JP2022535062A - Ｇｍ－ｃｓｆ拮抗薬を用いたがんの治療 - Google Patents

Abstract

本発明は、とりわけ、治療を必要とする患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、がんを治療する方法を提供し、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の投与は、骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の免疫抑制活性の阻害をもたらす。本発明はまた、とりわけ、患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、がんに罹患している患者における骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の免疫抑制活性を阻害する方法も提供する。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年６月３日に出願された米国仮特許出願第６２／８５６，６３８号に対する優先権を主張するものであり、これはすべての目的に対してそれらの全体の参照により本明細書に組み込まれる。

配列表
本明細書は、配列表（２０２０年６月３日に「ＫＰＬ－０３５ＷＯ＿ＳＬ．ｔｘｔ」という名称の．ｔｘｔファイルとして電子的に提出された）を参照する。．ｔｘｔファイルは、２０２０年６月３日に作成され、４ＫＢのサイズである。配列表の全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

腫瘍細胞は、宿主Ｔ細胞レパートリーによって認識される可能性のある固有の抗原を発現し、腫瘍免疫療法に対する強力な標的として機能する。しかしながら、腫瘍細胞は、宿主免疫を回避し、エフェクター細胞集団を提示する天然抗原を抑制する阻害性サイトカインを発現する。この免疫抑制性環境中の１つの要素は、腫瘍母地、排出リンパ節、および悪性腫瘍を有する患者の循環に見出される制御性Ｔ細胞の増加した存在である。さらなる研究の１つの分野は、腫瘍関連アネルギーを逆転させ、エフェクター細胞を刺激して悪性細胞を認識および除去するための治療薬の開発である。

図面は、例示のためだけであり、限定のためでない。

膵がんを有する患者の血液からのＣＤ１４＋細胞（ＭＤＳＣ）を用いるＴ細胞増殖アッセイを例示する例示的な棒グラフである。Ｔ細胞増殖は、健常ドナー同種Ｔ細胞と膵がん患者の血液から選別されたＣＤ１４＋細胞との共培養後に、完全培地単独中で培養されたそれらのＴ細胞と比較して、抑制される。Ｔ細胞増殖は、膵がん患者の血液から選別された抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体およびＣＤ１４＋細胞を用いた培養後に、レスキューされる。 異なるがん細胞株におけるＧＭ－ＣＳＦ発現レベルを例示する例示的なグラフである。 がん細胞条件培地が、単球を表現型ＭＤＳＣ（ＣＤ１４＋細胞）に極性化できることを例示する一連の例示的な棒グラフである。腫瘍条件培地（ＣＭ）を生成するために、４つの異なる細胞株を、当技術分野で公知の方法に従って播種および培養した。次いで、ＣＤ１４＋単球細胞を、ＣＭの存在下で６日間培養し、遺伝子およびタンパク質発現について解析した。低レベルのＨＬＡ－ＤＲバイオマーカーは、ＭＤＳＣ表現型を示す。表現型ＭＤＳＣの増加は、正常な培養培地（対照）中で成長したＣＤ＋１４細胞と比較して、ＣＤ１４＋単球がＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞からの条件培地を用いてインキュベートされる際に観察された。 様々な培地を用いて培養されたＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１発現を例示する一連の例示的な棒グラフである。データは、がん細胞条件培地（ＣＭ）および組換えＧＭ－ＣＳＦを補充されたＣＭが、ＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１の発現を誘導し得ることを示す。追加的に、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（Ａｂ）は、ＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１発現レベルを低減できる。 様々な培地を用いて培養されたＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１発現を例示する一連の例示的な棒グラフである。データは、がん細胞条件培地（ＣＭ）および１日目に組換えＧＭ－ＣＳＦを補充されたＣＭが、正常な培養培地（培地）中で成長したＭＤＳＣと比較して、ＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１の発現を誘導し得ることを示す。追加的に、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（Ａｂ）は、ＣＭ中のＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１発現レベルを低減できる。図５Ａにおけるデータは、ＣＭおよび抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（Ａｂ）が同時に添加される際のＰＤ－Ｌ１発現を示す。ＰＤ－Ｌ１発現を、３日間の処理後に測定した。図５Ｂは、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が、ＣＭを用いて培養した７２時間後に添加される際のＰＤ－Ｌ１発現を示す。ＰＤ－Ｌ１発現を、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を用いた処理の２４時間後に測定した。 同上。 ヒト組換えＧＭ－ＣＳＦおよび／または抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（Ａｂ）の補充の有無での、ＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株からの条件培地を用いて処理された単球を用いたＴ細胞増殖を例示する一連の例示的な棒グラフである。単球を、ＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株からの条件培地（ＣＭ）中で３日間培養した。Ｔ細胞（１×１０^５細胞）を、０．１μＭのＣＦＳＥで標識することと、ＩＭＤＭ細胞培養培地中での１０ｎｇ／ｍＬのＩＬ－２および１０ｕＬの可溶性ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔ細胞活性化因子（ＩｍｍｕｎｏＣｕｌｔ）での刺激とによって調製した。次いで、刺激されたＴ細胞を、混合リンパ球反応（ＭＬＲ）において、組換えＧＭ－ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）および／または抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（１００μｇ／ｍＬ）の有無で、ＣＭ処理された単球と（２：１の単球：Ｔ細胞の比率で）共培養した。健常単球と一緒にＩＭＤＭ培養培地中で刺激されたＴ細胞を、対照として使用した。Ｔ細胞を、５日間増殖させ、収集し、ヘルパーＴおよび細胞傷害性Ｔ細胞に対するマーカーであるＣＤ４およびＣＤ８について染色した。細胞増殖を、フローサイトメトリーによって測定し、ＣＦＳＥ希釈によって評価した。左のパネルは増殖する細胞の％に関するＴ細胞増殖アッセイの結果を示し、右のパネルはフローサイトメトリーによる最大値の％（ＭＦＩ）に関する結果（ＣＤ４＋またはＣＤ８＋細胞におけるＣＦＳＥ希釈のシグナル検出）を示す。

本発明は、とりわけ、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を使用して、骨髄由来抑制細胞の免疫抑制活性の阻害に基づいてがんを治療するための改善された方法を提供する。本発明は、部分的には、ＧＭ－ＣＳＦが免疫抑制活性を有するＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１の発現を誘導すること、およびこの発現がＧＭ－ＣＳＦを拮抗することによって抑制され得ることである、驚くべき発見に基づく。本発明はまた、本明細書にさらに記載される、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を他のがん療法と組み合わせて使用してがんを治療する方法も提供する。

いくつかの態様では、本発明は、治療を必要とする患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、がんを治療する方法を提供し、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の投与は、骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の免疫抑制活性の阻害をもたらす。

いくつかの態様では、本発明は、患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、がんに罹患している患者における骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の免疫抑制活性を阻害する方法を提供する。

いくつかの態様では、本発明は、がん治療を受けている患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、がん治療のための免疫応答を強化する方法を提供し、免疫応答は、対照と比較して増加する。

いくつかの実施形態では、免疫応答は、Ｔ細胞増殖のパーセンテージである。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８陽性（ＣＤ８＋）である。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ４陽性（ＣＤ４＋）である。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、ＣＤ８およびＣＤ４（ＣＤ８＋／ＣＤ４＋）について二重陽性（ＣＤ８＋／ＣＤ４＋）である。

いくつかの実施形態では、対照は、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の投与前の患者における免疫応答レベルを示す。いくつかの実施形態では、対照は、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を用いずにがん治療を受けている対照患者における参照免疫応答レベル、または履歴データに基づく参照免疫応答レベルである。

いくつかの実施形態では、がん療法は、免疫療法である。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することは、免疫療法の有効性を増加させる。

一態様では、本発明は、とりわけ、対照と比較して治療を必要とする患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、がん患者においてＰＤ－Ｌ１を抑制する方法を提供する。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することは、がん患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルを減少させる。

いくつかの実施形態では、対照は、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の投与前の患者におけるＰＤ－Ｌ１レベルを示す。

いくつかの実施形態では、対照は、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を用いずにがん治療を受けている対照患者における参照ＰＤ－Ｌ１レベル、または履歴データに基づく参照ＰＤ－Ｌ１レベルである。

いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも１０％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも１５％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも２０％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも３０％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも４０％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも４５％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも５０％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも６０％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも７０％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも７５％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも８０％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも８５％減少する。いくつかの実施形態では、患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルは、対照と比較して少なくとも９０％減少する。

いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１は、ＭＤＳＣ上で発現される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１は、循環ＭＤＳＣ上で発現される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１は、血漿由来ＭＤＳＣ上で発現される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１は、ＭＤＳＣ上で発現される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１は、腫瘍浸潤性免疫細胞上で発現される。

いくつかの実施形態では、患者は、循環骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）を有する。

いくつかの実施形態では、患者は、低レベルの浸潤性Ｔ細胞を有するがんに罹患する。

いくつかの実施形態では、患者は、免疫チェックポイント阻害剤（ＩＣＩ）難治性がんに罹患する。

いくつかの実施形態では、患者は、後期段階または転移性のがんに罹患する。

いくつかの実施形態では、患者は、乳がん、大腸がん（ＣＲＣ）、前立腺がん、黒色腫、膀胱がん、膵がん、膵管腺がん、肝細胞がん、胃がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）、頭頸部扁平上皮細胞がん、非ホジキンリンパ腫、子宮頸がん、消化器がん、泌尿生殖器がん、脳がん、中皮腫、腎細胞がん、婦人科がん、卵巣がん、子宮内膜がん、肺がん、消化器がん、膵がん、食道がん、肝細胞がん、胆管細胞がん、脳がん、中皮腫、悪性黒色腫、メルケル細胞がん、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群または急性リンパ芽球性白血病から選択されるがんに罹患する。

いくつかの実施形態では、患者は、ステージＩＶの乳がん、ステージＩＶの大腸がん（ＣＲＣ）、前立腺がん、または黒色腫から選択されるがんに罹患する。

前記方法が、前記患者に少なくとも１つの他のがん療法を投与することをさらに含む、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの他のがん療法は、化学療法、ＭＤＳＣ標的療法、免疫療法、放射線療法、およびそれらの組み合わせである。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および他のがん療法は、同時に投与される。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および他のがん療法は、順次投与される。

いくつかの実施形態では、患者は、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の投与前に他のがん療法を用いた治療を受けている。

いくつかの実施形態では、患者は、他のがん療法の投与前にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を用いた治療を受けている。

いくつかの実施形態では、他のがん療法は、ＩＣＩである。

いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、Ｂ７、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ－３、ＧＡＬ－９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＧＥＮ－１５０４９、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、またはＡ２ａＲの活性に拮抗する。

いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＰＤ－１抗体（任意選択的にペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（任意選択的にアテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、抗ＣＴＬＡ－４抗体（任意選択的にイピリムマブ（ｉｐｉｌｌｉｍｕｍａｂ））、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗Ｂ７－Ｈ３抗体、抗Ｂ７－Ｈ４抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＨＶＥＭ抗体、抗ＴＩＭ－３抗体、抗ＧＡＬ－９抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗ＶＩＳＴＡ抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗２Ｂ４抗体、抗ＣＤ１６０抗体、抗ＣＧＥＮ－１５０４９抗体、抗ＣＨＫ１抗体、抗ＣＨＫ２抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、抗Ｂ－７抗体、およびそれらの組み合わせから選択される。

いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。

いくつかの実施形態では、方法は、患者に化学療法剤を投与することをさらに含む。

いくつかの実施形態では、ＭＤＳＣ標的療法は、抗ＣＦＳ－１Ｒ抗体、抗ＩＬ－６抗体、オールトランスレチノイン酸、アキシチニブ、エンチノスタット、ゲムシタビン、またはフェンホルミン、およびそれらの組み合わせから選択される。

いくつかの実施形態では、免疫療法は、モノクローナル抗体、サイトカイン、がんワクチン、Ｔ細胞エンゲージング療法、およびそれらの組み合わせから選択される。

いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ５２抗体、抗ＰＤ１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＢＣＭＡ抗体、二重特異性抗体、または二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）抗体、およびそれらの組み合わせから選択される。

