JP2023113753A

JP2023113753A - ヤーヌスキナーゼ（ｊａｋ）ファミリー阻害剤及びその調製と使用

Info

Publication number: JP2023113753A
Application number: JP2023088385A
Authority: JP
Inventors: 勇呉; Yong Wu; 彦春 ▲ゴン▼; Yanchun Gong; 文斌周; Wenbin Zhou; 大安泰; Daan Qin; 亜張; Zhang Ya; 永強劉; Yongqiang Liu
Original assignee: Jiangsu Vcare Pharmatech Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Vcare Pharmatech Co Ltd
Priority date: 2019-02-02
Filing date: 2023-05-30
Publication date: 2023-08-16
Also published as: EP3919494B1; EP3919494A4; ES2950965T3; AU2020214895B2; CA3128421A1; US20220177467A1; JP2022518556A; CN111518096B; JP7344304B2; CN111518096A; KR20210120052A; EP3919494A1; AU2020214895A1

Abstract

【課題】７－アザインドール系ＪＡＫキナーゼファミリー阻害剤を提供する。【解決手段】式（Ｉ）の構造を有する７－アザインドール誘導体、式（Ｉ）化合物を含む医薬組成物、及び前記化合物のヤーヌスキナーゼ（ＪＡＫ）ファミリー関連疾患、特にタンパク質チロシンキナーゼ相関炎症疾患を予防または治療する医薬の調製のための使用に関し、式（Ｉ）における各置換基は、明細書と同じ定義を有する。TIFF2023113753000097.tif50170【選択図】なし

Description

本願は、医薬の技術分野に属し、具体的に７－アザインドール誘導体及びその抗炎症薬物を調製するための使用に関する。

ヤーヌスキナーゼ（ＪＡＫ）は、チロシンキナーゼの一種であり、そのファミリーがＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、及びＴＹＫ２の４つのメンバーを含む。ＪＡＫｓは、様々なサイトカインシグナルの伝達中に重要な役割を果たし、その下流のシグナル伝達兼転写活性化因子（ＳＴＡＴ）と共にサイトカイン受容体による細胞核内での遺伝子転写及び発現の調節を仲介する。

サイトカインは、その受容体と結合して、受容体分子の二量化を引き起こし、受容体と共役しているＪＡＫｓが互いに接近し、相互に作用するチロシン残基のリン酸化によって活性化される。活性化したＪＡＫｓは、受容体自身のチロシン残基のリン酸化を触媒しることにより、受容体複合体に結合するＳＴＡＴｓの対応する部位を形成する。ＳＴＡＴｓのＳＨ２領域が受容体分子のホスホチロシン残基に結合し、Ｃ末端のチロシン残基のリン酸化がＪＡＫｓの働きで成り遂げられる。２つのリン酸化されたＳＴＡＴ分子は、互いに作用して相同性／異種性の二量体を形成し、受容体分子から離れて細胞核に入り、標的遺伝子のプロモーター領域に結合し、遺伝子の転写と発現を調節する（Ｊ．ＢｉｏｌＣｈｅｍ．２００７、２８２、２００５９）。

ＪＡＫ／ＳＴＡＴ系は、免疫担当細胞におけるサイトカインの最も主要な細胞内シグナル伝達系であり、４種類のＪＡＫと７種類のＳＴＡＴの組み合わせにより、約４０種類のサイトカインのシグナル伝達が行われている（ＩｍｍｕｎｏｌＲｅｖ．２００９、２２８、２７３）。ＪＡＫ３はサイトカイン受容体の共通のγ鎖（Ｆｃγ）に特異的に結合することができ、一方、ＪＡＫ１はβ鎖に結合し、それらの両者はＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－７、ＩＬ－９、ＩＬ－１５、及びＩＬ－２１サイトカインにより活性化される（Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２００９、２２８、２７３）。ＩＬ－６などのいくつかの重要な炎症相関サイトカインは、ＪＡＫ１を介してのみシグナルを伝達する（ＥＭＢＯＪ．１９９５、１４、１４２１）。トシリズマブなどのＩＬ－６モノクローナル抗体は、リウマチ性関節炎（ＲＡ）の治療に有効な薬物であると証明されている（ＡｒｔｈｒｉｔｉｓＲｈｅｕｍ．２００６、５４、２８１７）ため、ＪＡＫ１は理想的な抗炎症標的である。ＪＡＫ２は、赤血球分化の促進やＳＴＡＴ５の活性化など、赤血球生成素（ＥＰＯ）のシグナル経路に重要な役割を果たしている。さらに、ＪＡＫ２は、脂質代謝経路にも関与している（Ｏｂｅｓｉｔｙ．２００８、１６、４９２）。ＪＡＫ１、ＪＡＫ２及びＴＹＫ２は、様々な組織や細胞に幅広く存在しており、ＪＡＫ３は主にリンパ球に分布しており、過度の阻害が感染のリスクを高める。サイトカインの異常な発生と異常なサイトカインシグナル伝達は、自己免疫性疾患、アレルギーなどの様々な免疫疾患や炎症疾患に関連しているだけではなく、がんなどの様々な異なる病理を持つ疾患にも関連している。アレルギー、喘息、（異種）移植拒絶、リウマチ性関節炎、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症などの自己免疫性疾患、骨髄増殖異常、白血病、リンパ腫などの血液系悪性腫瘍など、多くの異常な免疫応答は、その調節がＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル経路に関連している。

トファシチニブは、初めて市販された経口ＪＡＫ阻害剤であるが、汎ＪＡＫ阻害剤であるため、選択性が低く、ＪＡＫ１を阻害すると共にＪＡＫ２、ＪＡＫ３も阻害し、貧血、感染など、臨床的に重大な副作用が示され、臨床での用量や最終の治療効果が影響を受け
た（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．２００５、７９、７９１；ＡｎｎａｌｓｏｆｔｈｅＲｈｅｕｍａｔｉｃＤｉｓｅａｓｅｓ．２０１６、７５、１１３３．）。ＪＡＫ１／ＪＡＫ２阻害剤であるバリシチニブは、臨床試験でヒュミラ（アダリムマブ）よりも優れた抗炎症の治療効果を示しているが、明らかな血中脂質を上昇させる副作用（ＡｎｎＲｈｅｕｍＤｉｓ．２０１８、７７、９８８．）があるため、ＦＤＡに承認された低用量の製剤が市販されている。ＪＡＫ１を選択的に阻害するＡＢＴ－４９４も臨床試験で優れた抗炎症の治療効果を示しているが、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）を上昇させる臨床的リスクがある（Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ＆Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ．２０１６、６８、２８５７）。従って、選択性がより良いＪＡＫ阻害剤の開発は、依然として重要な臨床的意義がある。

Ｔｙｋ２もＪＡＫキナーゼファミリーのメンバーであり、重要な免疫調整部位として、ＩＦＮ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３シグナル経路の伝達に関与し、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３、及びＩ型のインターフェロン受容体の下流のＳＴＡＴタンパク質をリン酸化することにより、炎症シグナルを伝達する。前記の炎症性因子は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、滴状乾癬（ＰＳＯ）、炎症性腸病（ＩＢＤ）など、様々な自己免疫疾患の発生に関与するため、Ｔｙｋ２も重要な炎症疾患の治療標的である。現在、いくつかのＴｙｋ２阻害剤は、全身性エリテマトーデス、滴状乾癬、炎症性腸病、円形脱毛症の臨床試験研究に用いられている（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１８、６１、８５９７；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２０１８、６１、８５９４）。

ＷＯ２０１８１６９７００、ＷＯ２０１６１１６０２５には、ＪＡＫ阻害剤の化合物を開示しているが、本発明の化合物は、それらの構造と異なり、ＪＡＫ１に対する阻害活性が全体的にＷＯ２０１８１６９７００、ＷＯ２０１６１１６０２５特許の化合物よりも優れている。

本発明の目的は、７－アザインドール系ＪＡＫキナーゼファミリー阻害剤を提供することにある。

本発明のもう一つの目的は、選択性の良いＪＡＫキナーゼファミリー阻害剤のＪＡＫキナーゼファミリー関連疾患を予防または治療する薬物の調製ための使用を提供することにある。本発明の目的を達成するために、本発明の一つの局面は、

本発明の下式（Ｉ）で示される化合物、その立体異性体またはその薬学上許容される塩であり、

ここで、環Ａは任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルまたは５～１０員のヘテロアリールから選ばれ、
Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、Ｃ_２－Ｃ_８アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_８アルキニル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリールまたは５～１０員のヘテロアリールから選ばれ、
Ｒ^２はシアノ、－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７、－Ｃ＝ＯＮＲ^６ＮＲ^７Ｒ^８、－Ｃ＝ＯＮＨＯＲ^６、－Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^８、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－ＮＨＲ^８、または－Ｃ＝ＯＯＲ^６から選ばれ、
Ｌはアミノ、－ＮＲ^６Ｃ＝Ｏ－、－ＮＲ^６Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｏ－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６ＮＲ^１０－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^６－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキルまたはＣ＝ＯＲ^６から選ばれ、
Ｒ^４とＲ^５は、それぞれ水素、重水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、６～１０員のアリールまたは５～１０員のヘテロアリールから独立して選ばれ、
Ｒ^６、Ｒ^７及びＲ^１０は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
あるいは、Ｒ^１０はそれと結合しているＮ及びＲ^１と一緒になって任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルを形成し、
ここで、前記の環ＡとＲ^１における置換基は、それぞれ１つまたは複数のハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、メルカプト、ニトロ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシ、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリール、５～１０員のヘテロアリール、－（ＣＨ_２）_ｎＣ＝ＯＯＲ^８、－ＯＣ＝ＯＲ^８、－Ｃ＝ＯＲ^８、－Ｃ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－ＮＨＣ＝ＯＲ^８、－ＮＲ^８Ｒ^９、－ＯＣ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－ＮＨＣ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^８、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－ＮＨＲ^８、－ＮＨＣ＝ＯＯＲ^８または－ＮＨＳ（Ｏ）_ｍＲ^８から独立して選ばれ、
ｍは１または２から選ばれ、
ｎは１、２、３、４または５から選ばれ、
Ｒ^８とＲ^９は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
前記のＲ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９及びＲ^１０における置換基は、それぞれ１つまたは複数の重水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、メルカプト、ニトロ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれる。

