JP2023155237A - サイクリン依存性キナーゼ５（ｃｄｋ５）阻害性ペプチド - Google Patents

サイクリン依存性キナーゼ５（ｃｄｋ５）阻害性ペプチド Download PDF

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Abstract

【課題】本発明は、認知機能を促進するおよび／または認知機能障害および不全を処置する方法および組成物に関する。【解決手段】とりわけ方法は、対象に特異的なＣＤＫペプチドインヒビターおよび薬学的に許容し得る担体を投与することにより達成される。【選択図】なし

Description

関連出願
本出願は、35 U.S.C.§119(e)の下で、２０１７年９月１８日に出願された米国仮出願番号第62/559,824号の出願日の利益を主張し、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本発明の背景
脳萎縮は、正常な加齢の間に起こり、および不全な認知機能および記憶喪失と関連付けられる神経疾患のほぼ特色である。アルツハイマー病、ハンチントン病、前頭側頭型認知症および他の関連する認知症は、認知機能における著しい損失を引き起こし、しばしば苦しめられた人を病弱な状態へ弱める。アルツハイマー病および関する認知症のための治療は、知られず、およびそれらの疾患の原因は、十分に理解されていない。その上、前臨床研究は、実質的な神経細胞喪失が起こった後、失われた記憶を回復するためのストラテジーを、いまだに模索していない。
サイクリン依存性キナーゼ５（ＣＤＫ５）、タウキナーゼおよびＣＤＫファミリーのメンバーは、脳の発達において複数の役割を果たし、および数多の神経疾患に関係づけられる。具体的に言うと、ＣＤＫ５、プロリン特異的セリン／トレオニンキナーゼは、ｐ２５タンパク質によって活性化される。これは、カルシウムの細胞内レベルが上昇時に起こり、疼痛を活性化し、そして次いでｐ３５をｐ２５へ切断し、および次いでｐ２５はＣＤＫ５と結合する。ｐ３５と似ず、ｐ２５は直ちに分解されず、およびそのＣＤＫに対する結合は定常的にＣＤＫ５を活性化し、タウの超リン酸化を導く。ＣＤＫ５活性の調節解除が、神経細胞の死、上昇したアミロイドβ（Ａβ）蓄積、シナプスの可塑性の減少、細胞骨格の妨害、形態変性、アポトーシス、および学習障害という結果になると示されてきた。
本発明の概要
本発明は、一側面において、認知機能を促進するため、およびよって記憶喪失および認知機能障害／不全の処置のための方法および組成物の発見に関する。結果的に、本発明の一側面は、認知機能障害またはこれを必要とする対象において認知機能障害または不全を処置する方法に関与する。方法は、サイクリン依存性キナーゼ５阻害性（ＣＤＫ５ｉ）ペプチドおよび薬学的に許容し得る担体を対象に投与することを含む。
本発明の一側面においては、医薬組成物は以下の構造：
ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣ Ｘ２Ｓ＊（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）を有する配列番号１のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有する、５～５０アミノ酸長のペプチドおよび薬学的に許容し得る担体を含む。いくつかの態様において、ペプチドは、配列番号２を含む。一態様において、ペプチドは、配列番号の配列内の１以上の保存的置換を含む。
いくつかの態様において、薬学的に許容し得る担体は、ポリマーを含む。一態様において、ポリマーは、親水性ブロックおよびエンドソーム溶解性（endosomolytic）ブロックを含む。別の態様において、親水性ブロックは、ポリエチレングリコールメタクリラートを含み、およびここでエンドソーム溶解性ブロックは、ジエチルアミノエチルメタクリラート－ブチルメタクリラートコポリマーを含む。いくつかの態様において、ポリマーは、以下：ｐＨ、温度、ＵＶ可視光、光照射、電場への暴露、イオン強度、およびある化学物質の濃度からなる群から選択される１以上の刺激に、特性の変化を提示することによって応答する刺激応答性ポリマーである。
いくつかの態様において、ペプチドは、配列番号１の１～２個のアミノ酸の欠失を有する。一態様において、ペプチドは、配列番号１のＮ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む。別の態様において、ペプチドは、配列番号１のＣ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む。いくつかの態様において、ペプチドは、リンカーを通して非ペプチド分子に連結される。一態様において、非ペプチド分子は、ＰＥＧまたはＴＥＧである。
いくつかの態様において、ペプチドは、強化または安定化された二次構造を有する。
本発明は、別の側面において、以下の構造：ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣ Ｘ２Ｓ＊（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）を有する配列番号１のアミノ酸配列と比べて、その長さにわたって少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有する５～２５アミノ酸長から本質的になるペプチドである。
いくつかの態様において、ペプチドは、１以上の保存的置換を含む。一態様において、ペプチドは、配列番号１のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％または９５％のアミノ酸配列同一性を有する。別の態様において、ペプチドは、配列番号１の配列内に１以上の保存的置換を含む。いくつかの態様において、ペプチドは、配列番号１の１～２個のアミノ酸の欠失を有する。一態様において、ペプチドは、配列番号１のＮ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む。別の態様において、ペプチドは、配列番号１のＣ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む。
いくつかの態様において、ペプチドは、リンカーを通して非ペプチド分子に連結される。一態様において、非ペプチド分子は、ＰＥＧまたはＴＥＧである。別の態様において、ペプチドは、強化または安定化された二次構造を有する。本発明は、別の側面において、１２～５０アミノ酸長であり、以下の構造：ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣ Ｘ２Ｓ＊（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）を有する配列番号１のアミノ酸配列を含むペプチドである。
本開示は、別の側面において、上に記載のペプチドのいずれか１つをコードする組み換え核酸を提供する。本開示の別の側面は、プロモーターに機能的に連結される、上に記載の核酸を含む、組み換え発現ベクターを包含する。本開示のさらなる側面は、上に記載の組み換え発現ベクターを含む、組み換え宿主細胞を提供する。
本発明は、別の側面において、特異的なＣＤＫ５ペプチドインヒビター、またはＣＤＫ５の定常活性を妨害することまたはＣＤＫ１もしくはＣＤＫ２と相互作用することなしにＣＤＫ５－ｐ２５／ｐ３５相互作用を妨害するペプチドインヒビターをコードする核酸を、対象へ投与することを含む、対象において神経変性状態を処置するための方法を提供する。
いくつかの態様において、対象はまた、障害を処置する追加の治療をも受ける。別の態様において、特異的なＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、経口で、経皮で、静脈内に、皮膚に、皮下に、経鼻で、筋肉内に、腹腔内に、頭蓋内に、または脳室内に投与される。
いくつかの態様において、神経変性状態は、アルツハイマー病、ハンチントン病、前頭側頭型認知症、発作誘導性記憶喪失、統合失調症、ルビンシュタイン・テイビ症候群、レット症候群、脆弱性Ｘ、レビー小体認知症、血管性認知症、ＡＤＨＤ、失読症、双極性障害および自閉症に関連する社会、認知および学習障害、外傷性頭傷害、または注意欠陥障害である。他の態様において、認知機能障害／不全は、不安症、条件付けされた恐怖反応、パニック障害、強迫性障害、外傷後ストレス障害、恐怖症、社交不安症、または物質依存性回復に関連する。
いくつかの態様において、方法は、対象を認知行動療法（ＣＢＴ）、精神療法、行動曝露治療、仮想現実曝露（ＶＲＥ）または認知矯正治療に曝すことをさらに含む。一態様において、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターが、１日に１回、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、または７日毎に投与される。
いくつかの態様において、ペプチドは、以下の構造：ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣ Ｘ２Ｓ＊（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）を有する配列番号１のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有する５～５０アミノ酸長を含む。
いくつかの態様において、ペプチドは、１以上の保存的置換を含む。他の態様においてペプチドは、配列番号１のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％または９５％のアミノ酸配列同一性を有する。別の態様において、ペプチドは、配列番号１の配列内の少なくとも保存的置換を含む。いくつかの態様において、ペプチドは、配列番号１の１～２個のアミノ酸の欠失を有する。別の態様において、ペプチドは、配列番号１のＮ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む。他の態様において、ペプチドは、配列番号１のＣ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む
いくつかの態様において、ペプチドは、リンカーを介して非ペプチド分子に連結する。一態様において、非ペプチド分子は、ＰＥＧまたはＴＥＧである。別の態様において、ペプチドは、強化または安定化された二次構造を有する。
いくつかの態様において、ペプチドは、８～２５個のアミノ酸の長さを有する。別の態様において、ペプチドは、８～２０個のアミノ酸の長さを有する。他の態様において、ペプチドは、１０～１５個のアミノ酸の長さを有する。
本発明の限定の各々は、本発明の様々な態様を網羅し得る。したがって、いかなる１つの要素または要素の組み合わせを関与する本発明の限界のそれぞれが本発明の各側面中に包含され得ることが、期待される。本発明は、その適用において構成の詳細に、および以下の記載において表記または図面において例示される、構成要素の配置に限定されない。本発明は、他の態様、および様々な手法で実践されること、または様々な手法で実施されることが可能である。また、本明細書に使用される言い回しおよび専門用語は、記載の目的のためであり、そして限定するものとして、考えられるべきではない。「包含する」、「含む」、または「有する」、「含有する」、「関与する」および本明細書におけるそれらのバリエーションは、その後にリストされる項目およびその均等物ならびに追加の項目を網羅することを意味する。
図の簡単な説明
図は、例証であるにすぎず、本明細書に開示の本発明の実施のために要求されない。
図１Ａ～１Ｂは、ｐ２５／ＣＤＫ５複合体およびＣＤＫ５阻害性ペプチドの詳細を示す。図１Ａは、ｐ２４／ＣＤＫ５複合体の構造を示す。図１Ｂは、例示のＣＤＫ阻害性ペプチドの配列を示す。配列は、上から下へ、配列番号５～１３に対応する。ＣＤＫ５阻害性ペプチド（第１段に囲まれる）の配列は、配列番号２である。
図２は、ＣＤＫ５（左）およびｐ２５（右）とＣＤＫ５ｉペプチドの可能性のある相互作用を予想する、コンピューター処理モデルを示す。 図３は、ＣＤＫ５ｉペプチドによるＣＤＫ５活性の減少を示す。 図４は、ＣＤＫ５ｉペプチドがＣＤＫ５およびｐ２５と相互作用するが、しかしＣＤＫ１またはＣＤＫ２とは相互作用しないことを示す。 図５Ａ－５Ｂは、図５ＡにおけるＣＤＫ５ｉペプチドの効果のいくつかを示し、ＣＤＫ５ｉペプチドは、基底ＣＤＫ５活性に影響しないことが示され、一方で図５Ｂは、ＣＤＫ５ｉペプチドが、Ｐ３０１Ｓマウスから脳におけるＣＤＫ５活性を有意に減少させることを示す。 図５Ａ－５Ｂは、図５ＡにおけるＣＤＫ５ｉペプチドの効果のいくつかを示し、ＣＤＫ５ｉペプチドは、基底ＣＤＫ５活性に影響しないことが示され、一方で図５Ｂは、ＣＤＫ５ｉペプチドが、Ｐ３０１Ｓマウスから脳におけるＣＤＫ５活性を有意に減少させることを示す。
図６Ａ～６Ｂは、ｆＡＤ ｉＰＳＣからの神経前駆細胞（ＮＰＣ）を示し、ＨＤＡＣ２の上方制御およびγＨ２ＡＸシグナルの増大を実証し、健康な神経ｉＰＳＣ（複数）からの細胞（図６Ｂ）と比較したＤＮＡ損傷（図６Ａ）を指し示す。 図７は、ＣＤＫ５ｉペプチドまたはそのスクランブルペプチドで処置された神経前駆細胞（ＮＰＣ）を示す。ＣＤＫ５ｉは、ＨＤＡＣ２およびγＨ２ＡＸシグナル（ＤＮＡ損傷を指し示す）のレベルを有意に減少させた一方で、スクランブルタンパク質は、効果を全く示さなかった。
図８は、ＣＤＫ５ｉペプチドを使用する、可能性のあるＣＤＫ５阻害性化合物を同定することに使用された蛍光偏光ハイスループットスクリーニングの概略図を提示する。 図９Ａは、画像化研究のために、リンカー（アミノヘキサン酸；Ａｈｘ）をもつフルオレッセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）へ、Ｎ末端において連結される配列番号３を示す。図９Ｂは、ＦＩＴＣ－Ａｈｘ－Ｃｄｋ５ｉ－Ｔａｔ（１μＭ）（配列番号３）によって２時間処置され、およびイメージングを受けたヒトｉＰＳＣ由来神経前駆細胞の結果を示す。
詳細な記載
本発明は、一側面において、神経変性障害の処置のための方法および組成物の発見に関する。実例として、本発明の化合物は、認知機能を促進するために、およびよって記憶喪失および認知機能障害／不全の処置のために有用である。結果的に、本発明の一側面は、有効量のＣＤＫ５ペプチドインヒビターをこれを必要とする対象に投与することによって、認知機能障害／不全を処置する方法を関与する。
