JP2022500389A - リウマチ性疾患の治療に使用するためのコバーシン - Google Patents

Abstract

本発明は、リウマチ性疾患を治療または予防する方法に関する。

Description

本発明は、リウマチ性疾患、特に関節リウマチを治療および予防する方法に関する。

本文中に言及され、本明細書の最後に列挙される全ての文書は、参照により本明細書に組み込まれる。

補体
補体系は、外来侵入に対する身体の自然防御機構の必須部分であり、炎症過程にも関与している。血清中および細胞表面の３０を超えるタンパク質が、補体系の機能および調節に関与している。最近、有益な過程および病理学的過程の両方に関連する可能性がある補体系の約３５の公知の成分と同様に、補体系自体が、血管新生、血小板活性化と止血、グルコース代謝、および精子形成のように多様な機能を有する少なくとも８５の生物学的経路と相互作用することが明らかになった。

補体系は、免疫系によって非自己として認識される物質の存在によって活性化される。（１）ＩｇＭおよびＩｇＧ複合体によって、または糖質の認識によって活性化される古典的経路；（２）非自己表面（特異的調節分子を欠如する）および細菌エンドトキシンによって活性化される代替経路；ならびに（３）病原体表面のマンノース残基へのマンナン結合性レクチン（ＭＢＬ）の結合によって活性化されるレクチン経路という３つの活性化経路が存在する。これら３つの経路は、細胞表面の類似のＣ３^１コンバターゼおよびＣ５コンバターゼの形成による補体活性化の産生をもたらす、イベントの平行するカスケードを含み、その結果、急性期炎症メディエーター（Ｃ３ａおよびＣ５ａ）の放出および膜侵襲複合体（ＭＡＣ）の形成を生じる。古典的経路（ここではＣ１ｑを介した古典的およびＭＢＬを介したレクチンとして定義される）および代替経路に関与する、平行するカスケードを図１に示す。（^１補体経路の成分を文字「Ｃ」に続く「３」などの数字で表し、それにより「Ｃ３」が補体タンパク質Ｃ３を表すようにすることが慣例である。これらの成分の一部は、補体系の活性化時に切断され、切断産物は数字の後に小文字で示される。したがって、Ｃ５は、慣例的にＣ５ａおよびＣ５ｂと呼ばれる断片に切断される。補体タンパク質は、必ずしも数字の順番で作用するわけでないので、数字は、必ずしも作用の順番を示すわけではない。この呼称の慣例が、本出願に使用される。）

古典的補体経路、代替補体経路およびレクチン補体経路は、本明細書においてまとめて補体経路と呼ばれる。Ｃ５ｂは、補体活性化の「後期」または「最終」イベントを開始する。これらは、最終補体成分が相互作用してＭＡＣを形成する一連の重合反応を含み、ＭＡＣは、一部の病原体の細胞膜に孔を開け、そのことが病原体の死をもたらすか、溶解を引き起こすことなく身体の細胞を活性化する可能性がある。最終補体成分には、Ｃ５ｂ（膜侵襲システムの集合を開始する）、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８およびＣ９が含まれる。

ＬＴＢ４
ロイコトリエンＢ４（ＬＴＢ４）は、記載された、最も強力な走化性および化学運動性エイコサノイドであり、インテグリンのアップレギュレーションを介して好中球の血管内皮への接着を促進する［1］。それは、また、好中球に関する完全な分泌促進物質であり、その凝集を誘導し、微小血管透過性を増加させる。ＬＴＢ４は、ナチュラルキラー細胞、単球および好酸球を動員および活性化する。それは、スーパーオキシドラジカルの形成を増加させ［2］、組織の炎症を増強および延長するおそれがある、いくつかの炎症促進性サイトカインおよびメディエーターの産生を含む遺伝子発現をモジュレートする［3,4］。ＬＴＢ４は、また、適応免疫応答の誘導および管理に役割を果たす。例えば、流入領域リンパ節への樹状細胞輸送の調節［5,6］、肺Ｔ細胞からのＴｈ２サイトカインＩＬ−１３の産生［7］、抗原特異的エフェクターＣＤ８＋ Ｔ細胞の動員［8］ならびにヒトＢリンパ球の活性化および増殖［9］である。

ＬＴＢ４およびヒドロキシエイコサノイドは、ＢＬＴ１およびＢＬＴ２ Ｇタンパク質共役受容体を介してそれらの効果を媒介する［10,11］。ヒトＢＬＴ１は、ＬＴＢ４に特異的な高親和性受容体であり（Ｋｄ ０．３９〜１．５ｎＭ；［12］）、競合結合研究で２０−ヒドロキシＬＴＢ４および１２−エピＬＴＢ４だけがＬＴＢ４と置き換わることができる［13］。ヒトＢＬＴ２は、ＢＬＴ１と比べてＬＴＢ４に対して２０分の１の親和性（Ｋｄ ２３ｎＭ）を有し、１２−エピＬＴＢ４、２０−ヒドロキシＬＴＢ４、１２（Ｓ）−ＨＥＴＥ、１５（Ｓ）−ＨＥＴＥ、１２（Ｓ）−ＨＰＥＴＥおよび１５（Ｓ）−ＨＰＥＴＥを含む、より広い範囲のエイコサノイドと結合することによって活性化される［13］。ヒトＢＬＴ２は、ヒトおよびマウスＢＬＴ１と４５．２および４４．６％のアミノ酸同一性を有し、一方で、ヒトおよびマウスＢＬＴ２は、９２．７％の同一性を有する［11］。

ヒトＢＬＴ１は、内皮細胞および血管平滑筋細胞で発現すると最近記載されたものの、主として白血球の表面で発現する。ヒトＢＬＴ２は、より広い範囲の組織および細胞型で発現する。ヒト好中球の活性化、血管外遊出およびアポトーシスを阻害し［14］、炎症性関節炎［15］および腎虚血再灌流［16］のマウスモデルにおいて好中球浸潤によって起こる症状を軽減する、ＢＬＴ１およびＢＬＴ２のいくつかの特異的アンタゴニストが記載されている。ＢＬＴ１およびＢＬＴ２の両方は、ＬＴＢ４およびヒドロキシエイコサノイドを介して病的作用を媒介することができるが［17］、ＢＬＴ１が、マウスにおけるコラーゲン誘発関節炎などのいくつかの病状に疑いなく優位な役割を果たすことが、ますます多くの研究によって示されている［18］。ＢＬＴ１−／−欠損マウスは、また、炎症応答において好中球の遊走を方向づけることにＢＬＴ１が重要であることを強調している。特に、５ＬＯ欠損マウス系統を使用して、好中球上のＢＬＴ１のオートクリン活性化が、関節炎を起こした関節への好中球の動員に必要であることが示された［19］。

いくつかの市販薬が、エイコサノイドを標的とする。これらには、ホスホリパーゼＡ２（ＰＬＡ２）をモジュレートし、それにより、エイコサノイド前駆体であるアラキドン酸（ＡＡ）の放出を阻害するグルココルチコイド［20］が含まれる。非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）および他のＣＯＸ２阻害剤は、プロスタグランジンおよびトロンボキサンの合成を防止する［21］。ＬＴＢ４合成および他のロイコトリエンに必要な５−ＬＯＸ酵素を阻害する（ジロートン；［22］）か、またはシステイニルロイコトリエンの効果を媒介するＣｙｓＬＴ１受容体と拮抗する（ザフィルルカストおよびモンテルカスト）［23］かのいずれかの、いくつかのロイコトリエン（ＬＫ）調節物質もある。ＬＫ調節物質は、経口的に利用可能であり、例えば喘息の治療に使用するためにＦＤＡによって承認されている。ＬＴＢ４またはその受容体に特異的に作用する薬物は、まだ販売されていない。

リウマチ性疾患
背景
リウマチ性疾患という用語には、関節および／または結合組織に影響を与える慢性で、頻繁に断続的な痛みを生じる状態が含まれる。リウマチ性疾患として記載され得る少なくとも２００の異なる状態のうち、関節リウマチ（ＲＡ）は特に周知の例である。

特定のリウマチ性疾患は、傷害または感染症によって引き起こされるが、ほとんどは自己免疫によって引き起こされる状態である。このような状態には、強直性脊椎炎、再発性多発性軟骨炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、痛風、炎症性関節炎、偽痛風、若年性関節炎、シェーグレン症候群、強皮症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ベーチェット病および乾癬性関節炎が含まれる。

重症度
確立された関節炎状態の症状には、痛みおよび関節の機能の制限、例えば、関節のこわばり、腫れ、発赤、および熱感が含まれる。発疾患の全身性によって生じる、発熱、倦怠感、および肺、心臓、または腎臓などの臓器の異常からの症状に加えて、炎症を起こした関節の圧痛が存在し得る。

したがって、炎症は慢性筋骨格系疾患の重要な症状の１つであり、生じた関節および筋肉の痛みが特に衰弱する可能性がある。これらの疾患の多くは慢性かつ進行性であり、長期の薬物療法を必要とする。関節に影響を与えるリウマチ性疾患の例は、多くの形態がある関節炎である。関節リウマチ（ＲＡ）は、自己免疫に起因する炎症に関連する特定の例である。

長期的な影響があり治療法がない非常に蔓延している慢性疾患であるため、これらの状態の治療のための医療システムへの負担は信じ難いほどのものとなっている。例えば、ＲＡは２０１５年の時点で約２４５０万人、すなわち、先進国の成人の０．５〜１％に影響を及ぼしている［24］。１９９０年の２８，０００人から増加して、２０１３年において３８，０００人の死亡をもたらした［25］。

関節リウマチ（ＲＡ）は、炎症性でびらん性の滑膜炎を特徴とする慢性の全身性疾患である。その病理学的診断は、滑膜細胞の過形成、充血、血管壁の肥厚、炎症細胞の浸潤、線維性組織の過形成、透明化、および変性である。滑膜の変化は、炎症性血管組織のパンヌスの形成と維持に重要な役割を果たす、新しい血管の形成（血管新生と呼ばれる）によって特徴づけられる。このパンヌスは関節軟骨を覆って侵食し、最終的に、関節破壊をもたらす。

ＲＡの病因は完全には理解されていないものの、影響を受けた組織の病理学的血管新生および炎症に関連する自己免疫疾患と考えられている。

関節リウマチを関節炎の他の形態と区別する症状は、同時の多くの関節の炎症および軟部組織の腫れである（多発性関節炎）。関節リウマチは、痛みや関節破壊により可動性が顕著に失われる可能性がある、機能障害を引き起こす有痛性の炎症状態である。ＲＡは全身性疾患であり、頻繁に皮膚、血管、心臓、肺、および筋肉を含む、体全体の関節外組織に影響を与える。

関節リウマチについて、治療の基本的な目標は痛みと炎症を軽減すること；骨、軟骨、および軟組織の変形を防止すること；ならびに関節の正常な機能を維持することであり；そのことにより、患者の通常の日常活動を可能な限り長期間、維持することである。

ＲＡの薬理学的治療は、疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、抗炎症剤、鎮痛薬に分けることができる。治療の目標は、痛みや腫れなどの症状を最小限とし、骨の変形（例えば、Ｘ線で可視化できる骨の侵食）を防ぎ、日々の機能を維持することである。

ＤＭＡＲＤは、例えば、症状を改善し、関節損傷を減少させ、全体的な機能的能力を改善することが見出されている。抗炎症薬および鎮痛薬は痛みおよびこわばりを改善するが、関節損傷を防いだり、病気の進行を遅らせたりすることはない。

ＤＭＡＲＤの例には、従来の低分子（シクロスポリン、シクロホスファミド、ヒドロキシクロロキン、金塩メトトレキサート、レフルノミド、メトトレキサート（ＭＴＸ）、ミコフェノーラート、およびスルファサラジン）、ならびに、例えば遺伝子組換えにより製造された、免疫調整特性を有する生物学的薬剤、例えば：腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦａ）ブロッカー（エタネルセプト、セルトリズマブ ペゴル、ゴリムマブ、インフリキシマブ、およびアダリムマブ）、インターロイキン−１ブロッカー（アナキンラ）、抗Ｂ細胞（ＣＤ２０）抗体（リツキシマブ）、およびＴ細胞活性化のブロッカー（アバタセプト）が含まれる。

治療用の抗炎症剤には、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ、ほとんどが鎮痛薬としても作用する）およびグルココルチコイドが含まれる。

ＮＳＡＩＤは、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）を阻害し、したがって、炎症および痛みの中心的な役割を果たす、プロスタグランジン（ＰＧ）の産生を抑制することにより、疾患の初期段階で炎症と痛みを軽減する。ＮＳＡＩＤは関節炎の症状を治療することができるが、病気の進行を防ぐ効果はほとんどない。例としては、アセメタシン、ジクロフェナク、イブプロフェン、インドメタシン、メロキシカム、ケトプロフェン、スリンダク、オーラノフィン、ナプロキセン、ナブメトン、ピロキシカム、メコルフェナミン酸、クロフェナミン酸、メフェナミン酸、ピルプロフェン、フェンブフェン、トルメチン、フルフェナミド酸、フェノプロフェン、メトカルバモール、およびニメスリドが挙げられる。ＮＳＡＩＤは、ＣＯＸ−ＩおよびＣＯＸ−２生成物の生産の阻害に起因する悪影響を引き起こす可能性がある（例えば、胃腸複合症候群、胃のむかつき、腹痛、潰瘍、胃腸出血、ならびに腎臓、肝臓、および血液系の損傷）。

コルチコステロイド（コルチゾンやプレドニゾロンなどのグルココルチコイド）は効果的な免疫抑制剤であるが、やはり関節炎を治癒することはできない。それらの副作用（感染の増加、骨粗鬆症、および副腎皮質の機能不全を含む）は、投与量および治療の長さが増加するにつれて増加するため、長期薬物療法としての使用には勧められない。

鎮痛剤は、関節炎による痛みを治療するために一般的に使用される。それらには、パラセタモール、複合鎮痛薬、およびオピオイド鎮痛薬が含まれる。

ＤＭＡＲＤはＲＡの症状を改善できるが、このクラスの薬は多くの深刻な副作用を有し、患者には許容できない可能性がある。一部の患者における有効性の欠如、非忍容性、および再発性の二次感染は、新しい治療法の開発の必要性を促している要因である。関節リウマチの治療は依然として満たされない臨床的要求であり、関節リウマチ患者の約２０〜４０％が、現在利用可能な治療法のいずれにも適切に反応していない。

