JP2022545654A

JP2022545654A - 第三者ウイルス特異的ｔ細胞組成物、およびその製造方法、及び抗ウイルス予防剤のためのその使用

Info

Publication number: JP2022545654A
Application number: JP2022510102A
Authority: JP
Inventors: ヴァルデス、フアンフェルナンドヴェラ; マリーリーン、アン; ツァンノウ、イフィゲネイア
Original assignee: Baylor College of Medicine
Current assignee: Baylor College of Medicine
Priority date: 2019-08-16
Filing date: 2020-08-14
Publication date: 2022-10-28
Also published as: AU2020333654A1; CA3151356A1; BR112022002827A2; WO2021034674A1; US20220288119A1; MX2022001967A; IL290620A; KR20220048021A; CN114555836A; EP4013897A1

Abstract

【課題】ウイルス感染を対象において防止するための、および／または潜在ウイルスの再活性化を対象において防止するための組成物および方法を提供する。【解決手段】本開示は、ウイルス感染を対象において防止するための、および／または潜在ウイルスの再活性化を対象において防止するための組成物および方法を含む。本発明の方法では、第三者ドナーおよび／またはドナーミニバンクおよび／またはドナーバンクに由来する少なくとも１つの抗原特異的Ｔ細胞株を対象に予防的に投与することが伴う。対象は、移植（例えば、組織移植、臓器移植または骨髄移植）をこれまでに受けている患者、あるいはそのような移植を必要としている患者、または免疫抑制されている、もしくは免疫抑制療法を必要としている患者である場合がある。【選択図】図１

Description

関連出願相互参照
本出願は、２０１９年８月１６日に出願された米国仮出願第６２／８８７，８０６号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれるものとする。

分野
本開示の実施形態は、少なくとも細胞生物学、分子生物学、免疫学、及び医学の分野に関するものである。

ウイルス感染は、様々な疾患の治療法として選択される同種造血幹細胞移植（ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ）後の病的状態および死亡率の重大な原因となっている。しかし、移植後において、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、原疾患の再発、ウイルス感染症もまた、依然として病的状態と死亡率の主要な原因である。ウイルス性病原体に関連する感染症には、ＣＭＶ、ＢＫウイルス（ＢＫＶ）、アデノウイルス（ＡｄＶ）などがあるが、これらに限定されるものではない。ウイルス感染は、同種移植片のレシピエントの大部分で検出される。一部のウイルスには抗ウイルス剤が使用されているが、必ずしも有効ではなく、新しい治療法の必要性が強調されている。これらのウイルス感染を治療する戦略の一つとして、養子免疫療法（例えば、養子Ｔ細胞移植）がある。

養子免疫療法は、疾患特異的細胞やＴ細胞などの人工細胞（抗原特異的Ｔ細胞やキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞など）を個体に移植または注入し、疾患関連細胞を認識、標的化、破壊することを目的とした治療法である。養子免疫療法は、がん、移植後リンパ増殖性疾患、感染症（ウイルス感染症など）、自己免疫疾患など多くの疾患に対する治療法として有望視されている。

養子免疫療法には、主に2つのタイプがある。自己免疫療法では、患者からT細胞などの細胞（抗原特異的T細胞など）を分離・生産・増殖し、必要に応じて同じ患者に再投与できるように保存しておく。同種免疫療法は、患者と健康なドナーの2人が関与する。T細胞（例えば、抗原特異的T細胞）などの細胞は、健康なドナーから分離され、その後、いくつかのHLA対立遺伝子に基づくヒト白血球抗原（HLA）タイプが一致する（または部分的に一致する）患者への投与用に製造、および／または拡大、保管される。HLAは、ヒト主要組織適合性複合体（MHC）とも呼ばれる。このアプローチでは、幹細胞のドナーから細胞を取り出し、生体外でウイルス特異的集団を拡大し、最後に幹細胞移植のレシピエントにT細胞産物を注入して、レシピエントのウイルス感染を治療することができる。例えば、Adv、EBV、CMV、BK、HHV6を標的とするin vitroで増幅したドナー由来のウイルス特異的T細胞は、ウイルス感染を有する幹細胞移植患者に養子移入すると安全かつ有効であることを示している（Gerdemann et al.、2012）。このようなウイルスを標的とする第三者ドナー由来のウイルス特異的T細胞も安全であることが示されているが、現在進行中のウイルス感染症の治療にのみ適していると考えられている。なぜなら、第三者の細胞から作製されたウイルス特異的T細胞やその他の細胞療法は、レシピエントの免疫系に非自己と認識され、拒絶されることが予想されるからである。

Adv、EBV、CMV、BK、HHV6、HSV-1、HSV-2、HHV8、HBV、インフルエンザ、パラインフルエンザ、HMPV、VZVなどのウイルス感染は、年齢（若年または老年）、免疫不全、特定の癌または自己免疫疾患に対する免疫抑制療法による治療などの移植治療以外の理由で免疫不全になった患者にとっても懸念事項である。当技術分野では、ウイルス感染により免疫不全患者に生じる病的状態および死亡率の様々な原因をよりよく制御または予防する治療法に対するニーズがある。本開示は、このニーズおよび他のニーズに対処するものである。

本開示には、ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を第三者同種Ｔ細胞療法の予防的投与により防止するための、または抑制するための方法が含まれる。実施形態において、本発明の方法は、ポリクローナルな第三者Ｔ細胞株である第１の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に予防的に投与することを含み、ただし、前記Ｔ細胞株は１つまたは複数のウイルス抗原に対しての抗原特異性を含む。実施形態において、Ｔ細胞株は、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を含む。実施形態において、予防的投与は、前記Ｔ細胞株が投与されたとき、患者は活性ウイルス感染の証拠または潜在ウイルスの再活性化の証拠を示さないようになる。例を挙げれば、実施形態において、患者には、１つまたは複数のウイルスに対して特異的なＴ細胞を有するポリクローナルな第三者Ｔ細胞株が投与され、この場合、患者は前記１つまたは複数のウイルスに関しての活動性感染を有しない、あるいは患者は活性ウイルス感染をどのようなものであれ有しない。実施形態において、患者は、Ｔ細胞株が投与されたとき、検出可能なウイルス血症またはウイルス尿症を有しない。

実施形態において、患者は、ウイルス感染にかかる危険性または潜在ウイルスの再活性化を有する危険性が一般集団における平均的な人よりも高い。例を挙げれば、実施形態において、ウイルス感染は、そのような感染が一般集団における平均的な人にもたらすであろうよりも大きい危険性を患者の健康または生命にもたらす。実施形態において、患者は、１μＬの血液あたりのリンパ球が約１２００個未満である、約１０００個未満である、約９００個未満である、約８００個未満である、約７００個未満である、約６００個未満である、または約５００個未満である絶対的リンパ球数を有する。実施形態において、患者は内因性Ｔ細胞を欠く。実施形態において、患者は、ＡｄＶ、ＢＫＶ、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＨＶ６、ＨＨＶ８、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ（ＰＩＶ）、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２およびＨＢＶのいずれか１つまたは複数について血清陽性である。

実施形態において、患者は免疫低下している。実施形態において、患者は、疾患または状態に起因して、疾患または状態を処置するために患者が受ける処置に起因して、あるいは年齢に起因して免疫低下している。実施形態において、患者は造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）、臓器移植または組織移植を受ける予定である、あるいはこれまでに受けている。実施形態において、対象は、ＨＳＣＴ治療、臓器移植または組織移植を必要としている。例を挙げれば、実施形態において、患者は、腎臓、肝臓、心臓、心臓弁、肺、膵臓、腸、角膜、筋骨格、結合組織、皮膚、手または顔面の移植片を必要としている、あるいはこれまでに受けている。実施形態では、患者は、移植片の拒絶を防ぐために免疫抑制治療を現在受けている。実施形態において、対象は、がん、例えば、白血病、骨髄腫またはリンパ腫を有する。実施形態において、対象はがんを有し、ＨＳＣＴを必要としている。実施形態において、対象は１つまたは複数の非悪性疾患を有し、ＨＳＣＴを必要としている。例を挙げれば、実施形態において、対象は、再生不良性貧血、骨髄異形成症候群または免疫不全症候群を有する。実施形態において、対象は免疫抑制治療または化学療法治療をがんの処置として現在受けている。

実施形態において、疾患または状態を処置するために患者が受けた処置は、強度軽減移植前処置、骨髄破壊的移植前処置、骨髄非破壊的移植前処置、化学療法および免疫抑制薬物からなる群から選択される。

実施形態において、患者は年齢に起因して、例えば、若齢または高齢のために免疫低下している。実施形態において、患者は、１歳未満の年齢、９ヶ月未満の年齢、６ヶ月未満の年齢、３ヶ月未満の年齢、または１ヶ月未満の年齢である。実施形態において、患者は、６５歳超の年齢、７０歳超の年齢、７５歳超の年齢、または８０歳超の年齢である。

実施形態において、患者は免疫不全状態を有する。例を挙げれば、実施形態において、対象は、原発性免疫不全、例えば、原発性免疫不全疾患（ＰＩＤＤ）を有する。実施形態において、患者は後天性免疫不全状態を有する。実施形態において、対象はヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染を有し、かつ／または対象は後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を有する。

実施形態において、ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を第三者同種Ｔ細胞療法の予防的投与により防止するための、または抑制するための本明細書中に提供される方法は、第１のポリクローナルな第三者の抗原特異的Ｔ細胞株を予防的に投与することを含み、この場合、前記Ｔ細胞株が患者に複数回（例えば、２回、３回、４回、５回、６回またはそれ以上）投与される。例を挙げれば、実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が第１の投与の４～１２週間後での第２の投与において患者に投与される。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が第１の投与の約４～１２週間後での第２の投与において患者に投与される。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が患者に４～１２週間毎に、例えば、４週間毎に、５週間毎に、６週間毎に、７週間毎に、８週間毎に、９週間毎に、１０週間毎に、１１週間毎に、または１２週間毎に投与される。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が患者に約４～１２週間毎に、例えば、約４週間毎に、約５週間毎に、約６週間毎に、約７週間毎に、約８週間毎に、約９週間毎に、約１０週間毎に、約１１週間毎に、または約１２週間毎に投与される。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株の投与間の時間が変動する。例を挙げれば、実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株の第１の投与の後、患者はＴ細胞株の持続性についてモニターされ、かつ／あるいはウイルス血症および／またはウイルス尿症についてモニターされ、第１の抗原特異的Ｔ細胞株がそれに応じて後続の投与において投与される。実施形態において、対象がウイルス感染もしくは潜在ウイルスの再活性化の危険性がある間、および／またはウイルス感染もしくは潜在ウイルスの再活性化の高い危険性がある間にわたって、ならびに／あるいは患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が対象に繰り返し投与される。

実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株の多数回の投与の代替として、または第１の抗原特異的Ｔ細胞株の多数回の投与に加えて、患者には、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が特異的である抗原に対応するペプチドまたは無欠抗原を含む組成物が投与される。実施形態において、組成物は第１の抗原特異的Ｔ細胞株の後で投与される。実施形態において、ペプチドまたは無欠抗原を含む組成物は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株を投与した４週間後～１２週間後に対象に投与される。実施形態において、ペプチドまたは無欠抗原を含む組成物は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株を投与した約４週間後～約１２週間後に対象に投与される。実施形態において、組成物は第１の抗原特異的Ｔ細胞株の後に多数回投与される。例を挙げれば、実施形態において、ペプチドまたは無欠抗原を含む組成物は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が投与された後で４週間毎に、５週間毎に、６週間毎に、７週間毎に、８週間毎に、９週間毎に、１０週間毎に、１１週間毎に、または１２週間毎に対象に投与される。実施形態において、ペプチドまたは無欠抗原を含む組成物は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が投与された後で約４週間毎に、約５週間毎に、約６週間毎に、約７週間毎に、約８週間毎に、約９週間毎に、約１０週間毎に、約１１週間毎に、または約１２週間毎に対象に投与される。実施形態において、ペプチドまたは無欠抗原を含む組成物は、２回、３回、４回、５回、６回またはそれ以上の回数で投与される。実施形態において、ペプチドまたは無欠抗原を含む組成物は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が対象に投与された後で投与され、かつ、対象がウイルス感染もしくは潜在ウイルスの再活性化の危険性がある間、および／またはウイルス感染もしくは潜在ウイルスの再活性化の高い危険性がある間にわたって、ならびに／あるいは患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで繰り返し投与される。実施形態において、ペプチドまたは無欠抗原を含む組成物はさらにアジュバントを含む。

実施形態において、本明細書中に提供される方法はさらに、１つまたは複数の第２の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与すること、あるいは２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、または１０のさら多くの第２の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含む。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株および第２の抗原特異的Ｔ細胞株は患者に同時に、または連続して投与される。実施形態において、１つまたは複数の第２の抗原特異的Ｔ細胞株は患者に複数回投与される。例を挙げれば、実施形態において、１つまたは複数の第２の抗原特異的Ｔ細胞株は患者に４～１２週間毎に、例えば、４週間毎に、５週間毎に、６週間毎に、７週間毎に、８週間毎に、９週間毎に、１０週間毎に、１１週間毎に、または１２週間毎に投与される。実施形態において、１つまたは複数の第２の抗原特異的Ｔ細胞株は患者に約４～１２週間毎に、例えば、約４週間毎に、約５週間毎に、約６週間毎に、約７週間毎に、約８週間毎に、約９週間毎に、約１０週間毎に、約１１週間毎に、または約１２週間毎に投与される。実施形態において、１つまたは複数の第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで投与される。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株と同じ抗原特異性を含み、しかし異なるドナーから作製される。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株と同じ抗原特異性のいくらかを含む。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株とは異なる抗原特異性を含む。実施形態において、患者と、第１の抗原特異的Ｔ細胞株および／またはどのようなものであれ第２の抗原特異的Ｔ細胞株との間で適合する２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子は、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩ対立遺伝子、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子、または少なくとも１つのＨＬＡクラスＩ対立遺伝子および少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子を含む。実施形態において、ＨＬＡ型は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－ＤＲ、および／またはＨＬＡ－ＤＱである。

実施形態において、第三者ＶＳＴは遺伝子改変されていない。実施形態において、第三者ＶＳＴは、宿主免疫細胞による認識および拒絶を低下させるようには改変されていない。例を挙げれば、実施形態において、第三者ＶＳＴは、ＨＬＡ分子および／またはＴＣＲ分子をＶＳＴ細胞表面から除くようには改変されていない。

実施形態において、本開示は、ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を第三者同種Ｔ細胞療法の予防的投与により防止するための、または抑制するための方法であって、第１のポリクローナルな第三者の抗原特異的Ｔ細胞株を予防的に投与することを含み、ウイルス感染が、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８およびウエストナイルウイルス、ジカウイルス、エボラから選択されるウイルスに由来する、方法を提供する。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株および／または第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、１つだけのウイルスに由来する少なくとも１つの抗原またはその一部分に対しての抗原特異性を含む。実施形態において、前記１つだけのウイルスは、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８およびウエストナイルウイルス、ジカウイルス、エボラから選択される。特定の実施形態において、前記１つだけのウイルスはＨＢＶまたはＨＨＶ８である。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株は、前記１つだけのウイルスに由来する２つ以上の抗原またはその一部分に対しての特異性を含む。

実施形態において、本開示は、ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を第三者同種Ｔ細胞療法の予防的投与により防止するための、または抑制するための方法であって、第１のポリクローナルな第三者の抗原特異的Ｔ細胞株を予防的に投与することを含み、前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が、１～１０の異なるウイルスに由来する少なくとも１つの抗原またはその一部分に対しての抗原特異性を含む、方法を提供する。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株は、少なくとも２つの異なるウイルスのそれぞれに由来する２～５つの抗原、または少なくとも２つの異なるウイルスのそれぞれに由来する２～５つの抗原の少なくとも一部分に対しての抗原特異性を含む。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、１～１０の異なるウイルスに由来する少なくとも１つの抗原またはその一部分に対しての抗原特異性を含む。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、少なくとも２つの異なるウイルスのそれぞれに由来する２～５つの抗原、または少なくとも２つの異なるウイルスのそれぞれに由来する２～５つの抗原の少なくとも一部分に対しての抗原特異性を含む。

実施形態において、抗原は、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス（ＨＭＰＶ）、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８、ウエストナイルウイルス、ジカウイルスおよびエボラから選択されるウイルスに由来するウイルス抗原である。実施形態において、第１および／または第２の抗原特異的Ｔ細胞は、下記ウイルスのそれぞれに由来する少なくとも１つの抗原に対しての特異性を含む：ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザおよびＨＭＰＶ。実施形態において、インフルエンザ抗原が、Ａ型インフルエンザ抗原のＮＰ１、ＭＰ１、およびそれらの組み合わせから選択され、ＲＳＶ抗原が、Ｎ、Ｆ、およびそれらの組み合わせから選択され、ｈＭＰＶ抗原が、Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１、Ｍ、およびそれらの組み合わせから選択され、ＰＩＶ抗原が、Ｍ、ＨＮ、Ｎ、Ｆ、およびそれらの組み合わせから選択される。

実施形態において、第１および／または第２の抗原特異的Ｔ細胞は、下記ウイルスのそれぞれに由来する少なくとも１つの抗原に対しての特異性を含む：ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＨＨＶ６。実施形態において、ＥＢＶ抗原が、ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１、ＢＺＬＦ１、およびそれらの組み合わせから選択され、ＣＭＶ抗原が、ＩＥ１、ｐｐ６５、およびそれらの組み合わせから選択され、アデノウイルス抗原が、ヘキソン、ペントン、およびそれらの組み合わせから選択され、ＢＫウイルス抗原が、ＶＰ１、ラージＴ、およびそれらの組み合わせから選択され、ＨＨＶ６抗原が、Ｕ９０、Ｕ１１、Ｕ１４、およびそれらの組み合わせから選択される。

実施形態において、第１および／または第２の抗原特異的Ｔ細胞は、ＨＢＶ由来の少なくとも１つの抗原に対しての特異性を含む。実施形態において、ＨＨＶ８由来の抗原は、ＬＡＮＡ－１（ＯＲＦ３）、ＬＡＮＡ－２（ｖＩＲＦ３、Ｋ１０．５）、ｖＣＹＣ（ＯＲＦ７２）、ＲＴＡ（ＯＲＦ５０）、ｖＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１）、カポシン（Ｋａｐｏｓｉｎ）（ＯＲＦ１２、Ｋ１２）、ｇＢ（ＯＲＦ８）、ＭＩＲ１（Ｋ３）、ＳＳＢ（ＯＲＦ６）、ＴＳ（ＯＲＦ７０）、およびそれらの組み合わせから選択される。

実施形態において、第１および／または第２の抗原特異的Ｔ細胞は、ＨＨＶ８由来の少なくとも１つの抗原に対しての特異性を含む。実施形態において、ＨＢＶ由来の抗原は、ＨＢＶコア抗原、ＨＢＶ表面抗原、およびＨＢＶコア抗原とＨＢＶ表面抗原との組み合わせから選択される。

実施形態において、本明細書中に提供される方法における使用のための本明細書中に提供される抗原特異的Ｔ細胞は、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を有する好適なドナーからの単核細胞を抗原またはその一部分の存在下で培養することによって産生させられる。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を有する好適なドナーからの単核細胞を、抗原に広がるペプミックス（ｐｅｐｍｉｘ）またはその一部分の存在下で培養することによって産生させられる。実施形態において、培養することがＩＬ４およびＩＬ７の存在下である。実施形態において、ペプミックスは１５ｍｅｒのペプチドを含む。実施形態において、抗原に広がるペプミックスにおけるペプチドは配列において１１アミノ酸によって重複する。実施形態において、本明細書中に提供される方法における使用のための本明細書中に提供される抗原特異的Ｔ細胞は、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を有する好適なドナーからの末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を抗原またはその一部分の存在下で培養することによって産生させられる。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を有する好適なドナーからのＰＢＭＣを、抗原に広がるペプミックスまたはその一部分の存在下で培養することによって産生させられる。実施形態において、培養することがＩＬ４およびＩＬ７の存在下である。実施形態において、ペプミックスは１５ｍｅｒのペプチドを含む。実施形態において、抗原に広がるペプミックスにおけるペプチドは配列において１１アミノ酸によって重複する。実施形態において、本開示は、ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を第三者同種Ｔ細胞療法の予防的投与により防止するための、または抑制するための方法であって、第１のポリクローナルな第三者の抗原特異的Ｔ細胞株と、場合によっては１つまたは複数の第２のポリクローナルな第三者の抗原特異的Ｔ細胞株とを予防的に投与することを含み、第１の抗原特異的Ｔ細胞株ならびに／あるいは１つまたは複数のそれぞれの第２の抗原特異的Ｔ細胞株が生体内に少なくとも約４週間にわたって、少なくとも約６週間にわたって、少なくとも約８週間にわたって、少なくとも約１０週間にわたって、または少なくとも約１２週間にわたって持続する、方法を提供する。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株ならびに／あるいは１つまたは複数のそれぞれの第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、活動性感染がどのようなものであれ患者にない場合、生体内に少なくとも約４週間にわたって、少なくとも約６週間にわたって、少なくとも約８週間にわたって、少なくとも約１０週間にわたって、または少なくとも約１２週間にわたって持続する。例を挙げれば、いくつかの実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株ならびに／あるいは１つまたは複数のそれぞれの第２の抗原特異的Ｔ細胞株は生体内に４週間にわたって、６週間にわたって、８週間にわたって、１０週間にわたって、１２週間にわたって、または１２週間を超えて持続する。実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株ならびに／あるいは１つまたは複数のそれぞれの第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、活動性感染がどのようなものであれ患者にない場合、生体内に４週間にわたって、６週間にわたって、８週間にわたって、１０週間にわたって、１２週間にわたって、または１２週間を超えて持続する。

以下の図面は本明細書の一部を形成しており、本発明のある特定の局面をさらに明らかにするために含まれる。本発明は、本明細書中に示される明細書の実施形態の詳細な説明との組み合わせでこれらの図面の１つまたは複数を参照することによってよりよく理解され得る。

