JP2022542802A - 併用がん療法剤および方法 - Google Patents

Abstract

本開示は、一般に、がんを治療するための方法であって、それを必要とする対象に、有効量のＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、または組み合わせを、免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与することを含む、方法に関する。ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、または組み合わせは、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、またはＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、もしくは両方をコードするポリヌクレオチドを含む細胞として投与され得る。一態様において、治療は、低または高変異量腫瘍を有する患者に適している。【選択図】図５Ｃ

Description

政府の利益の声明
本研究は、米国退役軍人省によって支援され、連邦政府は、本発明において一定の権利を有する。

肺がんは、世界中で最も一般的ながんによる死亡原因であり、患者の約８５％は、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を有する。化学－免疫療法併用の最近の承認は、進行したＮＳＣＬＣの治療状況を変化させ、すべての適格な患者は、腫瘍ＰＤ－Ｌ１レベルに関係なく化学療法と組み合わせて、または腫瘍ＰＤ－Ｌ１＞５０％を有する選択された患者における単剤療法のいずれかで、フロントライン環境で抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１免疫療法を受けることができる。このシフトは、フロントライン環境での患者転帰の改善をもたらした［客観的奏効率（ＯＲＲ）は約５５％である］が、満たされていないニーズの領域、すなわちＰＤ－１および／またはＰＤ－Ｌ１阻害剤を投与中の進行後の患者にとって効果的な治療選択肢も生み出した。第二選択化学療法は、これらの患者にとって選択肢であるが、顕著な毒性および限られた有効性と関連づけられる。代替として、進行後のＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１阻害剤による治療は、観察された最小限の臨床的利益で評価されている（ＯＲＲは約８％である）。

試験は、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１遮断に対する応答が、高い腫瘍変異量（ＴＭＢ）、増加したＣＤ８＋Ｔ細胞腫瘍浸潤、および高いベースライン腫瘍ＰＤ－Ｌ１発現に関連していることを明らかにする。対照的に、発がん性ドライバー変異は、抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１免疫療法への耐性に寄与し得る。例えば、ＬＫＢ１不活性化変異は、おそらく免疫抑制および血管新生環境を促進して、腫瘍成長を促進することによって、ＫＲＡＳ変異体肺腺がん（ＬＵＡＣ）における抗ＰＤ－１療法に対する一次耐性の駆動に関与している。加えて、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）変異および／または未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）再編成を有する患者は、チロシンキナーゼ阻害剤（ＴＫＩ）療法の失敗後のＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害からの恩恵を受けない。ＥＧＦＲおよび／またはＡＬＫ変異体腫瘍は、多くの場合、非炎症性および免疫抑制性ＴＭＥを有し、それは免疫療法への耐性に寄与し得る。したがって、腫瘍抗原提示を強化し、免疫抑制性ＴＭＥを克服し、腫瘍血管新生を阻害するアプローチは、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１遮断の有効性の改善につながると予想される。

本発明は、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１遮断の有効性、および一般的な免疫チェックポイント阻害剤療法に対する耐性を改善することを対象とする。

一態様において、対象においてがんまたは充実性腫瘍を治療する方法であって、（ａ）対象に（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせを投与することと、（ｂ）対象に免疫チェックポイント阻害剤を投与することと、を含む、方法が提供される。

一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＣＴＬＡ－４受容体阻害剤、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、Ｐａｌｌ阻害剤、ＰＤ１－Ｌ２阻害剤、４－ｌＢＢ阻害剤、ＯＸ４０阻害剤、ＬＡＧ－３阻害剤、ＴＩＭ－３阻害剤、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、抗体、任意に、モノクローナル抗体である。一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４阻害剤、任意に、イピリムマブまたはトレミリムマブである。

一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、ランブロリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブ、およびＡＭＰ－２２４、ＡＭＰ２２４、ＡＵＮＰ１２、ＢＧＢ１０８、ＭＣＬＡ１３４、ＭＥＤＩ０６８０、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、ＳＨＲ１２１０、ＳＴＩＡＩ１０Ｘ、ＳＴＩＡ１１１０、およびＴＳＲ０４２からなる群から選択されるＰＤ１阻害剤である。

一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ＢＭＳ－９３６５５９、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＡＬＮ－ＰＤＬ、ＢＧＢＡ３１７、ＫＤ０３３、ＫＹ１００３、ＳＴＩＡ１００Ｘ、ＳＴＩＡ１０１０、ＳＴＩＡ１０１１、ＳＴＩＡ１０１２、およびＳＴＩＡ１０１４からなる群から選択されるＰＤ１－Ｌ１阻害剤である。

一実施形態において、ＣＸＣＬ９／１０は、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、またはそれらの組み合わせを指し、それらを含む。組み合わせの一実施形態において、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０の各々は、各々独立して、ポリペプチド、ポリヌクレオチドとして、ポリヌクレオチドを含む細胞、またはそれらの任意の組み合わせとして、異なる形態で投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９は、ポリペプチドとして投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０は、ポリペプチドとして投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせは、各々ポリペプチドとして投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドとして投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドとして投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせは、各々ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０をそれぞれコードするポリヌクレオチドとして投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドを含む細胞として投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞として投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせは、ＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドを含む細胞、およびＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドをコードする細胞として投与される。

一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせが投与され、ＣＸＣＬ９は、ポリペプチドとして投与され、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドとして投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせが投与され、ＣＸＣＬ１０は、ポリペプチドとして投与され、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドとして投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせが投与され、ＣＸＣＬ９は、ポリペプチドとして投与され、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞として投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせが投与され、ＣＸＣＬ１０は、ポリペプチドとして投与され、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドを含む細胞として投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせが投与され、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドとして投与され、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞として投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９とＣＸＣＬ１０との組み合わせが投与され、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドとして投与され、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドを含む細胞として投与される。

一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号５または配列番号６の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号５または配列番号６の配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号７または配列番号８の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号７または配列番号８の配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５または配列番号６の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号７または配列番号８の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドおよびＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５または配列番号６、および配列番号７または配列番号８の配列を含む。

一実施形態において、本明細書に記載される任意の形態のＣＸＣＬ９／１０、および免疫チェックポイント阻害剤は、独立して、腫瘍内、静脈内、動脈内、腹腔内、鼻腔内、筋肉内、皮内、もしくは皮下から選択される経路によって、またはＣＴ誘導もしくは気管支鏡によるＩＴ注射を介して投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９／１０は、腫瘍内投与され、免疫チェックポイント阻害剤は、静脈内投与される。

一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドは、ベクターに挿入され、ベクターは、対象に投与されるか、またはベクターは、抗原提示細胞（ＡＰＣ）もしくは樹状細胞（ＤＣ）に導入され、それは次いで対象もしくは腫瘍の部位に投与される。一実施形態において、ベクターは、アデノウイルスベクター、レンチウイルスベクター、ＣＭＶベクター、ワクシニアウイルスベクター、シンドビスウイルスベクター、またはヘルペスウイルスベクターである。一実施形態において、アデノウイルスベクターは、複製欠損アデノウイルスベクターである。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）または樹状細胞（ＤＣ）である。一実施形態において、ＡＰＣは、樹状細胞である。一実施形態において、樹状細胞は、対象に対して自己由来である。一実施形態において、樹状細胞は、ドナーに由来する。一実施形態において、樹状細胞は、細胞株に由来する。

一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む少なくとももしくは約１ｘ１０＾６細胞、またはそれらの組み合わせの場合は各々約１ｘ１０＾６細胞が対象に投与される。一実施形態において、細胞は、２４時間の期間に１ｘ１０＾６細胞あたり少なくともまたは約１０ｎｇのＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０の各々を産生する。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む少なくともまたは約１ｘ１０＾６細胞、およびＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む約１ｘ１０＾６細胞が対象に投与される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９発現細胞は、２４時間の期間に１ｘ１０＾６細胞あたり少なくともまたは約１０ｎｇのＣＸＣＬ９を産生し、ＣＸＣＬ１０発現細胞は、２４時間の期間に１ｘ１０＾６細胞あたり少なくともまたは約１０ｎｇのＣＸＣＬ１０を産生する。

一実施形態において、対象は、充実性腫瘍を含み、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、もしくは細胞、またはそれらの任意の組み合わせが、腫瘍内で対象に投与される。一実施形態において、充実性腫瘍は、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）充実性腫瘍である。

一実施形態において、（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせは、対象に、免疫チェックポイント阻害剤の前に、約２週間前に、またはそれと同時に投与される。一実施形態において、（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの組み合わせは、対象に約２回以上、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、または１ヶ月に１回投与される。一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、対象に２回以上、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、または１ヶ月に１回投与される。いくつかの実施形態において、ＣＸＣＬ９／１０および免疫チェックポイント阻害剤の各々の投与は、２、３、または４週間の期間中の複数回の投与、休薬期間、次いで同じレジメンの繰り返しを含む。他の実施形態において、２つ以上のそのようなサイクルが投与され得る。

一実施形態において、（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの組み合わせは、７、１１、および１５日目に対象に腫瘍内投与され、チェックポイント阻害剤は、７、９、１１、１３、および１５日目に投与される。一実施形態において、（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの組み合わせは、７、１０、および１３日目に対象に腫瘍内投与され、チェックポイント阻害剤は、７、１０、１３、および１５日目に投与される。一実施形態において、投薬レジメンは、１サイクルまたは複数サイクルで繰り返され、サイクル間に休薬がある。一実施形態において、レジメンは、２週間ごとに繰り返される。一実施形態において、サイクルは、３週間ごとに繰り返される。一実施形態において、サイクルは、毎月繰り返される。

一実施形態において、対象において高い変異量を有するがんまたは充実性腫瘍を治療するための方法であって、ａ．対象に：（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせを投与することと、ｂ．対象に免疫チェックポイント阻害剤を投与することと、を含む、方法が提供される。

一実施形態において、がんの治療または再発の低減を必要とする対象において、がんを治療するための方法、または高変異量がんの再発を低減するための方法であって、ａ）０、２１、および４２日目に、ＣＸＣＬ９／１０ベクター構築物を含む樹状細胞と、ｂ）０日目から開始して３週間ごとの有効量の抗ＰＤ－１抗体と、を含む、有効量の併用療法を投与することを含み、任意に、ベクターが、レンチウイルスベクターである、方法が提供される。

一実施形態において、対象において低い変異量を有するがんまたは充実性腫瘍を治療するための方法であって、ａ．対象に：（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせを投与することと、ｂ．対象に免疫チェックポイント阻害剤を投与することと、を含む、方法が提供される。

一実施形態において、がんの治療または再発の低減を必要とする対象において、がんを治療するための方法、または低変異量がんの再発を低減するための方法であって、ａ）０、２１、および４２日目に、ＣＸＣＬ９／１０ベクター構築物を含む樹状細胞と、ｂ）０日目から開始して３週間ごとの有効量の抗ＰＤ－１抗体と、を含む、有効量の併用療法を投与することを含み、任意に、ベクターが、レンチウイルスベクターである、方法が提供される。

一実施形態において、（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの組み合わせ、および免疫チェックポイント阻害剤を含むキットが提供される。一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＣＴＬＡ－４受容体阻害剤、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、ＰＤ１－Ｌ２阻害剤、４－１ＢＢ阻害剤、ＯＸ４０阻害剤、ＬＡＧ－３阻害剤、ＴＩＭ－３阻害剤、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、抗体、任意に、モノクローナル抗体である。一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４阻害剤、任意に、イピリムマブまたはトレミリムマブである。一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、ランブロリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブ、ＡＭＰ－２２４、ＡＭＰ２２４、ＡＵＮＰ１２、ＢＧＢ１０８、ＭＣＬＡ１３４、ＭＥＤＩ０６８０、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、ＳＨＲ１２１０、ＳＴＩＡ１１０Ｘ、ＳＴＩＡｌ１１０、およびＴＳＲ０４２からなる群から選択されるＰＤ１阻害剤である。一実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ＢＭＳ－９３６５５９、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＡＬＮ－ＰＤＬ、ＢＧＢＡ３１７、ＫＤ０３３、ＫＹ１００３、ＳＴＩＡ１００Ｘ、ＳＴＩＡ１０１０、ＳＴＩＡ１０１１、ＳＴＩＡ１０１２、およびＳＴＩＡ１０１４からなる群から選択されるＰＤ１－ＬＩ阻害剤である。

キットの一実施形態において、ＣＸＣＬ９／１０は、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、またはそれらの組み合わせを含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含み、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列からなり、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号５または配列番号６の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号５または配列番号６の配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号７または配列番号８の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号７または配列番号８の配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５または配列番号６の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号７または配列番号８の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドおよびＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５または配列番号６、および配列番号７または配列番号８の配列を含む。

一実施形態において、ＣＸＣＬ９／１０をコードするポリヌクレオチドを含むベクターを含む樹状細胞が提供される。一実施形態において、ＣＸＣＬ９／１０は、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、またはそれらの組み合わせを含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含み、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列からなり、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号５または配列番号６の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号５または配列番号６の配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号７または配列番号８の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号７または配列番号８の配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５または配列番号６の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号７または配列番号８の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドおよびＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５または配列番号６、および配列番号７または配列番号８の配列を含む。

