JP2022531552A

JP2022531552A - プラスモジウムスポロゾイト周囲タンパク質に結合する抗体、及びその使用

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Publication number: JP2022531552A
Application number: JP2021561902A
Authority: JP
Inventors: ダヴィデ・コルティ; ルカ・ピッコリ; カーチャ・フィンク; エリザベッタ・カメロニ
Original assignee: Vir Biotechnology Inc
Current assignee: Vir Biotechnology Inc
Priority date: 2019-04-30
Filing date: 2020-04-30
Publication date: 2022-07-07
Also published as: BR112021016341A2; SG11202108585QA; EP3962513A1; WO2020221910A1; IL285282A; CN114206921B; EA202192930A1; AU2020266283A1; MX2021013252A; KR20220004055A; WO2020221451A1; CA3130805A1; US20230084102A1; CN114206921A

Abstract

本発明は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイト、特にプラスモジウムスポロゾイト周囲タンパク質を標的とする抗体を提供する。本発明はまた、係る抗体をコードする核酸を提供する。更に、本発明は、マラリアの予防及び治療における本発明の抗体の使用を提供する。【選択図】なし

Description

本発明は、マラリア薬の分野、特にマラリアワクチン接種、及びプラスモジウムスポロゾイト、特にプラスモジウムスポロゾイト周囲タンパク質（ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎ）に結合する抗体に関する。

マラリアは、世界で最も深刻な公衆衛生上の問題の１つである。マラリアは、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属の寄生原虫によって引き起こされる。Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属には約２００種が含まれ、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ、Ｐ．ｖｉｖａｘ、Ｐ．ｏｖａｌｅ、及びＰ．ｍａｌａｒｉａｅが、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種によるヒトへの感染のほぼ全てを占める。Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種のうち、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍは、マラリアによる死の圧倒的多数を占める。マラリアの症状には通常、発熱、疲労感、嘔吐、及び頭痛が含まれる。重症の場合、黄色皮膚、発作、昏睡、又は死を引き起こすことがある。

マラリアは、蚊媒介性疾患であり、最も一般には、感染した雌のＡｎｏｐｈｅｌｅｓ蚊によって媒介される。例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍの感染中に、雌のＡｎｏｐｈｅｌｅｓ蚊は、少数のスポロゾイト（～１０～１００）を、脊椎動物の宿主の皮膚内に注入し、その後、肝臓に移動して肝細胞に侵入する（非特許文献１）。肝細胞において、スポロゾイトは無性生殖（組織シゾゴニー）し、成熟してシゾントになり、破裂してメロゾイトを放出する。メロゾイトは、赤血球に感染し、環状トロホゾイトが成熟してシゾントになり、破裂してメロゾイトを放出する。他のメロゾイトは、有性赤血球期（生殖母細胞）に発達する。蚊が脊椎動物の宿主を刺すと、生殖母細胞が血液に取り込まれ、蚊の腸で成熟する。雄と雌の生殖母細胞は融合してオーキネート、即ち、受精した運動性の接合子を形成する。オーキネートは、昆虫の唾液腺に遊走する新たなスポロゾイトに発達し、新しい脊椎動物の宿主に感染する。

マラリアの症状は、血液ステージの寄生虫によって引き起こされる。これに対して、スポロゾイトは、臨床症状に関連しないが、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍの生活環の肝臓でのステージ及びスポロゾイトにおいては、宿主中の寄生体数が少なく、それらを根絶することで感染を完全に無効にすることができる。したがって、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ寄生体のスポロゾイトと肝臓でのステージは、現在のマラリア薬候補の重要な標的である。その理由は、これらのステージを成功裏に防御する医薬が、マラリアの感染と伝染の両方を防ぐことができるからである。したがって、ＲＴＳ，Ｓなどのスポロゾイト周囲タンパク質（ＣＳＰ）に基づくサブユニットワクチンが、マラリアワクチンの取り組みの中心となっている。

Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質（ＣＳＰ）は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトステージの分泌タンパク質である。ＣＳＰは、寄生体の表面に密な被膜を形成し、スポロゾイトとその２つの宿主の間の初期相互作用の多くを媒介すると想定されている（非特許文献２及び非特許文献３）。ＣＳＰの構造と機能は、ヒト、非ヒト霊長類、及びげっ歯類に感染するＰｌａｓｍｏｄｉｕｍの各種株で高度に保存されている。ＣＳＰのアミノ酸配列は、免疫優勢の中央リピート領域を含んでおり、これは、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ種で多様である（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍの場合は、ＮＡＮＰリピート領域）。リピートに隣接するのは、Ｎ末端とＣ末端の２つの保存されたモチーフ、即ち、領域Ｉ、リピートのＮ末端の５－ａａ配列、及びタイプＩトロンボスポンジンリピート（ＴＳＲ）と呼ばれるリピートのＣ末端の既知細胞接着モチーフである。これらの保存されたモチーフは、寄生体が蚊から哺乳動物ベクターに移動するときのタンパク質処理に関係している。

ＣＳＰは、感染した蚊の中腸壁から蚊の唾液腺へのスポロゾイトの移動に重要な役割を果たすことが知られている。更に、ＣＳＰは、寄生体の結合を最初に促進するＣＳＰのＮ末端及び中央リピート領域を有する哺乳動物宿主の肝細胞結合に関与する。肝細胞表面では、Ｎ末端の領域１でのタンパク質分解による切断により、Ｃ末端の接着ドメインが露出し、それによって寄生体が肝臓に侵入できるようにする（非特許文献４）。

現在、最も進歩したマラリアワクチン候補は、ＲＴＳ，Ｓ（ＲＴＳ，Ｓ／ＡＳ０１；商品名Ｍｏｓｑｕｉｒｉｘ）であり、これは組換えタンパク質ベースのマラリアワクチンである。ＲＴＳ，Ｓは、ＡＳ０１という名称の多成分アジュバントに配合されるハイブリッドタンパク質粒子である。ＲＴＳ，Ｓワクチン抗原は、１９個のＮＡＮＰアミノ酸リピートユニットと、それに続く、Ｂ型肝炎ウイルスＳタンパク質と融合された完全なＣ末端ドメイン（但し、ＣＳ抗原のＧＰＩアンカーを除いたもの）からなる。サハラ以南のアフリカでの多施設臨床試験は、ＲＴＳ，Ｓが臨床マラリアに対する中程度の短期間の保護を与えることを示している。

そのようなマラリア薬の開発を複雑にした別の要因は、防御のロバストな相関関係を特定することの困難性である。抗体は、インビトロ機能アッセイで肝細胞のスポロゾイト侵入を阻害することが示されているが、マラリアワクチン接種を受けた個体の防御におけるそれらの役割は依然不明である。

しかし、最近になって、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質（ＣＳＰ）に特異的な非常に強力な抗マラリア抗体が記述された（非特許文献５）。この研究の著者らは、抗体「ＭＧＵ１０」及び「ＭＧＨ２」を含む最も強力な抗体が、（ｉ）ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域及び（ｉｉ）Ｎ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＣＳＰのＮ末端領域におけるエピトープを同時に標的とすることを示した。更に、この研究は、これらの抗体の高い効力が、それらの二重特異性によるものであり、一方、ＣＳＰエピトープの１つのみを標的とする抗体は、通常、それほど効力がないことを示した。

Ｃｒｏｍｐｔｏｎｅｔａｌ．（２０１４）ＡｎｎｕＲｅｖＩｍｍｕｎｏｌ３２，１５７－１８７ＭｅｎａｒｄＲ．，２０００，ＭｉｃｒｏｂｅｓＩｎｆｅｃｔ．２：６３３－６４２ＳｉｎｎｉｓＰ．ａｎｄＮａｒｄｉｎＥ．，２００２，Ｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅａｎｔｉｇｅｎｓ：ｂｉｏｌｏｇｙａｎｄｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙｏｆｔｈｅｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎｒｅｌａｔｅｄａｎｏｎｙｍｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎ．ＩｎＭａｌａｒｉａＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．Ｐ．ＰｅｒｌｍａｎｎａｎｄＭ．Ｔｒｏｙｅ－Ｂｌｏｍｂｅｒｇ，ｅｄｉｔｏｒｓ．Ｓ．ＫａｒｇｅｒＡＧ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ．７０－９６Ｃｏｐｐｉｅｔａｌ．（２００５）ＪＥｘｐＭｅｄ２０１，２７－３３ＴａｎＪ，ＳａｃｋＢＫ，ＯｙｅｎＤ，ｅｔａｌ．Ａｐｕｂｌｉｃａｎｔｉｂｏｄｙｌｉｎｅａｇｅｔｈａｔｐｏｔｅｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｓｍａｌａｒｉａｉｎｆｅｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｄｕａｌｂｉｎｄｉｎｇｔｏｔｈｅｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎ．ＮａｔＭｅｄ．２０１８；２４（４）：４０１－４０７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｍ．４５１３

前記に鑑みて、本発明の目的は、上に概説した先行技術の欠点を克服することである。特に、本発明の目的は、高親和性で、（ｉ）ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域及び（ｉｉ）Ｎ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＣＳＰのＮ末端領域の両方に結合する抗マラリア抗体を提供することである。

この目的は、以下及び添付の特許請求の範囲に示す主題によって達成される。

以下、本発明を詳細に説明するが、本発明は、本明細書に記載の特定の方法、プロトコル、及び試薬に、これらは変わる可能性があるので、限定されないことを理解されたい。また、本明細書で使用する用語は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。特段の断りがない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。

以下に、本発明の要素について説明する。これら要素は、具体的な実施形態と共に列挙されるが、これらを任意の方式で任意の数を組み合わせて更なる実施形態を生み出すことができることを理解すべきである。様々に記載される実施例及び実施形態は、本発明を明示的に記載される実施形態に限定することを意図するものではない。この記載は、明示的に記載された実施形態を任意の数の開示された要素と組み合わせる実施形態をサポート及び包含すると理解すべきである。更に、特に指定しない限り、本願における全ての記載された要素の任意の入れ換え及び組合せが本願の記載によって開示されるとみなすべきである。

本明細書及びその後に続く特許請求の範囲全体を通して、特に必要としない限り、用語「含む」並びに「含み」及び「含んでいる」などの変形は、指定されている部材、整数、又は工程を含むが、任意の他の指定されていない部材、整数、又は工程を除外するものではないことを意味すると理解される。用語「からなる」は、任意の他の指定されていない部材、整数、又は工程が除外される、用語「含む」の具体的な実施形態である。本発明において、用語「含む」は、用語「からなる」を包含する。したがって、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」及び「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」を包含し、例えば、Ｘを「含む」組成物は、Ｘのみからなっていてもよく、追加の何かを含んでいてもよい（例えば、Ｘ＋Ｙ）。

用語「ａ」及び「ａｎ」及び「ｔｈｅ」、並びに本発明の説明（特に、特許請求の範囲）において使用される同様の参照は、本明細書に指定されているか又は文脈上明示的に否定されていない限り、単数及び複数の両方を網羅すると解釈すべきである。本明細書における値の範囲の列挙は、単に、範囲内の各別個の値を個別に参照する簡易的な方法として機能することを意図する。本明細書において特に指定しない限り、各個別の値は、本明細書に個々に列挙されているかのように明細書に組み込まれる。明細書中のいずれの言語も、本発明の実施に必須の任意の請求されていない要素を示すと解釈されるべきではない。

用語「実質的に」は、「完全に」を除外するものではなく、例えば、Ｙを「実質的に含まない」組成物は、Ｙを完全に含んでいなくてもよい。必要な場合、用語「実質的に」は、本発明の定義から省略されることもある。

数値ｘに関連する用語「約」は、ｘ±１０％、例えば、ｘ±５％、又はｘ±７％、又はｘ±１０％、又はｘ±１２％、又はｘ±１５％、又はｘ±２０％を意味する。

用語「疾患」は、本明細書で使用するとき、ヒト若しくは動物の身体又は正常な機能が損なわれているその部分のうちの１つの異常な状態を全て反映し、典型的には、識別可能な徴候及び症状によって顕在化し、且つヒト又は動物の寿命又は生活の質を低減するという点で、用語「疾病」及び（健康状態のような）「状態」と略同義であることを意図し、互換的に使用される。

本明細書で使用するとき、対象又は患者の「治療」に対する言及は、防止、予防、軽減、寛解、及び療法を含むことを意図する。用語「対象」又は「患者」は、本明細書では互換的に使用されて、ヒトを含む全ての哺乳動物を意味する。対象の例としては、ヒト、ウシ、イヌ、ネコ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、及びウサギが挙げられる。いくつかの実施形態では、患者はヒトである。

用量は、多くの場合、体重に関連して表される。したがって、［ｇ、ｍｇ、又は他の単位］／ｋｇ（又はｇ、ｍｇなど）として表される用量は、たとえ用語「体重」が明示的に言及されていないとしても、通常「体重１ｋｇ（又はｇ、ｍｇなど）当たりの」［ｇ、ｍｇ、又は他の単位］を意味する。

用語「結合」及び同様の用語は、通常、「特異的結合」を意味し、非特異的な付着を含まない。

本明細書で使用するとき、用語「抗体」は、本発明に係る特徴的な性質が保持されている限り、抗体全体、抗体断片（例えば、抗原結合断片）、ヒト抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、組み換え抗体、及び遺伝子操作された抗体（変異体又は変異型抗体）を含むがこれらに限定されない様々な形態の抗体を包含する。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体である。例えば、抗体は、ヒトのモノクローナル抗体である。

前記したように、用語「抗体」は、一般に、抗体断片も包含する。抗体の断片は、抗体の抗原結合活性を保持することができる。係る断片は、「抗原結合断片」と呼ばれる。抗原結合断片としては、限定されるものではないが、単鎖抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、又はｓｃＦｖが挙げられる。抗体の断片は、ペプシン又はパパインなどの酵素による消化を含む方法、及び／又は化学的還元によるジスルフィド結合の切断によって、抗体から得ることができる。或いは、抗体の断片は、組換え手段によって、例えば、重鎖及び／又は軽鎖の配列の一部（断片）をクローニングする、及び発現させることによって得ることができる。また、本発明は、本発明の抗体の重鎖及び軽鎖に由来する単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）を包含する。例えば、本発明は、本発明の抗体由来のＣＤＲを含むｓｃＦｖを含む。また、重鎖又は軽鎖の単量体及び二量体、単一ドメイン重鎖抗体、単一ドメイン軽鎖抗体に加えて、単鎖抗体、例えば、重鎖及び軽鎖の可変ドメインがペプチドリンカーによって結合している単鎖Ｆｖも含まれる。本発明の抗体断片は、当業者に知られた様々な構造に含まれ得る。更に、本発明の配列は、本発明の配列が本発明のエピトープを標的とし、分子の他の領域が他の標的に結合する多重特異的分子の成分であってよい。特許請求の範囲を含む明細書は、一部の箇所では、抗体の抗原結合断片、抗体断片、変異体、及び／又は誘導体に明示的に言及するが、用語「抗体」は、抗体の全てのカテゴリー、即ち、抗体の抗原結合断片、抗体断片、変異体、及び誘導体を含むことが理解される。

ヒト抗体は、現在の技術水準において周知である（ｖａｎＤｉｊｋ，Ｍ．Ａ．，ａｎｄｖａｎｄｅＷｉｎｋｅｌ，Ｊ．Ｇ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．５（２００１）３６８－３７４）。ヒト抗体は、免疫時に、内因性免疫グロブリンが産生されていなくてもヒト抗体の完全レパートリー又はセレクションを産生することができるトランスジェニック動物（例えば、マウス）においても産生され得る。かかる生殖系列変異体マウスにヒト生殖系列免疫グロブリン遺伝子アレイを移植すると、抗原接種時にヒト抗体が産生される（例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ，Ａ．，ｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０（１９９３）２５５１－２５５５；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ，Ａ．，ｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３６２（１９９３）２５５－２５８；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．，ｅｔａｌ．，ＹｅａｒＩｍｍｕｎｏｌ．７（１９９３）３３４０を参照）。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリでも産生され得る（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ，Ｈ．Ｒ．，ａｎｄＷｉｎｔｅｒ，Ｇ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７（１９９２）３８１－３８８；Ｍａｒｋｓ，Ｊ．Ｄ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２（１９９１）５８１－５９７）。Ｃｏｌｅなど及びＢｏｅｒｎｅｒなどの技術も、ヒトモノクローナル抗体を調製するために利用可能である（Ｃｏｌｅｅｔａｌ．，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｎｄＣａｎｃｅｒＴｈｅｒａｐｙ，ＡｌａｎＲ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；及びＢｏｅｒｎｅｒ，Ｐ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（１９９１）８６－９５）。いくつかの実施形態では、ヒトモノクローナル抗体は、ＴｒａｇｇｉａｉＥ，ＢｅｃｋｅｒＳ，ＳｕｂｂａｒａｏＫ，ＫｏｌｅｓｎｉｋｏｖａＬ，ＵｅｍａｔｓｕＹ，ＧｉｓｍｏｎｄｏＭＲ，ＭｕｒｐｈｙＢＲ，ＲａｐｐｕｏｌｉＲ，ＬａｎｚａｖｅｃｃｈｉａＡ．（２００４）：ＡｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔｍｅｔｈｏｄｔｏｍａｋｅｈｕｍａｎｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｆｒｏｍｍｅｍｏｒｙＢｃｅｌｌｓ：ｐｏｔｅｎｔｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＳＡＲＳｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ．ＮａｔＭｅｄ．１０（８）：８７１－５に記載の通り、改善されたＥＢＶ－Ｂ細胞の不死化を使用することによって調製される。本明細書で使用するとき、用語「可変領域」（軽鎖（Ｖ_Ｌ）の可変領域、重鎖（Ｖ_Ｈ）の可変領域）は、抗体の抗原に対する結合に直接関与する軽鎖及び重鎖の各対を意味する。

本発明の抗体は、任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、即ち、α、γ、又はμ重鎖）であってよい。例えば、抗体は、ＩｇＧタイプである。ＩｇＧアイソタイプの中でも、抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４のサブクラスであってよく、例えば、ＩｇＧ１であってよい。本発明の抗体は、κ又はλ軽鎖を有していてよい。いくつかの実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１タイプであり、κ軽鎖を有する。

本発明に係る抗体は、精製形態で提供されてもよい。典型的には、抗体は、他のポリペプチドを実質的に含まない組成物、例えば、前記組成物の９０（重量）％未満、通常６０％未満、より通常は５０％未満が他のポリペプチドで構成される組成物中に存在する。

本発明に係る抗体は、ヒト及び／又は非ヒト（又は異種）宿主、例えば、マウスにおいて免疫原性であり得る。例えば、前記抗体は、非ヒト宿主では免疫原性であるが、ヒト宿主では免疫原性でないイディオトープを有し得る。ヒトで使用するための本発明の抗体は、マウス、ヤギ、ウサギ、ラット、非霊長類哺乳動物などの宿主から容易には単離することができず、且つ一般にヒト化によって又はゼノマウスから入手することができないものを含む。

本明細書で使用するとき、「中和抗体」は、宿主において感染を開始及び／又永続化させる病原体の能力を中和する、即ち、予防、阻害、低減、妨害、又は干渉することができるものである。用語「中和抗体」及び「中和する抗体」は、本明細書では互換的に使用される。これら抗体は、単独で使用してもよく、適切な製剤化に際して予防剤又は治療剤として、能動的ワクチン接種に関連して、診断ツールとして、又は本明細書に記載される生産ツールとして組み合わせて使用してもよい。

本明細書で使用するとき、用語「変異」は、レファレンス配列、例えば、対応するゲノム配列と比較した、核酸配列及び／又はアミノ酸配列の変化に関する。例えばゲノム配列と比較した変異は、（自然界に存在する）体細胞変異、自然変異、例えば、酵素、化学物質、若しくは放射線によって誘導される誘導変異、又は部位特異的変異誘発（核酸配列及び／又はアミノ酸配列を特異的且つ故意に変化させるための分子生物学的方法）によって得られる変異であってよい。したがって、用語「変異」又は「変異する」とは、例えば、核酸配列及び／又はアミノ酸配列において変異を物理的に作製することも含むと理解されるものとする。変異は、１以上のヌクレオチド又はアミノ酸の置換、欠失、及び挿入に加えて、いくつかの連続するヌクレオチド又はアミノ酸の逆位も含む。アミノ酸配列に変異を生じさせるため、（組み換え）変異型ポリペプチドを発現させるために、前記アミノ酸配列をコードしているヌクレオチド配列に変異を導入してよい。変異は、例えば、あるアミノ酸をコードしている核酸分子のコドンを、例えば部位特異的変異誘発によって、変化させて異なるアミノ酸をコードしているコドンを生じさせることにより、又は核酸分子の１以上のヌクレオチドを変異させる必要無しに、ポリペプチドをコードしている核酸分子のヌクレオチド配列を理解し、ポリペプチドの変異体をコードしているヌクレオチド配列を含む核酸分子の合成を設計することによって、配列変異体を合成することにより行ってよい。

本明細書の本文中には、いくつかの文献が引用されている。本明細書中に引用した各文献（全ての特許、特許出願、科学刊行物、製造者の明細書、指示書などを含む）は、上掲又は下記のいずれかにかかわらず、参照によりその全体を本明細書に援用する。本明細書中のいかなるものも、本発明が、先行する発明によってそのような開示よりも先行する資格がないと認めるものとして解釈されるものではない。