抗原特異的Ｔ細胞株の一般的な製造概念を示す概略図である。

抗原特異的Ｔ細胞株の製造のフローチャートである。

作製されたＣＭＶＳＴ株の特徴、およびスクリーニングされた対象と適合する程度。トリパンブルー排除を使用する細胞計数（ｎ＝８）に基づく、２０日の期間にわたって達成されるＣＭＶＳＴの細胞拡大。作製されたＣＭＶＳＴ株の特徴、およびスクリーニングされた対象と適合する程度。拡大されたＣＭＶＳＴ株の凍結保存当日での表現型（平均±ＳＥＭ、ｎ＝８）。作製されたＣＭＶＳＴ株の特徴、およびスクリーニングされた対象と適合する程度。抗原特異的Ｔ細胞の頻度、これらを、ＩＥ１抗原に広がるペプミックスと、ｐｐ６５抗原に広がるペプミックスとによるＣＭＶＳＴを一晩刺激した後でＩＦＮ－ｙＥＬＩＳｐｏｔアッセイによって求めた。結果が、置床された２×１０^５個のＶＳＴあたりのスポット形成細胞（ＳＦＣ）として報告される。全体で２：３０のＳＦＣ／２×１０^５を有するＣＭＶＳＴ株を陽性と見なした（ｎ＝８）。作製されたＣＭＶＳＴ株の特徴、およびスクリーニングされた対象と適合する程度。スクリーニングされた患者（ｎ＝２９）のレシピエントＨＬＡに関して臨床使用のために特定されるＣＭＶＳＴ株の（合計で８つのうちの）適合するＨＬＡ抗原の数。

サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）に感染する個々の患者における処置成績。患者における血漿中ＣＭＶウイルス量（ＩＵ／ｍＬ）であって、ＣＭＶＳＴの注入の２週間前における血漿中ウイルス量（－２週目に最も近いウイルス量レベル）、注入直前（ｐｒｅ）での血漿中ウイルス量、および注入後（ｐｏｓｔ）（２週目、４週目および６週目）での血漿中ウイルス量が示される。矢印が注入時点を示している。

ＣＭＶ特異的Ｔ細胞のインビボ頻度。ＩＥ１ウイルスペプミックスと、ｐｐ６５ウイルスペプミックスとによる一晩の刺激の後でのＩＦＮ－ｙＥＬＩＳｐｏｔアッセイによって測定されるような、注入前（ｐｒｅ）および注入後（ｐｏｓｔ）での末梢血におけるＣＭＶＳＴの頻度。結果が、５×１０^５個の投入細胞あたりのスポット形成細胞（ＳＦＣ）として表される（平均±ＳＥＭ、ｎ＝１０）。ＣＭＶ特異的Ｔ細胞のインビボ頻度。個々の患者における注入されたＣＭＶＳＴの持続性。ＣＭＶＳＴ株にもっぱら限定されるＨＬＡ抗原、またはレシピエントとＣＭＶＳＴ株との間で共有されるＨＬＡ抗原に拘束されることによるエピトープ特異的なＣＭＶペプチドによる刺激の後でのＩＦＮ－ｙＥＬＩＳｐｏｔアッセイによって測定されるような末梢血におけるＴ細胞の頻度。

ＶＳＴ注入の２週間後および４週間後における、ＨＬＡ－Ａ２（ＣＭＶ特異的）、ＤＲ１３（第三者ＶＳＴのみ）およびＤＲ３（患者のみ）の関連で提示されるペプチドに対抗する免疫応答の相対的存在を示す。

患者のＢＫＶ感染を処置するためにＶＳＴを注入した後における、ＢＫ特異的Ｔ細胞拡大（棒）に対応するＢＫＶ尿中ウイルス量における減少（点線）を示す。

ＶＳＴ注入後２週間でのＣＭＶの再活性化（点線；尿中ウイルス量）、ＣＭＶ特異的な第三者ＶＳＴの拡大（棒）、および１２週目までのその後のウイルス量の消散を示す。

他のウイルスについて処置される患者において持続する第三者ＶＳＴの検出を示す。ＢＫについて処置される患者では、ＥＢＶおよび／またはＨＨＶ６に特異的な細胞がＶＳＴ注入後の少なくとも３週間にわたって検出可能であったことが示される。他のウイルスについて処置される患者において持続する第三者ＶＳＴの検出を示す。ＢＫについて処置される第２の患者では、ＣＭＶ特異的なＴ細胞がＶＳＴ注入後の１週目の後で拡大し、少なくとも４週間にわたって持続したことが示される。他のウイルスについて処置される患者において持続する第三者ＶＳＴの検出を示す。ＡｄＶについて処置される患者では、ＣＭＶ特異的なＴ細胞がＶＳＴ注入後の少なくとも３週間にわたって検出可能であったことが示される。他のウイルスについて処置される患者において持続する第三者ＶＳＴの検出を示す。ＡｄＶについて処置される別の患者では、ＣＭＶ特異的なＴ細胞がＶＳＴ注入後の２週目の後で拡大し、少なくとも４週間にわたって検出可能であったことが示される。他のウイルスについて処置される患者において持続する第三者ＶＳＴの検出を示す。ＢＫについて処置される患者では、ＣＭＶ特異的なＴ細胞がＶＳＴ注入後の少なくとも６週間にわたって拡大し、検出可能であったことが示される。

免疫低下個体においてＶＳＴＴ細胞によって媒介される予防的保護の概略図である。

本発明の詳細が下記の付随する説明において示される。本明細書中に記載される方法および材料と類似する、または同等である方法および材料は本発明の実施または試験において使用することができるにもかかわらず、例示的な方法および材料が次に記載される。本発明の他の特徴、目的および利点が説明から、また特許請求項から明らかになるであろう。本明細書および添付された請求項において、単数形態は、文脈がそうでないことを明確に示す場合を除き、複数形態もまた包含する。別途定義される場合を除き、本明細書中で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書において引用されるすべての特許および刊行物はその全体が参照によって本明細書中に組み込まれる。

ＨＳＣＴは、急性白血病を含めて、生命を脅かす様々な造血性悪性腫瘍、同様にまた、再生不良性貧血、骨髄異形成症候群および免疫不全症候群を含めて様々な非悪性疾患のための潜在的に治癒的な治療法である。しかしながら、ＨＳＣＴに伴う準備的措置は、免疫系の細胞性成分、同様にまた体液性成分における著しい欠乏を生じさせ、そのため、患者をウイルス感染にかかりやすくさせている。感染に対しての危険性および感染症候群の症状範囲が移植のタイプによって異なる（同種移植については危険性が高くなる）；同種ドナーのタイプによって異なる（非血縁ドナーまたは不適合ドナーによる場合には危険性が高くなる）；前処理措置のタイプによって異なる（集中的な骨髄破壊的措置による場合には危険性が高くなる）；幹細胞移植片のタイプによって異なる（臍帯血による場合には危険性が高くなる）；移植片操作のタイプによって異なる（Ｔ細胞枯渇化による場合には危険性が高くなる）；また、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）のような免疫抑制薬物の使用によって異なる。それにもかかわらず、ウイルス性合併症が依然として、同種ＨＳＣＴ（同種間ＨＳＣＴ）レシピエントにおける病的状態および非再発死亡率の主な原因の１つである。

ＨＳＣＴレシピエントにおける抗ウイルス性予防は貧弱であり、毒性があり、また、根底にある欠陥、すなわち、内因性免疫の欠如に対処することができず、したがって、もたらされた利益はどれも一時的である傾向があり、そのため、患者は、再発に対しての危険性があるままである。Ｃｕｔｌｅｒ他（２００５）。したがって、安全かつ有効である新規な予防的戦略が、満たされることなく求められている。幹細胞ドナー由来ＶＳＴの養子移入が、同種間ＨＳＣＴレシピエントにおける感染に対する予防的治療を提供するための試みにおいて使用されている。しかしながら、第三者同種ＶＳＴ（すなわち、幹細胞ドナーではない第三者ドナーに由来するＶＳＴ）に関して、第三者細胞はレシピエントにおいて迅速に拒絶され、持続できないことが予想されるので、予防的方法ではなく、活性ウイルス感染を処置するための方法のみが実行可能であることがこの技術分野では十分に理解されている。

本発明者らは、第三者同種ＶＳＴが、当該ＶＳＴが特異性を有する活性ウイルス感染の非存在下でのレシピエントにおいて存続し、拡大する能力を保持するという驚くべき発見をした。実際、第三者同種ＶＳＴは数週間にわたって持続することができ、そして、その後、当該ＶＳＴが特異的であるウイルスに感染すると、または当該ＶＳＴが特異的であるウイルスが再活性化されると直ちに拡大することができる。したがって、本開示は、ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を第三者同種Ｔ細胞療法の予防的投与により防止するための、または抑制するための予想外かつ非常に効率的な方法を提供する。特に、本明細書中に提供される方法および組成物は、ハイリスクの患者における危険なウイルス感染に対する直ちに利用可能な、安全で、かつ効果的な保護を提供する。そのような患者集団には、同種間ＨＳＣＴのレシピエント、同様にまた、免疫低下しており、他の理由のために危険なウイルス感染の危険性が高い患者が含まれる。

（一般的方法）
本開示の実施では、別途示されている場合を除き、細胞培養、分子生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学および免疫学の、当該技術分野の技能の範囲内にある従来の技術が用いられるであろう。そのような技術が下記などの文献において十分に説明される：ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ、第３版（Ｓａｍｂｒｏｏｋ他、２００１）、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ；ＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｐ．Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎ編、２００４）；ＡｎｉｍａｌＣｅｌｌＣｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ）編、１９８７）；ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．Ｗｅｉｒ＆Ｃ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編）；ＧｅｎｅＴｒａｎｓｆｅｒＶｅｃｔｏｒｓｆｏｒＭａｍｍａｌｉａｎＣｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．Ｍｉｌｌｅｒ＆Ｍ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７）；ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ他編、１９８７）；ＰＣＲ：ＴｈｅＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ（Ｍｕｌｌｉｓ他編、１９９４）；ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ他編、１９９１）；ＳｈｏｒｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ（ＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ、１９９９）；ＭａｎｕａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｂ．Ｄｅｔｒｉｃｋ、Ｎ．Ｒ．ＲｏｓｅおよびＪ．Ｄ．Ｆｏｌｄｓ編、２００６）；ＩｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌＰｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ｊ．Ｐｏｕｎｄ，編、２００３）；ＬａｂＭａｎｕａｌｉｎＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ａ．ＮｉｇａｍおよびＡ．Ａｙｙａｇａｒｉ編、２００７）；ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙＭｅｔｈｏｄｓＭａｎｕａｌ：ＴｈｅＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅＳｏｕｒｃｅｂｏｏｋｏｆＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ（ＩｖａｎＬｅｆｋｏｖｉｔｓ編、１９９６）；ＵｓｉｎｇＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗおよびＤ．Ｌａｎｅ編、１９８８）；および他の文献。

（定義）
別途定義される場合を除き、本明細書中で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書中に記載される方法および材料と類似する、または同等である方法および材料はどれも、本発明の実施または試験において使用することができるにもかかわらず、好ましい方法および材料が記載される。本発明の目的のために、以下の用語が下記において定義される。

本明細書中で使用される場合、’’ａ’’または’’ａｎ’’の単語の使用は、特許請求項および／または明細書において用語’’ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ’’（含む）と併せて使用されるときには、’’ｏｎｅ’’（１つ）を意味する場合があり、しかし、その使用はまた、’’ｏｎｅｏｒｍｏｒｅ’’（１つまたは複数）、’’ａｔｌｅａｓｔｏｎｅ’’（少なくとも１つ）、および’’ｏｎｅｏｒｍｏｒｅｔｈａｎｏｎｅ’’（１つまたは１つを超える）の意味とも一致している。例として、’’ａｎｅｌｅｍｅｎｔ’’（要素）は、ｏｎｅｅｌｅｍｅｎｔ（１つの要素）、または、ｍｏｒｅｔｈａｎｏｎｅｅｌｅｍｅｎｔ（１つを超える要素）を意味する。本発明のいくつかの実施形態は、本発明の１つまたは複数の要素、方法工程および／または方法からなる場合があり、あるいは、本発明の１つまたは複数の要素、方法工程および／または方法から本質的になる場合がある。本明細書中に記載される方法または組成物はどれも、本明細書中に記載されるどのような他の方法または組成物に関してでも実施され得ることが意図される。

用語「約」は、数値の直前にあるときには、当該数値の±０％～１０％、すなわち、±０％～１０％、±０％～９％、±０％～８％、±０％～７％、±０％～６％、±０％～５％、±０％～４％、±０％～３％、±０％～２％、±０％～１％、±０％～１％未満、またはどのような値もしくは範囲であれその中の他の値もしくは他の範囲の値を意味する。例を挙げれば、「約４０」は、４０の±０％～１０％（すなわち、３６から４４まで）を意味する。

用語’’ａｎｄ／ｏｒ’’（および／または）は、別途示される場合を除き、’’ａｎｄ’’（および）または’’ｏｒ’’（または）のどちらも意味するように本開示では使用される。

本明細書全体を通して、文脈上他のものが要求される場合を除き、単語’’ｃｏｍｐｒｉｓｅ’’（含む）、単語’’ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ’’（含む）および単語’’ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ’’（含む）は、明記された工程または要素または一群の工程もしくは要素を含み、しかし、他の工程または要素または一群の工程もしくは要素をどのようなものであれ除外しないことを意味するように理解されるであろう。’’ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆ’’（からなる）によって、句’’ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆ’’に続くどのようなものも含み、かつそれに限定されることが意味される。したがって、句’’ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆ’’（からなる）は、列挙された要素が要求される、または必須であること、そして他の要素は存在しなくてもよいことを示している。’’ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙｏｆ’’（から本質的になる）によって、この句の後に列挙される要素をどれも含むこと、そして、列挙された要素について開示において指定される活性もしくは作用を妨げない、または列挙された要素について開示において指定される活性もしくは作用に寄与しない他の要素に限定されることが意味される。したがって、句’’ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙｏｆ’’（から本質的になる）は、列挙された要素が要求される、または必須であること、しかし、他の要素は随意的であり、列挙された要素の活性または作用に実質的に影響するか否かに依存して存在する場合がある、または存在しない場合があることを示している。

用語「障害」は、別途示されている場合を除き、疾患、状態または疾病の各用語を意味するように本開示では使用され、これらの用語と交換可能に使用される。

「効果的な量」は、治療剤（例えば、本明細書中に開示される抗原特異的Ｔ細胞製造物または抗原特異的Ｔ細胞株）に関連して使用されるときには、疾患または障害を本明細書中に記載されるように対象において処置するために、または防止するために効果的である量である。

用語’’ｅ．ｇ．’’（例えば）は、’’ｆｏｒｅｘａｍｐｌｅ’’（例を挙げれば）を意味するように本明細書中では使用され、明記された工程または要素または一群の工程もしくは要素を含み、しかし、他の工程または要素または一群の工程もしくは要素をどのようなものであれ除外しないことを意味するように理解されるであろう。

’’ｏｐｔｉｏｎａｌ’’（随意的な）または’’ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ’’（場合によっては、随意的に）によって、続いて記載された事象または状況が生じてもよい、または生じなくてもよいこと、そして、記載が、事象または状況が生じる事例、および事象または状況が生じない事例を包含することが意味される。

用語「ウイルス抗原」は、本明細書中で使用される場合、自然界のタンパク質であり、かつ、ウイルス粒子と密接に関連する抗原を示す。具体的な実施形態において、ウイルス抗原はコートタンパク質である。

ウイルス抗原の具体的な例には、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、アデノウイルス（ＡｄＶ）、ＢＫウイルス（ＢＫＶ）、ＪＣウイルス（ＪＣＶ）、ヒトヘルペスウイルス６型（ＨＨＶ６）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス（ＨＭＰＶ）、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型（ＨＴＬＶ１）、ヒトヘルペスウイルス８型（ＨＨＶ８）、ウエストナイルウイルス、ジカウイルスおよびエボラウイルスから選択されるウイルスに由来する抗原が少なくとも含まれる。

用語「ウイルス特異的Ｔ細胞」または用語「ＶＳＴ」または用語「ウイルス特異的Ｔ細胞株」または用語「ＶＳＴ細胞株」は、対象の体外で拡大された、および／または製造された、かつ、目的とする１つまたは複数のウイルスに対抗する特異性および効力を有するＴ細胞株（例えば、本明細書中に記載されるようなＴ細胞株）を示すために本明細書中では交換可能に使用される。本明細書中に提供されるＶＳＴは第三者ＶＳＴである。ＶＳＴは実施形態において、モノクローナルまたはオリゴクローナルである場合がある。特定の実施形態において、ＶＳＴはポリクローナルである。本明細書中に記載されるように、実施形態において、ウイルス抗原またはいくつかのウイルス抗原が、末梢血単核細胞における生来Ｔ細胞またはメモリーＴ細胞に提示され、ウイルス抗原（１つまたは複数）に対しての特異性を有するＣＤ４＋および／またはＣＤ８＋の生来Ｔ細胞集団が応答して拡大する。例を挙げれば、好適なドナーから得られるＰＢＭＣのサンプルにおけるＥＢＶ用のウイルス特異的Ｔ細胞は、ＥＢＶ抗原（例えば、場合によってはＭＨＣによって提示されるＥＢＶ抗原由来のペプチドエピトープ）を認識する（このＥＢＶ抗原に結合する）ことができ、このことが引き金となって、ＥＢＶに対して特異的なＴ細胞の拡大を生じさせることができる。別の一例において、好適なドナーから得られるＰＢＭＣのサンプルにおけるＢＫウイルス用のウイルス特異的Ｔ細胞、ＰＢＭＣの前記サンプルにおけるアデノウイルス用のウイルス特異的Ｔ細胞は、ＢＫウイルス抗原およびアデノウイルス抗原（例えば、場合によってはＭＨＣによって提示されるＢＫウイルス抗原およびアデノウイルス抗原にそれぞれ由来するペプチドエピトープ）をそれぞれ認識し、このＢＫウイルス抗原およびアデノウイルス抗原にそれぞれ結合することができ、このことが引き金となって、ＢＫウイルスに対して特異的なＴ細胞と、アデノウイルスに対して特異的なＴ細胞との拡大を生じさせることができる。

本明細書中で使用される場合、用語「細胞療法用製造物」は、対象の体外で拡大される、および／または製造される細胞株（例えば、本明細書中に記載されるような細胞株）を示す。例を挙げれば、用語「細胞療法用製造物」は、培養物で産生される細胞株を包含する。細胞株はエフェクター細胞を含む場合があり、またはエフェクター細胞から本質的になる場合がある。細胞株はＴ細胞を含む場合があり、またはＴ細胞から本質的になる場合がある。例を挙げれば、用語「細胞療法用製造物」は、培養物で産生される抗原特異的Ｔ細胞株を包含する。そのような抗原特異的Ｔ細胞株には、いくつかの実例において、メモリーＴ細胞の拡大された集団、およびナイーブＴ細胞を刺激することによって産生されるＴ細胞の拡大された集団が含まれる。特に、用語「細胞療法用製造物」には、実施形態において、ウイルス特異的Ｔ細胞株が含まれる。細胞株はモノクローナルまたはオリゴクローナルである場合がある。特定の実施形態において、細胞株はポリクローナルである。そのようなポリクローナル細胞株は実施形態において、多岐にわたる抗原特異性を有する複数の拡大された細胞集団（例えば、抗原特異的Ｔ細胞集団）を含む。例を挙げれば、用語「細胞療法用製造物」によって包含される細胞株の１つの限定されない例が、Ｔ細胞の複数の拡大されたクローン集団を含むウイルス特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団で、拡大されたクローン集団の少なくとも２つがそれぞれ、異なるウイルス抗原に対しての特異性を有する、ウイルス特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を含む。そのようなポリクローナルなウイルス特異的Ｔ細胞がこの技術分野では知られており、国際公開ＷＯ２０１１０２８５３１、同ＷＯ２０１３１１９９４７、同ＷＯ２０１７０４９２９１、および国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０２４７２６（それぞれがその全体において参照によって本明細書中に組み込まれる）を含む本発明者らによって出願される様々な特許出願において開示される。

用語「ドナーミニバンク」は、本明細書中で使用される場合、対象となる患者集団におけるある規定された割合の患者のための少なくとも１つの十分に適合した細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）がドナーミニバンクによって含有されるようにドナーの多種多様なプールから集団で得られる複数の細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含む細胞バンクを示す。例を挙げれば、ある特定の実施形態において、本明細書中に記載されるドナーミニバンクには、対象となる患者集団（例えば、同種造血幹細胞移植レシピエントまたは免疫低下対象など）の少なくとも９５％のための少なくとも１つの十分に適合した細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）が含まれる。用語「ドナーミニバンク」は、本明細書中で使用される場合、複数のドナーミニバンクを示す。様々な実施形態において、それぞれの候補患者のための２つ以上の十分に適合した細胞療法用製造物が利用できることを保証するために「ドナーバンク」に含めるためのいくつかの非冗長なミニバンクを作出することが有益である。細胞バンクは凍結保存される場合がある。様々な凍結保存方法がこの技術分野では知られており、これらには、例えば、細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を立ち入り制限区域において－７０℃で、例えば、気相液体窒素で貯蔵することが含まれる場合がある。細胞療法用製造物の個別アリコートが調製され、多数の検証された液体窒素デュアー瓶において容器（例えば、バイアル）に貯蔵される場合がある。容器（例えば、バイアル）は、検索を可能にする非重複の識別番号によりラベル表示される場合がある。

本明細書中で使用される場合、用語「患者」または用語「対象」は、ヒト、飼育動物および農場動物、ならびに動物園動物、競技動物およびペット動物、例えば、イヌ、ウマ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ラット、モルモット、または非ヒト霊長類（例えば、サル、チンパンジー、ヒヒまたはアカゲザルなど）などを含めてどのような哺乳動物をも示すために交換可能に使用される。１つの好ましい哺乳動物が、成人、小児および高齢者を含めてヒトである。

本明細書中で使用される場合、用語「可能性ドナー」は、本明細書中に開示される細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞）によって標的とされるであろう１つまたは複数の抗原について血清陽性を有する個体（例えば、健常個体）を示す。実施形態において、ドナープールに含めるために適格であるすべての可能性ドナーが標的抗原（１つまたは複数）について事前スクリーニングされ、かつ／または標的抗原（１つまたは複数）について血清陽性であると見なされる。