変動する変異量を有する肺がんの遺伝子操作されたマウスモデル（ＧＥＭＭ）が臨床応答を再現することを示す。 ＧＥＭＭの３つの遺伝子サブタイプの異なる腫瘍微小環境（ＴＭＥ）免疫表現型を示す。 ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用が単剤療法よりも優れていることを示す。 がんゲノムアトラス（ＴＣＧＡ）データにおいてＣＸＣＬ９／１０遺伝子発現とＣＤ８＋Ｔ細胞および樹状細胞との相関関係を示す。 実験設計ならびに腫瘍内ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用が単剤療法よりも優れていることを示す試験の結果を示す。 腫瘍内ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣがＫＰＬ－３Ｍモデルにおいて抗ＰＤ－１有効性を増強することを示す。 腫瘍体積に基づいて、ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ１０－ＤＣが抗ＰＤ－１の抗腫瘍有効性の増強において機能的に同等であることを示す。 腫瘍重量に基づいて、ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ１０－ＤＣが抗ＰＤ－１の抗腫瘍有効性の増強において機能的に同等であることを示す。

本主題は、本開示の一部を形成する以下の詳細な説明を参照することにより、より容易に理解することができる。本発明は、本明細書に記載および／または示される特定の製品、方法、条件またはパラメータに限定されず、本明細書で使用される用語は、例としてのみ特定の実施形態を説明することを目的としており、特許請求された発明を限定することを意図しない。

本明細書で別段の定義がない限り、本出願に関連して使用される科学的および技術的用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有するものとする。さらに、文脈で特に必要とされない限り、単数形の用語は複数形を含み、複数形の用語は単数形を含むものとする。

上記および本開示全体で用いられるように、以下の用語および略語は、特に明記しない限り、以下の意味を有すると理解されるものとする。

本開示において、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、複数形の参照を含み、特定の数値への参照は、文脈が明らかに他のことを示さない限り、少なくともその特定の値を含む。したがって、例えば、「化合物」への言及は、当業者に知られているそのような化合物およびその同等物のうちの１つ以上への言及などである。本明細書で使用される場合、「複数」という用語は、２つ以上を意味する。値の範囲が表される場合、別の実施形態は、１つの特定の値から、および／または他の特定の値までを含む。

同様に、先行詞「約」を使用することにより、値が近似値として表される場合、特定の値が別の実施形態を形成することが理解される。すべての範囲は包括的かつ組み合わせることができる。本開示の文脈において、「約」特定の量とは、その量が、記載された量の±２０％以内、好ましくは記載された量の±１０％以内、またはより好ましくは、記載された量の±５％以内であることを意味する。

本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療」、または「療法」（およびそれらの異なる形態）という用語は、予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）または予防的（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）手段を含む治療的処置（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）を指し、その目的は、疾患または状態と関連する望ましくない生理学的変化を予防または緩和する（減少させる）ことである。有益なまたは望ましい臨床結果には、検出可能であろうと検出不可能であろうと、症状の軽減、疾患または状態の程度の低下、疾患または状態の安定化（すなわち、疾患または状態が悪化しない場合）、疾患または状態の進行の遅延または減速、疾患または状態の改善または緩和、および疾患または状態の寛解（部分的であろうと全体的であろうと）が含まれるが、これらに限定されない。治療を必要とするものは、疾患もしくは状態を有しやすいもの、または疾患もしくは状態が抑制されるべきものと同様に、すでに疾患もしくは状態を有するものを含む。

本明細書で使用される場合、「成分」、「組成物」、「製剤」、「化合物の組成物」、「化合物」、「薬物（ｄｒｕｇ）」、「薬理学的活性剤」、「活性剤」、「治療剤」、「療法」、「治療薬」または「薬物（ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）」という用語は、文脈が指示するように、本明細書において交換可能に使用され、対象（ヒトまたは動物）に投与されたときに、局所的および／または全身的作用による所望の薬理学的および／または生理学的効果を誘導する化合物（複数可）または物質の組成物を指す。パーソナライズされた組成物または方法は、対象において同定または企図された特定の必要性を満たすように調整（ｔａｉｌｏｒ）または個別化されたレジメンにおける産物または産物の使用を指す。

「対象」、「個体」、および「患者」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、本発明による組成物または製剤による治療が提供される動物、例えばヒトを指す。本明細書で使用される「対象」という用語は、ヒトおよび非ヒト動物を指す。「非ヒト動物」および「非ヒト哺乳動物」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、すべての脊椎動物、例えば、非ヒト霊長類（特に高等霊長類）、ヒツジ、イヌ、げっ歯類（例えば、マウスまたはラット）、モルモット、ヤギ、ブタ、ネコ、ウサギ、ウシ、ウマなどの哺乳動物、および爬虫類、両生類、ニワトリ、七面鳥などの非哺乳動物を含む。本明細書に記載の組成物は、サルおよびヒトなどの霊長類、ウマ、ウシ、ネコ、イヌ、ウサギ、ならびにラットおよびマウスなどのげっ歯類を含む任意の好適な哺乳動物を治療するために使用することができる。一実施形態において、治療される哺乳動物はヒトである。非ヒトでの使用には、ＣＸＣＬ９および／またはＣＸＣＬ１０の種に適した配列（ポリペプチド、ポリヌクレオチド）が使用され、免疫チェックポイント阻害剤に対する抗体には、種に適した免疫チェックポイントに対する抗体が使用される。細胞ベースの送達には、種に適した細胞が使用される。ヒトは、あらゆる年齢のあらゆるヒトであり得る。一実施形態において、ヒトは成人である。別の実施形態において、ヒトは子供である。ヒトは、男性、女性、妊娠中、中年、青年、または高齢者である可能性がある。本発明の方法のいずれかによれば、一実施形態において、対象はヒトである。別の実施形態において、対象は非ヒト霊長類である。別の実施形態において、対象はネズミ科（ｍｕｒｉｎｅ）であり、これは、一実施形態においてマウスであり、別の実施形態においてラットである。別の実施形態において、対象は、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ラプリン（ｌａｐｒｉｎｅ）またはブタである。別の実施形態において、対象は哺乳動物である。

特定の薬物、化合物、組成物、製剤（またはそれらの組み合わせ）が本明細書で「示される」と言われる対象の状態および障害は、その薬物または化合物または組成物または製剤が規制当局によって明示的に承認されている状態および障害に限定されず、医師または他の健康または栄養の専門家によって、その薬物または化合物または組成物または製剤またはそれらの組み合わせによる治療に適していることが知られている、または合理的に信じられている他の状態および障害も含まれる。

免疫抑制腫瘍微小環境（ＴＭＥ）を克服する１つのアプローチは、ケモカイン遺伝子修飾機能抗原提示細胞（ＡＰＣ）でのインサイチュワクチン接種を利用して、腫瘍抗原提示を強化し、腫瘍特異的Ｔ細胞活性化を促進することである。ケモカインＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０は、エフェクターＴ細胞を動員し、効果的な抗腫瘍免疫を調整するためにＣＤ１０３＋樹状細胞（ＤＣ）によって分泌される重要なシグナル伝達分子であることが示されている。さらに、ＣＸＣＬ９／１０（すなわち、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０の１つまたは組み合わせ）は、血管新生のバランスを腫瘍誘導血管新生から血管新生抑制にシフトさせることができる抗血管新生特性を有する。よって、一実施形態において、抗ＰＤ－１療法に対する応答を増強するために、ＣＸＣＬ９／１０分泌ＤＣ（ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ）のＩＴ注射を使用する治療方法が本明細書に記載される。一実施形態において、抗ＰＤ－１療法などであるがこれに限定されない免疫チェックポイント阻害剤が共投与される。臨床ＮＳＣＬＣの変異状況を再現する増加した腫瘍変異量（ＴＭＢ）を有する肺がんの遺伝子操作されたマウスモデル（ＧＥＭＭ）を使用して、細胞ベースの療法および併用療法の有効性が実証される。ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣでのインサイチュワクチン接種は、非応答性ＮＳＣＬＣを抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１免疫療法に感作させる効果的なアプローチとなり得る。低変異量腫瘍および高変異量腫瘍における有効性が提供される。

ＣＸＣＬ９／１０
本発明の方法で有用なＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０は、天然に存在するポリペプチドならびにその変形および修飾された形態の両方を包含する。

本明細書で使用されるＣＸＣＬ９／１０は、ケモカインＣＸＣＬ９もしくはＣＸＣＬ１０、またはそれらの組み合わせを指し、それらをポリペプチド、ポリヌクレオチド、あるいは一方もしくは両方のポリヌクレオチドを含み、かつ／または一方もしくは両方のポリペプチドを発現する細胞の形態で個々にまたは組み合わせて指し得る。ＣＸＣＬ９／１０はまた、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０ポリペプチドの組み合わせ、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０ポリヌクレオチドの組み合わせ、細胞の組み合わせ、ＣＸＣＬ９ポリヌクレオチドを含むもの、およびＣＸＣＬ１０ポリヌクレオチドを含むものなどの、前述のいずれかの任意の組み合わせ、ならびにＣＸＣＬ９ポリペプチドおよびＣＸＣＬ１０を発現する細胞、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドおよびＣＸＣＬ９ポリヌクレオチドを含む細胞などの、他の組み合わせも指す。さらに、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、または細胞形態のいずれかにおけるＣＸＣＬ９またはＣＸＣＬ１０の各々は、本発明の実施において個々に、または組み合わせて使用され得る。

ケモカイン（Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフ）リガンド９（ＣＸＣＬ９）は、ガンマインターフェロン（ＭＩＧ）によって誘導されるモノカインとしても知られるＣＸＣケモカインファミリーに属する小サイトカイン（１１．７ｋＤａ）である。ＣＸＣＬ９は、走化性を誘導し、白血球の分化および増殖を促進し、組織溢出を引き起こす役割を果たすケモカインの１つである。ヒトＣＸＣＬ９ケモカインアミノ酸配列は、配列番号１に示される。マウスＣＸＣＬ９ケモカインアミノ酸配列は、配列番号２に示される。

ヒトＣＸＣＬ９のアミノ酸配列は、以下である：
ＭＫＫＳＧＶＬＦＬＬ ＧＩＩＬＬＶＬＩＧＶ ＱＧＴＰＶＶＲＫＧＲ ＣＳＣＩＳＴＮＱＧＴ ＩＨＬＱＳＬＫＤＬＫ ＱＦＡＰＳＰＳＣＥＫ ＩＥＩＩＡＴＬＫＮＧ ＶＱＴＣＬＮＰＤＳＡ ＤＶＫＥＬＩＫＫＷＥ ＫＱＶＳＱＫＫＫＱＫ ＮＧＫＫＨＱＫＫＫＶ ＬＫＶＲＫＳＱＲＳＲ ＱＫＫＴＴ（配列番号１）。

マウスＣＸＣＬ９のアミノ酸配列は、以下である：
ＭＫＳＡＶＬＦＬＬＧ ＩＩＦＬＥＱＣＧＶＲ ＧＴＬＶＩＲＮＡＲＣ ＳＣＩＳＴＳＲＧＴＩ ＨＹＫＳＬＫＤＬＫＱ ＦＡＰＳＰＮＣＮＫＴ ＥＩＩＡＴＬＫＮＧＤ ＱＴＣＬＤＰＤＳＡＮ ＶＫＫＬＭＫＥＷＥＫ ＫＩＳＱＫＫＫＱＫＲ ＧＫＫＨＱＫＮＭＫＮ ＲＫＰＫＴＰＱＳＲＲ ＲＳＲＫＴＴ（配列番号２）。

１つの非限定的な例において、ヒトＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドは、以下の配列を有する：
ＡＴＧＡＡＧＡＡＡＡＧＴＧＧＴＧＴＴＣＴＴＴＴＣＣＴＣＴＴＧＧＧＣＡＴＣＡＴＣＴＴＧＣＴＧＧＴＴＣＴＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＣＡＡＧＧＡＡＣＣＣ
ＣＡＧＴＡＧＴＧＡＧＡＡＡＧＧＧＴＣＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＣＣＡＡＧＧＧＡＣＴＡＴＣＣＡＣＣＴＡＣＡＡＴＣＣＴＴＧＡＡ
ＡＧＡＣＣＴＴＡＡＡＣＡＡＴＴＴＧＣＣＣＣＡＡＧＣＣＣＴＴＣＣＴＧＣＧＡＧＡＡＡＡＴＴＧＡＡＡＴＣＡＴＴＧＣＴＡＣＡＣＴＧＡＡＧＡＡＴＧＧＡ
ＧＴＴＣＡＡＡＣＡＴＧＴＣＴＡＡＡＣＣＣＡＧＡＴＴＣＡＧＣＡＧＡＴＧＴＧＡＡＧＧＡＡＣＴＧＡＴＴＡＡＡＡＡＧＴＧＧＧＡＧＡＡＡＣＡＧＧＴＣＡ
ＧＣＣＡＡＡＡＧＡＡＡＡＡＧＣＡＡＡＡＧＡＡＴＧＧＧＡＡＡＡＡＡＣＡＴＣＡＡＡＡＡＡＡＧＡＡＡＧＴＴＣＴＧＡＡＡＧＴＴＣＧＡＡＡＡＴＣＴＣＡ
ＡＣＧＴＴＣＴＣＧＴＣＡＡＡＡＧＡＡＧＡＣＴＡＣＡＴＡＡ（配列番号５）。

