について継続的な発現を指令し得る。
いくつかの実施形態において、ウイルスベクターは、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）標的部位を含む。いくつかの実施形態において、ｍｉＲＮＡ標的部位は、選択された組織における導入遺伝子の発現を低減またはサイレンシングさせることによって特定の組織を脱標的化するためにベクターの中へ操作されている。例えば、肝臓毒性は、ウイルスベクター内に肝臓特異的ｍｉＲＮＡ１２２標的部位を含むことによって低減され得る。いくつかの実施形態において、ｍｉＲＮＡ標的部位は、発現がサイレンシングまたは低減されるべき特定の組織に基づいて選択される。いくつかの実施形態において、ウイルスベクターは、肝臓特異的ｍｉＲＮＡ（例えばｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－２２３、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、及びｍｉＲＮＡ－１２２）（例えばＷｉｌｌｅｉｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ Ｈｅａｒｔ Ｊ ３７，３２６０－３２６６（２０１６）を参照）、筋肉特異的ｍｉＲＮＡ（例えばｍｉＲＮＡ－１及びｍｉＲＮＡ－１３３）（例えばＸｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．１２０，３０４５－３０５２（２００７）を参照）、心臓特異的ｍｉＲＮＡ（例えばｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、及びｍｉＲＮＡ－４９９）（例えばＸｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．１２０，３０４５－３０５２（２００７）、Ｃｈｉｓｔｉａｋｏｖ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．９４，１０７－１２１（２０１６）を参照）、及び／または脳特異的ｍｉＲＮＡ（例えばｍｉＲＮＡ－１２４及びｍｉＲＮＡ－１２８）（例えばＣａｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．２１，５３１－５３６（２００７）；Ａｄｌａｋｈａ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ １３，３３（２０１４）を参照）を含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクターは、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－２４及びｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１２４、ｍｉＲＮＡ－１２８、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、ｍｉＲＮＡ －２２３、及びｍｉＲＮＡ－４９９の群から選択されるｍｉＲＮＡ標的部位を含む。ｍｉＲＮＡ標的部位の追加の例は、ｍｉｒｂａｓｅ．ｏｒｇで利用可能である。Ｋｏｚｏｍａｒａ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ ２０１９ ４７：Ｄ１５５－Ｄ１６２を参照されたい。いくつかの実施形態において、ｍｉＲＮＡ標的部位は、特異性（例えば特異的組織において他の組織よりも少なくとも１０倍高く発現する）、及び／または高度に（例えば標的組織においてすべてのｍｉＲＮＡの平均レベルよりも少なくとも５倍高いレベルで存在する）発現されるｍｉＲＮＡである。例えば、ｍｉＲＮＡは、ＦＡＮＴＯＭ（Ｄｅ Ｒｉｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３５，８７２－８７８（２０１７）を参照）または当業者に公知の他のデータベースを使用して同定され得る。
いくつかの実施形態において、ウイルスベクターは、自己相補的（ｓｅｌｆ ｃｏｍｐ）ベクター骨格を含む。例えば、ウイルスベクターは、コドン最適化遺伝子コーディング配列を含み得る。いくつかの態様において、自己相補的骨格を含むウイルスベクターは、発現の増加（例えば少なくとも２倍、５倍、１０倍、１５倍高い発現）を示す。
いくつかの実施形態において、遺伝子は、組織へ送達される任意の遺伝子である。いくつかの実施形態において、遺伝子は、単一遺伝子の疾患または障害と関連する。いくつかの実施形態において、遺伝子は、加齢関連遺伝子または老化保護遺伝子である。例えば、遺伝子は、表２中でリストされた任意の遺伝子であり得る。いくつかの実施形態において、遺伝子は、神経学的障害、腫瘍学的障害、網膜障害、筋骨格障害、血液学的障害／血液障害、感染性疾患、免疫障害などと関連する。遺伝子は、ｏｍｉｍ．ｏｒｇで利用可能なＯＭＩＭデータベースを利用して同定され得る。いくつかの実施形態において、遺伝子は、Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮからなる群から選択される。
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いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、Ｃｉｓｄ２遺伝子を対象へ送達するためにＡＡＶ９血清型及び／またはＰＨＰ．ｅＢ血清型を含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、ｍｉＲＮＡ標的部位（例えばｍｉＲＮＡ－１２２標的部位）を含む。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、非サイレンシングプロモーター（例えばＣｂｈ）を含み、任意選択で自己相補的骨格をさらに含む。
ウイルスベクター送達系は、標的組織において（例えば除脂肪、除血液体重のうちの少なくとも７０％において）、野生型レベルの少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、または７５％までのネイティブな遺伝子の過剰発現をもたらし得る。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、標的組織において、野生型レベルの少なくとも１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、６００％、７００％、８００％、９００％、１０００％、１５００％、２０００％、２５００％、５０００％、７５００％、１００００％、５００００％、１０００００％までのネイティブな遺伝子の過剰発現をもたらし得る。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、組織において、野生型レベルの約１０％～９０％、２０％～８０％、３０％～７０％、または４０％～６０％までのネイティブな遺伝子の過剰発現をもたらすネイティブな遺伝子を送達する。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、野生型レベルの少なくとも３０％、または約２～５０％までのネイティブな遺伝子の過剰発現をもたらす。ウイルスベクター送達系は、標的組織において（例えば除脂肪、除血液体重のうちの少なくとも７０％において）、非ネイティブな遺伝子の検出可能な発現（例えば極微量発現を超える）をもたらし得る。いくつかの実施形態において、送達された遺伝子の発現は安定的で長期的である（例えば発現は、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１５か月、１８か月、２１か月、２４か月、３年、４年、５年、１０年、１５年、２０年、３０年、４０年、５０年、６０年、７０年、８０年、９０年間維持される）。
いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、関心のある遺伝子を、関心のある組織（例えば大動脈、内皮、心筋、骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、及び／または筋肉衛星細胞）へ送達する。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、関心のある遺伝子を、対象における関心のある複数の組織へ送達する。例えば、ウイルスベクター送達系は、関心のある遺伝子を、対象における組織のうちの少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％または６０％、７０％、８０％、または９０％へ送達し得る。いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、遺伝子を、対象における組織のうちの約１０％～９０％、２０％～８０％、３０％～７０％、または４０％～６０％へ送達する。ウイルスベクター送達系は、対象内の複数の組織にわたって、遺伝子の均一または限定された変動の送達を提供し得る。
本発明のいくつかの実施形態は、有効量の本明細書において記載されるウイルスベクター送達系を含む医薬組成物の送達によって疾患または病態（加齢関連の疾患または障害等）の治療または予防の方法に関する。医薬組成物の有効量は、組成物が投与される対象における疾患または障害を、予防、遅延、阻害、または寛解するのに十分な量である。いくつかの実施形態において、有効量の本明細書において記載されるウイルスベクター送達系を含む医薬組成物の送達は、対象の平均余命または寿命を延長する。
いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、対象へ投与される。ウイルスベクター送達系は、遺伝子を、対象へ（例えば対象の１つまたは複数の組織へ）送達し得る。いくつかの実施形態において、対象が家族歴または遺伝子解析に基づいて疾患または障害を患うことが期待されるが、対象は現在疾患または障害を患っていない。いくつかの実施形態において、対象は、疾患または障害を患っている。いくつかの実施形態において、対象は、有効量の活性のあるＣｉｓｄ２を欠如する。例えば、Ｃｉｓｄ２遺伝子は、対象において突然変異され得るかまたはそうでなければ不活性され得る。遺伝子は、対象における疾患または障害を治療または寛解するために、ウイルスベクター送達系を使用して送達され得る。
本明細書において使用される時、「対象」は、ヒトまたは動物を意味する。通常、動物は、脊椎動物（霊長動物、齧歯動物、飼育動物、または競技動物等）である。霊長動物としては、チンパンジー、カニクイザル、クモザル、及びマカク（例えばアカゲザル）が挙げられる。齧歯動物としては、マウス、ラット、ヤマネズミ、フェレット、ウサギ、及びハムスターが挙げられる。飼育動物及びゲーム動物としては、ウシ、ウマ、ブタ、シカ、バイソン、バッファロー、ネコ科の種（例えばイエネコ）、イヌ科の種（例えばイヌ、キツネ、オオカミ）、トリの種（例えばニワトリ、エミュー、ダチョウ）、及び魚類（例えばマス、ナマズ、及びサケ）が挙げられる。患者または対象としては、上記のもののうちの任意のサブセット（例えば上記のもののすべてであるが、１つまたは複数の群または種（ヒト、霊長動物、または齧歯動物等）を除外する）が挙げられる。ある特定の実施形態において、対象は、哺乳動物（例えば霊長動物、例えばヒト）である。「患者」、「個体」、及び「対象」という用語は、本明細書において互換的に使用される。好ましくは、対象は哺乳動物である。哺乳動物は、ヒト、非ヒト霊長動物、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマ、またはウシであり得るが、これらの例に限定されない。加えて、本明細書において記載される方法は、飼育動物及び／またはペットを治療するために使用され得る。対象は、オスまたはメスであり得る。対象は、治療を必要とする病態またはかかる病態に関連する１つもしくは複数の合併症を患うかまたは有すると以前に診断されたかまたは同定されたものであり得、任意選択あるが、病態または病態に関連する１つもしくは複数の合併症のための治療を既に受けている必要はない。代替的に、対象は、治療を必要とする病態またはかかる病態に関連する１つもしくは複数の合併症を有していると以前に診断されていないものでもあり得る。むしろ、対象としては、病態または病態へ関連する１つもしくは複数の合併症についての１つまたは複数のリスク因子を示すものが挙げられ得る。特定の病態のための治療を「必要とする対象」は、その病態を有するか、その条件を有すると診断されたか、または与えられた参照集団に比べてその病態を発症するリスクが増加した対象であり得る。
本明細書において使用される時、「治療する」、「治療」、「治療すること」、または「寛解」は、疾患、障害、または医学的病態を参照して使用される場合に、病態についての治療処置を指し、目的は、症状または病態の進行または重症度を、予防、好転、軽減、寛解、阻害、遅延、または停止することである。「治療すること」という用語は、病態の少なくとも１つの有害作用または症状を低減または軽減することを包含する。１つまたは複数の症状または臨床マーカーが低減したならば、治療は一般的に「有効」である。代替的に、病態の進行が低減または停止されるならば、治療は「有効」である。すなわち、「治療」は、症状またはマーカーの改善だけでなく、また治療の非存在下において期待される症状の中断または少なくとも進行もしくは悪化の遅延も包含する。有益なまたは所望される臨床結果としては、治療の非存在において期待されるものに比較して、１つまたは複数の症状（複数可）の軽減、欠陥の程度の縮小、安定化された（すなわち悪化しない）状態が挙げられるがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系は、免疫学的目的のために（例えばワクチン接種または耐性誘導のために）投与される。
障害または疾患についての所与の治療の有効性は、熟練した臨床医によって決定され得る。しかしながら、治療は、当該用語が本明細書において使用される時、本明細書において記載される薬剤または組成物による治療に続いて、障害の徴候または症状のうちの任意の１つまたはすべてが有益な様式で変更されるか、他の臨床的に許容される症状が例えば少なくとも１０％改善または寛解されるならば、「有効な治療」であると判断される。有効性は、個体の入院によって査定されるように悪化しないこと、または医療介入を必要としない（すなわち、疾患の進行は停止する）ことによっても測定され得る。これらの指標を測定する方法は、当業者に公知である、及び／または本明細書において記載される。
本発明の方法によれば、治療は、１つまたは複数の組織を本発明に記載の組成物と接触させることを含む。投与経路は変動し、例えば皮内、経皮、非経口、静脈内、筋肉内、鼻腔内、皮下、局所的、経皮、気管内、腹腔内、動脈内、膀胱内、眼内、腫瘍内、吸入、灌流、洗浄、及び経口的な投与及び製剤が挙げられるだろう。治療レジメンは同様に変動し、多くの場合、疾患タイプ、疾患所在位置、疾患進行、及び患者の健康及び年齢に依存し得る。
治療は、所定の量の治療組成物を含有しているとして定義された様々な「単位用量」を包含し得る。投与される量、ならびに特定の経路及び製剤は、臨床技術分野の当業者の技能内である。単位用量を単回注射として投与する必要がないが、規定された期間にわたる連続注入を含み得る。薬剤のための投薬量範囲は効力に依存し、所望される効果を産生するのに十分多い量である。投薬量は、許容できない有害な副作用を引き起こすほど多くするべきでない。
障害または疾患についての所与の治療の有効性は、熟練した臨床医によって決定され得る。しかしながら、治療は、当該用語が本明細書において使用される時、本明細書において記載される薬剤または組成物による治療に続いて、障害の徴候または症状のうちの任意の１つまたはすべてが有益な様式で変更されるか、他の臨床的に許容される症状が例えば少なくとも１０％改善または寛解されるならば、「有効な治療」であると判断される。有効性は、個体の入院によって査定されるように悪化しないこと、または医療介入を必要としない（すなわち、疾患の進行は停止する）ことによっても測定され得る。これらの指標を測定する方法は、当業者に公知である、及び／または本明細書において記載される。
本明細書において開示される医薬組成物は、米国特許出願第５，５４３，１５８号；同第５，６４１，５１５号、及び同第５，３９９，３６３号中で記載されるように、腫瘍内、非経口的、静脈内、皮内、筋肉内、経皮的、または腹腔内でさえ投与され得る。
ウイルスベクター送達系の注射は、発現コンストラクトが注射のために要求される針の特定のゲージを介して通過することができ、投薬量が要求されるレベルの精度により投与され得る限り、シリンジまたは溶液の注射のために使用される他の方法によって送達され得る。
水溶液中の非経口投与のために、例えば溶液は必要であるならば好適に緩衝され、液体希釈物質は最初に十分な食塩水またはグルコースにより等張にされるべきである。これらの特定の水溶液は、静脈内、筋肉内、皮下、腫瘍内、及び腹腔内の投与に特に好適である。これに関連して、用いられ得る滅菌済み水性溶媒は、本開示に照らして当業者に公知であろう。例えば、１つの投薬量は１ｍｌのＮａＣｌ等張溶液中で溶解され、１０００ｍｌの皮下注入液へ添加されるか、または点滴の提案された部位で注射されるかのいずれかである（例えば“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”第１５版、ページ１０３５－１０３８及び１５７０－１５８０を参照）。投薬量のいくらかの変動が、治療されている対象の病態に依存して必然的に起こるだろう。投与のための担当者は、どんな場合も、個別の対象のために適切な用量を決定するだろう。さらにヒト投与のために、調製物は、ＦＤＡ Ｏｆｆｉｃｅ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ基準によって要求される、滅菌性、発熱性、一般的な安全性、及び純度基準を満たすべきである。
「薬学的に許容される」または「薬理学的に許容される」という語句は、対象へ投与された場合に、アレルギー性反応または類似する有害反応を産生しない分子的実体及び組成物を指す。本明細書において使用される時、「担体」としては、任意の及びすべての溶媒、分散媒質、ビヒクル、コーティング、希釈物質、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤、バッファー、担体溶液、懸濁物、コロイド、ならびに同種のものが挙げられる。薬学的に活性のある物質のためのかかる媒質及び薬剤の使用は、当技術分野において周知である。任意の従来の媒質または薬剤がウイルス剤と適合性がない場合を除いて、治療組成物中での使用が企図される。補足の活性成分も組成物の中へ取り込まれ得る。
いくつかの実施形態において、方法は、本明細書において記載される医薬組成物を、有益な１つまたは複数の追加の薬剤、生物製剤、薬物、または治療と共に、障害または疾患を患う対象へ投与することをさらに含む。
いくつかの実施形態において、ウイルスベクター送達系、またはウイルスベクター送達系を含む医薬組成物は、疾患または病態を治療するために対象へ投与される。疾患または病態は、加齢関連の疾患または病態であり得る。いくつかの実施形態において、疾患または病態は、早老症候群（例えばハッチンソン・ギルフォード早老症候群（ＨＧＰＳ）、ウォルフラム症候群（例えばＩまたはＩＩ型ウォルフラム症候群）、ウェルナー症候群、コケイン症候群、１型筋緊張性ジストロフィー、ＭＤＰＬ症候群、先天性角化異常症障害など）、結合組織異常（例えばマルファン症候群、ロイス・ディーツ症候群、エーラス・ダンロス症候群、骨形成不全症など）、代謝障害（例えばメチルマロン酸血、ウィルソン病など）、腫瘍抑制因子及びＤＮＡ複製の欠損障害（例えばＰＴＥＮ病（カウデン症候群、プロテウス様症候群）、ブルーム症候群、ＲＡＳ病（ヌーナン症候群、コステロ症候群））、神経変性障害（例えばアルツハイマー病、認知症、軽度の認知機能の減退など）、神経血管障害（例えば脳卒中）、骨格筋病態（例えばサルコペニア、フレイル）、カウデン症候群、バナヤン・ライリー・ルバルカバ症候群、プロテウス症候群、プロテウス様症候群、及び他のＰＴＥＮ病、ウェルナー症候群、ブルーム症候群、ロスムンド・トムソン症候群、コケイン症候群、色素性乾皮症、硫黄欠乏性毛髪発育異常症、色素性乾皮症・コケイン症候群の合併型、拘束性皮膚障害、糖尿病、肥満、心血管性疾患、がん、眼の変性、肝不全、ならびに加齢黄斑変性症である。Ｓｃｈｎａｂｅｌ，Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｅｍａｔｕｒｅ ａｇｉｎｇ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ：Ａ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ９９，３－２８（２０２０）；Ｒｉｇｏｌｉ，Ｌ，．ｅｔ ａｌ．，Ｗｏｌｆｒａｍ ｓｙｎｄｒｏｍｅ １ ａｎｄ Ｗｏｌｆｒａｍ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ２．Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｅｄｉａｔｒ．２４，１（２０１２）；Ｋｅａｎｅ，Ｍ．Ｇ．，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｄｉｃａｌ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｒｆａｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ １１７，２８０２－２８１３（２００８）；ＭａｃＣａｒｒｉｃｋ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ｌｏｅｙｓ－Ｄｉｅｔｚ ｓｙｎｄｒｏｍｅ：Ａ ｐｒｉｍｅｒ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｇｅｎｅｔ．Ｍｅｄ．１６，５７６－５８７（２０１４）；Ｍａｏ，Ｊ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｅｈｌｅｒｓ－Ｄａｎｌｏｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ：Ｏｎ ｂｅｙｏｎｄ ｃｏｌｌａｇｅｎｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ １０７，１０６３－１０６９（２００１）；ｖａｎ Ｄｉｊｋ，Ｆ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ Ｉｍｐｅｒｆｅｃｔａ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ ｗｉｔｈ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｘａｍｐｌｅｓ．Ｍｏｌ．Ｓｙｎｄｒｏｍｏｌ．２，１－２０（２０１１）；Ｙｅｈｉａ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．，ＰＴＥＮ－ｏｐａｔｈｉｅｓ：ｆｒｏｍ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｔｏ ｅｖｉｄｅｎｃｅ－ｂａｓｅｄ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１２９，４５２－４６４（２０１９）；Ｃｕｎｎｉｆｆ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｍ’ｓ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ：Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓｐｅｃｔｒｕｍ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｅｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ．Ｍｏｌ．Ｓｙｎｄｒｏｍｏｌ．８，４－２３（２０１７）；及びＲａｕｅｎ，Ｋ．Ａ．Ｔｈｅ ＲＡＳｏｐａｔｈｉｅｓ．Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１４，３５５－３６９（２０１３）を参照されたい。対象は、２つ以上のタイプの組織への遺伝子の投与から利益を得る任意の疾患または病態を患い得る。
いくつかの実施形態において、神経変性障害は、ポリグルタミン伸長障害（例えばＨＤ、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮、ケネディ病（球脊髄性筋萎縮症とも称される）、脊髄小脳性運動失調（例えば１型、２型、３型（マシャド・ジョセフ病とも称される）、６型、７型、及び１７型））、他のトリヌクレオチド反復伸長障害（例えば脆弱Ｘ症候群、脆弱ＸＥ精神遅滞、フリードライヒ運動失調症、筋緊張性ジストロフィー、８型脊髄小脳性運動失調、及び１２型脊髄小脳性運動失調）、アレキサンダー病、アルパー病（Ａｌｐｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、毛細血管拡張性運動失調症、バッテン病（シュピールマイアー・フォークト・シェーグレン・バッテン病をとも称される）、カナバン病、コケイン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルト・ヤコブ病、ギラン・バレー症候群、虚血脳卒中、クラッベ病、クールー、レビー小体型認知症、多発性硬化症、多系統萎縮症、非ハンチントン様型の舞踏病（ｎｏｎ－Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎｉａｎ ｔｙｐｅ ｏｆ Ｃｈｏｒｅａ）、パーキンソン病、ペリツェウス・メルツバッハー病、ピック病、原発性側索硬化、進行性核上性麻痺、レフサム病、サンドホフ病、シルダー病、脊髄損傷、脊髄筋萎縮症（ＳＭＡ）、スティール・リチャードソン・オルゼウスキー病、及び脊髄癆のうちの１つである。
いくつかの実施形態において、神経血管障害は、脳アテローム血栓症、脳動脈瘤、脳動静脈奇形、脳塞栓症、脳虚血（例えばアテローム血栓症、塞栓症、または血行動態的異常によって引き起こされる）、心停止、頸動脈狭窄症、脳血管攣縮、頭痛、頭蓋内出血、虚血性脳卒中、痙攣、脊髄血管奇形、反射性交感性ジストロフィー（ＲＮＤ）、神経血管圧迫障害（片側顔面痙攣等）、響鳴、三叉神経痛、舌咽神経痛、脳卒中、一過性脳虚血発作、及び血管炎からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、骨格筋病態は、萎縮、筋肉消耗または衰弱と関連する骨折、悪液質、除神経、糖尿病、ジストロフィー、運動誘発性骨格筋疲労、疲労、フレイル、炎症性筋炎、メタボリック症候群、神経筋疾患、肥満、外科手術後筋肉衰弱、外傷後筋肉衰弱、サルコペニア、毒素曝露、消耗、及び衰弱からなる群から選択される。
いくつかの実施形態において、ベクター送達系、またはベクター送達系を含む医薬組成物は、対象へ投与される（例えば静脈内に）。ベクター送達系は、突然変異したＣｉｓｄ２と関連する疾患または病態（例えばＩＩ型ウォルフラム症候群、または関連する病態、すなわち視覚の喪失または白内障、糖尿病、聴覚障害、腎不全など）を治療するために、遺伝子（例えばＣｉｓｄ２）を対象へ送達し得る。
本開示の実施形態の記載は、網羅的であるとか、または開示された正確な形態へ本開示を限定するとは意図されない。本開示の具体的な実施形態及び例は、例示の目的のために本明細書において記載されるが、当業者が認識するように、様々な同等の修飾は本開示の範囲内で可能である。例えば、方法の工程または機能は所与の順において提示されているが、代替の実施形態は異なる順序で機能を実行することができるか、または機能を実質的に同時に実行することができる。本明細書において提供される本開示の教示は、他の手順または方法へ適宜適用され得る。本明細書において記載される様々な実施形態を組み合わせて、さらなる実施形態が提供され得る。本開示の態様は、上記の参照文献及び出願の組成物、機能、及び概念を用いるために、必要であるならば修飾されて、本開示のなおさらなる実施形態を提供することができる。これら及び他の変化は、発明を実施するための形態に照らして本開示へ行われ得る。
前述の実施形態の任意の具体的な要素は、組み合わせられ得るか、または他の実施形態における要素を置換し得る。さらに、本開示のある特定の実施形態と関連する利点が、これらの実施形態の文脈中で記載されているが、他の実施形態もかかる利点を示してもよく、すべての実施形態は必ずしも本開示の範囲以内に入るように、かかる利点を示す必要があるとは限らない。
すべての特許及び同定された他の出版物は、例えば本発明と関連して使用され得るかかる出版物中で記載される方法論を記載及び開示する目的のために参照することによって、明示的に本明細書に援用される。これらの出版物は、本出願の出願日の前のそれらの開示のためのみに提供される。この点に関して、本発明者らが、先行発明もしくは先行出版物のおかげでまたは他の理由で、かかる開示に先行する権利がないことの承認として解釈されるべきではない。これらの文書の日付についてのすべての記述または内容についての描写は、本出願人に利用可能な情報に基づいているが、これらの文書の日付または内容の正確さについての承認を構成しない。
当業者は、本発明が、目的を実行し、言及された結果及び利点、そして本発明に固有のものを得るために良く適合することを容易に認識する。本明細書における記載の詳細及び実施例は、ある特定の実施形態を代表し、例示的であり、本発明の範囲に対する限定として意図されない。本明細書における修飾及び他の使用は、当業者に思い浮かぶだろう。これらの修飾は、本発明の趣旨内に網羅される。本発明の範囲及び趣旨から逸脱せずに、本明細書において開示される本発明へ変動する置換及び修飾が行われ得ることは、当業者に容易に明らかであろう。
「ａ」及び「ａｎ」という冠詞は、本明細書において使用される時、明細書及び特許請求の範囲中で、相反することが明確に指摘されない限り、複数の指示物を包含するように理解されるべきである。群の１つまたは複数のメンバーの間に「または」を含む請求項または記載は、相反することが指摘されない限り、またはそうでなければ文脈から明白ではない限り、群のメンバーのうちの１つ、１つを超える、またはすべてが、所与の産物またはプロセスにおいて存在するか、用いられるか、またはさもなければ関連しているならば、満たされていると判断される。本発明は、群の正確に１つのメンバーが、所与の産物またはプロセスにおいて存在するか、用いられるか、またはさもなければ関連している実施形態を包含する。本発明は、群の１つを超える、またはすべてのメンバーが、所与の産物またはプロセスにおいて存在するか、用いられるか、またはさもなければ関連している実施形態も包含する。さらに、本発明は、すべての変動、組み合わせ、及び順列を提供することを理解すべきであり、ここで、リストされた請求項のうちの１つまたは複数からの１つまたは複数の限定、要素、条項、記述用語などは、別段指摘されない限り、または矛盾もしくは不一致が生じるであろうことが当業者に明白でない限り、同じ基本請求項（または関連すれば、任意の他の請求項）に依存して、別の請求項の中へ導入される。本明細書において記載されるすべての実施形態は、適切な場合、本発明のすべての異なる態様へ適用可能であることが企図される。実施形態または態様のうちの任意のものは、適切な場合は常に、１つまたは複数の他のかかる実施形態または態様と自由に組み合わせられ得ることも企図される。要素が、例えばマーカッシュ群または類似のフォーマットでリストとして提示される場合、要素の各々の亜群も開示され、任意の要素（複数可）は群から除去され得ることが理解されるべきである。概して、本発明、または本発明の態様が、特定の要素、特色などを含むとして言及される場合、本発明のある特定の実施形態または本発明の態様は、かかる要素、特色などからなるか、または本質的になることが理解されるべきである。単純性の目的のために、これらの実施形態は、すべての事例において、本明細書において非常に多くの言葉で具体的には説明されてこなかった。特定の除外が明細書において列挙されるかどうかにかかわらず、本発明の任意の実施形態または態様は、特許請求の範囲から明示的に除外され得ることも理解されるべきである。例えば、任意の１つまたは複数の活性剤、添加物、成分、任意選択の薬剤、生物体のタイプ、障害、対象、またはそれらの組み合わせが除外され得る。
請求項または記載が物質の組成物に関する場合、別段指摘されない限り、または矛盾もしくは不一致が生じるであろうことが当業者に明白でない限り、本明細書において開示される方法のうちの任意のものに従って主題の組成物を作製または使用する方法、及び本明細書において開示される目的のうちの任意のもののために主題の組成物を使用する方法は、本発明の態様であることが理解されるべきである。請求項または記載が方法に関する場合、別段指摘されない限り、または矛盾もしくは不一致が生じるであろうことが当業者に明白でない限り、例えば方法の遂行のために有用な組成物を作製する方法、及び方法に従って産生された産物は、本発明の態様であることが理解されるべきである。
範囲が本明細書において与えられる場合、本発明は、エンドポイントが含まれる実施形態、両方のエンドポイントが除外される実施形態、及び１つのエンドポイントが含まれ、他のエンドポイントが除外される実施形態を包含する。別段指摘されない限り、両方のエンドポイントが含まれていることが想定されるべきである。さらに、別段指摘されない限り、またはそうでなければ文脈及び当業者の理解から明白でない限り、範囲として表現される値は、別段文脈が明確に定めない限り、範囲の下限の単位の１０分の１まで、本発明の異なる実施形態において述べられた範囲内の任意の特定の値または部分範囲をとり得ることが理解されるべきである。１シリーズの数値が本明細書において述べられる場合、本発明は、任意の間に入る値、または当該シリーズ中の任意の２つの値によって定義された範囲に相似して関連する実施形態を含み、最小値は最小と見なされ得、最大値は最大として見なされ得ることも理解される。数値は、本明細書において使用される時、パーセンテージとして表現される値を含む。数値が「約」または「およそ」によって前置きされる本発明の任意の実施形態について、本発明は、正確な値が列挙される実施形態を包含する。数値が「約」または「およそ」によって前置きされない本発明の任意の実施形態について、本発明は、値が「約」または「およそ」によって前置きされる実施形態を包含する。
「およそ」または「約」は、概して、別段述べられない限り、またはそうでなければ文脈から明白でない限り（かかる数が、可能な値の１００％を許容されないほど越える場合を除いて）、いずれかの方向（その数を超えるかまたはそれ未満）において、１％の範囲内、またはいくつかの実施形態において、数の５％の範囲内、またはいくつかの実施形態において、数の１０％の範囲内に入る数を包含する。相反することが明確に指摘されない限り、２つ以上の行為を含む本明細書において請求される任意の方法において、方法の行為の順序は、必ずしも方法の行為が列挙される順序へ限定されないが、本発明は、順序がそのように限定された実施形態を包含することが理解されるべきである。別段指摘されない限り、または文脈から明白でない限り、本明細書において記載される任意の産物または組成物は、「単離された」と判断され得ることも理解されるべきである。
実施例１：加齢は、今日最も厄介な疾患における単一の最大の因子である。現在のヘルスケアシステムの主な関心事は、糖尿病、肥満、心血管性疾患、がん、フレイル、加齢黄斑変性症、及び神経変性疾患である。それらのすべては、共通且つ最大のリスク因子として高齢を共有する［１］。現在医学における支配的なパラダイムは、これらの疾患が現われた後に個別に治療し、複数の治療形式を介して症状を管理し続けることである。しかしながら、ほとんどの加齢した患者は決して回復せず、その代りに高齢に伴ってさらなる罹患率を生じ、そのすべては慣性的な治療を要求するので、これは悪化する戦いである。現在平均的な患者は、数十年間複数の慢性疾患について治療されており、多くの場合その患者の医療システムへの生涯の貢献よりもかなり高い費用である［２］。これは持続可能ではない。
加齢の生物学の基礎的研究から、マウスにおいて寿命に影響を及ぼす５０を上回る遺伝子が同定された［３］。これらの知見に基づいて、保存された加齢経路（例えばタンパク質恒常性、オートファジー、インスリン－ＩＧＦシグナリング、ミトコンドリア代謝、及び他の経路）を、全身性レベルで標的化する、新しいクラスの薬物用語老化保護物質（ｇｅｒｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒ）が浮上してきた。過去５年にわたって数及び投資が爆発的に成長し、現在２００を上回る異なる薬物が存在する［４］。
これらの薬物は、それらの源で加齢関連疾患を予防することに向けた重要な第１のステップであり、今後もおそらく大きな患者集団を抱えるだろう。しかしながら、小分子薬物は、基本的に３つの態様に起因して老化保護物質としては限定されている。第一に、これらは副作用を有する。副作用は、標的の摂動が望まれない組織における標的外の効果及び本来の標的の効果によって引き起こされる。他の薬物についての副作用は忍容されるが、これらの薬物は健康な人々を治療することが期待され、したがってそれらの使用を正当化するには、非常に軽度の副作用（たとえあったとしても）でなければならないだろう。第二に、それらは継続的で生涯にわたる投与を要求する。これは安い薬物（メトホルミン等）にとっては可能であり得るが、他に多くのものについては、これは法外に経費がかかるか、または扱いにくい（例えば注射を要求する薬物で）。最後に、これらの薬物は、標的の機能を遺伝子による方法を介して可能な限り完全には乱すことができないので、限定された有効性しか達成し得ない。
したがって、加齢関連疾患の予防を目的とする成功した治療法は、長時間作用し、組織特異的であり、細胞内ネットワークを正確に完全に乱すことが可能であることが必要である。これは、小分子薬物または生物製剤により達成可能ではないが、遺伝子療法により達成可能である。実際、遺伝子療法は、これらの要求性を満たす長期的に実行可能な唯一の方法であるように思われる。
遺伝子療法は、早老症の治療のための主な候補でもある。１つのかかる疾患の例はＩＩ型ウォルフラム症候群であり、糖尿病、聴覚障害、白内障、視覚及び聴覚の喪失、視神経の萎縮、腎臓及び胃腸の不全、ならびに多数の他の健康問題を特徴とする早老症であり、約３０年の平均寿命である［５、６］。ＩＩ型ウォルフラム症候群は、Ｃｉｓｄ２（ミトコンドリア膜及び小胞体（ＥＲ）中で活性のある小さなタンパク質）におけるホモ接合の機能喪失突然変異によって引き起こされることが見出された［７、８］。マウスにおけるＣｉｓｄ２喪失は寿命の減少を導き、大部分のヒトのＩＩ型ウォルフラム症候群の症状の表現型をコピーする（図１Ａ～１Ｂ）［９］。Ｃｉｓｄ２のレベルはマウスにおいて加齢とともに減少する［９］が、Ｃｉｓｄ２の過剰発現は、マウス（図１Ａ）［１０］及びおそらくヒト［７、１１］において、健康及び寿命を増加させる。それゆえ、Ｃｉｓｄ２遺伝子療法は、ＩＩ型ウォルフラム症候群の可能性のある治療及び母集団全体の健康でいる期間を増加させる老化保護物質の両方である。