いくつかの実施形態では、サイトカインは、ＩＦＮａ、ＩＦＮｐ、ＩＦＮｙ、ＩＦＮｙ、ＩＦＮ、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ｈＧＭ－ＣＳＦ、ＴＮＦａ、またはそれらの任意の組み合わせから選択される。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、抗ＧＭ－ＣＳＦ抗体またはその断片である。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、可溶性ＧＭ－ＣＳＦ受容体である。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体またはその断片である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体またはその断片は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的なモノクローナル抗体である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトまたはヒト化ＩｇＧ４抗体である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、マブリリムマブ（ｍａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂ）である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体その断片は、配列番号６によって規定される軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、配列番号７によって規定される軽鎖相補性決定領域２（ＬＣＤＲ２）、および配列番号８によって規定される軽鎖相補性決定領域３（ＬＣＤＲ３）、ならびに配列番号３によって規定される重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、配列番号４によって規定される重鎖相補性決定領域２（ＨＣＤＲ２）、および配列番号５によって規定される重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）を含む。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／またはＩＣＩの投与は、対照と比較して、患者におけるＭＤＳＣの低減したレベルをもたらす。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／またはＩＣＩの投与は、対照と比較して、特許におけるＭＤＳＣ介在性免疫抑制活性の低減したレベルをもたらす。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／またはＩＣＩの投与は、対照と比較して、患者の末梢血中のＬｉｎ－ＣＤ１４＋ＨＬＡ－ＤＲ－Ｍ－ＭＤＳＣの低減したパーセンテージをもたらす。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／またはＩＣＩの投与は、対照と比較して、患者における成熟ＭＤＳＣ細胞の増加したパーセンテージをもたらす。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／またはＩＣＩの投与は、対照と比較して、Ｔｒｅｇ細胞、マクロファージ、および／または好中球の低減したレベルをもたらす。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／またはＩＣＩの投与は、阻害性サイトカインの減少したレベルをもたらす。

いくつかの実施形態では、阻害性サイトカインは、ＩＬ－１０およびＴＧＦβから選択される。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／またはＩＣＩの投与は、免疫抑制因子の減少したレベルをもたらす。

いくつかの実施形態では、免疫抑制因子は、アルギナーゼ１、誘導性一酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯＳ）、ペルオキシ亜硝酸、一酸化窒素、反応性酸素種、腫瘍関連マクロファージ、およびそれらの組み合わせから選択される。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／またはＩＣＩの投与は、対照と比較して、ＣＤ４＋Ｔエフェクター細胞の増加したレベルをもたらす。

いくつかの実施形態では、対照は、患者における治療前レベルもしくはパーセンテージ、または履歴データに基づく参照レベルもしくはパーセンテージである。

いくつかの態様では、本発明は、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬およびＩＣＩを含むがんを治療するための医薬組成物を提供する。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、抗ＧＭ－ＣＳＦ抗体またはその断片である。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、可溶性ＧＭ－ＣＳＦ受容体である。

いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体またはその断片である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体またはその断片は、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的なモノクローナル抗体である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、ヒトまたはヒト化ＩｇＧ４抗体である。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、マブリリムマブである。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体その断片は、配列番号６によって規定される軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、配列番号７によって規定される軽鎖相補性決定領域２（ＬＣＤＲ２）、および配列番号８によって規定される軽鎖相補性決定領域３（ＬＣＤＲ３）、ならびに配列番号３によって規定される重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、配列番号４によって規定される重鎖相補性決定領域２（ＨＣＤＲ２）、および配列番号５によって規定される重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）を含む。

いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、Ｂ７、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ－３、ＧＡＬ－９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＧＥＮ－１５０４９、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、Ａ２ａＲ、およびそれらの組み合わせの活性に拮抗する。

いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＰＤ－１抗体（任意選択的にペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（任意選択的にアテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、抗ＣＴＬＡ－４抗体（任意選択的にイピリムマブ）、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗Ｂ７－Ｈ３抗体、抗Ｂ７－Ｈ４抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＨＶＥＭ抗体、抗ＴＩＭ－３抗体、抗ＧＡＬ－９抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗ＶＩＳＴＡ抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗２Ｂ４抗体、抗ＣＤ１６０抗体、抗ＣＧＥＮ－１５０４９抗体、抗ＣＨＫ１抗体、抗ＣＨＫ２抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、抗Ｂ－７抗体、およびそれらの組み合わせから選択される。

いくつかの態様では、本発明は、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を含む医薬組成物と、化学療法、ＭＤＳＣ標的療法、免疫療法、放射線療法、およびそれらの組み合わせから選択される少なくとも１つの他のがん療法を含む医薬組成物とを含む、がんを治療するためのキットを提供する。

いくつかの実施形態では、免疫療法は、抗ＰＤ－１抗体（任意選択的にペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（任意選択的にアテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、抗ＣＴＬＡ－４抗体（任意選択的にイピリムマブ）、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗Ｂ７－Ｈ３抗体、抗Ｂ７－Ｈ４抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＨＶＥＭ抗体、抗ＴＩＭ－３抗体、抗ＧＡＬ－９抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗ＶＩＳＴＡ抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗２Ｂ４抗体、抗ＣＤ１６０抗体、抗ＣＧＥＮ－１５０４９抗体、抗ＣＨＫ１抗体、抗ＣＨＫ２抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、抗Ｂ－７抗体、およびそれらの組み合わせから選択されるＩＣＩである。

定義
本発明がより理解され易いように、特定の用語を、最初に以下に定義する。以下の用語およびその他の用語についての追加の定義は、本明細書全体を通して定められる。本発明の背景を説明し、その実施に関する追加的詳細を提供するために本明細書に参照される公表文献および他の参照資料は、参照により本明細書に組み込まれる。

抗体：本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子および免疫グロブリン（Ｉｇ）分子の免疫活性部分、すなわち、抗原に結合する（免疫反応する）抗原結合部位を含む分子を指す。「結合する」または「免疫反応する」によって、抗体が、所望のものの１つ以上の抗原決定基と反応することが、意味される。抗体は、抗体断片を含む。抗体はまた、ポリクローナル、モノクローナル、キメラｄＡｂ（ドメイン抗体）、単鎖、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２断片、ｓｃＦｖ、およびＦａｂ発現ライブラリを含むが、これらに限定されない。抗体は、全抗体、または免疫グロブリン、または抗体断片であり得る。

アミノ酸：本明細書で使用される場合、「アミノ酸」という用語は、その最も広い意味で、ポリペプチド鎖に組み込まれ得る任意の化合物および／または物質を指す。いくつかの実施形態では、アミノ酸は、一般構造Ｈ_２Ｎ－Ｃ（Ｈ）（Ｒ）－ＣＯＯＨを有する。いくつかの実施形態では、アミノ酸は、天然に生じるアミノ酸である。いくつかの実施形態では、アミノ酸は合成アミノ酸であり、いくつかの実施形態では、アミノ酸はｄ－アミノ酸であり、いくつかの実施形態では、アミノ酸は、ｌ－アミノ酸である。「標準アミノ酸」は、天然に生じるペプチドに一般的に見出される２０の標準的なｌ－アミノ酸のうちのいずれかを指す。「非標準アミノ酸」は、合成的に調製されるか、または天然源から取得されたかにかかわらず、標準アミノ酸以外の任意のアミノ酸を指す。本明細書で使用される場合、「合成アミノ酸」は、塩、アミノ酸誘導体（アミドなど）、および／または置換を含むがこれらに限定されない化学的に改変されたアミノ酸を包含する。ペプチド中のカルボキシル末端アミノ酸、および／またはアミノ末端アミノ酸を含むアミノ酸は、メチル化、アミド化、アセチル化、保護基、および／またはそれらの活性に悪影響を与えることなくペプチドの循環半減期を変化させることができる他の化学基との置換によって改変され得る。アミノ酸は、ジスルフィド結合に関与し得る。アミノ酸は、１つ以上の化学物質（例えば、メチル基、酢酸基、アセチル基、リン酸基、ホルミル部分、イソプレノイド基、硫酸基、ポリエチレングリコール部分、脂質部分、炭水化物部分、ビオチン部分など）との会合などの、１つまたは翻訳後修飾を含み得る。「アミノ酸」という用語は、「アミノ酸残基」と互換的に使用され、遊離アミノ酸および／またはペプチドのアミノ酸残基を指す場合もある。用語が、遊離アミノ酸またはペプチドの残基を指すかは、用語が使用されている文脈から明白であろう。

向上：本明細書において使用される場合、「向上」という用語は、状態の防止、低減、もしくは緩和、または対象の状態の改善を意味される。向上は、疾患状態の完全な回復または完全な防止を含むが、これらを必要としない。いくつかの実施形態では、向上は、関連疾患組織では欠落している関連タンパク質またはその活性の増加するレベルを含む。

およそまたは約：本明細書で使用される場合、目的の１つ以上の値に適用される「およそ」または「約」という用語は、指定された参照値と類似している値を指す。特定の実施形態では、「およそ」または「約」という用語は、別段指定されない限り、または別段文脈から明白でない限り、指定された参照値のいずれか方向（大きいか、または小さい）に、２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはそれ以下の範囲内に収まる値の範囲を指す（そのような数が可能な値の１００％を超える場合を除く）。

送達：本明細書で使用される場合、「送達」という用語は、局所送達および全身送達の両方を包含する。

改善する、増加しり、阻害するまたは低減させる：本明細書で使用される場合、「改善する」、「増加する」「阻害する」もしくは「低減させる」という用語、またはその文法的等価物は、本明細書に記載される治療の開始前の同じ個体における測定値、または本明細書に記載される治療が行われない対照対象（または複数の対照対象）における測定値などのベースライン測定値に対する、相対的な値を示す。「対照対象」は、治療されている対象と同じ形態の疾患に罹患し、治療されている対象とほぼ同じ年齢である対象である。

「阻害」または「阻害すること」：本明細書で使用される場合、「阻害」もしくは「阻害すること」、または文法的等価物は、生物学的活性の低減、減少または阻害を意味する。中和：本明細書で使用される場合、中和は、中和抗体が結合するタンパク質、この場合にはＧＭ－ＣＳＦＲαの生物学的活性の低減または
阻害、例えば、ＧＭ－ＣＳＦＲαへのＧＭ－ＣＳＦ結合、もしくは例えば、ＧＭ－ＣＳＦＲα介在性応答によって測定されるＧＭ－ＣＳＦＲαによるシグナル伝達の低減または阻害を意味する。生物学的活性の低減または阻害は、部分的または合計であり得る。抗体がＧＭ－ＣＳＦＲαを中和する程度は、その中和効力と称される。

患者：本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、提供される組成物が、例えば、実験目的、診断目的、予防目的、美容目的、および／または治療目的のために投与され得る任意の生物体を指す。典型的な患者は、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、および／またはヒトなどの、哺乳動物）を含む。いくつかの実施形態では、患者は、ヒトである。ヒトは、出生前および出生後の形態を含む。

薬学的に許容可能な：本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能」という用語は、適切な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症を伴わずにヒトおよび動物の組織と接触して使用することに適し、合理的な利益／リスク比に見合った物質を指す。

実質的な同一性：本明細書において、「実質的な同一性」という語句は、アミノ酸配列または核酸配列の間の比較を指すために使用される。当業者によって理解されるであろうように、２つの配列は、対応する位置に同一の残基を含む場合、一般に「実質的に同一」であるとみなされる。当技術分野で周知であるように、アミノ酸配列または核酸配列は、ヌクレオチド配列に対するＢＬＡＳ ＴＮ、ならびにアミノ酸配列に対するＢＬＡＳＴＰ、ギャップＢＬＡＳＴ、およびＰＳＩ－ＢＬＡＳＴなどの市販のコンピュータープログラムにおいて利用可能なものを含む、多様なアルゴリズムのうちのいずれかを使用して比較され得る。そのようなプログラムの例は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ，ｅｔ ａｌ．，Ｂａｓｉｃ ｌｏｃａｌ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｓｅａｒｃｈ ｔｏｏｌ，Ｊ Ｍａｌ．Ｂｉｏｌ．，２１５（３）：４０３－４１０，１９９０、Ａｌｔｓｃｈｕｌ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２，１９９７、Ｂａｘｅｖａｎｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｔｈｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｗｉｌｅｙ，１９９８、およびＭｉｓｅｎｅｒ，ｅｔ ａｌ．，（ｅｄｓ．），Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１３２），Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，１９９９に記載されている。同一配列を特定することに加えて、上述のプログラムは、典型的には、同一性の程度の数値を提供する。いくつかの実施形態では、対応する残基の少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上は、残基の関連する並びにわたって同一である場合、実質的に同一であるとみなされる。いくつかの実施形態では、関連する並びは、完全な配列である。いくつかの実施形態では、関連する並びは、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２２５、２５０、２７５、３００、３２５、３５０、３７５、４００、４２５、４５０、４７５、５００またはそれ以上の残基である。

