JP2022547295A - 一酸化炭素を使用した試薬赤血球の貯蔵のための方法 - Google Patents

Abstract

本出願は、血液型決定を使用するための方法、組成物、およびキット、ならびに血液を輸血医学におけるその使用前に血液型判定する際に使用するための改善された赤血球含有試薬の調製を提供する。【選択図】図１

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年９月５日に出願された米国仮出願第６２／８９６，３６０号の利益を主張し、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

本発明は、血液型決定の分野、および血液を輸血医学におけるその使用の前に血液型判定する際に使用するための改善された赤血球含有試薬の調製に関する。本発明はまた、薬物送達のための赤血球の改善された保存およびインビボ循環に関する。

赤血球（ＲＢＣ）試薬は、十分に特徴付けられた表現型を有する確立されたドナーから収集される血液から製造される。ＲＢＣは、希釈され、希釈溶液中でパッケージングされて、血液センター／血液バンクで処理されたＲＢＣの血液型を決定するための標準として使用される。ほとんどの場合、自動化デバイスが、血液型決定および他の重要なＲＢＣ品質パラメータを特徴付けるために使用される。表面抗原を貯蔵するために、ＲＢＣは固定されておらず、したがって、保存障害の蓄積によって不安定である。これらの時間依存的変化は、これらの重要なＲＢＣ調製物の有効期間（shelf life）を約９週間（６３日）に制限する。

ＲＢＣは、表面を除き、周囲の空気からの拡散に頼ることができない体全体にわたって、酸素輸送を提供するように進化した。ＲＢＣはこの機能を、酸化可能な第一鉄を含有する非常に高い濃度のヘモグロビンを細胞質ゾルに詰め込むことによって達成する。約１２０日間の循環中、ＲＢＣは、代謝酵素／酸化還元酵素の緻密なネットワークによって酸素を輸送するように維持される。しかしながら、これらの緻密な進化的最適化は、ＲＢＣが循環から取り出されて、低温で保存されると、もはや実施可能ではなく、保存されたＲＢＣの有効期間にわたって蓄積される保存誘発性損傷（保存障害）をもたらす。保存障害の発生における２つの大きな駆動力の１つは酸化的損傷であり、知られてはいたが、最近まで全体的には取り組まれていなかった。

ヘモグロビン中の鉄の化学的酸化は、保存障害の発生における主要な要素である保存ＲＢＣ中の酸化ストレスを開始する中心反応である。ＲＢＣは、高濃度の溶存酸素とともに、ヘモグロビンの補欠分子族における高濃度の反応性第一鉄を含有する。ヘモグロビン中の４つの鉄部分（第一鉄状態）が酸素と化学反応して、メトヘモグロビン（第二鉄状態）を形成する。副産物として、スーパーオキシドアニオンが生成され、これはスーパーオキシドジムターゼによって変換されて、主要な活性酸素種（ＲＯＳ）であり、ヒドロキシルラジカル（ＯＨ・）生成における基質であるＨ₂Ｏ₂形成する。インビボで、メトヘモグロビンは、レダクターゼ酵素によって還元されてヘモグロビンに戻るが、これらの酵素活性は、低温保存条件下で抑制される。低温での溶解度の増加に起因する、より高い溶存酸素濃度と相まって、この現象は、メトヘモグロビンおよびスーパーオキシドアニオンの生成増加をもたらす。ＲＯＳ分子は、ＲＢＣ中の脂質および構造タンパク質と反応し、完全性を損なわせ、生体内循環寿命を低下させる。ＲＯＳはまた、「製品」ＲＢＣを価値あるものにする重要な酵素または表面分子を攻撃し、有効性または有用性を低下させる。

ヘモグロビンのＣＯに対する親和性は、Ｏ₂よりも約４００倍高く、ＣＯは、ヘムと化学的に容易に反応しない。ヘム－ＣＯ複合体は非常に安定であり、そのため、酸素によるヘモグロビン酸化が低温ＲＢＣ保存中の酸化ストレスの主な要因であるような酸化ＲＢＣ保存障害を大幅に低減させる。Ｏ₂とは異なり、ＣＯは第一鉄と容易に反応しないが、Ｈｂ－ＣＯとしてそれを安定させることによってＨｂ酸化を防止し、低温（すなわち１～６℃）で保存されるＲＢＣにおける酸化保存障害の発生を大幅に低減させる。ＲＯＳ損傷は、ＣＯまたは窒素のような不活性ガス下のいずれかの無酸素条件下でＲＢＣを保存することによって、さらに低下させることができる。

ＨｂとのＣＯの高親和性結合は、ＣＯが放出されるまで、Ｈｂ－ＣＯを含有するＨｂおよびＲＢＣを酸素キャリアとして役立たなくさせるが、ＣＯによるＨｂの安定化は保存中に有益であり、試薬ＲＢＣの有効期間を、使用のために開封または再構成される前だけでなく、開封後にも延長することができる。輸血用のＲＢＣよりもはるかに多く、試薬ＲＢＣは、高度に特徴付けられ、非常に価値のある慎重に管理される試薬である。有効期間に対する小さな改善さえ、血液バンク業務のコストを大幅に削減することができる。試薬ＲＢＣのＣＯ処理は、保存障害蓄積を低減させ、有効期間を延長させる。

酸素を輸送する赤血球の能力に加えて、赤血球はまた、異なる薬物、ペプチド分子、および酵素の生体適合性キャリアとしても利用される。赤血球は、細胞表面上または細胞質ゾル内で生体治療タンパク質の発現を介して様々な疾患を治療するように操作することができる。これらの赤血球を利用して、がん、自己免疫疾患、胃腸疾患を治療し、酵素欠損症を有する患者において欠損酵素に取って代わる。薬物送達のための細胞の広範なレビューは、Ｓｈｉ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，“Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｒｅｄ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ ａｓ ｃａｒｒｉｅｒｓ ｆｏｒ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ａ ｗｉｄｅ ａｒｒａｙ ｏｆ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｐｒｏｂｅｓ，”ＰＮＡＳ １１１（２８）：１０１３１－１０１３６（２０１４）、Ｄｅｓｈｍｕｋｈｅ Ａ ａｎｄ Ｓｈｅｔｔｙ Ｓ，“Ｒｅｓｅａｌｅｄ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ：ａ ｎｏｖｅｌ ａｎｄ ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｄｒｕｇ ｃａｒｒｉｅｒ，”Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ Ｒｅｓ ８（８）：３２４２－５１（２０１７）、Ｈａｍａｄｉ ａｎｄ Ｔａｊｅｒｚａｄｅｈ，“Ｃａｒｒｉｅｒ Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ：Ａｎ Ｏｖｅｒｖｉｅｗ，”Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ １０：９－２０（２００３）、Ｈａｒｉｓａ ｅｔ ａｌ．，“Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｙｓｔｅｍ，”Ａｓｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍ．６（４）：３０９－３２１（２０１１）、Ｒａｖｉｌｌａ ｅｔ ａｌ．，“Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ ａｓ Ｃａｒｒｉｅｒ ｆｏｒ Ｄｒｕｇｓ，Ｅｎｚｙｍｅｓ，ａｎｄ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，”Ｊｏｕｒｎ．ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．２（０４）：１６６－１７６（２０１２）、Ｓｐｒａｎｄｅｌ ａｎｄ Ｚｏｌｌｎｅｒ，“Ｏｓｍｏｔｉｃ ｆｒａｇｉｌｉｔｙ ｏｆ ｄｒｕｇ ｃａｒｒｉｅｒ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ，”Ｒｅｓ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８５：７７（１９８５）、米国特許公開第２０１７／００２０９２６号、米国特許公開第２０１８／００８５４０２号、米国特許公開第２０１８／０１５３９８９号、米国特許公開第２０１８／０１３５０１２号、および米国特許第９，６４４，１８０号を参照されたく、これらの各々はその全体が参照により組み込まれる。

薬物送達のための赤血球の１つの問題は、保存中に生じる。酸化的損傷は、薬剤送達のための医薬品（pharmaceutical agent）の有無にかかわらず、従来のように保存される赤血球で赤血球保存障害を開始する。さらに、非酸化的損傷も、薬剤送達ＲＢＣの循環寿命を低下させる。治療剤を送達する場合、保存中に高品質を維持し、一貫した循環寿命を確実にすることが重要である。活性薬剤の用量依存性を考慮すると、薬物送達のためのＲＢＣの予測可能で一貫した品質を確実にする方法が必要とされる。輸血のためのＲＢＣとは対照的に、酸素を送達するＲＢＣの薬物送達能力は、副次的に重要である。むしろ、長期循環における赤血球の障害の低下および安定化が第一目標である。したがって、医薬品送達では、酸化的損傷を低減させるとともに、赤血球を安定させて、保存有効期間および治療される患者の体内における循環寿命を延長するためのさらなる方法が必要とされる。

ここでは、酸化的損傷を低減させることと、ヘモグロビンを安定させることの両方によって、薬物送達に使用される赤血球の有効期間を改善および赤血球の循環期間を増加させるための保存方法を初めて提供する。これは、酸素レベルを低減し、保存中のヘモグロビンの安定した誘導体を調製することによって達成される。一態様において、一酸化炭素をヘモグロビン含有細胞に添加して、安定したカルボキシヘモグロビンを形成させる。上述のように、一酸化炭素に対するヘモグロビン親和性は、酸素の約４００倍であり、一酸化炭素は、ヘモグロビンの第一鉄と容易に化学的に反応しない。ここでは、シアン化物およびアジ化物など、一酸化炭素に代わるいくつかの代替も提供する。シアン化物は、酸化されたヘモグロビン（メトヘモグロビン）と反応して、非常に安定したシアノ－メトヘモグロビンを形成する。この複合体は容易に分解しない。シアノ－メトヘモグロビン複合体は、メチレンブルー、フェニルメチル硫酸塩、およびフェリシアン化カリウムなどの多数の酸化剤によって形成することができる。アジ化物もまたメトヘモグロビンと反応して、安定なアジド－ヘモグロビン複合体を形成する。

本開示は、試薬赤血球（ＲＢＣ）を貯蔵するための方法であって、赤血球を得ることと、赤血球を、一酸化炭素を含むガスでフラッシングして、ＲＢＣにおける一酸化炭素飽和ヘモグロビン（ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ）を調製することと、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣを一酸化炭素（ＣＯ）の存在下において嫌気条件下で保存することと、を含み、当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣの表面抗原が安定化される、方法を提供し、かつ含む。

本開示は、試薬赤血球（ＲＢＣ）を貯蔵するための方法であって、赤血球を得ることと、赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を嫌気条件下で保存して試薬赤血球を形成させることと、を含み、ヘモグロビン誘導体を含む試薬赤血球の表面抗原が安定化される、方法を提供し、かつ含む。

本開示は、緩衝液中に共通のセットの表面抗原を有する複数のＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣを有する一酸化炭素飽和ＲＢＣ（ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ）の１つ以上のバイアルと、使用説明書と、を含む、キットを提供し、かつ含む。