要約すると、老化保護物質としての小分子薬物の限界、早老症の治療についての必要性、ならびに加齢関連疾患の負担の増加、加齢の生物学の知識及び投資の増加、及びアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）の効率及び費用対有効性の増加についての現在の主な傾向を考慮して、ＡＡＶベースの老化保護遺伝子療法は、医療の主要な部分になる予定である。
ＤＡＥＵＳ、及び現在の遺伝子療法の方法の欠点
様々な遺伝子療法の方法から、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は非常に有効であり、一般的に使用されるベクターである。ＡＡＶからの、研究及び新規臨床試験の両方において最も一般的に使用されるベクターのうちの１つは、一本鎖ＡＡＶ９ベースのベクター（ｓｓＡＡＶ９）である。これは、ｓｓＡＡＶ９が高力価で産生され得、身体の様々な組織に形質導入され得るからであり、肝臓においてある最も高く、脳において最も低く（約１００～１０００倍）発現される。現在新しく操作され見出されたＡＡＶ血清型が相次いでいるが、新しいベクターは、産生することがより困難である（Ａｎｃ８０）か、または特異的組織のみに有効である（ＰＨＰ．Ｂ）のいずれかであるので、ｓｓＡＡＶ９は依然として選択される方法であった。ＡＡＶ９に類似して、他の現在存在するＡＡＶ血清型は、様々な組織間で高度に変動する遺伝子導入レベルをもたらす。ｓｓＡＡＶ９がいくつかの適用のためには十分であるが、それらを組織の幅広いセットへの遺伝子送達を要求する老化の研究のために使用する試みは、それらがこの目的のために好適でないことを直ちに示す。経験的には、複数の老化保護遺伝子について、最適化されたｓｓＡＡＶ９ベクターでさえ（図２Ａ）、加齢したマウスにおいて、全く過剰発現しないかまたは中等度の過剰発現しかもたらさず、組織間変動性が高い（図２Ｂ～２Ｄ）ことが見出された。この観察そして組織間の変動性の高さは、複数の他の人々によって報告されている（図３～４）［１２、１３］。このことは、加齢研究及び治療物質においてＡＡＶを使用することへの重大な障害を示し、その結果として、ＡＡＶを加齢研究のために使用する３つの論文のみがこれまでに出版されたようであり、そのすべては、長期発現を要求しない遺伝子、または分泌され得る遺伝子、または限られた組織において研究された遺伝子に限定された。
加齢に関与する大部分の遺伝子を効果的に送達するためにＡＡＶの使用を一般化するには、多数の技術の進歩が必要であった。第一に、加齢は全身に影響するので、単一または少数の組織ではなく、身体の大部分の組織の中へ遺伝子を送達できることが必要である。第二に、遺伝子発現は、数桁の規模の変動ではなく、これらの組織にわたって均一でなくてはならない。第三に、遺伝子発現は、長期的且つ安定的でなくてはならない。第四に、発現は、野生型レベルを超える過剰発現を達成するために強力且つ効率的でなくてはならない（大部分の遺伝子療法は、発現を野生型レベルのほんの一部のみまで回復させる）。最後に、遺伝子発現は、個別の細胞間で一様に分布しなければならない（ｓｓＡＡＶ９ベクターによるように高い細胞間変動を有しているのではなく）。
５年にわたる試験及び開発を複数回繰り返し、２つの研究室からの資料を組み合わせた後に、これらの要求性を満たす系：ＤＡＥＵＳ（均一な全身性の発現のための異なるＡＡＶ発現系）が開発された。これを達成するために、ＤＡＥＵＳは、自己相補的ベクター骨格、２つ以上のＡＡＶ血清型、１つまたは複数のマイクロＲＮＡ標的部位、及び強力な非サイレンシングプロモーターを使用して、新たにデザインされたベクターアーキテクチャを用いる。具体的には、一実施例において、ＤＡＥＵＳは、高く長期的且つ細胞にわたって均一な発現を提供するためのニワトリβ－アクチンハイブリッド（Ｃｂｈ）プロモーター、肝臓における発現を正規化するための肝臓特異的マイクロＲＮＡ １２２標的配列、発現をさらに増加させるためのコドン最適化遺伝子コーディング配列、及び身体の大部分の組織へ遺伝子を同時に送達するための２つのウイルス血清型（ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢ）を使用する（図５Ａ）。もたらされたＤＡＥＵＳ系は、それらの構成要素ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢ単独とは異なり、身体の主要な組織にわたって均一な遺伝子導入及び遺伝子発現を提供した（図５Ｂ～５Ｃ）。ｍｉＲＮＡ標的部位は、望まれない組織における高すぎる発現を弱めるために含まれる。特に、弱められていないｓｓＡＡＶ９ベクターによる実験では、アラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）レベル上昇から明らかな肝臓毒性が実証されたので、肝臓特異的ｍｉＲＮＡ１２２標的部位を含めた（図６Ａ）。ｍｉＲ－１２２標的部位の添加は、より強力なベクターの使用にもかかわらず毒性を減少させた（図６Ｂ）。さらに、Ｃｂｈプロモーター及びｍｉＲ１２２標的部位を含有する最適化された自己相補的骨格でさえ、単一の血清型単独を使用する実験は、非常に不均等または不十分な発現を示したので、少なくとも２つの血清型（ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢ）を含めた（図５Ｂ～５Ｃ、図７～９）。これとは対照的に、ＤＡＥＵＳを使用すると、加齢した野生型マウスにおける複数の老化保護遺伝子のかなり均一な高レベル且つ長期的な過剰発現が実証された（図７～９）。
ＤＡＥＵＳを使用する、定義されたレベルの遺伝子導入及び導入遺伝子発現の達成
最適な治療有効性を達成するために、多くの場合、様々な組織にわたる定義されたレベルの導入遺伝子発現が要求される。本明細書において記載される方法は、ＤＡＥＵＳ（場合によってはベクターゲノム上のｍｉＲＮＡ標的部位（ｍｉＲ１２２標的部位、ｍｉＲ１８２標的部位など等）と併用して、単一のカクテル中の複数の異なるＡＡＶ血清型（ＡＡＶ９、ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ８、ＡＡＶ２など等）からなる）を用いて、身体の複数の組織にわたる遺伝子導入及び発現の標的レベルを達成する。
標的種の対象において定義されたパターンの遺伝子導入及び遺伝子発現を達成するために、特異的ＡＡＶ血清型の注射された用量と、ＲＮＡ及び／またはタンパク質のレベルでのもたらされた遺伝子導入レベル及び遺伝子発現との間の関係性の第１の基準の曲線を生成する。これを達成するために、標的種の個体に、１ｋｇあたり１ｅ１０～１ｅ１８のＡＡＶベクターゲノムコピー（ＧＣ）の間の範囲の用量で特異的ＡＡＶ血清型を注射し、ＲＮＡ及び／またはタンパク質のレベルでのもたらされた遺伝子導入及び遺伝子発現を測定する。このプロセスを、ＡＡＶカクテル中で使用されるすべての血清型について単独で反復する。このプロセスを、使用されたすべてのｍｉＲＮＡ標的部位についても反復する。追加で、このプロセスを、使用された各々のペアのＡＡＶ血清型について反復して、可能な相互作用効果を推定する。
本明細書において、遺伝子導入は、標的組織中の宿主細胞核ゲノムＤＮＡあたりのＡＡＶベクターゲノムＤＮＡとして定義される。ＲＮＡ発現は、次世代シーケンシングに基づいて１００万あたりの導入遺伝子ＲＮＡカウントとして、または標的組織における逆定量ＰＣＲもしくは他の定量的ＲＮＡアッセイによって決定される宿主のハウスキーピング遺伝子レベルに対して正規化された導入遺伝子ＲＮＡレベルとして、定義される。タンパク質発現は、ウエスタンブロット、シンプルウエスタン、ＥＬＩＳＡ、または標的組織における他の定量的タンパク質発現アッセイによってアッセイされるような、インプットした組織の重量、全タンパク質、またはハウスキーピング遺伝子のタンパク質レベルへの正規化された導入遺伝子タンパク質発現のレベルとして定義される。
これらのデータから、線形回帰法または非線形回帰法を各々の標的組織について使用して、ＡＡＶ用量ｖｓ遺伝子導入及び遺伝子発現の基準の用量応答曲線を推定する。最終的に、各々の標的組織について、回帰から導出された等式は、使用されたすべてのＡＡＶ血清型及びｍｉＲＮＡ標的部位について、相互作用項を含んで合計され、１セットの等式からなるモデルが提供され、そのことにより、カクテル中で使用されるＡＡＶ血清型の個別の用量の予測が、遺伝子導入及び遺伝子発現パターンの標的レベルを達成することを可能にする。任意の標的種、標的組織、ＡＡＶ血清型、及びｍｉＲＮＡ標的部位が、この方法で任意選択で使用され得る。
上で記載される方法に基づいて、ハツカネズミ（Ｍｕｓ ｍｕｓｃｕｌｕｓ）の脳、前脛骨筋、心臓、肝臓、ならびに他の器官及び組織における遺伝子導入の標的レベルを達成するためのプロトタイプ装置を設計した。この目的のために、血清型ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢならびにｍｉＲ１２２標的部位を用いるＤＡＥＵＳ系の一実施形態を使用した。
５週齢のオスのＣ５７ＢＬ６－Ｊマウスに、以下の血清型及び組み合わせ：
１）ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２、
２）ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲＳｃｒ（配列中、ｍｉＲＮＡ標的部位をスクランブル化して、その機能を除去した）；
３）ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２；
４）ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲＳｃｒと一緒にｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２
を、１群あたりＮ＝３のマウスで、およそ１ｋｇあたり５ｅ１２、２ｅ１３、５ｅ１３、及び２ｅ１４のＡＡＶベクターゲノムの用量で注射した。
これから、脳、心臓、肝臓、及び前脛骨筋についてのＡＡＶ遺伝子導入に対するＡＡＶ用量の用量－応答曲線の等式を線形回帰を使用して推定した（図１０）。各々の血清型及び各々の組織についての特定の等式を図１０にリストする。
相互作用効果を、すべての組織についての群１及び３において個別に観察された遺伝子導入レベルを合計し、次いでそれらを群４において観察された遺伝子導入レベルに比較することによって推定した。相互作用がＡＡＶ９とＰＨＰ．ｅＢとの間に存在しないならば、すべての組織についての群１及び３からの遺伝子導入の合計（期待された）は、それぞれのすべての組織についての群４における遺伝子導入レベル（観察された）と厳密に一致するはずである。期待された遺伝子導入レベルｖｓ観察された遺伝子導入レベルの回帰分析は、期待値が観察値に一致し、高度に相関することを示した（ｒ２＝０．９～０．９９９）（図１１）。相互作用の二元配置ＡＮＯＶＡ分析は、期待値と観察値との間に有意な相互作用がないことを示した（図１１）。これらのデータから、試験した用量でＡＡＶ９とＰＨＰ．ｅＢとの間の相互作用効果が非常に小さいかまたは存在しないことが示される。
次いで関心のある５つの異なる遺伝子導入レベルを達成することが求められた。遺伝子発現パターンを、ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢの用量の５つの異なる組み合わせの上記のモデルを使用して予測し、５週齢のオスのＣ５７ＢＬ６－Ｊマウスの５つの群に、以下のカクテル：
１）１．４ｅ１４ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋１．９ｅ１３ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２
２）１．９ｅ１４ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋４．８ｅ１２ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２
３）４．８ｅ１３ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋１．９ｅ１４ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２
４）２．４ｅ１３ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋９．５ｅ１２ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２
５）４．８ｅ１２ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＡＡＶ９－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２＋４．８ｅ１３ ＧＣ／ｋｇ ｓｃＰＨＰ．ｅＢ－Ｃｂｈ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２
を、１群あたりＮ＝３マウスで後眼窩注射した。
結果から、予測された遺伝子導入パターン（予測）と観察された遺伝子導入パターン（観察）との間の高い一致が指摘された（図１２）。結果から、線形回帰を使用する、予測された遺伝子導入レベルと観察された遺伝子導入レベルの高い相関性も指摘された（図１３）。これは、上で記載された様式で用いられたＤＡＥＵＳ系が、所定のレベルの遺伝子導入を正確に達成することを可能にすることを示す。
ＩＩ型ウォルフラム症候群を治療するためのＤＡＥＵＳの使用
早老症の治療のためのＤＡＥＵＳの有効性を試験するために、Ｃｉｓｄ２ノックアウトマウスの系統をインハウスで確立した（図１４）。これらは、ＣＲＩＳＰＲを介して生成されたので、存在する唯一の非遺伝子導入Ｃｉｓｄ２ノックアウトモデルである（他のモデルの挿入突然変異誘発とは対照的に）。このモデルは選ばれたのは、上述したように、Ｃｉｓｄ２の喪失はＩＩ型ウォルフラム症候群を引き起こす一方で、Ｃｉｓｄ２の過剰発現がマウス及びおそらくヒトにおいて健康でいる期間及び寿命を増加させるからである［２］。したがって、Ｃｉｓｄ２遺伝子療法は、潜在的に、ＩＩ型ウォルフラム症候群（ＷＳＩＩ）のための治療及び母集団全体のための老化保護遺伝子療法の両方である。均一なレベルのＣｉｓｄ２発現を回復させることを目標として、Ｃｉｓｄ２ノックアウトマウスを、疾患の様々なステージにわたって、２ｅ１３ベクターゲノム／ｋｇの合計用量でＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２により処理した。この用量でのＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２によるマウスの処理は、実際、Ｃｉｓｄ２遺伝子導入の均一な回復（図１５Ａ）及び複数の組織にわたる生理的レベルへのＣｉｓｄ２タンパク質発現（図１５Ｂ）をもたらした。これにより、試験したすべての年齢群（例えば２～４か月、または７か月で、）新生児として注射したマウス）にわたって、罹病率及び死亡率が有意に減少した（図１５～１６）。
新生児として注射したマウスにおいて、フレイル、体重減少、活動度、及び視力（ルーミングスポットとしてアッセイされた）は、無処理のＣｉｓｄ２ノックアウトマウス（これらの機能のすべてにおける罹患率の増加が観察された）に比較して、ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓ２処理によって野生型レベルで維持された（図１７）。追加で、ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２処理マウスの寿命は、無処理対照に比較しておよそ２倍延長された（図１７）。２～４か齢月で処理したマウスにおいて、フレイル、体重減少、筋肉強度（グリッドハンドとしてアッセイした）、及び協調運動（ビーム横断への挑戦としてアッセイした）は、無処理対照に比較して改善された（図１８）。加えて、寿命は約２倍増加した（図１８）。驚くべきことに、疾患が進行したマウスにおいて、ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２処理は、体重減少、脱毛、脊柱後弯症、及び他の罹患率を好転させ、寿命を３倍延長させた（図１９）。このデータから、ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２が、ＩＩ型ウォルフラム症候群の予防及び治療のための非常に有効な療法であることが実証される。
野生型マウスの寿命を延長するためのＤＡＥＵＳの使用
次に、処理されたマウスの寿命を延長する目標により、野生型（早老性ではない）マウスにおいて、老化保護遺伝子Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮを過剰発現するように、ＤＡＥＵＳ系を操作した。この目的のために、野生型マウスにおいて、野生型のレベルを超えるＣｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮを過剰発現する能力を、１８か月齢の野生型マウスの中への最適化された用量でＤＡＥＵＳ－Ａｔｇ５、ＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ、及びＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２を送達し、注射の１か月後にもたらされたタンパク質発現の測定によって、検証した。２セットの実験において、身体の複数の主要な組織にわたって、ＤＡＥＵＳの最適化された用量を使用するすべての３つの遺伝子の過剰発現が、実証された（図２０）。次いで野生型Ｃ５７ＢＬ６／Ｊマウスの寿命に対するＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２及びＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ処理の効果を試験した。この目的のために、２４か月齢の等しい数のオス及びメスのマウスに、２ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２、１ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ、もしくは１ｅ１２ｖｇ／マウスのＤＡＥＵＳ－ＧＦＰ、または対照としてビヒクル（ＦＦＢ）で、後眼窩注射した。次いで処理群の寿命を測定し、結果から、ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２処理マウス及びＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ処理マウスは、ＤＡＥＵＳ－ＧＦＰ処理マウスまたはビヒクル処理マウスに比較して、より長い寿命を示すことが指摘された（ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２：全体的な中央寿命の７％の増加及び注射後の寿命の３８％の増加；ＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮ：全体的な中央寿命の７％の増加及び注射後の寿命の３７％の増加）（図２１）。結果から、本明細書において記載されるＤＡＥＵＳ系を使用して、老化保護遺伝子を過剰発現させ、処理した対象の寿命を延長し得ることが実証された。
材料及び方法
プラスミドの構築及びプラスミド配列
ｓｓＡＡＶ９ベクター及びＤＡＥＵＳベクターを、ＤＮＡ合成によって構築しクローニングした。ＤＡＥＵＳベクターのＩＴＲからＩＴＲへの配列を完全に合成し、標準的な分子クローニングを使用して、ｐＡＡＶ＼ＳＣ＼ＣＭＶ＼ＥＧＦＰ＼ＷＰＲＥ＼ｂＧＨ－２骨格（Ｖａｎｄｅｎｂｅｒｇｈｅ研究室から受理した）の中へクローニングした。ｓｓＡＡＶ９ベクターを部分的に合成し、ＡＡＶ ｐＣＡＧ－ＦＬＥＸ２－ｔＴＡ２－ＷＰＲＥ－ｂＧＨｐＡ骨格（Ａｄｄｇｅｎｅ）の中へクローニングした。ｓｓＡＡＶ９ベクターについては、ネイティブなＭｕｓ ｍｕｓｃｕｌｕｓコーディング配列を使用した。ＤＡＥＵＳベクターについては、Ａｔｇ５及びＰＴＥＮのコーディング配列はコドンを最適化した。
ＡＡＶの産生及び精製
４つの１５ｃｍのディッシュからの８０％のコンフルエンシーのＨＥＫ２９３細胞を、ハイパーフラスコへ播種し、８０％のコンフルエンシーまで増殖させ、ＡＡＶベクター、ＡＡＶ８またはＡＡＶ９についてのＲｅｐ／Ｃａｐ（Ａｄｄｇｅｎｅ １１２８６４及び１１２８６５）、及びｐＡｄΔＦ６によりそれぞれ、１つのハイパーフラスコあたり１３０ｕｇ：１３０ｕｇ：２６０ｕｇで、三重トランスフェクションした。トランスフェクションの４日後、ハイパーフラスコからの上清を１Ｌのフラスコの中へデカントし、３ｍｌのＴｒｉｔｏｎ－Ｘ １００（８７８７－１００ＭＬ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ）、１ｍｇ／ｍｌの濃度での２．５ｍｇのＲＮＡｓｅ Ａ（１０１０９１４２００１ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ）、２５Ｕ／ｍＬのターボヌクレアーゼ（Ｔｕｒｂｏｎｕｃｌｅａｓｅ）（ＡＣＧＣ８０００７ ＶｉｔａＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、及び５６μｌの１０％のプルロニック（登録商標）Ｆ６８（２４０４００３２ Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を、上清へ添加した。次いで上清を混合し、ハイパーフラスコの中へ注いで戻し、旋回シェーカー上で３７℃で１時間１５０ｒｐｍで振盪して細胞を溶解し、プラスミドＤＮＡを取り出した。次いで溶解物をハイパーフラスコからデカントし、ハイパーフラスコを１４０ｍＬのＤＰＢＳ（１００１００７２ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈ）により洗浄し、それを溶解物の残りへ添加した。次いで全溶解物を４℃３０分間４０００ｇで遠心分離し、上清を、０．４５μｍのＰＥＳボトルトップフィルター（２９５－４５４５ Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を介して濾過してから、ＨＰＬＣ上にロードした。
補助サンプルポンプ（ＧＥ ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ）を含有するＡｋｔａ Ｐｕｒｅ ＨＰＬＣシステムにおける６．６ｍｍ×１００ｍｍのカラム（ガラス、Ｏｍｎｉｆｉｔ、ｋｉｎｅｓｉｓ－ＵＳＡ）による、ＡＡＶＸ ＰＯＲＯＳ ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）樹脂を使用して、ＡＡＶ精製を遂行した。機械を室温でセットアップし、すべての精製を室温（およそ２１℃）で遂行した。各々の精製のためのカラム体積［ＣＶ］は１ｍＬであった。クロマトグラフィーカラムを、１０［ＣＶ］のトリス緩衝洗浄バッファー１×生理食塩水（１×ＴＢＳ）（Ｂｏｓｔｏｎ Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ）により前平衡化してから、ＡＡＶ溶解物を適用した。カラムの平衡及びすべての後続する洗浄を２ｍｌ／分の速度で遂行した。
ＡＡＶビリオンを含有する清澄にした／濾過した溶解物を１ｍＬ／分の速度でＡＡＶＸ ＰＯＲＯＳカラムの上へロードし、全ローディング時間は、小規模調製のために３０分からハイパーフラスコのための７００分（一晩）までの範囲であった。後の精製において１．５ｍＬ／分のロード速度も使用してランタイムの合計を減少させ、精製効率の減少は観察されなかった。次いで結合したＡＡＶを含有するカラムを１０［ＣＶ］の１×ＴＢＳにより洗浄し、５［ＣＶ］の２×ＴＢＳの洗浄、１０［ＣＶ］の２０％のＥｔＯＨ、及び１０［ＣＶ］の１×ＴＢＳの洗浄が続いた。結合したＡＡＶを、１ｍｌ／分の速度で１×ＴＢＳ中の０．２Ｍのグリシンの低ｐＨ（ｐＨ２．５～２．９）のバッファーを使用して、溶出させた。溶出画分は、１画分あたり０．２５～１ｍＬの体積とした。溶出させたウイルス溶液を、溶出の前に画分収集チューブの中へ画分体積の１／１０の１Ｍのトリス－ＨＣＬ（ｐＨ８．０）を直接添加することによって中和した。ＵＶ（２８０ｎｍ）吸収グラフに基づいてピーク画分を収集し、最終的な製剤バッファー（ＦＦＢ：１× ＰＢＳ、１７２ｍＭのＮａＣｌ、０．００１％のプルロニック（登録商標）Ｆ６８）中でバッファー交換し、５０ｋＤａの分子量カットオフのＡｍｉｃｏｎのフィルター（ＵＦＣ９０５００８ ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を使用して濃縮してから、ウイルス力価を測定した。
簡潔には、ウイルス力価及びゲノム力価を、定量的ＰＣＲ（ＴａｑＭａｎ、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）によって決定した。ＢｇｈｐＡ標的化プライマー－プローブ（ＧＣＣＡＧＣＣＡＴＣＴＧＴＴＧＴ（配列番号１）、ＧＧＡＧＴＧＧＣＡＣＣＴＴＣＣＡ（配列番号２）、６ＦＡＭ－ＴＣＣＣＣＣＧＴＧＣＣＴＴＣＣＴＴＧＡＣＣ－ＴＡＭＲＡ（配列番号３））による、リアルタイムｑＰＣＲ（７５００ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ；Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用した。直線化ＣＢＡ－ＥＧＦＰ ＤＮＡを、既知の濃度の１シリーズの希釈で基準として使用した。１０秒間の９５℃の保持ステージ後に、２ステップのＰＣＲサイクルステージを、９５℃５秒間続いて６０℃で５秒間の４０サイクルで遂行した。ゲノムベクター力価を基準から内挿し、１ミリリットルあたりのベクターゲノムとして表現した。
ＤＮＡ及びタンパク質の定量
１ｍＬのＤＮＡ及びＲＮＡ用のＲＬＴ＋バッファー、ならびに１ｍＬのタンパク質用の１×Ｈａｌｔプロテアーゼ及び脱リン酸化酵素のインヒビター（７８４４４ Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉ）を含有するＲＩＰＡバッファー中での３０ｍｇの組織の破壊によって、組織をホモジナイズした。破壊のために、サンプル、バッファー、及び１ｍｍのジルコニア／シリカビーズ（１１０７９１１０ｚ Ｂｉｏｓｐｅｃ）を、ＸＸＴｕｆｆバイアル（３３０ＴＸ ＢｉｏＳｐｅｃ）の中へロードし、Ｍｉｎｉ Ｂｅａｄｂｅａｔｅｒ ２４（１１２０１１ ＢｉｏＳｐｅｃ）を最大スピードで３分間使用して破壊した。次いでバイアルをＲＮＡのために２～５分間タンパク質のために１時間氷の上に置き、３分間１０，０００ｇで遠心分離し、上清をさらなる手順のために使用した。
ＤＮＡ／ＲＮＡのために、７００μＬの上清をＡｌｌＰｒｅｐ ＤＮＡミニスピンカラムの上へロードし、大腿四頭筋のためにＡｌｌＰｒｅｐ ＤＮＡ／ＲＮＡ／ｍｉＲＮＡ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｋｉｔ（８０２２４ Ｑｉａｇｅｎ）ならびに脳及び肝臓のためにＡｌｌｐｒｅｐ ＤＮＡ／ＲＮＡ ｍｉｎｉ ｋｉｔ（８０２０４ Ｑｉａｇｅｎ）を使用して精製した。精製をＱｉａｃｕｂｅ Ｃｏｎｎｅｃｔ（９００２８６４ Ｑｉａｇｅｎ）上で遂行した。
全ＡＡＶコピー数を、ＡＡＶコピー数のための基準としてＢｇｈｐＡプライマー及び直線化ＣＢＡ－ＧＦＰプラスミド希釈系列を使用して査定した（ＧＣＣＡＧＣＣＡＴＣＴＧＴＴＧＴ（配列番号１）、ＧＧＡＧＴＧＧＣＡＣＣＴＴＣＣＡ（配列番号２）、６ＦＡＭ－ＴＣＣＣＣＣＧＴＧＣＣＴＴＣＣＴＴＧＡＣＣ－ＴＡＭＲＡ（配列番号３））。全ゲノムコピー数を、既知の濃度のｇＤＮＡ希釈系列の基準と共に、ＲＰＩＩプライマー－プローブ（ＧＴＴＴＴＣＡＴＣＡＣＴＧＴＴＣＡＴＧＡＴＧＣ（配列番号４）、ＴＣＡＴＧＧＧＣＡＴＴＡＣＴＡＴＴＣＣＴＡＣ（配列番号５）、プローブ：ＶＩＣ－ＡＧＧＡＣＣＡＧＣＴＴＣＴＣＴＧＣＡＴＴＡＴＣＡＴＣＧＴＴＧＡＡＧＡＴ－３ＩＡＢｋＦＱ（配列番号６））を使用して推定した。次いで２倍体ゲノムあたりのＡＡＶコピー数を、
Figure 2023524010000016
 として計算した。
両方のプライマー－プローブセットのための増幅の効率及び特異性は以前に確立され、製造業者によって推奨される熱サイクル条件でＬｕｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｐｒｏｂｅ ｑＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（Ｍ３００４Ｌ ＮＥＢ）を使用して、増幅を遂行した。
タンパク質発現の定量のために、タンパク質溶解物を最初に新鮮なＲＩＰＡ＋Ｈａｌｔインヒビターバッファー中で５倍に２回希釈し、すべての希釈物を、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（２３２２５ Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を使用して、全タンパク質含有量についてアッセイした。各々の組織タイプごとに、次いで溶解物を、直線範囲の下端の濃度までＲＩＰＡ＋Ｈａｌｔインヒビターバッファー中で希釈した。ＧＦＰについては、抗ＧＦＰ抗体ａｂ２９０（ａｂ２９０ Ａｂｃａｍ）を使用した。Ｃｉｓｄ２、ＰＴＥＮ、及びＡｔｇ５については、抗Ｃｉｓｄ２抗体（１３３１８－１－ＡＰ Ｐｒｏｔｅｉｎｔｅｃｈ）、抗Ａｔｇ５抗体（ＮＢ１１０－５３８１８ Ｎｏｖｕｓ）、及び抗ＰＴＥＮ Ｄ４．３抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）をそれぞれ使用した。タンパク質定量のための直線範囲は、ａｂ２９０によるＷｅｓ上の１２～２３０ｋＤａ Ｊｅｓｓ ｏｒ Ｗｅｓ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ Ｍｏｄｕｌｅ（ＳＭ－Ｗ００４ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）を、各々の組織について、３μｇ／μｌ～０．０３μｇ／μｌの範囲の希釈物のために別々に使用して、各々のタンパク質をアッセイすることによって以前に決定された。全タンパク質のための直線範囲も、Ｔｏｔａｌ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｍｏｄｕｌｅ（ＤＭ－ＴＰ０１ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）を使用して、４μｇ／μｌ～０．１μｇ／μｌの範囲で全タンパク質をアッセイすることによって以前に決定された（直線範囲：試験されたすべての組織について＜１μｇ／μｌ）。次いでＧＦＰ、Ａｔｇ５、Ｃｉｓｄ２、及びＰＴＥＮを、全タンパク質レベルと同様にアッセイし、ＧＦＰ及び全タンパク質をＣｏｍｐａｓｓ ｆｏｒ ＳＷ ４．１（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）を使用して定量した。最終的に、ＧＦＰを全タンパク質に対して正規化して、最終値とした。
動物実験
マウスを、１ケージあたり５匹のマウスの最高密度で標準的な換気ラック中で収容した。室温をで２２℃で維持し、湿度は３０％～７０％であった。マウスを１２時間の明／暗サイクルで維持し、食品及び水を自由裁量で提供した。ブリーダーマウスを照射したＰｉｃｏＬａｂ Ｍｏｕｓｅ Ｄｉｅｔ ２０ ５０５８（ＬａｂＤｉｅｔ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）上で維持し、非ブリーダーマウスを照射したＬａｂＤｉｅｔ Ｐｒｏｌａｂ Ｉｓｏｐｒｏ ＲＭＨ ３０００ ５Ｐ７５（ＬａｂＤｉｅｔ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）上で維持した。ケージを１／４インチのＡｎｄｅｒｓｏｎのＢｅｄ ｏ Ｃｏｂ ｂｅｄｄｉｎｇ（Ｔｈｅ Ａｎｄｅｒｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、Ｍａｕｍｅｅ、ＯＨ）により満たし、すべてのケージは、３つのネストレット（ｎｅｓｔｌｅｔ）（２ ３ ２”の正方形の圧縮綿、Ａｎｃａｒｅ、Ｂｅｌｌｍｏｒｅ、ＮＹ）及び１つの赤色のマウス小屋（保証付きのポリカーボネート；３ ３／４”の幅×１ ７／８”の高さ×３”の長さ、ＢｉｏＳｅｒｖ、Ｆｌｅｍｉｎｇｔｏｎ、ＮＪ）を含有した。ケージ交換を、少なくとも１４日毎に、そして必要であるならばより頻繁に遂行した。動物健康監視を、指標動物及びラックプレナムからのスワブを介してのＰＣＲ試験によって四半期毎に遂行した。テキスト及び図中で記載されるように、ＡＡＶを様々な全用量で１匹のマウスあたり体積１５０μｌで、イソフルオラン麻酔下で後眼窩注射した。テキスト及び図中で記載されるように、ＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢを、ＤＡＥＵＳ－Ａｔｇ５、ＤＡＥＵＳ－Ｃｉｓｄ２、ＤＡＥＵＳ－ＧＦＰ、及びＤＡＥＵＳ－ＰＴＥＮの注射のために１：１比で使用し、８週齢または１８か月齢の野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを使用した。テキスト及び図中で別段指摘される場合を除いて、マウスを注射の２８日後にＣＯ２で安楽死させ、分析のために組織及び血清を収集した。血清ＡＬＴレベルは、ＵＭａｓｓ Ｍｏｕｓｅ Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒによって定量された。
Ｃｉｓｄ２ノックアウトマウスの生成及びフレイル測定
Ｃｉｓｄ２ノックアウトマウスを、ＳｐＣａｓ９タンパク質及びＣｉｓｄ２のエクソン２を標的化する３つのガイドＲＮＡ（ＡＧＣＧＣＡＡＧＴＡＣＣＣＣＧＡＧＧＡＡ（配列番号７）、ＣＣＣＣＧＡＧＧＡＡＧＧＧＣＡＧＴＡＧＧ（配列番号８）、ＴＧＣＴＧＴＧＴＴＣＡＧＴＴＴＣＡＧＡＣ（配列番号９））によるＣ５７ＢＬ６／Ｊ受精卵母細胞の顕微注射を介して生成した。次いでファウンダーの遺伝子型を決定し、サンガー法でシークエンシングし（プライマーＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＴＴＣＴＣＣＧＡＧＴＴＣ（配列番号１０）、ＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＴＧＣＴＧＴＡＧＡＡＣ（配列番号１１））、機能喪失突然変異のファウンダーを野生型Ｃ５７ＢＬ６／Ｊへ交配した。次いで仔マウスを、野生型Ｃ５７ＢＬ６／Ｊマウスへさらに戻し交配した。次いでこの戻し交配のヘテロ接合体仔マウスを交配して、ホモ接合体Ｃｉｓｄ２ノックアウトマウスに達した。２系統をさらに交配した（系統６：７８０ｂｐの欠失、エクソン２全体の欠失、及び系統１４：２６１ｂｐの欠失、エクソン２の大部分の欠失に起因するフレームシフト、エクソン２の３’で４ｂｐ残る）。Ｃｉｓｄ２発現の喪失をＳｉｍｐｌｅ Ｗｅｓを介して確認した（図示せず）。次いでマウスを間隔を置いて体重測定し、注射の４か月後にフレイルを査定した。フレイルを、Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ ｅｔ ａｌ．［１４］中で記載されるように、３１の罹患率関連測定値の加重和として盲検化して査定し、ただし、有益でない測定値（すべてのマウスにわたって０または１だった測定値）を、最終分析から除外した。
統計分析
データをすべて可視化し、統計分析をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ）で遂行した。使用した具体的な統計的検定を各々の試験について図の説明文中でリストし、すべての試験を別段の定めのない限りデフォルト設定により遂行した。
例示的なウイルスベクター
ＬＯＣＵＳ ｓｃＡＡＶ－ＣｂｈＭ－Ａｔｇ５（ＧＳ）－ｍｉＲ ５２３７ ｂｐ ｄｓ－ＤＮＡ環状
ＤＥＦＩＮＩＴＩＯＮ ．
ＦＥＡＴＵＲＥＳ Ｌｏｃａｔｉｏｎ／Ｑｕａｌｉｆｉｅｒｓ
ＣＤＳ ３９３７．．４７９７
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｍｐ－Ｒ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １０８９．．１１０９
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＡＧ３ Ｆ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２５６８．．２５７５
／ｌａｂｅｌ＝“シード領域”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２５８３．．２８２９
／ｌａｂｅｌ＝“正確なＷＰＲＥ３”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １６０９．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ ３’クローニング部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０１．．１７０１
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｒｅｐｅａｔ＿ｒｅｇｉｏｎ ７６７．．８７２
／ｌａｂｅｌ＝“５’ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １６８２．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“ハイブリッドイントロンの３’端部”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２５４７．．２５７６
／ｌａｂｅｌ＝“ｍＩＲ１２２標的部位ｍ８”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０１．．１７０６
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８８９．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １１８０．．１２０１
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＡＧ３ Ｒ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２３０４．．２３２１
／ｌａｂｅｌ＝“野生型と共有する領域”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２４４２．．２４６７
／ｌａｂｅｌ＝“野生型と共有する領域”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １４７２．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“ハイブリッドイントロン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３０４５．．３０６８
／ｌａｂｅｌ＝“５’ＩＴＲを欠失”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｐｏｌｙＡ＿ｓｉｇｎａｌ ２８３０．．３０４４
／ｌａｂｅｌ＝“ＢＧＨ＼ｐＡ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７１３．．２５４０