驚くべきことに、本発明に従うと、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターが、基底ＣＤＫ５活性またはＣＤＫ５に高い相同性を有する他のＣＤＫと相互作用することなしに、選択的にＣＤＫ５とｐ２５／ｐ３５の相互作用を選択的にブロックすることが発見されている。これは、それらが乏しい特異性を示しており、および他のＣＤＫの活性に影響を与えることから、ＣＤＫ５の超活性を阻害することに使用されてきている薬物に全くの正反対である。 その結果として、先行技術のＣＤＫ５インヒビターは、正常な状態の下で基底ＣＤＫ５活性を阻害し、正常ではない神経細胞の機能をおそらく引き起こし、深刻な副作用に導く。本発明のＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、高い特異性を実証し、よって、基底ＣＤＫ５活性を妨害することに関連する深刻な副作用を避ける。加えて、該ペプチドは、血液脳関門を横切ることが可能であることが実証された。
下の例に示されるように、特異的な領域において、それらのタンパク質の１以上と相互作用することによって、ＣＤＫ５およびｐ２５／ｐ３５の結合を妨害するペプチドは、有意な治療的特性を有する。該妨害は、複合体形成を予防し、よって神経細胞死、アミロイドβの蓄積の上昇、シナプス可塑性の減少、細胞骨格の妨害、形態変性、アポトーシス、および学習障害などのＣＤＫ５／ｐ２５の顆粒の効果を避ける。特異的な複合体形成を妨害する一方で、本発明に記載のペプチドインヒビターは、構造的に類似する分子への非特異的な結合に関連する副作用を避ける。実例として、本明細書に提供される例において、ペプチドが、具体的に言うと、ｐ２５／ｐ３５へのＣＤＫ５の結合を阻害するようにデザインされ得る。配列番号２のＣＤＫ５阻害性（ＣＤＫ５ｉ）ペプチドなどのＣＤＫ５ペプチドインヒビターが、ＣＤＫ５およびｐ２５の両方と相互作用するだろうから、ｐ２５／ＣＤＫ５複合体の形成（ＣＤＫ５ｉ）を中断するであろうことが決定された。In vitro試験は、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターが、スクランブルペプチド対照と比べると、ＣＤＫ５キナーゼ活性を有意に減少させることを示した。神経変性脳のマウスモデルを使用し、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターがＣＤＫ５およびｐ３５と相互作用する一方で、それが、ＣＤＫ５に高度に相同であるＣＤＫ１またはＣＤＫ２に結合しなかったことが見出された。さらに、驚くべきことに、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターが対照マウスにおいて基底ＣＤＫ５活性に影響を与えなかったこと、しかしアルツハイマー病（ＡＤ）の脳におけるＣＤＫ５のキナーゼ活性を有意に減少させたこと、および前頭側頭型認知症(ＦＴＤ)マウスモデル（Ｐ３０１Ｓマウス）の脳における基底ＣＤＫ５活性を有意に減少させたことが見出された。それらの知見は、本発明のペプチドインヒビターが価値のある治療的な効果を提供することを実証した。
さらに、家族性（familiar）ＡＤ（ｆＡＤ）患者の線維芽細胞から創造された人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣｓ）を使用する、ヒトＡＤ関連病的状態モデルシステムが採用された。ｆＡＤ ｉＰＳＣから由来する神経前駆細胞（ＮＰＣ）は、ヒストンアデアセチラーゼ２（学習および記憶に関連する遺伝子の転写をネガティブに制御する、ＨＤＡＣ２）の上方制御を包含する数多の病的な表現型を示した；しかしながら、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターによって処置されたＮＰＣは、スクランブルペプチドに比べると、ＨＤＡＣ２およびγＨ２ＡＸシグナリングのレベル（ＤＮＡ損傷を指し示す）の有意な減少を示した。よって、本発明のいくつかの方法は、本明細書に記載のＣＤＫ５ペプチドインヒビターをこれを必要とする対象に投与することを含む。
本発明の組成物は、神経変性傷害を処置することに使用されてもよい、サイクリン依存性キナーゼ５（ＣＤＫ５）ペプチドインヒビターを包含する。
サイクリン依存性キナーゼ５（ＣＤＫ５）は、神経変性傷害における非常に多くの病的な表現型に関係づけられてきた。ＣＤＫ５の薬理学的な阻害または標的化されたノックダウンは、アルツハイマー病、パーキンソン病、脊髄性筋萎縮症、および前頭側頭型認知症を包含する、選択された神経性障害において、神経毒性およびタウ病的状態を治すと示されてきた（(Qu et al.,2007；Piedrahita et al.,2010；Zhang et al.,2013；Miller et al.,2015)。病態下の異常なＣＤＫ５活性は、ｐ２５、ｐ２５のタンパク質分解のフラグメント、によって媒介され、それは、神経変性脳における、神経・脳内炎症、タウの高リン酸化、および神経細胞死などの、様々な病的な表現型を誘発することが示されてきた。Ｐ２５／ＣＤＫ５複合体の阻害は、疾患のある状態において有益であると示されてきており；例えば、５ｘＦＡＤマウス（アルツハイマー病マウスモデル）において、ｐ２５の遮断は、アミロイドプラークおよびＡβ誘発シナプス性うつ病、グリア細胞の活性化、神経・脳内炎症、および神経細胞死を減弱化する（Amini et al.,2013；Rao et al.,2014；Seo et al.,2014）。ｐ２５の遮断はまた、シナプス可塑性およびＡＤマウスの認知パフォーマンスを回復するとも示された。
本発明のＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、ＣＤＫ５およびｐ２５の結合領域と相互作用し、そしてＣＤＫ５／ｐ２５複合体の形成を中断するペプチドである。ＣＤＫ５ペプチドインヒビターの結合は、ペプチドが関する基底ＣＤＫ５活性またはＣＤＫ１もしくはＣＤＫ２などのエフェクターまたは経路に有意な影響を与えないということにおいて特異的である。ペプチドは、ＣＤＫ５ペプチドインヒビター暴露前および後で基底ＣＤＫ５活性が実質的に類似する場合、基底ＣＤＫ５活性に有意に影響を与えないと考えられる。基底ＣＤＫ５活性のレベルは、in vitroまたはin vivo アッセイによって評価され得る。実質的に類似のままである基底ＣＤＫ５活性のレベルは、暴露前のレベルの１０％、５％、４％、３％、２％、または１％以内であってもよい。
ペプチドは、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターへの暴露の後、有意なレベルのペプチドがＣＤＫ１および／またはＣＤＫ２に結合しない場合、ＣＤＫ１またはＣＤＫ２の結合に、有意に影響を与えないと考えられる。結合のレベルは、下の例のセクションにおいて提示されるアッセイを包含する、当業者に知られるin vitroまたはin vivoアッセイによって評価され得る。有意ではないと考えられるＣＤＫ１および／またはＣＤＫ２へのペプチドインヒビターの結合のレベルは、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターおよびＣＤＫ１および／またはＣＤＫ２の混合物内の結合複合体の１０％、５％、４％、３％、２％、または１％より少ないか、またはそれらに等しくてもよい。
ＣＤＫ５ペプチドインヒビターの長さは、変化してもよい。例えば、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０アミノ酸長である。厳選された態様において、ペプチドインヒビターは、８～２０、１０～２０、８～１５、１０～１５、８～１２、１０～１２または１２アミノ酸長である。かかる短ペプチド鎖を有するペプチドは、高い構造安定性（例えば、プロテアーゼへの抵抗性）を有し、および優れた取り扱い特性および保存特性を有する。
いくつかの態様において、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、以下の配列：ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣＸ２Ｓ＊（（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）（配列番号１）のアミノ酸配列と比べて、その長さにわたって少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチドである。いくつかの態様において、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、配列番号１において表記されるアミノ酸配列に、５０～１００％（すなわち、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～１００％、８０～９０％、８０～１００％、または９０～１００％）の配列同一性を有する。例えば、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、配列番号１において表記されるアミノ酸配列に８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％より大きい、または１００％配列同一性を有していてもよい。
１つの特定の態様において、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、ＡＲＡＦＧＩＰＶＲＣＹＳ（配列番号２；図１Ｂ）のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチドである。いくつかの態様において、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、配列番号２に表記されるアミノ酸配列に、５０～１００％（すなわち、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～１００％、８０～９０％、８０～１００％、または９０～１００％）の配列同一性を有する。例えば、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、配列番号２に表記されるアミノ酸配列に、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％より大きいまたは１００％配列同一性を有していてもよい。
本明細書に開示のペプチドは、ペプチドのいずれかの端において１以上の構成要素の追加を通して改変されてもよい。実例として、ペプチドは、アミノヘキサン酸；Ａｈｘなどのリンカーの有無にかかわらず、Ｃ末端および／またはＮ末端におけるＦＩＴＣなどのラベルを追加するように改変されもよい。ペプチドはまた、ペプチドのいずれかのまたは両方の末端における機能的構成要素を包含してもよい。実例として、機能的構成要素は、リンカーの有無にかかわらず、抗体または抗体フラグメントなどの標的ペプチドもしくはドメイン、転写のトランス活性化因子（ＴＡＴ）のペプチドなどのトランスロケーションペプチドもしくはドメイン、または安定化ペプチドもしくはドメインを包含する。
例示の改変されたペプチドは、ＨＩＶ ＴＡＴペプチド（ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ）（配列番号４）に直接連結される、Ｃｄｋ５ｉぺプチド（ＡＲＡＦＧＩＰＶＲＣＹＳ）（配列番号２）を包含するＡＲＡＦＧＩＰＶＲＣＹＳＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号３）である。
一つの特定の態様において、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、ＡＲＡＦＧＩＰＶＲＣＹＳＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号３－配列番号２＋ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号４））のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって、少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸を含むペプチドである。いくつかの態様において、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、配列番号３において表記されるアミノ酸配列に、５０～１００％（すなわち、５０～６０％、５０～７０％、５０～８０％、５０～９０％、６０～７０％、６０～８０％、６０～９０％、６０～１００％、７０～８０％、７０～９０％、７０～１００％、８０～９０％、８０～１００％、または９０～１００％）の配列同一性を有する。例えば、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、配列番号３において表記されるアミノ酸配列に８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％より大きい、または１００％の配列同一性を有していてもよい。
「トランスロケーションペプチド」または「トランスロケーションドメイン」は、それが中に存在するペプチドを所望される細胞内の行き先へ方向付ける、アミノ酸のいかなる配列を指す。例えば、ポリアルギニン配列などのトランスロケーションドメインは、例として、リン酸脂質膜、ミトコンドリア膜、または核膜などの生体膜を横切るペプチドの浸透を方向付けまたは円滑にし得る。例えばトランスロケーション配列は、細胞膜を通して、および細胞質内へまたは例として核、リボソーム、ミトコンドリア、ＥＲ、リソソーム、またはペルオキシソームなどの細胞内の所望される場所へ、細胞の外側からのペプチドを方向づける。代わりに、または加えて、トランスロケーション配列は、血液脳関門、経粘膜障壁、または血液脳関門（hematoencephalic）、血液網膜の、胃腸のおよび肺の障壁などの生理的な障壁を横切って、ペプチドを方向づけることができる。
本明細書に記載のＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、天然に存在するペプチドではない。１以上のアミノ酸が天然に存在する配列から異なる場合、ほとんどのペプチドは、非天然に存在する配列を有する。いくつかの態様において、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、完全なＣＤＫ５ポリペプチド内に包含されないアミノ酸の１以上を包含する。ペプチドが天然に存在するポリペプチド（完全なＣＤＫ５）の部分を形成するアミノ酸配列（配列番号２）を有する場合において、ペプチドそのものは、天然に存在せず、それがペプチド全体よりも少ないからである。完全なＣＤＫ５ポリペプチドのすべてが本発明のペプチドインヒビターであるわけではなく、それはそれらがＣＤＫ５とｐ２５／ｐ３５結合を特異的に妨害しないからである。
