JP2023167026A - 膵機能活性化剤、抗老化剤、２型糖尿病の治療薬または予防薬、医薬品、化粧品および食品または飲料 - Google Patents
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Abstract
【課題】 効果的に膵機能を修復、再生することができる因子を用いた膵機能活性化剤を提供する。【解決手段】 脂肪由来幹細胞Exosomeと、組み替え体レプチン、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種と、を含んでなる。【選択図】 なし
Description
本発明は、膵機能活性化剤、抗老化剤、医薬品、化粧品および食品または飲料に関するものである。
２型糖尿病（以下、「２ＤＭ」ということがある。）は、生活習慣病の１つとして挙げられる。ここで、２ＤＭでは、膵臓のβ細胞の機能不全によりインスリンの欠乏またはインスリンの作用の低下が引き起こされる。そのため、インスリンを直接注射する治療が行われ、また、インスリンの分泌を促進する２型糖尿病の治療剤の検討が行われている（例えば、特許文献１参照）。
また、近年、幹細胞を用いて臓器や組織そのものの欠損、機能障害や不全を修復、再生する再生医療が注目されている。２ＤＭの再生医療については、幹細胞注入を用いた報告は散見される（例えば、非特許文献１～１１参照）が、明確な有意差を示す結果は得られていないのが現状である。
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ここで、幹細胞注入ではホーミング効果を得る概念が主流である。すなわち幹細胞が体内の患部から発出されているＳＯＳの信号を受信することで患部へ集まり、そのダメージを受けている組織自体を再生する概念である。
しかし、上記の幹細胞注入では、体内に注入された幹細胞が効率的に患部へ向かわないために、明確な有意差が示されなかったと仮定した。この仮定に基づけば、体内に注入された幹細胞の液性因子を積極的に患部へ向かうようにする必要があるという仮説が立てられる。
本発明の目的は、幹細胞を体外から注入することに依存せず、元々体内に存在する幹細胞機能を効果的に活用し膵機能を修復、再生することができる膵機能活性化剤、また、この膵機能活性化剤を用いた抗老化剤、医薬品、化粧品および食品または飲料を提供することである。
本発明者らは、鋭意検討の結果、通常の再生医療のように幹細胞自体を体外から注入することなく脂肪由来幹細胞Exosomeを含む数種因子（以下、「DM-X」ということがある。）を用いることにより、上記目的を達成できることを見出し、本発明を完成するに至った。またDM-Xの効果は幹細胞と合わせて体内に注入することによっても阻害されることはなく、むしろ相加効果として示された。
すなわち、本発明によれば、
（１） 脂肪由来幹細胞Exosomeと、組み替え体レプチン、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種を含んでなる膵機能活性化剤、
（２） 前記幹細胞は、脂肪由来幹細胞である（１）記載の膵機能活性化剤、
（３） 前記組み替え体レプチンは、マウス組み替え体レプチンまたはヒト組み替え体レプチンである（１）または（２）記載の膵機能活性化剤、
（４） さらに幹細胞を含む（１）または（２）記載の膵機能活性化剤、
（５） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する抗老化剤、
（６） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する２型糖尿病の治療薬または予防薬、
（７） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する医薬品、
（８） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する化粧品、
（９） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する食品または飲料
が提供される。
（１） 脂肪由来幹細胞Exosomeと、組み替え体レプチン、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種を含んでなる膵機能活性化剤、