本発明のいくつかの実施態様において、環Ａは任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルから選ばれ、
Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、Ｃ_２－Ｃ_８アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_８アルキニル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリールまたは５～１０員のヘテロアリールから選ばれ、
Ｒ^２はシアノまたは－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７から選ばれ、
Ｌはアミノ、－ＮＲ^６Ｃ＝Ｏ－、－ＮＲ^６Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｏ－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６ＮＲ^１０－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^６－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキルまたは－Ｃ＝ＯＲ^６から選ばれ、
Ｒ^４とＲ^５は、それぞれ水素、重水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
Ｒ^６、Ｒ^７及びＲ^１０は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
あるいは、Ｒ^１０はそれと結合しているＮ及びＲ^１と一緒になって任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルを形成し、
ここで、前記の環ＡとＲ^１における置換基は、それぞれ１つまたは複数のハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシ、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリール、５～１０員のヘテロアリール、－Ｃ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－ＮＨＣ＝ＯＲ^８、－ＮＲ^８Ｒ^９、－ＯＣ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－ＮＨＣ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^８、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－ＮＨＲ^８、－ＮＨＣ＝ＯＯＲ^８または－ＮＨＳ（Ｏ）_ｍＲ^８から独立して選ばれ、
ｍは１または２から選ばれ、
Ｒ^８とＲ^９は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
前記のＲ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９及びＲ^１０における置換基は、それぞれ１つまたは複数の重水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれる。
本発明のいくつかの実施態様において、環Ａは任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルから選ばれ、
Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、Ｃ_２－Ｃ_８アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_８アルキニル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリールまたは５～１０員のヘテロアリールから選ばれ、
Ｒ^２はシアノまたは－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７から選ばれ、
Ｌはアミノ、－ＮＲ^６Ｃ＝Ｏ－、－ＮＲ^６Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｏ－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６ＮＲ^１０－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^６－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素またはメチルから選ばれ、
Ｒ^４とＲ^５は、それぞれ水素、重水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
Ｒ^６、Ｒ^７及びＲ^１０は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
あるいは、Ｒ^１０はそれと結合しているＮ及びＲ^１と一緒になって任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルを形成し、
ここで、前記の環ＡとＲ^１における置換基は、それぞれ１つまたは複数のハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシ、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリール、５～１０員のヘテロアリール、－Ｃ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－ＮＨＣ＝ＯＲ^８、－ＮＲ^８Ｒ^９、－ＯＣ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－ＮＨＣ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^８、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－ＮＨＲ^８、－ＮＨＣ＝ＯＯＲ^８または－ＮＨＳ（Ｏ）_ｍＲ^８から独立して選ばれ、
ｍは１または２から選ばれ、
Ｒ^８とＲ^９は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
前記のＲ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９及びＲ^１０における置換基は、それぞれ１つまたは複数の重水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれる。

本発明のいくつかの実施態様において、環Ａは任意選択的に置換される以下の基から選ばれ、

Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリールまたは５～１０員のヘテロアリールから選ばれ、
Ｒ^２はシアノまたは－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７から選ばれ、
Ｌはアミノ、－ＮＲ^６Ｃ＝Ｏ－、－ＮＲ^６Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｏ－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６ＮＲ^１０－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^６－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、
あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素またはメチルから選ばれ、
Ｒ^４とＲ^５は、それぞれ水素、重水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
Ｒ^６、Ｒ^７及びＲ^１０は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
あるいは、Ｒ^１０はそれと結合しているＮ及びＲ^１と一緒になって任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルを形成し、
ｍは１または２から選ばれ、
ここで、前記の環ＡとＲ^１における置換基は、それぞれ１つまたは複数のハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシ、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリール、５～１０員のヘテロアリール、－Ｃ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－ＮＨＣ＝ＯＲ^８、－ＮＲ^８Ｒ^９、－ＯＣ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－ＮＨＣ＝ＯＮＲ^８Ｒ^９、－Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^８、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－ＮＨＲ^８、－ＮＨＣ＝ＯＯＲ^８または－ＮＨＳ（Ｏ）_ｍＲ^８から独立して選ばれ、
Ｒ^８とＲ^９は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
前記のＲ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９及びＲ^１０における置換基は、それぞれ１つまたは複数の重水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれる。

Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に置換されるメチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、ｎ－ブチル、ｔ－ブチル、シクロブチル、フェニル、ピリジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリルまたは

から選ばれ、
Ｒ^２はシアノまたは－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７から選ばれ、
Ｌはアミノ、－ＮＲ^６Ｃ＝Ｏ－、－ＮＲ^６Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｏ－、－Ｃ＝ＯＮＲ^６ＮＲ^１０－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^６－、－ＮＲ^６Ｓ（Ｏ）_ｍＮＲ^７－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、
あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素またはメチルから選ばれ、
Ｒ^４とＲ^５は、それぞれ水素、重水素、ハロゲンまたはシアノから独立して選ばれ、
Ｒ^６、Ｒ^７及びＲ^１０は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
あるいは、Ｒ^１０はそれと結合しているＮ及びＲ^１と一緒になって任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルを形成し、
ｍは１または２から選ばれ、
ここで、前記の環ＡとＲ^１における置換基は、それぞれ１つまたは複数のハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシ、Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル、４～１２員のヘテロシクリル、６～１０員のアリールまたは５～１０員の
ヘテロアリールから独立して選ばれ、
前記のＲ^６、Ｒ^７及びＲ^１０における置換基は、それぞれ１つまたは複数の重水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル、Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれる。

から選ばれ、
Ｒ^２はシアノまたは－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７から選ばれ、
Ｌはアミノ、－ＮＲ^６Ｃ＝Ｏ－、－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、
あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素またはメチルから選ばれ、
Ｒ^４とＲ^５は、それぞれ水素、重水素、フッ素、塩素またはシアノから独立して選ばれ、
Ｒ^６、Ｒ^７及びＲ^１０は、それぞれ水素、任意選択的に置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルまたはＣ_３－Ｃ_８シクロアルキルから独立して選ばれ、
あるいは、Ｒ^１０はそれと結合しているＮ及びＲ^１と一緒になって任意選択的に置換される４～１２員のヘテロシクリルを形成し、
ｍは１または２から選ばれ、
ここで、前記の環ＡとＲ^１における置換基は、それぞれ１つまたは複数のハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_４アルキルまたはＣ_１－Ｃ_４アルコキシから独立して選ばれ、
前記のＲ^６、Ｒ^７及びＲ^１０における置換基は、それぞれ１つまたは複数の重水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノまたはアミノから独立して選ばれる。

Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に置換されるメチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、ｔ－ブチル、シクロブチルまたは

から選ばれ、
Ｒ^２はシアノまたは－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７から選ばれ、
Ｒ^６とＲ^７は水素、メチルまたは重水素化メチルから選ばれ、
Ｌは－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、
あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素またはメチルから選ばれ、
Ｒ^４とＲ^５はそれぞれ水素または重水素から独立して選ばれ、
Ｒ^１０は水素であり、
ｍは１または２から選ばれ、
ここで、前記の環ＡとＲ^１における置換基は、それぞれ１つまたは複数のフッ素、塩素、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、メチルまたはメトキシから独立して選ばれる。

本発明のいくつかの実施態様において、前記の化合物は、以下で示される化合物またはその薬学上許容される塩である。

好ましくは、本発明の化合物は、以下で示される化合物またはその薬学上許容される塩である。

本発明のもう一つの局面は、以下の工程を含む、式（Ｉ）化合物、その立体異性体またはその薬学上許容される塩の調製方法を提供する。

ここで、Ａ、Ｌ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５は、前記の式（Ｉ）化合物に定義されるとおりである。

本発明は、式（Ｉ）化合物、その立体異性体または薬学上許容される塩と薬学上使用可能な担体とを含む医薬組成物をさらに提供する。

好ましくは、医薬組成物は、カプセル剤、散剤、錠剤、ペレット剤、丸剤、注射剤、シロップ剤、経口液、吸入剤、軟膏剤、座剤またはパッチ剤から選ばれる。

本発明のもう一つの局面は、式（Ｉ）化合物または其互変異性体、メソマー、ラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、及びその混合物型、及びその医薬上使用可能な塩またはそれを含む医薬組成物の、ヤーヌスキナーゼ（ＪＡＫ）ファミリー誘発性疾患を予防または治療する薬物の調製のための使用を提供する。前記の疾患は免疫系疾患、自己免疫性疾患、皮膚病、アレルギー性疾患、ウィルス性疾患、１型糖尿病と糖尿病合併症、アルツハイマー病、眼球乾燥症、骨髄線維症、血小板増加症、赤血球増加症、白血病和がんが含まれ、前記の免疫系疾患は臓器移植拒絶反応、異種移植拒絶反応、または移植片対宿主病であり、前記の自己免疫性疾患は全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、リウマチ性関節炎、若年性関節炎、滴状乾癬、潰瘍性結腸炎、クローン病、または自己免疫性甲状腺疾患から選ばれ、前記の皮膚病は乾癬、皮疹、円形脱毛症、またはアトピー性皮膚炎から選ばれ、前記のアレルギー性疾患は喘息または鼻炎から選ばれ、前記のウィルス性疾患はB型肝炎、Ｃ型肝炎、水疱瘡、帯状疱疹ウィルスから選ばれ、前記のがんは固形腫瘍、血液がん、または皮膚がんから選ばれ、前記の固形腫瘍は前立腺がん、腎がん、肝がん、膵臓がん、胃がん、乳がん、肺がん、頭頸部がん、甲状腺がん、海綿芽細胞腫、または黒色腫から選ばれ、前記の血液がんはリンパ腫または白血病から選ばれ、前記の皮膚がんは皮膚Ｔ細胞性リンパ腫または皮膚Ｂ細胞性リンパ腫から選ばれる。

特に断らない限り、明細書および特許請求の範囲で用いた用語は以下の意味を有する。

本発明における「アリール」は全て炭素の単環または二環基を指し、「６～１０員のアリール」は６～１０個の炭素を有する全て炭素のアリールを指し、例えばフェニル、ナフチルである。前記のアリール環はヘテロアリール、ヘテロシクリルまたはシクロアルキル環に縮合してもよく、親構造に結合している環がアリール環である。

本発明における「ヘテロアリール」は１～４個のヘテロ原子を有するヘテロアリール系を指し、前記ヘテロ原子は窒素、酸素、硫黄のヘテロ原子が含まれ、例えば、フリル、チエニル、ピリジニル、ピロリル、ピラゾリル、Ｎ－アルキルピロリル、ピリミジニル、ピラジニル、イミダゾリル、テトラゾリル、オキサゾリルまたは

などが挙げられる。

本発明における「Ｃ_１－Ｃ_８アルキル」は１～８個の炭素原子を有する直鎖アルキルと分岐鎖を含むアルキルを指し、アルキルは飽和脂肪族炭化水素基を指し、例えばメチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉ－プロピル、ｎ－ブチル、ｉ－ブチル、ｔ－ブチル、ｓ－ブチル、ｎ－ペンチル、１，１－ジメチルプロピル、１，２－ジメチルプロピル、２，２－ジ
メチルプロピル、１－エチルプロピル、２－メチルブチル、３－メチルブチル、ｎ－ヘキシル、１－エチル－２－メチルプロピル、１，１，２－トリメチルプロピル、１，１－ジメチルブチル、１，２－ジメチルブチル、２，２－ジメチルブチル、１，３－ジメチルブチル、２－エチルブチル、２－メチルペンチル、３－メチルペンチル、４－メチルペンチル、２，３－ジメチルブチル、ｎ－ヘプチル、２－メチルヘキシル、３－メチルヘキシル、４－メチルヘキシル、５－メチルヘキシル、２，３－ジメチルペンチル、２，４－ジメチルペンチル、２，２－ジメチルペンチル、３，３－ジメチルペンチル、２－エチルペンチル、３－エチルペンチル、ｎ－オクチル、２，３－ジメチルヘキシル、２，４－ジメチルヘキシル、２，５－ジメチルヘキシル、２，２－ジメチルヘキシル、３，３－ジメチルヘキシル、４，４－ジメチルヘキシル、２－エチルヘキシル、３－エチルヘキシル、４－エチルヘキシル、２－メチル－２－エチルペンチル、２－メチル－３－エチルペンチルまたはそれらの分岐鎖の異性体などが挙げられる。

本発明における「シクロアルキル」は、飽和の単環式炭化水素置換基を指し、「Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル」は３～８個の炭素原子を有する単環式のシクロアルキルを指し、単環式のシクロアルキルの実施例としては、これらに限定されないが、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルなどが挙げられる。

本発明における「アルケニル」は少なくとも２つの炭素原子と少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を有する上記で定義されたアルキルを指し、「Ｃ_２－Ｃ_８アルケニル」は２～８個の炭素を有する、直鎖または分岐鎖を含むアルケニルを指す。例えば、エテニル、１－プロぺニル、２－プロぺニル、１－ブテニル、２－ブテニルまたは３－ブテニルなどが挙げられる。