ペプチドは、８アミノ酸長であってもよく、またはそれは、より長くてもよい。実例として、ペプチドは、Ｎおよび／またはＣ末端において追加のアミノ酸を有してもよい。いずれかの末端において、アミノ酸は、１と１００アミノ酸の間のいずれかであってもよい。いくつかの態様において、ペプチドは１～５０、１～２０、１～１５、１～１０、１～５またはその間のいかなる整数の範囲であってもよい。
ペプチドは、環状または非環状である。いくつかの例における環状ペプチドは、改善された安定性の特性を有する。当業者は、環状ペプチドの生産の仕方を知る。
本発明のペプチドは、保存的置換を包含してもよい。本明細書に使用されるとき、「保存的アミノ酸置換」は、ペプチドまたはポリヌクレオチドの機能またはほかの特徴を変えないまたは実質的に変えないアミノ酸または核酸を意味する。与えられるアミノ酸は、類似の物理化学的特徴を有する残基によって、交換され得、例として、１脂肪酸の残基を別のもの（相互にＩｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＡｌａなど）によって、または１つの極性残基を別のもの（ＬｙｓとＡｒｇ；ＧｌｕとＡｓｐ；またはＧｌｎとＡｓｎの間のなど）によってなどである。他のかかる保存的置換、例として、類似の疎水性の特徴を有する領域全体の置換は、周知である。保存的アミノ酸置換を含むペプチドは、所望される活性が保持されることを確認するために、本明細書に記載のいずれか１つのアッセイにおいて試験され得る。
アミノ酸は、それらの側鎖の特性における類似性：（１）無極性：Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｒｐ（Ｗ）、Ｍｅｔ（Ｍ）；（２）無電荷極性：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（単数または複数）、Ｔｈｒ（Ｔ）、Ｃｙｓ（Ｃ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、Ａｓｎ（Ｎ）、Ｇｌｎ（Ｑ）；（３）酸性：Ａｓｐ（Ｄ）、Ｇｌｕ（Ｅ）；（４）塩基性：Ｌｙｓ（Ｋ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｈｉｓ（Ｈ）に従って、グループ化され得る。代わりに、天然に存在する残基は、共通の側鎖の特性：（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；（５）鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅに基づき、グループ内に分けられることができる。非保存的置換は、それらのクラスの１つのメンバーを別のクラスと交換することを伴うだろう。特定の保存的置換は、例えば；ＡｌａをＧｌｙまたはＳｅｒに；ＡｒｇをＬｙｓに；ＡｓｎをＧｌｎまたはＨｉｓに；ＡｓｐをＧｌｕに；ＣｙｓをＳｅｒに；ＧｌｎをＡｓｎに；ＧｌｕをＡｓｐに；ＧｌｙをＡｌａまたはＰｒｏに；ＨｉｓをＡｓｎまたはＧｌｎに；ＩｌｅをＬｅｕまたはＶａｌに；ＬｅｕをＩｌｅまたはＶａｌに；ＬｙｓをＡｒｇ、ＧｌｎまたはＧｌｕに；ＭｅｔをＬｅｕ、ＴｙｒまたはＩｌｅに；ＰｈｅをＭｅｔ、ＬｅｕまたはＴｙｒに；ＳｅｒをＴｈｒに；ＴｈｒをＳｅｒに；ＴｒｐをＴｙｒに；ＴｙｒをＴｒｐに；および／またはＰｈｅをＶａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕに、などを包含する。
本出願の至る所に使用されるように、用語「ペプチド」は、サブユニットアミノ酸の配列を指すように、そのもっとも広い意味で使用される。本発明のペプチドは、Ｌ－アミノ酸、Ｄ－アミノ酸（そしてそれらは、in vivoにおいてＬ－アミノ酸に特異的なプロテアーゼに耐性がある）、またはＤ－およびＬ－アミノ酸の組み合わせを含んでいてもよい。本明細書に記載のペプチドは、化学的に合成されるか、または組み換えで発現されてもよい。ペプチドは、ＰＥＧ化（PEGylation）、ＨＥＳ化（HESylation）、ＰＡＳ化（PASylation）、グリコシル化などにより、in vivoにおいて半減期の増大を促進する他の化合物に連結されてもよく、またはＦｃ融合としてまたは脱免疫化された（deimmunized）バリアントとして生産されてもよい。当業者によって理解されるように、かかるつながり（linkage）は、共有または非共有である。
ペプチドはまた、他の分子に連結されていてもよい。ペプチドおよび分子は、相互に直接的に（例としてペプチド結合を介して）連結されるか；ペプチドであってもよいまたはペプチドでなくてもよいリンカー分子を介して連結されるか；または実例として、共通の担体分子へのつながりによって、相互に間接的に連結されてもよい。
よって、リンカー分子（「リンカー」）が、ペプチドを他の分子に連結することに、任意に使用されてもよい。リンカーは、１つから複数のアミノ酸からなるペプチド、または非ペプチド分子であってもよい。本発明において有用なペプチドリンカー分子の例は、グリシンリッチペプチドリンカーを包含し、ここで過半数のアミノ酸残基はグリシンである。好ましくは、かかるグリシンリッチペプチドリンカーは、約２０個またはより少ないアミノ酸からなる。
いくつかの態様において、リンカーは、グリシンおよびセリンからなる。実例として、リンカーは、Ｇｌｙ－Ｓｅｒ、またはＧｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒであってもよい。代わりに、片方もしくは両方の末端に１～４Ｇｌｙおよび／またはいずれかの末端に１～２Ｓｅｒをもつそれらの配列のいずれかであってもよい。それらのアミノ酸のいずれか１つの２～１０または２～５の連続して連結されるコピーを含む配列は、ペプチドリンカーとして採用されてもよい。
本発明の別の側面において、ペプチドは、尿のクリアランスおよび治療用量における減少のために、および血漿における半減期の増大のために、それらのＣ末端またはリシン残基によってポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子、顕著なことに１５００もしくは４０００ＭＷのＰＥＧ、に共有結合される。しかし別の態様において、ペプチドの半減期が、ミクロスフィアを形成する薬物送達システムのための生分解性および生物適合性のポリマー素材におけるペプチドを包含することによって、増大される。ポリマーおよびコポリマーは、実例として、ポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド－コ－グリコリド）（ＰＬＧＡ）であるペプチドは、実例として、ＰＥＧまたはＴＥＧ分子に連結される。かかる分子は、ＰＥＧ化またはＴＥＧ化されたペプチドと称される。
ペプチドは、タンパク質分解に対する抵抗を改善するいかなる化学改変によって配列番号１または２に由来してもよく；および実質的に相同のペプチドは、１以上のアミノ酸の置換による配列番号１または２から由来してもよい。「置換される」または「改変される」ことにより、本発明は、天然に存在するアミノ酸から変えらているまたは改変されているアミノ酸を包含する。
とりわけ、本目最初に記載のペプチドのＮおよび／またはＣ末端は、タンパク質分解に対して任意に保護され得る。実例として、Ｎ末端は、アセチル基の形態であってもよく、および／またはＣ末端は、アミノ基の形態であってもよい。タンパク質分解に耐性のあるペプチドの内部改変はまた、想像される。例として、ここで、少なくとも－－ＣＯＮＨ－－ペプチド結合は、改変され、および（ＣＨ２ＮＨ）の減少された結合、レトロインベルソ結合、（ＣＯ－－ＣＨ２セトメチレン（cetomethylene）結合、（ＣＨＯＨ－－ＣＨ２）ヒドロキシエチレン結合、（Ｎ－－Ｎ）結合、Ｅ－アルケン（E-alcene）結合または、－ＣＨ＝ＣＨ－結合によって交換される。
実例として、ペプチドは、アセチル化、アシル化、アミド化、架橋結合、環化、ジスルフィド結合形成、共有架橋結合の形成、システインの形成、ピログルタミン酸の形成、ホルミル化、ガンマカルボキシル化、ヨウ化、メチル化、ミリスチル化、酸化、リン酸化、等によって改変されてもよい。
本発明のペプチドは、Ｄ立体配置におけるアミノ酸（単数または複数）からなってもよく、それはペプチドをタンパク質分解に耐性があるようにする。それらはまた、いわゆる「ステープル」技術に従って、例として少なくとも２つのアミノ酸残基をオルフェンの側鎖、好ましくは、Ｃ３－Ｃ８アルケニル鎖、好ましくはペンテン－２－イル鎖、これに続き鎖の化学架橋結合によって改変することによって、安定化されてもよい。実例として、位置ｉおよびｉ＋４からｉ＋７におけるアミノ酸が、反応性のオルフェン残基を非天然アミノ酸を示す非天然アミノ酸によって置換され得る。すべてのそれらのタンパク質分耐性の化学的に改変されたペプチドが、本発明において網羅される。１以上のアミノ酸残基が、生物学的に類似の残基によって交換された場合または８０％より多くのアミノ酸が同一である、またはは約９０％より多くの、好ましくは約９５％より多くのアミノ酸が類似（機能的に同一）である場合、２つのアミノ酸は、「相同」、「実質的に相同」または「実質的に類似」である。
好ましくは、類似のまたは相同の配列は、例えばＧＣＧ（Genetics Computer Group、Program Manual for the GCG Package、Version 7、Madison、Wis.)パイルアッププログラム、または当該技術分野において知られているプログラム（ＢＬＡＳＴ、ＦＡＳＴＡ、等々)のいかなるものを使用するアラインメントによって、同定される。本明細書に記載のペプチドは、例えば、当業者に知られる.、標準的な合成方法を使用し合成され得る。好ましい態様において、ペプチドは、縮合の間にペプチドにおいて関与するものを除くアミノ酸官能基を保護する一方、適切な順序においてアミノ酸をすでに含有する実行されたフラグメントの縮合、またはこれまでに調製された数個のフラグメントの縮合によってアミノ酸残基の段階的な縮合によって得られる。とりわけ、ペプチドは、Merrifieldによって、元々記載された方法に従って合成され得る。
いくつかの例において、ペプチドは、自然のアミノ酸のみ包含し得、しかしながら、当該技術分野において知られているように、非天然アミノ酸（すなわち自然に起こらないが、ペプチド鎖に挿入され得る化合物）および／またはアミノ酸類似体が、代わりに採用されてもよい。
そのうちのいかなるものが本発明のペプチドに包含されてもよい、多くの知られる非天然アミノ酸がある。非天然アミノ酸のいくつかの例は、４－ヒドロキシプロリン、デスモシン、ガンマ－アミノ酪酸、ベータ－シアノアラニン、ノルバリン、４－（Ｅ）－ブテニル－４（Ｒ）－メチル－Ｎ－メチル－Ｌ－トレオニン、Ｎ－メチル－Ｌ－ロイシン、１－アミノ－シクロプロパンカルボン酸、１－アミノ－２－フェニル－シクロプロパンカルボン酸、１－アミノ－シクロブタンカルボン酸、４－アミノ－シクロペンテンカルボン酸、３－アミノ－シクロヘキサンカルボン酸、４－ピペリジル酢酸、４－アミノ－１－メチルピロール－２－カルボン酸、２，４－ジアミノ酪酸、２，３－ジアミノプロピオン酸、２，４－ジアミノ酪酸、２－アミノヘプタン二酸、４－（アミノメチル）安息香酸、４－アミノ安息香酸、オルト－、メタ－および／パラ－置換フェニルアラニン（例として、－－Ｃ（＝Ｏ）Ｃ６Ｈ５；－－ＣＦ３；－－ＣＮ；－ハロ；－－ＮＯ２；ＣＨ３によって置換された）、二置換フェニルアラニン、置換チロシン（例として、さらに－Ｑ＝Ｏ）Ｃ６Ｈ５；－－ＣＦ３；－－ＣＮ；－ハロ；－－ＮＯ２；ＣＨ３によって置換された）、およびスタチン（statine）である。ヒドロキシ化された、リン酸化された、スルホン化された、アシル化された、およびグリコシル化されたアミノ酸残基を包含するように、誘導体化され得る。
また、ペプチド（a peptide）またはペプチド（peptide）におけるアミノ酸の１以上は、例えば、炭水化物基、ヒドロキシル基、リン酸基、ファルネシル基、イソファルネシル基、脂肪酸基、共有のためのリンカー、官能基化、またはほかの改変、等々の化学的な実体の追加によって、改変されてもよい。ペプチド（a peptide）またはぺプチド（peptide）はまた、単一分子またはタンパク質などの、複数分子複合体であってもよい。ペプチド（a peptide）またはぺプチド（peptide）は、天然に存在するタンパク質またはペプチドのフラグメントのみであってもよい。ペプチド（a peptide）またはペプチド（peptide）は、天然に存在するか、組み換えか、もしくは合成かまたはそれらのいかなる組み合わせであってもよい。
いくつかの例において、ペプチドは、配列番号１または２の配列の少なくとも７個の（例として、７、８、９、１０、１１，１２）連続したアミノ酸を包含する（例として、含む、本質的にからなる、またはからなる）ことができる。
化学合成技術の例は、固体相の合成および液体相の合成である。固体相の合成として、例えば、合成されるべきペプチドのＣ末端に対応するアミノ酸は、有機溶媒中に可溶性であるサポートに結合され、および、適切な保護基によって保護されるアミノ基および側鎖官能基をもつ１つのアミノ酸がＣ末端からＮ末端へ１つ１つ順番に縮合されるもの、およびペプチドのアミノ基の樹脂または保護基に結合されるアミノ酸が放出されるものの交代する反応の繰り返しによって、ペプチド鎖が、よってこの仕方で延長される。固体相の合成方法は、使用される保護基のタイプに依ってｔＢｏｃ方法およびＦｍｏｃ方法に大まかに分類される。典型的に使用される保護基は、アミノ基に対してｔＢｏｃ（ｔ－ブトキシカルボニル）、Ｃｌ－－Ｚ（２－クロロベンジルオキシカルボニル）、Ｂｒ－－Ｚ（２－ブロモベンジルオイカルボニル）、Ｂｚｌ（ベンジル）、Ｆｍｏｃ（９－フルオレニルムクトキシカルボニル）、Ｍｂｈ（４，４'－ジメトキシジベンズヒドリル）、Ｍｔｒ（４－メトキシ－２，３，６－トリメチルベンゼンスルホニル）、Ｔｒｔ（トリチル）、Ｔｏｓ（トシル）、Ｚ（ベンジルオキシカルボニル）およびＣｌｚ－Ｂｚｌ（２，６－ジクロロベンジル）；グワニジノ基に対してＮＯ２（ニトロ）およびＰｍｃ（２，２，５，７，８－ペンタメチルクロマン－６－スルホニル））；およびヒドロキシル基に対してｔＢｕ（ｔ－ブチル））を包含する。所望されるペプチドの合成の後、それは脱保護反応を受け、および固体サポートから切り離される。かかるペプチド切り取り反応は、Ｂｏｃ方法について水素フッ化物またはトリ－フルオロメタンスルホン酸によって、およびＦｍｏｃ方法についてＴＦＡによって担われてもよい。
