JP2023509790A - α４β７インテグリン拮抗薬で炎症性腸疾患を治療するための方法 - Google Patents

α４β７インテグリン拮抗薬で炎症性腸疾患を治療するための方法 Download PDF

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Abstract

本発明は、α４β７インテグリンに結合する操作されたペプチド（例えば、ジスルフィドまたはチオエーテル分子内結合を含むペプチド単量体および二量体）を用いること含む、炎症性腸疾患を治療する方法に関する。一態様では、本開示は、その必要がある対象において炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を治療する方法を提供し、本方法は、α４β７インテグリン拮抗薬を対象に投与することを含み、拮抗薬は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇの用量で１日１回または２回、患者に経口投与され、拮抗薬は、２つのペプチドを含むペプチド二量体化合物、またはその薬学的に許容される塩である。【選択図】図２２

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年１月１０日に出願された米国仮出願第６２／９５９，８５４号の優先権を主張し、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
配列表
本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子的に出願され、電子的に提出された配列表を．ｔｘｔ形式で含む。．ｔｘｔファイルには、２０２１年１月８日に作成され、約７キロバイトのサイズを有する「ＰＲＴＨ＿０５２＿０１ＷＯ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ」と題された配列表が含有される。この．ｔｘｔファイルに含有される配列表は、本明細書の一部であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
発明の分野
本開示は、α４β７インテグリンに結合する操作されたペプチド（例えば、ジスルフィドまたはチオエーテル分子内結合を含むペプチド単量体および二量体）で炎症性腸疾患を治療する方法に関する。
発明の背景
インテグリンは、細胞接着および遊走から遺伝子調節までにわたる多数の細胞プロセスに関与する、非共有結合的に関連付けられるα／βヘテロ二量体細胞表面受容体である（Ｄｕｂｒｅｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ α４β７ Ｉｎｔｅｇｒｉｎ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｓ Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ａｇｅｎｔｓ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，３４５１－３４５７（非特許文献１））。インテグリンの差次的発現は、細胞の接着特性を調節し、種々の炎症性シグナルに応答して種々の白血球集団を特定の器官に動員させることができる。インテグリン媒介性接着プロセスは、放置すると慢性炎症および自己免疫疾患につながり得る。
α４インテグリンであるα４β１およびα４β７は、消化管全体のリンパ球遊走において重要な役割を果たす。それらは、ＢおよびＴリンパ球を含むほとんどの白血球上で発現され、それらのそれぞれの一次リガンドである、それぞれ血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）、および粘膜アドレシン細胞接着分子１（ＭＡｄＣＡＭ１）への結合を介して、細胞接着を媒介する。ＶＣＡＭは、α４β１およびより少ない程度でα４β７の両方に結合する一方で、ＭＡｄＣＡＭ１は、α４β７に高度に特異的であるという点で、タンパク質は結合特異性において異なる。α４サブユニットとの対合に加えて、β７サブユニットはまた、腸、肺、尿生殖路における上皮内リンパ球（ＩＥＬ）上に主に発現される、α４β７を形成するためのαＥサブユニットとヘテロ二量体複合体を形成する。α４β７は、腸内における樹状細胞上でも発現する。α４β７ヘテロ二量体は、上皮細胞上のＥ－カドヘリンに結合する。ＩＥＬ細胞は、上皮区画内の免疫監視のための機序を提供すると考えられている。したがって、α４β７およびα４β７をともに遮断することは、腸の炎症病態を治療するための有用な方法であり得る。
特定のインテグリン－リガンド相互作用の阻害剤は、様々な自己免疫疾患の治療のための抗炎症剤として有効であることが示されている。例えば、α４β７に対して高い結合親和性を示すモノクローナル抗体が、クローン病および潰瘍性大腸炎などの消化器自己炎症／自己免疫疾患（Ｉｄ）に対する治療上の利益を示している。しかしながら、これらの治療法はα４β１インテグリン－リガンド相互作用を妨害し、それによって患者に対する危険な副作用をもたらした。小分子拮抗薬を利用する治療法は、動物モデルにおいて類似する副作用を示しているため、これらの技術のさらなる開発が阻止されている。最近では、高い効力および安定性、ならびにα４β７インテグリンに対する高い特異性を示す操作されたペプチドは、炎症性腸疾患を含む様々な免疫障害の治療において有効であることが示されている。
しかしながら、炎症性障害を治療するためのα４β７拮抗薬および他の薬剤を使用するためのさらなる方法が、当該技術分野で必要とされている。かかる方法が本明細書に開示される。
Ｄｕｂｒｅｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ α４β７ Ｉｎｔｅｇｒｉｎ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｓ Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ａｇｅｎｔｓ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，３４５１－３４５７
本開示は、α４β７インテグリンシグナル伝達に関連する様々な疾患および病態を治療するための組成物および方法を提供する。
一態様では、本開示は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の治療を必要とする対象において炎症性腸疾患を治療する方法であって、α４β７インテグリン拮抗薬を対象に投与することを含み、拮抗薬が、約１００ｍｇ～約５００ｍｇの用量で１日１回または２回、患者に経口投与され、拮抗薬が、２つのペプチドを含むペプチド二量体化合物、またはその薬学的に許容される塩であり、２つのペプチドの各々が、配列（任意選択でＮ末端Ａｃを有する）：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号６）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号６）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号７）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号７）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号８）、もしくは
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号８）
のうちのいずれかを含むか、またはそれからなり、２つのペプチドの各々が、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含むか、または２つのＰｅｎの間にジスルフィド結合を含み、２つのペプチドが、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、方法を提供する。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000002
またはその薬学的に許容される塩である。
一実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000003
またはその薬学的に許容される塩である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
一実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
本明細書で開示されるペプチドのうちのいずれかは、Ｎ末端Ａｃを含み得る。
一実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000004
またはその薬学的に許容される塩である。
一実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000005
またはその薬学的に許容される塩である。
本明細書に開示される方法の特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、約１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３１２．５、３２５．０、３３７．５、３５０．０、３６２．５、３７５、３８７．５、４００．０、４１２．５、４２５．０、４３７．５、４５０．０、４６２．５、４７５、４８７．５、または５００．０ｍｇの用量で対象に投与される。一実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、約１５０ｍｇまたは約４５０ｍｇの用量で対象に投与される。特定の実施形態では、用量は、対象に１日２回投与される。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物の薬学的に許容される塩は、酢酸塩である。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、投与された投薬量は、任意選択で、拮抗薬のピーク血液または血清レベルで測定された場合、不飽和血液受容体占有率（ＲＯ％）をもたらす。いくつかの実施形態では、投与された投薬量が、任意選択で、拮抗薬のピーク血液または血清レベルで測定された場合、９０％未満のＲＯ、８０％未満のＲＯ、７０％未満のＲＯ、６０％未満のＲＯ、または５０％未満のＲＯをもたらす。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、本方法は、消化管におけるＭａｄＣＡＭ１媒介性Ｔ細胞増殖を阻害する。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、本方法は、消化管におけるＣＤ４＋Ｔ細胞上のβ７の細胞表面発現を低減させる。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、本方法は、
ｉ）ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞上のα４β７インテグリンの内部移行を誘導し、
ｉｉ）消化管におけるＭＡｄＣＡＭ１に対するＣＤ４＋Ｔメモリー細胞の接着の低減を引き起こし、かつ／または
ｉｉｉ）消化管、任意選択で、回腸固有層、パイエル板、腸間膜リンパ節、小腸、および／もしくは結腸へのＴ細胞のホーミングを阻害する。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、ＩＢＤは、潰瘍性大腸炎である。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、ＩＢＤは、クローン病である。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、本方法は、対象の血漿中の以下の薬物動態パラメータのうちの１つ以上をもたらす。
１～２５のＣｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）、
１～５のＴｍａｘ（時間）、
１０～２５０のＡＵＣｔ（ｎｇ．時間／ｍＬ）
１０～３００のＡＵＣｉｎｆ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
３～１０のｔ１／２（時間）、
３０～１３０のＡＵＣｔａｕ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
１～５のＣｔｒｏｕｇｈ（ｎｇ／ｍＬ）、
０．５～２．５の蓄積Ｃｍａｘ（ｎｇ．ｍＬ）、および
０．５～３．０の蓄積ＡＵＣｔ（ｎｇ．時間／ｍＬ）。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、本方法は、対象の血漿中の以下の薬力学的パラメータのうちの１つ以上をもたらす。
５０～１００のＲＯｍａｘ（％）、
－２０～－６０の受容体発現ｍａｘの変化（％）、
－１０～－５５の受容体発現の平均変化（％）、
８０～１００の定常状態ＲＯｍａｘ（％）、
５０～９５の平均ＲＯ０－２４（ｈ％）、
８０～９５の平均ＲＯ０－１２（ｈ％）、および
７０～９０の平均ＲＯ１２－２４（ｈ％）。
別の態様では、本開示は、炎症性疾患または障害の治療を必要とする対象において炎症性疾患または障害を治療する方法であって、α４β７インテグリン拮抗薬を対象に投与することを含み、拮抗薬が、任意選択で、拮抗薬のピーク血液または血清レベルで測定された場合、不飽和血液受容体占有率（ＲＯ％）をもたらす投薬量で投与される、方法を提供する。特定の実施形態では、拮抗薬は、任意選択で、拮抗薬のピーク血液または血清レベルで測定された場合、９０％未満の血液ＲＯ、８０％未満の血液ＲＯ、７０％未満の血液ＲＯ、６０％未満の血液ＲＯ、または５０％未満の血液ＲＯをもたらす投薬量で投与される。特定の実施形態では、拮抗薬は、経口投与、非経口投与、皮下投与、口腔投与、経鼻投与、吸入による投与、局所投与、および直腸投与から選択される投与経路のために製剤化された薬学的組成物中に存在する。特定の実施形態では、拮抗薬は、経口または直腸投与される。
本開示の方法のうちのいずれかの特定の実施形態では、炎症性疾患または障害は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、成人ＩＢＤ、小児ＩＢＤ、青年ＩＢＤ、潰瘍性大腸炎、クローン病、セリアック病（非熱帯性スプルー）、血清反応陰性関節症に関連する腸疾患、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン性大腸炎、好酸球性胃腸炎、放射線療法、化学療法、直腸結腸切除および回腸肛門吻合後に生じる嚢炎、消化器がん、膵炎、インスリン依存性真性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管炎、胆管周囲炎、慢性気管支炎、慢性副鼻腔炎、喘息、原発性硬化性胆管炎、ＧＩ管におけるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、好酸球性喘息、好酸球性食道炎、胃炎、大腸炎、顕微鏡的大腸炎、ならびに移植片対宿主病（ＧＶＤＨ）からなる群から選択される。特定の実施形態では、疾患または障害は、潰瘍性大腸炎またはクローン病などのＩＢＤである。
特定の実施形態では、拮抗薬は、２つのペプチドを含むペプチド二量体化合物、またはその薬学的に許容される塩であり、
２つのペプチドの各々は、配列（任意選択でＮ末端Ａｃを含む）：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号６）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号６）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号７）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号７）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号８）、もしくは
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号８）
のうちのいずれかを含むか、またはそれからなり、２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含むか、または２つのＰｅｎの間にジスルフィドを含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000006
またはその薬学的に許容される塩である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000007
またはその薬学的に許容される塩である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000008
またはその薬学的に許容される塩である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000009
またはその薬学的に許容される塩である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、約５、６、７、８、９、１０、１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３１２．５、３２５．０、３３７．５、３５０．０、３６２．５、３７５、３８７．５、４００．０、４１２．５、４２５．０、４３７．５、４５０．０、４６２．５、４７５、４８７．５、または５００．０ｍｇの用量で対象に投与される。特定の実施形態では、用量は、対象に１日１回または１日２回投与される。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物の薬学的に許容される塩は、酢酸塩である。
関連する態様では、本開示は、請求項３９～５８のいずれか一項において開示されるペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物を提供する。特定の実施形態では、組成物は、経口送達のために製剤化され、任意選択で、組成物は、腸溶コーティングを含む。特定の実施形態では、本方法は、本明細書で開示される薬学的組成物を対象に投与することを含む。
本明細書で開示される方法および組成物の特定の実施形態では、拮抗薬またはその薬学的に許容される塩は、α４β７インテグリンのＭＡｄＣＡＭ１への結合を阻害する。
本明細書で開示される方法および組成物の特定の実施形態では、拮抗薬もしくはその薬学的に許容される塩または薬学的組成物は、病態を向上または改善するのに十分な間隔で、それを必要とする対象に提供される。特定の実施形態では、間隔は、２４時間連続、１時間毎、４時間毎、１日に１回、１日に２回、１日に３回、１日に４回、隔日、１週間毎、隔週、および１ヶ月毎からなる群から選択される。特定の実施形態では、拮抗薬もしくはその薬学的に許容される塩または薬学的組成物は、初期用量として、続いて１つ以上の後続用量として提供され、任意の２つの用量間の最小間隔が、１日未満の期間であり、用量の各々が、有効量の拮抗薬を含む。いくつかの実施形態では、有効量のアンタゴニストもしくはその薬学的に許容される塩または薬学的組成物は、以下のうちの少なくとも１つを達成するのに十分である。
ａ）α４β７インテグリン分子上のＭＡｄＣＡＭ１結合部位の約５０％以上の飽和、
ｂ）細胞表面上のα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害、ならびに
ｃ）α４β７分子上のＭＡｄＣＡＭ１結合部位の約５０％以上の飽和、および細胞表面上のα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害であって、ｉ）飽和が１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持されるか、ｉｉ）阻害が１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持されるか、またはｉｉｉ）飽和および阻害がそれぞれ１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持される、飽和および阻害。
インディアクテッド（ｉｎｄｉａｃｔｅｄ）処理に応答したＴ細胞の増殖および化合物ＡまたはベドリズマブによるＴ細胞増殖の阻害を示す表である。 ａｔｉ－ＣＤ３または抗ＣＤ３＋ＭＡｄａＣＡＭによる処理に応答したＣＤ４５ＲＯ－ナイーブおよびＣＤ４５ＲＯ＋メモリーＴ細胞を示す表である。 図３Ａ～Ｂは、増殖の連続サイクル時のβ７発現の増大（図３Ａ）および化合物Ａの存在下での未分割ＣＤ４＋Ｔ細胞におけるβ７の表面発現の低減（ｒ図３Ｂ）を示す表を提供する。 化合物Ａで処置した際の５人のドナーにおける表面β７発現の低減を示すグラフである。 図５Ａ～Ｃは、抗ＣＤ３＋ＭＡｄＣＡＭ１での処理後のサイトカイン放出および以下のサイトカインについての化合物Ａによる阻害を示すグラフである。ＩＦＮγ（図５Ａ）、ＩＬ－２３（図５Ｂ）、およびＧＭ－ＣＳＦ（図５Ｃ）。 図６Ａ～Ｃは、抗ＣＤ３＋ＭＡｄＣＡＭ１での処理後のサイトカイン放出および以下のサイトカインについての化合物Ａによる阻害を示すグラフである。ＩＬ－１０（図６Ａ）、ＩＬ－５（図６Ｂ）、およびＴＮＦα（図６Ｃ）。 示された用量の化合物Ａの投与後の全血およびパイエル板における受容体占有率（ＲＯ）％を示すグラフである。グラフの下の表は、ＲＯ％を提供する。 示された量の化合物Ａで処置した６匹の個々の動物について、全血およびパイエル板におけるＲＯ％（上部パネル）を提供する。１４日目のＲＯ％が、下部パネルに提供される。 示された用量の化合物Ａの投与後の血漿およびパイエル板における化合物Ａの濃度（左パネル）、ならびに示された用量の化合物Ａの投与後の全血およびパイエル板における化合物ＡのＲＯ％（右パネル）を示すグラフを提供する。 処置後の様々な時点での血漿および示された組織において検出された化合物Ａの濃度を示すグラフを提供する。下部パネルは、拡大スケールでプロットされた上部パネルからのデータを表す。 マウスにおける３０ｍｇ／ｋｇの単回ＰＯ用量投与後の化合物Ａの様々な薬物動態パラメータを要約するグラフである。 示された処理後の示された表面マーカーを有する培養細胞の割合を示すグラフである。各細胞型について、左から右の４つのバーは、上部から下部の左に示されている処理に対応する。 示された処理後の示された表面マーカーを有する培養細胞の割合を示すグラフである。各細胞型について、左から右の４つのバーは、上部から下部の左に示されている処理に対応する。 化合物Ｃまたは化合物Ｄで処理されたＰＢＭＣ上のα４β７細胞表面発現を示すグラフである。ＦＭＯを染色対照として使用する。 ０時間での化合物Ａで処理されたＣＤ４＋Ｔメモリー細胞上の時間依存的なα４β７細胞表面発現を示すグラフである。 示された濃度の化合物Ａで処理されたＣＤ４＋Ｔメモリー細胞上の濃度依存的なα４β７細胞表面発現を示すグラフである。 示された濃度の化合物Ａで処理されたＣＤ４＋Ｔメモリー細胞上の濃度依存的なα４β７細胞表面発現を示すグラフである。 示された濃度の化合物Ａで処理されたＣＤ４＋Ｔメモリー細胞上の濃度依存的なＭＡｄＣＡＭ１への接着の低減を示すグラフである。 ＭＡｄＣＡＭ１への接着の低減の％とα４β７発現の低減の％との間の相関を示すグラフである。 化合物Ａによる処理後のα４β７発現の下方調節、続く処理終了後のα４β７発現の回復を示すグラフである。 示された量の化合物Ａの単回用量後の経時的な平均血漿濃度を示すグラフである。 図２２Ａ～Ｂは、示された量の化合物Ａの単回用量後の経時的な受容体占有率（％）（図２２Ａ）および受容体発現（％）（図２２Ｂ）を示すグラフである。 図２３Ａ～Ｂは、液体溶液または即時放出錠剤として４５０ｍｇの化合物Ａを投与した後の経時的な化合物Ａの平均定常状態血漿濃度（図２３Ａ）および受容体占有率（％）（図２３Ｂ）を示すグラフである。 化合物Ａの投与後の化合物Ａの血漿濃度と受容体占有率（％）との間の相関を示すグラフである。 示された用量の化合物Ａの投与後の全血およびパイエル板における平均受容体占有率（％）を示すグラフである。関連する数値は、表に提供される。 示された用量の化合物Ａのアドミンシトレーション（ａｄｍｉｎｓｉｔｒａｔｏｎ）後の血漿（左パネル）およびパイエル板（右パネル）における化合物Ａの用量依存的な濃度を示すグラフを提供する。 示された用量の化合物Ａでの処置後の個々の動物における受容体占有率を示す表である。
発明の詳細な説明
潰瘍性大腸炎は、寛解および再発の経過を伴う慢性炎症性腸疾患（ＩＢＤ）であり、血性下痢、腹部痙攣、および倦怠感によって特徴付けられる。病因は、消化器抗原に対する不適切な免疫応答および遺伝的に感受性のある個体における環境的誘引に起因すると考えられている。ヨーロッパおよび北アメリカにおいて最も有病率が高いと報告されている。潰瘍性大腸炎は、患者の生活の質に重大な悪影響を及ぼし、保健システムに高い経済的負担をもたらす。
潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患は、コルチコステロイド、５－アミノサリチル酸塩、および免疫抑制剤、最近では、炎症の特定の媒介物質に対して標的化された生物学的薬剤で管理されている。潰瘍性大腸炎の長期治療のための治療選択肢は限られている。スルファサラジン、オルサラジン、バルサラジドおよび様々な形態のメサラミン（例えば、アサコール、ペンタサ、リアルダ、カナサ（Ｃａｎａｓａ））などの５－アミノサリチル酸塩は、軽度から中等度の疾患においてのみ有効である一方で、重度の疾患を有する患者は、生物学的製剤で開始されることがある。ＴＮＦ－αに対するいくつかのモノクローナル抗体（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、ゴリムマブ、およびセルトリズマブ）が現在利用可能である。ＩＬ－１２／ＩＬ－２３に対するウステキヌマブ、および汎ＪＡＫ阻害剤であるトファシチニブなどの炎症反応に関与する他のサイトカインに対して標的化された薬剤は、現在の炎症性腸疾患に対して利用可能な治療選択肢の一部であり、いくつかのＩＬ－２３およびＳ１Ｐ１阻害剤も現在臨床試験中である。
幅広い治療選択肢があるにもかかわらず、炎症性腸疾患の治療には依然として制限があり、利用可能な薬剤はリスクなしではない。ＴＮＦ－α阻害剤は、患者のおよそ１／５～１／３で有効ではなく、初期の利益を示す治療された患者の１０～１５％は、毎年応答を失うことがある。皮膚反応は、大抵、抗ＴＮＦ治療で最も一般的な有害反応でもある。これには、注射部位反応、皮膚感染症、乾癬、および狼瘡様症候群などの免疫媒介性合併症、ならびにまれに皮膚がんが含まれる。トファシチニブは、感染のリスクを増大させる可能性があり、血栓症または血栓塞栓性事象のリスクを増大させることがある。局所的な炎症反応の緩和は、有望である可能性があるという認識が高まっている。経口投与されたブデソニドおよび５－ＡＳＡは局所的に有効であり、インターロイキン１０の局所的に作用する経口生物学的融合タンパク質であるＡＭＴ－１０１、およびＪＡＫ阻害剤であるＴＤ－１４７３を含む様々な他の局所的に作用する薬剤は、有望性を示しているか、または臨床試験が行われている。経口投与を介した局所送達は、全身的な副作用を増加させることなく、より高い用量の薬物を標的部位に送達することを可能にし得る。
インテグリンは、細胞接着分子として機能するヘテロ二量体である。α４インテグリンであるα４β１およびα４β７は、消化管全体のリンパ球遊走において重要な役割を果たすことが既知である。それらは、ＢおよびＴリンパ球、単球、ならびに樹状細胞を含むほとんどの白血球上で発現され、それらのそれぞれの一次リガンド、すなわちそれぞれ血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）および粘膜アドレシン細胞接着分子１（ＭＡｄＣＡＭ１）への結合を介して、細胞接着を媒介する。ＶＣＡＭおよびＭＡｄＣＡＭ１は、ＶＣＡＭはα４β１およびα４β７の両方に結合する一方で、ＭＡｄＣＡＭ１はα４β７に高度に特異的であるという点で、結合特異性において異なる。
主に消化器（ＧＩ）管への白血球の動員に関与するα４β７インテグリンは、循環ＴおよびＢリンパ球の少数集団の細胞表面上に存在する。その主要なリガンドであるＭＡｄＣＡＭ１は、腸血管系の内皮上に選択的に発現し、炎症組織において増大した濃度で存在する。
本開示は、例えば、本明細書で開示されるもののうちのいずれかが含まれるが、これらに限定されないα４β７インテグリンのペプチド二量体拮抗薬を使用して、α４β７インテグリンを阻害することによってＩＢＤを治療する方法を提供する。特に、本開示は、潰瘍性大腸炎を含むＩＢＤの治療に有効なα４β７インテグリン拮抗薬の経口投薬量を提供する。加えて、本開示は、ＭＡｄＣＡＭ１媒介性Ｔ細胞増殖の阻害、β７（およびα４β７インテグリン）のＴ細胞発現の低減、Ｔ細胞上のα４β７インテグリンの内部移行、Ｔ細胞の消化管組織へのホーミングの低減、Ｔ細胞によるサイトカイン放出の減少、Ｔ細胞のＭＡｄＣＡＭ１への接着の低減、および消化管炎症の低減などの拮抗薬の生物学的活性に関連するα４β７インテグリン拮抗薬の薬物動態および薬力学パラメータを提供する。特定の実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞である。
さらに、以前は、ＩＢＤを治療するためのα４β７インテグリン拮抗薬の使用の基礎となるメカニズムは、循環Ｔ細胞上で発現されたα４β７への拮抗薬の結合を伴い、これは、Ｔ細胞がＧＩ内皮細胞上で発現されたＭＡｄＣＡＭ１に結合することを防止し、したがって、ＩＢＤ患者の炎症消化器粘膜へのＴ細胞の血管外遊走を防止すると考えられていた。したがって、炎症消化器粘膜へのＴ細胞の結合および遊走を遮断するために、最大血液受容体占有率（％ＲＯ）、例えば８０％超のＲＯ、９０％超のＲＯ、または１００％近くのＲＯを達成することが目的であった。
対照的に、本発明者らは、α４β７インテグリン拮抗薬が、局所的効果を発揮することによって、炎症消化器粘膜などの炎症組織内の炎症を阻害する代替的な機構を同定した。付随する実施例に開示されるように、α４β７インテグリン拮抗薬は、炎症組織に存在する場合、α４β７インテグリンの直接結合および刺激を介して生じるＭＡｄＣＡＭ１媒介性ＣＤ４＋Ｔ細胞増殖およびサイトカイン産生を阻害することができる。この局所効果は、血液受容体占有率の飽和を必要としないが、代わりに、亜飽和用量の拮抗薬の経口投与が、治療効果、例えば、内視鏡的向上または組織学的向上を達成するのに十分であることが本明細書で実証されている。したがって、本開示は、とりわけ、本明細書で開示されるペプチド二量体化合物を含むがこれに限定されない、α４β７インテグリン拮抗薬のサブサチュリング血液受容体占有量を対象に経口で提供することを含む、ＩＢＤの治療方法を提供する。
特定の態様では、本開示は、α４β７拮抗薬チオエーテルペプチド単量体および二量体を、例えば、α４β７の生物学的機能に関連する病態、またはＭＡｄＣＡＭ１を発現する細胞もしくは組織に対する治療における使用のための、抗炎症剤および／または免疫抑制剤として使用する方法を提供する。
本発明の態様は、インテグリン拮抗薬活性、すなわち、α４β７インテグリンに対する高い特異性を示す、環化ジスルフィドまたはチオエーテルペプチド性化合物に関する。特定の実施形態では、本発明の各ペプチドは、ジスルフィドまたはチオエーテル結合を介して環化構造を形成するように架橋することができる、下流の天然または非天然アミノ酸、および上流の修飾アミノ酸または芳香族基を含む。本発明のペプチドは、治療剤として経口投与される際に増大した安定性を実証する。
さらなる関連する実施形態では、本発明は、インテグリンα４β７の生物学的機能に関連する疾患または病態を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、その治療または予防を必要とする対象に、有効量の本発明のペプチド分子または本発明の薬学的組成物を提供することを含む。特定の実施形態では、疾患または病態は、炎症性腸疾患である。特定の実施形態では、炎症性腸疾患は、潰瘍性大腸炎またはクローン病である。特定の実施形態では、ペプチド分子は、ＭＡｄＣＡＭ１へのα４β７の結合を阻害する。特定の実施形態では、ペプチド分子または薬学的組成物は、病態を改善するのに十分な間隔で、それを必要とする対象に提供される。特定の実施形態では、間隔は、２４時間連続、１時間毎、４時間毎、１日に１回、１日に２回、１日に３回、１日に４回、隔日、１週間毎、隔週、および１ヶ月毎からなる群から選択される。特定の実施形態では、ペプチド分子または薬学的組成物は、初期用量として、続いて１つ以上の後続用量として提供され、任意の２つの用量間の最小間隔は、１日未満の期間であり、用量の各々は、有効量のペプチド分子を含む。特定の実施形態では、有効量のペプチド分子または薬学的組成物は、以下のａ）α４β７インテグリン分子上のＭＡｄＣＡＭ１結合部位の約５０％以上の飽和、ｂ）細胞表面上のα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害、ならびにｃ）α４β７分子上のＭＡｄＣＡＭ１結合部位の約５０％以上の飽和、および細胞表面上のα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害であって、ｉ）飽和が１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持されるか、ｉｉ）阻害が１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持されるか、またはｉｉｉ）飽和および阻害がそれぞれ１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持される、飽和および阻害のうちの少なくとも１つを達成するのに十分である。特定の実施形態では、ペプチド分子は、経口、非経口、または局所的に投与される。
定義
本明細書で使用される場合、単数形の「ａ（１つの）」、「ａｎｄ（および）」、および「ｔｈｅ（前記）」は、文脈が別段明確に指示しない限り、複数の参照を含む。
「含む」という用語が本明細書で使用される場合、本発明は、「含む」という用語が「から本質的になる」または「からなる」で置換されている同じ実施形態も含むことが理解される。
本明細書で使用される場合、以下の用語は、指示される意味を有する。
「ペプチド」という用語は、本明細書で使用される場合、広義には、ペプチド結合によって一緒に接合された２つ以上のアミノ酸の配列を含む構造を指す。特定の実施形態では、それは、本明細書で使用される場合、ペプチド結合によって一緒に接合された２つ以上のアミノ酸の配列を指す。この用語が、特定の長さのアミノ酸のポリマーを暗示するものではなく、そのポリペプチドが組換え技術、化学合成もしくは酵素合成を使用して産生されるか、または自然に生じるかどうかを意味するか、または区別することを意図するものでもないことを理解される必要がある。「ペプチド」という用語は、本明細書で一般的に使用される場合、ペプチド単量体およびペプチド二量体の両方を含む。
本明細書で使用される「単量体」という用語は、「ペプチド単量体」、「ペプチド単量体分子」、または「単量体ペプチド」とも称され得る。「単量体」という用語は、ペプチド結合によって一緒に接合された２つ以上のアミノ酸の単一の配列を示す。
「二量体」という用語は、本明細書で使用される場合、広義には、それぞれのＣ末端またはＮ末端で連結されている２つの単量体ペプチドサブユニット（例えば、チオエーテル単量体ペプチド）を含むペプチドを指す。本発明の二量体は、インテグリン拮抗薬として機能するホモ二量体およびヘテロ二量体を含み得る。「二量体」という用語は、本明細書では、「ペプチド二量体」、「ペプチド二量体分子」、「二量体ペプチド」または「二量体化合物」とも称され得る。「単量体ペプチドサブユニット」という用語は、本明細書では、「単量体サブユニット（ｍｏｎｏｍｅｒ ｓｕｂｕｎｉｔ）」、「ペプチド単量体サブユニット」、「ペプチドサブユニット」、「ペプチド二量体サブユニット」、「二量体サブユニット」、「単量体サブユニット（ｍｏｎｏｍｅｒｉｃ ｓｕｂｕｎｉt）」、または「ペプチド二量体のサブユニット」とも称され得る。
「チオエーテル」という用語は、本明細書で使用される場合、上流のアミノ酸または芳香族酸基と、下流の硫黄含有アミノ酸、またはその同位体との間に形成される環化共有結合、すなわちＣ－Ｓ結合を指す。
「リンカー」という用語は、本明細書で使用される場合、広義には、２つのチオエーテル単量体サブユニットを一緒に連結して二量体を形成することができる化学構造を指す。
「Ｌ－アミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、「Ｌ」異性体形態のペプチドを指し、逆に「Ｄ－アミノ酸」という用語は「Ｄ」異性体形態のペプチドを指す。本明細書に記載されるアミノ酸残基は「Ｌ」異性体形態であることが好ましいが、ペプチドによって所望の機能性が保持される限り、任意のＬ－アミノ酸残基に対して「Ｄ」異性体形態の残基が置換され得る。
別段示されない限り、「ＮＨ２」という用語は、本明細書で使用される場合、ポリペプチドのアミノ末端に存在する遊離アミノ基を指す。「ＯＨ」という用語は、本明細書で使用される場合、ペプチドのカルボキシ末端に存在する遊離カルボキシ基を指す。さらに、「Ａｃ」という用語は、本明細書で使用される場合、ポリペプチドのＮ末端のアシル化を介したアセチル保護を指す。示される場合、「ＮＨ２」は、アミノ酸の遊離アミノ基側鎖を指す。示される場合、「Ａｃ」という用語は、本明細書で使用される場合、ＮＨ２基を有するアミノ酸のアシル化を指す。
「カルボキシ」という用語は、本明細書で使用される場合、－ＣＯ２Ｈを指す。
「同配体」または「同配体置換」という用語は、本明細書で使用される場合、特定のアミノ酸と同様の化学的特性および／もしくは構造的特性を有する、任意のアミノ酸または他の類似体部分を指す。特定の実施形態では、アミノ酸の「同配体」または「好適な同配体」は、同じ種類の別のアミノ酸であり、アミノ酸は、その側鎖が水のような極性溶媒に接触する傾向に基づいて次の種類に属する：疎水性（水と接触する傾向が低い）、極性、または荷電（水との接触がエネルギー的に起こりやすい）。荷電アミノ酸残基としては、リジン（＋）、アルギニン（＋）、アスパルテート（－）、およびグルタメート（－）が挙げられる。極性アミノ酸としては、セリン、スレオニン、アスパラギン、グルタミン、ヒスチジン、およびチロシンが挙げられる。疎水性アミノ酸としては、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、システイン、およびメチオニンが挙げられる。アミノ酸であるグリシンは側鎖を有せず、上記の種類のうちの１つに割り当てるのが難しい。しかしながら、グリシンは、タンパク質の表面に、多くの場合ループ内に見出されることが多く、これらの領域に高い柔軟性をもたらし、同配体は同様の特徴を有し得る。プロリンは反対の作用を有し、ポリペプチド鎖のセグメントにある特定のねじれ角を課すことによってタンパク質構造に剛性をもたらす。
「環化」という用語は、本明細書で使用される場合、ポリペプチド分子の一部がポリペプチド分子の別の一部に連結して、ジスルフィドまたはチオエーテル結合などの形成によって閉環を形成する反応を指す。特定の実施形態では、本発明のペプチド単量体およびペプチド二量体の単量体サブユニットは、分子内ジスルフィドまたはチオエーテル結合を介して環化される。
「受容体」という用語は、本明細書で使用される場合、細胞表面上、または特異的な化学基または分子に対して親和性を有する細胞内部内の分子の化学基に言及する。ペプチド分子と標的化インテグリンとの間の結合は、有用な診断的手段を提供し得る。
「インテグリン関連疾患」という用語は、本明細書で使用される場合、インテグリン結合の結果として現れ、インテグリン拮抗薬の投与を通して治療され得る兆候に言及する。
「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書で使用される場合、水可溶性または油可溶性あるいは分散性であり、過度の毒性、刺激、およびアレルギー反応なく疾患の治療にとって好適であり、妥当な利益／リスク比と釣り合い、それらの意図される使用にとって有効である、本発明の化合物の塩または双性イオン形態を表す。塩は、化合物の最終単離および精製中に、またはアミノ基を好適な酸と反応させることによって別個に調製され得る。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩（ｈｅｍｉｓｕｌｆａｔｅ）、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオン酸塩）、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロプリオン酸塩（３－ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐｒｉｏｎａｔｅ）、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、炭酸水素塩、パラ－トルエンスルホン酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられる。また、本発明の化合物中のアミノ基は、メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物、ならびにヨウ化物；硫酸ジメチル、硫酸ジエチル、硫酸ジブチル、および硫酸ジアミル；デシル、ラウリル、ミリスチル、およびステリルの塩化物、臭化物、ならびにヨウ化物；ならびに臭化ベンジルおよび臭化フェネチルで四級化することができる。治療上許容される付加塩を形成するために用いることができる酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸などの無機酸、ならびにシュウ酸、マレイン酸、コハク酸、およびクエン酸などの有機酸が挙げられる。
「Ｎ（アルファ）メチル化」という用語は、本明細書で使用される場合、一般的にＮ－メチル化とも称される、アミノ酸のアルファアミンのメチル化を記載する。
「アシル化有機化合物」という用語は、本明細書で使用される場合、ペプチド分子のＣ末端および／またはＮ末端をアシル化するために使用され得るカルボン酸官能性を有する様々な化合物を指す。アシル化有機化合物の非限定的な例としては、シクロプロピル酢酸、４－フルオロ安息香酸、４－フルオロフェニル酢酸、３－フェニルプロピオン酸、コハク酸、グルタル酸、シクロペンタンカルボン酸、グルタル酸、コハク酸、３，３，３－トリフルオロプロペオン酸（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｐｒｏｐｅｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、３－フルオロメチル酪酸が挙げられる。
すべてのペプチド配列は、α－Ｎ末端アミノ酸残基が左にあり、α－Ｃ末端が右にある、一般的に許容される慣習に従って書き記される。本明細書で使用される場合、「α－Ｎ末端」という用語は、ペプチド内のアミノ酸の遊離α－アミノ基を指し、「α－Ｃ末端」という用語は、ペプチド内のアミノ酸の遊離α－カルボン酸末端を指す。
本明細書で使用される「アミノ酸」または「任意のアミノ酸」という用語は、天然に存在するアミノ酸（例えば、ａ－アミノ酸）、非天然アミノ酸、修飾アミノ酸および非天然アミノ酸を含む、任意およびすべてのアミノ酸を指す。これには、Ｄ－アミノ酸とＬ－アミノ酸との両方が含まれる。天然アミノ酸には、例えば、組み合わさってペプチド鎖になり、多種多様なタンパク質の構成要素を形成する２３種のアミノ酸など天然で見出されるものが含まれる。これらは主にＬ立体異性体であるが、数種のＤ－アミノ酸は、細菌外被および一部の抗生物質において発生する。「非標準的」な天然アミノ酸は、ピロールリジン（メタン生成生物および他の真核生物中で見出される）、セレノシステイン（ほとんどの真核生物のみならず多くの非真核生物中に存在する）、およびＮ－ホルミルメチオニン（細菌、ミトコンドリア、および葉緑体中の開始コドンＡＵＧによってコードされる）である。「非天然（Ｕｎｎａｔｕｒａｌ）」または「非天然（ｎｏｎ－ｎａｔｕｒａｌ）」アミノ酸は、天然で存在するか、あるいは化学的に合成される、非タンパク新生アミノ酸（すなわち、天然にコードされていないか、遺伝コードに見出されないアミノ酸）である。１４０種を超える天然アミノ酸が知られており、数千のより多くの組み合わせが可能である。「非天然」アミノ酸の例には、β－アミノ酸（β３およびβ２）、ホモアミノ酸、プロリンおよびピルビン酸誘導体、３置換アラニン誘導体、グリシン誘導体、環置換フェニルアラニンおよびチロシン誘導体、直鎖状コアアミノ酸、ジアミノ酸、Ｄ－アミノ酸、アルファメチルアミノ酸ならびにＮ－メチルアミノ酸が挙げられる。非天然（ｕｎｎａｔｕｒａｌ）または非天然（ｎｏｎ－ｎａｔｕｒａｌ）アミノ酸には、修飾アミノ酸も含まれる。「修飾」アミノ酸には、アミノ酸上に天然には存在しない１つの基、複数の基、または化学的部分を含むように化学修飾されているアミノ酸（例えば、天然アミノ酸）が含まれる。
概して、本明細書で使用される天然に存在するアミノアシル残基および天然に存在しないアミノアシル残基の名称は、“Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｏｆ α－Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ（Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ，１９７４）”Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１４（２），（１９７５）に提示されるように、ＩＵＰＡＣ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、およびＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅによって提案される命名規則に従う。本明細書ならびに添付の特許請求の範囲において用いられるアミノ酸およびアミノアシル残基の名称ならびに略語がこれらの提案と異なる範囲では、それらは読者に対して明記される。本発明の説明に有用ないくつかの略語が、次の表１において以下に定義される。
（表１）略語
Figure 2023509790000010
Figure 2023509790000011
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Figure 2023509790000013
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ペプチド拮抗薬
本発明は、概して、インテグリン拮抗薬活性を有することが示されている環状ペプチド、例えば、ジスルフィドおよびチオエーテルペプチドに関する。特に、本発明は、分子内結合、例えば、ジスルフィドまたはチオエーテル結合、例えば、分子内ジスルフィドまたはチオエーテル結合を介して環化構造を形成する様々なペプチドに関する。本明細書で提供される開示は、概して、ジスルフィドまたはチエーテル分子内結合を有するペプチドに関するものであるが、異なる性質の分子内結合を含むものを含むａ４ｂ７インテグリンの他の環状ペプチド拮抗薬、および２つのペプチド単量体サブユニット間の結合を含むα４β７インテグリンの環状ペプチド拮抗薬も、本明細書で開示される方法を実施するために使用され得ることが理解される。特定の実施形態は、インテグリン拮抗薬活性を有するジスルフィドまたはチオエーテルペプチド単量体に関する。いくつかの実施形態は、ヘテロまたはホモ単量体チオエーテルペプチドサブユニットを含むインテグリン拮抗薬活性を有するジスルフィドまたはチオエーテルペプチド二量体に関し、ジスルフィドまたはチオエーテルペプチドサブユニットは、それらのＣ末端またはＮ末端のいずれかで連結される。ペプチド、ペプチド単量体、またはペプチドサブユニットの環化構造は、以下に説明されるように、ペプチド分子の効力、選択性、および安定性を増大させることが示されている。いくつかの実施形態では、ペプチド単量体を二量体化することは、非二量体化ペプチドと比較して、ポテンテンシー、選択性、および／または安定性を増大させる。本明細書に開示される方法に従って使用され得る例示的なペプチドおよびその属は、以下の特許出願公開において提供され、それらの各々は、その全体が参照により組み込まれる。ＰＣＴ出願公開第２０１４／０５９２１３号、同第２０１４／１６５４４８号、同第２０１４／１６５４４９号、同第２０１５／１７６０３５号、同第２０１６／０５４４１１号、および同第２０１６／０５４４４５号。
いくつかの例では、単量体ペプチドは、遊離アミンを含むＣ末端および／またはＮ末端（または遊離アミンを含むＣ末端およびＮ末端の両方）をさらに含む。同様に、ペプチド二量体は、遊離アミンを含む１つ以上のＣ末端またはＮ末端を含み得る。したがって、ユーザは、ＰＥＧ化、例えば、小ＰＥＧ化（例えば、ＰＥＧ４～ＰＥＧ１３）などの修飾基を含むようにいずれかの末端終端を修飾し得る。ユーザは、アシル化を通していずれかの末端終端をさらに修飾し得る。例えば、いくつかの例では、ペプチド分子のＮ末端およびＣ末端のうちの少なくとも１つは、２－Ｍｅ－トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、アセチル、オクトニル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、パルミチル、トリフルオロメチル酪酸、シクロペンタンカルボン酸、シクロプロピル酢酸、４－フルオロ安息香酸、４－フルオロフェニル酢酸、３－フェニルプロピオン酸からなる群から選択されるアシル化有機化合物でアシル化される。いくつかの例において、本発明のペプチド分子は、遊離カルボキシ末端および遊離アミノ末端及の両方を含み、これによりユーザは、ペプチドを選択的に修飾して、所望の修飾を達成し得る。本明細書で開示されるチオエーテルペプチド、例えば、チオエーテル単量体のＣ末端残基は、別段示されない限り、アミドまたは酸であることがさらに理解される。したがって、当業者は、本発明のチオエーテルペプチドが選択的に修飾され得ることを理解するであろう。