補体阻害剤
ＷＯ２００４／１０６３６９（Ｅｖｏｌｕｔｅｃ Ｌｉｍｉｔｅｄ［26］）は、補体阻害剤に関する。開示される補体阻害剤の特定のサブセットは、Ｃ５に方向づけられ、補体活性化経路のいずれかによりＣ５がＣ５ａおよびＣ５ｂに開裂されるのを防止する。このようなＣ５開裂阻害剤の特定の例は、Ｏｒｎｉｔｈｄｏｒｏｓ ｍｏｕｂａｔａ種のマダニによって産生されるタンパク質であり、その成熟型は、ＷＯ２００４／１０６３６９の図４に示されるアミノ酸配列のアミノ酸１９〜１６８からなるタンパク質である（配列番号２）。その成熟型のアミノ酸配列は、配列番号４に示される。ＷＯ２００４／１０６３６９において、このタンパク質は、名称「ＥＶ５７６」および「ＯｍＣＩタンパク質」として知られており、より最近には、「コバーシン（Ｃｏｖｅｒｓｉｎ）」として知られている［27］。２０１９年に、コバーシンは、世界保健機関によって国際一般名として承認された後、「ノマコパン（ｎｏｍａｃｏｐａｎ）」と名称変更された。このタンパク質は、本明細書において「コバーシン」と称される。

マダニにおいて、コバーシンは、成熟コバーシンタンパク質のＮ末端に、ＷＯ２００４／１０６３６９の図４に示されるアミノ酸配列のアミノ酸１〜１８を含むリーダー配列を有するプレタンパク質として発現する（配列番号２）。リーダー配列は、発現後に開裂除去される。成熟タンパク質は、ＷＯ２００４／１０６３６９の図４および本出願の図２Ａに示されるアミノ酸配列のアミノ酸１９〜１６８からなる配列を有する（配列番号２）。その成熟型のアミノ酸配列は、配列番号４に示される。

コバーシンは、また、ロイコトリエンＢ４（ＬＴＢ４）活性を阻害する能力を有する。ＬＴＢ４と結合する能力は、当技術分野において公知の標準的なｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイによって、例えば、標識ＬＴＢ４への結合をめぐって競合するコバーシンと抗ＬＴＢ４抗体との間の競合ＥＬＩＳＡによって、等温滴定熱量測定によって、または蛍光滴定によって、実証される場合がある。

ＷＯ２００７／０２８９６８、ＷＯ２００８／０２９１６７、ＷＯ２００８／０２９１６９、ＷＯ２０１１／０８３３１７およびＷＯ２０１６／１９８１３３などの、様々な応用におけるコバーシンまたはその機能的等価物の使用に関する、いくつかのさらなる特許出願がある。これらの応用については、ＲＡなどのリウマチ性疾患の治療におけるコバーシンまたはその機能的等価物の有効性を確証する実験的証拠はない。

本発明に至る研究において、ＬＴＢ４に結合し、Ｃ５に結合することによって補体経路も阻害する分子コバーシンは、上に議論したように、ＲＡのマウスモデルにおける関節炎の発症を予防し、同モデルにおける確立された関節炎疾患を改善することが示されている。コバーシンは、補体（Ｃ５を阻害することにより）およびＬＴＢ４の両方を阻害する能力を有するため、特に、単独または他の治療法と組合せにおけるＲＡなどのリウマチ性疾患の予防および治療において有利である。Ｋ／ＢｘＮ血清トランスファーマウスモデルにおいて、ＬＴＢ４またはＣ５ａのいずれかのみを阻害すると、関節炎の発症を完全に予防できることが以前から知られていた。同じモデルにおいて、ＬＴＢ４を阻害すると、確立された関節炎疾患を改善する能力を発揮する。したがって、本研究以前には、Ｃ５活性化とＬＴＢ４の併用阻害は、治療モデルにおいてＬＴＢ４阻害単独と同程度の効果のみだと予想されていた。しかし、予期せぬことに、コバーシンによるＣ５とＬＴＢ４の併用阻害は、治療モデルにおいてＬＴＢ４阻害単独よりもはるかに効果的であることが証明された。

コバーシンは、ＲＡのマウスモデルで関節炎の発症を予防し、同モデルにおいて確立された関節炎疾患を改善することが示された。コバーシンは、補体（Ｃ５を阻害することにより）およびＬＴＢ４の両方を阻害する能力を有するため、特に、単独または他の治療法との組合せにおけるＲＡなどのリウマチ性疾患の予防および治療において有利である。実施例１において、疾患の誘発とのコバーシンの投与は、関節炎の発症を完全に予防することが示された。このモデルにおいて、ジロートンは関節炎の発症を部分的にしか改善しないため、ジロートンと比較すると、コバーシンの投与では、より大きな効果が観察され得る。したがって、コバーシンは、このマウスモデルにおける関節炎の発症の予防において、ＬＴＢ４阻害剤（ジロートン）よりも効果的であるようである。本発明の背景に記したように、ジロートンは、ＬＴＢ４、およびそのいくつかは抗炎症性である可能性がある他のＬＫの合成を阻害する。

疾患誘発後のコバーシンの投与は、確立された関節炎疾患を改善できることも示された（実施例２）。この実験の結果は、Ｃ５およびＬＴＢ４の両方を標的とするコバーシンの二重阻害活性が、関節炎の治療において特に有利であるように見えることを示しているため、特に興味深い。

これらの実験では、Ｃ５結合活性は低下しているか存在しないが、ＬＴＢ４結合能力は保持している改変コバーシンポリペプチドをコバーシンと比較した。この分子（Ｌ−コバーシンと称される）は、確立された関節炎疾患の改善においてジロートンよりも効果的であったが、コバーシンよりも効果が低く、ＲＡなどのリウマチ性疾患の治療におけるコバーシンの利点を強調している。

したがって、本発明者らは、マダニタンパク質コバーシン（当技術分野および本明細書においてＥＶ５７６およびＯｍＣＩとも称される［26］）の投与が、リウマチ性疾患を治療または予防するために使用できることを実証した。

したがって、本発明は、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤の治療または予防有効量を投与することを含む、リウマチ性疾患を治療または予防する方法を提供する。

本発明は、また、リウマチ性疾患を治療または予防する方法における使用のための、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤を提供する。

本発明は、また、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物をコードする核酸分子である薬剤の治療または予防有効量を投与することを含む、リウマチ性疾患を治療または予防する方法を提供する。

本発明は、また、リウマチ性疾患を治療または予防する方法における使用のための、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物をコードする核酸分子である薬剤を提供する。

本発明は、また、（ａ）図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤の治療または予防有効量、および（ｂ）第２のリウマチ性疾患治療を投与することを含む、リウマチ性疾患を治療または予防する方法を提供する。

本発明は、また、リウマチ性疾患を治療または予防する方法における使用のための、（ａ）図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤、および（ｂ）第２のリウマチ性疾患治療を提供する。

本発明は、また、（ａ）図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物をコードする核酸分子である薬剤の治療または予防有効量、および（ｂ）第２のリウマチ性疾患治療を投与することを含む、リウマチ性疾患を治療または予防する方法を提供する。

本発明は、また、リウマチ性疾患を治療または予防する方法における使用のための、（ａ）図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物をコードする核酸分子である薬剤、および（ｂ）第２のリウマチ性疾患治療を提供する。

本発明は、また、リウマチ性疾患を治療もしくは予防するために必要とされる第２のリウマチ性疾患治療の量を減少させる、またはリウマチ性疾患を治療もしくは予防するために必要とされる第２のリウマチ性疾患治療による治療期間を減少させる方法であって、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質もしくはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤または前記薬剤をコードする核酸分子の治療または予防有効量および前記第２のリウマチ性疾患治療を投与することを含む方法を提供する。

疾患
対象は、リウマチ性疾患に罹患しているか、罹患している疑いがあるか、または発症するリスクがあってもよい。一実施形態では、リウマチ性疾患は、そのサブタイプを含む関節炎である。一実施形態では、リウマチ性疾患は、自己免疫性リウマチ性疾患である。自己免疫性リウマチ性疾患の例には、強直性脊椎炎、再発性多発性軟骨炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、痛風、炎症性関節炎、偽痛風、若年性関節炎、シェーグレン症候群、強皮症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ベーチェット病および乾癬性関節炎が含まれる。特定の実施形態では、リウマチ性疾患はＲＡである。他の実施形態では、ＲＡは血管炎に関連している。

関節炎のサブタイプには、変形性関節症、痛風（または痛風性関節炎）、ＲＡ、乾癬性関節炎、若年性関節リウマチ、若年性特発性関節炎、およびリウマチ性多発筋痛が含まれる。関節炎財団ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．ｏｒｇ／ａｂｏｕｔ−ａｒｔｈｒｉｔｉｓ／ｔｙｐｅｓ／による関節炎のタイプのリストを以下に示す：

ＲＡは好ましい疾患である。

これらの疾患の存在は、当該技術分野でよく理解されている日常的な診断によって決定することができる。特定の状態の重症度もまた、スコアリング可能であり、特定の治療が効果的か否かを評価することに役立つ。

例えば、ＲＡについては、臨床スコアリングは、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（ＡＣＲ）によって確立された基準などの臨床的に認められた基準を使用して行われてもよい。一例は、治療後の改善の量の測定を可能にするＡＣＲスコアである（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ．ｏｒｇ／ｔｒｅａｔｍｅｎｔ／ａｃｒ−ｓｃｏｒｅ／）。ＡＣＲスコアは、様々な要因を考慮して、患者の関節リウマチで起きた改善の量を評価するスコアを作成する。ＡＣＲ基準はまた、圧痛および有痛性の関節数の改善、ならびに以下のパラメーターの５つのうち３つにおける改善を評価して、確立する。（１）炎症−赤血球沈降速度（ＥＳＲ）またはＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のいずれかを測定する臨床検査で、関節の炎症の量が決定される。（２）患者の評価−患者は進行状況について自分自身による評価を説明し、決定する。（３）医師の評価−医師は患者の進行状況を説明し、決定する。（４）痛みの尺度−患者が日常的に自分の関節にどれだけ痛みを感じるか。（５）障害／機能性質問票−患者が日常の活動を完結させるために自分の関節をどれだけ容易に使用できるか。

ＡＣＲ２０のスコアは、その患者の圧痛および有痛性の関節数が２０％改善し、上記５つのパラメーターのうち３つを２０％改善したことを意味する。ＡＣＲ２０は、２０％の改善を２８段階で評価する。ＡＣＲ５０およびＡＣＲ７０は、５０％および７０％の改善に相当する。

代替法としては、疾患活動性スコア２８関節数（Ｄｉｓｅａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｓｃｏｒｅ ２８−ｊｏｉｎｔ ｃｏｕｎｔ；ＤＡＳ２８）がある。一実施形態では、ＤＡＳ２８スコアが５．１を超えると重度、３．２から５．１までは中等症とみなされ、スコアが２．６未満の患者は寛解していると定義される。さらに、治療後のＤＡＳ２８スコアの減少が０．６以下の場合は反応不良を示すものとみなされ、１．２ポイントを超える減少は、エンドポイントでの個人のＤＡＳ２８スコアがそれぞれ３．２より上または下であるかによって、中等度のまたは良好な反応を示す。

さらなる代替法は、臨床疾患活動性インデックス（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｉｎｄｅｘ；ＣＤＡＩ）である。ＣＤＡＩスコアが１０超から２２未満では中等度とみなされ、ＣＤＡＩスコアが２２超では重度とみなされ、ＣＤＡＩが２．８超および１０未満では低疾患活動性とみなされ、ＣＤＡＩが２．８未満では寛解とみなされる。６．５のＣＤＡＩの減少は、中等度の改善を表す。さらなる代替的実施形態では、１から３のＲＡＰＩＤ３［28］スコアは、ほぼ寛解を示し、４から６のスコアは、低重症度を示し、７から１２のスコアは中等度とみなされ、１３から３０のＲＡＰＩＤ３スコアは、重度とみなされる。

リウマチ性疾患を発症するリスクのある対象は、リウマチ性疾患またはその症状を予防するために、本明細書で言及される薬剤の投与から利益を得る可能性がある。特定のリウマチ性疾患のリスク因子は、以下の表２に記載され、より詳細には［29］で議論されている。

リウマチ性疾患の治療または予防の観点から、これらのリスク因子の１つまたは複数を有する対象が好ましい。

いくつかの実施形態では、対象は、これらのリスク因子のうちの１つまたは複数を有してもよいが、臨床症状を示していなくてもよい。いくつかの実施形態では、対象は、状態、例えばＲＡのエフェクターフェーズにあり得る。そのような対象において、ＲＡに関連する１つまたは複数の自己抗体は、前記対象において、例えば疾患進捗のリスクを示すレベルで検出され得る。ＲＡのＫ／ＢｘＮマウスモデルは、ＲＡのエフェクターフェーズのモデルであり、このフェーズには自己抗体の関与がある。理論に拘束されないが、コバーシンは、自己抗体が存在する場合、またはリウマチ性疾患が自己抗体によって引き起こされ続ける場合の治療に特に効果的である可能性がある。特定の実施形態では、任意の治療方法は、自己抗体の存在に基づく治療について対象を選択するステップをさらに含み得る。

ＲＡ
特定の実施形態では、リウマチ性疾患はＲＡである。ＲＡ対象は、血清陽性または血清陰性であり得る（検出可能なリウマチ因子（ＲＦ）、例えば、凝集反応または腎測定によって決定することができる、ヒトＩｇＧのＦｃ部分に対する抗体の有無による）。シトルリン化アルギニン残基を含む特定のペプチドに対する抗体（抗シトルリン化タンパク質抗体（ＡＣＰＡ））を含む、ＲＡへの特異性を持つ他の抗体も公知である。ＲＡ対象は、環状シトルリン化ペプチド（ＣＣＰ）に対する自己抗体を、追加的または代替的に有し得る（市販の試験を使用して検出することができる）。ＡＣＰＡにより、非常に早い段階で関節リウマチ（ＲＡ）を診断することができ、ＡＣＰＡテストは、関節リウマチの２０１０ＡＣＲ−ＥＵＬＡＲ分類基準の一部を形成している。

したがって、ＲＡは、自己抗体駆動ＲＡと説明してもよく、特に、対象は、ＲＦ陽性および／または抗ＣＣＰ（またはＡＣＰＡ）陽性であり得る。特定の実施形態では、任意の治療方法は、ＲＦおよび／または抗ＣＣＰ自己抗体（またはＡＣＰＡ）の存在に基づく治療について対象を選択するステップをさらに含んでもよい。

血管炎
さらなる実施形態では、ＲＡ対象は、ＲＡに関連する血管炎、例えばリウマチ性血管炎、例えば全身性血管炎を有していてもよい。「血管炎」という用語は、血管が炎症状態にあることを示す。血管炎の結果は、関与する血管のサイズ、部位、および数に依存している。血管が供給する組織の梗塞は、小または中サイズの動脈が関与している場合に発生する可能性がある（例えば、冠状動脈血管炎は心臓発作を引き起こす可能性がある）が、毛細血管のような非常に細い血管が関与している場合には、影響はそれほど深刻ではない。例外は、腎臓で発生して糸球体腎炎を引き起こす可能性があるような、広範囲の局所血管炎である。