本発明は、本明細書に記載の特定の方法、プロトコル、及び試薬に、これらは変わる可能性があるので、限定されないことを理解されたい。また、本明細書で使用する用語は、特定の実施形態を説明するためにのみ用いられるのであって、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。特段の断りがない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。

抗体及びその抗原結合断片
最近になって、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質（ＣＳＰ）に特異的な非常に強力な抗マラリア抗体が記載された（ＴａｎＪ，ＳａｃｋＢＫ，ＯｙｅｎＤ，ｅｔａｌ．Ａｐｕｂｌｉｃａｎｔｉｂｏｄｙｌｉｎｅａｇｅｔｈａｔｐｏｔｅｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｓｍａｌａｒｉａｉｎｆｅｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｄｕａｌｂｉｎｄｉｎｇｔｏｔｈｅｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎ．ＮａｔＭｅｄ．２０１８；２４（４）：４０１－４０７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｍ．４５１３）。この研究の著者らは、最も強力な抗体が、（ｉ）ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域及び（ｉｉ）Ｎ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＣＳＰのＮ末端領域におけるエピトープを同時に標的とすることを示した。更に、この研究は、これらの抗体の高い効力が、それらの二重特異性によるものであり、一方、ＣＳＰエピトープの１つのみを標的とする抗体は、通常、それほど効力がないことを示した。この研究に記述される最も強力な二重特異性抗体は、抗体「ＭＧＵ１０」及び「ＭＧＨ２」を含む。

これに基づいて、本発明者らは、ＣＤＲ又はフレームワーク領域に変異を人工的に導入することにより、抗体ＭＧＵ１０及びＭＧＨ２の配列変異体を設計した。したがって、抗体ＭＧＵ１０及びＭＧＨ２は、本明細書では「親」抗体と呼ばれる一方で、本発明の抗体は、前記「親」抗体の配列変異体又は「変異体」抗体を表す。次いで、変異型抗体を、Ｔａｎら（ＴａｎＪ，ＳａｃｋＢＫ，ＯｙｅｎＤ，ｅｔａｌ．Ａｐｕｂｌｉｃａｎｔｉｂｏｄｙｌｉｎｅａｇｅｔｈａｔｐｏｔｅｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｓｍａｌａｒｉａｉｎｆｅｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｄｕａｌｂｉｎｄｉｎｇｔｏｔｈｅｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎ．ＮａｔＭｅｄ．２０１８；２４（４）：４０１－４０７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｍ．４５１３）の記載にしたがって、それらの二重特異性について試験した。本発明の変異型抗体は、ＣＳＰ（ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域及びＮ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＣＳＰのＮ末端領域）の標的エピトープに対して驚くべきほど高い親和性を示す。

第１の態様において、本発明は、（ｉ）配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、又は（ｉｉ）配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、又は（ｉｉｉ）配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、又は（ｖｉ）配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号２０、配列番号２１、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、又は（ｖ）配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号２０、配列番号２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列を含む（単離された）抗体又はその抗原結合断片を提供する。

一般に、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片は、典型的には、重鎖上の（少なくとも）３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）及び軽鎖上の（少なくとも）３つのＣＤＲを含む。一般に、相補性決定領域（ＣＤＲ）は、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインに存在する超可変領域である。典型的には、抗体の重鎖と、結合された軽鎖とのＣＤＲが一緒になって抗原受容体を形成する。通常、３つのＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３）は、可変ドメインに非連続的に配置される。抗原受容体は通常、２つの可変ドメイン（２つの異なるポリペプチド鎖、即ち重鎖と軽鎖：重鎖可変領域（ＶＨ）と軽鎖可変領域（ＶＬ））で構成されているため、通常、抗原受容体ごとに６つのＣＤＲが存在する（重鎖：ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３；軽鎖：ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３）。古典的な単一抗体分子は通常、２つの抗原受容体を有するので、１２個のＣＤＲを含む。重鎖及び／又は軽鎖上のＣＤＲは、フレームワーク領域によって分離されることができる。フレームワーク領域（ＦＲ）は、ＣＤＲよりも「可変性」が低い可変ドメイン内の領域である。例えば、鎖（又は各鎖）は、３つのＣＤＲで分離された４つのフレームワーク領域で構成されることができる。

重鎖上の３つの異なるＣＤＲ及び軽鎖上の３つの異なるＣＤＲを含む、本発明の例示的な抗体の重鎖及び軽鎖の配列を決定した。ＣＤＲアミノ酸の位置は、ＩＭＧＴナンバリングシステム（ＩＭＧＴ：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／；ｃｆ．Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍ．－Ｐ．ｅｔａｌ．（２００９）ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．３７，Ｄ１００６－Ｄ１０１２）にしたがって定義される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１１と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２４と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と７０％以上（即ち、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号２０、配列番号２１又は２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

配列同一性は、通常、レファレンス配列（即ち、本願に列挙される配列）の完全長に対して計算される。本明細書において言及するとき、同一性パーセントは、例えば、ＮＣＢＩ（ｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＣｅｎｔｅｒｆｏｒＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ；ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）によって指定されたデフォルトパラメータ［Ｂｌｏｓｕｍ６２マトリクス；ギャップオープンペナルティ＝１１、及びギャップエクステンションペナルティ＝１］を用いるＢＬＡＳＴを使用して決定することができる。

「配列変異体」は、レファレンスアミノ酸におけるアミノ酸のうちの１以上が欠失、置換、及び／又は１以上のアミノ酸がレファレンスアミノ酸配列の配列に挿入されている、変化した配列を有する。変化の結果、アミノ酸配列変異体は、レファレンス配列と少なくとも７０％同一のアミノ酸配列を有する。少なくとも７０％同一の変異体配列は、レファレンス配列の１００アミノ酸当たり３０以下の変化、即ち、欠失、挿入、又は置換の任意の組合せを有する。

一般に、非保存的アミノ酸置換を有することが可能であるが、前記置換は、通常、置換するアミノ酸が、レファレンス配列中の対応する置換されたアミノ酸と類似の構造的又は化学的性質を有する保存的アミノ酸置換である。一例として、保存的アミノ酸置換は、ある脂肪族又は疎水性のアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシン）の別の脂肪族又は疎水性のアミノ酸による置換；あるヒドロキシ含有アミノ酸（例えば、セリン及びトレオニン）の別のヒドロキシル含有アミノ酸による置換；ある酸性残基（例えば、グルタミン酸又はアスパラギン酸）の別の酸性残基による置換；あるアミド含有残基（例えば、アスパラギン及びグルタミン）の別のアミド含有残基による置換；ある芳香族残基（例えば、フェニルアラニン及びチロシン）の別の芳香族残基による置換；ある塩基性残基（例えば、リジン、アルギニン、及びヒスチジン）の別の塩基性残基による置換；並びにある小アミノ酸（例えば、アラニン、セリン、トレオニン、メチオニン、及びグリシン）の別の小アミノ酸による置換を含む。

アミノ酸配列の挿入は、１残基から１００以上の残基を含有するポリペプチドに及ぶ長さの範囲のアミノ及び／又はカルボキシル末端融合、並びに単一又は複数のアミノ酸残基の配列内挿入を含む。末端挿入の例としては、アミノ酸配列のＮ又はＣ末端のレポーター分子又は酵素への融合が挙げられる。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１１と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２４と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号２０、配列番号２１又は２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と７５％以上（即ち、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１１と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２４と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号２０、配列番号２１又は２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８０％以上（即ち、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１１と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２４と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号２０、配列番号２１又は２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と８５％以上（即ち、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１１と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２４と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号２０、配列番号２１又は２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９０％以上（即ち、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１１と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１３と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１６と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号２４と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号２０、配列番号２１又は２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０４と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と９５％以上（即ち、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、上に定義したＣＤＲ配列（配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、及び配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列）は維持される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、（ｉ）配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｉ）配列番号７で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｉｉ）配列番号１６で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｖ）配列番号１１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖ）配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉ）配列番号１６で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉｉ）配列番号２４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２９で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉｉｉ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｘ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

本発明はまた、（ｉ）配列番号１１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｉ）配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｉｉ）配列番号７で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｖ）配列番号１６で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖ）配列番号１１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉ）配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉｉ）配列番号１６で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉｉｉ）配列番号２４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２９で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｘ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｘ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片を提供する。

本発明の例示的な抗体、即ち、抗体ＭＧＵ１０変異体１（ＭＧＵ１０ｖ１）、ＭＧＵ１０変異体２（ＭＧＵ１０ｖ２）、ＭＧＵ１０変異体３（ＭＧＵ１０ｖ３）、ＭＧＵ１０変異体４（ＭＧＵ１０ｖ４）、ＭＧＵ１０変異体５（ＭＧＵ１０ｖ５）、ＭＧＵ１０変異体６（ＭＧＵ１０ｖ６）、ＭＧＵ１０変異体７（ＭＧＵ１０ｖ７）、ＭＧＵ１０変異体８（ＭＧＵ１０ｖ８）、ＭＧＵ１０変異体９（ＭＧＵ１０ｖ９）、及びＭＧＨ２変異体１（ＭＧＨ２ｖ１）、並びにそれらの各野生型レファレンス抗体ＭＧＵ１０及びＭＧＨ２のＣＤＲ及びＶＨ／ＶＬ配列を、以下の表１に示す。
表１：本発明の例示的な抗体、並びにそれらの各レファレンス抗体ＭＧＵ１０及びＭＧＨ２のＣＤＲ及びＶＨ／ＶＬ配列

特に、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイトに（特異的に）結合する。抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ（ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）に対する保護を提供することができ、特に、抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ（ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）感染症（の症状）を阻害又は低減することができる。したがって、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍによる感染を予防、低減、阻害、及び／又は中和することができる。より具体的には、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３３に係るＰｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質（ＰｆＣＳＰ）などのＰｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質（ＣＳＰ）に（特異的に）結合することができる。

換言すれば、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片は、エピトープ、特にＣＳＰエピトープを認識することができる。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質（ＰｆＣＳＰ）のＮＡＮＰリピート領域に（特異的に）結合する。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質のＮ末端領域に（特異的に）結合し、この領域は、スポロゾイト周囲タンパク質のＮ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部をカバーする。典型的には、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、そのパラトープに関して一重特異性であり得る（即ち、抗体又は抗原結合断片は、単一の種類／タイプの抗原結合部位のみを含み得る）；抗体又は抗原結合断片のすべての抗原結合部位が、同一のＣＤＲ又はＶＨ／ＶＬ配列を有し得る）。しかし、同時に、前記抗体又は抗原結合断片は、ＣＳＰの標的エピトープ（即ち、抗体又は抗原結合断片は、ＣＳＰ上の２つ（又はそれ以上）のエピトープ、特に本明細書に記載の２つのエピトープを認識できる）に関して、「二重特異性」であり得る。したがって、本発明の抗体又はその抗原結合断片の単一パラトープは、ＰｆＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域と、スポロゾイト周囲タンパク質のＮ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部をカバーするＰｆＣＳＰのＮ末端領域との両方に結合することができる。ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域は、当業者によく知られている。例えば、ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域は、配列番号３４で表されるアミノ酸配列を有することができる。例えば、スポロゾイト周囲タンパク質のＮ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部をカバーする、ＣＳＰのＮ末端領域は、配列番号３５又は配列番号１０５で表されるアミノ酸配列を有し得る。したがって、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３４及び／又は配列番号３５又は配列番号１０５に係るペプチドに（特異的に）結合することができる。

本発明に係る抗体又はその抗原結合断片の結合を評価するための標準的な方法は、当業者に知られており、例えば、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）が挙げられる。例示的且つ標準的なＥＬＩＳＡは、以下のように行うことができる。ＥＬＩＳＡプレートを、抗体の結合試験対象であるタンパク質／複合体／粒子の十分量（例えば、１μｇ／ｍｌ）でコーティングすることができる。例えば、前記概説したＣＳＰ又はそのエピトープへの結合を試験するために、ＣＳＰタンパク質（例えば、配列番号３３）及び／又はその断片／エピトープ（例えば、配列番号３４又は３５／１０５のペプチド）を使用することができる。ＥＬＩＳＡプレートは、直接、又は間接的に（例えば、最初にプレートをアビジンでコーティングし、後に、抗体の結合試験対象であるビオチン化タンパク質／複合体／粒子と共にインキュベートすることによって）コーティングすることができる。最初のコーティング工程（アビジン、又は抗体の結合試験対象であるタンパク質／複合体／粒子で直接）の後、プレートを、例えば、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）の１％ｗ／ｖＰＢＳ溶液でブロッキングすることができる。コーティングされたプレートを、試験対象の抗体とインキュベートする前に、洗浄することができる。例えば、ＥＣ_５０値を決定するために、プレートは、通常、各種濃度の試験対象抗体とインキュベートされる（「滴定」）。抗体の結合は、例えば、アルカリホスファターゼと結合させたヤギ抗ヒトＩｇＧなどを用いて判定することができる。次いで、プレートを洗浄し、必要な基質（例えば、ｐ－ＮＰＰ）を添加し、プレートを、例えば４０５ｎｍの波長で読み取り、光学密度値を決定することができる。抗体結合の相対的親和性は、飽和状態での最大結合の５０％を達成するために必要な抗体の濃度（ＥＣ_５０）を測定することによって決定することができる。ＥＣ_５０値は、可変勾配の４パラメータ非線形回帰に適合された結合曲線の補間によって計算することができる。係るＥＬＩＳＡの具体例は、実施例２に記載されており、これは、他の抗体又は抗原結合断片でも（本質的に同一の方法で）行うことができる。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、ＣＳＰ（例えば、配列番号３３）、例えば、その断片／エピトープ（例えば、配列番号３４及び／又は３５／１０５）に対する結合に関して、１０^３ｎｇ／ｍｌ未満、例えば、２００又は１００ｎｇ／ｍｌ未満のＥＣ_５０値を有する。例えば、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３４のペプチドに対する結合及び配列番号３５又は配列番号１０５のペプチドに対する結合に関し、１０^３ｎｇ／ｍｌ未満、例えば、２００又は１００ｎｇ／ｍｌ未満のＥＣ_５０値を有することができる。より具体的には、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３４のペプチドに対する結合及び配列番号３５又は配列番号１０５のペプチドに対する結合に関して、３０ｎｇ／ｍｌ未満のＥＣ_５０値を有することができる。例えば、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３４のペプチドに対する結合に関して、２９ｎｇ／ｍｌ未満（例えば、２８又は２７ｎｇ／ｍｌ未満）のＥＣ_５０値及び配列番号３５又は配列番号１０５のペプチドに対する結合に関して、２６ｎｇ／ｍｌ未満（例えば、２３又は２１ｎｇ／ｍｌ未満）のＥＣ_５０値を有することができる。

いくつかの実施形態では、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片は、抗体の重鎖の可変領域、又は遺伝子（セグメント）ＶＨ３－３０などのＶＨ３遺伝子ファミリーの遺伝子（セグメント）を含む核酸によってコードされる、その抗原結合断片の重鎖の可変領域（ＶＨ）を含む。

実験室でウイルス感染性（又は「中和」）を研究及び定量するために、当業者は、各種の標準的な「中和アッセイ」を認識している。中和アッセイの場合、動物ウイルスは、通常、細胞及び／又は細胞株で増殖する。例えば、中和アッセイにおいて、培養細胞は、試験対象の抗体の存在下（又は非存在下）で、一定量のＰｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイトとインキュベートすることができる。読み取りとして、例えばフローサイトメトリを使用することができる。或いは、他の読み取りも考えられる。

いくつかの例では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトの滑走運動性を低下させることができる。Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトは、蚊が刺すことで脊椎動物の宿主の皮膚内に伝染する。スポロゾイトは血流に入る前に、「滑走運動」と呼ばれる運動の形態を使用して、アクトミオシンシステムを動力源とし真皮中の迅速に移動する。したがって、スポロゾイトの運動性は、寄生虫の伝染と脊椎動物宿主への感染成功のための重要な前提条件である。

スポロゾイトの滑走運動性は、スポロゾイトに平らな表面上、例えば、ガラス面上を滑走させるインビトロアッセイによって評価することができる。スポロゾイトの滑走痕跡は、滑走中にスポロゾイトが放出したＣＳＰを検出する抗ＣＳＰ抗体で表面を覆うことにより可視化することができる。抗ＣＳＰ抗体それ自体を標識することができる（例えば、ビオチン）、又は抗ＣＳＰ抗体に対する二次標識抗体を使用して、痕跡を可視化することができる。スポロゾイトの滑走に対する化合物の効果を試験するために、スポロゾイトを滑走させる前に、試験化合物とプレインキュベートすることができる。滑走アッセイの詳細なプロトコルは、当技術分野で知られており、例えば、実施例４又はＰｒｉｎｚ，Ｈ．Ｌ．，Ｓａｔｔｌｅｒ，Ｊ．Ｍ．＆Ｆｒｉｓｃｈｋｎｅｃｈｔ，Ｆ．（２０１７）ＰｌａｓｍｏｄｉｕｍＳｐｏｒｏｚｏｉｔｅＭｏｔｉｌｉｔｙｏｎＦｌａｔＳｕｂｓｔｒａｔｅｓ．Ｂｉｏ－ｐｒｏｔｏｃｏｌ７，ｅ２３９５に記載されている。更に、ヒト組織を利用するエクスビボ画像化技術を使用して、スポロゾイトの滑走運動性を決定することができ、これは、Ｗｉｎｋｅｌ，Ｂ．Ｍ．Ｆ．，ｄｅＫｏｒｎｅ，Ｃ．Ｍ．，ｖａｎＯｏｓｔｅｒｏｍ，Ｍ．Ｎ．ｅｔａｌ．（２０１９）Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｗｉｌｄ－ｔｙｐｅａｎｄｒａｄｉａｔｉｏｎａｔｔｅｎｕａｔｅｄＰｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｍｏｔｉｌｉｔｙｉｎｈｕｍａｎｓｋｉｎ．ＳｃｉＲｅｐ９，１３４３６に記載されている。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、それぞれ、その親抗体ＭＧＵ１０又はＭＧＨ２よりも、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイト滑走運動性を、より大きく低減させる。これは、例えば、実施例４に記載されているように、同一の滑走運動性アッセイにおいて、本発明に係る親抗体（ＭＧＵ１０又はＭＧＨ２）及びその変異型抗体（又はその抗原結合断片）の効果を直接比較することによって容易に評価することができる。

いくつかの例では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトの細胞トラバーサルを低減させることができる。スポロゾイトが肝臓に向かって移動すると、一過性の液胞内で宿主細胞に出入りすることができ、これが、細胞トラバーサルとして知られるプロセスである。トラバーサルは、スポロゾイトが細胞障壁を越えて宿主の免疫応答を回避することを可能にすることによって、脊椎動物宿主への感染を成功させるための重要な前提条件である。

スポロゾイトの細胞トラバーサルは、スポロゾイトが共培養で宿主細胞とインキュベートされるインビトロアッセイによって評価することができる。可視化のために、例えば、共培養において様々な（例えば、蛍光）標識を使用することができ、又はスポロゾイトを（例えば、実施例５に記載されるように）標識と共にプレインキュベートすることができる。或いは、例えば蛍光標識を発現する遺伝子改変されたＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ株を使用することができる。トラバーサルに対する化合物の効果を試験するために、スポロゾイトを、宿主細胞と共培養する前に、試験化合物とプレインキュベートすることができる。スポロゾイトトラバーサルアッセイの詳細なプロトコルは、当技術分野で知られており、例えば、実施例５；Ｓｃｈｌｅｉｃｈｅｒ，Ｔ．Ｒ．，Ｙａｎｇ，Ｊ．，Ｆｒｅｕｄｚｏｎ，Ｍ．ｅｔａｌ．（２０１８）ＡｍｏｓｑｕｉｔｏｓａｌｉｖａｒｙｇｌａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｐａｒｔｉａｌｌｙｉｎｈｉｂｉｔｓＰｌａｓｍｏｄｉｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｃｅｌｌｔｒａｖｅｒｓａｌａｎｄｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ．ＮａｔＣｏｍｍｕｎ９，２９０８；又はＳｉｎｎｉｓ，Ｐ．，ＤｅＬａＶｅｇａ，Ｐ．，Ｃｏｐｐｉ，Ａ．，Ｋｒｚｙｃｈ，Ｕ．，＆Ｍｏｔａ，Ｍ．Ｍ．（２０１３）．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｉｎｖａｓｉｏｎ，ｍｉｇｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｂｙｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓｉｎｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃｌｉｆｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．），９２３，３８５－４００に記載されている。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、それぞれ、その親抗体ＭＧＵ１０又はＭＧＨ２よりも、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイト細胞のトラバースを、より大きく低減させる。これは、例えば、実施例５に記載されているように、同一のトラバーサルアッセイにおいて、本発明に係る親抗体（ＭＧＵ１０又はＭＧＨ２）及びその変異型抗体（又はその抗原結合断片）の効果を直接比較することによって容易に評価することができる。

いくつかの例では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトの侵入及び／又は成熟を低減させることができる。肝細胞へのスポロゾイトの侵入とそれに続く赤血球外形態への成熟は、マラリア感染の確立に不可欠な工程である。