１つの非限定的な例において、マウスＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドは、以下の配列を有する：
ＡＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＴＧＴＴＣＴＴＴＴＣＣＴＣＴＴＧＧＧＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＣＴＧＧＡＧＣＡＧＴＧＴＧＧＡＧＴＴＣＧＡＧＧＡＡＣＣＣＴＡＧ
ＴＧＡＴＡＡＧＧＡＡＴＧＣＡＣＧＡＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＧＣＣＧＡＧＧＣＡＣＧＡＴＣＣＡＣＴＡＣＡＡＡＴＣＣＣＴＣＡＡＡＧＡ
ＣＣＴＣＡＡＡＣＡＧＴＴＴＧＣＣＣＣＡＡＧＣＣＣＣＡＡＴＴＧＣＡＡＣＡＡＡＡＣＴＧＡＡＡＴＣＡＴＴＧＣＴＡＣＡＣＴＧＡＡＧＡＡＣＧＧＡＧＡＴ
ＣＡＡＡＣＣＴＧＣＣＴＡＧＡＴＣＣＧＧＡＣＴＣＧＧＣＡＡＡＴＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＴＧＡＡＡＧＡＡＴＧＧＧＡＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＡＧＣＣ
ＡＡＡＡＧＡＡＡＡＡＧＣＡＡＡＡＧＡＧＧＧＧＧＡＡＡＡＡＡＣＡＴＣＡＡＡＡＧＡＡＣＡＴＧＡＡＡＡＡＣＡＧＡＡＡＡＣＣＣＡＡＡＡＣＡＣＣＣＣＡ
ＡＡＧＴＣＧＴＣＧＴＣＧＴＴＣＡＡＧＧＡＡＧＡＣＴＡＣＡＴＡＡ（配列番号６）。

インターフェロンガンマ誘導タンパク質１０（ＩＰ－１０）または小誘導性サイトカインＢ１０としても知られるＣ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン１０（ＣＸＣＬ１０）は、ヒトではＣＸＣＬ１０遺伝子によってコードされる８．７ｋＤａのタンパク質である。ヒトＣＸＣＬ１０ケモカインアミノ酸配列は、配列番号３に示される。マウスＣＸＣＬ１０ケモカインアミノ酸配列は、配列番号４に示される。

ヒトＣＸＣＬ１０のアミノ酸配列は、以下である。
ＭＮＱＴＡＩＬＩＣＣ ＬＩＦＬＴＬＳＧＩＱ ＧＶＰＬＳＲＴＶＲＣ ＴＣＩＳＩＳＮＱＰＶ ＮＰＲＳＬＥＫＬＥＩ ＩＰＡＳＱＦＣＰＲＶ ＥＩＩＡＴＭＫＫＫＧ ＥＫＲＣＬＮＰＥＳＫ ＡＩＫＮＬＬＫＡＶＳ ＫＥＲＳＫＲＳＰ（配列番号３）

マウスＣＸＣＬ１０のアミノ酸配列は、以下である。
ＭＮＰＳＡＡＶＩＦＣ ＬＩＬＬＧＬＳＧＴＱ ＧＩＰＬＡＲＴＶＲＣ ＮＣＩＨＩＤＤＧＰＶ ＲＭＲＡＩＧＫＬＥＩ ＩＰＡＳＬＳＣＰＲＶ ＥＩＩＡＴＭＫＫＮＤ ＥＱＲＣＬＮＰＥＳＫ ＴＩＫＮＬＭＫＡＦＳ ＱＫＲＳＫＲＡＰ（配列番号４）

１つの非限定的な例において、ヒトＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドは、以下の配列を有する：
ＡＴＧＡＡＴＣＡＡＡＣＴＧＣＣＡＴＴＣＴＧＡＴＴＴＧＣＴＧＣＣＴＴＡＴＣＴＴＴＣＴＧＡＣＴＣＴＡＡＧＴＧＧＣＡＴＴＣＡＡＧＧＡＧＴＡＣＣＴＣ
ＴＣＴＣＴＡＧＡＡＣＴＧＴＡＣＧＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＴＣＡＧＣＡＴＴＡＧＴＡＡＴＣＡＡＣＣＴＧＴＴＡＡＴＣＣＡＡＧＧＴＣＴＴＴＡＧＡＡＡＡ
ＡＣＴＴＧＡＡＡＴＴＡＴＴＣＣＴＧＣＡＡＧＣＣＡＡＴＴＴＴＧＴＣＣＡＣＧＴＧＴＴＧＡＧＡＴＣＡＴＴＧＣＴＡＣＡＡＴＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＧＧＴ
ＧＡＧＡＡＧＡＧＡＴＧＴＣＴＧＡＡＴＣＣＡＧＡＡＴＣＧＡＡＧＧＣＣＡＴＣＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＡＡＧＣＡＧＴＴＡＧＣＡＡＧＧＡＡＡＧＧＴ
ＣＴＡＡＡＡＧＡＴＣＴＣＣＴＴＡＡ（配列番号７）。

１つの非限定的な例において、マウスＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドは、以下の配列を有する。
ＡＴＧＡＡＣＣＣＡＡＧＴＧＣＴＧＣＣＧＴＣＡＴＴＴＴＣＴＧＣＣＴＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＧＧＴＣＴＧＡＧＴＧＧＧＡＣＴＣＡＡＧＧＧＡＴＣＣＣＴＣ
ＴＣＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＴＣＣＧＣＴＧＣＡＡＣＴＧＣＡＴＣＣＡＴＡＴＣＧＡＴＧＡＣＧＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＡＴＧＡＧＧＧＣＣＡＴＡＧＧＧＡＡ
ＧＣＴＴＧＡＡＡＴＣＡＴＣＣＣＴＧＣＧＡＧＣＣＴＡＴＣＣＴＧＣＣＣＡＣＧＴＧＴＴＧＡＧＡＴＣＡＴＴＧＣＣＡＣＧＡＴＧＡＡＡＡＡＧＡＡＴＧＡＴ
ＧＡＧＣＡＧＡＧＡＴＧＴＣＴＧＡＡＴＣＣＧＧＡＡＴＣＴＡＡＧＡＣＣＡＴＣＡＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＧＡＡＡＧＣＧＴＴＴＡＧＣＣＡＡＡＡＡＡＧＧＴ
ＣＴＡＡＡＡＧＧＧＣＴＣＣＴＴＡＡ（配列番号８）

ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０には、天然に存在する哺乳動物ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０、ならびにそれらのバリアントおよびフラグメントが含まれる。好ましくは、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０は、ヒトまたはマウス起源のものである。最も好ましくは、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０は、ヒトＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０である。

本明細書に開示される方法における使用のためのＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、ＣＸＣＬ９またはＣＸＣＬ１０バリアント、ＣＸＣＬ９またはＣＸＣＬ１０フラグメント、類似体、および誘導体であり得る。

他の場所で記載されるように、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、ＣＸＣＬ９またはＣＸＣＬ１０のいずれかまたは両方の、ポリヌクレオチドを含む細胞の形態の、これらのケモカインの各々は、チェックポイント阻害剤と一緒に対象に投与され得る。例えば、ＣＸＣＬ９は、本明細書に記載される方法で使用される唯一のケモカインであり得、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、もしくはポリヌクレオチドを含む細胞、またはそれらの任意の組み合わせとして投与され得る。別の例において、ＣＸＣＬ１０は、本明細書に記載される方法で使用される唯一のケモカインであり得、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、もしくはポリヌクレオチドを含む細胞、またはそれらの任意の組み合わせとして投与され得る。別の例において、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０の両方は、本明細書に記載される方法で使用されるが、それらは、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、もしくはポリヌクレオチドを含む細胞、またはそれらの任意の組み合わせとして独立して投与され得る。一例において、ＣＸＣＬ９は、ポリペプチドとして腫瘍内に投与され、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞として腫瘍内に投与される。一実施形態において、２つまたは３つの送達の手段は、一方または両方のケモカイン、例えば、ポリペプチドおよびポリヌクレオチド、またはポリペプチドおよび細胞、またはポリヌクレオチドおよび細胞に使用され得る。他の実施形態において、送達の手段、送達の経路、およびいずれかまたは両方のケモカイン（任意の形態）の投薬スケジュールの任意の組み合わせが本明細書に含まれる。

一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドは、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号５または配列番号６の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号５または配列番号６の配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドは、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号７または配列番号８の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドは、配列番号７または配列番号８の配列からなる。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５または配列番号６の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号７または配列番号８の配列を含む。一実施形態において、ＣＸＣＬ９ポリペプチドおよびＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５または配列番号６、および配列番号７または配列番号８の配列を含む。

免疫チェックポイント阻害
免疫チェックポイント阻害、チェックポイント阻害、免疫チェックポイント阻害剤、またはチェックポイント阻害剤は、Ｔ細胞関与を抑制する免疫チェックポイントのうちの１つ以上を阻害する治療剤を同様に指す。チェックポイントの非限定的な例には、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１、およびＰＤ－Ｌ１が含まれ、追加の例が以下に提供される。免疫チェックポイント阻害剤の非限定的な例には、抗ＣＴＬＡ－４、抗ＰＤ－１、抗ＰＤ－Ｌ１などの抗体、および以下でさらにより詳細に記載されるものが含まれる。本発明の実施において本明細書に記載されるように、任意の１つ以上のチェックポイント阻害剤は、ＣＸＣＬ９／１０とともに使用され得る。

１つの非限定的な例において、ＰＤ－１は、ＣＤ２８ファミリーの免疫グロブリンである。ＰＤ－１は、リガンド結合に関与する細胞外Ｉｇ可変型（Ｖ型）ドメインおよび細胞内シグナル伝達に関与する細胞質尾部を含有するＩ型膜貫通糖タンパク質である。ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１（または他のリガンドＰＤ１－Ｌ２）との結合は、ＳＨＰ－１およびＳＨＰ－２のＰＤ－１への動員を誘導し、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）シグナル伝達、およびＴリンパ球活性化の下方制御に不可欠なＣＤ３ζ、ＰＫＣθ、およびＺＡＰ７０の脱リン酸化をもたらす。健康な状態下、ＰＤ－Ｌ１は、自己免疫などの望ましくない免疫応答を減弱する。

ペンブロリズマブは、がん免疫治療で使用されるヒト化抗ＰＤ－１抗体である。ペンブロリズマブは、ＰＤ－１とそのリガンド、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）およびプログラム細胞死リガンド２（ＰＤ－Ｌ２）の間の相互作用を遮断するように設計された、高度に選択的なヒト化ｍＡｂである。ペンブロリズマブは、ＩｇＧ４／カッパ・アイソタイプであり、Ｆｃ領域に安定化配列が変化している。グリコシル化を除く、アミノ酸配列に由来する重鎖および軽鎖の理論分子量は、それぞれ４９．４キロダルトン（ＫＤａ）および２３．７ＫＤａである。

ＮＳＣＬＣ患者の治療におけるペンブロリズマブの安全性および有効性を試験する臨床試験により、この疾患の薬剤が承認された。ＫＥＹＮＯＴＥ－００１試験は、中程度の副作用プロファイルを有する患者の約２０％における応答を明らかにした。重要なことに、ＰＤ－Ｌ１ベースライン腫瘍染色が５０％を超える患者は、腫瘍ＰＤ－Ｌ１発現が５０％未満の患者よりも、抗ＰＤ－１療法の利益が大きく、充実性腫瘍における応答評価基準（ＲＥＣＩＳＴ）基準により定義されるＯＲＲは、ＰＤ－Ｌ１染色が５０％を超える患者では４５．２％であるのに対し、ＰＤ－Ｌ１染色が１～４９％の患者では１６．５％、ＰＤ－Ｌ１染色が１％未満の患者では１０．７％であった。ＫＥＹＮＯＴＥ－０１０第ＩＩ／ＩＩＩ相試験では、２ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇ ｑ３ｗのペンブロリズマブは、＞１％のＰＤ－Ｌ１染色を有する無作為化されたステージＩＶの予め治療された患者において、７５ｍｇ／ｍ２ ｑ３ｗのドセタキセルを超える有意な利益を示した。ＫＥＹＮＯＴＥ－０２４試験では、２００ｍｇのペンブロリズマブは、＞５０％のＰＤ－Ｌ１染色を有する未治療の患者において、医師が選択する標準治療の化学療法よりも有意な利益を示した。ＮＳＣＬＣ患者の部分群における抗ＰＤ－１療法に対する強く持続的な反応にもかかわらず、ほとんどの患者は単剤としてのＰＤ－１チェックポイント阻害剤に反応しない（１２）。したがって、進行したＮＳＣＬＣ患者における抗ＰＤ１療法の有効性を高めるには、ＰＤ－１阻害剤との合理的かつ効果的な併用戦略が必要である。