用語「対象となる患者集団」は、本明細書中に記載される細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞製造物）を必要としている複数の患者（または交換可能に「対象」）を記述するために本明細書中の実施形態において使用される。実施形態において、この用語は、世界中にわたる同種ＨＳＣＴ集団を包含する。実施形態において、この用語は、全米にわたる同種ＨＳＣＴ集団体を包含する。実施形態において、この用語は、ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．ｂｅｔｈｅｍａｔｃｈｃｌｉｎｉｃａｌ．ｏｒｇのワールドワイドウェブアドレスから利用可能である全米骨髄ドナープログラム（ＮａｔｉｏｎａｌＭａｒｒｏｗＤｏｎｏｒＰｒｏｇｒａｍ、ＮＭＤＰ）データベースに含まれるすべての患者を包含する。実施形態において、この用語は、ｅｂｍｔ．ｏｒｇ／ｅｂｍｔ－ｐａｔｉｅｎｔ－ｒｅｇｉｓｔｒｙのワールドワイドウェブアドレスから利用可能である欧州造血細胞移植学会（ＥｕｒｏｐｅａｎＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＢｌｏｏｄａｎｄＭａｒｒｏｗＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、ＥＢＭＴ）データベースに含まれるすべての患者を包含する。実施形態において、この用語は、小児年齢が１６歳以下である世界中にわたる同種ＨＳＣＴ集団を包含する。実施形態において、この用語は、小児年齢が１６歳以下である全米にわたる同種ＨＳＣＴ集団を包含する。実施形態において、この用語は、小児年齢が５歳以下である世界中にわたる同種ＨＳＣＴ集団を包含する。実施形態において、この用語は、小児年齢が５歳以下である全米にわたる同種ＨＳＣＴ集団を包含する。実施形態において、この用語は、個体年齢が６５歳以上である世界中にわたる同種ＨＳＣＴ集団を包含する。実施形態において、この用語は、個体年齢が６５歳以上である全米にわたる同種ＨＳＣＴ集団を包含する。

用語「防止する」または用語「防止すること」は、対象に関しては、疾患または障害が対象を苦しめないようにすること、あるいはそうでない場合には対象において生じるであろう疾患または障害の重症度を低下させることを示す。予防的処置は、防止することを包含する。実例を挙げれば、防止することは、対象が疾患により苦しむ前、またはウイルスに感染する前、または潜在ウイルス感染の再活性化を受ける前に、本明細書中に開示される複合物を対象に投与することを含むことができる。実施形態において、防止することは、予防的処置の投与により、対象が疾患により苦しまないようになること、対象がウイルスに感染しないようになること、または潜在ウイルスが再活性化しないようになることを意味する。予防的処置はまた、抑制することを包含する。例を挙げれば、ウイルス感染を抑制することは、予防的処置の投与がウイルス感染の前であり、その場合、予防的処置により、後で起こるウイルス感染が、重大な疾患、病的状態または死亡率がこれによって引き起こされる前に抑制されること、および／または解消されることを意味する。ウイルス感染を抑制することはまた、予防的処置の投与が潜在ウイルスの再活性化の前であり、予防的処置の投与により、再活性化ウイルスが、重大な疾患、病的状態または死亡率がこれによって引き起こされる前に抑制されることになること、および／または解消されることになることを意味する。したがって、ウイルス感染を「抑制する」ための本明細書中に提供される方法は、ウイルス感染が、本明細書中に提供される第三者ＶＳＴによる以前に投与された予防的処置によって防止される、または容易に排除されることを意味する。

用語「処置する」、用語「処置すること」、用語「処置」および同様な用語は、本明細書中で使用される場合、別途示されていない限り、そのような用語が適用される疾患、障害または状態、あるいはそのような疾患、障害または状態の１つまたは複数の症状を逆戻りさせること、緩和すること、またはそれらのプロセスを阻害することを示し、本明細書中に記載される組成物、医薬組成物または投薬形態物のいずれかを、症状または合併症の発症を防止するために、あるいは症状または合併症を緩和するために、あるいは疾患、状態または障害を排除するために投与することを含む。いくつかの実例において、処置は治癒的または寛解的である。

用語「第三者」に対する本明細書中での言及は、ドナーと同じでない対象（例えば、患者）を意味する。したがって、例を挙げれば、対象に「第三者の抗原特異的Ｔ細胞製造物」（例えば、第三者ＶＳＴ製造物）を投与することに対する言及は、当該製造物がドナー組織（例えば、ドナーの血液から単離されるＰＢＭＣ）に由来し、対象（例えば、患者）が、ドナーと同じ対象でないことを意味する。実施形態において、第三者の抗原特異的Ｔ細胞製造物は、当該製造物が将来を見越して作製されるもので、使用まで貯蔵（例えば、凍結保存）され得るという点で「既製の」製造物である。そのような製造物は、自己細胞製造物または個別化されたドナー細胞製造物（すなわち、細胞または組織または器官を対象に提供した同じドナー、あるいは他の場合には特定のレベルのＨＬＡ適合について選択されるドナーからの細胞から作製される細胞製造物）とは対照的に、それを必要とする対象における使用のために直ちに利用可能である。したがって、そのような製造物は、即時治療を必要としている患者に遅滞なく投与することができるので好都合である。様々な実施形態において、同種細胞療法（例えば、同種抗原特異的Ｔ細胞療法）は「第三者」細胞療法である。用語「ＶＳＴ」は、本明細書中で使用される場合、ウイルス特異的Ｔ細胞を意味する。

用語「投与すること」、用語「投与する」、用語「投与」および同様な用語は、本明細書中で使用される場合、治療剤を、そのような薬剤による処置を必要としている対象に移す、送達する、導入する、または輸送する様式をどのようなものであれ示す。そのような様式には、眼内投与、経口投与、局所投与、静脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、皮内投与、鼻腔内投与および皮下投与が含まれるが、これらに限定されない。

様々な実施形態において、用語「十分に適合した（する）」は、所与の患者および所与の細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）に関して本明細書中では、患者および細胞療法用製造物が少なくとも２つのＨＬＡ対立遺伝子を共有する（すなわち、少なくとも２つのＨＬＡ対立遺伝子で適合する）ときを記述するために使用される。

本発明の他の目的、特徴および利点が、下記の詳細な説明から明らかになるであろう。しかしながら、詳細な説明および具体的な例は、本発明の具体的な実施形態を示している一方で、本発明の精神および範囲に含まれる様々な変化および改変がこの詳細な説明から当業者には明らかになるであろうから、例示としてのみ与えられていることを理解しなければならない。

以下の議論は本発明の様々な実施形態に関する。用語「発明」は、どのような特定の実施形態であれ当該実施形態を示すことも、またはそうでない場合には本開示の範囲を限定することも意図されない。これらの実施形態のうちの１つまたは複数が好ましいけれども、開示される実施形態は、特許請求項を含めて本開示の範囲を限定するものとして解釈してはならず、また、そうでない場合には、特許請求項を含めて本開示の範囲を限定するものとして使用してはならない。加えて、当業者は、以下の説明が広範な適用を有しており、どのような実施形態であれその議論は、その実施形態の例示であることのみが意図されており、特許請求項を含めて本開示の範囲がその実施形態に限定されることを暗示することは意図されないことを理解するであろう。

（概要）
免疫系は、病原体を認識し、身体から排除するという目的のために進化したことが長い間理解されてきた。免疫系は、「自己」を「非自己」から区別することによってこれを達成している。免疫細胞が、免疫細胞によって非自己として認識される分子、タンパク質、細胞または組織に対してのみ反応する。非自己は、病原体、同様にまた免疫細胞と免疫学的に適合しない（上記で記載されるようにＨＬＡが適合しない）生体物質を含めてどのような異物をも包含する。したがって、免疫学的に適合しないドナーからの細胞または組織が、それらが免疫細胞によって非自己として認識される身体の体内に注入されるならば、そのような免疫細胞によって拒絶される（すなわち、攻撃される、破壊される、および／または除去される）ことになる。

したがって、免疫低下した幹細胞移植レシピエントと部分的にだけ適合する細胞療法用製造物（例えば、第三者ＶＳＴ）は、ドナーの細胞が生着し、レシピエントにおいて再増殖し始める時点までのみ循環することになり、そのような段階で、細胞療法用製造物（例えば、ＶＳＴ）が患者の再構成された免疫系によって拒絶されることになることが予想される。第三者ＶＳＴの予想された拒絶のために、第三者ＶＳＴは、新たな感染などの活性ウイルス感染、または既に再活性化された潜在ウイルス感染を処置するためにだけ使用されてきた。すなわち、感染または再活性化が患者において検出されるときに、既に拡大され、かつ、感染ウイルスまたは再活性化ウイルスに対して特異的である第三者ＶＳＴを、ウイルスに対抗する即時応答を得るために、すなわち、第三者ＶＳＴの拒絶が懸念されないシナリオを得るために注入することができる。第三者細胞がどのような他の宿主環境においてでも、保護目的をいかなるものであれ果たすことができる前における第三者細胞の予想された拒絶は、この技術分野では十分に認識されており、実際、他の同種の既製の細胞製造物（例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞または抗腫瘍Ｔ細胞移植片）は典型的には、宿主免疫細胞による認識および拒絶を低下させるように改変される（Ｌｉｕ他、ＣｅｌｌＲｅｓｅａｒｃｈ（２０１７）；Ｋａｇｏｙａ他、２０２０）。驚くべきことに、本発明者らは、本明細書中に提供される第三者ＶＳＴは予防的方法で患者に投与することができ、しかも、宿主免疫細胞による認識を低下させるための改変が何らない場合でさえ、数週間にわたって循環に留まり得ることを見出した。そのうえ、ＶＳＴは、投与後数週間でのウイルス感染時または潜在ウイルスの再活性化のときに拡大することができた。したがって、本開示は、ウイルス感染（再活性化された潜在ウイルスを含む）の効果的な防止または抑制と、即時利用可能性、標準化、および多数回の再投与のための利用可能性という利点との両方を提供する既製の第三者ＶＳＴ製品を提供する。

実施形態において、ＶＳＴは、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間、少なくとも９週間、少なくとも１０週間、少なくとも１１週間、少なくとも１２週間、少なくとも１３週間、少なくとも１４週間、少なくとも１５週間、少なくとも１６週間、少なくとも１７週間、または少なくとも１８週間（それらの間におけるすべての範囲および部分範囲を含む）にわたってレシピエントにおいて循環する。１つの実施形態において、ＶＳＴは、少なくとも１２週間にわたってレシピエントにおいて循環する。

本開示には、そのような好適な第三者血液ドナーから採取される血液サンプルに由来するそのような細胞療法用製造物を含むドナーミニバンク（および複数のそのようなドナーミニバンクを含むドナーバンク）、同様にまた、疾患または障害を防止するためのそのような細胞療法用製造物（これには、例を挙げれば、抗原特異的Ｔ細胞株製造物、例えば、ＶＳＴ製造物が含まれる）を作製する方法、投与する方法、および使用する方法が含まれる。したがって、様々な実施形態において、そのようなドナーミニバンクには、ウイルス感染、疾患および／または障害の防止および／または抑制をもたらすための予防的養子免疫療法として使用するための、本明細書中に開示される方法によってドナーから得られるサンプル（例えば、ＰＢＭＣなどの単核細胞）に由来する複数の細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）が含まれる。

様々な実施形態において、本明細書中に開示されるドナーミニバンクに含まれる細胞療法用製造物の１つまたは複数が、患者適合方法に基づく、そのような療法を必要としている十分に適合した対象に投与される。実施形態において、ドナーミニバンクに含まれる複数のそのような細胞療法用製造物が、患者適合方法に基づく十分に適合した対象に投与される。実施形態において、本明細書中に開示されるドナーミニバンクを構築する際に利用されるドナーは血清陽性について事前スクリーニングされ、かつ／またはドナーは健康である。本開示は、これらの抗原特異的Ｔ細胞株が将来を見越して作製され、その後、冷凍保存され、その結果、それらが、１つのウイルスまたは多数のウイルスに対する実証可能な予防的有用性を有する「既製の」製造物として直ちに利用可能であるようになることを規定する。

本開示は実施形態において、ポリクローナルＶＳＴが、製造プロセスにおける生ウイルスまたは組換えＤＮＡ技術の存在を必要とすることなく作製され得ることを規定する。実施形態において、Ｔ細胞集団が、同種反応性Ｔ細胞の喪失を結果として伴って拡大され、ウイルス特異性について富化される。実施形態において、細胞療法（例えば、ＶＳＴ）のドナーバンクおよびドナーミニバンクは、ウイルス感染細胞に対する抗ウイルス効果を媒介するために十分にＨＬＡ適合している。例を挙げれば、十分にＨＬＡ適合した（する）は、少なくとも２つの対立遺伝子が一致することを示している。実施形態において、前記２つ以上の対立遺伝子は、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩ対立遺伝子を含む。実施形態において、前記２つ以上の対立遺伝子は、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子を含む。実施形態において、前記２つ以上の対立遺伝子は、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩ対立遺伝子と、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子とを含む。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法は、ドナーミニバンクに含まれる各ドナーのそれぞれから得られる血液からＭＮＣを単離すること、またはドナーミニバンクに含まれる各ドナーのそれぞれから得られる血液から単離されるＭＮＣを有することを含む。ドナーバンクに含まれるそれぞれのドナーからの血液は採取することができる。実施形態において、ドナーバンクに含まれるそれぞれのドナーからの採取された血液における単核細胞（ＭＮＣ）が集められる。ＭＮＣおよびＰＢＭＣが、当業者によって知られている方法を使用することによって単離される。例として、密度遠心分離（勾配）（Ｆｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ）を、ＰＢＭＣを単離するために使用することができる。他の例において、新たに採血された血液とともに細胞調製チューブ（ＣＰＴ）およびＳｅｐＭａｔｅチューブを、ＰＢＭＣを単離するために使用することができる。例として、ＰＢＭＣは、リンパ球、単球および樹状細胞を含むことができる。例として、リンパ球には、Ｔ細胞、Ｂ細胞およびＮＫ細胞が含まれ得る。実施形態において、本明細書中で使用されるようなＭＮＣは培養され、または凍結保存される。実施形態において、細胞を培養する、または凍結保存するプロセスは、抗原特異的Ｔ細胞を刺激し、拡大するために、好適な培養条件のもとで１つまたは複数の抗原と細胞を培養において接触させることを含むことができる。実施形態において、前記１つまたは複数の抗原は１つまたは複数のウイルス抗原を含むことができる。

実施形態において、細胞を培養する、または凍結保存するプロセスは、好適な培養条件のもとで、１つまたは複数の抗原に由来する１つまたは複数のエピトープと細胞を培養において接触させることを含むことができる。実施形態において、ＭＮＣまたはＰＢＭＣを１つまたは複数の抗原と、あるいは１つまたは複数の抗原に由来する１つまたは複数のエピトープと接触させることにより、各ドナーのＭＮＣまたはＰＭＢＣのそれぞれに由来する抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団が刺激され、拡大される。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株は凍結保存することができる。

実施形態において、前記１つまたは複数の抗原は無欠タンパク質の形態であることが可能である。実施形態において、前記１つまたは複数の抗原は、それぞれの抗原の一部または配列全体に広がる一連の重複するペプチドを含むペプミックスが可能である。実施形態において、前記１つまたは複数の抗原は、無欠タンパク質と、それぞれの抗原の一部または配列全体に広がる一連の重複するペプチドを含むペプミックスとの組み合わせが可能である。

実施形態において、ＰＢＭＣまたはＭＮＣを培養することが、ガス透過性培養表面を含む入れ物において行われる。１つの実施形態において、前記入れ物は、ガス透過性部分を有する輸液バッグ、または剛性の入れ物である。１つの実施形態において、前記入れ物はＧＲｅｘバイオリアクターである。１つの実施形態において、前記入れ物は、ＰＢＭＣまたはＭＮＣを本明細書中に記載されるように培養するために好適である容器、バイオリアクターまたは同様なものがどれも可能である。

実施形態において、ＰＢＭＣまたはＭＮＣは１つまたは複数のサイトカインの存在下で培養される。実施形態において、サイトカインはＩＬ４である。実施形態において、サイトカインはＩＬ７である。実施形態において、サイトカインはＩＬ４およびＩＬ７である。実施形態において、サイトカインには、ＩＬ４およびＩＬ７が含まれ、しかしＩＬ２は含まれない。実施形態において、サイトカインは、ＰＢＭＣまたはＭＮＣを本明細書中に記載されるように培養するために好適であるサイトカインの組み合わせがどれも可能である。

実施形態において、ＭＮＣまたはＰＢＭＣを培養することが、少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、またはそれ以上の異なるペプミックスの存在下で可能である。ペプミックス、すなわち、複数のペプチドは、抗原の一部または配列全体に広がる一連の重複するペプチドを含む。実施形態において、ＭＮＣまたはＰＢＭＣは複数のペプミックスの存在下で培養することができる。この場合、それぞれのペプミックスが、複数のペプミックスにおけるそれ以外のペプミックスのそれぞれによってカバーされる抗原とは異なる少なくとも１つの抗原をカバーする。実施形態において、少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、またはそれ以上の異なる抗原が、前記複数のペプミックスによってカバーされる。実施形態において、少なくとも２つの異なるウイルスに由来する少なくとも１つの抗原が、前記複数のペプミックスによってカバーされる。図１および図２は、抗原特異的Ｔ細胞株を構築する一般的なＧＭＰ製造プロトコルの一例を示す。

実施形態において、ペプミックスは１５ｍｅｒのペプチドを含む。実施形態において、ペプミックスは、本明細書中に記載されるような方法のために好適であるペプチドを含む。実施形態において、抗原に広がるペプミックスにおけるペプチドは、８アミノ酸、９アミノ酸、１０アミノ酸、１１アミノ酸、１２アミノ酸、１３アミノ酸、１４アミノ酸、１５アミノ酸によって配列において重複する。実施形態において、抗原に広がるペプミックスにおけるペプチドは配列において１１アミノ酸によって重複する。

実施形態において、１つまたは複数のペプミックスにおけるウイルス抗原は、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＢＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８、ウエストナイルウイルス、ジカウイルスおよびエボラウイルスから選択されるウイルスに由来するものである。実施形態において、少なくとも１つのペプミックスが、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザおよびヒトメタニューモウイルス（ＨＭＰＶ）に由来する抗原をカバーする。実施形態において、少なくとも１つのペプミックスが、ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＢＫＶおよびＨＨＶ６に由来する抗原をカバーする。実施形態において、少なくとも１つのペプミックスが、ＨＨＶ８またはＨＢＶに由来する抗原をカバーする。実施形態において、ウイルスは、好適なウイルスがどれも可能である。

実施形態において、インフルエンザ抗原は、Ａ型インフルエンザ抗原ＮＰ１が可能である。実施形態において、インフルエンザ抗原は、Ａ型インフルエンザ抗原ＭＰ１が可能である。実施形態において、インフルエンザ抗原は、ＮＰ１と、ＭＰ１との組み合わせが可能である。実施形態において、ＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＮが可能である。実施形態において、ＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＦが可能である。実施形態において、ＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＮと、ＲＳＶＦとの組み合わせが可能である。実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｆが可能である。実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｎが可能である。実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｍ２－１が可能である。実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｍが可能である。実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｆと、Ｎと、Ｍ２－１と、Ｍとの組み合わせが可能である。実施形態において、ＰＩＶ抗原は、Ｍが可能である。実施形態において、ＰＩＶ抗原は、ＨＮが可能である。実施形態において、ＰＩＶ抗原は、Ｎが可能である。実施形態において、ＰＩＶ抗原は、Ｆが可能である。実施形態において、ＰＩＶ抗原は、Ｍと、ＨＮと、Ｎと、Ｆとの組み合わせが可能である。

実施形態において、ＰＢＭＣまたはＭＮＣは、Ａ型インフルエンザ抗原ＮＰ１およびＡ型インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原のＮおよびＦ、ｈＭＰＶ抗原のＦ、Ｎ、Ｍ２－１およびＭ、ならびにＰＩＶ抗原のＭ、ＨＮ、ＮおよびＦに広がるペプミックスの存在下で培養される。実施形態において、ＰＢＭＣまたはＭＮＣは、ＥＢＶ抗原のＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１およびＢＺＬＦ１、ＣＭＶ抗原のＩＥ１およびｐｐ６５、アデノウイルス抗原のヘキソンおよびペントン、ＢＫウイルス抗原のＶＰ１およびラージＴ、ならびにＨＨＶ６抗原のＵ９０、Ｕ１１およびＵ１４に広がるペプミックスの存在下で培養される。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は抗原特異的細胞傷害性について試験される。

他の実施形態において、少なくとも１つのペプミックスが、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫおよびＨＨＶ６に由来する抗原をカバーする。実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１、ＢＺＬＦ１、およびそれらの組み合わせに由来する。実施形態において、ＣＭＶ抗原は、ＩＥ１、ｐｐ６５、およびそれらの組み合わせに由来する。実施形態において、アデノウイルス抗原は、ヘキソン、ペントン、およびそれらの組み合わせに由来する。実施形態において、ＢＫウイルス抗原は、ＶＰ１、ラージＴ、およびそれらの組み合わせに由来する。実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ９０、Ｕ１１、Ｕ１４、およびそれらの組み合わせに由来する。

実施形態において、少なくとも１つのペプミックスがＨＨＶ８由来の抗原をカバーする。実施形態において、ＨＨＶ８由来の抗原は、ＬＡＮＡ－１（ＯＲＦ３）、ＬＡＮＡ－２（ｖＩＲＦ３、Ｋ１０．５）、ｖＣＹＣ（ＯＲＦ７２）、ＲＴＡ（ＯＲＦ５０）、ｖＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１）、カポシン（ＯＲＦ１２、Ｋ１２）、ｇＢ（ＯＲＦ８）、ＭＩＲ１（Ｋ３）、ＳＳＢ（ＯＲＦ６）、ＴＳ（ＯＲＦ７０）、およびそれらの組み合わせから選択される。

実施形態において、少なくとも１つのペプミックスがＨＢＶ由来の抗原をカバーする。実施形態において、ＨＢＶ由来の抗原は、ＨＢＶコア抗原、ＨＢＶ表面抗原、およびＨＢＶコア抗原とＨＢＶ表面抗原との組み合わせから選択される。