本開示は、緩衝液および一酸化炭素飽和ＲＢＣ（ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ）を含むＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣのバイアルであって、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、血液型Ｏ細胞であり、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、およびｓからなる群から選択される表面抗原について陽性であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原について陽性である、血液型Ｏ細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原について陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ｆ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｌｕ^a、およびＬｕ^bについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であるＯ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^a、について陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a Ｖ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ａ１について陽性である、Ａ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ａ１について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ａ２について陽性である、Ａ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ａ２について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｂについて陽性である、Ｂ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｂについて陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ｂ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有する、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有する、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有する、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有する、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁を有するか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈヘテロタイプＲ₂を有する、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈヘテロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプスブルクＲ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性であり、Ｄ、Ｃ、Ｅ、ｃ、ｅ、ｆ、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｐ₁、Ｉ、ＩＨ、Ｖｅｌ、ＰＰ₁Ｐ^k、およびＰ抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^aについて陰性であり、Ｆｙａ、Ｆｙｂ、Ｓ、ｓ、Ｍ、Ｎ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aに対する抗体の低下した結合を有するかもしくは結合を有さない、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）血清で感作される、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ａ₂抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ａ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｂ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ｂ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ａ₁抗原に対する抗体の結合について陽性であり、Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ａ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ａ₁、Ｂ抗原、ならびにＲｈ血清型ｒｒ（ｄｃｅ／ｄｅｃ）のＲｈ抗原ｄ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性である、ＡＢ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｒｈ抗原Ｄ、ｄ、Ｃ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ｒ（ＤＣｅ／ｄｃｅ）を有する、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^a抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^w抗原に対する抗体の結合について陰性である、Ｏ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、からなる群から選択される、バイアルを、提供し、かつ含む。

本開示は、薬物送達のための赤血球組成物の有効期間を増加させるための方法であって、医薬品を含む赤血球を得ることと、赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、医薬品を含む赤血球を保存雰囲気下で保存することと、を含む方法を提供し、かつ含む。

本開示はまた、薬物送達のための赤血球組成物の有効期間を増加させるための方法であって、医薬品を含む赤血球を一酸化炭素でパージすることと、パージした赤血球を期間の間保存することと、を含む方法を提供し、かつ含む。

本開示は、医薬品を発現する白血球枯渇化赤血球（ＲＢＣ＋ＰＡ）を含む医薬組成物を提供し、かつ含み、医薬組成物は、非酸素ヘモグロビン結合剤および２５％未満のＳＯ２を含む。

本開示は、医薬品を含む赤血球を含む一酸化炭素飽和医薬組成物を含む、保存バイアルを提供し、かつ含む。

本開示はまた、所定の用量の赤血球薬品をパッケージングする方法であって、酸素を一酸化炭素とのガス交換によって枯渇させることと、薬品容器を所定用量の赤血球薬品で充填することと、薬品容器を密封することと、を含む方法を提供し、かつ含む。

本開示はさらに、薬物送達のための赤血球の循環寿命を増加させるための方法であって、医薬品を含む赤血球（ＲＢＣ＋ＰＡ）を得ることと、赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、医薬品を含む赤血球を保存雰囲気下で保存することと、を含む方法を提供し、かつ含む。

実施例２（ａ）による実施形態における赤血球濃縮物の脱酸素化および一酸化炭素化を示すグラフである。

血液型血清学は、患者に関わる輸血または臓器移植の前に、血液ドナーと患者レシピエントとの間の血液細胞適合性の決定を必要とする。血液細胞適合性は、患者の血清に含有される抗体と、ドナーからの血液細胞に存在する抗原との間の免疫学的反応の非発生によって決定される。血液細胞型判定および適合性のための試験は、一般に２つのタイプがあり、（１）細胞に添加された特異的抗体がそれらの凝集を引き起こすか決定する凝集試験と、（２）血清補体とともに試験細胞に添加された特異的抗体が溶血をもたらすかを決定する細胞溶解試験と、である。一般的に使用される血液細胞型判定および適合性試験手順では、凝集試験および細胞溶解試験の両方が、訓練された技術者によってマニュアルで、または自動化デバイスを使用して実行される。免疫学的反応の存在は、輸血および移植療法で不適合である。

国際輸血学会は、３００を超える抗原を代表する３３の血液型系を列挙している。Ｌｏｇｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．“Ｈｕｍａｎ ｂｌｏｏｄ ｇｒｏｕｐ ｇｅｎｅｓ ２００４：Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ ｌｏｃａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｃｌｏｎｉｎｇ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，”Ｔｒａｎｓｆｕｓ Ｍｅｄ Ｒｅｖ．１９：４５－５７（２００５）およびＬｏｇｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，“Ｈｕｍａｎ ｂｌｏｏｄ ｇｒｏｕｐ ｇｅｎｅｓ ２０１０：Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ ｌｏｃａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｃｌｏｎｉｎｇ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｒｅｖｉｓｉｔｅｄ，”Ｔｒａｎｓｆｕｓ Ｍｅｄ Ｒｅｖ．２５：３６－４６（２０１１）を参照されたい。クローニングおよび配列決定は、これらの血液型系の遺伝子が、Ｘ由来であるＸＧおよびＸＫを除いて常染色体であり、ＸおよびＹ染色体の両方に存在するＭＩＣ２であることを実証する。多くの異なる血液型抗原が、すべての個体の赤血球の表面に認められる。遺伝した遺伝子の産物であるこれらの抗原は、一卵性双生児を除くすべての個体間で独自であるような組み合わせで存在する。

多くの重要な血液型系が、当該技術分野で周知であり、表１に示される。

血液型判定は、一般に、どの抗原が存在し、どの抗原が存在しないかを決定するために赤血球を試験するプロセスであり、通常、試験対象の抗原に対する抗体を利用する。加えて、人が赤血球に特定の赤血球抗原を有しない場合、その人の血清はその抗原に対する抗体を含有し得る。抗体が血清中に存在するかしないは、その人の免疫系が、その特定の抗原またはそれに非常に類似したものによって過去に負荷されて、それに応答したかに依存する。例えば、赤血球がＡ型である人、すなわち、赤血球に「Ａ」抗原を有する人は、その血清中に抗Ｂ抗体を有することになる。したがって、かかる人にＢ型血液が与えられた場合、免疫学的応答が、重大な臨床的結果の可能性とともに生じる。

輸血療法の前に、採取した血液は、血液型を分析することによって適合性が試験される。血液型の試験は、種々の抗原（Ａ、Ｂなど）についてＲＢＣを試験し、抗原に対する抗体について血清を試験することによって実行される。前者の試験では、試料血液に由来するＲＢＣを、血液型抗原の各々を認識する抗体とともにインキュベートし、凝集または他の既知の免疫学的アプローチのいずれかを使用して結合についてスコア化する。血清の試験は、抗原が提供され、抗体結合が酵素または蛍光レポーターを介して間接的に検出されるＥＬＩＳＡなどの様々な方法で行うことができる。より伝統的なアプローチは、血球凝集アッセイと呼ばれる凝集アッセイにおいて特定の抗原を表わすことが既に特徴付けられているＲＢＣを用いることである。要するに、凝集アッセイは、試薬ＲＢＣを血液の試験試料からの血清または血漿と一緒に混合することを含む。試験試料中の抗体、典型的には、５つの抗原結合部位を有するＩｇＭは、細胞を一緒に交差結合し、巨視的に認めることができる凝集を引き起こす。二価ＩｇＧ抗体もまた、凝集アッセイに好適である。血液型判定に関するものを含む凝集アッセイは、当技術分野で周知である。Ｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，“Ａｎｔｉｇｌｏｂｕｌｉｎ ｔｅｓｔ ｉｎ ｌｏｗ－ｉｏｎｉｃ ｓｔｒｅｎｇｔｈ ｓａｌｔ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｆｏｒ ｒａｐｉｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｃｒｏｓｓ－ｍａｔｃｈｉｎｇ，”Ｖｏｘ Ｓａｎｇ ２６：５３－６１（１９７４）、Ｍａｌｙｓｋａ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｈｅ ｇｅｌ ｔｅｓｔ，”Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２５：８１（１９９４）、およびＴｅｃｈｎｉｃａｌ ｍａｎｕａｌ．１４ｔｈ ｅｄ．Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｌｏｏｄ Ｂａｎｋｓ，２００２を参照されたい。

とりわけウラ型判定のために使用されるより一般的な試薬ＲＢＣは、それらの表面に、Ａ、Ａ、もしくはＢ抗原を有するか、またはＡＢＯ抗原を有さない（Ａ１型、Ａ２型、Ｂ型、Ｏ型）いずれかである。これらの細胞は、試薬ＲＢＣの凝集を引き起こす予め形成された抗体を検出するために有用である。オモテ型判定試験では、モノクローナル抗Ａおよび抗Ｂを使用して、試料赤血球表面上のそれらのそれぞれの抗原の存在を検出する。別の良く知られた血液型は、５８種の異なる抗原型を有するＲｈ血液型であるが、９種の型が最も一般的である。血液型および抗原の指定を表２および表３に示す。Ｂｙｒｎｅ ｅｔ ａｌ．，“Ｒｅｖｉｅｗ：ｏｔｈｅｒ ｂｌｏｏｄ ｇｒｏｕｐ ｓｙｓｔｅｍｓ－－Ｄｉｅｇｏ，Ｙｔ，Ｘｇ，Ｓｃｉａｎｎａ，Ｄｏｍｂｒｏｃｋ，Ｃｏｌｔｏｎ，Ｌａｎｄｓｔｅｉｎｅｒ－Ｗｉｅｎｅｒ，ａｎｄ Ｉｎｄｉａｎ，”Ｉｍｍｕｎｏｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．２０（１）：５０－８（２００４）、Ｄａｎｉｅｌｓ Ｇ．，“Ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｇｅｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｇｒｏｕｐ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，”Ｔｒａｎｓｐｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４（３－４）：１４３－５３（２００５）、Ｄａｎｉｅｌｓ Ｇ．，“Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｒｅｄ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，”Ｖｏｘ Ｓａｎｇ．９３（４）：３３１－４０（２００７）、Ｅｙｌｅｒ ａｎｄ Ｔｅｌｅｎ，“Ｔｈｅ Ｌｕｔｈｅｒａｎ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ：ａ ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．”Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ４６（４）：６６８－７７（２００６）、Ｐａｌａｃａｊｏｒｎｓｕｋ Ｐ．，“Ｒｅｖｉｅｗ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂａｓｉｓ ｏｆ ＭＮＳ ｂｌｏｏｄ ｇｒｏｕｐ ｖａｒｉａｎｔｓ．Ｉｍｍｕｎｏｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ，”２２（４）：１７１－８２（２００６）；Ｑｕｉｌｌ Ｅ．，“Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｂｌｏｏｄ－ｍａｔｃｈｉｎｇ ｇｏｅｓ ｇｅｎｅｔｉｃ，”Ｓｃｉｅｎｃｅ １４；３１９（５８６９）：１４７８－９（２００８）、Ｗｅｓｔｈｏｆｆ ＣＭ．，“Ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｈ ａｎｔｉｇｅｎ ｃｏｍｐｌｅｘ，”Ｓｅｍｉｎ Ｈｅｍａｔｏｌ ４４（１）：４２－５０（２００７）、Ｗｅｓｔｈｏｆｆ ａｎｄ Ｒｅｉｄ，“Ｒｅｖｉｅｗ：ｔｈｅ Ｋｅｌｌ，Ｄｕｆｆｙ，ａｎｄ Ｋｉｄｄ ｂｌｏｏｄ ｇｒｏｕｐ ｓｙｓｔｅｍｓ，”Ｉｍｍｕｎｏｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２０（１）：３７－４９（２００４）、およびＹａｍａｍｏｔｏ Ｆ．，“Ｒｅｖｉｅｗ：ＡＢＯ ｂｌｏｏｄ ｇｒｏｕｐ ｓｙｓｔｅｍ－－ＡＢＨ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ，ａｎｔｉ－Ａ ａｎｄ ａｎｔｉ－Ｂ，Ａ ａｎｄ Ｂ ｇｌｙｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ，ａｎｄ ＡＢＯ ｇｅｎｅｓ，”Ｉｍｍｕｎｏｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２０（１）：３－２２（２００４）、それらのそれぞれは、参照により、それらの全体が本明細書に組み込まれる。