ペプチド二量体に関して、単量体サブユニットが二量体化されてペプチド二量体分子を形成すること、例えば、単量体サブユニットが、本明細書で定義されるような好適なリンカー部分によって接合または二量体化されることが理解される。単量体サブユニットのうちのいくつかは、両方とも遊離アミンを含むＣ末端およびＮ末端を有することが示される。したがって、ユーザは、単量体サブユニットのいずれかの末端終端を修飾して、Ｃ末端またはＮ末端のいずれかの遊離アミンを排除し、それによって残部の遊離アミンにおける二量体化を可能にし得る。したがって、単量体サブユニットのいくつかは、Ｃ末端に遊離カルボキシまたはアミドおよび遊離アミノ末端の両方を含み、それにより、ユーザは、所望の末端において二量体化を達成するようにサブユニットを選択的に修飾し得る。したがって、当業者は、所望の二量体化のための単一の特定のアミンを達成するように、本発明の単量体サブユニットを選択的に修飾することができることを理解するであろう。
本明細書で開示される単量体サブユニットのＣ末端残基は、別段示されない限り、－ＯＨまたは－ＮＨ２を含むことがさらに理解される。さらに、Ｃ末端での二量体化は、当該技術分野で一般的に理解されるように、アミン官能性を有する側鎖を有する好適なアミノ酸を使用することによって促進され得ることが理解される。特定の実施形態では、リンカーは、ペプチド単量体サブユニットの各々のＣ末端アミノ酸の官能性アミン基に結合して、二量体を形成する。Ｎ末端残基に関して、二量体化は、末端残基の遊離アミンを介して達成され得るか、または当該技術分野で一般的に理解されるように、遊離アミンを有する好適なアミノ酸側鎖を使用することによって達成され得ることが一般に理解される。
本発明のペプチド単量体および二量体、またはそのペプチドサブユニットは、１つ以上の末端修飾基をさらに含み得る。少なくとも１つの実施形態では、ペプチドの末端終端は、ＤＩＧ、ＰＥＧ４、ＰＥＧ１３、ＰＥＧ２５、ＰＥＧ１Ｋ、ＰＥＧ２Ｋ、ＰＥＧ４Ｋ、ＰＥＧ５Ｋ、４００Ｄａ～４０，０００Ｄａの分子量を有するポリエチレングリコール、４０，０００Ｄａ～８０，０００Ｄａの分子量を有するＰＥＧ、ＩＤＡ、ＡＤＡ、グルタル酸、コハク酸、イソフタル酸、１，３－フェニレン二酢酸、１，４－フェニレン二酢酸、１，２－フェニレン二酢酸、ＡＡＤＡ、ならびに好適な脂肪族化合物、芳香族化合物、および複素芳香族化合物からなる非限定的な群から選択される末端修飾基を含むように修飾される。
本明細書に記載のペプチド二量体、ペプチド二量体サブユニットまたはペプチド単量体のいくつかの実施形態では、Ｎ末端は、好適なリンカー部分または他の修飾基をさらに含む。本明細書に記載されるペプチド単量体のいくつかの実施形態では、Ｎ末端は、さらに、アシル化され得る。
末端修飾基の非限定的な例が、表２に提供される。
（表２）例示的な末端修飾基
Figure 2023509790000017
Figure 2023509790000018
Figure 2023509790000019
本発明のリンカー部分は、本明細書における教示と適合する任意の構造、長さ、および／または大きさを含み得る。少なくとも１つの実施形態では、リンカー部分は、ＤＩＧ、ＰＥＧ４、ＰＥＧ４－ビオチン、ＰＥＧ１３、ＰＥＧ２５、ＰＥＧ１Ｋ、ＰＥＧ２Ｋ、ＰＥＧ３．４Ｋ、ＰＥＧ４Ｋ、ＰＥＧ５Ｋ、ＩＤＡ、ＡＤＡ、Ｂｏｃ－ＩＤＡ、グルタル酸、イソフタル酸、１，３－フェニレンニ酢酸、１，４－フェニレンニ酢酸、１，２－フェニレンニ酢酸、トリアジン、Ｂｏｃ－トリアジン、ＩＤＡ－ビオチン、ＰＥＧ４－ビオチン、ＡＡＤＡ、好適な脂肪族化合物、芳香族化合物、複素芳香族化合物、およびおよそ４００Ｄａ～およそ４０，０００Ｄａ、またはおよそ４０，０００Ｄａ～およそ８０，０００Ｄａの分子量を有するポリエチレングリコールベースのリンカーからなる非限定的な群から選択される。
リンカーが、ＩＤＡ、ＡＤＡ、または遊離アミンを有する任意のリンカーである場合、それは、２－ｍｅ－トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、アセチル、オクトニル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、パルミチル、ラウリル、オレオイル、ラウリル、トリフルオロメチル酪酸、シクロペンタンカルボン酸、シクロプロピル酢酸、４－フルオロ安息香酸、４－フルオロフェニル酢酸、３－フェニルプロピオン酸、テトラヘドロ（ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏ）－２Ｈ－ピラン－４カルボン酸、コハク酸、およびグルタル酸、１０～２０個の炭素単位を有する直鎖脂肪族酸、コール酸、ならびに他の胆汁酸からなる群から選択されるアシル化有機化合物でアシル化することができる。いくつかの例では、小ＰＥＧ（ＰＥＧ４～ＰＥＧ１３）、Ｇｌｕ、またはＡｓｐが、アシル化の前にスペーサーとして使用される。
特定の実施形態では、リンカーは、２個の硫黄含有Ｃ末端アミノ酸またはＮ末端アミノ酸を接続することによって、２つの単量体サブユニットを接続する。いくつかの実施形態では、２個の硫黄含有アミノ酸は、ジハライド、脂肪族鎖、またはＰＥＧを含むリンカーによって接続される。ある特定の実施形態では、リンカーは、各単量体サブユニットのＣ末端で硫黄含有Ｃ末端アミノ酸を接続することによって、２つの単量体サブユニットを接続する。いくつかの実施形態では、２個の硫黄含有アミノ酸は、ホモ二官能性マレイミド架橋剤、ジハライド、１，２－ビス（ブロモモメチル（ｂｒｏｍｏｍｏｍｅｔｈｙｌ））ベンゼン、１，２－ビス（クロロモメチル（ｃｈｌｏｒｏｍｏｍｅｔｈｙｌ））ベンゼン、１，３－ビス（ブロモモメチル（ｂｒｏｍｏｍｏｍｅｔｈｙｌ））ベンゼン、１，３－ビス（クロロモメチル（ｃｈｌｏｒｏｍｏｍｅｔｈｙｌ））ベンゼン、１，４－ビス（ブロモモメチル（ｂｒｏｍｏｍｏｍｅｔｈｙｌ））ベンゼン、１，４－ビス（クロロモメチル（ｃｈｌｏｒｏｍｏｍｅｔｈｙｌ））ベンゼン、３，３’－ビス－ブロモメチル－ビフェニル、または２，２’－ビス－ブロモメチル－ビフェニルを含むリンカーによって接続される。特定のハロアセチル架橋剤は、ヨードアセチルまたはブロモアセチル基を含有する。これらのホモ二官能性リンカーは、ＰＥＧまたは脂肪族鎖を含むスペーサーを含有し得る。
好適なリンカー部分の非限定的な例が、表３に提供される。
（表３）例示的なリンカー部分
Figure 2023509790000020
Figure 2023509790000021
Figure 2023509790000022
Figure 2023509790000023
Figure 2023509790000024
Figure 2023509790000025
当業者は、特定のアミノ酸および他の化学部分が別の分子に結合される場合に修飾されることを理解するであろう。例えば、アミノ酸側鎖は、別のアミノ酸側鎖と分子内架橋を形成する場合に修飾され得る。加えて、ホモ－Ｓｅｒ－Ｃｌがチオエーテル結合を介してＣｙｓまたはＰｅｎなどのアミノ酸に結合する場合、Ｃｌ部分が放出される。したがって、本明細書で使用される場合、本発明のペプチド二量体に存在するＨｏｍｏ－Ｓｅｒ－Ｃｌなどのアミノ酸または修飾アミノ酸（例えば、Ｘａａ４位またはＸａａ１０位）への言及は、分子内結合を形成する前および後の両方で、ペプチドに存在するかかるアミノ酸または修飾アミノ酸の形態を含むことを意味する。
特定の実施形態では、本明細書で開示される方法は、以下のα４β７インテグリンのペプチド拮抗薬のうちのいずれかを使用して実施されるが、本明細書で開示される方法は、参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ出願で開示されるものを含む他のペプチド拮抗薬を使用して実施されてもよいことが理解される。
いくつかの実施形態では、ペプチド拮抗薬は、２つのペプチドを含むペプチド二量体化合物、またはその薬学的に許容される塩であり、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）もしくは、
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号６）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号６）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号７）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号７）、
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号８）、もしくは
Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号８）
のうちのいずれかを含むか、またはそれからなり、２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含むか、または２つのＰｅｎの間にジスルフィドを含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。ペプチドはまた、Ｎ末端Ａｃも含み得る。
ペプチド拮抗薬またはその薬学的に許容される塩のうちのいずれかの特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物の薬学的に許容される塩は、酢酸塩である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）からなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列を含むか、またはそれからなる。
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000026
またはその薬学的に許容される塩である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000027
またはその薬学的に許容される塩である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、２つのペプチドの各々は、配列：
２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）を含むか、またはそれからなり、
２つのペプチドの各々は、２－メチルベンゾイルとＰｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、２つのペプチドは、２つのペプチドのＤ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、リンカー部分は、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000028
またはその薬学的に許容される塩である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩は、
Figure 2023509790000029
またはその薬学的に許容される塩である。
特定の実施形態では、ペプチド二量体化合物は、付随する実施例に記載される、化合物Ａまたは化合物Ｂである。
ペプチドの生物学的活性
特定の実施形態では、本明細書で開示されるペプチド分子は、α４β７結合の増大した親和性、α４β１に対する増大した選択性、および模擬腸液（ＳＩＦ）および還元条件下の胃環境中での増大した安定性を有する。これらの新規の拮抗薬分子は、α４β７との高い結合親和性を実証し、それによってα４β７とＭＡｄＣＡＭ１リガンドとの間の結合を防止する。したがって、これらのペプチド分子は、様々な実験において炎症プロセスを排除および／または低減するのに有効であることが示されている。
ペプチド単量体および二量体分子は、α４β７インテグリンと結合または会合して、α４β７とＭＡｄＣＡＭ１リガンドとの間の結合を崩壊または遮断する。ある特定の実施形態では、本発明のペプチド二量体および単量体分子は、α４β７とＭＡｄＣＡＭ１リガンドとの間の結合を阻害するか、または低減させる。特定の実施形態では、本発明のペプチドは、α４β７とＭＡｄＣＡＭ１リガンドとの結合を、陰性対照ペプチドと比較して、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％低減させる。結合性を判定する方法は当該技術分野で既知であり、本明細書に記載されており、例えばＥＬＩＳＡアッセイを含む。
特定の実施形態では、ペプチド単量体または二量体分子は、＜５００ｎＭ、＜２５０ｎＭ、＜１００ｎＭ、＜５０ｎＭ、＜２５ｎＭ、または＜１０ｎＭのＩＣ５０を有する。活性を判定する方法は当該技術分野において既知であり、付随する実施例に記載されるもののいずれをも含む。
いくつかの実施形態では、ペプチド単量体または二量体分子は、模擬腸液（ＳＩＦ）に曝露された場合、１８０分超の半減期を有する。いくつかの実装例はさらに、およそ１分～およそ１８０分の半減期を備えるペプチド単量体または二量体分子を提供する。同様に、これらのペプチドは還元条件下で胃の環境に対して安定であり、ＤＴＴ（ジチオスレイトール）アッセイで試験した場合に＞１２０分の半減期を有する。
特定の実施形態では、ペプチド単量体または二量体分子は、対照ペプチドと比較して、増大した安定性、増大した消化器安定性、および／または刺激された腸液（ＳＩＦ）中での増大した安定性を有する。特定の実施形態では、対照ペプチドは、ペプチド単量体または二量体と同一または高度に関連するアミノ酸配列（例えば、＞９０％の配列同一性）を有するが、チオエーテル結合を介して環化構造を形成しない、ペプチドである。二量体分子に関するいくつかの実施形態では、対照ペプチドは、二量体化されていない。特定の実施形態では、ペプチド単量体または二量体と対照ペプチドとの間の唯一の差異は、本ペプチドが、１つ以上のアミノ酸残基を本ペプチドに導入する１つ以上のアミノ酸置換を含み、導入された残基が、本ペプチドにおける別の残基とチオエーテル結合を形成することである。
ペプチドの安定性を判定する方法は、当該技術分野で既知である。特定の実施形態では、ペプチド（例えば、本明細書に記載のペプチド単量体または二量体）の安定性は、例えば、付随する実施例に記載されるように、ＳＩＦアッセイを使用して判定される。特定の実施形態では、本発明のペプチド単量体または二量体分子は、ＳＩＦに曝露された場合、１分超、１０分超、２０分超、３０分超、６０分超、９０分超、１２０分超、３時間超、または４時間超の所与の一式の条件下（例えば、温度）での半減期を有する。特定の実施形態では、温度は、約２５℃、約４℃、または約３７℃であり、ｐＨは、生理的ｐＨ、すなわちｐＨ約７．４である。
いくつかの実施形態では、半減期は、当該技術分野で既知の任意の好適な方法を使用してインビトロで測定され、例えば、いくつかの実施形態では、本発明のペプチド単量体または二量体分子の安定性は、３７℃で予熱されたヒト血清（Ｓｉｇｍａ）とともにペプチドをインキュベーションすることによって判定される。典型的には最大２４時間の様々な時点で試料を採取し、ペプチド単量体または二量体を血清タンパク質から分離させ、次いでＬＣ－ＭＳを使用して目的のペプチド単量体または二量体の存在を分析することによって、試料の安定性を分析する。
特定の実施形態では、ペプチド二量体または単量体分子は、α４β７媒介性炎症を阻害または低減する。関連する実施形態では、本発明のペプチド単量体または二量体は、Ｔ細胞、例えば、ＭＡｄＣＡＭ１に応答するＧＩ粘膜におけるＴ細胞による１つ以上のサイトカイン（本明細書に開示される任意のものを含む）のα４β７媒介性分泌または放出を阻害または低減する。サイトカイン分泌の阻害およびシグナル伝達分子の阻害を判定する方法は、当該技術分野において既知である。
特定の実施形態では、ペプチド単量体または二量体分子は、増大した結合選択性を実証する。特定の例では、ペプチド単量体または二量体は、単量体または二量体がα４β１に結合するよりも少なくとも２倍、３倍、５倍、または１０倍高い親和性でα４β７に結合する。
いくつかの実施形態では、ペプチド単量体または二量体分子は、様々な天然アミノアシル残基をＮ－メチル化類似体残基で置換する結果として、増大した効力を実証する。特定の実施形態では、効力は、α４β７への結合のＩＣ５０として測定され、例えば、本明細書に記載されるように判定されるが、いくつかの実施形態では、効力は、例えば、細胞接着アッセイに従って機能的活性を示す。
特定の実施形態では、本発明のペプチドのこれらの優れた特性のうちのいずれかは、対照ペプチドと比較して測定される。
製造方法
本発明のペプチド（例えば、ペプチド単量体またはペプチド二量体）は、例えば、ＰＣＴ出願公開第２０１４／０５９２１３号、同第２０１４／１６５４４８号、同第２０１４／１６５４４９号、同第２０１５／１７６０３５号、同第２０１６／０５４４１１号、または同第２０１６／０５４４４５号に開示されるように、当業者に既知の技術によって合成され得る。かかる技術は、市販のロボットタンパク質合成装置（例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓからのＳｙｍｐｈｏｎｙ多重ペプチド合成装置）の使用を含む。いくつかの実施形態では、新規のペプチド単量体または二量体サブユニットは、本明細書に記載の技術を使用して合成および精製される。
治療法および薬学的組成物
いくつかの実施形態では、本発明は、例えば、ＭＡｄＣＡＭ１へのα４β７インテグリン結合によって特徴付けられる病態または兆候を罹患する個体または対象を治療するための方法を提供し、方法は、本明細書に記載のインテグリン拮抗薬、例えば、ペプチド分子を個体または対象に提供すること、または投与することを含む。特定の実施形態では、対象または個体は、哺乳動物、例えば、ヒトまたはイヌ、ネコもしくはウマなどの非ヒト哺乳動物である。インテグリン拮抗薬は、薬学的組成物、例えば、本明細書で開示されるもののうちのいずれかに存在し得ることが理解される。α４β７インテグリンまたはＭＡｄＣＡＭ１シグナル伝達、または例えば、ＭＡｄＣＡＭ１へのα４β７インテグリン結合を阻害崩壊する他の薬剤は、本明細書に開示される拮抗薬の代替として使用され得ることがさらに理解される。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、消化管におけるＣＤ４＋Ｔ細胞上のβ７の細胞表面発現を低減させる。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、消化管におけるＭａｄＣＡＭ１媒介性Ｔ細胞増殖を阻害する。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、消化管におけるＣＤ４＋Ｔ細胞上のβ７の細胞表面発現を低減させる。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞上のα４β７インテグリンの内部移行を誘導する。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、消化管におけるＭＡｄＣＡＭ１へのＣＤ４＋Ｔメモリー細胞の接着の低減を引き起こす。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、消化管、任意選択で、回腸固有層および／またはパイエル板へのＴ細胞のホーミングを阻害する。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、ＩＢＤを治療するために使用され、任意選択で、ＩＢＤは、潰瘍性大腸炎またはクローン病である。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、対象の血漿中の以下の薬物動態パラメータのうちの１つ以上をもたらす。
１～２５、任意選択で、４～１２のＣｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）、
１～５、任意選択で、２～４のＴｍａｘ（時間）、
１０～２５０、任意選択で、５０～１５０のＡＵＣｔ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
１０～３００、任意選択で、３０～２５０のＡＵＣｉｎｆ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
３～１０、任意選択で４～１０のｔ１／２（時間）、
３０～１３０のＡＵＣｔａｕ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
１～５のＣｔｒｏｕｇｈ（ｎｇ／ｍＬ）、
０．５～２．５、任意選択で、２～３の蓄積Ｃｍａｘ（ｎｇ．ｍＬ）、および
０．５～３．０の蓄積ＡＵＣｔ（ｎｇ．時間／ｍＬ）。
これらの方法の特定の実施形態では、本方法は、本明細書で開示される拮抗薬、任意選択で、化合物Ａまたは化合物Ａを、１日２回約１５０ｍｇまたは１日２回約４５０ｍｇの用量で、経口で提供することを含む。
本開示の方法の特定の実施形態では、本方法は、対象の血漿中の以下の薬力学的パラメータのうちの１つ以上をもたらす。
５０～１００、任意選択で、９０～１００のＲＯｍａｘ（％）、
５０～９５、任意選択で、６５～９５の平均ＲＯ（％）、
－２０～－６０、任意選択で、－３５～－６０の受容体発現ｍａｘの変化（％）、
－１０～－５５、任意選択で、－２５～－５５の受容体発現の平均変化（％）、
８０～１００の定常状態ＲＯｍａｘ（％）、
７５～９０または５０～９５、任意選択で、６５～９５の平均ＲＯ０－２４（ｈ％）、
８０～９５の平均ＲＯ０－１２（ｈ％）、および
７０～９０の平均ＲＯ１２－２４（ｈ％）。
これらの方法の特定の実施形態では、本方法は、本明細書で開示される拮抗薬、任意選択で、化合物Ａまたは化合物Ａを、１日２回約１５０ｍｇまたは１日２回約４５０ｍｇの用量で、経口で提供することを含む。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、対象は、循環Ｔ細胞上の血液受容体、例えば、α４β７インテグリン受容体を飽和させない用量または量のα４β７インテグリン拮抗薬（または他の薬剤）を提供される。したがって、用量または量は、亜飽和血液受容体占有率（ＲＯ％）をもたらす用量または量である。特定の実施形態では、用量は、９０％未満、８０％未満、７０％未満、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満または１０％未満のＲＯ％をもたらす。特定の実施形態では、ＲＯ％は、５０％未満または４０％未満である。ＲＯ％は、薬物レベルまたは最大ＲＯ％で測定され得る。特定の実施形態では、最大ＲＯは、用量の約４時間後に測定されるが、トラフレベルは、用量の約２４時間後に発生する。特定の実施形態では、本方法は、本明細書に開示されるペプチド二量体化合物、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂを使用して実施される。特定の実施形態では、用量は、経口で、または局所的に、例えば、直腸に提供される。特定の実施形態では、対象は、１日１回または２回、この用量で提供される。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、対象に、消化器組織におけるＴ細胞α４β７の高い拮抗薬レベルおよび／または占有率を達成する用量または量のα４β７インテグリン拮抗薬（または他の薬剤）が提供される。特定の実施形態では、用量は、少なくとも９５％、少なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、少なくとも５０％、少なくとも４０％、または少なくとも３０％のＧＩ粘膜におけるＴ細胞α４β７の占有率をもたらす。特定の実施形態では、本方法は、本明細書に開示されるペプチド二量体化合物、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂを使用して実施される。特定の実施形態では、用量は、経口で、または局所的に、例えば、直腸に提供される。特定の実施形態では、対象は、１日１回または２回、この用量で提供される。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、対象に、１．０未満、０．９未満、０．８未満、０．７未満、０．６未満、または０．５未満の血液におけるＲＯ％／パイエル板（または他のＧＩ組織）におけるＲＯ％の比を達成する用量または量のα４β７インテグリン拮抗薬（または他の薬剤）が提供される。