対象：本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、ヒトまたは任意の非ヒト動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、または霊長類）を指す。ヒトは、出生前および出生後の形態を含む。多くの実施形態では、対象は、ヒトである。対象は、患者であってもよく、患者とは、疾患の診断または治療のために、医療提供者に提示するヒトを指す。「対象」という用語は、「個体」または「患者」と互換的に本明細書で使用される。対象は、疾患もしくは障害に罹患しているか、または感受性であってもよいが、疾患または障害の症状を呈している場合も、呈していない場合もある。

実質的に：本明細書で使用される場合、「実質的に」という用語は、目的の特徴もしくは特性のすべてまたはほぼすべての範囲または程度を呈する定性的な状態を指す。生物学分野の当業者であれば、生物学的および化学的な現象が、完了まで到達すること、かつ／または完全性にまで進展すること、または完全な結果を実現すること、または絶対的な結果を達成もしくは回避することは、あるとしても滅多にないことを理解するであろう。したがって、「実質的に」という用語は、多くの生物学的および化学的な現象に固有な完全性の潜在的な欠落を捉えるために本明細書で使用される。

全身分布または送達：本明細書で使用される場合、「全身分布」、「全身送達」という用語、または文法的等価物は、身体全体もしくは生物体全体に影響を及ぼす送達または分布メカニズムまたはアプローチを指す。典型的には、全身分布または全身送達は、身体の循環系、例えば、血流を介して達成される。「局所分布または送達」の定義と比較される。

治療有効量：本明細書で使用される場合、治療剤の「治療有効量」という用語は、疾患、障害、および／もしくは状態に罹患しているか、または感受性の対象に投与されたとき、疾患、障害、および／もしくは状態の症状を治療、診断、予防、および／または発症遅延させるために十分である量を意味する。治療有効量は、典型的には、少なくとも１つの単位用量を含む投与レジメンを介して投与されることが、当業者によって理解されるであろう。

治療：本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療」または「治療すること」という用語は、特定の疾患、障害、および／もしくは状態の１つ以上の症状または特性を部分的に、あるいは完全に軽減する、向上させる、緩和する、阻害する、予防する、発生遅延させる、重篤度低減させる、ならびに／あるいは発生率低減させるために使用される任意の方法を指す。治療は、疾患に関連した病態の発現リスクを減少させる目的のために、疾患の徴候を呈せず、かつ／または疾患の早期徴候のみを呈する対象に施され得る。

本発明は、とりわけ、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を使用する治療を必要とする患者において骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の免疫抑制活性を阻害することによって、がんを治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて使用される。本発明は、免疫チェックポイント阻害性（ＩＣＩ）の難治性もしくは抵抗性のがん、または後期段階もしくは転移性のがんを治療するのに特に効果的であることが、企図される。

本発明の様々な態様を、以下のセクションにおいて詳細に記載する。セクションの使用は、本発明を限定するように意味されない。各セクションは、本発明の任意の態様に適用できる。本出願では、「または」の使用は、別段指定されない限り「および／または」を意味する。

骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）
ＭＤＳＣは、骨髄系からの免疫細胞の異種群である。ＭＤＳＣは、慢性感染症およびがんなどの病理学的状況において猛烈に増殖し、免疫刺激特性というよりむしろ、強力な免疫抑制活性を保有する他の骨髄細胞型と区別される。ＣＤ１４^＋ＨＬＡ－ＤＲ^{ｌｏ／ｎｅｇ}単球と呼ばれる、低下したＨＬＡ－ＤＲ発現を有するか、またはＨＬＡ－ＤＲ発現を有しない単球は、ＭＤＳＣにグループ化され、適応免疫を変化させ免疫抑制を生み出すことができる。

ＭＤＳＣは、がん、感染症、慢性炎症、移植、および自己免疫において、末梢血、リンパ器官、脾臓、および腫瘍部位に蓄積する。腫瘍がＭＤＳＣを動員し、増殖させ、活性化する具体的な経路は未知のままであるが、インターロイキン（ＩＬ－１β）、ＩＬ－６、シクロオキシヘナーゼ２（ＣＯＸ２）生成ＰＧＥ_２、高濃度のＧＭ－ＣＳＦ、Ｍ－ＣＳＦ、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、ＩＬ－１０、形質転換成長ベータ（ＴＧＦβ）、インドールアミン２、３－ジオキシヘナーゼ（ＩＤＯ）、ＦＬＴ３リガンド、および幹細胞因子の関与についての証拠は、増加している。

寛容原性ＤＣまたはＭＤＳＣを誘導することが示されている腫瘍細胞株との免疫能力のある細胞の共培養。以前の研究はまた、腫瘍細胞がＧＭ－ＣＳＦを放出し、これが顆粒球ＲＯＳ産生を誘導してＴ細胞機能を阻害することも示唆する。追加的に、プログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）の発現はマウス腫瘍モデルにおけるＭＤＳＣの表面で増加するが、ＭＤＳＣ介在性抑制におけるこのことの役割は不明なままである。

プログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）
プログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１、ＣＤ２７４としても知られる）は、その受容体ＰＤ－１に結合する免疫チェックポイントタンパク質である。ＰＤ－Ｌ１は、様々な細胞型で、主に腫瘍細胞、ＭＤＳＣ、単球、マクロファージ、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、樹状細胞（ＤＣ）、および活性化Ｔ細胞において、また脳、角膜、および網膜などの免疫特権部位で、広く発現される。正常な生理学的条件下では、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１シグナル伝達経路の活性化は、末梢寛容の誘導および維持、Ｔ細胞免疫ホメオスタシスの維持、過剰活性化を回避することおよび免疫介在性組織損傷に対して保護することに密接に関連している。病態では、ＰＤ－Ｌ１は、その受容体プログラム死１（ＰＤ－１）と相互作用し、陰性シグナルを伝達して、プライミング、成長、増殖およびアポトーシスを含む、Ｔ細胞介在性細胞免疫応答の一連のプロセス、ならびに機能的成熟を制御して、免疫逃避をもたらす。

免疫チェックポイント阻害剤（ＩＣＩ）は、多くの腫瘍の治療風景を変え、一部の症例では持続的な応答を誘導し、腫瘍変異荷重、ＣＤ８^＋Ｔ細胞密度、およびＰＤ－Ｌ１発現は各々、ＰＤ－１／－Ｌ１拮抗薬に対する応答の別個のバイオマーカーとして提案されている。免疫チェックポイント遮断抗体についての主な課題のうちの１つは、限定されたＴ細胞応答を伴う悪性腫瘍または免疫学的に「冷たい」腫瘍にある。これらの冷たい腫瘍は、ほとんど浸潤性Ｔ細胞を含まず、認識されず、免疫系による強力な応答を誘発せず、現在の免疫療法での治療を困難にしている。本発明者らは、驚くべきことに、ＧＭ－ＣＳＦが、ＰＤ－Ｌ１を上方制御し、免疫抑制活性に寄与することを見出した。「冷たい」腫瘍を「熱い」腫瘍に変換することは、がん治療における画期的な出来事のうちの１つである。

ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬
ＧＭ－ＣＳＦシグナル伝達
ＧＭ－ＣＳＦは、広範囲の造血細胞型の生存および増殖を強化するＩ型炎症促進性サイトカインである。それは、骨髄細胞（例えば、好中球、好塩基球、好酸球、単球、およびマクロファージ）の分化および増殖の誘導因子として最初に特定された成長因子である（Ｗｉｃｋｓ ＩＰ ａｎｄ Ｒｏｂｅｒｔｓ ＡＷ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．２０１６，１２（１）：３７－４８）。異なるアプローチを使用する研究は、ＧＭ－ＣＳＦ過剰発現では、病理学的変化がほぼ常に続くことが実証している（Ｈａｍｉｌｔｏｎ ＪＡ ｅｔ ａｌ．，Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ．２００４，２２（４）：２２５－３１）。ＧＭ－ＣＳＦは、血管の活性化された内皮を通じて骨髄細胞の輸送を強化し、炎症中の血管における単球およびマクロファージの蓄積にも寄与し得る。ＧＭ－ＣＳＦはまた、炎症組織における常駐組織マクロファージと同様に、単球およびマクロファージの活性化、分化、生存、および増殖も促進する。それは、ＭＭ１マクロファージおよび単球由来樹状細胞（ＭｏＤＣ）への浸潤性単球の分化を促進することによって、炎症組織における抗原提示細胞の表現型を調節する。さらに、マクロファージおよびＭｏＤＣによるＩＬ－２３の産生は、ＩＬ－６およびＩＬ－１などの他のサイトカインと組み合わせて、Ｔ細胞分化を調節する。

Ｍ－ＣＳＦ（マクロファージ－コロニー刺激因子）と一緒に、ＧＭ－ＣＳＦは、マクロファージの数および機能を調節する。ＧＭ－ＣＳＦによって活性化されたマクロファージは、一連のエフェクター機能を獲得し、それらすべては、それらを炎症性マクロファージとして特定される。ＧＭ－ＣＳＦ活性化マクロファージは、ＴＮＦ、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－２３およびＩＬ－１２を含む炎症促進性サイトカイン、ならびにＣＣＬ５、ＣＣＬ２２、およびＣＣＬ２４などのケモカインを産生し、Ｔ細胞および他の炎症性細胞を組織微小環境中に動員する。

ＧＭ－ＣＳＦ受容体は、ヘマトポイエチン（ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｎ）受容体スーパーファミリーのメンバーである。それは、アルファおよびベータサブユニットからなるヘテロ二量体である。アルファサブユニットは、ＧＭ－ＣＳＦに非常に特異的であるのに対し、ベータサブユニットは、ＩＬ－３およびＩＬ－５を含む他のサイトカイン受容体と共有される。これは、ベータ受容体サブユニットのより広範な組織分布に反映される。アルファサブユニット、ＧＭ－ＣＳＦＲαは、主に、好中球、マクロファージ、好酸球、樹状細胞、内皮細胞および呼吸上皮細胞などの骨髄細胞および非造血細胞上で発現される。全長ＧＭ－ＣＳＦＲαは、Ｉ型サイトカイン受容体ファミリーに属する４００アミノ酸のＩ型膜糖タンパク質であり、２２アミノ酸のシグナルペプチド（位置１～２２）、２９８アミノ酸の細胞外ドメイン（位置２３～３２０）、位置３２１～３４５からの膜貫通ドメインおよび短い５５アミノ酸の細胞内ドメインからなる。シグナルペプチドは、切断されて、３７８アミノ酸のタンパク質としてＧＭ－ＣＳＦＲαの成熟形態を提供する。ヒトおよびマウスＧＭ－ＣＳＦＲαの相補的なＤＮＡ（ｃＤＮＡ）クローンが利用可能であり、タンパク質レベルでは、受容体サブユニットは３６％の同一性を有する。ＧＭ－ＣＳＦは、αサブユニット単独に比較的低い親和性（Ｋｄ １～５ｎＭ）で結合することができるが、βサブユニット単独には全く結合することができない。しかしながら、αおよびβサブユニット両方の存在は、高親和性リガンド－受容体複合体（Ｋｄ約１００ｐＭ）をもたらす。ＧＭ－ＣＳＦシグナル伝達は、ＧＭ－ＣＳＦＲα鎖へのその初期の結合、次いでより大きなサブユニット共通β鎖との架橋を通じて生じて、高親和性相互作用を生成し、ＪＡＫ－ＳＴＡＴ経路をリン酸化する。この相互作用はまた、チロシンリン酸化およびＭＡＰキナーゼ経路の活性化を通じてシグナル伝達することもできる。