本開示は、保存中に血液型抗原の分解を低減する方法を提供し、かつ含む。より具体的には、本開示は、ＲＯＳ誘導性障害を含むがこれに限定されない、保存中のＲＢＣにおける保存障害の形成を低減することを提供する。要するに、ＲＢＣを収集し、ヘモグロビンのヘム基に結合した酸素（Ｏ₂）を取り除くのに十分な期間、一酸化炭素（ＣＯ）の雰囲気に曝露させる。実施例２および図１に示されるように、酸素のＣＯとの交換は、３０分および３回のガス交換で迅速かつ基本的に完了する。ＣＯを血液と接触させる方法、特に体積比に対してＣＯ／液体界面の表面積を増加させる方法は、結合した酸素を一酸化炭素と交換するのに必要な時間の長さを著しく減少させるであろう。上で考察されるように、一酸化炭素は、ヘモグロビンに対して酸素よりも著しく高い親和性（例えば、４００倍）を有し、そのため、ＣＯに対する任意のレベルおよび時間でのＲＢＣの曝露は、交換プロセスを開始し、十分なＣＯが提供され、完了のために交換を駆動する。

本開示は、実施例２に示される方法に従って酸素を一酸化炭素に交換することを、これらに限定されないが、提供し、かつ含む。態様において、赤血球濃縮物（ＲＣＣ、濃縮赤血球としても知られる）を容器中に保持し、ＣＯを導入し、容器を期間の間優しく振とうまたは混合する。態様において、容器は、ポリ塩化ビニルを含む標準的な血液保存バッグである。態様において、ＣＯガスで置換され、混合は、ヘモグロビンがＣＯで飽和されるまで（例えば、Ｈｂ－ＣＯ ＲＢＣが生成される）、１回以上繰り返される。別の態様において、ＲＣＣを含む容器は、ＣＯの体積とともに提供され、時々混合するか、または混合せずに一晩放置される。混合することで交換速度が向上するが、必要とはされない。別の態様において、血液とＣＯとは、ガス透過性膜によって分離される。これは、当該技術分野で既知の方法を使用して、例えば、ソーリンＤ１００人工肺を使用して、酸素ではなくＣＯを提供して行うことができる。膜ベースのアプローチの利点は、ガスを連続的に交換し、それによって濃度勾配を維持して、交換速度を増加させることができることである。

別の態様において、ＣＯガスは、ＲＢＣの容器またはバッグを通してバブリングすることができる。理論によって制限されることなく、気泡を直径１μｍ未満に維持することによって、赤血球の溶解を防止または最小限に抑えることができると考えられる。「バブリング」法は、ＣＯ気泡が最大濃度差を提供し、それによって交換反応の動態を促進し、膜ベースのアプローチと同じ利点を共有する。気泡アプローチはまた、ＲＢＣを混合するさらなる利点も提供する。

一酸化炭素交換をＲＣＣで行うことが好ましい場合があるが、本明細書は、ＣＯをプロセスの任意の段階で血液の酸素と交換することを提供し、かつ含む。態様において、ＣＯは、全血で、例えば、血小板または白血球を取り除く前に、交換される。態様において、ＣＯは、白血球減少した血液で交換される。本明細書の方法は、アフェレーシスによって調製されるか、または従来の方法を使用して収集されるＲＢＣに適用することができる。本方法はまた、ＲＢＣを試薬の使用および保存のための好適な緩衝液中に処理した後に、行われ得る。例えば、２００１年２月２６日に公開された米国特許公開第２０１１／００４５４５５号、および１９８３年１０月１３日に公開された国際特許公開第１９８３／００３４７７号を参照されたい。血液型判定方法に適合する他の保存溶液は、当該技術分野において既知である。

本明細書は、当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣをＣＯの存在する嫌気条件下で保存することをさらに含む、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣを調製するための方法を提供し、かつ含む。態様において、細胞は、上述のように調製され、一酸化炭素を含む雰囲気下でバイアルに移される。別の態様において、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣは、窒素雰囲気を有する保存のための容器に移される。本明細書に提供されるように、保存中、任意の適切な非酸素含有ガスが好適である。特定の態様において、追加のＣＯが、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ保存のために容器を密封する前に提供される。

本明細書は、当該ＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣを嫌気条件下で保存することをさらに含む、ＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣを調製するための方法を提供し、かつ含む。態様において、細胞は、上述のように調製され、周囲空気を含む雰囲気下でバイアルに移される。別の態様において、ＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣは、窒素雰囲気を有する保存のための容器に移される。本明細書に提供されるように、保存中、任意の適切な非酸素含有ガスが好適である。特定の態様において、追加の非酸素含有ガスが、ＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣ保存のために容器を密封する前に提供される。

本明細書は、当該Ｎ₃－Ｈｂ ＲＢＣを嫌気条件下で保存することをさらに含む、Ｎ₃－Ｈｂ ＲＢＣの調製方法を提供し、かつ含む。態様において、細胞は、上述のように調製され、周囲空気を含む雰囲気下でバイアルに移される。別の態様において、Ｎ₃－Ｈｂ ＲＢＣは、窒素雰囲気を有する保存のための容器に移される。本明細書に提供されるように、保存中、任意の適切な非酸素含有ガスが好適である。特定の態様において、追加の非酸素含有ガスが、Ｎ₃－Ｈｂ ＲＢＣ保存のために容器を密封する前に提供される。

本開示は、試薬赤血球（ＲＢＣ）を貯蔵するための方法であって、赤血球を得ることと、赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、ヘモグロビン誘導体を含む試薬赤血球を嫌気条件下で保存して試薬赤血球を形成することと、を含み、ヘモグロビン誘導体を含む試薬赤血球の表面抗原が安定化される、方法を提供し、かつ含む。

態様において、化学薬剤は、一酸化炭素（ＣＯ）であり、当該ヘモグロビン誘導体は、カルボキシ－ヘモグロビン（ＣＯ－Ｈｂ）である。別の態様において、化学薬剤はシアン化物であり、当該ヘモグロビン誘導体は、シアノ－メトヘモグロビン（ＣＮ－Ｈｂ）である。別の態様において、化学薬剤はアジ化物（Ｎ３）であり、当該ヘモグロビン誘導体は、アジ化ナトリウムの水溶液と反応させることによって調製されるアジド－メトヘモグロビン（Ｎ₃－Ｈｂ）である。

本開示は、緩衝液中に共通のセットの表面抗原を有する複数のＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣまたはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣを有するシアンまたはアジド物飽和ＲＢＣ（ＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣまたはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣ）の１つ以上のバイアルと、使用説明書と、を含む、キットを提供し、かつ含む。

本開示は、緩衝液およびシアン化またはアジド化飽和ＲＢＣ（ＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣ）を含むＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣのバイアルであって、ＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣが、血液型Ｏ細胞であり、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、およびｓからなる群から選択される表面抗原について陽性であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原について陽性である血液型Ｏ細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原について陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ｆ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｌｕ^a、およびＬｕ^bについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^aＶ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ａ１について陽性である、Ａ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ａ１について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ａ２について陽性である、Ａ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ａ２について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｂについて陽性である、Ｂ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｂについて陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ｂ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有する、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有する、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有する、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有する、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有するか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有する、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、フィチン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^aおよびＹｋ^aについて陰性であり、Ｄ、Ｃ、Ｅ、ｃ、ｅ、ｆ、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｐ₁、Ｉ、ＩＨ、Ｖｅｌ、ＰＰ₁Ｐ^kおよびＰ抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^aについて陰性であり、Ｆｙａ、Ｆｙｂ、Ｓ、ｓ、Ｍ、Ｎ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aに対する抗体の低下した結合を有するかもしくは結合を有さない、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）血清で感作される、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ａ₂抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ａ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｂ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ｂ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ａ₁抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ａ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ａ₁、Ｂ抗原、ならびにＲｈ血液型ｒｒ（ｄｃｅ／ｄｅｃ）のＲｈ抗原ｄ、ｃ、およびｅ対する抗体の結合について陽性である、ＡＢ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｒｈ抗原Ｄ、ｄ、Ｃ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ｒ（ＤＣｅ／ｄｃｅ）を有する、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^aおよびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^a抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｊｓ
^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^w抗原に対する抗体の結合について陰性である、Ｏ型細胞であるＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣもしくはＮ３－Ｈｂ ＲＢＣと、からなる群から選択される、バイアルを提供し、かつ含む。

本開示は、以下の４０種の免疫学的型から選択されるが、これらに限定されない赤血球を得ることを含む、試薬赤血球（ＲＢＣ）を貯蔵する方法を提供し、かつ含む。
１．血液型Ｏ細胞であり、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、およびｓからなる群から選択される表面抗原ついて陽性である、血液型Ｏ細胞、
２．Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原ついて陽性である、血液型Ｏ細胞、
３．Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原ついて陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
４．表面抗原Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ｆ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｌｕ^a、およびＬｕ^bについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
５．Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性である、血液型Ｏ細胞、
６．Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、ならびにＹｔ^aについて陽性である、血液型Ｏ細胞、
７．Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、ならびにＹｔ^aについて陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^aＶ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
８．表面抗原Ａ１について陽性である、血液型Ａ細胞、
９．表面抗原Ａ１について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、血液型Ａ細胞、
１０．表面抗原Ａ２について陽性である、血液型Ａ細胞、
１１．表面抗原Ａ２について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、血液型Ａ細胞、
１２．表面抗原Ｂについて陽性である、血液型Ｂ細胞、
１３．表面抗原Ｂについて陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、血液型Ｂ細胞、
１４．表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有する、血液型Ｏ細胞、
１５．表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有する、血液型Ｏ細胞、
１６．表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有する、血液型Ｏ細胞、
１７．表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有する、血液型Ｏ細胞、
１８．表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、血液型Ｏ細胞、
１９．表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、血液型Ｏ細胞、
２０．表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、血液型Ｏ細胞、
２１．表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、血液型Ｏ細胞、
２２．表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
２３．表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
２４．表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
２５．表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
２６．表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有するか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有する、血液型Ｏ細胞、
２７．表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、血液型Ｏ細胞、
２８．表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
２９．フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性である、血液型Ｏ細胞、
３０．フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性であり、Ｄ、Ｃ、Ｅ、ｃ、ｅ、ｆ、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｐ₁、Ｉ、ＩＨ、Ｖｅｌ、ＰＰ₁Ｐ^k、およびＰ抗原に対する抗体の結合について陽性である、血液型Ｏ細胞、
３１．フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^aについて陰性であり、Ｆｙａ、Ｆｙｂ、Ｓ、ｓ、Ｍ、Ｎ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aに対する抗体の低下した結合を有するか、もしくは結合を有さない、血液型Ｏ細胞、
３２．Ｄ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが抗Ｄ（Ｒｈ₀）血清で感作される、血液型Ｏ細胞、
３３．Ａ₂抗原に対する抗体の結合について陽性である、血液型Ａ細胞、
３４．Ｂ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、血液型Ｂ細胞、
３５．Ａ₁抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ａ型細胞であるＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
３６．Ａ₁抗原、Ｂ抗原、ならびにＲｈ血液型ｒｒ（ｄｃｅ／ｄｅｃ）のＲｈ抗原ｄ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性である、血液型ＡＢ細胞、
３７．Ｒｈ抗原Ｄ、ｄ、Ｃ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ｒ（ＤＣｅ／ｄｃｅ）を有する、血液型Ｏ細胞、
３８．Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性である、血液型Ｏ細胞、
３９．Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^a抗原に対する抗体の結合について陽性である、血液型Ｏ細胞、ならびに
４０．Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^w抗原に対する抗体の結合について陰性である、血液型Ｏ細胞。

