JP2023027623A - 栄養補給欲促進剤 - Google Patents
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Abstract
Description
<1>小麦グルテン加水分解物由来のペプチドを有効成分として含有する栄養補給欲促進剤。
<2>前記ペプチドが小麦グルテン加水分解物の水溶性成分のうちの高親水性画分由来のペプチドである、<1>の栄養補給欲促進剤。
<3>前記栄養補給欲促進剤が食欲促進剤である、<1>又は<2>の栄養補給欲促進剤。
<4>前記栄養が糖質である、<1>~<3>のいずれか1つの栄養補給欲促進剤。
<5>経口投与用である、<1>~<4>のいずれか1つの栄養補給欲促進剤。
<6>高負荷運動者用、患者用、又は、高齢者用である、<1>~<5>のいずれか1つの栄養補給欲促進剤。
本発明の栄養補給欲促進剤は、小麦グルテン加水分解物由来のペプチドを有効成分として含有する。小麦グルテン加水分解物由来のペプチドは以下、「グルテン分解ペプチド」と略記する場合がある。栄養補給欲の例として、食欲等が挙げられる。
グルテンは、小麦に含まれるタンパク質であり、グルテニンとグリアジンが会合している。
本発明の栄養補給欲促進剤は、グルテン分解ペプチド以外の他の成分をさらに含んでいてもよい。当該他の成分は特に限定されないが、例えば、薬学的に許容される担体、潤滑剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧調整用の塩類、緩衝剤、着色剤、香味料、甘味料、抗酸化剤、及び粘度調整剤等が挙げられる。また、必要に応じて、公知の栄養補給欲促進剤を、本発明の栄養補給欲促進剤の一構成として加えて複合剤を構成してもよい。
投与対象は、ヒト又は動物であり、より具体的には、ヒトを含む哺乳類からなる群より選択される何れかである。中でも、哺乳類に対して特に好適に本発明の栄養補給欲促進剤が適用される投与対象となる哺乳類の種類は特に限定されないが、マウス、ラット、ウサギ、モルモット及びヒトを除く霊長類等の実験動物;イヌ及びネコ等の愛玩動物(ペット);ブタ、ウシ、ヤギ、ヒツジ及びウマ等の家畜;ヒト;が挙げられ、好ましくは家畜又はヒトであり、特に好ましくはヒトである。
本発明の栄養補給欲促進剤の投与方法は特に限定されず、経口投与、静脈内又は動脈内への血管内投与、腸内投与といった手法によって全身投与されてもよく、経皮投与、舌下投与といった手法によって局所投与されてもよい。好ましい一つの投与態様では、投与の容易さ等の観点で優れるため、経口投与される。
小麦グルテン(長田産業製、商品名:フメリットA2)を基質として、図2に記載の製造工程にしたがって、水溶性成分からなる小麦グルテン分解ペプチド(以下、「WGH-2」と略記する場合がある)を調製した。プロテアーゼとして、B.subtilis由来中性金属プロテアーゼ(HBI製、商品名:オリエンターゼ90N)を使用した。
WGH-2の成分分析を、一般財団法人日本食品分析センターに依頼して行った。分析結果を図3に示す。図3に示すように、WGH-2に含まれるタンパク質量が77.5%であり、そのうち44%がグルタミン(Q)及びグルタミン酸(E)であった。分析法の性質上、グルタミンとグルタミン酸は区別できない。しかしながら、図1より、親タンパク質である小麦グルテンのアミノ酸組成から、WGH-2の実質大部分がグルタミン(Q)であると考えられる。
WGH-2のSDS-PAGEによる評価結果を図4に示す。WGH-2のレーンでは、グルテンが検出されなかったことから、グルテンはSDS-PAGEでは検出できないレベルまでに分解されていることが分かった。
食物アレルゲン件検出キットである、アレルゲンアイ(登録商標)イムノクロマトシングルステップ(登録商標)(プリマハム製)を使用して、WGH-2の小麦(グリアジン)に対するアレルゲン試験を行った。結果を図5に示す。
WGH-2の10kDa膜透過画分(低分子画分)を凍結乾燥させて、WGH-3を得た。Sep-Pak Vac 35 cc (10 g) C18 カートリッジ(Waters社製)に、40mg/mLのWGH-3溶液を10mL/カートリッジになるように添加し、0~50%のMeOH水溶液100mLで溶出させた。溶出液を凍結乾燥し、凍結乾燥物をマウスに1g/10mL/kg(体重)の投与用量でゾンデにより胃内投与を行った。ケージに設置した水溶液(2%スクロース含有水溶液)入りボトルを舐める(リック)回数を電気的に計測して、栄養補給欲の指標とした。
<条件>