病理学的には、ＧＭ－ＣＳＦは、炎症性、呼吸器系、および自己免疫性の疾患を悪化させる役割を果たすことが示されている。したがって、ＧＭ－ＣＳＦＲαへのＧＭ－ＣＳＦ結合の中和は、ＧＭ－ＣＳＦＲを通じて介在される疾患および状態を治療するための治療アプローチである。したがって、本発明は、ヒトＧＭ－ＣＳＦまたはＧＭ－ＣＳＦＲα，に結合するか、またはヒトＧＭ－ＣＳＦのＧＭ－ＣＳＦＲαへの結合を阻害する、かつ／または受容体へのＧＭ－ＣＳＦリガンド結合から生じるシグナル伝達を阻害する結合メンバーに関する。リガンド結合時に、ＧＭ－ＣＳＦＲは、ＪＡＫ２／ＳＴＡＴ５、ＭＡＰＫ経路、およびＰＩ３Ｋ経路を含む、複数の下流シグナル伝達経路の刺激を誘発し、すべて、骨髄細胞の活性化および分化に関連する。結合メンバーは、ＧＭ－ＣＳＦＲを通じたＧＭ－ＣＳＦシグナル伝達の可逆的阻害因子であり得る。

ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬
本発明に適したＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、本明細書に記載されるものを含む１つ以上のＧＭ－ＣＳＦ介在性シグナル伝達を低減、阻害または無効化できるそれらの治療薬を含む。例えば、本発明に従う好適なＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、数例を挙げると、ＧＭ－ＣＳＦ可溶性受容体－Ｆｃ融合タンパク質、抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片などの融合タンパク質を含む、抗ＧＭ－ＣＳＦ抗体およびその断片、可溶性ＧＭ－ＣＳＦ受容体およびそのバリアントを含むが、これらに限定されない。

いくつかの実施形態では、好適なＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体である。例示的な抗ＧＭ－ＣＳＦＲαモノクローナル抗体は、ＷＯ２００７／１１０６３１として公開された２００７年３月２７日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＧＢ２００７／００１１０８号、２０１０年１０月１０日に出願されたＥＰ出願第１２０７７０４８７号、２００７年３月２７日に出願された米国出願第１１／６９２，００８号、２００８年９月２５日に出願された米国出願第１２／２９４，６１６号、２０１３年７月１２日に出願された米国出願第１３／９４１，４０９号、２０１０年１１月３０日に出願された米国出願１４／７５３，７９２号、ＷＯ／２０１３／０５３７６７として公開された２０１２年１０月１０日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＥＰ２０１２／０７００７４号、ＷＯ２０１５／１７７０９７として公開された２０１５年５月１８日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＥＰ２０１５／０６０９０２号、２０１７年５月２３日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０６２４７９号に記載されるものを含み、それらの各々は、それらの全体の参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲαモノクローナル抗体は、マブリリムマブである。ＷＯ２００７／１１０６３１は、ＧＭ－ＣＳＦＲαの生物学的活性を高力価で中和する能力を共有する抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体マブリリムマブおよびそのバリアントの分離ならびに特徴付けについて報告している。これらの抗体の機能特性は、少なくとも部分的に、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαの２２６～２３０位のＴｙｒ－Ｌｅｕ－Ａｓｐ－Ｐｈｅ－Ｇｌｎモチーフを結合することに起因すると考えられ、それによって、ＧＭ－ＣＳＦＲαとそのリガンドＧＭ－ＣＳＦとの間の会合を阻害する。マブリリムマブは、ＧＭ－ＣＳＦＲαを標的とすることによってマクロファージの活性化、分化、および生存を調節するように設計されたヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体である。それは、ＧＭ－ＣＳＦＲαの生物学的活性の強力な中和剤であり、ＲＡ患者の滑膜関節内の白血球上のＧＭ－ＣＳＦＲαに結合することによって治療効果を発揮し、低減した細胞生存および活性化をもたらすことが示された。現在までのインビボ使用についてのＧＭ－ＣＳＦＲα抗体マブリリムマブの安全性プロファイルは、関節リウマチ（ＲＡ）に対する第ＩＩ相治験において確立している。

特定の実施形態では、抗体は、２つの軽鎖および２つの重鎖から構成される。重鎖可変ドメイン（ＶＨ）は、配列番号１において特定されたアミノ酸配列を含む。軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）は、配列番号２において特定されたアミノ酸配列を含む。重鎖および軽鎖は各々、相補性決定領域（ＣＤＲ）およびフレームワーク領域を以下の配置で含む。
ＦＲ１－ＣＤＲ１－ＦＲ２－ＣＤＲ２－ＦＲ３－ＣＤＲ３－ＦＲ４

マブリリムマブ抗体重鎖は、ＣＤＲ：ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３を、それぞれ、配列番号３、４および５のアミノ酸配列によって特定されるように含む。軽鎖は、ＣＤＲ：ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を、それぞれ、配列番号６、７および８のアミノ酸配列によって特定されるように含む。

抗ＧＭ－ＣＳＦＲα重鎖可変ドメインアミノ酸配列
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＹＴＬＴＥＬＳＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＧＦＤＰＥＥＮＥＩＶＹＡＱＲＦＱＧＲＶＴＭＴＥＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＩＶＧＳＦＳＰＬＴＬＧＬＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ（配列番号１）

抗ＧＭ－ＣＳＦＲα軽鎖可変ドメインアミノ酸配列
ＱＳＶＬＴＱＰＰＳＶＳＧＡＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＧＳＮＩＧＡＰＹＤＶＳＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＨＮＮＫＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＴＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＡＴＶＥＡＧＬＳＧＳＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ（配列番号２）

抗ＧＭ－ＣＳＦＲａ重鎖可変ドメインＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）アミノ酸配列
ＥＬＳＩＨ（配列番号３）

抗ＧＭ－ＣＳＦＲα重鎖可変ドメインＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）アミノ酸配列
ＧＦＤＰＥＥＮＥＩＶＹＡＱＲＦＱＧ（配列番号４）

抗ＧＭ－ＣＳＦＲα重鎖可変ドメインＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）アミノ酸配列
ＶＧＳＦＳＰＬＴＬＧＬ（配列番号５）

抗ＧＭ－ＣＳＦＲα軽鎖可変ドメインＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）アミノ酸配列
ＴＧＳＧＳＮＩＧＡＰＹＤＶＳ（配列番号６）

抗ＧＭ－ＣＳＦＲα軽鎖可変ドメインＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）アミノ酸配列
ＨＮＮＫＲＰＳ（配列番号７）

抗ＧＭ－ＣＳＦＲａ軽鎖可変ドメインＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）アミノ酸配列
ＡＴＶＥＡＧＬＳＧＳＶ（配列番号８）

いくつかの実施形態では、がん治療のための抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、出願第ＷＯ２００７／１１０６３号および第ＷＯ２０１３／０５３７６７号に開示されるＧＭ－ＣＳＦα結合メンバーから選択されるマブリリムマブのバリアントであり、その全体は、その全体の参照により組み込まれる。

いくつかの実施形態では、がん治療のための抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、および配列番号８のうちの１つ以上と、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上の同一性を有するＣＤＲアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、配列番号２に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン、および配列番号１に対し少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメインを含む。本発明のいくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、配列番号２に対し少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上の同一性を有する軽鎖可変ドメインアミノ酸配列と、配列番号１に対し少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上の同一性を有する重鎖可変ドメインアミノ酸配列とを有する。本発明のいくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、配列番号２に記載されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメインと、配列番号１に記載されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメインとを含む。本発明のいくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の重鎖定常領域は、ＩｇＧ１抗体に由来するＣＨ３ドメインに融合された、ＩｇＧ４抗体に由来するＣＨ１、ヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む。本発明のいくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の重鎖定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、またはＩｇＧ４重鎖定常領域であるか、またはこれらに由来する。本発明のいくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の軽鎖定常領域は、ラムダもしくはカッパ軽鎖定常領域であるか、またはこれらに由来する。

いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、マブリリムマブ抗体の断片である。いくつかの実施形態では、阻害剤は、配列番号３、４、５、６、７、または８のＣＤＲ配列のうちの少なくともいずれか１つを含む、単鎖可変断片（ＳｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態では、阻害剤は、配列番号３、４、５、６、７、または８のＣＤＲ配列のうちの少なくともいずれか１つを含む融合分子である。いくつかの実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα阻害剤配列は、配列番号３、４、５、６、７、または８のＣＤＲ配列のうちの少なくとも１つを含む二重特異性抗体である。

他の実施形態では、好適なＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、抗ＧＭ－ＣＳＦ抗体である。例示的な抗ＧＭ－ＣＳＦモノクローナル抗体は、ＷＯ２００６／１２２７９７として公開された２００６年５月１７日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＥＰ２００６／００４６９６号、ＷＯ２０１７／０７６８０４として公開された２０１６年１０月３１日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＥＰ２０１６／０７６２２５号、およびＷＯ／２０１９／０７０６８０として公開された２０１８年１０月２日に出願された国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０５３９３３号に記載されるものを含み、それらの各々は、それらの全体の参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態では、抗ＧＭ－ＣＳＦモノクローナル抗体は、オチリマブ（ｏｔｉｌｉｍａｂ）である。

本開示の抗ＧＭ－ＣＳＦＲαまたは抗ＧＭ－ＣＳＦ抗体は、多重特異性、例えば、二重特異性であり得る。その抗体は、哺乳動物（例えば、ヒトまたはマウス）、ヒト化、キメラ、組換え、合成的に産生された、または天然に単離された抗体であり得る。本開示の例示的な抗体は、限定なく、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）、ＩｇＭ、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、およびＩｇＡｓｅｃ）、ＩｇＤ、ＩｇＥ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’２、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、Ｆｅｂ、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、およびＳＭＩＰ結合部分を含む。特定の実施形態では、抗体は、ｓｃＦｖである。ｓｃＦｖは、例えば、抗原結合を可能にするためにｓｃＦｖを異なる方向に配向することを可能にする可撓性リンカーを含み得る。様々な実施形態において、抗体は、細胞内側の還元環境においてその構造および機能を保持するサイトゾル安定性ｓｃＦｖまたはイントラボディであってもよい（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Ｆｉｓｈｅｒ ａｎｄ ＤｅＬｉｓａ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３８５（１）：２９９－３１１，２００９を参照されたい）。特定の実施形態では、ｓｃＦｖは、当技術分野で公知の方法に従って、ＩｇＧまたはキメラ抗原受容体に変換される。実施形態では、抗体は、変性タンパク質標的および天然タンパク質標的の両方に結合する。実施形態では、抗体は、変性タンパク質および天然タンパク質の両方に結合する。

ヒトを含むほとんどの哺乳動物において、抗体全体は、ジスルフィド結合によって連結される少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を有する。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）および重鎖定常領域（ＣＨ）からなる。重鎖定常領域は、３つのドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）、およびＣＨ１とＣＨ２との間のヒンジ領域からなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬ）および軽鎖定常領域（ＣＬ）からなる。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬからなる。ＶＨ領域およびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存されている領域が散在する相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる、超可変性の領域にさらに細分され得る。各ＶＨおよびＶＬは、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端へ以下の順序で配置される：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。

抗体は、抗体のすべての既知の形態、および抗体様特性を有する他のタンパク質足場を含む。例えば、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体、一価抗体、キメラ抗体、またはフィブロネクチンもしくはアンキリンリピートなどの抗体様特性を有するタンパク質足場であり得る。抗体は、以下のアイソタイプのうちのいずれかを有し得る：ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）、ＩｇＭ、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、およびＩｇＡｓｅｃ）、ＩｇＤ、またはＩｇＥ。

抗体断片は、抗体に由来する１つ以上のセグメントを含み得る。抗体に由来するセグメントは、特定の抗原に特異的に結合する能力を保持し得る。抗体断片は、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’２、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、Ｆｅｂ、ｓｃＦｖ、またはＳＭＩＰであり得る。抗体断片は、例えば、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、トリアボディ（ｔｒｉａｂｏｄｙ）、アフィボディ（ａｆｆｉｂｏｄｙ）、ナノボディ、アプタマー、ドメイン抗体、線状抗体、単鎖抗体、または抗体断片から形成され得る多様な多重特異性抗体のうちのいずれかであり得る。