本発明における「アルキニル」は少なくとも２つの炭素原子と少なくとも１つの炭素－炭素三重結合を有する上記で定義されたアルキルを指し、「Ｃ_２－Ｃ_８アルキニル」は２～８個の炭素を有する直鎖または分岐鎖を含むアルキニルを指す。例えば、エチニル、１－プロピニル、２－プロピニル、１－ブチニル、２－ブチニルまたは３－ブチニルなどが挙げられる。

置換基の結合「－－－」が特定の位置に接続されている場合、置換基はこの位置で置換され、
置換基の結合「－－－」が同一の環上の２つの原子間で交差接続されている場合、この置換基は環上の任意の原子に結合でき、すなわち、置換基は環上の任意の位置で置換され得る。例えば、構造単位

は、シクロヘキシル上の任意の1つの位置で置換され得る。

本発明における「ヘテロシクリル」は、飽和または部分不飽和の単環式または多環式の環状炭化水素置換基を指し、環中の1つまたは複数の環原子は窒素、酸素またはＳ（Ｏ）_ｍのヘテロ原子から選ばれるが、環中の－Ｏ－Ｏ－、－Ｏ－Ｓ－または－Ｓ－Ｓ－を除外して残りの環原子は炭素である。「４－１２員のヘテロシクリル」は４～１２個の環原子を有する環基を指す。単環式のヘテロシクリルの実施例として、これらに限定されないが、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、高ピペラジニルなどが挙げられ、多環式のヘテロシクリルはスピロ環、縮合環、架橋環のヘテロシクリルが含まれ、これらに限定されないが、以下の構造が挙げられる。

本発明における「アルコキシ」は－Ｏ－（アルキル）を指し、そのアルキルが上記で定義された通りである。「Ｃ_１－Ｃ_８アルコキシ」は１～８個の炭素を有するアルキルオキシを指し、その実施例として、これらに限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシなどが挙げられる。

「ハロゲン」はフッ素、塩素、臭素またはヨウ素を指す。

「医薬組成物」は前記した化合物またはその生理学上／薬学上使用可能な塩またはプロドラッグの１種または複数種と他の化学成分とを含む混合物を指し、他の成分としては、例えば、生理学上／薬学上使用可能な担体や賦形剤が挙げられる。医薬組成物の目的は、生体への投与を促すことで活性成分の吸収に寄与して、生物活性を示すことにある。

「担体」は、生体に顕著的な刺激を与えず、投与される化合物の生物活性及び特性を抑制しない材料を指す。

本発明の調製工程において、使用される試薬の略称は次の通りである。
ＤＭＦＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＴＨＦテトラヒドロフラン
ＰＥ石油エーテル
ＥＡ酢酸エチル
ＣＤＩカルボニルジイミダゾール
ＴＢＴＵＯ－ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート
ＤＣＭジクロロメタン
Ｂｏｃｔ－ブトキシカルボニル
ＴＩＰＳＣｌトリイソプロピルシリルクロリド
ＭｅＣＮアセトニトリル
ＴＦＡトルフルオロ酢酸

実施例１の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例２の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例３の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例４の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例５の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例６の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例７の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例８の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例９の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１０の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１１の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１２の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１３の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１４の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１５の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１６の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１７の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１８の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例１９の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例２０の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例２１の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例２２の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。実施例２３の化合物の^１ＨＮＭＲスペクトルである。マウスＤＳＳ腸炎モデルにおける疾患活動性指標（Ｄｉｓｅａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｄｅｘ，ＤＡＩ）の評価結果である。ラットＤＮＢＳ誘発性のクローン病モデルにおける結腸長さに対する結腸重量の比の影響結果である。ラットＤＮＢＳ誘発性のクローン病モデルの結腸潰瘍の面積である。Ｇ１群ラットの結腸の写真である。Ｇ２群ラットの結腸の写真である。Ｇ３群ラットの結腸の写真である。Ｇ４群ラットの結腸の写真である。Ｇ５群ラットの結腸の写真である。Ｇ６群ラットの結腸の写真である。Ｇ１～Ｇ６群ラットの結腸の写真を縮小して比較したものである。

以下、本発明を具体的な実施例を参照して説明する。これらの実施例が本発明を説明するために使用され、本発明の範囲を決して限定しないことは、当業者が理解できる。

以下の実施例における実験方法は、特に断らない限り常法が用いられる。以下の実施例で使用される薬材原料、試薬材料などは、特に断らない限り市販品が用いられる。

実施例１
（Ｓ）－４－（３－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：４－クロロ－１－（トリイソプロピルシリル）－７－アザインドールの合成

室温で、４－クロロ－７アザインドール（１００．００ｇ、６５５．３９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１．２Ｌ）に溶解し、氷浴で０℃まで冷却し、ＮａＨ（３９．４７ｇ、９８３．０９ｍｍｏｌ）を一部分ずつ添加してから、０℃で１時間攪拌し、トリイソプロピルシリルクロリド（１９０．８０ｇ、９８３．０９ｍｍｏｌ、略語ＴＩＰＳＣｌ）を滴下し、室温まで昇温して２時間反応させた。反応液を２Ｌの氷水に注ぎ、石油エーテル（１Ｌ×２）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水（１Ｌ×３）で洗浄し、減圧で乾固まで濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：０）により１９７．５０ｇの無色透明の液体を収率９７％で得た。

工程２：４－クロロ－１－（トリイソプロピルシリル）－７－アザインドール－５－カルボン酸エチルの合成

四つ口フラスコにおいて、４－クロロ－１－（トリイソプロピルシリル）－７－アザインドール（２０．００ｇ、６４．７４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、－７５℃まで降温し、ｓ－ブチルリチウム（１００ｍＬ、１２９．４８ｍｍｏｌ、Ｓｅｃ．ＢｕＬｉ）を滴下してから、－７５℃で１時間攪拌し、クロロカルボン酸クロロエチル（１７．８０ｇ、１２９．４８ｍｍｏｌ）を添加してから、－７５℃で１時間反応させた。反応液を飽和塩化アンモニウム溶液に注ぎ、分液し、水相に酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加して抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過、濃縮し、カラム（ＰＥ：ＥＡ＝１：０～１０：１）により２３．１５ｇの薄黄色の液体を収率９４％で得た。

工程３：４－クロロ－７－アザインドール－５－カルボン酸の合成

室温で、単口フラスコに４－クロロ－１－（トリイソプロピルシリル）－７－アザインドール－５－カルボン酸エチル（１２．９４ｇ、３３．９６ｍｍｏｌ）を加え、エタノール（２００ｍＬ）と１０％の水酸化ナトリウム（１００ｍＬ）を添加してから、６０℃で２時間反応させた。エタノールを減圧で留去し、氷浴で１Ｎの希塩酸により水相をｐＨ＝４に調整し、大量に溶出した白色の固形物をろ過し、ろ過ケーキを乾燥させて８．６０ｇの白色の固形物を収率７７％で得た。

工程４：４－クロロ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

四つ口フラスコにおいて、４－クロロ－７－アザインドール－５－カルボン酸（７．０
０ｇ、３５．６０ｍｍｏｌ）を加え、１００ｍＬのＤＭＦを添加し、攪拌しながらカルボニルジイミダゾール（８．７２ｇ、５３．４１ｍｍｏｌ、ＣＤＩ）を添加し、室温で１．５時間攪拌し、０℃でアンモニア水（９．３４ｇ、１４２．４０ｍｍｏｌ）を滴下し、室温まで自然昇温し、２時間攪拌して反応させた。反応液に１００ｍＬのＥＡを添加し、静置して大量に溶出した白色の固形物をろ過し、ろ過ケーキを洗浄し、乾燥させ、５．３４ｇの灰色の固形物を収率７６％で得た。

工程５：（Ｓ）－１－ニトロソピペリジン－３－カルボン酸エチルの合成

室温で、（Ｓ）－３－ピペリジンカルボン酸エチル（１０．００ｇ、０．０６４ｍｏｌ）を氷酢酸（１００ｍＬ）、水（４０ｍＬ）からなる混合溶液に加え、０℃まで降温してから２０ｍＬの亜硝酸ナトリウム（８．７８ｇ、０．１３ｍｏｌ）が溶解された水溶液を滴下し、０℃で攪拌しながら１時間反応させ、室温まで昇温して２時間反応させた。反応液に２００ｍＬの水を加え、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧濃縮してから直接次の工程に投入した。

工程６：（Ｓ）－１－アミノピペリジン－３－カルボン酸エチル塩酸塩の合成

室温で、（Ｓ）－１－ニトロソピペリジン－３－カルボン酸エチル（１１．８３ｇ、０．０６４ｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、Ｚｎ粉（１０．４０ｇ、０．１６ｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、氷酢酸（５０ｍＬ）を緩やかに滴下してから、０℃で攪拌しながら０．５時間反応させ、室温まで昇温して引き続き２時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキを１００ｍＬのメタノールで注ぎ、ろ液を蒸発乾固させ、残留物に塩酸のエタノール溶液を添加し、０．５時間攪拌し、溶媒を留去して１３．２７ｇの黄色の油状物を工程５と工程６の粗生成物の収率１００％で得た。

工程７：（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸エチルの合成

４－クロロ－７－アザインドール－５－ホルムアミド（１．００ｇ、５．１２ｍｍｏｌ）と（Ｓ）－１－アミノピペリジン－３－カルボン酸エチル塩酸塩（２．１４ｇ、１０．２４ｍｍｏｌ）をマイクロ波管に加え、２０ｍＬのｎ－ブタノールを添加し、１５０℃でマイクロ波により１時間反応させた。反応液を減圧で蒸発乾固させ、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール系）により０．８０ｇの薄黄色のゲル状粗生成物を収率４７．３％で得た。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４０（ｓ，１Ｈ），９．９７（ｓ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），７．７９（ｓ，１Ｈ），７．０７（ｓ，１Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），４．０６（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１７（ｄ，Ｊ＝５６．４Ｈｚ，３Ｈ），２．８８－２．６４（ｍ，２Ｈ），２．３８（ｓ，１Ｈ），２．０７－１．５９（ｍ，３Ｈ），１．２２－０．９３（ｍ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３３２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

工程８：（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸の合成

室温で、（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸エチル（０．７０ｇ、２．１１ｍｍｏｌ）をメタノールに溶解し、３ＮのＮａＯＨ溶液を滴下し、２３℃で３時間反応させた。有機溶媒を留去し、水相を１Ｎの希塩酸でｐＨ＝４程度に調整し、減圧で蒸発乾固させ、残留固形物にメタノールを添加し溶解させ、無機塩をろ過で除去し、メタノールを留去して０．５２ｇの薄黄色の固形物を収率８１．３％で得た。

工程９：（Ｓ）－４－（３－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸（０．２５ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、トルフルオロ乙アンモニウム塩酸塩（０．１７ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）及びＯ－ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（０．４０ｇ、１．２３ｍｍｏｌ、ＴＢＴＵ）を単口フラスコに加え、５ｍＬのＤＭＦを添加し、攪拌しながらトリエチルアミン（０．４８ｇ、４．７５ｍｍｏｌ）を添加してから、室温で徹夜攪拌した。反応液に１０ｍＬの水を加え、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５：１の混合溶媒（１０ｍＬ×５）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で蒸発乾固させ、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール系）により０．０２２ｇの薄黄色の固形物を収率１０％で得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.42 (br, 1H), 9.95 (br, 1H), 8.59 (br, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.15(s, 1H), 7.78 (br, 1H), 7.04 (m, 2H), 3.87 (br, 2H), 3.11 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 2.37 (m, 2H), 1.82 (m, 2H), 1.67 (m, 1H), 1.34 (m, 1H)。MS (ESI) m/z: 385 [M+H]⁺。