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５ ＣＯ Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２７１７．．２７４１
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ８０”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｅｎｈａｎｃｅｒ ８８９．．１１９２
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＭＶエンハンサー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８８３．．８８７
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ ５’クローニング部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０７．．１７１２
／ｌａｂｅｌ＝“Ｋｏｚａｋ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｒｅｐｅａｔ＿ｒｅｇｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ（３０４５．．３１７４）
／ｌａｂｅｌ＝“３’ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｐｒｏｍｏｔｅｒ １１９４．．１４７１
／ｌａｂｅｌ＝“ニワトリβ－アクチンプロモーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ＯＲＩＧＩＮ
１ ｇｔｔｇｇａｃｔｃａ ａｇａｃｇａｔａｇｔ ｔａｃｃｇｇａｔａａ ｇｇｃｇｃａｇｃｇｇ ｔｃｇｇｇｃｔｇａａ ｃｇｇｇｇｇｇｔｔｃ
６１ ｇｔｇｃａｃａｃａｇ ｃｃｃａｇｃｔｔｇｇ ａｇｃｇａａｃｇａｃ ｃｔａｃａｃｃｇａａ ｃｔｇａｇａｔａｃｃ ｔａｃａｇｃｇｔｇａ
１２１ ｇｃｔａｔｇａｇａａ ａｇｃｇｃｃａｃｇｃ ｔｔｃｃｃｇａａｇｇ ｇａｇａａａｇｇｃｇ ｇａｃａｇｇｔａｔｃ ｃｇｇｔａａｇｃｇｇ
１８１ ｃａｇｇｇｔｃｇｇａ ａｃａｇｇａｇａｇｃ ｇｃａｃｇａｇｇｇａ ｇｃｔｔｃｃａｇｇｇ ｇｇａａａｃｇｃｃｔ ｇｇｔａｔｃｔｔｔａ
２４１ ｔａｇｔｃｃｔｇｔｃ ｇｇｇｔｔｔｃｇｃｃ ａｃｃｔｃｔｇａｃｔ ｔｇａｇｃｇｔｃｇａ ｔｔｔｔｔｇｔｇａｔ ｇｃｔｃｇｔｃａｇｇ
３０１ ｇｇｇｇｃｇｇａｇｃ ｃｔａｔｇｇａａａａ ａｃｇｃｃａｇｃａａ ｃｇｃｇｇｃｃｔｔｔ ｔｔａｃｇｇｔｔｃｃ ｔｇｇｃｃｔｔｔｔｇ
３６１ ｃｔｇＧＣＣｔｔｔｔ ｇｃｔｃａｃａｔｇｔ ｔｃｔｔｔｃｃｔｇｃ ｇｔｔａｔｃｃｃｃｔ ｇａｔｔｃｔｇｔｇｇ ａｔａａｃｃｇｔａｔ
４２１ ｔａｃｃｇｃｃｔｔｔ ｇａｇｔｇａｇｃｔｇ ａｔａｃｃｇｃｔｃｇ ｃｃｇｃａｇｃｃｇａ ａｃｇａｃｃｇａｇｃ ｇｃａｇｃｇａｇｔｃ
４８１ ａｇｔｇａｇｃｇａｇ ｇａａｇｃｇｇａａｇ ａｇｃｇｃｃｃａａｔ ａｃｇｃａａａｃｃｇ ｃｃｔｃｔｃｃｃｃｇ ｃｇｃｇｔｔｇｇｃｃ
５４１ ｇａｔｔｃａｔｔａａ ｔｇｃａｇｃｔｇｇｃ ａｃｇａｃａｇｇｔｔ ｔｃｃｃｇａｃｔｇｇ ａａａｇｃｇｇｇｃａ ｇｔｇａｇｃｇｃａａ
６０１ ｃｇｃａａｔｔａａｔ ｇｔｇａｇｔｔａｇｃ ｔｃａｃｔｃａｔｔａ ｇｇｃａｃｃｃｃａｇ ｇｃｔｔｔａｃａｃｔ ｔｔａｔｇｃｔｔｃｃ
６６１ ｇｇｃｔｃｇｔａｔｇ ｔｔｇｔｇｔｇｇａａ ｔｔｇｔｇａｇｃｇｇ ａｔａａｃａａｔｔｔ ｃａｃａｃａｇｇａａ ａｃａｇｃｔａｔｇａ
７２１ ｃｃａｔｇａｔｔａｃ ｇｃｃａｇａｔｔｔａ ａｔｔａａｇｇｇａｔ ｃｔｇｇｇｃｃａｃｔ ｃｃｃｔｃｔｃｔｇｃ ｇｃｇｃｔｃｇｃｔｃ
７８１ ｇｃｔｃａｃｔｇａｇ ｇｃｃｇｇｇｃｇａｃ ｃａａａｇｇｔｃｇｃ ｃｃｇａｃｇｃｃｃｇ ｇｇｃｔｔｔｇｃｃｃ ｇｇｇｃｇｇｃｃｔｃ
８４１ ａｇｔｇａｇｃｇａｇ ｃｇａｇｃｇｃｇｃａ ｇａｇａｇｇｇａｇｔ ｇｇｔｔａａｇＣＴＡ ＧＣｇｇｔａｃｃｃｇ ｔｔａｃａｔａａｃｔ
９０１ ｔａｃｇｇｔａａａｔ ｇｇｃｃｃｇｃｃｔｇ ｇｃｔｇａｃｃｇｃｃ ｃａａｃｇａｃｃｃｃ ｃｇｃｃｃａｔｔｇａ ｃｇｔｃａａｔａａｔ
９６１ ｇａｃｇｔａｔｇｔｔ ｃｃｃａｔａｇｔａａ ｃｇｃｃａａｔａｇｇ ｇａｃｔｔｔｃｃａｔ ｔｇａｃｇｔｃａａｔ ｇｇｇｔｇｇａｇｔａ
１０２１ ｔｔｔａｃｇｇｔａａ ａｃｔｇｃｃｃａｃｔ ｔｇｇｃａｇｔａｃａ ｔｃａａｇｔｇｔａｔ ｃａｔａｔｇｃｃａａ ｇｔａｃｇｃｃｃｃｃ
１０８１ ｔａｔｔｇａｃｇｔｃ ａａｔｇａｃｇｇｔａ ａａｔｇｇｃｃｃｇｃ ｃｔｇｇｃａｔｔａｔ ｇｃｃｃａｇｔａｃａ ｔｇａｃｃｔｔａｔｇ
１１４１ ｇｇａｃｔｔｔｃｃｔ ａｃｔｔｇｇｃａｇｔ ａｃａｔｃｔａｃｇｔ ａｔｔａｇｔｃａｔｃ ｇｃｔａｔｔａｃｃａ ｔｇｇｔｃｇａｇｇｔ
１２０１ ｇａｇｃｃｃｃａｃｇ ｔｔｃｔｇｃｔｔｃａ ｃｔｃｔｃｃｃｃａｔ ｃｔｃｃｃｃｃｃｃｃ ｔｃｃｃｃａｃｃｃｃ ｃａａｔｔｔｔｇｔａ
１２６１ ｔｔｔａｔｔｔａｔｔ ｔｔｔｔａａｔｔａｔ ｔｔｔｇｔｇｃａｇｃ ｇａｔｇｇｇｇｇｃｇ ｇｇｇｇｇｇｇｇｇｇ ｇｇｇｇｇｃｇｃｇｃ
１３２１ ｇｃｃａｇｇｃｇｇｇ ｇｃｇｇｇｇｃｇｇｇ ｇｃｇａｇｇｇｇｃｇ ｇｇｇｃｇｇｇｇｃｇ ａｇｇｃｇｇａｇａｇ ｇｔｇｃｇｇｃｇｇｃ
１３８１ ａｇｃｃａａｔｃａｇ ａｇｃｇｇｃｇｃｇｃ ｔｃｃｇａａａｇｔｔ ｔｃｃｔｔｔｔａｔｇ ｇｃｇａｇｇｃｇｇｃ ｇｇｃｇｇｃｇｇｃｇ
１４４１ ｇｃｃｃｔａｔａａａ ａａｇｃｇａａｇｃｇ ｃｇｃｇｇｃｇｇｇｃ ｇｇｇａｇｔｃｇｃｔ ｇｃｇａｃｇｃｔｇｃ ｃｔｔｃｇｃｃｃｃｇ
１５０１ ｔｇｃｃｃｃｇｃｔｃ ｃｇｃｃｇｃｃｇｃｃ ｔｃｇｃｇｃｃｇｃｃ ｃｇｃｃｃｃｇｇｃｔ ｃｔｇａｃｔｇａｃｃ ｇｃｇｔｔａｃｔｃｃ
１５６１ ｃａｃａｇｇｔｇａｇ ｃｇｇｇｃｇｇｇａｃ ｇｇｃｃｃｔｔｃｔｃ ｃｔｃｃｇｇｇｃｔｇ ｔａａｔｔａｇｃｔｇ ａｇｃａａｇａｇｇｔ
１６２１ ａａｇｇｇｔｔｔａａ ｇｇｇａｔｇｇｔｔｇ ｇｔｔｇｇｔｇｇｇｇ ｔａｔｔａａｔｇｔｔ ｔａａｔｔａｃｃｔｇ ｇａｇｃａｃｃｔｇｃ
１６８１ ｃｔｇａａａｔｃａｃ ｔｔｔｔｔｔｔｃａｇ ａｃｇｃｇｔｇｃｃａ ｃｃａｔｇａｃｇｇａ ｔｇａｔａａａｇａｔ ｇｔｔｃｔｇａｇａｇ
１７４１ ａｔｇｔｃｔｇｇｔｔ ｃｇｇａｃｇｃａｔｔ ｃｃｔａｃｃｔｇｃｔ ｔｃａｃｇｃｔｇｔａ ｃｃａａｇａｔｇａｇ ａｔｔａｃｇｇａｇａ
１８０１ ｇｇｇａｇｇｃｔｇａ ａｃｃｃｔａｃｔａｃ ｃｔｇｃｔｇｃｔｇｃ ｃａａｇａｇｔｃａｇ ｃｔａｃｃｔｇａｃｔ ｃｔｇｇｔｇａｃｃｇ
１８６１ ａｃａａｇｇｔｃａａ ｇａａｇｃａｃｔｔｃ ｃａｇａａｇｇｔｃａ ｔｇａｇｇｃａｇｇａ ｇｇａｃｇｔｇｔｃｔ ｇａａａｔｃｔｇｇｔ
１９２１ ｔｃｇａｇｔａｃｇａ ａｇｇａａｃｔｃｃｔ ｃｔｇａａｇｔｇｇｃ ａｃｔａｃｃｃｃａｔ ｃｇｇｔｃｔｇｃｔｇ ｔｔｃｇａｃｃｔｇｃ
１９８１ ｔｇｇｃｔｔｃｃａｇ ｃｔｃｔｇｃｃｃｔｇ ｃｃｔｔｇｇａａｃａ ｔｃａｃｃｇｔｃｃａ ｃｔｔｃａａｇａｇｃ ｔｔｃｃｃａｇａｇａ
２０４１ ａｇｇａｃｃｔｇｃｔ ｇｃａｃｔｇｃｃｃｔ ｔｃａａａｇｇａｃｇ ｃｔｇｔｇｇａｇｇｃ ｃｃａｃｔｔｃａｔｇ ｔｃｃｔｇｃａｔｇａ
２１０１ ａｇｇａａｇｃｔｇａ ｃｇｃｃｃｔｇａａｇ ｃａｃａａｇｔｃｃｃ ａｇｇｔｃａｔｃａａ ｃｇａａａｔｇｃａｇ ａａｇａａｇｇａｃｃ
２１６１ ａｃａａｇｃａｇｃｔ ｇｔｇｇａｔｇｇｇｔ ｃｔｇｃａａａａｃｇ ａｃｃｇｃｔｔｃｇａ ｃｃａｇｔｔｃｔｇｇ ｇｃｔａｔｃａａｃｃ
２２２１ ｇｔａａｇｃｔｇａｔ ｇｇａｇｔａｃｃｃｔ ｃｃｔｇａｇｇａａａ ａｃｇｇｃｔｔｃｃｇ ｃｔａｃａｔｃｃｃｃ ｔｔｃｃｇｔａｔｃｔ
２２８１ ａｃｃａｇａｃｃａｃ ｔａｃｃｇａａａｇｇ ｃｃｃｔｔｃａｔｃｃ ａｇａａｇｃｔｇｔｔ ｃａｇａｃｃａｇｔｇ ｇｃｔｇｃｃｇａｃｇ
２３４１ ｇｔｃａｇｃｔｇｃａ ｃａｃｔｃｔｇｇｇｃ ｇａｃｃｔｇｃｔｇａ ｇｇｇａｇｇｔｃｔｇ ｃｃｃａｔｃａｇｃｔ ｇｔｇｇｃｔｃｃｔｇ
２４０１ ａｇｇａｃｇｇａｇａ ａａａｇａｇｇａｇｃ ｃａｇｇｔｃａｔｇａ ｔｃｃａｃｇｇａａｔ ｃｇａｇｃｃａａｔｇ ｃｔｇｇａａａｃｃｃ
２４６１ ｃｔｃｔｇｃａａｔｇ ｇｃｔｇｔｃｃｇａａ ｃａｃｃｔｃｔｃｃｔ ａｃｃｃａｇａｃａａ ｃｔｔｃｃｔｃｃａｃ ａｔｔｔｃｃａｔｔｇ
２５２１ ｔｃｃｃｃｃａａｃｃ ｔａｃｇｇａｃｔａａ ａａｇｃｔｔａｔｃｇ ｃｇａａｃａａａｃａ ｃｃａｔｔｇｔｃａｃ ａｃｔｃｃａａｃｔａ
２５８１ ｇｔａｔａａｔｃａａ ｃｃｔｃｔｇｇａｔｔ ａｃａａａａｔｔｔｇ ｔｇａａａｇａｔｔｇ ａｃｔｇｇｔａｔｔｃ ｔｔａａｃｔａｔｇｔ
２６４１ ｔｇｃｔｃｃｔｔｔｔ ａｃｇｃｔａｔｇｔｇ ｇａｔａｃｇｃｔｇｃ ｔｔｔａａｔｇｃｃｔ ｔｔｇｔａｔｃａｔｇ ｃｔａｔｔｇｃｔｔｃ
２７０１ ｃｃｇｔａｔｇｇｃｔ ｔｔｃａｔｔｔｔｃｔ ｃｃｔｃｃｔｔｇｔａ ｔａａａｔｃｃｔｇｇ ｔｔａｇｔｔｃｔｔｇ ｃｃａｃｇｇｃｇｇａ
２７６１ ａｃｔｃａｔｃｇｃｃ ｇｃｃｔｇｃｃｔｔｇ ｃｃｃｇｃｔｇｃｔｇ ｇａｃａｇｇｇｇｃｔ ｃｇｇｃｔｇｔｔｇｇ ｇｃａｃｔｇａｃａａ
２８２１ ｔｔｃｃｇｔｇｇｔｇ ｃｃｔｃｇａｃｔｇｔ ｇｃｃｔｔｃｔａｇｔ ｔｇｃｃａｇｃｃａｔ ｃｔｇｔｔｇｔｔｔｇ ｃｃｃｃｔｃｃｃｃｃ
２８８１ ｇｔｇｃｃｔｔｃｃｔ ｔｇａｃｃｃｔｇｇａ ａｇｇｔｇｃｃａｃｔ ｃｃｃａｃｔｇｔｃｃ ｔｔｔｃｃｔａａｔａ ａａａｔｇａｇｇａａ
２９４１ ａｔｔｇｃａｔｃｇｃ ａｔｔｇｔｃｔｇａｇ ｔａｇｇｔｇｔｃａｔ ｔｃｔａｔｔｃｔｇｇ ｇｇｇｇｔｇｇｇｇｔ ｇｇｇｇｃａｇｇａｃ
３００１ ａｇｃａａｇｇｇｇｇ ａｇｇａｔｔｇｇｇａ ａｇａｃａａｔａｇｃ ａｇｇｃａｔｇｃｔｇ ｇｇｇａａｇｇａａｃ ｃｃｃｔａｇｔｇａｔ
３０６１ ｇｇａｇｔｔｇｇｃｃ ａｃｔｃｃｃｔｃｔｃ ｔｇｃｇｃｇｃｔｃｇ ｃｔｃｇｃｔｃａｃｔ ｇａｇｇｃｃｇｇｇｃ ｇａｃｃａａａｇｇｔ
３１２１ ｃｇｃｃｃｇａｃｇｃ ｃｃｇｇｇｃｔｔｔｇ ｃｃｃｇｇｇｃｇｇｃ ｃｔｃａｇｔｇａｇｃ ｇａｇｃｇａｇｃｇｃ ｇｃａｇｃｃｔｔａａ
３１８１ ｔｔａａｃｃｔａａｔ ｔｃａｃｔｇｇｃｃｇ ｔｃｇｔｔｔｔａｃａ ａｃｇｔｃｇｔｇａｃ ｔｇｇｇａａａａｃｃ ｃｔｇｇｃｇｔｔａｃ
３２４１ ｃｃａａｃｔｔａａｔ ｃｇｃｃｔｔｇｃａｇ ｃａｃａｔｃｃｃｃｃ ｔｔｔｃｇｃｃａｇｃ ｔｇｇｃｇｔａａｔａ ｇｃｇａａｇａｇｇｃ
３３０１ ｃｃｇｃａｃｃｇａｔ ｃｇｃｃｃｔｔｃｃｃ ａａｃａｇｔｔｇｃｇ ｃａｇｃｃｔｇａａｔ ｇｇｃｇａａｔｇｇｇ ａｃｇｃｇｃｃｃｔｇ
３３６１ ｔａｇｃｇｇｃｇｃａ ｔｔａａｇｃｇｃｇｇ ｃｇｇｇｔｇｔｇｇｔ ｇｇｔｔａｃｇｃｇｃ ａｇｃｇｔｇａｃｃｇ ｃｔａｃａｃｔｔｇｃ
３４２１ ｃａｇｃｇｃｃｃｔａ ｇｃｇｃｃｃｇｃｔｃ ｃｔｔｔｃｇｃｔｔｔ ｃｔｔｃｃｃｔｔｃｃ ｔｔｔｃｔｃｇｃｃａ ｃｇｔｔｃｇｃｃｇｇ
３４８１ ｃｔｔｔｃｃｃｃｇｔ ｃａａｇｃｔｃｔａａ ａｔｃｇｇｇｇｇｃｔ ｃｃｃｔｔｔａｇｇｇ ｔｔｃｃｇａｔｔｔａ ｇｔｇｃｔｔｔａｃｇ
３５４１ ｇｃａｃｃｔｃｇａｃ ｃｃｃａａａａａａｃ ｔｔｇａｔｔａｇｇｇ ｔｇａｔｇｇｔｔｃａ ｃｇｔａｇｔｇｇｇｃ ｃａｔｃｇｃｃｃｔｇ
３６０１ ａｔａｇａｃｇｇｔｔ ｔｔｔｃｇｃｃｃｔｔ ｔｇａｃｇｔｔｇｇａ ｇｔｃｃａｃｇｔｔｃ ｔｔｔａａｔａｇｔｇ ｇａｃｔｃｔｔｇｔｔ
３６６１ ｃｃａａａｃｔｇｇａ ａｃａａｃａｃｔｃａ ａｃｃｃｔａｔｃｔｃ ｇｇｔｃｔａｔｔｃｔ ｔｔｔｇａｔｔｔａｔ ａａｇｇｇａｔｔｔｔ
３７２１ ｇｃｃｇａｔｔｔｃｇ ｇｃｃｔａｔｔｇｇｔ ｔａａａａａａｔｇａ ｇｃｔｇａｔｔｔａａ ｃａａａａａｔｔｔａ ａｃｇｃｇａａｔｔｔ
３７８１ ｔａａｃａａａａｔａ ｔｔａａｃｇｃｔｔａ ｃａａｔｔｔａｇｇｔ ｇｇｃａｃｔｔｔｔｃ ｇｇｇｇａａａｔｇｔ ｇｃｇｃｇｇａａｃｃ
３８４１ ｃｃｔａｔｔｔｇｔｔ ｔａｔｔｔｔｔｃｔａ ａａｔａｃａｔｔｃａ ａａｔａｔｇｔａｔｃ ｃｇｃｔｃａｔｇａｇ ａｃａａｔａａｃｃｃ
３９０１ ｔｇａｔａａａｔｇｃ ｔｔｃａａｔａａｔａ ｔｔｇａａａａａｇｇ ａａｇａｇｔａｔｇａ ｇｔａｔｔｃａａｃａ ｔｔｔｃｃｇｔｇｔｃ
３９６１ ｇｃｃｃｔｔａｔｔｃ ｃｃｔｔｔｔｔｔｇｃ ｇｇｃａｔｔｔｔｇｃ ｃｔｔｃｃｔｇｔｔｔ ｔｔｇｃｔｃａｃｃｃ ａｇａａａｃｇｃｔｇ
４０２１ ｇｔｇａａａｇｔａａ ａａｇａｔｇｃｔｇａ ａｇａｔｃａｇｔｔｇ ｇｇｔｇｃａｃｇａｇ ｔｇｇｇｔｔａｃａｔ ｃｇａａｃｔｇｇａｔ
４０８１ ｃｔｃａａＣＡＧＣｇ ｇｔａａｇａｔｃｃｔ ｔｇａｇａｇｔｔｔｔ ｃｇｃｃｃｃｇａａｇ ａａｃｇｔｔｔｔｃｃ ａａｔｇａｔｇａｇｃ
４１４１ ａｃｔｔｔｔａａａｇ ｔｔｃｔｇｃｔａｔｇ ｔｇｇｃｇｃｇｇｔａ ｔｔａｔｃｃｃｇｔａ ｔｔｇａｃｇｃｃｇｇ ｇｃａａｇａｇｃａａ
４２０１ ｃｔｃｇｇｔｃｇｃｃ ｇｃａｔａｃａｃｔａ ｔｔｃｔｃａｇａａｔ ｇａｃｔｔｇｇｔｔｇ ａｇｔａｃｔｃａｃｃ ａｇｔｃａｃａｇａａ
４２６１ ａａｇｃａｔｃｔｔａ ｃｇｇａｔｇｇｃａｔ ｇａｃａｇｔａａｇａ ｇａａｔｔａｔｇｃａ ｇｔｇｃｔｇｃｃａｔ ａａｃｃａｔｇａｇｔ
４３２１ ｇａｔａａｃａｃｔｇ ｃｇｇｃｃａａｃｔｔ ａｃｔｔｃｔｇａｃａ ａｃｇａｔｃｇｇａｇ ｇａｃｃｇａａｇｇａ ｇｃｔａａｃｃｇｃｔ
４３８１ ｔｔｔｔｔｇｃａｃａ ａｃａｔｇｇｇｇｇａ ｔｃａｔｇｔａａｃｔ ｃｇｃｃｔｔｇａｔｃ ｇｔｔｇｇｇａａｃｃ ｇｇａｇｃｔｇａａｔ
４４４１ ｇａａｇｃｃａｔａｃ ｃａａａｃｇａｃｇａ ｇｃｇｔｇａｃａｃｃ ａｃｇａｔｇｃｃｔｇ ｔａｇｃａａｔｇｇｃ ａａｃａａｃｇｔｔｇ
４５０１ ｃｇｃａａａｃｔａｔ ｔａａｃｔｇｇｃｇａ ａｃｔａｃｔｔａｃｔ ｃｔａｇｃｔｔｃｃｃ ｇｇｃａａｃａａｔｔ ａａｔａｇａｃｔｇｇ
４５６１ ａｔｇｇａｇｇｃｇｇ ａｔａａａｇｔｔｇｃ ａｇｇａｃｃａｃｔｔ ｃｔｇｃｇｃｔｃｇｇ ｃｃｃｔｔｃｃｇｇｃ ｔｇｇｃｔｇｇｔｔｔ
４６２１ ａｔｔｇｃｔｇａｔａ ａａｔｃｔｇｇａｇｃ ｃｇｇｔｇａｇｃｇｔ ｇｇｇｔｃｔｃｇｃｇ ｇｔａｔｃａｔｔｇｃ ａｇｃａｃｔｇｇｇｇ
４６８１ ｃｃａｇａｔｇｇｔａ ａｇｃｃｃｔｃｃｃｇ ｔａｔｃｇｔａｇｔｔ ａｔｃｔａｃａｃｇａ ｃｇｇｇｇａｇｔｃａ ｇｇｃａａｃｔａｔｇ
４７４１ ｇａｔｇａａｃｇａａ ａｔａｇａｃａｇａｔ ｃｇｃｔｇａｇａｔａ ｇｇｔｇｃｃｔｃａｃ ｔｇａｔｔａａｇｃａ ｔｔｇｇｔａａｃｔｇ
４８０１ ｔｃａｇａｃｃａａｇ ｔｔｔａｃｔｃａｔａ ｔａｔａｃｔｔｔａｇ ａｔｔｇａｔｔｔａａ ａａｃｔｔｃａｔｔｔ ｔｔａａｔｔｔａａａ
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５１６１ ｇｃａｃｃｇｃｃｔａ ｃａｔａｃｃｔｃｇｃ ｔｃｔｇｃｔａａｔｃ ｃｔｇｔｔａｃｃａｇ ｔｇｇｃｔｇｃｔｇｃ ｃａｇｔｇｇｃｇａｔ
５２２１ ａａｇｔｃｇｔｇｔｃ ｔｔａｃｃｇｇ（配列番号１２）
ＬＯＣＵＳ ｓｃＡＡＶ－ＣｂｈＭ－Ｃｉｓｄ２－ｍｉＲ１２２ ４８１７ ｂｐ ｄｓ－ＤＮＡ環状
ＤＥＦＩＮＩＴＩＯＮ ．
ＦＥＡＴＵＲＥＳ Ｌｏｃａｔｉｏｎ／Ｑｕａｌｉｆｉｅｒｓ
ＳＴＳ １２９４．．１３５４
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２ ＳＴＳ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ９４１．．９４６
／ｌａｂｅｌ＝“Ｋｏｚａｋ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｐｏｌｙＡ＿ｓｉｇｎａｌ １６４４．．１８５８
／ｌａｂｅｌ＝“ＢＧＨ＼ｐＡ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １２６１．．１２８３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１５５リバース”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ＣＤＳ ２７５１．．３６１１
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｍｐ－Ｒ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８００．．９３２
／ｌａｂｅｌ＝“ステムループ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ６５２．．７６０
／ｌａｂｅｌ＝“ステムループ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １６６６．．１６８１
／ｌａｂｅｌ＝“ｂＧｈｐＡ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １１２４．．１１４８
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ６７”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ７２２．．７３６
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１８４＿２”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ９３５．．９３５
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １４８１．．１５０８
／ｌａｂｅｌ＝“ＷＰＲＥ Ｆ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｒｅｐｅａｔ＿ｒｅｇｉｏｎ １．．１０６
／ｌａｂｅｌ＝“５’－ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １８２３．．１８４６
／ｌａｂｅｌ＝“ＩＴＲ配列のためのｏＭＦ２５３ Ｆ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｐｒｏｍｏｔｅｒ ４２８．．７０５
／ｌａｂｅｌ＝“ニワトリβ－アクチンプロモーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８４３．．９３４
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ ３’クローニング部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ７３５．．７５５
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ２０３”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ９１６．．９３４
／ｌａｂｅｌ＝“ハイブリッドイントロンの３’端部”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｅｘｏｎ １０５０．．１２６４
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ＣＤＳ ９４７．．１３５４
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２ ＣＤＳ（ＣＤＧＳＨ鉄－硫黄ドメイン含有タンパク質２）”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １２５８．．１２８１
／ｌａｂｅｌ＝“フォワードｏＭＦ１５２”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ９３５．．９４０
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １０５８．．１１２６
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２ ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｅｎｈａｎｃｅｒ １２３．．４２６
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＭＶエンハンサー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７１１．．１７２６
／ｌａｂｅｌ＝“ＢｈｊＰａ Ｒ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ７０６．．９３４
／ｌａｂｅｌ＝“ハイブリッドイントロン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２３０．．３２８
／ｌａｂｅｌ＝“ステムループ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １２１９．．１２４３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ６８”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １１７．．１２１
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ ５’クローニング部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｒｅｐｅａｔ＿ｒｅｇｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ（１８５９．．１９８８）
／ｌａｂｅｌ＝“３’ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ７１９．．７３３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１８６＿２”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １５３１．．１５５５
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ８０”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １１７１．．１１９５
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１５４－フォワード”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｅｘｏｎ ９４７．．１０４９
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １８５９．．１８８０
／ｌａｂｅｌ＝“Ｄループ（ＭｃＣａｒｔｙ ２００４に基づく末端分離部位）”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １３９７．．１６４３
／ｌａｂｅｌ＝“正確なＷＰＲＥ３”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １２３．．９３４
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｅｘｏｎ １２６５．．１３５４
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １８５９．．１８８２
／ｌａｂｅｌ＝“５’ＩＴＲを欠失”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １３８２．．１３８９
／ｌａｂｅｌ＝“シード領域”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １３６１．．１３９０
／ｌａｂｅｌ＝“ｍＩＲ１２２標的部位ｍ８”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ＯＲＩＧＩＮ
１ ｃｔｇｃｇｃｇｃｔｃ ｇｃｔｃｇｃｔｃａｃ ｔｇａｇｇｃｃｇｇｇ ｃｇａｃｃａａａｇｇ ｔｃｇｃｃｃｇａｃｇ ｃｃｃｇｇｇｃｔｔｔ
６１ ｇｃｃｃｇｇｇｃｇｇ ｃｃｔｃａｇｔｇａｇ ｃｇａｇｃｇａｇｃｇ ｃｇｃａｇａｇａｇｇ ｇａｇｔｇｇｔｔａａ ｇｃｔａｇｃｇｇｔａ
１２１ ｃｃｃｇｔｔａｃａｔ ａａｃｔｔａｃｇｇｔ ａａａｔｇｇｃｃｃｇ ｃｃｔｇｇｃｔｇａｃ ｃｇｃｃｃａａｃｇａ ｃｃｃｃｃｇｃｃｃａ
１８１ ｔｔｇａｃｇｔｃａａ ｔａａｔｇａｃｇｔａ ｔｇｔｔｃｃｃａｔａ ｇｔａａｃｇｃｃａａ ｔａｇｇｇａｃｔｔｔ ｃｃａｔｔｇａｃｇｔ
２４１ ｃａａｔｇｇｇｔｇｇ ａｇｔａｔｔｔａｃｇ ｇｔａａａｃｔｇｃｃ ｃａｃｔｔｇｇｃａｇ ｔａｃａｔｃａａｇｔ ｇｔａｔｃａｔａｔｇ
３０１ ｃｃａａｇｔａｃｇｃ ｃｃｃｃｔａｔｔｇａ ｃｇｔｃａａｔｇａｃ ｇｇｔａａａｔｇｇｃ ｃｃｇｃｃｔｇｇｃａ ｔｔａｔｇｃｃｃａｇ
３６１ ｔａｃａｔｇａｃｃｔ ｔａｔｇｇｇａｃｔｔ ｔｃｃｔａｃｔｔｇｇ ｃａｇｔａｃａｔｃｔ ａｃｇｔａｔｔａｇｔ ｃａｔｃｇｃｔａｔｔ
４２１ ａｃｃａｔｇｇｔｃｇ ａｇｇｔｇａｇｃｃｃ ｃａｃｇｔｔｃｔｇｃ ｔｔｃａｃｔｃｔｃｃ ｃｃａｔｃｔｃｃｃｃ ｃｃｃｃｔｃｃｃｃａ
４８１ ｃｃｃｃｃａａｔｔｔ ｔｇｔａｔｔｔａｔｔ ｔａｔｔｔｔｔｔａａ ｔｔａｔｔｔｔｇｔｇ ｃａｇｃｇａｔｇｇｇ ｇｇｃｇｇｇｇｇｇｇ
５４１ ｇｇｇｇｇｇｇｇｇｃ ｇｃｇｃｇｃｃａｇｇ ｃｇｇｇｇｃｇｇｇｇ ｃｇｇｇｇｃｇａｇｇ ｇｇｃｇｇｇｇｃｇｇ ｇｇｃｇａｇｇｃｇｇ
６０１ ａｇａｇｇｔｇｃｇｇ ｃｇｇｃａｇｃｃａａ ｔｃａｇａｇｃｇｇｃ ｇｃｇｃｔｃｃｇａａ ａｇｔｔｔｃｃｔｔｔ ｔａｔｇｇｃｇａｇｇ
６６１ ｃｇｇｃｇｇｃｇｇｃ ｇｇｃｇｇｃｃｃｔａ ｔａａａａａｇｃｇａ ａｇｃｇｃｇｃｇｇｃ ｇｇｇｃｇｇｇａｇｔ ｃｇｃｔｇｃｇａｃｇ
７２１ ｃｔｇｃｃｔｔｃｇｃ ｃｃｃｇｔｇｃｃｃｃ ｇｃｔｃｃｇｃｃｇｃ ｃｇｃｃｔｃｇｃｇｃ ｃｇｃｃｃｇｃｃｃｃ ｇｇｃｔｃｔｇａｃｔ
７８１ ｇａｃｃｇｃｇｔｔａ ｃｔｃｃｃａｃａｇｇ ｔｇａｇｃｇｇｇｃｇ ｇｇａｃｇｇｃｃｃｔ ｔｃｔｃｃｔｃｃｇｇ ｇｃｔｇｔａａｔｔａ
８４１ ｇｃｔｇａｇｃａａｇ ａｇｇｔａａｇｇｇｔ ｔｔａａｇｇｇａｔｇ ｇｔｔｇｇｔｔｇｇｔ ｇｇｇｇｔａｔｔａａ ｔｇｔｔｔａａｔｔａ
９０１ ｃｃｔｇｇａｇｃａｃ ｃｔｇｃｃｔｇａａａ ｔｃａｃｔｔｔｔｔｔ ｔｃａｇａｃｇｃｇｔ ｇｃｃａｃｃａｔｇｇ ｔｃｃｔｇｇａｃａｇ
９６１ ｃｇｔｇｇｃｃｃｇｃ ａｔｃｇｔｇａａｇｇ ｔｇｃａｇｃｔｇｃｃ ｃｇｃｃｔａｃｃｔｃ ａａｇｃａｇｃｔｃｃ ｃｇｇｔｃｃｃｃｇａ
１０２１ ｃａｇｃａｔｃａｃｃ ｇｇｇｔｔｃｇｃｃｃ ｇｃｃｔｃａｃａｇｔ ｔｔｃａｇａｃｔｇｇ ｃｔｃｃｇｃｃｔａｃ ｔｇｃｃｃｔｔｃｃｔ
１０８１ ｃｇｇｇｇｔａｃｔｔ ｇｃｇｃｔｔｃｔｇｇ ｇｃｔａｃｃｔｃｇｃ ａｇｔｇｃｇｃｃｃａ ｔｔｃｔｔｃｃｃａａ ａｇａａｇａａｇｃａ
１１４１ ａｃａｇａａｇｇａｔ ａｇｃｔｔｇａｔｃａ ａｔｃｔｔａａｇａｔ ａｃａａａａｇｇａａ ａａｔｃｃｃａａｇｇ ｔｇｇｔｇａａｔｇａ
１２０１ ｇａｔａａａｃａｔｔ ｇａａｇａｔｃｔｇｔ ｇｔｃｔｃａｃｃａａ ａｇｃａｇｃｔｔａｔ ｔｇｔａｇｇｔｇｃｔ ｇｇｃｇｇｔｃｃａａ
１２６１ ｇａｃｇｔｔｔｃｃｔ ｇｃｃｔｇｔｇａｔｇ ｇａｔｃｃｃａｔａａ ｔａａｇｃａｔａａｔ ｇａａｔｔｇａｃａｇ ｇｃｇａｔａａｃｇｔ
１３２１ ｇｇｇｔｃｃｔｃｔｃ ａｔｃｃｔｇａａｇａ ａｇａａａｇａａｇｔ ａｔａｇａａｇｃｔｔ ａｔｃｇｃｇａａｃａ ａａｃａｃｃａｔｔｇ
１３８１ ｔｃａｃａｃｔｃｃａ ａｃｔａｇｔａｔａａ ｔｃａａｃｃｔｃｔｇ ｇａｔｔａｃａａａａ ｔｔｔｇｔｇａａａｇ ａｔｔｇａｃｔｇｇｔ
１４４１ ａｔｔｃｔｔａａｃｔ ａｔｇｔｔｇｃｔｃｃ ｔｔｔｔａｃｇｃｔａ ｔｇｔｇｇａｔａｃｇ ｃｔｇｃｔｔｔａａｔ ｇｃｃｔｔｔｇｔａｔ
１５０１ ｃａｔｇｃｔａｔｔｇ ｃｔｔｃｃｃｇｔａｔ ｇｇｃｔｔｔｃａｔｔ ｔｔｃｔｃｃｔｃｃｔ ｔｇｔａｔａａａｔｃ ｃｔｇｇｔｔａｇｔｔ
１５６１ ｃｔｔｇｃｃａｃｇｇ ｃｇｇａａｃｔｃａｔ ｃｇｃｃｇｃｃｔｇｃ ｃｔｔｇｃｃｃｇｃｔ ｇｃｔｇｇａｃａｇｇ ｇｇｃｔｃｇｇｃｔｇ
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２７０１ ｔｇａｇａｃａａｔａ ａｃｃｃｔｇａｔａａ ａｔｇｃｔｔｃａａｔ ａａｔａｔｔｇａａａ ａａｇｇａａｇａｇｔ ａｔｇａｇｔａｔｔｃ
２７６１ ａａｃａｔｔｔｃｃｇ ｔｇｔｃｇｃｃｃｔｔ ａｔｔｃｃｃｔｔｔｔ ｔｔｇｃｇｇｃａｔｔ ｔｔｇｃｃｔｔｃｃｔ ｇｔｔｔｔｔｇｃｔｃ
２８２１ ａｃｃｃａｇａａａｃ ｇｃｔｇｇｔｇａａａ ｇｔａａａａｇａｔｇ ｃｔｇａａｇａｔｃａ ｇｔｔｇｇｇｔｇｃａ ｃｇａｇｔｇｇｇｔｔ
２８８１ ａｃａｔｃｇａａｃｔ ｇｇａｔｃｔｃａａｃ ａｇｃｇｇｔａａｇａ ｔｃｃｔｔｇａｇａｇ ｔｔｔｔｃｇｃｃｃｃ ｇａａｇａａｃｇｔｔ
２９４１ ｔｔｃｃａａｔｇａｔ ｇａｇｃａｃｔｔｔｔ ａａａｇｔｔｃｔｇｃ ｔａｔｇｔｇｇｃｇｃ ｇｇｔａｔｔａｔｃｃ ｃｇｔａｔｔｇａｃｇ
３００１ ｃｃｇｇｇｃａａｇａ ｇｃａａｃｔｃｇｇｔ ｃｇｃｃｇｃａｔａｃ ａｃｔａｔｔｃｔｃａ ｇａａｔｇａｃｔｔｇ ｇｔｔｇａｇｔａｃｔ
３０６１ ｃａｃｃａｇｔｃａｃ ａｇａａａａｇｃａｔ ｃｔｔａｃｇｇａｔｇ ｇｃａｔｇａｃａｇｔ ａａｇａｇａａｔｔａ ｔｇｃａｇｔｇｃｔｇ
３１２１ ｃｃａｔａａｃｃａｔ ｇａｇｔｇａｔａａｃ ａｃｔｇｃｇｇｃｃａ ａｃｔｔａｃｔｔｃｔ ｇａｃａａｃｇａｔｃ ｇｇａｇｇａｃｃｇａ
３１８１ ａｇｇａｇｃｔａａｃ ｃｇｃｔｔｔｔｔｔｇ ｃａｃａａｃａｔｇｇ ｇｇｇａｔｃａｔｇｔ ａａｃｔｃｇｃｃｔｔ ｇａｔｃｇｔｔｇｇｇ
３２４１ ａａｃｃｇｇａｇｃｔ ｇａａｔｇａａｇｃｃ ａｔａｃｃａａａｃｇ ａｃｇａｇｃｇｔｇａ ｃａｃｃａｃｇａｔｇ ｃｃｔｇｔａｇｃａａ
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３４２１ ｃｇｇｃｔｇｇｃｔｇ ｇｔｔｔａｔｔｇｃｔ ｇａｔａａａｔｃｔｇ ｇａｇｃｃｇｇｔｇａ ｇｃｇｔｇｇｇｔｃｔ ｃｇｃｇｇｔａｔｃａ
３４８１ ｔｔｇｃａｇｃａｃｔ ｇｇｇｇｃｃａｇａｔ ｇｇｔａａｇｃｃｃｔ ｃｃｃｇｔａｔｃｇｔ ａｇｔｔａｔｃｔａｃ ａｃｇａｃｇｇｇｇａ
３５４１ ｇｔｃａｇｇｃａａｃ ｔａｔｇｇａｔｇａａ ｃｇａａａｔａｇａｃ ａｇａｔｃｇｃｔｇａ ｇａｔａｇｇｔｇｃｃ ｔｃａｃｔｇａｔｔａ
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３７２１ ｃｔｔａａｃｇｔｇａ ｇｔｔｔｔｃｇｔｔｃ ｃａｃｔｇａｇｃｇｔ ｃａｇａｃｃｃｃｇｔ ａｇａａａａｇａｔｃ ａａａｇｇａｔｃｔｔ
３７８１ ｃｔｔｇａｇａｔｃｃ ｔｔｔｔｔｔｔｃｔｇ ｃｇｃｇｔａａｔｃｔ ｇｃｔｇｃｔｔｇｃａ ａａｃａａａａａａａ ｃｃａｃｃｇｃｔａｃ
３８４１ ｃａｇｃｇｇｔｇｇｔ ｔｔｇｔｔｔｇｃｃｇ ｇａｔｃａａｇａｇｃ ｔａｃｃａａｃｔｃｔ ｔｔｔｔｃｃｇａａｇ ｇｔａａｃｔｇｇｃｔ
３９０１ ｔｃａｇｃａｇａｇｃ ｇｃａｇａｔａｃｃａ ａａｔａｃｔｇｔｔｃ ｔｔｃｔａｇｔｇｔａ ｇｃｃｇｔａｇｔｔａ ｇｇｃｃａｃｃａｃｔ
３９６１ ｔｃａａｇａａｃｔｃ ｔｇｔａｇｃａｃｃｇ ｃｃｔａｃａｔａｃｃ ｔｃｇｃｔｃｔｇｃｔ ａａｔｃｃｔｇｔｔａ ｃｃａｇｔｇｇｃｔｇ
４０２１ ｃｔｇｃｃａｇｔｇｇ ｃｇａｔａａｇｔｃｇ ｔｇｔｃｔｔａｃｃｇ ｇｇｔｔｇｇａｃｔｃ ａａｇａｃｇａｔａｇ ｔｔａｃｃｇｇａｔａ
４０８１ ａｇｇｃｇｃａｇｃｇ ｇｔｃｇｇｇｃｔｇａ ａｃｇｇｇｇｇｇｔｔ ｃｇｔｇｃａｃａｃａ ｇｃｃｃａｇｃｔｔｇ ｇａｇｃｇａａｃｇａ
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４２６１ ａｇｃｔｔｃｃａｇｇ ｇｇｇａａａｃｇｃｃ ｔｇｇｔａｔｃｔｔｔ ａｔａｇｔｃｃｔｇｔ ｃｇｇｇｔｔｔｃｇｃ ｃａｃｃｔｃｔｇａｃ
４３２１ ｔｔｇａｇｃｇｔｃｇ ａｔｔｔｔｔｇｔｇａ ｔｇｃｔｃｇｔｃａｇ ｇｇｇｇｇｃｇｇａｇ ｃｃｔａｔｇｇａａａ ａａｃｇｃｃａｇｃａ
４３８１ ａｃｇｃｇｇｃｃｔｔ ｔｔｔａｃｇｇｔｔｃ ｃｔｇｇｃｃｔｔｔｔ ｇｃｔｇｇｃｃｔｔｔ ｔｇｃｔｃａｃａｔｇ ｔｔｃｔｔｔｃｃｔｇ
４４４１ ｃｇｔｔａｔｃｃｃｃ ｔｇａｔｔｃｔｇｔｇ ｇａｔａａｃｃｇｔａ ｔｔａｃｃｇｃｃｔｔ ｔｇａｇｔｇａｇｃｔ ｇａｔａｃｃｇｃｔｃ
４５０１ ｇｃｃｇｃａｇｃｃｇ ａａｃｇａｃｃｇａｇ ｃｇｃａｇｃｇａｇｔ ｃａｇｔｇａｇｃｇａ ｇｇａａｇｃｇｇａａ ｇａｇｃｇｃｃｃａａ
４５６１ ｔａｃｇｃａａａｃｃ ｇｃｃｔｃｔｃｃｃｃ ｇｃｇｃｇｔｔｇｇｃ ｃｇａｔｔｃａｔｔａ ａｔｇｃａｇｃｔｇｇ ｃａｃｇａｃａｇｇｔ
４６２１ ｔｔｃｃｃｇａｃｔｇ ｇａａａｇｃｇｇｇｃ ａｇｔｇａｇｃｇｃａ ａｃｇｃａａｔｔａａ ｔｇｔｇａｇｔｔａｇ ｃｔｃａｃｔｃａｔｔ
４６８１ ａｇｇｃａｃｃｃｃａ ｇｇｃｔｔｔａｃａｃ ｔｔｔａｔｇｃｔｔｃ ｃｇｇｃｔｃｇｔａｔ ｇｔｔｇｔｇｔｇｇａ ａｔｔｇｔｇａｇｃｇ
４７４１ ｇａｔａａｃａａｔｔ ｔｃａｃａｃａｇｇａ ａａｃａｇｃｔａｔｇ ａｃｃａｔｇａｔｔａ ｃｇｃｃａｇａｔｔｔ ａａｔｔａａｇｇｇａ
４８０１ ｔｃｔｇｇｇｃｃａｃ ｔｃｃｃｔｃｔ（配列番号１３）
ＬＯＣＵＳ ｓｃＡＡＶ－ＣｂｈＭ－ＧＦＰ－ｍｉＲ１２２－８ ５１２９ ｂｐ ｄｓ－ＤＮＡ環状
ＤＥＦＩＮＩＴＩＯＮ
ＦＥＡＴＵＲＥＳ Ｌｏｃａｔｉｏｎ／Ｑｕａｌｉｆｉｅｒｓ
ＣＤＳ ３８２９．．４６８９
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｍｐ－Ｒ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２４６０．．２４６７
／ｌａｂｅｌ＝“シード領域”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｐｒｏｍｏｔｅｒ １１９４．．１４７１
／ｌａｂｅｌ＝“ニワトリβ－アクチンプロモーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０７．．１７１２
／ｌａｂｅｌ＝“Ｋｏｚａｋ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １６８２．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“ハイブリッドイントロンの３’端部”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８８３．．８８７
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ ５’クローニング部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １６０９．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ ３’クローニング部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９３７．．２９６０
／ｌａｂｅｌ＝“５’ＩＴＲを欠失”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２４３９．．２４６８
／ｌａｂｅｌ＝“ｍＩＲ１２２標的部位ｍ８”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｐｏｌｙＡ＿ｓｉｇｎａｌ ２７２２．．２９３６
／ｌａｂｅｌ＝“ＢＧＨ＼ｐＡ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２４７５．．２７２１
／ｌａｂｅｌ＝“正確なＷＰＲＥ３”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２６０９．．２６３３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ８０”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｅｎｈａｎｃｅｒ ８８９．．１１９２
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＭＶエンハンサー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｒｅｐｅａｔ＿ｒｅｇｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ（２９３７．．３０６６）
／ｌａｂｅｌ＝“３’ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０１．．１７０６
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ＣＤＳ １７１３．．２４２９
／ｌａｂｅｌ＝“ｅＧＦＰ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０１．．１７０１
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １４７２．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“ハイブリッドイントロン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８８９．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
ｒｅｐｅａｔ＿ｒｅｇｉｏｎ ７６７．．８７２
／ｌａｂｅｌ＝“５’ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ＯＲＩＧＩＮ
１ ｇｔｔｇｇａｃｔｃａ ａｇａｃｇａｔａｇｔ ｔａｃｃｇｇａｔａａ ｇｇｃｇｃａｇｃｇｇ ｔｃｇｇｇｃｔｇａａ ｃｇｇｇｇｇｇｔｔｃ
６１ ｇｔｇｃａｃａｃａｇ ｃｃｃａｇｃｔｔｇｇ ａｇｃｇａａｃｇａｃ ｃｔａｃａｃｃｇａａ ｃｔｇａｇａｔａｃｃ ｔａｃａｇｃｇｔｇａ
１２１ ｇｃｔａｔｇａｇａａ ａｇｃｇｃｃａｃｇｃ ｔｔｃｃｃｇａａｇｇ ｇａｇａａａｇｇｃｇ ｇａｃａｇｇｔａｔｃ ｃｇｇｔａａｇｃｇｇ
１８１ ｃａｇｇｇｔｃｇｇａ ａｃａｇｇａｇａｇｃ ｇｃａｃｇａｇｇｇａ ｇｃｔｔｃｃａｇｇｇ ｇｇａａａｃｇｃｃｔ ｇｇｔａｔｃｔｔｔａ
２４１ ｔａｇｔｃｃｔｇｔｃ ｇｇｇｔｔｔｃｇｃｃ ａｃｃｔｃｔｇａｃｔ ｔｇａｇｃｇｔｃｇａ ｔｔｔｔｔｇｔｇａｔ ｇｃｔｃｇｔｃａｇｇ
３０１ ｇｇｇｇｃｇｇａｇｃ ｃｔａｔｇｇａａａａ ａｃｇｃｃａｇｃａａ ｃｇｃｇｇｃｃｔｔｔ ｔｔａｃｇｇｔｔｃｃ ｔｇｇｃｃｔｔｔｔｇ
３６１ ｃｔｇｇｃｃｔｔｔｔ ｇｃｔｃａｃａｔｇｔ ｔｃｔｔｔｃｃｔｇｃ ｇｔｔａｔｃｃｃｃｔ ｇａｔｔｃｔｇｔｇｇ ａｔａａｃｃｇｔａｔ
４２１ ｔａｃｃｇｃｃｔｔｔ ｇａｇｔｇａｇｃｔｇ ａｔａｃｃｇｃｔｃｇ ｃｃｇｃａｇｃｃｇａ ａｃｇａｃｃｇａｇｃ ｇｃａｇｃｇａｇｔｃ
４８１ ａｇｔｇａｇｃｇａｇ ｇａａｇｃｇｇａａｇ ａｇｃｇｃｃｃａａｔ ａｃｇｃａａａｃｃｇ ｃｃｔｃｔｃｃｃｃｇ ｃｇｃｇｔｔｇｇｃｃ
５４１ ｇａｔｔｃａｔｔａａ ｔｇｃａｇｃｔｇｇｃ ａｃｇａｃａｇｇｔｔ ｔｃｃｃｇａｃｔｇｇ ａａａｇｃｇｇｇｃａ ｇｔｇａｇｃｇｃａａ