抗体断片の例は、（ｉ）Ｆａｂ断片：ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、およびＣＨ１ドメインからなる一価断片と、（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片：ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片と、（ｉｉｉ）Ｆｄ断片：ＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインからなる断片と、（ｉｖ）Ｆｖ断片：抗体の単一アームのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなる断片と、（ｖ）ｄＡｂ断片：ＶＨドメインおよびＶＬドメインを含む断片と、（ｖｉ）ｄＡｂ断片：ＶＨドメインである断片と、（ｖｉｉ）ｄＡｂ断片：ＶＬドメインである断片と、（ｖｉｉｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）と、（ｉｘ）１つ以上の合成リンカーによって任意選択的に結合し得る、２つ以上の単離されたＣＤＲの組み合わせとを含む。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは、別個の遺伝子によってコードされるが、それらは、例えば、ＶＬ領域およびＶＨ領域が対になって一価結合部分（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる）を形成する単一のタンパク質として発現されることを可能にする合成リンカーによる組換え方法を使用して、結合できる。抗体断片は、当業者に公知の従来技術を使用して取得され得、いくつかの例では、インタクトな抗体と同じ様式で使用され得る。抗原結合断片は、組換えＤＮＡ技術によって、またはインタクトな免疫グロブリンの酵素的もしくは化学的切断によって産生され得る。抗体断片は、追加のＣ末端アミノ酸、Ｎ末端アミノ酸、または個々の断片を分離するアミノ酸の添加を伴う、上述の抗体断片のうちのいずれかをさらに含み得る。

抗体は、第一の種に由来する１つ以上の抗原決定領域または定常領域、および第２の種に由来する１つ以上の抗原決定領域または定常領域を含む場合、キメラと称され得る。キメラ抗体は、例えば、遺伝子工学によって構築され得る。キメラ抗体は、異なる種（例えば、マウスおよびヒトから）に属する免疫グロブリン遺伝子セグメントを含み得る。

抗体は、ヒト抗体であり得る。ヒト抗体は、フレームワーク領域およびＣＤＲ領域の両方がヒト免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する結合部分を指す。さらに、抗体が定常領域を含む場合、定常領域もまた、ヒト免疫グロブリン配列に由来する。ヒト抗体は、例えば、１つ以上の配列多様性、例えば、変異などの、ヒト免疫グロブリン配列において特定されないアミノ酸残基を含み得る。多様性または追加のアミノ酸は、例えば、ヒトの操作によって導入され得る。本開示のヒト抗体は、キメラでない。

抗体は、ヒト化され得、非ヒト免疫グロブリンまたは抗体に実質的に由来する１つ以上の抗原決定領域（例えば、少なくとも１つのＣＤＲ）を含む抗体は、操作されて、ヒト免疫グロブリンまたは抗体に実質的に由来する少なくとも１つの免疫グロブリンドメインを含むことを意味する。抗体は、本明細書に記載される変換方法を使用して、例えば、第１のベクターによってコードされた非ヒト抗体から、第２のベクターによってコードされたヒトフレームワークに抗原認識配列を挿入することによって、ヒト化され得る。例えば、第一のベクターは、非ヒト抗体（またはその断片）をコードするポリヌクレオチドおよび部位特異的組換えモチーフを含み得、一方で第２のベクターは、ヒトフレームワークをコードするポリヌクレオチドおよび第１のベクター上の部位特異的組換えモチーフに相補的な部位特異的組換えモチーフを含み得る。部位特異的組換えモチーフは、組換え事象が、非ヒト抗体からヒトフレームワークへの１つ以上の抗原決定領域の挿入をもたらし、それによって、ヒト化抗体をコードするポリヌクレオチドを形成するように、各ベクター上に位置付けられ得る。

特定の実施形態では、抗体は、ｓｃＦｖからＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）に変換される。ｓｃＦｖ断片をＩｇＧに変換するための当技術分野における様々な方法が、存在する。ｓｃＦｖ断片をＩｇＧに変換する１つのそのような方法は、米国特許出願公開第２０１６／０３６２４７６号に開示されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

併用療法
免疫チェックポイント阻害剤（ＩＣＩ）
いくつかの実施形態では、本発明に従うがんを治療する方法は、それを必要とする対象に、ＩＣＩと組み合わせてＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む。

いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、生物学的治療薬または小分子である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、融合タンパク質またはそれらの組み合わせである。

いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＰＤ－１、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ－３、ＧＡＬ－９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＧＥＮ－１５０４９、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、Ａ２ａＲ、Ｂ－７ファミリーリガンドまたはそれらの組み合わせであり得るチェックポイントタンパク質を阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＰＤ－１、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ－３、ＧＡＬ－９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＧＥＮ－１５０４９、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、Ａ２ａＲ、Ｂ－７ファミリーリガンドまたはそれらの組み合わせであり得るチェックポイントタンパク質のリガンドと相互作用する。

いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＣＴＬＡ－４抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＰＤ－Ｌ２抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＰＤ－１抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗Ｂ７－Ｈ３抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗Ｂ７－Ｈ４抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＢＴＬＡ抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＨＶＥＭ抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＴＩＭ－３抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＧＡＬ－９抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＬＡＧ－３抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＶＩＳＴＡ抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＫＩＲ抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗２Ｂ４抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＣＤ１６０抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＣＧＥＮ－１５０４９抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＣＨＫ１抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗ＣＨＫ２抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＣＩは、抗Ａ２ａＲ抗体である。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、抗Ｂ－７抗体である。

いくつかの実施形態では、ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブである。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１抗体は、ニボルマブである。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１抗体は、セミプリマブである。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１抗体はアベルマブである。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１抗体は、デュルバルマブである。いくつかの実施形態では、ＣＴＬＡ－４抗体は、イピリムマブである。

追加の治療剤
いくつかの実施形態では、本発明に従うがんを治療する方法は、それを必要とする対象に、追加の治療剤と組み合わせてＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む。特定の実施形態では、追加の薬剤は、化学療法および／または放射線療法を含むがん療法である。特定の実施形態では、追加の治療剤は、組換えタンパク質またはモノクローナル抗体を含む。特定の実施形態では、組換えタンパク質またはモノクローナル抗体は、エタラシズマブ（Ｅｔａｒａｃｉｚｕｍａｂ）（Ａｂｅｇｒｉｎ）、タカツズマブテトラキセタン（Ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ）、ラベツズマブ、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ）、オビヌツズマブ（Ｇａｚｙｖａ）、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ）、クリバツズマブ（Ｃｌｉｖａｔｕｚｕｍａｂ）、トラスツズマブエムタンシン（Ｋａｄｃｙｌａ）、ラムシルマブ、リツキシマブ（ＭａｂＴｈｅｒａ、Ｒｉｔｕｘａｎ）、ゲムツズマブオゾガマイシン（Ｍｙｌｏｔａｒｇ）、ペルツズマブ（Ｏｍｎｉｔａｒｇ）、ギレンツキシマブ（Ｇｉｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ）（Ｒｅｎｃａｒｅｘ）、またはニモツズマブ（Ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ）（Ｔｈｅｒａｃｉｍ、Ｔｈｅｒａｌｏｃ）を含む。

特定の実施形態では、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬は、上のチェックポイント阻害剤の節に記載されるチェックポイント阻害剤を標的とする免疫調節物質を含む。特定の実施形態では、免疫調節物質は、ニボルマブ、イピリムマブ、アテゾリズマブ、またはペムブロリズマブを含む。特定の実施形態では、追加の治療剤は、化学療法剤である。特定の実施形態では、化学療法剤は、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、イホスファミド、クロラムブシル、ブスルファン、メルファラン、メクロレタミン、ウラムスチン、チオテパ、ニトロソウレア、またはテモゾロミド）、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン、アドリアマイシン、ダウノルビシン、エピルビシン、またはミトキサントロン）、細胞骨格破壊因子（例えば、パクリタキセルまたはドセタキセル）、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（例えば、ボリノスタットまたはロミデプシン）、トポイソメラーゼの阻害剤（例えば、イリノテカン、トポテカン，アムサクリン、エトポシド、またはテニポシド）、キナーゼ阻害剤（例えば、ボルテゾミブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ベムラフェニブ、またはビスモデギブ）、ヌクレオシド類似体もしくは前駆体類似体（例えば、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、シタラビン，フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、またはチオグアニン）、ペプチド抗生物質（例えば、アクチノマイシンまたはブレオマイシン）、白金系薬剤（例えば、シスプラチン、オキサロプラチン、またはカルボプラチン）、または植物アルカロイド（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、ポドフィロトキシン、パクリタキセル、またはドセタキセル）である。いくつかの実施形態では、化学療法剤は、ヌクレオシド類似体である。いくつかの実施形態では、化学療法剤は、ゲムシタビンである。特定の実施形態では、追加の治療剤は、放射線療法である。

がんの治療
本発明は、様々ながん、特に、それらの免疫チェックポイント阻害性（ＩＣＩ）の難治性もしくは抵抗性のがん、または後期段階もしくは転移性のがんを治療するために使用され得る。

いくつかの実施形態では、がんは、泌尿生殖器がん（前立腺がん、腎細胞がん、膀胱がんなど）、婦人科がん（卵巣がん、子宮頸がん、子宮内膜がんなど）、肺がん、消化器がん（非転移性または転移性の大腸がん、膵がん、胃がん、食道がん、肝細胞がん、胆管細胞がんなど）、頭頸部がん（例えば、頭頸部扁平上皮細胞がん）、悪性グリオーマおよび脳転移を含む脳がん、悪性中皮腫、非転移性または転移性の乳がん（例えば、ホルモン難治性転移性乳がん）、悪性黒色腫、メルケル細胞がんまたは骨および軟部組織肉腫、ならびに多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群および急性リンパ芽球性白血病などの血液学的腫瘍症を含む、任意の固形腫瘍または液体がんである。いくつかの実施形態では、疾患は、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、乳がん（例えば、ステージＩＶ乳がん、ホルモン難治性転移性乳がん）、頭頸部がん（例えば、頭頸部扁平上皮細胞がん）、転移性大腸がん、ホルモン感受性またはホルモン難治性の前立腺がん、大腸がん（例えば、ステージＩＶ大腸がん）、卵巣がん、肝細胞がん、腎細胞がん、軟部組織肉腫、または小細胞肺がんである。

本明細書で使用される場合、用語「がん」は、インビトロ（例えば、形質転換細胞）またはインビボのいずれかで、過剰増殖性細胞成長によって特徴付けられた広範なクラスの障害を指す。本発明の組成物および方法によって治療または予防され得る状態は、例えば、良性または悪性の腫瘍、多様な過形成などを含む、多様な新生物を含む。本発明の化合物および方法は、そのような条件に関与する望ましくない過剰増殖性細胞成長の阻害および／または復帰を達成できる。