スポロゾイトの侵入及び／又は成熟は、スポロゾイトが宿主細胞（例えば、肝細胞）と共にインキュベートされるインビトロアッセイによって評価することができる。可視化のために、（例えば、実施例３に記載されるように）様々な（例えば、蛍光）標識を使用することができる。或いは、例えば蛍光標識を発現する遺伝子改変されたＰｌａｓｍｏｄｉｕｍ株を使用することができる。侵入及び／又は成熟に対する化合物の効果を試験するために、スポロゾイトを、宿主細胞と共培養する前に、試験化合物とプレインキュベートすることができる。スポロゾイトの侵入及び／又は成熟アッセイの詳細なプロトコルは、当技術分野で知られており、例えば、実施例３；Ｋａｕｓｈａｎｓｋｙ，Ａ．，Ｒｅｚａｋｈａｎｉ，Ｎ．，Ｍａｎｎ，Ｈ．＆Ｋａｐｐｅ，Ｓ．Ｈ．（２０１２）ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｂａｓｅｄａｓｓａｙｔｏａｓｓｅｓｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｂｙＰｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ１８３，１００－１０３；Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ－ＧａｌａｎＡ，ＳａｌｍａｎＡＭ，ＢｏｗｙｅｒＧ，ＣｏｌｌｉｎｓＫＡ，ＬｏｎｇｌｅｙＲＪ，ＢｒｏｄＦ，ＵｌａｓｚｅｗｓｋａＭ，ＥｗｅｒＫＪ，ＪａｎｓｅＣＪ，ＫｈａｎＳＭ，ＨａｆａｌｌａＪＣ，ＨｉｌｌＡＶＳ，ＳｐｅｎｃｅｒＡＪ．（２０１７）Ａｎｉｎｖｉｔｒｏａｓｓａｙｔｏｍｅａｓｕｒｅａｎｔｉｂｏｄｙ－ｍｅｄｉａｔｅｄｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＰ．ｂｅｒｇｈｅｉｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｉｎｖａｓｉｏｎａｇａｉｎｓｔＰ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍａｎｔｉｇｅｎｓ．ＳｃｉＲｅｐ５；７（１）：１７０１１；又はＳｉｎｎｉｓ，Ｐ．，ＤｅＬａＶｅｇａ，Ｐ．，Ｃｏｐｐｉ，Ａ．，Ｋｒｚｙｃｈ，Ｕ．，＆Ｍｏｔａ，Ｍ．Ｍ．（２０１３）．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｉｎｖａｓｉｏｎ，ｍｉｇｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｂｙｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓｉｎｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃｌｉｆｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．），９２３，３８５－４００に記載されている。いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、それぞれ、その親抗体ＭＧＵ１０又はＭＧＨ２よりも、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイト細胞の侵入及び／又は成熟を、より大きく低減させる。これは、例えば、実施例３に記載されているように、同一の侵入及び／又は成熟アッセイにおいて、本発明に係る親抗体（ＭＧＵ１０又はＭＧＨ２）及びその変異型抗体（又はその抗原結合断片）の効果を直接比較することによって容易に評価することができる。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、それぞれ、その親抗体ＭＧＵ１０又はＭＧＨ２と比較して、上昇した安定性を示すことができる。比較のために、本発明の変異型抗体及びその親抗体が同一条件下で（即ち、並べて）試験されることが理解される。例えば、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、ｐＨ５．５又は５．６などの６未満のｐＨで、それぞれ、その親抗体ＭＧＵ１０又はＭＧＨ２と比較して、上昇した安定性を示すことができる。これは、例えば、抗体を５０ｍＭの酢酸ナトリウム及び５０ｍＭのＮａＣｌを含む緩衝液にｐＨ５．５で保存することによって達成することができる。更に、抗体を、それらの安定性を試験するために、熱ストレス、例えば、約４０℃に曝露することができる。安定性試験は、通常、少なくとも数日間、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０日間、又はそれより長い日数、継続させる。いくつかの例では、安定性は、１４日間又は１５日間に亘って試験される。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、本発明の抗体は、モノクローナル抗体である。例えば、本発明の抗体は、ヒトのモノクローナル抗体である。

本発明の抗体は、任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、即ち、α、γ、又はμ重鎖）であることができる。例えば、抗体は、ＩｇＧタイプである。ＩｇＧアイソタイプの中でも、抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４のサブクラスであってよく、例えば、ＩｇＧ１であってよい。本発明の抗体は、κ又はλ軽鎖を有していてよい。いくつかの実施形態では、ラムダ又はカッパ軽鎖を有する。いくつかの実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１タイプであり、ラムダ又はカッパ軽鎖を有する。

いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ１タイプである。抗体は、任意のアロタイプであることができる。用語「アロタイプ」は、ＩｇＧサブクラス内にみられる対立遺伝子のバリエーションを意味する。例えば、抗体は、Ｇ１ｍ１（又はＧ１ｍ（ａ））アロタイプ、Ｇ１ｍ２（又はＧ１ｍ（ｘ））アロタイプ、Ｇ１ｍ３（又はＧ１ｍ（ｆ））アロタイプ、及び／又はＧ１ｍ１７（又はＧｍ（ｚ））アロタイプであることができる。Ｇ１ｍ３アロタイプ及びＧ１ｍ１７アロタイプは、ＣＨ１ドメインの同一位置に位置する（ＥＵナンバリングによると２１４位）。Ｇ１ｍ３はＲ２１４（ＥＵ）に対応し、Ｇ１ｍ１７はＫ２１４（ＥＵ）に対応する。Ｇ１ｍ１アロタイプは、ＣＨ３ドメイン（位置３５６及び３５８（ＥＵ））に位置し、置換Ｅ３５６Ｄ及びＭ３５８Ｌを意味する。Ｇ１ｍ２アロタイプは、４３１位（ＥＵ）のアラニンのグリシンによる置換を意味する。Ｇ１ｍ１アロタイプは、例えば、Ｇ１ｍ３又はＧ１ｍ１７アロタイプと組み合わせることができる。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｇ１ｍ１を含まないアロタイプＧ１ｍ３である（Ｇ１ｍ３，－１）。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｇ１ｍ１７，１アロタイプである。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｇ１ｍ３，１アロタイプである。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｇ１ｍ１を含まないアロタイプＧ１ｍ１７である（Ｇ１ｍ１７，－１）。任意に、これらのアロタイプは、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ２７、又はＧ１ｍ２８アロタイプと組み合わせる（又は組み合わせない）ことができる。例えば、抗体は、Ｇ１ｍ１７，１，２アロタイプであることができる。

いくつかの実施形態では、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片は、Ｆｃ部分を含む。Ｆｃ部分は、ヒト起源、例えばヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及び／又はＩｇＧ４に由来することができ、例えば、ヒトＩｇＧ１が挙げられる。

本明細書で使用するとき、用語「Ｆｃ部分」とは、パパイン切断部位の直ぐ上流のヒンジ領域（例えば、重鎖定常領域の最初の残基が１１４であるとすると、ネイティブＩｇＧにおける残基２１６）で始まり、免疫グロブリン重鎖のＣ末端で終わる免疫グロブリン重鎖の部分に由来する配列を指す。したがって、Ｆｃ部分は、完全Ｆｃ部分又はその一部（例えば、ドメイン）であってよい。完全Ｆｃ部分は、ヒンジドメイン、ＣＨ２ドメイン、及びＣＨ３ドメイン（例えば、ＥＵアミノ酸位置２１６～４４６）を少なくとも含む。時に、追加のリジン残基（Ｋ）がＦｃ部分のＣ末端に存在するが、多くの場合、成熟抗体から切断される。

本明細書では、Ｆｃ部分内のアミノ酸位置には、それぞれ、当技術分野において認識されているＫａｂａｔのＥＵナンバリングシステムにしたがって番号が振られている。例えば、Ｋａｂａｔｅｔａｌ．，“ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ”，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ＨｅａｌｔｈａｎｄＨｕｍａｎＳｅｒｖｉｃｅｓ，１９８３ａｎｄ１９８７を参照。ＥＵインデックス若しくはＫａｂａｔに記載のＥＵインデックス又はＥＵナンバリングシステムは、ＥＵ抗体のナンバリングを意味する（ＥｄｅｌｍａｎＧＭ，ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍＢＡ，ＧａｌｌＷＥ，ＧｏｔｔｌｉｅｂＰＤ，ＲｕｔｉｓｈａｕｓｅｒＵ，ＷａｘｄａｌＭＪ．ＴｈｅｃｏｖａｌｅｎｔｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆａｎｅｎｔｉｒｅｇａｍｍａＧｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｍｏｌｅｃｕｌｅ．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．１９６９；６３（１）：７８－８５；ＫａｂａｔＥ．Ａ．，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ（Ｕ．Ｓ．）ＯｆｆｉｃｅｏｆｔｈｅＤｉｒｅｃｔｏｒ， “ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ”，５^ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆＨｅａｌｔｈａｎｄＨｕｍａｎＳｅｒｖｉｃｅｓ，ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＳｅｒｖｉｃｅ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，１９９１（参照によりその全体を本明細書に援用する））。

いくつかの実施形態では、本発明において、Ｆｃ部分は、ヒンジ（例えば、上方、中央、及び／又は下方ヒンジ領域）ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、又はこれらの変異体、一部、若しくは断片のうちの少なくとも１つを含む。Ｆｃ部分は、ヒンジドメイン、ＣＨ２ドメイン又はＣＨ３ドメインを少なくとも含んでいてもよい。Ｆｃ部分は、完全Ｆｃ部分であってもよい。また、Ｆｃ部分は、天然Ｆｃ部分に対して１以上のアミノ酸挿入、欠失、又は置換を含んでいてもよい。例えば、ヒンジドメイン、ＣＨ２ドメイン、又はＣＨ３ドメイン（又はこれらの一部）のうちの少なくとも１つが欠失していてもよい。例えば、Ｆｃ部分は、（ｉ）ＣＨ２ドメイン（又はその一部）に融合しているヒンジドメイン（又はその一部）、（ｉｉ）ＣＨ３ドメイン（又はその一部）に融合しているヒンジドメイン（又はその一部）、（ｉｉｉ）ＣＨ３ドメイン（又はその一部）に融合しているＣＨ２ドメイン（又はその一部）、（ｉｖ）ヒンジドメイン（又はその一部）、（ｖ）ＣＨ２ドメイン（又はその一部）、又は（ｖｉ）ＣＨ３ドメイン又はその一部を含んでいてもよく、これらからなっていてもよい。

天然Ｆｃ部分によって付与される少なくとも１つの望ましい機能を保持しながら、天然免疫グロブリン分子の完全Ｆｃ部分とアミノ酸配列が異なるようにＦｃ部分を改変し得ることを当業者であれば理解するであろう。かかる機能としては、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）の結合、抗体の半減期の変更、ＡＤＣＣ機能、プロテインＡの結合、プロテインＧの結合、及び補体の結合が挙げられる。天然Ｆｃ部分のどこがかかる機能に関与する及び／又は必須であるかは、当業者に周知である。

例えば、補体カスケードを活性化するために、Ｃ１ｑは、抗原性標的に結合している少なくとも２分子のＩｇＧ１又は１分子のＩｇＭに結合する（Ｗａｒｄ，Ｅ．Ｓ．，ａｎｄＧｈｅｔｉｅ，Ｖ．，Ｔｈｅｒ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２（１９９５）７７－９４）。Ｂｕｒｔｏｎ，Ｄ．Ｒ．は、アミノ酸残基３１８～３３７を含む重鎖領域が補体結合に関与していると記載している（Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２（１９８５）１６１－２０６）。Ｄｕｎｃａｎ，Ａ．Ｒ．及びＷｉｎｔｅｒ，Ｇ．（Ｎａｔｕｒｅ３３２（１９８８）７３８－７４０）は、部位特異的変異誘発を使用して、Ｇｌｕ３１８、Ｌｙｓ３２０、及びＬｙｓ３２２がＣ１ｑに対する結合部位を形成すると報告した。Ｃ１ｑの結合におけるＧｌｕ３１８、Ｌｙｓ３２０、及びＬｙｓ３２２残基の役割は、これら残基を含有する短い合成ペプチドが補体媒介性溶解を阻害する能力によって確認された。

例えば、ＦｃＲ結合は、造血細胞における特殊な細胞表面受容体であるＦｃ受容体（ＦｃＲ）と（抗体の）Ｆｃ部分との相互作用によって媒介され得る。Ｆｃ受容体は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属し、抗体でコーティングされた病原体の免疫複合体の食作用による除去と、抗体依存性細胞媒介細胞傷害作用（ＡＤＣＣ；ＶａｎｄｅＷｉｎｋｅｌ，Ｊ．Ｇ．，ａｎｄＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ｃ．Ｌ．，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ．４９（１９９１）５１１－５２４）を介する、対応する抗体でコーティングされた赤血球及び様々な他の細胞標的（例えば、腫瘍細胞）の溶解とを両方媒介することが示されている。ＦｃＲは、免疫グロブリンクラスに対する特異性によって定義される；ＩｇＧ抗体に対するＦｃ受容体はＦｃγＲと称され、ＩｇＥの場合はＦｃεＲと称され、ＩｇＡの場合はＦｃαＲと称され、新生児Ｆｃ受容体はＦｃＲｎと称される。Ｆｃ受容体結合は、例えば、Ｒａｖｅｔｃｈ，Ｊ．Ｖ．，ａｎｄＫｉｎｅｔ，Ｊ．Ｐ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９（１９９１）４５７－４９２；Ｃａｐｅｌ，Ｐ．Ｊ．，ｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ４（１９９４）２５－３４；ｄｅＨａａｓ，Ｍ．，ｅｔａｌ．，ＪＬａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６（１９９５）３３０－３４１；及びＧｅｓｓｎｅｒ，Ｊ．Ｅ．，ｅｔａｌ．，Ａｎｎ．Ｈｅｍａｔｏｌ．７６（１９９８）２３１－２４８に記載されている。

ネイティブＩｇＧ抗体のＦｃドメイン（ＦｃγＲ）による受容体の架橋は、食作用、抗体依存性細胞傷害作用、及び炎症メディエータの放出を含む広範なエフェクタ機能に加えて、免疫複合体のクリアランス及び抗体産生の調節も誘発する。したがって、Ｆｃ部分が、受容体の架橋を提供してもよい（ＦｃγＲ）。ヒトでは、３つのクラスのＦｃγＲが特徴付けられている。即ち、（ｉ）高い親和性で単量体ＩｇＧに結合し、マクロファージ、単球、好中球、及び好酸球で発現するＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）；（ｉｉ）中～低親和性で複合体化ＩｇＧに結合し、広く、特に白血球で発現し、抗体媒介性免疫において中心的な役割を果たすことが知られており、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、及びＦｃγＲＩＩＣに分類することができ、免疫系において様々な機能を発揮するが、同様の低親和性でＩｇＧ－Ｆｃに結合し、これら受容体のエクトドメインが高度に相同であるＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）；並びに（ｉｉｉ）中～低親和性でＩｇＧに結合し、ＮＫ細胞、マクロファージ、好酸球、及び幾つかの単球、並びにＴ細胞でみられ、ＡＤＣＣを媒介するＦｃγＲＩＩＩＡ及び好中球で高度に発現するＦｃγＲＩＩＩＢの２つのタイプとして存在するＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）である。ＦｃγＲＩＩＡは、殺傷に関与する多くの細胞（例えば、マクロファージ、単球、好中球）でみられ、殺傷プロセスを活性化することができると考えられる。ＦｃγＲＩＩＢは、阻害プロセスにおいて役割を果たすと考えられ、Ｂ細胞、マクロファージ、並びに肥満細胞及び好酸球でみられる。重要なことに、全てのＦｃγＲＩＩＢのうちの７５％が肝臓でみられる（Ｇａｎｅｓａｎ，Ｌ．Ｐ．ｅｔａｌ．，２０１２：ＦｃγＲＩＩｂｏｎｌｉｖｅｒｓｉｎｕｓｏｉｄａｌｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍｃｌｅａｒｓｓｍａｌｌｉｍｍｕｎｅｃｏｍｐｌｅｘｅｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ１８９：４９８１－４９８８）。ＦｃγＲＩＩＢは、ＬＳＥＣと呼ばれる肝臓洞様血管内皮及び肝臓のクッパー細胞で多量に発現し、ＬＳＥＣは、小免疫複合体のクリアランスの主な部位である（Ｇａｎｅｓａｎ，Ｌ．Ｐ．ｅｔａｌ．，２０１２：ＦｃγＲＩＩｂｏｎｌｉｖｅｒｓｉｎｕｓｏｉｄａｌｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍｃｌｅａｒｓｓｍａｌｌｉｍｍｕｎｅｃｏｍｐｌｅｘｅｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ１８９：４９８１－４９８８）。

したがって、本発明の抗体及びその抗原結合断片は、ＦｃγＲＩＩｂに結合することができ、例えば、ＦｃγＲＩＩｂに結合するためのＦｃ部分、特にＦｃ領域を含む抗体、例えば、ＩｇＧ型抗体である。更に、Ｃｈｕ，Ｓ．Ｙ．ｅｔａｌ．，２００８：ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＢｃｅｌｌｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｐｒｉｍａｒｙｈｕｍａｎＢｃｅｌｌｓｂｙｃｏｅｎｇａｇｅｍｅｎｔｏｆＣＤ１９ａｎｄＦｃγＲＩＩｂｗｉｔｈＦｃ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ４５，３９２６－３９３３によって記載されている通り、変異Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆを導入することによってＦｃ部分を改変してＦｃγＲＩＩＢの結合を強化することが可能である。それによって、免疫複合体のクリアランスを強化することができる（Ｃｈｕ，Ｓ．，ｅｔａｌ．，２０１４：ＡｃｃｅｌｅｒａｔｅｄＣｌｅａｒａｎｃｅｏｆＩｇＥＩｎＣｈｉｍｐａｎｚｅｅｓＩｓＭｅｄｉａｔｅｄＢｙＸｍａｂ７１９５，ＡｎＦｃ－ＥｎｇｉｎｅｅｒｅｄＡｎｔｉｂｏｄｙＷｉｔｈＥｎｈａｎｃｅｄＡｆｆｉｎｉｔｙＦｏｒＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙＲｅｃｅｐｔｏｒＦｃγＲＩＩｂ．ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔ，ＡｍｅｒｉｃａｎＴｈｏｒａｃｉｃＳｏｃｉｅｔｙＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅＡｂｓｔｒａｃｔｓ）。したがって、本発明の抗体及びその抗原結合断片は、特にＣｈｕ，Ｓ．Ｙ．ｅｔａｌ．，２００８：ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＢｃｅｌｌｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｍｅｄｉａｔｅｄａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｐｒｉｍａｒｙｈｕｍａｎＢｃｅｌｌｓｂｙｃｏｅｎｇａｇｅｍｅｎｔｏｆＣＤ１９ａｎｄＦｃγＲＩＩｂｗｉｔｈＦｃ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ４５，３９２６－３９３３に記載されている通り、変異Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆを有する改変されたＦｃ部分を含んでもよい。

Ｂ細胞では、更なる免疫グロブリン産生及び例えばＩｇＥクラスへのアイソタイプスイッチを抑制する機能を有すると考えられる。マクロファージでは、ＦｃγＲＩＩＢは、ＦｃγＲＩＩＡを介して媒介されたとき食作用を阻害する作用を有する。好酸球及び肥満細胞では、ｂ形態は、ＩｇＥのその別個の受容体への結合を通してこれら細胞の活性化を抑制するのに役立ち得る。

ＦｃγＲＩ結合に関しては、ネイティブＩｇＧにおけるＥ２３３～Ｇ２３６、Ｐ２３８、Ｄ２６５、Ｎ２９７、Ａ３２７、及びＰ３２９のうちの少なくとも１つを改変すると、ＦｃγＲＩへの結合が減少する。２３３位～２３６位におけるＩｇＧ２残基をＩｇＧ１及びＩｇＧ４に置換すると、ＦｃγＲＩへの結合が１０^３倍減少し、抗体感作赤血球に対するヒト単球応答が排除された（Ａｒｍｏｕｒ，Ｋ．Ｌ．，ｅｔａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９（１９９９）２６１３－２６２４）。ＦｃγＲＩＩ結合に関しては、例えば、Ｅ２３３～Ｇ２３６、Ｐ２３８、Ｄ２６５、Ｎ２９７、Ａ３２７、Ｐ３２９、Ｄ２７０、Ｑ２９５、Ａ３２７、Ｒ２９２、及びＫ４１４のうちの少なくとも１つのＩｇＧ変異について、ＦｃγＲＩＩＡの結合減少がみられる。ＦｃγＲＩＩＩ結合に関しては、例えば、Ｅ２３３～Ｇ２３６、Ｐ２３８、Ｄ２６５、Ｎ２９７、Ａ３２７、Ｐ３２９、Ｄ２７０、Ｑ２９５、Ａ３２７、Ｓ２３９、Ｅ２６９、Ｅ２９３、Ｙ２９６、Ｖ３０３、Ａ３２７、Ｋ３３８、及びＤ３７６のうちの少なくとも１つの変異について、ＦｃγＲＩＩＩＡへの結合減少がみられる。Ｆｃ受容体についてのヒトＩｇＧ１における結合部位のマッピング、上述の変異部位、並びにＦｃγＩＲ及びＦｃγＲＩＩＡに対する結合を測定する方法は、Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（２００１）６５９１－６６０４に記載されている。例えば、一重（Ｓ２３９Ｄ又はＩ３３２Ｅ）、二重（Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ）、及び三重（Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ａ３３０Ｌ）変異は、ヒトＦｃγＲＩＩＩａに対する親和性を改善した。更に、変異Ｇ２３６ＡをＳ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅに加えると、ＦｃγＲＩＩａ：ＦｃγＲＩＩｂ比が改善されただけでなく、ＦｃγＲＩＩＩａへの結合も強化された。したがって、変異Ｇ２３６Ａ／Ｓ２３９Ｄ／Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅは、ＦｃγＲＩＩａ及びＦｃγＲＩＩＩａの関与を増強することが記述された。