本開示の態様において、一酸化炭素処理は、シアン化物（ＣＮ）またはアジ化物（Ｎ₃）で置換することができる。態様において、本開示は、保存中の血液型抗原の分解を低減する方法を提供し、かつ含む。より具体的には、本開示は、ＲＯＳ誘導性障害を含むがこれに限定されない、保存中のＲＢＣにおける保存障害の形成を低減させることを提供する。要するに、ＲＢＣを収集して、ヘモグロビンのヘム基に結合した酸素（Ｏ₂）を取り除くのに十分な期間、シアン化物（ＣＮ）またはアジ化物（Ｎ₃）に曝露させる。本開示は、シアン化物を酸化されたヘモグロビン（メトヘモグロビン）と反応させて、非常に安定したシアノ－メトヘモグロビンを形成させる方法を提供する。シアノ－メトヘモグロビン複合体は、メチレンブルー、フェニルメチル硫酸塩、およびフェリシアン化カリウムなどの多数の酸化剤によって形成され得る。別の態様において、本開示は、アジ化物をメトヘモグロビンと反応させて、安定したアジド－ヘモグロビン複合体を形成させる方法を提供する。

当業者に理解されるように、試薬ＲＢＣの調製に好適なＲＢＣの選択は、上記で提供される血液型の組み合わせに限定されない。当業者は、表２および３に列挙される任意の抗原の型の組み合わせを有するＲＢＣが、本出願の方法のために有用であることを認識するであろう。実際、当業者は、免疫学的に特徴付けられている任意のＲＢＣが、一酸化炭素（Ｈｂ－ＣＯ ＲＢＣ）、シアン化物（Ｈｂ－ＣＮ ＲＢＣ）、またはアジ化物（Ｈｂ－Ｎ₃ ＲＢＣ）で貯蔵される試薬ＲＢＣの調製のために好適であることを認識するであろう。

本明細書は、実施例に示される方法を含むが、これらに限定されない、当該技術分野における任意の既知の方法を使用して、ヘモグロビンに結合された酸素を一酸化炭素と交換することを提供し、かつ含む。したがって、本明細書で使用される場合、「フラッシング」という用語は、一酸化炭素ガスを、バブリングまたは膜を通すことを含む、ＲＢＣと接触させる任意の方法を指す。

本明細書は、一酸化炭素安定化赤血球（Ｈｂ－ＣＯ ＲＢＣ）を含むキットを提供し、かつ含む。本明細書のキットは、上述の細胞の４０種の特定のタイプのＨｂ－ＣＯ ＲＢＣのうちの１つ以上を含み得るが、これらの細胞に限定されない。他の好適なＨｂ－ＣＯ ＲＢＣは、必要に応じて調製することができる。特定の態様において、キットは、好適な緩衝液中に懸濁された細胞を提供し、細胞の調製は、様々な洗浄ステップを一酸化炭素交換の前か、または一酸化炭素交換の後のいずれかに含み得る。免疫学的アッセイを実施するために必要な追加の試薬および緩衝液がキットに含まれ得る。多くの態様において、キットは、アッセイの実施に関する説明書、Ｈｂ－ＣＯ ＲＢＣのロット特性評価、および当業者に関連する他の材料を含む。いくつかの態様において、本明細書のキットは、チューブ、ピペット、緩衝液などの様々な検査器具を含み得る。

本明細書は、本明細書に記載のＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣを含有する容器を提供し、かつ含む。態様において、本明細書は、本明細書に記載のＣＮ－Ｈｂ ＲＢＣを含有する容器を提供し、かつ含む。別の態様において、本明細書は、本明細書に記載のＮ₃－Ｈｂ ＲＢＣを含有する容器を提供し、かつ含む。態様において、容器は、バイアルである。別の態様において、容器は、チューブである。さらに別の態様において、容器は、アンプルである。

本開示は、薬物送達のための赤血球組成物の有効期間を増加させるための方法であって、医薬品を含む赤血球を得ることと、赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、医薬品を含む赤血球を保存雰囲気下で保存することと、を含む方法を提供し、かつ含む。

本開示は、薬物送達のための赤血球組成物の有効期間を増加させるための方法であって、医薬品を含む赤血球を得ることと、医薬品を含む赤血球を液体窒素中で保存することと、を含む方法を提供し、かつ含む。

本開示は、医薬品を含む赤血球を提供する。本開示の一態様において、医薬品は、赤血球の細胞表面に発現される導入遺伝子を含む。別の態様において、医薬品は、赤血球の細胞質ゾルに局在する。別の態様において、医薬品は、細胞内膜に局在する。さらに別の態様において、医薬品は、融合タンパク質である。さらなる態様において、医薬品は、２０１９年１月２６日に公開された米国特許公開第２０１７／００２０９２６号の表ＢおよびＣによって提供されるタンパク質と、表４、表５、表６、および表７に列挙されるものからなる群と、から選択されるタンパク質を含む。別の態様において、医薬品は、抗原を含む。別の態様において、抗原は、赤血球タンパク質との融合によって発現される。さらに別の態様において、抗原は、２０１９年１月２６日に公開された米国特許公開第２０１７／００２０９２６号の表ＦおよびＧによって提供される表と、表８、表９および表１０に列挙される抗原と、から選択される。別の態様において、医薬品は、表１１に列挙されるタンパク質のクラスから選択されるタンパク質である。さらなる態様において、医薬品は、表１２に列挙される抗原または抗原の標的を含む。さらに別の態様において、医薬品は、疾患を治療するものであり、外因性抗原もしくは標的を含むか、または２０１８年３月２９日に公開された米国特許公開第２０１８／００８５４０２号によって提供され、ならびに表１３に列挙される外因性抗原もしくは標的を標的にするようにされる。別の態様において、医薬品は、抗体分子を含む。別の態様において、医薬品は、免疫チェックポイント分子を阻害する。さらに別の態様において、医薬品は、赤血球と標的細胞との融合を促進する赤血球表面上の第１のポリペプチドと、表１４、表１５、および表１６に列挙されるポリペプチドのうちのいずれか１つから選択される第２のポリペプチドと、を含む。別の態様において、第２のポリペプチドは、表１５および表１６に提供されるように、Ｔ細胞を活性化または阻害するように製剤化される。

本開示の態様において、医薬品は、抗がん療法である。別の態様において、医薬品は、２０１９年１月２６日に公開された米国特許公開第２０１７／００２０９２６号および以下の表１７に提供される治療用抗がん抗体である。別の態様において、医薬品は、２０１９年１月２６日に公開された米国特許公開第２０１７／００２０９２６号の表４および５、ならびに表１８および表１９によって提供される、免疫チェックポイント分子または共刺激分子に結合する薬剤である。さらなる態様において、医薬品は、２０１８年５月１７日に公開された米国特許公開第２０１８／０１３５０１２号および米国特許第９，６６４，１８０号に提供される疾患および標的のうちのいずれかを標的にする。

本開示の態様において、医薬品を赤血球に負荷する方法には、エレクトロポレーション、エンドサイトーシス、催眠希釈のような浸透圧ベース、透析、浸透圧溶解、脂質融合、および化学的摂動が含まれる。別の態様において、医薬品を組み込むための方法は、エレクトロポレーション、浸透圧ショック、低張性および高張性サイクル、ヘテロ二官能性架橋による細胞表面標識、ならびにクリック化学による細胞表面標識からなる群から選択される。医薬品を負荷する方法は、当業者によって理解される。Ｄｉｓｃｈｍｕｋｈｅ Ａ ａｎｄ Ｓｈｅｔｔｙ Ｓ：Ｒｅｓｅａｌｅｄ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ：ａ ｎｏｖｅｌ ａｎｄ ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｄｒｕｇ ｃａｒｒｉｅｒ．Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ Ｒｅｓ ８（８）：３２４２－５１（２０１７）を参照されたい。

本開示の態様において、赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製する。態様において、化学薬剤は一酸化炭素であり、ヘモグロビン誘導体はカルボキシ－ヘモグロビンである。別の態様において、化学薬剤はシアン化物であり、ヘモグロビン誘導体はシアノ－メトヘモグロビンである。態様において、ヘモグロビンは最初に、メチレンブルーまたはフェリシアン化カリウムなどの酸化剤によって酸化させ、次いで、ＮａＣＮ溶液またはＨＣＮガスと反応させて、シアノ－メトヘモグロビンを形成させる。さらなる態様において、薬剤は、アジ化物（Ｎ₃）であり、ヘモグロビン誘導体は、アジ化ナトリウムの水溶液と反応させることによって形成されるアジド－メトヘモグロビンである。別の態様において、薬剤は、ヘモグロビン分子に結合して安定化することができる薬剤である。

本開示の態様において、カルボキシヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、赤血球組成物がそれを必要とする患者において循環する能力を保持しながら、赤血球組成物の冷蔵または室温保存期間の最大の長さを増加させることを含む。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、ハインツ小体の形成を最小限に抑えながら、冷蔵または周囲温度保存期間の最大の長さを増加させることを含む。さらに別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、形成されるハインツ小体の数を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０％、またはそれを超えて減少させることを含む。別の態様において、ハインツ小体は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、カルボキシヘモグロビンを含む赤血球組成物中で、５～１０、１０～２０、２０～３０、３０～４０、４０～５０、５０～６０、または６０～７０％減少する。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、溶解細胞の数を減少させさせることを含む。態様において、溶解細胞の数は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、カルボキシヘモグロビンを含む赤血球組成物中で、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０％、またはそれを超えて減少する。

本開示の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、赤血球組成物がそれを必要とする患者において循環する能力を保持しながら、赤血球組成物の冷蔵または室温保存期間の最大の長さを増加させることを含む。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、ハインツ小体を形成せずに、冷蔵または周囲温度保存期間の最大の長さを増加させることを含む。さらに別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、形成されるハインツ小体の数を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０％、またはそれを超えて減少させることを含む。別の態様において、ハインツ小体は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、シアノ－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物中で、５～１０、１０～２０、２０～３０、３０～４０、４０～５０、５０～６０、または６０～７０％減少する。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、溶解細胞の数を減少させさせることを含む。態様において、溶解細胞の数は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、シアノ－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物中で、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０％、またはそれを超えて減少する。