６０１ ｃｇｃａａｔｔａａｔ ｇｔｇａｇｔｔａｇｃ ｔｃａｃｔｃａｔｔａ ｇｇｃａｃｃｃｃａｇ ｇｃｔｔｔａｃａｃｔ ｔｔａｔｇｃｔｔｃｃ
６６１ ｇｇｃｔｃｇｔａｔｇ ｔｔｇｔｇｔｇｇａａ ｔｔｇｔｇａｇｃｇｇ ａｔａａｃａａｔｔｔ ｃａｃａｃａｇｇａａ ａｃａｇｃｔａｔｇａ
７２１ ｃｃａｔｇａｔｔａｃ ｇｃｃａｇａｔｔｔａ ａｔｔａａｇｇｇａｔ ｃｔｇｇｇｃｃａｃｔ ｃｃｃｔｃｔｃｔｇｃ ｇｃｇｃｔｃｇｃｔｃ
７８１ ｇｃｔｃａｃｔｇａｇ ｇｃｃｇｇｇｃｇａｃ ｃａａａｇｇｔｃｇｃ ｃｃｇａｃｇｃｃｃｇ ｇｇｃｔｔｔｇｃｃｃ ｇｇｇｃｇｇｃｃｔｃ
８４１ ａｇｔｇａｇｃｇａｇ ｃｇａｇｃｇｃｇｃａ ｇａｇａｇｇｇａｇｔ ｇｇｔｔａａｇｃｔａ ｇｃｇｇｔａｃｃｃｇ ｔｔａｃａｔａａｃｔ
９０１ ｔａｃｇｇｔａａａｔ ｇｇｃｃｃｇｃｃｔｇ ｇｃｔｇａｃｃｇｃｃ ｃａａｃｇａｃｃｃｃ ｃｇｃｃｃａｔｔｇａ ｃｇｔｃａａｔａａｔ
９６１ ｇａｃｇｔａｔｇｔｔ ｃｃｃａｔａｇｔａａ ｃｇｃｃａａｔａｇｇ ｇａｃｔｔｔｃｃａｔ ｔｇａｃｇｔｃａａｔ ｇｇｇｔｇｇａｇｔａ
１０２１ ｔｔｔａｃｇｇｔａａ ａｃｔｇｃｃｃａｃｔ ｔｇｇｃａｇｔａｃａ ｔｃａａｇｔｇｔａｔ ｃａｔａｔｇｃｃａａ ｇｔａｃｇｃｃｃｃｃ
１０８１ ｔａｔｔｇａｃｇｔｃ ａａｔｇａｃｇｇｔａ ａａｔｇｇｃｃｃｇｃ ｃｔｇｇｃａｔｔａｔ ｇｃｃｃａｇｔａｃａ ｔｇａｃｃｔｔａｔｇ
１１４１ ｇｇａｃｔｔｔｃｃｔ ａｃｔｔｇｇｃａｇｔ ａｃａｔｃｔａｃｇｔ ａｔｔａｇｔｃａｔｃ ｇｃｔａｔｔａｃｃａ ｔｇｇｔｃｇａｇｇｔ
１２０１ ｇａｇｃｃｃｃａｃｇ ｔｔｃｔｇｃｔｔｃａ ｃｔｃｔｃｃｃｃａｔ ｃｔｃｃｃｃｃｃｃｃ ｔｃｃｃｃａｃｃｃｃ ｃａａｔｔｔｔｇｔａ
１２６１ ｔｔｔａｔｔｔａｔｔ ｔｔｔｔａａｔｔａｔ ｔｔｔｇｔｇｃａｇｃ ｇａｔｇｇｇｇｇｃｇ ｇｇｇｇｇｇｇｇｇｇ ｇｇｇｇｇｃｇｃｇｃ
１３２１ ｇｃｃａｇｇｃｇｇｇ ｇｃｇｇｇｇｃｇｇｇ ｇｃｇａｇｇｇｇｃｇ ｇｇｇｃｇｇｇｇｃｇ ａｇｇｃｇｇａｇａｇ ｇｔｇｃｇｇｃｇｇｃ
１３８１ ａｇｃｃａａｔｃａｇ ａｇｃｇｇｃｇｃｇｃ ｔｃｃｇａａａｇｔｔ ｔｃｃｔｔｔｔａｔｇ ｇｃｇａｇｇｃｇｇｃ ｇｇｃｇｇｃｇｇｃｇ
１４４１ ｇｃｃｃｔａｔａａａ ａａｇｃｇａａｇｃｇ ｃｇｃｇｇｃｇｇｇｃ ｇｇｇａｇｔｃｇｃｔ ｇｃｇａｃｇｃｔｇｃ ｃｔｔｃｇｃｃｃｃｇ
１５０１ ｔｇｃｃｃｃｇｃｔｃ ｃｇｃｃｇｃｃｇｃｃ ｔｃｇｃｇｃｃｇｃｃ ｃｇｃｃｃｃｇｇｃｔ ｃｔｇａｃｔｇａｃｃ ｇｃｇｔｔａｃｔｃｃ
１５６１ ｃａｃａｇｇｔｇａｇ ｃｇｇｇｃｇｇｇａｃ ｇｇｃｃｃｔｔｃｔｃ ｃｔｃｃｇｇｇｃｔｇ ｔａａｔｔａｇｃｔｇ ａｇｃａａｇａｇｇｔ
１６２１ ａａｇｇｇｔｔｔａａ ｇｇｇａｔｇｇｔｔｇ ｇｔｔｇｇｔｇｇｇｇ ｔａｔｔａａｔｇｔｔ ｔａａｔｔａｃｃｔｇ ｇａｇｃａｃｃｔｇｃ
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１７４１ ｃｃｇｇｇｇｔｇｇｔ ｇｃｃｃａｔｃｃｔｇ ｇｔｃｇａｇｃｔｇｇ ａｃｇｇｃｇａｃｇｔ ａａａｃｇｇｃｃａｃ ａａｇｔｔｃａｇｃｇ
１８０１ ｔｇｔｃｃｇｇｃｇａ ｇｇｇｃｇａｇｇｇｃ ｇａｔｇｃｃａｃｃｔ ａｃｇｇｃａａｇｃｔ ｇａｃｃｃｔｇａａｇ ｔｔｃａｔｃｔｇｃａ
１８６１ ｃｃａｃｃｇｇｃａａ ｇｃｔｇｃｃｃｇｔｇ ｃｃｃｔｇｇｃｃｃａ ｃｃｃｔｃｇｔｇａｃ ｃａｃｃｃｔｇａｃｃ ｔａｃｇｇｃｇｔｇｃ
１９２１ ａｇｔｇｃｔｔｃａｇ ｃｃｇｃｔａｃｃｃｃ ｇａｃｃａｃａｔｇａ ａｇｃａｇｃａｃｇａ ｃｔｔｃｔｔｃａａｇ ｔｃｃｇｃｃａｔｇｃ
１９８１ ｃｃｇａａｇｇｃｔａ ｃｇｔｃｃａｇｇａｇ ｃｇｃａｃｃａｔｃｔ ｔｃｔｔｃａａｇｇａ ｃｇａｃｇｇｃａａｃ ｔａｃａａｇａｃｃｃ
２０４１ ｇｃｇｃｃｇａｇｇｔ ｇａａｇｔｔｃｇａｇ ｇｇｃｇａｃａｃｃｃ ｔｇｇｔｇａａｃｃｇ ｃａｔｃｇａｇｃｔｇ ａａｇｇｇｃａｔｃｇ
２１０１ ａｃｔｔｃａａｇｇａ ｇｇａｃｇｇｃａａｃ ａｔｃｃｔｇｇｇｇｃ ａｃａａｇｃｔｇｇａ ｇｔａｃａａｃｔａｃ ａａｃａｇｃｃａｃａ
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２４６１ ａｃａｃｔｃｃａａｃ ｔａｇｔａｔａａｔｃ ａａｃｃｔｃｔｇｇａ ｔｔａｃａａａａｔｔ ｔｇｔｇａａａｇａｔ ｔｇａｃｔｇｇｔａｔ
２５２１ ｔｃｔｔａａｃｔａｔ ｇｔｔｇｃｔｃｃｔｔ ｔｔａｃｇｃｔａｔｇ ｔｇｇａｔａｃｇｃｔ ｇｃｔｔｔａａｔｇｃ ｃｔｔｔｇｔａｔｃａ
２５８１ ｔｇｃｔａｔｔｇｃｔ ｔｃｃｃｇｔａｔｇｇ ｃｔｔｔｃａｔｔｔｔ ｃｔｃｃｔｃｃｔｔｇ ｔａｔａａａｔｃｃｔ ｇｇｔｔａｇｔｔｃｔ
２６４１ ｔｇｃｃａｃｇｇｃｇ ｇａａｃｔｃａｔｃｇ ｃｃｇｃｃｔｇｃｃｔ ｔｇｃｃｃｇｃｔｇｃ ｔｇｇａｃａｇｇｇｇ ｃｔｃｇｇｃｔｇｔｔ
２７０１ ｇｇｇｃａｃｔｇａｃ ａａｔｔｃｃｇｔｇｇ ｔｇｃｃｔｃｇａｃｔ ｇｔｇｃｃｔｔｃｔａ ｇｔｔｇｃｃａｇｃｃ ａｔｃｔｇｔｔｇｔｔ
２７６１ ｔｇｃｃｃｃｔｃｃｃ ｃｃｇｔｇｃｃｔｔｃ ｃｔｔｇａｃｃｃｔｇ ｇａａｇｇｔｇｃｃａ ｃｔｃｃｃａｃｔｇｔ ｃｃｔｔｔｃｃｔａａ
２８２１ ｔａａａａｔｇａｇｇ ａａａｔｔｇｃａｔｃ ｇｃａｔｔｇｔｃｔｇ ａｇｔａｇｇｔｇｔｃ ａｔｔｃｔａｔｔｃｔ ｇｇｇｇｇｇｔｇｇｇ
２８８１ ｇｔｇｇｇｇｃａｇｇ ａｃａｇｃａａｇｇｇ ｇｇａｇｇａｔｔｇｇ ｇａａｇａｃａａｔａ ｇｃａｇｇｃａｔｇｃ ｔｇｇｇｇａａｇｇａ
２９４１ ａｃｃｃｃｔａｇｔｇ ａｔｇｇａｇｔｔｇｇ ｃｃａｃｔｃｃｃｔｃ ｔｃｔｇｃｇｃｇｃｔ ｃｇｃｔｃｇｃｔｃａ ｃｔｇａｇｇｃｃｇｇ
３００１ ｇｃｇａｃｃａａａｇ ｇｔｃｇｃｃｃｇａｃ ｇｃｃｃｇｇｇｃｔｔ ｔｇｃｃｃｇｇｇｃｇ ｇｃｃｔｃａｇｔｇａ ｇｃｇａｇｃｇａｇｃ
３０６１ ｇｃｇｃａｇｃｃｔｔ ａａｔｔａａｃｃｔａ ａｔｔｃａｃｔｇｇｃ ｃｇｔｃｇｔｔｔｔａ ｃａａｃｇｔｃｇｔｇ ａｃｔｇｇｇａａａａ
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３１８１ ｔａｇｃｇａａｇａｇ ｇｃｃｃｇｃａｃｃｇ ａｔｃｇｃｃｃｔｔｃ ｃｃａａｃａｇｔｔｇ ｃｇｃａｇｃｃｔｇａ ａｔｇｇｃｇａａｔｇ
３２４１ ｇｇａｃｇｃｇｃｃｃ ｔｇｔａｇｃｇｇｃｇ ｃａｔｔａａｇｃｇｃ ｇｇｃｇｇｇｔｇｔｇ ｇｔｇｇｔｔａｃｇｃ ｇｃａｇｃｇｔｇａｃ
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３３６１ ｃａｃｇｔｔｃｇｃｃ ｇｇｃｔｔｔｃｃｃｃ ｇｔｃａａｇｃｔｃｔ ａａａｔｃｇｇｇｇｇ ｃｔｃｃｃｔｔｔａｇ ｇｇｔｔｃｃｇａｔｔ
３４２１ ｔａｇｔｇｃｔｔｔａ ｃｇｇｃａｃｃｔｃｇ ａｃｃｃｃａａａａａ ａｃｔｔｇａｔｔａｇ ｇｇｔｇａｔｇｇｔｔ ｃａｃｇｔａｇｔｇｇ
３４８１ ｇｃｃａｔｃｇｃｃｃ ｔｇａｔａｇａｃｇｇ ｔｔｔｔｔｃｇｃｃｃ ｔｔｔｇａｃｇｔｔｇ ｇａｇｔｃｃａｃｇｔ ｔｃｔｔｔａａｔａｇ
３５４１ ｔｇｇａｃｔｃｔｔｇ ｔｔｃｃａａａｃｔｇ ｇａａｃａａｃａｃｔ ｃａａｃｃｃｔａｔｃ ｔｃｇｇｔｃｔａｔｔ ｃｔｔｔｔｇａｔｔｔ
３６０１ ａｔａａｇｇｇａｔｔ ｔｔｇｃｃｇａｔｔｔ ｃｇｇｃｃｔａｔｔｇ ｇｔｔａａａａａａｔ ｇａｇｃｔｇａｔｔｔ ａａｃａａａａａｔｔ
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４０８１ ｇｇｇｃａａｇａｇｃ ａａｃｔｃｇｇｔｃｇ ｃｃｇｃａｔａｃａｃ ｔａｔｔｃｔｃａｇａ ａｔｇａｃｔｔｇｇｔ ｔｇａｇｔａｃｔｃａ
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４３８１ ｇｃａａｃａａｃｇｔ ｔｇｃｇｃａａａｃｔ ａｔｔａａｃｔｇｇｃ ｇａａｃｔａｃｔｔａ ｃｔｃｔａｇｃｔｔｃ ｃｃｇｇｃａａｃａａ
４４４１ ｔｔａａｔａｇａｃｔ ｇｇａｔｇｇａｇｇｃ ｇｇａｔａａａｇｔｔ ｇｃａｇｇａｃｃａｃ ｔｔｃｔｇｃｇｃｔｃ ｇｇｃｃｃｔｔｃｃｇ
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４５６１ ｇｃａｇｃａｃｔｇｇ ｇｇｃｃａｇａｔｇｇ ｔａａｇｃｃｃｔｃｃ ｃｇｔａｔｃｇｔａｇ ｔｔａｔｃｔａｃａｃ ｇａｃｇｇｇｇａｇｔ
４６２１ ｃａｇｇｃａａｃｔａ ｔｇｇａｔｇａａｃｇ ａａａｔａｇａｃａｇ ａｔｃｇｃｔｇａｇａ ｔａｇｇｔｇｃｃｔｃ ａｃｔｇａｔｔａａｇ
４６８１ ｃａｔｔｇｇｔａａｃ ｔｇｔｃａｇａｃｃａ ａｇｔｔｔａｃｔｃａ ｔａｔａｔａｃｔｔｔ ａｇａｔｔｇａｔｔｔ ａａａａｃｔｔｃａｔ
４７４１ ｔｔｔｔａａｔｔｔａ ａａａｇｇａｔｃｔａ ｇｇｔｇａａｇａｔｃ ｃｔｔｔｔｔｇａｔａ ａｔｃｔｃａｔｇａｃ ｃａａａａｔｃｃｃｔ
４８０１ ｔａａｃｇｔｇａｇｔ ｔｔｔｃｇｔｔｃｃａ ｃｔｇａｇｃｇｔｃａ ｇａｃｃｃｃｇｔａｇ ａａａａｇａｔｃａａ ａｇｇａｔｃｔｔｃｔ
４８６１ ｔｇａｇａｔｃｃｔｔ ｔｔｔｔｔｃｔｇｃｇ ｃｇｔａａｔｃｔｇｃ ｔｇｃｔｔｇｃａａａ ｃａａａａａａａｃｃ ａｃｃｇｃｔａｃｃａ
４９２１ ｇｃｇｇｔｇｇｔｔｔ ｇｔｔｔｇｃｃｇｇａ ｔｃａａｇａｇｃｔａ ｃｃａａｃｔｃｔｔｔ ｔｔｃｃｇａａｇｇｔ ａａｃｔｇｇｃｔｔｃ
４９８１ ａｇｃａｇａｇｃｇｃ ａｇａｔａｃｃａａａ ｔａｃｔｇｔｔｃｔｔ ｃｔａｇｔｇｔａｇｃ ｃｇｔａｇｔｔａｇｇ ｃｃａｃｃａｃｔｔｃ
５０４１ ａａｇａａｃｔｃｔｇ ｔａｇｃａｃｃｇｃｃ ｔａｃａｔａｃｃｔｃ ｇｃｔｃｔｇｃｔａａ ｔｃｃｔｇｔｔａｃｃ ａｇｔｇｇｃｔｇｃｔ
５１０１ ｇｃｃａｇｔｇｇｃｇ ａｔａａｇｔｃｇｔｇ ｔｃｔｔａｃｃｇｇ（配列番号１４）
ＬＯＣＵＳ ｓｃＡＡＶ－ＣｂｈＭ－ＰＴＥＮ－ｍｉＲ１２２－ ５２８３ ｂｐ ｄｓ－ＤＮＡ環状
ＤＥＦＩＮＩＴＩＯＮ
ＦＥＡＴＵＲＥＳ Ｌｏｃａｔｉｏｎ／Ｑｕａｌｉｆｉｅｒｓ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０１．．１７０６
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７１３．．２９２４
／ｌａｂｅｌ＝“ｍＰＴＥＮ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １６８２．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“ハイブリッドイントロンの３’端部”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １６０９．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ ３’クローニング部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ＣＤＳ ３９８３．．４８４３
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｍｐ－Ｒ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９３４．．２９６３
／ｌａｂｅｌ＝“ｍＩＲ１２２標的部位ｍ８”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １４７２．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“ハイブリッドイントロン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｐｒｏｍｏｔｅｒ １１９４．．１４７１
／ｌａｂｅｌ＝“ニワトリβ－アクチンプロモーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｒｅｐｅａｔ＿ｒｅｇｉｏｎ ７６７．．８７２
／ｌａｂｅｌ＝“５’ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｅｎｈａｎｃｅｒ ８８９．．１１９２
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＭＶエンハンサー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０１．．１７０１
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７０７．．１７１２
／ｌａｂｅｌ＝“Ｋｏｚａｋ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９７０．．３０９０
／ｌａｂｅｌ＝“ＳＶ４０ｐＡ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３０９１．．３１１４
／ｌａｂｅｌ＝“５’ＩＴＲを欠失”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｒｅｐｅａｔ＿ｒｅｇｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ（３０９１．．３２２０）
／ｌａｂｅｌ＝“３’ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８８９．．１７００
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８８３．．８８７
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｂｈ ５’クローニング部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９５５．．２９６２
／ｌａｂｅｌ＝“シード領域”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ＯＲＩＧＩＮ
１ ｇｔｔｇｇａｃｔｃａ ａｇａｃｇａｔａｇｔ ｔａｃｃｇｇａｔａａ ｇｇｃｇｃａｇｃｇｇ ｔｃｇｇｇｃｔｇａａ ｃｇｇｇｇｇｇｔｔｃ
６１ ｇｔｇｃａｃａｃａｇ ｃｃｃａｇｃｔｔｇｇ ａｇｃｇａａｃｇａｃ ｃｔａｃａｃｃｇａａ ｃｔｇａｇａｔａｃｃ ｔａｃａｇｃｇｔｇａ
１２１ ｇｃｔａｔｇａｇａａ ａｇｃｇｃｃａｃｇｃ ｔｔｃｃｃｇａａｇｇ ｇａｇａａａｇｇｃｇ ｇａｃａｇｇｔａｔｃ ｃｇｇｔａａｇｃｇｇ
１８１ ｃａｇｇｇｔｃｇｇａ ａｃａｇｇａｇａｇｃ ｇｃａｃｇａｇｇｇａ ｇｃｔｔｃｃａｇｇｇ ｇｇａａａｃｇｃｃｔ ｇｇｔａｔｃｔｔｔａ
２４１ ｔａｇｔｃｃｔｇｔｃ ｇｇｇｔｔｔｃｇｃｃ ａｃｃｔｃｔｇａｃｔ ｔｇａｇｃｇｔｃｇａ ｔｔｔｔｔｇｔｇａｔ ｇｃｔｃｇｔｃａｇｇ
３０１ ｇｇｇｇｃｇｇａｇｃ ｃｔａｔｇｇａａａａ ａｃｇｃｃａｇｃａａ ｃｇｃｇｇｃｃｔｔｔ ｔｔａｃｇｇｔｔｃｃ ｔｇｇｃｃｔｔｔｔｇ
３６１ ｃｔｇｇｃｃｔｔｔｔ ｇｃｔｃａｃａｔｇｔ ｔｃｔｔｔｃｃｔｇｃ ｇｔｔａｔｃｃｃｃｔ ｇａｔｔｃｔｇｔｇｇ ａｔａａｃｃｇｔａｔ
４２１ ｔａｃｃｇｃｃｔｔｔ ｇａｇｔｇａｇｃｔｇ ａｔａｃｃｇｃｔｃｇ ｃｃｇｃａｇｃｃｇａ ａｃｇａｃｃｇａｇｃ ｇｃａｇｃｇａｇｔｃ
４８１ ａｇｔｇａｇｃｇａｇ ｇａａｇｃｇｇａａｇ ａｇｃｇｃｃｃａａｔ ａｃｇｃａａａｃｃｇ ｃｃｔｃｔｃｃｃｃｇ ｃｇｃｇｔｔｇｇｃｃ
５４１ ｇａｔｔｃａｔｔａａ ｔｇｃａｇｃｔｇｇｃ ａｃｇａｃａｇｇｔｔ ｔｃｃｃｇａｃｔｇｇ ａａａｇｃｇｇｇｃａ ｇｔｇａｇｃｇｃａａ
６０１ ｃｇｃａａｔｔａａｔ ｇｔｇａｇｔｔａｇｃ ｔｃａｃｔｃａｔｔａ ｇｇｃａｃｃｃｃａｇ ｇｃｔｔｔａｃａｃｔ ｔｔａｔｇｃｔｔｃｃ
６６１ ｇｇｃｔｃｇｔａｔｇ ｔｔｇｔｇｔｇｇａａ ｔｔｇｔｇａｇｃｇｇ ａｔａａｃａａｔｔｔ ｃａｃａｃａｇｇａａ ａｃａｇｃｔａｔｇａ
７２１ ｃｃａｔｇａｔｔａｃ ｇｃｃａｇａｔｔｔａ ａｔｔａａｇｇｇａｔ ｃｔｇｇｇｃｃａｃｔ ｃｃｃｔｃｔｃｔｇｃ ｇｃｇｃｔｃｇｃｔｃ
７８１ ｇｃｔｃａｃｔｇａｇ ｇｃｃｇｇｇｃｇａｃ ｃａａａｇｇｔｃｇｃ ｃｃｇａｃｇｃｃｃｇ ｇｇｃｔｔｔｇｃｃｃ ｇｇｇｃｇｇｃｃｔｃ
８４１ ａｇｔｇａｇｃｇａｇ ｃｇａｇｃｇｃｇｃａ ｇａｇａｇｇｇａｇｔ ｇｇｔｔａａｇｃｔａ ｇｃｇｇｔａｃｃｃｇ ｔｔａｃａｔａａｃｔ
９０１ ｔａｃｇｇｔａａａｔ ｇｇｃｃｃｇｃｃｔｇ ｇｃｔｇａｃｃｇｃｃ ｃａａｃｇａｃｃｃｃ ｃｇｃｃｃａｔｔｇａ ｃｇｔｃａａｔａａｔ
９６１ ｇａｃｇｔａｔｇｔｔ ｃｃｃａｔａｇｔａａ ｃｇｃｃａａｔａｇｇ ｇａｃｔｔｔｃｃａｔ ｔｇａｃｇｔｃａａｔ ｇｇｇｔｇｇａｇｔａ
１０２１ ｔｔｔａｃｇｇｔａａ ａｃｔｇｃｃｃａｃｔ ｔｇｇｃａｇｔａｃａ ｔｃａａｇｔｇｔａｔ ｃａｔａｔｇｃｃａａ ｇｔａｃｇｃｃｃｃｃ
１０８１ ｔａｔｔｇａｃｇｔｃ ａａｔｇａｃｇｇｔａ ａａｔｇｇｃｃｃｇｃ ｃｔｇｇｃａｔｔａｔ ｇｃｃｃａｇｔａｃａ ｔｇａｃｃｔｔａｔｇ
１１４１ ｇｇａｃｔｔｔｃｃｔ ａｃｔｔｇｇｃａｇｔ ａｃａｔｃｔａｃｇｔ ａｔｔａｇｔｃａｔｃ ｇｃｔａｔｔａｃｃａ ｔｇｇｔｃｇａｇｇｔ
１２０１ ｇａｇｃｃｃｃａｃｇ ｔｔｃｔｇｃｔｔｃａ ｃｔｃｔｃｃｃｃａｔ ｃｔｃｃｃｃｃｃｃｃ ｔｃｃｃｃａｃｃｃｃ ｃａａｔｔｔｔｇｔａ
１２６１ ｔｔｔａｔｔｔａｔｔ ｔｔｔｔａａｔｔａｔ ｔｔｔｇｔｇｃａｇｃ ｇａｔｇｇｇｇｇｃｇ ｇｇｇｇｇｇｇｇｇｇ ｇｇｇｇｇｃｇｃｇｃ
１３２１ ｇｃｃａｇｇｃｇｇｇ ｇｃｇｇｇｇｃｇｇｇ ｇｃｇａｇｇｇｇｃｇ ｇｇｇｃｇｇｇｇｃｇ ａｇｇｃｇｇａｇａｇ ｇｔｇｃｇｇｃｇｇｃ
１３８１ ａｇｃｃａａｔｃａｇ ａｇｃｇｇｃｇｃｇｃ ｔｃｃｇａａａｇｔｔ ｔｃｃｔｔｔｔａｔｇ ｇｃｇａｇｇｃｇｇｃ ｇｇｃｇｇｃｇｇｃｇ
１４４１ ｇｃｃｃｔａｔａａａ ａａｇｃｇａａｇｃｇ ｃｇｃｇｇｃｇｇｇｃ ｇｇｇａｇｔｃｇｃｔ ｇｃｇａｃｇｃｔｇｃ ｃｔｔｃｇｃｃｃｃｇ
１５０１ ｔｇｃｃｃｃｇｃｔｃ ｃｇｃｃｇｃｃｇｃｃ ｔｃｇｃｇｃｃｇｃｃ ｃｇｃｃｃｃｇｇｃｔ ｃｔｇａｃｔｇａｃｃ ｇｃｇｔｔａｃｔｃｃ
１５６１ ｃａｃａｇｇｔｇａｇ ｃｇｇｇｃｇｇｇａｃ ｇｇｃｃｃｔｔｃｔｃ ｃｔｃｃｇｇｇｃｔｇ ｔａａｔｔａｇｃｔｇ ａｇｃａａｇａｇｇｔ
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１６８１ ｃｔｇａａａｔｃａｃ ｔｔｔｔｔｔｔｃａｇ ａｃｇｃｇｔｇｃｃａ ｃｃａｔｇａｃａｇｃ ｃａｔｃａｔｃａａａ ｇａｇａｔｃｇｔｔａ
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１８０１ ｃａａａｔａｔｔａｔ ｔｇｃｔａｔｇｇｇａ ｔｔｔｃｃｔｇｃａｇ ａａａｇａｃｔｔｇａ ａｇｇｔｇｔａｔａｃ ａｇｇａａｃａａｔａ
１８６１ ｔｔｇａｔｇａｔｇｔ ａｇｔａａｇｇｔｔｔ ｔｔｇｇａｔｔｃａａ ａｇｃａｔａａａａａ ｃｃａｔｔａｃａａｇ ａｔａｔａｃａａｔｃ
１９２１ ｔａｔｇｔｇｃｔｇａ ｇａｇａｃａｔｔａｔ ｇａｃａｃｃｇｃｃａ ａａｔｔｔａａｃｔｇ ｃａｇａｇｔｔｇｃａ ｃａｇｔａｔｃｃｔｔ
１９８１ ｔｔｇａａｇａｃｃａ ｔａａｃｃｃａｃｃａ ｃａｇｃｔａｇａａｃ ｔｔａｔｃａａａｃｃ ｃｔｔｃｔｇｔｇａａ ｇａｔｃｔｔｇａｃｃ
２０４１ ａａｔｇｇｃｔａａｇ ｔｇａａｇａｔｇａｃ ａａｔｃａｔｇｔｔｇ ｃａｇｃａａｔｔｃａ ｃｔｇｔａａａｇｃｔ ｇｇａａａｇｇｇａｃ
２１０１ ｇｇａｃｔｇｇｔｇｔ ａａｔｇａｔｔｔｇｔ ｇｃａｔａｔｔｔａｔ ｔｇｃａｔｃｇｇｇｇ ｃａａａｔｔｔｔｔａ ａａｇｇｃａｃａａｇ
２１６１ ａｇｇｃｃｃｔａｇａ ｔｔｔｔｔａｔｇｇｇ ｇａａｇｔａａｇｇａ ｃｃａｇａｇａｃａａ ａａａｇｇｇａｇｔｃ ａｃａａｔｔｃｃｃａ
２２２１ ｇｔｃａｇａｇｇｃｇ ｃｔａｔｇｔａｔａｔ ｔａｔｔａｔａｇｃｔ ａｃｃｔｇｃｔａａａ ａａａｔｃａｃｃｔｇ ｇａｔｔａｃａｇａｃ
２２８１ ｃｃｇｔｇｇｃａｃｔ ｇｃｔｇｔｔｔｃａｃ ａａｇａｔｇａｔｇｔ ｔｔｇａａａｃｔａｔ ｔｃｃａａｔｇｔｔｃ ａｇｔｇｇｃｇｇａａ
２３４１ ｃｔｔｇｃａａｔｃｃ ｔｃａｇｔｔｔｇｔｇ ｇｔｃｔｇｃｃａｇｃ ｔａａａｇｇｔｇａａ ｇａｔａｔａｔｔｃｃ ｔｃｃａａｔｔｃａｇ
２４０１ ｇａｃｃｃａｃｇｃｇ ｇｃｇｇｇａｇｇａｃ ａａｇｔｔｃａｔｇｔ ａｃｔｔｔｇａｇｔｔ ｃｃｃｔｃａｇｃｃａ ｔｔｇｃｃｔｇｔｇｔ
２４６１ ｇｔｇｇｔｇａｔａｔ ｃａａａｇｔａｇａｇ ｔｔｃｔｔｃｃａｃａ ａａｃａｇａａｃａａ ｇａｔｇｃｔｃａａａ ａａｇｇａｃａａａａ
２５２１ ｔｇｔｔｔｃａｃｔｔ ｔｔｇｇｇｔａａａｔ ａｃｇｔｔｃｔｔｃａ ｔａｃｃａｇｇａｃｃ ａｇａｇｇａａａｃｃ ｔｃａｇａａａａａｇ
２５８１ ｔｇｇａａａａｔｇｇ ａａｇｔｃｔｔｔｇｔ ｇａｔｃａｇｇａａａ ｔｃｇａｔａｇｃａｔ ｔｔｇｃａｇｔａｔａ ｇａｇｃｇｔｇｃａｇ
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５０４１ ｃｔｇｃｔｇｃｔｔｇ ｃａａａｃａａａａａ ａａｃｃａｃｃｇｃｔ ａｃｃａｇｃｇｇｔｇ ｇｔｔｔｇｔｔｔｇｃ ｃｇｇａｔｃａａｇａ
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５２２１ ｃｃｔｃｇｃｔｃｔｇ ｃｔａａｔｃｃｔｇｔ ｔａｃｃａｇｔｇｇｃ ｔｇｃｔｇｃｃａｇｔ ｇｇｃｇａｔａａｇｔ ｃｇｔｇｔｃｔｔａｃ
５２８１ ｃｇｇ（配列番号１５）
ＬＯＣＵＳ ＡＡＶ＿ｐＣＡＧ－Ａｔｇ５－ＷＰＲＥ－ｂＧＨｐ ６３２５ ｂｐ ｄｓ－ＤＮＡ環状
ＤＥＦＩＮＩＴＩＯＮ
ＫＥＹＷＯＲＤＳ“アクセッション：ａｄｄｇｅｎｅ＿６５４５５＿１１０９７８”ＦＥＡＴＵＲＥＳ Ｌｏｃａｔｉｏｎ／Ｑｕａｌｉｆｉｅｒｓ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９５７．．３０５０
／ｌａｂｅｌ＝“ニワトリβアクチンエクソン１全長”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２６２２．．２６４３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ１プライマー結合部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９３０．．２９５６
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ２０９”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４０６４．．４０８８
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ６５”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １２６７．．１２９５
／ｌａｂｅｌ＝“ＡｍｐＲプロモーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９５８．．４０２７
／ｌａｂｅｌ＝“ニワトリβアクチンエクソン－イントロン－ウサギβグロビンイントロン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ＳＴＳ ４４１５．．４５３２
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５ ＳＴＳ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９７０．．２９８４
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１８６ ＣＡＧｅｘ１＿２Ｆ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４０４０．．４０４２
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５ ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４８１９．．４８５２
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ８１”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３１４８．．３１６３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ２０７”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２６８０．．２９５６
／ｌａｂｅｌ＝“ニワトリβアクチンプロモーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３９３４．．４０２７
／ｌａｂｅｌ＝“ウサギβ－グロビン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｅｘｏｎ ４５１８．．４６１２
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ６ｃ９ｄ１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４０３４．．４０３９
／ｌａｂｅｌ＝“Ｋｏｚａｋ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｆｅａｔｕｒｅ ４８８２．．５４６９
／ｌａｂｅｌ＝“ＷＰＲＥ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｅｘｏｎ ４６１３．．４７３０
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
ｐｒｉｍｅｒ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ（５５０３．．５５２０）
／ｌａｂｅｌ＝“ＢＧＨ＿リバース＿プライマー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７４４．．２０５０
／ｌａｂｅｌ＝“Ｆ１起点”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５７３９．．５８６９
／ｌａｂｅｌ＝“ＡＡＶ２ ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ＳＴＳ ４７５４．．４８６７
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５ ＳＴＳ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４０４０．．４０６１
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ２１０－２１３”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｅｘｏｎ ４０４０．．４１４７
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３９２６．．３９３３
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｅｘｏｎ ４２７６．．４３５４
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １４２５．．１４７６
／ｌａｂｅｌ＝“オリジナルのｐＣＡＧ骨格中で欠損する配列”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３０２７．．３０４５
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１８７－ＣＡＧｅｘ１＿２Ｒ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４７７２．．４７９９
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ １５９プローブ？”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
ＣＤＳ ４０４０．．４８６７
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５ ＣＤＳ（オートファジータンパク質５アイソフォーム１）”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４８０４．．４８２３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ １５８リバース”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３６５．．１２２５
／ｌａｂｅｌ＝“アンピシリン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４００１．．４０２７
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ２ Ｒ結合部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５０９３．．５１１２
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ１４ ＷＰＲＥリバースプライマー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４７４５．．４７６４
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１５７”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４００１．．４０２７
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ２ Ｒ結合部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ｊｏｉｎ（５９１６．．６３２５，１．．２１０）
／ｌａｂｅｌ＝“ｐＢＲ３２２起点”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｐｒｉｍｅｒ ３９８２．．４００１
／ｌａｂｅｌ＝“ｐＣＡＧ＿Ｆ＿プライマー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４１８０．．４２０４
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１５０”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３０５１．．３９２５
／ｌａｂｅｌ＝“ニワトリβアクチンイントロン１の５’（ＥＮＳＥＭＢＬに比較していくつかのＳＮＰ）”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ｊｏｉｎ（５８７０．．６３２５，１．．２１４１）
／ｌａｂｅｌ＝“ＡＡＶ－ＣＲＥ逆向き骨格”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３７７２．．３７８９
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ１３プライマー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｅｘｏｎ ４３５５．．４５１７
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２９６８．．２９８２
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ２０４－２０６”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ２３７９．．２６６６
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＭＶエンハンサー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２６７４．．２６９２
／ｌａｂｅｌ＝“２０８”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４１６１．．４１８５
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１４９”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４０７０．．４０９３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ２１４”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８４ｂ０ｄｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ（２１４２．．２２８２）
／ｌａｂｅｌ＝“ＡＡＶ２ ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４０２８．．４０３３
／ｌａｂｅｌ＝“クローニングスカー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒ ５５０６．．５７０９
／ｌａｂｅｌ＝“ｂＧＨ＿ＰＡ＿ターミネーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４１４５．．４１６９
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ６６”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｅｘｏｎ ４７３１．．４８６７
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｅｘｏｎ ４１４８．．４２７５
／ｌａｂｅｌ＝“Ａｔｇ５エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ＯＲＩＧＩＮ
１ ｃｔａｃａｇａｇｔｔ ｃｔｔｇａａｇｔｇｇ ｔｇｇｃｃｔａａｃｔ ａｃｇｇｃｔａｃａｃ ｔａｇａａｇａａｃａ ｇｔａｔｔｔｇｇｔａ
６１ ｔｃｔｇｃｇｃｔｃｔ ｇｃｔｇａａｇｃｃａ ｇｔｔａｃｃｔｔｃｇ ｇａａａａａｇａｇｔ ｔｇｇｔａｇｃｔｃｔ ｔｇａｔｃｃｇｇｃａ
１２１ ａａｃａａａｃｃａｃ ｃｇｃｔｇｇｔａｇｃ ｇｇｔｇｇｔｔｔｔｔ ｔｔｇｔｔｔｇｃａａ ｇｃａｇｃａｇａｔｔ ａｃｇｃｇｃａｇａａ
１８１ ａａａａａｇｇａｔｃ ｔｃａａｇａａｇａｔ ｃｃｔｔｔｇａｔｃｔ ｔｔｔｃｔａｃｇｇｇ ｇｔｃｔｇａｃｇｃｔ ｃａｇｔｇｇａａｃｇ
２４１ ａａａａｃｔｃａｃｇ ｔｔａａｇｇｇａｔｔ ｔｔｇｇｔｃａｔｇａ ｇａｔｔａｔｃａａａ ａａｇｇａｔｃｔｔｃ ａｃｃｔａｇａｔｃｃ
３０１ ｔｔｔｔａａａｔｔａ ａａａａｔｇａａｇｔ ｔｔｔａａａｔｃａａ ｔｃｔａａａｇｔａｔ ａｔａｔｇａｇｔａａ ａｃｔｔｇｇｔｃｔｇ
３６１ ａｃａｇｔｔａｃｃａ ａｔｇｃｔｔａａｔｃ ａｇｔｇａｇｇｃａｃ ｃｔａｔｃｔｃａｇｃ ｇａｔｃｔｇｔｃｔａ ｔｔｔｃｇｔｔｃａｔ
４２１ ｃｃａｔａｇｔｔｇｃ ｃｔｇａｃｔｃｃｃｃ ｇｔｃｇｔｇｔａｇａ ｔａａｃｔａｃｇａｔ ａｃｇｇｇａｇｇｇｃ ｔｔａｃｃａｔｃｔｇ
４８１ ｇｃｃｃｃａｇｔｇｃ ｔｇｃａａｔｇａｔａ ｃｃｇｃｇａｇａｃｃ ｃａｃｇｃｔｃａｃｃ ｇｇｃｔｃｃａｇａｔ ｔｔａｔｃａｇｃａａ
５４１ ｔａａａｃｃａｇｃｃ ａｇｃｃｇｇａａｇｇ ｇｃｃｇａｇｃｇｃａ ｇａａｇｔｇｇｔｃｃ ｔｇｃａａｃｔｔｔａ ｔｃｃｇｃｃｔｃｃａ
６０１ ｔｃｃａｇｔｃｔａｔ ｔａａｔｔｇｔｔｇｃ ｃｇｇｇａａｇｃｔａ ｇａｇｔａａｇｔａｇ ｔｔｃｇｃｃａｇｔｔ ａａｔａｇｔｔｔｇｃ
６６１ ｇｃａａｃｇｔｔｇｔ ｔｇｃｃａｔｔｇｃｔ ａｃａｇｇｃａｔｃｇ ｔｇｇｔｇｔｃａｃｇ ｃｔｃｇｔｃｇｔｔｔ ｇｇｔａｔｇｇｃｔｔ
７２１ ｃａｔｔｃａｇｃｔｃ ｃｇｇｔｔｃｃｃａａ ｃｇａｔｃａａｇｇｃ ｇａｇｔｔａｃａｔｇ ａｔｃｃｃｃｃａｔｇ ｔｔｇｔｇｃａａａａ
７８１ ａａｇｃｇｇｔｔａｇ ｃｔｃｃｔｔｃｇｇｔ ｃｃｔｃｃｇａｔｃｇ ｔｔｇｔｃａｇａａｇ ｔａａｇｔｔｇｇｃｃ ｇｃａｇｔｇｔｔａｔ
８４１ ｃａｃｔｃａｔｇｇｔ ｔａｔｇｇｃａｇｃａ ｃｔｇｃａｔａａｔｔ ｃｔｃｔｔａｃｔｇｔ ｃａｔｇｃｃａｔｃｃ ｇｔａａｇａｔｇｃｔ
９０１ ｔｔｔｃｔｇｔｇａｃ ｔｇｇｔｇａｇｔａｃ ｔｃａａｃｃａａｇｔ ｃａｔｔｃｔｇａｇａ ａｔａｇｔｇｔａｔｇ ｃｇｇｃｇａｃｃｇａ
９６１ ｇｔｔｇｃｔｃｔｔｇ ｃｃｃｇｇｃｇｔｃａ ａｔａｃｇｇｇａｔａ ａｔａｃｃｇｃｇｃｃ ａｃａｔａｇｃａｇａ ａｃｔｔｔａａａａｇ
１０２１ ｔｇｃｔｃａｔｃａｔ ｔｇｇａａａａｃｇｔ ｔｃｔｔｃｇｇｇｇｃ ｇａａａａｃｔｃｔｃ ａａｇｇａｔｃｔｔａ ｃｃｇｃｔｇｔｔｇａ
１０８１ ｇａｔｃｃａｇｔｔｃ ｇａｔｇｔａａｃｃｃ ａｃｔｃｇｔｇｃａｃ ｃｃａａｃｔｇａｔｃ ｔｔｃａｇｃａｔｃｔ ｔｔｔａｃｔｔｔｃａ
１１４１ ｃｃａｇｃｇｔｔｔｃ ｔｇｇｇｔｇａｇｃａ ａａａａｃａｇｇａａ ｇｇｃａａａａｔｇｃ ｃｇｃａａａａａａｇ ｇｇａａｔａａｇｇｇ
１２０１ ｃｇａｃａｃｇｇａａ ａｔｇｔｔｇａａｔａ ｃｔｃａｔａｃｔｃｔ ｔｃｃｔｔｔｔｔｃａ ａｔａｔｔａｔｔｇａ ａｇｃａｔｔｔａｔｃ
１２６１ ａｇｇｇｔｔａｔｔｇ ｔｃｔｃａｔｇａｇｃ ｇｇａｔａｃａｔａｔ ｔｔｇａａｔｇｔａｔ ｔｔａｇａａａａａｔ ａａａｃａａａｔａｇ
１３２１ ｇｇｇｔｔｃｃｇｃｇ ｃａｃａｔｔｔｃｃｃ ｃｇａａａａｇｔｇｃ ｃａｃｃｔｇａｃｇｔ ｃｔａａｇａａａｃｃ ａｔｔａｔｔａｔｃａ
１３８１ ｔｇａｃａｔｔａａｃ ｃｔａｔａａａａａｔ ａｇｇｃｇｔａｔｃａ ｃｇａｇｇｃｃｃｔｔ ｔｃｇｔｃｔｃｇｃｇ ｃｇｔｔｔｃｇｇｔｇ
１４４１ ａｔｇａｃｇｇｔｇａ ａａａｃｃｔｃｔｇａ ｃａｃａｔｇｃａｇｃ ｔｃｃｃｇｇａｇａｃ ｇｇｔｃａｃａｇｃｔ ｔｇｔｃｔｇｔａａｇ
１５０１ ｃｇｇａｔｇｃｃｇｇ ｇａｇｃａｇａｃａａ ｇｃｃｃｇｔｃａｇｇ ｇｃｇｃｇｔｃａｇｃ ｇｇｇｔｇｔｔｇｇｃ ｇｇｇｔｇｔｃｇｇｇ
１５６１ ｇｃｔｇｇｃｔｔａａ ｃｔａｔｇｃｇｇｃａ ｔｃａｇａｇｃａｇａ ｔｔｇｔａｃｔｇａｇ ａｇｔｇｃａｃｃａｔ ａａａａｔｔｇｔａａ
１６２１ ａｃｇｔｔａａｔａｔ ｔｔｔｇｔｔａａａａ ｔｔｃｇｃｇｔｔａａ ａｔｔｔｔｔｇｔｔａ ａａｔｃａｇｃｔｃａ ｔｔｔｔｔｔａａｃｃ
１６８１ ａａｔａｇａｃｃｇａ ａａｔｃｇｇｃａａａ ａｔｃｃｃｔｔａｔａ ａａｔｃａａａａｇａ ａｔａｇｃｃｃｇａｇ ａｔａｇａｇｔｔｇａ
１７４１ ｇｔｇｔｔｇｔｔｃｃ ａｇｔｔｔｇｇａａｃ ａａｇａｇｔｃｃａｃ ｔａｔｔａａａｇａａ ｃｇｔｇｇａｃｔｃｃ ａａｃｇｔｃａａａｇ
１８０１ ｇｇｃｇａａａａａｃ ｃｇｔｃｔａｔｃａｇ ｇｇｃｇａｔｇｇｃｃ ｃａｃｔａｃｇｔｇａ ａｃｃａｔｃａｃｃｃ ａａａｔｃａａｇｔｔ
１８６１ ｔｔｔｔｇｇｇｇｔｃ ｇａｇｇｔｇｃｃｇｔ ａａａｇｃａｃｔａａ ａｔｃｇｇａａｃｃｃ ｔａａａｇｇｇａｇｃ ｃｃｃｃｇａｔｔｔａ
１９２１ ｇａｇｃｔｔｇａｃｇ ｇｇｇａａａｇｃｃｇ ｇｃｇａａｃｇｔｇｇ ｃｇａｇａａａｇｇａ ａｇｇｇａａｇａａａ ｇｃｇａａａｇｇａｇ