重要なＦｃγＲＩＩに対する結合に関しては、ネイティブＩｇＧＦｃの２つの領域、即ち、（ｉ）ＩｇＧＦｃの下方ヒンジ部位、特に、アミノ酸残基Ｌ、Ｌ、Ｇ、Ｇ（２３４～２３７、ＥＵナンバリング）、及び（ｉｉ）ＩｇＧＦｃのＣＨ２ドメインの隣接領域、特に、下方ヒンジ領域に隣接する上方ＣＨ２ドメイン、例えば、Ｐ３３１の領域におけるループ及び鎖は、ＦｃγＲＩＩ及びＩｇＧの相互作用にとって重要であると考えられる（Ｗｉｎｅｓ，Ｂ．Ｄ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０００；１６４：５３１３－５３１８）。更に、ＦｃγＲＩは、ＩｇＧＦｃにおける同じ部位に結合すると考えられ、一方、ＦｃＲｎ及びプロテインＡは、ＩｇＧＦｃにおける異なる部位（ＣＨ２－ＣＨ３界面であると考えられる）に結合する（Ｗｉｎｅｓ，Ｂ．Ｄ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０００；１６４：５３１３－５３１８）。

例えば、Ｆｃ部分は、ＦｃＲｎの結合又は半減期の延長に必要であることが当技術分野において公知であるＦｃ部分の部分を少なくとも含んでいてもよく、又はからなっていてもよい。それに代えて又はそれに加えて、本発明の抗体のＦｃ部分は、プロテインＡの結合に必要であることが当技術分野において公知である部分を少なくとも含む、及び／又は本発明の抗体のＦｃ部分は、プロテインＧの結合に必要であることが当技術分野において公知であるＦｃｃ分子の一部を少なくとも含む。Ｆｃ部分は、ＦｃγＲの結合に必要であることが当技術分野において公知である部分を少なくとも含むことができる。したがって、上に概説した通り、Ｆｃ部分は、（ｉ）ネイティブＩｇＧＦｃの下方ヒンジ部位、特に、アミノ酸残基Ｌ、Ｌ、Ｇ、Ｇ（２３４～２３７、ＥＵナンバリング）、及び（ｉｉ）ネイティブＩｇＧＦｃのＣＨ２ドメインの隣接領域、特に、下方ヒンジ領域に隣接する上方ＣＨ２ドメイン、例えばＰ３３１の領域、例えば、ネイティブＩｇＧＦｃのアミノ酸３２０～３４０（ＥＵナンバリング）などのＰ３３１周辺のネイティブＩｇＧＦｃの上方ＣＨ２ドメインにおける少なくとも３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、又は１０個の連続するアミノ酸の領域におけるループ及び鎖を少なくとも含み得る。

いくつかの実施形態では、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片は、Ｆｃ領域を含む。本明細書で使用するとき、用語「Ｆｃ領域」とは、抗体重鎖の２以上のＦｃ部分によって形成される免疫グロブリンの部分を指す。例えば、Ｆｃ領域は、単量体又は「単鎖」Ｆｃ領域（即ち、ｓｃＦｃ領域）であってよい。単鎖Ｆｃ領域は、（例えば、単一の連続する核酸配列にコードされている）単一のポリペプチド鎖内で結合しているＦｃ部分で構成される。例示的なｓｃＦｃ領域は、国際公開第２００８／１４３９５４Ａ２号に開示されている。Ｆｃ領域は、二量体であってよい。「二量体Ｆｃ領域」又は「ｄｃＦｃ」は、２つの別個の免疫グロブリン重鎖のＦｃ部分によって形成される二量体を指す。二量体Ｆｃ領域は、２つの同一のＦｃ部分のホモ二量体（例えば、天然免疫グロブリンのＦｃ領域）又は２つの非同一のＦｃ部分のヘテロ二量体であってよい。

Ｆｃ領域のＦｃ部分は、同じ又は異なるクラス及び／又はサブクラスであってよい。例えば、Ｆｃ部分は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４サブクラスの免疫グロブリン（例えば、ヒト免疫グロブリン）に由来していてよい。Ｆｃ領域のＦｃ部分は、同じクラス及びサブクラスであってよい。しかし、Ｆｃ領域（又はＦｃ領域の１以上のＦｃ部分）はキメラであってもよく、キメラＦｃ領域は、異なる免疫グロブリンクラス及び／又はサブクラスに由来するＦｃ部分を含み得る。例えば、二量体又は単鎖Ｆｃ領域のＦｃ部分のうちの少なくとも２つは、異なる免疫グロブリンクラス及び／又はサブクラスに由来していてよい。それに加えて又はそれに代えて、キメラＦｃ領域は、１以上のキメラＦｃ部分を含み得る。例えば、キメラＦｃ領域又は部分は、第１のサブクラスの免疫グロブリン（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、又はＩｇＧ３サブクラス）の免疫グロブリンに由来する１以上の部分を含み得るが、一方、Ｆｃ領域又は部分の残りは、異なるサブクラスである。例えば、ＦｃポリペプチドのＦｃ領域又は部分は、第１のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、又はＩｇＧ４サブクラス）の免疫グロブリンに由来するＣＨ２及び／又はＣＨ３ドメインと、第２のサブクラス（例えば、ＩｇＧ３サブクラス）の免疫グロブリンに由来するヒンジ領域とを含み得る。例えば、Ｆｃ領域又は部分は、第１のサブクラス（例えば、ＩｇＧ４サブクラス）の免疫グロブリンに由来するヒンジ及び／又はＣＨ２ドメインと、第２のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、又はＩｇＧ３サブクラス）の免疫グロブリンに由来するＣＨ３ドメインとを含み得る。例えば、キメラＦｃ領域は、第１のサブクラス（例えば、ＩｇＧ４サブクラス）の免疫グロブリンに由来するＦｃ部分（例えば、完全Ｆｃ部分）と、第２のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、又はＩｇＧ３サブクラス）の免疫グロブリンに由来するＦｃ部分とを含み得る。例えば、Ｆｃ領域又は部分は、ＩｇＧ４免疫グロブリンに由来するＣＨ２ドメインと、ＩｇＧ１免疫グロブリンに由来するＣＨ３ドメインとを含み得る。例えば、Ｆｃ領域又は部分は、ＩｇＧ４分子に由来するＣＨ１ドメイン及びＣＨ２ドメインと、ＩｇＧ１分子に由来するＣＨ３ドメインとを含み得る。例えば、Ｆｃ領域又は部分は、抗体の特定のサブクラスに由来するＣＨ２ドメインの一部、例えば、ＣＨ２ドメインのＥＵ２９２位～３４０位を含み得る。例えば、Ｆｃ領域又は部分は、ＩｇＧ４部分に由来するＣＨ２の２９２位～３４０位のアミノ酸とＩｇＧ１部分に由来するＣＨ２の残りとを含み得る（或いは、ＣＨ２の２９２～３４０は、ＩｇＧ１部分に由来し、ＣＨ２の残りはＩｇＧ４部分に由来していてもよい）。

更に、Ｆｃ領域又は部分は、（それに加えて又はそれに代えて）例えば、キメラヒンジ領域を含み得る。例えば、キメラヒンジは、例えば、一部はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、又はＩｇＧ４分子（例えば、上方及び下方の中央ヒンジ配列）に由来し得、一部はＩｇＧ３分子（例えば、中央ヒンジ配列）に由来し得る。別の例では、Ｆｃ領域又は部分は、一部がＩｇＧ１分子に由来し、一部がＩｇＧ４分子に由来するキメラヒンジを含み得る。他の実施形態では、キメラヒンジは、ＩｇＧ４分子由来の上方及び下方ヒンジドメインと、ＩｇＧ１分子由来の中央ヒンジドメインとを含み得る。かかるキメラヒンジは、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ領域の中央ヒンジドメインにおけるＥＵ２２８位にプロリン置換（Ｓｅｒ２２８Ｐｒｏ）を導入することによって作製され得る。別の実施形態では、キメラヒンジは、ＩｇＧ２抗体に由来するＥＵ２３３位～２３６位のアミノ酸及び／又はＳｅｒ２２８Ｐｒｏ変異を含み得、この場合、ヒンジの残りのアミノ酸は、ＩｇＧ４抗体由来である（例えば、配列ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰのキメラヒンジ）。更に、本発明に係る抗体のＦｃ部分において用いることができるキメラヒンジは、米国特許特許公開第２００５／０１６３７８３Ａ１号明細書に記載されている。

いくつかの実施形態では、Ｆｃ部分又はＦｃ領域は、ヒト免疫グロブリン配列に由来するアミノ酸配列（例えば、ヒトＩｇＧ分子由来のＦｃ領域又はＦｃ部分）を含む又はからなる。しかし、ポリペプチドは、別の哺乳動物種由来の１以上のアミノ酸を含み得る。例えば、霊長類Ｆｃ部分又は霊長類結合部位が対象ポリペプチドに含まれていてもよい。或いは、１以上のマウスアミノ酸がＦｃ部分又はＦｃ領域に存在していてもよい。

いくつかの実施形態では、本発明に係る抗体は、特に前記Ｆｃ部分に加えて、定常領域に由来する他の部分、特にＩｇＧの定常領域、例えば（ヒト）ＩｇＧ１の定常領域などを含む。本発明に係る抗体は、特に前記Ｆｃ部分に加えて、定常領域の他の部分全て、特にＩｇＧ（例えば（ヒト）ＩｇＧ１）の定常領域の他の部分全てを含むことができる。

定常領域の例示的配列は、配列番号３０～３２に係るアミノ酸配列である。例えば、ＩｇＧ１のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３のアミノ酸配列は、配列番号３０又は少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有する（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、又はそれ以上の変異を含む）その配列変異体で表される。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ１のＣＨ１－ＣＨ２－ＣＨ３のアミノ酸配列は、配列番号１０３又は少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有する（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、又はそれ以上の変異を含む）その配列変異体で表され、変異Ｍ４２８Ｌ及び／又はＮ４３４Ｓが維持され得る。

前記概説したように、本発明に係る抗体は、ヒトＩｇＧ１に由来する（完全な）Ｆｃ領域を含むことができる。いくつかの実施形態では、本発明に係る抗体は、特に、ヒトＩｇＧ１に由来する（完全な）Ｆｃ領域に加えて、（ヒト）ＩｇＧ１の定常領域の他の全ての部分など、ＩｇＧの定常領域の他の全ての部分も含む。

いくつかの実施形態では、本発明に係る抗体は、（完全な）Ｆｃ部分／Ｆｃ領域を含み、ＦｃＲとの相互作用／結合が損なわれない。一般に、Ｆｃ受容体への抗体の結合は、ＥＬＩＳＡ（ＨｅｓｓｅｌｌＡＪ，ＨａｎｇａｒｔｎｅｒＬ，ＨｕｎｔｅｒＭ，ＨａｖｅｎｉｔｈＣＥＧ，ＢｅｕｒｓｋｅｎｓＦＪ，ＢａｋｋｅｒＪＭ，ＬａｎｉｇａｎＣＭＳ，ＬａｎｄｕｃｃｉＧ，ＦｏｒｔｈａｌＤＮ，ＰａｒｒｅｎＰＷＨＩ，ｅｔａｌ．：ＦｃｒｅｃｅｐｔｏｒｂｕｔｎｏｔｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｂｉｎｄｉｎｇｉｓｉｍｐｏｒｔａｎｔｉｎａｎｔｉｂｏｄｙｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｇａｉｎｓｔＨＩＶ．Ｎａｔｕｒｅ２００７，４４９：１０１－１０４；ＧｒｅｖｙｓＡ，ＢｅｒｎＭ，ＦｏｓｓＳ，ＢｒａｔｌｉｅＤＢ，ＭｏｅｎＡ，ＧｕｎｎａｒｓｅｎＫＳ，ＡａｓｅＡ，ＭｉｃｈａｅｌｓｅｎＴＥ，ＳａｎｄｌｉｅＩ，ＡｎｄｅｒｓｅｎＪＴ：ＦｃＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｏｆＨｕｍａｎＩｇＧ１ｆｏｒＡｌｔｅｒｅｄＢｉｎｄｉｎｇｔｏｔｈｅＮｅｏｎａｔａｌＦｃＲｅｃｅｐｔｏｒＡｆｆｅｃｔｓＦｃＥｆｆｅｃｔｏｒＦｕｎｃｔｉｏｎｓ．２０１５，１９４：５４９７－５５０８）又はフローサイトメトリ（ＰｅｒｅｚＬＧ，ＣｏｓｔａＭＲ，ＴｏｄｄＣＡ，ＨａｙｎｅｓＢＦ，ＭｏｎｔｅｆｉｏｒｉＤＣ：ＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎＧＦｃｒｅｃｅｐｔｏｒｓｂｙｈｕｍａｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓｔｙｐｅ１：ａｓｐｅｃｉｆｉｃｒｏｌｅｆｏｒａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｇａｉｎｓｔｔｈｅｍｅｍｂｒａｎｅ－ｐｒｏｘｉｍａｌｅｘｔｅｒｎａｌｒｅｇｉｏｎｏｆｇｐ４１．ＪＶｉｒｏｌ２００９，８３：７３９７－７４１０；ＰｉｃｃｏｌｉＬ，ＣａｍｐｏＩ，ＦｒｅｇｎｉＣＳ，ＲｏｄｒｉｇｕｅｚＢＭＦ，ＭｉｎｏｌａＡ，ＳａｌｌｕｓｔｏＦ，ＬｕｉｓｅｔｔｉＭ，ＣｏｒｔｉＤ，ＬａｎｚａｖｅｃｃｈｉａＡ：ＮｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｃｌｅａｒａｎｃｅｏｆＧＭ－ＣＳＦｂｙａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎｐｕｌｍｏｎａｒｙａｌｖｅｏｌａｒｐｒｏｔｅｉｎｏｓｉｓ．ＮａｔＣｏｍｍｕｎ２０１５，６：１－９）などの当業者に知られた各種方法によって評価することができる。

一般に、本発明に係る抗体は、グリコシル化され得る。例えば、重鎖のＣＨ２ドメインに結合したＮ結合グリカンは、Ｃ１ｑ及びＦｃＲの結合に影響を及ぼすことがあり、グリコシル化抗体はこれらの受容体に対する親和性が低くなる。したがって、本発明に係る抗体のＦｃ部分のＣＨ２ドメインは、１以上の変異を含むことができ、グリコシル化残基が非グリコシル化残基に置換される。例えば、抗体のグリカンは、投与後にヒトの免疫原性応答を引き起こさない。

更に、本発明に係る抗体は、重鎖のＣＨ２又はＣＨ３ドメインの特定領域に（ランダムな）アミノ酸変異を導入することによって修飾することができ、ＦｃＲに対するそれらの結合親和性及び／又はそれらの血清半減期を、未修飾抗体と比較して変えることができる。係る修飾の例としては、アミノ酸残基２５０、３１４、及び４２８からなる群から選択される重鎖定常領域からの少なくとも１つのアミノ酸の置換が挙げられるが、これらに限定されない。係るＦｃ修飾の更なる例が、参照により本明細書に援用するＳａｘｅｎａＡ，ＷｕＤ．ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＦｃＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ－ＭｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆＩｇＧ－ＡｓｓｏｃｉａｔｅｄＥｆｆｅｃｔｏｒＦｕｎｃｔｉｏｎｓａｎｄＳｅｒｕｍＨａｌｆ－ｌｉｆｅ．ＦｒｏｎｔＩｍｍｕｎｏｌ．２０１６；７：５８０に記載される。いくつかの実施形態では、抗体は、「ＹＴＥ」変異（Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ；ＥＵナンバリング）を含むことができる。いくつかの実施形態では、抗体は、重鎖定常領域（ＥＵナンバリング）において変異Ｍ４２８Ｌ及び／又はＮ４３４Ｓを含むことができる。例えば、抗体は、配列番号１０３で表されるアミノ酸配列又は配列番号１０３と少なくとも７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖定常領域を含むことができ、変異Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓが維持される。

いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１００で表されるアミノ酸配列又は配列番号１００と少なくとも７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖を含むことができ、配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに変異Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓが維持される。

いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１０２で表されるアミノ酸配列又は配列番号１０２と少なくとも７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖を含むことができ、配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに変異Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓが維持される。

本発明の抗体はまた、前記定義された本発明の抗体からの６つのＣＤＲ、及び抗原に対する別の抗体からの１以上のＣＤＲを含むハイブリッド抗体分子を含む。例えば、抗体は、二重特異性であることができる。

変異型抗体も本発明の範囲内に包含される。したがって、本願に記載される配列の変異体もまた、本発明の範囲内に包含される。このような変異体としては、免疫応答中のインビボ又は不死化Ｂ細胞クローンの培養時のインビトロでの体細胞変異によって生成される天然変異体が挙げられる。或いは、変異体は、遺伝暗号の縮退により生じ得る、又は転写若しくは翻訳のエラーにより生じ得る。

本発明の抗体は、精製形態で提供され得る。典型的には、抗体は、他のポリペプチドを実質的に含まない組成物中に存在し、例えば、組成物の９０（重量）％未満、通常は６０％未満、より通常は５０％未満が他のポリペプチドで構成される。

本発明の抗体は、非ヒト（又は異種）宿主、例えば、マウスにおいて免疫原性であり得る。特に、抗体は、非ヒト宿主において免疫原性であるが、ヒト宿主においては免疫原性でないイディオトープを有し得る。特に、ヒトで使用するための本発明の抗体は、マウス、ヤギ、ウサギ、ラット、非霊長類哺乳動物などの宿主から容易に単離することができず、且つ一般にヒト化によってもゼノマウスからも得ることができないものが挙げられる。

核酸
別の態様では、本発明はまた、前記した本発明に係る抗体又はその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチドを含む核酸分子を提供する。

いくつかの実施形態では、抗体又はその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチドは、コドン最適化され得る。

核酸分子は、配列番号３６～３９又は１０６のいずれかで表される核酸配列又は少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するその配列変異体を含む。

本発明はまた、配列番号４０～９９のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む核酸分子を提供する。更に、本発明は、配列番号４０～９９又は配列番号１０６のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む核酸分子も提供する。

いくつかの実施形態では、核酸分子は、
（ｉ）配列番号４０～４５のいずれかに係るポリヌクレオチド及び配列番号４６～５１のいずれか係るポリヌクレオチド；又は、
（ｉｉ）配列番号６４～６６のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号６７～６９のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７０～７２のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７３～７５のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７６～７８のいずれかに係るポリヌクレオチド、及び配列番号７９～８１のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む。

特定の実施形態では、核酸分子は、
（ｉ）配列番号３６、３７、４０～４５、及び１０６のいずれかに係るポリヌクレオチド及び配列番号３８及び４６～５１のいずれかに係るポリヌクレオチドヌクレオチド；又は
（ｉｉ）配列番号６４～６６のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号６７～６９のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７０～７２のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７３～７５のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７６～７８のいずれかに係るポリヌクレオチド、及び配列番号７９～８１のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む。

いくつかの実施形態では、核酸分子は、
（ｉ）配列番号５２～５７のいずれかに係るポリヌクレオチド及び配列番号５８～６３のいずれかに係るポリヌクレオチドヌクレオチド；又は
（ｉｉ）配列番号８２～８４のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号８５～８７のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号８８～９０のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号９１～９３のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号９４～９６のいずれかに係るポリヌクレオチド、及び配列番号９７～９９のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む。

特定の実施形態では、核酸分子は、
（ｉ）配列番号５２～５７のいずれかに係るポリヌクレオチド及び配列番号３９及び５８～６３のいずれかに係るポリヌクレオチドヌクレオチド；又は
（ｉｉ）配列番号８２～８４のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号８５～８７のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号８８～９０のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号９１～９３のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号９４～９６のいずれかに係るポリヌクレオチド、及び配列番号９７～９９のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む。

１以上のポリヌクレオチドは、抗体、具体的には、その２個の可変領域（オプション（ｉ）に記載）又はその６個のＣＤＲ（オプション（ｉｉ）に記載）をコードすることができる。

特定の実施形態では、１以上のポリヌクレオチドは、それらが共に、（ｉ）前記６個のＣＤＲ、（ｉｉ）前記可変領域ＶＨ及びＶＬ、又は、例示抗体ＭＧＵ１０ｖ１、ＭＧＵ１０ｖ２、ＭＧＵ１０ｖ３、ＭＧＵ１０ｖ４、ＭＧＵ１０ｖ５、ＭＧＵ１０ｖ６、ＭＧＵ１０ｖ７、ＭＧＵ１０ｖ８、ＭＧＵ１０ｖ９、又はＭＧＨ２ｖ１のうちのいずれかの軽鎖及び重鎖をコードするように選択することができる。