血管炎は、関節リウマチの合併症、例えば小血管炎（例えば、小動脈および細動脈に関与する）として発生する可能性がある。血管炎はまた、関節リウマチで説明されている関節外（「関節の外側」を意味する）症状のほとんどに関連している。これらには、目の炎症（虹彩炎）、心臓と肺の内層の炎症（心膜炎と胸膜炎）、および肺の基部の炎症（線維性肺胞炎）および心臓ブロックを含む不整脈を含む他の肺と心臓の症状が含まれる。全身性血管炎の対象は通常、血中に高レベルのＲＦを有する。

全身性血管炎はまれであるが、深刻な関節リウマチの合併症であり、この疾患の最も深刻な関節外事象の１つとみなされ得る。例として、中型の動脈および毛細血管の炎症を特徴とするリウマチ性血管炎（ＲＶ）は重度であり、血管炎による損傷および／または免疫抑制療法の帰結により、患者の最大４０％が５年以内に死亡する。ＲＶは依然として治療が困難であり、高い死亡率を伴う。

対象は、以前に１つまたは複数の他のリウマチ性疾患治療（例えば、上で議論した１つまたは複数の治療またはＤＭＡＲＤ）で治療されていてもよい。いくつかの実施形態では、以前の治療は、効果的ではなかったか、効果的ではなくなったか、または１つまたは複数の有害事象のために中止された。１つのリウマチ性疾患の治療を中止することは、特にＴＮＦ阻害剤においては、比較的一般的である。したがって、特定の実施形態では、対象は以前に１つまたは複数のＴＮＦ阻害剤で治療されている。特定の実施形態では、そのような治療は、効力の欠如または有害作用のために中止された。効力の欠如は、本明細書の他の場所で議論されるように評価され得る。有害作用の例には、咳、頭痛、胸焼け、吐き気または嘔吐、腹痛、脱力感、重篤なアレルギー反応、感染症、癌、例えば腫瘍の発症などが含まれる。

タイミング
診断後または発病後の早期に治療を開始することが有利であり得る。本発明の好ましい実施形態では、対象における本発明によるリウマチ性疾患の治療は、最初の診断から約６カ月以内、最初の診断から約１２カ月以内、最初の診断から約１８カ月以内、最初の診断から約２年以内、最初の診断から約３年以内、最初の診断から約４年以内、最初の診断から約５年以内に開始される。

本発明の好ましい実施形態では、対象における本発明によるリウマチ性疾患の治療は、約６カ月以下の罹病期間、約１２カ月以下の罹病期間、約１８カ月以下の罹病期間、約２年以下の罹病期間、約３年以下の罹病期間、約４年以下の罹病期間、約５年以下の罹病期間を有する対象におけるものである。

通常、リウマチ性疾患の治療は、疾患の急性期の期間の対象におけるものである。関節リウマチの文脈における「急性期」という用語は、軽度または中等度の炎症のみと異なり、１つまたは複数の関節の重大な炎症を経験している患者を意味すると解釈されるものとする。急性期は、当該技術分野において、「フレア」とも称される。

投与成績
対象は、治療の結果として、症状の発生率の減少、症状の軽減、症状の発生もしくは再発生の阻害もしくは遅延、またはその組合せを有する場合がある。好ましくは、治療は、典型的な疾患状態の症状の軽減をもたらす。例えば、これは、炎症または腫れの量、関節のサイズ、影響を受ける関節の数、もしくは痛みの量の減少、または再発までの間隔の長期化に現れる可能性がある。また、発熱および／または重症度および／または痛む箇所の数が減少する可能性がある。一部の対象は症状が完全に解消し、それ以上再発しない場合がある。

治療の結果として、対象は、例えば上に引用した方法の１つを使用する臨床スコアの改善を示す場合がある。例えば、対象は、治療後に寛解しているとみなされる場合があるか、または特定の治療期間後に症状の改善を示すスコアを有する場合がある。対象がＤＡＳ２８、ＣＤＡＩまたはＲＡＰＩＤ３によってスコア付けされるリウマチ性疾患、例えばＲＡを有する場合、治療は、一実施形態では、ＤＡＳ２８スコア、ＣＤＡＩまたはＲＡＰＩＤ３の改善をもたらす可能性がある。対象は、治療過程の後に、少なくとも０．８または１．０または１．２ポイントのＤＡＳ２８の減少を有する（好ましくは、エンドポイントでの対象のＤＡＳ２８スコアが３．２未満である）場合がある。対象は、治療過程の後に、少なくとも６．５のＣＤＡＩの減少を有する場合がある。さらなる代替の実施形態では、対象は、治療過程の後に、６未満のＲＡＰＩＤ３スコアを有する場合がある。

換言すれば、対象は、治療過程の後に、ＡＣＲ２０、ＡＣＲ５０またはＡＣＲ７０のスコアを有する場合がある。

急性関節リウマチを診断するための方法は当該技術分野で公知であり、赤血球沈降速度（ＥＳＲ）および／または血清Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）レベルの分析を含んでもよく、ここで、例えば５０以上のＥＳＲは急性とみなされる。対象が急性ＲＡを有する場合、治療は、赤血球沈降速度（ＥＳＲ）および／または血清Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）レベルの減少をもたらす可能性がある。

対象がＲＶを有する場合、治療は、上記のような改善および／またはＲＶの臨床症状（皮膚潰瘍、末梢壊疽、血管神経障害、炎症性眼疾患および内臓梗塞を含む、すなわち、これらの臨床症状の１つもしくは複数が減少するおよび／またはその重症度が減少する可能性がある）の改善をもたらす可能性がある。

治療はまた、必要とされる第２のリウマチ性疾患治療の量または期間の減少をもたらす可能性がある。

したがって、本発明のさらなる実施形態では、リウマチ性疾患を有する対象における臨床スコアを減少させるか、またはリウマチ性疾患を有する対象における関節炎症を軽減するか、またはリウマチ性疾患を有する対象における関節のこわばりを軽減する方法であって、図２のアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９から１６８を含むタンパク質もしくはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤、または前記薬剤をコードする核酸分子の治療または予防有効量を投与することを含む方法が提供される。これは、単独であってもよいし、または第２のリウマチ性疾患の治療を伴ってもよい。

本発明はまた、図２のアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９から１６８を含むタンパク質、またはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤、前記薬剤をコードする核酸分子を、リウマチ性疾患を有する対象の臨床スコアを低減させる方法、またはリウマチ性疾患を有する対象の関節炎症を低減する方法、またはリウマチ性疾患を有する対象の関節のこわばりを低減する方法において使用するために提供する。これは、単独であってもよいし、または第２のリウマチ性疾患の治療を伴ってもよい。

本発明の薬剤は、上述のように、他のリウマチ性疾患治療と組み合わせて使用することができる。本発明の薬剤と他の（本明細書において「第２の」と称される）リウマチ性疾患治療との組合せは、本発明の薬剤による治療の非存在下で使用される量と比較して、第２のリウマチ性疾患薬剤の量が減少するか、または、本発明の薬剤による治療の非存在下で使用される治療期間と比較して、第２のリウマチ性疾患薬剤による治療の期間が減少するようなものであり得る。これは、特定の公知の治療法の副作用を考慮すると有利である。したがって、治療に使用される第２のリウマチ性疾患治療の量を減少させる方法、または第２のリウマチ性疾患治療による治療の期間を減少させる方法もまた、提供される。

好ましくは、第２のリウマチ性疾患治療は、ＤＭＡＲＤ（例えば、シクロスポリン、シクロホスファミド、ヒドロキシクロロキン、金塩、メトトレキサート、レフルノミド、ミコフェノレート、スルファサラジン、エタネルセプト、セルトリズマブ ペゴル、ゴリムマブ、インフリキシマブ、およびアダリムマブ、アナキンラ、リツキシマブ、およびアバタセプトの１つまたは複数）、抗炎症剤（例えば、ＮＳＡＩＤ、またはグルココルチコイド）および鎮痛薬（例えば、パラセタモール、複合鎮痛薬およびオピオド鎮痛薬から選択される）から選択される。

本発明の薬剤および第２のリウマチ性疾患治療が使用される場合、それらは一緒にまたは別々に投与され得る。本発明の薬剤は、最初に投与される場合があり、第２のリウマチ性疾患治療が２番目に投与される場合があるか、またはその逆である。

したがって、例えば上記の方法において、本発明の薬剤が１つまたは複数の他のリウマチ性疾患治療と組み合わせて使用される場合、これは、第２のリウマチ性疾患治療によりリウマチ性疾患を治療もしくは予防する方法における使用のための、または図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質もしくはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤によりリウマチ性疾患を治療もしくは予防する方法における使用のための第２のリウマチ性疾患治療としての、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤として記載することができる。

治療が、第２のリウマチ性疾患治療の量、または治療期間における減少を生じる場合、減少は、本発明の薬剤の非存在下で使用される第２の治療の量と比較して、最大でまたは少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０％であり得る。

対象
好ましい対象、薬剤、用量およびその他は、本明細書に開示される通りである。

任意の減少または増加への任意の参照は、処置の非存在下での前記対象と比較される疾患パラメーターにおける減少または増加である。好ましくは、パラメーターは、定量でき、この場合、増加または減少は、好ましくは統計的に有意である。例えば増加または減少は、治療の非存在下（例えば、前記治療が開始される前）のパラメーターと比較して、少なくとも３、５、１０、１５、２０、３０、４０、５０％またはそれよりも大きい場合がある。

本発明の実施において薬剤が投与される対象は、好ましくは哺乳動物であり、好ましくはヒトである。薬剤が投与される対象は、リウマチ性疾患のリスクがある、またはリウマチ性疾患を有する対象である。

本発明の方法は、また、（ｉ）対象がリウマチ性疾患のリスクがあるまたはリウマチ性疾患を有するかどうかを判定すること、（ｉｉ）コバーシンの投与前および／または後に実施され得る、リウマチ性疾患の重症度を決定することの、１つまたは複数の追加的なステップを含む場合がある。

本発明に使用すべき薬剤
本発明の一実施形態によると、薬剤は、コバーシン自体またはその機能的等価物である。以下において、「コバーシン型タンパク質」という用語は、「図２に示されるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはその機能的等価物」についての略記として使用される。

コバーシンは、マダニＯｒｎｉｔｈｏｄｏｒｏｓ ｍｏｕｂａｔａの唾液腺から単離された。コバーシンは、リポカリンファミリーの遠いメンバーであり、補体活性化を阻害することが示された最初のリポカリンファミリーのメンバーである。コバーシンは、Ｃ５に結合し、Ｃ５コンバターゼによるＣ５のＣ５ａおよびＣ５ｂへの開裂を防止することによって、古典的補体経路、第二補体経路、およびレクチン補体経路を阻害することで、活性（例えば炎症促進性）ペプチドであるＣ５ａの産生およびＭＡＣの形成の両方を阻害する。コバーシンは、ラット、マウスおよびヒト血清中でＣ５に結合し、Ｃ５コンバターゼによるＣ５の開裂を約０．０２ｍｇ／ｍｌのＩＣ５０で防止することが実証されている。

したがって、コバーシン型タンパク質は、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８または図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１〜１６８を含むまたはそれからなる場合がある。図２に示されるタンパク質配列の最初の１８アミノ酸は、Ｃ５の結合またはＬＴＢ４結合活性に必要とされないシグナル配列を形成するので、これは、必要に応じて、例えば組換えタンパク質産生の効率のために、省かれる場合がある。

コバーシンタンパク質は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して決定された１ｎＭのＫｄでＣ５に結合することが実証されている［30］。コバーシン型ペプチド（例えば、コバーシンタンパク質の機能的等価物）は、好ましくは、好都合には３６０ｎＭ未満、より好都合には３００ｎＭ未満、最も好都合には２５０ｎＭ未満、好ましくは２００ｎＭ未満、より好ましくは１５０ｎＭ未満、最も好ましくは１００ｎＭ未満、さらにより好ましくは５０、４０、３０、２０、または１０ｎＭ未満、有利には５ｎＭ未満のＫｄでＣ５と結合する能力を保持し、その際、前記Ｋｄは、好ましくは［30］に記載された方法により、表面プラズモン共鳴を使用して決定される。

コバーシンは、古典的補体経路、第二補体経路およびレクチン補体経路を阻害する。好ましくは、コバーシン型タンパク質は、Ｃ５の全体的コンフォメーションを安定化するが、３つの活性化経路のＣ５コンバターゼによって標的化されるＣ５開裂部位を直接には遮断しないように、Ｃ５に結合する。Ｃ５へのコバーシンの結合は、Ｃ５の全体的コンフォメーションの安定化を招くが、コンバターゼ開裂部位を遮断しない。コバーシンの機能的等価物も、好ましくはこれらの特性を共有する。

Ｃ５は、Ｃ５コンバターゼ酵素によって開裂される（図１）。この開裂の産物は、アナフィラトキシンＣ５ａおよび溶解複合体Ｃ５ｂを含み、これは、膜侵襲複合体（ＭＡＣ）としても公知の、Ｃ５ｂ、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８およびＣ９の複合体の形成を促進する。Ｃ５ａは、好中球および好酸球の走化性、好中球の活性化、毛細血管の透過性増加および好中球アポトーシスの阻害を含む多くの病的炎症過程に意味づけられている高度に炎症促進性のペプチドである［31］。

Ｃ５と結合してそれを阻害するモノクローナル抗体および小分子が、様々な疾患、特に、ＰＮＨ、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデスおよび移植片拒絶を治療するために開発されている［32］。しかし、これらのモノクローナル抗体の一部は、Ｃ５多型を有する対象からのある特定のＣ５タンパク質に結合せず、したがって、これらの対象には無効である［33］。好ましくは、コバーシン型タンパク質は、野生型Ｃ５だけでなく、Ｃ５多型（例えば、エクリズマブによる治療を無効にする、またはエクリズマブによる治療の効力を減少させるＣ５多型）を有する対象からのＣ５にも結合し、その開裂を阻害する。「Ｃ５多型」という用語は、野生型Ｃ５と比較して、どれも１つもしくは複数であり得る挿入、欠失、アミノ酸置換、フレームシフト、短縮化、またはこれらの変化の１つもしくは複数の組合せによって変化された任意のバージョンのＣ５を含む。ヒト対象において、野生型Ｃ５は、受託番号ＮＰ＿００１７２６．２；バージョンＧＩ：３８０１６９４７を有するＣ５タンパク質と考えられている。Ｃ５多型の例には、ｍＡｂエクリズマブの有効性を減少させる、アミノ酸位置８８５での多型、例えば、Ａｒｇ８８５Ｃｙｓ（ｃ．２６５３Ｃ＞Ｔによってコードされる）、ｐ．Ａｒｇ８８５Ｈｉｓ（ｃ．２６５４Ｇ＞Ａによってコードされる）およびＡｒｇ８８５Ｓｅｒが含まれる［33］。