代わりに、ペプチドは、組み換え技術を使用して合成されてもよい。ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、ペプチドをコードする単離された核酸として表現されてもよい。単離された核酸配列は、ＲＮＡまたはＤＮＡを含む。本明細書に使用される時、「単離された核酸」は、ゲノム中またはＤＮＡ配列中のそれらの正常な周囲の核酸配列から、取り除かれているものである。 かかる単離された核酸配列は、これらに限定されないが、ポリＡ配列、改変されたＫｏｚａｋ配列、およびエピトープタグをコードする配列、エクスポートシグナル、および分泌シグナル、核移行シグナル、および細胞膜移行シグナルを包含する、コードされるペプチドの発現および／または精製を促進するために有用な追加の配列を含んでもよい。
よって、別の側面において、本発明は、好適な制御配列に機能的に連結された本発明のいかなる側面の単離された核酸を含む、組み換え発現ベクターを提供する。「組み換え発現ベクター」は、核酸コード領域または遺伝子を、遺伝子産物の発現に影響を与えることが可能であるいかなる制御配列に機能的に連結するベクターを包含する。本発明の核酸配列に機能的に連結される「制御配列」は、核酸分子の発現に効果を与えることが可能である。制御配列は、それらがそれらの発現を方向図けるように機能する限り、核酸配列と連続である必要はない。よって、例えば、非翻訳の、しかし転写された配列に介入することは、プロモーター配列および核酸配列の間に存在し、そしてプロモーター配列が、コード配列に「機能的に連結される」となお考えられ得る。他のかかる制御配列は、これらに限定されないが、ポリアデニル化シグナル、終止シグナル、およびリボソーム結合部位を包含する。
かかる発現ベクターは、当該技術分野において知られている、いかなるタイプのものであり得、限定されないが、プラスミドおよびウイルス由来発現ベクターを包含する。哺乳動物のシステムにおいて開示された核酸配列の発現を駆動することに使用される制御配列は、定常性（これらに限定されないが、ＣＭＶ、ＳＶ４０、ＲＳＶ、アクチン、ＥＦを包含する様々なプロモーターのいかなるものによって駆動される）または誘発性（これらに限定されないが、テトラサイクリン、ステロイド反応性を包含する誘発性のプロモーターのいかなるものによって駆動される）である。宿主細胞をトランスフェクトすることにおける使用のための発現ベクターの構成は、当該技術分野において周知であり、およびよって標準的な技術によって達成され得る。
ペプチドを生産する方法は、該ペプチドを精製するステップ、および／または該ペプチドを化学的に改変するステップを、任意に含んでいてもよい。
本発明の方法は、正常な対象において認知機能を促進することに使用されるか、または認知機能障害を有する対象を処置することに使用されてもよい。本明細書に使用されるとき、正常な対象は、不全な認知機能に関連する障害をもつと診断されていない対象である。
「認知機能」は、情報を集めることおよび／または処理すること；理解すること、理由付けすること、および／または情報および／またはアイデアの適用；アイデアおよび／または情報の要約または明細書；創造的な、問題解決の、およびおそらく洞察の行為；および学習、知覚、および／またはアイデアおよび／または情報の自覚に関する、動物またはヒト対象の精神的なプロセスを指す。精神的なプロセスは、それらの信念、所望、等から明瞭に異なる。いくつかの態様において、認知機能は、認知機能についての１以上の試験またはアッセイ評価され、およびよって任意に定義されてもよい。認知機能についてのテストまたはアッセイの非限定例は、ＣＡＮＴＡＢを包含する。（例えば、Fray et al. "CANTAB battery: proposed utility in neurotoxicology."Neurotoxicol Teratol. 1996；18(4):499-504), Stroop Test, Trail Making, Wechsler Digit Span, or the CogState computerized cognetive test (see also Dehaene et al. "Reward-dependent learning in neuronal networks for planning and decision making. Brain Res. 2000;126:21729；Iverson et al. "Interpreting change on the WAIS-III/ WMS-III in clinical samples." Arch Clin Neuropsychol. 2001;16(2):183-91；および Weaver et al. "Mild memory impairment in healthy older adults is distinct from normal aging." Cogn. 2006;60(2):146-55を参照)。
不全な認知機能は、年齢の見合う正常な対象において観察されるほどロバストではない認知機能を指し、および、認知機能が減少された状態を包含する。いくつかのケースにおいて、認知機能は、年齢の見合う正常な対象において測定された認知機能と比べると、約５％、約１０％、約３０％、またはより多くで減少される。認知機能は、いかなる検出可能な度合いで促進されてもよいが、しかしヒトにおいて、好ましくは、不全の対象が正常な生活の日常行動を行うことを許容するのに十分なほど促進される。
いくつかの態様において、認知機能障害または不全を処置するための方法が、提供される。方法は、ＣＤＫ５ｉペプチドの有効量を、これを必要とする対象に投与することを含む。ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、対象における有効な累積的なＣＤＫ５ペプチドインヒビター血清濃度を維持するように、有効に低い投薬量において投与されてもよい。ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、１日おきに１回投与されてもよい。ＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、１日に１回、２回、３回、４回、または５回、および／または１日おき、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、７日毎、等々に投与されてもよい。ＣＤＫ５ペプチドインヒビターはまた、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３，１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０日間投与されてもよい。
いくつかの態様において、認知機能障害または不全は、これらに限定されないが、アルツハイマー病、ハンチントン病、前頭側頭型認知症、発作誘導性記憶喪失、統合失調症、ルビンシュタイン・テイビ症候群、レット症候群、脆弱性Ｘ、レビー小体認知症、血管性認知症、ＡＤＨＤ、失読症、双極性障害および自閉症に関連する社会、認知および学習障害、外傷性頭傷害、脳卒中誘導性認知およ運動不全、外傷的脳損傷、認知不全媒介性神経細胞変性および神経変性喪失または注意欠陥障害に関連する。いくつかの態様において、認知機能障害または不全は、これらに限定されないが不安症、条件付けされた恐怖反応、パニック障害、強迫性障害、外傷後ストレス障害、恐怖症、社交不安症、物質依存性回復またはAge Associated Memory Impairment（ＡＡＭＩ）、およびAge Related Cognitive Decline(ARCD)に関連する。当業者は、本発明の方法が認知機能障害または不全に関連するいかなる状態を処置することに使用されてもよいことを理解するだろう。
アルツハイマー病は、６５歳を超える患者のすべてのケースのおよそ６０％を占める、認知および非認知の精神神経の症状に特徴づけられる変性的脳障害である。アルツハイマー病において、記憶を制御する認知のシステムが、損傷されている。しばしば、長期記憶が保持され、一方で、短期記憶は失われ；逆に、記憶は、混乱するようになってもよく、精通するはずの人々や場所を認識することにおける間違いという結果になる。精神学的な症状は、アルツハイマー病において共通であり、多くの患者において精神障害（幻聴および妄想）が存在する。アルツハイマー病の精神的な症状が、ドーパミン／コリンのバランスを増大することのあるドーパミンまたはアセチルコリンの濃度におけるシフトを関与する可能性がある。例えば、増大するドーパミン放出が統合失調症の陽性の症状に責任があってもよいことが、提案される。これは、ドーパミン作動性／コリン作動性の妨害という結果になってもよい。アルツハイマー病においてコリン作動性のニューロンにおける減少は、アセチルコリンの放出を有効に減少させ、ドーパミン作動性／コリン作動性のバランスの負の妨害という結果になる。確かに、統合失調症の精神障害を治すことに使用される抗精神病剤はまた、アルツハイマー病患者における精神障害を低減することにも有用であり、および本発明の方法においての使用のための本明細書に記載の組成物と組み合わされ得る。
ＣＤＫ５ペプチドインヒビターまたは本発明に関する他の化合物を投与することによってアルツハイマー病を有する対象における記憶を再補足するための方法がまた、本発明に従って提供される。かかる方法は、インヒビターを投与すること、および対象がこれまでに失われた記憶の再補足を同定することをモニタリングすることを、任意に関与してもよい。対象は、当該技術分野において知られている日常的な試験によってモニターされてもよい。実例として、いくつかは、上に記載のＤＳＭなどの本において、または医科学文献において記載されている。
本発明はまた、有効量のＣＤＫ５ｉペプチドを投与することによってハンチントン病を処置するための方法を提供する。ハンチントン病は、死への容赦ない進行に関連する認知機能低下という結果になる神経学的疾患である。ハンチントン病に関連するヌル認知症状は、知能のスピード、注意、および短期記憶の喪失、および／または挙動的な症状を包含する。いくつかの態様において、処置の方法は、ＡＮＸＡ１、ＡＸＯＴ、ＣＡＰＺＡ１、ＨＩＦ１Ａ、ＪＪＡＺ１、Ｐ２Ｙ５、ＰＣＮＰ、ＲＯＣＫ（ｐ１６０ＲＯＣＫ）、ＳＦ３Ｂ１、ＳＰ３、ＴＡＦ７およびＹＩＰＰＥＥからなる群から選択されるハンチントン病のバイオマーカー遺伝子の発現レベルに基づいて選択されない。いくつかの態様において、診断および処置の方法は、米国特許出願US2007/0015183号において開示されたハンチントン病バイオマーカー遺伝子の発現レベルに基づき選択されない。いくつかの態様において、診断および処置の方法は、病歴、家族歴、またはイメージング試験に基づき選択される。
本発明は、有効量のＣＤＫ５ｉペプチドを投与することによって、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）を処置するための方法をさらに提供する。ＦＴＤは、典型的には脳の前頭葉および側頭葉における、進行性の神経細胞喪失に関連する認知機能低下という結果になる神経学的疾患である。ＦＴＤに関連する認知症状は、社会的および個人的挙動、感情の鈍り、および表現的および受容的言語療法における欠陥である。診断および処置の方法は、病歴、家族歴、神経心理学的試験、または脳イメージング試験に基づき選択されてもよい。
本明細書に使用されるとき、状態または患者を処置することは、臨床試験を包含する、有益なまたは所望される結果を得るステップを採ることを指す。有益なまたは所望される臨床結果は、これらに限定されないが、認知の機能障害を関与する障害に関連する１以上の症状の軽減または回復、疾患の程度の縮小、疾患の進行の遅延または減速、回復、病状の緩和または安定化、および認知機能の改善または認知機能減退の速度の減少などの他の有益な結果を包含する。
いくつかの態様において、対象は、ＣＤＫ５ｉペプチドに加えて、障害を処置する追加の治療を受けてもよい。組み合わせの治療は、特定の疾患を処置するために適切ないかなるタイプの治療であってもよい。実例として、組み合わせ治療は、行動療法または医薬である。行動療法は、限定されないが、電気痙攣発作療法、運動、集団療法、トークセラピー、または条件付けを含む。別の態様において、行動療法は、認知行動療法である。進行中の方法において使用されてもよい行動療法の例が、記載される。例えば、Cognetive-Behavioral Therapies by K. Dobson, ed., Guilford Publications, Inc., 2002；The New Handbook of Cognetive Therapy Techniques by Rian E. McMullin；Norton、W. W. & Company, Inc., 2000；およびCognetive Therapy: Basics and Beyond by Judith S. S. Beck, Guilford Publications, Inc., 1995,においてなど、その全体が明細書全体に参照として組み込まれる。
ＣＤＫ５ｉペプチドインヒビターは、日ごと、週ごと、または月ごと、１以上の用量においてなど、反復的に投与されてもよい。それは、予防的に投与されてもよい；すなわち症状が表れる前に、定期的に（日ごと、週ごと、月ごと、等々）、およびいくつかのケースにおいて、不定期的に、例としていつ症状が始まったとしても、投与されてもよい。
特異的なＣＤＫ５ペプチドインヒビターは、経口で、経皮で、静脈内に、皮膚に、皮下に、経鼻で、筋肉内に、腹腔内に、頭蓋内に、または脳室内に投与されてもよい。
本発明はまた、有効量のＣＤＫ５ペプチドインヒビターを投与することによって正常な対照における認知機能を改善することに関する。認知機能を改善することは、それが年齢に見合う正常な不全のない対象の機能により近く類似するまたはそれを超過するように、対象における認知機能を促進することを包含する。正常な対象は、不全な認知機能に関連するいかなる障害または状態を持つと診断されていない対象である。対象の認知のパフォーマンスは、様々な因子によって影響され、および本発明の方法は、例えば睡眠不足、精神疲労、肉体疲労、または過疲労などのいかなる因子に相反するように実施され得る。