がんの例は、急性リンパ芽球性白血病、成人；急性リンパ芽球性白血病、小児；急性骨髄白血病、成人；副腎皮質がん；副腎皮質がん、小児；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；ＡＩＤＳ関連悪性腫瘍；肛門がん；星細胞腫、小児小脳；星細胞腫、小児大脳；胆管がん、肝外；膀胱がん；膀胱がん、小児；骨がん、骨肉腫／悪性線維性組織球腫；脳幹グリオーマ、小児；脳腫瘍、成人；脳腫瘍、脳幹グリオーマ、小児；脳腫瘍、小脳星細胞腫、小児；脳腫瘍、大脳星細胞腫／悪性グリオーマ、小児；脳腫瘍、上衣腫、小児；脳腫瘍、髄芽腫、小児；脳腫瘍、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、小児；脳腫瘍、視覚路および視床下部グリオーマ、小児；脳腫瘍、小児（その他）；乳がん；乳がんおよび妊娠；乳がん、小児；乳がん、男性；気管支腺腫／カルチノイド、小児：カルチノイド腫瘍、小児；カルチノイド腫瘍、消化器；がん腫、副腎皮質；がん腫、膵島細胞；原発不明のがん腫；中枢神経系リンパ腫、原発性；小脳星細胞腫、小児；大脳星細胞腫／悪性グリオーマ、小児；子宮頸がん；小児がん；慢性リンパ球性白血病；慢性骨髄性白血病；慢性骨髄増殖性障害；腱鞘の明細胞肉腫；結腸がん；大腸がん、小児；皮膚Ｔ細胞リンパ腫；子宮内膜がん；上衣腫、小児；上皮がん、卵巣；食道がん；食道がん、小児；ユーイングの腫瘍ファミリー；頭蓋外胚細胞腫瘍、小児；性腺外胚細胞腫瘍；肝外胆管がん；眼がん、眼内黒色腫；眼がん、網膜芽細胞腫；胆嚢がん；胃（Ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（Ｓｔｏｍａｃｈ））がん；胃（Ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（Ｓｔｏｍａｃｈ））がん、小児；消化管カルチノイド腫瘍；胚細胞腫瘍、頭蓋外、小児；胚細胞腫瘍、性腺外；胚細胞腫瘍、卵巣；妊娠性絨毛性腫瘍；グリオーマを含む。小児脳幹；グリオーマ。小児の視覚路および視床下部；ヘアリー細胞白血病；頭頸部がん；肝細胞（肝）がん、成人（原発性）；肝細胞（肝）がん、小児（原発性）；ホジキンリンパ腫、成人；ホジキンリンパ腫、小児；妊娠中のホジキンリンパ腫；下咽頭がん；視床下部および視覚路グリオーマ、小児；眼内黒色腫；膵島細胞がん（膵内分泌部）；カポジ肉腫；腎臓がん；喉頭がん；喉頭がん、小児；白血病、急性リンパ芽球性、成人；白血病、急性リンパ芽球性、小児；白血病、急性骨髄、成人；白血病、急性骨髄、小児；白血病、慢性リンパ球性；白血病、慢性骨髄性；白血病、ヘアリー細胞；口唇および口腔がん；肝がん、成人（原発性）；肝がん、小児（原発性）；肺がん、非小細胞；肺がん、小細胞；リンパ芽球性白血病、成人急性；リンパ芽球性白血病、小児急性；リンパ球性白血病、慢性；リンパ腫、ＡＩＤＳ関連；リンパ腫、中枢神経系（原発性）；リンパ腫、皮膚Ｔ細胞；リンパ腫、ホジキン、成人；リンパ腫、ホジキン；小児；リンパ腫、妊娠中のホジキン；リンパ腫、非ホジキン、成人；リンパ腫、非ホジキン、小児；リンパ腫、妊娠中の非ホジキン；リンパ腫、原発性中枢神経系；マクログロブリン血症、ワルデンシュトレーム；男性乳がん；悪性中皮腫、成人；悪性中皮腫、小児；悪性胸腺腫；髄芽腫、小児；黒色腫；黒色腫、眼内；メルケル細胞がん；中皮腫、悪性；潜在性原発性の転移性扁平上皮頸部がん；多発性内分泌腫瘍症候群、小児；多発性骨髄腫／形質細胞新生物；菌状息肉症；骨髄異形成症候群；骨髄性白血病、慢性；骨髄白血病、小児急性；骨髄腫、多発性；骨髄増殖性障害、慢性；鼻腔および副鼻腔がん；上咽頭がん；上咽頭がん、小児；神経芽細胞腫；神経線維腫；非ホジキンリンパ腫、成人；非ホジキンリンパ腫、小児；妊娠中の非ホジキンリンパ腫；非小細胞肺がん；口腔（Ｏｒａｌ）がん、小児；口腔（Ｏｒａｌ Ｃａｖｉｔｙ）および口唇がん；中咽頭がん；骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫；卵巣がん、小児；卵巣上皮がん；卵巣胚細胞腫瘍；卵巣低悪性度腫瘍；膵がん；膵がん、小児、膵がん、膵島細胞；副鼻腔および鼻腔がん；副甲状腺がん；陰茎がん；褐色細胞腫、松果体およびテント上原始神経外胚葉性腫瘍、小児；下垂体腫瘍；形質細胞新生物／多発性骨髄腫；胸膜肺芽腫；妊娠および乳がん；妊娠およびホジキンリンパ腫；妊娠および非ホジキンリンパ腫；原発性中枢神経系リンパ腫；原発性肝がん、成人；原発性肝がん、小児；前立腺がん；直腸がん；腎細胞（腎臓）がん；腎細胞がん、小児；腎盂および輸尿管、移行細胞がん；網膜芽細胞腫；横紋筋肉腫、小児；唾液腺がん；唾液腺がん、小児；肉腫、ユーイングの腫瘍ファミリー；肉腫、カポジ肉腫（骨肉腫）／骨の悪性線維性組織球腫；肉腫、横紋筋肉腫、小児；肉腫、軟部組織、成人；肉腫、軟部組織、小児；セザリー症候群；皮膚がん；皮膚がん、小児；皮膚がん（黒色腫）；皮膚がん、メルケル細胞；小細胞肺がん；小腸がん；軟部組織肉腫、成人；軟部組織肉腫、小児；潜在性原発性の扁平上皮頸部がん、転移性；胃（Ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（Ｇａｓｔｒｉｃ））がん；胃（Ｓｔｏｍａｃｈ）（胃（Ｇａｓｔｒｉｃ））がん、小児；テント上原始神経外胚葉性腫瘍、小児；Ｔ細胞リンパ腫、皮膚；精巣がん；胸腺腫、小児；胸腺腫、悪性；甲状腺がん；甲状腺がん、小児；腎盂および輸尿管の移行細胞がん；絨毛性腫瘍、妊娠性；原発部位不明のがん、小児；小児の異常ながん；輸尿管および腎盂、移行細胞がん；尿道がん；子宮肉腫；膣がん；視覚路および視床下部グリオーマ、小児；外陰がん；ワルデンシュトレームマクログロブリン血症ならびにウィルムス腫瘍。

医薬組成物および投与
本発明の抗体または薬剤（本明細書では「活性化合物」とも称される）ならびにそれらの誘導体、断片、類似体および相同体は、投与に適した医薬組成物に組み込まれ得る。かかる組成物は、典型的には、抗体または薬剤および薬学的に許容可能な担体を含む。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能な担体」という用語は、医薬投与と互換性のある、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含むように意図される。好適な担体は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの最新版、当分野の標準参照テキストに記載される。そのような担体または希釈剤の好ましい例は、水、生理食塩水、リンゲル溶液、デキストロース溶液、および５％ヒト血清アルブミンを含むが、これらに限定されない。リポソームおよび固定油などの非水性ビヒクルもまた、使用され得る。薬学的に活性な物質のためのこのような媒体および薬剤の使用は、当技術分野で周知である。任意の従来の培地または薬剤が活性化合物と互換性がない場合を除き、組成物におけるその使用が企図される。補足的な活性化合物もまた、組成物に組み込まれ得る。

本発明の医薬組成物は、その意図された投与経路に適合するように製剤化される。投与経路の例は、非経口、例えば、静脈内、皮内、皮下、経口（例えば、吸入）、経皮（すなわち、局所）、経粘膜、および直腸投与を含む。非経口、皮内、または皮下適用のために使用される溶液または懸濁液は、以下の構成要素：注射用水、生理食塩水溶液、固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒などの滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗細菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化物質；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの浸透圧の調整のための薬剤を含み得る。ｐＨは、塩酸または水酸化ナトリウムなどの酸または塩基で調整され得る。非経口調製物は、アンプル、使い捨てシリンジまたはガラスもしくはプラスチックで作製された複数回用量バイアルに封入され得る。

注射可能な使用に適した医薬組成物は、滅菌注射可能溶液または分散液の即時調製のための滅菌水溶液（水溶性である場合）または分散液および滅菌粉末を含む。静脈内投与については、好適な担体は、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，Ｎ．Ｊ．）、またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含む。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、およびそれらの好適な混合物を含有する溶媒または分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散の場合に必要な粒子サイズの維持によって、かつ界面活性剤の使用によって維持され得る。微生物の作用の防止は、様々な抗細菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって達成され得る。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば、糖類、例えば、マニトール（ｍａｎｉｔｏｌ）、ソルビトールなどのポリアルコール、塩化ナトリウムを含むことが、好ましくなる。注射可能な組成物の長期間の吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを組成物中に含むことによってもたらされ得る。

滅菌注射可能溶液は、活性化合物を、必要に応じて、上で列挙された成分の１つまたは組み合わせを適切な溶媒中に必要量で組み込み、その後の濾過滅菌によって調製され得る。一般に、分散体は、活性化合物を、塩基性分散媒と、上で列挙されたものから必要とされる他の成分とを含有する滅菌ビヒクルに組み込むことによって調製される。滅菌注射可能溶液の調製のための滅菌粉末の場合、調製方法は、活性成分に加えて、その以前に滅菌濾過された溶液からの任意の追加の所望の成分の粉末を生じる、真空乾燥および凍結乾燥である。

経口組成物は、一般に、不活性希釈剤または食用担体を含む。これらは、ゼラチンカプセルに封入され得るか、または錠剤に圧縮され得る。経口治療投与の目的のために、活性化合物は、賦形剤とともに組み込まれ得、錠剤、トローチ、またはカプセルの形態で使用され得る。経口組成物はまた、マウスウォッシュとしての使用のための流体担体を使用して調製され得、流体担体中の化合物は、経口的に適用され、すすがれ（ｓｗｉｓｈｅｄ）、吐き出されるか、または飲み込まれる。薬学的に互換性のある結合剤、および／またはアジュバント材料は、組成物の一部として含まれ得る。錠剤、カプセル、トローチなどは、以下の成分、微結晶セルロース、トラガカントガムもしくはゼラチンなどの結合剤；デンプンもしくはラクトースなどの賦形剤、アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、またはトウモロコシデンプンなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｔｅｓなどの潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロースまたはサッカリンなどの甘味剤；またはペパーミント、サリチル酸メチル、もしくはオレンジ香味料などの香味剤、または類似の性質の化合物のうちのいずれかを含有し得る。

吸入による投与のために、化合物は、好適な噴射剤、例えば、二酸化炭素などの気体、またはネブライザーを含有する、加圧された容器またはディスペンサーからのエアロゾルスプレーの形態で送達される。

全身投与はまた、経粘膜手段または経皮手段によるものでもあり得る。経粘膜投与または経皮投与のために、透過されるバリアに適切な浸透剤が、製剤において使用される。そのような浸透剤は、当技術分野で一般に公知であり、例えば、経粘膜投与用、洗剤、胆汁酸塩、およびフシジン酸誘導体を含む。経粘膜投与は、鼻腔スプレーまたは座薬の使用を通じて達成され得る。経皮投与のために、活性化合物は、当技術分野で一般に公知の軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、ゲル、またはクリームに製剤化される。

化合物はまた、直腸送達のための座薬（例えば、ココアバターおよび他のグリセリドなどの従来の座薬基剤を用いて）または停留浣腸剤（ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｅｎｅｍａ）の形態でも調製され得る。

一実施形態では、活性化合物は、移植片およびマイクロカプセル化送達システムを含む制御放出製剤などの、身体からの急速な除去に対して化合物を保護するであろう担体とともに調製される。エチレンビニルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの生分解性、生体適合性ポリマーが、使用され得る。そのような製剤の調製のための方法は、当業者に明白であろう。材料はまた、Ａｌｚａ ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎおよびＮｏｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から商業的に入手することもできる。リポソーム懸濁液（ウイルス抗原に対するモノクローナル抗体を用いて感染細胞に標的化されたリポソームを含む）もまた、薬学的に許容可能な担体として使用され得る。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載されるように、当業者に公知の方法に従って調製され得る。

投与の容易さおよび投薬量の均一性のために、投薬量単位形態で経口組成物または非経口組成物を製剤化することが、特に有利である。本明細書で使用される場合、投薬量単位形態は、治療される対象に対する単位投薬量として適した、物理的に別個の単位を指し、各単位は、必要とされる薬学的担体に関連して所望の治療効果を生み出すように計算された所定量の活性化合物を含有する。本発明の投薬量単位形態についての仕様は、活性化合物の固有の特徴、および達成される特定の治療効果、および個体の治療のためのそのような活性化合物を配合する技術に内在する限界によって左右され、それらに直接依存する。