特定の実施形態では、対象は、約５、６、７、８、９、１０、１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３１２．５、３２５．０、３３７．５、３５０．０、３６２．５、３７５、３８７．５、４００．０、４１２．５、４２５．０、４３７．５、４５０．０、４６２．５、４７５、４８７．５、または５００．０ｍｇのうちのいずれかの用量または量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３５０．０、４００．０、４５０．０、または５００．０ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、または１３０ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、または１１５ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約９５、１００、または１０５ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約１００ｍｇの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇの範囲の用量で、任意選択で１日１回または１日２回、提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約２００ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の用量で提供され、任意選択で、１日１回の用量として、または１日２回の分割用量（例えば、量の半分）として服用する。いくつかの実施形態では、対象は、１日当たり約１００ｍｇ～約１５００ｍｇの範囲の用量で提供され、任意選択で、１日１回の用量として、または１日２回の分割用量（例えば、量の半分）として服用する。いくつかの実施形態では、対象は、１日１回または１日２回、約１００ｍｇ～約１５００ｍｇの範囲の用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、１日１回または２回、約１００、１５０、２００、２５０、３００、２５０、４００、４５０、または５００ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、１日当たり約２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、または１０００ｍｇのうちのいずれかの用量が提供され、任意選択で１日１回の用量として、または１日２回の分割用量（例えば、量の半分）として服用する。いくつかの実施形態では、約４５０ｍｇまたは約１５０ｍｇで、任意選択で１日２回、提供される。特定の実施形態では、対象に、１日２回、任意選択で、経口で、これらの用量のいずれか（ａｎｙｂｏｕｔｔ）で提供される。特定の実施形態では、対象は、１日１回または２回、この用量で提供される。いくつかの実施形態では、この用量は分割され、半分が、１日２回投与される。特定の実施形態では、用量は、本明細書で開示されるペプチド二量体化合物、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂを含む。特定の実施形態では、用量は、任意選択で、潰瘍性大腸炎などのＩＢＤを治療するために、経口で、または局所的に、例えば、直腸に提供される。
本明細書で開示される方法のうちのいずれかの特定の実施形態では、対象は、約５、６、７、８、９、１０、１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、または１００．０ｍｇのうちのいずれかの用量または量で、任意選択で１日２回提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約６、７、８、９、１０、１２．５、２５．０、または３７．５ｍｇの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約５ｍｇ～約１３０ｍｇの範囲の用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約５ｍｇ～約５０ｍｇの範囲の用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約５ｍｇ～約１２．５ｍｇの範囲の用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約８ｍｇの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、１日２回約１５０ｍｇの用量または１日２回約４５０ｍｇの用量で提供される。特定の実施形態では、対象は、１日２回、任意で経口で、これらの用量のいずれかで提供される。特定の実施形態では、対象は、１日１回または２回のこれらの用量のいずれかで提供される。特定の実施形態では、それは、１日２回提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約８ｍｇの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、１日２回約１５０ｍｇの用量または１日２回約４５０ｍｇの用量で提供される。特定の実施形態では、用量は、本明細書に開示されるペプチド二量体化合物、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂを含む。特定の実施形態では、用量は、経口で、または局所的に、例えば、直腸に、例えば、座薬によって提供される。いくつかの実施形態では、対象に、任意選択で、潰瘍性大腸炎などのＩＢＤを治療するために、１日２回約１５０ｍｇの用量または１日２回約４５０ｍｇの用量の化合物Ａまたは化合物Ｂが、１日２回経口で提供される。
本明細書で開示される方法の特定の実施形態では、方法は、炎症性疾患または障害に罹患している個体または対象を治療するためのものである。特定の実施形態では、病態は、消化器系の炎症病態である。特定の実施形態では、対象に、亜飽和血液受容体占有率（ＲＯ％）をもたらす用量または量のα４β７インテグリン拮抗薬を投与または提供する。特定の実施形態では、本方法は、本明細書に開示されるペプチド二量体化合物、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂを使用して実施される。特定の実施形態では、用量は、経口で、または局所的に、例えば、直腸に提供される。特定の実施形態では、対象は、１日１回または２回、この用量で提供される。
特定の実施形態では、疾患または障害は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、成人ＩＢＤ、小児ＩＢＤ、青年ＩＢＤ、潰瘍性大腸炎、クローン病、セリアック病（非熱帯性スプルー）、血清反応陰性関節症に関連する腸疾患、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン性大腸炎、好酸球性胃腸炎、放射線療法、化学療法、直腸結腸切除および回腸肛門吻合後に生じる嚢炎、消化器がん、膵炎、インスリン依存性真性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管炎、胆管周囲炎、慢性気管支炎、慢性副鼻腔炎、喘息、原発性硬化性胆管炎、ＧＩ管におけるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、好酸球性喘息、好酸球性食道炎、胃炎、大腸炎、顕微鏡的大腸炎、ならびに移植片対宿主病（ＧＶＤＨ）からなる群から選択される。特定の実施形態では、疾患または障害は、ＩＢＤである。いくつかの実施形態では、ＩＢＤは、潰瘍性大腸炎である。いくつかの実施形態では、ＩＢＤは、クローン病である。いくつかの実施形態では、対象は、潰瘍性大腸炎またはクローン病を治療するために、化合物Ａまたは化合物Ｂを経口で提供される。
特定の実施形態では、本開示は、ＩＢＤの治療を必要とする対象においてＩＢＤを治療する方法であって、対象に、本明細書で開示されるペプチド二量体化合物、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂを経口投与することを含み、化合物は、亜飽和血液受容体占有率、例えば、５０％未満のＲＯをもたらす投薬量で投与される、方法を提供する。ある特定の実施形態では、ＩＢＤは、潰瘍性大腸炎またはクローン病である。特定の実施形態では、対象は、約５、６、７、８、９、１０、１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３１２．５、３２５．０、３３７．５、３５０．０、３６２．５、３７５、３８７．５、４００．０、４１２．５、４２５．０、４３７．５、４５０．０、４６２．５、４７５、４８７．５、または５００．０ｍｇのうちのいずれかの用量または量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３５０．０、４００．０、４５０．０、または５００．０ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、または１３０ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、または１１５ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約９５、１００、または１０５ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約１００ｍｇの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約１００ｍｇ～約５００ｍｇの範囲の用量で、任意選択で１日１回または１日２回、提供される。いくつかの実施形態では、対象は、約２００ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の用量で提供され、任意選択で、１日１回の用量として、または１日２回の分割用量（例えば、量の半分）として服用する。いくつかの実施形態では、対象は、１日当たり約１００ｍｇ～約１５００ｍｇの範囲の用量で提供され、任意選択で、１日１回の用量として、または１日２回の分割用量（例えば、量の半分）として服用する。いくつかの実施形態では、対象は、１日１回または１日２回、約１００ｍｇ～約１５００ｍｇの範囲の用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、１日１回または２回、約１００、１５０、２００、２５０、３００、２５０、４００、４５０、または５００ｍｇのうちのいずれかの用量で提供される。いくつかの実施形態では、対象は、１日当たり約２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、または１０００ｍｇのうちのいずれかの用量が提供され、任意選択で１日１回の用量として、または１日２回の分割用量（例えば、量の半分）として服用する。いくつかの実施形態では、約４５０ｍｇまたは約１５０ｍｇで、任意選択で１日２回、提供される。いくつかの実施形態では、対象は、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）またはクローン病を治療するために、１日２回約１５０ｍｇの用量または１日２回約４５０ｍｇの用量の化合物Ａまたは化合物Ｂが経口で提供される。特定の実施形態では、本方法は、潰瘍性大腸炎に対して対象を治療するために使用される。特定の実施形態では、対象は、中等度から重度の活性ＵＣを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＣの生検で確認された診断を有する。特定の実施形態では、対象は、実施例に開示される参加基準のうちの１つ以上（またはすべて）を満たし、実施例に開示される除外クリティエリア（ｃｒｉｔｉｅｒｉａ）のうちの１つ以上（またはいずれか）を満たさない。
特定の実施形態では、本開示は、ＩＢＤ（例えば、潰瘍性大腸炎またはクローン病）の治療を必要とする対象においてＩＢＤを治療する方法であって、対象に、本明細書で開示されるペプチド二量体化合物、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂを経口投与することを含み、化合物は、対象の血漿中で満たされる以下の薬物動態パラメータのうちの１つ以上をもたらす投薬量で投与される、方法を提供する。
１～２５、任意選択で、４～１２のＣｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）、
１～５、任意選択で、２～４のＴｍａｘ（時間）、
１０～２５０、任意選択で、５０～１５０のＡＵＣｔ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
１０～３００、任意選択で、３０～２５０のＡＵＣｉｎｆ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
３～１０、任意選択で４～１０のｔ１／２（時間）、
３０～１３０のＡＵＣｔａｕ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
１～５のＣｔｒｏｕｇｈ（ｎｇ／ｍＬ）、
０．５～２．５、任意選択で、２～３の蓄積Ｃｍａｘ（ｎｇ．ｍＬ）、および
０．５～３．０の蓄積ＡＵＣｔ（ｎｇ．時間／ｍＬ）。
これらの方法の特定の実施形態では、ＩＢＤは、潰瘍性大腸炎またはクローン病である。特定の実施形態では、薬物動態パラメータは、投与の１時間以内、２時間以内、３時間以内、４時間以内、６時間以内、８時間以内、または１２時間以内に満たされる。特定の実施形態では、薬物動態パラメータは、投与後、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも６時間、少なくとも８時間または少なくとも１２時間維持される。
特定の実施形態では、本開示は、ＩＢＤの治療を必要とする対象においてＩＢＤを治療する方法であって、対象に、本明細書で開示されるペプチド二量体化合物、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂを経口投与することを含み、化合物は、対象の血漿中の以下の薬力学的パラメータのうちの１つ以上をもたらす投薬量で投与される、方法を提供する。
５０～１００、任意選択で、９０～１００のＲＯｍａｘ（％）、
５０～９５、任意選択で、６５～９５の平均ＲＯ（％）、
－２０～－６０、任意選択で、－３５～－６０の受容体発現ｍａｘの変化（％）、
－１０～－５５、任意選択で、－２５～－５５の受容体発現の平均変化（％）、
８０～１００の定常状態ＲＯｍａｘ（％）、
７５～９０の平均ＲＯ０－２４（ｈ％）、
８０～９５の平均ＲＯ０－１２（ｈ％）、および
７０～９０の平均ＲＯ１２－２４（ｈ％）。
これらの方法の特定の実施形態では、ＩＢＤは、潰瘍性大腸炎またはクローン病である。特定の実施形態では、薬力学的パラメータは、投与の１時間以内、２時間以内、３時間以内、４時間以内、６時間以内、８時間以内、または１２時間以内に満たされる。特定の実施形態では、薬力学的パラメータは、投与後、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも６時間、少なくとも８時間または少なくとも１２時間維持される。
特定の実施形態では、本明細書に開示される方法は、対象におけるα４β７の活性を（部分的または完全に）低減させる。特定の実施形態では、本方法は、α４β７インテグリンを含むＴ細胞の増殖、例えば対象の消化器組織、例えば消化器粘膜に存在するＴ細胞の増殖を低減させる。さらなる実施形態では、本方法は、対象におけるＴ細胞、例えば、対象の消化器組織中のＴ細胞、例えば、β７＋Ｔ細胞によるサイトカインの生成または放出を阻害する。特定の実施形態では、本方法は、付随する図に開示されるサイトカインのうちのいずれか、例えば、ＩＦＮガンマ、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－８、ＩＬ－１２／２３ｐ４０、ＩＬ－１５、ＩＬ－１６、ＩＬ－１３、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）、または腫瘍壊死因子β（ＴＮＦβ）の生成または放出を低減させる。特定の実施形態では、本明細書で開示される方法は、Ｔ細胞によるサイトカインの生成または放出を阻害し、それらの放出は、対象における、例えば、消化器粘膜などの消化器組織における粘膜血管アドレシン細胞接着分子１（ＭＡｄＣＡＭ１）への結合によって促進される。特定の実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ４５ＲＯ－ナイーブまたはＣＤ４５ＲＯ＋メモリーＴ細胞である。特定の実施形態では、Ｔ細胞は、β７＋である。
さらなる関連する実施形態では、本発明には、生物学的機能α４β７に関連する病態を罹患する対象、例えば、哺乳動物またはヒトを治療するための方法であって、ＭＡｄＣＡＭ１を発現する組織、例えば、消化器粘膜などの消化器組織におけるα４β７の生物学的機能を（部分的または完全に）阻害するのに十分な量で、本明細書に記載のペプチド分子を対象に提供または投与することを含む、方法が含まれる。特定の実施形態では、対象は、ＭＡｄＣＡＭ１を発現する組織におけるα４β７の生物学的機能を少なくとも部分的に阻害するのに十分な有効量のペプチド単量体またはペプチド二量体が提供される。特定の実施形態では、病態は、炎症性腸疾患である。
追加の実施形態では、本発明には、疾患または病態の治療または予防を必要とする対象において疾患または病態を治療または予防する方法であって、対象、例えば、哺乳動物に、本明細書に記載の有効量のペプチド二量体またはペプチド単量体を提供または投与することを含み、疾患または病態は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）（成人ＩＢＤ、小児ＩＢＤおよび青年ＩＢＤを含む）、潰瘍性大腸炎、クローン病、セリアック病（非熱帯性スプルー）、血清反応陰性関節症に関連する腸疾患、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン性大腸炎、好酸球性胃腸炎、放射線療法、化学療法、直腸結腸切除および回腸肛門吻合後に生じる嚢炎、消化器がん、膵炎、インスリン依存性真性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管炎、胆管周囲炎、慢性気管支炎、慢性副鼻腔炎、喘息、原発性硬化性胆管炎、ＧＩ管におけるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、好酸球性喘息、好酸球性食道炎、胃炎、大腸炎、顕微鏡的大腸炎、ならびに移植片対宿主病（ＧＶＤＨ）（腸ＧＶＤＨを含む）からなる群から選択される、方法が含まれる。本明細書に記載される治療方法のうちのいずれかの特定の実施形態では、対象は、これらの疾患または病態のうちの１つと診断されているか、またはそれを発症するリスクがあるとみなされている。
本明細書に記載される治療方法のうちのいずれかの特定の実施形態では、ペプチド分子（またはペプチド分子を含む薬学的組成物）は、経口、静脈内、腹膜、皮内、皮下、筋肉内、髄腔内、吸入、気化、噴霧、舌下、口腔、非経口、直腸、膣、および局所からなる群から選択される投与形態によって個体に投与される。
特定の実施形態では、本開示は、約５、６、７、８、９、１０、１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３１２．５、３２５．０、３３７．５、３５０．０、３６２．５、３７５、３８７．５、４００．０、４１２．５、４２５．０、４３７．５、４５０．０、４６２．５、４７５、４８７．５、または５００．０ｍｇのうちのいずれかを含む、本明細書で開示されるペプチド二量体化合物の単位用量形態を提供する。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３５０．０、４００．０、４５０．０、または５００．０ｍｇのうちのいずれかを含む。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、または１３０ｍｇのうちのいずれかを含む。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、または１１５ｍｇのうちのいずれかを含む。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約９５、１００、または１０５ｍｇのうちのいずれかを含む。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約１００ｍｇを含む。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約１００～５００ｍｇを含む。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約１００、１５０、２００、２５０、３００、２５０、４００、４５０、または５００ｍｇのうちのいずれかを含む。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約４５０ｍｇまたは約１５０ｍｇを含む。特定の実施形態では、単位用量形態は、ペプチド二量体化合物、例えば、本明細書で開示されるもののうちのいずれかを含む薬学的組成物を含む。特定の実施形態では、それは、経口投与のために、例えば、錠剤として製剤化される。特定の実施形態では、それは、直腸投与のために、例えば、座薬として製剤化される。いくつかの実施形態では、単位用量形態は、約４５０ｍｇまたは約１５０ｍｇの化合物Ａまたはコポウンド（Ｃｏｐｏｕｎｄ）Ｂ（またはそれらの薬学的に許容される塩）を含む。特定の実施形態では、単位用量形態は、ペプチド二量体化合物、例えば、本明細書で開示されるもののうちのいずれかを含む薬学的組成物を含む。
特定の実施形態では、本発明のペプチド分子は、１つ以上の薬学的に許容される希釈剤、担体、または賦形剤をさらに含む薬学的組成物中に存在する。特定の実施形態では、それらは液体または固体として製剤化される。特定の実施形態では、それらは、錠剤もしくはカプセルとして、または液体懸濁液として製剤化される。本発明のいくつかの実施形態は、徐放性マトリクス中に懸濁されている本発明のα４β７インテグリン拮抗薬ペプチド分子で個体を治療するための方法をさらに提供する。本明細書で使用される徐放性マトリクスは、酵素的加水分解もしくは酸－塩基加水分解によって、または溶解によって分解可能である材料（通常ポリマー）で作製されるマトリクスである。体内に挿入されると、このマトリクスに酵素および体液が作用する。徐放性マトリクスは、望ましくは、リポソーム、ポリラクチド（ポリ乳酸）、ポリグリコリド（グリコール酸のポリマー）、ポリラクチドコグリコリド（乳酸とグリコール酸とのコポリマー）ポリ酸無水物、ポリ（オルト）エステル、ポリペプチド、ヒアルロン酸、コラーゲン、コンドロイチン硫酸塩、カルボン酸、脂肪酸、リン脂質、多糖、核酸、ポリアミノ酸、フェニルアラニン、チロシン、イソロイシンなどのアミノ酸、ポリヌクレオチド、ポリビニルプロピレン、ポリビニルピロリドン、およびシリコーンなどの生体適合性材料から選択される。特に、生分解性マトリクスは、ポリラクチド、ポリグリコリド、またはポリラクチドコグリコリド（乳酸およびグリコール酸のコポリマー）のいずれかのうちの１つのマトリクスである。
いくつかの態様では、本発明は経口送達のための薬学的組成物を提供する。本発明の様々な実施形態およびペプチド分子組成物は、本明細書に記載される方法、技術、および／または送達ビヒクルのうちのいずれかに従って、経口投与のために調製され得る。さらに、当業者は、本発明のペプチド分子組成物は、本明細書に開示されないが、当該技術において既知であり、小ペプチド分子の経口送達における使用に適合する系または送達ビヒクル内に修飾、あるいは統合され得ることを理解するであろう。
本発明のペプチドとの使用に適合する経口用量形態またはユニット用量は、ペプチド活性薬物成分の混合物および非薬物成分または賦形剤、ならびに成分またはパッケージングのいずれかとしてみなされ得る他の再利用不可能材料を含み得る。経口組成物は、液体、固体、および半固体用量形態のうちの少なくとも１つを含み得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の有効量のペプチド分子を含む経口用量形態が、提供され、用量形態は、丸剤、錠剤、カプセル、ゲル、ペースト、飲料、およびシロップのうちの少なくとも１つを含む。いくつかの例では、対象の小腸内でチオエーテルペプチド分子の遅延した放出を達成するように設計および構成される、経口用量形態が提供される。
一実施形態では、本発明のペプチドを含む経口薬学的組成物は、小腸においてペプチド分子の放出を遅延させるように設計された腸溶コーティングを含む。いくつかの例では、本発明の薬学的組成物は、約５．０以上のｐＨの胃液中で可溶性である腸溶コーティングを含むことが好ましい。少なくとも１つの実施形態では、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、セルロースアセテートフタレート、およびセルロースアセテートトリメリテートを含むセルロースの誘導体、ならびにセルロースおよび他の炭水化物ポリマーの同様の誘導体などの解離可能なカルボキシル基を有するポリマーを含む、腸溶コーティングを含む、薬学的組成物が提供される。
一実施形態では、本明細書に記載のペプチド分子を含む薬学的組成物は、腸溶コーティング内に提供され、腸溶コーティングは、薬学的組成を対象の下部消化器系内で制御された様式で保護し、放出するように、および全身性の副作用を回避するように設計される。腸溶コーティングに加えて、本発明のペプチド分子は、任意の適合する経口薬物送達系または成分内に被包、コーティング、係合、または別の方法で関連付けられ得る。例えば、いくつかの実施形態において、本発明のペプチド分子は、ポリマーヒドロゲル、ナノ粒子、微粒子、ミセル、および他の脂質系のうちの少なくとも１つを含む脂質担体系内に提供される。
小腸内でのペプチド分解を克服するために、本発明のいくつかの実装例は、本発明に従うペプチド分子が収容されるヒドロゲルポリマー担体系を含み、これによりヒドロゲルポリマーは、小腸内でペプチドをタンパク質分解から保護する。本発明のペプチド分子は、ペプチドの溶解動態を増大させ、腸吸収を増強するように設計された担体系との適合する使用のためにさらに製剤化され得る。これらの方法は、ペプチドのＧＩ管浸透を増大させるためのリポソーム、ミセルおよびナノ粒子の使用を含む。