Ｃ５多型、例えば、エクリズマブによる治療を無効にする、またはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型を有する対象からのＣ５を含むＣ５と結合する薬剤の能力は、当技術分野において公知の標準的なｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイ、例えば、表面プラズモン共鳴、またはタンパク質をゲル上で標識Ｃ５と共にインキュベーションした後のウエスタンブロットにより決定される場合がある。好ましくは、コバーシン型タンパク質は、野生型Ｃ５および／またはＣ５多型、例えば、エクリズマブによる治療を無効にする、もしくはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型を有する対象からのＣ５のいずれかであるＣ５と、３６０ｎＭ未満、より好都合には３００ｎＭ未満、最も好都合には２５０ｎＭ未満、好ましくは２００ｎＭ未満、より好ましくは１５０ｎＭ未満、最も好ましくは１００ｎＭ未満、さらにより好ましくは５０、４０、３０、２０、または１０ｎＭ未満、有利には５ｎＭ未満のＫｄで結合し、その際、前記Ｋｄは、表面プラズモン共鳴を使用して、好ましくは［30］に記載される方法により決定される。

これは、野生型Ｃ５およびＣ５多型、例えばエクリズマブによる治療を無効にする、またはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型を有する対象からのＣ５に対して、より高い、より低いまたは同じ親和性を示す場合がある。

コバーシン型タンパク質が補体活性化を阻害する能力は、また、薬剤が血清中で補体活性化を阻害する能力を測定することによって決定される場合がある。例えば、血清中の補体の活性は、当技術分野において公知または本明細書に記載される任意の手段によって測定することができる。

コバーシン型タンパク質は、また、エイコサノイド活性を阻害する機能を有すると定義される場合がある。コバーシンは、また、ＬＴＢ４と結合すると実証されている。コバーシンタンパク質の機能的等価物もまた、コバーシンタンパク質と類似の親和性でＬＴＢ４と結合する能力を保持する場合がある。

コバーシン型タンパク質がＬＴＢ４と結合する能力は、当技術分野において公知の標準的なｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイ、例えば、標識ＬＴＢ４への結合をめぐって競合するコバーシンと抗ＬＴＢ４抗体との間の競合ＥＬＩＳＡ、等温滴定熱量測定または蛍光滴定によって決定される場合がある。蛍光滴定を使用して得られるデータは、コバーシンがＬＴＢ４に、２００から３００ｐＭの間のＫｄで結合することを示している。例えば、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中のＬＴＢ４（Ｃａｙｍｅｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ、ＭＩ、ＵＳＡ）に対する結合活性は、分光蛍光計、例えば、ＬＳ ５０ Ｂ分光蛍光計（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ、Ｎｏｒｗａｌｋ、ＣＴ、ＵＳＡ）で定量することができる。これは、以下のように実施され得る：

２ｍＬのＰＢＳ中の１００ｎＭ精製コバーシン溶液を、磁気スターラーを備える石英キュベット（１０ｍｍ経路長；Ｈｅｌｌｍａ、Ｍｕｈｌｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ）中に加えた。温度を２０℃に調整し、平衡に達した後、タンパク質のＴｙｒ／Ｔｒｐの蛍光を２８０ｎｍで励起させた（スリット幅：１５ｎｍ）。最大発光に対応する蛍光発光を３４０ｎｍで測定した（スリット幅：１６ｎｍ）。ＰＢＳ中の３０μＭ ＬＴＢ４リガンド溶液を、最大体積２０μＬ（全試料体積の１％）まで段階的に添加し、３０秒インキュベーション後に定常状態の蛍光を測定した。ＫＤ値の計算のために、初期蛍光強度１００％に対してデータを規準化し、３μＭ Ｎ−アセチル−トリプトファンアミド溶液の滴定を使用してインナーフィルター効果を補正し、対応するリガンド濃度に対してデータをプロットした。次に、二分子複合体の形成に関する質量作用の法則に基づく非線形最小二乗回帰を使用して、公表された式（Ｂｒｅｕｓｔｅｄｔら、２００６）［34］を用いてＯｒｉｇｉｎソフトウェアバージョン８．５（ＯｒｉｇｉｎＬａｂ、Ｎｏｒｔｈａｍｐｔｏｎ、ＭＡ、ＵＳＡ）によりデータをフィットした。

コバーシンは、１ｎＭ未満、より好都合には０．９ｎＭ未満、最も好都合には０．８ｎＭ未満、好ましくは０．７ｎＭ未満、より好ましくは０．６ｎＭ未満、最も好ましくは０．５ｎＭ未満、さらにより好ましくは０．４ｎＭ未満、有利には０．３ｎＭ未満のＫｄでＬＴＢ４と結合する場合があり、その際、前記Ｋｄは、蛍光滴定を使用して、好ましくは上記方法により決定される。コバーシン型タンパク質は、好ましくはこれらの特性を共有する。

本発明の一実施形態によると、コバーシン型タンパク質は、Ｃ５およびＬＴＢ４の両方、例えば野生型Ｃ５およびＣ５多型、例えばエクリズマブによる治療を無効にする、またはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型を有する対象からのＣ５の両方、かつ、ＬＴＢ４に結合する場合がある。

したがって、コバーシン型タンパク質は、Ｃ５コンバターゼによる補体Ｃ５の補体Ｃ５ａおよび補体Ｃ５ｂへの開裂を防止するように、かつ、またＬＴＢ４活性を阻害するように作用する場合がある。Ｃ５およびＬＴＢ４の両方に結合する薬剤を使用することが特に有利である。Ｃ５およびエイコサノイド経路は、両方とも、リウマチ性疾患において観察される病状の原因になり得る。したがって、リウマチ性疾患に関与する複数の経路を阻害する単一薬剤を使用することによって、補体介在性疾患および障害の炎症作用に関与する単一の経路だけを阻害する薬剤を使用することと比較して、増強した効果を達成することができる（例えば、コバーシンとＬ−コバーシンを比較した実施例２を参照されたい）。さらに、単一の分子を投与することに関連する実用上の利点がある。

好ましくは、本発明の薬剤は、吸血性節足動物に由来する。「吸血性節足動物」という用語は、適切な宿主から餌として血を吸う、昆虫、マダニ、シラミ、ノミおよびダニなどの全ての節足動物を含む。好ましくは、本薬剤は、マダニ、好ましくは、マダニＯｒｎｉｔｈｏｄｏｒｏｓ ｍｏｕｂａｔａに由来する。

コバーシンの機能的等価物は、それが野生型Ｃ５もしくはＣ５多型（例えば、上記のＡｒｇ８８５Ｃｙｓ、Ａｒｇ８８５Ｈｉｓ、またはＡｒｇ８８５Ｓｅｒ多型）を有する対象からのＣ５のいずれかのＣ５に結合する能力およびＣ５コンバターゼによるＣ５のＣ５ａおよびＣ５ｂへの開裂を防止する能力を保持する、コバーシンの相同体または断片であり得る。その相同体または断片は、また、ＬＴＢ４と結合する能力を保持する場合がある。

相同体は、例えば、Ｒｈｉｐｉｃｅｐｈａｌｕｓ ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔｕｓ、Ｒ．ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓ、Ｒ．ｂｕｒｓａ、Ａ．ａｍｅｒｉｃａｎｕｍ、Ａ．ｃａｊｅｎｎｅｎｓｅ、Ａ．ｈｅｂｒａｅｕｍ、Ｂｏｏｐｈｉｌｕｓ ｍｉｃｒｏｐｌｕｓ、Ｂ．ａｎｎｕｌａｔｕｓ、Ｂ．ｄｅｃｏｌｏｒａｔｕｓ、Ｄｅｒｍａｃｅｎｔｏｒ ｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｓ、Ｄ．ａｎｄｅｒｓｏｎｉ、Ｄ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｓ、Ｄ．ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ、Ｈａｅｍａｐｈｙｓａｌｉｓ ｉｎｅｒｍｉｓ、Ｈａ．ｌｅａｃｈｉｉ、Ｈａ．ｐｕｎｃｔａｔａ、Ｈｙａｌｏｍｍａ ａｎａｔｏｌｉｃｕｍ ａｎａｔｏｌｉｃｕｍ、Ｈｙ．ｄｒｏｍｅｄａｒｉｉ、Ｈｙ．ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ ｍａｒｇｉｎａｔｕｍ、Ｉｘｏｄｅｓ ｒｉｃｉｎｕｓ、Ｉ．ｐｅｒｓｕｌｃａｔｕｓ、Ｉ．ｓｃａｐｕｌａｒｉｓ、Ｉ．ｈｅｘａｇｏｎｕｓ、Ａｒｇａｓ ｐｅｒｓｉｃｕｓ、Ａ．ｒｅｆｌｅｘｕｓ、Ｏｒｎｉｔｈｏｄｏｒｏｓ ｅｒｒａｔｉｃｕｓ、Ｏ．ｍｏｕｂａｔａ ｍｏｕｂａｔａ、Ｏ．ｍ．ｐｏｒｃｉｎｕｓ、およびＯ．ｓａｖｉｇｎｙｉを含む他のマダニ種からのコバーシンタンパク質配列を含む、図２に明示的に特定されるコバーシン配列（配列番号２）のパラログおよびオルソログを含む。

「相同体」という用語は、また、イエカ属（Ｃｕｌｅｘ）、ハマダラカ属（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ）およびヤブカ属（Ａｅｄｅｓ）の種、特にＣｕｌｅｘ ｑｕｉｎｑｕｅｆａｓｃｉａｔｕｓ、Ａｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉおよびＡｎｏｐｈｅｌｅｓ ｇａｍｂｉａｅを含むカ種；ノミ種、例えばＣｔｅｎｏｃｅｐｈａｌｉｄｅｓ ｆｅｌｉｓ（ネコノミ）；アブ；スナバエ；ブユ；ツェツェバエ；シラミ；ダニ；ヒル；および扁虫からの同等のコバーシンタンパク質配列を含むことが意味される。ネイティブなコバーシンタンパク質は、Ｏ．ｍｏｕｂａｔａにおいて約１８ｋＤａの別の３つの形態で存在すると考えられており、「相同体」という用語は、コバーシンのこれらの代替形態を含むことが意味される。

図２に示されるコバーシン配列の相同体を同定する方法は、当業者に明らかであろう。例えば、相同体は、公的配列データベースおよび非公的配列データベースの両方の相同性検索によって同定される場合がある。好都合には、公的に入手可能なデータベースが使用される場合がある。とはいえ、非公的または商業的に利用可能なデータベースは、特に、それらが公的データベースに表されていないデータを含むならば、等しく有用である。一次データベースは、一次ヌクレオチド配列または一次アミノ酸配列データの寄託サイトであり、公的または商業的に利用可能な場合がある。公的に利用可能な一次データベースの例には、ＧｅｎＢａｎｋデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）、ＥＭＢＬデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／）、ＤＤＢＪデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｄｄｂｊ．ｎｉｇ．ａｃ．ｊｐ／）、ＳＷＩＳＳ−ＰＲＯＴタンパク質データベース（ｈｔｔｐ：／／ｅｘｐａｓｙ．ｈｃｕｇｅ．ｃｈ／）、ＰＩＲ（ｈｔｔｐ：／／ｐｉｒ．ｇｅｏｒｇｅｔｏｗｎ．ｅｄｕ／）、ＴｒＥＭＢＬ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／）、ＴＩＧＲデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｔｉｇｒ．ｏｒｇ／ｔｄｂ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ参照）、ＮＲＬ−３Ｄデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｂｒｆａ．ｇｅｏｒｇｅｔｏｗｎ．ｅｄｕ）、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄａｔａ Ｂａｓｅ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｒｃｓｂ．ｏｒｇ／ｐｄｂ）、ＮＲＤＢデータベース（ｆｔｐ：／／ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｕｂ／ｎｒｄｂ／ＲＥＡＤＭＥ）、ＯＷＬデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｃｈｅｍ．ｕｃｌ．ａｃ．ｕｋ／ｂｓｍ／ｄｂｂｒｏｗｓｅｒ／ＯＷＬ／）および二次データベースＰＲＯＳＩＴＥ（ｈｔｔｐ：／／ｅｘｐａｓｙ．ｈｃｕｇｅ．ｃｈ／ｓｐｒｏｔ／ｐｒｏｓｉｔｅ．ｈｔｍｌ）、ＰＲＩＮＴＳ（ｈｔｔｐ：／／ｉｕｐａｂ．ｌｅｅｄｓ．ａｃ．ｕｋ／ｂｍｂ５ｄｐ／ｐｒｉｎｔｓ．ｈｔｍｌ）、Ｐｒｏｆｉｌｅｓ（ｈｔｔｐ：／／ｕｌｒｅｃ３．ｕｎｉｌ．ｃｈ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／ＰＦＳＣＡＮ＿ｆｏｒｍ．ｈｔｍｌ）、Ｐｆａｍ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓａｎｇｅｒ．ａｃ．ｕｋ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／ｐｆａｍ）、Ｉｄｅｎｔｉｆｙ（ｈｔｔｐ：／／ｄｎａ．ｓｔａｎｆｏｒｄ．ｅｄｕ／ｉｄｅｎｔｉｆｙ／）およびＢｌｏｃｋｓ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｌｏｃｋｓ．ｆｈｃｒｃ．ｏｒｇ）データベースが含まれる。商業的に利用可能なデータベースまたは非公的データベースの例には、ＰａｔｈｏＧｅｎｏｍｅ（Ｇｅｎｏｍｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｉｎｃ．）およびＰａｔｈｏＳｅｑ（以前はＩｎｃｙｔｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．のもの）が含まれる。

典型的には、２つのポリペプチドの間の（好ましくは、活性部位などの特定領域にわたる）３０％よりも大きい同一性は、機能的等価性の指標、したがって、２つのタンパク質が相同である指標であると考えられる。好ましくは、相同体であるタンパク質は、図２で特定されるコバーシンタンパク質配列（配列番号２）と６０％よりも大きい配列同一性のレベルを有する。より好ましい相同体は、図２に示されるコバーシンタンパク質配列（配列番号２）とそれぞれ７０％、８０％、９０％、９５％、９８％または９９％よりも大きい同一性のレベルを有する。相同体は、図２に示すコバーシンタンパク質配列（配列番号２）と、それぞれ７０％を超える、８０％を超える、９０％を超える、９５％を超える、９８％を超える、または９９％を超える同一性のレベルを有してもよい。いくつかの実施形態では、相同体は、図２に示されるコバーシンタンパク質配列（配列番号２）と９０％を超える同一性のレベルを有する。本明細書において言及される同一性パーセンテージは、ＢＬＡＳＴバージョン２．１．３を使用して、ＮＣＢＩ（ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ；ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）によって明示されるデフォルトパラメーター［Ｂｌｏｓｕｍ ６２行列；ギャップ開始ペナルティー＝１１およびギャップ伸長ペナルティー＝１］を使用して決定されるものである。％同一性は、関連参照配列（例えば配列番号２のアミノ酸１〜１６８または配列番号２のアミノ酸１９〜１６８）の完全長にわたる場合がある。