核酸分子及び／又はポリヌクレオチドの例としては、例えば、組換えポリヌクレオチド、ベクター、オリゴヌクレオチド、ｒＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、又はｔＲＮＡなどのＲＮＡ分子、又はｃＤＮＡなどのＤＮＡ分子が挙げられる。核酸は、抗体の軽鎖及び／又は重鎖をコードすることができる。換言すれば、抗体の軽鎖及び重鎖は、同一の核酸分子によって（例えば、バイシストロン性の様式で）コードされ得る。或いは、抗体の軽鎖及び重鎖は、別々の核酸分子によってコードされ得る。

遺伝暗号の重複性のために、本発明はまた、同じアミノ酸配列をコードする核酸配列の配列変異体も含む。抗体（又は完全な核酸分子）をコードするポリヌクレオチドは、抗体の発現のために最適化することができる。例えば、ヌクレオチド配列のコドン最適化を使用して、抗体産生のための発現系における翻訳効率を改善することができる。更に、核酸分子は、異種要素（即ち、抗体（の重鎖又は軽鎖）のコード配列と同一の核酸分子上に天然には存在しない要素）を含むことができる。例えば、核酸分子は、異種プロモーター、異種エンハンサー、異種ＵＴＲ（例えば、最適な翻訳／発現のための）、異種ポリ－Ａ－テールなどを含むことができる。

核酸分子は、核酸成分を含む分子である。核酸分子という用語は、通常、ＤＮＡ又はＲＮＡ分子を意味する。それは、用語「ポリヌクレオチド」と同義的に使用することができ、即ち、核酸分子は、抗体をコードするポリヌクレオチドからなることができる。或いは、核酸分子はまた、抗体をコードするポリヌクレオチドの他に、更なる要素を含むことができる。典型的には、核酸分子は、糖／リン酸－主鎖のホスホジエステル結合によって互いに共有結合したヌクレオチドモノマーを含む又はからなるポリマーである。用語「核酸分子」はまた、塩基修飾、糖修飾、又は骨格修飾などの修飾核酸分子、例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡ分子を包含する。

一般に、核酸分子は、特定の核酸配列を挿入、欠失、又は変更するように操作することができる。係る操作による変更としては、限定するものではないが、制限部位を導入するための変更、コドン使用を変えるための変更、転写及び／又は翻訳調節配列を追加又は最適化するための変更などが挙げられる。また、核酸を変更して、被コードアミノ酸を変えることもできる。例えば、１以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個など）のアミノ酸の置換、欠失、及び／又は挿入を抗体のアミノ酸配列に導入することが有用であり得る。係る点変異は、エフェクタ機能、抗原結合親和性、翻訳後修飾、免疫原性などを改変することができ、共有結合基（例えば、標識）の結合のためのアミノ酸を導入することができる、又は（例えば、精製目的のための）タグを導入することができる。或いは、核酸配列の変異は、「サイレント」、即ち、遺伝暗号の重複性のためにアミノ酸配列に反映されないことがある。一般に、変異は特定部位に導入することができ、又はランダムに導入してから選択（分子進化など）することもできる。例えば、（例示的な）抗体の軽鎖又は重鎖のいずれかをコードする１以上の核酸を、ランダムに又は定方向に（ｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌｌｙ）変異させて、被コードアミノ酸に各種性質を導入することができる。係る変化は、初期の変化が保持され、他のヌクレオチド位置に新たな変化が導入される反復プロセスの結果であり得る。更に、独立した各工程で達成された変化を組み合わせることができる。

いくつかの実施形態では、抗体又はその抗原結合断片（若しくは（完全な）核酸分子）をコードするポリヌクレオチドは、コドン最適化され得る。当業者は、コドン最適化のための各種ツールを認識しており、例えば、ＪｕＸｉｎＣｈｉｎ，ＢｅｖａｎＫａｉ－ＳｈｅｎｇＣｈｕｎｇ，Ｄｏｎｇ－ＹｕｐＬｅｅ，ＣｏｄｏｎＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎＯｎＬｉｎｅ（ＣＯＯＬ）：ａｗｅｂ－ｂａｓｅｄｍｕｌｔｉ－ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｐｌａｔｆｏｒｍｆｏｒｓｙｎｔｈｅｔｉｃｇｅｎｅｄｅｓｉｇｎ，Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，Ｖｏｌｕｍｅ３０，Ｉｓｓｕｅ１５，１Ａｕｇｕｓｔ２０１４，Ｐａｇｅｓ２２１０－２２１２；又はＧｒｏｔｅＡ，ＨｉｌｌｅｒＫ，ＳｃｈｅｅｒＭ，ＭｕｎｃｈＲ，ＮｏｒｔｅｍａｎｎＢ，ＨｅｍｐｅｌＤＣ，ＪａｈｎＤ，ＪＣａｔ：ａｎｏｖｅｌｔｏｏｌｔｏａｄａｐｔｃｏｄｏｎｕｓａｇｅｏｆａｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｔｏｉｔｓｐｏｔｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｈｏｓｔ．ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．２００５Ｊｕｌ１；３３（ＷｅｂＳｅｒｖｅｒｉｓｓｕｅ）：Ｗ５２６－３１；又は、例えば、Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ’ｓＯｐｔｉｍｕｍＧｅｎｅ^ＴＭａｌｇｏｒｉｔｈｍ（米国特許出願公開第２０１１／００８１７０８Ａ１号明細書に記載）に記載されているツールが挙げられる。

例えば、本発明の核酸分子は、配列番号３６～３９のいずれかに記載の核酸配列又は、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するその配列変異体を含むことができる。

本発明はまた、第１及び第２の核酸分子の組合せを提供し、第１の核酸分子は、本発明の抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、第２の核酸分子は、同一の抗体又は同一の抗原結合断片の対応する軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。本発明の核酸分子の（一般的な）特徴に関する前記記載が、同様に、前記組合せの第１及び第２の核酸分子に適用される。したがって、抗体又はその抗原結合断片の重鎖及び／又は軽鎖をコードするポリヌクレオチドの一方又は両方は、コドン最適化される。例えば、前記組合せは、配列番号３６～３９又は１０６のいずれかで表される核酸配列又は、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有するその配列変異体を含むことができる。

本発明はまた、第１及び第２の核酸分子の組合せを提供し、
－前記第１の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号４０～４５のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｂ）配列番号６４～６６のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号６７～６９のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号７０～７２のいずれかに係るヌクレオチド配列を含み、
－前記第２の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ｃ）配列番号４６～５１のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｄ）配列番号７３～７５のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号７６～７８のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号７９～８１のいずれかに係るヌクレオチド配列を含む。

この場合においても、本発明の核酸分子の（一般的な）特徴に関する前記記載が、同様に、前記組合せの第１及び第２の核酸分子に適用される。

本発明はまた、第１及び第２の核酸分子の組合せを提供し、
－前記第１の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号３６、３７、４０～４５、及び１０６のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｂ）配列番号６４～６６のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号６７～６９のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号７０～７２のいずれかに係るヌクレオチド配列を含み、
－前記第２の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ｃ）配列番号３８及び４６～５１のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｄ）配列番号７３～７５のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号７６～７８のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号７９～８１のいずれかに係るヌクレオチド配列を含む。

本発明はまた、第１及び第２の核酸分子の組合せを提供し、
－前記第１の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号５２～５７のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｂ）配列番号８２～８４のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号８５～８７のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号８８～９０のいずれかに係るヌクレオチド配列を含み、
－前記第２の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ｃ）配列番号５８～６３のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｄ）配列番号９１～９３のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号９４～９６のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号９７～９９のいずれかに係るヌクレオチド配列を含む。

本発明はまた、第１及び第２の核酸分子の組合せを提供し、
－前記第１の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号５２～５７のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｂ）配列番号８２～８４のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号８５～８７のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号８８～９０のいずれかに係るヌクレオチド配列を含み、
－前記第２の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ｃ）配列番号３９及び５８～６３のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｄ）配列番号９１～９３のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号９４～９６のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号９７～９９のいずれかに係るヌクレオチド配列を含む。

特に、前記第１及び第２の核酸分子は、それらが共に、（ｉ）前記６個のＣＤＲ、（ｉｉ）前記可変領域ＶＨ及びＶＬ、又は、例示抗体ＭＧＵ１０ｖ１、ＭＧＵ１０ｖ２、ＭＧＵ１０ｖ３、ＭＧＵ１０ｖ４、ＭＧＵ１０ｖ５、ＭＧＵ１０ｖ６、ＭＧＵ１０ｖ７、ＭＧＵ１０ｖ８、ＭＧＵ１０ｖ９、又はＭＧＨ２ｖ１のうちのいずれかの軽鎖及び重鎖をコードするように選択することができる。

配列番号４０～９９及び配列番号１０６の核酸配列は、抗体発現のためにコドン最適化される。

ベクター
本発明に係る核酸分子を含むベクター、例えば、発現ベクターが、更に、本発明の範囲内に含まれる。通常、ベクターは、前記核酸分子を含む。

本発明はまた、第１及び第２のベクターの組合せを提供し、前記第１のベクターは、（核酸分子の組合せにおいて）前記した第１の核酸分子を含み、前記第２のベクターは、（核酸分子の組合せにおいて）前記した第２の核酸分子を含み、特に、前記第１及び第２の核酸分子が、前記した核酸分子の同一の（実施形態の）組合せから選択される。より具体的には、前記第１及び第２の核酸分子は、それらが共に、（ｉ）前記６個のＣＤＲ、（ｉｉ）前記可変領域ＶＨ及びＶＬ、又は、例示抗体ＭＧＵ１０ｖ１、ＭＧＵ１０ｖ２、ＭＧＵ１０ｖ３、ＭＧＵ１０ｖ４、ＭＧＵ１０ｖ５、ＭＧＵ１０ｖ６、ＭＧＵ１０ｖ７、ＭＧＵ１０ｖ８、ＭＧＵ１０ｖ９、又はＭＧＨ２ｖ１のうちのいずれかの軽鎖及び重鎖をコードするように選択することができる。

ベクターは通常、組換え核酸分子、即ち、天然には存在しない核酸分子である。したがって、ベクターは、異種要素（即ち、本質的に異なる起源の配列要素）を含み得る。例えば、ベクターは、マルチクローニング部位、異種プロモーター、異種エンハンサー、異種選択マーカー（前記ベクターを含まない細胞と比較して、前記ベクターを含む細胞を同定するため）などを含み得る。本発明の文脈におけるベクターは、所望の核酸配列を組み入れる又は組み込むのに好適である。係るベクターは、ストレージベクター、発現ベクター、クローニングベクター、トランスファーベクターなどであることができる。ストレージベクターは、核酸分子の便利なストレージを可能にするベクターである。したがって、ベクターは、例えば、本発明に係る所望の抗体（の重鎖及び／又は軽鎖）に対応する配列を含み得る。発現ベクターは、ＲＮＡ、例えば、ｍＲＮＡ、又はペプチド、ポリペプチド、若しくはタンパク質などの発現産物の産生に使用することができる。例えば、発現ベクターは、（異種）プロモーター配列などの、ベクターの配列の一続きの転写に必要な配列を含み得る。クローニングベクターは、典型的には、核酸配列をベクターに組み込むために使することができるクローニング部位を含むベクターである。クローニングベクターは、例えば、プラスミドベクター又はバクテリオファージベクターであることができる。トランスファーベクターは、核酸分子を細胞又は生物に移入するのに好適なベクター、例えばウイルスベクターであることができる。本発明の文脈におけるベクターは、例えば、ＲＮＡベクター又はＤＮＡベクターであることができる。例えば、本願の意味におけるベクターは、クローニング部位、抗生物質耐性因子などの選択マーカー、及び複製起点などのベクターの増殖に好適な配列を含む。本願の文脈におけるベクターは、プラスミドベクターであることができる。

細胞
更なる態様では、本発明はまた、本発明に係る抗体を発現する、及び／又は本発明に係るベクター（又はベクターの組合せ）を含む細胞を提供する。

係る細胞の例としては、真核細胞、例えば、酵母細胞、動物細胞、又は植物細胞が含まれるが、これらに限定されない。係る細胞の他の例としては、原核細胞、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、細胞は、哺乳動物細胞株などの哺乳動物細胞である。例としては、ヒト細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞、ＮＳ０細胞、ヒト肝細胞、骨髄腫細胞、又はハイブリドーマ細胞が挙げられる。

細胞は、本発明に係るベクター、例えば発現ベクターでトランスフェクトすることができる。用語「トランスフェクション」は、ＤＮＡ又はＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ）分子などの核酸分子の、細胞への導入、例えば、真核細胞又は原核細胞への導入を意味する。本発明の文脈において、用語「トランスフェクション」は、哺乳動物細胞などの細胞に核酸分子を導入するための当業者に知られた任意の方法を包含する。係る方法は、例えば、エレクトロポレーション、リポフェクション（例えば、カチオン性脂質及び／又はリポソームに基づく）、リン酸カルシウム沈殿、ナノ粒子ベースのトランスフェクション、ウイルスベースのトランスフェクション、又はＤＥＡＥ－デキストラン又はポリエチレンイミンなどのカチオン性ポリマーに基づくトランスフェクションを包含する。いくつかの実施形態では、導入は、非ウイルス性である。

更に、本発明の細胞は、例えば、本発明による抗体を発現させるために、本発明に係るベクターで安定的又は一過性にトランスフェクトすることができる。いくつかの実施形態では、細胞は、本発明に係る抗体をコードする本発明に係るベクターで安定的にトランスフェクトされる。他の実施形態では、細胞は、本発明に係る抗体をコードする本発明に係るベクターで一過性にトランスフェクトされる。

したがって、本発明はまた、本発明の抗体又はその抗原結合断片を異種発現する組換え宿主細胞を提供する。例えば、細胞は、抗体とは別の種のものであることができる（例えば、ヒト抗体を発現するＣＨＯ細胞）。いくつかの実施形態では、細胞の細胞タイプは、天然には（係る）抗体を発現しない。更に、宿主細胞は、それらの天然状態では存在しない抗体に翻訳後修飾（ＰＴＭ；例えば、グリコシル化）を付与することができる。係るＰＴＭは、機能的な違いをもたらすことができる（例えば、免疫原性の低下）。したがって、本発明の抗体又はその抗原結合断片は、天然に産生された抗体（例えば、ヒトにおける免疫応答の抗体）とは異なる翻訳後修飾を有し得る。

抗体の産生
本発明に係る抗体は、当技術分野において公知の任意の方法によって作製することができる。例えば、ハイブリドーマ技術を使用してモノクローナル抗体を作製するための一般的な方法論は、周知である（Ｋｏｈｌｅｒ，Ｇ．ａｎｄＭｉｌｓｔｅｉｎ，Ｃ，．１９７５；Ｋｏｚｂａｒｅｔａｌ．１９８３）。いくつかの実施形態では、国際公開第２００４／０７６６７７号に記載の代替ＥＢＶ不死化方法が用いられる。

いくつかの実施形態では、参照により本明細書に援用する国際公開第２００４／０７６６７７号に記載の方法が用いられる。この方法では、本発明の抗体を産生するＢ細胞を、ＥＢＶ及びポリクローナルＢ細胞活性化剤で形質転換する。任意で、効率を更に高めるために、細胞の成長及び分化の更なる刺激剤を形質転換工程中に添加してもよい。これら刺激剤は、ＩＬ－２及びＩＬ－１５などのサイトカインであってよい。一態様では、ＩＬ－２を不死化工程中に添加して、不死化効率を更に向上させるが、その使用は必須ではない。次いで、これら方法を用いて産生された不死化Ｂ細胞を、当技術分野において公知の方法及びそれから単離された抗体を用いて培養してよい。

別の例示的な方法は、国際公開第２０１０／０４６７７５号に記載されている。この方法では、プラズマ細胞を限定数又は単一プラズマ細胞としてマイクロウェル培養皿で培養する。プラズマ細胞培養物から抗体を単離することができる。更に、プラズマ細胞培養物からＲＮＡを抽出することができ、当技術分野において公知の方法を使用してＰＣＲを実施することができる。抗体のＶＨ及びＶＬ領域をＲＴ－ＰＣＲ（逆転写酵素ＰＣＲ）によって増幅させ、配列を決定し、発現ベクターにクローニングし、次いで、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞又は他の宿主細胞にトランスフェクトすることができる。発現ベクターへの核酸のクローニング、宿主細胞のトランスフェクション、トランスフェクトされた宿主細胞の培養、及び産生された抗体の単離は、当業者に公知の任意の方法を使用して行うことができる。

抗体は、必要に応じて、濾過、遠心分離、及び様々なクロマトグラフィー法、例えば、ＨＰＬＣ又はアフィニティクロマトグラフィーを用いて更に精製することができる。医薬品グレードの抗体を産生するための技術を含む抗体、例えば、モノクローナル抗体を精製する技術は、当技術分野において周知である。

分子生物学の標準的な技術を用いて、本発明の抗体をコードしているＤＮＡ配列を調製することができる。オリゴヌクレオチド合成技術を用いて所望のＤＮＡ配列を完全に又は部分的に合成することができる。部位特異的変異誘発及びポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術を適宜使用してよい。

任意の好適な宿主細胞／ベクター系を、本発明の抗体分子をコードしているＤＮＡ配列を発現させるために用いることができる。完全抗体分子などの抗体分子を産生させるために、真核生物、例えば哺乳動物の宿主細胞発現系を使用してよい。好適な哺乳動物宿主細胞としては、ＣＨＯ、ＨＥＫ２９３Ｔ、ＰＥＲ．Ｃ６、ＮＳ０、骨髄腫、又はハイブリドーマ細胞が挙げられるが、これらに限定されない。また、原核生物、例えば、細菌宿主細胞発現系は、完全な抗体分子などの抗体分子の産生に使用することができる。好適な細菌宿主細胞としては、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞が挙げられるが、これらに限定されない。

また、本発明は、本発明に係る抗体分子を産生させるプロセスであって、本発明の核酸をコードしているベクターを含む（異種）宿主細胞を、本発明の抗体分子をコードしているＤＮＡからタンパク質を発現させるのに好適な条件下で培養することと、前記抗体分子を単離することとを含むプロセスを提供する。

重鎖及び軽鎖の両方を含む抗体を産生させる場合、第１のベクターが軽鎖ポリペプチドをコードしており、第２のベクターが重鎖ポリペプチドをコードしている２つのベクターを細胞株にトランスフェクトしてよい。或いは、軽鎖及び重鎖のポリペプチドをコードしている配列を含む単一のベクターを使用してもよい。

或いは、本発明に係る抗体は、（ｉ）例えば、本発明に係るベクターを使用することによって、宿主細胞で本発明に係る核酸配列を発現させ、（ｉｉ）発現した抗体産物を単離することによって産生され得る。更に、前記方法は、（ｉｉｉ）単離抗体を精製することを含み得る。形質転換されたＢ細胞及び培養したプラズマ細胞を、所望の特異性又は機能の抗体を産生するものについてスクリーニングしてよい。

スクリーニング工程は、任意のイムノアッセイ、例えば、ＥＬＩＳＡによって、組織若しくは細胞（トランスフェクトされた細胞を含む）を染色することによって、中和アッセイによって、又は所望の特異性若しくは機能を同定するための当技術分野において公知の多数の他の方法のうちの１つによって実施してよい。アッセイでは、１以上の抗原の単純な認識に基づいて選択することもでき、更に所望の機能に基づいて選択して、例えば、単なる抗原結合抗体ではなく中和抗体を選択したり、標的細胞の特徴（例えば、そのシグナル伝達カスケード、形状、成長速度、他の細胞に影響を与える能力、他の細胞又は他の試薬又は条件の変化による影響に対する応答、分化状態など）を変化させることができる抗体を選択したりすることもできる。

次いで、陽性形質転換Ｂ細胞培養物から個々の形質転換Ｂ細胞クローンが産生され得る。陽性細胞の混合物から個々のクローンを分離するためのクローニング工程は、限界希釈、マイクロマニピュレーション、セルソーティングによる単一細胞沈着、又は当技術分野において公知の別の方法を使用して実施することができる。

当技術分野において公知の方法を用いて、培養プラズマ細胞から核酸を単離し、クローニングし、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞又は他の公知の宿主細胞で発現させることができる。

本発明の不死化Ｂ細胞クローン又はトランスフェクトされた宿主細胞は、例えば、モノクローナル抗体源として、対象となるモノクローナル抗体をコードしている核酸（ＤＮＡ又はｍＲＮＡ）源として、研究のためなど、様々な方法で使用することができる。

また、本発明は、本発明に係る抗体を産生する不死化記憶Ｂ細胞又はトランスフェクトされた宿主細胞を含む組成物を提供する。

本発明の不死化Ｂ細胞クローン又は培養プラズマ細胞は、後で組み換え発現させるために抗体遺伝子をクローニングするための核酸源として使用することもできる。例えば、安定性、再現性、培養の容易さなどの理由から、Ｂ細胞又はハイブリドーマから発現させるよりも、組み換え源から発現させる方が医薬目的では一般的であることがある。