様々な生物反応性系はまた、本発明の１つ以上のチオエーテルペプチド分子と組み合わせられて、経口送達のための薬学的薬剤を提供し得る。いくつかの実施形態において、本発明のペプチド分子は、ヒドロゲル、水素結合基を有する粘膜接着性ポリマー（例えば、ＰＥＧ、ポリ（メタクリル）酸［ＰＭＡＡ］、セルロース、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）、キトサン、アルギン酸塩）、などの生物反応性系との組み合わせで使用されて、経口投与のための治療剤を提供する。他の実施形態は、本明細書に開示されるペプチド分子の薬物滞留時間を最適化または延長するための方法を含み、ペプチド分子の表面は、水素結合、連結したムチンを有するポリマー、または／および疎水性相互作用を通して粘膜接着性特性を含むように修飾される。これらの修飾ペプチド分子は、本発明の所望の特徴に従って、対象内での増大薬物滞留時間を実証し得る。さらに、標的化粘膜接着性系は、腸細胞およびＭ－細胞表面で受容体に特異的に結合し得、これによりペプチド分子を含有する粒子の取り込みをさらに増大させる。
他の実施形態は、本明細書に記載のペプチド分子の経口送達のための方法を含み、ペプチド分子は、傍細胞または経細胞浸透を増大させることによって、腸粘膜を横断してペプチドの移送を促進する浸透増強剤と組み合わせて使用される。例えば、一実施形態では、浸透増強剤は、本明細書に記載のペプチド分子と組み合わされ、浸透増強剤は、長鎖脂肪酸、胆汁酸塩、両親媒性界面活性剤、およびキレート剤のうちの少なくとも１つを含む。一実施形態では、Ｎ－［（ヒドロキシベンゾイル）アミノ］カプリル酸ナトリウムを含む浸透増強剤が、本発明のペプチド分子との弱い非共有結合的会合を形成するために使用され、浸透増強剤は、血液循環に到達すると膜移送およびさらなる解離を助力する。別の実施形態では、本発明のペプチド分子はオリゴアルギニンにコンジュゲーションし、これにより様々な細胞型内へのペプチドの細胞透過を増大させる。さらに、少なくとも１つの実施形態では、非共有結合は、本明細書に記載のペプチド分子と、シクロデキストリン（ＣＤ）およびデンドリマーからなる群から選択される浸透増強剤との間に提供され、浸透増強剤は、ペプチド凝集を低減し、ペプチド分子の安定性および溶解性を増大させる。
本明細書に記載される治療または送達系のうちの少なくとも１つにおいて使用されるとき、治療有効量の本発明のペプチド分子は、純粋な形態で、またはそのような形態が存在する場合、薬学的に許容される塩の形態で用いられ得る。本明細書で使用される場合、「治療有効量」の本発明の化合物は、任意の医学的治療に適用可能な所望の利益／リスク比で、インテグリン関連疾患を治療する（例えば、ＩＢＤに関連する炎症を低減する）ために十分な量のペプチド分子を記載することが意図される。しかしながら、本発明の化合物および組成物の１日の合計使用量が、健全な医学的判断の範囲内で担当医によって決定されることは理解されるであろう。任意の特定の患者の特定の治療有効用量レベルは、ａ）治療される障害および障害の重症度、ｂ）用いられる特定の化合物の活性、ｃ）用いられる特定の組成物、患者の年齢、体重、一般的な健康、性別、食事、ｄ）投与の時間、投与の経路、および用いられる特定の化合物の排泄の割合、ｅ）治療期間、ｆ）用いられる特定の化合物との組み合わせで、または同時に使用される薬物、および当該医学的技術において既知の同様の要因を含む様々な要因に依存するであろう。
あるいは、本発明の化合物は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤との組み合わせで、対象のペプチド分子を含有する薬学的組成物として投与され得る。薬学的に許容される担体または賦形剤は、任意の種類の無毒性の固体、半固体、もしくは液体充填剤、希釈剤、封入材料、または製剤化補助剤を指す。組成物は、非経口、大槽内、膣内、腹腔内、直腸内、局所（粉末、軟膏、液滴、坐剤、または経皮パッチなどによって）、直腸または口腔投与され得る。本明細書で使用される「非経口」という用語は、静脈内、筋肉内、腹腔内、胸骨内、皮下、皮内、ならびに関節内の注射および注入を含む投与様式を指す。
直腸または腟投与のための組成物は、室温で固体であるが体温で液体であるため、直腸または膣腔内で融解し活性化合物を放出する、ココアバター、ポリエチレングリコール、または坐剤ワックスなどの好適な非刺激性賦形剤または担体と、本発明の化合物を混合することによって調製され得る好ましくは坐剤である。
単一または分割された用量で、ヒトまたは他の哺乳類宿生に投与されるべき本発明の組成物の全１日用量は、例えば、１日０．０００１～３００ｍｇ／体重ｋｇ、およびより通常は１～３００ｍｇ／体重ｋｇなどの量であり得る。
実施例１
化合物Ａは、ＭＡｄＣＡＭ１媒介性ＣＤ４＋Ｔ細胞増殖を遮断する。
α４β７インテグリンの経口消化器（ＧＩ）制限ペプチド拮抗薬である化合物Ａは、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の治療のために開発されている。粘膜アドレシン細胞接着分子－１（ＭＡｄＣＡＭ１）に結合するα４β７の遮断は、炎症ＧＩ粘膜内への血管Ｔ細胞の血管外遊走を防止することによってＩＢＤを治療すると考えられている。化合物ＡがＧＩ炎症を低減するメカニズムをさらに探索するために、以下の実験を実施した。特に、ＭＡｄＣＡＭ１媒介性ＣＤ４＋Ｔ細胞増殖およびサイトカイン産生を阻害する化合物Ａの能力を評価することによって、α４β７の局所ＧＩ作用機能の可能性を評価した。
化合物Ａ：
Figure 2023509790000030
（（２－ベンジル）－（Ｎ－Ｍｅ－Ｒ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－（Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ））－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ）２（配列番号５）およびリンカー－ＤＩＧジグリコール酸。
ＰＢＭＣを健康なヒトドナーから精製し、ＣＤ４＋Ｔ細胞の濃縮を実施した。初代ＣＤ４＋Ｔ細胞を蛍光標識し、プレート結合抗ＣＤ３単独で、または阻害剤（または陰性対照）：化合物Ａ（１ｕＭ）、陰性対照として不活性類似体（１ｕＭ）、もしくはベドリズマブ（５００ｎｇ／ｍＬ）を含んで、もしくは含まずに、ＭＡｄＣＡＭ１とともに３日間インキュベーションした。表現型、Ｔヘルパー（Ｔｈ）サブセットの分布、およびＲＯ％の分析を、染色されたばかりの生試料のフローサイトメトリーによって実施した。
抗ＣＤ３と組み合わせたＭＡｄＣＡＭ１は、３日間のインキュベーション後、抗ＣＤ３単独と比較して、ＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖を顕著に増強した（ｎ＝７、１２～８７％）（図１）。化合物Ａは、ＭＡｄＣＡＭ１媒介性増殖を完全に無効にした（図１）。阻害レベルは、ベドリズマブによる阻害と同様であった（図１）。遮断は、α４β７への化合物Ａの結合への依存性を示す不活性類似体（陰性対照、ＮＥＧ）では観察されなかった。化合物Ａによる阻害は、化合物Ａの活性に依存していた。化合物Ａによる阻害は、濃度依存性であった。４人の独立したヒトドナーからの平均ＩＣ５０は、４．４ｎＭであった（表４）。
（表４）４人のドナーからのＩＣ５０
Figure 2023509790000031
免疫表現型決定は、ＣＤ４５ＲＯ－ナイーブおよびＣＤ４５ＲＯ＋メモリーＴ細胞の両方で増殖が生じ、ナイーブＴ細胞をメモリー細胞表現型にシフトさせたことを明らかにした（図２）。増殖は、β７＋集団に制限され、増殖の連続サイクルはβ７発現の増大を示した（図３Ａ）。β７の表面発現は、化合物Ａの存在下で、未分割のＣＤ４＋Ｔ細胞において低下し、化合物Ａによる内部移行を示した（図３Ｂおよび図４、５人のドナーで試験された）。増殖したメモリーＴ細胞のうち、ＩＦＮγ産生Ｔｈ１サブセットの割合は、ＩＬ－１７Ａ産生Ｔｈ１７およびＩＬ－４産生Ｔｈ２サブセットよりも高かった（表５）。
（表５）増殖ＣＤ４＋Ｔ細胞の特徴
Figure 2023509790000032
α４β７－ＭＡｄＣＡＭ１相互作用は、β７＋ＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖およびサイトカイン放出を促進し、これは、Ｔ細胞輸送とは独立して、ＩＢＤ患者の疾患の腸において生じる慢性炎症反応に寄与し得る。α４β７を介したＭＡｄＣＡＭ１媒介性シグナル伝達の化合物Ａの阻害は、経口ＧＩ制限アプローチの潜在的な治療上の利点を支持し、それにより、化合物Ａが局所的に送達され、ＧＩ内のα４β７機能を直接遮断する。
実施例２
化合物Ａは、ＭＡｄＣＡＭ１媒介性サイトカイン産生を遮断する。
化合物ＡがＧＩ炎症を低減するメカニズムをさらに探索するために、以下の実験を実施した。特に、サイトカインプロファイリングは、正常で健康なドナーから単離されたＴ細胞で実施された。
ＰＢＭＣを、３人の健康なヒトドナー（ドナー７、１０および１１）から精製し、ＣＤ４＋Ｔ細胞の濃縮を行った。初代ＣＤ４＋Ｔ細胞を蛍光標識し、プレート結合抗ＣＤ３単独、ＭＡｄＣＡＭ１とともにプレート結合抗ＣＤ３、またはＭＡｄＣＡＭ１および様々な量の化合物Ａとともにプレート結合抗ＣＤ３とともにインキュベーションした。上清サイトカインレベルを、抗ＣＤ３単独および様々な濃度の化合物Ａの存在下での抗ＣＤ３＋ＭＡｄＣＡＭ１について、ＭＳＤまたはルミネクスプラットフォームマルチプレックスアッセイによって定量化した。
多重プロファイリングにより、ＭＡｄＣＡＭ１によって放出が促進されたＩＦＮγ、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＧＭ－ＣＳＦおよびＴＮＦαを含むいくつかのサイトカインが同定された（図５Ａ～Ｃおよび６Ａ～Ｃ）。ＭＡｄＣＡＭ１媒介性サイトカイン産生は、化合物Ａによって濃度依存的に阻害された。化合物Ａによる特異的サイトカインのＭＡｄＣＡＭ１媒介性産生の濃度依存的で完全な阻害を、図５Ａ～Ｃおよび６Ａ～Ｃに示す。α４β７－ＭＡｄＣＡＭ１相互作用は、β７＋ＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖およびサイトカイン放出を促進し、これは、Ｔ細胞輸送とは独立して、ＩＢＤ患者の疾患の腸において生じる慢性炎症反応に寄与し得る。α４β７を介したＭＡｄＣＡＭ１媒介性シグナル伝達の化合物Ａの阻害は、経口ＧＩ制限アプローチの治療上の利点を支持し、それにより、化合物Ａが局所的に送達され、ＧＩ内のα４β７機能を直接遮断する。
実施例３
マウスにおける受容体占有率
次の実験を実施し、化合物Ａ類似体である化合物Ｂを投薬したマウスにおける全血およびパイエル板における受容体占有率を調べた。
化合物Ｂ：
Figure 2023509790000033
リンカー＝ＤＩＧ（ジグリコール酸）を有する（Ａｃ－Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－（Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ））－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２）２（配列番号６）
３群の雌のＣ５７ＢＬ／６マウス（１群当たりＮ＝６）を、ビヒクル（群１）、化合物Ｂ（３ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＱＤ、群２）、または化合物Ｂ（３０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＱＤ、群３）のいずれかで経口処置した。投薬の１時間後、マウスを安楽死させ、全血／血漿およびパイエル板を収集した。パイエル板を、洗浄ステップなしで、２％のＦＢＳを含む１ｍＬのＲＰＭＩ培地に分散させた。全血およびパイエル板の単一細胞懸濁液（合計１ｍＬのうち１００ｕＬ）をフローサイトメトリー用に提出し、α４β７受容体の占有率を判定した。ＲＯ％＝（１－（陽性試験試料％／陽性ビヒクル対照の中央値％））＊１００。血漿および単一細胞懸濁液中に分散したパイエル板（合計１ｍＬのうちの５００ｕＬ）を、薬物曝露についても分析した。
両方の用量群において、全血と比較して、パイエル板における受容体占有率が有意に高かった（図７）。用量群間での全血またはパイエル板における受容体占有率レベルは、同等であった。３ｍｇ／ｋｇ用量および３０ｍｇ／ｋｇ用量の両方で、いくつかの動物でパイエル板における競合（１００％）受容体占有率があった（図８、上部）。化合物Ｂの様々な用量に対するＲＯ％を、図８下部に示す。ＰＫおよびＰＤデータを、化合物Ｂの用量が示される図９に示す。
化合物Ａを使用して同様の実験を実施した。両方の用量群において、全血と比較して、パイエル板における受容体占有率が有意に高かった。３ｍｇ／ｋｇ用量と比較して、３０ｍｇ／ｋｇ用量では、全血（Ｐ＜０．０１）およびパイエル板（Ｐ＜０．００１）における受容体占有率が有意に高かった（図２５）。効果は、化合物Ｂで観察されたのと同じであったが、定量的にはそれほど大きくはなかったが、潜在的に化合物Ａが化合物Ｂよりも大きな活性を有するため、同じ用量を使用した。また、血漿およびパイエル板の両方において、化合物Ａ濃度の有意な用量依存的増大があった（図２６）。化合物Ａの濃度は、両方の用量レベルで、血漿よりもパイエル板で有意に高かった。図２７に示されるように、化合物Ａを投薬した動物の全血およびパイエル板において受容体占有率の用量依存的増大があり、３０ｍｇ／ｋｇ用量での動物ではパイエル板における完全な（１００％）受容体占有率があった。
実施例４
マウスにおける化合物Ａの組織曝露
この研究を実施して、健康なＣ５７ＢＬ／６雌マウスにおけるＰＯ投与後の化合物Ａの血漿、パイエル板（ＰＰ）、および腸間膜リンパ節（ＭＬＮ）、小腸、および結腸組織曝露を判定した。
１２匹の処置ナイーブＣ５７ＢＬ／６雌マウスを研究に割り当てた。動物を一晩絶食させ、１０ｍＬ／ｋｇの用量体積で経口強制飼養（ＰＯ）により、３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ａの単回用量を投与した。用量の１、３、および６時間（ｈ）後に、４匹のマウス／時点を末端出血に供し、安楽死させ、各動物からパイエル板（ＰＰ）、腸間膜リンパ節（ＭＬＮ）、小腸、および結腸を収集した。血液を処理して血漿にし、適格な液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）方法を使用して、化合物Ａレベルの薬物動態（ＰＫ）分析のために、血漿および組織試料を提出した。
血漿および組織中の化合物Ａの濃度を、適格な液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）方法を使用して分析した。処理された血漿および組織試料を、ＡＢ／ＭＤＳ Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ４０００質量分析計で分析した。陽イオンは、多重反応モニタリング（ＭＲＭ）モードでモニタリングした。ピーク面積比により定量化した。
ＰＫデータ分析を、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ８．１（Ｃｅｒｔａｒａ ＵＳＡ Ｉｎｃ．）における非区画分析（ＮＣＡ）を使用して実施した。定量化の下限を下回るすべての濃度値は、薬物動態分析においてはゼロとして処理された。最大濃度（Ｃｍａｘ）およびＣｍａｘまでの見かけの時間（ｔｍａｘ）は、観察によって得られた。濃度対時間曲線下面積（ＡＵＣ）は線形台形法により得られた。すべての濃度データおよびＰＫパラメータは、値が１より大きい場合、有効数字最大３桁で報告され、値が１より小さい場合、小数点以下最大３桁で報告された。時間パラメータは、小数点以下最大２桁で報告された。濃度データを、Ｅｘｃｅｌ（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ）を使用してプロットした。
各動物における化合物Ａの血漿および組織濃度の平均値を図１０にプロットする。得られたＰＫパラメータを図１１に示す。３０ｍｇ／ｋｇでの単一ＰＯ投与後、ＭＬＮ、ＰＰおよび小腸においては１時間で、血漿においては３時間で、および結腸においては６時間で、化合物Ａ曝露のピークが観察された。平均Ｃｍａｘ値は、小腸において最大であり（１３３００ｎｇ／ｇ）、ＰＰおよび結腸では、およそ２分の１の平均値がみられた。これらの消化器レベルは、血漿（１９．０ｎｇ／ｍＬ）およびＭＬＮ（５６．８ｎｇ／ｇ）のレベルよりもはるかに高かった（１００倍以上）。同様に、小腸、ＰＰ、および結腸における平均ＡＵＣ値（それぞれ４８６００、３７９００、および１５７００ｎｇ／ｇ）は、血漿（９５．４ｎｇ／ｍＬ）およびＭＬＮ（２２６ｎｇ／ｇ）における平均ＡＵＣ値よりもはるかに大きかった（６０倍以上）。これらの結果により、化合物Ａが、他の点では健康な雌マウスにＰＯ投薬した場合、血漿およびリンパ節曝露が制限されることが実証された。用量分析（データは示さず）により、投薬溶液が公称濃度の９７．６％であることが実証された。
実施例５
化合物Ａは、培養Ｔ細胞の腸ホーミングを阻害する。
オールトランスレチノイン酸（ＡＴＲＡ）の存在下で培養されたＴ細胞は、腸ホーミング受容体ＣＣＲ９、インテグリンα４（α４）およびインテグリンβ７（β７）を上方調節し、優先的に腸組織（回腸固有層およびパイエル板）にホーミングする。本研究の目的は、化合物Ａの存在下で培養されたＴ細胞の腸ホーミングを分析することであった。
精製されたＣＤ３＋細胞をＢ６．ＳＪＬ（ＣＤ４５．１＋）ドナーマウスから単離し、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズおよびＩＬ－２の存在下で培養して、Ｔ細胞の活性化および増殖を誘導した。いくつかの培養条件では、化合物Ａおよび／またはＡＴＲＡを添加した。インビボで細胞を追跡するために、ＡＴＲＡ－およびＡＴＲＡ＋細胞を、それぞれＣＭＦＤＡおよびＣＴＦＲで標識した。次いで、これらの標識細胞をＣ５７ＢＬ／６（ＣＤ４５．２＋）レシピエントマウスに共注射した。本研究には、４群のレシピエントマウスが存在した。
●ビヒクル（陰性対照）
●抗ＶＬＡ－４（陽性対照である抗ＶＬＡ－４でインビボ処置）
●化合物Ａ、１００ｎＭ（試験、培養中）
●化合物Ａ、１０００ｎＭ（試験、培養中）
レシピエントマウスの脾臓、パイエル板（ＰＰ）、および回腸固有層（ＬＰ）におけるＡＴＲＡ－およびＡＴＲＡ＋細胞の割合をフローサイトメトリーによって測定し、細胞ホーミングを評価した。
ＡＴＲＡ＋／ＤＭＳＯの存在下で培養された細胞（「ＡＴＲＡ＋／ＤＭＳＯ細胞」）は、予想されたとおり、ＡＴＲＡの非存在下で培養された細胞（「ＡＴＲＡ－細胞」）よりも、腸ホーミング受容体ＣＣＲ９ならびにインテグリンα４およびβ７を発現する細胞の割合が高かった。ＡＴＲＡ＋／化合物Ａ細胞は、ＡＴＲＡ＋／ＤＭＳＯ細胞よりもインテグリンβ７＋細胞の割合が低かった。ビヒクル群マウスの脾臓は、この群について予想されたとおり、ＡＴＲＡ＋細胞よりもＡＴＲＡ－の割合が大きく、それらのマウスのＬＰは、ＡＴＲＡ－細胞よりもＡＴＲＡ＋の割合が大きく、ＡＴＲＡ＋細胞が腸内に優先的にホーミングすることが確認された。ビヒクル処置マウスと比較して、抗ＶＬＡ－４処置マウスは、ＬＰ中のＡＴＲＡ＋細胞の割合がおよそ１０分の１であり、ＰＰ中のＡＴＲＡ＋細胞の割合がおよそ２分の１であった。これらの結果により、この陽性対照について予想されたとおり、抗ＶＬＡ－４処置が、ＡＴＲＡ＋細胞の腸ホーミングを低減させたことが確認された。化合物Ａ、１０００ｎＭ群は、ビヒクル群よりも、脾臓およびＬＰ中のＣＤ４５．１＋細胞の割合が有意に小さかった。加えて、両方の化合物Ａ群は、ビヒクルと比較して、ＬＰ中のＡＴＲＡ＋細胞の割合が小さく、その低減は、１０００ｎＭ群については統計的に有意に近かった。
方法：
１８匹のＢ６．ＳＪＬ（ＣＤ４５．１＋）ドナーマウスを、研究の開始前に３～９週間馴化させ、培養セットアップ（０日目）では１１～１６週齢であった。０日目に、脾臓およびリンパ節細胞をドナーマウスから単離し、プールした。ＣＤ３＋細胞を、ＳＴＥＭＣＥＬＬ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓキットカタログ番号１９８５１を使用して濃縮した。濃縮された細胞の純度を、フローサイトメトリーによって確認した。
次いで、およそ４４％の細胞を、抗ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ（Ｄｙｎａｂｅａｄｓ、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ１１４５３Ｄ）の存在下、１：１の細胞対ビーズ比で、１．５×１０６／ｍＬで培養した（ＡＴＲＡ－、以下の表４による）。残りの細胞は、細胞濃度が２×１０６／ｍＬであり、化合物ＡまたはＤＭＳＯのいずれかを培養物に添加したことを除いて、同じ条件下で培養した。次いで、オールトランスレチノイン酸（ＡＴＲＡ）を０．１μＭの濃度でこれらの培養物に添加した。以下の表６は、培養条件を要約したものである。
（表６）培養条件
Figure 2023509790000034
１日目に、ＩＬ－２を、３０Ｕ／ｍＬの濃度に達するようにすべての培養物に添加した。
２日目から４日目まで、次の濃度を維持しながら新鮮な培地を添加することにより、培養物を必要に応じて増殖させた。
●すべての培養物について３０Ｕ／ｍＬのＩＬ－２
●ＡＴＲＡ＋培養物については０．１μＭのＡＴＲＡ
●ＡＴＲＡ＋培養物にいては０．１％のＤＭＳＯ
●表４に列記される化合物Ａ
５日目に、各培養物からの細胞を染色し、表７に列挙される試薬を使用してフローサイトメトリーによって分析した。
（表７）腸ホーミング受容体発現の評価のためのフローサイトメトリーパネル
Figure 2023509790000035
３８匹のＣ５７ＢＬ／６（ＣＤ４５．２＋）レシピエントマウスを、研究の開始前（０日目）に９週間馴化させ、細胞移入時（５日目）では１６週齢であった。４日目に、群を横断して同様の平均体重を達成するように、レシピエントマウスをバランスの取れた方法で群に割り当てた。
５日目に、磁石で細胞培養からＣＤ３／ＣＤ２８ビーズを除去した後、ＡＴＲＡ＋細胞をＣＦＴＲで標識し、ＡＴＲＡ－細胞をＣＭＦＤＡで標識した。次いで、各培養条件由来の細胞を計数した。各群について、ＡＴＲＡ－細胞およびＡＴＲＡ＋培養条件のうちの１つ由来の細胞を、以下の表８により１：１の比率で混合し、レシピエントマウスに移入した。およそ１３００万個の各種の細胞（合計２６００万個）を各マウスに静脈内注射した。
（表８）治療レジメン
Figure 2023509790000036
群２のマウスに、抗ＶＬＡ－４を１回、細胞移入前の５日目に投薬した。抗ＶＬＡ－４（ＰＳ／２）抗体を、ＢｉｏＸＣｅｌｌから購入し、必要とされるまで－８０Ｃで保持した。抗体を滅菌ＰＢＳで１ｍｇ／ｍＬの最終濃度まで希釈し、１０ｍｇ／ｋｇで腹腔内投薬した。インビボ処置は、他の群には施さなかった。
細胞移入から２０～２２時間後、すべてのマウスを安楽死させ、その血液、脾臓、パイエル板および小腸を収集した。およそ５０μＬの血漿を各マウスの血液から単離し、さらなる分析まで乾燥インス上で痛みを感じた。
フローサイトメトリー分析のために、次の組織由来の細胞を各マウスから単離した。
●脾臓
●パイエル板
●回腸固有層
単離された細胞を計数し、抗ＣＤ４５．１抗体および生／死染色剤で染色した。次いで、フローサイトメトリー分析のために細胞を取得し、各組織におけるＣＤ４５．１＋、ＡＴＲＡ＋、およびＡＴＲＡ－細胞の割合を判定した。
培養期間の終了時に、フローサイトメトリー分析により、ＡＴＲＡ－細胞よりもはるかに小さい割合のＡＴＲＡ＋／ＤＭＳＯ細胞が、腸ホーミング受容体ＣＣＲ９ならびにインテグリンα４およびβ７を発現したことが示された（図１２および１３）。これらの所見により、予想されたとおり、ＡＴＲＡの存在下で培養された細胞は、腸ホーミング受容体を上方調節したことが確認された。ＡＴＲＡ＋／化合物Ａ培養物は、ＡＴＲＡ＋／ＤＭＳＯ培養物よりもインテグリンβ７＋細胞の割合が少なかった（図１２）。インテグリンα４の発現は、ＡＴＲＡ＋／化合物Ａ培養物と比較して、ＡＴＲＡ＋／ＤＭＳＯ培養物では低かったが、ＣＣＲ９の発現は影響を受けなかったようである（図１３）。これらの結果により、化合物Ａが上方調節を阻害し、発現を下方調節し、またはインテグリンβ７およびα４の検出に干渉したことが示された。組織ホーミング解析の結果を表９～１３に示す。
（表９）単離された細胞の総数（ｘ１０３）
Figure 2023509790000037
*ビヒクルに対してp<0.05
（表１０）ＣＤ４５．１＋細胞／１０３生細胞
Figure 2023509790000038
*ビヒクルに対してp<0.05
（表１１）脾臓におけるＡＴＲＡ＋細胞およびＡＴＲＡ－細胞／１０３生細胞
Figure 2023509790000039
*ビヒクルに対してp<0.05
（表１２）パイエル板におけるＡＴＲＡ＋およびＡＴＲＡ－細胞／１０３生細胞
Figure 2023509790000040
*ビヒクルに対してp<0.05
（表１３）回腸ＬＰにおけるＡＴＲＡ＋およびＡＴＲＡ－細胞／１０３生細胞
Figure 2023509790000041
*ビヒクルに対してp<0.05