（２） 前記幹細胞は、脂肪由来幹細胞である（１）記載の膵機能活性化剤、
（３） 前記組み替え体レプチンは、マウス組み替え体レプチンまたはヒト組み替え体レプチンである（１）または（２）記載の膵機能活性化剤、
（４） さらに幹細胞を含む（１）または（２）記載の膵機能活性化剤、
（５） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する抗老化剤、
（６） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する２型糖尿病の治療薬または予防薬、
（７） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する医薬品、
（８） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する化粧品、
（９） （１）または（２）に記載の膵機能活性化剤を含有する食品または飲料
が提供される。
本発明の膵機能活性化剤によれば、DM-Xを用いて効果的に膵機能を修復、再生することができる。また、本発明によれば、この膵機能活性化剤を用いた抗老化剤、２型糖尿病の治療薬または予防薬、医薬品、化粧品および食品または飲料が提供される。
以下、本発明の膵機能活性化剤について説明する。本発明の膵機能活性化剤は、脂肪由来幹細胞Exosomeと、組み替え体レプチン、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種と、を含んでなる。
（脂肪由来幹細胞Exosome）
本発明において用いられる脂肪由来幹細胞Exosomeは、脂肪細胞由来の幹細胞、すなわち脂肪中にある幹細胞から得られるExosomeである。本発明において、脂肪由来幹細胞Exosomeとしては、脂肪由来幹細胞から抽出・分離されたものであってもよいし、脂肪由来幹細胞Exosomeを含有する組成物であってもよい。脂肪由来幹細胞Exosomeを含有する組成物としては、例えば、脂肪由来幹細胞の培養液等を用いることができる。すなわち、本発明においては、脂肪由来幹細胞Exosomeのほか、幹細胞由来の成長因子を含んでいてもよい。
本発明において用いられる脂肪由来幹細胞Exosomeは、脂肪細胞由来の幹細胞、すなわち脂肪中にある幹細胞から得られるExosomeである。本発明において、脂肪由来幹細胞Exosomeとしては、脂肪由来幹細胞から抽出・分離されたものであってもよいし、脂肪由来幹細胞Exosomeを含有する組成物であってもよい。脂肪由来幹細胞Exosomeを含有する組成物としては、例えば、脂肪由来幹細胞の培養液等を用いることができる。すなわち、本発明においては、脂肪由来幹細胞Exosomeのほか、幹細胞由来の成長因子を含んでいてもよい。
また、脂肪由来幹細胞Exosomeの分離・抽出方法としては、公知の方法を用いることができ、超遠心分離法、限外濾過法、ゲル濾過法、ＨＰＬＣ、抽出用試薬を用いる方法、Exosomeをトラップできるように処理されたろ紙を用いる方法等が挙げられる。
脂肪細胞由来幹細胞としては、たとえば、脂肪細胞由来間葉系幹細胞が挙げられる。ここで、間葉系幹細胞は、骨細胞、心筋細胞、脂肪細胞、筋細胞、軟骨細胞など、間葉系に属する一種以上の細胞への分化能を有する多能性幹細胞である。
なお、本発明において、脂肪由来幹細胞は、ヒト由来（自家細胞）であってもよいし、異種由来（他家細胞）であってもよい。異種由来の脂肪由来幹細胞の種として、牛、馬、豚、犬、猫、マウス、ラット、羊等が挙げられる。
また、自家細胞を用いる場合、自己脂肪由来幹細胞を用いてもよいし、他人の脂肪由来幹細胞を用いてもよい。
また、自家細胞を用いる場合、自己脂肪由来幹細胞を用いてもよいし、他人の脂肪由来幹細胞を用いてもよい。
本発明において脂肪由来幹細胞とは、脂肪由来幹細胞を含む細胞集団であってもよく、細胞集団において間葉系幹細胞が好ましくは２０％以上、より好ましくは５０％以上、さらに好ましくは８０％以上、特に好ましくは９０％以上、最も好ましくは９８％以上含まれる。
なお、本発明において、脂肪由来幹細胞を培養して用いてもよいが、脂肪由来幹細胞の培養方法としては、脂肪由来幹細胞の多能性を維持する観点から、牛やヒト、馬等の血清を用いない無血清培地により培養することが好ましい。また、この無血清培地は、フェノールレッドをも含まないことが好ましい。