１９８１ ｃｇｇｇｃｇｃｔａａ ｇｇｃｇｃｔｇｇｃａ ａｇｔｇｔａｇｃｇｇ ｔｃａｃｇｃｔｇｃｇ ｃｇｔａａｃｃａｃｃ ａｃａｃｃｃｇｃｃｇ
２０４１ ｃｇｃｔｔａａｔｇｃ ｇｃｃｇｃｔａｃａｇ ｇｇｃｇｃｇｔａｃｔ ａｔｇｇｔｔｇｃｔｔ ｔｇａｃｇｔａｔｇｃ ｇｇｔｇｔｇａａａｔ
２１０１ ａｃｃｇｃａｃａｇａ ｔｇｃｇｔａａｇｇａ ｇａａａａｔａｃｃｇ ｃａｔｃａｇｇｃｇｃ ｃｃｃｔｇｃａｇｇｃ ａｇｃｔｇｃｇｃｇｃ
２１６１ ｔｃｇｃｔｃｇｃｔｃ ａｃｔｇａｇｇｃｃｇ ｃｃｃｇｇｇｃａａａ ｇｃｃｃｇｇｇｃｇｔ ｃｇｇｇｃｇａｃｃｔ ｔｔｇｇｔｃｇｃｃｃ
２２２１ ｇｇｃｃｔｃａｇｔｇ ａｇｃｇａｇｃｇａｇ ｃｇｃｇｃａｇａｇａ ｇｇｇａｇｔｇｇｃｃ ａａｃｔｃｃａｔｃａ ｃｔａｇｇｇｇｔｔｃ
２２８１ ｃｔｇｃｇｇｃｃｇｃ ａｃｇｃｇａａａｃａ ａｔｔｃｔｇｃａｇｇ ａａｔｃｔａｇｔｔａ ｔｔａａｔａｇｔａａ ｔｃａａｔｔａｃｇｇ
２３４１ ｇｇｔｃａｔｔａｇｔ ｔｃａｔａｇｃｃｃａ ｔａｔａｔｇｇａｇｔ ｔｃｃｇｃｇｔｔａｃ ａｔａａｃｔｔａｃｇ ｇｔａａａｔｇｇｃｃ
２４０１ ｃｇｃｃｔｇｇｃｔｇ ａｃｃｇｃｃｃａａｃ ｇａｃｃｃｃｃｇｃｃ ｃａｔｔｇａｃｇｔｃ ａａｔａａｔｇａｃｇ ｔａｔｇｔｔｃｃｃａ
２４６１ ｔａｇｔａａｃｇｃｃ ａａｔａｇｇｇａｃｔ ｔｔｃｃａｔｔｇａｃ ｇｔｃａａｔｇｇｇｔ ｇｇａｇｔａｔｔｔａ ｃｇｇｔａａａｃｔｇ
２５２１ ｃｃｃａｃｔｔｇｇｃ ａｇｔａｃａｔｃａａ ｇｔｇｔａｔｃａｔａ ｔｇｃｃａａｇｔａｃ ｇｃｃｃｃｃｔａｔｔ ｇａｃｇｔｃａａｔｇ
２５８１ ａｃｇｇｔａａａｔｇ ｇｃｃｃｇｃｃｔｇｇ ｃａｔｔａｔｇｃｃｃ ａｇｔａｃａｔｇａｃ ｃｔｔａｔｇｇｇａｃ ｔｔｔｃｃｔａｃｔｔ
２６４１ ｇｇｃａｇｔａｃａｔ ｃｔａｃｇｔａｔｔａ ｇｔｃａｔｃｇｃｔａ ｔｔａｃｃａｔｇｇｔ ｃｇａｇｇｔｇａｇｃ ｃｃｃａｃｇｔｔｃｔ
２７０１ ｇｃｔｔｃａｃｔｃｔ ｃｃｃｃａｔｃｔｃｃ ｃｃｃｃｃｃｔｃｃｃ ｃａｃｃｃｃｃａａｔ ｔｔｔｇｔａｔｔｔａ ｔｔｔａｔｔｔｔｔｔ
２７６１ ａａｔｔａｔｔｔｔｇ ｔｇｃａｇｃｇａｔｇ ｇｇｇｇｃｇｇｇｇｇ ｇｇｇｇｇｇｇｇｇｇ ｇｃｇｃｇｃｇｃｃａ ｇｇｃｇｇｇｇｃｇｇ
２８２１ ｇｇｃｇｇｇｇｃｇａ ｇｇｇｇｃｇｇｇｇｃ ｇｇｇｇｃｇａｇｇｃ ｇｇａｇａｇｇｔｇｃ ｇｇｃｇｇｃａｇｃｃ ａａｔｃａｇａｇｃｇ
２８８１ ｇｃｇｃｇｃｔｃｃｇ ａａａｇｔｔｔｃｃｔ ｔｔｔａｔｇｇｃｇａ ｇｇｃｇｇｃｇｇｃｇ ｇｃｇｇｃｇｇｃｃｃ ｔａｔａａａａａｇｃ
２９４１ ｇａａｇｃｇｃｇｃｇ ｇｃｇｇｇｃｇｇｇａ ｇｔｃｇｃｔｇｃｇｃ ｇｃｔｇｃｃｔｔｃｇ ｃｃｃｃｇｔｇｃｃｃ ｃｇｃｔｃｃｇｃｃｇ
３００１ ｃｃｇｃｃｔｃｇｃｇ ｃｃｇｃｃｃｇｃｃｃ ｃｇｇｃｔｃｔｇａｃ ｔｇａｃｃｇｃｇｔｔ ａｃｔｃｃｃａｃａｇ ｇｔｇａｇｃｇｇｇｃ
３０６１ ｇｇｇａｃｇｇｃｃｃ ｔｔｃｔｃｃｔｃｃｇ ｇｇｃｔｇｔａａｔｔ ａｇｃｇｃｔｔｇｇｔ ｔｔａａｔｇａｃｇｇ ｃｔｔｇｔｔｔｃｔｔ
３１２１ ｔｔｃｔｇｔｇｇｃｔ ｇｃｇｔｇａａａｇｃ ｃｔｔｇａｇｇｇｇｃ ｔｃｃｇｇｇａｇｇｇ ｃｃｃｔｔｔｇｔｇｃ ｇｇｇｇｇｇａｇｃｇ
３１８１ ｇｃｔｃｇｇｇｇｇｇ ｔｇｃｇｔｇｃｇｔｇ ｔｇｔｇｔｇｔｇｃｇ ｔｇｇｇｇａｇｃｇｃ ｃｇｃｇｔｇｃｇｇｃ ｔｃｃｇｃｇｃｔｇｃ
３２４１ ｃｃｇｇｃｇｇｃｔｇ ｔｇａｇｃｇｃｔｇｃ ｇｇｇｃｇｃｇｇｃｇ ｃｇｇｇｇｃｔｔｔｇ ｔｇｃｇｃｔｃｃｇｃ ａｇｔｇｔｇｃｇｃｇ
３３０１ ａｇｇｇｇａｇｃｇｃ ｇｇｃｃｇｇｇｇｇｃ ｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃ ｇｇｔｇｃｇｇｇｇｇ ｇｇｇｃｔｇｃｇａｇ ｇｇｇａａｃａａａｇ
３３６１ ｇｃｔｇｃｇｔｇｃｇ ｇｇｇｔｇｔｇｔｇｃ ｇｔｇｇｇｇｇｇｇｔ ｇａｇｃａｇｇｇｇｇ ｔｇｔｇｇｇｃｇｃｇ ｔｃｇｇｔｃｇｇｇｃ
３４２１ ｔｇｃａａｃｃｃｃｃ ｃｃｔｇｃａｃｃｃｃ ｃｃｔｃｃｃｃｇａｇ ｔｔｇｃｔｇａｇｃａ ｃｇｇｃｃｃｇｇｃｔ ｔｃｇｇｇｔｇｃｇｇ
３４８１ ｇｇｃｔｃｃｇｔａｃ ｇｇｇｇｃｇｔｇｇｃ ｇｃｇｇｇｇｃｔｃｇ ｃｃｇｔｇｃｃｇｇｇ ｃｇｇｇｇｇｇｔｇｇ ｃｇｇｃａｇｇｔｇｇ
３５４１ ｇｇｇｔｇｃｃｇｇｇ ｃｇｇｇｇｃｇｇｇｇ ｃｃｇｃｃｔｃｇｇｇ ｃｃｇｇｇｇａｇｇｇ ｃｔｃｇｇｇｇｇａｇ ｇｇｇｃｇｃｇｇｃｇ
３６０１ ｇｃｃｃｃｃｇｇａｇ ｃｇｃｃｇｇｃｇｇｃ ｔｇｔｃｇａｇｇｃｇ ｃｇｇｃｇａｇｃｃｇ ｃａｇｃｃａｔｔｇｃ ｃｔｔｔｔａｔｇｇｔ
３６６１ ａａｔｃｇｔｇｃｇａ ｇａｇｇｇｃｇｃａｇ ｇｇａｃｔｔｃｃｔｔ ｔｇｔｃｃｃａａａｔ ｃｔｇｔｇｃｇｇａｇ ｃｃｇａａａｔｃｔｇ
３７２１ ｇｇａｇｇｃｇｃｃｇ ｃｃｇｃａｃｃｃｃｃ ｔｃｔａｇｃｇｇｇｃ ｇｃｇｇｇｇｃｇａａ ｇｃｇｇｔｇｃｇｇｃ ｇｃｃｇｇｃａｇｇａ
３７８１ ａｇｇａａａｔｇｇｇ ｃｇｇｇｇａｇｇｇｃ ｃｔｔｃｇｔｇｃｇｔ ｃｇｃｃｇｃｇｃｃｇ ｃｃｇｔｃｃｃｃｔｔ ｃｔｃｃｃｔｃｔｃｃ
３８４１ ａｇｃｃｔｃｇｇｇｇ ｃｔｇｔｃｃｇｃｇｇ ｇｇｇｇａｃｇｇｃｔ ｇｃｃｔｔｃｇｇｇｇ ｇｇｇａｃｇｇｇｇｃ ａｇｇｇｃｇｇｇｇｔ
３９０１ ｔｃｇｇｃｔｔｃｔｇ ｇｃｇｔｇｔｇａｃｃ ｇｇｃｇｇｃｔｃｔａ ｇａｇｃｃｔｃｔｇｃ ｔａａｃｃａｔｇｔｔ ｃａｔｇｃｃｔｔｃｔ
３９６１ ｔｃｔｔｔｔｔｃｃｔ ａｃａｇｃｔｃｃｔｇ ｇｇｃａａｃｇｔｇｃ ｔｇｇｔｔａｔｔｇｔ ｇｃｔｇｔｃｔｃａｔ ｃａｔｔｔｔｇｇｃａ
４０２１ ａａｇａａｔｔａｃｇ ｃｇｔｇｃｃａｃｃａ ｔｇａｃａｇａｔｇａ ｃａａａｇａｔｇｔｇ ｃｔｔｃｇａｇａｔｇ ｔｇｔｇｇｔｔｔｇｇ
４０８１ ａｃｇａａｔｔｃｃａ ａｃｔｔｇｃｔｔｔａ ｃｔｃｔｃｔａｔｃａ ｇｇａｔｇａｇａｔａ ａｃｔｇａａａｇａｇ ａａｇｃａｇａａｃｃ
４１４１ ａｔａｃｔａｔｔｔｇ ｃｔｔｔｔｇｃｃａａ ｇａｇｔｃａｇｃｔａ ｔｔｔｇａｃｇｔｔｇ ｇｔａａｃｔｇａｃａ ａａｇｔｇａａａａａ
４２０１ ｇｃａｃｔｔｔｃａｇ ａａｇｇｔｔａｔｇａ ｇａｃａａｇａａｇａ ｔｇｔｔａｇｔｇａｇ ａｔａｔｇｇｔｔｔｇ ａａｔａｔｇａａｇｇ
４２６１ ｃａｃａｃｃｃｃｔｇ ａａａｔｇｇｃａｔｔ ａｔｃｃａａｔｔｇｇ ｔｔｔａｃｔａｔｔｔ ｇａｔｃｔｔｃｔｔｇ ｃａｔｃａａｇｔｔｃ
４３２１ ａｇｃｔｃｔｔｃｃｔ ｔｇｇａａｃａｔｃａ ｃａｇｔａｃａｔｔｔ ｃａａｇａｇｔｔｔｔ ｃｃａｇａａａａｇｇ ａｃｃｔｔｃｔａｃａ
４３８１ ｃｔｇｔｃｃａｔｃｃ ａａｇｇａｔｇｃｇｇ ｔｔｇａｇｇｃｔｃａ ｃｔｔｔａｔｇｔｃｇ ｔｇｔａｔｇａａａｇ ａａｇｃｔｇａｔｇｃ
４４４１ ｔｔｔａａａｇｃａｔ ａａａａｇｔｃａａｇ ｔｇａｔｃａａｃｇａ ａａｔｇｃａｇａａａ ａａａｇａｃｃａｃａ ａｇｃａｇｃｔｃｔｇ
４５０１ ｇａｔｇｇｇａｃｔｇ ｃａｇａａｔｇａｃａ ｇａｔｔｔｇａｃｃａ ｇｔｔｔｔｇｇｇｃｃ ａｔｃａａｃｃｇｇａ ａａｃｔｃａｔｇｇａ
４５６１ ａｔａｔｃｃｔｃｃａ ｇａａｇａａａａｔｇ ｇａｔｔｔｃｇｔｔａ ｔａｔｃｃｃｃｔｔｔ ａｇａａｔａｔａｔｃ ａｇａｃｃａｃｇａｃ
４６２１ ｇｇａｇｃｇｇｃｃｔ ｔｔｃａｔｃｃａｇａ ａｇｃｔｇｔｔｃｃｇ ｇｃｃｔｇｔｇｇｃｃ ｇｃａｇａｔｇｇａｃ ａｇｃｔｇｃａｃａｃ
４６８１ ａｃｔｔｇｇａｇａｔ ｃｔｃｃｔｃａｇａｇ ａａｇｔｃｔｇｔｃｃ ｔｔｃｃｇｃａｇｔｃ ｇｃｃｃｃｔｇａａｇ ａｔｇｇａｇａｇａａ
４７４１ ｇａｇｇａｇｃｃａｇ ｇｔｇａｔｇａｔｔｃ ａｃｇｇｇａｔａｇａ ｇｃｃａａｔｇｃｔｇ ｇａａａｃｃｃｃｔｃ ｔｇｃａｇｔｇｇｃｔ
４８０１ ｇａｇｃｇａｇｃａｔ ｃｔｇａｇｃｔａｃｃ ｃａｇａｔａａｃｔｔ ｔｃｔｔｃａｔａｔｔ ａｇｃａｔｔｇｔｃｃ ｃｃｃａｇｃｃａａｃ
４８６１ ａｇａｔｔｇａａａｇ ｃｔｔａｔｃｇａｔａ ａｔｃａａｃｃｔｃｔ ｇｇａｔｔａｃａａａ ａｔｔｔｇｔｇａａａ ｇａｔｔｇａｃｔｇｇ
４９２１ ｔａｔｔｃｔｔａａｃ ｔａｔｇｔｔｇｃｔｃ ｃｔｔｔｔａｃｇｃｔ ａｔｇｔｇｇａｔａｃ ｇｃｔｇｃｔｔｔａａ ｔｇｃｃｔｔｔｇｔａ
４９８１ ｔｃａｔｇｃｔａｔｔ ｇｃｔｔｃｃｃｇｔａ ｔｇｇｃｔｔｔｃａｔ ｔｔｔｃｔｃｃｔｃｃ ｔｔｇｔａｔａａａｔ ｃｃｔｇｇｔｔｇｃｔ
５０４１ ｇｔｃｔｃｔｔｔａｔ ｇａｇｇａｇｔｔｇｔ ｇｇｃｃｃｇｔｔｇｔ ｃａｇｇｃａａｃｇｔ ｇｇｃｇｔｇｇｔｇｔ ｇｃａｃｔｇｔｇｔｔ
５１０１ ｔｇｃｔｇａｃｇｃａ ａｃｃｃｃｃａｃｔｇ ｇｔｔｇｇｇｇｃａｔ ｔｇｃｃａｃｃａｃｃ ｔｇｔｃａｇｃｔｃｃ ｔｔｔｃｃｇｇｇａｃ
５１６１ ｔｔｔｃｇｃｔｔｔｃ ｃｃｃｃｔｃｃｃｔａ ｔｔｇｃｃａｃｇｇｃ ｇｇａａｃｔｃａｔｃ ｇｃｃｇｃｃｔｇｃｃ ｔｔｇｃｃｃｇｃｔｇ
５２２１ ｃｔｇｇａｃａｇｇｇ ｇｃｔｃｇｇｃｔｇｔ ｔｇｇｇｃａｃｔｇａ ｃａａｔｔｃｃｇｔｇ ｇｔｇｔｔｇｔｃｇｇ ｇｇａａａｔｃａｔｃ
５２８１ ｇｔｃｃｔｔｔｃｃｔ ｔｇｇｃｔｇｃｔｃｇ ｃｃｔａｔｇｔｔｇｃ ｃａｃｃｔｇｇａｔｔ ｃｔｇｃｇｃｇｇｇａ ｃｇｔｃｃｔｔｃｔｇ
５３４１ ｃｔａｃｇｔｃｃｃｔ ｔｃｇｇｃｃｃｔｃａ ａｔｃｃａｇｃｇｇａ ｃｃｔｔｃｃｔｔｃｃ ｃｇｃｇｇｃｃｔｇｃ ｔｇｃｃｇｇｃｔｃｔ
５４０１ ｇｃｇｇｃｃｔｃｔｔ ｃｃｇｃｇｔｃｔｔｃ ｇｃｃｔｔｃｇｃｃｃ ｔｃａｇａｃｇａｇｔ ｃｇｇａｔｃｔｃｃｃ ｔｔｔｇｇｇｃｃｇｃ
５４６１ ｃｔｃｃｃｃｇｃａｔ ｃｇａｔａｃｃｇａｇ ｃｇｃｔｇｃｔｃｇａ ｇａｇａｔｃｇａｔｃ ｔｇｃｃｔｃｇａｃｔ ｇｔｇｃｃｔｔｃｔａ
５５２１ ｇｔｔｇｃｃａｇｃｃ ａｔｃｔｇｔｔｇｔｔ ｔｇｃｃｃｃｔｃｃｃ ｃｃｇｔｇｃｃｔｔｃ ｃｔｔｇａｃｃｃｔｇ ｇａａｇｇｔｇｃｃａ
５５８１ ｃｔｃｃｃａｃｔｇｔ ｃｃｔｔｔｃｃｔａａ ｔａａａａｔｇａｇｇ ａａａｔｔｇｃａｔｃ ｇｃａｔｔｇｔｃｔｇ ａｇｔａｇｇｔｇｔｃ
５６４１ ａｔｔｃｔａｔｔｃｔ ｇｇｇｇｇｇｔｇｇｇ ｇｔｇｇｇｇｃａｇｇ ａｃａｇｃａａｇｇｇ ｇｇａｇｇａｔｔｇｇ ｇａａｇａｃａａｔａ
５７０１ ｇｃａｇｇｃａｔｇｃ ｔｇｇｇｇａｃａｃｇ ｔｇｃｇｇａｃｃｇａ ｇｃｇｇｃｃｇｃａｇ ｇａａｃｃｃｃｔａｇ ｔｇａｔｇｇａｇｔｔ
５７６１ ｇｇｃｃａｃｔｃｃｃ ｔｃｔｃｔｇｃｇｃｇ ｃｔｃｇｃｔｃｇｃｔ ｃａｃｔｇａｇｇｃｃ ｇｇｇｃｇａｃｃａａ ａｇｇｔｃｇｃｃｃｇ
５８２１ ａｃｇｃｃｃｇｇｇｃ ｔｔｔｇｃｃｃｇｇｇ ｃｇｇｃｃｔｃａｇｔ ｇａｇｃｇａｇｃｇａ ｇｃｇｃｇｃａｇｃａ ｃａｔｇｔｇａｇｃａ
５８８１ ａａａｇｇｃｃａｇｃ ａａａａｇｇｃｃａｇ ｇａａｃｃｇｔａａａ ａａｇｇｃｃｇｃｇｔ ｔｇｃｔｇｇｃｇｔｔ ｔｔｔｃｃａｔａｇｇ
５９４１ ｃｔｃｃｇｃｃｃｃｃ ｃｔｇａｃｇａｇｃａ ｔｃａｃａａａａａｔ ｃｇａｃｇｃｔｃａａ ｇｔｃａｇａｇｇｔｇ ｇｃｇａａａｃｃｃｇ
６００１ ａｃａｇｇａｃｔａｔ ａａａｇａｔａｃｃａ ｇｇｃｇｔｔｔｃｃｃ ｃｃｔｇｇａａｇｃｔ ｃｃｃｔｃｇｔｇｃｇ ｃｔｃｔｃｃｔｇｔｔ
６０６１ ｃｃｇａｃｃｃｔｇｃ ｃｇｃｔｔａｃｃｇｇ ａｔａｃｃｔｇｔｃｃ ｇｃｃｔｔｔｃｔｃｃ ｃｔｔｃｇｇｇａａｇ ｃｇｔｇｇｃｇｃｔｔ
６１２１ ｔｃｔｃａｔａｇｃｔ ｃａｃｇｃｔｇｔａｇ ｇｔａｔｃｔｃａｇｔ ｔｃｇｇｔｇｔａｇｇ ｔｃｇｔｔｃｇｃｔｃ ｃａａｇｃｔｇｇｇｃ
６１８１ ｔｇｔｇｔｇｃａｃｇ ａａｃｃｃｃｃｃｇｔ ｔｃａｇｃｃｃｇａｃ ｃｇｃｔｇｃｇｃｃｔ ｔａｔｃｃｇｇｔａａ ｃｔａｔｃｇｔｃｔｔ
６２４１ ｇａｇｔｃｃａａｃｃ ｃｇｇｔａａｇａｃａ ｃｇａｃｔｔａｔｃｇ ｃｃａｃｔｇｇｃａｇ ｃａｇｃｃａｃｔｇｇ ｔａａｃａｇｇａｔｔ
６３０１ ａｇｃａｇａｇｃｇａ ｇｇｔａｔｇｔａｇｇ ｃｇｇｔｇ（配列番号１６）
ＬＯＣＵＳ ＡＡＶ＿ｐＣＡＧ－Ｃｉｓｄ２－ＷＰＲＥ－ｂＧＨ ５９１５ ｂｐ ｄｓ－ＤＮＡ環状
ＤＥＦＩＮＩＴＩＯＮ
ＫＥＹＷＯＲＤＳ“アクセッション：ａｄｄｇｅｎｅ＿６５４５５＿１１０９７８”ＦＥＡＴＵＲＥＳ Ｌｏｃａｔｉｏｎ／Ｑｕａｌｉｆｉｅｒｓ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５０４１．．５０６９
／ｌａｂｅｌ＝“ＡｍｐＲプロモーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １６３１．．１６４８
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ１３プライマー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ６１７．．６３９
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１４０”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２２１３．．２２３５
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１５５リバース”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２５３２．．２５５１
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ１４ ＷＰＲＥリバースプライマー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ８１７．．１８８６
／ｌａｂｅｌ＝“キメライントロン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５５０．．５６８
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１３９”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２４３．．２６８
／ｌａｂｅｌ＝“２１ｂｐ反復エレメント”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３３１９．．５９１５
／ｌａｂｅｌ＝“ＡＡＶ－ＣＲＥ逆向き骨格”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２２１０．．２２３３
／ｌａｂｅｌ＝“フォワードｏＭＦ１５２”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５２５．．５４６
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＡＧ３ Ｒ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４７４．．５０３
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１７４プローブＣＡＧ３”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４１３９．．４９９９
／ｌａｂｅｌ＝“アンピシリン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｐｒｉｍｅｒ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ（２９４２．．２９５９）
／ｌａｂｅｌ＝“ＢＧＨ＿リバース＿プライマー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３１７８．．３３１８
／ｌａｂｅｌ＝“ＡＡＶ２ ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ７５７．．７７４
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１４２”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ（１．．１４１）
／ｌａｂｅｌ＝“ＡＡＶ２ ＩＴＲ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒ ２９４５．．３１４８
／ｌａｂｅｌ＝“ｂＧＨ＿ＰＡ＿ターミネーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １８６０．．１８８６
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ２ Ｒ結合部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｅｘｏｎ １８９９．．２００１
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２１７１．．２１９５
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ６８”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ６ｂ２９５
ｅｘｏｎ ２００２．．２２１６
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２エクソン”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ７ｅ６ｄ７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４３４．．４５４
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＡＧ３ Ｆ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｆｅａｔｕｒｅ ２３２１．．２９０８
／ｌａｂｅｌ＝“ＷＰＲＥ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２１２３．．２１４７
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１５４－フォワード”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４１１．．４３１
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＡＧ４リバース”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ６２３．．６４２
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１４１＼”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆｅｆ８６
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２３５３．．２３８７
／ｌａｂｅｌ＝“ＷＰＲＥ Ｒ２”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｄ５９６８７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５１９９．．５２５０
／ｌａｂｅｌ＝“オリジナルのｐＣＡＧ骨格中で欠損する配列”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３３６５．．３９８４
／ｌａｂｅｌ＝“ｐＢＲ３２２起点”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５０７．．５３５
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＭＶフォワード”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２０７６．．２１００
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ６７”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ５８ａ５ｅ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５３９．．８１５
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＢＡプロモーター”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １７３．．５３７
／ｌａｂｅｌ＝“ＣＭＶエンハンサー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｃ７ｂ０ｅ３
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ４８１．．５０２
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ１プライマー結合部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃７５ｃ６ａ９
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３４９．．３７１
／ｌａｂｅｌ＝“フォワードＣＡＧ４”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ５５１８．．５８２４
／ｌａｂｅｌ＝“Ｆ１起点”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃８５ｄａｅ９
ｐｒｉｍｅｒ １８４１．．１８６０
／ｌａｂｅｌ＝“ｐＣＡＧ＿Ｆ＿プライマー”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ４ａｂａｃ
ＣＤＳ １８９９．．２３０６
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２ ＣＤＳ（ＣＤＧＳＨ鉄－硫黄ドメイン含有タンパク質２）”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆａａｃ６１
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ２０１０．．２０７８
／ｌａｂｅｌ＝“Ｃｉｓｄ２ ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｂ１ｆｆ６７
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ ３８０．．４０８
／ｌａｂｅｌ＝“ｏＭＦ１７５ ＣＡＧ４プローブ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃９ｅａｆｄ２
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １８９３．．１８９８
／ｌａｂｅｌ＝“Ｋｏｚａｋ”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆｆ９ｃｃｄ
ｍｉｓｃ＿ｆｅａｔｕｒｅ １８６０．．１８８６
／ｌａｂｅｌ＝“ｏ２ＭＦ２ Ｒ結合部位”
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｒｅｖｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
／ＡｐＥｉｎｆｏ＿ｆｗｄｃｏｌｏｒ＝＃ｆ８ｄ３ａ９
ＯＲＩＧＩＮ
１ ｃｃｔｇｃａｇｇｃａ ｇｃｔｇｃｇｃｇｃｔ ｃｇｃｔｃｇｃｔｃａ ｃｔｇａｇｇｃｃｇｃ ｃｃｇｇｇｃａａａｇ ｃｃｃｇｇｇｃｇｔｃ
６１ ｇｇｇｃｇａｃｃｔｔ ｔｇｇｔｃｇｃｃｃｇ ｇｃｃｔｃａｇｔｇａ ｇｃｇａｇｃｇａｇｃ ｇｃｇｃａｇａｇａｇ ｇｇａｇｔｇｇｃｃａ
１２１ ａｃｔｃｃａｔｃａｃ ｔａｇｇｇｇｔｔｃｃ ｔｇｃｇｇｃｃｇｃａ ｃｇｃｇａａａｃａａ ｔｔｃｔｇｃａｇｇａ ａｔｃｔａｇｔｔａｔ
１８１ ｔａａｔａｇｔａａｔ ｃａａｔｔａｃｇｇｇ ｇｔｃａｔｔａｇｔｔ ｃａｔａｇｃｃｃａｔ ａｔａｔｇｇａｇｔｔ ｃｃｇｃｇｔｔａｃａ
２４１ ｔａａｃｔｔａｃｇｇ ｔａａａｔｇｇｃｃｃ ｇｃｃｔｇｇｃｔｇａ ｃｃｇｃｃｃａａｃｇ ａｃｃｃｃｃｇｃｃｃ ａｔｔｇａｃｇｔｃａ
３０１ ａｔａａｔｇａｃｇｔ ａｔｇｔｔｃｃｃａｔ ａｇｔａａｃｇｃｃａ ａｔａｇｇｇａｃｔｔ ｔｃｃａｔｔｇａｃｇ ｔｃａａｔｇｇｇｔｇ
３６１ ｇａｇｔａｔｔｔａｃ ｇｇｔａａａｃｔｇｃ ｃｃａｃｔｔｇｇｃａ ｇｔａｃａｔｃａａｇ ｔｇｔａｔｃａｔａｔ ｇｃｃａａｇｔａｃｇ
４２１ ｃｃｃｃｃｔａｔｔｇ ａｃｇｔｃａａｔｇａ ｃｇｇｔａａａｔｇｇ ｃｃｃｇｃｃｔｇｇｃ ａｔｔａｔｇｃｃｃａ ｇｔａｃａｔｇａｃｃ
４８１ ｔｔａｔｇｇｇａｃｔ ｔｔｃｃｔａｃｔｔｇ ｇｃａｇｔａｃａｔｃ ｔａｃｇｔａｔｔａｇ ｔｃａｔｃｇｃｔａｔ ｔａｃｃａｔｇｇｔｃ
５４１ ｇａｇｇｔｇａｇｃｃ ｃｃａｃｇｔｔｃｔｇ ｃｔｔｃａｃｔｃｔｃ ｃｃｃａｔｃｔｃｃｃ ｃｃｃｃｃｔｃｃｃｃ ａｃｃｃｃｃａａｔｔ
６０１ ｔｔｇｔａｔｔｔａｔ ｔｔａｔｔｔｔｔｔａ ａｔｔａｔｔｔｔｇｔ ｇｃａｇｃｇａｔｇｇ ｇｇｇｃｇｇｇｇｇｇ ｇｇｇｇｇｇｇｇｇｇ
６６１ ｃｇｃｇｃｇｃｃａｇ ｇｃｇｇｇｇｃｇｇｇ ｇｃｇｇｇｇｃｇａｇ ｇｇｇｃｇｇｇｇｃｇ ｇｇｇｃｇａｇｇｃｇ ｇａｇａｇｇｔｇｃｇ
７２１ ｇｃｇｇｃａｇｃｃａ ａｔｃａｇａｇｃｇｇ ｃｇｃｇｃｔｃｃｇａ ａａｇｔｔｔｃｃｔｔ ｔｔａｔｇｇｃｇａｇ ｇｃｇｇｃｇｇｃｇｇ
７８１ ｃｇｇｃｇｇｃｃｃｔ ａｔａａａａａｇｃｇ ａａｇｃｇｃｇｃｇｇ ｃｇｇｇｃｇｇｇａｇ ｔｃｇｃｔｇｃｇｃｇ ｃｔｇｃｃｔｔｃｇｃ
８４１ ｃｃｃｇｔｇｃｃｃｃ ｇｃｔｃｃｇｃｃｇｃ ｃｇｃｃｔｃｇｃｇｃ ｃｇｃｃｃｇｃｃｃｃ ｇｇｃｔｃｔｇａｃｔ ｇａｃｃｇｃｇｔｔａ
９０１ ｃｔｃｃｃａｃａｇｇ ｔｇａｇｃｇｇｇｃｇ ｇｇａｃｇｇｃｃｃｔ ｔｃｔｃｃｔｃｃｇｇ ｇｃｔｇｔａａｔｔａ ｇｃｇｃｔｔｇｇｔｔ
９６１ ｔａａｔｇａｃｇｇｃ ｔｔｇｔｔｔｃｔｔｔ ｔｃｔｇｔｇｇｃｔｇ ｃｇｔｇａａａｇｃｃ ｔｔｇａｇｇｇｇｃｔ ｃｃｇｇｇａｇｇｇｃ
１０２１ ｃｃｔｔｔｇｔｇｃｇ ｇｇｇｇｇａｇｃｇｇ ｃｔｃｇｇｇｇｇｇｔ ｇｃｇｔｇｃｇｔｇｔ ｇｔｇｔｇｔｇｃｇｔ ｇｇｇｇａｇｃｇｃｃ
１０８１ ｇｃｇｔｇｃｇｇｃｔ ｃｃｇｃｇｃｔｇｃｃ ｃｇｇｃｇｇｃｔｇｔ ｇａｇｃｇｃｔｇｃｇ ｇｇｃｇｃｇｇｃｇｃ ｇｇｇｇｃｔｔｔｇｔ
１１４１ ｇｃｇｃｔｃｃｇｃａ ｇｔｇｔｇｃｇｃｇａ ｇｇｇｇａｇｃｇｃｇ ｇｃｃｇｇｇｇｇｃｇ ｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇ ｇｔｇｃｇｇｇｇｇｇ
１２０１ ｇｇｃｔｇｃｇａｇｇ ｇｇａａｃａａａｇｇ ｃｔｇｃｇｔｇｃｇｇ ｇｇｔｇｔｇｔｇｃｇ ｔｇｇｇｇｇｇｇｔｇ ａｇｃａｇｇｇｇｇｔ
１２６１ ｇｔｇｇｇｃｇｃｇｔ ｃｇｇｔｃｇｇｇｃｔ ｇｃａａｃｃｃｃｃｃ ｃｔｇｃａｃｃｃｃｃ ｃｔｃｃｃｃｇａｇｔ ｔｇｃｔｇａｇｃａｃ
１３２１ ｇｇｃｃｃｇｇｃｔｔ ｃｇｇｇｔｇｃｇｇｇ ｇｃｔｃｃｇｔａｃｇ ｇｇｇｃｇｔｇｇｃｇ ｃｇｇｇｇｃｔｃｇｃ ｃｇｔｇｃｃｇｇｇｃ
１３８１ ｇｇｇｇｇｇｔｇｇｃ ｇｇｃａｇｇｔｇｇｇ ｇｇｔｇｃｃｇｇｇｃ ｇｇｇｇｃｇｇｇｇｃ ｃｇｃｃｔｃｇｇｇｃ ｃｇｇｇｇａｇｇｇｃ
１４４１ ｔｃｇｇｇｇｇａｇｇ ｇｇｃｇｃｇｇｃｇｇ ｃｃｃｃｃｇｇａｇｃ ｇｃｃｇｇｃｇｇｃｔ ｇｔｃｇａｇｇｃｇｃ ｇｇｃｇａｇｃｃｇｃ
１５０１ ａｇｃｃａｔｔｇｃｃ ｔｔｔｔａｔｇｇｔａ ａｔｃｇｔｇｃｇａｇ ａｇｇｇｃｇｃａｇｇ ｇａｃｔｔｃｃｔｔｔ ｇｔｃｃｃａａａｔｃ
１５６１ ｔｇｔｇｃｇｇａｇｃ ｃｇａａａｔｃｔｇｇ ｇａｇｇｃｇｃｃｇｃ ｃｇｃａｃｃｃｃｃｔ ｃｔａｇｃｇｇｇｃｇ ｃｇｇｇｇｃｇａａｇ
１６２１ ｃｇｇｔｇｃｇｇｃｇ ｃｃｇｇｃａｇｇａａ ｇｇａａａｔｇｇｇｃ ｇｇｇｇａｇｇｇｃｃ ｔｔｃｇｔｇｃｇｔｃ ｇｃｃｇｃｇｃｃｇｃ
１６８１ ｃｇｔｃｃｃｃｔｔｃ ｔｃｃｃｔｃｔｃｃａ ｇｃｃｔｃｇｇｇｇｃ ｔｇｔｃｃｇｃｇｇｇ ｇｇｇａｃｇｇｃｔｇ ｃｃｔｔｃｇｇｇｇｇ
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１８０１ ａａｃｃａｔｇｔｔｃ ａｔｇｃｃｔｔｃｔｔ ｃｔｔｔｔｔｃｃｔａ ｃａｇｃｔｃｃｔｇｇ ｇｃａａｃｇｔｇｃｔ ｇｇｔｔａｔｔｇｔｇ
１８６１ ｃｔｇｔｃｔｃａｔｃ ａｔｔｔｔｇｇｃａａ ａｇａａｔｔａｃｇｃ ｇｔｇｃｃａｃｃａｔ ｇｇｔｃｃｔｇｇａｃ ａｇｃｇｔｇｇｃｃｃ
１９２１ ｇｃａｔｃｇｔｇａａ ｇｇｔｇｃａｇｃｔｇ ｃｃｃｇｃｃｔａｃｃ ｔｃａａｇｃａｇｃｔ ｃｃｃｇｇｔｃｃｃｃ ｇａｃａｇｃａｔｃａ
１９８１ ｃｃｇｇｇｔｔｃｇｃ ｃｃｇｃｃｔｃａｃａ ｇｔｔｔｃａｇａｃｔ ｇｇｃｔｃｃｇｃｃｔ ａｃｔｇｃｃｃｔｔｃ ｃｔｃｇｇｇｇｔａｃ
２０４１ ｔｔｇｃｇｃｔｔｃｔ ｇｇｇｃｔａｃｃｔｃ ｇｃａｇｔｇｃｇｃｃ ｃａｔｔｃｔｔｃｃｃ ａａａｇａａｇａａｇ ｃａａｃａｇａａｇｇ
２１０１ ａｔａｇｃｔｔｇａｔ ｃａａｔｃｔｔａａｇ ａｔａｃａａａａｇｇ ａａａａｔｃｃｃａａ ｇｇｔｇｇｔｇａａｔ ｇａｇａｔａａａｃａ
２１６１ ｔｔｇａａｇａｔｃｔ ｇｔｇｔｃｔｃａｃｃ ａａａｇｃａｇｃｔｔ ａｔｔｇｔａｇｇｔｇ ｃｔｇｇｃｇｇｔｃｃ ａａｇａｃｇｔｔｔｃ
２２２１ ｃｔｇｃｃｔｇｔｇａ ｔｇｇａｔｃｃｃａｔ ａａｔａａｇｃａｔａ ａｔｇａａｔｔｇａｃ ａｇｇｃｇａｔａａｃ ｇｔｇｇｇｔｃｃｔｃ
２２８１ ｔｃａｔｃｃｔｇａａ ｇａａｇａａａｇａａ ｇｔａｔａｇａａｇｃ ｔｔａｔｃｇａｔａａ ｔｃａａｃｃｔｃｔｇ ｇａｔｔａｃａａａａ
２３４１ ｔｔｔｇｔｇａａａｇ ａｔｔｇａｃｔｇｇｔ ａｔｔｃｔｔａａｃｔ ａｔｇｔｔｇｃｔｃｃ ｔｔｔｔａｃｇｃｔａ ｔｇｔｇｇａｔａｃｇ
２４０１ ｃｔｇｃｔｔｔａａｔ ｇｃｃｔｔｔｇｔａｔ ｃａｔｇｃｔａｔｔｇ ｃｔｔｃｃｃｇｔａｔ ｇｇｃｔｔｔｃａｔｔ ｔｔｃｔｃｃｔｃｃｔ
２４６１ ｔｇｔａｔａａａｔｃ ｃｔｇｇｔｔｇｃｔｇ ｔｃｔｃｔｔｔａｔｇ ａｇｇａｇｔｔｇｔｇ ｇｃｃｃｇｔｔｇｔｃ ａｇｇｃａａｃｇｔｇ
２５２１ ｇｃｇｔｇｇｔｇｔｇ ｃａｃｔｇｔｇｔｔｔ ｇｃｔｇａｃｇｃａａ ｃｃｃｃｃａｃｔｇｇ ｔｔｇｇｇｇｃａｔｔ ｇｃｃａｃｃａｃｃｔ
２５８１ ｇｔｃａｇｃｔｃｃｔ ｔｔｃｃｇｇｇａｃｔ ｔｔｃｇｃｔｔｔｃｃ ｃｃｃｔｃｃｃｔａｔ ｔｇｃｃａｃｇｇｃｇ ｇａａｃｔｃａｔｃｇ
２６４１ ｃｃｇｃｃｔｇｃｃｔ ｔｇｃｃｃｇｃｔｇｃ ｔｇｇａｃａｇｇｇｇ ｃｔｃｇｇｃｔｇｔｔ ｇｇｇｃａｃｔｇａｃ ａａｔｔｃｃｇｔｇｇ
２７０１ ｔｇｔｔｇｔｃｇｇｇ ｇａａａｔｃａｔｃｇ ｔｃｃｔｔｔｃｃｔｔ ｇｇｃｔｇｃｔｃｇｃ ｃｔａｔｇｔｔｇｃｃ ａｃｃｔｇｇａｔｔｃ
２７６１ ｔｇｃｇｃｇｇｇａｃ ｇｔｃｃｔｔｃｔｇｃ ｔａｃｇｔｃｃｃｔｔ ｃｇｇｃｃｃｔｃａａ ｔｃｃａｇｃｇｇａｃ ｃｔｔｃｃｔｔｃｃｃ
２８２１ ｇｃｇｇｃｃｔｇｃｔ ｇｃｃｇｇｃｔｃｔｇ ｃｇｇｃｃｔｃｔｔｃ ｃｇｃｇｔｃｔｔｃｇ ｃｃｔｔｃｇｃｃｃｔ ｃａｇａｃｇａｇｔｃ
２８８１ ｇｇａｔｃｔｃｃｃｔ ｔｔｇｇｇｃｃｇｃｃ ｔｃｃｃｃｇｃａｔｃ ｇａｔａｃｃｇａｇｃ ｇｃｔｇｃｔｃｇａｇ ａｇａｔｃｇａｔｃｔ
２９４１ ｇｃｃｔｃｇａｃｔｇ ｔｇｃｃｔｔｃｔａｇ ｔｔｇｃｃａｇｃｃａ ｔｃｔｇｔｔｇｔｔｔ ｇｃｃｃｃｔｃｃｃｃ ｃｇｔｇｃｃｔｔｃｃ
３００１ ｔｔｇａｃｃｃｔｇｇ ａａｇｇｔｇｃｃａｃ ｔｃｃｃａｃｔｇｔｃ ｃｔｔｔｃｃｔａａｔ ａａａａｔｇａｇｇａ ａａｔｔｇｃａｔｃｇ
３０６１ ｃａｔｔｇｔｃｔｇａ ｇｔａｇｇｔｇｔｃａ ｔｔｃｔａｔｔｃｔｇ ｇｇｇｇｇｔｇｇｇｇ ｔｇｇｇｇｃａｇｇａ ｃａｇｃａａｇｇｇｇ
３１２１ ｇａｇｇａｔｔｇｇｇ ａａｇａｃａａｔａｇ ｃａｇｇｃａｔｇｃｔ ｇｇｇｇａｃａｃｇｔ ｇｃｇｇａｃｃｇａｇ ｃｇｇｃｃｇｃａｇｇ
３１８１ ａａｃｃｃｃｔａｇｔ ｇａｔｇｇａｇｔｔｇ ｇｃｃａｃｔｃｃｃｔ ｃｔｃｔｇｃｇｃｇｃ ｔｃｇｃｔｃｇｃｔｃ ａｃｔｇａｇｇｃｃｇ
３２４１ ｇｇｃｇａｃｃａａａ ｇｇｔｃｇｃｃｃｇａ ｃｇｃｃｃｇｇｇｃｔ ｔｔｇｃｃｃｇｇｇｃ ｇｇｃｃｔｃａｇｔｇ ａｇｃｇａｇｃｇａｇ
３３０１ ｃｇｃｇｃａｇｃｔｇ ｃｃｔｇｃａｇｇａｃ ａｔｇｔｇａｇｃａａ ａａｇｇｃｃａｇｃａ ａａａｇｇｃｃａｇｇ ａａｃｃｇｔａａａａ
３３６１ ａｇｇｃｃｇｃｇｔｔ ｇｃｔｇｇｃｇｔｔｔ ｔｔｃｃａｔａｇｇｃ ｔｃｃｇｃｃｃｃｃｃ ｔｇａｃｇａｇｃａｔ ｃａｃａａａａａｔｃ
３４２１ ｇａｃｇｃｔｃａａｇ ｔｃａｇａｇｇｔｇｇ ｃｇａａａｃｃｃｇａ ｃａｇｇａｃｔａｔａ ａａｇａｔａｃｃａｇ ｇｃｇｔｔｔｃｃｃｃ
３４８１ ｃｔｇｇａａｇｃｔｃ ｃｃｔｃｇｔｇｃｇｃ ｔｃｔｃｃｔｇｔｔｃ ｃｇａｃｃｃｔｇｃｃ ｇｃｔｔａｃｃｇｇａ ｔａｃｃｔｇｔｃｃｇ
３５４１ ｃｃｔｔｔｃｔｃｃｃ ｔｔｃｇｇｇａａｇｃ ｇｔｇｇｃｇｃｔｔｔ ｃｔｃａｔａｇｃｔｃ ａｃｇｃｔｇｔａｇｇ ｔａｔｃｔｃａｇｔｔ
３６０１ ｃｇｇｔｇｔａｇｇｔ ｃｇｔｔｃｇｃｔｃｃ ａａｇｃｔｇｇｇｃｔ ｇｔｇｔｇｃａｃｇａ ａｃｃｃｃｃｃｇｔｔ ｃａｇｃｃｃｇａｃｃ
３６６１ ｇｃｔｇｃｇｃｃｔｔ ａｔｃｃｇｇｔａａｃ ｔａｔｃｇｔｃｔｔｇ ａｇｔｃｃａａｃｃｃ ｇｇｔａａｇａｃａｃ ｇａｃｔｔａｔｃｇｃ
３７２１ ｃａｃｔｇｇｃａｇｃ ａｇｃｃａｃｔｇｇｔ ａａｃａｇｇａｔｔａ ｇｃａｇａｇｃｇａｇ ｇｔａｔｇｔａｇｇｃ ｇｇｔｇｃｔａｃａｇ
３７８１ ａｇｔｔｃｔｔｇａａ ｇｔｇｇｔｇｇｃｃｔ ａａｃｔａｃｇｇｃｔ ａｃａｃｔａｇａａｇ ａａｃａｇｔａｔｔｔ ｇｇｔａｔｃｔｇｃｇ
３８４１ ｃｔｃｔｇｃｔｇａａ ｇｃｃａｇｔｔａｃｃ ｔｔｃｇｇａａａａａ ｇａｇｔｔｇｇｔａｇ ｃｔｃｔｔｇａｔｃｃ ｇｇｃａａａｃａａａ
３９０１ ｃｃａｃｃｇｃｔｇｇ ｔａｇｃｇｇｔｇｇｔ ｔｔｔｔｔｔｇｔｔｔ ｇｃａａｇｃａｇｃａ ｇａｔｔａｃｇｃｇｃ ａｇａａａａａａａｇ
３９６１ ｇａｔｃｔｃａａｇａ ａｇａｔｃｃｔｔｔｇ ａｔｃｔｔｔｔｃｔａ ｃｇｇｇｇｔｃｔｇａ ｃｇｃｔｃａｇｔｇｇ ａａｃｇａａａａｃｔ
４０２１ ｃａｃｇｔｔａａｇｇ ｇａｔｔｔｔｇｇｔｃ ａｔｇａｇａｔｔａｔ ｃａａａａａｇｇａｔ ｃｔｔｃａｃｃｔａｇ ａｔｃｃｔｔｔｔａａ
４０８１ ａｔｔａａａａａｔｇ ａａｇｔｔｔｔａａａ ｔｃａａｔｃｔａａａ ｇｔａｔａｔａｔｇａ ｇｔａａａｃｔｔｇｇ ｔｃｔｇａｃａｇｔｔ
４１４１ ａｃｃａａｔｇｃｔｔ ａａｔｃａｇｔｇａｇ ｇｃａｃｃｔａｔｃｔ ｃａｇｃｇａｔｃｔｇ ｔｃｔａｔｔｔｃｇｔ ｔｃａｔｃｃａｔａｇ
４２０１ ｔｔｇｃｃｔｇａｃｔ ｃｃｃｃｇｔｃｇｔｇ ｔａｇａｔａａｃｔａ ｃｇａｔａｃｇｇｇａ ｇｇｇｃｔｔａｃｃａ ｔｃｔｇｇｃｃｃｃａ
４２６１ ｇｔｇｃｔｇｃａａｔ ｇａｔａｃｃｇｃｇａ ｇａｃｃｃａｃｇｃｔ ｃａｃｃｇｇｃｔｃｃ ａｇａｔｔｔａｔｃａ ｇｃａａｔａａａｃｃ
４３２１ ａｇｃｃａｇｃｃｇｇ ａａｇｇｇｃｃｇａｇ ｃｇｃａｇａａｇｔｇ ｇｔｃｃｔｇｃａａｃ ｔｔｔａｔｃｃｇｃｃ ｔｃｃａｔｃｃａｇｔ
４３８１ ｃｔａｔｔａａｔｔｇ ｔｔｇｃｃｇｇｇａａ ｇｃｔａｇａｇｔａａ ｇｔａｇｔｔｃｇｃｃ ａｇｔｔａａｔａｇｔ ｔｔｇｃｇｃａａｃｇ
４４４１ ｔｔｇｔｔｇｃｃａｔ ｔｇｃｔａｃａｇｇｃ ａｔｃｇｔｇｇｔｇｔ ｃａｃｇｃｔｃｇｔｃ ｇｔｔｔｇｇｔａｔｇ ｇｃｔｔｃａｔｔｃａ
４５０１ ｇｃｔｃｃｇｇｔｔｃ ｃｃａａｃｇａｔｃａ ａｇｇｃｇａｇｔｔａ ｃａｔｇａｔｃｃｃｃ ｃａｔｇｔｔｇｔｇｃ ａａａａａａｇｃｇｇ
４５６１ ｔｔａｇｃｔｃｃｔｔ ｃｇｇｔｃｃｔｃｃｇ ａｔｃｇｔｔｇｔｃａ ｇａａｇｔａａｇｔｔ ｇｇｃｃｇｃａｇｔｇ ｔｔａｔｃａｃｔｃａ
４６２１ ｔｇｇｔｔａｔｇｇｃ ａｇｃａｃｔｇｃａｔ ａａｔｔｃｔｃｔｔａ ｃｔｇｔｃａｔｇｃｃ ａｔｃｃｇｔａａｇａ ｔｇｃｔｔｔｔｃｔｇ
４６８１ ｔｇａｃｔｇｇｔｇａ ｇｔａｃｔｃａａｃｃ ａａｇｔｃａｔｔｃｔ ｇａｇａａｔａｇｔｇ ｔａｔｇｃｇｇｃｇａ ｃｃｇａｇｔｔｇｃｔ
４７４１ ｃｔｔｇｃｃｃｇｇｃ ｇｔｃａａｔａｃｇｇ ｇａｔａａｔａｃｃｇ ｃｇｃｃａｃａｔａｇ ｃａｇａａｃｔｔｔａ ａａａｇｔｇｃｔｃａ
４８０１ ｔｃａｔｔｇｇａａａ ａｃｇｔｔｃｔｔｃｇ ｇｇｇｃｇａａａａｃ ｔｃｔｃａａｇｇａｔ ｃｔｔａｃｃｇｃｔｇ ｔｔｇａｇａｔｃｃａ
４８６１ ｇｔｔｃｇａｔｇｔａ ａｃｃｃａｃｔｃｇｔ ｇｃａｃｃｃａａｃｔ ｇａｔｃｔｔｃａｇｃ ａｔｃｔｔｔｔａｃｔ ｔｔｃａｃｃａｇｃｇ
４９２１ ｔｔｔｃｔｇｇｇｔｇ ａｇｃａａａａａｃａ ｇｇａａｇｇｃａａａ ａｔｇｃｃｇｃａａａ ａａａｇｇｇａａｔａ ａｇｇｇｃｇａｃａｃ
４９８１ ｇｇａａａｔｇｔｔｇ ａａｔａｃｔｃａｔａ ｃｔｃｔｔｃｃｔｔｔ ｔｔｃａａｔａｔｔａ ｔｔｇａａｇｃａｔｔ ｔａｔｃａｇｇｇｔｔ
５０４１ ａｔｔｇｔｃｔｃａｔ ｇａｇｃｇｇａｔａｃ ａｔａｔｔｔｇａａｔ ｇｔａｔｔｔａｇａａ ａａａｔａａａｃａａ ａｔａｇｇｇｇｔｔｃ
５１０１ ｃｇｃｇｃａｃａｔｔ ｔｃｃｃｃｇａａａａ ｇｔｇｃｃａｃｃｔｇ ａｃｇｔｃｔａａｇａ ａａｃｃａｔｔａｔｔ ａｔｃａｔｇａｃａｔ
５１６１ ｔａａｃｃｔａｔａａ ａａａｔａｇｇｃｇｔ ａｔｃａｃｇａｇｇｃ ｃｃｔｔｔｃｇｔｃｔ ｃｇｃｇｃｇｔｔｔｃ ｇｇｔｇａｔｇａｃｇ
５２２１ ｇｔｇａａａａｃｃｔ ｃｔｇａｃａｃａｔｇ ｃａｇｃｔｃｃｃｇｇ ａｇａｃｇｇｔｃａｃ ａｇｃｔｔｇｔｃｔｇ ｔａａｇｃｇｇａｔｇ
５２８１ ｃｃｇｇｇａｇｃａｇ ａｃａａｇｃｃｃｇｔ ｃａｇｇｇｃｇｃｇｔ ｃａｇｃｇｇｇｔｇｔ ｔｇｇｃｇｇｇｔｇｔ ｃｇｇｇｇｃｔｇｇｃ
５３４１ ｔｔａａｃｔａｔｇｃ ｇｇｃａｔｃａｇａｇ ｃａｇａｔｔｇｔａｃ ｔｇａｇａｇｔｇｃａ ｃｃａｔａａａａｔｔ ｇｔａａａｃｇｔｔａ
５４０１ ａｔａｔｔｔｔｇｔｔ ａａａａｔｔｃｇｃｇ ｔｔａａａｔｔｔｔｔ ｇｔｔａａａｔｃａｇ ｃｔｃａｔｔｔｔｔｔ ａａｃｃａａｔａｇａ
５４６１ ｃｃｇａａａｔｃｇｇ ｃａａａａｔｃｃｃｔ ｔａｔａａａｔｃａａ ａａｇａａｔａｇｃｃ ｃｇａｇａｔａｇａｇ ｔｔｇａｇｔｇｔｔｇ
５５２１ ｔｔｃｃａｇｔｔｔｇ ｇａａｃａａｇａｇｔ ｃｃａｃｔａｔｔａａ ａｇａａｃｇｔｇｇａ ｃｔｃｃａａｃｇｔｃ ａａａｇｇｇｃｇａａ
５５８１ ａａａｃｃｇｔｃｔａ ｔｃａｇｇｇｃｇａｔ ｇｇｃｃｃａｃｔａｃ ｇｔｇａａｃｃａｔｃ ａｃｃｃａａａｔｃａ ａｇｔｔｔｔｔｔｇｇ
５６４１ ｇｇｔｃｇａｇｇｔｇ ｃｃｇｔａａａｇｃａ ｃｔａａａｔｃｇｇａ ａｃｃｃｔａａａｇｇ ｇａｇｃｃｃｃｃｇａ ｔｔｔａｇａｇｃｔｔ
５７０１ ｇａｃｇｇｇｇａａａ ｇｃｃｇｇｃｇａａｃ ｇｔｇｇｃｇａｇａａ ａｇｇａａｇｇｇａａ ｇａａａｇｃｇａａａ ｇｇａｇｃｇｇｇｃｇ
５７６１ ｃｔａａｇｇｃｇｃｔ ｇｇｃａａｇｔｇｔａ ｇｃｇｇｔｃａｃｇｃ ｔｇｃｇｃｇｔａａｃ ｃａｃｃａｃａｃｃｃ ｇｃｃｇｃｇｃｔｔａ
５８２１ ａｔｇｃｇｃｃｇｃｔ ａｃａｇｇｇｃｇｃｇ ｔａｃｔａｔｇｇｔｔ ｇｃｔｔｔｇａｃｇｔ ａｔｇｃｇｇｔｇｔｇ ａａａｔａｃｃｇｃａ
５８８１ ｃａｇａｔｇｃｇｔａ ａｇｇａｇａａａａｔ ａｃｃｇｃａｔｃａｇ ｇｃｇｃｃ（配列番号１７）
参照文献
１． Ｎｉｃｃｏｌｉ， Ｔ． ｅｔ ａｌ． Ａｇｅｉｎｇ ａｓ ａ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｒ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｃｕｒｒ． Ｂｉｏｌ． ２２， Ｒ７４１－５２ （２０１２）． ＰＭＩＤ：２２９７５００５