**p<0.10
ビヒクル群における脾臓、パイエル板、および回腸固有層（ＬＰ）から単離された細胞の数は、予想どおりであった（表９）。また、これらの組織から単離されたＣＤ４５．１＋細胞の割合は、このモデルについて予想されたとおりであった（表１０）。
ビヒクル群由来の脾臓は、ＡＴＲＡ＋細胞よりもＡＴＲＡ－の割合が大きかった（表１１）が、固有層（ＬＰ）は、ＡＴＲＡ－細胞よりもＡＴＲＡ＋の割合が大きく（表１３）、この群に予想されたとおり、ＡＴＲＡ＋細胞が優先的に腸内にホーミングしたことが確認された。
抗ＶＬＡ－４群は、ビヒクルマウスと比較して、ＬＰ中のＡＴＲＡ＋細胞の約１／１０の割合およびＰＰ中のＡＴＲＡ＋細胞の約１／２の割合を有し（表１３および１２）、この陽性対照について予想されたとおり、処置がＡＴＲＡ＋細胞の腸ホーミングを低減したことが確認された。
抗ＶＬＡ－４群は、ビヒクル群よりも、パイエル板および回腸固有層から単離された細胞が有意に少なかった（表９）。これは、典型的には、抗ＶＬＡ－４処置マウスにおいて、特にパイエル板について観察される。
この群の脾臓中のＡＴＲＡ＋細胞の割合は、ビヒクル群よりも有意に高かった。これは、多くの場合、抗ＶＬＡ－４処置マウスで観察され、ＡＴＲＡ＋細胞が腸内へのホーミングを遮断され、結果として脾臓に蓄積されることに起因し得る。
化合物Ａ群からのマウスのＬＰにおけるＡＴＲＡ＋細胞の割合は、ビヒクル群よりも小さいことが見出された。この低減は用量依存的であり、１０００ｎＭの化合物Ａで処理した細胞について統計的に有意に近かった。
化合物Ａ、１０００ｎＭ群は、ビヒクル群よりも脾臓から単離された細胞が有意に少なく、一方、１００ｎＭ群および１０００ｎＭ群の両方は、パイエル板から単離された細胞が有意に少なかった（表９）。
化合物Ａ、１０００ｎＭ群はまた、ビヒクル群よりも脾臓およびＬＰ中のＣＤ４５．１＋細胞の割合が有意に小さかった（表１０）。
全体として、これらの結果は、化合物Ａで処理された細胞が腸組織へのホーミングを損なったことを示唆する。
実施例６
化合物ＡはインテグリンΒ７の上方調節を阻害する。
フローサイトメトリーベースのインビトロアッセイを使用して、ペプチド化合物Ａの内部移行活性を評価した。この研究は、化合物Ａが、時間および用量依存的様式でヒト初代細胞におけるα４β７の内部移行を特異的に引き起こすことを示した。化合物Ａはまた、α４β７発現の低減を引き起こし、その結果、ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞によるＭＡｄＣＡＭ１への接着の減少につながり、α４β７発現において平均最大３９％の低減が観察され、ＭＡｄＣＡＭ１への接着において平均最大３７％の減少がもたらされた。さらに、化合物Ａの発現は、化合物Ａの除去後、追加のインキュベーションの５日後に対照レベルにまで回復した。
方法
ヒトドナー由来の血液試料は、ＩＲＢが承認した研究プロトコルに基づいて、Ｓｔａｎｆｏｒｄ Ｂｌｏｏｄ Ｃｅｎｔｅｒ（Ｓｔａｎｆｏｒｄ，ＣＡ）から入手した。血液をＢＤ Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒナトリウムヘパリン採血チューブ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号３６２７５３）に引き込んだ。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、ＳｅｐＭａｔｅ－５０チューブおよびＬｙｍｐｈｏＰｒｅｐを使用して、製造者のプロトコルによって、血液から単離した。ＥａｓｙＳｅｐキット（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、製造者のプロトコルによって、ＰＢＭＣ単離後、ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞を濃縮した。
特異性を判定するために、ヒトＰＢＭＣを、１００ｎＭの化合物Ｃ（化合物Ａの類似体）、化合物Ｄ（化合物Ａの不活性な三重変異ペプチド類似体）、またはペプチドなしのいずれかで、３７℃で２４時間、完全培養培地中でインキュベーションした。インキュベーション後、各反応由来の細胞のアリコートをα４β７発現に対して染色した。
時間および用量依存性を判定するために、精製したヒトＣＤ４＋Ｔメモリー細胞を、異なる時間範囲（０、１、２、４、６、２４、２８、３０、および４８時間）での１０ｎＭの化合物Ａ、または種々の濃度（０、０．０１、０．１、１、および１０ｎＭ）の化合物Ａのいずれかとともに、完全培養培地中で３７℃で２４時間インキュベーションした。インキュベーション後、各反応由来の細胞のアリコートをα４β７発現に対して染色した。
α４β７発現およびＭＡｄＣＡＭ１接着への効果を判定するために、精製したヒトＣＤ４＋Ｔメモリー細胞を、様々な濃度（０、０．０１、０．１、１、および１０ｎＭ）の化合物Ａとともに、完全培養培地中で３７℃で２時間インキュベーションした。インキュベーション後、細胞を十分に洗浄して、過剰のペプチドを除去した。各反応について、細胞のアリコートをα４β７発現に対して染色し、一方、別個のアリコートをＭＡｄＣＡＭ１への接着について試験した。
洗い流した後の回復を判定するために、ヒトＰＢＭＣを１０ｎＭの化合物Ａとともに、３７℃で２４時間完全培養培地中（ＭｎＣｌ２を含まない）でインキュベーションした。ペプチド添加の前および２４時間後に細胞のアリコートを収集し、α４β７発現に対して染色した。その後、細胞を十分に洗浄して過剰のペプチドを除去し、新鮮な完全培養培地（ＭｎＣｌ２を含まない）中でさらに７日間インキュベーションした。ペプチドを洗い流した後、１日目、２日目、４日目、５日目、および７日目に、α４β７発現に対してアリコートを染色した。
ペプチドインキュベーション後、各反応のアリコートを、フローサイトメトリーのための調製でα４β７の表面発現に対して染色した。細胞を、４℃で３０分間染色し、０．５％のＢＳＡを含有するＤＰＢＳ（ＰＢＳ／ＢＳＡ）中で２回洗浄し、４℃で３０分間ストレプトアビジンＢＶ４２１（１：１０００希釈）とともにインキュベーションし、ＰＢＳ／ＢＳＡ中で２回洗浄し、その後、分析のためにＰＢＳ／ＢＳＡ中に再懸濁させた。関連する場合、「蛍光マイナス１」（ＦＭＯ）試料を染色対照として使用した。
以下の４０５ｎｍ（紫）、４８８ｎｍ（青）、５６１ｎｍ（黄緑）、および６４０ｎｍ（赤）のレーザーを備えたＢＤ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）ＦＡＣＳＶｅｒｓｅフローサイトメーターで、試料をフローサイトメトリーによって分析した。ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞を、ＣＤ４＋、ＣＤ４５ＲＡ－、ＣＤ１９７＋リンパ球として同定した。ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞内のα４β７発現を、ベドリズマブＢＶ４２１複合体での染色に基づいて同定し、ＢＤ ＦＡＣＳｕｉｔｅソフトウェア、バージョン１．０．５を使用して染色を分析した。関連する場合、値は、ペプチドを含まない対照に対して正規化され、示されたパラメータの変化の評価を可能にするための割合として表された。データをプロットし、Ｐｒｉｓｍソフトウェア（バージョン７、ＧｒａｐｈＰａｄ、Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）を使用して分析した。
結果
ヒトＰＢＭＣを１００ｎＭの化合物Ｂ、化合物Ｃ、またはペプチドなしでインキュベーションし、α４β７発現に対して染色した。化合物Ｃまたはペプチドを含まない対照ではなく、化合物Ｂとのインキュベーションが、α４β７の内部移行を引き起こした（図１４）。これらのデータは、内在移行がペプチドのα４β７への結合に依存していることを示す。
精製したヒトＣＤ４＋Ｔメモリー細胞を、１０ｎＭの化合物Ａともにある範囲の時間（０～４８時間）または化合物Ａ濃度（０～１０ｎＭ）とともに２４時間インキュベーションし、α４β７発現に対して染色した。結果は、化合物Ａが誘導したα４β７の内部移行は、それぞれ時間（図１５）および濃度（図１６）に依存していることを示す。ＰＢＭＣを用いて同様の結果を得た（データは示さず）。
精製したヒトＣＤ４＋Ｔメモリー細胞を様々な濃度の化合物Ａとともにインキュベーションし、次いで洗浄して過剰のペプチドを除去した。各反応からの別々のアリコートをα４β７発現に対して染色し、ＭＡｄＣＡＭ１接着性について試験し、各アッセイについてそれぞれの「ペプチド処理なし」対照に対して値を正規化した。データにより、化合物Ａが、α４β７の発現（ペプチドなし対照に対して正規化して５．４～２４．７％の範囲の減少）、およびＭＡｄＣＡＭ１への接着を低減させた（ペプチドなし対照に対して１８．４％～３６．４％の範囲の減少）ことが明らかになった（それぞれ、図１７および図１８）。これらの効果は強く相関し、０．９６８のＲ－二乗値を示した（図１９）。第２のドナー由来の精製されたヒトＣＤ４＋Ｔメモリー細胞を使用してアッセイを繰り返した場合、同様の相関を得た（Ｒ二乗０．９４０、完全なデータは示さない）。２人のドナーからのデータは、表１に示されるように、α４β７発現において平均最大３９％の低減、およびＭＡｄＣＡＭ１に対する接着において平均最大３７％の低減をもたらした。
（表１４）α４β７発現およびＭＡｄＣＡＭ１への接着の最大の低減
Figure 2023509790000042
*ペプチドを含まない対照の割合に対して正規化されている。
ヒトＰＢＭＣを、ＭｎＣｌ２を含まない培地中、１０ｎＭの化合物Ａとともに、またはペプチドなしで２４時間インキュベーションし、次いで洗浄して過剰のペプチドを除去し、ＭｎＣｌ２を含まない新鮮な培地中に再懸濁した。２４時間では、ＭＦＩ（５０９０ＭＦＩ）によって測定したα４β７発現は、ＦＭＯ対照（４２１９ＭＦＩ）と比較して２０．６％しか差がなかった。化合物Ａを除去した後、インキュベーションを継続し、アリコートを取り出し、１日目、２日目、４日目、５日目、および７日目にα４β７発現に対して染色した。結果は、追加のインキュベーションの４～５日後に、ペプチドの存在下でのα４β７発現の下方調節が、対照レベルまでほぼ回復したことを示した（図２０）。
結論
この研究は、化合物Ａが、ヒト初代細胞において時間および用量依存的にα４β７の内部移行を特異的に引き起こすことを示した。化合物Ａによるα４β７発現の低減は、ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞によるＭＡｄＣＡＭ１への接着の低減と高度に相関した。化合物Ａによる細胞上のα４β７の内在移行は、発現レベルを制御するように完全に回復するために４～５日間の追加のインキュベーションを必要とした。
実施例７
正常な健康なボランティアにおける化合物Ａの単回および複数回漸増用量の無作為化、二重盲検、プラセボ対照研究
潰瘍性大腸炎は、寛解および再発の経過を伴う慢性炎症性腸疾患であり、血性下痢、腹部痙攣、および倦怠感によって特徴付けられる。病因は、消化器抗原に対する不適切な免疫応答および遺伝的に感受性のある個体における環境的誘引に起因すると考えられている。
循環メモリーＴおよびＢリンパ球の細胞表面上に存在するα４β７インテグリンは、消化器粘膜および関連リンパ組織への白血球の動員に主に関与する。α４β７の主要なリガンである粘膜アドレシン細胞接着分子（ＭＡｄＣＡＭ１）は、消化器血管系の内皮上で選択的に発現され、炎症組織において増大した濃度で存在する。
ベドリズマブは、α４β７に対して指向された静脈内投与されるヒト化ＩｇＧモノクローナル抗体であり、それは、ステロイド、免疫抑制剤、または腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）阻害剤などの１つ以上の従来の治療に応答しない成人患者における中等度から重度の潰瘍性大腸炎およびクローン病の治療のために承認されている。注射可能な治療の不便さおよび潜在的な全身リスクにより、α４β７インテグリンを選択的に標的とする経口ＧＩ制限治療薬は、潰瘍性大腸炎患者に有意な利益をもたらす可能性がある。化合物Ａは、白血球上のα４β７インテグリンに特異的に結合し、動物研究において最小限の全身吸収（＜１％）を示す、経口安定ペプチドである。この研究は、健康な男性対象における経口化合物Ａの安全性、忍容性、薬物動態および薬力学を調査した。
２つの薬物動態／薬力学的研究を健康なボランティアで実施した。研究１は、化合物Ａ、１００～１４００ｍｇ、またはプラセボを単回用量として受ける４０人の男性、および化合物Ａ、１００～１０００ｍｇ、またはプラセボを複数回用量として受ける５７人の男性での第１のヒトでの研究であった。研究２は、１０人の対象において、液体溶液として、および即時放出錠剤として、１日２回、４５０ｍｇの化合物Ａの複数用量を比較する無作為化クロスオーバー研究であった。
処置中に発生した有害事象により中止した対象はいなかった。ペプチドの消化器制限の性質と一致して、全身曝露は最小限であり、ＡＵＣではおよそ用量比例した増大があった。１日１回の投薬では、蓄積は最小限であり、薬物動態に時間依存的な変化はなかった。高脂肪の食事後の化合物Ａの投与は、ピーク血漿濃度およびＡＵＣを低減させた。完全なままの薬物の尿中排泄は最小限（＜０．１％）であり、完全なままの化合物Ａの糞便排泄には用量に関連した増大があった。血液受容体占有率の用量依存的な増大および血液受容体発現の低減が観察され、標的の係合を支持した。１日２回の投薬は、低い血漿変動を伴う持続的な受容体占有率をもたらした（１４３％）。
化合物Ａは、概して、低全身曝露での単回および複数回の経口用量後に、十分に忍容性であった。１日２回の投薬は、持続的な薬物動態および薬力学をもたらし、有効性研究におけるさらなる調査を支持した。
方法
研究設計
２つの研究を、単一の臨床センターで実施した。
研究１は、化合物Ａの液体溶液製剤の安全性、忍容性、薬物動態、および薬力学を評価するために、健康な男性ボランティアにおける３部構成の第１のヒトでの研究であった。
パート１は、４つの等しいコホートに分割した４０人の男性における、化合物Ａの単回漸増用量の無作為化、プラセボ対照、二重盲検研究であった。用量漸増は、１００ｍｇ、３００ｍｇ、１０００ｍｇ、１４００ｍｇから進行した。３００ｍｇ用量コホートの対象は、クロスオーバー方式で、１回目は空腹状態で、２回目は高脂肪の食事後に処置を受けた。高脂肪の食事は、バターで焼いた２つの目玉焼き、２枚のベーコン、２枚のバターを塗ったトースト、４オンスのハッシュブラウンポテト、２４０ｍｌの全乳からなる。パート１の間、対象は、接触処置中、３００ｍｇ用量コホート中の対象を除いて、投薬の１０時間前および４時間後に、水以外の食べ物および飲料を控えた。
パート２は、５つのコホートに均等に分けた５０人の男性の対象における、無作為化、プラセボ対照、二重盲検複数回漸増用量研究であった。対象は、１４日間、化合物Ａまたはプラセボの１日１回の投薬を受けた。パート２で評価した用量には、１００ｍｇ、３００ｍｇおよび１０００ｍｇが含まれた。パート２の間、２つのコホートの対象（１００ｍｇおよび３００ｍｇ）は、各用量のおよそ３０分前に食事を受け、別の２つのコホートの対象（３００ｍｇおよび１００ｍｇ）は、投薬の１０時間前および１時間後に食べ物を控えた。パート２の９人の対象の追加のコホートは、化合物Ａの薬物動態および薬力学に対する食事のタイミングの効果を評価するために、クロスオーバー方式で３００ｍｇの化合物Ａを受けた。このコホートの対象は、化合物Ａの投薬の３０、６０または９０分後に食事を受けた。
パート３は、液体溶液として５日間、化合物Ａの１日１回９００ｍｇの投薬、および１日２回４５０ｍｇの投薬の非盲検、無作為化、クロスオーバー複数回用量の比較であった。パート３の対象は、化合物Ａの投薬の１０時間前、および１時間後は食べ物を控えた。
第２の研究は、健康な男性および女性において、１日２回、４５０ｍｇの化合物Ａとして投与される液体製剤および錠剤製剤を比較した５日間の複数回用量の薬物動態および薬力学的研究であった。対象は、毎日の朝の用量の１０時間前および１時間後、夕方の用量の前後１時間に食べ物を保持した。
研究プロトコル、対象情報、およびインフォームドコンセントフォームは、独立したヒト研究倫理委員会によって審査および承認された。研究は、ヒト対象を含む生物医学研究に関するヘルシンキ宣言およびＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｈａｒｍｏｎｉｚａｔｉｏｎ Ｇｏｏｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅガイドラインに従って実施され、すべての研究手順は科学的および医学的に適格な担当者によって実施された。研究の性質、目的、ならびに潜在的なリスクおよび利益を説明する書面によるインフォームドコンセントは、研究に関連する活動の前に対象によって提供された。
研究対象
両方の研究は、スクリーニングおよび登録に同様の手順を使用した。対象は、登録の２１日以内にスクリーニングした。適格な対象は、１８～５５歳であり、体重指数（ＢＭＩ）は１８～３０ｋｇ／ｍ２であり、一般的な健康状態は良好であり、重大な病歴または身体検査での臨床的に重大な異常はなかった。第１のヒトでの研究（研究１）では男性のみが登録され、錠剤製剤を評価する研究（研究２）では、男性および女性が登録され、彼らは、研究期間中および最後の用量後９０日間、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ Ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｏｎ Ｇｒｏｕｐに基づいて非常に効果的な避妊方法を使用することに同意した。
対象は、臨床的に重大な内分泌、消化器心血管、血液、肝臓、免疫学的、腎臓呼吸器、または泌尿器の異常または疾患の病歴を有するか、または腎機能の損失（血清クレアチニン＞１０６ｕｍｏｌ／Ｌ、または推定クレアチニンクリアランス＜８０ｍＬ／ｍｉｎ）、もしくはアラニンアミノトランスフェラーゼもしくはアスパルテートアミノトランスフェラーゼ値が正常値の＞１．２倍を含む臨床的に重大な臨床検査異常を有した場合に、除外された。
手順
研究１：研究の単回および複数回漸増用量フェーズは、用量コホートごとに１０人の対象における順次用量漸増からなった。参加者は、作為化され、８：２の比率で、６０ｍＬの経口溶液として化合物Ａまたは対応するプラセボを受けた。用量溶液を、５０ｍＭのリン酸緩衝液ｐＨ７．４中で製剤化し、有資格の薬剤師によって毎週調製された。予想される濃度範囲にわたる投薬溶液は、２～８℃で保存した場合、３ヶ月間安定であることが実証された。
薬物動態のための血液試料を、単回用量の投薬前および投薬後４８時間に収集した。複数回漸増用量フェーズでは、１～３日目および１４～１６日目に血液試料を得た。８日目では、投薬前４時間および１２時間に試料を得た。ＭＡＤの１０日目に、対象は、投薬後０～６、６～１２、１２～１８、および１８～２４時間の間隔のすべての尿を採取する必要があり、１１日目には、対象は、糞便試料を採取する必要があった。
次の用量レベルに進むことの決定は、低用量の許容可能な安全性および忍容性に基づいて治験責任医師および安全性モニタリング委員会によって行われた。
研究２：この研究は、化合物Ａの即時放出（ＩＲ）錠剤および液体溶液の安全性、忍容性、薬物動態および薬力学を判定するための無作為化、非盲検、２つの治療、２期間、複数回用量研究であった。この研究は、第１のヒトでの研究で調査した液体製剤と固体用量製剤との比較を可能にした。対象は、無作為化された方法で、１２時間毎に投与される１つ３００ｍｇおよび１つ１５０ｍｇ用量強度のＩＲ錠剤として５日間、４５０ｍｇの化合物Ａを１日２回（ＢＩＤ）、ならびに１２時間毎に投与される液体溶液として５日間、４５０ｍｇの化合物ＡをＢＩＤ受けた。
投薬
単回および複数回用量研究における第１のヒトにおける開始用量は、ラットおよびカニクイザルにおける２８日間の毒性研究からの観察されなかった影響レベル（ＮＯＥＬ）およびカニクイザルで示された受容体占有率の考慮に基づいた。ラットおよびサルにおいて判定されたＮＯＥＬは、標準的な相対成長スケーリングおよび１０倍の安全性マージンを使用して、およそ１４５ｍｇのヒト当量用量に変換された。およそ３倍の初期の段階的漸増で、１００ｍｇの開始用量を選択した。
錠剤および経口溶液製剤を比較した研究２で選択した用量は、研究１のパート３からの薬物動態および薬力学的プロファイル、ならびに中等度から重度の潰瘍性大腸炎を有する患者における有効性研究で計画された予想用量に基づいた。
分析方法
確証された高性能液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）法を使用して、研究１からの血漿、尿および糞便試料、ならびに研究２からの血漿および尿試料中の化合物Ａの濃度をアッセイした。薬物および内部標準物質を、タンパク質沈殿手順によってマトリックスから抽出した。定量限界は、血漿、尿、および糞便でそれぞれ０．２ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ、および１００ｎｇ／ｍＬであった。すべてのマトリックスについて、少なくとも１００日間および４回の凍結融解サイクルにわたって試料の安定性が実証された。検量線の判定係数は、すべてのマトリックスで少なくとも０．９９であった。分析間正確さ（バイアス％）は、血漿の場合－２．２％～１．０％、尿の場合－３．８％～９．０％、糞便の場合－５．０％～５．２％の範囲であった。分析間精度（ＣＶ％）は、血漿の場合３．７％～７．７％、尿の場合２．８％～７．０％、糞便の場合１．２％～５．２％の範囲であった。発生した試料の再分析は、有効な再分析を有する試料の＞８８％が許容基準を満たし、分析方法が許容可能であることを示した。
研究エンドポイント
主なエンドポイントは、第１のヒトでの研究は、化合物Ａでの単回および複数回の投薬後の安全性および忍容性評価であり、副次的な目的は、薬物動態および薬力学を特徴付け、化合物Ａの薬物動態に対する高脂肪の食事の効果を評価し、１日２回および１日１回の投薬を比較することであった。プラセボおよび各化合物Ａ用量について、安全性評価、有害事象、および実験室評価を記述的に要約する。
経口溶液および錠剤製剤を比較した第２の研究のエンドポイントは、薬物動態および薬力学であった。
薬物動態分析
Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（Ｃｅｒｔａｒａ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ ＮＪ）を使用して、非区画法によって薬物動態パラメータを推定した。ピーク血漿濃度（Ｃｍａｘ）およびピーク血漿濃度までの時間（Ｔｍａｘ）が観測された値であった。排除率は、末端対数線形位相上の最小二乗回帰の傾きから推定した。ゼロ時間から最後の定量可能な濃度（ＡＵＣｔ）までの血漿濃度－時間曲線下面積を線形台形法によって推定し、最後の定量可能な濃度を排除率で割ることによって無限大（ＡＵＣ∞）に外挿した。定常状態血漿濃度の変動を、
Figure 2023509790000043
として計算した。
α４β７受容体占有率および受容体発現についての薬力学的アッセイ
受容体占有率などの翻訳バイオマーカーは、ベドリズマブを用いた前臨床研究および臨床試験における使用を介して、薬力学的マーカーとして検証されている２７～２８。この研究では、フローサイトメトリーベースのアッセイを設計して、化合物Ａによって占有される細胞表面上のα４β７インテグリンの量、または化合物Ａによる係合に応答して循環リンパ球の細胞表面上のα４β７発現の量を定量化した。簡潔に述べると、このアッセイでは、各ヘパリン化された全血試料を、まず、１００％の受容体占有率のための「遮断」対照として機能する飽和量の非標識競合ペプチドで、または経口投与される化合物Ａによる遮断のレベルを測定するための「非遮断」試料として機能するペプチドなしで処理し、インキュベーション後、血液を亜飽和濃度のＡｌｅｘａ６４７標識ペプチドで染色し、続いて、細胞表面マーカーパネル（ＣＤ４５、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ１９、ＩｇＤおよび抗α４β７抗体ベドリズマブ）で染色する。染色が完了した後、試料を赤血球溶解および固定緩衝液で処理し、洗浄し、フローサイトメーターで取得する。α４β７発現メモリーＣＤ４Ｔ細胞上の受容体占有率を定量化するために、ベドリズマブ＋メモリーＣＤ４＋Ｔ細胞内のＡｌｅｘａ６４７標識ペプチドの培地蛍光強度（ＭＦＩ）を使用した。受容体占有率は、以下の式に従って計算された。［ＲＯパーセント］＝（１－（［非遮断］－［遮断］）／（［非遮断のベースライン］－［遮断のベースライン］））ｘ１００。
α４β７の発現は、非遮断試料由来のメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞内のベドリズマブのＭＦＩによって定義される。受容体発現（ＲＥ）を、ベドリズマブ染色のベースラインからのＭＦＩの変化パーセントとして計算した。
統計分析
正式な試料サイズの推定は実施しなかった。単回および複数回漸増用量研究において、８人の対象が経口化合物Ａを、２人の対象が各用量コホートにおいてプラセボを受けた。即時放出錠剤製剤と経口溶液とを比較した第２の研究には、１０人の対象が登録された。各研究における登録は、化合物Ａの耐容性および安全性を評価し、化合物Ａの薬物動態および薬力学の特徴付けを可能にするのに適切であるとみなされた。
結果
対象の特徴および傾向