本開示の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、赤血球組成物がそれを必要とする患者において循環する能力を保持しながら、赤血球組成物の冷蔵または室温保存期間の最大の長さを増加させることを含む。別の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、ハインツ小体を形成せずに、冷蔵または周囲温度保存期間の最大の長さを増加させることを含む。さらに別の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、形成されるハインツ小体の数を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０％、またはそれ以上減少させることを含む。別の態様において、ハインツ小体は、シアノ－メトヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、アジド－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物中で、５～１０、１０～２０、２０～３０、３０～４０、４０～５０、５０～６０、または６０～７０％減少する。別の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物の有効期間を増加させることは、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、溶解細胞の数を減少させさせることを含む。態様において、溶解細胞の数は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、アジド－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物中で、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０％以上減少する。

本開示の態様において、有効期間は、医薬品およびカルボキシヘモグロビンを含む赤血球の有効性を定量化することによって測定される。本開示の別の態様において、有効期間は、医薬品およびシアノ－メトヘモグロビンを含む赤血球の有効性を定量化することによって測定される。本開示の別の態様において、有効期間は、医薬品およびアジド－ヘモグロビンを含む赤血球の有効性を定量化することによって測定される。別の態様において、有効期間は、医薬品を含む赤血球をビオチン、⁵¹Ｃｒ、または^99mＴｃで標識して、循環における期間の長さを定量化することによって測定される。

本開示の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１週以上増加される。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、２週以上増加される。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、３週以上増加される。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、４週以上増加される。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、５週以上増加される。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、２日以上増加される。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、４日以上増加される。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、３～１０日、５～１０日、７～１４日、または５～３０日増加される。さらに別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１～２週、１～３週、１～４週、１～５週、または２～１０週増加される。別の態様において、カルボキシヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、５～１０％、１０～２０％、２０～４０％、４０～６０％、６０～８０％、または８０～１００％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも１０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも２０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも３０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも４０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも５０％増加される。

別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１週以上増加される。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、２週以上増加される。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、３週以上増加される。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、４週以上増加される。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、５週以上増加される。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、２日以上増加される。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、４日以上増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、３～１０日、５～１０日、７～１４日、または５～３０日増加される。さらに別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１～２週、１～３週、１～４週、１～５週、または２～１０週増加される。別の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、５～１０％、１０～２０％、２０～４０％、４０～６０％、６０～８０％、または８０～１００％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも１０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも２０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも３０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも４０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも５０％増加される。

本開示の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１週以上増加される。別の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、２週以上増加される。別の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、３週以上増加される。別の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、４週以上増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、５週以上増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、２日以上増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、４日以上増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、３～１０日、５～１０日、７～１４日、または５～３０日増加される。さらに別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１～２週、１～３週、１～４週、１～５週、または２～１０週増加される。別の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含むＲＢＣの有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、５～１０％、１０～２０％、２０～４０％、４０～６０％、６０～８０％、または８０～１００％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも１０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも２０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも３０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも４０％増加される。別の態様において、有効期間は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも５０％増加される。

本開示は、薬物送達のための赤血球組成物を保存するための保存雰囲気を提供する。態様において、保存雰囲気は、最小分圧の酸素を含む。態様において、保存雰囲気は、２０ｍｍＨｇ、１５ｍｍＨｇ、または１０ｍｍＨｇ未満を含む。別の態様において、保存雰囲気は、窒素、アルゴン、ヘリウム、または一酸化炭素の分圧に対して最小分圧の酸素を含む。態様において、薬物送達のための赤血球組成物は、カルボキシヘモグロビン、シアノ－メトヘモグロビン、またはアジド－メトヘモグロビンを含む。

態様において、保存雰囲気は、バイアル、容器、注射器、またはバッグに含有される。別の態様において、保存は、周囲圧力下にある。別の態様において、保存雰囲気は、周囲空気、一酸化炭素、Ｎ₂、またはそれらの組み合わせを含む。さらなる態様において、保存雰囲気は、２０、１５、１０、５、または３％未満の飽和酸素を含む。別の態様において、保存雰囲気は、３～５、５～１０、１０～１５、または１５～２０％の飽和酸素を含む。

本開示は、医薬品を含む赤血球をガス交換で処理することを提供する。態様において、本開示は医薬品およびオキシヘモグロビンを含む赤血球をガス交換で処理することを提供する。態様において、ガス交換は、急速ガス交換を含む。別の態様において、ガス交換は、一晩のガス交換を含む。さらに別の態様において、ガス交換は、膜ガス交換を含む。さらなる態様において、ガス交換は、マイクロバブルガス交換を含む。別の態様において、ガス交換は、一酸化炭素、ＨＣＮガス、またはＮＡＮ３溶液によるものである。

本開示の態様において、保存温度は、０．１～６℃、－４～６℃、６～２４℃、２４～３８℃である。別の態様において、保存温度は、－４℃超、４℃超、１０℃超、１５℃超、２０℃超、２５℃超、３０℃超、３５℃超、または４０℃超である。別の態様において、保存温度は、約３７℃である。さらに別の態様において、保存温度は、約２７℃である。いくつかの態様において、組成物は、凍結保護剤をさらに含む。さらに別の態様において、保存温度は、約－８０℃である。

本開示の態様において、赤血球組成物は、添加剤溶液を含む。別の態様において、添加剤溶液は、グルコース、リン酸塩、クエン酸塩、重炭酸塩、または塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）のうちの１つ以上を含む。別の態様において、添加剤溶液を含む赤血球組成物は、５．５～８のｐＨを有する。本開示の別の態様において、赤血球組成物は、１０マイクロリットルの液体当たり少なくとも２個の赤血球を含む。別の態様において、赤血球組成物は、１０マイクロリットルの液体当たり少なくとも５、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００個の細胞を含む。

本開示はまた、薬物送達のための赤血球組成物の有効期間を増加させるための方法であって、医薬品を含む赤血球を一酸化炭素でパージすることと、パージした赤血球を期間の間保存することと、を含む方法を提供し、かつ含む。本開示の態様において、赤血球のパージは、周囲空気、一酸化炭素、Ｎ₂、またはそれらの組み合わせを用いるものである。

本開示の態様において、カルボキシヘモグロビンを含む赤血球組成物は、１、２、３、４、５、６、７、８、９週間、またはそれを超えて保存される。別の態様において、赤血球組成物は、１～３週間、３～６週間、６～９週間、または９～１２週間保存される。別の態様において、赤血球組成物は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、または８週間保存される。

本開示の態様において、シアノ－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物は、１、２、３、４、５、６、７、８、９週間、またはそれを超えて保存される。別の態様において、赤血球組成物は、１～３週間、３～６週間、６～９週間、または９～１２週間保存される。別の態様において、赤血球組成物は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、または８週間保存される。

本開示の態様において、アジド－メトヘモグロビンを含む赤血球組成物は、１、２、３、４、５、６、７、８、９週間、またはそれを超えて保存される。別の態様において、赤血球組成物は、１～３週間、３～６週間、６～９週間、または９～１２週間保存される。別の態様において、赤血球組成物は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、または８週間保存される。

本開示は、医薬品を発現する赤血球を含む医薬組成物であって、医薬組成物が、非酸素ヘモグロビン結合剤および２５％未満のＳＯ２を含む、医薬組成物を提供し、かつ含む。別の態様において、医薬組成物は、２０、１５、１０、５、または３％未満のＳＯ２を含む。別の態様において、医薬組成物は、２５～５０、５０～７５、または７５～１００％の一酸化炭素を含む。

本開示は、医薬品を含む赤血球を含む一酸化炭素飽和医薬組成物を含む、保存バイアルを提供し、かつ含む。態様において、保存バイアルは、一酸化炭素、窒素、またはアルゴンを有するヘッドスペースを含む。態様において、保存バイアルは、一酸化炭素を有するヘッドスペースを含む。別の態様において、保存バイアルは、アルゴンを有するヘッドスペースを含む。態様において、保存バイアルは、窒素を有するヘッドスペースを含む。

本開示はまた、所定用量の赤血球薬品をパッケージングする方法であって、酸素を一酸化炭素とのガス交換によって枯渇させることと、薬品容器を所定用量の赤血球薬品で充填することと、薬品容器を密封することと、を含む、方法を提供し、かつ含む。

本開示の態様において、赤血球薬品は、医薬品と、一酸化炭素、シアン化物、またはアジ化物から選択されるヘモグロビン誘導体と、を含む。

本開示の態様において、非酸素ヘモグロビン結合剤および化学結合剤は、同一の化合物である。

本開示の態様において、所定用量は、１～１００マイクロリットル、１～５００マイクロリットル、５００～１０００マイクロリットル、または１～２ミリリットルである。別の態様において、所定用量は、少なくとも１、１０、１００、または５００マイクロリットルである。

本開示の態様において、赤血球薬品は、本開示に提供される医薬品を含む赤血球である。本開示の態様において、薬品容器は、バイアル、注射器、チューブ、バッグ、またはアンプルである。

本開示はさらに、薬剤送達のための赤血球の循環寿命を増加させるための方法であって、医薬品を含む赤血球を得ることと、赤血球を薬剤で処理してヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、医薬品を含む赤血球を保存雰囲気下で保存することと、を含む方法を提供し、かつ含む。

本開示の態様において、赤血球の循環寿命は、それを必要とする患者において、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存される赤血球と比較して、少なくとも２、４、５、８、１６、または３２日増加される。別の態様において、薬物送達のための赤血球の循環寿命は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存される赤血球と比較して、少なくとも１、２、または３週増加される。

本開示の態様において、「同様の条件」は、酸素飽和、ヘモグロビン誘導体、または酸素飽和およびヘモグロビン誘導体を除いて一致するすべての条件によって定義される。例えば、同様の条件には、保存における期間の長さ、保存温度、および保存容器が含まれる。態様において、同様の条件は、ヘッドスペースガス組成物（すなわち、ＣＯ対周囲空気）を含まない。態様において、同様の条件は、保存温度、保存期間の長さ、および添加物溶液を含む。

本開示の態様において、「オキシヘモグロビンを含むＲＢＣ」は、オキシヘモグロビンとデオキシヘモグロビンとの混合物を含み、５０％を超えて含むオキシヘモグロビンを有する。別の態様において、オキシヘモグロビンを含むＲＢＣは、６０％を超えるオキシヘモグロビンを含む。別の態様において、オキシヘモグロビンを含むＲＢＣは、７０％を超えるオキシヘモグロビンを含む。別の態様において、オキシヘモグロビンを含むＲＢＣは、８０％を超えるオキシヘモグロビンを含む。別の態様において、オキシヘモグロビンを含むＲＢＣは、９０％を超えるオキシヘモグロビンを含む。別の態様において、オキシヘモグロビンを含むＲＢＣは、９５％を超えるオキシヘモグロビンを含む。別の態様において、オキシヘモグロビンを含むＲＢＣは、９８％を超えて含む。別の態様において、オキシヘモグロビンは、１００％オキシヘモグロビンを含む。さらに別の態様において、オキシヘモグロビンを含むＲＢＣは、５０、４０、３０、２０、１０、５、または２％未満のデオキシヘモグロビンを含む。