実施例２
（Ｓ）－４－（３－（２，２－ジフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：（Ｓ）－３－（（２，２－ジフルオロエチル）カルバモイル）ピペリジン－１－カルボン酸ｔ－ブチルの合成

室温で、（Ｓ）－１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－３－カルボン酸（１５．００ｇ、６５．４０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４００ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１６．５０ｇ、１６３．５０ｍｍｏｌ）とＴＢＴＵ（２５．２０ｇ、７８．５０ｍｍｏｌ）を添加して１時間反応させた後で、０℃の氷浴に移し、２，２－ジフルオロ乙アミン塩酸塩（１０．００ｇ、８５．００ｍｍｏｌ）緩やかに添加してから、０℃で１時間攪拌し、室温で５時間反応させて終了した。濃縮し、水（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、１００ｍＬの飽和食塩水で３回洗浄し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ体系）により１６．０６ｇの無色透明の液体を収率８４％で得た。MS (ESI) m/z: 237.1 [M+H-56]⁺。

工程２：（Ｓ）－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩の合成

（Ｓ）－３－（（２，２－ジフルオロエチル）カルバモイル）ピペリジン－１－カルボン酸ｔ－ブチル（１６．０６ｇ、５４．９４ｍｍｏｌ）をエタノール（１５０ｍＬ）に溶解し、常温で３５％ＨＣｌ／ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）を緩やかに滴下し、３時間反応させて終了した。減圧で溶媒を留去して１１．４３ｇの白色の固形物を収率９１％で得た。MS (ESI) m/z: 193.1 [M+H]⁺。

工程３：（Ｓ）－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）－１－ニトロソピペリジン－３－ホルムアミドの合成

室温で、（Ｓ）－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩（１１．４３ｇ、４９．９８ｍｍｏｌ）を酢酸（１００ｍＬ）に溶解し、０℃で亜硝酸ナトリウム（４．４９ｇ、６５．００ｍｍｏｌ）が溶解された５０ｍＬの水溶液を緩やかに添加した。滴下してから、０℃で１時間反応させ、常温まで昇温して徹夜反応させた。反応終了した後で、反応液に水（１００ｍＬ）を添加し、酢酸エチル（８０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、飽和炭酸ナトリウム水溶液（８０ｍＬ）で有機相を洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、有機相を濃縮した。シリカゲルと混合し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ）により９．８０ｇの白色の固形物を収率８９％で得た。MS (ESI) m/z: 222.1 [M+H]⁺。

工程４：（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩の合成

（Ｓ）－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）－１－ニトロソピペリジン－３－ホルムアミド（９．８０ｇ、４４．３０ｍｍｏｌ）をメタノール（４０ｍＬ）に溶解し、室温で亜鉛粉末（８．７０ｇ、１３２．９０ｍｍｏｌ）を緩やかに添加し、窒素ガスの保護で－２０℃まで降温して１０分間攪拌した。－２０℃で酢酸（５０ｍＬ）を緩やかに滴下し、窒素ガスの保護で２時間反応させて終了し、塩酸の酢酸エチル溶液を添加し、１時間攪拌して塩にし、減圧で蒸発乾固させて保存した。反応液をろ過し、ろ液を直接シリカゲルと混合し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）により８．６０ｇの白色の固形物が得られ、塩酸の酢酸エチル溶液を添加し、１時間攪拌して塩にし、減圧で蒸発乾固させて保存した。MS (ESI) m/z: 208.1 [M+H]⁺。

工程５：（Ｓ）－４－（３－（２，２－ジフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

４－クロロ－７－アザインドール－５－ホルムアミド（０．１０ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩（０．２５ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）をマイクロ波管に加え、ｎ－ブタノール２ｍＬを添加し、１５０℃でマイクロ波により１時間反応させた。反応液をろ過し、ろ液をスピン乾燥し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール系）により０．０１４ｇの薄黄色の固形物を収率７．５％で得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４１（ｂｒ，１Ｈ），９．９３（ｂｒ，１Ｈ），８．３７（ｓ，１Ｈ），８．３２（ｂｒ，１Ｈ），７．８１（ｂｒ，１Ｈ），７．０４（ｍ，３Ｈ），５．９６（ｔ，Ｊ＝５７．５Ｈｚ，１Ｈ），３．４４（ｍ，２Ｈ），３．１２（ｍ，２Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），２．３３（ｍ，２Ｈ），１．７８（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，１Ｈ），１．３２（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３６７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例３
（Ｒ）－４－（３－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

中間体である（Ｒ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩の合成は、実施例２における中間体である（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩の調製方法を参照し、実施例２の工程（１）における（Ｓ）－１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－３－カルボン酸を（Ｒ）－１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－３－カルボン酸に置き換え、２，２－ジフルオロ乙アミン塩酸塩をトルフルオロ乙アミン塩酸塩に置き換えて調製して得た。

４－クロロ－７－アザインドール－５－ホルムアミド（０．１０ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、（Ｒ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩（０．２７ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）をマイクロ波管に加え、２ｍＬのｎ－ブタノールを添加し、１５０℃でマイクロ波により１時間反応させた。反応液をろ過し、ろ液をスピン乾燥し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール系）により０．０１５ｇの薄黄色の固形物粉末を収率７．６％で得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４１（ｂｒ，１Ｈ），９．９４（ｂｒ，１Ｈ），８．６０（ｂｒ，１Ｈ），８．３７（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｂｒ，１Ｈ），７．８２（ｂｒ，１Ｈ），７．０４（ｍ，２Ｈ），３．８８（ｂｒ，２Ｈ），３．１０（ｍ，２Ｈ），２．７１（ｍ，１Ｈ），２．３８（ｍ，２Ｈ），１．８２（ｍ，２Ｈ），１．６７（ｍ，１Ｈ），１．３７（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例４
（Ｒ）－４－（３－（２，２－ジフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

（Ｒ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩の合成は、実施例２における（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミドの調製方法を参照し、実施例２の工程（１）における（Ｓ）－１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－３－カルボン酸を（Ｒ）－１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－３－カルボン酸に置き換えて調製して得た。

４－クロロ－７－アザインドール－５－ホルムアミド（０．１０ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）と（Ｒ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩（０．２５ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）をマイクロ波管に加え、２ｍＬのｎ－ブタノールを添加し、１５０℃でマイクロ波により１時間反応させた。反応液をろ過し、ろ液をスピン乾燥し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール系）により０．０３５ｇの薄黄色の固形物粉末を収率１８．７％で得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４２（ｂｒ，１Ｈ），９．９４（ｂｒ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．３２（ｂｒ，１Ｈ），７．８２（ｂｒ，１Ｈ），７．０８（ｍ，３Ｈ），５．９７（ｔ，Ｊ＝５７．５Ｈｚ，１Ｈ），３．４６（ｂｒ，２Ｈ），３．１２（ｍ，２Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），２．３７（ｍ，２Ｈ），１．８０（ｍ，２Ｈ），１．６７（ｍ，１Ｈ），１．３４（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３６７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例５
（Ｓ）－４－（３－（ｎ－プロピルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸（０．２５ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、ｎ－プロピルアミン（０．０５８ｇ、１．００ｍｍｏｌ）及びＯ－ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（０．３９ｇ、１．２３ｍｍｏｌ、ＴＢＴＵ）を単口フラスコに加え、５ｍＬのＤＭＦを添加し、攪拌しながらトリエチルアミン（０．２５ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）を添加してから、室温で攪拌しながら１６時間反応させた。減圧で反応液を直接蒸発乾固させ、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール系）により４８ｍｇの薄黄色の固形物を収率１７％で得た。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４４（ｂｒ，１Ｈ），９．９７（ｂｒ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），７．８５（ｂｒ，２Ｈ），７．０５（ｍ，３Ｈ），３．１１（ｍ，２Ｈ），２．９８（ｍ，２Ｈ），２．６０（ｍ，１Ｈ），２．３０（ｍ，２Ｈ），１．７２（ｍ，３Ｈ），１．３８（ｍ，３Ｈ），０．８１（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例６
（Ｓ）－４－（３－（シクロプロピルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸（（０．１６ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、シクロプロピルアミン（０．０３６ｇ、０．６３ｍｍｏｌ）及びＯ－ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（０．２５ｇ、０．８０ｍｍｏｌ、ＴＢＴＵ）を単口フラスコに加え、５ｍＬのＤＭＦを添加し、攪拌しながらトリエチルアミン（０．１６ｇ、１．５９ｍｍｏｌ）を添加してから、室温で攪拌しながら１６時間反応させた。減圧で反応液を直接蒸発乾固させ、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール系）により４５ｍｇの薄黄色の固形物を収率２５％で得た。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．５２（ｂｒ，１Ｈ），１０．０３（ｂｒ，１Ｈ），８．３９（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｂｒ，２Ｈ），７．０９（ｍ，２Ｈ），７．０１（ｍ，１Ｈ），３．０９（ｍ，２Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｍ，２Ｈ），１．８０（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，１Ｈ），１．３６（ｍ，１Ｈ），０．５６（ｄｔ，Ｊ＝４．６，２．７Ｈｚ，２Ｈ），０．３６（ｄｔ，Ｊ＝４．６，２．７Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例７
（Ｓ）－４－（３－（シアノエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸（０．２５ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、アミノアセトニトリル塩酸塩（０．０９３ｇ、１．００ｍｍｏｌ）及びＯ－ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（０．３９ｇ、１．２３ｍｍｏｌ、ＴＢＴＵ）を単口フラスコに加え、５ｍＬのＤＭＦを添加し、攪拌しながらトリエチルアミン（０．２５ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）を添加してから、室温で攪拌しながら１６時間反応させた。減圧で反応液を直接蒸発乾固させ、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール系）により４３ｍｇの薄黄色の固形物を収率１５％で得た。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．５０（ｂｒ，１Ｈ），１０．０１（ｂｒ，１Ｈ），８．６７（ｂｒ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），７．８４（ｂｒ，１Ｈ），７．０５（ｍ，３Ｈ），４．１１（ｂｒ，２Ｈ），３．１８（ｍ，２Ｈ），２．６６（ｍ，１Ｈ），２．３８（ｍ，２Ｈ），１．７７（ｍ，３Ｈ），１．３０（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例８
（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸エチル

（Ｓ）－１－（５－ホルミルアミノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸エチルは、実施例１の工程７で得られた中間体である。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４０（ｂｒ，１Ｈ），９．９７（ｂｒ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｂｒ，１Ｈ），７．７９（ｂｒ，１Ｈ），７．０７（ｂｒ，１Ｈ），６．９８（ｂｒ，１Ｈ），４．０６（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１８（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｍ，１Ｈ），２．３８（ｍ，２Ｈ），１．７９（ｍ，３Ｈ），１．３０（ｍ，１Ｈ），１．１５（ｔ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３３２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例９
４－（３－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピロール－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピロール－３－カルボン酸の合成

室温で、３－ピロールカルボン酸（１．００ｇ、８．６８ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＴＨＦと５ｍＬの水からなる混合溶媒に溶解し、炭酸水素ナトリウム（２．１８ｇ、０．０２６ｍｏｌ）を添加し、０℃まで降温し、（Ｂｏｃ）_２Ｏ（２．０８ｇ、９．５５ｍｍｏｌ）滴下してから、室温まで昇温して２時間反応させた。反応液に１００ｍＬのＥＡを添加し、抽出して不純物を除去し、水相をクエン酸溶液でＰＨ＝４に調整し、ＤＣＭを添加して抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して１．６４ｇの白色の固形物を収率８８％で得た。