医薬組成物は、投与についての指示と一緒に、容器、パック、またはディスペンサーに含まれ得る。

本発明は、本明細書に付随するスライドによってさらに例示されるが、限定されるものではない。本発明の特定の化合物、組成物および方法が、特定の実施形態に従って具体的に記載されている一方で、以下の実施例は、本発明を例示するためにのみ役立つものであり、本発明を限定するように意図されない。

実施例１．抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＴ細胞増殖をレスキューする
本実施例における研究は、Ｔ細胞増殖に対する骨髄集団の抑制能が、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬によってレスキューされ得ることを例示する。

抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の処理の有無でのＣＤ１４＋細胞を用いたＴ細胞増殖アッセイを、実施した。簡潔に述べると、ＣＤ１４＋（ＭＤＳＣ）細胞を、当技術分野で公知の方法に従って、膵がん患者から取得された血液サンプル（ＰＢＭＣ）から単離した。単離されたＣＤ１４＋細胞を、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体で４８時間処理した。次に、カルボキシ－フルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）で標識されたＣＤ３＋Ｔ細胞を、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体処理または未処理のＣＤ１４＋細胞と９６時間共培養し、増殖を、ＣＦＳＥ希釈（分割細胞）によって決定した。共培養を有しないＴ細胞を、陰性対照として使用した。

図１に示されるように、Ｔ細胞増殖は、未処理のＣＤ１４＋細胞を用いた培養後に著しく抑制される。一方で、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体処理されたＣＤ１４＋細胞は、増加したＴ細胞増殖を示し、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の添加が、Ｔ細胞増殖をレスキューし、ＭＤＳＣの抑制能を妨げることを示唆した。

実施例２．がん細胞条件培地は単球を表現型ＭＤＳＣに極性化する
この研究では、様々ながん細胞株を、ＣＤ＋１４単球がＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞からの条件培地を用いてインキュベートされる際の表現型ＭＤＳＣ（ＨＬＡ－ＤＲ^低）の増加を例示するために使用した。

がん細胞株を、ＧＭ－ＣＳＦの発現について解析した。この特定の研究では、２つの大腸がん（ＨＣＴ１１６およびＳＷ－４８０）、２つの膵がん（Ｐａｎｃ－１およびＣａｐａｎ－１）、子宮頸部腺がん（ＨｅＬａ）、および悪性黒色腫（Ａ３７５）細胞株を、ＧＭ－ＣＳＦ発現について測定した。図２に示されるように、がん細胞株は、異なるレベルでＧＭ－ＣＳＦを発現する。特に、ＳＷ４８０およびＣａｐａｎ－１は、ＧＭ－ＣＳＦの比較的高い発現を有するが、ＨｅＬａ細胞は、ＧＭ－ＣＳＦの比較的低い発現を有する。

腫瘍条件培地（ＣＭ）を生成するために、細胞株を、当技術分野で公知の方法に従って播種および培養した。次いで、ＣＤ１４＋細胞を、ＣＭの存在下で６日間培養し、遺伝子およびタンパク質発現について解析した。低レベルのＨＬＡ－ＤＲバイオマーカーは、ＭＤＳＣ表現型を示す。図３は、正常な培養培地中で成長したＣＤ＋１４細胞と比較して、ＣＤ１４＋単球がＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞からの条件培地とインキュベートされた際の表現型ＭＤＳＣの増加を示す。結果は、高いＧＭ－ＣＳＦ発現を有するがん細胞株からのＣＭがＭＤＳＣの高い誘導を有することを示し、ＧＭ－ＣＳＦが単球の表現型ＭＤＳＣへの極性化に寄与することを示唆している。

実施例３．抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＭＤＳＣにおけるＰＤ－Ｌ１上方制御を遮断する
本実施例の研究は、ＧＭ－ＣＳＦが表現型ＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１の発現を誘導するという、本発明者による驚くべき発見を例示する。特に、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を用いた治療は、ＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株からの条件培地（ＣＭ）で処理された単球上のＰＤ－Ｌ１の発現を抑制するのに十分である。

免疫チェックポイント遮断抗体についての主な課題のうちの１つは、限定されたＴ細胞応答を伴う悪性腫瘍または免疫学的に「冷たい」腫瘍にある。これらの冷たい腫瘍は、ほとんど浸潤性Ｔ細胞を含まず、認識されず、免疫系による強力な応答を誘発せず、現在の免疫療法での治療を困難にしている。本発明者らは、驚くべきことに、ＧＭ－ＣＳＦが、ＰＤ－Ｌ１、免疫抑制活性に寄与するＭＤＳＣの表面上のチェックポイントタンパク質を上方制御することを見出した。本実施例の研究は、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が、「冷たい」腫瘍を「熱い」腫瘍に変換し、免疫療法の有効性および感受性をおそらく増加させるために使用され得ることを示す。

この研究では、様々ながん細胞株を、ＣＤ１４＋単球がＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞からの条件培地を用いてインキュベートされる際のＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１発現レベルの変化を評価するために使用した。図４に示されるように、ＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株からの条件培地をＣＤ１４＋単球に添加することは、ベースライン（培養培地のみ）と比較してＰＤ－Ｌ１発現のレベルを増加させた。低いレベルのＧＭ－ＣＳＦ発現を呈したＨｅＬａ細胞株（図２を参照されたい）は、ＰＤ－Ｌ１発現を上方制御しなかった。ＣＭ（ＣＭ＋ＧＭ－ＣＳＦ）と組み合わせた組換えＧＭ－ＣＳＦを添加することは、ＰＤ－Ｌ１の発現を増加させ、ＧＭ－ＣＳＦが表現型ＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１の発現を誘導することを示している。ＰＤ－Ｌ１におけるスパイクは、ＣＭのみで低いベースラインＰＤ－Ｌ１発現を有する細胞株（例えば、Ｐａｎｃ－１およびＨｅＬａ細胞）においてより顕著であった。ＰＤ－Ｌ１発現に対する抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体の効果もまた、調べた。組換えＧＭ－ＣＳＦの不在下または存在下で、ＭＤＳＣをＣＭ中の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体で治療すること（それぞれ、ＣＭ＋ＡｂおよびＣＭ＋ＧＭ－ＣＳＦ＋Ａｂ）は、それぞれ、ＣＭのみまたはＣＭ＋ＧＭ－ＣＳＦと比較して、ＰＤ－Ｌ１の著しい減少レベルをもたらした。これらのデータは、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が、ＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株から条件培地で処理されたＣＤ１４＋単球（ＭＤＳＣ）においてＰＤ－Ｌ１上方制御を抑制することを示す。

実施例４．抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＭＤＳＣにおけるＰＤ－Ｌ１発現を抑制する
本実施例の研究は、ＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１レベルがすでに増加している際に、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬がＣＭ処理と同時またはその後に添加されるかどうかにかかわらず、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬が、ＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株（ＣＭ）からの条件培地で処理されたＭＤＳＣ上でＰＤ－Ｌ１発現を抑制できることを示す。

図５Ａに示されるように、組換えＧＭ－ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍＬで）および抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（１００μｇ／ｍＬで）の有無でのＧＭ－ＣＳＦがん細胞株（ＣＭ）からの条件培地（表１に示される）を、１日目にＣＤ１４＋単球（ＭＤＳＣ）に添加した。３日間のインキュベーション後、ＭＤＳＣ細胞を、ＰＤ－Ｌ１の発現について解析した。

実施例３と一致して、ＧＭ－ＣＳＦを発現するがん細胞株からの条件培地をＭＤＳＣ（Ｂ；ＣＭ）または組換えＧＭ－ＣＳＦを有するＣＭ（Ｄ；ＣＭ＋ＧＭ－ＣＳＦ）に添加することは、ベースライン（Ａ；培養培地のみ）と比較してＰＤ－Ｌ１発現のレベルを増加させた。さらに、それぞれ、図５ＡのサンプルＣおよびＥにおいて示されるように、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がＣＭまたはＣＭ＋ＧＭ－ＣＳＦと同時に添加される際に、ＰＤ－Ｌ１の減少が観察され、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体がＭＤＳＣに対するＰＤ－Ｌ１の上方制御を遮断することを示唆している。

次に、ＭＤＳＣに対するＰＤ－Ｌ１の上昇したレベルがすでに確立されている際に、ＰＤ－Ｌ１発現レベルに対するＧＭ－ＣＳＦ遮断の効果を調べるための、条件培地を用いたＭＤＳＣのインキュベーション後の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を添加する効果。この特定のセットアップでは、ＭＤＳＣを、組換えＧＭ－ＣＳＦ（図５ＢのサンプルＢ～Ｅ）の有無での条件培地中で４８時間培養する。次いで、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体を、３日目に図５ＢのサンプルＣおよびＥに添加した（４８時間後）。試料Ａ中のＭＤＳＣを、対照として培養培地中で３日間インキュベートした。ＭＤＳＣの表現型解析を、４日目に実施した。図５Ｂに示されるように、ＭＤＳＣがＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株（サンプルＣおよびＥ）からの条件培地を用いて培養された後の抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体でのＭＤＳＣの処理は、ＭＤＳＣ上のＰＤ－Ｌ１の発現レベルを抑制した。注目すべきことに、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体での処理のわずか２４時間後、サンプルＣおよびＥにおけるＰＤ－Ｌ１発現は、サンプルＢおよびＤと比較して、それぞれ減少した。

実施例５．抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体はＭＤＳＣ介在性Ｔ細胞抑制を低減させる
本実施例における研究は、Ｔ細胞増殖に対する骨髄集団の抑制能が、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬によって抑制され得ることをさらに例示する。

この特定の実験では、ＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株からの条件培地を用いて処理された単球を、Ｔ細胞増殖アッセイにおいて使用した。簡潔に述べると、単球を、ＧＭ－ＣＳＦ発現がん細胞株（ＣＭ）からの条件培地中で３日間培養した（ＣＭ処理単球）。Ｔ細胞（１×１０^５細胞）を、１μＭのＣＦＳＥで標識することと、ＩＭＤＭ細胞培養培地中での１０ｎｇ／ｍＬのＩＬ－２および１０ｕＬの可溶性ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔ細胞活性化因子での刺激とによって調製した。次いで、刺激されたＴ細胞を、図６に示されるように、混合リンパ球反応（ＭＬＲ）において、補充のヒト組換えＧＭ－ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍＬ）および／または抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（１００μｇ／ｍＬ）の有無で、ＣＭ処理された単球と（２：１の単球：Ｔ細胞の比率で）共培養した。健常単球と一緒にＩＭＤＭ培養培地中で刺激されたＴ細胞を、対照として使用した。Ｔ細胞を、５日間増殖させ、収集し、ヘルパーＴおよび細胞傷害性Ｔ細胞に対するマーカーであるＣＤ４およびＣＤ８について染色した。細胞増殖を、フローサイトメトリーによって測定し、ＣＦＳＥ希釈によって評価した。

図６は、増殖する細胞の％に関するＴ細胞増殖アッセイ（左のパネル）、およびフローサイトメトリーによる最大値の％（ＭＦＩ）（ＣＤ４＋またはＣＤ８＋細胞におけるＣＦＳＥ希釈のシグナル検出）（右のパネル）の結果を示す。図６に示されるように、ＣＭ処理された単球は対象と比較してＴ細胞増殖を抑制し、組換えＧＭ－ＣＳＦの添加はＴ細胞増殖をさらに抑制した。抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体（Ａｂ）での処理は、ＭＤＳＣ介在性Ｔ細胞抑制を低減させた。

等価物
当業者であれば、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態に対する多数の等価物を、通常の実験そのものを使用して認識するか、または確認することができるであろう。本発明の範囲は、上記の記載に限定されるように意図されないが、むしろ以下の特許請求の範囲に定められる通りである。

Claims (69)