したがって、コバーシン型タンパク質は、参照配列、例えば図２、配列番号２のアミノ酸１９〜１６８または図２、配列番号２のアミノ酸１〜１６８に対するある特定のアミノ酸配列同一性％への参照により、例えば、図２、配列番号２のアミノ酸１９〜１６８または図２、配列番号２のアミノ酸１〜１６８と少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％または９９％の同一性を有する配列を含むまたはそれからなるタンパク質として記載することができる。いくつかの実施形態では、コバーシン型タンパク質は、配列番号４のコバーシンタンパク質配列と少なくとも９０％の同一性を有する配列を含むか、またはそれからなる。コバーシン型タンパク質が前記配列を含む場合、コバーシン型タンパク質は、融合タンパク質（例えば、第２のタンパク質、例えば、異種タンパク質との）であり得る。適切な第２のタンパク質を下に述べる。

本開示の様々な態様および実施形態では、修飾されたコバーシンポリペプチド（例えば、コバーシン型タンパク質）は、配列番号２および配列番号４において、修飾されていないコバーシンポリペプチドと１から５０、２〜４５、３〜４０、４〜３５、５〜３０、６〜２５、７〜２０、８〜２５、９〜２０、１０〜１５アミノ酸、最大１、２、３、４、５、７、８、９、１０、２０、３０、４０、５０アミノ酸で異なっていてもよい。これらは、置換、挿入、または欠失であり得るが、好ましくは置換である。欠失する場合、これらは、好ましくは、１、２、３、４、５、７または１０個までのアミノ酸の欠失（例えば、ＮまたはＣ末端からの欠失）である。したがって、変異体には、例えばタンパク質の機能または活性に不利に影響しない保存的アミノ酸置換などのアミノ酸置換を含むタンパク質が含まれる。本用語は、また、天然生物学的バリアント（例えば、コバーシンタンパク質が由来する種内の対立遺伝子バリアントまたは地理的変異）を含むことが意図される。野生型Ｃ５および／もしくはＣ５多型（例えば、エクリズマブによる治療を無効にする、もしくはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型）を有する対象からのＣ５および／またはＬＴＢ４と結合する改善された能力を有する変異体は、また、タンパク質配列中の特定の残基の系統的または定方向変異により設計される場合がある。

これらの修飾は、配列番号２および配列番号４に記載されるようにコバーシンポリペプチドに対して行われてもよく、分子が有用性を維持し、得られる修飾コバーシンポリペプチドが、配列番号２および配列番号４に記載のコバーシンポリペプチドに匹敵するＬＴＢ４結合活性およびＣ５結合を保持するという条件の下で、機能的変異体であるとみなされ、例えば、本明細書の他の場所で言及されている試験を使用して決定することができる（例えば、これらの各々への結合は、未修飾のコバーシンポリペプチドと比較して、少なくとも８０、８５、９０、９５％の結合である）。

Ｃ５およびＬＴＢ４に結合する機能的変異体の要件を考えると、修飾が行われる場合、特定の残基は修飾から除外するべきである。これらには、保存されたシステイン残基が含まれる。他の残基は修飾から除外するかまたは、置換する場合は、保存的修飾のみに供されるべきである。これらは、以下に定義するＬＴＢ４結合残基およびＣ５結合残基である。ＬＴＢ４とＣ５の結合が比較的よく理解されていることを考えると、コバーシンに対して約６５％の同一性のパーセンテージを有してもよいが、変更がＣ５およびＬＴＢ４の結合に関与しない残基に限定される分子設計をすることが可能である。

いくつかの実施形態では、成熟コバーシン分子の位置６、３８、１００、１２８、１２９、１５０での６つのシステインアミノ酸の各々（例えば、配列番号４に示されるシグナル配列を含む全長タンパク質の残基１９から１６８に対応するもの）が保持され、以下に記載のＬＴＢ４結合残基のうちの少なくとも５、１０、または１５、または各々、およびＣ５結合残基のうちの少なくとも５、１０、または１５、または２０、または各々が保持されるか、または保存的修飾が施されている。

いくつかの実施形態では、配列番号４の位置６、３８、１００、１２８、１２９、１５０の６つのシステインアミノ酸の各々が保持され、以下に記載のＬＴＢ４結合残基のうちの少なくとも５、１０または１５または各々およびＣ５結合残基のうちの少なくとも５、１０または１５または２０または各々が、保持されるか、または保存的修飾に供され、ＬＴＢ４およびＣ５結合残基の最大２、３、４、５、１０、１５、２０までが、保存的修飾が施されている。

いくつかの実施形態では、配列番号４の位置６、３８、１００、１２８、１２９、１５０の６つのシステインアミノ酸の各々が保持され、以下に記載のＬＴＢ４結合残基のうちの少なくとも５、１０または１５または各々およびＣ５結合残基のうちの少なくとも５つ、１０、または１５、または２０、または各々が保持されている。

いくつかの実施形態では、配列番号４の位置６、３８、１００、１２８、１２９、１５０の６つのシステインアミノ酸の各々が保持され、以下に記載されるＬＴＢ４結合残基の各々およびＣ５結合残基の各々が保持されるか、または保存的修飾が施されている。

いくつかの実施形態では、配列番号４の位置６、３８、１００、１２８、１２９、１５０の６つのシステインアミノ酸の各々が保持され、以下に記載のＬＴＢ４結合残基の各々およびＣ５結合残基の各々が、保持されるか、または保存的修飾に供され、Ｃ５および／またはＬＴＢ４結合残基の最大２、３、４、５、１０、１５、２０までが、保存的修飾が施されている。

いくつかの実施形態では、配列番号４の位置６、３８、１００、１２８、１２９、１５０の６つのシステインアミノ酸の各々が保持され、以下に記載されるＬＴＢ４結合残基の各々およびＣ５結合残基の各々が保持されている。

これらの領域外で行われる修飾は、保存的でも非保存的であってもよい。

これらの実施形態の各々では、これらの６つのシステインアミノ酸残基間の間隔は、分子の全体的な構造を保存するために好ましくは保持されている（例えば、分子は、図２のアミノ酸配列のアミノ酸１〜１６８に従った配列のアミノ末端からカルボキシル末端に配置された場合、３２アミノ酸離れた、６２アミノ酸離れた、２８アミノ酸離れた、１アミノ酸離れた、および２１アミノ酸離れた距離で互いに間隔を置いた６つのシステイン残基を含む）。

ＬＴＢ４結合残基
ＬＴＢ４への結合に関与すると考えられ、好ましくは非修飾形態で保持されるか、または配列番号２または配列番号４に対して修飾された任意の分子の配列においてのみ保存的変化を受ける残基は、Ｐｈｅ１８、Ｔｙｒ２５、Ａｒｇ３６、Ｌｅｕ３９、Ｇｌｙ４１、Ｐｒｏ４３、Ｌｅｕ５２、Ｖａｌ５４、Ｍｅｔ５６、Ｐｈｅ５８、Ｔｈｒ６７、Ｔｒｐ６９、Ｐｈｅ７１、Ｇｌｎ８７、Ａｒｇ８９、Ｈｉｓ９９、Ｈｉｓ１０１、Ａｓｐ１０３、およびＴｒｐ１１５（配列番号４に応じた番号付け）である。

Ｃ５結合残基
ＬＴＢ４への結合に関与すると考えられる残基は、好ましくは、配列番号２または配列番号４に対して修飾された任意の分子の配列において非修飾形態で保持され、Ｖａｌ２６、Ｖａｌ２８、Ａｒｇ２９、Ａｌａ４４、Ｇｌｙ４５、Ｇｌｙ６１、Ｔｈｒ６２、Ｓｅｒ９７、Ｈｉｓ９９、Ｈｉｓ１０１、Ｍｅｔ１１４、Ｍｅｔ１１６、Ｌｅｕ１１７、Ａｓｐ１１８、Ａｌａ１１９、Ｇｌｙ１２０、Ｇｌｙ１２１、Ｌｅｕ１２２、Ｇｌｕ１２３、Ｖａｌ１２４、Ｇｌｕ１２５、Ｇｌｕ１２７、Ｈｉｓ１４６、Ｌｅｕ１４７、およびＡｓｐ１４９（配列番号４に応じた番号付け）である。

ＬＴＢ４および／またはＣ５結合残基
ＬＴＢ４およびＣ５の両方の結合に関与する２つのヒスチジン残基、Ｈｉｓ９９およびＨｉｓ１０１がある。したがって、ＬＴＢ４および／またはＣ５結合に関与する残基のリストは、Ｐｈｅ１８、Ｔｙｒ２５、Ｖａｌ２６、Ｖａｌ２８、Ａｒｇ２９、Ａｒｇ３６、Ｌｅｕ３９、Ｇｌｙ４１、Ｐｒｏ４３、Ａｌａ４４、Ｇｌｙ４５、Ｌｅｕ５２、Ｖａｌ５４、Ｍｅｔ５６、Ｐｈｅ５８、Ｇｌｙ６１、Ｔｈｒ６２、Ｔｈｒ６７、Ｔｒｐ６９、Ｐｈｅ７１、Ｇｌｎ８７、Ａｒｇ８９、Ｓｅｒ９７、Ｈｉｓ９９、Ｈｉｓ１０１、Ａｓｐ１０３、Ｍｅｔ１１４、Ｔｒｐ１１５、Ｍｅｔ１１６、Ｌｅｕ１１７、Ａｓｐ１１８、Ａｌａ１１９、Ｇｌｙ１２０、Ｇｌｙ１２１、Ｌｅｕ１２２、Ｇｌｕ１２３、Ｖａｌ１２４、Ｇｌｕ１２５、Ｇｌｕ１２７、Ｈｉｓ１４６、Ｌｅｕ１４７、およびＡｓｐ１４９（配列番号４に応じた番号付け）である。

コバーシンの機能的等価物には、コバーシンタンパク質の断片が含まれるが、但し、このような断片は、野生型Ｃ５および／もしくはＣ５多型（例えば、エクリズマブによる治療を無効にする、もしくはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型）を有する対象からのＣ５および／またはＬＴＢ４と結合する能力を保持する。断片には、例えば、１５０アミノ酸未満、１４５アミノ酸未満である、コバーシンタンパク質配列（または相同体）由来のポリペプチドが含まれる場合があるが、但し、これらの断片は、補体野生型Ｃ５および／もしくはＣ５多型（例えば、エクリズマブによる治療を無効にする、もしくはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型）を有する対象からのＣ５および／またはＬＴＢ４と結合する能力を保持する。断片には、例えば、少なくとも１５０アミノ酸、少なくとも１４５アミノ酸であるコバーシンタンパク質配列（または相同体）に由来するポリペプチドが含まれる場合があるが、但し、これらの断片は、補体野生型Ｃ５および／もしくはＣ５多型（例えば、エクリズマブによる治療を無効にする、もしくはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型）を有する対象からのＣ５および／またはＬＴＢ４と結合する能力を保持する。

任意の機能的等価物またはその断片は、好ましくは、コバーシン中に見出されるシステイン残基のパターンを保持する。例えば、前記機能的等価物は、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１〜１６８による配列のアミノ末端からカルボキシル末端に配列したときに３２アミノ酸離れた、６２アミノ酸離れた、２８アミノ酸離れた、１アミノ酸離れたおよび２１アミノ酸離れた距離で相互に間隔が空いた６つのシステイン残基を含む。コバーシンタンパク質の例示的な断片は、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４に開示されている。対応する断片をコードするＤＮＡは、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３に開示されている。

本明細書の図２に明示的に特定されるＯ．ｍｏｕｂａｔａコバーシンタンパク質の断片だけでなく、上記のようなこのタンパク質の相同体の断片も、このような断片として含まれる。相同体のこのような断片は、典型的には図２におけるコバーシンタンパク質配列の断片と６０％よりも大きい同一性を有するが、相同体のより好ましい断片は、図２におけるコバーシンタンパク質配列の断片とそれぞれ７０％、８０％、９０％、９５％、９８％または９９％よりも大きい同一性のレベルを示す。好ましくは、このような断片は、上述のシステイン間隔を保持する。改善された特性を有する断片は、もちろん、野生型配列の系統的変異または断片化に続く適切な活性アッセイによって合理的に設計される場合がある。断片は、Ｃ５の野生型もしくは多型バリアントの一方もしく両方のＣ５および／またはＬＴＢ４に対してコバーシンと類似またはより大きい親和性を示す場合がある。これらの断片は、コバーシンタンパク質の断片について上に記載されたサイズであり得る。

上記のように、コバーシン型タンパク質は、好ましくは、野生型Ｃ５および／またはＣ５多型（例えば、エクリズマブによる治療を無効にする、もしくはエクリズマブによる治療の有効性を減少させるＣ５多型）を有する対象からのＣ５およびＬＴＢ４の両方に結合する。

任意の置換は、好ましくは、例えば次の表に応じた保存的置換である。第２列の同じブロック内にあり、好ましくは第３列の同じ行にあるアミノ酸は、互いに置換され得る：

本発明により使用される機能的等価物は、例えば、異種タンパク質配列についてのコード配列のフレーム内に、コバーシンタンパク質または機能的等価物をコードするポリヌクレオチドをクローニングすることによって得られる融合タンパク質であり得る。本明細書に使用される「異種」という用語は、コバーシンタンパク質またはその機能的等価物以外の任意のポリペプチドを表すことが意図される。可溶性融合タンパク質のＮ末端またはＣ末端のいずれかに含まれ得る異種配列の例は、以下：膜結合タンパク質の細胞外ドメイン、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ領域）、ＰＡＳもしくはＸＴＥＮもしくは類似の構造不定のポリペプチド、多量体化ドメイン、細胞外タンパク質のドメイン、シグナル配列、搬出配列、またはアフィニティークロマトグラフィーによる精製を可能にする配列である。これらの異種配列の多くは、発現プラスミドに入れて市販されており、それは、これらの配列と融合されたタンパク質の特異的生物学的活性を顕著に損なうことなく追加的な特性を提供するために、これらの配列が一般的に融合タンパク質に含まれるからである［35］。このような追加的な特性の例は、体液中により長く持続する半減期（例えば、Ｆｃ領域の付加またはＰＡＳ化（ＰＡＳｙｌａｔｉｏｎ）［36］の結果として生じる）、細胞外局在、またはヒスチジン、ＧＳＴ、ＦＬＡＧ、アビジンもしくはＨＡタグなどのタグによって可能になるような、より簡単な精製手順である。融合タンパク質は、追加的に、リンカー配列（例えば１〜５０アミノ酸長を含有する場合があり、それにより、構成成分がこのリンカーによって分離される。