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４． Ｍｏｓｋａｌｅｖ， Ａ． ｅｔ ａｌ． Ｇｅｒｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒｓ．ｏｒｇ： ａ ｎｅｗ， ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ ａｎｄ ｃｕｒａｔｅｄ ｄａｔａｂａｓｅ ｏｆ ｃｕｒｒｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓ ｉｎ ａｇｉｎｇ ａｎｄ ａｇｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｄｉｓｅａｓｅ． Ａｇｉｎｇ （Ａｌｂａｎｙ． ＮＹ）． ７， ６１６－６２８ （２０１５）． ＰＭＩＤ：２６３４２９１９

５． Ｒｉｇｏｌｉ， Ｌ． ＆ Ｄｉ Ｂｅｌｌａ， Ｃ． Ｗｏｌｆｒａｍ ｓｙｎｄｒｏｍｅ １ ａｎｄ Ｗｏｌｆｒａｍ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ２． Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｐｅｄｉａｔｒ． ２４， １ （２０１２）． ＰＭＩＤ：２２７９０１０２

６． Ｕｒａｎｏ， Ｆ． Ｗｏｌｆｒａｍ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ： Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ， Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ， ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ． Ｃｕｒｒ． Ｄｉａｂ． Ｒｅｐ． １６， ６ （２０１６）． ＰＭＩＤ：２６７４２９３１