ＰＤ－１に対する抗体は、米国特許第８，７３５，５５３号、同第８，６１７，５４６号、同第８，００８，４４９号、同第８，７４１，２９５号、同第８，５５２，１５４号、同第８，３５４，５０９号、同第８，７７９，１０５号、同第７，５６３，８６９号、同第８，２８７，８５６号、同第８，９２７，６９７号、同第８，０８８，９０５号、同第７，５９５，０４８号、同第８，１６８，１７９号、同第６，８０８，７１０号、同第７，９４３，７４３号、同第８，２４６，９５５号および同第８，２１７，１４９号に記載されている。

本方法では、任意の既知の抗ＰＤ－１抗体を使用することができることが企図されている。様々な実施形態において、抗ＰＤ－１抗体は、ＰＤ－１受容体がそのリガンドであるＰＤ－Ｌ１およびＰＤ－Ｌ２の一方または両方に結合することを阻害または遮断する。例示的な態様において、ＰＤ－１に特異的に結合するモノクローナル抗体は、ニボルマブ（ＢＭＳ９３６５５８、Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｅｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（ＭＫ－３４７５、Ｍｅｒｃｋ）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１、ＣｕｒｅＴｅｃｈ）、ランブロリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブ、またはＡＭＰ－２２４（ＧＳＫ／Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、ＡＭＰ２２４（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、ＡＵＮＰ１２（Ｄｒ．Ｒｅｄｄｙ’ｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｔｄ．）、ＢＧＢ１０８（ＢｅｉＧｅｎｅ）、ＭＣＬＡ１３４（Ｍｅｒｕｓ ＢＶ）、ＭＥＤＩ０６８０（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ／Ｓａｎｏｆｉ）、ＳＨＲ１２１０（Ｊｉａｎｇｓｕ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ／Ｉｎｃｙｔｅ）、ＳＴＩＡ１１０Ｘ（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）、ＳＴＩＡ１１１０（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）、ＴＳＲ０４２（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ／Ｔｅｓａｒｏ）である。

例示的な態様において、ＰＤ－Ｌ１に特異的に結合するモノクローナル抗体は、ＢＭＳ－９３６５５９（ＢＭＳ／Ｏｎｏ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｒｏｃｈｅ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、またはＭＥＤＩ－４７３６（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（Ｍｅｒｃｋ／Ｓｅｒｏｎｏ）、ＡＬＮ－ＰＤＬ（Ａｌｎｙｌａｍ）、ＢＧＢＡ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ）、ＫＤ０３３（Ｋａｄｍｏｎ Ｃｏｒｐ．）、ＫＹ１００３（Ｋｙｍａｂ Ｌｔｄ．）、ＳＴＩＡ１００Ｘ（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）、ＳＴＩＡ１０１０（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）、ＳＴＩＡ１０１１（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）、ＳＴＩＡ１０１２（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）、およびＳＴＩＡ１０１４（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）である。

マウスで抗ＰＤ－１を使用する試験について、マウスＰＤ－１特異的抗体、これに限定されないが、Ｂｉｏ Ｘ Ｃｅｌｌ，Ｌｅｂａｎｏｎ ＮＨからのモノクローナル抗体クローンＲＭＰ－１－１４、カタログ番号ＢＰ０１４６などが使用される。他の動物モデルでの試験は、適切な種特異的抗体を使用することができる。

他の免疫チェックポイント阻害剤が本明細書に包含され、本発明は、本明細書に記載されるＣＸＣＬ９／１０と共投与される任意の特定の免疫チェックポイント阻害剤に限定されない。

本明細書で使用される場合、「プログラム細胞死タンパク質１」、すなわち、「ＰＤ－１」は、２つのリガンドであるＰＤ－Ｌ１およびＰＤ－Ｌ２への結合によって媒介される免疫チェックポイント遮断に関与する細胞表面受容体を指す。ＰＤ－１のリガンドへの結合は、Ｔ細胞の増殖、サイトカイン産生、および細胞毒性の活性を低減させることが示されている。

細胞毒性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ－４）（ＣＤ１５２）は、Ｔ細胞活性化のＢ７－１／Ｂ７－２共刺激経路に関与する周知の共刺激分子である。ＣＴＬＡ－４は、ヘルパーＴ細胞の表面上に発現し、阻害シグナルをＴ細胞に伝達する（例えば、Ｋｒｕｍｍｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８２（２）：４５９－６５，１９９５を参照されたい）。ＣＴＬＡ－４に結合する抗体には、イピリムマブおよびトレミリムマブが含まれる。

「抗原提示細胞」（ＡＰＣ）は、Ｔ細胞を活性化することができる細胞であり、単球／マクロファージ、Ｂ細胞、および樹状細胞（ＤＣ）を含むが、これらに限定されない。「樹状細胞」または「ＤＣ」という用語は、リンパ組織または非リンパ組織に見られる形態学的に類似した細胞型の多様な集団の任意のメンバーを指す。これらの細胞は、その独特の形態、高レベルの表面ＭＨＣクラスＩＩ発現を特徴とする。ＤＣは、多くの組織源から単離することができる。ＤＣは、ＭＨＣ拘束性Ｔ細胞を感作する能力が高く、インサイチュでＴ細胞に抗原を提示するのに非常に効果的である。抗原は、Ｔ細胞の発達および寛容の間に発現する自己抗原、および通常の免疫プロセスの間に存在する外来抗原であり得る。

「治療上有効な量」という用語は、本明細書では、治療される疾患の症状または徴候を改善または軽減するのに有効である、本開示の標的特異的組成物の量を示すために使用される。

本明細書の方法に関して使用される「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療される」、「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」および「治療」という用語は、臨床症状、事象の発現もしくは進行、疾患または状態を、一時的または恒久的に、部分的または完全に、排除、低減、抑制または改善することを指す。このような治療は、有用であるために絶対的である必要はない。

「がん」、「がん性」、または「悪性」という用語は、通常、無秩序な細胞増殖を特徴とする哺乳動物の生理学的状態を指す、または記載する。本明細書で企図される例示的ながんは、発明を実施するための形態において、より詳しく記載されている。

「がんの治療」は、以下の効果のうちの１つ以上を指す。（１）（ｉ）減速、および（ｉｉ）完全な増殖停止を含む腫瘍成長のある程度の阻害、（２）腫瘍細胞数の低減、（３）腫瘍サイズの維持、（４）腫瘍サイズの縮小、（５）末梢器官への腫瘍細胞浸潤の（ｉ）低減、（ｉｉ）減速、または（ｉｉｉ）完全阻止を含む阻害、（６）転移の（ｉ）低減、（ｉｉ）減速、または（ｉｉｉ）完全阻止を含む阻害、（７）（ｉ）腫瘍サイズの維持、（ｉｉ）腫瘍サイズの縮小、（ｉｉｉ）腫瘍成長の遅延、（ｉｖ）浸潤の低減、遅延、または防止をもたらし得る、抗腫瘍免疫反応の増強、および／または（８）障害に関連する１つ以上の症状の重症度または数のある程度の軽減、に至る場合がある。

本明細書で使用される場合、「医薬組成物」は、ヒトおよび哺乳動物を含む対象動物への投与に適した組成物を指す。医薬組成物は、薬理学的に有効な量の本発明のウイルス組成物または抗原組成物を含み、薬学的に許容される担体も含む。医薬組成物は、有効成分、および医薬的に許容される担体を構成する不活性成分、ならびに任意の２つ以上の成分の組み合わせ、複合体形成または凝集に直接的または間接的に由来する任意の産物を含む組成物を包含する。したがって、本発明の医薬組成物は、本発明の化合物または抱合体と薬学的に許容される担体とを混合することによって作製される任意の組成物を包含する。

ＣＸＣＬ９／１０修飾樹状細胞
ベクター
ＣＸＣＬ９／１０発現構築物の送達のための方法は、発現ベクターの使用を含む。一実施形態において、本明細書に記載される試験のために、ＤＣは、マウスＣＸＣＬ９を発現するレンチウイルス構築物で形質導入され、別個に、他のＤＣは、マウスＣＸＣＬ１０を発現するレンチウイルス構築物で形質導入された。一実施形態において、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０の両方をコードするベクターは、同じベクター上に提供することができるか、または各ＣＸＣＬをコードする別個のベクターは、同じ細胞に導入することができる。しかしながら、本発明は、そのように限定的ではない。

一実施形態において、改善した安定性およびより良好な発現のためにレンチウイルスベクターが使用され得る。あるいは、他のベクターを使用して、ＣＸＣＬ９もしくはＣＸＣＬ１０、または両方を発現させることができる。

ＣＸＣＬ９のヌクレオチド配列は、配列番号２に提供される配列に基づいて得られ得る。ＣＸＣＬ９のＰＣＲ産物が生成され、「粘着末端」が制限消化によって生成され得る。これらの産物は、次いでレンチウイルスベクターにライゲーションされる。次いで、このベクターは、ヘルパーベクターで２９３Ｔ細胞にトランスフェクトして、ＣＸＣＬ９タンパク質発現を含有するレンチウイルスを生成し、これは、その後、腫瘍への送達のために樹状細胞に感染するために使用された。ＣＸＣＬ１０－ＤＣは、同様のプロセスを使用して生成され得る。あるいは、他のウイルスベクターを使用することができる。

例示的なベクターには、ウイルスベクター、リポソームまたはプラスミドベクター、ならびに他の遺伝子送達ベクターが含まれる。ウイルスベクターには、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レンチウイルス、レトロウイルス、ワクシニアウイルス、修飾アンカラウイルス、および水胞性口内炎ウイルスが含まれる。

アデノウイルスベクターはゲノムＤＮＡに組み込む能力が低いことが知られているが、この特性は、これらのベクターによってもたらされる遺伝子導入の高効率によって相殺される。「アデノウイルス発現ベクター」とは、（ａ）相補的パッケージング機能を有する宿主細胞における構築物のパッケージングをサポートし、（ｂ）その中にクローン化された目的の異種遺伝子を最終的に発現するのに十分なアデノウイルス配列を含有するこれらの構築物を含むことを意味する。

発現ベクターは、遺伝子操作された形態のアデノウイルスを含む。３６ｋｂの直鎖二本鎖ＤＮＡウイルスであるアデノウイルスの遺伝的構成に関する知見により、アデノウイルスＤＮＡの大きな断片を外来配列で置き換えることができる（Ｇｒｕｎｈａｕｓ ａｎｄ Ｈｏｒｗｉｔｚ、１９９２）。レトロウイルスとは対照的に、野生型アデノウイルスＤＮＡは潜在的な遺伝毒性なしにエピソーム様式で複製することができるため、宿主細胞のアデノウイルス感染は染色体組み込みを引き起こさない。また、アデノウイルスは構造的に安定しており、大規模な増幅後のゲノム再配列は検出されていない。

アデノウイルスは、中型のゲノム、操作の容易さ、高力価、広い標的細胞範囲、および高い感染力のために、遺伝子導入ベクターとしての使用に特に適している。

様々な実施形態において、ベクターは、複製欠損アデノウイルスベクターである。

様々な実施形態において、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される。

以下に詳細に記載される一例において、ＤＣは、マウスＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０を発現するレンチウイルス構築物で形質導入された。

本明細書での使用のために、ＤＣは、白血球アフェレーシスまたは患者の血液から樹状細胞を収集する他の方法によって患者から得られ得る。次いで、ＤＣは、培養され、ＣＸＣＬ９またはＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含むベクターで形質導入されるであろう。他の実施形態において、ＤＣは、ドナーまたは細胞株に由来する。一実施形態において、ドナーまたは細胞株ＤＣは、レシピエントにＨＬＡ適合している。一実施形態において、ＤＣは、部分的にＨＰＡ適合している。
使用方法

提案された併用療法で治療することができる例示的な状態または障害には、食道がん、膵臓がん、転移性膵臓がん、膵臓の転移性腺がん、膀胱がん、胃がん、線維性がん、神経膠腫、悪性神経膠腫、びまん性内因性橋膠腫、再発性小児脳新生物腎細胞がん、明細胞転移性腎細胞がん、腎臓がん、前立腺がん、転移性去勢抵抗性前立腺がん、ステージＩＶ前立腺がん、転移性黒色腫、黒色腫、悪性黒色腫、皮膚の再発性黒色腫、黒色腫脳転移、ステージＩＩＩＡ皮膚黒色腫、ステージＩＩＩＢ皮膚黒色腫、ステージＩＩＩＣ皮膚黒色腫、ステージＩＶ皮膚黒色腫、頭頸部の悪性黒色腫、肺がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、扁平上皮細胞非小細胞肺がん、乳がん、再発性転移性乳がん、肝細胞がん、ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、進行性Ｂ細胞ＮＨＬ、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）を含むＨＬ、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病、寛解期の成人急性骨髄性白血病、Ｉｎｖ（１６）（ｐ１３．１ｑ２２）を伴う成人急性骨髄性白血病、ＣＢＦＢ－ＭＹＨ１１、ｔ（１６、１６）（ｐ１３．１、ｑ２２）を伴う成人急性骨髄性白血病、ＣＢＦＢ－ＭＹＨ１１、ｔ（８、２１）（ｑ２２、ｑ２２）を伴う成人急性骨髄性白血病、ＲＵＮＸ１－ＲＵＮＸ１Ｔ１、ｔ（９、１１）（ｐ２２、ｑ２３）を伴う成人急性骨髄性白血病、ＭＬＬＴ３－ＭＬＬ、ｔ（１５、１７）（ｑ２２、ｑ１２）を伴う成人急性前骨髄球性白血病、ＰＭＬ－ＲＡＲＡ、アルキル化剤関連の急性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、リヒター症候群、ワルデンストレーム・マクログロブリン血症、成人神経膠芽腫、成人神経膠肉腫、再発性神経膠芽腫、再発性小児横紋筋肉腫、再発性ユーイング肉腫／末梢原始神経外胚葉性腫瘍、再発性神経芽細胞腫、再発性骨肉腫、結腸直腸がん、ＭＳＩ陽性結腸直腸がん、ＭＳＩ陰性結腸直腸がん、鼻咽頭非角質化がん、再発性鼻咽頭未分化がん、子宮頸部腺がん、子宮頸部腺扁平上皮がん、子宮頸部扁平上皮がん、再発子宮頸がん、ステージＩＶＡ子宮頸がん、ステージＩＶＢ子宮頸がん、肛門管扁平上皮がん、転移性肛門管がん、再発性肛門管がん、再発性頭頸部がん、がん腫、頭頸部扁平上皮細胞、頭頸部扁平上皮がん（ＨＮＳＣＣ）、卵巣がん、結腸がん、胃がん、進行性ＧＩがん、胃腺がん、胃食道接合部腺がん、骨新生物、軟部肉腫、骨肉腫、胸腺がん、尿路上皮がん、再発性メルケル細胞がん、ステージＩＩＩメルケル細胞がん、ステージＩＶメルケル細胞がん、骨髄異形成症候群、および再発性菌状息肉腫およびセザリー症候群などのがんが含まれる。