対象は、これらに限定されないが、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、七面鳥、ニワトリ、および例としてサルの、霊長目の動物を包含するヒトまたは脊椎動物、または哺乳動物を意味するものである。いくつかの態様において、対象は、さもなければＣＤＫ５および／またはｐ２５インヒビターの必要ないものである。ヒト対象が、好ましい。
用語、本発明の化合物の有効は、所望される生物的効果を認知することに十分な必要なまたは十分な量を指す。例えば、本発明の化合物の治療的な有効量は、メモリーへのアクセスを復元することに十分な量である。本明細書に提供される教示と組み合わされ、様々な活性化合物、および効能、比較バイオアベイラビリティ、患者の体重、副作用効果の重症度および投与の好ましい方式などの秤量因子の間から選ぶことによって、実質的な毒性を引き起こさないが、およびしかし特定の対象を処置することに全体的に有効な予防的または治療的処置レジメンが、計画され得る。いかなる特定の適用のための有効量は、処置される疾患または状態、投与される特定の治療化合物対象のサイズ、または疾患または状態の重症度などのかかる因子によって変化し得る。当業者は、過度の実験法を必要とせずに、本発明の特定の治療的化合物の有効量を経験的に決定し得る。
一つの例において、本開示のＣＤＫ５ペプチドインヒビターの有効量は、静脈内に投与される場合、ｋｇ体重当たり約１００μｇ～１００ｍｇに変動し得る。いくつかの態様において、治療的に有効な量は、約２０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約４５ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約５５ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇまたは約９０ｍｇ／ｋｇなどの２０～８０ｍｇ／ｋｇ体重、３０～７０ｍｇ／ｋｇ体重、または４０～６０ｍｇ／ｋｇを包含する、腹腔内に投与される１０～１００ｍｇ／ｋｇ体重である。用量は、単一でまたは分けられた要領で与えられてもよい。投与されるべきＣＤＫ５ペプチドインヒビターの量は、そのすべてが当業者に知られる他の因子のあいだで、処置されるべき状態、投与の選択されたルート、対象の年齢、性別および体重、および対象の症状の重症度などの様々な関係のある因子に照らし合わせて決定される。例示の用量は、いかなる形でも本発明の範囲を限定するべきではない。
本明細書に記載の化合物の送達のための対象用量は、典型的には、連続の日々の一連の期間、１日１回投与されてもよく、適用に依っては、日ごと、週ごと、または月ごとおよびその間のいかなる量の時間で与えられ得るだろう。一態様において、組成物は、少なくとの２連続日の間、１日1回投与される。別の態様において、治療的な化合物（ＣＤＫ５ペプチドインインヒビターおよび薬学的に許容し得る担体）は、１日おき１回、または投与の間に少なくとも２日で１日１回投与される。与えられた用量においてヒトにおけるいくつかの変動があるという理由から、その容量が、いくつかの例において独自のものにされてもよい。かかる操作は、本明細書に見出される教示の観点における当業者の技術内である。
所望される生物学的効果は、神経変性疾患に関連する１以上の症状の減少または阻害であってもよい。１以上の症状は、所望される生物学的効果を有する目的で、完全に（すなわち、１００％）除去されなければならないわけではない。処置なしの症状と比較して、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターの投与は、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも１００％（すなわち、完全に）などの、所望される程度によって症状（単数または複数）を減少させてもよい。代わりに、所望される生物的効果は、脳におけるＣＤＫ５キナーゼの減少または阻害であってもよい。
本発明の製剤は、薬学的に許容し得る濃度の塩、緩衝剤、防腐剤、相溶性のある担体、および任意の他の治療的な成分を日常的に含有してもよい薬学的に許容し得る溶液において投与される。
治療における使用のために、本発明の治療的な化合物の有効量が、治療剤または化合物を、例として粘膜の、全身性の、所望される表面に送達するいかなる方式によって対象へ投与され得る。本発明の医薬組成物を投与することは、当業者に知られるいかなる方法によって達成されてもよい。本発明は、本発明のいかなる態様または組み合わせのペプチド、および薬学的に許容し得る担体を含む。医薬組成物は、本発明のペプチドに加えて、（ａ）リオプロテクタント（lyoprotectant）ｂ）界面活性剤；（ｃ）充填剤；（ｄ）浸透圧調整剤；（ｅ）安定剤；（ｆ）防腐剤および／または（ｇ）緩衝液を含んでいてもよい。リオプロテクタントは、実例として、実例として、スクロース、ソルビトールまたはトレハロースを包含してもよい。他の態様において、医薬組成物は、例として、ペプチドと組み合わせられたとき、凍結乾燥されたまたは液体の形におけるペプチドの化学的なおよび物理的な不安定性を実質的に予防するまたは減少させる分子などの安定剤を加えて包含する。例示の安定剤は、スクロース、ソルビトール、グリシン、イノシトール、ナトリウム塩化物、メチオニン、アルギニン、およびアルギニン塩酸塩を包含する。
経口投与のために、本発明の治療的化合物が、当該技術分野において周知である薬学的に許容し得る担体とともに活性化合物（単数または複数）と組み合わせることによって容易に製剤化され得る。かかる担体は、本発明の化合物を、処置されるべき対象による経口的な摂取のために、錠剤、ピル、ドラジェ、カプセル、液剤、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液、等として製剤化することを可能にする。経口使用のための医薬品が固体賦形剤として得られることができ、および錠剤またはドラジェの芯を得ることが所望される場合、結果として生じる混合物を任意に粉砕し、好適な補助剤を加えた後、顆粒状の混合物を処理され得る。好適な賦形剤は、とりわけ、ラクトース、スクロース、マンニトールまたはソルビトールを包含する糖などの充填剤；例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などのセルロース製剤である。所望される場合、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸またはその塩などの崩壊剤が加えられもよい。任意に経口製剤がまた、生理食塩水または緩衝材中に製剤化されてもよく、すなわち、内部の酸性条件を中和するためのＥＤＴＡまたはいかなる担体なしに投与されてもよい。
また具体的に言うと、想定されるのは、上の構成要素（単数）または構成要素（複数）の経口剤形である。構成要素（単数）または構成要素（複数）は、誘導体の経口送達が効果的であるように、化学的に改変されてもよい。一般に、想定される化学的な改変は、該部分が（ａ）タンパク質分解の阻害；および（ｂ）胃または腸からの血流への取り込みを許容する、構成要素分子そのものへの１以上の部分の結合（attachment）；および胃または腸からの血流の中への取り込みである。また所望されるのは、体中の構成要素（単数）または構成要素（複数）の全体的な安定性の増大および循環時間の増大である。かかる部分の例は、以下：ポリエチレングリコール、エチレングリコールのコポリマーおよびプロピレングリコール、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンおよびポリプロリンを包含する。使用されてもよいだろう他のポリマーは、ポリ－１，３－ジオキソランおよびポリ－１，３，６－チオキソカンおよびポリエチレングリコール部分である。
いくつかの態様において、ポリマーは、ブロックポリマーであり、および親水性のブロックおよびエンドソーム溶解性のブロックを含む。いかなる好適な親水性のブロックおよびエンドソーム溶解性ブロックが使用されてもよい。一態様において、親水性のブロックは、ポリエチレングリコールメタクリラートを含む。別の態様において、エンドソーム溶解性ブロックは、ジエチルアミノエチルメタクリラートブチルメタクリラートコポリマーを含む。さらなる態様において、ポリマーは、ｐＨ、温度、ＵＶ可視光、光照射、電場への暴露、イオン強度、および特性変化を提示することによるある化学物質の濃度からなる群から選択される、１以上の刺激に応答する刺激応答性ポリマーである。本明細書に使用される時、「刺激応答性ポリマー」は、刺激に対する応答における連動性の特性を変化するポリマーである。刺激応答性ポリマーは、ｐＨ、温度、ＵＶ可視光、光照射、電場への暴露、イオン強度およびある化学物質の濃度などの外部刺激における変化に、特性の変化を提示することによって応答する。化学物質は、カルシウムイオンなどの多価イオン、いずれかの電荷のポリイオン、またはグルコースなどの酵素基質であることができるだろう。例えば、温度応答性ポリマーは、水性溶液中の、より低い臨界溶液温度を提示することによって、温度における変化に応答性であってもよい。刺激応答性ポリマーは、２以上の外部刺激における組み合わされた同時のまたは連続の変化への応答における特性の変化を提示する、複数応答性ポリマ―であってもよい。刺激応答性ポリマーは、フォールディング／アンフォールディングの転移、可逆的な沈殿挙動、または温度、光、ｐＨ、イオン、または圧力などの刺激への応答における他の原体の変化などの可逆的な原体または物理化学的な変化を提示する合成または自然のポリマーであってもよい。代表的な刺激応答性ポリマーは、温度感受性ポリマー、ｐＨ感受性ポリマー、および光感受性ポリマーである。
胃、小腸（十二指腸、空腸、または回腸）、または大腸であってもよい。当業者は、胃の中で溶解しないだろうが、しかし十二指腸において、または小腸における他の場所において材料を放出するであろう入手可能な製剤を有する。好ましくは、放出は、治療剤の保護によるかまたは腸においてなど胃環境を超える生物学的に活性な材料の放出によるのいずれかで、胃の環境の有害な効果を避けるだろう。
完全な胃部の耐性を確実にするために、少なくともｐＨ５．０に不透過なコーティングが重要である。腸溶性のコーティングとして使用される、より一般的な不活性成分の例は、セルロースアセタートトリメリト酸（ＣＡＴ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタル酸（ＨＰＭＣＰ）、ＨＰＭＣＰ５０、ＨＰＭＣＰ５５、ポリ酢酸ビニルフタル酸（ＰＶＡＰ）、Eudragit L30D、Aquateric、セルロースアセタートフタル酸（ＣＡＰ）、Eudragit L、 Eudragit S、およびShellacである。それらのコーティングは、混合フィルムとして使用されてもよい。
胃に対する保護を目的としない錠剤において、コーティングまたはコーティングの混合物がまた、使用され得る。これは、糖コーティング、または錠剤をよりのみこみやすくするコーティングを包含し得る。カプセルは、乾燥治療薬すなわち粉末の送達のためのハードシェル（ゼラチンなど）からなってもよく；液体形のために、ソフトゼラチンシェルが、使用されてもよい。カシェ剤のシェル材料は、濃厚なデンプン、または他の可食紙であり得るだろう。ピルのために、トローチ剤、成形錠剤または粉薬錠剤、湿性マッシング技術が、使用され得る。
治療薬は、約１ｍｍの粒子サイズの顆粒もしくはペレットの細かい複数粒子性の形態として製剤中に包含され得る。カプセル投与のための材料の製剤はまた、粉末、軽く圧縮されたプラグ、または錠剤としてでさえあり得る。治療薬は、圧縮により調製されてもよい。
着色料および香味料のすべてが、包含されてもよい。例えば、治療剤が製剤化され（リポソームまたはミクロスフィアカプセル化によってなど）、および次いで着色料および香味料を含有する冷蔵飲料などの可食製品の中にさらに含有されてもよい。
不活性な材料によって治療薬の体積を希釈するかまたは増大してもよい。それらの希釈剤は、特にマンニトール、ラクトース、無水ラクトース、セルロース、スクロース、改変デキストランおよびデンプンなどの炭水化物を包含し得るだろう。ある無機塩が、カルシウム三リン酸、炭酸マグネシウムおよびナトリウム塩化物を包含する潤展剤としてもまた使用されてもよい。いくつかの市販の希釈剤は、Fast-Flo、Emdex、STA-Rx 1500、EmcompressおよびAvicellである。
崩壊剤は、治療薬を固形剤形へ製剤することに包含されてもよい。崩壊剤として使用される材料は、これらに限定されないが、デンプンに基づく商業的崩壊剤、Explotabを包含するデンプンを包含する。ナトリウムデンプングルコラート、Amberlite、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ウルトラミロオペクチン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸カルボキシメチルセルロース、天然スポンジ、ベントニットのすべてが使用されてもよい。崩壊剤の別の形は可溶性カチオン交換樹脂である。粉末状のガムは、崩壊剤としておよび結合剤として使用されてもよく、およびそれらは寒天、カラヤまたは糖がカラントなどの粉末状ガムを包含し得る。アルギニン酸およびそのナトリウム塩はまた、崩壊剤としても有用である。治療剤を一緒に保ち硬い錠剤を形成するように使用されてもよい結合剤は、アカシア、トウガカラント、デンプンおよびゼラチンなどの天然の産物からの材料を包含する。他のものは、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）およびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）を包含する。ポリビニルピロリデン（ＰＶＰ）およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）が、両方、アルコール溶液中、治療薬を顆粒化することにおいて使用され得るだろう。
抗摩擦剤が、製剤プロセスの間にくっつくことを予防するために治療薬の製剤に包含されてもよい。潤滑剤が、治療薬とダイウォールの間の層として使用されてもよく、およびこれらに限定されないが、それらは；そのマグネシウムおよびカルシウム塩、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、液体パラフィン、植物油およびステアリン酸ワックスを包含するステアリン酸を包含し得る。可溶性の潤滑剤がまた、使用されてもよく、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、様々な分子量のポリエチレングリコール、Carbowax 4000および6000などである。