７． Ｃｈｅｎ， Ｙ．－Ｆ．， Ｗｕ， Ｃ．－Ｙ．， Ｋｉｒｂｙ， Ｒ．， Ｋａｏ， Ｃ．－Ｈ． ＆ Ｔｓａｉ， Ｔ．－Ｆ． Ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ＣＩＳＤ２ ｇｅｎｅ ｉｎ ｌｉｆｅｓｐａｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｄｉｓｅａｓｅ． Ａｎｎ． Ｎ． Ｙ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． １２０１， ５８－６４ （２０１０）． ＰＭＩＤ：２０６４９５４０

８． Ｃｏｎｌａｎ， Ａ． Ｒ． ｅｔ ａｌ． Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｍｉｎｅｒ１： Ｔｈｅ ｒｅｄｏｘ－ａｃｔｉｖｅ ２Ｆｅ－２Ｓ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃａｕｓａｔｉｖｅ ｉｎ Ｗｏｌｆｒａｍ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ ２． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ３９２， １４３－５３ （２００９）． ＰＭＩＤ：１９５８０８１６

９． Ｃｈｅｎ， Ｙ．－Ｆ． ｅｔ ａｌ． Ｃｉｓｄ２ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｄｒｉｖｅｓ ｐｒｅｍａｔｕｒｅ ａｇｉｎｇ ａｎｄ ｃａｕｓｅｓ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｅｆｅｃｔｓ ｉｎ ｍｉｃｅ． Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ． ２３， １１８３－１１９４ （２００９）． ＰＭＩＤ：１９４５１２１９