ここで、血清を含む培地を用いると、脂肪由来幹細胞に対して刺激が付与されることにより分化誘導が起こり多能性を有する脂肪由来幹細胞ではなく、組織幹細胞の状態へ変化する虞がある。そのため、本発明においては、無血清培地を用いることにより、培養時における脂肪由来幹細胞の分化誘導を防ぐことができる。
（組み替え体レプチン）
本発明において用いる組み替え体レプチンとしては、レプチンの組み替え体であれば特に限定されないが、投与する対象に応じてマウス組み替え体レプチン、ヒト組み替え体レプチン等を選択することができる。
本発明において用いる組み替え体レプチンとしては、レプチンの組み替え体であれば特に限定されないが、投与する対象に応じてマウス組み替え体レプチン、ヒト組み替え体レプチン等を選択することができる。
（γ－オリザノール）
γ－オリザノールは、フェルラ酸とステロールとが縮合したエステル類であり、オリザノールＡ、オリザノールＣ等が挙げられる。本発明においては、これらのうちの一種を単独で用いてもよいし、二種以上を組み合わせて用いてもよい。
γ－オリザノールの製造方法は、特に限定されないが、たとえば、米糠から単離、精製することにより得ることができる。
γ－オリザノールは、フェルラ酸とステロールとが縮合したエステル類であり、オリザノールＡ、オリザノールＣ等が挙げられる。本発明においては、これらのうちの一種を単独で用いてもよいし、二種以上を組み合わせて用いてもよい。
γ－オリザノールの製造方法は、特に限定されないが、たとえば、米糠から単離、精製することにより得ることができる。
（イヌリン）
イヌリンは、多糖類の一種であり、グルコースにフルクトースが複数個結合した構造を有する。また、イヌリンは、水溶性である。イヌリンは、菊芋、ごぼう、タマネギ、チコリ、ニラ等に含まれ、たとえば、これらの少なくとも１種から単離、精製することにより得ることができる。
イヌリンは、多糖類の一種であり、グルコースにフルクトースが複数個結合した構造を有する。また、イヌリンは、水溶性である。イヌリンは、菊芋、ごぼう、タマネギ、チコリ、ニラ等に含まれ、たとえば、これらの少なくとも１種から単離、精製することにより得ることができる。
（亜鉛）
亜鉛は、人の全身の細胞内に存在し、健康を維持するために必要な元素であり、食品等から摂取する必要がある必須ミネラルの一種である。亜鉛は、豚レバー等の肉、カキ等の魚介類、大豆等の豆類、ナッツ類等に含まれ、たとえば、これらの少なくとも１種を原料として得ることができるが、亜鉛の製造方法や原料は特に限定されない。また、本発明においては、グルコン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸亜鉛等の形で用いてもよい。
亜鉛は、人の全身の細胞内に存在し、健康を維持するために必要な元素であり、食品等から摂取する必要がある必須ミネラルの一種である。亜鉛は、豚レバー等の肉、カキ等の魚介類、大豆等の豆類、ナッツ類等に含まれ、たとえば、これらの少なくとも１種を原料として得ることができるが、亜鉛の製造方法や原料は特に限定されない。また、本発明においては、グルコン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸亜鉛等の形で用いてもよい。
（ビタミンＣ）
ビタミンＣは、Ｌ－アスコルビン酸として表される水溶性ビタミンの１種である。本発明においては、合成されたものを用いてもよいし、天然物から抽出されたものを用いてもよい。
ビタミンＣは、Ｌ－アスコルビン酸として表される水溶性ビタミンの１種である。本発明においては、合成されたものを用いてもよいし、天然物から抽出されたものを用いてもよい。
（幹細胞）
本発明の膵機能活性化剤は、さらに幹細胞を併用してもよい。幹細胞としては、特に限定されないが、間葉系幹細胞、造血幹細胞、神経幹細胞、表皮幹細胞、胚性幹（ＥＳ）細胞、胚性生殖（ＥＧ）細胞、その他全ての組織幹細胞等を用いることができる。また、組織幹細胞である場合には、特に限定されないが、脂肪、臍帯、臍帯血、骨髄、胎盤、歯髄、羊膜、骨格筋、骨膜、子宮内膜等の組織に由来する幹細胞を得ることができる。これらの中でも脂肪由来幹細胞が好ましい。