したがって、融合タンパク質は、コバーシン様タンパク質を含むタンパク質の例であり、これらには、具体例としてＰＡＳ配列およびコバーシン型タンパク質配列を含むタンパク質が含まれる。ＰＡＳ配列は、例えば、［36］、およびＥＰ２１７３８９０に記載されており、ＰＡＳ化コバーシン分子は、Ｋｕｈｎら［37］に記載されている。ＰＡＳ化は、タンパク質と、アミノ酸Ｐｒｏ、Ａｌａ、および／またはＳｅｒから構成されるコンフォメーション的に無秩序なポリペプチド配列との遺伝的融合を説明している。これは、ＸＬ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ｈｔｔｐ：／／ｘｌ−ｐｒｏｔｅｉｎ．ｃｏｍ／）によって開発された技法であり、大きな流体力学的体積を有する溶媒和したランダム鎖を、それと融合されるタンパク質に結合させる簡単な方法を提供する。ポリペプチド配列は、ランダムコイル構造をとる。したがって、結果として生じる融合タンパク質のみかけの分子量は、融合タンパク質の実際の分子量よりもはるかに大きい。これにより、生体系での腎臓濾過によるクリアランス率が大幅に低下する。適切なＰＡＳ配列は、ＥＰ２１７３８９０ならびに［36］に記載されている。任意の適切なＰＡＳ配列が、融合タンパク質に使用され得る。例には、ランダムコイルコンフォメーションを形成し、アラニン、セリンおよびプロリン残基からなるかまたは本質的にそれからなる（またはプロリンおよびアラニン残基からなるかまたは本質的にそれからなる）少なくとも約１００個のアミノ酸残基からなるアミノ酸配列が含まれる。これは、複数のアミノ酸リピートを含む場合があり、その際、前記リピートは、Ａｌａ、Ｓｅｒ、およびＰｒｏ残基（またはプロリンおよびアラニン残基）からなるかまたは本質的にそれからなり、同一アミノ酸残基の連続は、６つ以下である。プロリン残基は、配列のアミノ酸の４％よりも大きく４０％未満を構成する場合がある。配列は、
ＡＳＰＡＡＰＡＰＡＳＰＡＡＰＡＰＳＡＰＡ（配列番号１５）；
ＡＡＰＡＳＰＡＰＡＡＰＳＡＰＡＰＡＡＰＳ（配列番号１６）；
ＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳＳ（配列番号１７）；、
ＳＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳ（配列番号１８）；
ＳＳＰＳＡＰＳＰＳＳＰＡＳＰＳＰＳＳＰＡ（配列番号１９）；
ＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡ（配列番号２０）および
ＡＳＡＡＡＰＡＡＡＳＡＡＡＳＡＰＳＡＡＡ（配列番号２１）
またはこれらの配列の全体もしくは部分としてのこれらの配列の環状並び替えバージョンもしくは多量体から選択されるアミノ酸配列を含む場合がある。例えば、ＰＡＳ配列中に存在するリピートのうち１つの５〜４０、１０〜３０、１５〜２５、１８〜２０、好ましくは、２０〜３０または３０コピー、すなわち配列番号１５〜２１のうち１つ、好ましくは１５個が存在し得る。好ましくは、ＰＡＳ配列は、配列番号１５の３０コピーを含むまたはそれからなる。好ましくは、ＰＡＳ配列は、コバーシン型タンパク質のＮ末端と（直接またはリンカー配列を介して）融合され、ある特定の好ましい実施形態では、コバーシン型タンパク質は、配列番号２のアミノ酸１９〜１６８を含むまたはそれからなる場合がある（例えば、融合タンパク質は、（ａ）配列番号１５の３０コピーからなるＰＡＳ配列および（ｂ）配列番号２のアミノ酸１９〜１６８を含み、その際、（ａ）は、（ｂ）のＮ末端に直接またはリンカー配列を介して融合されている）。例示的な配列が図５および配列番号２２に提供されている。

融合タンパク質は、リンカー配列（例えば、１〜５０、２〜３０、３〜２０、５〜１０、２〜４、３〜５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０または最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０アミノ酸の長さ）をさらに含む場合があり、それにより、構成成分は、このリンカーによって分離される。一実施形態では、リンカー配列は、単一のアラニン残基であり得る。

現在、「ＰＡＳ−コバーシン」は、例えば、上記のように、ＰＡＳ化されたコバーシンの機能的等価物を指すことを意図している。実施例１および２で試験されたＰＡＳ−コバーシン分子の正確な配列は、図５および配列番号２２に示されている。ＰＡＳ−コバーシンには、半減期が長いため投与頻度が少なく、患者にとってより便利であるという利点がある。したがって、ＰＡＳ−コバーシンは、Ｃ５およびＬＴＢ４依存性経路の両方を阻害し、しかしコバーシンよりも投与頻度が少ないため、投与上の利点があるという点において、コバーシンの利点を兼ね備える。

タンパク質およびその機能的等価物は、宿主細胞における発現により組換え形態として調製される場合がある。このような発現方法は、当業者に公知であり、［38］および［39］によって詳細に記載されている。コバーシンタンパク質およびその機能的等価物の組換え形態は、好ましくは、グリコシル化されていない。好ましくは、宿主細胞は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）である。

コバーシンタンパク質およびその機能的等価物は、好ましくは、例えばそれがその中で発現される宿主細胞および／または細胞増殖培地の少なくとも１つの成分から分離された、単離形態である。一部の実施形態では、コバーシンタンパク質またはその機能的等価物は、例えば、電気泳動またはクロマトグラフィーによって決定される、少なくとも９０％、９５％、または９９％の純度に精製される。本発明のタンパク質および断片は、また、タンパク質化学の通例の技法を使用して調製することができる。例えば、タンパク質断片は、化学合成によって調製される場合がある。融合タンパク質を生成する方法は、当技術分野において標準的であり、熟練の読者に公知である。例えば、大部分の一般分子生物学、微生物学、組換えＤＮＡ技法および免疫学的技法は、［38］または［40］に見出すことができる。

本発明のさらなる実施形態によると、薬剤は、コバーシン型タンパク質をコードする核酸分子であり得る。例えば、対象において関連細胞によるコバーシン型タンパク質のｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏのいずれかの内因性産生を引き起こすために遺伝子療法が採用される場合がある。別のアプローチは、治療用遺伝子が血流または筋組織中に直接注射される、「ｎａｋｅｄ ＤＮＡ」の投与である。

好ましくは、このような核酸分子は、図２におけるヌクレオチド配列（配列番号１）の塩基５５〜５０７を含むまたはそれからなる。このヌクレオチド配列は、シグナル配列を有さない図２におけるコバーシンタンパク質をコードする。図２におけるヌクレオチド配列の最初の５４塩基は、補体阻害活性またはＬＴＢ４結合活性に必要とされないシグナル配列をコードする。あるいは、核酸分子は、シグナル配列を有するタンパク質をコードする、図２における核酸配列の塩基１〜５０７を含むまたはそれからなる場合がある。

投与様式
コバーシン型タンパク質は、投与が実施されるために医療従事者を必要とせず、これらの分子は迅速に吸収される。対照的に、多くの組換え抗体は、非常にゆっくりと吸収されるか、皮下注射または他の投与経路によって投与することができず、結果として長時間かけて（例えば静脈内に）注入する必要がある。したがって、このような分子の投与は、また、医療従事者を必要とする。したがって、コバーシン型タンパク質は、注入を必要とする他の薬剤よりも投与が容易であるという利点も有する。

薬剤は、治療または予防有効量で投与される。「治療有効量」という用語は、リウマチ性疾患を治療するために必要な薬剤の量を表す。これに関連して、「治療すること」には、障害の重症度を減少させることが含まれる。

本明細書に使用される「予防有効量」という用語は、関連する状態、例えばリウマチ性疾患を予防するために必要な薬剤の量を表す。これに関連して、「予防すること」は、例えば、薬剤の投与が開始される前には障害の存在が検出されない場合に、障害の重症度を減少させることを含む。障害の重症度を減少させることは、例えば、痛み、炎症、関節のこわばり、または発熱のレベルを減少させることであり得る。

減少または改善は、投与を行わず、本明細書に記載の薬剤もない場合の結果に対するものである。結果は、このような患者を評価するために使用される標準的な基準により評価される。これを定量できる範囲で、相対基準（例えば、痛み、炎症、関節のこわばり、または発熱のレベル）に少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％の減少または改善がある。

好ましくは、コバーシン分子に基づいて計算される用量は、０．１ｍｇ／ｋｇ／日から１０ｍｇ／ｋｇ／日（患者の質量と比較した薬物の質量）例えば、０．２〜５、０．２５〜２、または０．１〜１ｍｇ／ｋｇ／日である。融合タンパク質（例えば、本明細書で議論されるような）は、コバーシン分子よりも大きいので、等モル量をそのようなタンパク質に使用することができる。したがって、コバーシンの機能的等価物については、上に言及した用量の等モル量を使用することができる。例えば、コバーシンおよび約６００アミノ酸のＰＡＳ部分、または本明細書で定義されるＰＡＳ部分を含む融合タンパク質については、例えば、ＰＡＳ−コバーシン）０．１ｍｇ／ｋｇ／日の等モル量は０．４ｍｇ／ｋｇ／日であるため、用量は０．４ｍｇ／ｋｇ／日から４０ｍｇ／ｋｇ／日（患者の体重に対する薬物の質量）、例えば０．８〜２０、１〜８、または０．４〜４ｍｇ／ｋｇ／日になる可能性がある。あるいは、これらの融合タンパク質のより長い半減期をもたらすために、例えば、１週間の間に、４０ｍｇ〜２ｇ、５０ｍｇ〜１．５ｇ、７５ｍｇ〜１ｇ、例えば週に１または２回のような、例えば、投与で、用量あたりでより多くの量を与えることができ、より少ない頻度で用量を投与することができる。

治療または予防有効量は、終末補体の阻害の点からさらに定義することができ、例えば、終末補体活性（ＴＣＡ）が、治療の非存在下での終末補体活性と比較して少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００％減少していることを意味する量であり得る。用量および回数は、終末補体活性を所望のレベルに維持するために調整される場合があり、そのレベルは、治療の非存在下での終末補体活性と比較して例えば１０％以下、例えば９、８、７、６、５、４、３、２、１％以下であり得る。

治療または予防有効量は、血漿中のＬＴＢ４レベルの減少の点からさらに定義することができ、例えば、治療の非存在下での血漿中のＬＴＢ４レベルと比較して、血漿中のＬＴＢ４レベルが少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００％低下することを意味する量、またはＬＴＢ４レベルが正常レベルの特定の範囲内になる（例えば、正常の９０〜１１０％、正常の８５〜１１５％）ような量であり得る。血漿中のＬＴＢ４レベルを所望のレベルに維持するために、用量および回数を調整することができ、これは、例えば、治療の非存在下での血漿中のＬＴＢ４レベルと比較して、９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１０％以下、例えば９、８、７、６、５、４、３、２、１％以下であってもよいし、または正常レベルの特定の範囲内（例えば、通常の９０〜１１０％、通常の８５〜１１５％）であってもよい。ＬＴＢ４レベルは、日常的な方法によって決定され得る（例えば、イムノアッセイ、例えば、順次的競合結合技術に基づく市販のＲ＆Ｄシステムアッセイを参照されたい［41］）。

用量が示されるとき、これは、タンパク質またはその機能的等価物である薬剤の用量に関するものである。核酸分子である薬剤に適した用量を使用して、これらのレベルが生じる場合がある。存在する非活性タンパク質の存在をもたらすために用量を変えることができる（例えば、６００アミノ酸のＰＡＳ部分を有するＰＡＳ−コバーシンは、コバーシンの約４倍の分子量を有するので、等モル量はコバーシンの量の約４倍になるであろう）。コバーシンに提供される任意の用量の等モル量は、追加の配列を含むその任意のコバーシン機能的等価物に使用することができる。等モル量は、日常的な方法を使用して計算できる。

終末補体活性は、当技術分野において公知の標準的なアッセイによって、例えば、Ｑｕｉｄｅｌ ＣＨ_５０溶血アッセイおよびヒツジ赤血球溶解ＣＨ５０アッセイを使用して測定することができる。

用量を投与する必要がある回数は、関与する薬剤の半減期に依存する。コバーシンタンパク質またはその機能的等価物は、例えば、１日２回ベース、毎日ベース、または２、３、４、５、６、または７日もしくはより多くの日数毎、例えば、１日２回、毎日ベースに投与される場合がある。延長された半減期バージョン、例えばＰＡＳ化コバーシン分子は、より少ない回数で投与することができる（例えば、２、３、４日毎、５、６、７、１０、１５または２０日もしくはより多くの日数毎、例えば、１日１回または２日もしくはより多くの日数毎、または毎週）。

用量の正確な投薬量および回数は、また、投与時での患者の状態に依存する場合がある。投薬量を決定する場合に考慮され得る要因には、治療または予防の必要性、患者における病状の重症度、患者の全身の健康状態、年齢、体重、性別、食事、投与の時間および回数、薬物の組合せ、反応の感受性および治療に対する患者の抵抗性または応答が含まれる。正確な量は、日常的な実験により決定することができるが、最終的には医師の判断に委ねられる可能性がある。

投薬レジメンはまた、最初の「消散レジメン」とそれに続く１つまたは複数の次の用量（例えば、維持用量）の形態をとることができる。一般に、消散レジメンはその後の投与量よりも多くなる。コバーシンの例として、これは０．６〜１．２ｍｇ／ｋｇの消散レジメンであり、その後８〜１８、１０〜１４、または１１〜１３時間（例えば約１２時間）後に０．３〜０．６ｍｇ／ｋｇ、続いて、０．４５〜０．９ｍｇ／ｋｇの維持量であって、これは例えば、１日１回投与できる。

ＰＡＳ化バージョン（例えば、ＰＡＳ−コバーシン、例えば、本明細書の他の場所に記載されているような）については、適切なレジメンは、６〜１２ｍｇ／ｋｇ（例えば、６００ｍｇ）の消散レジメン、その後６〜１２ｍｇ／ｋｇ（例えば、６００ｍｇ）３−１０、４〜８、５〜７、例えば約７日後、続いて、４〜８ｍｇ／ｋｇ（例えば４００ｍｇ）の維持用量であってよく、これは例えば１日１回投与され得る。