実施形態において、ペプミックスはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２由来の抗原をカバーする。実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗原は、（ｉ）ｎｓｐ１；ｎｓｐ３；ｎｓｐ４；ｎｓｐ５；ｎｓｐ６；ｎｓｐ１０；ｎｓｐ１２；ｎｓｐ１３；ｎｓｐ１４；ｎｓｐ１５；およびｎｓｐ１６；（ｉｉ）スパイク（Ｓ）；エンベロープタンパク質（Ｅ）；マトリックスタンパク質（Ｍ）；およびヌクレオカプシドタンパク質（Ｎ）；ならびに（ｉｉｉ）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＡＰ３Ａ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＮＳ７）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＮＳ８）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＯＲＦ１０）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＯＲＦ９Ｂ）；およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（Ｙ１４）からなる群から選択される１つまたは複数の抗原を含む。

本開示は、疾患または状態を防止する、または抑制する方法であって、本明細書中に記載されるようなミニバンクからの１つまたは複数の好適な抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含む方法を提供する。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株が患者への投与のために適格であるための唯一の判断基準が、患者が、抗原特異的Ｔ細胞株の製造において使用されるＭＮＣまたはＰＢＭＣが単離されたドナーと少なくとも２つのＨＬＡ対立遺伝子を共有することである。実施形態において、本開示には、最も好適な細胞療法用製造物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を所与の患者への投与のためにドナーミニバンクから特定するための方法が含まれる。実施形態において、患者は造血幹細胞移植をこれまでに受けている。いくつかのこのような実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株が患者への投与のために適格であるための唯一の判断基準が、患者と、患者の造血幹細胞ドナーとが、抗原特異的Ｔ細胞株の製造において使用されるＭＮＣまたはＰＢＭＣが単離されたドナーと少なくとも２つの一致したＨＬＡ対立遺伝子を共有することである。

実施形態において、本明細書中に提供される方法によって防止される疾患は、ウイルス感染である。実施形態において、防止される疾患は対象における免疫不全に関連し、または対象における免疫不全によって引き起こされる。実施形態において、免疫不全は原発性免疫不全である。

実施形態において、患者は、ウイルス感染にかかる危険性または潜在ウイルスの再活性化を有する危険性が一般集団における平均的な人よりも高い。実施形態において、ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化は、そのような感染または再活性化が一般集団における平均的な人にもたらすであろう危険性と比較して、より大きい危険性を患者の健康にもたらす。実施形態において、患者は免疫低下している。本明細書中で使用される場合、免疫低下している（した）は、免疫系が弱まっていることを意味する。例を挙げれば、免疫低下している患者は、感染および他の疾患と戦う能力が低下している。実施形態において、患者は、前記疾患または状態あるいは別の疾患または状態を処置するために患者が受けた処置に起因して免疫低下している。実施形態において、患者は年齢に起因して免疫低下している。１つの実施形態において、患者は若年に起因して免疫低下している。例を挙げれば、実施形態において、患者は１歳未満の年齢である。１つの実施形態において、患者は高齢に起因して免疫低下している。例を挙げれば、実施形態において、特許は、６０歳超の年齢、６５歳超の年齢、７０歳超の年齢、７５歳超の年齢、８０歳超の年齢、または８５歳超の年齢である。実施形態において、患者は、免疫不全と合わさって若年または高齢に起因して免疫低下している。実施形態において、患者は移植治療を必要としている。

本開示は、移植ドナーからの移植物を移植手順でこれまでに受けている、または受けることを必要としている患者への同種Ｔ細胞療法における投与のために、第１の抗原特異的Ｔ細胞株をミニバンクから、またはドナーバンクに含まれるミニバンクから選択し、使用する方法を提供する。１つの実施形態において、投与は、ウイルス感染の防止、あるいはウイルス感染によって、または潜在ウイルスの再活性化によって引き起こされる疾患または障害の予防のためである。１つの実施形態において、投与は、移植前の原発性免疫不全のためのものである。実施形態において、移植物は幹細胞を含む。実施形態において、移植物は実質臓器または組織を含む。実施形態において、移植物は骨髄を含む。実施形態において、移植物は、幹細胞、実質臓器または骨髄を含む。

実施形態において、原発性免疫不全疾患（ＰＩＤＤ）は遺伝性障害である場合がある。例示的なＰＩＤＤには、自己免疫性リンパ増殖症候群（ＡＬＰＳ）、自己免疫性多腺性症候群１型ＡＰＳ－１）、ＢＥＮＴＡ疾患、カスパーゼ８欠損状態、ＣＡＲＤ９欠損症、慢性肉芽腫性疾患（ＣＧＤ）、分類不能型免疫不全症、先天性好中球減少症症候群、ＣＴＬＡ４欠損症、ＤＯＣＫ８欠損症、ＧＡＴＡ２欠損症、グリコシル化障害、高免疫グロブリンＥ症候群、高免疫グロブリンＭ症候群、サイトカイン欠損症、白血球接着不全症、ＬＲＢＡ欠損症、ＰＩ３キナーゼ疾患、ＰＣＬＧ２関連の抗体欠損および免疫調節異常（ＰＬＡＩＤ）、重症複合免疫不全症（ＳＣＩＤ）、ＳＴＡＴ３ドミナントネガティブ疾患、ＳＴＡＴ３機能獲得疾患、ＷＨＩＭ症候群、ウィスコット・アルドリッチ症候群、Ｘ連鎖無ガンマグロブリン血症、Ｘ連鎖リンパ球増殖性疾患、ＸＭＥＮ疾患、補体欠損症、選択的ＩｇＡ欠損症、ディジョージ症候群、ならびに毛細血管拡張性運動失調症が含まれる。実施形態において、患者は、ＰＩＤＤではない免疫不全疾患を有し、例を挙げれば、ＨＩＶ感染および／または後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を有する。

実施形態において、患者には、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が複数回投与される。例を挙げれば、実施形態において、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が患者に２回、３回、４回、５回、またはそれ以上の回数で投与される場合がある。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株が患者に投与される。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株と同じミニバンクから選択される。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が得られたミニバンクとは異なるミニバンクから選択される。実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は患者に複数回、例えば、２回、３回、４回、５回、またはそれ以上の回数で投与される。実施形態において、患者には、複数のさらなる抗原特異的Ｔ細胞株が投与される。例を挙げれば、実施形態において、本明細書中に提供される方法は、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０またはそれ以上の異なる抗原特異的Ｔ細胞株を投与することを含む。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株は、互いに同じ抗原特異性を含み、しかし、異なるドナーから作製される。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株は異なる抗原特異性を含み、同じドナーから作製される。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株は異なる抗原特異性を含み、異なるドナーから作製される。

実施形態において、上記方法は、ポリクローナルな抗原特異的Ｔ細胞株を対象に投与し、その後、ポリクローナルな抗原特異的Ｔ細胞が特異的であるウイルスまたは抗原の１つまたは複数に対する応答を増強するための抗原組成物を投与することを含む。例を挙げれば、実施形態において、上記方法は、応答を増強するための抗原組成物を、ポリクローナルな抗原特異的Ｔ細胞株が投与された約２週間後、３週間後、４週間後、５週間後、６週間後、７週間後、８週間後、９週間後、１０週間後、１１週間後、１２週間後、またはそれ以降に投与することを含む。実施形態において、抗原組成物は、１つまたは複数のペプチド、あるいは１つまたは複数の無欠抗原（例えば、本明細書中に提供されるウイルス抗原のいずれか）を含む。いくつかの実施形態において、抗原組成物は、ポリクローナルな抗原特異的Ｔ細胞株を産生させるために使用される１つまたは複数のペプミックス、あるいはポリクローナルな抗原特異的Ｔ細胞株を産生させるために使用される１つまたは複数のペプミックスに含有される抗原性ペプチドの１つまたは複数を含む。実施形態において、抗原組成物はさらにアジュバントを含む。例示的なアジュバントには、アルミニウム塩、例えば、水酸化アルミニウム（（Ａｌ（ＯＨ）_３）、水酸化アルミニウムゲル（ミョウバン）またはリン酸アルミニウムなど；カルシウム、鉄または亜鉛の塩；フロイント不完全アジュバント、フロイント完全アジュバント、メルクアジュバント６５、ｔｏｌｌ様受容体４型（ＴＬＲ－４）のアゴニスト（例えば、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、合成リピドＡ、リピドＡの模倣物または類似体）、アルミニウム塩、サイトカイン、サポニン、ムラミルジペプチド（ＭＤＰ）誘導体、ＣｐＧオリゴ、グラム陰性細菌のリポ多糖（ＬＰＳ）、ポリホスファゼン、エマルション、ビロソーム、コクレアート（ｃｏｃｈｌｅａｔｅ）、ポリ（ラクチド－ｃｏ－グリコリド）（ＰＬＧ）微小粒子、ポロキサマー粒子、微小粒子、リポソーム、水中油型エマルション、ＭＦ５９、３ＤＭＰＬ、ＱＳ２１、およびスクアレンが含まれるが、これらに限定されない。

本開示は、１つまたは複数の第三者同種Ｔ細胞療法を患者に投与することを含む、疾患もしくは状態またはウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を防止する方法であって、１つまたは複数のポリクローナルな抗原特異的Ｔ細胞株を前記患者に投与することを含む方法を提供する。実施形態において、Ｔ細胞株は１つまたは複数のウイルス抗原に対しての抗原特異性を含む。実施形態において、Ｔ細胞株は、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を含む。例を挙げれば、Ｔ細胞株は、２つ、３つ、４つ、５つまたは６つのＨＬＡ対立遺伝子で患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を含む。いくつかの実施形態において、患者はＨＳＣＴをこれまでに受けており、Ｔ細胞株は患者およびＨＳＣＴドナーの両方と２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で適合する。

炎症反応を、（ｉ）発熱、硬直、頭痛、倦怠感、疲労、悪心、嘔吐、関節痛から選択される全身症状；（ｉｉ）低血圧を含む血管症状；（ｉｉｉ）不整脈を含む心臓症状；（ｉｖ）呼吸困難；（ｖ）腎不全および尿毒症を含む腎症状；ならびに（ｖｉ）凝固障害および血球貪食性リンパ組織球症様症候群を含む検査症状のうちの１つまたは複数の症状または徴候を観察することによって検出することができる。実施形態において、炎症応答を、知られている兆候または一般的である徴候をどのようなものであれ観察することによって検出することができる。

実施形態において、予防的方法の効力が抗原特異的Ｔ細胞株の投与後に見積もられる。実施形態において、予防的方法の効力が、患者からのサンプルにおけるウイルス量に基づいて見積もられる。実施形態において、予防的方法の効力が、患者の末梢血において検出可能なウイルス量をモニターすることによって見積もられる。実施形態において、予防的方法の効力は肉眼的血尿の減少または維持を含む。実施形態において、予防的方法の効力は、患者および／または臨床医によって報告された結果を調べるＣＴＣＡＥ－ＰＲＯまたは類似する評価ツールによって見積もられるような出血性膀胱炎症状の軽減または維持を含む。実施形態において、予防的方法の効力が、患者の末梢血／血清において検出可能な疾患負荷のマーカーをモニターすることによって見積もられる。

サンプルは患者からの組織サンプルから選択される。サンプルは患者からの体液サンプルから選択される。サンプルは患者からの脳脊髄液（ＣＳＦ）から選択される。サンプルは患者からのＢＡＬから選択される。サンプルは患者からの便から選択される。

例示的な臨床的に重要なウイルス
ウイルス感染が、同種造血幹細胞移植（ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ）または臓器移植の後における病的状態および死亡率の深刻な原因の１つである。ウイルス再活性化が形成不全の部分的免疫不全または全面的免疫不全の期間中に、また、ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ後の免疫抑制療法の期間中に起こりやすい。サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ＢＫウイルス（ＢＫＶ）およびアデノウイルス（ＡｄＶ）を含む様々なウイルス性病原体に関連する感染がａｌｌｏ－ＨＳＣＴ後においてますます問題となってきており、著しい病的状態および死亡率に関連する。

一般の感染の中でも、ＣＭＶが依然として同種造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）後の最も臨床的に重要な感染であり、ＣＭＶはまた、臓器移植後の重要な感染でもある。国際血液骨髄移植研究センター（ＣＩＢＭＴＲ）のデータは、移植後早期のＣＭＶ再活性化がＣＭＶ血清陽性ＨＳＣＴレシピエントの３０％超で起こり、大腸炎、網膜炎、肺臓炎および死亡をもたらし得ることを示す。ガンシクロビル、バルガンシクロビル、レテルモビル、ホスカルネットおよびシドホビルを含む様々な抗ウイルス剤が予防的および治療的の両方で使用されているにもかかわらず、それらは必ずしも効果的ではなく、それらには、骨髄抑制、腎毒性および最終的には非再発死亡率を含む著しい毒性が伴う。免疫再構成が依然として感染抑制に対して最も重要であるので、エクスビボ拡大／単離されたＣＭＶ特異的Ｔ細胞（ＣＭＶＳＴ）の養子移入が、抗ウイルス効果をもたらす効果的な手段として出現している。

ＣＭＶを標的とする初期の免疫療法が幹細胞ドナー由来のＴ細胞製造物に集中し、これは、安全であることと、効果的であることとの両方が、２０年超にわたる一連の学術的な第Ｉ／ＩＩ相研究において判明した。しかしながら、治療の個別化された性質、同様にまた、ウイルス－免疫ドナーについての要件（これは、ウイルス未感作である可能性がより高いより若齢のドナーを使用するという利点を考えれば、重要な問題である）が、広範な実施を妨げる障壁として現れている。したがって、より最近では、将来を見越して調製し、臨床的必要性に先立ってバンク化することが可能である部分的にＨＬＡ適合した第三者由来のウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）が、治療様式として研究されている。このＶＳＴは、エプスタイン・バーウイルス、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＨＨＶ６およびＢＫウイルスを含む広範なウイルスに対して安全かつ効果的であることが、薬物不応性感染／疾患を有する１５０名を超えるＨＳＣＴまたは臓器移植（ＳＯＴ）のレシピエントにおいて判明している。これらの研究は、「既製の」ウイルス特異的Ｔ細胞を中心的研究およびその後の商品化に向けて前進させることにおいて関心を促したが、（ｉ）多様な移植集団に適応させるために要求される細胞株の数、および（ｉｉ）臨床的利益を保証するための株選択のための判断基準を確立することに関する問題が残っていた。

加えて、潜在型ＢＫＶ（ポリオーマウイルス科に属するウイルス）の再活性化によって引き起こされる感染の出現は、重症の臨床疾患を腎臓移植レシピエントと同様に、ＨＳＣＴ患者において引き起こしている。ＢＫＶ感染の主要な臨床所見が出血性膀胱炎（ＢＫ－ＨＣ）である。これは同種ＨＳＣＴレシピエントの最大で２５％において生じ、継続的な麻酔剤注入を必要とする重症の、多くの場合には衰弱性である腹痛を伴う肉眼的血尿として顕在化する。健常個体では、Ｔ細胞免疫により、ウイルスから防御されている。ａｌｌｏ－ＨＳＣＴレシピエントでは、強力な免疫抑制措置の使用（およびその後の関連する免疫低下）が患者を重症のウイルス感染にかかりやすくさせている。

ＡｄＶが、小児ＨＳＣＴ、不適合ドナー、Ｔ細胞枯渇、臍帯血移植、ＧＶＨＤグレードＩＩＩ～ＩＶ、およびリンパ球減少を含む既知の危険性因子を伴って同種ＨＳＣＴ後の有意な病的状態および死亡率を生じさせ得る場合がある。全体として、より若い年齢が、ＡｄＶ感染についての増大した発生率に関連する。欧州における５０の施設で移植された１，７３８名の患者を検討した後、Ｖｏｉｇｔおよび共同研究者らは、３名中１名（３３％）の小児同種間ＨＳＣＴレシピエントがＡｄＶ感染（血漿中のＡｄＶＤＮＡとして定義される）を移植後の最初の６ヶ月以内に発症したことを報告した。ＡｄＶ感染が、感染患者の４０％までにおいて、重症で、長引く全身性疾病（例えば、肺臓炎、大腸炎、出血性膀胱炎、肝炎および脳炎など）に進行し得る場合があり、このため、ＨＳＣＴ後のＡｄＶ感染による全死亡率が小児同種ＨＳＣＴレシピエントの間では１９～８３％となっている。加えて、小児同種間ＨＳＣＴにおけるＡｄＶ感染には、病院滞在期間によって見積もられるように、著しい医療資源利用が伴う。５２０名の小児同種間ＨＳＣＴレシピエントの多施設多国研究において、ＡｄＶウイルス血症（１０００コピー／ｍＬを超える血中のＡｄＶＤＮＡとして定義される）を有する小児は、ＡｄＶ非感染の小児よりも２２日長く入院した。別個の研究において、小児同種ＨＳＣＴレシピエントにおけるＡｄＶ感染の（抗ウイルス費用および入院患者の病院滞在における）経済的負担が、ＡｄＶ非感染の患者における１，１２０ドルと比較して、患者あたり３１，５００ドルであると推定された。シドホビルによる適用外の抗ウイルス治療は効果がなく、腎毒性である。重要なことに、これらの抗ウイルス剤はウイルス抑制的（ｖｉｒｏｓｔａｔｉｃ）であり、ＡｄＶ感染からの回復のために非常に重要であるＴ細胞免疫再構成を促進させることに何ら影響を有していない。ＡｄＶ特異的免疫の再構築は依然として感染クリアランスのために最も重要であり、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍを含む第三者ＡｄＶ特異的Ｔ細胞が、活性ＡｄＶ感染および疾患を処置するために成功裏に使用されている。

呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザ、パラインフルエンザウイルス（ＰＩＶ）およびヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）を含めて市中感染性呼吸器ウイルス（ＣＡＲＶ）に起因する様々な呼吸器ウイルス感染が、致命的となり得る細気管支炎および肺炎などの重症の疾患がこれらの呼吸器ウイルス感染により引き起こされることがある同種造血幹細胞移植（ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ）レシピエントの４０％までにおいて検出される。ＲＳＶ誘発の細気管支炎が、１歳未満の小児における入院のための最も一般的な理由であり、一方で、疾病管理センター（ＣＤＣ）は、インフルエンザが毎年、世界中では３５６０万件に達する疾病、１４０，０００件～７１０，０００件の間での入院、米国だけでの疾患管理におけるおよそ８７１億ドルの年間費用、および１２，０００名～５６，０００名の間での死亡の原因になっていると推定している。

本開示は、移植患者自身の免疫系が復活するまでの期間にわたってウイルス感染を抑制し、症状を排除するためのエクスビボ拡大された遺伝子非改変のウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）を投与することによってＴ細胞免疫を復活させることを提供する。どのような理論であれ理論によって縛られることを望まないが、ＶＳＴは少なくとも６週間または少なくとも１２週間にわたって循環することができ、かつ、ウイルス感染を予防的に防止し、または潜在ウイルスの再活性化を予防的に防止する。実施形態において、ＶＳＴは、ウイルス由来ペプチドを提示する標的細胞において発現される主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子に結合するその生来的Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を介してウイルス感染細胞を認識し、死滅させる。

実施形態において、予備スクリーニングされた血清陽性の健常者ドナーから得られる末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）に由来するＶＳＴで、部分的にＨＬＡ適合した「既製の」製造物として利用可能であるＶＳＴ。実施形態において、本明細書中に記載されるようなＶＳＴは、ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＢＫＶ、ＨＨＶ６、ＨＨＶ８、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶ、ｈＭＰＶおよびＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２のいずれか１つまたは複数に応答する。実施形態において、本明細書中に記載されるようなＶＳＴは、少なくともＥＢＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＢＫＶおよびＨＨＶ６に応答する。実施形態において、本明細書中に記載されるようなＶＳＴは、ＨＢＶまたはＨＨＶ８に応答する。実施形態において、本明細書中に記載されるようなＶＳＴは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に応答する。実施形態において、本明細書中に記載されるようなＶＳＴは、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶおよびｈＭＰＶに応答する。実施形態において、ＶＳＴは、例えば、ＨＳＣＴ生着および免疫系の再定着の後、患者が免疫能を取り戻すまで、レシピエント患者において循環するように設計される。理論によって縛られることを望まないが、実施形態において、本明細書中に記載されるようなＶＳＴおよび方法は、患者に生着し、患者が内因性免疫応答を開始させることができるまで免疫低下患者にＴ細胞免疫を提供する「免疫学的橋渡し療法」である。実施形態において、ＶＳＴは、少なくともＶＳＴのさらなる投与まで、例えば、前回投与の約４週間後、５週間後、６週間後、７週間後、８週間後、９週間後、１０週間後、１１週間後、１２週間後、またはそれ以降でのＶＳＴの引き続く投与まで、レシピエントにおいて循環するように設計される。実施形態において、ペプチドまたは無欠抗原のブースト投与が、ＶＳＴ投与の約２週間後、３週間後、４週間後、５週間後、６週間後、７週間後、８週間後、９週間後、１０週間後、１１週間後、１２週間後、またはそれ以降において患者に施される。

本開示の実施形態において、作製された抗原特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染、細菌感染または真菌感染を含めて病原性感染を有する個体、または有する危険性がある個体に与えられる。個体は免疫系が欠損している場合があり、または欠損していない場合がある。いくつかの場合において、個体は、例を挙げれば、臓器移植または幹細胞移植（造血幹細胞移植を含む）の後におけるウイルス感染、細菌感染または真菌感染の危険性があり、あるいはがんを有しており、またはがん処置をこれまでに受けており、もしくはがん処置を受けるであろう。いくつかの場合において、個体は後天性免疫不全を有する。

個体における感染はどのような種類のものであってもよく、しかし、具体的な実施形態において、感染は、１つまたは複数のウイルスの結果である。病原性ウイルスはどのような種類のものであってもよく、しかし、具体的な実施形態において、下記の科の１つに由来する：アデノウイルス科、ピコルナウイルス科、コロナウイルス、ヘルペスウイルス科、ヘパドナウイルス科、フラビウイルス科、レトロウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、パポバウイルス科、ポリオーマウイルス、ラブドウイルス科またはトガウイルス科。実施形態において、ウイルスは、免疫優性または準優位である抗原を産生し、あるいは両方の種類を産生する。具体的な場合において、ウイルスは、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ＨＨＶ８、ＨＢＶ、ボカウイルス、コロナウイルス（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、メタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、ウエストナイルウイルス、スペイン風邪およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。