１０． Ｗｕ， Ｃ．－Ｙ． ｅｔ ａｌ． Ａ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｌｅｖｅｌ ｏｆ Ｃｉｓｄ２ ｅｘｔｅｎｄｓ ｈｅａｌｔｈｙ ｌｉｆｅｓｐａｎ ａｎｄ ｄｅｌａｙｓ ａｇｉｎｇ ｉｎ ｍｉｃｅ． Ｈｕｍ． Ｍｏｌ． Ｇｅｎｅｔ． ２１， ３９５６－３９６８ （２０１２）． ＰＭＩＤ：２２６６１５０１

１１． Ｐｕｃａ， Ａ． Ａ． ｅｔ ａｌ． Ａ ｇｅｎｏｍｅ－ｗｉｄｅ ｓｃａｎ ｆｏｒ ｌｉｎｋａｇｅ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｅｘｃｅｐｔｉｏｎａｌ ｌｏｎｇｅｖｉｔｙ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ ａ ｌｏｃｕｓ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ４． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ９８， １０５０５－１０５０８ （２００１）． ＰＭＩＤ：１１５２６２４６

１２． Ｌｕ， Ｙ． ｅｔ ａｌ． Ｒｅｖｅｒｓａｌ ｏｆ ａｇｅｉｎｇ－ ａｎｄ ｉｎｊｕｒｙ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｖｉｓｉｏｎ ｌｏｓｓ ｂｙ Ｔｅｔ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ． ｂｉｏＲｘｉｖ ７１０２１０ （２０１９）． ｄｏｉ：１０．１１０１／７１０２１０

１３． Ｚｉｎｃａｒｅｌｌｉ， Ｃ．， Ｓｏｌｔｙｓ， Ｓ．， Ｒｅｎｇｏ， Ｇ． ＆ Ｒａｂｉｎｏｗｉｔｚ， Ｊ． Ｅ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＡＡＶ ｓｅｒｏｔｙｐｅｓ １－９ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｏｐｉｓｍ ｉｎ ｍｉｃｅ ａｆｔｅｒ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ． Ｍｏｌ． Ｔｈｅｒ． １６， １０７３－１０８０ （２００８）． ＰＭＩＤ：１８４１４４７６

１４． Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ， Ｊ． Ｃ． ｅｔ ａｌ． Ａ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｆｒａｉｌｔｙ ｉｎｄｅｘ ｉｎ ａｇｉｎｇ ｍｉｃｅ： Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｗｉｔｈ ｆｒａｉｌｔｙ ｉｎｄｅｘ ｄａｔａ ｉｎ ｈｕｍａｎｓ． Ｊｏｕｒｎａｌｓ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ． － Ｓｅｒ． Ａ Ｂｉｏｌ． Ｓｃｉ． Ｍｅｄ． Ｓｃｉ． ６９， ６２１－６３２ （２０１４）． ＰＭＩＤ：２４０５１３４６

１５． Ｗｉｌｌｅｉｔ， Ｐ．， Ｓｋｒｏｂｌｉｎ， Ｐ．， Ｋｉｅｃｈｌ， Ｓ．， Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ－Ｈｅｒｎａｎｄｏ， Ｃ． ＆ Ｍａｙｒ， Ｍ． Ｌｉｖｅｒ ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ： ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ａｎｄ ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ｆｏｒ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ａｎｄ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅ？ Ｅｕｒ． Ｈｅａｒｔ Ｊ． ３７， ３２６０－３２６６ （２０１６）． ＰＭＩＤ：２７０９９２６５

１６． Ｘｕ， Ｃ． ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅ ｍｕｓｃｌｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ ｍｉＲ－１ ａｎｄ ｍｉＲ－１３３ ｐｒｏｄｕｃｅ ｏｐｐｏｓｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｂｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＨＳＰ６０， ＨＳＰ７０ ａｎｄ ｃａｓｐａｓｅ－９ ｉｎ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ． Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ． １２０， ３０４５－３０５２ （２００７）． ＰＭＩＤ：１７７１５１５６

１７． Ｃｈｉｓｔｉａｋｏｖ， Ｄ． Ａ．， Ｏｒｅｋｈｏｖ， Ａ． Ｎ． ＆ Ｂｏｂｒｙｓｈｅｖ， Ｙ． Ｖ． Ｃａｒｄｉａｃ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｉＲＮＡ ｉｎ ｃａｒｄｉｏｇｅｎｅｓｉｓ， ｈｅａｒｔ ｆｕｎｃｔｉｏｎ， ａｎｄ ｃａｒｄｉａｃ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ （ｗｉｔｈ ｆｏｃｕｓ ｏｎ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ）． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ． Ｃａｒｄｉｏｌ． ９４， １０７－１２１ （２０１６）． ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｙｊｍｃｃ．２０１６．０３．０１５

１８． Ｃａｏ， Ｘ．， Ｐｆａｆｆ， Ｓ． Ｌ． ＆ Ｇａｇｅ， Ｆ． Ｈ． Ａ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｍｉＲ－１２４ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｎｅｕｒａｌ ｔｕｂｅ． Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ． ２１， ５３１－５３６ （２００７）． ｄｏｉ：１０．１１０１／ｇａｄ．１５１９２０７

１９． Ａｄｌａｋｈａ， Ｙ． Ｋ． ＆ Ｓａｉｎｉ， Ｎ． Ｂｒａｉｎ ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ ａｎｄ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｂｒａｉｎ ｅｎｒｉｃｈｅｄ ｍｉＲＮＡ－１２８． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ １３， ３３ （２０１４）． ｄｏｉ：１０．１１８６／１４７６－４５９８－１３－３３

２０． Ｄｅ Ｒｉｅ， Ｄ． ｅｔ ａｌ． Ａｎ ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｔｌａｓ ｏｆ ｍｉＲＮＡｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｐｒｏｍｏｔｅｒｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ａｎｄ ｍｏｕｓｅ． Ｎａｔ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ３５， ８７２－８７８ （２０１７）． ＰＭＩＤ：２８８２９４３９

Claims (135)

  1. 単一遺伝子の送達のために操作された２つ以上のウイルス血清型を含む、ウイルスベクター送達系。
  2. 前記遺伝子を送達するために５～１０のウイルス血清型を含む、請求項１に記載のウイルスベクター送達系。
  3. 前記２つ以上のウイルス血清型がアデノ随伴ウイルス血清型である、請求項１に記載のウイルスベクター送達系。
  4. 前記２つ以上のウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ／８、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ１０、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ２２、及びＡＡＶＭＹＯからなる群から選択される、請求項１に記載のウイルスベクター送達系。
  5. 前記２つ以上のウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、及びＰＨＰ．ｅＢからなる群から選択される、請求項１に記載のウイルスベクター送達系。
  6. 前記２つ以上のウイルス血清型が表１から選択される、請求項１に記載のウイルスベクター送達系。
  7. 少なくとも１つのウイルス血清型がＡＡＶ９である、請求項１に記載のウイルスベクター送達系。
  8. 少なくとも１つのウイルス血清型がＰＨＰ．ｅＢである、請求項１に記載のウイルスベクター送達系。
  9. 前記２つ以上のウイルス血清型がＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢを含む、請求項１に記載のウイルスベクター送達系。
  10. ｍｉＲＮＡ標的部位をさらに含む、請求項１～９のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  11. 前記ｍｉＲＮＡ標的部位が組織標的に基づいて選択される、請求項１０に記載のウイルスベクター送達系。
  12. 前記組織標的が、大動脈、内皮、心筋、骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、ならびに筋肉衛星細胞からなる群から選択される、請求項１１に記載のウイルスベクター送達系。
  13. 前記組織標的が、心臓、肝臓、筋肉、及び脳からなる群から選択される、請求項１１に記載のウイルスベクター送達系。
  14. 前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１２４、ｍｉＲＮＡ－１２８、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、ｍｉＲＮＡ－２２３、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される、請求項１０～１３のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  15. 標的組織が心臓組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される、請求項１０～１４のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  16. 標的組織が肝臓組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、及びｍｉＲＮＡ－２２３からなる群から選択される、請求項１０～１４のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  17. 標的組織が筋肉組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１またはｍｉＲＮＡ－１３３である、請求項１０～１４のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  18. 標的組織が脳組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１２４またはｍｉＲＮＡ－１２８である、請求項１０～１４のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  19. 非サイレンシングプロモーターをさらに含む、請求項１～１８のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  20. 前記非サイレンシングプロモーターが、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも３０％のＲＮＡ発現を導く、請求項１９に記載のウイルスベクター送達系。
  21. 前記非サイレンシングプロモーターが、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも５０％のＲＮＡ発現を導く、請求項１９または請求項２０に記載のウイルスベクター送達系。
  22. 前記プロモーターが、Ｃｂｈ、ＣＡＧ、ＣＢ７、及びＣＢＡからなる群から選択される、請求項１９～２１のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  23. 自己相補的ベクター骨格をさらに含む、請求項１～２２のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  24. 前記遺伝子が表２から選択される、請求項１～２３のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  25. 前記遺伝子が、Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮからなる群から選択される、請求項１～２４のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  26. 請求項１～２５のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系を含む、医薬組成物。
  27. 請求項２６に記載の医薬組成物を対象へ投与することを含む、前記対象における疾患または障害を治療する方法。
  28. 請求項２６に記載の医薬組成物を対象へ投与することを含む、前記対象の寿命を延長する方法。
  29. 単一遺伝子の送達のために操作された少なくとも２つのウイルス血清型を含むウイルスベクター送達系を対象へ投与することを含む、疾患または障害を治療または予防する方法。
  30. 前記ウイルスベクター送達系が、前記遺伝子を送達するために５～１０のウイルス血清型を含む、請求項２９に記載の方法。
  31. 前記２つ以上のウイルス血清型がアデノ随伴ウイルス血清型である、請求項２９に記載の方法。
  32. 前記２つ以上のウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ／８、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ１０、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ２２、及びＡＡＶＭＹＯからなる群から選択される、請求項２９に記載の方法。
  33. 前記２つ以上のウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、及びＰＨＰ．ｅＢからなる群から選択される、請求項２９に記載の方法。
  34. 前記２つ以上のウイルス血清型が表１から選択される、請求項２９に記載の方法。
  35. 少なくとも１つのウイルス血清型がＡＡＶ９である、請求項２９に記載の方法。
  36. 少なくとも１つのウイルス血清型がＰＨＰ．ｅＢである、請求項２９に記載の方法。
  37. 前記２つ以上のウイルス血清型がＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢを含む、請求項２９に記載の方法。
  38. 前記ウイルスベクター送達系がｍｉＲＮＡ標的部位をさらに含む、請求項２９～３７のいずれか１項に記載の方法。
  39. 前記ｍｉＲＮＡ標的部位が組織標的に基づいて選択される、請求項３８に記載の方法。
  40. 前記組織標的が、大動脈、内皮、心筋、骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、ならびに筋肉衛星細胞からなる群から選択される、請求項３９に記載の方法。
  41. 前記組織標的が、心臓、肝臓、筋肉、及び脳からなる群から選択される、請求項３９に記載の方法。
  42. 前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１２４、ｍｉＲＮＡ－１２８、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、ｍｉＲＮＡ－２２３、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される、請求項３８～４１のいずれか１項に記載の方法。
  43. 標的組織が心臓組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される、請求項３８～４２のいずれか１項に記載の方法。
  44. 標的組織が肝臓組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、及びｍｉＲＮＡ－２２３からなる群から選択される、請求項３８～４２のいずれか１項に記載の方法。
  45. 標的組織が筋肉組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１またはｍｉＲＮＡ－１３３である、請求項３８～４２のいずれか１項に記載の方法。
  46. 標的組織が脳組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１２４またはｍｉＲＮＡ－１２８である、請求項３８～４２のいずれか１項に記載の方法。
  47. 前記ウイルスベクター送達系が、非サイレンシングプロモーターをさらに含む、請求項２９～４６のいずれか１項に記載の方法。
  48. 前記非サイレンシングプロモーターが、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも３０％のＲＮＡ発現を導く、請求項４７に記載の方法。
  49. 前記非サイレンシングプロモーターが、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも５０％のＲＮＡ発現を導く、請求項４７または請求項４８に記載の方法。
  50. 前記プロモーターが、Ｃｂｈ、ＣＡＧ、ＣＢ７、及びＣＢＡからなる群から選択される、請求項４７～４９のいずれか１項に記載の方法。
  51. 前記ウイルスベクター送達系が、自己相補的ベクター骨格をさらに含む、請求項２９～５０のいずれか１項に記載の方法。
  52. 前記遺伝子が表２から選択される、請求項２９～５１のいずれか１項に記載の方法。
  53. 前記遺伝子が、Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮからなる群から選択される、請求項２９～５２のいずれか１項に記載の方法。
  54. 前記疾患または前記障害が、加齢関連の疾患または障害である、請求項２９～５３のいずれか１項に記載の方法。
  55. 前記疾患または前記障害が、早老症、ウォルフラム症候群、神経変性障害、神経血管障害、骨格筋条件、カウデン症候群、バナヤン・ライリー・ルバルカバ症候群、プロテウス症候群、プロテウス様症候群、及び他のＰＴＥＮ病、ウェルナー症候群、ブルーム症候群、ロスムンド・トムソン症候群、コケイン症候群、色素性乾皮症、硫黄欠乏性毛髪発育異常症、色素性乾皮症・コケイン症候群の合併型、ハッチンソン・ギルフォード早老症候群、拘束性皮膚障害、糖尿病、肥満、心血管性疾患、がん、眼の変性、肝不全、ならびに加齢黄斑変性症からなる群から選択される、請求項２９～５４のいずれか１項に記載の方法。
  56. 前記疾患または前記障害が、２つ以上の組織標的への前記遺伝子の投与から利益を得るであろう、請求項２９～５４のいずれか１項に記載の方法。
  57. 前記疾患または前記障害が、ＩＩ型ウォルフラム症候群である、請求項２９～５４のいずれか１項に記載の方法。
  58. 前記遺伝子が、前記対象中の２つ以上の組織において発現される、請求項２９～５７のいずれか１項に記載の方法。
  59. 前記遺伝子が、前記対象中の２つ以上の組織にわたって均一に発現される、請求項２９～５８のいずれか１項に記載の方法。
  60. 前記遺伝子が、前記対象中の２つ以上の組織にわたって均一に過剰発現される、請求項２９～５８のいずれか１項に記載の方法。
  61. 前記遺伝子が、前記対象中の組織のうちの少なくとも５０％へ送達される、請求項２９～５８のいずれか１項に記載の方法。
  62. 前記遺伝子が、前記対象中で少なくとも４か月間発現される、請求項２９～６１のいずれか１項に記載の方法。
  63. 単一遺伝子の送達のために操作された２つ以上のＡＡＶ血清型、非サイレンシングプロモーター、少なくとも１つのｍｉＲＮＡ標的部位、前記遺伝子、及び任意選択で自己相補的骨格を含む、ウイルスベクター送達系。
  64. 前記ＡＡＶ血清型がＡＡＶ９及びＰＨＰ．ｅＢである、請求項６３に記載のウイルスベクター送達系。
  65. 前記遺伝子が、Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮからなる群から選択される、請求項６３または請求項６４に記載のウイルスベクター送達系。
  66. 請求項６３～６５のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系を対象へ投与することを含む、疾患または障害を治療する方法。
  67. 前記疾患または前記障害が、ＩＩ型ウォルフラム症候群である、請求項６６に記載の方法。
  68. Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮからなる群から選択される単一遺伝子の送達のために操作された少なくとも１つのウイルス血清型を含む、ウイルスベクター送達系。
  69. 前記少なくとも１つのウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ／８、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ１０、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ２２、及びＡＡＶＭＹＯからなる群から選択される、請求項６８に記載のウイルスベクター送達系。
  70. 前記少なくとも１つのウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、及びＰＨＰ．ｅＢからなる群から選択される、請求項６８に記載のウイルスベクター送達系。
  71. 前記少なくとも１つのウイルス血清型が表１から選択される、請求項６８に記載のウイルスベクター送達系。
  72. 少なくとも１つのウイルス血清型がＡＡＶ９である、請求項６８に記載のウイルスベクター送達系。
  73. 少なくとも１つのウイルス血清型がＰＨＰ．ｅＢである、請求項６８に記載のウイルスベクター送達系。
  74. ｍｉＲＮＡ標的部位をさらに含む、請求項６８～７３のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  75. 前記ｍｉＲＮＡ標的部位が組織標的に基づいて選択される、請求項７４に記載のウイルスベクター送達系。
  76. 前記組織標的が、大動脈、内皮、心筋、骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、ならびに筋肉衛星細胞からなる群から選択される、請求項７５に記載のウイルスベクター送達系。
  77. 前記組織標的が、心臓、肝臓、筋肉、及び脳からなる群から選択される、請求項７５に記載のウイルスベクター送達系。
  78. 前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１２４、ｍｉＲＮＡ－１２８、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、ｍｉＲＮＡ－２２３、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される、請求項７４～７７のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  79. 標的組織が心臓組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される、請求項７４～７８のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  80. 標的組織が肝臓組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、及びｍｉＲＮＡ－２２３からなる群から選択される、請求項７４～７８のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  81. 標的組織が筋肉組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１またはｍｉＲＮＡ－１３３である、請求項７４～７８のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  82. 標的組織が脳組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１２４またはｍｉＲＮＡ－１２８である、請求項７４～７８のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  83. 非サイレンシングプロモーターをさらに含む、請求項６８～８２のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  84. 前記非サイレンシングプロモーターが、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも３０％のＲＮＡ発現を導く、請求項８３に記載のウイルスベクター送達系。
  85. 前記非サイレンシングプロモーターが、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも５０％のＲＮＡ発現を導く、請求項８３または請求項８４に記載のウイルスベクター送達系。
  86. 前記プロモーターが、Ｃｂｈ、ＣＡＧ、ＣＢ７、及びＣＢＡからなる群から選択される、請求項８３～８５のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  87. 自己相補的ベクター骨格をさらに含む、請求項６８～８６のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系。
  88. 請求項６８～８７に記載のいずれか１項に記載のウイルスベクター送達系を含む、医薬組成物。
  89. 請求項８８に記載の医薬組成物を対象へ投与することを含む、前記対象における疾患または障害を治療する方法。
  90. 前記疾患が、ＩＩ型ウォルフラム症候群である、請求項８９に記載の方法。
  91. 請求項８８に記載の医薬組成物を対象へ投与することを含む、前記対象の寿命を延長する方法。
  92. 単一遺伝子の送達のために操作された少なくとも１つのウイルス血清型を含むウイルスベクター送達系を対象へ投与することを含む、対象の寿命を延長する方法。
  93. 単一遺伝子の送達のために操作された少なくとも１つのウイルス血清型を含むウイルスベクター送達系を対象へ投与することを含む、疾患または障害を治療または予防する方法。
  94. 前記少なくとも１つのウイルス血清型がアデノ随伴ウイルス血清型である、請求項９２または請求項９３に記載の方法。
  95. 前記少なくとも１つのウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ／８、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ１０、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ２２、及びＡＡＶＭＹＯからなる群から選択される、請求項９２または請求項９３に記載の方法。
  96. 前記少なくとも１つのウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、及びＰＨＰ．ｅＢからなる群から選択される、請求項９２または請求項９３に記載の方法。
  97. 前記少なくとも１つのウイルス血清型が表１から選択される、請求項９２または請求項９３に記載の方法。
  98. 前記少なくとも１つのウイルス血清型がＡＡＶ９である、請求項９２または請求項９３に記載の方法。
  99. 前記少なくとも１つのウイルス血清型がＰＨＰ．ｅＢである、請求項９２または請求項９３に記載の方法。
  100. 前記ウイルスベクター送達系がｍｉＲＮＡ標的部位をさらに含む、請求項９２～９９のいずれか１項に記載の方法。
  101. 前記ｍｉＲＮＡ標的部位が組織標的に基づいて選択される、請求項１００に記載の方法。
  102. 前記組織標的が、大動脈、内皮、心筋、骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、ならびに筋肉衛星細胞からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
  103. 前記組織標的が、心臓、肝臓、筋肉、及び脳からなる群から選択される、請求項１０１に記載の方法。
  104. 前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１２４、ｍｉＲＮＡ－１２８、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、ｍｉＲＮＡ－２２３、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される、請求項１００～１０３のいずれか１項に記載の方法。
  105. 標的組織が心臓組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１、ｍｉＲＮＡ－１３３、ｍｉＲＮＡ－２０８ａ、ｍｉＲＮＡ－２０８ｂ、及びｍｉＲＮＡ－４９９からなる群から選択される、請求項１００～１０４のいずれか１項に記載の方法。
  106. 標的組織が肝臓組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－２４、ｍｉＲＮＡ－２９、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ、ｍｉＲＮＡ－３３、ｍｉＲＮＡ－１２２、ｍｉＲＮＡ－１４４、ｍｉＲＮＡ－１４８ａ、及びｍｉＲＮＡ－２２３からなる群から選択される、請求項１００～１０４のいずれか１項に記載の方法。
  107. 標的組織が筋肉組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１またはｍｉＲＮＡ－１３３である、請求項１００～１０４のいずれか１項に記載の方法。
  108. 標的組織が脳組織であり、前記ｍｉＲＮＡ標的部位が、ｍｉＲＮＡ－１２４またはｍｉＲＮＡ－１２８である、請求項１００～１０４のいずれか１項に記載の方法。
  109. 前記ウイルスベクター送達系が、非サイレンシングプロモーターをさらに含む、請求項９２～１０８のいずれか１項に記載の方法。
  110. 前記非サイレンシングプロモーターが、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも３０％のＲＮＡ発現を導く、請求項１０９に記載の方法。
  111. 前記非サイレンシングプロモーターが、ＣＭＶプロモーター発現の少なくとも５０％のＲＮＡ発現を導く、請求項１０９または請求項１１０に記載の方法。
  112. 前記プロモーターが、Ｃｂｈ、ＣＡＧ、ＣＢ７、及びＣＢＡからなる群から選択される、請求項１０９～１１１のいずれか１項に記載の方法。
  113. 前記ウイルスベクター送達系が、自己相補的ベクター骨格をさらに含む、請求項９２～１１２のいずれか１項に記載の方法。
  114. 前記遺伝子が表２から選択される、請求項９２～１１３のいずれか１項に記載の方法。
  115. 前記遺伝子が、Ｃｉｓｄ２、Ａｔｇ５、及びＰＴＥＮからなる群から選択される、請求項９２～１１４のいずれか１項に記載の方法。
  116. 前記疾患または前記障害が、加齢関連の疾患または障害である、請求項９３～１１５のいずれか１項に記載の方法。
  117. 前記疾患または前記障害が、早老症、ウォルフラム症候群、神経変性障害、神経血管障害、骨格筋条件、カウデン症候群、バナヤン・ライリー・ルバルカバ症候群、プロテウス症候群、プロテウス様症候群、及び他のＰＴＥＮ病、ウェルナー症候群、ブルーム症候群、ロスムンド・トムソン症候群、コケイン症候群、色素性乾皮症、硫黄欠乏性毛髪発育異常症、色素性乾皮症・コケイン症候群の合併型、ハッチンソン・ギルフォード早老症候群、拘束性皮膚障害、糖尿病、肥満、心血管性疾患、がん、眼の変性、肝不全、ならびに加齢黄斑変性症からなる群から選択される、請求項９３～１１６のいずれか１項に記載の方法。
  118. 前記疾患または前記障害が、ＩＩ型ウォルフラム症候群である、請求項９３～１１７のいずれか１項に記載の方法。
  119. 有効量のＣｉｓｄ２をＩＩ型ウォルフラム症候群を患う対象へ投与することを含む、ＩＩ型ウォルフラム症候群を治療する方法。
  120. Ｃｉｓｄ２が、遺伝子療法を介して前記対象へ投与される、請求項１１９に記載の方法。
  121. Ｃｉｓｄ２が、ウイルスベクター送達系を介して前記対象へ投与される、請求項１１９または請求項１２０に記載の方法。
  122. 前記ウイルスベクター送達系が、少なくとも１つのウイルス血清型を含む、請求項１２１に記載の方法。
  123. 前記ウイルスベクター送達系が、２つ以上のウイルス血清型を含む、請求項１２１に記載の方法。
  124. 対象の１つまたは複数の標的組織における遺伝子導入の前決定されたレベルを同定する方法であって、
    前記対象へ投与されたベクターの量と前記１つまたは複数の標的組織中のもたらされた遺伝子導入レベルとの間の関係性を特徴づける用量－応答曲線を得ることと；
    前記対象へ投与された前記ベクターの量と前記１つまたは複数の標的組織中の前記もたらされた遺伝子導入レベルとの間の関係性を特徴づける線形方程式または非線形方程式を得ることと；
    遺伝子送達系の要求する用量を内挿または外挿して、前記１つまたは複数の標的組織において定義されたレベルの遺伝子導入を達成することと、
    を含む、前記方法。
  125. 対象の１つまたは複数の標的組織における導入遺伝子発現の前決定されたレベルを同定する方法であって、
    前記対象へ投与されたベクターの量と前記１つまたは複数の標的組織中のもたらされた導入遺伝子発現レベルとの間の関係性を特徴づける用量－応答曲線を得ることと；
    前記対象へ投与された前記ベクターの量と前記１つまたは複数の標的組織中の前記もたらされた導入遺伝子発現レベルとの間の関係性を特徴づける線形方程式または非線形方程式を得ることと；
    遺伝子送達系の要求する用量を内挿または外挿して、前記１つまたは複数の標的組織において定義されたレベルの導入遺伝子発現を達成することと、
    を含む、前記方法。
  126. 前記遺伝子送達系が、少なくとも１つのウイルス血清型を含む、請求項１２４または請求項１２５に記載の方法。
  127. 前記遺伝子送達系が、２つ以上のウイルス血清型を含む、請求項１２４または請求項１２５に記載の方法。
  128. 前記ウイルス血清型がアデノ随伴ウイルス血清型である、請求項１２６または請求項１２７に記載の方法。
  129. 前記ウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ－ＤＪ、ＡＡＶ－ＤＪ／８、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．Ｓ、ＡＡＶ－ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ１０、ＡＡＶ．ＣＡＰ－Ｂ２２、及びＡＡＶＭＹＯからなる群から選択される、請求項１２６～１２８のいずれか１項に記載の方法。
  130. 前記ウイルス血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、Ａｎｃ８０、及びＰＨＰ．ｅＢからなる群から選択される、請求項１２６～１２８のいずれか１項に記載の方法。
  131. 前記ウイルス血清型が表１から選択される、請求項１２６～１２８のいずれか１項に記載の方法。
  132. 前記１つまたは複数の標的組織が、単一組織を含む、請求項１２４～１３１のいずれか１項に記載の方法。
  133. 前記１つまたは複数の標的組織が、２つ以上の組織を含む、請求項１２４～１３１のいずれか１項に記載の方法。
  134. 前記１つまたは複数の標的組織が、大動脈、内皮、心筋、骨格筋、舌、食道、胃、小腸、大腸、横隔膜、眼、視神経、内耳、聴神経、褐色脂肪、白色脂肪、中枢神経系、末梢神経系、腎臓、脾臓、肝臓、肺、心臓、脳、胸腺、卵巣、精巣、皮膚、膵臓、骨髄細胞、骨芽細胞及び破骨細胞、血液細胞、造血幹細胞、ならびに筋肉衛星細胞からなる群から選択される、請求項１２４～１３３のいずれか１項に記載の方法。
  135. 前記１つまたは複数の標的組織が、心臓、肝臓、筋肉、及び脳からなる群から選択される、請求項１２４～１３３のいずれか１項に記載の方法。
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