合計９７人の健康な男性の対象が、研究１に登録され、４０人の対象が単回用量フェーズに登録され、５７人の対象が複数回用量フェーズに登録された。９５人の対象が、予定どおりに化合物Ａまたはプラセボでの投薬を完了した。２人の対象は、安全性に関連しない個人的な理由で同意を撤回した。ひとりの対象は臨床ユニットに残りたくなく、もうひとりの対象は静脈カニューレに不快感を示した。平均年齢は、単回用量フェーズで２８．７歳、複数回用量フェーズで３０．９歳であった。
１０人の対象が研究２に登録され、９人の対象が両方の処置を完了した。１人の対象は、研究薬と無関係であるとみなされた急性扁桃炎の有害事象のため、経口溶液処置後１日目に研究を中止した。
安全性および忍容性
単回漸増用量フェーズ中、１４名の対象から合計２３件のＴＥＡＥが報告された。ＴＥＡＥを経験した１３人の対象のうち、１２人は化合物Ａ（２１事象）を受け、２人はプラセボ（２事象）を受けた。すべてのＴＥＡＥは、処置に関連するとはみなされなかった１００ｍｇの化合物Ａで処置した対象の重度の頭痛を除いて、軽度または中等度であった。すべての対象はＡＥから回復し、ＡＥによる対象の離脱はなかった。呼吸数またはバイタルサイン、臨床検査パラメータ（血液学、凝固、血清化学、または尿検査）、または心電図もしくはＱＴｃ間隔の解釈において、臨床的に関連する変化は観察されなかった。
安全性および忍容性
化合物Ａの複数回用量を受けた群の３０人の対象は、合計６８件のＡＥを報告した。２件を除いたすべての発生は、重症度は軽度であった。上気道感染症の１件の報告は中等度として特徴付けられ、臨床ユニットからの開放後に発生したインフルエンザの１件の報告は重度として特徴付けられ、重篤な有害事象とみなされた。プラセボを受けた４人の対象は、主に消化器障害である合計６件の軽度のＴＥＡＥを報告した。複数回漸増用量フェーズにおいて２人以上の対象で報告された処置中に発生した有害事象には、腹部不快感、鼓腸、上気道感染症、腰痛、めまい、および頭痛が含まれた。神経系障害、特に頭痛は、最も一般に報告されたＴＥＡＥであった。呼吸数、バイタルサイン、臨床検査パラメータ、または心電図に臨床的に関連する変化は観察されなかった。
安全性および忍容性
即時放出錠剤および経口溶液の投薬を比較する研究２に登録された１０人の対象のうち、９人の対象が両方の処置を完了した。１人の対象は、処置とは無関係の中等度の扁桃炎の有害事象を経験し、それにより研究を中止した。処置中に発生した有害事象の発生率は、両方の処置を横断して同様であった。最も一般的な有害事象は頭痛であり、他のすべての有害事象は１人の対象のみで報告された。
安全性および忍容性
薬物動態
化合物Ａの単回用量後の平均血漿濃度－時間プロファイルを図２１に示す。化合物Ａの単回用量薬物動態を表１５に要約する。
（表１５）化合物Ａの単回用量薬物動態（平均±ＳＤ）
Figure 2023509790000044
a 中央値(最小、最大)
b N=4
c 不十分なデータのため報告なし
d N=7
ピーク血漿濃度までの時間の中央値は２～４時間であった。平均ピーク化合物Ａ血漿濃度（Ｃｍａｘ）は、２．１１ｍｇ／ｍＬ～２３．５ｎｇ／ｍＬに増大し、化合物Ａの用量が１００ｍｇ～１４００ｍｇに増大するにつれて、ＡＵＣｉｎｆは１６．５ｎｇ．時間／ｍＬ～２６０ｎｇ．時間／ｍＬに増大した。化合物Ａ１００ｍｇ～１４００ｍｇの用量範囲にわたって、ＡＵＣｉｎｆの用量比例的な増大およびＣｍａｘの用量比例的よりわずかに少ない増大があった。低用量（１００および３００ｍｇ）での平均排除半減期は３．１～４．０時間であり、高用量（１０００および１４００ｍｇ）での平均排除半減期は５．３～５．７時間であった。
安全性および忍容性
複数回用量後の化合物Ａの薬物動態を表１６に要約する。
（表１６）化合物Ａの複数回用量薬物動態（平均±ＳＤ）
Figure 2023509790000045
a 中央値(最小、最大)
b N=1
c 不十分なデータのため報告なし
d N=7
１４日目の摂食状態における１００ｍｇおよび３００ｍｇの用量群、ならびに１４日目の絶食状態における３００ｍｇと１０００ｍｇとの用量群の間で、ＣｍａｘおよびＡＵＣｉｎｆのおよその用量比例的な増大があった。ピーク血漿濃度までの時間の中央値は、２～４時間の範囲であった。平均排除半減期は、５．２～７．７時間であった。半減期と一致し、１日目および１４日目の３００ｍｇおよび１０００ｍｇでの個々の対象のＣｍａｘおよびＡＵＣｔ値の比較は、１日１回の投薬で最小限の蓄積（≦３０％）を示唆した。１日目のＡＵＣｉｎｆ値および１４日目のＡＵＣｔ値の比較は、化合物Ａの薬物動態に時間依存的な変化がないことを示した。
複数回漸増用量フェーズ中、３００ｍｇおよび１０００ｍｇ用量群で実施される尿および糞便の２４時間収集。化合物Ａのごく一部のみが、２４時間にわたって尿中に完全のままで回収され、３００ｍｇ 絶食、３００ｍｇ 摂食、および１０００ｍｇの用量群でそれぞれ０．０２８％、０．０５６％、および０．０５６％の回収率であった。３００ｍｇ 絶食、３００ｍｇ 摂食、および１０００ｍｇの用量群において、化合物Ａの２４時間の糞便回収率に用量に関連した増大があり、それぞれ０．７３％、１．７８％、および１６．８％の化合物Ａが、完全のまままで回収された。
食べ物の影響
化合物Ａの薬物動態に対する高脂肪の食事の作用を、研究１の単回漸増用量部分中、３００ｍｇでクロスオーバー方式で評価した。
高脂肪の食事を摂取してから３０分以内の化合物Ａの投与により、空腹状態と比較してピーク濃度および曝露が低減した（表１３）。平均化合物Ａピーク血漿濃度は、絶食状態では６．５５ｎｇ／ｍＬ、摂食状態では１．５８ｎｇ／ｍＬであった。ピーク濃度までの時間の中央値は、高脂肪の食事後１時間遅らせた。
化合物Ａの投薬と食事の摂取との間の間隔の作用を研究１において調べた。対象は、３００ｍｇの化合物Ａの単回用量後、３０、６０、または９０分間食事を受けた。ピーク化合物Ａ血漿濃度までの時間の中央値は、３０、６０、および９０分間の処置群の場合、１、２、および４時間であった。化合物Ａの３０分後と比較して食べ物が６０または９０分遅延した場合のＣｍａｘおよびＡＵＣｔ値は、わずかに増大し、６０分遅延と９０分遅延との間にわずかな差が示された。３０分間の遅延と比較して、食べ物の６０分間の遅延について示されたより好ましいＣｍａｘおよびＡＵＣｔ値に基づいて、複数回漸増用量における追加のコホートのための投薬には、化合物Ａの投薬の前後の１時間の絶食間隔を組み込んだ。
表１６は、研究１の複数回漸増用量フェーズの一部として、化合物Ａの投薬の１時間以内に食事を控えることと比較した、一晩の絶食後の３００ｍｇの化合物Ａの薬物動態の比較を示す。ピーク濃度までの時間の中央値は、一晩の絶食後４時間であったが、化合物Ａの１時間後に食物を摂取した場合は２時間であった。ピーク血漿濃度は、一晩絶食後に化合物Ａが投与された場合、食物が投薬の１時間後投与された場合と比較して低かった（１日目のＣｍａｘは、絶食および用量１時間後の摂食の場合について、それぞれ７．２３ｎｇ／ｍＬおよび２．３２ｎｇ／ｍＬであった）。
１日１回および１日２回の投薬の薬物動態
投薬レジメンの効果は、研究１のパート３において、９００ｍｇを１日１回５日間、および４５０ｍｇを１日２回５日間の後に、無作為化クロスオーバー方式で評価した。
図２５は、化合物Ａの１日１回９００ｍｇおよび１日２回４５０ｍｇの投薬後の平均血漿濃度－時間プロファイルを示す。１日１回および１日２回の投薬を比較した薬物動態の概要を表１７に示す。
（表１７）１日１回および１日２回の投薬後の化合物Ａの薬物動態（平均±ＳＤ）
Figure 2023509790000046
a中央値(最小、最大)
b不十分なデータのため報告なし
ピーク濃度は、１日目および５日目の両方の投薬レジメンにおいて、２時間の中央値で観察された。定常状態ピーク濃度は、１日１回投薬で１４．２ｎｇ／ｍＬ、１日２回投薬で９．９６ｎｇ／ｍＬであった。投薬間隔に対する曲線下用量調整面積は、２つの処置レジメンで同等であった。化合物Ａの半減期と一致して、１日１回の投薬では蓄積が最小限であり、１日２回の投薬では蓄積がおよそ１．６～１．７倍であった。液体溶液として４５０ｍｇの化合物Ａの１日２回の投薬は、９００ｍｇを１日１回と比較して、ピークからトラフへの変動が低い（１４３％対２４５％）ことと、トラフ濃度が高い（３．２５ｎｇ／ｍＬ対１．７８ｎｇ／ｍＬ）ことによって反映されるように、維持した血漿濃度をもたらした（表１８）。
化合物Ａの液体溶液および即時放出錠剤製剤の薬物動態
第１のヒトでの研究で使用された液体溶液と比較して、５日間にわたり１日２回４５０ｍｇとして投与された化合物Ａの即時放出錠剤の定常状態の薬物動態を表１８に要約する。
（表１８）液体溶液としておよびＩＲ錠剤としての１日２回の４５０ｍｇの経口投薬後の化合物Ａの定常状態薬物動態（平均±ＳＤ）
Figure 2023509790000047
ａ中央値（最小、最大）
図２３Ａは、２つの製剤の平均定常状態血漿濃度－時間プロファイルを示す。両方の製剤は、同様のピーク濃度までの時間の中央値（２時間）を有し、一方、ピーク濃度は、液体溶液と比較して、ＩＲ錠剤の場合およそ２０％低かった。ＩＲ錠剤製剤は、液体溶液に対しておよそ８５％のバイオアベイラビリティを有した。錠剤製剤の１日２回投薬は、Ｃｍａｘに基づいておよそ２倍、ＡＵＣに基づいて１．６倍の蓄積をもたらした。化合物Ａの定常状態トラフ濃度は、ＩＲ錠剤および液体溶液について同等であった（それぞれ１．８６ｎｇ／ｍＬおよび１．９８ｎｇ／ｍＬ）。
薬力学
化合物Ａの単回用量後の平均受容体占有率パーセントおよび平均受容体発現によって測定したα４β７ ＋メモリーＣＤ４＋Ｔ細胞の平均薬力学を表１９に要約する。
（表１９）化合物Ａの単回用量後の薬力学（平均±ＳＤ）。
Figure 2023509790000048
ROmax最大受容体占有率、REmax最大受容体発現
単回用量後の平均受容体占有率パーセントおよび平均受容体発現の時間経過を図２２Ａ～Ｂに示す。ピークα４β７メモリーＣＤ４＋Ｔ細胞占有までの平均時間は、およそ４時間であった。平均ピーク受容体占有率は、用量に関連して増大し、１００ｍｇで６１．８％～１４００ｍｇで９４．８％の範囲であった。１０００ｍｇおよび１４００ｍｇ用量コホートのピーク受容体占有率は、同様であり、およそ１０００ｍｇの化合物Ａの単回用量によって受容体占有率飽和が達成されたことを示す。受容体発現の平均変化（ＲＥｍａｘ）は、用量とともに増大し、１００ｍｇの化合物Ａで－２８．２％～１４００ｍｇの用量群で－４９．０％の範囲であった（表１９）。
化合物Ａの複数回用量後のα４β７ ＋メモリーＣＤ４＋Ｔ細胞の受容体占有率パーセントを表２０に示す。
（表２０）化合物Ａの複数用量薬力学（平均±ＳＤ）
Figure 2023509790000049
ＲＯｍａｘ最大受容体占有率、ＲＥｍａｘ最大受容体発現
化合物Ａの複数回用量後の平均ピークメモリーＴ細胞受容体占有率は、およそ４時間でピークに達成した。複数回用量コホートの１日目の平均受容体占有率パーセントは、単回用量コホートにおける対応する用量と同等であった。１日目では、３００ｍｇおよび１０００ｍｇ後の平均ピーク受容体占有率は、それぞれ７７．８％および９１．３％であった。１４日間にわたって継続した毎日の投薬に伴い、ピーク受容体占有率パーセントはわずかに増大した。１４日目では、３００ｍｇおよび１０００ｍｇ後の平均ピーク受容体占有率は、それぞれ７９．７％および９５．６％であった。
高脂肪の食事を摂取した３０分以内の化合物Ａの投与は、薬物動態に対する高脂肪の食事の効果と一致して、薬力学的効果を低減させた。断食状態での３００ｍｇの化合物Ａ後のピーク受容体占有率パーセントは、高脂肪の食事後３０分以内に化合物Ａを投与した場合の６１．４％と比較して、８３．４％であった。化合物Ａの投与後６０分間食べ物を遅らせることは、高脂肪の食事後の投薬または化合物Ａの投薬後３０分以内に食事を摂取することと比較して、薬力学的プロファイルを向上させた。化合物Ａを絶食状態で摂取した場合、または化合物Ａの投薬から６０分後に食べ物を摂取した場合、定常状態（１４日目）の薬力学的効果には比較的ほとんど差がなかった（表１５）。
研究１の複数回漸増用量フェーズの一部として、９００ｍｇを１日１回、４５０ｍｇを１日２回の薬力学的効果を検討した。投薬レジメンによる受容体占有率に対する薬力学的効果のまとめを表２１に示す。
（表２１）１日１回および１日２回の受容体占有率の薬力学の概要（平均±ＳＤ）。
Figure 2023509790000050
a N=7
１日目では、９００ｍｇを１日１回のレジメンは、平均ピーク受容体占有率が９４．５％であり、４５０ｍｇを１日２回のレジメンは８６．５％であった。両方の処置レジメンは、５日目に同様のピーク受容体占有率をもたらしたが（９００ｍｇＱＤおよび４５０ｍｇＢＩＤについて、それぞれ、９４．９％および９１．９％）、１日２回のレジメンは、より持続的な薬力学的効果を提供した。注目すべきことに、５日目のＡＵＥＣは、１日１回のレジメンと比較して、１日２回のレジメンで高かった。５日目の２４時間効果曲線下面積（ＡＵＥＣ）に基づく平均受容体占有率は、１日２回のレジメンで８５．３％、１日１回のレジメンで７９．２％であった。ＢＩＤレジメンはまた、ピークおよびトラフ受容体占有率における最小差によって示されるように、持続的な効果を提供した。加えて、４５０ｍｇＢＩＤ処置のトラフでの受容体占有率の対象間変動は、９００ｍｇＱＤ処置の２６．３％～３３．６％と比較して、５日目に１１．３％～１５．２％であり、ＢＩＤレジメンのより一貫した効果を示唆した。
ＩＲ錠剤または液体溶液として１日２回の化合物Ａの後の定常状態ＣＤ４＋α４β７メモリーＴ細胞の受容体占有率パーセントの薬力学を図２３Ｂに示す。定常状態の受容体占有率の薬力学は、表２２に要約される。
（表２２）液体溶液としておよびＩＲ錠剤としての１日２回の４５０ｍｇの経口投薬後の化合物Ａの定常状態薬力学（平均±ＳＤ）
Figure 2023509790000051
ＲＯｍａｘ最大受容体占有率、ＲＥｍａｘ最大受容体発現
ピーク受容体占有率は、両方の製剤について４時間で観察された。液体溶液の９３．８％のピーク受容体占有率および８５．８％の平均２４時間受容体占有率と比較して、ＩＲ錠剤の平均定常状態ピーク受容体占有率は、９１．９％であり、平均２４時間受容体占有率は８３．６％であった。
薬物動態－薬力学的相関
インビボ化合物Ａ血漿濃度－受容体占有率関係を、Ｓ字状Ｅｍａｘ（Ｈｉｌｌ）モデルを使用して特徴付けた（図２４）。受容体占有率の推定ＩＣ５０およびＩＣ８０は、それぞれ０．６９ｎｇ／ｍＬおよび５．９ｎｇ／ｍＬであった。
考察
化合物Ａは、潰瘍性大腸炎を有する患者の潜在的な経口治療法としてフェーズ２研究で開発されている、白血球上のα４β７インテグリンに特異的に結合する経口腸管制限ペプチドである。ペプチドのＧＩ制限の性質および増強された消化器安定性は、局所効果を可能にし、全身曝露に関連する有害事象の可能性を最小限に抑えながら、有効性を増強する可能性を有する。
これらの研究の主な目的は、単回および複数回投薬後の化合物Ａの安全性／忍容性を評価することであった。副次的な目的は、単回および複数回漸増経口用量投与後の化合物Ａの薬物動態および薬力学的プロファイルを評価すること、薬物動態および薬力学に対する食べ物の影響を評価すること、１日１回および１日２回の投薬を比較すること、ならびに化合物Ａの即時放出製剤の薬物動態および薬力学を説明することであった。
第１のヒトでの研究では、化合物Ａは、１４日間、最大１４００ｍｇの単回用量後、および１日１回最大１４００ｍｇの複数回用量後に十分に忍容性であった。ＴＥＡＥは、最低用量の化合物Ａ（１００ｍｇ）の単回投与後の重度の頭痛の１回の報告と、１日１回の９００ｍｇ後のインフルエンザの報告を除いてすべて軽度であった。ＴＥＡＥのいずれも、対象の研究からの離脱には至らなかった。繰り返し投薬後の２人以上の対象において示された処置中に発生した有害事象には、腹部不快感、鼓腸、上気道感染症、腰痛、めまい、および頭痛が含まれ、頭痛が最も頻繁に報告されるＴＥＡＥであった。化合物Ａでの処置は、バイタルサイン、臨床検査値の臨床的に有意な変化に関していずれの安全性所見ももたらさず、ＱＴｃ延長の証拠は観察されなかった。化合物ＡをＩＲ錠剤または液体溶液として１日２回投薬した後の処置中に発生した有害事象プロファイルに差はなかった。
単回経口用量後、化合物Ａは、およそ４時間で最大血漿濃度を示した中程度の吸収速度を有した。化合物ＡのＡＵＣの増大は、ほぼ用量比例であったが、Ｃｍａｘの増大は、用量比例よりもわずかに小さかった。化合物Ａは、単回および複数回投薬後に低い全身曝露を実証した。終末半減期は、絶食状態で３．１～５．７時間、摂食状態で５．２～７．７時間であった。終末半減期と一致して、１日１回および１日２回投与した場合、化合物Ａの蓄積はそれぞれおよそ０．９および１．６倍であった。同様の１日目のＡＵＣｉｎｆおよび１４日目のＡＵＣｔによって証明されるように、時間依存的な薬物動態はなかった（補足表４）。
化合物Ａ投与後のα４β７受容体占有率には用量依存的な増大があり、９００ｍｇの用量で９０％を超える平均ピーク受容体占有率に達した。１００ｍｇおよび１０００ｍｇの化合物Ａの１日１回投薬後のトラフ受容体占有率は、それぞれおよそ２５．４％および７８．６％であり、ならびに１日２回の４５０ｍｇの化合物Ａ後、７９．２％であった。これらの受容体占有率データは、化合物Ａの濃度が、１日１回または２回の投薬を可能にするのに十分なレベルを維持することを示す。ＰＫ／ＰＤの相関は、推定０．６９ｎｇ／ｍＬのＩＣ５０および５．９ｎｇ／ｍＬのＩＣ８０で、完全な受容体占有率で漸近線を伴う濃度依存的な受容体占有率を示した。ヒトにおいて示される受容体占有率の推定ＩＣ５０（０．６９ｎｇ／ｍＬ）は、組換えＭＡｄＣＡＭ１へのヒト末梢血単核細胞から単離されたα４β７を発現するメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞に対する化合物Ａの効力（０．７３ｎｇ／ｍＬ）と非常に好ましく比較される。
経口投与後の化合物Ａの全身濃度は、概して低く、薬物の腸管制限の性質およびマウスおよびカニクイザルにおいて示された非常に低い経口バイオアベイラビリティ（＜１％）と一致した。経口投与後の化合物Ａの糞便回収には用量依存的な増大があり、３００ｍｇでおよそ１～２％～１０００ｍｇで１６．８％の範囲であった。化合物Ａは、小さなジスルフィド含有環状ペプチドである。経口投与されたペプチドは、胃のｐＨ＜２～十二指腸内のｐＨ８の範囲のｐＨ条件、ならびに胃ヒドロラーゼ（ペプシン）、膵臓ヒドロラーゼ（トリプシン、キモトリプシン、エラスターゼ、アミノペプチダーゼ、ならびにカルボキシペプチダーゼＡおよびＢ）、および腸ブラシ境界膜結合酵素（カルボキシペプチダーゼ、エンドペプチダーゼ、およびアミノペプチダーゼ）などのタンパク質分解酵素を含む消化管に沿った過酷な環境に遭遇する２９。胃内の高酸性環境は、三次元構造の不安定化を介してペプチド薬物の分解をもたらす。消化管におけるペプチドおよびタンパク質の安定性は、局所作用のためであっても全身送達のためであっても、経口投与に関連する固有の問題である。多くの研究は、アミノ酸配列、分子サイズ、ｐＨおよび酵素作用を含む消化器環境の曝露などの様々な要因が、ペプチドの安定性および経口吸収の可能性を判定する上で重要な役割を果たすことを示している。スルフィド結合連結を介した環化、およびＮ－メチル化は、酵素分解に対するある程度の耐性を提供し、化合物Ａの経口吸収も向上し得る。
経口投与後の血漿中の低い検出可能な完全なままの存在の濃度は、化合物Ａが消化器壁を通過することができることを示す。また、尿中にはおよそ０．０３％～０．０６％の薬物が完全なままで検出された。経口投与されるペプチドは、典型的には、低い経口バイオアベイラビリティを有する。化合物Ａの全身濃度は低いが、１日１回または１日２回の投薬後にトラフで８０％を超える受容体占有率を達成し、維持するのに十分であった。
高脂肪の食事から３０分以内の化合物Ａの投与は、化合物Ａの経口吸収を低減させた。全身曝露と糞便回収との間に直接的な相関はなかったが、直接的には、データは、高脂肪の食事後の吸収の低減に対応して、糞便回収の増大があったことを示した。
化合物Ａの即時放出錠剤製剤の定常状態の薬物動態および薬力学的プロファイルは、概して、第１のヒトでの研究で使用された液体製剤と同様であった。ＩＲ錠剤として４５０ｍｇの化合物Ａの１日２回の投薬は、持続的な薬物動態および、約８４％の平均受容体占有率をもたらした。
結論
９７人の健康な男性ボランティアに化合物Ａを投薬した。パート１では、１４００ｍｇの最大１日用量の化合物Ａの単回漸増用量、および食べ物の影響が研究された。パート２では、最大１０００ｍｇの複数回漸増用量を、最大１４日間、１日１回の投薬として試験した。さらに、９００ｍｇの化合物Ａの５日間、１日１回を、４５０ｍｇの化合物Ａの５日間、１日２回と比較した。研究薬は十分な忍容性を有し、用量制限毒性は観察されなかった。１つを除外して、すべての有害事象は軽度から中等度の重症度であった。重度として特徴付けられるインフルエンザの１つの重篤な有害事象は、化合物Ａを受けたおよそ３６時間後の対象において、研究薬に関連している可能性があると報告された。診断は、インフルエンザスワブの試験によって確認されたインフルエンザＡであった。対象は、無事に回復した。
単回および複数回投薬の両方の最大忍容用量は、試験した最高用量であり、１４００ｍｇの単回用量および１０００ｍｇの複数回用量であった。単回および複数回投薬の両方について最小限の血漿曝露が観察され、薬物がほぼＧＩ制限されていることが確認された。用量依存的な血液受容体占有率の増大および受容体発現の低減が観察され、したがって、健康なボランティアにおける化合物Ａの標的係合および薬理学的活性を支持した。
錠剤製剤の使用を支持するために、１日２回、５日間投与される経口溶液として、または１日２回、５日間投与される即時放出錠剤として４５０ｍｇの投薬後に、１０人の健康な対象において複数回用量クロスオーバー薬物動態および薬力学研究を実施した。平均して、ＩＲ錠剤は、５日目の溶液よりもわずかに低いピーク化合物Ａ血漿濃度およびＡＵＣ値（約１５～１８％）を有し、この差は臨床的に有意であるとみなされない。平均定常状態ピーク受容体占有率は、両方の製剤で＞９０％であり、５日目の２４時間効果曲線下面積（ＡＵＥＣ）に基づく平均受容体占有率は、２つの製剤で同等であった。
単回および複数回の漸増用量後、化合物Ａは、広い用量範囲にわたって健康な対象に経口投与したときに安全で十分に忍容性であった。ＧＩ制限ペプチドと一致して、化合物Ａは、１日１回または２回の投薬を支持する薬物動態プロファイルを有する低い全身曝露を有した。化合物Ａの１日２回の投薬は、持続的な受容体占有率をもたらした。健康な対象における化合物Ａの安全性、忍容性、およびＰＫ／ＰＤプロファイルは、炎症性腸疾患に対するこの新規の消化器制限標的化された治療の継続的な臨床評価を支持する。
実施例８
中等度から重度の活動性潰瘍性大腸炎を有する対象における経口化合物Ａの安全性および有効性を評価する無作為化、二重盲検、プラセボ対照研究
中等度から重度の潰瘍性大腸炎を有するヒト患者における、フェーズ２無作為化、二重盲検、プラセボ対照臨床研究を実施し、経口化合物Ａでの処置の安全性、忍容性、および有効性を実証する。この研究は、経口化合物Ａによる処置に対する薬物動態（ＰＫ）および薬力学（ＰＤ）、ならびにバイオマーカー応答も評価する。
研究設計
これは、２部構成の研究である。パート１は、中等度から重度の活動性ＵＣを有する患者における無作為化、二重盲検、プラセボ対照、並列設計の１２週間の導入処置期間であり、パート２は、パート１を正常に完了した対象を含む４０週間の延長処置期間である。パート１の１２週目訪問を完了した対象は、パート２に入るのに適格である。
パート１：誘導処置期間（ＩＴＰ）：
パート１は、中等度から重度の活性ＵＣを有する成人対象における、１２週間の無作為化、二重盲検、プラセボ対照、並列設計研究である。適格な対象は、化合物Ａ４５０ｍｇを１日２回（ＢＩＤ）、化合物Ａ１５０ｍｇＢＩＤ、またはプラセボＢＩＤに１：１：１で無作為化される。対象は、生検で確認されたＵＣの診断を有する必要がある。参加基準を満たすために、適格な対象は、ＵＣに対するより古い従来の治療法（すなわち、コルチコステロイド、アミノサリチル酸または免疫調節剤）に対して以前に不十分な初期応答、応答の消失もしくは不耐性、またはより新しい生物学的治療法（すなわち、ＴＮＦα拮抗薬またはＩＬ１２／２３拮抗薬）に対して以前に不十分な初期応答、応答の消失もしくは不耐性を有する必要がある。以前にベドリズマブ治療の既往歴がある対象は除外される。無作為化は、ＴＮＦα拮抗薬またはＩＬ－１２／２３拮抗薬に対する以前の失敗によって階層化される。
適格な対象は、以下の参加基準を満たす：
●１８歳（または＞１８歳の場合は同意の国固有の最低年齢）～７５歳の男性および女性の対象、
●研究手順を理解し、書面によるインフォームドコンセントを付与することにより研究に参加することに同意する対象、
●ＵＣと一致する生検結果の適切な文書によって支持されているＵＣの診断、
●中等度から重度の活動性ＵＣ、ならびに
●経口アミノサリチレート（５－ＡＳＡ）、コルチコステロイド、免疫調節物質、または生物学的薬剤（ベドリズマブを除く）の実証された少なくとも１つの不十分な応答、応答の喪失、または不耐性、
かつ、適格な対象が以下の除外基準を満たさない：
●クローン病（ＣＤ）、不確定性大腸炎（ＩＣ）、顕微鏡的大腸炎、虚血性大腸炎、放射線性大腸炎の現在の診断を有する対象、
●完全に除去された低グレードの異形成病変以外の結腸異形成の既往歴、
●スクリーニングの４週間以内の入院またはＩＶ抗生物質／抗感染治療、またはスクリーニングの２週間以内の経口抗生物質／抗感染薬を必要とする活性細菌、ウイルス、真菌、またはマイコバクテリア感染の既往歴、