本明細書で使用される場合、「試薬赤血球」という用語は、抗原的に特徴付けられている赤血球である。本開示の態様において、試薬赤血球は、抗原的に特徴付けられており、一酸化炭素、シアン化物、およびアジ化物からなる群から選択されるヘモグロビン誘導体で安定化されている赤血球である。別の態様において、試薬赤血球は、濃縮赤血球である。別の態様において、試薬赤血球は、プールされた洗浄済み赤血球の２～３％懸濁液を含む。別の態様において、試薬赤血球は、改良アルセバー溶液中のプールされた洗浄済み赤血球の２～３％懸濁液を含む。さらに別の態様において、試薬赤血球は、貯蔵溶液を含む。態様において、貯蔵溶液は、クエン酸三ナトリウム、クエン酸、デキストロース、イノシン、ネオマイシン硫酸塩、クロラムフェニコール、またはそれらの組み合わせを含む。別の態様において、貯蔵溶液は、クエン酸三ナトリウム、クエン酸、デキストロース、イノシン、ネオマイシン硫酸塩（０．１０３グラム／リットル）、クロラムフェニコール（０．３４９グラム／リットル）、またはそれらの組み合わせを含む。

本明細書で使用される場合、「低下している」、「低下」、「低下した」、「減少している」、または「減少した」という用語は、初期量よりも低いか、または対照試料と比較して低い最終量を指すことを意味する。態様において、対照試料は、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣを含む。別の態様において、対照試料は、オキシヘモグロビンおよびデオキシヘモグロビンの混合物を含むＲＢＣを含む。

本明細書で使用される場合、「増加している」または「増加した」という用語は、初期量よりも高いか、または対照試料と比較して高い最終量を指すことを意味する。

本明細書は、以下の実施形態を提供し、かつ含む。

実施形態１．試薬赤血球（ＲＢＣ）を貯蔵するための方法であって、
ａ）赤血球を得ることと、
ｂ）当該赤血球を一酸化炭素を含むガスでフラッシングして、一酸化炭素飽和ＲＢＣ（ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ）を調製することと、
ｃ）当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣを一酸化炭素（ＣＯ）の存在下の嫌気条件下で保存することと、を含み、当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣの表面抗原が安定化される、方法。
実施形態２．当該ガスが、酸素を含まない、実施形態１に記載の方法。
実施形態３．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、およびｓからなる群から選択される表面抗原について陽性である、血液型Ｏ細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態４．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについてさらに陽性である、血液型Ｏ細胞である、実施形態３に記載の方法。
実施形態５．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞である、実施形態４に記載の方法。
実施形態６．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ｆ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｌｕ^a、およびＬｕ^bについて陰性である、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態７．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性である、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態８．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、実施形態７に記載の方法。
実施形態９．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^aＶ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、実施形態８に記載の方法。
実施形態１０．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ａ１について陽性であるＡ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態１１．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞である、実施形態１０に記載の方法。
実施形態１２．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ａ２について陽性である、Ａ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態１３．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞である、実施形態１２に記載の方法。
実施形態１４．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｂについて陽性である、Ｂ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態１５．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性であるＢ型細胞である、実施形態１４に記載の方法。
実施形態１６．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有するか、表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有するか、
表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有するか、または
表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有する、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態１７．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、実施形態１６に記載の方法。
実施形態１８．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、実施形態１６に記載の方法。
実施形態１９．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有するか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有する、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態２０．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、実施形態１９に記載の方法。
実施形態２１．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、実施形態１９に記載の方法。
実施形態２２．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性である、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態２３．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｄ、Ｃ、Ｅ、ｃ、ｅ、ｆ、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｐ₁、Ｉ、ＩＨ、Ｖｅｌ、ＰＰ₁Ｐ^k、およびＰ抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、実施形態２２に記載の方法。
実施形態２４．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｆｙａ、Ｆｙｂ、Ｓ、ｓ、Ｍ、Ｎ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aに対する抗体の低下した結合を有するか、または結合を有さない、Ｏ型細胞である、実施形態２２に記載の方法。
実施形態２５．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｄ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、抗Ｄ（Ｒｈ₀）血清で感作される、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態２６．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ａ₂抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ａ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態２７．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｂ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ｂ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態２８．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ａ₁抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ａ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態２９．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ａ₁抗原、Ｂ抗原、ならびにＲｈ血液型ｒｒ（ｄｃｅ／ｄｅｃ）のＲｈ抗原ｄ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性である、ＡＢ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態３０．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｒｈ抗原Ｄ、ｄ、Ｃ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ｒ（ＤＣｅ／ｄｃｅ）を有する、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態３１．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態３２．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^a抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、実施形態３１に記載の方法。
実施形態３３．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^w抗原に対する抗体の結合について陰性である、Ｏ型細胞である、実施形態３１に記載の方法。
実施形態３４．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｒｅｓｏｌｖｅ（登録商標）パネルＡ説明書にプロファイルがない、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態３５．当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、Ｒｅｓｏｌｖｅ（登録商標）パネルＢ説明書にプロファイルがない、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。