１つまたは複数の消散用量は、維持用量の少なくとも１．５倍、２倍、または５倍であってもよい。消散用量は、単回用量として、または特定の時間枠内の１つまたは複数の用量（例えば、２回の用量）として投与されてもよい。通常、負荷用量は、単一の２４時間（または延長された半減期バージョンの場合は１週間）中に投与される１、２、３、４、または５用量となろう。維持用量は、規則的な間隔で繰り返される、より低い用量であり得る。維持用量は、１２、２４、または４８時間毎（または毎週、または延長された半減期バージョンの場合は２週間毎）などの間隔で繰り返すことができる。正確なレジメンは日常的な実験によって決定できるが、最終的には臨床医の判断に委ねられる可能性がある。維持用量は、最初の消散用量の少なくとも２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００％、または最初の消散線量の最大２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００％であり得る。

さらなる実施形態では、治療経過にわたり同じ用量が使用される（例えば、毎日または１日２回または毎週）。

薬剤は、一般に、薬学的に許容される担体と組み合わせて、またはその中で投与される。「薬学的に許容される担体」という用語は、一般に液体であるが、担体自体が毒性作用を誘発しないか、または医薬組成物を受け取る個体に有害な抗体の産生を引き起こさないという条件の下で、他の薬剤を含み得る。薬学的に許容される担体は、例えば、水、食塩水、グリセロール、エタノールなどの液体または湿潤剤もしくは乳化剤などの補助物質、ｐＨ緩衝物質およびその他を含有する場合がある。したがって、採用される医薬担体は、投与経路に応じて様々である。薬学的に許容される担体の詳細な議論は［42］で利用可能である。好ましい実施形態では、薬剤は、液体、例えば、水またはＰＢＳの溶液中で投与される。

薬剤は、コロイド送達システム（例えば、リポソーム、ナノ粒子、または微粒子（例えば、［43］で議論されるように））を使用して任意選択で送達され得る。これらの担体システムの利点には、感受性タンパク質の保護、徐放、投与頻度の減少、患者のコンプライアンス、および制御された血漿レベルが含まれる。

リポソーム（例えば、合成および／または天然起源のリン脂質を含む）は、例えば、２０ｎｍ １００または２００マイクロメートル、例えば小さな単層ベシクル（２５〜５０ｎｍ）、大きな単層ベシクル（１００〜２００ｎｍ）、巨大な単層ベシクル（１〜２μｍ）または多層ベシクル（ＭＬＶ；１μｍ−２μｍ）であってもよい。

ナノ粒子（サイズが１０〜１０００ｎｍのコロイド担体）は、脂質、ポリマー、または金属から製造できる。ポリマーナノ粒子は、天然または合成ポリマー（例えば、キトサン、アルギン酸塩、ＰＣＬ、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ（グリコリド）、ＰＬＧＡ）から作ることができ、ナノスフェア（分子はポリマーマトリックス内に均一に分布されている）またはナノカプセル（高分子膜内に閉じ込められた薬物分子を運ぶ）として生成されてもよい。

微粒子、例えば、でんぷん、アルギン酸塩、コラーゲン、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）から作られているものも使用できる。

ヒドロゲルが、代替的または追加的に存在してもよい。

例えば融合タンパク質のような、より大きな分子量の分子の場合、ヒアルロニダーゼなどの追加の賦形剤も、例えば、大容量（例：２〜２０ｍｌ）の投与を可能にするために使用することができる。

薬剤は、好ましくは、皮下注射または滑液への注射によって送達される。対象の投与の容易さの観点から、皮下注射が好ましい。いくつかの実施形態では、これは、１日１回または２回の皮下注射を介する。

好ましくは、治療経過は、少なくとも１、２、３、４、５もしくは６週間、または少なくとも１、２、３、４、５もしくは６カ月、または少なくとも１、２、３、４、５もしくは６年の間継続される。治療経過は、少なくとも対象の症状が軽減するまで継続することが好ましい。したがって、治療過程は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０週間の薬剤の投与（例えば、毎日、隔日または毎週）であり得る。

維持用量（例えば、単回１日または１週間維持用量）は、治療経過全体にわたり一定を維持する場合）または維持用量（例えば、１日維持用量）は、治療経過中に改変（例えば、増加もしくは減少）される場合がある。維持用量は、終末補体活性および血漿ＬＴＢ４レベルを所望のレベル、例えば、治療の非存在下での前記患者からの血清と比較して、もしくは正常対照血清と比較して、１０％以下の終末補体活性、ならびに／または治療の非存在下での前記患者からの血漿と比較して９０％以下の血漿ＬＴＢ４レベルを維持するために、または正常レベルの特定の範囲内にある血漿ＬＴＢ４レベル（例えば、正常の９０〜１１０％、正常の８５〜１１５％）を達成するために、変更され得る。あるいは、各維持量は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０週間、例えば、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０週間毎日継続してもよい。対象の症状が改善するにつれて、維持量を減らすことができる。対象の症状が改善するにつれて、薬剤の量または薬剤の投与頻度を減らすことができる。

したがって、初期消散用量またはレジメンがあり得、その後、上記で定義された維持用量であってもよい初期維持用量（例えば、毎日または毎週の初期維持用量）、および１つまたは複数のさらなる維持用量（例えば、毎日または毎週のさらなる維持量）、例えば少なくとも２、３、４、５回のさらなる維持用量があり得る。

したがって、本発明は、対象に上記で定義された薬剤の初期消散用量またはレジメンを投与し、次に、上記で定義された薬剤の維持用量（例えば、毎日または毎週の維持用量）を投与することを含む、対象におけるリウマチ性疾患を治療または予防する方法をさらに含み、ここで初期維持用量および１つまたは複数のさらなる維持用量がある。

したがって、本発明は、対象のリウマチ性疾患を治療または予防する方法で使用するための上記で定義された薬剤、上記で定義された薬剤の初期消散用量またはレジメンを対象に投与する方法、次いで上記で定義された薬剤の維持用量（例えば、毎日または毎週の維持用量）を投与することさらに含み、ここで、初期維持用量および１つまたは複数のさらなる維持用量がある。

１つまたは複数のさらなる維持用量は、対象（例えば、対象からの生物学的サンプル）における終末補体活性もしくは血漿ＬＴＢ４レベルを試験し、終末補体活性のレベルおよび／もしくは血漿ＬＴＢ４レベルに基づいてさらなる維持用量を決定し、および／または対象の症状を試験し、ならびに症状に基づいてさらなる維持用量を決定することによって決定され得る。この方法は、任意選択で、前記さらなる維持用量を投与することをさらに含み得る。前記さらなる用量は、終末補体活性を所望のレベルに維持するレベルであると計算され得る。

生物学的サンプルが採取される場合、これは血液、例えば、全血、血漿または血清サンプルであり得る。この方法は、任意選択で、サンプルを採取するステップをさらに含み、さらに任意選択で、サンプルのＴＣＡを決定するステップおよび／または血漿ＬＴＢ４レベルを決定するステップを含む。

１つまたは複数のさらなる維持用量は、対象（例えば、生物学的サンプル）における終末補体活性および／または血漿ＬＴＢ４レベルを試験し、終末補体活性のレベルおよび／または血漿ＬＴＢ４レベルに基づいてさらなる維持用量を決定し、および／または対象の症状を試験し、ならびに症状に基づいてさらなる維持量を決定することによって決定され得る。この方法は、任意選択で、前記さらなる維持用量を投与することをさらに含み得る。前記さらなる用量は、終末補体活性および／または血漿ＬＴＢ４レベルを所望のレベルに維持するレベルであると計算される場合がある。

特定の態様では、所望の補体活性レベルは、治療の非存在下での前記対象からの血清と比較して、または正常対照血清と比較して１０％以下であり、および／または血漿ＬＴＢ４レベルが、治療の非存在下での前記対象からの血清と比較して９０％以下であり、および／または血漿ＬＴＢ４レベルが正常レベルの特定の範囲内にある（例えば、正常の９０〜１１０％、正常の８５〜１１５％）。

特定の態様では、ＴＣＡおよび／または血漿ＬＴＢ４が所望のレベルよりも高い場合、維持用量が増加され、ここで、任意選択で、ＴＣＡが５、４、３、２、１％未満である、および／またはＬＴＢ４血漿レベルが、治療の非存在下での前記患者からの血漿と比較して９０％以下である場合（または血漿ＬＴＢ４レベルが正常レベルの特定の範囲内（例えば、正常の９０〜１１０％、正常の８５〜１１５％）にある場合）、用量は維持または減少される。

特定の態様では、症状が悪化する場合、維持用量は増加され、任意選択で、症状が改善する場合、用量は維持または減少される。

一部の実施形態では、対象は、治療の開始から１カ月以内、治療の開始から２週間以内、治療の開始から１週間以内に検査される。他の実施形態では、対象は、１日１回もしくは１日に少なくとも１回、１週間に１回、もしくは１週間に少なくとも１回、２週間に１回もしくは２週間に少なくとも１回、１カ月に１回または２カ月に１回検査される。

投薬レジメンは、また、治療される対象の体重に依存しない固定用量の形態をとる場合がある。固定用量は、単回用量として、または特定の時間枠内の１つもしくは複数の用量として投与され得る。固定用量は、典型的なヒト患者（例えば、体重５０ｋｇから１００ｋｇの間の患者）について１ｍｇ〜１００ｍｇのコバーシン（例えば、配列番号４）であり得る。コバーシン型タンパク質の分子量を使用して、機能的等価薬剤の当量の固定用量を計算することができる。一部の実施形態では、固定用量は、１ｍｇ〜８０ｍｇ、１ｍｇ〜５０ｍｇ、５ｍｇ〜８０ｍｇ、５ｍｇ〜５０ｍｇ、１０ｍｇ〜６０ｍｇ、１０ｍｇ〜５０ｍｇ、２０ｍｇ〜５０ｍｇ、２０ｍｇ〜４０ｍｇまたは２５ｍｇ〜３５ｍｇの間のコバーシン（例えば、配列番号４）またはコバーシン型タンパク質のモル当量である。好ましくは、固定用量は、３０ｍｇ、または４５ｍｇのコバーシン（配列番号４）またはコバーシン型タンパク質のモル当量である。典型的には、固定用量は、単一の２４時間中に投与された１、２、３、４または５用量である。固定用量は、３、４、６、８、１２、２４、または４８時間毎などの間隔で繰り返される場合がある。正確なレジメンは、日常的な実験により決定することができるが、最終的に医師の判断に委ねられる可能性がある。

補体活性化の古典的および代替経路の模式ダイアグラムを示す図である。アナフィラトキシンを星形で囲む。 コバーシンの一次配列を示す図である。シグナル配列に下線を付ける。システイン残基を太字で示す。ヌクレオチド番号およびアミノ酸番号を右に示す。ヌクレオチド配列は配列番号１であり、アミノ酸配列は配列番号２である。 コバーシンバリアントの例を示す図である。 予防的コバーシン、ＰＡＳ−コバーシンまたはジロートンで治療されたマウスに対するビヒクルにおける実験的ＲＡの臨床スコアおよび足幅を示す図である。 ＰＡＳ−コバーシンで治療したマウスでは、ビヒクル対照群、ジロートン、およびＣ５に結合しないＰＡＳ−Ｌコバーシンと比較して、ＰＡＳ−コバーシンで治療したマウスに対するビヒクルおける実験的ＲＡの臨床スコアにおいて疾患が改善されていることを示す図である。 ＰＡＳ−コバーシン配列を示す図である。

Ｋ／ＢｘＮ血清トランスファーモデルにおけるコバーシンの効果（予防的）
Ｋ／ＢｘＮ血清トランスファー関節炎モデルを使用して、コバーシンにより関節炎の発症を予防できるか否かを試験した。このモデルは、関節炎トランスジェニックＫ／ＢｘＮマウスの血清をナイーブマウスにトランスファーすることによって、関節リウマチ（ＲＡ）において発生する免疫学的メカニズムが誘発される周知のマウスモデルである。治療の非存在下で、関節炎の症状は数日後に発生する。このモデルは、特にＲＡおよびおそらく他の形態の炎症性関節炎の新しい治療標的の前臨床スクリーニングについて、ＲＡに非常に関連していることが認識されている［44］。

実験的ＲＡは、［45］に記載されているプロトコルを使用して誘導された。各治療群で５匹のマウスを試験した。

０日目に、標準プロトコルを使用して、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの臨床スコアおよび足の厚さを評価した［45］。全てのマウスは、０日目および２日目にＫ／ＢｘＮ血清の注射を受けた。各治療は、０日目から１４日目まで毎日投与された。血清も注射した日（０日目および２日目）、血清注射の直後に薬物を投与した。臨床スコアおよび足の厚さを１日おきに測定した。

治療グループは以下の通りである：
グループ１：ＰＢＳ（ビヒクル、皮下、ｑ２４ｈ）
グループ２：治療（コバーシン５ｍｇ／ｋｇ皮下、ｑ１２ｈ）
グループ３：治療（ジロートン５０ｍｇ／ｋｇ経口１日１回）
グループ４：治療（ＰＡＳ−コバーシン２０ｍｇ／ｋｇ皮下、１日１回）

実験１の結果を図３に示す。コバーシン（ｑ１２ｈ）およびＰＡＳ−コバーシン（ｑ２４ｈ）が、このモデルで関節炎の発症を完全に抑制することがわかる。ジロートン（５−ＬＯＸ阻害剤）は、このモデルの関節炎の発症を部分的に改善する。

コバーシンおよびＰＡＳ−コバーシンは、このモデルの関節炎の発症を、５−リポキシゲナーゼ阻害剤（５−ＬＯＸ）経口阻害剤であるＮ−［１−（１−ベンゾチエン−２−イル）エチル］−Ｎ−ヒドロキシ尿素（ジロートン）よりも大幅に減少させた（アラキドン酸カスケードの重要な酵素であり、生理活性ロイコトリエン（ＬＴ）の形成に関与している）。

ＰＡＳ−コバーシンとコバーシンの相違は、ＰＡＳ−コバーシンが「ＰＡＳ化」されていることである。これは、アミノ酸Ｐｒｏ、Ａｌａ、および／またはＳｅｒで構成される構造的にディスオーダーしたポリペプチド配列とタンパク質の遺伝子融合と表現される。これはＸＬ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ｈｔｔｐ：／／ｘｌ−ｐｒｏｔｅｉｎ．ｃｏｍ／）によって開発された技術であり、融合させるタンパク質に大きな流体力学的体積を持つ溶媒和ランダム鎖を結合させる、単純な方法を提供する。ポリペプチド配列はランダムコイル構造をとり、みかけの分子量が大幅に増加し、腎臓濾過によるクリアランス速度が減少する。この実験で使用されたＰＡＳ−コバーシンの配列は、図５および配列番号２２に示されている。

ＰＡＳ−Ｃｏｖの分子量は大きいため、２０ｍｇ／ｋｇのＰＡＳ−Ｃｏｖは５ｍｇ／ｋｇのコバーシンに相当する、そこで、この実験では、等用量の活性コバーシン剤は毎日投与するが、コバーシンは２倍の頻度で投与する（１２時間毎）。この実験では、ＰＡＳ−コバーシンはコバーシンと同じように効果的であったが、投与頻度はより少ない。したがって、ＰＡＳコバーシンのようなコバーシンのより長い半減期バージョンを治療的に使用することには利点があり得る。