工程２：１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピロール－３－（２，２，２－トルフルオロエチル）ホルムアミドの合成

室温で、１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピロール－３－カルボン酸（１．６４ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＤＭＦに加え、Ｏ－ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート（３．６７ｇ、１１．４３ｍｍｏｌ、ＴＢＴＵ）、トルフルオロ乙アンモニウム塩酸塩（１．２４ｇ、９．１５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２．３１ｇ、０．０２３ｍｏｌ）を順に添加し、室温で攪拌しながら１６時間反応させた。反応液を５０ｍＬの水に注ぎ、３０ｍＬのＤＣＭを添加して抽出し、水相をＤＣＭで２回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧で蒸発乾固させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）により１．９０ｇの薄黄色の油状物を収率８４％で得た。

工程３：Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピロール－３－ホルムアミド塩酸塩の合成

１－（ｔ－ブトキシカルボニル）ピロール－３－（２，２，２－トルフルオロエチル）ホルムアミド（１．９０ｇ、６．４２ｍｍｏｌ）を塩酸の酢酸エチル（２０ｍＬ）溶液に溶解し、室温で攪拌しながら１６時間反応させた。反応液に対して直接溶媒を減圧で留去し、１．４５ｇの粘稠性の油状物を粗生成物の収率１００％で得た。

工程４：１－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピロール－３－ホルム
アミドの合成

Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩（１．４５ｇ、６．２３ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と５ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温し、亜硝酸ナトリウム（０．６５ｇ、９．３５ｍｍｏｌ）を滴下し、調製された５ｍＬの水溶液を０℃で攪拌しながら１時間反応させ、室温まで昇温して２時間反応させた。反応液に水を加え、酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で蒸発乾固させ、１．２５ｇの薄黄色の液体を粗生成物の収率９５％で得て、直接次の反応に投入した。

工程５：１－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピロール－３－ホルムアミド塩酸塩の合成

１－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピロール－３－ホルムアミド（１．２５ｇ、５．９０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ（１．１５ｇ、０．０１８ｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、氷酢酸（１０ｍＬ）を緩やかに滴下してから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧で蒸発乾固させ、残留物に５０ｍＬの水を添加し、炭酸ナトリウムで溶液のｐＨを９に調整し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５：１）の混合溶媒で５回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で１回洗浄してから無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過、濃縮して薄黄色の液体を得て、塩酸の酢酸エチル溶液を添加し、１時間攪拌して塩にし、溶媒をスピン乾燥させ、１．５０ｇの薄黄色の油状物を収率１００％で得た。

工程６：４－（３－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピロール－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（３－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピロール－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を１－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピロール－３－ホルムアミド塩酸塩に置き換えて調製して得た。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４０（ｂｒ，１Ｈ），９．９７（ｂｒ
，１Ｈ），８．６２（ｂｒ，１Ｈ），８．３６（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｂｒ，１Ｈ），７．０４（ｍ，３Ｈ），３．９５（ｍ，２Ｈ），３．２３－３．０２（ｍ，３Ｈ），２．６９（ｍ，２Ｈ），２．０７（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１０
４－（（３－オキサ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－イル）アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：８－ニトロソ－３－オキサ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタンの合成

室温で、３－オキサ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン塩酸塩（０．３０ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を６ｍＬの酢酸に溶解し、０℃で亜硝酸ナトリウム（０．２１ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）が溶解された３ｍＬの水溶液を緩やかに添加した。滴下してから０℃で１時間反応させ、常温まで昇温して徹夜反応させた。反応終了した後で、反応液に水１５ｍＬを添加し、１５ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、飽和炭酸ナトリウム水溶液で有機相を洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ）により０．２４ｇの黄色の固形物を収率８５％で得た。MS (ESI) m/z: 143 [M+H]⁺。

工程２：３－オキサ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－アミンの合成

８－ニトロソ－３－オキサ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン（０．２４ｇ、
１．６９ｍｍｏｌ）を４ｍＬのメタノールに溶解し、室温で亜鉛粉末（０．３３ｇ、５．０６ｍｍｏｌ）を緩やかに添加し、窒素ガスの保護で－２０℃まで降温して１０分間攪拌した。－２０℃で４ｍＬの酢酸を緩やかに滴下し、２時間攪拌して反応させた。反応液をろ過し、ろ液を直接蒸発乾固させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）により０．２０ｇの白色の固油混合物を収率９３％で得た。MS (ESI) m/z: 129 [M+H]⁺。

工程３：４－（（３－オキサ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－イル）アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（（３－オキサ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－イル）アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を３－オキサ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－アミンに置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４１（ｂｒ，１Ｈ），１０．４４（ｂｒ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．３３（ｂｒ，１Ｈ），７．２３（ｂｒ，１Ｈ），７．０６（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，２Ｈ），３．５７（ｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，２Ｈ），３．２７（ｍ，２Ｈ），１．９４（ｑ，Ｊ＝１０．５，９．２Ｈｚ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２８８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１１
４－（（３－ヒドロキシ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－イル）アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：（１Ｒ，３ｒ，５Ｓ）－８－ニトロソ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－オールの合成

室温で、（１Ｒ，３ｒ，５Ｓ）－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－オール塩酸（０．５０ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）を酢酸（１０ｍＬ）に溶解し、０℃で亜硝酸ナトリウム（０．５４ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）が溶解された５ｍＬの水溶液を緩やかに添加した。滴下してから、０℃で１時間反応させ、常温まで昇温して徹夜反応させた。反応終了した後で、反応液に水（１５ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１５ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、飽和炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）で有機相を洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、有機相を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ）により０．５９ｇの黄色の固形物を収率９６％で得た。MS (ESI) m/z: 157.1 [M+H]⁺。

工程２：（１Ｒ，３ｒ，５Ｓ）－８－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－オールの合成

（１Ｒ，３ｒ，５Ｓ）－８－ニトロソ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－オール（０．５１ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）をメタノール（６ｍＬ）に溶解し、室温で亜鉛粉末（０．６４ｇ、９．８１ｍｍｏｌ）を緩やかに添加し、窒素ガスの保護で－２０℃まで降温して１０分間攪拌した。－２０℃で酢酸（８ｍＬ）を緩やかに滴下し、窒素ガスの保護で０℃で２時間反応させて終了した。反応液をろ過し、炭酸ナトリウムでろ液のｐＨを８に調整し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）により０．５７ｇの白色の固油混合物を１００％より多い収率で得た。MS (ESI) m/z: 143.1[M+H]⁺。

工程３：（（３－ヒドロキシ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－イル）アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
（（３－ヒドロキシ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－イル）アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を（１Ｒ，３ｒ，５Ｓ）－８－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－オールに置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ８．３１（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｂｒ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｂｒ，２Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），２．３７－２．３１（ｍ，２Ｈ），２．２５－２．１０（ｍ，３Ｈ），２．０５（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，６．４Ｈｚ，１Ｈ），１．９４（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），１．９１（ｍ，１Ｈ），１．６１（ｔ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１２
４－（Ｎ－Ｂｏｃ－５－アミノ－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ
））－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：Ｎ－Ｂｏｃ－５－ニトロソ－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ）の合成

Ｎ－Ｂｏｃ－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ）（２．１２ｇ、１０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と５ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温し、亜硝酸ナトリウム（１．０３ｇ、１５ｍｍｏｌ）が溶解された５ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌してから、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液に水を加え、酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、得られた２．４１ｇの白色の固形物を減圧で蒸発乾固させて直接次の工程に投入した。

工程２：Ｎ－Ｂｏｃ－５－アミノ－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ）の合成

Ｎ－Ｂｏｃ－５－ニトロソ－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ）
（２．４１ｇ、１０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ（１．９５ｇ、０．０３ｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、１０ｍＬの氷酢酸を緩やかに滴下してから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧で蒸発乾固させ、５０ｍＬの水を添加して溶解させた後で、炭酸ナトリウムで溶液のｐＨを９に調整し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５：１）の混合溶媒で５回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を留去して１．７６ｇの白色の固形物を収率８１．８％で得た。

工程３：４－（Ｎ－Ｂｏｃ－５－アミノ－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（Ｎ－Ｂｏｃ－５－アミノ－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩をＮ－Ｂｏｃ－５－アミノ－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ）に置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．３８（ｂｒ，１Ｈ），９．８６（ｂｒ，１Ｈ），８．３６（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｂｒ，１Ｈ），７．１５－６．５８（ｍ，３Ｈ），３．５７（ｍ，２Ｈ），３．０９（ｍ，２Ｈ），２．８８－２．５１（ｍ，４Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．１８（ｍ，１Ｈ），０．７７（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１３
４－（５－アセチルヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：１－（５－ニトロソヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））エタン-1-オンの合成

１－（ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））アセトアルデヒド塩酸塩（１．５０ｇ、７．８７ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と５ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温し、亜硝酸ナトリウム（０．８１ｇ、１１．８０ｍｍｏｌ）が溶解された５ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液に水を加え、酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で溶媒を留去して、１．４４ｇの薄黄色の液体を収率１００％で得て、直接次の工程に投入した。

工程２：１－（５－アミノヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））アセトアルデヒド塩酸塩の合成

１－（５－ニトロソヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））アセトアルデヒド（１．４４ｇ、７．８７ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ粉（１．５３ｇ、０．０２３ｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、氷酢酸（１０ｍＬ）を緩やかに滴下してから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧で蒸発乾固させ、残留物に５０ｍＬの水を添加して溶解させ、炭酸ナトリウムで溶液のｐＨを９に調整し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５：１）の混合溶媒で５回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧溶媒を留去し、得られた薄黄色の液体に塩酸の酢酸エチル溶液を添加し、０．５時間攪拌して塩にし、溶媒を留去して２．００ｇの薄黄色の油状物を粗生成物の収率１００％で得た。

工程３：４－（５－アセチルヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（５－アセチルヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を１－（５－アミノヘキサヒドロピロロ［３，４－ｃ］ピロール－２（１Ｈ））アセトアルデヒド塩酸塩に置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４０（ｂｒ，１Ｈ），９．８５（ｂｒ，１Ｈ），８．３６（ｓ，１Ｈ），７．８８（ｂｒ，１Ｈ），７．１２（ｂｒ，１Ｈ），７．０３（ｂｒ，１Ｈ），６．８５（ｂｒ，１Ｈ），３．６７（ｍ，２Ｈ），３．１４－２．６２（ｍ，６Ｈ），２．００（ｓ，３Ｈ），１．２８（ｍ，１Ｈ），０．８６（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１４
４－（１－オキソ－２，８－ジアザスピロ［４．５］デカン－８－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：８－ニトロソ－２，８－ジアザスピロ［４．５］デカン－１－オンの合成

２，８－ジアザスピロ［４．５］デカン－１－オン（２．０８ｇ、２０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と５ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温し、亜硝酸ナトリウム（２．０７ｇ、３０ｍｍｏｌ）が溶解された１０ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液に水を加え、酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で蒸発乾固させ、得られた２．４７ｇの粗生成物を直接次の工程に投入して反応された。