書にプロファイルがない、Ｏ型細胞である、実施形態１に記載の方法。
実施形態３７．キットであって、
ａ）一酸化炭素飽和ＲＢＣ（ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ）の１つ以上のバイアルであって、当該バイアルが緩衝液を含む、バイアルと、
ｂ）表面抗原の共通セットを有する複数のＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣであって、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、
（ｉ）血液型Ｏ細胞であり、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、およびｓからなる群から選択される表面抗原について陽性である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｉｉ）Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原について陽性である、血液群Ｏ細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｉｉｉ）．Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原について陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｉｖ）表面抗原Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ｆ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｌｕ^a、およびＬｕ^bについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｖ）Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｖｉ）Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、ならびにＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｖｉｉ）Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、ならびにＹｔ^aについて陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^aＶ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｖｉｉｉ）表面抗原Ａ１について陽性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｉｘ）表面抗原Ａ１について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘ）表面抗原Ａ２について陽性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｉ）表面抗原Ａ２について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｉｉ）表面抗原Ｂについて陽性である、Ｂ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｉｉｉ）表面抗原Ｂについて陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ｂ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｉｖ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｖ）表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｖｉ）表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｖｉｉ）表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｖｉｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｉｘ）表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘ）表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｉ）表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｉｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｉｖ）表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｖ）表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｖｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有するか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｖｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｖｉｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｉｘ）フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘ）フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性であり、Ｄ、Ｃ、Ｅ、ｃ、ｅ、ｆ、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｐ₁、Ｉ、ＩＨ、Ｖｅｌ、ＰＰ₁Ｐ^k、およびＰ抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｉ）フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^aについて陰性であり、Ｆｙａ、Ｆｙｂ、Ｓ、ｓ、Ｍ、Ｎ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aに対する低下した結合を有するか、または結合を有さない、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｉｉ）Ｄ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、当該ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、抗Ｄ（Ｒｈ₀）血清で感作される、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｉｉｉ）Ａ₂抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｉｖ）Ｂ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ｂ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｖ）Ａ₁抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｖｉ）Ａ₁抗原、Ｂ抗原、ならびにＲｈ血液型ｒｒ（ｄｃｅ／ｄｅｃ）のＲｈ抗原ｄ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性である、ＡＢ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｖｉｉ）Ｒｈ抗原Ｄ、ｄ、Ｃ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ｒ（ＤＣｅ／ｄｃｅ）を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｖｉｉｉ）Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｘｘｉｘ）Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^a抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、
（ｘｌ）Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^w抗原に対する抗体の結合について陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ、からなる群から選択される、複数のＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、ｃ）説明書と、を含む、キット。
実施形態３８．緩衝液およびＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣを含む、一酸化炭素飽和ＲＢＣ（ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣ）のバイアルであって、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣが、
（ｉ）血液型Ｏ細胞であり、Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、およびｓからなる群から選択される表面抗原について陽性である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｉｉ）Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原について陽性である、血液群Ｏ細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｉｉｉ）．Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｉ、Ｌｕ^a、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aからなる群から選択される表面抗原について陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、血液型Ｏ細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｉｖ）表面抗原Ｄ、Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ、ｆ、ＣＷ、Ｋ、ｋ、Ｐ₁、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｌｕ^a、およびＬｕ^bについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｖ）Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｖｉ）Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、ならびにＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｖｉｉ）Ｒｈ抗原Ｄ、Ｃ、およびｅ、Ｉ、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、ならびにＹｔ^aについて陽性であり、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^aＶ^w、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｖｉｉｉ）表面抗原Ａ１について陽性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｉｘ）表面抗原Ａ１について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘ）表面抗原Ａ２について陽性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｉ）表面抗原Ａ２について陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｉｉ）表面抗原Ｂについて陽性である、Ｂ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｉｉｉ）表面抗原Ｂについて陽性であり、表面抗原Ｄ、Ｃ、およびＥについて陰性である、Ｂ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｉｖ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｖ）表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｖｉ）表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｖｉｉ）表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｖｉｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｉｘ）表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘ）表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｉ）表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁Ｒ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｉｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ^w、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ ^wＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性であるＯ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｉｖ）表面抗原Ｄ、ｃ、およびＥについて陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₂Ｒ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｖ）表面抗原ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、Ｒｈ表現型ｒｒを有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｖｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有するか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｖｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^aについて陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｖｉｉｉ）表面抗原Ｄ、Ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₁を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性であるか、または表面抗原Ｄ、ｃ、およびｅについて陽性であり、ＲｈハプロタイプＲ₂を有し、表面抗原Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^wについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｉｘ）フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘ）フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aについて陰性であり、Ｄ、Ｃ、Ｅ、ｃ、ｅ、ｆ、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、Ｌｅ^b、Ｐ₁、Ｉ、ＩＨ、Ｖｅｌ、ＰＰ₁Ｐ^k、およびＰ抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｉ）フィシン処理されており、表面抗原Ｍ、Ｎ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｓ、ｓ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^aについて陰性であり、Ｆｙａ、Ｆｙｂ、Ｓ、ｓ、Ｍ、Ｎ、Ｘｇ^a、Ｐｒ、Ｃｈ^a、Ｒｇ^a、およびＹｋ^aに対する低下した結合を有するか、または結合を有さない、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｉｉ）Ｄ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、当該細胞が抗Ｄ（Ｒｈ₀）血清で感作される、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｉｉｉ）Ａ₂抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｉｖ）Ｂ抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ｂ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｖ）Ａ₁抗原に対する抗体の結合について陽性であり、抗Ｄ（Ｒｈ₀）抗体の結合について陰性である、Ａ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｖｉ）Ａ₁抗原、Ｂ抗原、ならびにＲｈ血液型ｒｒ（ｄｃｅ／ｄｅｃ）のＲｈ抗原ｄ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性である、ＡＢ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｖｉｉ）Ｒｈ抗原Ｄ、ｄ、Ｃ、ｃ、およびｅに対する抗体の結合について陽性であり、Ｒｈ表現型Ｒ₁ｒ（ＤＣｅ／ｄｃｅ）を有する、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｖｉｉｉ）Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｘｘｉｘ）ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣは、Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｌｕ^b、Ｊｓ^b、Ｋｐ^b、およびＹｔ^a抗原に対する抗体の結合について陽性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、
（ｘｌ）Ｄ（ＲＨ１）、Ｃ（ＲＨ２）、Ｅ（ＲＨ３）、ｃ（ＲＨ４）、ｅ（ＲＨ５）、Ｍ、Ｎ、Ｓ、ｓ、Ｐ₁、Ｋ、ｋ、Ｆｙ^a、Ｆｙ^b、Ｊｋ^a、Ｊｋ^b、Ｌｅ^a、およびＬｅ^bに対する抗体の結合について陽性であり、Ｊｓ^a、Ｋｐ^a、Ｗｒ^a、Ｄｉ^a、Ｖｗ、Ｖ、Ｌｕ^a、およびＣ^w抗原に対する抗体の結合について陰性である、Ｏ型細胞である、ＣＯ－Ｈｂ ＲＢＣと、からなる群から選択される、バイアル。
実施形態３９．試薬赤血球（ＲＢＣ）を貯蔵するための方法であって、
ａ）抗原的に特徴付けられている赤血球を得ることと、
ｂ）当該赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、
ｃ）ヘモグロビン誘導体を含む当該赤血球を嫌気条件下で保存して、試薬赤血球を形成させることと、を含み、ヘモグロビン誘導体を含む当該試薬赤血球の表面抗原が安定化される、方法。
実施形態４０．当該化学薬剤が、一酸化炭素（ＣＯ）であり、当該ヘモグロビン誘導体が、カルボキシ－ヘモグロビンである、実施形態３９に記載の方法。
実施形態４１．当該化学薬剤が、シアン化物であり、当該ヘモグロビン誘導体が、シアノ－メトヘモグロビンである、実施形態３９に記載の方法。
実施形態４２．当該化学薬剤が、アジ化物（Ｎ３）であり、当該ヘモグロビン誘導体が、アジ化ナトリウムの水溶液と反応させることによって調製されるアジド－メトヘモグロビンである、実施形態３９に記載の方法。
実施形態４３．赤血球を特徴付けることをさらに含む、実施形態３９に記載の方法。
実施形態４４．薬物送達のための赤血球組成物の有効期間を増加させるための方法であって、
医薬品を含む赤血球を得ることと、
当該赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、
当該医薬品を含む当該赤血球を保存雰囲気下で保存することと、を含む、方法。
実施形態４５．当該保存雰囲気が、１０ｍｍＨｇ未満の酸素を含む、実施形態４４に記載の方法。
実施形態４６．当該保存が、周囲圧力下にある、実施形態４４に記載の方法。
実施形態４７．当該化学薬剤が、一酸化炭素（ＣＯ）であり、当該ヘモグロビン誘導体が、カルボキシ－ヘモグロビンである、実施形態４４に記載の方法。
実施形態４８．当該化学薬剤が、シアン化物であり、当該ヘモグロビン誘導体が、シアノ－メトヘモグロビンである、実施形態４４に記載の方法。
実施形態４９．当該化学薬剤が、アジ化物（Ｎ₃）であり、当該ヘモグロビン誘導体が、アジ化ナトリウムの水溶液と反応させることによって調製されるアジド－メトヘモグロビンである、実施形態４４に記載の方法。
実施形態５０．当該保存雰囲気が、一酸化炭素を含む、実施形態４７に記載の方法。
実施形態５１．当該雰囲気が、当該保管雰囲気が、周囲空気、一酸化炭素、Ｎ₂、またはそれらの混合物を含むことを含む、実施形態４８に記載の方法。
実施形態５２．当該雰囲気が、窒素を含む、実施形態４９に記載の方法。
実施形態５３．当該有効期間が、オキシヘモグロビンを含んで同様な条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１週間以上増加される、実施形態４７に記載の方法。
実施形態５４．オキシヘモグロビンを含む当該ＲＢＣが、オキシヘモグロビンとデオキシヘモグロビンとの混合物を含み、５０％を超えて含むオキシヘモグロビンを有する、実施形態５３に記載の方法。
実施形態５５．オキシヘモグロビンを含む当該ＲＢＣが、６０、７０、８０、９０、または９５％を超えるオキシヘモグロビンを含む、実施形態５４に記載の方法。
実施形態５６．当該有効期間が、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１週以上増加される、実施形態４８に記載の方法。
実施形態５７．当該有効期間が、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１週以上増加される、実施形態４９に記載の方法。
実施形態５８．当該有効期間が、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１日以上増加される、実施形態４７～４９に記載の方法。
実施形態５９．当該赤血球中のハインツ小体の成長が、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、低下される、実施形態４５～５８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態６０．細胞溶解が、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、当該赤血球組成物中で低下される、実施形態４５～５８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態６１．当該医薬品が、当該ＲＢＣの細胞表面に発現される導入遺伝子である、実施形態４４に記載の方法。
実施形態６２．当該医薬品が、当該ＲＢＣの細胞質ゾル内に局在化される、実施形態４４に記載の方法。
実施形態６３．当該医薬品が、当該ＲＢＣの細胞表面に局在化される、実施形態４４に記載の方法。
実施形態６４．当該医薬品が、細胞内膜に局在化される、実施形態４４に記載の方法。
実施形態６５．当該処理することが、ガス交換を含む、実施形態４４に記載の方法。
実施形態６６．当該ガス交換が、急速ガス交換、一晩ガス交換、膜ガス交換、またはマイクロバブルガス交換である、実施形態６５に記載の方法。
実施形態６７．当該ガス交換が、一酸化炭素によるものである、実施形態６５または６６に記載の方法。
実施形態６８．当該ガス交換が、ＨＣＮによる処理によってシアン化物を用いて行われる、実施形態６５または６６に記載の方法。
実施形態６９．当該ガス交換が、赤血球をアジ化ナトリウム（ＮａＮ₃）溶液で処理することによるものである、実施形態６５または６６に記載の方法。
実施形態７０．当該医薬品が、融合タンパク質である、実施形態４４に記載の方法。
実施形態７１．当該融合タンパク質が、表４および表５に列挙されるものからなる群から選択される、実施形態７０に記載の方法。
実施形態７２．当該医薬品が、表１１に列挙されるタンパク質のクラスから選択されるタンパク質である、実施形態４４に記載の方法。
実施形態７３．当該医薬品が、表１２に列挙される医薬品から選択される、実施形態４４に記載の方法。
実施形態７４．当該保存することが、０．１～６℃の温度である、実施形態４４に記載の方法。
実施形態７５．当該保存することが、６℃を超える温度である、実施形態４４に記載の方法。
実施形態７６．当該保存することが、２４～３８℃の温度である、実施形態４４に記載の方法。
実施形態７７．当該保存することが、３７℃である、実施形態４４に記載の方法。
実施形態７８．赤血球を、５．５～８のｐＨを有する添加剤溶液と混合することをさらに含む、実施形態４４に記載の方法。
実施形態７９．当該添加剤溶液が、グルコース、リン酸塩、クエン酸塩、重炭酸塩、または塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）のうちの１つ以上を含む、実施形態７８に記載の方法。
実施形態８０．当該赤血球組成物が、マイクロリットル当たり少なくとも１００個の赤血球を含む、実施形態４４に記載の方法。薬物送達のための赤血球組成物の有効期間を増加させるための方法であって、医薬品を含む赤血球を一酸化炭素でパージすることと、
当該パージされた赤血球を期間の間保存することと、を含む方法。
実施形態８１．当該有効期間が、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１週を超えて増加される、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８２．当該有効期間が、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１日以上増加される、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８３．当該保存することが、２５％未満の酸素の低下した酸素条件下にある、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８４．当該医薬品が、１つ以上の発現されるタンパク質である、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８５．当該医薬品が、当該ＲＢＣの細胞質内に局在化される、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８６．当該医薬品が、当該ＲＢＣの細胞表面に局在化される、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８７．当該医薬品が、ＲＢＣ膜に局在化される、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８８．当該パージすることが、一酸化炭素との急速、一晩、またはガス交換によるものである、実施形態８０に記載の方法。
実施形態８９．当該保存することが、３７℃である、実施形態８０に記載の方法。
実施形態９０．当該保存することが、０．１～６℃の温度である、実施形態８０に記載の方法。
実施形態９１．当該保存することが、６℃を超える温度である、実施形態８０に記載の方法。
実施形態９２．赤血球を、５．５～８のｐＨを有する添加剤溶液と混合することをさらに含む、実施形態８０に記載の方法。
実施形態９３．当該添加剤溶液が、グルコース、リン酸塩、クエン酸塩、重炭酸塩、または塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）のうちの１つ以上を含む、実施形態９２に記載の方法。
実施形態９４．当該赤血球組成物が、マイクロリットル当たり少なくとも１００個の赤血球を含む、実施形態８０に記載の方法。
実施形態９５．当該ヘッドスペース雰囲気が、５ｍｍＨｇ未満の酸素を含む、実施形態４４に記載の方法。
実施形態９６．医薬品を発現する赤血球を含む医薬組成物であって、当該医薬組成物が、非酸素ヘモグロビン結合剤および２５％未満のＳＯ₂を含む、医薬組成物。
実施形態９７．当該非酸素ヘモグロビン結合剤が、一酸化炭素である、実施形態９６に記載の医薬組成物。
実施形態９８．当該非酸素ヘモグロビン結合剤が、シアン化物である、実施形態９６に記載の方法。
実施形態９９．当該非酸素ヘモグロビン結合剤が、アジ化物（Ｎ₃）である、実施形態９６に記載の方法。
実施形態１００．医薬品を含む赤血球を含む一酸化炭素飽和医薬組成物を含む、保存バイアル。
実施形態１０１．当該医薬品が、表５、表６、および表７に列挙されるものからなる群から選択される、赤血球タンパク質との融合によって発現される抗原を含む、実施形態１００に記載の医薬組成物。
実施形態１０２．当該医薬品が、表１１に列挙されるタンパク質のクラスから選択されるタンパク質である、実施形態１００に記載の医薬組成物。
実施形態１０３．当該抗原が、表８、表９、または表１０に列挙される抗原から選択される、実施形態１０１に記載の医薬組成物。
実施形態１０４．当該医薬品が、抗体分子を含む、実施形態１０１に記載の医薬組成物。
実施形態１０５．当該医薬品が、免疫チェックポイント分子を阻害する薬剤である、実施形態１０１に記載の医薬組成物。
実施形態１０６．当該抗原が、表１２の抗原から選択される、実施形態１０１に記載の医薬組成物。
実施形態１０７．当該抗体が、表１７に列挙される抗体から選択される、実施形態１０４に記載の医薬組成物。
実施形態１０８．所定用量の赤血球薬品をパッケージングする方法であって、酸素を一酸化炭素とのガス交換によって枯渇させることと、薬品容器を所定用量の当該赤血球薬品で充填することと、当該薬品容器を密封することと、を含む、方法。
実施形態１０９．当該パッケージングステップが、低下した酸素条件下で行われる、実施形態１０８に記載の方法。
実施形態１１０．薬物送達のための赤血球のインビボ循環時間を増加させるための方法であって、
医薬品を含む赤血球を得ることと、
当該赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、
当該医薬品を含む当該赤血球を保存雰囲気下で保存することと、を含む、方法。
実施形態１１１．当該化学薬剤が、シアン化物であり、当該ヘモグロビン誘導体が、シアノ－メトヘモグロビンである、実施形態１１０に記載の方法。
実施形態１１２．当該化学薬剤が、アジ化物（Ｎ₃）であり、当該ヘモグロビン誘導体が、当該赤血球をアジ化ナトリウムの水溶液と反応させることによって調製されるアジド－メトヘモグロビンである、実施形態１１０に記載の方法。
実施形態１１３．当該有効期間が、オキシヘモグロビンを含んで同様の条件下で保存されるＲＢＣと比較して、少なくとも５日増加される、実施形態１１０に記載の方法。