したがって、本発明は、また、組み換え細胞を調製する方法であって、（ｉ）対象となる抗体をコードしているＢ細胞クローン又は培養プラズマ細胞から１以上の核酸（例えば、重鎖及び／又は軽鎖ｍＲＮＡ）を得る工程と、（ｉｉ）前記核酸を発現ベクターに挿入する工程と、（ｉｉｉ）（異種）宿主細胞において対象となる抗体を発現させるために、前記ベクターを宿主細胞にトランスフェクトする工程とを含む方法を提供する。

同様に、本発明はまた、組み換え細胞を調製する方法であって、（ｉ）対象となる抗体をコードしているＢ細胞クローン又は培養プラズマ細胞から核酸の配列を決定する工程と、（ｉｉ）工程（ｉ）で得られた配列情報を使用して、宿主細胞において対象となる抗体を発現させるために、前記宿主細胞に挿入するための核酸を調製する工程とを含む方法を提供する。工程（ｉ）と（ｉｉ）との間に、制限酵素部位を導入する、コドンの使用頻度を変更する、及び／又は転写及び／又は翻訳調節配列を最適化するために前記核酸を操作してもよいが、必須ではない。

更に、本発明は、また、トランスフェクトされた宿主細胞を調製する方法であって、対象となる抗体をコードしている１以上の核酸を宿主細胞にトランスフェクトする工程を含み、前記核酸が、本発明の不死化Ｂ細胞クローン又は培養プラズマ細胞に由来する核酸である方法も提供する。したがって、まず核酸を調製し、次いで、それを使用して宿主細胞をトランスフェクトする手順は、異なる場所（例えば、異なる国）で異なる人々によって異なる時点で実施することができる。

次いで、本発明のこれら組み換え細胞を発現及び培養目的のために使用することができる。前記組み換え細胞は、大規模に医薬品を生産するために抗体を発現させるのに特に有用である。また、前記組み換え細胞は、医薬組成物の活性成分として用いることもできる。静置培養、ローラーボトル培養、腹水液、中空繊維型バイオリアクタカートリッジ、モジュラーミニ発酵槽、撹拌槽、微粒子担体培養、セラミックコア灌流などが挙げられるがこれらに限定されない任意の好適な培養技術を使用することができる。

Ｂ細胞又はプラズマ細胞から免疫グロブリン遺伝子を得、配列を決定する方法は、当技術分野において周知である（例えば、ＫｕｂｙＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第４版、２０００年の第４章）。

トランスフェクトされた宿主細胞は、酵母及び動物細胞を含む真核細胞、特に、哺乳動物細胞（例えば、ＣＨＯ細胞、ＮＳ０細胞、ヒト細胞（例えば、ＰＥＲ．Ｃ６又はＨＫＢ－１１細胞）、骨髄腫細胞、又はヒト肝細胞）に加えて、植物細胞であってよい。いくつかの実施形態では、トランスフェクトされた宿主細胞は、哺乳動物細胞、例えばヒト細胞である。いくつかの実施形態では、発現宿主は、特にそれ自体ヒトにおいて免疫原性ではない炭水化物構造で本発明の抗体をグリコシル化することができる。いくつかの実施形態では、トランスフェクトされた宿主細胞は、無血清培地において増殖することができる。更なる実施形態では、トランスフェクトされた宿主細胞は、動物由来の生成物が存在しなくても培養物中で増殖することができる。また、トランスフェクトされた宿主細胞を培養して、細胞株を得ることもできる。

また、本発明は、対象となる抗体をコードしている１以上の核酸分子（例えば、重鎖及び軽鎖遺伝子）を調製する方法であって、（ｉ）不死化Ｂ細胞クローンを調製するか又は本発明に係るプラズマ細胞を培養する工程と、（ｉｉ）対象となる抗体をコードしている核酸を、Ｂ細胞クローン又は培養プラズマ細胞から得る工程とを含む方法を提供する。更に、本発明は、対象となる抗体をコードしている核酸配列を得る方法であって、（ｉ）不死化Ｂ細胞クローンを調製するか又は本発明に係るプラズマ細胞を培養する工程と、（ｉｉ）対象となる抗体をコードしているＢ細胞クローン又は培養プラズマ細胞から得られた核酸の配列を決定する工程とを含む方法を提供する。

本発明は、更に、対象となる抗体をコードしている核酸分子を調製する方法であって、本発明の形質転換Ｂ細胞クローン又は培養プラズマ細胞から得られた核酸を得る工程を含む方法を提供する。したがって、先ずＢ細胞クローン又は培養プラズマ細胞を得、次いで、前記Ｂ細胞クローン又は前記培養プラズマ細胞から核酸を得るための手順は、異なる場所（例えば、異なる国）で異なる人々によって異なる時点で実施することができる。

また、本発明は、本発明に係る（例えば、製薬に使用するための）抗体を調製する方法であって、（ｉ）対象となる抗体を発現する選択されたＢ細胞クローン又は培養プラズマ細胞から１以上の核酸（例えば、重鎖及び軽鎖の遺伝子）を得る及び／又は配列を決定する工程と；（ｉｉ）前記核酸配列を発現ベクターに挿入するか又は前記核酸配列を使用して発現ベクターを調製する工程と；（ｉｉｉ）対象となる抗体を発現することができる宿主細胞にトランスフェクトする工程と；（ｉｖ）トランスフェクトされた宿主細胞を、前記対象となる抗体が発現する条件下で培養又は継代培養する工程と；任意で、（ｖ）前記対象となる抗体を精製する工程とを含む方法を含む。

また、本発明は、トランスフェクトされた宿主細胞集団、例えば、安定的にトランスフェクトされた宿主細胞集団を、対象となる抗体が発現する条件下で培養又は継代培養する工程と；任意で、前記対象となる抗体を精製する工程とを含む、対象となる抗体を調製する方法であって、前記トランスフェクトされた宿主細胞集団が、（ｉ）上記の通り調製したＢ細胞クローン又は培養プラズマ細胞によって産生される、選択された対象となる抗体をコードしている核酸を提供し、（ｉｉ）前記核酸を発現ベクターに挿入し、（ｉｉｉ）前記対象となる抗体を発現することができる宿主細胞に前記ベクターをトランスフェクトし、（ｉｖ）挿入された核酸を含むトランスフェクトされた宿主細胞を培養又は継代培養して、前記対象となる抗体を産生させることによって調製される方法を提供する。したがって、先ず組み換え宿主細胞を調製し、次いで、それを培養して抗体を発現させるための手順は、異なる場所（例えば、異なる国）で異なる人々によって異なる時点で実施することができる。

医薬組成物
本発明はまた、
（ｉ）本発明の抗体又はその抗原結合断片；
（ｉｉ）本発明に係る核酸又は核酸の組合せ；
（ｉｉｉ）本発明に係るベクター又はベクターの組合せ；及び／又は
（ｉｖ）本発明に係る抗体を発現する又は本発明に係るベクターを含む細胞、及び任意に、薬学的に許容される希釈剤又は担体のうちの１以上を含む医薬組成物を提供する。

換言すれば、本発明はまた、本発明に係る抗体、本発明に係る核酸、本発明に係るベクター、及び／又は本発明に係る細胞を含む医薬組成物を提供する。

医薬組成物は、任意に、薬学的に許容し得る担体、希釈剤、及び／又は賦形剤を含有していてもよい。担体又は賦形剤は投与を容易にすることができるが、それ自体が、組成物を摂取する個体にとって有害な抗体の産生を誘導してはならない。また、毒性であってもならない。好適な担体は、タンパク質、ポリペプチド、リポソーム、多糖類、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、高分子アミノ酸、アミノ酸コポリマー、及び不活性ウイルス粒子などの、大きく、ゆっくりと代謝される巨大分子であってよい。いくつかの実施形態では、本発明に係る医薬組成物中の薬学的に許容し得る担体、希釈剤、及び／又は賦形剤は、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ感染症及び／又はマラリアに関して活性成分ではない。

薬学的に許容し得る塩、例えば、鉱酸塩（例えば、塩酸塩、臭化水素塩、リン酸塩、及び硫酸塩）又は有機酸の塩（例えば、酢酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩、及び安息香酸塩）を用いてもよい。

医薬組成物中の薬学的に許容し得る担体は、水、生理食塩水、グリセロール、及びエタノールなどの液体を更に含有していてもよい。更に、湿潤剤若しくは乳化剤などの補助物質、又はｐＨ緩衝物質がかかる組成物中に存在していてもよい。かかる担体によって、対象に服用させるために、医薬組成物を錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、及び懸濁剤として製剤化することができるようになる。

本発明の医薬組成物は、様々な形態で調製することができる。例えば、前記組成物は、液体溶液又は懸濁液のいずれかとして、注射液として調製してよい。注射する前に液体ビヒクルの溶液又は懸濁液にするのに好適な固体形態を調製してもよい（例えば、保存剤を含有する滅菌水で再構成するための、Ｓｙｎａｇｉｓ（商標）及びＨｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）と同様の凍結乾燥組成物）。前記組成物は、例えば軟膏剤、クリーム剤、又は粉剤として、局所投与用に調製してもよい。前記組成物は、例えば錠剤若しくはカプセル剤として、噴霧剤として、又はシロップ剤として（任意で、風味付けされる）経口投与用に調製してもよい。前記組成物は、例えば微粉末又はスプレーを用いる吸入器として、肺内投与用に調製してもよい。前記組成物は、坐剤又は膣坐剤として調製してもよい。前記組成物は、例えば点眼剤として、鼻腔内、耳内、又は眼内投与用に調製してもよい。前記組成物は、対象に投与する直前に複合組成物が再構成されるように設計されたキット形態であってもよい。例えば、凍結乾燥した抗体を、滅菌水又は滅菌バッファと共にキット形態で提供してよい。

いくつかの実施形態では、組成物中の（唯一の）有効成分は、本発明に係る抗体である。抗体は、胃腸管における分解を受けやすい場合がある。したがって、組成物が胃腸管を使用する経路によって投与されるとき、組成物は、抗体を分解から保護するが、胃腸管から吸収されると抗体を放出する剤を含むことができる。

薬学的に許容し得る担体についての詳細な検討は、Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，ＩＳＢＮ：０６８３３０６４７２から入手可能である。

本発明の医薬組成物は、一般に、５．５～８．５のｐＨを有し、幾つかの実施形態では、これは、６～８であり、例えば約７である。ｐＨは、バッファを使用することによって維持することができる。前記組成物は、無菌及び／又はパイロジェンフリーであってよい。前記組成物は、ヒトに対して等張であってよい。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、密封容器で提供される。

いくつかの投与形態で存在する組成物が、本発明の範囲内であり、前記形態としては、例えば、ボーラス注射又は持続点滴などの注射又は点滴による非経口投与に好適な形態が挙げられるが、これらに限定されない。製品が注射又は注入用である場合、油性又は水性のビヒクルの懸濁液、溶液、又はエマルションの形態をとってもよく、懸濁化剤、保存剤、安定剤、及び／又は分散剤などの調合剤を含有していてもよい。或いは、抗体は、適切な無菌液体を用いて使用前に再構成するために乾燥形態であってもよい。

ビヒクルは、典型的には、薬学的活性化合物などの化合物、特に、本発明に係る抗体を保存、輸送、及び投与するのに好適な物質であると理解される。例えば、ビヒクルは、薬学的活性化合物、特に、本発明に係る抗体を保存、輸送、及び／又は投与するのに好適な生理学的に許容し得る液体であってよい。製剤化すると、本発明の組成物を対象に直接投与することができる。いくつかの実施形態では、前記組成物は、哺乳動物、例えば、ヒト対象への投与に適応する。

本発明の医薬組成物は、経口、静脈内、筋肉内、動脈内、髄内、腹腔内、髄腔内、脳室内、経皮、経皮、局所、皮下、鼻腔内、経腸、舌下、膣内、又は直腸内経路が挙げられるがこれらに限定されない、任意の数の経路によって投与することができる。また、皮下噴射器を用いて、本発明の医薬組成物を投与してもよい。任意に、医薬組成物は、例えば錠剤、カプセル剤などとして経口投与用に、局所投与用に、又は例えば液体溶液又は懸濁液などの注射剤として調製することができる。いくつかの実施形態では、前記医薬組成物は、注射剤である。注射前に液体ビヒクルの溶液又は懸濁液にするのに好適な固体形態も包含され、例えば、医薬組成物は凍結乾燥形態であってもよい。

静脈内、皮膚、若しくは皮下への注射、又は罹患部位への注射などの注射については、活性成分は、パイロジェンフリーであり且つ好適なｐＨ、等張性、及び安定性を有する非経口的に許容し得る水溶液の形態であることができる。当業者は、例えば、生食注射、リンゲル液、乳酸加リンゲル液などの等張ビヒクルを用いて好適な溶液をうまく調製することができる。必要に応じて、保存剤、安定剤、緩衝剤、抗酸化剤、及び／又は他の添加剤が含まれていてもよい。個体に投与されるのが本発明に係る抗体であろうと、ペプチドであろうと、核酸分子であろうと、他の薬学的に有用な化合物であろうと、個体に対して効果を示すのに十分な「予防的に有効な量」又は「治療的に有効な量」（場合による）が、通常投与される。実際に投与される量、並びに投与の速度及び時間推移は、処置されるものの性質及び重篤度に依存する。注射の場合、本発明に係る医薬組成物を、例えばプレフィルドシリンジで提供してよい。

前記定義された本発明の医薬組成物は、カプセル剤、錠剤、水性懸濁剤、又は液剤が挙げられるがこれらに限定されない任意の経口的に許容し得る剤形で経口投与してよい。経口使用するための錠剤の場合、一般に使用される担体としては、ラクトース及びコーンスターチが挙げられる。ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤も典型的に添加される。カプセル形態で経口投与する場合、有用な希釈剤としては、ラクトース及び乾燥コーンスターチが挙げられる。経口使用のために水性懸濁剤が必要な場合、活性成分、即ち、上に定義された本発明のトランスポータ－カーゴコンジュゲート分子を乳化剤及び懸濁化剤と合わせる。必要に応じて、特定の甘味剤、着香剤、又は着色剤を添加してもよい。

また、特に、治療の標的が、例えばアクセス可能な上皮組織を含む、局所適用によって容易にアクセス可能な領域又は器官を含むとき、本発明の医薬組成物を局所的に投与してもよい。これら領域又は器官のそれぞれに好適な局所製剤が容易に調製される。局所適用の場合、本発明の医薬組成物は、１以上の担体に懸濁又は溶解している本発明の医薬組成物、特に、上に定義されたその成分を含有する好適な軟膏剤に製剤化してよい。局所投与用の担体としては、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス及び水が挙げられるが、これらに限定されない。或いは、本発明の医薬組成物は、好適なローション又はクリームに製剤化することもできる。本発明において、好適な担体としては、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２－オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、及び水が挙げられるが、これらに限定されない。

投薬治療は、単回投与スケジュール又は複数回投与スケジュールであり得る。特に、医薬組成物は、単回用量製品として提供することができる。いくつかの実施形態では、医薬組成物中の抗体の量は、特に単回投与の製品として提供される場合、２００ｍｇを超えず、例えば、１００ｍｇ又は５０ｍｇを超えない。

単回投与の場合、例えば、１日に１回、１週間に１回、１月に１回などの場合、本発明に係る医薬組成物中の抗体の量は、１ｇ又は５００ｍｇを超えてはならない。いくつかの実施形態では、単回投与の場合、本発明に係る医薬組成物中の抗体の量は、２００ｍｇ又は１００ｍｇを超えてはならない。例えば、単回投与の場合、本発明に係る医薬組成物中の抗体の量は、５０ｍｇを超えてはならない。

医薬組成物は、典型的には、本発明の１以上の抗体を「有効」量、即ち、所望の疾患若しくは状態を治療、寛解、軽減、低減、若しくは予防するか、又は検出可能な治療効果を呈するのに十分な量含む。治療効果は、病原性効力又は身体症状を低減又は軽減することも含む。任意の特定の対象についての正確な有効量は、前記対象の身長、体重、及び健康、状態の性質及び程度、並びに投与のために選択された治療法又は治療法の組合せに依存する。所与の状況についての有効量は、ルーチンな実験によって決定され、臨床医の判断の範囲内である。本発明の目的のために、前記有効量は、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．００７５ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ又は約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、本発明の抗体の有効量（例えば、医薬組成物中の抗体の量）は、一般に、投与される個体の体重（例えば、ｋｇ）に関連して、約０．０２ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇである。

更に、本発明に係る医薬組成物は、更なる抗体、又は抗体ではない成分であってもよい追加の活性成分を含むことができる。したがって、本発明に係る医薬組成物は、１以上の追加の活性成分を含むことができる。

本発明に係る抗体は、追加の活性成分と同じ医薬組成物中に存在していてもよく、或いは、本発明に係る抗体は、第１の医薬組成物に含まれることができ、追加の活性成分は、第１の医薬組成物とは異なる第２の医薬組成物に含まれる。したがって、１超の追加の活性成分が企図される場合、各追加の活性成分と本発明に係る抗体は、異なる医薬組成物に含まれてもよい。かかる異なる医薬組成物は、合わせて／同時に、又は別々の時点で若しくは別々の箇所（例えば、身体の別々の部分）に投与してよい。

本発明に係る抗体と追加の活性成分とは、相加的治療効果、例えば、相乗的治療効果を提供することができる。用語「相乗作用」とは、２以上の活性剤の併用効果が、各活性剤の個々の効果の合計よりも大きいことを説明するために用いられる。したがって、２以上の剤の併用効果によって活性又はプロセスの「相乗的阻害」が生じる場合、前記活性又はプロセスの阻害が、各活性剤の阻害効果の合計よりも大きいことを意図する。用語「相乗的治療効果」とは、（多数のパラメータのうちのいずれかによって測定される）治療効果が、それぞれの個々の治療で観察される個々の治療効果の合計よりも大きい、２以上の治療の組合せで観察される治療効果を意味する。

いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、本発明の抗体を含んでいてよく、前記抗体は、前記組成物中の全タンパク質の少なくとも５０重量％（例えば、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上）を構成し得る。本発明の組成物では、抗体は、精製形態であることができる。

また、本発明は、医薬組成物を調製する方法であって、（ｉ）本発明の抗体を調製する工程と、（ｉｉ）精製抗体を１以上の薬学的に許容し得る担体と混合する工程とを含む方法を提供する。

他の実施形態では、医薬組成物を調製する方法は、抗体を１以上の薬学的に許容し得る担体と混合する工程を含み、前記抗体は、本発明の形質転換Ｂ細胞又は培養プラズマ細胞から得られたモノクローナル抗体である。

治療目的のために抗体又はＢ細胞を送達する代りに、Ｂ細胞由来の目的のモノクローナル抗体をコードしている核酸（典型的には、ＤＮＡ）又は培養したプラズマ細胞を対象に送達することもでき、その結果、前記核酸は、対象においてインサイチュで発現して所望の治療効果を提供することができる。好適な遺伝子療法及び核酸送達ベクターは、当技術分野において公知である。

医薬組成物は、特に複数回投与フォーマットにパッケージ化されている場合、抗微生物剤を含んでいてよい。前記医薬組成物は、洗浄剤、例えばＴｗｅｅｎ８０などのＴｗｅｅｎ（ポリソルベート）を含んでいてよい。洗浄剤は、一般に、低濃度、例えば、０．０１％未満で存在する。また、組成物は、等張にするためにナトリウム塩（例えば、塩化ナトリウム）を含んでいてもよい。例えば、１０±２ｍｇ／ｍＬのＮａＣｌ濃度が典型的である。

更に、医薬組成物は、特に、凍結乾燥される場合又は凍結乾燥物質から再構成された物質を含む場合、例えば、約１５ｍｇ／ｍＬ～約３０ｍｇ／ｍＬ（例えば、２５ｍｇ／ｍＬ）の糖アルコール（例えば、マンニトール）又は二糖（例えば、スクロース又はトレハロース）を含んでいてよい。凍結乾燥用組成物のｐＨは、凍結乾燥前に５～８、又は５．５～７、又は約６．１に調整してよい。

本発明の組成物はまた、１以上の免疫調節剤を含むことができる。いくつかの実施形態では、免疫調節剤の１以上は、アジュバントを含む。

医学的処置及び使用
更なる態様では、本発明は、マラリアの予防及び／又は治療、又は（ｉｉ）マラリアの診断における、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片、本発明に係る核酸分子（又は核酸分子の組合せ）、本発明に係るベクター（又は、ベクターの組合せ）、本発明に係る細胞、又は本発明に係る医薬組成物の使用を提供する。したがって、本発明はまた、マラリアを低減する、又はＰ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ感染症のリスクを低下させる方法を提供し、それを必要とする対象に、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片、本発明に係る核酸分子（又は核酸分子の組合せ）、本発明に係るベクター（又は、ベクターの組合せ）、本発明に係る細胞、又は本発明に係る医薬組成物の治療有効量を投与することを含む。更に、本発明はまた、マラリアの予防、処置、又は軽減のための医薬の製造における、本発明に係る抗体又はその抗原結合断片、本発明に係る核酸分子（又は核酸分子の組合せ）、本発明に係るベクター（又は、ベクターの組合せ）、本発明に係る細胞、又は本発明に係る医薬組成物の使用を提供する。