工程２：８－アミノ－２，８－ジアザスピロ［４．５］デカン－１－オン塩酸塩の合成

８－ニトロソ－２，８－ジアザスピロ［４．５］デカン－１－オン（２．４７ｇ、２０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ（３．９０ｇ、０．０６ｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、１０ｍＬの氷酢酸を緩やかに滴下してから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧で蒸発乾固させ、塩酸のエタノール溶液を添加して０．５時間攪拌し、減圧で溶媒を留去してから、酢酸エチルでパルプ化してろ過し、ろ過ケーキを乾燥させて２．１２ｇの薄黄色の固形物を収率９３％で得た。

工程３：４－（１－オキソ－２，８－ジアザスピロ［４．５］デカン－８－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（１－オキソ－２，８－ジアザスピロ［４．５］デカン－８－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を８－アミノ－２，８－ジアザスピロ［４．５］デカン－１－オン塩酸塩に置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．３９（ｂｒ，１Ｈ），９．９２（ｂｒ，１Ｈ），８．３７（ｓ，１Ｈ），７．６４（ｂｒ，２Ｈ），７．０５（ｍ，３Ｈ），３．５３（ｍ，２Ｈ），３．１９
（ｍ，２Ｈ），３．０５（ｍ，２Ｈ），１．９７（ｍ，２Ｈ），１．９１（ｍ，２Ｈ），１．４９（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１５
４－（８－（シクロプロピルカルボニル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：８－シクロプロピルカルボニル（３－ニトロソ－３，８－ジアザビシクロ［３．
２．１］オクタンの合成

室温で、８－シクロプロピルカルボニル－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン塩酸塩（１．１１ｇ、５．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と５ｍＬからなる混合溶液に加え、０℃まで降温し、亜硝酸ナトリウム（０．５３ｇ、７．６８ｍｍｏｌ）が溶解された５ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液に水を加え、酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で溶媒を留去し、得られた１．０４ｇの薄黄色の液体を直接次の工程の反応に用いる。

工程２：８－シクロプロピルカルボニル（３－アミノ－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタンの合成

室温で、８－シクロプロピルカルボニル（３－ニトロソ－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン（１．０４ｇ、５．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ粉（１．００ｇ、１５．００ｍｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、１０ｍＬの氷酢酸を緩やかに滴下してから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させ、反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールでリンスし、ろ液を集め、減圧で蒸発乾固させた後で、５０ｍＬの水を添加して溶解させ、炭酸ナトリウム水溶液でｐＨを９に調整し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５：１）の混合溶媒で５回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧で溶媒を留去して薄黄色の油状物０．９８ｇを得た。

工程３：４－（８－（シクロプロピルカルボニル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（８－（シクロプロピルカルボニル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を８－シクロプロピルカルボニル（３－アミノ－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタンに置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４４（ｂｒ，１Ｈ），１０．４７（ｂｒ，１Ｈ），８．４０（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｂｒ，１Ｈ），７．２３（ｂｒ，１Ｈ），７．１０（ｍ，２Ｈ），４．２０（ｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１０（ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，１Ｈ），３．４３（ｍ，２Ｈ），２．９８（ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，１Ｈ），１．９６（ｍ，３Ｈ），１．７２（ｍ，１Ｈ），１．５８（ｍ，１Ｈ），０．７６（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１６
４－（２－メチル－５－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：６－メチル－１－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミドの合成

６－メチル－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド（２．２４ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と１０ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温してから亜硝酸ナトリウム（１．０３ｇ、１５．００ｍｍｏｌ）が溶解された１０ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌し、室温まで自然昇温して１時間反応させた。反応液に水を加え、ＤＣＭで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩で３回洗浄し、減圧で蒸発乾固させ、得られた２．５３ｇの薄黄色の固形物を直接次の工程に投入して反応された。

工程２：６－メチル－１－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミドの合成

室温で、６－メチル－１－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド（２．５３ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ粉（２．４０ｇ、４０．００ｍｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、１０ｍＬの氷酢酸を緩やかに滴下してから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させ、反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧で蒸発乾固させ、５０ｍＬの水を添加して溶解させた後で、炭酸ナトリウムで溶液のｐＨを９に調整し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５：１）の混合溶媒で５回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧で蒸発乾固させて２．１１ｇの薄黄色の油状物を収率８８％で得た。

工程３：４－（２－メチル－５－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（２－メチル－５－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を６－メチル－１－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミドに置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ８．３４（ｓ，１Ｈ），７．２４（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．８９（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ），２．８３（ｍ，１Ｈ），２．６６（ｍ，１Ｈ），２．５２（ｍ，１Ｈ），２．２９－２．００（ｍ，１Ｈ），１．９４（ｍ，１Ｈ），１．６０（ｍ，２Ｈ），１．１１（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１７
４－（８－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：３－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－ホルムアミドの合成

Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－ホルムアミド塩酸塩（３．５１ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）を４０ｍＬの氷酢酸と１０ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温し、亜硝酸ナトリウム（１．０４ｇ、１５．００ｍｍｏｌ）が溶解された１０ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌し、室温まで自然昇温して１時間反応させた。反応液に水を加え、ＤＣＭで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で蒸発乾固させ、得られた２．６６ｇの薄黄色の固形物を直接次の工程の反応に用いる。

工程２：３－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－ホルムアミドの合成

室温で、３－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－ホルムアミド（２．６６ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ（２．６４ｇ、４０．００ｍｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、氷酢酸（１０ｍＬ）を緩やかに滴下してから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して１６時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧で蒸発乾固させ、５０ｍＬの水を添加して溶解させた後で、炭酸ナトリウムで溶液のｐＨを９に調整し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５：１）混合溶媒で５回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧で蒸発乾固させて２．４１ｇの薄黄色の油状物を収率９５％で得た。

工程３：４－（８－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（８－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を３－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－８－ホルムアミドに置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ８．３５（ｓ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．９２（ｍ，２Ｈ），３．８９－３．８１（ｍ，２Ｈ），３．５１（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｍ，２Ｈ），１．８３（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１８
４－（８－（２，２，２－トルフルオロアセチル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：８－ニトロソ－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－カルボン酸ｔ－ブチルの合成

８－Ｂｏｃ－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン（１．０６ｇ、５．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と５ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温してから亜硝酸ナトリウム（０．５２ｇ、１５．００ｍｍｏｌ）が溶解された１０ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液に水を加え、酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で蒸発乾固させ、得られた１．２１ｇの粗生成物を直接次の工程に投入した。

工程２：８－アミノ－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－カルボン酸ｔ－ブチルの合成

８－ニトロソ－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－カルボン酸ｔ－ブチル（１．２１ｇ、５．００ｍｍｏｌ）を四つ口フラスコに含まれている２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ粉（１．３０ｇ、２０．００ｍｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、１０ｍＬの氷酢酸てを緩やかに滴下しから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液減圧で溶媒を留去して１．１４ｇの薄黄色の粘稠状液体を収率９９％で得た。

工程３：４－（８－（２，２，２－トルフルオロアセチル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
実施例１の工程７における方法を参照し、実施例１の工程７における（Ｓ）－１－アミノピペリジン－３－カルボン酸エチル塩酸塩を８－アミノ－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－カルボン酸ｔ－ブチルに置き換え、そしてｂｏｃの脱保護でアシル化して４－（８－（２，２，２－トルフルオロアセチル）－３，８－ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ８．５３（ｓ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），４．２５（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｍ，２Ｈ），３．１４（ｍ，２Ｈ），２．４７（ｍ，２Ｈ），２．３０（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１９
４－（４－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：１－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－４－ホルムアミドの合成

Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－４－ホルムアミド塩酸塩（２．１０ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と５ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温してから亜硝酸ナトリウム（１．０４ｇ、１５．００ｍｍｏｌ）が溶解された５ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液に水を加え、酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で蒸発乾固させ、得られた２．３９ｇの薄黄色の固形物を直接次の工程に投入して反応された。

工程２：１－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－４－ホルムアミド塩酸塩の合成

１－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－４－ホルムアミド（２．３９ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ粉（２．６４ｇ、４０．００ｍｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、１０ｍＬの氷酢酸を緩やかに滴下してから、０℃で攪拌０．５時間後、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧で蒸発乾固させ、残留物に１０ｍＬの塩酸のエタノール溶液を加え、１０分間攪拌してから、減圧で蒸発乾固させて２．６１ｇの薄黄色の粘稠状液体を収率１００％で得た。

工程３：４－（４－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
４－（４－（２，２，２－トルフルオロエチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を１－アミノ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－４－ホルムアミド塩酸塩に置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４１（ｂｒ，１Ｈ），９．９５（ｂｒ，１Ｈ），８．５９（ｂｒ，１Ｈ），８．３７（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｂｒ，１Ｈ），７．０８－７．０３（ｍ，３Ｈ），３．８８（ｂｒ，２Ｈ），３．１０（ｍ，２Ｈ），２．７１（ｍ，１Ｈ），２．４２（ｍ，２Ｈ），１．８０（ｍ，２Ｈ），１．６９（ｍ，１Ｈ），１．３６（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例２０
（Ｓ）－４－（３－（３，３－ジフルオロシクロブチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成

工程１：（Ｓ）－Ｎ－（３，３－ジフルオロシクロブチル）－１－ニトロソピペリジン－３－ホルムアミドの合成

（Ｓ）－Ｎ－（３，３－ジフルオロシクロブチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩（２．１８ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの氷酢酸と５ｍＬの水からなる混合溶媒に加え、０℃まで降温してから亜硝酸ナトリウム（１．０４ｇ、１５．００ｍｍｏｌ）が溶解された５ｍＬの水溶液を滴下し、０℃で１時間攪拌してから、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液に水を加え、酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、減圧で蒸発乾固させて２．４７ｇの薄黄色の固形物を収率１００％得て、直接次の反応に投入した。

工程２：（Ｓ）－Ｎ－（３，３－ジフルオロシクロブチル）－１－ニトロソピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩の合成

１－ニトロソ－Ｎ－（２，２，２－トルフルオロエチル）ピペリジン－４－ホルムアミド（２．４７ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、Ｚｎ粉（２．６４ｇ、４０．００ｍｍｏｌ）を添加し、－５℃まで降温し、１０ｍＬの氷酢酸を緩やかに滴下してから、０℃で０．５時間攪拌し、室温まで自然昇温して２時間反応させた。反応液をろ過し、ろ過ケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧で蒸発乾固させ、残留物に１０ｍＬの塩酸のエタノール溶液を添加して１０分間攪拌し、減圧で蒸発乾固させて２．６９ｇの薄黄色の粘稠液体を収率１００％で得た。

工程３：（Ｓ）－４－（３－（３，３－ジフルオロシクロブチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの合成
（Ｓ）－４－（３－（３，３－ジフルオロシクロブチルカルバモイル）ピペリジン－１－アミノ）－１Ｈ－７－アザインドール－５－ホルムアミドの調製方法は、実施例２の工程（５）における方法を参照し、（Ｓ）－１－アミノ－Ｎ－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩を（Ｓ）－Ｎ－（３，３－ジフルオロシクロブチル）－１－ニトロソピペリジン－３－ホルムアミド塩酸塩に置き換えて調製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ８．３２（ｓ，１Ｈ），７．１８（ｂｒ，１Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｍ，１Ｈ），２．９０（ｍ，２Ｈ），２．７４（ｍ，１Ｈ），２．５４（ｍ，４Ｈ），２．２２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），２．０６（ｍ，１Ｈ），１．８６（ｍ，３Ｈ），１．６２（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例２１
（Ｓ）－１－（５－シアノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸エチルの合成

工程１：４－クロロ－１－（トリイソプロピルシリル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－カルボニトリルの合成