いくつかの局面において、感染は病原性細菌の結果であり、本発明は、どのようなタイプの病原性細菌に対してでも適用可能である。例示的な病原性細菌には、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、らい菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｅｐｒａｅ）、ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｎｔｈｒａｃｉｓ）、ペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａｐｅｓｔｉｓ）、発疹チフスリケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ）、ストレプトコッカス属、シュードモナス属、赤痢菌属、カンピロバクター属およびサルモネラ属が少なくとも含まれる。

いくつかの局面において、感染は病原性真菌の結果であり、本発明は、どのようなタイプの病原性真菌に対してでも適用可能である。例示的な病原性真菌には、カンジダ属、アスペルギルス属、クリプトコッカス属、ヒストプラズマ属、ニューモシスチス属またはスタキボトリス属が少なくとも含まれる。実施形態において、ウイルス抗原は、本開示において記載されるような使用のために好適である抗原がどれも可能である。

ペプミックスライブラリーの作製
本発明の実施形態において、ペプチドのライブラリーが、最終的には抗原特異的Ｔ細胞を生じさせるためにＰＢＭＣに与えられる。ライブラリーは特定の場合において、同じ抗原の一部または全体にわたるペプチドの混合物（「ペプミックス」）を含む。本発明において利用されるペプミックスは、ある特定の局面では、１５アミノ酸長であり、互いに１１アミノ酸によって重複するペプチドから構成される市販のペプチドライブラリーからのものである場合がある。いくつかの場合において、本発明において利用されるペプミックスは合成的に作製される場合がある。例には、ＪＰＴＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ、ＶＡ）またはＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ（Ａｕｂｕｒｎ、ＣＡ）から得られるものが含まれる。特定の実施形態において、ペプチドは、長さが、例を挙げれば、少なくとも７アミノ酸、８アミノ酸、９アミノ酸、１０アミノ酸、１１アミノ酸、１２アミノ酸、１３アミノ酸、１４アミノ酸、１５アミノ酸、１６アミノ酸、１７アミノ酸、１８アミノ酸、１９アミノ酸、２０アミノ酸、２１アミノ酸、２２アミノ酸、２３アミノ酸、２４アミノ酸、２５アミノ酸、２６アミノ酸、２７アミノ酸、２８アミノ酸、２９アミノ酸、３０アミノ酸、３１アミノ酸、３２アミノ酸、３３アミノ酸、３４アミノ酸、または３５アミノ酸長、あるいはそれ以上であり、具体的な実施形態において、長さにおける重複が、例を挙げれば、少なくとも３アミノ酸、４アミノ酸、５アミノ酸、６アミノ酸、７アミノ酸、８アミノ酸、９アミノ酸、１０アミノ酸、１１アミノ酸、１２アミノ酸、１３アミノ酸、１４アミノ酸、１５アミノ酸、１６アミノ酸、１７アミノ酸、１８アミノ酸、１９アミノ酸、２０アミノ酸、２１アミノ酸、２２アミノ酸、２３アミノ酸、２４アミノ酸、２５アミノ酸、２６アミノ酸、２７アミノ酸、２８アミノ酸、２９アミノ酸、３０アミノ酸、３１アミノ酸、３２アミノ酸、３３アミノ酸、または３４アミノ酸である。

実施形態において、ペプミックスにおいて使用されるようなアミノ酸は、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９、少なくとも９９．９％の純度（それらの間におけるすべての範囲および部分範囲を含む）を有する。実施形態において、ペプミックスにおいてここで使用されるようなアミノ酸は、少なくとも９０％の純度を有する。

種々ペプチドの混合物は、どのような比率であっても種々ペプチドを含んでもよく、だが、実施形態において、それぞれの特定のペプチドが混合物に、別の特定のペプチドと実質的に同じ数で存在する。広範囲の特異性を有するマルチウイルス抗原特異的Ｔ細胞のためのペプミックスを調製する方法および製造する方法が、米国特許出願公開第２０１８／０１８７１５２号（その全体が参照によって組み込まれる）に記載される。

ポリクローナルなウイルス特異的Ｔ細胞組成物
本開示には、臨床的に重要なウイルスに対抗する特異性を有する、血清陽性ドナー（例えば、本明細書中に開示されるドナー選択方法により選択される血清陽性ドナー）から作製されるポリクローナルなウイルス特異的Ｔ細胞組成物が含まれる。実施形態において、臨床的に重要なウイルスには、ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＢＫＶおよびＨＨＶ６が含まれ得るが、これらに限定されない。実施形態において、臨床的に重要なウイルスには、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザウイルスおよびＨＭＰＶが含まれるが、これらに限定されない。実施形態において、臨床的に重要なウイルスはＨＢＶである。実施形態において、臨床的に重要なウイルスはＨＨＶ８である。実施形態において、臨床的に重要なウイルスはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を含む組成物を提供する。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団は複数のウイルス抗原を認識することができる。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団は、ただ１つのウイルスに由来する２つ以上または複数のウイルス抗原を認識することができる。例を挙げれば、実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団は、ＨＨＶ８、ＨＢＶ、ＡｄＶ、ＣＭＶ、ＢＫＶ、ＥＢＶ、ＨＨＶ６、ＪＣＶ、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶ、ＨＰＭＶまたはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に由来する２つ以上または複数のウイルス抗原を認識することができる。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団は、２つ以上のウイルスに由来する２つ以上または複数のウイルス抗原を認識することができ、例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つまたはそれ以上の異なるウイルスに由来する２つ以上または複数のウイルス抗原を認識することができる。

実施形態において、複数のウイルス抗原はパラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ－３）由来の少なくとも１つの第１の抗原を含むことができる。実施形態において、複数のウイルス抗原は、１つまたは複数の第２のウイルスに由来する少なくとも１つの第２の抗原を含むことができる。実施形態において、ポリクローナルなウイルス特異的Ｔ細胞の組成物は、どのようなウイルスであれ臨床的に重要なウイルスまたは関連性があるウイルスに対抗する特異性を有する。例を挙げれば、ポリクローナルなウイルス特異的Ｔ細胞の組成物は、ＣＭＶ、ＢＫＶ、ＥＢＶ、ＡｄＶ、ＨＨＶ６、ＨＨＶ８、ＨＢＶ、ＪＣＶ、ＰＩＶ３、ＲＳＶ、ＨＭＰＶ、インフルエンザおよびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、またはどのような組み合わせであれそれらの組み合わせから選択されるウイルス抗原を含むことができる。

実施形態において、本開示は、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ－３）呼吸器合胞体ウイルス、インフルエンザおよびヒトメタニューモウイルスのそれぞれに由来する少なくとも１つの抗原を含む複数のウイルス抗原を認識する抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団、同様にまた、そのような抗原特異的Ｔ細胞を含有する複数の細胞株を含有する本明細書中に記載されるようなドナーミニバンクを提供する。実施形態において、本開示は、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ－３）呼吸器合胞体ウイルス、インフルエンザおよびヒトメタニューモウイルスのそれぞれに由来する少なくとも２つの抗原を含む前記複数のウイルス抗原を含む複数のウイルス抗原を認識する抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団、同様にまた、そのような抗原特異的Ｔ細胞を含有する複数の細胞株を含有する本明細書中に記載されるようなドナーミニバンクを提供する。

実施形態において、複数の抗原は、ＰＩＶ－３抗原Ｍ、ＰＩＶ－３抗原ＨＮ、ＰＩＶ－３抗原Ｎ、ＰＩＶ－３抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原ＦおよびｈＭＰＶ抗原Ｎを含む。実施形態において、複数の抗原は、ＰＩＶ－３抗原Ｍ、ＰＩＶ－３抗原ＨＮ、ＰＩＶ－３抗原Ｎ、ＰＩＶ－３抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原ＦおよびｈＭＰＶ抗原Ｎのどれからでも選択することができる。

実施形態において、第１の抗原はＰＩＶ－３抗原Ｍが可能である。実施形態において、第１の抗原はＰＩＶ－３抗原ＨＮが可能である。実施形態において、第１の抗原はＰＩＶ－３抗原Ｎが可能である。実施形態において、第１の抗原はＰＩＶ－３抗原Ｆが可能である。実施形態において、第１の抗原は、ＰＩＶ－３抗原Ｍ、ＰＩＶ－３抗原ＨＮ、ＰＩＶ－３抗原ＮおよびＰＩＶ－３抗原Ｆのどのような組み合わせも可能である。実施形態において、組成物は１つの第１の抗原を含むことができる。実施形態において、組成物は２つの第１の抗原を含むことができる。実施形態において、組成物は３つの第１の抗原を含むことができる。実施形態において、組成物は４つの第１の抗原を含むことができる。実施形態において、前記４つの第１の抗原は、ＰＩＶ－３抗原Ｍ、ＰＩＶ－３抗原ＨＮ、ＰＩＶ－３抗原ＮおよびＰＩＶ－３抗原Ｆを含むことができる。

実施形態において、１つまたは複数の第２のウイルスは呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）が可能である。実施形態において、１つまたは複数の第２のウイルスはインフルエンザが可能である。実施形態において、１つまたは複数の第２のウイルスはヒトメタニューモウイルスウイルス（ｈＭＰＶ）が可能である。実施形態において、１つまたは複数の第２のウイルスは、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザおよびヒトメタニューモウイルスを含むことができる。実施形態において、１つまたは複数の第２のウイルスは、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザおよびヒトメタニューモウイルスからなることができる。実施形態において、１つまたは複数の第２のウイルスは、本明細書中に記載されるような好適なウイルスからどのようなものあれ選択することができる。

実施形態において、組成物は２つまたは３つの第２のウイルスを含むことができる。実施形態において、組成物は３つの第２のウイルスを含むことができる。実施形態において、３つの第２のウイルスは、インフルエンザ、ＲＳＶおよびｈＭＰＶを含むことができる。実施形態において、組成物は、それぞれの第２のウイルスあたり少なくとも２つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は１つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は２つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は３つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は４つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は５つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は６つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は７つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は８つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は９つの第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は１０の第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は１１の第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は１２の第２の抗原を含む。実施形態において、組成物は、本明細書中に記載されるような組成物のために好適であろう第２の抗原をどのような数であれ含む。

実施形態において、第２の抗原はインフルエンザ抗原ＮＰ１が可能である。実施形態において、第２の抗原はインフルエンザ抗原ＭＰ１が可能である。実施形態において、第２の抗原はＲＳＶ抗原Ｎが可能である。実施形態において、第２の抗原はＲＳＶ抗原Ｆが可能である。実施形態において、第２の抗原はｈＭＰＶ抗原Ｍが可能である。実施形態において、第２の抗原はｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１が可能である。実施形態において、第２の抗原はｈＭＰＶ抗原Ｆが可能である。実施形態において、第２の抗原はｈＭＰＶ抗原Ｎが可能である。実施形態において、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原ＦおよびｈＭＰＶ抗原Ｎのどのような組み合わせも可能である。

実施形態において、第２の抗原はインフルエンザ抗原ＮＰ１を含む。実施形態において、第２の抗原はインフルエンザ抗原ＭＰ１を含む。実施形態において、第２の抗原はインフルエンザ抗原ＮＰ１とインフルエンザ抗原ＭＰ１との両方を含む。実施形態において、第２の抗原はＲＳＶ抗原Ｎを含む。実施形態において、第２の抗原はＲＳＶ抗原Ｆを含む。実施形態において、第２の抗原はＲＳＶ抗原ＮとＲＳＶ抗原Ｆとの両方を含む。

実施形態において、第２の抗原はｈＭＰＶ抗原Ｍを含む。実施形態において、第２の抗原はｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１を含む。実施形態において、第２の抗原はｈＭＰＶ抗原Ｆを含む。実施形態において、第２の抗原はｈＭＰＶ抗原Ｎを含む。実施形態において、第２抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原ＦおよびｈＭＰＶ抗原Ｎの組み合わせを含む。

実施形態において、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原ＦおよびｈＭＰＶ抗原Ｎのそれぞれを含む。実施形態において、複数の抗原は、ＰＩＶ－３抗原Ｍ、ＰＩＶ－３抗原ＨＮ、ＰＩＶ－３抗原Ｎ、ＰＩＶ－３抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原ＦおよびｈＭＰＶ抗原Ｎを含む。実施形態において、複数の抗原は、ＰＩＶ－３抗原Ｍ、ＰＩＶ－３抗原ＨＮ、ＰＩＶ－３抗原Ｎ、ＰＩＶ－３抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原ＦおよびｈＭＰＶ抗原Ｎからなる。実施形態において、複数の抗原は、ＰＩＶ－３抗原Ｍ、ＰＩＶ－３抗原ＨＮ、ＰＩＶ－３抗原Ｎ、ＰＩＶ－３抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原ＦおよびｈＭＰＶ抗原Ｎから本質的になる。実施形態において、第２の抗原は、本明細書中に記載されるような組成物のための好適な抗原をどのようなものであれ含むことができる。

実施形態において、臨床的に重要なウイルスには、ＨＨＶ８が含まれ得るが、これらに限定されない。実施形態において、ウイルス抗原はＨＨＶ８由来の免疫原性抗原に広がる。実施形態において、ＨＨＶ８由来の抗原は、ＬＡＮＡ－１（ＯＲＦ３）、ＬＡＮＡ－２（ｖＩＲＦ３、Ｋ１０．５）、ｖＣＹＣ（ＯＲＦ７２）、ＲＴＡ（ＯＲＦ５０）、ｖＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１）、カポシン（ＯＲＦ１２、Ｋ１２）、ｇＢ（ＯＲＦ８）、ＭＩＲ１（Ｋ３）、ＳＳＢ（ＯＲＦ６）、ＴＳ（ＯＲＦ７０）、およびそれらの組み合わせから選択される。

実施形態において、臨床的に重要なウイルスには、ＨＢＶが含まれ得るが、これらに限定されない。実施形態において、ウイルス抗原はＨＢＶ由来の免疫原性抗原に広がる。実施形態において、ＨＢＶ由来の抗原は、（ｉ）ＨＢＶコア抗原、（ｉｉ）ＨＢＶ表面抗原、および（ｉｉｉ）ＨＢＶコア抗原とＨＢＶ表面抗原との組み合わせから選択される。

実施形態において、臨床的に重要なウイルスには、コロナウイルスが含まれ得るが、これらに限定されない。実施形態において、コロナウイルスはα－コロナウイルス（α－ＣｏＶ）である。実施形態において、コロナウイルスはβ－コロナウイルス（β－ＣｏＶ）である。実施形態において、β－ＣｏＶは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１およびＨＣｏＶ－ＯＣ４３から選択される。実施形態において、コロナウイルスはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗原は、（ｉ）ｎｓｐ１；ｎｓｐ３；ｎｓｐ４；ｎｓｐ５；ｎｓｐ６；ｎｓｐ１０；ｎｓｐ１２；ｎｓｐ１３；ｎｓｐ１４；ｎｓｐ１５；およびｎｓｐ１６；（ｉｉ）スパイク（Ｓ）；エンベロープタンパク質（Ｅ）；マトリックスタンパク質（Ｍ）；およびヌクレオカプシドタンパク質（Ｎ）；ならびに（ｉｉｉ）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＡＰ３Ａ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＮＳ７）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＮＳ８）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＯＲＦ１０）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＯＲＦ９Ｂ）；およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（Ｙ１４）からなる群から選択される１つまたは複数の抗原を含む。

実施形態において、組成物における抗原特異的Ｔ細胞は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を複数のペプミックスライブラリーと接触させることによって作製することができる。実施形態において、それぞれのペプミックスライブラリーが、ウイルス抗原の少なくとも一部分に広がる複数の重複するペプチドを含む。実施形態において、複数のペプミックスライブラリーの少なくとも１つがＰＩＶ－３由来の第１の抗原に広がる。実施形態において、複数のペプミックスライブラリーの少なくとも１つのさらなるペプミックスライブラリーが、それぞれの第２の抗原に広がる。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、Ｔ細胞を、少なくとも１つのＤＮＡプラスミドによりヌクレオフェクションされる樹状細胞（ＤＣ）と接触させることによって作製することができる。実施形態において、ＤＮＡプラスミドはＰＩＶ－３抗原をコードすることができる。実施形態において、少なくとも１つのＤＮＡプラスミドにより、それぞれの第２の抗原がコードされる。実施形態において、プラスミドにより、少なくとも１つのＰＩＶ－３抗原と、少なくとも１つの第２の抗原とがコードされる。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、ＣＤ４＋Ｔリンパ球と、ＣＤ８＋Ｔリンパ球とを含む。実施形態において、組成物は、αβＴ細胞受容体を発現する抗原特異的Ｔ細胞を含む。実施形態において、組成物は、ＭＨＣ拘束された抗原特異的Ｔ細胞を含む。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、ＩＬ－７およびＩＬ－４の両方の存在下でエクスビボ培養することができる。実施形態において、マルチウイルス抗原特異的Ｔ細胞は、患者への投与がすぐにできるように、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日（それらの間におけるすべての範囲および部分範囲を含む）の範囲内で十分に拡大されている。実施形態において、マルチウイルス抗原特異的Ｔ細胞は、どのような日数であれ本明細書中に記載されるような組成物のために好適である日数の範囲内で十分に拡大されている。

本開示は、無視できるほどの同種反応性を示す抗原特異的Ｔ細胞を含む組成物を提供する。実施形態において、患者から採取される抗原特異的Ｔ細胞の活性化誘導細胞死が、同じ患者から採取される対応する抗原特異的Ｔ細胞よりも少ない抗原特異的Ｔ細胞を含む組成物。実施形態において、組成物は、ＩＬ－７およびＩＬ－４の両方の存在下で培養されない。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞を含む組成物は、７０％を超える生存能を示す。

実施形態において、組成物は、培養状態において少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、少なくとも７日間、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、細菌および真菌について陰性である。実施形態において、組成物は、培養状態において少なくとも７日間、細菌および真菌について陰性である。実施形態において、組成物は、１ＥＵ／ｍｌ未満、２ＥＵ／ｍｌ未満、３ＥＵ／ｍｌ未満、４ＥＵ／ｍｌ未満、５ＥＵ／ｍｌ未満、６ＥＵ／ｍｌ未満、７ＥＵ／ｍｌ未満、８ＥＵ／ｍｌ未満、９ＥＵ／ｍｌ未満、１０ＥＵ／ｍｌ未満のエンドトキシンを示す。実施形態において、組成物は５ＥＵ／ｍｌ未満のエンドトキシンを示す。実施形態において、組成物はマイコプラズマについて陰性である。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を構築するために使用されるペプミックスは化学合成される。実施形態において、ペプミックスは純度が場合によっては１０％超、２０％超、３０％超、４０％超、５０％超、６０％超、７０％超、８０％超、９０％超（それらの間におけるすべての範囲および部分範囲を含む）である。実施形態において、ペプミックスは純度が場合によっては９０％超である。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞はＴｈ１分極している。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞はウイルス抗原発現標的細胞を溶解することができる。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は他の好適なタイプの抗原発現標的細胞を溶解することができる。実施形態において、組成物における抗原特異的Ｔ細胞は、非感染の自己標的細胞を著しく溶解しない。実施形態において、組成物における抗原特異的Ｔ細胞は、非感染の自己同種標的細胞を著しく溶解しない。

本開示は、静脈内送達のために配合される組成物をどのようなものであれ含む医薬組成物（例えば、静脈内送達のために配合される本明細書中に記載される抗原特異的Ｔ細胞株を含む医薬組成物）を提供する。実施形態において、組成物は、培養状態において少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、少なくとも７日間、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、細菌について陰性である。実施形態において、組成物は、培養状態において少なくとも７日間、細菌について陰性である。実施形態において、組成物は、培養状態において少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、少なくとも７日間、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、真菌について陰性である。実施形態において、組成物は、培養状態において少なくとも７日間、真菌について陰性である。

本発明の医薬組成物は、１ＥＵ／ｍｌ未満、２ＥＵ／ｍｌ未満、３ＥＵ／ｍｌ未満、４ＥＵ／ｍｌ未満、５ＥＵ／ｍｌ未満、６ＥＵ／ｍｌ未満、７ＥＵ／ｍｌ未満、８ＥＵ／ｍｌ未満、９ＥＵ／ｍｌ未満または１０ＥＵ／ｍｌ未満のエンドトキシンを示す。実施形態において、本発明の医薬組成物はマイコプラズマについて陰性である。

本開示は、標的細胞を溶解する方法であって、標的細胞を本明細書中に記載されるような組成物または医薬組成物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株、または静脈内送達のために配合されるそのようなＴ細胞株を含む医薬組成物）と接触させることを含む方法を提供する。実施形態において、標的細胞と組成物または医薬組成物との間で接触させることが、対象においてインビボで生じる。実施形態において、標的細胞と組成物または医薬組成物との間で接触させることが、抗原特異的Ｔ細胞を対象に投与することによりインビボで生じる。実施形態において、対象はヒトである。

本開示は、ウイルス感染を抑制する、または防止する方法であって、その必要性のある対象に、本明細書中に記載されるような組成物または医薬組成物（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株、または静脈内送達のために配合されるそのようなＴ細胞株を含む医薬組成物）を投与することを含む方法を提供する。実施形態において、投与される抗原特異的Ｔ細胞の量が１ｍ^２あたり５×１０^３個～５×１０^９個の間の範囲の抗原特異的Ｔ細胞、１ｍ^２あたり５×１０^４個～５×１０^８個の間の範囲の抗原特異的Ｔ細胞、１ｍ^２あたり５×１０^５個～５×１０^７個の間の範囲の抗原特異的Ｔ細胞、１ｍ^２あたり５×１０^４個～５×１０^８個の間の範囲の抗原特異的Ｔ細胞、１ｍ^２あたり５×１０^６個～５×１０^９個の間の範囲の抗原特異的Ｔ細胞（それらの間におけるすべての範囲および部分範囲を含む）である。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は対象に投与される。実施形態において、対象は免疫低下している。実施形態において、対象は急性骨髄性白血病を有する。実施形態において、対象はリンパ芽球性白血病を有する。実施形態において、対象は慢性肉芽腫性疾患を有する。