製剤の間の薬物の流れの特性を改善するかもしれず、および圧縮の間の再配置を助ける滑剤が足されるかもしれない。滑剤は、デンプン、タルク、発熱性シリカおよびシリコアルミン酸を包含してもよい。
治療薬を水性環境へ溶解することを助けるために、界面活性剤が湿潤剤として加えられてもよい。界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルナトリウムスルフホサクシネートおよびスルホン化ジオクチルナトリウムなどのアニオン性洗浄剤を包含してもよい。カチオン性洗浄剤が使用されることもあるかもしれず、および塩化ベンザルコニウムまたは塩化ベンザトニウムを包含することができるだろう。界面活性剤として製剤中に包含され得るだろう可能な非イオン性洗浄剤のリストは、ラウロマクロゴール４００、ステアリン酸４０ポリオキシル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、５０および６０、モノステアリン酸グリセロール、ポリソルベート４０、６０、６５および８０、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロースである。それらの界面活性剤は、治療剤の製剤中に単独でまたは異なる比率の混合物としてのいずれかで存在し得るだろう。
経口的に使用され得る医薬品は、ゼラチンで作製された押し込み型カプセル、ならびにゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトールなどの可塑剤で作製された柔らかく密封されたカプセルを包含する。押し込み型カプセルは、ラクトースなどの充填剤、デンプンなどの結着剤、および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤および、任意に安定剤を含有し得る。柔らかいカプセルにおいて、活性化合物は脂肪油、液体パラフィン、または液体ポリエチレングリコールなどの好適な液体中に溶解されるか、または懸濁されてもよい。加えて、安定剤が、追加されてもよい。経口投与のために製剤化されたミクロスフィアがまた、使用されてもよい。かかるミクロスフィアは、当該技術分野において、十分に定義されている。経口投与のためのすべての製剤は、かかる投与のために、好適な投与量におけるべきである。
口腔投与のために、組成物は、従来のやり方において製剤化された錠剤またはトローチ剤の形を採ってもよい。
吸入投与のために、本明細書に従う使用のための化合物は、例として、ジクロロフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロメタン、二酸化炭素またはほかの好適なガスなど、好適な噴霧剤の使用によって、圧縮パックまたは噴霧器からエアゾールスプレーの体裁の形で便利に送達されてもよい。圧縮されたエアゾールの場合、投与量単位は、メーター量を送達するバルブを提供することによって決定されてもよい。吸入器または注入器における使用のための例として、ゼラチンのカプセルおよびカートリッジが、化合物およびラクトースまたはデンプンなどの好適な粉末基材の粉末混合を含有するように製剤化されてもよい。
本発明の実施における使用のために想定されるのは、それらのすべてが当業者に精通される、噴霧器、定量噴霧式吸入器、および粉末吸入器を包含する治療製品の肺送達のためにデザインされた広範な機械的なデバイスである。
本発明の実施のための市販デバイスのいくつかの特異的な例は、Mallinckrodt, Inc., St. Louis, Missouriによって製造されたUltravent Inhaler；Marquest Medical Products, Englewood, Coloradoによって製造されたAcorn II Inhaler；Glaxo Inc., Research Triangle Park, North Carolinaによって製造された、Ventolin Metered Dose Inhaler；およびFisons Corp., Bedford, Massachusetts によって製造されたSpinhalater Powder inhalerである。
すべてのかかるデバイスは、治療剤の分配のために好適な製剤の使用を要求する。典型的には、各製剤は、採用されるデバイスのタイプに特異的であり、および通常の希釈剤および／または治療において有用な担体に加えて、適切な噴霧剤材料の使用に関与してもよい。また、リポソーム、マイクロカプセルもしくはミクロスフィア、包括複合体、または担体の他のタイプの使用が、想定される。化学的に改変された治療剤はまた、化学改変のタイプまたは採用されるデバイスのタイプに依って異なる製剤中に調製されてもよい。
ジェットまたは超音波のいずれかの、噴霧器で使用するために好適な製剤は、水中に溶解する治療債を典型的には含むだろう。製剤はまた、緩衝液および単糖（例として、浸透圧の安定化および調節のため）を包含してもよい。噴霧器製剤はまた、エアゾール形成における溶液の噴霧化によって引き起こされる化合物の表面誘導凝集を減少させるまたは予防するための、界面活性剤をも含有する。定量噴霧式吸入器によって使用するための製剤は、一般に、界面活性剤の補助剤とともに噴霧剤に懸濁された治療剤を含有する、細かく分けられた粉末を一般に含むだろう。噴霧剤は、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール、および１，１，１，２-テトラフルオロエタンを包含する、クロロフルオロ炭素、ヒドロクロロフルオロ炭素、ヒドロフルオロ炭素、または炭化水素、またはそれらの組み合わせなどこの目的のために採用されるいかなる従来の材料であってもよい。好適な界面活性剤は、ソルビタントリオレイン酸および大豆レシチンを包含する。オレイン酸はまた、界面活性剤として有用であってもよい。
粉末吸入デバイスから分配するための製剤は、治療剤を含有する細かく分けられた粉末を含むだろう、およびまたデバイスから粉末の分配を円滑にする量、例として製剤の５０から９０％において、ラクトース、ソルビトール、スクロース、またはマンニトールなどの充填剤をも包含してもよい。治療剤が、１０ｍｍ（またはミクロン）の平均粒子サイズをもつ粒子の形に、最も有利に調製されるはずであり、最も好ましくは、遠位の肺への最も有効な送達のために、０．５～５ｍｍである。
本発明の医薬組成物の経鼻の送達がまた、想定される。経鼻の送達は、肺における製品の蓄積の必要なしに、本発明の医薬組成物の治療製品を鼻へ投与した後の血流への直接な通過を許容する。経鼻の送達のための製剤は、デキストランまたはシクロデキストランをもつものを包含する。
経鼻投与のために、有効なデバイスは、定量スプレーが取り付けられた小さく、硬いビンである。一態様において、定量は、チャンバーがチャンバーにおける液体が圧縮されたときスプレーを形成することにより、エアゾール製剤をエアゾール化するような寸法である開口部を有する、定義された体積のチャンバーの中へ本発明の溶液を引き出すことにより送達される。チャンバーは、本発明の医薬組成物を投与するために圧縮される。特異的な態様において、チャンバーは、ピストン配置である。かかるデバイスは、市販である。
代わりに、圧搾されたときにスプレーを形成することによりエアゾール製剤をエアゾール化するような寸法である開口部または開きをもつプラスチック圧搾ビンが、使用される。開きは、通常ビンの最上部において見出され、および最上部は、エアゾールの効果的な投与のための経鼻通路において部分的にフィットするように一般に先細である。好ましくは、経鼻吸入器は、薬物の測定された用量の投与のたの、エアゾール製剤の定量を提供するだろう。
化合物は、全身性にそれらを送達することが所望される場合、例として、ボーラス静注または継続的注入によって、注射による非経口投与のために製剤化されてもよい。注射のための製剤は、例として、加えられた防腐剤のある、アンプル中または複数用量容器中に、単位用量の形においてあたえられてもよい。組成物は、かかる懸濁液、油性または水性ビヒクル中の溶液もしくはエマルションとしてのかかる形を採ってもよく、および懸濁の、安定化のおよび／または分散剤などの製剤化剤を含有してもよい。
非経口投与のための医薬製剤は、水可溶性の形における活性化合物の水性溶液を包含する。加えて、活性化合物の懸濁液が、適切な油性の注射懸濁液として調製されてもよい。好適な親油性の溶媒またはビヒクルは、ゴマ油、またはオレイン酸エチルまたはトリグリセリド、またはリポソームなどの合成脂肪酸エステル脂肪油を包含する。水性注射懸濁液は、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール、またはデキストランなど懸濁液の粘度を増大する物質を含有していてもよい。任意に、懸濁液はまた、好適な安定剤または高度に濃縮された溶液の調製を許容する、化合物の可溶性を増大する剤を包含していてもよい。
代わりに、活性化合物は、使用の前に、好適なビヒクル、例として、滅菌パイロジェンフリー水による構成のための粉末の形にあってもよい。これまでに記載された製剤に加えて、化合物はまた、デポ剤として製剤化されてもよい。かかる長期作用製剤は、好適なポリマーもしくは疎水性の材料（例えば許容し得る油におけるエマルションとして）またはイオン交換樹脂によって、あるいはやや溶けにくい誘導体として、例えばやや溶けにくい塩として製剤化されてもよい。
医薬組成物はまた、好適な固体もしくはゲル相担体または賦形剤を含んでもよい。かかる担体または賦形剤の例は、これらに限定されないが、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールなどのポリマーを包含する。
好適な液体または固体医薬品の形は、例えば、吸入のために水性もしくは生理食塩水溶液、マイクロカプセル化された、渦巻き型にされた、顕微の金粒子にコーティングされた、リポソームに含有される、噴霧された、エアゾールの、皮膚への埋め込みペレット、または皮膚の中へスクラッチされるための鋭い物体上に乾燥されたものである。医薬組成物はまた、顆粒、粉末、錠剤、コーティングされた錠剤、(マイクロ)カプセル、座薬、シロップ、エマルション、懸濁（液）、クリーム、ドロップまたはその調製において賦形剤および添加剤および／または補助剤、崩壊剤、バインダー、コーティング剤、膨張剤、潤滑剤、香味剤、甘味剤、溶解剤が上に記載のとおり習慣的に使用される、活性化合物の遅延性放出をともなう調製を包含する。医薬組成物は、様々な薬物送達システムにおける使用に好適である。薬物送達のための方法の簡潔なレビューは、Langer, Science 249:1527-1533, 1990を参照、そしてそれは参照により本明細書に組み込まれる。
本発明の治療薬化合物および任意に他の治療薬は、それ自体（ニート）または薬学的に許容し得る塩の形態で投与されてもよい。医薬に使用される場合、塩は、薬学的に許容し得るべきであるが、しかし非薬学的に許容し得る塩がその薬学的に許容し得る塩を調製することに便利に使用されてもよい。かかる塩は、これらに限定されないが、以下の酸：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、リンゴ酸、酢酸、サリチル酸、ｐ－トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸、ナフタレイン－２－スルホン酸、およびベンゼンスルホン酸から調製されるものを包含する。また、かかる塩が、アルカリメタ１またはそれらのカルボン酸群のナトリウム、カリウムまたはカルシウム塩などのアルカリ土類塩としても調製され得る。
好適な緩衝液剤は、酢酸および塩（例として１～２％ｗ／ｖ）；クエン酸および塩（例として、１～３％ｗ／ｖ）；およびリン酸および塩（例として、０．８～２％ｗ／ｖ）を包含する。好適な防腐剤は、塩化ベンザルコニウム（例として、０．００３～０．０３％ｗ／ｖ）；クロロブタノール（例として、０．３～０．９％ｗ／ｖ）；パラベン（例として、０．０１～０．２５％ｗ／ｖ）およびチメロサール（例として、０．００４～０．０２％ｗ／ｖ）を包含する。
本発明の医薬組成物は、薬学的に許容し得る担体中に、任意に包含される本発明の有効量の治療薬化合物を含有する。用語、薬学的に容認し得る担体は、１以上の相溶性のある固体もしくは液体充填剤、希釈剤、またはヒトもしくは他の脊椎動物への投与に好適であるカプセル化物質を意味する。用語、担体は、活性成分が適用を円滑にするように組み合わされる、天然もしくは合成の有機または無機成分を意味する。医薬組成物の構成要素がまた、実質的に所望される医薬品の効率を不全にするであろう相互作用がまったくないようなやり方で、本発明の化合物と、および互いに、混合されることが可能である。
治療剤が、血液脳関門を横切って治療剤を送達することが可能である製剤を使用して、脳へ送達されてもよい。治療薬を脳に送達することへの１つの障害は、脳の生理および構造である。血液脳関門は、内皮細胞の単一層によって裏打ちされた特殊化した毛細血管からなる。細胞間の領域は、密着結合によって密封され、そのため血液から脳への唯一のアクセスは、内皮細胞をとおしてである。障壁は、親油性分子などのある物質のみを通すことを許容し、および他の有害な化合物および病原体を外に留める。よって、親油性の担体は、非親油性の化合物を脳へ送達することに有用である。実例として、ＤＨＡ、ヒト脳において天然に存在する脂肪酸は、それに共有的に結合した（attached）薬物を脳へ送達するために有用であることが見出されてきた（米国特許6407137号）。米国特許5,525,727号は、薬物種の脳への特異的および持続的な送達のためのジヒドロピリジンピリジニウム塩担体の酸化還元システムを記載する。米国特許5,618,803号は、ホスホン酸塩誘導体による表雨滴化された薬物送達を記載する。米国特許7119074号は、血液脳関門を横切る化合物を送達するためのＰＥＧ－オリゴマー／ポリマーに共役される治療薬化合物の両親媒性のプロドラックを記載する。本明細書に記載の化合物は、親油性の担体への共有結合（covalent attachment）によって改変されてもよく、あるいは親油性の担体とともに製剤されてもよい。他は、当業者に知られる。
本発明の治療剤は、記憶修復を高めることまたは他の症状もしくは記憶喪失と関連する障害の原因を処置することのために、他の治療薬とともに送達されてもよい。実例として、環境的な濃縮（ＥＥ）が、記憶を高めるために使用されてきた。ＥＥは、対象のまわりに刺激的な環境を創造することに関与する。他の治療薬はまた、根本的障害を処置するか、または記憶想起を亢進するように組み合わされてもよい。