診断の方法は、抗体をサンプルと接触させることを含むことができる。係るサンプルは、対象から単離することができ、例えば、鼻腔、洞腔、唾液腺、肺、肝臓、膵臓、腎臓、耳、眼、胎盤、消化管、心臓、卵巣、下垂体、副腎、甲状腺、脳、皮膚、又は血漿や血清などの血液から採取した単離組織サンプルであることができる。診断の方法はまた、特に抗体とサンプルとの接触後の、抗原／抗体複合体の検出を含むことができる。係る検出工程は、通常、ベンチで、即ち、ヒト又は動物の体に接触することなしに行われる。検出方法の例は、当業者に周知であり、例えば、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）が挙げられる。

マラリアの予防とは、特に、対象がマラリアと診断されなかった（診断が行われなかったか、診断結果が陰性であった）、及び／又は対象がマラリアの症状を呈さない予防的設定を意味する。対照的に、治療的設定では、対象は通常、マラリアと診断される、及び／又はマラリアの症状を呈している。なお、マラリアの「処置」及び「治療」／「治療的」という用語は、マラリア及び／又は関連する症状の（完全な）治癒、及び軽減／低減を含む。

以下、添付図面の簡単な説明をする。図面は、本発明をより詳細に説明することが意図されている。しかし、それらは本発明の主題を何ら限定することを意図するものではない。

図１は、実施例３に関し、対照抗体（Ａ）並びに抗体ＭＧＵ１０（Ｂ）、ＭＧＵ１０ｖ２（Ｃ）、及びＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳ（Ｄ）についてのスポロゾイト浸潤／成熟アッセイの結果を示し、各抗体について５種の希釈物を試験した。図２は、実施例４に関し、対照抗体（Ａ）並びに抗体ＭＧＵ１０（Ｂ）及びＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳ（Ｃ）についてのスポロゾイト滑走アッセイの結果を示し、各抗体について５種の希釈物を試験した。図３は、実施例５に関し、対照抗体（Ａ）並びに抗体ＭＧＵ１０（Ｂ）及びＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳ（Ｃ）についてのスポロゾイトトラバーサルアッセイの結果を示し、各抗体について５種の希釈物を試験した。図４は、実施例６に関し、示されるように２つの異なるバッファ中における４０℃での抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳ（上のパネル）とＭＧＵ１０＿ＬＳ（下のパネル）の二量体化（二量体）と凝集（ＨＭＷ）を示す。図５は、実施例７に関し、接種試験においてＭＧＵ１０抗体によって付与されたインビボでの保護の結果を、生物発光（Ａ）及び阻害パーセント（Ｂ）で示す。図６は、実施例８に関し、接種試験においてＭＧＨ２抗体によって付与されたインビボでの保護の結果を、生物発光（Ａ）及び阻害パーセント（Ｂ）で示す。図７は、実施例９に関し、ペプチドＮＡＮＰ（Ａ）及びＮＰＤＰ１９（Ｂ）に対するＭＧＵ１０ｖ２及びＭＧＵ１０ｖ８の結合を示す。

特に定義しない限り、本明細書で使用する全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する分野の当業者に一般に理解されている意味と同じ意味を有する。本明細書に記載するものと類似又は等価な方法及び材料を本発明の実施又は試験で用いることができるが、好適な方法及び材料を以下に記載する。本明細書に記載する全ての刊行物、特許出願、特許、及び他の参照文献は、その全体が参照によって援用される。矛盾する場合、定義を含む本明細書が優先する。更に、材料、方法、及び実施例は、単なる例示であり、限定を意図するものではない。

実施例１：抗体ＭＧＵ１０及びＭＧＨ２の変異体の設計
近年、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質（ＣＳＰ）に特異的な非常に強力な抗マラリア抗体が報告された（ＴａｎＪ，ＳａｃｋＢＫ，ＯｙｅｎＤ，ｅｔａｌ．Ａｐｕｂｌｉｃａｎｔｉｂｏｄｙｌｉｎｅａｇｅｔｈａｔｐｏｔｅｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｓｍａｌａｒｉａｉｎｆｅｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｄｕａｌｂｉｎｄｉｎｇｔｏｔｈｅｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎ．ＮａｔＭｅｄ．２０１８；２４（４）：４０１－４０７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｍ．４５１３）。この研究で記載されている最も強力な二重特異性抗体は、抗体「ＭＧＵ１０」及び「ＭＧＨ２」を含む。

これに基づいて、本発明者らは、前記参照抗体の重鎖及び／又は軽鎖にアミノ酸変異を有する、ＭＧＵ１０（配列番号１～８）及びＭＧＨ２（配列番号１７～２７）の以下の変異体を設計した。

１．ＭＧＵ１０変異体１（ＭＧＵ１０ｖ１）：重鎖可変領域（ＶＨ；配列番号１１）のフレームワーク領域（ＦＲ）がＭＧＵ１０と異なる。

２．ＭＧＵ１０変異体２（ＭＧＵ１０ｖ２）：重鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲＨ３：配列番号１２；ＶＨ：配列番号１３）がＭＧＵ１０と異なる。

３．ＭＧＵ１０変異体３（ＭＧＵ１０ｖ３）：軽鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲＬ３：配列番号１４；軽鎖可変領域（ＶＬ）：配列番号１５）がＭＧＵ１０と異なる。

４．ＭＧＵ１０変異体４（ＭＧＵ１０ｖ４）：ＭＧＵ１０ｖ１とＭＧＵ１０ｖ２との組合せであるため、重鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲＨ３；配列番号１２）及び重鎖ＦＲ（ＶＨ；配列番号１６）がＭＧＵ１０と異なる。

５．ＭＧＵ１０変異体５（ＭＧＵ１０ｖ５）：ＭＧＵ１０ｖ１とＭＧＵ１０ｖ３との組合せ（ＭＧＵ１０ｖ１のＶＨとＭＧＵ１０ｖ３のＶＬとを含む）であるため、重鎖ＦＲ（ＶＨ；配列番号１１）及びＣＤＲＬ３（ＣＤＲＬ３：配列番号１４；ＶＬ：配列番号１５）がＭＧＵ１０と異なる。

６．ＭＧＵ１０変異体６（ＭＧＵ１０ｖ６）：ＭＧＵ１０ｖ２とＭＧＵ１０ｖ３との組合せ（ＭＧＵ１０ｖ２のＶＨとＭＧＵ１０ｖ３のＶＬとを含む）であるため、ＣＤＲＨ３（ＣＤＲＨ３：配列番号１２；ＶＨ：配列番号１３）及びＣＤＲＬ３（ＣＤＲＬ３：配列番号１４；ＶＬ：配列番号１５）がＭＧＵ１０と異なる。

７．ＭＧＵ１０変異体７（ＭＧＵ１０ｖ７）：ＭＧＵ１０ｖ１と、ＭＧＵ１０ｖ２と、ＭＧＵ１０ｖ３との組合せ（ＭＧＵ１０ｖ４のＶＨとＭＧＵ１０ｖ３のＶＬとを含む）であるため、ＣＤＲＨ３（配列番号１２）、重鎖ＦＲ（ＶＨ；配列番号１６）、及びＣＤＲＬ３（ＣＤＲＬ３：配列番号１４；ＶＬ：配列番号１５）がＭＧＵ１０と異なる。

８．ＭＧＨ２変異体１（ＭＧＨ２ｖ１）：軽鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲＬ３：配列番号２８；ＶＬ：配列番号２９）がＭＧＨ２と異なる。

ＭＧＵ１０及びＭＧＨ２とそれぞれ比較した変異体のＣＤＲ及びＶＨ／ＶＬ配列の配列番号の概要を表２に示す。

実施例２：本発明の抗体は二重特異性を示す
Ｔａｎｅｔａｌ，２０１８は、ＭＧＵ１０とＭＧＨ２を含む、彼らの研究で最も強力な抗体が、（ｉ）ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域と、（ｉｉ）Ｎ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＣＳＰのＮ末端領域のエピトープを同時に標的とすることを示した（ＴａｎＪ，ＳａｃｋＢＫ，ＯｙｅｎＤ，ｅｔａｌ．Ａｐｕｂｌｉｃａｎｔｉｂｏｄｙｌｉｎｅａｇｅｔｈａｔｐｏｔｅｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｓｍａｌａｒｉａｉｎｆｅｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｄｕａｌｂｉｎｄｉｎｇｔｏｔｈｅｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎ．ＮａｔＭｅｄ．２０１８；２４（４）：４０１－４０７．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｍ．４５１３）。更に、この研究は、これらの抗体の強力な効果がその二重特異性によるものであり、ＣＳＰエピトープの一方のみを標的とする抗体は通常、効果が低いことを示した。

したがって、本発明の抗体を生成し、Ｔａｎｅｔａｌ，２０１８によって記載されたエピトープの両方、即ち、（ｉ）ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域及び（ｉｉ）Ｎ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＣＳＰのＮ末端領域、に結合する能力について試験した。

この目的のために、抗体ＭＧＵ１０ｖ１、ＭＧＵ１０ｖ２、ＭＧＵ１０ｖ３、及びＭＧＨ２ｖ１を生成した。即ち、抗体を、Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔで合成し、ＩｇＧ１及びカッパ又はラムダ鎖の発現用のベクターにサブクローニングした。重鎖と軽鎖の精製プラスミドを組み合わせて、ポリエチレンイミン（９６ウェルプレートでのマイクロスケールトランスフェクション（６００μｌ））を使用するＥｘｐｉ２９３Ｆ細胞（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）をトランスフェクトするために使用した。トランスフェクトされた細胞を６日目に回収し、遠心分離と濾過によって上清を回収した。

上清に存在する総ＩｇＧを、１０μｇ／ｍｌのヤギ抗ヒトＩｇＧ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ）でコーティングした９６ウェルＭａｘｉＳｏｒｐプレート（Ｎｕｎｃ）を使用して定量した。次いで、プレートを１％ＢＳＡ含有ＰＢＳでブロッキングし、標準としてＣｅｒｔｉｆｉｅｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＭａｔｅｒｉａｌ４７０（ＥＲＭｓ－ＤＡ４７０、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して滴定モノクローナル抗体とインキュベートした。次いで、プレートを洗浄し、１／５００アルカリホスファターゼ（ＡＰ）コンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ）と共にインキュベートした。基質（パラニトロフェニルホスフェート（ｐ－ＮＰＰ）、Ｓｉｇｍａ）を添加し、プレートを４０５ｎｍの波長で読み取って、光学密度（ＯＤ）値を決定した。

（ｉ）ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域及び（ｉｉ）Ｎ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＣＳＰのＮ末端領域に結合する特異的抗体を試験するために、ＥＬＩＳＡプレートを１０μｇ／ｍｌのアビジン（Ｓｉｇｍａ）でコーティングした。プレートを１％ＢＳＡ含有ＰＢＳでブロッキングし、１μｇ／ｍｌのビオチン化ＮＡＮＰ－ペプチド（配列番号３４）又は１μｇ／ｍｌのビオチン化ＮＰＤＰ－ペプチド（配列番号３５）と共にインキュベートした。プレートを洗浄し、滴定モノクローナル抗体と共にインキュベートした後、１／５００のＡＰコンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ）及びｐＮＰＰ基質と共にインキュベートした。ＥＣ５０（ｎｇ／ｍｌ）値は、ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ７ソフトウェアを使用する非線形回帰分析によって試験した全サンプルについて計算した。

結果は、ＭＧＵ１０及びその変異体ＭＧＵ１０ｖ１、ＭＧＵ１０ｖ２、及びＭＧＵ１０ｖ３については表３に、ＭＧＨ２及びその変異体ＭＧＨ２ｖ１については表４に示す。

驚くべきことに、ＭＧＵ１０について試験した変異体がいずれも、両ＣＳＰエピトープに対して高い結合親和性を示す一方で、ＭＧＨ２ｖ１は、ＭＧＨ２と比較して、ＮＡＮＰリピート領域としか高い結合親和性を示さない。

実施例３：スポロゾイトの侵入／成熟アッセイ
変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２を、機能的アッセイにおける更なる特性評価のために選択した。スポロゾイトの侵入／成熟アッセイは、スポロゾイトの感染力に対する抗体の影響を試験するための機能的アッセイである。肝細胞へのスポロゾイトの侵入とそれに続く赤血球外形態への成熟は、マラリア感染の成立に不可欠な工程である。

凍結保存したヒト初代肝細胞をマイクロタイタープレートに播種し、２日間インキュベートした。唾液腺ＰｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍＮＦ５４スポロゾイトを、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍに感染したＡｎ．ｓｔｅｐｈｅｎｓｉ蚊から単離した。各ウェルについて、スポロゾイトを段階希釈した抗体サンプルと３０分間プレインキュベートし、その後、肝細胞に移した。３時間後、侵入していないスポロゾイトを洗い流し、細胞を４日間インキュベートした。細胞を固定し、抗ＨＳＰ７０及びＤＡＰＩで染色した。肝細胞核とＨＳＰ７０陽性型の数を、自動化ハイコンテントイメージングで定量した。

このアッセイでは、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２を親抗体ＭＧＵ１０と比較した。更に、ＭＧＵ１０ｖ２のＦｃ変異体「ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳ」を試験したが、これは、重鎖定常領域（ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳ重鎖のアミノ酸配列：配列番号１００）に変異Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵナンバリング）を含むという点でのみ変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２と異なる。したがって、ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳの可変領域は、ＭＧＵ１０ｖ２の可変領域と同一である。無関係な抗体を対照として使用した。抗体サンプルごとに５つの希釈液を試験し、各希釈液を２連で試験した。３ＳＰ２／Ａｔｏｖａｑｕｏｎｅで処理したスポロゾイトをＭＩＮ対照として使用し、ビヒクルで処理したスポロゾイトをＭＡＸ対照として使用した。

データを、肝細胞核の総数、ＨＳＰ７０陽性型の総数、感染肝細胞の割合（％）として表す。ＩＣ５０値は、最小二乗法を使用する４パラメータ非線形回帰モデルを使用して推定し、最適なフィットを見出した。得られた値（μｇ／ｍｌで表す）を以下の表５に示す。

結果のグラフ表示を図１に示す。対照抗体を除く全ての抗体は、ヒト初代肝細胞における肝臓ステージのシゾントの発生を機能的にブロックした。興味深いことに、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２は親抗体ＭＧＵ１０よりも効果的であり、追加のＦｃ変異体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳが最も効果的であった。

実施例４：スポロゾイト滑走アッセイ
スポロゾイト滑走アッセイは機能的アッセイであり、スポロゾイトの滑走運動性に対する化合物の影響を評価することができる。Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトは、感染性の蚊が刺すことによって脊椎動物の宿主の皮膚に移る。スポロゾイトの運動性は、寄生虫の伝染と脊椎動物の宿主の感染を成功させるための重要な前提条件である。運動性は、阻害可能な最初の寄生メカニズムを構成するので、介入戦略にとって興味深い。

プレートを、抗ＣＳＰｍＡｂ３ＳＰ２でコーティングして、脱落した（ｓｈｅｄ）ＣＳＰ（スポロゾイト周囲タンパク質）を捕捉した。新鮮な唾液腺スポロゾイトを、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍに感染したＡｎ．ｓｔｅｐｈｅｎｓｉ蚊から単離し、段階希釈したサンプル（５希釈液／サンプル）で３０分間プレインキュベートした後、３ＳＰ２でコーティングしたウェルに移した。９０分間後、スポロゾイトを洗い流し、滑走跡を固定し、ビオチン化抗ＣＳＰ抗体、続いてストレプトアビジンＡＦ５５５で染色した。滑走跡は、自動化ハイコンテンツイメージングによって捕捉し、滑走跡の全長を、機械学習アルゴリズムを使用して分析した。

このアッセイでは、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳを親抗体ＭＧＵ１０と比較した。無関係な抗体を対照として使用した。抗体サンプルごとに５つの希釈液を試験し、各希釈液を２連で試験した。３ＳＰ２／Ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎで処理したスポロゾイトをＭＩＮ対照として使用し、ビヒクルで処理したスポロゾイトをＭＡＸ対照として使用した。

総滑走跡は、画像分析によって定量化し、相対的な蛍光カウントとして報告した。ＩＣ５０値は、最小二乗法を使用する４パラメータ非線形回帰モデルを使用して推定し、最適なフィットを見出した。得られた値（μｇ／ｍｌで表す）を以下の表６に示す。

結果のグラフ表示を図２に示す。抗体ＭＧＵ１０及びＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳは、対照抗体ではなく、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍスポロゾイトの滑走運動性を機能的にブロックした。変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳは親抗体ＭＧＵ１０よりも効果的であった。

実施例５：スポロゾイトトラバーサルアッセイ
プラスモジウムのスポロゾイトは脊椎動物の宿主の皮膚に沈着する。スポロゾイトが肝臓に向かって移動すると、一過性の液胞内で宿主細胞に出入りすることができ、これは、トラバーサルとして知られるプロセスである。トラバーサルは、スポロゾイトが細胞障壁を越えて宿主の免疫応答を回避することを可能にし、それによって、脊椎動物の宿主の感染を成功させるための重要な前提条件である。スポロゾイトトラバーサルアッセイは機能的アッセイであり、スポロゾイトの細胞トラバーサルに対する化合物の影響を評価することができる。

ヒト肝癌（ＨＣ－Ｏ４）細胞をマイクロタイタープレートに播種し、ほぼコンフルエンスまで増殖させた。新鮮なＰ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ唾液腺スポロゾイトを、Ａｎ．ｓｔｅｐｈｅｎｓｉ蚊から単離し、希釈したＩｇＧと３０分間プレインキュベートした後、ローダミン－デキストランを添加した。３７℃で１時間インキュベートした後、細胞核をＤＡＰＩで染色した。トラバースした細胞の蛍光レベルは、ハイコンテンツ自動化イメージャを使用して定量化した。

このアッセイでは、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳを親抗体ＭＧＵ１０と比較した。無関係な抗体を対照として使用した。抗体サンプルごとに５つの希釈液を試験し、各希釈液を２連で試験した。３ＳＰ２／ＣｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＤで処理したスポロゾイトをＭＩＮ対照として使用し、ビヒクルで処理したスポロゾイトをＭＡＸ対照として使用した。

データを、アッセイプレートのＭＩＮ及びＭＡＸ対照と比較した％トラバース細胞として表した。ＩＣ５０値は、最小二乗法を使用する４パラメータ非線形回帰モデルを使用して推定し、最適なフィットを見出した。得られた値（μｇ／ｍｌで表す）を以下の表７に示す。

結果のグラフ表示を図３に示す。抗体ＭＧＵ１０及びＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳは、対照抗体ではなく、Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍスポロゾイトのトラバーサルを機能的にブロックしました。変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳは親抗体ＭＧＵ１０よりも効果的であった。

実施例６：抗体の安定性
安定性を試験するために、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳをその親バージョンであるＭＧＵ１０＿ＬＳと比較した。ＭＧＵ１０＿ＬＳは、重鎖定常領域（ＭＧＵ１０＿ＬＳ重鎖のアミノ酸配列：配列番号１０１）に変異Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵナンバリング）を含むという点でのみ親抗体ＭＧＵ１０と異なる。したがって、ＭＧＵ１０＿ＬＳの可変領域はＭＧＵ１０の可変領域と同一である。変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳとその親バージョンであるＭＧＵ１０＿ＬＳを、様々な条件下で熱ストレスに曝露した。

この目的のために、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳ及びその親バージョンであるＭＧＵ１０＿ＬＳを、ｐＨ５．６の酢酸ナトリウム緩衝液中にて４０℃で２週間インキュベートした。凝集体及び二量体（高分子量種及び低分子量種）の形成は、サイズ排除クロマトグラフィーによって評価した。結果を以下の表８に示す。

表８．ＨＭＷＳ：凝集を示す高分子量種。ＬＭＷＳ：二量体形成を示す低分子量種。％モノマーは、二量体化又は凝集していない抗体を示す。

ｍＡｂＭＧＵ１０の安定性と凝集を更に評価するために、親ｍＡｂ及び開発したｍＡｂを、ｐＨが異なる２種類のバッファ中で試験した。異なるバッファ中でのｍＡｂの二量体化と凝集を比較するために、精製時に、ｍＡｂバッチを、５０ｍＭの酢酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ５．５又は２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ６．０にバッファ交換した。サイズ排除クロマトグラフィーを使用して、４０℃で４日間後及び１５日間後のｍＡｂ種の分子量を評価し、サイズ計算には、ＢＥＨ４５０ＳＥＣＰｒｏｔｅｉｎＳｔａｎｄａｒｄＭｉｘ５成分タンパク質混合物（Ｔｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ、ＩｇＧ、ＢＳＡ、Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ、Ｕｒａｃｉｌ）を使用した。

結果を図４に示す。変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳは、親バージョンであるＭＧＵ１０＿ＬＳと比較して、５０ｍＭの酢酸ナトリウム／５０ｍＭのＮａＣｌバッファ（ｐＨ５．５）中で４０℃にて２週間維持したところ、高分子量種の形成がより少なくなった（凝集体がより少なくなった）。したがって、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳは、親抗体と比較して安定性向上を示す。