実施形態において、対象は、１つまたは複数の医学的状態を有する可能性がある。実施形態において、対象は、抗原特異的Ｔ細胞を受ける前に、強度軽減移植前処置を伴う適合血縁ドナー移植を受ける。実施形態において、対象は、抗原特異的Ｔ細胞を受ける前に、骨髄破壊的移植前処置を伴う適合非血縁ドナー移植を受ける。実施形態において、対象は、抗原特異的Ｔ細胞を受ける前に、強度軽減移植前処置を伴うハプロ同一（ｈａｐｌｏ－ｉｄｅｎｔｉｃａｌ）移植を受ける。実施形態において、対象は、抗原特異的Ｔ細胞を受ける前に、骨髄破壊的移植前処置を伴う適合血縁ドナー移植を受ける。実施形態において、対象は臓器移植をこれまでに受けている。実施形態において、対象は化学療法をこれまでに受けている。実施形態において、対象はＨＩＶ感染および／またはＡＩＤＳを有する。実施形態において、対象は、遺伝的免疫不全、例えば、原発性免疫不全疾患（ＰＩＤＤ）を有する。実施形態において、対象は同種幹細胞をこれまでに受けている。実施形態において、対象は、この段落に記載されるような１つを超える医学的状態を有する。実施形態において、対象は、この段落に記載されるようなすべての医学的状態を有する。実施形態において、対象は年齢に起因して免疫低下している（例えば、対象は高齢であり、例を挙げれば、６０歳超、６５歳超、７０歳超、７５歳超、または８０歳超の年齢であり、あるいは若齢であり、例えば、１歳未満、６ヶ月未満、３ヶ月未満、または１ヶ月未満の年齢である）。実施形態において、対象は、本明細書中に記載される１つまたは複数の医学的状態に加えて、年齢に起因して免疫低下している。

実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に複数回投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に１回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に２回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に３回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に４回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に５回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に６回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に７回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に８回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に９回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は対象に１０回超投与される。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、対象のために好適である数の回数で対象に投与される。実施形態において、組成物は、対象がウイルス感染の危険性が大きい期間が継続する間、本明細書中に示されるような定期的な投与で対象に投与される。実施形態において、組成物は、対象が免疫低下している期間が継続する間、本明細書中に示されるような定期的な投与で対象に投与される。

実施形態において、組成物の投与により、対象におけるウイルス感染が効果的に防止され、かつ／または対象における潜在ウイルスの再活性化が防止される。実施形態において、組成物の投与により、対象におけるウイルス感染が効果的に抑制され、または対象における潜在ウイルスの再活性化が効果的に抑制され、この場合、対象は、組成物が投与された時点においてそのウイルスに関しての活動性感染または再活性化を有していなかった。例を挙げれば、実施形態において、対象は、所与のウイルスに関してのウイルス血症もしくはウイルス尿症またはそうでない場合には検出可能なウイルスを有しておらず、対象には、本明細書中に提供される組成物が予防的に投与され、この場合、対象はその後で当該所与のウイルスにさらされ、および／または当該所与のウイルスに感染し、および／または当該所与のウイルスを再活性化し、組成物の予防的投与により、感染が防止され、感染が抑制され、感染が解消され、および／またはそうでない場合には感染から生じる重篤な疾患もしくは合併症が防止される。実施形態において、ウイルス感染はパラインフルエンザウイルスである。実施形態において、ウイルス感染はパラインフルエンザウイルス３型である。実施形態において、ウイルス感染はＲＳＶである。実施形態において、ウイルス感染はインフルエンザである。実施形態において、ウイルス感染はＨＭＰＶである。実施形態において、ウイルス感染はＨＨＶ８である。実施形態において、ウイルス感染はＨＢＶである。実施形態において、ウイルス感染はＢＫＶである。実施形態において、ウイルス感染はＣＭＶである。実施形態において、ウイルス感染はＥＢＶである。実施形態において、ウイルス感染はＨＨＶ６である。実施形態において、ウイルス感染はＡｄＶである。実施形態において、ウイルス感染はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

実施形態において、本開示は、静脈内送達のために配合される本明細書中に記載されるような組成物を含む医薬組成物を提供する。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は細菌について陰性である。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は真菌について陰性である。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、培養状態において少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、少なくとも７日間、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、細菌または真菌について陰性である。実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、培養状態において少なくとも７日間、細菌または真菌について陰性である。

実施形態において、静脈内送達のために配合される医薬組成物は、１ＥＵ／ｍｌ未満、２ＥＵ／ｍｌ未満、３ＥＵ／ｍｌ未満、４ＥＵ／ｍｌ未満、５ＥＵ／ｍｌ未満、６ＥＵ／ｍｌ未満、７ＥＵ／ｍｌ未満、８ＥＵ／ｍｌ未満、９ＥＵ／ｍｌ未満または１０ＥＵ／ｍｌ未満のエンドトキシンを示す。実施形態において、静脈内送達のために配合される医薬組成物はマイコプラズマについて陰性である。

前述の議論は本発明の様々な実施形態に関する。用語「発明」は、どのような実施形態であれ特定の実施形態を示すことも、また、そうでない場合には本開示の範囲を限定することも意図されない。これらの実施形態のうちの１つまたは複数が好ましいけれども、開示される実施形態は、特許請求項を含めて本開示の範囲を限定するものとして解釈してはならず、また、そうでない場合には、特許請求項を含めて本開示の範囲を限定するものとして使用してはならない。加えて、当業者は、以下の説明が広範な適用を有しており、どのような実施形態であれその議論は、その実施形態の例示であることのみが意図されており、特許請求項を含めて本開示の範囲がその実施形態に限定されることを暗示することは意図されないことを理解するであろう。

実施例１．ＣＭＶ特異的ＶＳＴ（ＣＭＶＳＴ）のドナーバンクの構築
ＣＭＶ（すなわち、依然として移植後の病的状態および死亡率の主要な原因である遍在ウイルスの１つ）を処置するために第三者Ｔ細胞を使用して、臨床試験が実施された。

ＣＭＶＳＴ作製のためのドナーの選択：臨床的に効果的な株が同種ＨＳＣＴ患者集団の大多数に提供され得ることを保証するために、全体として合衆国と類似する多様な人種構成を有するヒューストン地域で（ＨｏｕｓｔｏｎＭｅｔｈｏｄｉｓｔＨｏｓｐｉｔａｌ、またはＴｅｘａｓＣｈｉｌｄｒｅｎ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌにおいて）処置される６６６名の同種ＨＳＣＴレシピエントのＨＬＡ型を分析した。その後、これらのＨＳＣＴレシピエントのＨＬＡをＣＭＶ血清陽性の多様な健常者適格ドナーのプールのＨＬＡ型と比較した。最初の工程において、ドナーのＨＬＡプロフィルにより最大数の患者にＣＭＶＳＴ製造物が受け入れられる健常者ドナーを特定した。このドナーを全体的なドナープールから除き、このドナーによって受け入れられるすべての患者もまた非適合患者集団から除いた。続いて、これらの工程を、第２、第３などのドナーに関して繰り返し、これにより、毎回、残りの患者を最もよくカバーするドナーを特定し、その後、分析された患者の少なくとも９５％をカバーするパネルが得られるまで、このドナーおよび適応した患者の両方をさらなる検討から除いた。この手順をその後、患者が２つ以上の可能性ドナー選択肢を有するであろうことを保証にするために、もう一度繰り返した。このモデルを使用したとき、８名の首尾よく選択されたドナーのみが、少なくとも２つのＨＬＡ抗原で適合するＴ細胞製造物を患者集団の９５％超にもたらすであろうことが見出された；ドナープールをさらに大きくしても、適合数は著しく増大しないであろう。その後、これらドナーの８名を、同種ＨＳＣＴレシピエントのこの多様な集団の２：９５％に対する確認されたＣＭＶ活性を有する適用範囲好適なＣＭＶＳＴ株（２：２の共有ＨＬＡ抗原）を提供する目的とともに選択した。

第三者ＣＭＶＳＴバンクの調製：すべてのドナーがＩＲＢ承認プロトコルについて書面によるインフォームドコンセントを与え、血液バンク適格性基準を満たした。製造のために、１単位の血液を末梢血採血によって集め、ＰＢＭＣをフィコール勾配によって単離した。１０×１０６個のＰＢＭＣを、ガス透過性材料から構成される底部と、培地を１０ｃｍまでの高さで収容する本体とを含むＧ－Ｒｅｘ５バイオリアクター（ＷｉｌｓｏｎＷｏｌｆ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）に播種し、８００Ｕ／ｍｌのＩＬ４および２０ｎｇ／ｍｌのＩＬ７（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）、ならびにＩＥ１ペプミックス、ｐｐ６５ペプミックス（２ｎｇ／ペプチド／ｍｌ）（ＪＰＴＰｅｐｔｉｄｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｂｅｒｌｉｎ、ドイツ）を含有するＴ細胞培地［改良型ＲＰＭＩ１６４０（ＨｙＣｌｏｎｅＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓＩｎｃ．、Ｌｏｇａｎ、Ｕｔａｈ）、４５％のＣｌｉｃｋ’ｓ（ＩｒｖｉｎｅＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＳａｎｔａＡｎａ、ＣＡ）、２ｍＭのＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）］ＴＭ－Ｉ（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ＧｒａｎｄＩｓｌａｎｄ、ＮＹ）、および１０％のウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）］において培養した。開始後９～１２日目に、Ｔ細胞を採取し、計数し、Ｇ－Ｒｅｘ－１ＯＯＭにおいてＩＬ４（８００Ｕ／ｍｌ）およびＩＬ７（２０ｎｇ／ｍｌ）とともに、自己のペプミックスパルス刺激された放射線照射ＰＢＭＣ［１：４のエフェクター：標的（Ｅ：Ｔ）、すなわち、４×１０５個のＣＭＶＳＴ：１．６×１０６個の放射線照射ＰＢＭＣ／ｃｍ２］により再刺激した。培養の３～４日目に、細胞に２００ｎｇ／ｍｌのＩＬ２（ＰｒｏｍｅｔｈｅｕｓＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ）を与え、２回目の刺激を行った９～１２日後に、Ｔ細胞を凍結保存のために採取した。凍結保存時において、それぞれの株を微生物学的に試験し、免疫表現型を決定し［ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２５、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４５、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ５６、ＣＤ６２ＬＣＤ６９、ＣＤ８３、ＨＬＡＤＲおよび７ＡＡＤ（ＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎ、ＦｒａｎｋｌｉｎＬａｋｅｓ、ＮＪ）］、ＩＦＮｙ酵素結合免疫スポット（ＥＬＩＳｐｏｔ）アッセイによってウイルス特異性について評価した。反応性細胞の頻度が、ＩＦＮｙＥＬＩＳｐｏｔアッセイによって測定された場合、２×１０５個の入力ウイルス特異的Ｔ細胞あたり３０超のスポット形成細胞（ＳＦＣ）であったとき、細胞株を「反応性である」と定義した。

臨床試験設計：これは、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）からのＩＮＤの下で実施され、かつベイラー医科大学施設内審査委員会（ＩＲＢ）によって承認される単一施設第Ｉ相研究（ＮＣＴ０２３１３８５７）であった。本研究は、ガンシクロビル、ホスカメット（ｆｏｓｃａｍｅｔ）またはシドホビルによる処置として定義される標準的治療にもかかわらず、少なくとも７日間にわたって持続していたＣＭＶ感染またはＣＭＶ疾患を有する同種ＨＳＣＴレシピエントを対象とした。除外基準には、プレドニゾン（または同等物）の２：０．５ｍｇ／ｋｇによる処置、酸素飽和度が室内空気で９０％未満である呼吸不全、他の抑制されていない感染、および活動性ＧＶＨＤグレードＩＩが含まれた。ＡＴＧ、Ｃａｍｐａｔｈ、他のＴ細胞免疫抑制モノクローナル抗体、またはドナーリンパ球注入（ＤＬＩ）を投与予定日の２８日以内に受ける患者もまた、参加から除外された。患者は最初に、（２：２の共有ＨＬＡ抗原を有する）好適なＶＳＴ株について検索することに同意した。利用可能であれば、また、患者が適格性基準を満たすならば、患者は研究の処置部分に登録することができるであろう。それぞれの患者が、４週間後での第２の注入およびその後における隔週間隔でのさらなる注入を受ける選択肢とともに、２×１０７個／ｍ２の部分的ＨＬＡ適合ＶＳＴの単回静脈内注入を受けた。標準的な抗ウイルス薬物療法による治療を処置医の自由裁量で施すことができるであろう。

安全性エンドポイント：この試験的研究の主目的が、持続するＣＭＶ感染／疾患を有するＨＳＣＴレシピエントにおけるＣＭＶＳＴの安全性を判定することであった。毒性をＮＣＩ有害事象共通用語規準（ＣＴＣＡＥ）（バージョン４．Ｘ）によって段階分けした。安全性エンドポイントには、最後のＣＭＶＳＴ投与の４２日以内での急性ＧｖＨＤグレードＩＩＩ～ＩＶ、注入の２４時間以内での注入関連毒性、または最後のＣＭＶＳＴ投与の２８日以内にＴ細胞製造物に関連づけられ、かつ、既存の感染、元々の悪性腫瘍または既存の併存症に起因し得ると考えられないグレード３～５の非血液学的有害事象が含まれた。急性および慢性のＧＶＨＤを、存在するならば、標準的な臨床定義に従って段階分けした（１、２）。研究は、ＤａｎＬ．ＤｕｎｃａｎＣａｎｃｅｒＣｅｎｔｅｒデータ審査委員会によってモニターされた。

治療成績の評価：末梢血におけるＣＭＶ量を、臨床検査室改善修正法（ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔＡｍｅｎｄｍｅｎｔｓ）（ＣＬＩＡ）認可の検査室において定量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）によってモニターした。処置に対するウイルスの完全奏効（ＣＲ）を、ｑＰＣＲによる検出閾値未満へのウイルス量における低下、ならびに（ベースラインで存在したならば）組織疾患の臨床的な徴候および症状の消散として定義した。部分奏効（ＰＲ）を、ベースラインからの少なくとも５０％のウイルス量における低下として定義した。臨床応答およびウイルス学的応答をＣＭＶＳＴ注入後６週目において割り当てた。

免疫モニタリング：ＥＬＩＳｐｏｔ分析を、ＩＦＮγをＣＭＶ抗原およびＣＭＶペプチドに対する応答で分泌する循環Ｔ細胞の頻度を求めるために使用した。臨床サンプルを、注入前、ならびに注入後の１週目、２週目、３週目、４週目、６週目および１２週目に集めた。陽性コントロールとして、ＰＢＭＣをブドウ球菌エンテロトキシンＢ（１μｇ／ｍｌ）（Ｓｉｇｍａ－ＡｌｄｒｉｃｈＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＳｔＬｏｕｉｓ、ＭＯ）により刺激した。ＩＥ１ペプミックスおよびｐｐ６５ペプミックス（ＪＰＴＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｂｅｒｌｉｎ、ドイツ）を１０００ｎｇ／ペプチド／ｍｌに希釈して、注入後のドナー由来ＣＭＶＳＴを追跡するために使用した。入手可能なときには、既知のエピトープを表すペプチド（ＧｅｎｅｍｅｄＳｙｎｔｈｅｓｉｓＩｎｃ．、ＳａｎＡｎｔｏｎｉｏ、ＴＸ；１２５０ｎｇ／ｍｌに希釈）もまた、ＥＬＩＳｐｏｔアッセイにおいて使用した。ＥＬＩＳｐｏｔ分析のために、ＰＢＭＣをＴ細胞培地において５×１０^６個／ｍｌで再懸濁し、９６ウエルＥＬＩＳｐｏｔプレートに播種した。それぞれの条件を二連で行った。２０時間のインキュベーションの後、プレートを以前に記載されるように発色させ、暗所において室温で一晩乾燥させ、その後、定量化のためにＺｅｌｌｎｅｔＣｏｎｓｕｌｔｉｎｇ（ＮｅｗＹｏｒｋ、ＮＹ）に送った。インターフェロン－γ（スポット形成細胞（ＳＦＣ）および投入細胞数をプロットし、それぞれの抗原に対して特異的なＴ細胞の頻度を投入細胞数あたりの特異的ＳＦＣとして表した。

統計学的分析：記述統計学を、データを要約するために計算した。抗ウイルス応答を要約し、応答率を正確な９５％二項信頼区間とともに推定した。ウイルス量およびＴ細胞頻度のデータを、経時的な免疫応答のパターンをグラフにより例示するためにプロットした。注入の前後でのウイルス量およびＴ細胞頻度における変化の比較を、ウィルコクソン符号順位検定を使用して行った。データをＳＡＳシステム（Ｃａｒｙ、ＮＣ）（バージョン９．４）およびＲ（バージョン３．２．１）により分析した。０．０５未満のＰ値を、統計学的に有意であると見なした。

結果

第三者ＣＭＶＳＴバンク：ＣＭＶＳＴのバンクを、移植集団の多様なＨＬＡプロフィルを表すために選ばれる８名のＣＭＶ血清陽性ドナーから作製した（表１）。中央値で７．７×１０^８個のＰＢＭＣ（４．６～８．８×１０^８個の範囲）を一回の採血（４２５ｍｌの中央値）から単離した。ＣＭＶＳＴを拡大するために、ＰＢＭＣをｐｐ６５およびＩＥ１に広がるペプミックスにさらし、２０日間にわたって培養すると、１０２±１２の平均拡大倍数（図３Ａ）が達成された。得られた細胞はほぼＣＤ３＋だけであり（９９．３±０．４％）、セントラルＣＤ４５ＲＡ－／６２Ｌ＋のメモリーマーカー（５８．５±４．８％）およびエフェクターＣＤ４５ＲＡ－／６２Ｌ－のメモリーマーカー（３５．３±４．６％）を発現するＣＤ４＋サブセット（２１．３±７．５％）およびＣＤ８＋サブセット（７４．７±７．８％）の両方を含んでいた（図３Ｂ）。８つすべての株が、刺激しているＣＭＶ抗原に対して反応性であった（ＩＥ１、２×１０^５あたり４１９±１００のＳＦＣ；およびｐｐ６５、１０６９±２３０、図３Ｃ）。表１には、細胞株の特徴が要約される。これら８株のうち、６つの製造物を１０名の処置研究患者に投与した。

スクリーニング：ＣＭＶ感染を有する２９名の同種ＨＳＣＴレシピエントがそれらの一次ＢＭＴ提供者によって研究参加のために照会され、８株のバンクから、好適な製造物（２／８の最小ＨＬＡ適合閾値）が２８症例における注入のために特定された（９６．６％；９５％ＣＩ：８２．２％～９９．９％）。２／８のＨＬＡ適合閾値が、そのようなＨＬＡ適合製造物の投与に関連する臨床的利益を明らかにした以前の第三者研究に対して行われる遡及的分析に基づいて確立された。ＨＬＡクラスＩまたはＨＬＡクラスＩＩが適合することは、治療成績に影響しないようであった。注目すべきことに、本研究に関しては、ほとんどの製造物が４つ以上の抗原で適合した（図１Ｄ）。利用可能な株による２８名の患者のうち、１７名の患者が標準的な抗ウイルス処置に応答したため、これらの患者は細胞を受けず、また、１名の患者が、最近のＤＬＩのために不適格であった。

処置患者の特徴：持続感染のために処置される１０名の患者（小児、ｎ＝７；および成人、ｎ＝３）の特徴が表２に要約されており、２名のアフリカ系アメリカ人レシピエント、ラテンアメリカ系白人起源の３名の患者、および５名の非ラテンアメリカ系白人レシピエントが含まれた。１０名の患者のうちの３名に、ウイルス関連疾患が確認された［ＣＭＶ網膜炎（ｎ＝１）、ＣＭＶ大腸炎に起因すると考えられる下痢（ｎ＝２）］。ＣＭＶＳＴ（２～６／８のＨＬＡ抗原において適合する）を移植後４６日目～３６５日目の間（中央値で１３３日目）で投与した。７名の患者が、中央値で２４日間（平均で４８日間；１４日～２１１日の範囲）の標準的な抗ウイルス処置に対して不応性である感染を有し、３名の患者が、従来の抗ウイルス剤に対する耐性を与える変異を有するウイルスを保有した。免疫療法介入の前に、これらの患者のうちの６名が、急性腎傷害（ｎ＝４）、ホスカルネット誘発腎性尿細管障害（ｎ＝１）、および重度のホスカルネット関連膵炎（ｎ＝１）を含む、従来の抗ウイルス剤に関連する重度の有害事象（ＳＡＥ）を経験したことがあり、このため、３例では、どのような薬物であれ従来の薬物によるさらなる処置が不可能であった。

臨床での安全性：すべての注入が十分に許容された。一過性の単独発熱を注入の８時間後に発症した１名の患者を除いて、即時毒性が何ら認められなかった。１名の患者が軽度の斑状丘疹状皮疹を体幹に発症し、しかし、これは、ウイルス性発疹を示唆しているように見えたが、局所的または全身的な処置によることなく数日以内に自然に消散した。サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）または注入ＣＭＶＳＴに関連づけられる他の毒性の症例が何ら認められず、患者の誰もが、移植不全、自己免疫性溶血性貧血、または移植に伴う微小血管障害を発症しなかった。患者を急性ＧｖＨＤについては６週間にわたって、慢性ＧｖＨＤについては１２ヶ月間にわたって追跡した。患者と注入細胞との間におけるＨＬＡ不一致にもかかわらず、急性ＧｖＨＤの前歴［グレードＩＩ（ｎ＝２）またはＩＩＩ（ｎ＝１）］を有する３名の患者を含めて、患者の誰もが、処置後の再発したＧｖＨＤあるいは新規急性ＧｖＨＤまたは慢性ＧｖＨＤを発症しなかった（表３）。

臨床応答：注入された１０名すべての患者がＣＭＶＳＴに応答し、７名がＣＲ者であり、３名がＰＲ者であり、６週目までの累積奏効率が１００％であった（９５％ＣＩ：６９．２～１００．０％）。６週目における平均血漿中ウイルス量減少が８９．８％（＋／－２１．４％）であった。図４には、逐次ウイルス量測定に基づくすべての処置患者のウイルス学的治療成績が要約される。注目すべきことに、臨床的利益が、不応性感染の患者においてだけでなく、組織疾患［ＣＭＶ網膜炎（ｎ＝１）、ＣＭＶ大腸炎に起因すると考えられる下痢（ｎ＝２）］を有する３名の個体においても達成された。