窒素ガスの保護で、４－クロロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－カルボニ
トリル（１．００ｇ、５．６０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、０℃でＮａＨ（０．２７ｇ、１１．２０ｍｍｏｌ）を添加し、攪拌しながら２０分間反応された。トリイソプロピルシリルクロリド（１．６０ｇ、８．４０ｍｍｏｌ、ＴＩＰＳＣｌ）を滴下し、室温まで昇温して１６時間反応させて終了した。水を添加して希釈し、ＥＡで抽出し、有機相を合わせ、乾燥させて濃縮した。カラムクロマトグラフィー精製（ＥＡ／ＰＥ系）により１．７７ｇの白色の固形物を収率９５％で得た。

工程２：（Ｓ）－１－（５－シアノ－１Ｈ－７－アザインドール－４－アミノ）ピペリジン－３－カルボン酸エチルの合成

４－クロロ－１－（トリイソプロピルシリル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－カルボニトリル（０．９０ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）を１，４－ジオキサン（１５ｍＬ）に溶解し、室温でトリエチルアミン（０．６８ｇ、６．７２ｍｍｏｌ）、（Ｓ）－１－アミノピペリジン－３－カルボン酸エチル塩酸（０．７３ｇ、３．５０ｍｍｏｌ）を緩やかに添加し、窒素ガスの保護で１００℃まで昇温し、２４時間反応された。反応液を濃縮し、カラムクロマトグラフィー精製（順相カラムはＥＡ／ＰＥ系であり、逆相カラムはＨ_２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）／ＭｅＣＮ系である）により０．０３ｇの薄黄色の固形物を得た。

^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．７５（ｂｒ，１Ｈ），８．６２（ｂｒ，１Ｈ），８．０６（ｓ，１Ｈ），７．２０（ｂｒ，１Ｈ），６．７６（ｂｒ，１Ｈ），４．０８（ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．２１（ｍ，１Ｈ），３．０５（ｍ，１Ｈ），２．８１（ｍ，１Ｈ），２．６６（ｍ，２Ｈ），１．９９（ｍ，１Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例２２
（Ｓ）－４－（（３－（（２，２－ジフルオロエチル）カルバモイル）ピペリジン－１－イル）アミノ）－Ｎ－メチル－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－ホルムアミドの合成

（Ｓ）－４－（（３－（（２，２－ジフルオロエチル）カルバモイル）ピペリジン－１－イル）アミノ）－Ｎ－メチル－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－ホルムアミドの合成は、実施例１の化合物、実施例２の化合物の調製方法を参照し、実施例１の工程４におけるアンモニア水溶液をメチルアミン溶液に置き換え、実施例２の工程５における４－クロロ－７－アザインドール－５－ホルムアミドを４－クロロ－Ｎ－メチル－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－ホルムアミドに置き換えて製して得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ １１．４８（ｂｒ，１Ｈ），９．７４（ｂｒ，１Ｈ），８．３１（ｂｒ，３Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝３８．４Ｈｚ，２Ｈ），５．９７（ｔ，Ｊ＝５６．０Ｈｚ，１Ｈ），３．５６－３．４０（ｍ，２Ｈ），３．１８－３．０６（ｍ，２Ｈ），２．７５（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，３Ｈ），２．６８（ｔ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），２．４８－２．３０（ｍ，２Ｈ），１．８０（ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，２Ｈ），１．７３－１．６１（ｍ，１Ｈ），１．３５（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例２３
（Ｓ）－４－（（３－（（２，２，２－トルフルオロエチル）カルバモイル）ピペリジン－１－イル）アミノ）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－カルボン酸エチルの合成

（Ｓ）－４－（（３－（（２，２，２－トルフルオロエチル）カルバモイル）ピペリジン－１－イル）アミノ）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－５－カルボン酸エチルの合成は、実施例１、実施例２２の化合物の調製方法を参照して、実施例１の工程４におけるアンモニア水溶液をメチルアミン溶液に置き換えて調製して得た。

１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １２．４９（ｂｒ，１Ｈ），１０．５３（ｂｒ，１Ｈ），８．７３（ｂｒ，１Ｈ），８．６３
（ｂｒ，１Ｈ），８．４０（ｂｒ，１Ｈ），７．３３（ｂｒ，１Ｈ），７．２１（ｂｒ，１Ｈ），３．８９（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，６．７Ｈｚ，２Ｈ），３．１１（ｄｄ，Ｊ＝２４．０，９．１Ｈｚ，２Ｈ），
２．８０（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｍ，３Ｈ），１．８５（ｍ，２Ｈ），１．６９（ｍ，１Ｈ），１．３８（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９９［Ｍ＋Ｈ］＋。

実施例２４
キナーゼ活性試験
本試験は、γ－^３３Ｐ－ＡＴＰ同位体試験法を用いて、キナーゼＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、ＴＹＫ２に対する化合物の阻害作用を試験し、これらのキナーゼに対する化合物の阻害活性の５０％阻害濃度ＩＣ_５０が得られた。

トファシチニブ（トファシチニブ）は、ＷＯ２０１４１９５９７８Ａ２特許の方法により調製された（ＪｉａｎｇｓｕＶｃａｒｅＰｈａｒｍａＴｅｃｈＣｏ． Ltd.、製品番号：３２１－１－１６８８－３７Ｃ）。

１．基本的な反応のバッファー
２０ｍＭの４－ヒドロキシエチルピペラジンエタンスルホン酸バッファー（Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．５）、１０ｍＭの塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ_２）、１ｍＭのグリコールエーテルジアミン四酢酸（ＥＧＴＡ）、０．０２％のドデシルポリグリコールエーテル（Ｂｒｉｊ３５）、０．０２ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、０．１ｍＭのバナジウム酸ナトリウム（Ｎａ_３ＶＯ_４）、２ｍＭのジチオスレイトール（ＤＴＴ）、１％のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）。

２．化合物の調製
化合物は、１００％のＤＭＳＯで特定の濃度に溶解されてから、自動サンプリング装置により異なる濃度のサンプル（ＤＭＳＯ溶解液）に勾配希釈された。

３．反応の工程
３．１基本的な反応のバッファーで反応基質を希釈する。
３．２基質溶液にキナーゼを加え、穏やかに均一に混合する。
３．３自動サンプリングシステムにより１００％のＤＭＳＯで希釈された異なる濃度の化合物をキナーゼ溶液に加え、室温で２０分間培養する。
３．４室温で^３３Ｐ－ＡＴＰ（１０μＭ、１０μＣｉ／μｌ）を加えてキナーゼ反応を開始し、２時間反応させた。

４．検出
反応液をイオン交換ろ過システムにかけて、未反応のＡＴＰ及び反応により発生したＡＤＰなどのイオンを除去した後、基質中の^３３Ｐ同位体の放射線量を検出した。

５．データ処理
放射線量に基づいて、異なる濃度の阻害剤が添加された系のキナーゼ活性を計算し、キナーゼ活性に対する異なる濃度の化合物の阻害作用を得て、グラフパッドプリズムにより適合して化合物の阻害ＩＣ_５０を算出した。

本発明の化合物の生物化学活性は、上記の試験により行われ、測定されたＩＣ_５０値は、具体的に表１に示される。

化合物ＷＸ１４、ＷＸ１５は、ＷＯ２０１６１１６０２５Ａ１特許の実施例１２、実施例１３の方法を参照して調製され、それらの構造は以下で示される。

結論：本発明の実施例１、実施例２、実施例３、実施例７、実施例９、及び実施例２３の化合物は、陽性対照薬であるトファシチニブと比べてより優れたＪＡＫ１キナーゼ阻害活性があり、ほとんどの化合物は、ＪＡＫ２よりも、ＪＡＫ１キナーゼ、ＪＡＫ３キナーゼに対する選択性が強く、より良い安全性が期待され得る。本発明の化合物は、ＴＹＫ２に対しても有意な阻害活性があり、対応する抗炎症活性がある。

実施例２５
肝臓ミクロソーム試験
培養系の総体積は２５０μＬであり、５０ｍｍｏｌ／ＬのＰＢＳバッファー（ｐＨ＝７．４）でタンパク質濃度が０．５ｍｇ／ｍＬであるヒト肝臓ミクロソーム培養液を調製し、培養を開始する前に、１００μｍｏｌ／Ｌの試験化合物２．５μＬと前記の培養液１９７．５μＬとを混合し、３７℃の水浴で５分間予培養した後、同じく５分間予培養した還元型補酵素II溶液（５ｍｍｏｌ／Ｌ）を５０μＬ加えて反応を開始し、（反応系中の肝臓ミクロソーム種のタンパク質含有量は０．５ｇ／Ｌであり、試験化合物の最終濃度は１μｍｏｌ／Ｌである）、３７℃の水浴で振とうしながら培養し、それぞれ０、５、１５、３０、６０分間で取り出し、すぐに内部標準がテルフェナジン（正イオンの内部標準、２５ｎｇ／ｍＬ）とトルブタミド（負イオンの内部標準、５０ｎｇ／ｍＬ）である正負内部標準が混合されたメタノール溶液６００μＬを添加して反応を終了させた。反応が終了した培養液を２分間振とうし、１０分間遠心（４℃、１６０００ｒ／ｍｉｎ）した後で、上澄みを取り、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより検出し、母薬の残留量を定量分析した。（ＤＭＳＯ＝０．１％）

０分間培養した化合物の濃度を１００％とし、他の培養時点での濃度を残留量百分率に変換し、培養時間に対して各時点での残留量百分率の自然対数を線形回帰し、傾きｋを算出し、公式に従ってＴ_１／２＝－０．６９３／ｋでインビトロの半減期を算出した。肝臓ミクロソームでのクリアランス率（ＣＬｉｎｔ（μＬ／ｍｉｎ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ）＝Ｌｎ（２）＊１０００／Ｔ_１／２（ｍｉｎ）／タンパク質濃度（ｍｇ／ｍｌ））。

結論：本発明の実施例１、実施例２の化合物は、優れた肝臓代謝安定性を有し、特に実施例２の化合物は肝臓ミクロソームでの代謝半減期が陽性対照薬物のトファシチニブよりも有意に優れるインビボの代謝安定性を有する。

実施例２６
ＤＳＳ誘発性のマウス潰瘍性結腸炎モデルの治療活性試験
６～７週齢のマウスを無作為に群分け、群ごとに６匹のマウスを入れる。陰性対照群のマウスは自由に精製水を飲ませ、他の群のマウスは自由に２％のデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）溶液を７日間連続して飲ませた。モデルを作ると共に、各群に薬物治療を1日1回連続7日間で施した（具体的な状況に応じて治療群及びマウスの数を調整できる）。８～１０日後、ＤＳＳを含む水を精製水に置き換え、マウスに自由に飲ませた。引き続き通常どおりに３日間投与した。

投与初日から、マウスの精神状態、摂食、摂水、及び活動などの状況を毎日観察し、マウスの体重を毎日量り、性状評価や潜血検査のために動物の糞を集めた。得られた実験動物の１～１０日の疾患活動性指標（Ｄｉｓｅａｓｅａｃｔｉｖｅｉｎｄｅｘ、ＤＡＩ）を総合的に得た。

前記の標準に従って採点した。体重の減少、糞の性状、及び潜血の状況の採点を合計して、各マウスの疾患活動性指標（Ｄｉｓｅａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｄｅｘ、ＤＡＩ）を得て、疾患の活動状況を評価した。ＤＡＩ＝（体重減少スコア＋糞性状スコア＋便血スコア）／３、スコア範囲は０～４点である。

実験データは、統計的に処理され、データはｍｅａｎ±ＳＤまたはｍｅａｎ±ＳＭＥで示され、ＳＰＳＳ１３．０のソフトウェアで統計分析し、各群間の差はｔ検定（等分散）あるいはｔ‘検定（不等分散）で比較され、α＝０．０５、Ｐ＜０．０５を統計的に有意であるとする。