いくつかの実施形態において、がんは、肺がんである。様々な実施形態において、肺がんは、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）である。様々な実施形態において、肺がんは、細胞の５０％未満でＰＤ－Ｌ１を発現するステージＩＶのＮＳＣＬＣである。

様々な実施形態において、ＮＳＣＬＣまたは他の充実性腫瘍は、扁平上皮細胞または非扁平上皮細胞の腫瘍である。様々な実施形態において、対象は、低い腫瘍変異量を有する。様々な実施形態において、対象は、高い腫瘍変異量を有する。腫瘍の変異量は、例えば、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ ＣＤｘ（商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＡｃｔ（登録商標）、またはＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）ＨｅｍｅなどのＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（マサチューセッツ州ケンブリッジ）の診断アッセイによって監視することができる。

様々な実施形態において、患者は、ＣＴ誘導介入または気管支鏡検査によってアクセス可能なＮＳＣＬＣ腫瘍を有し、患者は、ＮＳＣＬＣの全身治療を受けていない。様々な実施形態において、ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣは、ＣＴ誘導または気管支鏡検査によるＩＴ注射を介して投与される。

本明細書に記載されるように、特定のがんは、高い変異量を有することを特徴とする。様々な実施形態において、対象において高い変異量を有するがんまたは充実性腫瘍を治療する方法であって、ａ．対象に（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせを投与することと、（ｂ）対象に免疫チェックポイント阻害剤を投与することと、を含む、方法が提供される。

様々な実施形態において、対象においてがんまたは充実性腫瘍を治療する方法であって、ａ．対象の腫瘍における高い変異量の存在を同定するステップと、ｂ．高変異量腫瘍を有する対象に（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチド、（ｉｉｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせを投与するステップと、（ｂ）対象に免疫チェックポイント阻害剤を投与するステップと、を含む、方法が提供される。

前述の方法の一実施形態において、高変異量は、腫瘍の生検によって決定される。一実施形態において、腫瘍関連新生抗原が決定される。一実施形態において、併用療法の有効性に続いて、腫瘍の新生抗原状況が解明される。一実施形態において、腫瘍は、ＫＲＡＳ、ＴＰ５３（ＫＰ）、もしくはＳＴＫ１１／ＬＫＢ１、またはそれらの任意の組み合わせから選択される変異を含む。一実施形態において、腫瘍は、腫瘍内異種性を有する。一実施形態において、腫瘍変異量は、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ ＣＤｘ（商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＡｃｔ（登録商標）、およびＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）Ｈｅｍｅから選択される診断アッセイによって決定される。

一実施形態において、高変異量腫瘍は、上皮成長因子受容体または未分化リンパ腫キナーゼ遺伝子（ＡＬＫ）融合物に活性化変異を有しない。一実施形態において、治療前、治療中、および治療後の体細胞変異量および腫瘍関連新生抗原を使用して、療法を開始、処方、および監視する。

一実施形態において、がんの治療または再発の低減を必要とする対象において、がんを治療するための方法、または高変異量がんの再発を低減するための方法は、ａ）０、２１、および４２日目にＣＸＣＬ９／１０ベクター構築物を含む樹状細胞と、ｂ）０日目に開始して３週間ごとに有効量の抗ＰＤ－１抗体と、を含む、有効量の併用療法を投与することを含む。

その様々な実施形態において、腫瘍は、上皮成長因子受容体または未分化リンパ腫キナーゼ遺伝子（ＡＬＫ）融合物に活性化変異を有しない。

その様々な実施形態において、治療前、治療中、および治療後の体細胞変異量および腫瘍関連新生抗原を使用して、治療を開始、処方、および監視する。

いくつかの実施形態において、本方法で治療されたがんでは、腫瘍細胞の５０％未満が、それらの表面にＰＤ－Ｌ１タンパク質を発現する。様々な実施形態において、がんは、それらの細胞表面に５０％超のＰＤ－Ｌ１染色を有し、したがって、腫瘍細胞の５０％超が、それらの表面にＰＤ－Ｌ１タンパク質を発現する。

本方法は、第一選択ペンブロリズマブおよび化学療法で治療された対象、あるいは、この組み合わせによる初期療法に失敗した対象において有用であることがさらに企図される。

いくつかの実施形態において、本方法で治療することができるがんには、本明細書に記載の転移性ＮＳＣＬＣおよび他の充実性腫瘍が含まれる。

様々な実施形態において、本発明の方法は、低変異量腫瘍を有する患者を治療するために使用することができる。

本明細書の方法は、対象の腫瘍サイズもしくは腫瘍量を低減し、かつ／または対象の転移を低減することが企図される。様々な実施形態において、対象の腫瘍サイズまたは腫瘍体積は、約２５～５０％、約４０～７０％、または約５０～９０％またはそれ以上減少する。様々な実施形態において、本方法は、腫瘍サイズまたは腫瘍体積を１０％、２０％、３０％、またはそれ以上低減させる。様々な実施形態において、本方法は、腫瘍サイズまたは腫瘍体積を１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％低減させる。

本明細書の方法は、腫瘍量を低減させ、また、がんが一旦寛解した腫瘍の再発を低減または予防することも企図される。

ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣの投与がＣＤ８Ｔ細胞の腫瘍への浸潤を増加させることも企図される。様々な実施形態において、ＣＤ８細胞は、併用療法を受けていない対象と比較して、治療対象では２倍以上増加する。ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣが腫瘍のＰＤ－Ｌ１発現を増加させることが提供される。

様々な実施形態において、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０ポリペプチドの一方もしくは両方、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０ポリヌクレオチドの一方もしくは両方、またはＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、もしくは両方を発現する樹状細胞などの抗原提示細胞は、腫瘍内、静脈内、動脈内、腹腔内、鼻腔内、筋肉内、皮内、もしくは皮下、またはＣＴ誘導もしくは気管支鏡によるＩＴ注射を介して投与される。様々な実施形態において、チェックポイント阻害剤は静脈内投与される。

ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせ、ポリヌクレオチドまたはＡＰＣ、例えば、樹状細胞、およびチェックポイント阻害剤の投与の経路は、所望の結果に応じて異なるであろう。一般に、免疫応答の開始のために、炎症または応答の所望の部位またはその近くでの薬剤の注射が利用される。あるいは、他の投与の経路は、病状に応じて正当な場合がある。すなわち、新生物または腫瘍の増殖を抑制するために、腫瘍部位またはその近くに医薬組成物を注射することが好ましい。

本明細書に記載されるように、ＣＸＣＬ９／１０は、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、または両方を含み得る。一方または両方の投与の形態は、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、またはポリペプチドを含む細胞の形態であり得る。ＣＸＣＬおよび投与の形態の両方は、各ＣＸＣＬについて独立して選択される。よって、いくつかの実施形態において、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチド、もしくはＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドを含む細胞、またはそれらの任意の組み合わせとして送達され得る。よって、いくつかの実施形態において、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチド、もしくはＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞、またはそれらの任意の組み合わせとして送達され得る。いくつかの実施形態において、ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０の両方が投与され得、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９ポリペプチドとして送達され得、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０ポリペプチドとして、またはＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドおよびＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチド、またはＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドおよびＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチド、もしくはそれらの任意の組み合わせを含む細胞として送達され得る。ＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０の両方が送達される他の実施形態において、各々は、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、もしくはポリヌクレオチドをコードする細胞、またはそれらの任意の組み合わせとして独立して送達され得る。非限定的な例として、ＣＸＣＬ９は、ポリペプチドとして、ＣＸＣＬ１０は、ポリヌクレオチドとして送達され得る。別の例において、ＣＸＣＬ９は、ポリペプチドとして、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０ポリヌクレオチドを含む細胞で送達され得る。別の例において、ＣＸＣＬ９は、ＣＸＣＬ９ポリヌクレオチドを含む細胞によって、ＣＸＣＬ１０は、ポリペプチドとして送達され得る。別の例において、ＣＸＣＬ９は、ポリヌクレオチドとして、ＣＸＣＬ１０は、ＣＸＣＬ１０ポリヌクレオチドを含む細胞で送達され得る。よって、一方または両方のＣＸＣＬおよび１つ以上の送達の方法の任意の組み合わせが、本明細書で具体化される。もちろん、免疫チェックポイント阻害剤も送達される。本明細書に記載されるように、ＣＸＣＬ９／１０および免疫チェックポイント阻害剤（１つ以上の免疫チェックポイント阻害剤を含む）の用量レベル、投薬の頻度および期間などの投薬レジメンが本明細書に提供される。

本明細書に記載されるように、ヒトＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドは、配列番号５を含むか、または配列番号５からなり得る。本明細書に記載されるように、マウスＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドは、配列番号６を含むか、または配列番号６からなり得る。本明細書に記載されるように、ヒトＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドは、配列番号７を含むか、または配列番号７からなり得る。本明細書に記載されるように、マウスＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドは、配列番号８を含むか、または配列番号８からなり得る。

本明細書に記載されるように、ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５を含むか、または配列番号５からなるヒトＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドを含み得る。本明細書に記載されるように、マウスＣＸＣＬ９をコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号６を含むか、または配列番号６からなり得る。本明細書に記載されるように、ヒトＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号７を含むか、または配列番号７からなり得る。本明細書に記載されるように、マウスＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号８を含むか、または配列番号８からなり得る。本明細書に記載されるように、ヒトＣＸＣＬ９およびヒトＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号５を含むか、または配列番号５からなり得、配列番号７を含むか、または配列番号７からなり得る。本明細書に記載されるように、マウスＣＸＣＬ９およびマウスＣＸＣＬ１０をコードするポリヌクレオチドを含む細胞は、配列番号６を含むか、または配列番号６からなり得、配列番号８を含むか、または配列番号８からなり得る。いくつかの実施形態において、細胞は、ヒトおよびマウスの両方のケモカインを含み得る。

一実施形態において、ＣＸＣＬ９の形態および独立してＣＸＣＬ１０の形態は、腫瘍内（ＩＴ）に送達され得る。

併用という用語の使用にもかかわらず、ＣＸＣＬ９／１０およびチェックポイント阻害剤は、同時に、同じ投与の経路によって、または同じ製剤で投与される必要がないことに留意されたい。各々は、異なる投薬スケジュールを有し得、一実施形態において、投薬スケジュールは、時間的に重複しており、一実施形態において、一方は、他方の前に開始され、一実施形態において、一方は、他方の前に終了し、一実施形態において、一方の薬剤の療法の過程は、他方が開始する前に終了する（両方の薬剤の抗腫瘍有効性は、いずれか単独よりも大きく、すなわち、相乗的である）。併用とは、本明細書に記載される抗腫瘍活性を達成するＣＸＣＬ９／１０およびチェックポイント阻害剤の両方の同時使用を指す。一実施形態において、ＣＸＣＬ９／１０および免疫チェックポイント阻害剤の併用の抗腫瘍効果は、個々にいずれかの薬剤よりも大きく、一実施形態において、効果は、個々に各薬剤の効果の組み合わせよりも大きく、一実施形態において、併用は、相乗的である。

全身投与の他の経路の例には、非経口、例えば、静脈内、皮内、皮下、経口（例えば、吸入）、経皮（局所）、経粘膜、および直腸投与が含まれる。非経口、皮内、または皮下の適用に使用される溶液または懸濁液には、以下の成分が含まれ得る。注射用水、生理食塩水などの無菌希釈剤、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶剤、ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤、ＥＤＴＡなどのキレート剤、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの張性調整剤。