８名の患者がＣＭＶＳＴの単回注入を受け、１名（３９７６）がＣＭＶＳＴの２回の注入を有し、１名（４２０１）がＣＭＶＳＴの３回の注入を有した。患者３９７６がＣＲを６週目に有し、しかし１０週目にはウイルス量を増大させるとともに再発した。１回目の注入の８０日後に、患者は、持続したＣＲをもたらした同じＣＭＶＳＴ株による第２の注入を受けた。患者４２０１は、最初の投与の２８日後に同じＣＭＶＳＴの第２の注入を受けたが、応答することができず、そのため、２週間後、異なるＣＭＶＳＴ株による第３の注入が施され、持続したＣＲが達成された。これらの患者において達成される臨床応答およびウイルス学的応答には、１０名の処置患者のうちの８名において、ウイルス反応性ＣＭＶＳＴにおける増大が伴った［５×１０^５個のＰＢＭＣあたり、注入前の平均で１２６±８４のＳＦＣから、４４３±１７８のピークへの増大（ｐ＝０．０２３；図５Ａ）］。

Ｔ細胞の持続性：ＣＭＶＳＴ注入が、これらの患者において見られる保護効果に寄与するかどうかを評価するために、また、これらの部分的ＨＬＡ適合ＶＳＴのインビボ寿命を評価するために、ＣＭＶＳＴの特異性を、注入株に拘束されるＨＬＡ拘束エピトープペプチドを使用して注入前後の患者ＰＢＭＣにおいて調べた。確認された第三者起源の機能的Ｔ細胞が、ＨＬＡ拘束性ペプチド試薬が利用可能である５名の患者で検出され、この機能的Ｔ細胞は最大で１２週間にわたって持続した。８名すべての患者において、患者とＣＭＶＳＴ株との間で共有されるＨＬＡ対立遺伝子によって拘束される抗ウイルス応答（図５Ｂ）が認められた。したがって、注入されたＣＭＶＳＴは、ＣＭＶ感染の抑制をもたらす抗ウイルス効果を誘導したことが推測された。

第Ｉ相試験において、第三者ＣＭＶＳＴを、ガンシクロビルおよび／またはホスカルネットによる少なくとも１４日間の処置に失敗した、あるいは標準的な抗ウイルス薬物療法を許容することができなかった同種ＨＳＣＴレシピエントにおけるＣＭＶ感染／疾患を処置するために投与した。注目すべき除外基準が、活動性ＧｖＨＤを有する、あるいは中程度の用量または高用量のコルチコステロイドを受ける患者であった。ＣＭＶＳＴのバンクを、人種的および民族的に多様な同種ＨＳＣＴ患者集団に対する幅広い適用範囲を提供するためにＨＬＡプロフィルに基づいて慎重に選択された８名ちょうどの健常者ドナーから作製した。実際、研究参加のためにスクリーニングされた２９名の患者のうち、２８名のための好適な株（少なくとも２つの共有ＨＬＡ抗原閾値）（９６．６％；９５％ＣＩ：８２．２～９９．９％）が特定され、これにより、広い患者適用範囲を小規模な精選された細胞バンクに提供することの実現可能性が証明された。これら２８名の患者のうち、多様な背景からの１０名（２名のアフリカ系アメリカ人、ラテンアメリカ系白人起源の３名、および５名の非ラテンアメリカ系白人）が処置され、すべてが、急性ＧｖＨＤまたは慢性ＧｖＨＤあるいは他の毒性を経験することなくウイルス学的利益および臨床的利益を達成した。このことは注目すべきことであった：これは、６人が、急性腎傷害、腎性尿細管障害および膵炎を含めて従来の抗ウイルス剤に関連づけられる重篤な有害事象を以前に経験していたからであった。この第Ｉ相試験では、小規模な、慎重に設計されたドナーバンクを供給源とする第三者のウイルス反応性Ｔ細胞を不応性ＣＭＶ感染の処置のために投与することに伴う安全性および臨床的利益が示された。

疾患割合がここ数十年で減少しているにもかかわらず、ＣＭＶは依然として、同種ＨＳＣＴの後における病的状態の主な原因である；９４６９名の患者［ＡＭＬ（ｎ＝５３１０）、ＡＬＬ（ｎ＝１８８３）、ＣＭＬ（ｎ＝１０７９）およびＭＤＳ（ｎ＝１１９７）について２００３年から２０１０年までに移植された患者］からのデータが調べられた近年のＣＩＢＭＴＲ報告において、ＣＭＶの再活性化が、より高い非再発死亡率、同様にまた、４つすべての疾患カテゴリーの中でのより低い全生存と関連していた。そのうえ、２００８年～２０１３年の間で移植された２０８名の患者の近年の研究では、院内滞在の平均長さが、ＣＭＶ再活性化を有する患者では２６日長引くことが見出され、一方、２回以上のＣＭＶ再活性化エピソードの発生は同種ＨＳＣＴの費用を２５～３０％増大させ（ｐ＜０．０００１）、このことはＣＭＶ管理の経済的負担を浮き彫りにした。

ホスカルネットおよびガンシクロビルが、ＨＳＣＴ後のＣＭＶ感染症を処置するために頻繁に使用されている。しかしながら、ＣＭＶ網膜炎のためのガンシクロビルを除いて、それらの使用は適用外であり、両方の薬物には、著しい副作用、特に腎疾患および移植片抑制が伴う。予防的に使用されたとき、レテルモビル（サイトメガロウイルスＤＮＡターミナーゼ複合体の阻害剤）は移植後のＣＭＶ感／再活性化の発生率を低下させた（６）が、２０１７年に（成人ＨＳＣＴ患者におけるＣＭＶ予防のために）ＦＤＡ承認されてからは高リスク患者においてますます使用されている。しかしながら、学際的なＣＭＶ薬物開発フォーラムのＣＭＶ耐性作業部会は、ＣＭＶブレークスルー感染が生じたならば、レテルモビルのより広範な予防的使用は、従来の抗ウイルス剤に対して耐性である生物の出現を増大させるであろうと予想している。実際、レテルモビル耐性ＣＭＶ株がますます報告されており、耐性疾患を有する患者における臨床成績は不良であり、その臨床成績には進行性組織疾患および死亡が伴っている。

ＣＭＶＳＴは、本発明者らのグループなどによって以前に報告されたように、初期の再活性化と、同様にまた薬物耐性ウイルス株との両方を標的とするための代替戦略を提供する。実際、本研究においてＣＭＶＳＴにより処置される患者の３０％が、１つまたは複数の従来の抗ウイルス剤に対して耐性であることが確認されるウイルス株に感染した。

本研究の１つの目的が、処置のために照会される同種ＨＳＣＴレシピエントの大多数をカバーするための十分な多様性を有するＣＭＶ特異的Ｔ細胞バンクを調製することであった。したがって、６００名を超える同種ＨＳＣＴレシピエントのＨＬＡ型を、ＣＭＶＳＴを作製することができるであろう多様な健常者適格（ＣＭＶ血清陽性）ドナーのプールと将来を見越して比較して、十分に適合した製造物を患者に提供するであろう最小コホートを特定した。このモデルを使用したとき、８名の首尾よく選択されたドナーのみが、少なくとも２つのＨＬＡ抗原で適合するＴ細胞製造物を患者集団の９５％超にもたらすであろうことが見出された；ドナープールをさらに大きくしても、適合数は著しく増大しないであろう。本研究では、好適な株が、臨床参加のためにスクリーニングされる２９名の患者のうちの２８名（９６．５％）について特定されたので、本研究は、そのようなドナーバンクは同種ＨＳＣＴ患者集団の大多数を効果的に満たすことができるであろうという理論を裏づけている。

人種的および民族的な多様性を米国の移植集団の多様性を有する移植患者集団内で比較した（表４）。これにより、本発明者らの患者集団における多様性が、米国集団よりもわずかに多様でないにしても類似していることが明らかにされた。このことは、現在の研究のために開発された小規模の細胞バンクが国中の臨床使用のために広く適用され得るであろうことを示唆している。試験されたＣＭＶＳＴの様々な移植センターにわたる一般的使用が、２，０００回を超える注入のための細胞をただ１つのドナーコレクションから作製するための十分な材料を産生することができることによってより実現可能になる。したがって、細胞が需要に応じて利用できることを保証する、「既製の」第三者ウイルス反応性Ｔ細胞の分散化配送モデルが想定され得るであろう。

要約すると、データは、８名ちょうどの首尾よく選定された第三者ドナーから調製されるＣＭＶ反応性Ｔ細胞の十分に特徴づけられたバンクが、安全かつ効果的な抗ウイルス活性をもたらすことができる適切に適合した株を不応性ＣＭＶ感染の患者の大多数に供給することができることを示している。

実施例２．第三者Ｔ細胞の予防活性：ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ後の感染症防止のためのマルチウイルス特異的Ｔリンパ球
健常個体では、Ｔ細胞免疫により、ＢＫＶおよび他のウイルスから防御されている。ａｌｌｏ－ＨＳＣＴレシピエントでは、強力な免疫抑制措置の使用（およびその後の関連する免疫低下）が患者を重症のウイルス感染にかかりやすくさせている。したがって、本発明者らのアプローチは、移植患者自身の免疫系が復活するまでの期間にわたってウイルス感染を抑制し、症状を排除するためのエクスビボ拡大された遺伝子非改変のウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）を投与することによってＴ細胞免疫を復活させることである。この目的を達成するために、本発明らは、予備スクリーニングされた血清陽性健常者ドナーから入手される末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）に由来するＶＳＴで、部分的にＨＬＡ適合した「既製の」製造物として利用可能であるＶＳＴを将来を見越して製造している。Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍは１つのそのような「既製の」製造物である。

Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍは、５つのウイルス［ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＢＫＶおよびヒトヘルペスウイルス６型（ＨＨＶ６）］に対して特異的である。ドナーミニバンクを、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞株を作製するために実施例１に記載されるように構築した。本発明者らの目的が、処置のために照会される同種ＨＳＣＴレシピエントの大多数をカバーするための十分な多様性を有するミニバンクを調製することであった。

Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ製造プロセスは、国際公開ＷＯ２０１３／１１９９４７、およびＴｚａｎｎｏｕ他、ＪＣｌｉｎＯｎｃｏｌ．２０１７Ｎｏｖ１；３５（３１：３５４７－３５５７（これらのそれぞれがその全体において参照によって本明細書中に組み込まれる）に本発明者らによって以前に記載される通りであった。その概略が図２に示される。簡単に記載すると、ＰＢＭＣを血清陽性健常者ドナーから単離し、２５０×１０^６個のＰＢＭＣを、完全培地、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ抗原（アデノウイルス、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶおよびＨＨＶ６）をカバーするペプミックス、ＩＬ－４およびＩＬ－７の存在下、５％のＣＯ_２において３７℃でおよそ７～１４日間、Ｇ－Ｒｅｘ１００Ｍ培養システム（ＷｉｌｓｏｎＷｏｌｆ、ＳａｉｎｔＰａｕｌ、ＭＮ）において培養した（だが、培養時間はいくつかの場合には１８日前後にまで増やされることがある）。培養後、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞株を採取し、洗浄し、品質管理試験で使用するまで、または治療剤として使用するまでの液体窒素中での凍結保存のために小分けした。

Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍを、ＶＳＴが処置不応性感染の５８名の同種ＨＳＣＴ患者に投与される第２相非盲検概念実証試験において評価した。この試験は本明細書中ではＣＨＡＲＭＳとして示される。優位性または有意性について統計学的に強化されなかったが、ＣＨＡＲＭＳの主目的は、５つのウイルスに対して特異的な部分的ＨＬＡ適合マルチＶＳＴ療法を、ウイルス再活性化またはウイルス感染が持続しているＨＳＣＴ患者において施すことの実現可能性および安全性を判定することであった。患者は、標準的な抗ウイルス療法にもかかわらず再発する、再活性化される、または持続しているＢＫＶ感染、ＣＭＶ感染、ＡｄＶ感染、ＥＢＶ感染、ＨＨＶ－６感染および／またはＪＣＶ感染を有するならば、どのようなタイプの同種移植であれその後で適格であった。

マルチウイルス特異的Ｔ細胞（Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ）の同種反応可能性を評価するために、本発明者らは最初に、それぞれのウイルスに由来する免疫原性抗原に広がるペプチド混合物によりＰＢＭＣを直接に活性化した：Ａｄｖ（ヘキソンおよびペントン）、ＣＭＶ（ＩＥ１およびｐｐ６５）、ＥＢＶ（ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１、ＢＺＬＦ１）、ＢＫウイルス（ＶＰ１およびラージＴ）、およびＨＨＶ６（Ｕ９０、Ｕ１１およびＵ１４）。その後、細胞を、ＩＬ４＋７が補充されるＴ細胞培地においてＧ－Ｒｅｘデバイスに移し、ＨＬＡ非適合標的に対するその細胞傷害活性を評価した。これらの細胞は最小限の同種反応性を示し／検出可能な同種反応性を何ら示さず、このことは、「既製の」部分的ＨＬＡ適合製造物として投与されたときのこれらの細胞の潜在的安全性を裏づけた。

続いて、本発明者らは、部分的ＨＬＡ適合Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞の安全性および臨床効果を同種ＨＳＣＴ後の小児および成人における不応性ウイルス感染の処置のために詳しく調べた（Ｔｚａｎｎｏｕ他、ＪＣＯ、２０１７）。すべての注入が十分に許容された。注入の２４時間以内に一過性発熱を生じさせた３名の患者およびリンパ節痛を生じさせた１名を除いて、急性毒性が認められなかった。患者の誰もがサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を発症しなかった。注入後の続く数週間において、１名の患者が再発のグレードＩＩＩの胃腸（ＧＩ）ＧＶＨＤを急速なステロイド減量の後で発症し、８名の患者が再発（ｎ＝４）または新規（ｎ＝４）のグレードＩ～ＩＩの皮膚ＧＶＨＤを発症し、しかし、これらは局所的処置の投与により消散し（ｎ＝７）、減量後のコルチコステロイドの再開により消散した（ｎ＝１）。

評価可能なデータをもたらした５２名の処置患者における６０例の感染について、累積臨床奏功率が、下記で要約されるように、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ注入後６週目までに９３％であった：
● ＢＫＶ：２２名の患者が持続性ウイルスＢＫＶ感染および組織疾患の処置のためにＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを受けた（２０名がＢＫ出血性膀胱炎を有し、２名がＢＫＶ関連腎炎が有した）。２０名すべてのＢＫ－ＨＣ患者が、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍを受けた後で臨床症状の消散を有し、９名が完全奏効（ＣＲ）であり、１１名が部分奏効（ＰＲ）であり、６週間累積奏功が１００％であった。
● ＣＭＶ：２０名の患者が持続性ＣＭＶのためにＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを受けた。１９名の患者がＶｉｒａｌｙｍ－Ｍに応答し、７名がＣＲであり、１２名がＰＲであり、１名が非奏功者（ＮＲ）であり、６週間累積奏功率が９５％であった。奏功者には、大腸炎の３名の患者のうちの２名、および脳炎の１名の患者が含まれた。
● ＡｄＶ：１１名の患者が持続性ＡｄＶのためにＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを受け、注入は、７名のＣＲ、２名のＰＲ、および２名のＮＲをもたらし、６週間累積奏効率が８１．８％であった。
● ＥＢＶ：３名の患者が持続性ＥＢＶの処置のためにＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを受けた。２名の患者がウイルス学的ＣＲを達成し、１名の患者がＰＲを達成した。
● ＨＨＶ６：４名の患者（不応性脳炎の１名の患者を含む）が、ＨＨＶ６再活性化を処置するためにＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを受け、３名の患者が注入の６週間以内にＰＲを有し（脳炎の患者を含む）、一方で、１名が処置に応答しなかった。
● 二重感染：８名の患者が２つのウイルス感染のためにＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを受け、全体的経験で、１回だけの注入の後において１２名がＣＲであり、４名がＰＲであった。ＣＭＶ、ＡｄＶおよびＥＢＶがすべての症例で排除され、ＢＫＶＨＣの全患者が臨床的改善（ｎ＝３）または疾患消散（ｎ＝２）を有し、ＨＨＶ６脳炎の患者もまた臨床的改善を有した。

本発明者らは、臨床的有効性に関連するＨＬＡ適合の閾値があるかどうかを明らかにするために、本発明者らの第Ｉ／ＩＩ相Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ研究から利用可能なデータを調べた。本発明者らの臨床試験に関して、臨床使用される製造物は、ＨＬＡ対立遺伝子が１／８で適合し（ｎ＝２）、２／８で適合し（ｎ＝１０）、３／８で適合し（ｎ＝１１）、４／８で適合し（ｎ＝１４）、５／８で適合し（ｎ＝１４）、６／８で適合し（ｎ＝４）、または７／８で適合した（ｎ＝５）。臨床成績およびＨＬＡ適合度との相関があるかどうかを明らかにするために、本発明者らは、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）、および非奏効者（ＮＲ）に患者を分け、しかし、図３５に要約されるように、結果は、ＨＬＡ適合する対立遺伝子の数に基づく治療成績には差が何ら認められなかったことを示唆する。

次に、ＨＬＡクラスＩのみ、クラスＩＩのみ、または両者の組み合わせで適合する株の投与に基づく治療成績において差があるかどうかを調べた。注目すべきことに、大多数の患者が、クラスＩ対立遺伝子およびクラスＩＩ対立遺伝子の両方で適合する株を受けた。再度であるが、結果は、治療成績が対立遺伝子適合度によって影響されなかったことを示唆する。

そのうえ、重要なことに、ＣＨＡＲＭＳ研究では、たとえ第２の株が非常に非適合であるにしても、１つ超の異なるＶＳＴ製造物（Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ）を投与することが安全かつ有効であることが明らかにされた。例を挙げれば、Ｔｚａｎｎｏｕ（２０１７）において報告されるように、幾人かの患者が、有益な応答とともに２つの別個の細胞株の投与を受けた：

そのうえ、下記において表６（Ｔｚａｎｎｏｕ（２０１７）からの改変）に示されるように、少なくとも２つの細胞株の投与を受けたこれらの患者は処置の６週目までのＧＶＨＤまたは処置の１年以内のｃＧＶＨＤを全くまたはほとんど示さなかった。

したがって、この第Ｉ／ＩＩ相データからのこれらの結果は、９５％を超える患者が、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で適合する製造物を受け、この製造物が臨床的利益に関連したことを明らかにした。ＨＬＡクラスＩまたはクラスＩＩでの適合は治療成績に影響しないように思われ、かつ、細胞の安全性プロフィルに影響せず、または、２つ以上の細胞株を所与の患者に投与するは、第２の株が非常に非適合であるときでさえ、影響がなかった。

その後、データを、第三者Ｔ細胞が予防的可能性を有するという証拠について調べた。

最初に、患者が再活性化しなかったウイルスに対抗する特異性を有する第三者ＶＳＴの持続性が、合計で４名の患者において確認された。例を挙げれば、１名の患者（処置のために使用されるＶＳＴ株と２つの対立遺伝子でＨＬＡ適合する患者；表７を参照のこと）を、ＢＫＨＣのために処置した。注入されるＶＳＴ株は、ＨＬＡ－Ａ２（共有対立遺伝子）の関連で媒介されるＢＫＶ活性およびＣＭＶ活性を有した。ＶＳＴの持続性を、ＤＲ３（ＶＳＴ株に特有である）の関連で提示される免疫応答を分析することによって追跡した。内因性免疫再構成を、Ｂ４０およびＤＲ１３（患者に特有の対立遺伝子）によって提示されるペプチドに対する免疫応答を追跡することによってモニターした。

注入後４週間においてさえ、ＣＭＶ特異的であったが、ＨＬＡ－Ａ２の関連で提示されるペプチドに対抗するペプチド特異的免疫応答を検出することができた。（図６）。ＤＲ３の関連におけるＣＭＶ特異的応答もまた検出することができ、このことは、第三者ＶＳＴが存在することを示していた（図６）。したがって、この研究は、驚くべきことに、ＢＫＨＣのために処置されている患者における第三者ＶＳＴの注入により、ＣＭＶ再活性化が防止される予防的ＣＭＶ適用範囲がもたらされることを示した。類似するパターンが、下記において詳細に記載されるようにさらなる患者において認められ、このことから、注入後１２週間までのＶＳＴの完全なインビボ持続性が確認された。

そのうえ、第三者ＶＳＴが、ウイルス再活性化を注入後に経験する患者において検出された。患者は、ＢＫＶＨＣを処置するためにＶＳＴを受けた。その後で、患者はＣＭＶを再活性化した。図７は患者のＢＫ応答を示す。ウイルス量が注入後のＢＫＶ特異的Ｔ細胞の拡大に対応して減少する典型的なプロフィルが観察された（図７）。ＣＭＶ再活性化が、ＶＳＴが注入された２週間後に生じた。ウイルス量およびＴ細胞拡大が図８に示される。ウイルスがＶＳＴ注入後２週間で再活性化するとすぐに、ＣＭＶ特異的Ｔ細胞が応答し、これにより、ウイルスが、他の薬物療法によることなく抑制された。４週目の時点において、第三者ＶＳＴの存在が、上記で議論される持続性分析を使用して確認された。ＣＭＶ特異的細胞が少なくとも１２週目まで残っており、ＣＭＶウイルス量は１２週目までに検出不能であった。

Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ由来Ｔ細胞がレシピエントにおいて持続したというさらなる証拠が図９Ａ～図９Ｅに示される。例を挙げれば、ＢＫ感染のために処置される１名の患者において、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ由来の、ＨＨＶ６およびＥＢＶに特異的なＴ細胞が、注入後少なくとも３週間（試験された最後の時点）まで十分に検出可能であった。この患者で検出されるペプチド反応性はＥＢＶ－ＬＭＰ２のＨＬＡ－Ａ１拘束応答およびＨＨＶ６－Ｕ９０のＨＬＡ－Ａ１拘束応答であった。これらの特異性は、注入された株に特有であり、ＨＬＡ－Ａ１が患者によって発現されなかった。したがって、検出された活性は、少なくとも３週間にわたって持続する注入されたＶＳＴ株に由来した（図９Ａ）。ＢＫ感染のために処置される第２の患者において、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ由来のＣＭＶ特異的Ｔ細胞が、注入後４週間（試験された最後の時点）に至るまで十分に検出された。この患者で検出されたペプチド反応性は、ＣＭＶ－ＩＥ１のＨＬＡ－Ｂ８拘束応答およびＣＭＶ－ｐｐ６５のＨＬＡ－ＤＲ４拘束応答であり、これらの両方が、注入された株に特有であり、ＨＬＡ－Ｂ８またはＨＬＡ－ＤＲ４が患者によって発現されず、したがって、これらのことから、検出された活性が注入ＶＳＴ株に由来することが確認された（図９Ｂ）。ＡｄＶ感染のために処置される１名の患者において、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ由来のＣＭＶ特異的Ｔ細胞が、２回目の注入の後の３週間（試験された最後の時点）に至るまで十分に検出された。検出されたペプチド反応性は、注入された株に特有であるＣＭＶ－ｐｐ６５のＨＬＡ－ＤＲ４拘束応答であり、ＨＬＡ－ＤＲ４が患者によって発現されなかった。したがって、検出された活性は、注入されたＶＳＴ株に由来した（図９Ｃ）。ＡｄＶ感染のために処置される別の患者において、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ由来のＣＭＶ特異的Ｔ細胞が、注入後４週間（試験された最後の時点）に至るまで十分に検出された。検出されたペプチド反応性は、注入された株に特有であるＣＭＶ－ＩＥ１のＨＬＡ－Ｂ８拘束応答であり、ＨＬＡ－Ｈ８が患者によって発現されなかった。したがって、この患者における検出された活性は、注入されたＶＳＴ株に由来した（図９Ｄ）。最後に、ＢＫＶ感染のために処置される別の患者において、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ由来のＣＭＶ特異的Ｔ細胞が、注入後１２週間（試験された最後の時点）に至るまで十分に検出された。検出されたペプチド反応性は、ＣＭＶ－ｐｐ６５のＨＬＡ－ＤＲ４拘束応答およびＨＬＡ－ＤＲ１５拘束応答であり、これらの両方が、注入された株に特有であり、ＨＬＡ－ＤＲ４またはＨＬＡ－ＤＲ１５が患者によって発現されなかった。したがって、活性が少なくとも１２週間にわたって検出可能であり、注入されたＶＳＴ株に由来した（図９Ｅ）。

表８には、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍによる予防的保護の証拠の要約が示される。活性ＢＫＶまたは活性ＡｄＶのためにＶｉｒａｌｙｍ－Ｍにより処置される患者において、ＣＭＶＶＳＴが、示されるように少なくとも３週間、４週間、または１２週間にわたって検出された。上記で議論される患者において、また図７において、さらなる処置によらない再活性化ＣＭＶの排除が達成され、ＣＭＶ特異的ＶＳＴがＶｉｒａｌｙｍ－Ｍ投与後の少なくとも１２週間にわたって検出された。評価される他の４人の患者では、第三者Ｔ細胞が検出されるウイルスの再活性化が生じなかった。

したがって、際立つことに、第三者ＶＳＴの注入は、活動性感染を標的とすることに加えて、まだ存在していないウイルスまたはまだ再活性化されていないウイルスからの予防的保護をもたらす。したがって、第三者ＶＳＴによる組成物および方法は、インビボにおける幅広い保護を予防的に提供するために使用することができる。このことは、何らかの理由で免疫低下している患者にとっては特に重要な臨床的利点である。予防的方法の概略が図１０として示される。

実施例３．第三者ＶＳＴの予防的治療に取り組む臨床試験
臨床的に重要なウイルス感染（ＡｄＶ、ＢＫＶ、ＣＭＶ、ＥＢＶおよびＨＨＶ６）を同種ＨＳＣＴ後の高リスク患者において防止するためのＶｉｒａｌｙｍ－Ｍの第ＩＩ相二重盲検プラセボ対照試験が行われる。研究目的には、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍの機能的Ｔ細胞の持続性；処置を必要とするＡｄＶ感染者、ＢＫＶ感染者、ＣＭＶ感染者、ＥＢＶ感染者および／またはＨＨＶ６感染者における減少、あるいは疾患発症における低下；ドナー生着の成功；移植後１年での総死亡率および非再発死亡率が含まれる。選択基準には、臨床的に重要なウイルス感染について高リスクであるａｌｌｏ－ＨＳＣＴのレシピエント（例えば、非血縁ドナーもしくはハプロタイプ一致ドナーからの骨髄、単一／二重の臍帯血幹細胞または末梢血幹細胞のどれか使用する骨髄破壊的ａｌｌｏ－ＨＳＣＴを受けた患者；Ｔ細胞枯渇移植片を受ける者、または移植後のシクロホスファミドを受ける者として定義されるレシピエント）で、ＡｄＶ、ＢＫＶ、ＣＭＶ、ＥＢＶおよび／またはＨＨＶ６について血清陽性であるレシピエントがどのような年齢であれ含まれる。患者はスクリーニング時に無症候でなければならない。除外基準：コルチコステロイド類による継続中の治療（０．５ｍｇ／ｋｇ／日を超えるプレドニゾン用量、または相当量）；登録のためのスクリーニングの２８日以内での、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ－１Ｈ）または他の免疫抑制性Ｔ細胞モノクローナル抗体による事前治療；ドナーリンパ球注入（ＤＬＩ）またはＣＤ３４＋幹細胞補給を登録のためのスクリーニングの２８日以内に受けた；グレード２を超える急性ＧＶＨＤの証拠；他の進行中の感染の存在（ウイルス性、真菌性または細菌性の起源であり得る；進行中の感染は、敗血症または新たな症状に起因し得ると考えられる血行動態不安定、感染に起因し得ると考えられる悪化する身体的徴候またはＸ線所見として定義される）；脳炎の存在；動脈酸素飽和度を９０％超で維持するために、０．５超のＦｉＯ２が要求されること；ＲＢＣ輸血にもかかわらず、８ｇｍ／ｄＬ未満のヘモグロビン；３０ｍｌ／分／１．７３ｍ２未満の推算糸球体濾過量（ＧＦＲ）として定義される腎機能障害；妊娠または授乳中の女性、および原発性悪性腫瘍の再発。

患者は移植前に同意し、スクリーニングされる。患者が適格性基準を満たすならば、患者は登録され、無作為化される。無作為化後、患者は、２×１０^７個のＶｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞（体重≦４０ｋｇ）または４×１０^７個のＶｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞（体重＞４０ｋｇ）の一定の細胞用量（または）プラセボの注入を、（注入時に適格性基準を満たすならば）移植後２８日目に受ける。患者はウイルス血症およびウイルス尿症についてモニターされ、ならびに／あるいはウイルス特異的第三者ＶＳＴの持続性についてモニターされる。一部の対象が、同じ第三者ＶＳＴおよび／または異なる第三者ＶＳＴの多数回の注入を受ける場合がある。例を挙げれば、患者には、第三者ＶＳＴの第１の投薬が施され、その後、第２の投薬が約６週間後、約８週間後、約１０週間後または約１２週間後に施される場合がある。一部の対象が、試験の継続期間中、および／または患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで第三者ＶＳＴを約６週間毎に、約８週間毎に、約１０週間毎に、または約１２週間毎に受け続ける場合がある。本研究では、第三者ＶＳＴがウイルスによるどのような感染の前であれ、またはウイルスのどのような再活性化の前であれ投与される場合でさえ、ＡｄＶ感染、ＢＫＶ感染、ＣＭＶ感染、ＥＢＶ感染および／またはＨＨＶ６感染が、第三者ＶＳＴの投与により、免疫低下患者において防止され得ることが示されるであろう。

類似の研究が、ＨＨＶ８、ＨＢＶまたはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して特異的な第三者ＶＳＴによる予防的治療を評価するために行われる。検出可能なウイルスを有しない患者に、ＨＨＶ８、ＨＢＶまたはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して特異的な第三者ＶＳＴが投与され、患者がウイルス量について、および／またはレシピエントにおけるウイルス特異的第三者ＶＳＴの持続性についてモニターされる。一部の対象が、示されたウイルスに対して特異的な同じ第三者ＶＳＴおよび／または異なる第三者ＶＳＴの多数回の注入を受ける場合がある。例を挙げれば、患者には、ＨＨＶ８、ＨＢＶまたはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して特異的な第三者ＶＳＴの第１の投薬が施され、その後、第２の投薬が約６週間後、約８週間後、約１０週間後または約１２週間後に施される場合がある。一部の対象が、試験の継続期間中、および／または患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで第三者ＶＳＴを約６週間毎に、約８週間毎に、約１０週間毎に、または約１２週間毎に受け続ける場合がある。本研究では、第三者ＶＳＴがウイルスによるどのような感染の前であれ、またはウイルスのどのような再活性化の前であれ投与される場合でさえ、ＨＨＶ８、ＨＢＶおよびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２がそれぞれ、第三者ＶＳＴの投与により、免疫低下患者において防止され、かつ／または容易に抑制され得ることが示されるであろう。

類似の研究が、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶまたはｈＭＰＶに対して特異的な第三者ＶＳＴによる予防的治療を評価するために行われる。検出可能なウイルスを有しない患者に、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶおよびｈＭＰＶに対して特異的な第三者ＶＳＴを投与し、患者がウイルス量について、および／またはレシピエントにおけるウイルス特異的第三者ＶＳＴの持続性についてモニターされる。一部の対象が、示されたウイルスに対して特異的な同じ第三者ＶＳＴおよび／または異なる第三者ＶＳＴの多数回の注入を受ける場合がある。例を挙げれば、患者には、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶおよびｈＭＰＶに対して特異的な第三者ＶＳＴの第１の投薬の後、第２の投薬が約６週間後、約８週間後、約１０週間後または約１２週間後に施される場合がある。一部の対象が、試験の継続期間中、および／または患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで第三者ＶＳＴを約６週間毎に、約８週間毎に、約１０週間毎に、または約１２週間毎に受け続ける場合がある。例を挙げれば、患者には、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶおよびｈＭＰＶに対して特異的な第三者ＶＳＴの第１の投薬が施され、その後、第２の投薬が６週間後、８週間後、１０週間後または１２週間後に施される場合がある。一部の対象が、試験の継続期間中、および／または患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで第三者ＶＳＴを６週間毎に、８週間毎に、１０週間毎に、または１２週間毎に受け続ける場合がある。本研究では、第三者ＶＳＴがウイルスによるどのような感染の前であれ、またはウイルスのどのような再活性化の前であれ投与される場合でさえ、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶおよびｈＭＰＶがそれぞれ、第三者ＶＳＴの投与により、免疫低下患者において防止され、かつ／または容易に抑制され得ることが示されるであろう。
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スクリーニング：ＣＭＶ感染を有する２９名の同種ＨＳＣＴレシピエントがそれらの一次ＢＭＴ提供者によって研究参加のために照会され、８株のバンクから、好適な製造物（２／８の最小ＨＬＡ適合閾値）が２８症例における注入のために特定された（９６．６％；９５％ＣＩ：８２．２％～９９．９％）。２／８のＨＬＡ適合閾値が、そのようなＨＬＡ適合製造物の投与に関連する臨床的利益を明らかにした以前の第三者研究に対して行われる遡及的分析に基づいて確立された。ＨＬＡクラスＩまたはＨＬＡクラスＩＩが適合することは、治療成績に影響しないようであった。注目すべきことに、本研究に関しては、ほとんどの製造物が４つ以上の抗原で適合した（図３Ｄ）。利用可能な株による２８名の患者のうち、１７名の患者が標準的な抗ウイルス処置に応答したため、これらの患者は細胞を受けず、また、１名の患者が、最近のＤＬＩのために不適格であった。

本発明者らは、臨床的有効性に関連するＨＬＡ適合の閾値があるかどうかを明らかにするために、本発明者らの第Ｉ／ＩＩ相Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ研究から利用可能なデータを調べた。本発明者らの臨床試験に関して、臨床使用される製造物は、ＨＬＡ対立遺伝子が１／８で適合し（ｎ＝２）、２／８で適合し（ｎ＝１０）、３／８で適合し（ｎ＝１１）、４／８で適合し（ｎ＝１４）、５／８で適合し（ｎ＝１４）、６／８で適合し（ｎ＝４）、または７／８で適合した（ｎ＝５）。臨床成績およびＨＬＡ適合度との相関があるかどうかを明らかにするために、本発明者らは、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）、および非奏効者（ＮＲ）に患者を分け、しかし、結果は、ＨＬＡ適合する対立遺伝子の数に基づく治療成績には差が何ら認められなかったことを示唆する（データは示されていない）。

Claims

ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を第三者同種Ｔ細胞療法により防止する方法であって、ポリクローナルな第三者Ｔ細胞株である第１の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に予防的に投与することを含み、前記Ｔ細胞株が１つまたは複数のウイルス抗原に対しての抗原特異性を含み、かつ前記Ｔ細胞株が、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で前記患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を含む、方法。
ウイルス感染または潜在ウイルスの再活性化を第三者同種Ｔ細胞療法により抑制する方法であって、ポリクローナルな第三者Ｔ細胞株である第１の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に予防的に投与することを含み、前記Ｔ細胞株が１つまたは複数のウイルス抗原に対しての抗原特異性を含み、かつ前記Ｔ細胞株が、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で前記患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を含む、方法。
前記患者が、ウイルス感染にかかる危険性または潜在ウイルスの再活性化を有する危険性が一般集団における平均的な人よりも高い、請求項１または請求項２に記載の方法。
前記ウイルス感染が、そのような感染が一般集団における平均的な人にもたらすであろうよりも大きい危険性を前記患者の健康または生命にもたらす、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
前記Ｔ細胞株が投与されたとき、前記患者が活性ウイルス感染の証拠または潜在ウイルスの再活性化の証拠を示さない、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
前記Ｔ細胞株が投与されたとき、前記患者が検出可能なウイルス血症またはウイルス尿症を有しない、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が、１μＬの血液あたりのリンパ球が８００個未満である絶対的リンパ球数を有する、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が内因性Ｔ細胞を欠く、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が、ＡｄＶ、ＢＫＶ、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＨＶ６、ＨＨＶ８、ＲＳＶ、インフルエンザ、ＰＩＶ、ｈＭＰＶＨＢＶ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のいずれか１つまたは複数について血清陽性である、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が前記患者に複数回投与される、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が第１の投与の約４～１２週間後での第２の投与において前記患者に投与される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が前記患者に約４～１２週間毎に投与される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が免疫低下状態であり、前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が、前記患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで前記患者に約４～１２週間毎に投与される、請求項１２に記載の方法。
前記患者には、前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が特異的である抗原に対応するペプチドまたは無欠抗原を含む組成物が投与され、前記ペプチドまたは無欠抗原が、前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株の投与の約４～１２週間後に前記対象に投与される、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
前記組成物がさらにアジュバントを含む、請求項１４に記載の方法。
（ａ）１つまたは複数の第２の抗原特異的Ｔ細胞株を前記患者に投与することをさらに含む、あるいは
（ｂ）２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、または１０のさらに多くの第２の抗原特異的Ｔ細胞株を前記患者に投与することをさらに含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株および前記第２の抗原特異的Ｔ細胞株が前記患者に同時に投与される、請求項１６に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株および前記第２の抗原特異的Ｔ細胞株が前記患者に連続して投与される、請求項１６に記載の方法。
前記１つまたは複数の第２の抗原特異的Ｔ細胞株が前記患者に複数回投与される、請求項１６～１８のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が免疫低下状態であり、前記１つまたは複数の第２の抗原特異的Ｔ細胞株が、前記患者がもはや免疫低下状態でなくなるまで前記患者に約６～１２週間毎に投与される、請求項１９に記載の方法。
少なくとも１つの第２の抗原特異的Ｔ細胞株、場合によってはそれぞれの第２の抗原特異的Ｔ細胞株が、前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株と同じ抗原特異性を含み、しかし異なるドナーから作製される、請求項１６～２０のいずれか一項に記載の方法。
前記患者と、投与されたならば、前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株および／またはどのようなものであれ第２の抗原特異的Ｔ細胞株との間で適合する前記２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子が、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩ対立遺伝子、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子、または少なくとも１つのＨＬＡクラスＩ対立遺伝子および少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子を含む、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
前記ウイルス感染が、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８、ＨＢＶ、ウエストナイルウイルス、ジカウイルスおよびエボラウイルスから選択されるウイルスに由来する、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株および／または前記第２の抗原特異的Ｔ細胞株が、１つだけのウイルスに由来する少なくとも１つの抗原またはその一部分に対しての抗原特異性を含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
前記１つだけのウイルスが、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８、ＨＢＶ、ウエストナイルウイルス、ジカウイルスおよびエボラウイルスから選択される、請求項２４に記載の方法。
前記１つだけのウイルスがＨＢＶまたはＨＨＶ８である、請求項２５に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が、前記１つだけのウイルスに由来する２つ以上の抗原またはその一部分に対しての特異性を含む、請求項２４～２６のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が、少なくとも２つの異なるウイルスに由来する少なくとも１つの抗原またはその一部分に対しての抗原特異性を含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が、１～１０の異なるウイルスに由来する少なくとも１つの抗原またはその一部分に対しての抗原特異性を含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株が、少なくとも２つの異なるウイルスのそれぞれに由来する２～５つの抗原、または少なくとも２つの異なるウイルスのそれぞれに由来する２～５つの抗原の少なくとも一部分に対しての抗原特異性を含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
前記第２の抗原特異的Ｔ細胞株が、１～１０の異なるウイルスに由来する少なくとも１つの抗原またはその一部分に対しての抗原特異性を含む、請求項１３～３０のいずれか一項に記載の方法。
前記第２の抗原特異的Ｔ細胞株が、少なくとも２つの異なるウイルスのそれぞれに由来する２～５つの抗原、または少なくとも２つの異なるウイルスのそれぞれに由来する２～５つの抗原の少なくとも一部分に対しての抗原特異性を含む、請求項１３～３１のいずれか一項に記載の方法。
前記抗原が、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス（ＨＭＰＶ）、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８、ＨＢＶ、ウエストナイルウイルス、ジカウイルスおよびエボラウイルスから選択されるウイルスに由来するウイルス抗原である、請求項１～３２のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞および／または前記第２の抗原特異的Ｔ細胞が、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザおよびＨＭＰＶのウイルスのそれぞれに由来する少なくとも１つの抗原に対しての特異性を含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
前記インフルエンザ抗原が、Ａ型インフルエンザ抗原のＮＰ１、ＭＰ１、およびそれらの組み合わせから選択され、前記ＲＳＶ抗原が、Ｎ、Ｆ、およびそれらの組み合わせから選択され、前記ｈＭＰＶ抗原が、Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１、Ｍ、およびそれらの組み合わせから選択され、前記ＰＩＶ抗原が、Ｍ、ＨＮ、Ｎ、Ｆ、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項３４に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞および／または前記第２の抗原特異的Ｔ細胞が、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＨＨＶ６のウイルスのそれぞれに由来する少なくとも１つの抗原に対しての特異性を含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
前記ＥＢＶ抗原が、ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１、ＢＺＬＦ１、およびそれらの組み合わせから選択され、前記ＣＭＶ抗原が、ＩＥ１、ｐｐ６５、およびそれらの組み合わせから選択され、前記アデノウイルス抗原が、ヘキソン、ペントン、およびそれらの組み合わせから選択され、前記ＢＫウイルス抗原が、ＶＰ１、ラージＴ、およびそれらの組み合わせから選択され、前記ＨＨＶ６抗原が、Ｕ９０、Ｕ１１、Ｕ１４、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項３６に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞および／または前記第２の抗原特異的Ｔ細胞が、ＨＢＶに由来する少なくとも１つの抗原に対しての特異性を含む、請求項１～３３のいずれか一項に記載の方法。
前記第１の抗原特異的Ｔ細胞および／または前記第２の抗原特異的Ｔ細胞が、ＨＨＶ８に由来する少なくとも１つの抗原に対しての特異性を含む、請求項１～３３のいずれか一項に記載の方法。
前記抗原特異的Ｔ細胞が、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で前記患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を有する好適なドナーからの単核細胞を、前記抗原またはその一部分の存在下で培養することによって産生させられる、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
前記抗原特異的Ｔ細胞が、２つ以上のＨＬＡ対立遺伝子で前記患者のＨＬＡ型と適合するＨＬＡ型を有する好適なドナーからの単核細胞を、前記抗原に広がるペプミックス（ｐｅｐｍｉｘ）またはその一部分の存在下で培養することによって産生させられる、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
前記培養することがＩＬ４およびＩＬ７の存在下である、請求項４０または４１に記載の方法。
前記ペプミックスが１５ｍｅｒのペプチドを含む、請求項４２に記載の方法。
前記抗原に広がる前記ペプミックスにおける前記ペプチドが配列において１１アミノ酸によって重複する、請求項４１～４３のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が免疫低下している、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が、疾患または状態を処置するために前記患者が受けた処置に起因して免疫低下している、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
前記処置が、造血幹細胞移植、臓器移植または抗がん剤である、請求項４６に記載の方法。
疾患または状態を処置するために前記患者が受けた前記処置が、強度軽減移植前処置、骨髄破壊的移植前処置、骨髄非破壊的移植前処置、化学療法および免疫抑制薬物からなる群から選択される、請求項４６に記載の方法。
前記患者が年齢に起因して免疫低下している、請求項４５に記載の方法。
前記特許が１歳未満の年齢である、請求項４９に記載の方法。
前記患者が６５歳超の年齢である、請求項４９に記載の方法。
前記対象が免疫不全状態を有する、請求項４５に記載の方法。
前記免疫不全が原発性免疫不全である、請求項４５に記載の方法。
前記対象がＨＩＶ感染を有する、請求項４５に記載の方法。
前記患者が移植治療を必要としている、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が、白血病、骨髄腫またはリンパ腫を有し、造血幹細胞移植治療を必要としている、請求項４５に記載の方法。
前記第１のＴ細胞株ならびに／あるいは１つまたは複数のそれぞれの第２のＴ細胞株が生体内に少なくとも１２週間にわたって持続する、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
前記第１のＴ細胞株ならびに／あるいは１つまたは複数のそれぞれの第２のＴ細胞株が、活動性感染がどのようなものであれ前記患者にない場合、生体内に少なくとも１２週間にわたって持続する、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。