Ｋ／ＢｘＮ血清トランスファーモデルにおけるコバーシンの効果（治療）
Ｋ／ＢｘＮ血清トランスファー関節炎（ＳＴＡ）モデルを使用して、確立された関節炎疾患がコバーシンにより改善できるか否かを試験した。

実験的ＲＡは、［45］に記載されるプロトコルを使用して誘導された。各治療群で５匹のマウスを試験した。

０日目に、標準プロトコルを使用してＣ５７ＢＬ／６マウスの臨床スコアおよび足の厚さを評価した［45］。全てのマウスは、０日目と２日目にＫ／ＢｘＮ血清の注射を受けた。治療は４日目から１４日目まで毎日行われた。血清も注射した日（０日目および２日目）、血清注射の直後に薬物を投与した。臨床スコアおよび足の厚さを１日おきに測定した。

治療群は以下の通りである：
グループ１：ＰＢＳ（ビヒクル）
グループ２：治療（ＰＡＳ−Ｌコバーシン２０ｍｇ／ｋｇ皮下１日１回）
グループ３：治療（ジロートン５０ｍｇ／ｋｇ経口１日１回）
グループ４：治療（ＰＡＳ−コバーシン２０ｍｇ／ｋｇ皮下１日１回）

２番目の実験からの臨床スコアの結果を図４に示す。血清注射後にマウスが関節炎を発症したことがわかる。ビヒクルおよびジロートン群では、実験の６日目に最大の臨床スコアが見られた。ＰＡＳ−Ｌ−コバーシン（ｑ２４ｈ）およびＰＡＳ−コバーシン（ｑ２４ｈ）の投与後、ＰＡＳ−コバーシンおよびＰＡＳ−Ｌ−コバーシン群の臨床スコアは減少した。ＰＡＳ−Ｌ−コバーシン群については、ビヒクルおよびジロートン治療群よりも臨床スコアが有意に低かった。

ＰＡＳ−コバーシンおよびＰＡＳ−Ｌ−コバーシンの違いは、Ｌ−コバーシン分子において、コバーシン配列が変異しているために、ＬＴＢ４には結合するものの、Ｃ５には結合しないことである（「Ｌ−コバーシン」と称される）。Ｌ−コバーシン配列の配列は、以下の残基が修飾される成熟コバーシン配列（配列番号４）の変異体である：Ａｌａ４４をＡｓｎに、Ｍｅｔ１１６をＧｌｎに、Ｌｅｕ１１７をＳｅｒに、Ｇｌｙ１２１をＡｌａに、Ｌｅｕ１２２をＡｓｐに、Ｇｌｕ１２３をＡｌａに、およびＡｓｐ１４９をＧｌｙに（バリアント２と称される、配列はｄｓｅｓｄｃｔｇｓｅ ｐｖｄａｆｑａｆｓｅ ｇｋｅａｙｖｌｖｒｓ ｔｄｐｋａｒｄｃｌｋ ｇｅｐＮｇｅｋｑｄｎ ｔｌｐｖｍｍｔｆｋｎ ｇｔｄｗａｓｔｄｗｔ ｆｔｌｄｇａｋｖｔａ ｔｌｇｎｌｔｑｎｒｅ ｖｖｙｄｓｑｓｈｈｃ ｈｖｄｋｖｅｋｅｖｐ ｄｙｅｍｗＱＳｄａｇ ＡＤＡｖｅｖｅｃｃｒ ｑｋｌｅｅｌａｓｇｒ ｎｑｍｙｐｈｌｋＧｃ（配列番号２３）、ここで、配列番号４のネイティブなコバーシン配列と比べた変化は大文字で示す）。

ＰＡＳ−Ｌ−コバーシンは、ＲＡの改善においてＰＡＳ−コバーシンほど効果的ではなかったが、ジロートンよりも効果的であった。このことは、コバーシンの二重阻害活性（Ｃ５およびＬＴＢ４阻害）により、改善された治療効果がこのモデルにもたらされることを示唆する。Ｃ５活性化およびＬＴＢ４の同時阻害は、治療モデルにおいてＬＴＢ４単独阻害と同程度でしか効果的ではないと予想されていた。しかしながら、予期せぬことに、コバーシンによるＣ５およびＬＴＢ４の同時阻害は、Ｌ−コバーシンと比較したコバーシンの改善された効果で示されるように、治療モデルにおいてＬＴＢ４単独阻害よりもはるかに効果的であることがわかった。

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Claims (29)

1. 対象に、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤の治療または予防有効量を投与することを含む、対象におけるリウマチ性疾患を治療または予防する方法。
2. 対象におけるリウマチ性疾患を治療または予防する方法における使用のための、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物である薬剤。
3. 対象に、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物をコードする核酸分子である薬剤の治療または予防有効量を投与することを含む、対象におけるリウマチ性疾患を治療または予防する方法。
4. 対象におけるリウマチ性疾患を治療または予防する方法における使用のための、図２におけるアミノ酸配列（配列番号２）のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質またはこのタンパク質の機能的等価物をコードする核酸分子である薬剤。
5. 薬剤が、配列番号２のアミノ酸１９〜１６８の配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含むタンパク質であるか、またはそれをコードするものであり、
   前記タンパク質が、Ｃ５と結合して、Ｃ５コンバターゼによる補体Ｃ５の補体Ｃ５ａおよび補体Ｃ５ｂへの開裂を防止し、かつ、ＬＴＢ４に結合する、
   請求項１もしくは３のいずれか一項に記載の方法または請求項２もしくは４のいずれか一項に記載の使用のための薬剤。
6. 薬剤が、配列番号２のアミノ酸１９〜１６８の配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むタンパク質であるか、またはそれをコードするものであり、
   前記タンパク質が、Ｃ５と結合して、Ｃ５コンバターゼによる補体Ｃ５の補体Ｃ５ａおよび補体Ｃ５ｂへの開裂を防止し、かつ、ＬＴＢ４に結合する、
   請求項１、３もしくは５のいずれか一項に記載の方法または請求項２、４もしくは５のいずれか一項に記載の使用のための薬剤。
7. 薬剤が、配列番号２のアミノ酸１９〜１６８の配列を含むまたはそれからなるタンパク質であるか、またはそれをコードするものである、請求項１、３もしくは５から６のいずれか一項に記載の方法、または請求項２、４もしくは５から６のいずれか一項に記載の使用のための薬剤。
8. 薬剤が、最大で５０個のアミノ酸置換、挿入または欠失が行われた、配列番号２のアミノ酸１９〜１６８の配列を含むタンパク質であるか、またはそれをコードするものであり、
   タンパク質が、Ｃ５と結合して、Ｃ５コンバターゼによる補体Ｃ５の補体Ｃ５ａおよび補体Ｃ５ｂへの開裂を防止し、かつ、ＬＴＢ４に結合し、
   配列番号４に記載の成熟コバーシン分子の位置６、３８、１００、１２８、１２９、１５０の６つのシステインアミノ酸の各々が保持され、およびＬＴＢ４結合残基のうちの少なくとも５、１０または１５または各々、およびＣ５結合残基セットのうちの少なくとも５、１０または１５または２０または各々が保持されるか、または保存的修飾に供され、
   ＬＴＢ４結合残基は、Ｐｈｅ１８、Ｔｙｒ２５、Ａｒｇ３６、Ｌｅｕ３９、Ｇｌｙ４１、Ｐｒｏ４３、Ｌｅｕ５２、Ｖａｌ５４、Ｍｅｔ５６、Ｐｈｅ５８、Ｔｈｒ６７、Ｔｒｐ６９、Ｐｈｅ７１、Ｇｌｎ８７、Ａｒｇ８９、Ｈｉｓ９９、Ｈｉｓ１０１、Ａｓｐ１０３、およびＴｒｐ１１５（配列番号４による番号付け）であり、ならびにＣ５結合残基は、Ｖａｌ２６、Ｖａｌ２８、Ａｒｇ２９、Ａｌａ４４、Ｇｌｙ４５、Ｇｌｙ６１、Ｔｈｒ６２、Ｓｅｒ９７、Ｈｉｓ９９、Ｈｉｓ１０１、Ｍｅｔ１１４、Ｍｅｔ１１６、Ｌｅｕ１１７、Ａｓｐ１１８、Ａｌａ１１９、Ｇｌｙ１２０、Ｇｌｙ１２１、Ｌｅｕ１２２、Ｇｌｕ１２３、Ｖａｌ１２４、Ｇｌｕ１２５、Ｇｌｕ１２７、Ｈｉｓ１４６、Ｌｅｕ１４７およびＡｓｐ１４９（配列番号４による番号付け）である、
   請求項１もしくは３のいずれか一項に記載の方法、または請求項２もしくは４のいずれか一項に記載の使用のための薬剤。
9. ＬＴＢ４およびＣ５結合残基の最大２、３、４、５、１０、１５、２０が、保存的修飾が施されている、請求項８に記載の方法または使用のための薬剤。
10. ＬＴＢ４結合残基のうちの少なくとも５、１０または１５または各々、およびＣ５結合残基のうちの少なくとも５、１０または１５または２０または各々が保持されている、請求項８または９に記載の方法または使用のための薬剤。
11. ＬＴＢ４結合残基の各々およびＣ５結合残基の各々が、保持されるか、または保存的修飾が施されている、請求項８から１０のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
12. ＬＴＢ４結合残基の各々およびＣ５結合残基の各々が、保持されるか、または保存的修飾に供され、Ｃ５および／またはＬＴＢ４結合残基のうちの最大２、３、４、５、１０、１５、２０が、保存的修飾が施されている、請求項８から１１のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
13. ＬＴＢ４結合残基の各々およびＣ５結合残基の各々が保持されている、請求項８から１２のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
14. 薬剤が、前記請求項のいずれかに定義のタンパク質の断片であるか、またはそれをコードするものであり、
    タンパク質が、Ｃ５と結合して、Ｃ５コンバターゼによる補体Ｃ５の補体Ｃ５ａおよび補体Ｃ５ｂへの開裂を防止し、かつ、ＬＴＢ４に結合する、
    請求項１もしくは３のいずれか一項に記載の方法、または請求項２もしくは４のいずれか一項に記載の使用のための薬剤。
15. 薬剤が、皮下または滑液内に、好ましくは皮下に投与される、前記請求項のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
16. 対象が、ヒトである、前記請求項のいずれかに記載の方法または使用のための薬剤。
17. リウマチ性疾患が、強直性脊椎炎、再発性多軟骨炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、痛風、炎症性関節炎、偽痛風、若年性関節炎、シェーグレン症候群、強皮症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ベーチェット病および乾癬性関節炎から選択される、前記請求項のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
18. リウマチ性疾患がＲＡであり、任意選択で、ＲＡがＲＦおよび／または抗ＣＣＰ陽性ＲＡである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
19. ＲＡが血管炎を伴う、請求項１８に記載の方法または使用のための薬剤。
20. 方法が、対象に薬剤の初期消散レジメンを投与し、次いで、薬剤の維持用量を投与することを含む、前記請求項のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤であって、任意選択で初回維持用量および１または２以上のさらなる維持用量がある、方法または使用のための薬剤。
21. 方法が、第２のリウマチ性疾患治療の投与をさらに含む、前記請求項のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
22. 第２のリウマチ性疾患治療が、ＤＭＡＲＤ、抗炎症剤（例えば、ＮＳＡＩＤ、またはグルココルチコイド）および鎮痛剤から選択される、請求項２１に記載の方法または使用のための薬剤。
23. （ａ）ＤＭＡＲＤが、シクロスポリン、シクロホスファミド、ヒドロキシクロロキン、金塩、メトトレキサート、レフルノミド、ミコフェノレート、スルファサラジン、エタネルセプト、セルトリズマブ ペゴル、ゴリムマブ、インフリキシマブ、およびアダリムマブ、アナキンラ、リツキシマブ、およびアバタセプトから選択され、好ましくは、エタネルセプト、セルトリズマブ ペゴル、ゴリムマブ、インフリキシマブ、およびアダリムマブ、アナキンラ、リツキシマブ、およびアバタセプトから選択される、
    （ｂ）抗炎症剤が、ＮＳＡＩＤ、もしくはグルココルチコイドである、および／または
    （ｃ）鎮痛薬が、パラセタモール、複合鎮痛薬、およびオピオイド鎮痛薬から選択される、請求項２２に記載の方法または使用のための薬剤。
24. 配列番号２のアミノ酸１９〜１６８を含むタンパク質の機能的等価物が、（ａ）請求項６から１４のいずれかで定義される配列、および（ｂ）第２の配列を含む融合タンパク質であり、
    前記融合タンパク質が、Ｃ５と結合して、Ｃ５コンバターゼによる補体Ｃ５の補体Ｃ５ａおよび補体Ｃ５ｂへの開裂を防止し、かつ、ＬＴＢ４と結合する、
    前記請求項のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
25. 前記第２の配列が、ＰＡＳ配列である、請求項２４に記載の方法または使用のための薬剤。
26. 前記融合タンパク質が、ＡＳＰＡＡＰＡＰＡＳＰＡＡＰＡＰＳＡＰＡ（配列番号１５）；ＡＡＰＡＳＰＡＰＡＡＰＳＡＰＡＰＡＡＰＳ（配列番号１６）；ＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳＳ（配列番号１７）、ＳＡＰＳＳＰＳＰＳＡＰＳＳＰＳＰＡＳＰＳ（配列番号１８）、ＳＳＰＳＡＰＳＰＳＳＰＡＳＰＳＰＳＳＰＡ（配列番号１９）、ＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡＡＡＳＰＡＡＰＳＡＰＰＡ（配列番号２０）およびＡＳＡＡＡＰＡＡＡＳＡＡＡＳＡＰＳＡＡＡ（配列番号２１）のうちの１つの複数コピー、好ましくは配列番号１５〜２１のうちの１つの２０〜３０または３０コピーを含む、請求項２３または２４に記載の方法または使用のための薬剤。
27. 前記融合タンパク質が、（ａ）配列番号１５の３０コピーからなるＰＡＳ配列および（ｂ）配列番号２のアミノ酸１９〜１６８を含み、（ａ）が、（ｂ）のＮ末端と融合されている、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
28. 前記融合タンパク質が、配列番号２２の配列を含む、請求項２４から２７のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
29. タンパク質または融合タンパク質が、Ｃ５と結合して、Ｃ５コンバターゼによる補体Ｃ５の補体Ｃ５ａおよび補体Ｃ５ｂへの開裂を防止し、かつ、ＬＴＢ４と結合する、請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法または使用のための薬剤。
    

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