一実施形態において、医薬組成物は、ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせもしくは体内の部位中もしくはその周辺へのＣＸＣＬ９／１０の発現に適したＤＮＡ構築物を含む徐放性製剤またはマトリックスを介して送達することができる。このようにして、一過性のリンパ節を所望の移植位置で作成し、樹状細胞および免疫応答を開始するＴ細胞を誘引することができる。

ＣＸＣＬ９／１０とともに投与される１つ以上の免疫チェックポイント阻害剤の選択は、本明細書に記載されるように誘導され得る。本明細書の例は抗ＰＤ１抗体に言及するが、本発明は、そのように限定されず、一般に、ＣＸＣＬ９／１０および任意の１つ以上の免疫チェックポイント阻害剤の併用を対象とする。

抗ＰＤ－１の例において、抗ＰＤ－１抗体は、０日目に開始して３週間ごとに投与されることが企図される。様々な実施形態において、抗ＰＤ－１抗体は、３週間ごとに２００ｍｇの用量で投与されるペンブロリズマブである。

様々な実施形態において、ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ１０－ＤＣの各々は、５ｘ１０^６細胞／注射～３ｘ１０^７細胞／注射、例えば、５ｘ１０^６、１ｘ１０^７、または３ｘ１０^７細胞／注射の用量で投与される。レンチウイルス構築物（ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ）などのベクター－ＣＸＣＬ９／１０を含む樹状細胞は、３週間間隔で、例えば、０、２１、および４２日目に投与されることが企図される。記載されるように、これらは単なる例示的な投薬レジメンであり、本発明を実施する当業者は、特定の対象、腫瘍ステージなどに最適な投薬レジメンを容易に決定するであろう。

必要に応じて、他の補助療法を投与され得ることがさらに企図される。例えば、患者はまた、必要に応じて、外科的療法、化学療法、細胞毒性剤、光線力学療法または放射線療法も投与され得る。

多種多様な化学療法剤を、本発明の併用療法と組み合わせて使用することができる。これらは、例えば、ＤＮＡを直接架橋する薬剤、ＤＮＡに挿入する薬剤、および核酸合成に影響を及ぼすことによって染色体および有糸分裂の異常を引き起こす薬剤であり得る。様々な化学療法剤が、本明細書に開示される併用治療法において使用されることが意図される。例示として企図される化学療法剤には、例えば、エトポシド（ＶＰ－１６）、アドリアマイシン、５－フルオロウラシル（５ＦＵ）、カンプトテシン、アクチノマイシン－Ｄ、マイトマイシンＣ、シスプラチン（ＣＤＤＰ）、さらには過酸化水素が含まれる。

当業者に理解されるように、化学療法剤の適切な用量は、一般に、化学療法剤が単独でまたは他の化学療法剤と組み合わせて投与される臨床療法ですでに使用されているようなものである。ほんの一例として、シスプラチンなどの薬剤、および他のＤＮＡアルキル化を使用することができる。シスプラチンは、がんの治療に広く使用されており、臨床適用で使用される有効な用量は、２０ｍｇ／ｉｎ２で３週間ごとに５日間、合計３コースである。シスプラチンは経口吸収されないため、静脈内、皮下、腫瘍内、または腹腔内の注射を介して送達する必要がある。

ＤＮＡ損傷に帰着するために、核酸、特にＤＮＡを直接架橋する薬剤が構想され、本明細書に示され、相乗的な抗腫瘍性の組み合わせをもたらす。シスプラチンなどの薬剤、および他のＤＮＡアルキル化剤を使用することができる。

さらに有用な薬剤には、ＤＮＡ複製、有糸分裂、および染色体分離に干渉する化合物が含まれる。このような化学療法化合物には、ドキソルビシンとしても知られるアドリアマイシン、エトポシド、ベラパミル、ポドフィロトキシンなどが含まれる。新生物の治療のために臨床現場で広く使用されているこれらの化合物は、アドリアマイシンの場合、ボーラス注射により静脈内に２１日間隔で２５～７５ｍｇ／ｉｎ２から、エトポシドの場合、静脈内に３５～５０ｍｇ／ｉｎ２までの範囲の用量で、または静注用量の２倍を経口で投与される。

ポリヌクレオチド前駆体の合成および忠実度を破壊する薬剤も使用することができる。特に有用なのは、広範な試験を受け容易に利用することができる薬剤である。このように、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）などの薬剤は、腫瘍性組織によって優先的に使用され、この薬剤を腫瘍性細胞への標的化に特に有用にする。非常に毒性があるとはいえ、５－ＦＵは局所を含む幅広い担体に適用できるが、３～１５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の用量での静脈内投与が一般的に使用される。

タキソールなどの植物アルカロイドもまた、本発明の特定の態様における使用について企図される。タキソールは、トネリコ、Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａの樹皮から単離された、実験的な抗有糸分裂剤である。チューブリン（ビンカアルカロイドが使用する部位とは異なる部位）に結合し、微小管の集合を促進する。タキソールは現在、臨床評価されており、悪性黒色腫および卵巣がんに対して活性を有する。最大用量は、５日間１日あたり３０ｍｇ／ｍ２、または３週間に１回２１０～２５０ｍｇ／ｍ２である。無論、これらの投与量のすべては例示的なものであり、これらの点の間の任意の投与量もまた、本発明において有用であると予測される。

併用療法に関連して有用である前述の例示的な化学療法剤は、限定することを意図するものではなく、そのような薬剤（複数可）の使用は、当業者によって誘導されるであろう。そこに列挙されている薬剤のそれぞれは例示的なものであり、決して限定するものではない。当業者は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」第１５版、第３３章、特に６２４～６５２ページを対象にする。治療される対象の状態に応じて、投与量にいくらかの変動が必然的に生じる。いずれにせよ、投与の責任者は、個々の対象に適切な用量を決定する。さらに、ヒト投与の場合、調製物は、ＦＤＡ局生物製剤基準で要求するように、無菌性、発熱性、一般的安全性、および純度の基準を満たす必要がある。

実施例１．異なる変異量を有する肺がんの新たに確立された遺伝子操作されたマウスモデル（ＧＥＭＭ）は、抗ＰＤ－１に対する臨床応答を再現する。
ＮＳＣＬＣの条件付きＧＥＭＭは、疾患の一般的なドライバー変異を有するが、最近の試験は、これらのＧＥＭＭが低い腫瘍変異量（ＴＭＢ）を有することを明らかにする。ヒトＮＳＣＬＣの変異状況を再現するために、我々は、ＫｒａｓＧ１２Ｄ（Ｋ）、ＫｒａｓＧ１２ＤＰ５３－／－（ＫＰ）、およびＫｒａｓＧ１２ＤＰ５３－／－Ｌｋｂ１－／－（ＫＰＬ）細胞の発がん物質メチル－ニトロソ尿素（ＭＮＵ）への毎回３０分間の３回、５回、または７回の（それぞれ、３Ｍ、５Ｍ、７Ｍと指定される）インビトロ曝露によって増加したＴＭＢを有する新規ＧＥＭＭを確立した。ＭＮＵは、ヌクレオチドの窒素および酸素原子を標的とする強力なアルキル化剤であり、同様の数のＧ＞ＡおよびＣ＞Ｔ置換での遷移をもたらす。これらの変異体細胞株の全エクソーム配列決定（ＷＥＳ）は、変異量（図１Ａ）、および腫瘍内異種性の有意な増加を明らかにした。すべての３つの親細胞株からの腫瘍は抗ＰＤ－１療法に耐性であるが（図１Ｂ）、ＰＤ－１遮断はＫ－３ＭおよびＫＰ－３Ｍモデルで強力な有効性を誘導した（図１Ｃ）。対照的に、ＫＰＬ－３Ｍ腫瘍では限られた抗ＰＤ－１有効性が観察された（図１Ｄ）。最近の試験は、抗ＰＤ－１単剤療法に対するＯＲＲが、ヒトＫＲＡＳ変異体ＬＵＡＣのＫＬ（７．４％）、ＫＰ（３５．７％）、およびＫ（２８．６％）部分群の中で有意に異なり、機能変異のＬＫＢ１損失を抗ＰＤ－１に対する一次耐性の主要なドライバーとして同定することが明らかになった。我々の結果は、ＮＳＣＬＣにおける抗ＰＤ－１療法に対する臨床応答を再現し、免疫療法に対する応答の分子メカニズムの試験におけるこれらの新規ＧＥＭＭの有用性を強調する。

図１Ａ、図１Ｂ、図１Ｃ、および図１Ｄの詳細な説明。異なる変異量を有する肺がんの新たに確立されたＧＥＭＭは、抗ＰＤ－１に対する臨床応答を再現する。図１Ａ）ＷＥＳは、ＫｒａｓＧ１２Ｄ（Ｋ）、ＫｒａｓＧ１２ＤＰ５３^－／－（ＫＰ）、およびＫｒａｓＧ１２ＤＰ５３^－／－Ｌｋｂ１^－／－（ＫＰＬ）親および変異体細胞（３Ｍ、５Ｍ、７Ｍ）からのゲノムＤＮＡで行った。マウス尾部からのＤＮＡは、正常な組織対照として含まれた。数字は、Ｍｂあたりの一塩基バリアント（ＳＮＶ）としての変異量を表す。図１Ｂ）腫瘍接種後［１２９／ＥマウスではＫ－親（２ｘ１０６）細胞ＳＣ、ＦＶＢマウスではＫＰ－親（８ｘ１０^５）またはＫＰＬ－親（７．５ｘ１０^４）細胞ＳＣ］、＜５０ｍｍ３の腫瘍を有するマウス（約５～７日目）を、ｉ）ビヒクル、ｉｉ）抗ＰＤ－１抗体（２００μｇ／用量ＩＰ、３日ごとに４用量）で処理し、腫瘍成長をキャリパーで測定した。図１Ｃ）３Ｍ細胞が利用されたことを除いて図１Ｂと同じである［１２９／ＥマウスではＫ－３Ｍ（２ｘ１０^６）細胞、ＦＶＢマウスではＫＰ－３Ｍ（２．２ｘ１０^６）またはＫＰＬ－３Ｍ（１ｘ１０^５）細胞。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された。ｎ．ｓ．、有意ではない、＊、Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．００５、＊＊＊、Ｐ＜０．０００５、＊＊＊＊、Ｐ＜０．０００１。

実施例２．異なるＴＭＥ免疫表現型がＧＥＭＭサブタイプで発生する。
抗ＰＤ－１療法への応答は、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１媒介抑制によって抑制される既存の腫瘍特異的Ｔ細胞免疫を必要とする。ＬＫＢ１不活性化変異を有するＫＲＡＳ駆動肺がんは、抗ＰＤ－１療法に耐性があるという観察と一致して、フローサイトメトリーによるＧＥＭＭの腫瘍微小環境（ＴＭＥ）の我々の免疫プロファイリングは、Ｋ－３ＭおよびＫＰ－３Ｍ腫瘍におけるＴリンパ球の顕著な浸潤、ＫＰＬ－ＰおよびＫＰＬ－３Ｍ腫瘍におけるＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞浸潤の欠如を明らかにし、抑制されたＴ細胞免疫の状態を示した（図２Ａ）。対照的に、以前の試験と一致して、我々は、ＫＰＬ－ＰおよびＫＰＬ－３ＭのＴＭＥ内で骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の優勢を観察した（図２Ｂ）。予想通り、低Ｔリンパ球浸潤を有するＫＰＬ－ＰおよびＫＰＬ－３Ｍ腫瘍における免疫抑制の深刻な状態は、抗ＰＤ－１単剤療法に対する一次耐性に関連する、低いＰＤ－Ｌ１発現と相関する（図２Ｃ）。我々は、ＣＸＣＬ１、２、３、５、７、およびＩＬ－６を含む、ＬＫＢ１－ｎｕｌｌ ＫＰＬ－３Ｍ腫瘍における化学誘引物質サイトカインのレベルの増加を見出し、これは、ＴＭＥ内でのＭＤＳＣの動員およびＴ細胞抑制の深刻な状態に寄与し得る。

図２Ａ、図２Ｂ、および図２Ｃの詳細な説明。ＧＥＭＭの３つの遺伝子サブタイプにおける異なるＴＭＥ免疫表現型。図２Ａ）腫瘍接種（１２９／ＥマウスではＳＣ送達された２ｘ１０６のＫ－親およびＫ－３Ｍ、ＦＶＢマウスではＫＰ－親（８ｘ１０５）およびＫＰ－３Ｍ（２．２ｘ１０６）細胞、またはＦＶＢマウスではＫＰＬ－親（１ｘ１０５）およびＫＰＬ－３Ｍ（１．５ｘ１０５）細胞）後１４～１６日目に、腫瘍を採取し、Ｔ細胞マーカーを使用してＦＡＣＳによって分析した。Ｔｒｅｇは、ＣＤ４５＋ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋として定義される。図２Ｂ）ＭＤＳＣマーカーが利用されたことを除いて、図２Ａと同じである。多形核（ＰＭＮ）－ＭＤＳＣは、ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｇ＋Ｌｙ６Ｃｌｏとして定義される。単球（Ｍ）－ＭＤＳＣは、ＣＤ４５＋ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｇ－Ｌｙ６Ｃｈｉとして定義される。図２Ｃ）ＰＤ－Ｌ１の平均蛍光強度（ＭＦＩ）がプロットされることを除いて、図２Ａと同じである。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された。＊、Ｐ＜０．０５、＊＊、Ｐ＜０．００５、＊＊＊、Ｐ＜０．０００５、＊＊＊＊、Ｐ＜０．０００１。ＮＤ、未定。