本発明の化合物と単位用量またはキットの形における他の薬物の組み合わせの例は、以下：抗アルツハイマー薬、ベータセクレターゼインヒビター、ガンマセクレターゼインヒビター、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素インヒビター、イブロプロフェンを包含するＮＳＡＩＤｓ、メマンチンなどのＮ－メチル－Ｄ－アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニスト、ガランタミンなどのコリンエステラーゼインヒビター、リバスチグミン、ドネペジル、およびタクリン、ビタミンＥ、ＣＢ－１受容体アンタゴニストまたはＣＢ－１受容体インバースアゴニスト、ドキシサイクリンおよびリファンピンなどの抗生物質、抗アミロイド抗体、または有効性、安全性、便利性を増大する、または本発明の化合物の不要な副作用もしくは毒性を減少させるいずれかの、受容体または酵素に影響を与える薬物による組み合わせを包含する。上記の組み合わせのリストは、実証のみであり、いかなる形でも限定を意図しない。
本発明は、構成要素のいずれか１つまたは集まりを指す物品を包含する。いくつかの態様において、物品は、キットである。物品は、本発明の医薬品または診断グレードの化合物を１以上の容器に包含する。物品は、本発明の化合物の使用を促進または記載する指示またはラベルを包含してもよい。
本明細書に使用されるとき、「促進される」は、アルツハイマー病などの認知障害の処置と結びつく本発明の組成物に関連する、教育、病院および他の臨床指示の方法、医薬品のセールスを包含する製薬産業活動、および記述、口述および電子のコミュニケ―ションを包含するいかなる広告または他の促進活動を包含する医薬品の産業活動を包含する、ビジネスをするすべての方法を包含する。
「指示」は、促進の構成要素を定義し得、および本発明の組成物の関与する記述の指示または本発明の組成物の梱包に、典型的に関与する。指示はまた、いかなるやり方において提供されるいかなる口述または電子の指示を包含し得る。
よって、本明細書に記載の剤は、いくつかの態様において、治療的な診断または研究への適用においてそれらの使用を円滑にする、医薬品または診断のまたは研究キットに組み立てられてもよい。キットは、本発明および使用のための指示の構成要素を収納する1以上の容器を包含してもよい。具体的に言うと、かかるキットは、それらの剤の意図する治療的な適用および適切な投与を記載する指示と一緒に本明細書に記載の１以上の剤を包含してもよい。ある態様において、キット中の剤は、医薬製剤においてでありおよび特定の適用のためにおよび剤の投与の方法のために好適な医薬製剤および投薬量においてであってもよい。
キットは、医師による本発明に記載の方法の使用を円滑にするようにデザインされていてもよく、および多くの形を採り得る。キットの組成物の各々は、当てはまる場合、液体の形（例として、溶液中）において、または固体の形（例として、乾燥粉末）において提供されてもよい。あるケースにおいて、組成物のいくつかは、例えば、キットとともに提供されてもよくまたは提供されなくてもよい好適な溶媒または他の種の追加（例えば、水または細胞培養媒体）によって、構成可能またはさもなければ処理可能（例として、活性の形へ）であってもよい。本明細書に使用されるとき、「指示」は、指示および／または促進の構成要素を定義し得、および記述の指示を典型的に関与するか、または本発明の梱包に関連する。指示はまた、ユーザーが指示がキットに関連するべきであることを明確に認識するであろうように、例えば、視聴覚（例として、ビデオテープ、ＤＶＤ、等々）の、いかなるやり方において提供されるいかなる口述のまたは電子の指示をも包含し得る。記述の指示は、製造、使用または医薬品もしくは生物学的製品の使用またはセールスを制御する、政府機関によって処方された形においてであってもよく、そして指示はまた、製造、使用またはヒト投与に対する販売の機関による容認をも反映し得る。
キットは、１以上の容器中に本明細書に記載の構成要素のいかなる１以上を含有してもよい。例として、一態様において、キットは、キットの１以上の構成要素を混合するおよび／または試料を分離することおよび混合することおよび対象に適用することに対する指示を包含してもよい。キットは、本明細書に記載の剤を収納する容器を包含してもよい。剤は、滅菌で調製され、シリンジ中に梱包されおよび冷蔵で発送されてもよい。代わりに、それが、バイアルまたは保存のための他の容器の中に収納されてもよい。第２の容器は、滅菌で調製されたほかの剤を有してもよい。代わりに、キットは、プレミックスの活性剤を包含し、およびシリンジ、バイアル、チューブ、または他の容器において発送されてもよい。
キットは、ブリスターパウチ、収縮包装パウチ、真空密封可能パウチ、密封可能熱形成トレーまたは類似のパウチ、１以上のチューブ、容器、箱または袋内に付属品がゆるく梱包されるトレー形などの様々な形を採ってもよい。キットは、付属品が追加された後、滅菌されてもよく、それによって容器中の個々の付属品がさもなければ包装を解かれていることを許容する。キットは、放射線滅菌、加熱滅菌、または他の滅菌方法などの当該技術分野において知られているいかなる適切な滅菌技術を使用して滅菌され得る。キットはまた、特異的な適用に依って、例えば、容器、細胞培地、塩、緩衝液、試薬、シリンジ、針、殺菌剤を適用または除去するガーゼなどの布、使い捨ての手袋、投与前の剤のための補助、等々などの他の構成要素をも包含していてもよい。
キットの組成物は、例えば、液体溶液としてまたは乾燥粉末として、いかなる好適な形として提供されていてもよい。提供される組成物が乾燥粉末である場合、粉末が、好適な溶媒の追加によって、再構成されてもよく、そしてそれが提供されてもまたよい。組成物の液体の形が使用される（sued）場合、液体の形は、濃縮またはすぐ使える状態であってもよい。溶媒は、化合物および使用または投与の方式に依るだろう。薬物組成物のための好適な溶媒が、周知であり、および文献において使用可能に存在する。溶媒は、化合物および使用または投与の方式に依るだろう。
一連の態様において、キットは、近接する閉じ込めにおいて受け取るように区画されれている担体手段、バイアル、チューブ、等、などの１以上の容器手段、容器手段の各々は、方法において使用されるべき別個の要素の１つを含む。例えば、容器の１つは、アッセイのための陽性対照を含んでいてもよい。加えて、キットは、他の構成要素についての容器を包含してもよく、例えばアッセイにおいて有用な緩衝液である。
本発明はまた、完了され梱包されたおよびラベル付けされた医薬品の製品をも網羅する。製造のこの物品は、密封に封されたガラス製バイアルまたは他の容器などの適切なベッセルまたは容器中に適切な単位用量の形を包含する。非経口投与のために好適な剤形の場合、活性成分は、滅菌され、および粒子フリーの溶液として投与のために好適である。言い換えれば、本発明は、各々が滅菌された、非経口溶液および凍結乾燥粉末の両方を網羅し、および後者は注射前の再構成に好適である。 代わりに、単位用量の形は、経口、経皮、局所また粘膜送達のために好適な固体であってもよい。
別の態様において、本発明の組成物は、これらに限定されないが、レシチン、タウロコール酸、およびコレステロールを包含する、生物適合性の洗浄剤とともに；またはこれらに限定されないが、ガンマグロブリンおよび血清アルブミンを包含する、他のタンパク質とともに、容器中に保存される。より好ましくは、本発明の組成物は、人の使用のためにヒト血清アルブミンとともに保存され、および獣医学的使用のためにウシ血清アルブミンとともに保存される。
いかなる医薬品の製品と同様に、梱包材料および容器は、保存および送付の間の製品の安全性を守るようにデザインされる。さらに、本発明の製品は、使用のための指示または問題となる疾患または障害を適切に予防するまたは処置する仕方について、医師、技師、または患者に助言する他の情報的な材料を包含する。言い換えれば、製造の物品は、これらに限定されないが、実際の用量、モニタリング手順および他のモニタリング情報を包含する投薬レジメンを示唆するまたは提案する指示手段を包含する。
より具体的に言うと、本発明は、箱、瓶、チューブ、バイアル、容器、スプレー、注入器、静脈（i.v.）バック、エンベロープ等などの梱包材料；および該梱包材料内に含有される医薬品の単位剤形の１以上を含む物品を提供する。本発明はまた、箱、瓶、チューブ、バイアル、容器、スプレー、注入器、静脈（i.v.）バック、エンベロープ等などの梱包材料；および該梱包材料内に含有される各医薬品の１以上の単位用量の形を含む梱包材料を含む、製造の物品を提供する。本発明は、さらには、箱、瓶、チューブ、バイアル、容器、スプレー、注入器、静脈（i.v.）バック、エンベロープ等などの梱包材料；および該梱包材料内に含有される各医薬品の１以上の単位用量の形を含む、製造の物品を提供する。本発明は、好ましくは滅菌された形において梱包された製剤の注射のための針またはシリンジ、および／または梱包されたアルコールパッドを含む製造の物品をさらに提供する。
特異的な態様において、製造の物品は、梱包材料、および該梱包材料内に含有される医薬品および指示を含み、ここで、該医薬品は、ＣＤＫ５ペプチドインヒビターおよび薬学的に許容し得る担体、および該指示は、アルツハイマー病などの認知障害を持つ対象を予防する、処置する、または管理するための投薬レジメンを指し示す。
いくつかの態様において、対象は、治療的にモニターされる。例として、用量、スケジュール、等などの選ばれ得る処置パラメーターの妥当性は、記憶モニタリングのための従来の方法によって、決定される。加えて、患者の臨床状態は、例として、認知機能における増大などの所望される効果についてモニターされ得る。不十分な効果が達成された場合、次いで患者がさらなる処置によってブーストされ得、および本発明の組成および／または他の活性剤の量を増大することによって、または、投与のルートを変動することによってなど、処置および処置パラメーターが改変され得る。
本発明は、さらに以下の例によって実証され、そしてそれらはいかなる様に限定されるように構成されるべきものではない。本出願の至る所に引用されるすべての参照（参照文献、交付済み特許、公開された特許出願、および同時継続の特許出願を包含する）の全体の内容は、参照によって明細書に明らかに組み込まれる。
例
例１：ＣＤＫ５阻害性ペプチドのデザイン
そのｐ２５結合のために不可欠であるＣＤＫ５中の領域を、決定した。特異的な領域におけるアミノ酸の配列は、他のＣＤＫと比較してユニークであり、およびそれは、ヒトを包含する多くの種にわたって保存される。したがって、この領域から、１２アミノ酸長ペプチド（ＣＤＫ５ｉ、配列番号２）を、可能性のあるｐ２５／ＣＤＫ５インヒビター（図１Ａ～１Ｂ）としてデザインした。コンピューター処理のモデル化は、このＣＤＫ５およびｐ２５の両方を有するＣＤＫ５阻害性ペプチド（ＣＤＫ５ｉ）の予想される強力な相互作用を予想した。このペプチドはまた、ｐ２５／ＣＤＫ５複合体の形成を阻害する（図２）ことができるだろうことをも実証した。
配列番号２の結合部位および活性の知識は、本発明に従って有用なペプチドのセットのデザインを導いている。図８において示されるように、それらのＣＤＫ５ペプチドインヒビターはまた、蛍光ラベル化されたＣＤＫ５ｉを使用し、他のＣＤＫ５インヒビターを同定すること（蛍光偏光ハイスループットスクリーン）にも使用されることができる。
例２．ＣＫＤ５ｉペプチドのIn Vitro スクリーニング
ＣＤＫ５活性と、ペプチド（配列番号２）の効果を試験した。精製された組み換えｐ２５／ＣＤＫ５複合体をＣＤＫ５ｉペプチドとともに培養し、および次いでＣＤＫ５キナーゼ活性を、放射標識されたＡＴＰおよびその基質、ＨＩを使用し測定した。結果は、ＣＤＫ５ｉペプチドが有意にスクランブルペプチド処置グループのそれと比べて、ＣＤＫ５キナーゼ活性を有意に減少させた（図３）。
神経変性脳におけるＣＤＫｉペプチドの効果を決定するために、Ｐ３０１Ｓからの脳組織試料および対象マウスを使用した。Ｐ３０１Ｓマウスを、アルツハイマー病（ＡＤ）および全島即答型認知症（ＦＴＤ）のモデルとして使用した。図４において示されるように、ＣＤＫ５ｉペプチドが脳においてＣＤＫ５ならびにｐ２５の前駆体、ｐ３５と物理的に相互作用することを見出した。しかしながら、それは、ＣＤＫ５に高度に相同なファミリーメンバーである、ＣＤＫ１またはＣＤＫ２に結合しない。
ＣＤＫ５の定常活性は、神経発達の間、欠かせないものである。それはまた、さまざまな神経細胞の機能のためにも要求される。病態時に似ず、生理学的な条件下のＣＤＫ５活性は、ｐ２５ではなく、ほぼｐ２４によって媒介される。ＣＤＫｉペプチドが基底ＣＤＫ５活性に有する効果を試験するために、対象マウスからの脳組織をＣＤＫ５ｉとともに培養し、そしてＣＤＫ５の定常活性において変化がないことを見出した（図５Ａ）。しかしながら、ＣＤＫ５ｉペプチドが上方制御されたｐ２５によるキナーゼの過剰活性化を通常表す、Ｐ３０１Ｓマウスの脳におけるＣＤＫ５のキナーゼ活性を有意に減少させることが示された（図５Ｂ）。
ヒトモデルシステムにおけるＡＤ関連の病的状態のＣＤＫ５ｉペプチドの効果を検証するために、家族性ＡＤ（ｆＡＤ）患者の線維芽細胞から創造された人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣｓ）を使用した。ｆＡＤ ｉＰＳＣに由来する神経前駆細胞（ＮＰＣ）は、学習および記憶に関連する遺伝子の転写をネガティブに制御するヒストンデアセチラーゼ２（ＨＤＡＣ２）の上方制御を包含する、複数の病的な表現型を示す（図６Ａ）。ＰＳＥＮ１ Ｍ１４６Ｉ突然変異を運ぶ系統は、最も強い表現型を示し、およびさらなる特徴づけは、健康なｉＰＳＣｓからのＮＰＣと比較して、それらの細胞においてＤＮＡ損傷を増加することを明らかにした（図６Ｂ）。
ＮＰＣを、ついでＣＤＫ５ｉペプチドまたはそのスクランブルペプチドのいずれかによって処置し、その結果得られる病的な表現型を試験した。スクランブルペプチドが効果を示さなかった一方、ＣＤＫ５ｉペプチドがＰＳＥＮ １ Ｍ１４６Ｉ ＮＰＳ中のＨＤＡＣ２およびγＨ２ＡＸ（ＤＮＡ損傷を示唆する）のレベルを有意に減少させることを見出した（図７）。
例３：機能的ドメインを有する、ＣＤＫ５ｉペプチドインヒビター