ＤＡＩの評価結果：実施例１（５ｍｇ／ｋｇ群の８日目のＤＩＡスコアは２．８であり、１５ｍｇ／ｋｇ群の８日目のＤＩＡスコアは２である）、実施例２（５ｍｇ／ｋｇ群の８日目のＤＩＡスコアは１．５である）の化合物は、マウスＤＳＳモデルで顕示出明確的な治療効果を示し、陽性対照薬物のメサラジン（５ＡＳＡ）（１００ｍｇ／ｋｇ群の８日目のＤＩＡスコアは３．５である）、トファシチニブ（５ｍｇ／ｋｇ群の８日目のＤＩＡスコアは３．５である）よりも治療効果が強い。

結論：本発明の実施例１、実施例２の化合物は低い用量で有意なＤＳＳ誘発性のマウス腸炎を阻害する作用を示し、同じ用量で陽性対照薬のトファシチニブよりも薬物効果が強い。

実施例２７
ＤＮＢＳ（２，４－ジニトロベンゼンスルホン酸）誘発性のラットクローン病モデルの治療活性を評価する試験
４～５週齢の雄性ウィスターラットに5日間適応的に給餌し、実験の２日前に無作為に６群に分ける。

ブランク対照群：Ｇ１（正常）、正常ラットを４匹選択し、３０％のエタノールを１０ｍＬ／ｋｇで摂取させた。

モデル群：ラットの腸管に０．５ｍＬの５０ｍｇ／ｍｌ濃度のＤＮＢＳ（ＤＮＢＳを３０％エタノールに溶解してなる）を注射し、ラット腸炎を誘発し、合計４０匹のうち、８匹をモデル群Ｇ２（モデル）として選択し、残りの３２匹のラットに薬物を投与した。

投与群：ＤＮＢＳ誘発性の腸炎ラットにそれぞれＡＢＴ４９４、実施例２の化合物を投与し、群毎に８匹でＧ３～Ｇ６群に分け、Ｇ３：ＡＢＴ４９４１０ｍｇ／ｋｇ－ＱＤ、Ｇ４：実施例２０．３ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ、Ｇ５：実施例２１ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ、Ｇ６：実施例２３ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ。

ラットを４８時間摂水・絶食させ、絶食期間中、１日１回、５％のブドウ糖塩溶液（１０ｍＬ／ｋｇ）を実験動物のエネルギー補給剤として使用した。実験でモデルを作る日、絶食ラットを舒泰（２５ｍｇ／ｋｇ）で麻酔した後、ラットの肛門から左結腸曲（肛門までは約８ｃｍ）に０．５ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬのＤＮＢＳを注射してラットに腸炎を誘発させた。ラットは、ＤＮＢＳの逆流を防ぐために意識を取り戻すまで１５分間頭を下に向けた姿勢を保った。実験でモデルを作る日から７日間薬物治療を行った。

陽性対照薬のＡＢＴ４９４は、ＮａｎｊｉｎｇＮｅｗＥｎｚｙｍｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏＬｔｄから購入しており、番号がＮＮＥＳ１９０３２９であり、その構造は以下に示される。

ＤＮＢＳモデルを作った後、毎日動物の体重を測定、記録し、動物の日常の活動を観察し、異常な状況を記録した。実験中、ラットの糞の状態を毎日評価した。７日目にイソフルラン（３～５％）で麻酔し、眼窩から採血し、血清を分離して－８０℃で保存した。すべての動物は、動物が過剰なＣＯ_２を吸入して窒息させた後で頸椎脱臼する方法で安楽死させた。腹腔を切り、結腸直腸を取り出し、縦方向に解剖し、結腸直腸内の糞の性状を評価した。氷のＰＢＳで結腸直腸を洗浄した後、潰瘍面を観察し、腸の長さ、重量及び潰瘍の面積を記録し、その重量と長さとの比を算出し（結腸重量（ｇ）／長度（ｃｍ）の比率×１００）、全体の写真を撮った。すべての腸組織を縦方向に２つに分割し、４％の中性PFAで固定化し、パラフィンで埋め込み、残りの結腸サンプルを－８０℃で凍結保存した。

統計分析にはＥｘｃｅｌ、Ｇｒａｐｈｐａｄのソフトウェアを使用して行った。結果はｍｅａｎ±ＳＤで表わされる。群間の比較は、両側Ｔ検定が採用され、^＊ｐ＜０．０５は薬物治療群がモデル群と比べて有意な統計的差異を有し、^＊＊ｐ＜０．０１は薬物治療群がモデル群と比べて非常に有意な統計的差異を有し、^＃ｐ＜０．０５はモデル群が正常群と比べて有意な統計的差異を有し、^＃＃ｐ＜０．０１はモデル群が正常群と比べて非常に有意な統計的差異を有する。

ラットＤＮＢＳ誘発性のクローン病モデルにおける長さに対する結腸重量の比に対して化合物の影響結果を図２５に示し、結腸の写真を図２７～図３３に示し、ここで、Ｇ３：ＡＢＴ４９４１０ｍｇ／ｋｇ－ＱＤ、Ｇ４：実施例２０．３ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ、Ｇ５：実施例２１ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ、Ｇ６：実施例２３ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ薬物治療群における長さに対する結腸重量の比は、それぞれ１３．４±５．２、１０．５±３．９、１０．０±１．９、１０．５±２．０であり、いずれもモデル群Ｇ２における長さに対する結腸重量の比（１４．６±５．１）よりも低く、Ｇ５実施例２１ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ組はモデル群Ｇ２と比べて有意な差異を有する（＊Ｐ＜０．０５）。

ラットＤＮＢＳ誘発性のクローン病モデルの結腸潰瘍面積に対する化合物の影響を図２６に示し、ここで、Ｇ３ＡＢＴ４９４１０ｍｇ／ｋｇ－ＱＤ、Ｇ４実施例２０．３ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ、Ｇ５実施例２１ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ、Ｇ６実施例２３ｍｇ／ｋｇ－ＢＩＤ薬物治療群におけるマウスの結腸潰瘍面積は、それぞれ１．３７±１．７２、０．８３±１．００、０．６５±１．０５、０．７６±１．２１であり、いずれもモデル群Ｇ２（１．５４±２．００）よりも低い。

結論：本発明の実施例２の化合物は、低い用量で有意なＤＮＢＳ誘発性のラット腸炎を阻害する作用を示す。

Claims

式（Ｉ）で示される化合物、その立体異性体またはその薬学上許容される塩。

式中、環Ａは任意選択的に1つまたは複数のＲ_ａによって置換される以下の基から選ばれ、

Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に1つまたは複数のＲ_ａによって置換されるメチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、ｎ－ブチル、ｔ－ブチル、シクロブチル、ピリジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリルまたは

から選ばれ、
Ｒ^２は－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７であり、
Ｌは－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、
あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素であり、
Ｒ^４とＲ^５はそれぞれ水素であり、
Ｒ^６とＲ^７とＲ^１０はそれぞれ水素、任意選択的に1つまたは複数のＲ_ｂによって置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルから独立して選ばれ、
ｍは１または２から選ばれ、
ここで、Ｒ_ａは、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ１－Ｃ８アルキル
またはＣ_１－Ｃ_８アルコキシから選ばれ、
Ｒ_ｂは、水素または重水素から選ばれる。
環Ａは任意選択的に1つまたは複数のＲ_ａによって置換される

から選ばれ、
Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に1つまたは複数のＲ_ａによって置換されるメチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、ｎ－ブチル、ｔ－ブチル、シクロブチル、ピリジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリルまたは

から選ばれ、
Ｒ^２は－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７であり、
Ｌは－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、
あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素であり、
Ｒ^４とＲ^５は、それぞれ水素であり、
Ｒ^６とＲ^７とＲ^１０は、それぞれ水素、任意選択的に1つまたは複数のＲ_ｂによって置換されるＣ_１－Ｃ_８アルキルから独立して選ばれ、
ｍは１または２から選ばれ、
ここで、Ｒ_ａは、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、Ｃ_１－Ｃ_４アルキルまたはＣ_１－Ｃ_４アルコキシから選ばれ、
Ｒ_ｂは、水素または重水素から選ばれる
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
環Ａは任意選択的に1つまたは複数のＲ_ａによって置換される

から選ばれ、
Ｒ^１は水素、ヒドロキシ、任意選択的に1つまたは複数のＲ_ａによって置換されるメチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、ｔ－ブチル、シクロブチルまたは

から選ばれ、
Ｒ^２は－Ｃ＝ＯＮＲ^６Ｒ^７であり、
Ｒ^６とＲ^７は、それぞれ水素であり、
Ｌは－Ｃ＝ＯＮＲ^１０－、－Ｓ（Ｏ）_ｍ－、－Ｃ＝Ｏ－または－Ｃ＝ＯＯ－から選ばれ、
あるいは、Ｌが存在しない、
Ｒ^３は水素であり、
Ｒ^４とＲ^５は、それぞれ水素であり、
Ｒ^１０は水素であり、
ｍは１または２から選ばれ、
ここで、Ｒ_ａは、水素、フッ素、塩素、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、メチルまたはメトキシから選ばれる、
ことを特徴とする、請求項２に記載の化合物。
から選ばれる化合物、その立体異性体またはその薬学上許容される塩。
請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体またはその薬学上許容される塩と薬学上使用可能な担体とを含むことを特徴とする、医薬組成物。
前記の医薬組成物は、カプセル剤、散剤、錠剤、ペレット剤、丸剤、注射剤、シロップ剤、経口液、吸入剤、軟膏剤、座剤またはパッチ剤から選ばれることを特徴とする、請求項５に記載の医薬組成物。
請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体またはその薬学上許容される塩、あるいは請求項５に記載の医薬組成物の、ヤーヌスキナーゼ（ＪＡＫ）ファミリー誘発性疾患を予防または治療する薬物の調製のための使用。
前記の疾患は、免疫系疾患、自己免疫性疾患、皮膚病、アレルギー性疾患、ウィルス性疾患、１型糖尿病と糖尿病合併症、アルツハイマー病、眼球乾燥症、骨髄線維症、血小板増加症、赤血球増加症またはがんから選ばれることを特徴とする、請求項７に記載の使用。
前記の免疫系疾患は臓器移植拒絶反応であり、前記の自己免疫性疾患は全身性エリテマ
トーデス、多発性硬化症、リウマチ性関節炎、若年性関節炎、滴状乾癬、潰瘍性結腸炎、クローン病または自己免疫性甲状腺疾患から選ばれ、前記の皮膚病は乾癬、皮疹、円形脱毛症またはアトピー性皮膚炎から選ばれ、前記のアレルギー性疾患は喘息または鼻炎から選ばれ、前記のウィルス性疾患はB型肝炎、Ｃ型肝炎、水疱瘡、帯状疱疹ウィルスから選ばれ、前記のがんは固形腫瘍、血液がんまたは皮膚がんから選ばれることを特徴とする、請求項８に記載の使用。
前記の臓器移植拒絶反応は異種移植拒絶反応または移植片対宿主病から選ばれ、前記の固形腫瘍は前立腺がん、腎がん、肝がん、膵臓がん、胃がん、乳がん、肺がん、頭頸部がん、甲状腺がん、海綿芽細胞腫または黒色腫から選ばれ、前記の血液がんはリンパ腫または白血病から選ばれ、前記の皮膚がんは皮膚Ｔ細胞性リンパ腫または皮膚Ｂ細胞性リンパ腫から選ばれることを特徴とする、請求項９に記載の使用。