カラム:TSKgel ODS-80TM(4.6 mm (ID)×15 cm)(東ソー社製)
溶離液A:水(Milli Q water)
溶離液B:MeOH
流速:1.2mL/分
温度:40℃
小麦グルテン分解ペプチド中の低親水性成分の除去(栄養補給欲促進効果の増強)を目的とし、20mg/mLのWGH-2溶液を、Diaion HP20(SIGMA-ALDRICH社製、bed volume:125 mL)に連続的に供した。そして、溶出液を50mLずつ回収した。回収した溶出液のHPLC分析の結果を図7に示す。HPLCの分析条件は評価例4と同様である。また、WGH-2については評価例4と同様の評価試験を行い、リック回数を計測して、栄養補給欲傾向を評価した。図7に記載した促進傾向および抑制傾向とは、WGH-2について栄養補給欲傾向を評価した結果である。
小麦グルテン分解ペプチド中の低親水性成分の除去(栄養補給欲促進効果の増強)を目的とし、WGH-3に対する固形分比で0倍、0.2倍、0.4倍、0.6倍、0.8倍又は1倍の活性炭処理を施した。活性炭として、FP-6(大阪ガスケミカル社製、白鷺WP-Z)を使用した。活性炭処理後のWGH-3を評価例4と同じ分析条件でHPLCに供した。HPLCの分析結果を図8に示す。
雄性5週齢C57BL6マウス8匹を用いて、ケージに設置した2%スクロース水溶液入りボトルを舐める(リック)回数を電気的に計測して、栄養補給欲の指標とした。被験試料(WGH-2)は、1又は3g/10mL/kg体重の投与用量でゾンデにより胃内投与を行った。コントロールとして生理食塩水を用いた。投与30分後から40分後までの10分間、リック測定装置(メルクエスト社製)にて経時的に累積リック数を測定した。測定結果を図9に示す。
評価例6で得られたWGH-3の活性炭処理物中、活性炭添加量0倍(WGH-3:活性炭=1:0)、0.4倍(WGH-3:活性炭=1:0.4)及び1.0倍(WGH-3:活性炭=1:1)の処理物について、評価例7と同様に累積リック数を測定した。測定結果を図10(活性炭添加量0倍)、図11(活性炭添加量0.4倍)及び図12(活性炭添加量1.0倍)に示す。
WGH-2の10kDa膜透過画分(低分子画分)であるWGH-3と、評価例6で得られたWGH-3の活性炭処理物(活性炭添加量1.0倍)について、栄養成分による栄養補給欲促進効果について検討した。ケージに設置したボトル中の溶液を表1に示す溶液に変更した以外は、評価例7と同様の手順で評価を行った。評価結果を表1に示す。
小麦グルテン(長田産業製、商品名:フメリットA2)を基質として、図13に記載の製造工程にしたがって、小麦グルテン分解ペプチド(以下、「WGH-5」と略記する場合がある)を調製した。図13に記載の製造工程は図2に記載の製造工程とは異なり、クエン酸を添加していない。プロテアーゼとして、B.subtilis由来中性金属プロテアーゼ(HBI製、商品名:オリエンターゼ90N)を使用した。
雄性5週齢C57BL6マウスを用いて、ケージに設置した2%スクロース水溶液入りボトルを舐める(リック)回数を電気的に計測して、栄養補給欲の指標とした。被験試料(WGH-5)は、1又は3g/10mL/kg体重の投与用量でゾンデにより胃内投与を行った。コントロールとして生理食塩水を用いた。投与30分後から40分後までの10分間、リック測定装置にて経時的に累積リック数を測定した。測定結果を図14に示す。
Claims (6)
- 小麦グルテン加水分解物由来のペプチドを有効成分として含有する栄養補給欲促進剤。
- 前記ペプチドが小麦グルテン加水分解物の水溶性成分のうちの高親水性画分由来のペプチドである、請求項1に記載の栄養補給欲促進剤。
- 前記栄養補給欲促進剤が食欲促進剤である、請求項1又は2に記載の栄養補給欲促進剤。
- 前記栄養が糖質である、請求項1~3のいずれか1項に記載の栄養補給欲促進剤。
- 経口投与用である、請求項1~4のいずれか1項に記載の栄養補給欲促進剤。
- 高負荷運動者用、患者用、又は、高齢者用である、請求項1~5のいずれか1項に記載の栄養補給欲促進剤。
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FEBS OPEN BIO, vol. 11(4), JPN6022040846, 19 February 2021 (2021-02-19), pages 1144 - 1152, ISSN: 0004889440 * |
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