JP2010502687A - 呼吸器疾患の治療方法 - Google Patents
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Abstract
Description
文献[20]に開示されているように、EV576は、ヒメダニ類のOrthinodoros moubataの唾液腺抽出物を用いて、古典的溶血アッセイ(図3)により補体阻害活性があることが判明した唾液腺抽出物フラクションをSDS−PAGE及びRP−HPLCに付すことにより精製した。
OVA感作マウスと誘発(チャレンジ)マウスにおいて、3種の異なる濃度のrEV576に対する応答を、ブデソニド処置及び非感作/非攻撃誘発コントロールと比較した。
免疫複合体で誘導された肺胞炎に対するrEV576の効果を調べるため、C57/BL6雄性マウス(約8週齢;体重約25g)にエバンズ・ブルー(EB)を0.3%含有する300μgのOvaを0、50、或いは250μgのrEV576と共に腹腔内投与した。その直後、各マウスに150μgの抗Ova抗体を鼻腔内適用した。抗体投与の4時間後にマウスを犠牲にし、肺を等張液で灌流し、BALを行って肺を切除してMPOを測定した。BAL中の細胞をカウントし、Diff−Quickで分染した[21]。実験は2回行った(各回とも4匹からなる群を使用)。
免疫複合体の生成とその局所的堆積は急性炎症反応を誘起する。血管漏洩は、気管支肺胞空間(BAL)に漏出したエバンズ・ブルーを測定することによって決定した。BALは遠心操作によって細胞から抽出し、吸収の測定にはELISAプレート・リーダーを用いた(OD610nmで測定)。
BALへの、免疫複合体で誘起された好中球動員は、rEV576の50μg投与(p<0.05、n=4)及び250μg投与(経静脈ルート)で阻害された。MAPK阻害剤は、50μgで顕著な効果を示さなかった(データは示さず)。
肺組織における、免疫複合体誘起の好中球動員を、肺組織切片によって更に検査した。気管支肺胞洗浄後、肺を切除(抗−Ovaの投与4時間後)し、4%の緩衝ホルムアルデヒドで固定化してH&Eによる標準顕微鏡分析を行った。気管支周囲の浸潤を、2名の独立した観察者が半定量的なスコア(0〜3)で評価した。
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Claims (17)
- 呼吸器疾患を治療又は予防する方法であって、補体C5に結合する剤の治療又は予防に有効な量を、それを必要とする被験体に投与することを含む方法。
- 呼吸器疾患を治療又は予防するための医薬の製造における、補体C5に結合する剤の治療又は予防に有効な量の使用。
- 前記剤は、補体C5がC5コンベルターゼによって補体C5aと補体C5b−9とに分解されるのを防ぐ作用をする、請求項1に記載の方法又は請求項2に記載の使用。
- 前記剤はIC500.2mg/mL未満でC5に結合する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- 前記剤は吸血性節足動物に由来する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- C5に結合する前記剤は、図2のアミノ酸配列の19〜168番アミノ酸を含む若しくはそれから構成されるタンパク質であるか、又はこのタンパク質の機能的等価物である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- C5に結合する前記剤は、図2のアミノ酸配列の1〜168番アミノ酸を含む若しくはそれから構成されるタンパク質であるか、又はこのタンパク質の機能的等価物である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- 前記剤は、請求項6又は7に記載のタンパク質をコードする核酸分子である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- 前記核酸分子は、図2のヌクレオチド配列の53〜507番塩基を含むか又はそれから構成される、請求項8に記載の方法又は使用。
- 前記核酸分子は、図2のヌクレオチド配列の1〜507番塩基を含むか又はそれから構成される、請求項9に記載の方法又は使用。
- 前記被験体は哺乳類であり、好ましくはヒトである、請求項1〜10のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- 前記剤は、被験体内においてできる限り多くの利用可能なC5、より好ましくは全ての利用可能なC5に結合するのに十分な用量で投与される、請求項1〜10のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- C5に結合する剤は、呼吸器疾患の治療のための他の薬物の投与も伴う治療計画の一部として投与される、請求項1〜12のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- 前記他の薬物は、ベクロメタゾン、ブデソニド、フルチカゾン等のステロイド;サルブタモールやテルブタリン等のベータ拮抗剤;イプラトロピウムやオキシトロピウム等の抗コリン作動剤;免疫抑制剤;細胞障害性薬剤;抗アレルギー剤(抗ヒスタミン等);ヒスタミンとセロトニン結合分子;ケモカインとサイトカイン拮抗剤;抗菌剤;及び抗菌剤からなる群から選択される一種以上である、請求項13に記載の使用方法。
- C5に結合する前記剤は、他の一種以上の薬物と同時に、順次的に又は別々に投与される、請求項13又は請求項14に記載の使用方法。
- 前記呼吸器疾患は、喘息(重度のものやステロイド抵抗性喘息を含む)、COPD、免疫複合体肺胞炎(有機粉塵、カビ、風媒アレルゲン、無機粉塵、化学薬品等への曝露によって引起されるものを含む);これらの病態の例として、限定されるものではない:農夫肺、ハト(乃至その他のトリ)愛好者肺、納屋熱、製粉工肺、金属加工者肺、加湿器熱、珪肺、塵肺症、アスベスト肺、綿工場熱、ベリリウム中毒症、中皮腫;全身性の或いは吸入性の薬物や化学薬剤である次のような剤、但し限定されるものではない:ブレオマイシン、マイトマイシン、ペニシリン、スルフォンアミド、セファロスポリン、アスピリン、NSAID(非ステロイド性抗炎症薬)、タルトラジン、ACE阻害剤、ヨウ素含有造影剤、非選択性β遮断剤、スキサメトニウム、ヘキサメトニウム、チオペントン、アミオダロン、ニトロフラントイン、パラコート、酸素、細胞障害性剤、テトラサイクリン、フェニトイン、カルバマゼピン、クロルプロパミド、ヒドララジン、プロカインアミド、イソニアジド、p−アミノサリチル酸への曝露によって引起される喘息、鼻炎、肺胞炎、びまん性線維性肺疾患;次のような物理的肺損傷、但しこれらに限定されるものではない:挫滅損傷、煙や熱いガスの吸入、爆発傷、放射線障害、吸引性肺炎、リポイド肺炎;次のような臓器移植、但しこれらに限定されるものではない:心臓移植、肺移植、骨髄移植、に伴う肺損傷;原因不明の繊維形成性肺胞炎;アレルギー性肉芽腫症(チャーグ−ストラウス症候群);ウェーゲナー肉芽腫症;閉鎖性気管支梢炎;間質肺線維症;嚢胞性繊維症;自己免疫及び結合組織疾患の次のような呼吸器症状、但しこれらに限定されるものではない:リウマチ疾患、全身性紅斑性狼瘡、全身性硬化症、結節性多発性動脈炎、多発筋炎、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、強直性脊椎炎、キャプラン症候群;グッドパスチュア症候群;肺胞蛋白症;突発性肺血鉄症;ヒスチオサイトーシスX;次のような好酸球増多性肺浸潤(PIE)症、但しこれらに限定されない:単純性肺好酸球増加症、遷延性肺好酸球増加症、喘息性気管支肺好酸球増加症、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、アスペルギルス腫、侵襲性アスペルギルス症、熱帯性肺好酸球増加症、過好酸球増加症候群、寄生虫の体内侵入;及びリンパ管平滑筋腫(LAM)からなる群から選択される疾患である、請求項1〜15のいずれか1項に記載の方法又は使用。
- 前記呼吸器疾患は喘息とCOPDからなる群から選択される疾患である、請求項16に記載の方法又は使用。
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