実施例７：変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２によって付与されたインビボ保護－接種試験
完全長のＰ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍＣＳＰを発現するＰ．ｂｅｒｇｈｅｉキメラ寄生虫に対するインビボでの保護を評価するため、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（１群当たりｎ＝５）に、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳを５４．５μｇ／マウスで、又はその親抗体ＭＧＵ１０＿ＬＳを１００μｇ／マウスでｉ．ｖ．注射した。陰性対照として、無関係な抗体ＡＢ－１２４５（１００μｇ／マウス）を使用した。抗体注射後４８時間で、抗体処置マウスに加え、ナイーブマウスの追加群（ｎ＝５）に、ｉ．ｖ．注射した完全長のＰ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍＣＳＰを発現する２×１０^３のキメラＰ．ｂｅｒｇｈｅｉスポロゾイトを接種した。接種後４２時間で、マウスに１００μｌのＤ－ルシフェリン（３０ｍｇ／ｍＬ）を注射し、イソフルランで麻酔し、ＩＶＩＳスペクトルで画像化して、キメラ寄生虫によって発現される生物発光を測定した。ナイーブ群（１００％感染を表す）と比較した％阻害を計算した。

結果を図５に示す。無関係の対照抗体ＡＢ－１２４５と異なり、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳとその親抗体ＭＧＵ１０＿ＬＳは、それぞれ、８０．７６（ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳ）と６９．６０％阻害（ＭＧＵ１０＿ＬＳ）でインビボでの寄生虫感染を有意に阻害した。したがって、その親抗体であるＭＧＵ１０＿ＬＳと比較して、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳで、より強力な感染阻害が達成された。

実施例８：変異型抗体ＭＧＨ２ｖ１によって付与されたインビボ保護－接種試験
完全長のＰ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍＣＳＰを発現するＰ．ｂｅｒｇｈｅｉキメラ寄生虫に対するインビボでの保護を評価するため、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（１群当たりｎ＝５）に、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳを１００μｇ／マウスで、又はその親抗体ＭＧＵ１０＿ＬＳをｉ．ｖ．注射した。Ｆｃ変異体ＭＧＨ２ｖ１＿ＬＳ及びＭＧＨ２＿ＬＳは、それぞれＭＧＨ２ｖ１及びＭＧＨ２と、Ｆｃ領域における２つの変異のみが異なっており、即ち、それぞれの可変領域は維持されている。即ち、変異型抗体ＭＧＨ２ｖ１＿ＬＳは、重鎖定常領域（ＭＧＨ２ｖ１＿ＬＳ重鎖のアミノ酸配列：配列番号１０２）に変異Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵナンバリング）を含むという点でのみ変異型抗体ＭＧＨ２ｖ１と異なる。したがって、抗体ＭＧＨ２＿ＬＳは、重鎖定常領域（ＭＧＨ２＿ＬＳ重鎖のアミノ酸配列：配列番号１０２）に変異Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付け）を含むという点でのみ抗体ＭＧＨ２とは異なる。変異型抗体ＭＧＨ２ｖ１は軽鎖ＣＤＲ３（ＶＬ）のみが親抗体ＭＧＨ２と異なるので、ＭＧＨ２＿ＬＳとＭＧＨ２ｖ１＿ＬＳの重鎖アミノ酸配列は同一である。

陰性対照として、無関係な抗体ＡＢ－１２４５（１００μｇ／マウス）を使用した。抗体注射後４８時間で、抗体処置マウスに加え、ナイーブマウスの追加群（ｎ＝５）に、実施例７に記載されるように、ｉ．ｖ．注射した完全長のＰ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍＣＳＰを発現する２×１０^３のキメラＰ．ｂｅｒｇｈｅｉスポロゾイトを接種した。接種後４２時間で、マウスに１００μｌのＤ－ルシフェリン（３０ｍｇ／ｍＬ）を注射し、イソフルランで麻酔し、ＩＶＩＳスペクトルで画像化して、キメラ寄生虫によって発現される生物発光を測定した。ナイーブ群（１００％感染を表す）と比較した％阻害を計算した。

結果を図６に示す。無関係の対照抗体ＡＢ－１２４５と異なり、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２＿ＬＳとその親抗体ＭＧＵ１０＿ＬＳは、それぞれ、３８．６２％（ＭＧＨ２ｖ１＿ＬＳ）と２５．２３％阻害（ＭＧＨ２＿ＬＳ）でインビボでの寄生虫感染を有意に阻害した。したがって、その親抗体であるＭＧＨ２ｖ１＿ＬＳと比較して、変異型抗体ＭＧＨ２ｖ１＿ＬＳで、より強力な感染阻害が達成された。

実施例９：ＭＧＵ１０／ＭＧＵ１０ｖ２の更なる変異体の設計及び試験
実施例６に前記されるように、変異Ｄ１０６ＥにおいてＭＧＵ１０と異なるＭＧＵ１０ｖ２は、高い安定性を示す。いかなる理論にも拘束されるものではないが、本発明者らは、変異Ｄ１０６Ｅが異性化モチーフを除去し、それにより、実施例６に示されるように抗体ＭＧＵ１０ｖ２の安定性を高めると考えている。

それを考慮して、ＭＧＵ１０ｖ２と比較して、ＭＧＵ１０の更なる変異体を設計した。更なる異性化モチーフを除去するために（抗体の安定性と製造可能性を更に高めるために）、ＭＧＵ１０ｖ２の重鎖（ＶＨ）のフレームワーク領域に更なる変異Ｄ９７Ｅを導入した。したがって、ＭＧＵ１０ｖ８は、ＭＧＵ１０ｖ２と同一のＣＤＲ配列を含み、ＭＧＵ１０ｖ２及びその親抗体であるＭＧＵ１０と同一のＶＬ配列を含む。ＭＧＵ１０ｖ８のＶＨは、配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む。配列番号１０６は、ＭＧＨｖ８ＶＨをコードする例示的なヌクレオチド配列を提供する。

新たな変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ８は、ＥｘｐｉＣＨＯ細胞（より大量、例えば２５ｍｌ又は１００ｍｌ以上）を使用して、実質的に実施例２に記載されているように発現させ、（ｉ）ＣＳＰのＮＡＮＰリピート領域（「ＮＡＮＰ」－ペプチド）及び（ｉｉ）Ｎ末端ドメインとＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＣＳＰのＮ末端領域（「ＮＰＤＰ」－ペプチド）をＥＬＩＳＡで試験した。この目的のために、Ｐｉｅｒｃｅ^ＴＭストレプトアビジンコーティングプレート（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、ビオチン化ＮＡＮＰ－ペプチド（Ｎ－ｔｅｒｍビオチン化；配列番号３４）又はビオチン化ＮＰＤＰ１９－ペプチド（Ｎ－ｔｅｒｍビオチン化；配列番号１０５）のいずれかを、ブロッキングバッファ（ＰＢＳ、１％ＢＳＡ）中、それぞれ５μｇ／ｍｌで用いてコーティングした。プレートを洗浄（ＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）した後、滴定抗体ＭＧＵ１０ｖ２又はＭＧＵ１０ｖ８をＲＴで９０分間添加した。更なる洗浄工程の後、二次抗体ヤギ抗ヒトＩｇＧＨＲＰＦ（ａｂ’）_２断片Ｆｃｇ特異的（ＪａｃｋｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を０．８μｇ／ｍｌで添加した。ＳｕｒｅＢｌｕｅＴＭＢ（Ｂｉｏｃｏｎｃｅｐｔ）を発色に使用し、１％ＨＣｌ水溶液で停止させた。ＥＬＩＳＡＲｅａｄｅｒＥＬｘ８０８ＩＵ（Ｂｉｏｔｅｋ）を使用して、４５０ｎｍにおける光学密度を検出した。

結果を図７に示す。図７に示すように、ＮＡＮＰとＮＰＤＰ１９の両方のペプチドに対する結合は、変異型抗体ＭＧＵ１０ｖ２とＭＧＵ１０ｖ８で非常に類似している。

配列及び配列番号の表（配列表）

Claims

（ｉ）配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、又は（ｉｉ）配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、又は（ｉｉｉ）配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、又は（ｖｉ）配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号２０、配列番号２１、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、又は（ｖ）配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号２０、配列番号２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列を含むことを特徴とする、抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉ）配列番号７と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉｉ）配列番号１６と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｖ）配列番号１１と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖ）配列番号１３と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉ）配列番号１６と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉ）配列番号２４と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉｉ）配列番号１０４と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｘ）配列番号１０４と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉ）配列番号７と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉｉ）配列番号１６と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｖ）配列番号１１と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖ）配列番号１３と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉ）配列番号１６と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉ）配列番号２４と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉｉ）配列番号１０４と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｘ）配列番号１０４と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１から２のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉ）配列番号７と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉｉ）配列番号１６と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｖ）配列番号１１と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖ）配列番号１３と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉ）配列番号１６と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉ）配列番号２４と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉｉ）配列番号１０４と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｘ）配列番号１０４と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１から３のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉ）配列番号７と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉｉ）配列番号１６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｖ）配列番号１１と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖ）配列番号１３と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉ）配列番号１６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉ）配列番号２４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉｉ）配列番号１０４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｘ）配列番号１０４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１から４のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉ）配列番号７と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉｉ）配列番号１６と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｖ）配列番号１１と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖ）配列番号１３と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉ）配列番号１６と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉ）配列番号２４と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉｉ）配列番号１０４と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｘ）配列番号１０４と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１から５のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉ）配列番号７と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉｉ）配列番号１６と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｖ）配列番号１１と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖ）配列番号１３と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉ）配列番号１６と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉ）配列番号２４と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉｉ）配列番号１０４と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｘ）配列番号１０４と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１から６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉ）配列番号７で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｉｉ）配列番号１６で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｖ）配列番号１１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖ）配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉ）配列番号１６で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉ）配列番号２４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｖｉｉｉ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、又は（ｉｘ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含み、請求項１に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１から７のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号６でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列を含む、請求項１から８のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３に係るアミノ酸配列又は配列番号１３と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８に係るアミノ酸配列又は配列番号８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項９に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項９に記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１６に係るアミノ酸配列又は配列番号１６と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８に係るアミノ酸配列又は配列番号８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項９に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項９に記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１０４に係るアミノ酸配列又は配列番号１０４と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号８に係るアミノ酸配列又は配列番号８と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項９に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項９に記載の抗体又はその抗原結合断片。
配列番号１、配列番号２、及び配列番号３でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列を含む、請求項１から８のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号７に係るアミノ酸配列又は配列番号７と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５に係るアミノ酸配列又は配列番号１５と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項１３に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１３に記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１１に係るアミノ酸配列又は配列番号１１と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５に係るアミノ酸配列又は配列番号１５と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項１３に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１３に記載の抗体又はその抗原結合断片。
配列番号１、配列番号２、及び配列番号１２でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号４、配列番号５、及び配列番号１４でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列を含む、請求項１から８のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１３に係るアミノ酸配列又は配列番号１３と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５に係るアミノ酸配列又は配列番号１５と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項１６に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１６に記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１６に係るアミノ酸配列又は配列番号１６と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５に係るアミノ酸配列又は配列番号１５と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項１６に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１６に記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１０４に係るアミノ酸配列又は配列番号１０４と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号１５に係るアミノ酸配列又は配列番号１５と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項１６に記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項１６に記載の抗体又はその抗原結合断片。
配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号２０、配列番号２１、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列を含む、請求項１から８のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
配列番号１７、配列番号１８、及び配列番号１９でそれぞれ表される重鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列、並びに配列番号２０、配列番号２２、及び配列番号２８でそれぞれ表される軽鎖ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、及びＣＤＲ３配列を含む、請求項１から８のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号２４に係るアミノ酸配列又は配列番号２４と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び（ｉｉ）配列番号２９に係るアミノ酸配列又は配列番号２９と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、請求項１８から１９のいずれかに記載の前記ＣＤＲ配列が維持される、請求項２０から２１のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｉ）配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｉｉ）配列番号７で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｖ）配列番号１６で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖ）配列番号１１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉ）配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉｉ）配列番号１６で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｖｉｉｉ）配列番号２４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｘ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、又は（ｉｘ）配列番号１０４で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含むことを特徴とする、抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、（ｉ）配列番号１１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項２３に記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイトに結合する、請求項１から２４のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質に結合する、請求項１から２５のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質が、配列番号３３で表されるアミノ酸配列を有する、請求項２６に記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトの滑走運動性を低下させる、請求項１から２７のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトの細胞トラバーサルを低減させる、請求項１から２８のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍのスポロゾイトの侵入及び／又は成熟を低減させる、請求項１から２９のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍに対する保護を提供する、請求項１から３０のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍによる感染を中和する、請求項１から３１のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質のＮＡＮＰリピート領域に結合する、請求項１から３２のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、前記スポロゾイト周囲タンパク質のＮ末端ドメインと、前記ＮＡＮＰリピートとの間の接合部を覆うＰｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍのスポロゾイト周囲タンパク質の前記Ｎ末端ドメインに結合する、請求項１から３３のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体が、配列番号３４に係るペプチド及び／又は配列番号３５に係るペプチドに結合する、請求項３３から３４のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体が、配列番号３４に係るペプチド及び／又は配列番号１０５に係るペプチドに結合する、請求項３３から３５のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、ヒト抗体である、請求項１から３６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、モノクローナル抗体である、請求項１から３７のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体が、Ｆｃ部分を含む、請求項１から３８のいずれかに記載の抗体。
前記抗体又はその抗原結合断片が、重鎖定常領域に変異Ｍ４２８Ｌ及び／又はＮ４３４Ｓを含む、請求項１から３９のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体が、ＩｇＧ型である、請求項１から４０のいずれかに記載の抗体。
前記抗体が、ＩｇＧ１型である、請求項４１に記載の抗体。
前記抗体又はその抗原結合断片が、精製されている、請求項１から４２のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、単鎖抗体である、請求項１から４３のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又はその抗原結合断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、又はｓｃＦｖから選択される、請求項１から４４のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
前記抗体又は前記その抗原結合断片の前記重鎖の可変領域が、遺伝子ＶＨ３－３０などのＶＨ３遺伝子ファミリーの遺伝子を含む核酸によってコードされる、請求項１から４５のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
医薬としての使用のための、請求項１から４６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片。
マラリアの予防又は治療における請求項４７に記載の使用のための、抗体又はその抗原結合断片。
請求項１から４６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチドを含むことを特徴とする、核酸分子。
前記抗体又はその抗原結合断片をコードするポリヌクレオチドが、コドン最適化されている、請求項４９に記載の核酸分子。
配列番号３６～３９のいずれか若しくは配列番号１０６で表される核酸配列、又は少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有するその配列変異体を含む、請求項４９から５０のいずれかに記載の核酸分子。
配列番号４０～９９のいずれか又は配列番号１０６で表されるポリヌクレオチドを含むことを特徴とする、核酸分子。
（ｉ）配列番号４０～４５のいずれかに係るポリヌクレオチド及び配列番号４６～５１のいずれか係るポリヌクレオチド；又は、
（ｉｉ）配列番号６４～６６のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号６７～６９のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７０～７２のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７３～７５のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７６～７８のいずれかに係るポリヌクレオチド、及び配列番号７９～８１のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む、
請求項４９から５２のいずれかに記載の核酸分子。
（ｉ）配列番号３６、３７、４０～４５、及び１０６のいずれかに係るポリヌクレオチド及び配列番号３８及び４６～５１のいずれかに係るポリヌクレオチドヌクレオチド；又は
（ｉｉ）配列番号６４～６６のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号６７～６９のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７０～７２のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７３～７５のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号７６～７８のいずれかに係るポリヌクレオチド、及び配列番号７９～８１のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む、
請求項４９から５２のいずれかに記載の核酸分子。
（ｉ）配列番号５２～５７のいずれかに係るポリヌクレオチド及び配列番号５８～６３のいずれかに係るポリヌクレオチドヌクレオチド；又は
（ｉｉ）配列番号８２～８４のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号８５～８７のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号８８～９０のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号９１～９３のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号９４～９６のいずれかに係るポリヌクレオチド、及び配列番号９７～９９のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む、
請求項４９から５２のいずれかに記載の核酸分子。
（ｉ）配列番号５２～５７のいずれかに係るポリヌクレオチド及び配列番号３９及び５８～６３のいずれかに係るポリヌクレオチドヌクレオチド；又は
（ｉｉ）配列番号８２～８４のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号８５～８７のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号８８～９０のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号９１～９３のいずれかに係るポリヌクレオチド、配列番号９４～９６のいずれかに係るポリヌクレオチド、及び配列番号９７～９９のいずれかに係るポリヌクレオチドを含む、
請求項４９から５２のいずれかに記載の核酸分子。
１以上のポリヌクレオチドが、抗体若しくはＣＤＲ又はその可変領域をコードする請求項４９から５６のいずれかに記載の核酸分子。
第１及び第２の核酸分子の組合せであって、前記第１の核酸分子が、請求項１～４６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記第２の核酸分子が、同一抗体又はその同一抗原結合断片の対応する軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含むことを特徴とする、組合せ。
前記抗体又はその抗原結合断片の前記重鎖及び／又は前記軽鎖をコードする前記ポリヌクレオチドの一方又は両方が、コドン最適化されている、請求項５８に記載の核酸分子の組合せ。
配列番号３６～３９のいずれか又は配列番号１０６で表される核酸配列、又は少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８８％、少なくとも９０％、少なくとも９２％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有するその配列変異体を含む、請求項５８又は５９に記載の核酸分子の組合せ。
第１及び第２の核酸分子の組合せであって、
（ｉ）前記第１の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号４０～４５のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｂ）配列番号６４～６６のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号６７～６９のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号７０～７２のいずれかに係るヌクレオチド配列を含み、
（ｉｉ）前記第２の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ｃ）配列番号４６～５１のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｄ）配列番号７３～７５のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号７６～７８のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号７９～８１のいずれかに係るヌクレオチド配列を含むことを特徴とする、組合せ。
第１及び第２の核酸分子の組合せであって、
（ｉ）前記第１の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号３６、３７、４０～４５、及び１０６のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｂ）配列番号６４～６６のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号６７～６９のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号７０～７２のいずれかに係るヌクレオチド配列を含み、
（ｉｉ）前記第２の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ｃ）配列番号３８及び４６～５１のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｄ）配列番号７３～７５のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号７６～７８のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号７９～８１のいずれかに係るヌクレオチド配列を含むことを特徴とする、組合せ。
第１及び第２の核酸分子の組合せであって、
（ｉ）前記第１の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号５２～５７のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｂ）配列番号８２～８４のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号８５～８７のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号８８～９０のいずれかに係るヌクレオチド配列を含み、
（ｉｉ）前記第２の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ｃ）配列番号５８～６３のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｄ）配列番号９１～９３のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号９４～９６のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号９７～９９のいずれかに係るヌクレオチド配列を含むことを特徴とする、組合せ。
第１及び第２の核酸分子の組合せであって、
（ｉ）前記第１の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ａ）配列番号５２～５７のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｂ）配列番号８２～８４のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号８５～８７のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号８８～９０のいずれかに係るヌクレオチド配列を含み、
（ｉｉ）前記第２の核酸分子は、抗体又はその抗原結合断片の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドは：（ｃ）配列番号３９及び５８～６３のいずれかに係るヌクレオチド配列；又は（ｄ）配列番号９１～９３のいずれかに係るヌクレオチド配列、配列番号９４～９６のいずれかに係るヌクレオチド配列、及び配列番号９７～９９のいずれかに係るヌクレオチド配列を含むことを特徴とする、組合せ。
請求項４９から５７のいずれかに記載の核酸分子又は請求項５８から６４のいずれかに記載の核酸分子の組合せを含むことを特徴とする、ベクター。
第１及び第２のベクターの組合せであって、
前記第１のベクターが、請求項５８から６４のいずれかに記載の第１の核酸分子を含み、前記第２のベクターが、請求項５８から６４のいずれかに記載の対応する第２の核酸分子を含むことを特徴とする、組合せ。
請求項１から４６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片を発現する、又は請求項６５に記載のベクター若しくは請求項６６に記載のベクターの組合せを含むことを特徴とする、細胞。
請求項１から４６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片、請求項４９から５７のいずれかに記載の核酸、請求項５８から６４のいずれかに記載の核酸の組合せ、請求項６５に記載のベクター、請求項６６に記載のベクターの組合せ、又は請求項６７に記載の細胞、及び任意に、薬学的に許容される希釈剤又は担体を含むことを特徴とする、医薬組成物。
マラリアの予防又は治療における使用のための、請求項１から４６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片、請求項４９から５７のいずれかに記載の核酸、請求項５８から６４のいずれかに記載の核酸の組合せ、請求項６５に記載のベクター、請求項６６に記載のベクターの組合せ、請求項６７に記載の細胞、又は請求項６８に記載の医薬組成物。
マラリアの予防、治療、又は軽減のための医薬の製造における、請求項１から４６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片、請求項４９から５７のいずれかに記載の核酸、請求項５８から６４のいずれかに記載の核酸の組合せ、請求項６５に記載のベクター、請求項６６に記載のベクターの組合せ、請求項６７に記載の細胞、又は請求項６８に記載の医薬組成物の使用。
マラリアを軽減する又はＰｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍの感染リスクを低下させる方法であって、それを必要とする対象に、請求項１から４６のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合断片、請求項４９から５７のいずれかに記載の核酸、請求項５８から６４のいずれかに記載の核酸の組合せ、請求項６５に記載のベクター、請求項６６に記載のベクターの組合せ、請求項６７に記載の細胞、又は請求項６８に記載の医薬組成物を投与することを含むことを特徴とする、方法。