ＣＤＫ５阻害性ドメインおよび機能的ドメイン（配列番号３）を有する、例示のペプチドをデザインした（図９Ａ）。機能的ドメインは、Ｃｄｋ５ｉペプチドの細胞の中への送達を亢進する。例において、それは、転写のトランス活性化因子（ＴＡＴ）のペプチド、転写のトランス活性化因子（ＴＡＴ）のペプチド、Ｃｄｋ５ｉペプチドが細胞膜を横切って移動することを可能にするように、Ｃ末端において接合されたＨＩＶのフラグメントである。ペプチドの分布を画像化するために、Ｎ末端にて、フルオレッセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）をリンカー（アミノヘキサン酸；Ａｈｘ）によって接合した。
ヒトｉＰＳＣ由来神経前駆細胞を、２時間ＦＩＴＣ－Ａｈｘ－Ｃｄｋ５ｉ－Ｔａｔ（１μＭ）（配列番号３）によって処置し、およびイメージングを受けさせた。結果を、図９Ｂにおいて示した。結果は、ＦＩＴＣシグナルが細胞内の場所にあることを示し、該ペプチドが細胞膜を通過することができることを実証した。
例４．Ｃｄｋ５ｉは、マウス内の血液脳関門を通過する
野生型マウスを、Ｃｄｋ５ｉの単回用量（４０ｍｇ／ｋｇ）で腹腔内注射し、および注射の２４時間後、屠殺した。脳を抽出する前に、マウスを血液脳関門を横切らなかった可能性のある、血液中に循環するいかなるＣｄｋ５ｉの排除を確実にするように、４０ｍＬの冷たいリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）によって経心的に灌流した。灌流の後に、脳を２つの半球に解剖しおよび１つの半球を総タンパク質を抽出するように、冷たい溶解緩衝液（ＲＩＰＡ）によって溶解した。総タンパク質を、次いで、大きなタンパク質を分離するように１２％アクリルアミドゲルにおいて短時間に泳動し、次いでトリプシン酵素によって消化し、そしてＧＧＧスペーサー／リンカーおよびＦＩＴＣに連結される配列番号３のＣｄｋ５ｉペプチド配列（Ｃｄｋ５ｉ配列：ＦＩＴＣ－ＧＧＧ－配列番号３）を使用する、標的化された質量分析を受けさせた。
接合されたtatタンパク質配列を包含するＣｄｋ５ｉ配列の実質的な部分（１２のうち１１アミノ酸）を、スペクトルの数およびピーク面積に基づき、質量分析を使用し検出した。データを、表１において示す。標的化された質量分析を使用し、Ｃｄｋ５ｉによって注射されたマウスからの脳の溶解物は、スペクトルの#およびピーク面積に基づき、Ｃｄｋ５ｉに対する濃縮を示した（表１中のデータの２段目）。
上記の記述された明細書は、当業者が本発明を実施することを可能にすることに十分であると考えられる。例が本発明の一側面、および本発明の範囲内の他の機能的当量物の態様の一側面の単一の例示として意図されるという理由から、本発明は、提供される例による範囲内に限定されない。本明細書に示されるおよび記載されるものに加えて、本発明の様々な改変は、上記の記載から当業者に明らかになり、および付加される請求項の範囲内にあるだろう。本発明の利点は、本発明の各態様によって必ずしも網羅されない。

Claims (51)

  1. 以下の構造：ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣ Ｘ２Ｓ＊（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）を有する配列番号１のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有する、５～５０アミノ酸長のペプチドおよび薬学的に許容し得る担体を含む、医薬組成物。
  2. ペプチドが、配列番号２を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
  3. ペプチドが、配列番号１の配列内に１以上の保存的置換を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
  4. 薬学的に許容し得る担体が、ポリマーを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
  5. ポリマーが、親水性ブロックおよびエンドソーム溶解性ブロックを含む、請求項４に記載の医薬組成物。
  6. 親水性ブロックがポリエチレングリコールメタクリラートを含み、および、エンドソーム溶解性ブロックがジエチルアミノエチルメタクリラート－ブチルメタクリラートコポリマーを含む、請求項５に記載の医薬組成物。
  7. ポリマーが、ｐＨ、温度、ＵＶ可視光、光照射、電場への暴露、イオン強度、およびある化学物質の濃度からなる群から選択される１以上の刺激に、特性の変化を提示することによって応答する刺激応答性ポリマーである、請求項４に記載の医薬組成物。
  8. ペプチドが、配列番号１の１～２個のアミノ酸の欠失を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
  9. ペプチドが、配列番号１のＮ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
  10. ペプチドが、配列番号１のＣ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
  11. ペプチドが、リンカーを介して非ペプチド分子に連結される、請求項１に記載の医薬組成物。
  12. 非ペプチド分子が、ＰＥＧまたはＴＥＧである、請求項１１に記載の医薬組成物。
  13. ペプチドが、強化または安定化された二次構造を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
  14. ペプチドが、機能的ドメインに連結される、請求項１～１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
  15. 機能的ドメインが、トランス活性化ドメイン、標的ドメインまたは安定化ドメインである、請求項１４に記載の医薬組成物。
  16. トランス活性化ドメインが、転写のトランス活性化因子（ＴＡＴ）のペプチドである、請求項１５に記載の医薬組成物。
  17. トランス活性化ドメインが、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号４）のペプチド配列である、請求項１５に記載の医薬組成物。
  18. 以下の構造：ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣ Ｘ２Ｓ＊（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）を有する配列番号１のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有する、５～２５アミノ酸長から本質的になる、ペプチド。
  19. １以上の保存的置換を含む、請求項１８に記載のペプチド。
  20. 配列番号１のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％または９５％のアミノ酸配列同一性を有する、請求項１８に記載のペプチド。
  21. 配列番号１の配列内の１以上の保存的置換を含む、請求項１８に記載のペプチド。
  22. 配列番号１の１～２個のアミノ酸の欠失を有する、請求項１８に記載のペプチド。
  23. 配列番号１のＮ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む、請求項１８に記載のペプチド。
  24. 配列番号１のＣ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む、請求項１８に記載のペプチド。
  25. リンカーを介して非ペプチド分子に連結される、請求項１８に記載のペプチド。
  26. 非ペプチド分子が、ＰＥＧまたはＴＥＧである、請求項２５に記載のペプチド。
  27. 強化または安定化された二次構造を有する、請求項１８に記載のペプチド。
  28. １２～５０アミノ酸長であり、以下の構造：ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣ Ｘ２Ｓ＊（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む、ペプチド。
  29. 請求項１８～２４および２８のいずれか一項に記載のペプチドをコードする、組み換え核酸。
  30. プロモーターに作動的に連結される請求項２９に記載の核酸を含む、組み換え発現ベクター。
  31. 請求項３０に記載の組み換え発現ベクターを含む、組み換え宿主細胞。
  32. 特異的なＣＤＫ５ペプチドインヒビター、またはＣＤＫ５の定常活性を妨害することまたはＣＤＫ１もしくはＣＤＫ２と相互作用することなしにＣＤＫ５－ｐ２５／ｐ３５相互作用を妨害するペプチドインヒビターをコードする核酸を、対象へ投与することを含む、対象において神経変性状態を処置するための方法。
  33. 対象がまた、障害を処置する追加の治療を受ける、請求項３２に記載の方法。
  34. 特異的なＣＤＫ５ペプチドインヒビターが、経口で、経皮で、静脈内に、皮膚に、皮下に、経鼻で、筋肉内に、腹腔内に、頭蓋内に、または脳室内に投与される、請求項３２または３３に記載の方法。
  35. 神経変性状態が、アルツハイマー病、ハンチントン病、前頭側頭型認知症、発作誘導性記憶喪失、統合失調症、ルビンシュタイン・テイビ症候群、レット症候群、脆弱性Ｘ、レビー小体認知症、血管性認知症、ＡＤＨＤ、失読症、双極性障害および自閉症に関連する社会、認知および学習障害、外傷性頭傷害、または注意欠陥障害である、請求項３２～３４のいずれか一項に記載の方法。
  36. 認知機能障害／不全が、不安症、条件付けされた恐怖反応、パニック障害、強迫性障害、外傷後ストレス障害、恐怖症、社交不安症、または物質依存性回復に関連する、請求項３２～３４のいずれか一項に記載の方法。
  37. 対象を、認知行動療法（ＣＢＴ)、精神療法、行動曝露治療、仮想現実曝露（ＶＲＥ）または認知矯正治療に曝すことをさらに含む、請求項３３に記載の方法。
  38. ＣＤＫ５ペプチドインヒビターが、１日に１回、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、６日毎、または７日毎に投与される、請求項３２に記載の方法。
  39. ペプチドが、以下の構造：ＡＲＡＦＧＸ１ＰＶＲＣ Ｘ２Ｓ＊（Ｘ１＝ＩまたはＶおよびＸ２＝ＹまたはＦ）を有する配列番号１のアミノ酸配列と比べてその長さにわたって少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有する５～５０アミノ酸長を含む、請求項３２～３８のいずれか一項に記載の方法。
  40. ペプチドが、１以上の保存的置換を含む、請求項３９に記載の方法。
  41. ペプチドが、その長さにわたって配列番号１のアミノ酸配列と比べて少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％または９５％のアミノ酸配列同一性を有する、請求項３９に記載の方法。
  42. ペプチドが、配列番号１の配列内に１以上の保存的置換を含む、請求応３９に記載の方法。
  43. ペプチドが、配列番号１の１～２個のアミノ酸の欠失を有する、請求項３９に記載の方法。
  44. ペプチドが、配列番号１のＮ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む、請求項３９に記載の方法。
  45. ペプチドが、配列番号１のＣ末端において１以上の追加のアミノ酸を含む、請求項３９に記載の方法。
  46. ペプチドが、リンカーを通じて非ペプチド分子に連結される、請求項３９に記載の方法。
  47. 非ペプチド分子が、ＰＥＧまたはＴＥＧである、請求項４６に記載の方法。
  48. ペプチドが、強化または安定化された二次構造を有する、請求項３９に記載の方法。
  49. ペプチドが、８～２５個のアミノ酸の長さを有する、請求項３５に記載の方法。
  50. ペプチドが、８～２０個のアミノ酸の長さを有する、請求項３５に記載の方法。
  51. ペプチドが、１０～１５個のアミノ酸の長さを有する、請求項３５に記載の方法。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5525727A (en) 1982-05-18 1996-06-11 University Of Florida Brain-specific drug delivery
US5994392A (en) 1988-02-26 1999-11-30 Neuromedica, Inc. Antipsychotic prodrugs comprising an antipsychotic agent coupled to an unsaturated fatty acid
US5177064A (en) 1990-07-13 1993-01-05 University Of Florida Targeted drug delivery via phosphonate derivatives
US6693166B1 (en) * 1999-04-12 2004-02-17 Hong Kong University Of Science And Technology Cdk5—specific inhibitory peptides
US6713454B1 (en) 1999-09-13 2004-03-30 Nobex Corporation Prodrugs of etoposide and etoposide analogs
EP1877423A2 (en) * 2005-01-18 2008-01-16 Adra N. Chaker Htm4 used for cell-cycle regulation through its interaction with kap
US20070015183A1 (en) 2005-06-03 2007-01-18 The General Hospital Corporation Biomarkers for huntington's disease
AU2009324661A1 (en) * 2008-12-10 2011-07-07 Purdue Research Foundation Cell-permeant peptide-based inhibitor of kinases
US20120270821A1 (en) * 2009-12-07 2012-10-25 The Hong Kong University Of Science And Technology CDK5 Inhibitors and Therapeutic Uses Thereof

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