実施例３．マウス肺がんモデルにおけるＣＸＣＬ９／１０－ＤＣのＩＴ投与による抗ＰＤ－１の有効性の強化。
本明細書に記載される試験のために、ＤＣは、マウスＣＸＣＬ９を発現するレンチウイルス構築物で形質導入され、別個に、他のＤＣは、マウスＣＸＣＬ１０を発現するレンチウイルス構築物で形質導入された。ＣＸＣＬ９（配列番号６）のヌクレオチド配列は、配列番号２に提供される配列に基づいて得られた。ＣＸＣＬ９のＰＣＲ産物が生成され、「粘着末端」が制限消化によって生成された。これらの産物は、次いでレンチウイルスベクターにライゲーションされた。次いで、このベクターは、ヘルパーベクターで２９３Ｔ細胞にトランスフェクトして、ＣＸＣＬ９タンパク質発現を含有するレンチウイルスを生成し、これは、その後、腫瘍への送達のために樹状細胞に感染するために使用された。ＣＸＣＬ１０－ＤＣは、配列番号４に基づくヌクレオチド配列（配列番号８）を使用する同様のプロセスを使用して生成された。これらのＤＣは、本明細書ではＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ（またはベクター－ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ）と呼ばれた。本明細書に記載されるように、各ＤＣ集団について、約１ｘ１０＾６の細胞は、２４時間で１０ｎｇのそれぞれのポリペプチドを産生した。ＣＸＣＬ９を発現する約１ｘ１０＾６細胞およびＣＸＣＬ１０を発現する約１ｘ１０＾６細胞（すなわち、合計２ｘ１０＾６細胞）が動物に投与された。

我々は、肺がんのＫＰＬ－３Ｍ ＧＥＭＭにおけるＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１（抗マウスＰＤ－１（ＣＤ２７９）、クローンＲＭＰ－１－１４、カタログ番号ＢＰ０１４６、Ｂｉｏ Ｘ Ｃｅｌｌ，Ｌｅｂａｎｏｎ ＮＨ製）併用の有効性を評価する試験を実施した。観察された免疫抑制ＴＭＥ（図２Ａ－Ｃ）と一致して、抗ＰＤ－１単独は、限られた有効性を示した（図３Ａ）。重要なことに、ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣは、ＰＤ－１遮断の抗腫瘍効果を有意に増強した。安楽死の日の腫瘍重量は、腫瘍体積測定値と一致していた（図３Ｂ）。これらのデータは、ＰＤ－１と組み合わせたＣＸＣＬ９／１０－ＤＣが強力な抗腫瘍効果を誘導することを示す。

図３Ａおよび図３Ｂの簡単な説明。ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用は、単剤療法よりも優れている。図３Ａ）ＩＴ ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ（マウスＫＰＬ－３ＭモデルにおいてマウスＣＸＣＬ９およびＣＸＣＬ１０ならびに抗ＰＤ－１の組み合わせを発現するレンチウイルス構築物が形質導入されたＤＣ）である。ＦＶＢマウスに１ｘ１０５のＫＰＬ－３Ｍ細胞をＳＣ接種した。７日目に、＜２５ｍｍ３の腫瘍を有するマウスを、ａ）ビヒクル対照、ｂ）ＩＴ ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ（７、１１、１５日目に１０６ＣＸＣ９／１０－ＤＣ／用量）、ｃ）ＩＰ抗ＰＤ－１（７、９、１１、１３、１５日目に２００μｇ／用量）、ｄ）上記と同じ時点でのＩＴ ＣＸＣＬ９／１０およびＩＰ抗ＰＤ－１の併用で処理した。キャリパーによって測定される腫瘍体積を記録した。図３Ｂ）試験終了時の腫瘍重量が提示されたことを除いて図３Ａと同じである。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された、＊、Ｐ＜０．０５、＊＊、Ｐ＜０．００５、＊＊＊、Ｐ＜０．０００５、＊＊＊＊、Ｐ＜０．００００５。

実施例４．ＣＸＣＬ９／１０遺伝子発現レベルは、ＤＣおよびＣＤ８＋Ｔ細胞浸潤と相関する。
ＣＸＣＬ９／１０発現と免疫浸潤との関連を決定するために、我々は、肺腺がん（ＬＵＡＤ）および肺扁平上皮がん（ＬＵＳＣ）の両方を含むＴＣＧＡ ＮＳＣＬＣデータを分析した。ＴＩＭＥＲは、遺伝子発現レベルに基づいて免疫細胞集団を推定するために使用した。ＣＸＣＬ９（図４Ａ）およびＣＸＣＬ１０（図４Ｂ）の両方の遺伝子発現レベルは、推定された浸潤性ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＤＣ集団と有意に相関した。ＣＸＣＬ９／１０発現は、腫瘍含有量とは相関しない。

図４Ａおよび図４Ｂの詳細な説明。ＴＣＧＡデータにおけるＣＸＣＬ９／１０遺伝子発現とＣＤ８＋Ｔ細胞およびＤＣとの相関。ＣＸＣＬ９（図４Ａ）およびＣＸＣＬ１０（図４Ｂ）発現レベルを、純度（腫瘍含有量）に対してプロットし、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＤＣ集団を、ＮＳＣＬＣのＬＵＡＤ（上）およびＬＵＳＣ（下）について推定した。腫瘍含有量のレベルは、ＣＸＣＬ９またはＣＸＣＬ１０レベルと相関していなかったが、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＤＣは、有意な相関を示した。

実施例５．ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣの腫瘍内（ＩＴ）投与は、ＫＰＬ－３Ｍモデルにおける抗ＰＤ－１の有効性を強化する。
実施例３に記載されたものと同様の試験設計（投薬レジメンを除く）において、ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１併用療法の有効性をＫＰＬ－３Ｍマウスモデルで評価した。試験設計を図５Ａに示す。腫瘍は、０日目に皮下に移植した。７、１０、１３、および１５日目に、動物にＣＸＣＬ９／１０および抗ＰＤ－１を腫瘍内投与した。図５Ｂに示されるように、抗ＰＤ－１またはＣＸＣＬ９／１０単剤療法は、限られた有効性を示した。重要なことに、ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣは、それぞれ、腫瘍成長および腫瘍体積に関して、ＰＤ－１遮断の抗腫瘍効果を有意に増強した（図５Ｂおよび図５Ｃ）。

ＣＸＣＬ９／１０および抗ＰＤ１の併用の相乗効果を評価するために、腫瘍体積曲線の倍加時間を計算し、対照群の倍加時間と比較し、群の中での倍加時間の変化および変化パーセントを比較した。より長い倍加時間は、腫瘍成長の低減を示す。以下の表に示されるように、ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用処理の倍加時間の減少は、個々の処理の倍加時間の減少の合計よりも２．７倍大きかった。

同様の分析において、腫瘍重量データの変化を以下の表に示す。ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用処理の腫瘍重量の減少は、個々の処理の腫瘍重量の減少の合計よりも２４％大きかった。

図５Ａ、図５Ｂ、および図５Ｃの詳細な説明。ＩＴ ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣは、ＫＰＬ－３Ｍモデルにおいて抗ＰＤ－１有効性を増強する。図５Ａ）試験の概略図である。図５Ｂ）ＦＶＢマウスに１．５ｘ１０＾５のＫＰＬ－３Ｍ細胞をＳＣ接種した。７日目に、＜５０ｍｍ３の腫瘍を有するマウスを、ａ）ビヒクル、ｂ）ＩＰ抗ＰＤ－１（７、１０、１３、１５日目に２００μｇ／用量）、ｃ）ＩＴ ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ（７、１０、１３日目に各１０＾６細胞／用量）、ｄ）ｂ）およびｃ）の併用で処理した。腫瘍体積を記録した。図５Ｃ）剖検時の腫瘍重量である。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された。＊、Ｐ＜０．０５、＊＊、Ｐ＜０．００５、＊＊＊＊、Ｐ＜０．０００１。

実施例６．腫瘍内（ＩＴ）ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣは、Ｔ細胞浸潤を促進し、ＫＰＬ－３ＭモデルにおいてＴＭＥの免疫抑制ＭＤＳＣを低減する。
処理時の腫瘍微小環境（ＴＭＥ）の変化を評価するために、腫瘍接種後１６日目および１９日目に腫瘍を採取し、フローサイトメトリーによる免疫表現型検査のために単細胞懸濁液を調製したことを除いて、実施例５（図５）と同じマウス実験を行った（図６）。１６日目に、我々は、ＩＴ ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ単剤療法（図６、左上）および併用処理後に増加したＣＤ４＋Ｔ細胞浸潤を、１９日目のＣＤ８＋Ｔ細胞浸潤の追加の増加およびＭＤＳＣの同時低減とともに観察した（図６、左下、中央、および右）。これらのデータは、ＩＴ ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣがＴ細胞浸潤および機能を強化し、免疫抑制ＴＭＥを再プログラムすることができるという仮説を支持する。

図６の詳細な説明。ＦＶＢマウスに１．５ｘ１０＾５のＫＰＬ－３Ｍ細胞をＳＣ接種した。７日目に、＜５０ｍｍ３の腫瘍を有するマウスを、ａ）ビヒクル、ｂ）ＩＰ抗ＰＤ－１（７、１０、１３、１５日目に２００μｇ／用量）、ｃ）ＩＴ ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ（７、１０、１３日目に各１０＾６細胞／用量）、ｄ）ｂ）およびｃ）の併用で処理した。腫瘍接種後１６日目または１９日目に、腫瘍を採取し、表面マーカーを使用したフローサイトメトリーによって分析した。ＭＤＳＣ、骨髄由来抑制細胞。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された。＊、Ｐ＜０．０５、＊＊、Ｐ＜０．００５、＊＊＊、Ｐ＜０．０００５、＊＊＊＊、Ｐ＜０．０００１。

実施例７．ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ１０－ＤＣは、抗ＰＤ－１の抗腫瘍有効性の増強において機能的に同等である。
ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ－１０ＤＣがＰＤ－１遮断の抗腫瘍効果の増強に対して異なる効果を有するかを評価するために、マウスがＣＸＣＬ９－ＤＣ単独（２ｘ１０＾６）、ＣＸＣＬ１０－ＤＣ単独（２ｘ１０＾６）、または両方（１：１比、各１０＾６）で構成された等数の細胞のＩＴ注射を受けたことを除いて、実施例５（図５）と同様の実験を行った（図７、腫瘍体積、図８、腫瘍重量）。ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ１０－ＤＣ単独、または抗ＰＤ－１との組み合わせによって媒介される同様の抗腫瘍効果が観察され、ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ１０－ＤＣが抗ＰＤ－１の抗腫瘍有効性の増強において機能的に同等であることを示した。

ＣＸＣＬ９－ＤＣ、ＣＸＣＬ１０－ＤＣ、または両方と、抗ＰＤ１との組み合わせの相乗効果を評価するために、腫瘍体積曲線の倍加時間を計算し、対照群の倍加時間と比較し、群の中での倍加時間の変化および変化パーセントを比較した。より長い倍加時間は、腫瘍成長の低減を示す。以下の表に示されるように、ＣＸＣＬ９－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用処理の倍加時間の減少は、個々の処理の倍加時間の減少の合計よりも３０％大きかった。ＣＸＣＬ１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用処理の倍加時間の減少は、個々の処理の倍加時間の減少の合計よりも２．７倍大きかった。ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の両方の併用処理の倍加時間の減少は、個々の処理の倍加時間の減少の合計よりも５５％大きかった。

同様の分析において、腫瘍重量データの変化を以下の表に示す。ＣＸＣＬ９－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用処理の腫瘍重量の減少は、個々の処理の腫瘍重量の減少の合計よりも９．３％大きかった。ＣＸＣＬ１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の併用処理の腫瘍重量の減少は、個々の処理の腫瘍重量の減少の合計よりも３１％大きかった。ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣおよび抗ＰＤ－１の両方の併用処理の腫瘍重量の減少は、個々の処理の腫瘍重量の減少の合計よりも２６％大きかった。

図７Ａ、図７Ｂ、および図７Ｃの詳細な説明。ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ１０－ＤＣは、腫瘍体積によって測定される、抗ＰＤ－１の抗腫瘍有効性の増強において機能的に同等である。図７Ａ）ＦＶＢマウスに１．５ｘ１０＾５のＫＰＬ－３Ｍ細胞をＳＣ接種した。７日目に、＜５０ｍｍ３の腫瘍を有するマウスを、ａ）ビヒクル、ｂ）ＩＰ抗ＰＤ－１（７、１０、１３、１５日目に２００μｇ／用量）、ｃ）ＩＴ ＣＸＣＬ９－ＤＣ（７、１０、１３日目に２ｘ１０＾６細胞／用量）、ｄ）ｂ）およびｃ）の併用で処理した。腫瘍体積を記録した。図７Ｂ）ＣＸＣＬ１０－ＤＣが利用されたことを除いて、図７Ａと同じである。図７Ｃ）ＣＸＣＬ９／１０－ＤＣ（各１０＾６細胞／用量）が利用されたことを除いて、Ａと同じである。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された。＊＊＊＊、Ｐ＜０．０００１。