いままで本発明を全般的に記載しており、以下の実施例を参照することによって、同様のことがより容易に理解されるが、これらの実施例は、説明のために提供され、特定されない限り、本発明を限定することは意図されない。

本明細書に引用される各定期刊行物、特許、および他の文書または参照文献は、参照により、その全体が本明細書に組み込まれる。

実施例１：血液の収集および赤血球濃縮物（ＲＣＣ）の調製
試薬ＲＢＣの調製のための血液は、確立されたドナーから、標準的な方法を使用して抗凝固溶液に収集される。輸血医学における使用のために好適である様々な既知の抗凝固剤が好適であり、クエン酸リン酸デキストロース（ＣＰＤ）およびクエン酸デキストロース（ＡＣＤ）が含まれるが、血液が輸血に使用されない場合、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）およびエチレングリコール－ビス（β－アミノエチルエーテル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－四酢酸（ＥＧＴＡ）などの他の抗凝固剤を、必要に応じて使用することができる。収集した血液を遠心分離または濾過に供して白血球（ＷＢＣ）および過剰な血漿を分離し、濃縮赤血球（ｐＲＢＣ）または赤血球濃縮物（ＲＣＣ）を調製する。

実施例２：Ｈｂ－ＣＯ含有ＲＣＣ（Ｈｂ－ＣＯ ＲＣＣ）の調製
好ましくは、遅滞なく、実施例１で調製される赤血球濃縮物（ＲＣＣ）は、以下の方法のうちの１つによってＨｂ－ＣＯに変換される。

ａ．急速ガス交換：
ＲＣＣをポリ塩化ビニルまたは他の好適なバッグ（１５０ｍｌ以上）に保持し、一酸化炭素を導入し、ＲＣＣおよびＣＯを含むバッグを血小板シェーカーに約１０分間設置する。インキュベーション後、未交換のＣＯ、放出されて残留する酸素、および二酸化炭素を含有するガスを発現させ、新鮮なＣＯに置き換える。血小板シェーカーにおける約１０分間の第２のインキュベーション後、ガスを再度発現させ、第３の体積のＣＯで置き換える。血小板シェーカーでの振とうによる最終インキュベーション後、過剰なガスを除去し、Ｈｂ－ＣＯ ＲＣＣを嫌気条件下で、さらなる特性評価、品質管理、および保存のために好適なバイアルに移す。

ｂ．一晩ガス交換：
ＲＣＣをポリ塩化ビニルまたは他の好適なバッグ（１５０ｍｌ以上）に保持し、一酸化炭素を導入し、ＲＣＣおよびＣＯを含有するバッグを、一定の穏やかな振とうで、または規則的な間隔（例えば、８時間にわたって３～５回）で撹拌して、４℃に一晩置く。インキュベーション後、ＣＯを含有する過剰なガスを除去し、Ｈｂ－ＣＯ ＲＣＣを嫌気条件下で、さらなる特性評価、品質管理、および保管のために好適なバイアルに移す。
ｃ．膜ガス交換
ポリ塩化ビニルまたは他の適切なバッグ（１５０ｍｌ以上）に保持されたＲＣＣを、供給源ガスとして一酸化炭素を用いるソーリンＤ１００人工肺にポンプで送って通す。ＲＣＣは、遠心ポンプまたはペリスタポンプのいずれかを使用して、Ｄ１００に３０分間送って通す。酸素およびＣＯレベルは、９５％を超えるＨｂ－ＣＯレベルが達成されるまで監視される。あるいは、ＣＯとＣＯ₂との混合ガスの使用によって、懸濁液のｐＨを最適化する。

ｄ．マイクロバブルガス交換：
ＲＣＣをポリ塩化ビニルまたは他の好適な通気バッグ（１５０ｍｌ以上）に保持し、一酸化炭素をバブリングしてＲＣＣに通す。赤血球の溶解を防ぐため、気泡が直径１μｍ未満であることを確実にするように注意する。得られるＨｂ－ＣＯ ＲＣＣを嫌気条件下で、さらなる特性評価、品質管理、および保存のために好適なバイアルに移す。あるいは、ＣＯとＣＯ₂との混合ガスの使用によって、懸濁液のｐＨを最適化する。

ｅ．変更したＨＥＭＡＮＥＸＴ（登録商標）酸素還元バッグ（ＯＲＢ）
２０１８年８月２８日に発行された米国特許第１０，０５８，０９１号に記載されているＨＥＭＡＮＥＸＴ（登録商標）酸素還元バッグ（ＯＲＢ）を、吸着剤パックを取り除き、ヘッドスペース（１００～２００ｍｌ）をＣＯガスで充填するように変更する。ＣＯ含有ＯＲＢバッグを、血小板シェーカー上で、室温で３０分間撹拌する。あるいは、ＣＯ含有ＯＲＢバッグを、一定の振とうまたは一定間隔（例えば、８時間にわたって３～５回）での撹拌のいずれかを用いて４℃に置く。

実施例３：ＨＢ－ＣＯ試薬ＲＢＣの調製およびパッケージング
ＣＯ処理されたＲＢＣを用いてさらなる製造プロセスを続ける。

試薬ＲＢＣを試薬ボトルヘッドにパッケージングし、ヘッドスペースＣＯを陽圧下で充填し、４℃で保存する。

実施例４：ＲＢＣと一酸化炭素との３７℃での長期インキュベーション。
予備的試験を、レシピエントへの輸血後における保存されたＲＢＣの挙動を推定する試みで実施する。実験は、新鮮なＲＢＣおよび保存したＲＢＣを、組織培養培地において３７℃で長期間インキュベートするように設定し、ＲＢＣ形態学を結果尺度として用いる。ＲＢＣを周囲空気下で培地に配置すると、１～３日以内に、小さな暗い結節（ハインツ小体）が表面に現れ、数日にわたってサイズが成長し続ける。１週間に、ハインツ小体は成長し続け、大きくなり（直径が１ｕｍを超えると推定される）、ほとんどのＲＢＣの破裂をもたらす。結果として、大きな暗色結節が付着したＲＢＣゴースト（透明な細胞質ゾル、ヘモグロビンがほとんどまたはまったくない）の発生を生じる。

理論に制限されることなく、ハインツ小体およびＲＢＣゴーストの発生は、ヘモグロビン酸化産物によって引き起こされる可能性が高い。例えば、ヘモグロビン中の第一鉄（＋２）鉄は、インキュベーション中に酸素と反応することによって第二鉄（＋３）状態に酸化される。ヘモグロビンがメトヘモグロビンに酸化されると、それは不安定になり、容易にヘミクロムに分解され、次にグロビンおよびヘミンに分解され、これらはすべて疎水性であり、ＲＢＣ膜形成凝集体（ハインツ小体）を引き起こす。さらに、これらのヘモグロビン酸化産物は、タンパク質およびＲＢＣ細胞骨格に結合し、正常な形態および機能を破壊する。通常、循環では、小さなハインツ小体はマクロファージによって除去され、細胞サイズの低下を伴うものの、正常なＲＢＣ形態が維持される。循環における最適化された栄養素および機械的変形との組み合わせで、ＲＢＣは、約１２０日の循環寿命を有する。マクロファージを含まない培地では、ハインツ小体の成長は阻害されず、速やかな細胞破壊をもたらした。

一酸化炭素（Ｈｂ－ＣＯ複合体）によるヘモグロビンの安定化は、ヘモグロビンの酸化を防止し、ハインツ小体の形成および細胞破壊を阻害する。Ｈｂ－ＣＯ複合体ＲＢＣは、３７℃細胞培養環境でのインキュベーションの間、周囲空気を培養ボトルで１００％一酸化炭素または５％ＣＯ₂／９５％ＣＯでパージする場合、２～３週間にわたって正常な両凹形態を維持する。

Claims (20)

1. 試薬赤血球（ＲＢＣ）を貯蔵するための方法であって、
   ａ）抗原的に特徴付けられている赤血球を得ることと、
   ｂ）前記赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、
   ｃ）ヘモグロビン誘導体を含む前記赤血球を嫌気条件下で保存して、試薬赤血球を形成することと、を含み、ヘモグロビン誘導体を含む前記試薬赤血球の表面抗原が安定化されている、前記方法。
2. 前記化学薬剤が、一酸化炭素（ＣＯ）であり、前記ヘモグロビン誘導体が、カルボキシ－ヘモグロビンである、請求項１に記載の方法。
3. 前記化学薬剤が、シアン化物であり、前記ヘモグロビン誘導体が、シアノ－メトヘモグロビンである、請求項１に記載の方法。
4. 前記化学薬剤が、アジ化物（Ｎ３）であり、前記ヘモグロビン誘導体が、アジ化ナトリウムの水溶液と反応させることによって調製されるアジド－メトヘモグロビンである、請求項１に記載の方法。
5. 赤血球を特徴付けることをさらに含む、請求項１に記載の方法。
6. 薬物送達のための赤血球組成物の有効期間を増加させるための方法であって、
   医薬品を含む赤血球を得ることと、
   前記赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、
   前記医薬品を含む前記赤血球を保存雰囲気下で保存することと、を含む、前記方法。
7. 前記保存雰囲気が、１０ｍｍＨｇ未満の酸素を含む、請求項６に記載の方法。
8. 前記保存が、周囲圧力下にある、請求項６に記載の方法。
9. 前記化学薬剤が、一酸化炭素（ＣＯ）であり、前記ヘモグロビン誘導体が、カルボキシ－ヘモグロビンである、請求項６に記載の方法。
10. 前記化学薬剤が、シアン化物であり、前記ヘモグロビン誘導体が、シアノ－メトヘモグロビンである、請求項６に記載の方法。
11. 前記化学薬剤が、アジ化物（Ｎ₃）であり、前記ヘモグロビン誘導体が、アジ化ナトリウムの水溶液と反応させることによって調製されるアジド－メトヘモグロビンである、請求項６に記載の方法。
12. 前記保存雰囲気が、一酸化炭素を含む、請求項９に記載の方法。
13. 前記雰囲気が、前記保管雰囲気が、周囲空気、一酸化炭素、Ｎ₂、またはそれらの混合物を含むことを含む、請求項１０に記載の方法。
14. 前記雰囲気が、窒素を含む、請求項１１に記載の方法。
15. 前記有効期間が、オキシヘモグロビンを含み、同様な条件下で保存されるＲＢＣと比較して、１週間以上増加する、請求項９に記載の方法。
16. 医薬品を発現する赤血球を含む医薬組成物であって、前記医薬組成物が、非酸素ヘモグロビン結合剤および２５％未満のＳＯ₂を含む、医薬組成物。
17. 医薬品を含む赤血球を含む一酸化炭素飽和医薬組成物を含む、保存バイアル。
18. 所定用量の赤血球薬品をパッケージングする方法であって、酸素を一酸化炭素とのガス交換によって枯渇させることと、薬品容器を所定用量の前記赤血球薬品で充填することと、前記薬品容器を密封することと、を含む、前記方法。
19. 薬物送達のための赤血球のインビボ循環時間を増加させるための方法であって、
    医薬品を含む赤血球を得ることと、
    前記赤血球を化学薬剤で処理して、ヘモグロビン誘導体を含む赤血球を調製することと、
    前記医薬品を含む前記赤血球を保存雰囲気下で保存することと、を含む、前記方法。
20. 実質的に、本明細書に記載される通りである発明。

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