本発明の膵機能活性化剤は、さらに幹細胞を併用してもよい。幹細胞としては、特に限定されないが、間葉系幹細胞、造血幹細胞、神経幹細胞、表皮幹細胞、胚性幹（ＥＳ）細胞、胚性生殖（ＥＧ）細胞、その他全ての組織幹細胞等を用いることができる。また、組織幹細胞である場合には、特に限定されないが、脂肪、臍帯、臍帯血、骨髄、胎盤、歯髄、羊膜、骨格筋、骨膜、子宮内膜等の組織に由来する幹細胞を得ることができる。これらの中でも脂肪由来幹細胞が好ましい。
また、幹細胞は、ヒト由来（自家細胞）であってもよいし、異種由来（他家細胞）であってもよい。異種由来の幹細胞の種として、牛、馬、豚、犬、猫、マウス、ラット、羊等が挙げられる。また、自家細胞を用いる場合、自己の細胞を用いてもよいし、他人の細胞を用いてもよい。
（膵機能活性化剤）
本発明の膵機能活性化剤は、脂肪由来幹細胞Exosomeと、組み替え体レプチン、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種を含んでなる。また、幹細胞と、組み替え体レプチン、脂肪由来幹細胞Exosome、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種の配合割合は、本発明の効果を損なわない限り特に限定されないが、特定の配合割合にて配合することが好ましい。
本発明の膵機能活性化剤は、脂肪由来幹細胞Exosomeと、組み替え体レプチン、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種を含んでなる。また、幹細胞と、組み替え体レプチン、脂肪由来幹細胞Exosome、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種の配合割合は、本発明の効果を損なわない限り特に限定されないが、特定の配合割合にて配合することが好ましい。
なお、前述したDM-Xに含まれる数種因子としては、脂肪由来幹細胞Exosomeのほか、組み替え体レプチン、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛またはビタミンＣが挙げられる。また、以下において、これらの因子をX因子と呼ぶことがある。
膵臓の細胞や組織を新たに作り出すことは困難であるが、本発明によれば、元々体内に存在する幹細胞あるいは体外から導入する幹細胞に分化誘導の刺激を与えて膵臓細胞や組織、特に膵臓β細胞へのホーミング効果を高めることによって膵機能の維持または向上を図ることができる。そのため、２型糖尿病の治療薬または予防薬としての効果を有する。
（用途）
本発明の膵機能活性化剤は、健康を維持向上させることを目的とするものであり、健康の維持向上のための用途や、抗老化（アンチエイジング）のための用途に用いることができる。
本発明の膵機能活性化剤は、健康を維持向上させることを目的とするものであり、健康の維持向上のための用途や、抗老化（アンチエイジング）のための用途に用いることができる。
また、本発明の膵機能活性化剤は、抗老化（アンチエイジング）の作用効果を有するため、これらを目的とした医薬品に配合させることもできる。医薬品としては、予防薬、治療薬のいずれにも用いることができる。
医薬品に配合させる場合には、成分配合品を単独で用いてもよいし、又は一般に製剤上許容される添加剤と共に混和し、製剤化してもよい。また、投与形態としては、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、エキス剤等の経口剤を用いた投与形態または、注射剤、液剤、坐剤、軟膏剤、貼付剤、パップ剤、ローション剤等の非経口剤を用いた投与形態等が挙げられるが、特に制限はなく、治療や予防の目的等に応じて適宜選択することができる。
また、錠剤、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、散剤の場合には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等の添加剤を含有させることができる。賦形剤としては、デンプン、カルボキシメチルセルロース、白糖、デキストリン、コーンスターチ等を挙げることができる。