1. 治療を必要とする患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、がんを治療する方法であって、前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の投与が、骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の免疫抑制活性の阻害をもたらす、方法。
2. がんに罹患している患者における骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の免疫抑制活性を阻害する方法であって、前記患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、方法。
3. がん治療のための免疫応答を強化する方法であって、がん治療を受けている患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含み、前記免疫応答が、対照と比較して増加する、方法。
4. 前記免疫応答が、Ｔ細胞増殖のパーセンテージである、請求項３に記載の方法。
5. 前記対照が、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の投与前の前記患者における免疫応答レベルを示す、請求項３または４に記載の方法。
6. 前記対照が、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を用いずに前記がん治療を受けている対照患者における参照免疫応答レベル、または履歴データに基づく参照免疫応答レベルである、請求項３または４に記載の方法。
7. 前記がん治療が、免疫療法である、請求項３～６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を前記投与することが、前記免疫療法の有効性を増加させる、請求項７に記載の方法。
9. がん患者においてＰＤ－Ｌ１を抑制する方法であって、対照と比較して治療を必要とする患者にＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を投与することを含む、方法。
10. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を前記投与することが、がん患者におけるＰＤ－Ｌ１のレベルを減少させる、請求項９に記載の方法。
11. 前記対照が、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の投与前の前記患者におけるＰＤ－Ｌ１レベルを示す、請求項９または１０に記載の方法。
12. 前記対照が、ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を用いずに前記がん治療を受けている対照患者における参照ＰＤ－Ｌ１レベル、または履歴データに基づく参照ＰＤ－Ｌ１レベルである、請求項９または１０に記載の方法。
13. 前記患者における前記ＰＤ－Ｌ１のレベルが、前記対照と比較して、少なくとも１０％、２０％、３０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％減少する、請求項１０～１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記ＰＤ－Ｌ１が、ＭＤＳＣ上で発現される、請求項９～１３のいずれか一項に記載の方法。
15. 前記ＰＤ－Ｌ１が、循環ＭＤＳＣ上で発現される、請求項１４に記載の方法。
16. 前記ＰＤ－Ｌ１が、血漿由来ＭＤＳＣ上で発現される、請求項１４に記載の方法。
17. 前記患者が、循環骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
18. 前記患者が、低レベルの浸潤性Ｔ細胞を有するがんに罹患する、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
19. 前記患者が、免疫チェックポイント阻害剤（ＩＣＩ）難治性がんに罹患する、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記患者が、後期段階または転移性のがんに罹患する、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記患者が、乳がん、大腸がん（ＣＲＣ）、前立腺がん、黒色腫、膀胱がん、膵がん、膵管腺がん、肝細胞がん、胃がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）、頭頸部扁平上皮細胞がん、非ホジキンリンパ腫、子宮頸がん、消化器がん、泌尿生殖器がん、脳がん、中皮腫、腎細胞がん、婦人科がん、卵巣がん、子宮内膜がん、肺がん、消化器がん、膵がん、食道がん、肝細胞がん、胆管細胞がん、脳がん、中皮腫、悪性黒色腫、メルケル細胞がん、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群または急性リンパ芽球性白血病から選択されるがんに罹患する、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
22. 前記患者が、ステージＩＶの乳がん、ステージＩＶの大腸がん（ＣＲＣ）、前立腺がん、または黒色腫から選択されるがんに罹患する、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
23. 前記方法が、前記患者に少なくとも１つの他のがん療法を投与することをさらに含む、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
24. 前記少なくとも１つの他のがん療法が、化学療法、ＭＤＳＣ標的療法、免疫療法、放射線療法、およびそれらの組み合わせである、請求項２３に記載の方法。
25. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および前記他のがん療法が、同時に投与される、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
26. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および前記他のがん療法が、順次投与される、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
27. 前記患者が、前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬の前記投与前に、前記他のがん療法を用いた治療を受けている、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
28. 前記患者が、前記他のがん療法の投与前に、前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を用いた治療を受けている、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
29. 前記他のがん療法が、ＩＣＩである、請求項２３～２８のいずれか一項に記載の方法。
30. 前記ＩＣＩが、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、Ｂ７、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ－３、ＧＡＬ－９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＧＥＮ－１５０４９、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、またはＡ２ａＲの活性に拮抗する、請求項２９に記載の方法。
31. 前記ＩＣＩが、抗ＰＤ－１抗体（任意選択的にペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（任意選択的にアテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、抗ＣＴＬＡ－４抗体（任意選択的にイピリムマブ（ｉｐｉｌｌｉｍｕｍａｂ））、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗Ｂ７－Ｈ３抗体、抗Ｂ７－Ｈ４抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＨＶＥＭ抗体、抗ＴＩＭ－３抗体、抗ＧＡＬ－９抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗ＶＩＳＴＡ抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗２Ｂ４抗体、抗ＣＤ１６０抗体、抗ＣＧＥＮ－１５０４９抗体、抗ＣＨＫ１抗体、抗ＣＨＫ２抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、抗Ｂ－７抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項２９に記載の方法。
32. 前記ＩＣＩが、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である、請求項２９に記載の方法。
33. 前記方法が、前記患者に化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項２４～３２のいずれか一項に記載の方法。
34. 前記ＭＤＳＣ標的療法が、抗ＣＦＳ－１Ｒ抗体、抗ＩＬ－６抗体、オールトランスレチノイン酸、アキシチニブ、エンチノスタット、ゲムシタビン、またはフェンホルミン、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項２４～２８のいずれか一項に記載の方法。
35. 前記免疫療法が、モノクローナル抗体、サイトカイン、がんワクチン、Ｔ細胞エンゲージング療法、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項２４～２８のいずれか一項に記載の方法。
36. 前記モノクローナル抗体が、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ５２抗体、抗ＰＤ１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＢＣＭＡ抗体、二重特異性抗体、または二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項３５に記載の方法。
37. 前記サイトカインが、ＩＦＮａ、ＩＦＮｐ、ＩＦＮｙ、ＩＦＮｙ、ＩＦＮ、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ｈＧＭ－ＣＳＦ、ＴＮＦａ、またはそれらの任意の組み合わせから選択される、請求項３５に記載の方法。
38. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬が、抗ＧＭ－ＣＳＦ抗体またはその断片である、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
39. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬が、可溶性ＧＭ－ＣＳＦ受容体である、請求項１～３７のいずれか一項に記載の方法。
40. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬が、抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片である、請求項１～３７のいずれか一項に記載の方法。
41. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片が、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体またはその断片である、請求項４０に記載の方法。
42. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体またはその断片が、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的なモノクローナル抗体である、請求項４１に記載の方法。
43. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が、ヒトまたはヒト化ＩｇＧ４抗体である、請求項４２に記載の方法。
44. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が、マブリリムマブ（ｍａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂ）である、請求項４２または４３に記載の方法。
45. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体その断片が、配列番号６によって規定される軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、配列番号７によって規定される軽鎖相補性決定領域２（ＬＣＤＲ２）、および配列番号８によって規定される軽鎖相補性決定領域３（ＬＣＤＲ３）、ならびに配列番号３によって規定される重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、配列番号４によって規定される重鎖相補性決定領域２（ＨＣＤＲ２）、および配列番号５によって規定される重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）を含む、請求項４１～４４のいずれか一項に記載の方法。
46. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／または前記ＩＣＩの前記投与が、対照と比較して、前記患者におけるＭＤＳＣの低減したレベルをもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
47. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／または前記ＩＣＩの前記投与が、対照と比較して、特許におけるＭＤＳＣ介在性免疫抑制活性の低減したレベルをもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
48. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／または前記ＩＣＩの前記投与が、対照と比較して、前記患者の末梢血中のＬｉｎ^－ＣＤ１４^＋ＨＬＡ－ＤＲ^－Ｍ－ＭＤＳＣの低減したパーセンテージをもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
49. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／または前記ＩＣＩの前記投与が、対照と比較して、前記患者における成熟ＭＤＳＣ細胞の増加したパーセンテージをもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
50. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／または前記ＩＣＩの前記投与が、対照と比較して、Ｔｒｅｇ細胞、マクロファージ、および／または好中球の低減したレベルをもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
51. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／または前記ＩＣＩの前記投与が、阻害性サイトカインの減少したレベルをもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
52. 前記阻害性サイトカインが、ＩＬ－１０およびＴＧＦβから選択される、請求項５１に記載の方法。
53. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／または前記ＩＣＩの前記投与が、免疫抑制因子の減少したレベルをもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
54. 前記免疫抑制因子が、アルギナーゼ１、誘導性一酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯＳ）、ペルオキシ亜硝酸、一酸化窒素、活性酸素種、腫瘍関連マクロファージ、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項５３に記載の方法。
55. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬および／または前記ＩＣＩの前記投与が、対照と比較して、ＣＤ４^＋Ｔエフェクター細胞の増加したレベルをもたらす、先行請求項のいずれか一項に記載の方法。
56. 前記対照が、前記患者における治療前レベルもしくはパーセンテージ、または履歴データに基づく参照レベルもしくはパーセンテージである、請求項４６～５５のいずれか一項に記載の方法。
57. ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬およびＩＣＩを含む、がんを治療するための、医薬組成物。
58. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬が、抗ＧＭ－ＣＳＦ抗体またはその断片である、請求項５７に記載の医薬組成物。
59. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬が、可溶性ＧＭ－ＣＳＦ受容体である、請求項５７に記載の医薬組成物。
60. 前記ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬が、抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片である、請求項５７に記載の医薬組成物。
61. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦ受容体抗体またはその断片が、抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体またはその断片である、請求項６０に記載の医薬組成物。
62. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体またはその断片が、ヒトＧＭ－ＣＳＦＲαに特異的なモノクローナル抗体である、請求項６１に記載の医薬組成物。
63. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が、ヒトまたはヒト化ＩｇＧ４抗体である、請求項６２に記載の医薬組成物。
64. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体が、マブリリムマブである、請求項６０～６３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
65. 前記抗ＧＭ－ＣＳＦＲα抗体その断片が、配列番号６によって規定される軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、配列番号７によって規定される軽鎖相補性決定領域２（ＬＣＤＲ２）、および配列番号８によって規定される軽鎖相補性決定領域３（ＬＣＤＲ３）、ならびに配列番号３によって規定される重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、配列番号４によって規定される重鎖相補性決定領域２（ＨＣＤＲ２）、および配列番号５によって規定される重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）を含む、請求項６０～６３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
66. 前記ＩＣＩが、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、Ｂ７、ＢＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＭ－３、ＧＡＬ－９、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＫＩＲ、２Ｂ４、ＣＤ１６０、ＣＧＥＮ－１５０４９、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、Ａ２ａＲ、およびそれらの組み合わせの活性に拮抗する、請求項５７～６５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
67. 前記ＩＣＩが、抗ＰＤ－１抗体（任意選択的にペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（任意選択的にアテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、抗ＣＴＬＡ－４抗体（任意選択的にイピリムマブ）、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗Ｂ７－Ｈ３抗体、抗Ｂ７－Ｈ４抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＨＶＥＭ抗体、抗ＴＩＭ－３抗体、抗ＧＡＬ－９抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗ＶＩＳＴＡ抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗２Ｂ４抗体、抗ＣＤ１６０抗体、抗ＣＧＥＮ－１５０４９抗体、抗ＣＨＫ１抗体、抗ＣＨＫ２抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、抗Ｂ－７抗体、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項５７～６３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
68. ＧＭ－ＣＳＦ拮抗薬を含む医薬組成物と、化学療法、ＭＤＳＣ標的療法、免疫療法、放射線療法、およびそれらの組み合わせから選択される少なくとも１つの他のがん療法を含む医薬組成物とを含む、がんを治療するための、キット。
69. 前記免疫療法が、抗ＰＤ－１抗体（任意選択的にペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（任意選択的にアテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、抗ＣＴＬＡ－４抗体（任意選択的にイピリムマブ）、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗Ｂ７－Ｈ３抗体、抗Ｂ７－Ｈ４抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＨＶＥＭ抗体、抗ＴＩＭ－３抗体、抗ＧＡＬ－９抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗ＶＩＳＴＡ抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗２Ｂ４抗体、抗ＣＤ１６０抗体、抗ＣＧＥＮ－１５０４９抗体、抗ＣＨＫ１抗体、抗ＣＨＫ２抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、抗Ｂ－７抗体、およびそれらの組み合わせから選択されるＩＣＩである、請求項６８に記載のキット。

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