図８Ａ、図８Ｂ、および図８Ｃの詳細な説明。ＣＸＣＬ９－ＤＣおよびＣＸＣＬ１０－ＤＣは、腫瘍重量によって測定される、抗ＰＤ－１の抗腫瘍有効性の増強において機能的に同等である。剖検時の腫瘍重量が示されることを除いて、図７と同じである。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された。＊、Ｐ＜０．０５、＊＊、Ｐ＜０．００５、＊＊＊、Ｐ＜０．０００５、＊＊＊＊、Ｐ＜０．０００１、ｎｓ、有意ではない。

本明細書では本発明の特定の特徴が図示され、説明されてきたが、多くの修正、置換、変更、および同等物がここで、当業者に思いつくであろう。したがって、添付の特許請求の範囲は、本発明の真の精神趣旨に収まるように、すべてのそのような修正および変更を網羅することを意図することを理解されたい。

Claims (67)

1. 対象において、がんまたは充実性腫瘍を治療する方法であって、
   ａ．前記対象に、
   （ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、
   （ｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、もしくはそれらの組み合わせ、
   （ｉｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、もしくはそれらの組み合わせ、または
   （ｉｖ）それらの任意の組み合わせを投与することと、
   ｂ．前記対象に免疫チェックポイント阻害剤を投与することと、を含む、方法。
2. 前記免疫チェックポイント阻害剤が、抗体、任意に、モノクローナル抗体である、請求項１に記載の方法。
3. 前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＣＴＬＡ－４受容体阻害剤、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ１－Ｌ１阻害剤、ＰＤ１－Ｌ２阻害剤、４－ｌＢＢ阻害剤、ＯＸ４０阻害剤、ＬＡＧ－３阻害剤、ＴＩＭ－３阻害剤、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１または２に記載の方法。
4. 前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ－４阻害剤、任意に、イピリムマブまたはトレミリムマブである、請求項３に記載の方法。
5. 前記免疫チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、ランブロリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブ、およびＡＭＰ－２２４、ＡＭＰ２２４、ＡＵＮＰ１２、ＢＧＢ１０８、ＭＣＬＡ１３４、ＭＥＤＩ０６８０、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、ＳＨＲ１２１０、ＳＴＩＡ１１０Ｘ、ＳＴＩＡ１１１０、およびＴＳＲ０４２からなる群から選択されるＰＤ１阻害剤である、請求項３に記載の方法。
6. 前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＢＭＳ－９３６５５９、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＡＬＮ－ＰＤＬ、ＢＧＢＡ３１７、ＫＤ０３３、ＫＹ１００３、ＳＴＩＡ１００Ｘ、ＳＴＩＡ１０１０、ＳＴＩＡ１０１１、ＳＴＩＡ１０１２およびＳＴＩＡ１０１４からなる群から選択されるＰＤ１－Ｌ１阻害剤である、請求項３に記載の方法。
7. 前記投与することが、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の方法。
8. 前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドが、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含み、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドが、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
9. 前記ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせをコードする前記ポリヌクレオチドが、ベクターに挿入され、前記ベクターが、前記対象に投与されるか、または前記ベクターが、抗原提示細胞（ＡＰＣ）もしくは樹状細胞（ＤＣ）に導入され、次いで、前記対象もしくは前記腫瘍の部位に投与される、請求項１に記載の方法。
10. 前記ベクターが、アデノウイルスベクター、レンチウイルスベクター、ＣＭＶベクター、ワクシニアウイルスベクター、シンドビスウイルスベクター、またはヘルペスウイルスベクターである、請求項９に記載の方法。
11. 前記アデノウイルスベクターが、複製欠損アデノウイルスベクターである、請求項１０に記載の方法。
12. 前記ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、またはそれらの組み合わせをコードする前記ポリヌクレオチドを含む前記細胞が、抗原提示細胞（ＡＰＣ）または樹状細胞（ＤＣ）である、請求項１に記載の方法。
13. 前記ＡＰＣが、樹状細胞である、請求項１２に記載の方法。
14. 前記樹状細胞が、前記対象に対して自己由来であるか、ドナーに由来するか、または細胞株に由来する、請求項１３に記載の方法。
15. 前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む少なくとももしくは約１ｘ１０＾６の細胞、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む約１ｘ１０＾６の細胞、またはそれらの組み合わせが、前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
16. 前記細胞が、２４時間の期間で、１ｘ１０＾６細胞あたり少なくともまたは約１０ｎｇのＣＸＣＬ９またはＣＸＣＬ１０を産生する、請求項１５に記載の方法。
17. 前記対象が、充実性腫瘍を含み、前記細胞が、前記対象に腫瘍内投与される、請求項１に記載の方法。
18. 前記充実性腫瘍が、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）充実性腫瘍である、請求項１７に記載の方法。
19. 前記（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせが、前記対象に、前記免疫チェックポイント阻害剤の前に、約２週間前に、またはそれと同時に投与される、請求項１に記載の方法。
20. 前記（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせが、前記対象に約２回以上、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、または１ヶ月に１回投与される、請求項１に記載の方法。
21. 前記免疫チェックポイント阻害剤が、前記対象に２回以上、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、または１ヶ月に１回投与される、請求項１に記載の方法。
22. 前記（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせ、および前記免疫チェックポイント阻害剤が、独立して、腫瘍内、静脈内、動脈内、腹腔内、鼻腔内、筋肉内、もしくは皮下から選択される経路によって、またはＣＴ誘導もしくは気管支鏡によるＩＴ注射を介して投与される、請求項１に記載の方法。
23. 前記（ｉ）ＣＸＣＬ９ポリペプチド、ＣＸＣＬ１０ポリペプチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、もしくはそれらの組み合わせ、（ｉｉｉ）前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドをコードする前記ポリヌクレオチドを含む細胞、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｖ）それらの任意の組み合わせが、腫瘍内投与され、前記免疫チェックポイント阻害剤が、静脈内投与される、請求項１に記載の方法。
24. 前記対象が、高変異量腫瘍を有する、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 前記高変異量が、前記腫瘍の生検によって決定される、請求項２４に記載の方法。
26. 腫瘍関連新生抗原が、決定される、請求項２４に記載の方法。
27. 前記併用療法の有効性に続いて、前記腫瘍の新生抗原状況が解明される、請求項２４に記載の方法。
28. 前記腫瘍が、ＫＲＡＳ、ＴＰ５３（ＫＰ）、もしくはＳＴＫ１１／ＬＫＢ１、またはそれらの任意の組み合わせから選択される変異を含む、請求項２４に記載の方法。
29. 前記腫瘍が、腫瘍内異種性を有する、請求項２４に記載の方法。
30. 前記腫瘍変異量が、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ ＣＤｘ（商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＡｃｔ（登録商標）、およびＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）Ｈｅｍｅから選択される診断アッセイによって決定される、請求項２４に記載の方法。
31. 前記腫瘍が、上皮成長因子受容体または未分化リンパ腫キナーゼ遺伝子（ＡＬＫ）融合物において活性化変異を有しない、請求項２４に記載の方法。
32. 治療前、治療中、および治療後の体細胞変異量および腫瘍関連新生抗原を使用して、療法を開始、処方、および監視する、請求項２４に記載の方法。
33. 前記対象が、低変異量腫瘍を有する、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
34. 前記低変異量が、前記腫瘍の生検によって決定される、請求項３３に記載の方法。
35. 腫瘍関連新生抗原が、決定される、請求項３３に記載の方法。
36. 前記併用療法の有効性に続いて、前記腫瘍の新生抗原状況が解明される、請求項３３に記載の方法。
37. 前記腫瘍が、ＫＲＡＳ、ＴＰ５３（ＫＰ）、もしくはＳＴＫ１１／ＬＫＢ１、またはそれらの任意の組み合わせから選択される変異を含む、請求項３３に記載の方法。
38. 前記腫瘍が、腫瘍内異種性を有する、請求項３３に記載の方法。
39. 前記腫瘍変異量が、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ ＣＤｘ（商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＡｃｔ（登録商標）、およびＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）Ｈｅｍｅから選択される診断アッセイによって決定される、請求項３３に記載の方法。
40. 前記腫瘍が、上皮成長因子受容体または未分化リンパ腫キナーゼ遺伝子（ＡＬＫ）融合物において活性化変異を有しない、請求項３３に記載の方法。
41. 治療前、治療中、および治療後の体細胞変異量および腫瘍関連新生抗原を使用して、療法を開始、処方、および監視する、請求項３３に記載の方法。
42. がんの治療または再発の低減を必要とする対象において、がんを治療するための方法、または高変異量がんの再発を低減するための方法であって、ａ）ＣＸＣＬ９ベクターを含む樹状細胞およびＣＸＣＬ１０ベクターを含む樹状細胞と、ｂ）有効量の抗ＰＤ－１抗体と、を含む、有効量の併用療法を投与することを含む、方法。
43. ＣＸＣＬ９ベクターを含む前記樹状細胞およびＣＸＣＬ１０ベクターを含む前記樹状細胞が、０、２１、および４２日目に投与され、有効量の抗ＰＤ－１抗体が、０日目に開始して３週間ごとに投与され、任意に、前記ベクターが、レンチウイルスベクターである、請求項４２に記載の方法。
44. 前記高変異量が、前記腫瘍の生検によって決定される、請求項４２に記載の方法。
45. 腫瘍関連新生抗原が、決定される、請求項４２に記載の方法。
46. 前記併用療法の有効性に続いて、前記腫瘍の新生抗原状況が解明される、請求項４２に記載の方法。
47. 前記腫瘍が、ＫＲＡＳ、ＴＰ５３（ＫＰ）、もしくはＳＴＫ１１／ＬＫＢ１、またはそれらの任意の組み合わせから選択される変異を含む、請求項４２に記載の方法。
48. 前記腫瘍が、腫瘍内異種性を有する、請求項４２に記載の方法。
49. 前記腫瘍変異量が、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ ＣＤｘ（商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＡｃｔ（登録商標）、およびＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）Ｈｅｍｅから選択される診断アッセイによって決定される、請求項４２に記載の方法。
50. 前記腫瘍が、上皮成長因子受容体または未分化リンパ腫キナーゼ遺伝子（ＡＬＫ）融合物において活性化変異を有しない、請求項４２に記載の方法。
51. 治療前、治療中、および治療後の体細胞変異量および腫瘍関連新生抗原を使用して、療法を開始、処方、および監視する、請求項４２に記載の方法。
52. がんの治療または再発の低減を必要とする対象において、がんを治療するための方法、または低変異量がんの再発を低減するための方法であって、ａ）ＣＸＣＬ９ベクターを含む樹状細胞およびＣＸＣＬ１０ベクターを含む樹状細胞と、ｂ）有効量の抗ＰＤ－１抗体と、を含む、有効量の併用療法を投与することを含む、方法。
53. ＣＸＣＬ９ベクターを含む樹状細胞およびＣＸＣＬ１０ベクターを含む樹状細胞が、０、２１、および４２日目に投与され、有効量の抗ＰＤ－１抗体が、０日目に開始して３週間ごとに投与され、任意に、前記ベクターが、レンチウイルスベクターである、請求項５２に記載の方法。
54. 前記低変異量が、前記腫瘍の生検によって決定される、請求項５２に記載の方法。
55. 腫瘍関連新生抗原が、決定される、請求項５２に記載の方法。
56. 前記併用療法の有効性に続いて、前記腫瘍の新生抗原状況が解明される、請求項５２に記載の方法。
57. 前記腫瘍が、ＫＲＡＳ、ＴＰ５３（ＫＰ）、もしくはＳＴＫ１１／ＬＫＢ１、またはそれらの任意の組み合わせから選択される変異を含む、請求項５２に記載の方法。
58. 前記腫瘍が、腫瘍内異種性を有する、請求項５２に記載の方法。
59. 前記腫瘍変異量が、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ ＣＤｘ（商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）、ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＡｃｔ（登録商標）、およびＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＯｎｅ（登録商標）Ｈｅｍｅから選択される診断アッセイによって決定される、請求項５２に記載の方法。
60. 前記腫瘍が、上皮成長因子受容体または未分化リンパ腫キナーゼ遺伝子（ＡＬＫ）融合物において活性化変異を有しない、請求項５２に記載の方法。
61. 治療前、治療中、および治療後の体細胞変異量および腫瘍関連新生抗原を使用して、療法を開始、処方、および監視する、請求項５２に記載の方法。
62. ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、またはそれらの組み合わせをコードするポリヌクレオチドを含むベクターを含む、抗原提示細胞。
63. 前記抗原提示細胞が、樹状細胞である、請求項６２に記載の抗原提示細胞。
64. 前記ＣＸＣＬ９ポリペプチドが、配列番号１または配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の抗原提示細胞。
65. 前記ＣＸＣＬ９ポリヌクレオチド配列が、配列番号５または配列番号６を含む、請求項６２に記載の抗原提示細胞。
66. 前記ＣＸＣＬ１０ポリペプチドが、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の抗原提示細胞。
67. 前記ＣＸＣＬ１０ポリヌクレオチド配列が、配列番号７または配列番号８を含む、請求項６２に記載の抗原提示細胞。
    

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