結合剤としては、結晶セルロース、結晶セルロース・カルメロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルメロースナトリウム、エチルセルロース、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、デキストリン、アルファー化デンプン、部分アルファー化デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、プルラン、ポリビニルピロリドン、アミノアルキルメタクリレートコポリマーＥ 、アミノアルキルメタクリレートコポリマーＲＳ、メタクリル酸コポリマーＬ、メタクリル酸コポリマー、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、ポリビニルアルコール、アラビアゴム、アラビアゴム末、寒天、ゼラチン、白色セラック、トラガント、精製白糖、マクロゴールが挙げられる。
崩壊剤としては、結晶セルロース、メチルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロース、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、部分アルファー化デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウム、トラガントが挙げられる。
滑沢剤としては、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、含水二酸化ケイ素、軽質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム、乾燥水酸化アルミニウムゲル、タルク、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、リン酸水素カルシウム、無水リン酸水素カルシウム、ショ糖脂肪酸エステル、ロウ類、水素添加植物油、ポリエチレングリコールが挙げられる。
また、液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤の場合には、水や植物油等の一般的に用いられる不活性な希釈剤の他、着色剤、矯味剤、着香剤等を添加剤として含有させてもよい。
また、注射剤の場合には、懸濁液、乳濁液、用時溶解剤等の添加剤を含有させることができる。また、軟膏剤、坐剤の場合には、脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、パラフィン、ろう、樹脂、プラスチック、基剤、グリコール類、高級アルコール、水、乳化剤、懸濁化剤等を添加剤として含有させることができる。また、パップ剤の場合にはグリセリン、水、水溶性高分子、吸水性高分子等を添加物として含有させることができる。また、ローション剤の場合には、溶剤、乳化剤、懸濁化剤等を添加剤として含有させることができる。
また、本発明の膵機能活性化剤を化粧品に配合することもできる。化粧品としては、化粧水、乳液、洗顔料、クレンジング、美容液、クリーム、ファンデーション、アイブロー、マスカラ、アイシャドウ、アイライン、口紅、グロス、チーク、白粉、マニキュア等が挙げられる。また、化粧品の形態としては、液体、クリーム、固体、スティック、粉末等の形態を採用することができる。
また、本発明の膵機能活性化剤を、食品や飲料等に配合させてもよい。食品としては、パン類、麺類、菓子類、食肉加工品、魚介加工品、冷凍食品、ゼリー類、アイスクリーム類、乳製品、各種調味料等が挙げられる。また、一般食品の他、特定保健用食品、医薬部外品、健康食品、サプリメントにも配合させることができる。飲料としては、清涼飲料水、乳飲料、酒類、茶、紅茶飲料、コーヒー、果汁飲料、炭酸飲料、ミネラルウォーター類、果実・野菜飲料等が挙げられる。
また、本発明の膵機能活性化剤を配合させた食品や飲料を、錠剤、カプセル剤、シロップ等の経口投与製剤と同様の形態としてもよい。
また、本発明の膵機能活性化剤を配合させた食品や飲料を、錠剤、カプセル剤、シロップ等の経口投与製剤と同様の形態としてもよい。
また、本発明の膵機能活性化剤を配合させた食品や飲料を製造する際に、本発明の効果を妨げない範囲で必要に応じて、甘味料、着色料、保存料、増粘剤、安定化剤、ゲル化剤、酸化防止剤、発色剤、漂白剤、乳化剤、膨張剤、酸味料、光沢剤、香料等の添加剤；溶剤；油を添加してもよい。これらの添加剤は各種類を単独で用いてもよいし、二種類以上を組み合わせて用いてもよい。
上記食品や飲料中に配合される本発明の膵機能活性化剤の割合は、使用目的に応じて適宜調整することができるが、上記食品や飲料中に配合される成分配合品の割合は、好ましくは０．０１～２０重量％、より好ましくは０.０１～１５重量％、さらに好ましくは０．１～１０重量％である。