●ベドリズマブ、ナタリズマブ、または研究中に計画されたα４β７もしくはβ１インテグリンを標的とする任意の薬剤による以前の治療、
●Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の便検査陽性
●慢性の再発性または重篤な感染症、
●既知の一次または二次性免疫不全、
●妊娠中もしくは授乳中の女性、または研究中もしくは研究薬の最後の用量後の３０日以内に妊娠を検討している女性、および
●任意の主要な神経障害の既往歴。
適格な対象は、化合物Ａ４５０ｍｇを１日２回（ＢＩＤ）、化合物Ａ４５０ １５０ｍｇＢＩＤ、またはプラセボＢＩＤに１：１：１で無作為化される。
パート２：延長治療期間（ＥＴＰ）：
Ａｄａｐｔｅｄ Ｍａｙｏスコアの構成要素を含む、パート１の１２週目訪問を完了した対象は、パート２に入るのに適格である。パート１のすべての完了者は、治験責任医師の判断でパート２の延長治療期間に入るのに適格であろう。対象は、盲検様式で適切な延長処置群に割り当てられる。パート２に進むすべての対象は、化合物Ａを受ける。
試験試料、用量および投与様式：
化合物Ａ（３００ｍｇおよび１５０ｍｇ）および対応するプラセボ錠剤を経口投与する。化合物Ａの強度およびプラセボの両方は、同じ外観を有する。
転帰分析：
主要転帰尺度は、プラセボと比較して、１２週目に臨床的寛解を達成した対象の割合を含む。臨床的寛解は、Ａｄａｐｔｅｄ Ｍａｙｏスコア（Ｍａｙｏスコアからの３つのサブスコアの合計）を使用して判定される。
●便頻度サブスコア（ＳＦＳ）
●直腸出血サブスコア（ＲＢＳ）
●内視鏡サブスコア（ＥＳＳ）
副次的転帰尺度には、プラセボに対する化合物Ａの高用量と低用量との間の個別の比較が含まれる。
●内視鏡的向上を有する対象の割合。
●内視鏡的寛解を達成した対象の割合。
●組織学的向上を有する対象の割合。
●組織学的寛解を達成した対象の割合。
●粘膜治癒を有する対象の割合。
他の転帰尺度としては、５２週目に臨床的寛解を達成した対象の割合が含まれる。臨床的寛解は、Ａｄａｐｔｅｄ Ｍａｙｏスコア（Ｍａｙｏスコアからの３つのサブスコアの合計）を使用して判定される。
●便頻度サブスコア（ＳＦＳ）
●直腸出血サブスコア（ＲＢＳ）
●内視鏡サブスコア（ＥＳＳ）。
有効性の評価
有効性は、少なくとも部分的に、Ｍａｙｏスコアに基づいて評価される。Ｍａｙｏスコアには４つの構成要素が含まれる。便頻度サブスコア（ＳＦＳ）、直腸出血サブスコア（ＲＢＳ）、内視鏡サブスコア（ＥＳＳ）、および医師の総合評価（ＰＧＡ）。個々のスコアの各々は、０～３の範囲であり、高い数値は、高い重症度を示す）。
●Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｍａｙｏスコアは、すべての４つのサブスコア（ＳＦＳ、ＲＢＳ、ＥＳＳ、ＰＧＡ）の合計であり、０～１２点の範囲である。
●Ａｄａｐｔｅｄ Ｍａｙｏスコアは、３つのサブスコア（ＳＦＳ、ＲＢＳ、およびＥＳＳ）の合計である。Ａｄａｐｔｅｄ Ｍａｙｏスコアは０～９点の範囲である。
●Ｐａｒｔｉａｌ Ｍａｙｏスコアは、０～９点の範囲の３つのサブスコア（ＳＦＳ、ＲＢＳ、およびＰＧＡ）の合計である。
●内視鏡サブスコア（ＥＳＳ）≦１（１のスコアに脆性が含まれないように修正された）。
結果
化合物Ａの用量のうちのいずれかでの処置は安全であり、４５０ｍｇＢＩＤまたは１５０ｍｇＢＩＤのいずれかでの処置は、プラセボでの処置と比較して、Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｍａｙｏスコア、Ａｄａｐｔｅｄ Ｍａｙｏスコア、および／またはＰａｒｔｉａｌ Ｍａｙｏスコアにおいて統計的に有意な向上を示すことが予想され、したがって、潰瘍性大腸炎を治療するためのこれらの用量の化合物Ａの有効性を実証する。
本出願で言及され、および／または本出願データシートに記載されている、上記の米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および／または非特許公開のすべては、参照により、その全体が本明細書に組み込まれる。
本発明は、本明細書に広く記載され、以下に主張されるようなその構造、方法、または他の重要な特性から逸脱せずに、他の特定の形態において実施され得る。記載される実施形態は、あらゆる観点において、制限されるものではなく例示的であるものとみなされるべきである。したがって本発明の範囲は、前述の説明によってではなく、添付の特許請求の範囲によって示される。特許請求の範囲の等価の意味および範囲内にあるすべての変更が、それらの範囲内に包含されるものとする。

Claims (67)

  1. その必要がある対象において炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を治療する方法であって、α４β７インテグリン拮抗薬を前記対象に投与することを含み、前記拮抗薬が、約１００ｍｇ～約５００ｍｇの用量で１日１回または２回、患者に経口投与され、前記拮抗薬が、２つのペプチドを含むペプチド二量体化合物、またはその薬学的に許容される塩であり、前記２つのペプチドの各々が、配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号６）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号６）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号７）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号７）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号８）、もしくは
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号８）
    のうちのいずれかを含むか、またはそれからなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含むか、または前記２つのＰｅｎの間にジスルフィド結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、方法。
  2. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  3. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  4. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  5. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  6. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  7. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  8. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、
    Figure 2023509790000052
    またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。
  9. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、
    Figure 2023509790000053
    またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。
  10. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  11. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  12. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項９に記載の方法。
  13. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  14. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  15. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項１に記載の方法。
  16. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、
    Figure 2023509790000054
    またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。
  17. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、
    Figure 2023509790000055
    またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。
  18. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、約１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３１２．５、３２５．０、３３７．５、３５０．０、３６２．５、３７５、３８７．５、４００．０、４１２．５、４２５．０、４３７．５、４５０．０、４６２．５、４７５、４８７．５、または５００．０ｍｇの用量で前記対象に投与される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。
  19. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、約１５０ｍｇの用量で前記対象に投与される、請求項１７に記載の方法。
  20. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、約４５０ｍｇの用量で前記対象に投与される、請求項１７に記載の方法。
  21. 前記用量が、前記対象に、１日２回投与される、請求項１８または１９に記載の方法。
  22. 前記ペプチド二量体化合物の前記薬学的に許容される塩が、酢酸塩である、請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法。
  23. 投与された投薬量が、任意選択で、前記拮抗薬のピーク血液または血清レベルで測定された場合、不飽和血液受容体占有率（ＲＯ％）をもたらす、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
  24. 前記投与された投薬量が、任意選択で、前記拮抗薬のピーク血液または血清レベルで測定された場合、９０％未満のＲＯ、８０％未満のＲＯ、７０％未満のＲＯ、６０％未満のＲＯ、または５０％未満のＲＯをもたらす、請求項２２に記載の方法。
  25. 消化管におけるＭａｄＣＡＭ１媒介性Ｔ細胞増殖を阻害する、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
  26. 消化管におけるＣＤ４＋Ｔ細胞上のβ７の細胞表面発現を低減させる、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
  27. ｉ）ＣＤ４＋Ｔメモリー細胞上のα４β７インテグリンの内部移行を誘導し、
    ｉｉ）消化管におけるＭＡｄＣＡＭ１に対するＣＤ４＋Ｔメモリー細胞の接着の低減を引き起こし、かつ／または
    ｉｉｉ）前記消化管、任意選択で、回腸固有層、パイエル板、腸間膜リンパ節、小腸、および／もしくは結腸へのＴ細胞のホーミングを阻害する、
    請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
  28. 前記ＩＢＤが、潰瘍性大腸炎である、請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法。
  29. 前記ＩＢＤが、クローン病である、請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法。
  30. 前記対象の血漿中の以下の薬物動態パラメータ：
    １～２５のＣｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）、
    １～５のＴｍａｘ（時間）、
    １０～２５０のＡＵＣｔ（ｎｇ．時間／ｍＬ）
    １０～３００のＡＵＣｉｎｆ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
    ３～１０のｔ１／２（時間）、
    ３０～１３０のＡＵＣｔａｕ（ｎｇ．時間／ｍＬ）、
    １～５のＣｔｒｏｕｇｈ（ｎｇ／ｍＬ）、
    ０．５～２．５の蓄積Ｃｍａｘ（ｎｇ．ｍＬ）、および
    ０．５～３．０の蓄積ＡＵＣｔ（ｎｇ．時間／ｍＬ）
    のうちの１つ以上をもたらす、
    請求項のいずれか一項に記載の方法。
  31. 前記対象の血漿中の以下の薬力学的パラメータ：
    ５０～１００のＲＯｍａｘ（％）、
    －２０～－６０の受容体発現ｍａｘの変化（％）、
    －１０～－５５の受容体発現の平均変化（％）、
    ８０～１００の定常状態ＲＯｍａｘ（％）、
    ５０～９５の平均ＲＯ０－２４（ｈ％）、
    ８０～９５の平均ＲＯ０－１２（ｈ％）、および
    ７０～９０の平均ＲＯ１２－２４（ｈ％）
    のうちの１つ以上をもたらす、請求項のいずれか一項に記載の方法。
  32. その必要がある対象において炎症性疾患または障害を治療する方法であって、α４β７インテグリン拮抗薬を前記対象に投与することを含み、前記拮抗薬が、任意選択で、前記拮抗薬のピーク血液または血清レベルで測定された場合、不飽和血液受容体占有率（ＲＯ％）をもたらす投薬量で投与される、方法。
  33. 前記拮抗薬が、任意選択で、前記拮抗薬のピーク血液または血清レベルで測定された場合、９０％未満の血液ＲＯ、８０％未満の血液ＲＯ、７０％未満の血液ＲＯ、６０％未満の血液ＲＯ、または５０％未満の血液ＲＯをもたらす投薬量で投与される、請求項１１に記載の方法。
  34. 前記拮抗薬が、経口投与、非経口投与、皮下投与、口腔投与、経鼻投与、吸入による投与、局所投与、および直腸投与から選択される投与経路のために製剤化された薬学的組成物中に存在する、請求項３１または３２に記載の方法。
  35. 前記拮抗薬が、経口または直腸投与される、請求項３１～３３のいずれか一項に記載の方法。
  36. 前記疾患または障害が、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、成人ＩＢＤ、小児ＩＢＤ、青年ＩＢＤ、潰瘍性大腸炎、クローン病、セリアック病（非熱帯性スプルー）、血清反応陰性関節症に関連する腸疾患、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン性大腸炎、好酸球性胃腸炎、放射線療法、化学療法、直腸結腸切除および回腸肛門吻合後に生じる嚢炎、消化器がん、膵炎、インスリン依存性真性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管炎、胆管周囲炎、慢性気管支炎、慢性副鼻腔炎、喘息、原発性硬化性胆管炎、ＧＩ管におけるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、好酸球性喘息、好酸球性食道炎、胃炎、大腸炎、顕微鏡的大腸炎、ならびに移植片対宿主病（ＧＶＤＨ）からなる群から選択される、請求項３１～３４のいずれか一項に記載の方法。
  37. 前記疾患または障害が、ＩＢＤである、請求項３１～３５のいずれか一項に記載の方法。
  38. 前記ＩＢＤが、潰瘍性大腸炎である、請求項３６に記載の方法。
  39. 前記ＩＢＤが、クローン病である、請求項３６に記載の方法。
  40. 前記拮抗薬が、２つのペプチドを含むペプチド二量体化合物、またはその薬学的に許容される塩であり、
    前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）、
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号６）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号６）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号７）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号７）、
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号８）、もしくは
    Ｐｅｎ－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号８）
    のうちのいずれかを含むか、またはそれからなり、
    前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含むか、または前記２つのＰｅｎの間にジスルフィドを含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３１～３８のいずれか一項に記載の方法。
  41. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  42. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  43. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  44. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  45. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  46. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  47. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、
    Figure 2023509790000056
    またはその薬学的に許容される塩である、請求項３９に記載の方法。
  48. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、
    Figure 2023509790000057
    またはその薬学的に許容される塩である、請求項３９に記載の方法。
  49. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号１）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  50. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｇｌｙ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号２）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  51. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号３）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  52. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｐｒｏ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号４）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  53. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＮＨ２（配列番号５）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  54. 前記２つのペプチドの各々が、前記配列：
    ２－メチルベンゾイル－（Ｎ－Ｍｅ－Ａｒｇ）－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｐｅｎ－Ｐｈｅ（４－ｔＢｕ）－（β－ホモ－Ｇｌｕ）－（Ｄ－Ｌｙｓ）－ＯＨ（配列番号５）
    からなり、前記２つのペプチドの各々が、前記２－メチルベンゾイルと前記Ｐｅｎとの間にチオエーテル結合を含み、前記２つのペプチドが、前記２つのペプチドの前記Ｄ－Ｌｙｓアミノ酸に結合されたリンカー部分によって連結され、前記リンカー部分が、ジグリコール酸（ＤＩＧ）である、請求項３９に記載の方法。
  55. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、
    Figure 2023509790000058
    またはその薬学的に許容される塩である、請求項３９に記載の方法。
  56. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、
    Figure 2023509790000059
    またはその薬学的に許容される塩である、請求項３９に記載の方法。
  57. 前記ペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩が、約５、６、７、８、９、１０、１２．５、２５．０、３７．５、５０．０、６２．５、７５、８７．５、１００．０、１１２．５、１２５．０、１３７．５、１５０．０、１６２．５、１７５、１８７．５、２００．０、２１２．５、２２５．０、２３７．５、２５０．０、２６２．５、２７５、２８７．５、３００．０、３１２．５、３２５．０、３３７．５、３５０．０、３６２．５、３７５、３８７．５、４００．０、４１２．５、４２５．０、４３７．５、４５０．０、４６２．５、４７５、４８７．５、または５００．０ｍｇの用量で前記対象に投与される、請求項３９～５５のいずれか一項に記載の方法。
  58. 前記用量が、前記対象に、１日１回または１日２回投与される、請求項５６に記載の方法。
  59. 前記ペプチド二量体化合物の前記薬学的に許容される塩が、酢酸塩である、請求項３９～５７のいずれか一項に記載の方法。
  60. 請求項３９～５８のいずれか一項に開示されるペプチド二量体化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、薬学的組成物。
  61. 前記組成物が、経口送達のために製剤化され、任意選択で、前記組成物が、腸溶コーティングを含む、請求項５９に記載の薬学的組成物。
  62. 前記対象に、請求項３２～３４のいずれか一項に記載の薬学的組成物を投与することを含む、請求項３９～５８のいずれか一項に記載の方法。
  63. 前記拮抗薬またはその薬学的に許容される塩が、α４β７インテグリンのＭＡｄＣＡＭ１への結合を阻害する、請求項３１～５８または６１のいずれか一項に記載の方法。
  64. 前記拮抗薬もしくはその薬学的に許容される塩または前記薬学的組成物が、病態を向上または改善するのに十分な間隔で、それを必要とする前記対象に提供される、請求項３１～５８または６１～６２のいずれか一項に記載の方法。
  65. 前記間隔が、２４時間連続、１時間毎、４時間毎、１日に１回、１日に２回、１日に３回、１日に４回、隔日、１週間毎、隔週、および１ヶ月毎からなる群から選択される、請求項６３に記載の方法。
  66. 前記拮抗薬もしくはその薬学的に許容される塩または薬学的組成物が、初期用量として、続いて１つ以上の後続用量として提供され、任意の２つの用量間の最小間隔が、１日未満の期間であり、前記用量の各々が、有効量の前記拮抗薬を含む、請求項６３または６４に記載の方法。
  67. 前記有効量の前記拮抗薬もしくはその薬学的に許容される塩または前記薬学的組成物が、以下：
    ａ）α４β７インテグリン分子上のＭＡｄＣＡＭ１結合部位の約５０％以上の飽和、
    ｂ）前記細胞表面上のα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害、ならびに
    ｃ）α４β７分子上のＭＡｄＣＡＭ１結合部位の約５０％以上の飽和、および前記細胞表面上のα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害であって、（ｉ）前記飽和が１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持されるか、（ｉｉ）前記阻害が１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持されるか、または（ｉｉｉ）前記飽和および前記阻害がそれぞれ１日２回以下の投薬頻度と一致する期間維持される、飽和および阻害
    のうちの少なくとも１つを達成するのに十分である、請求項６５に記載の方法。
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