以下に、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
（STZマウス）
マウス（C57BL/6、４週令、雄性）にStreptozotocin（以下、「STZ」という）をマウスの体重1kgに対して40mgの割合で注射により投与した（以下、このマウスを「STZマウス」という）。１週間飼育し、血糖値を測定した。ここで、血糖値は、眼静脈叢からキャピラリーを用いて採血した血液を用いて行った。血糖値測定の方法は、以下においても同様である。なお、STZを上記の量投与することによりマウスの膵臓が一部破壊され、２型糖尿病に近い病態となった。
マウス（C57BL/6、４週令、雄性）にStreptozotocin（以下、「STZ」という）をマウスの体重1kgに対して40mgの割合で注射により投与した（以下、このマウスを「STZマウス」という）。１週間飼育し、血糖値を測定した。ここで、血糖値は、眼静脈叢からキャピラリーを用いて採血した血液を用いて行った。血糖値測定の方法は、以下においても同様である。なお、STZを上記の量投与することによりマウスの膵臓が一部破壊され、２型糖尿病に近い病態となった。
（幹細胞）
本発明に用いる幹細胞は脂肪由来幹細胞であり、マウス腹腔から摘出した脂肪組織から単離、培養したものを用いた。
本発明に用いる幹細胞は脂肪由来幹細胞であり、マウス腹腔から摘出した脂肪組織から単離、培養したものを用いた。
（膵機能活性化剤）
上記の脂肪由来幹細胞を、Culture Flaskを用いて、３７℃、５％ＣＯ２の条件下のインキュベーター内で７日間培養、培養液（Mesenchymal Stem Cell Growth Medium 2;C-28009, PromoCell社またはOpti-MEM I Reduced Serum Medium;11058-021, gibco社）中で培養し、８０％程度コンフルエントになった状態の培養上清を回収した。なお、培養上清には、脂肪由来幹細胞Exosomeが含有されている。
上記の脂肪由来幹細胞を、Culture Flaskを用いて、３７℃、５％ＣＯ２の条件下のインキュベーター内で７日間培養、培養液（Mesenchymal Stem Cell Growth Medium 2;C-28009, PromoCell社またはOpti-MEM I Reduced Serum Medium;11058-021, gibco社）中で培養し、８０％程度コンフルエントになった状態の培養上清を回収した。なお、培養上清には、脂肪由来幹細胞Exosomeが含有されている。
上記の培養上清と、マウス組み替え体レプチンと、γ－オリザノールと、イヌリンと、亜鉛と、ビタミンＣとを混合し、必要に応じて超純水または生理食塩水を加えて所定の濃度として、膵機能活性化剤１（本実施例におけるDM-X）を得た。また、DM-Xと脂肪由来幹細胞とを一定の配合比率で配合し、膵機能活性化剤３を得た。
（STZマウスの治療）
上記のＳＴＺ糖尿病マウス（ｎ＝５）に、膵機能活性化剤１として上記のDM-Xを血管注射により、２週間毎に３回投与した。ここで、１回の投与においてDM-X, 2mLを用いた。また、２週間毎に血糖値を測定した。また、３回投与後に、血中インスリン値および膵臓内のインスリン含量を測定した。図１～図３に結果を示すが、この群の結果は、#1 DM-X aloneとして示した。また、図２、図３において、「●」は各個体のデータ、「－」は平均値を示し、後述する群の結果についても同様に示した。
上記のＳＴＺ糖尿病マウス（ｎ＝５）に、膵機能活性化剤１として上記のDM-Xを血管注射により、２週間毎に３回投与した。ここで、１回の投与においてDM-X, 2mLを用いた。また、２週間毎に血糖値を測定した。また、３回投与後に、血中インスリン値および膵臓内のインスリン含量を測定した。図１～図３に結果を示すが、この群の結果は、#1 DM-X aloneとして示した。また、図２、図３において、「●」は各個体のデータ、「－」は平均値を示し、後述する群の結果についても同様に示した。
DM-X aloneとは別の群のＳＴＺ糖尿病マウス（ｎ＝５）に、膵機能活性化剤２として上記の脂肪由来幹細胞およびリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を血管注射により、２週間毎に３回投与した。ここで、１回の投与において脂肪由来幹細胞50,000cellとPBS 2mLを用いた。また、２週間毎に血糖値を測定した。また、３回投与後に、血中インスリン値および膵臓内のインスリン含量を測定した。図１～図３に結果を示すが、この群の結果は、#2 Stem cell/ PBSとして示した。また、図２、図３において、「●」は各個体のデータ、「－」は平均値を示し、後述する群の結果についても同様に示した。
また、DM-X aloneおよびStem cell/ PBSとは別の群のＳＴＺ糖尿病マウス（ｎ＝５）に、上記にて作製した膵機能活性化剤３を血管注射により、２週間毎に３回投与した。ここで、１回の投与で用いた脂肪由来幹細胞は50,000cellであり、培養上清は2mLであった。血糖値、血中インスリン値および膵臓内のインスリン含量測定は、#1 DM-X alone、 #2Stem cell/ PBSと同様のタイミングにて行った。図１～図３に結果を示すが、この群の結果は、#3 Stem cell/ DM-Xとして示した。
また、#1 DM-X alone、#2 Stem cell/ PBSおよび#3 Stem cell/ DM-Xとは別の群のＳＴＺ糖尿病マウス（ｎ＝５）に、膵機能活性化剤および幹細胞含有液を投与せず、リン酸緩衝生理食塩水（PBS）のみを２週間毎に３回投与した。血糖値、血中インスリン値および膵臓内のインスリン含量測定は、実施例１と同様のタイミングにて行った。図１～図３に結果を示すが、この群の結果は、#4 PBS aloneとして示した。
（まとめ）
図１に示すように、#4 PBS aloneの群は、病態が悪化する傾向にあり、血糖値が徐々に上昇していった。#2 Stem cell/ PBS投与群では血糖値の上昇はおこらず、現状維持を示す結果であった。一方、#1 DM-X alone及び#3 Stem cell/ DM-X投与群では、血糖値が低下する傾向にあった。
図１に示すように、#4 PBS aloneの群は、病態が悪化する傾向にあり、血糖値が徐々に上昇していった。#2 Stem cell/ PBS投与群では血糖値の上昇はおこらず、現状維持を示す結果であった。一方、#1 DM-X alone及び#3 Stem cell/ DM-X投与群では、血糖値が低下する傾向にあった。
また、図２に示すように、治療終了後の血中インスリン値は、#4 PBS aloneの群では1 μU/mLほどであったが、#2 Stem cell/ PBS投与群では高い値を示した。さらに#1 DM-X alone及び#3 Stem cell/ DM-X投与群では、より高い血中インスリン値を示した。図３に示すように、膵臓内のインスリン含量も、血中インスリン値と同様の傾向を示した。
以上から、脂肪由来幹細胞Exosomeを含むDM-Xは２型糖尿病に対して有効であることが示され、さらに脂肪由来幹細胞を加えることで効果が増強されることが認められた。DM-X中には幹細胞由来の成長因子及びExosomeが含まれていること、またX因子によって糖代謝に影響を及ぼしていることが考察される。
すなわち、体内に元々存在する幹細胞に分化誘導の刺激を与えて膵臓細胞や組織、特に膵臓β細胞へのホーミング効果を高めることによって膵機能が維持または向上することが示唆された。そのため、２型糖尿病の治療薬または予防薬として有用であることが示唆された。
Claims (9)
- 幹細胞Exosomeと、
組み替え体レプチン、γ－オリザノール、イヌリン、亜鉛およびビタミンＣの群からなる少なくとも１種と、
を含んでなる膵機能活性化剤。 - 前記幹細胞は、脂肪由来幹細胞である請求項１記載の膵機能活性化剤。
- 前記組み替え体レプチンは、マウス組み替え体レプチンまたはヒト組み替え体レプチンである請求項１または２記載の膵機能活性化剤。
- さらに幹細胞を含む請求項１または２記載の膵機能活性化剤。
- 請求項１または２に記載の膵機能活性化剤を含有する抗老化剤。
- 請求項１または２に記載の膵機能活性化剤を含有する２型糖尿病の治療薬または予防薬。
- 請求項１または２に記載の膵機能活性化剤を含有する医薬品。
- 請求項１または２に記載の膵機能活性化剤を含有する化粧品。
- 請求項１または２に記載の膵機能活性化剤を含有する食品または飲料。
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