JP2022145696A - キャピラリ電気泳動、等電点および分子量分析のためのシステムおよび方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2016年1月13日に出願された米国仮特許出願第62/278,159号の利益を主張し、その開示内容は、参照によりその全体が本明細書に援用される。
本明細書に記載する実施形態は、概して、試料混合物を分子量および/または等電点によって電気泳動的に分離および/または分析するシステムおよび方法に関する。本明細書に記載するいくつかの実施形態は、試料中に存在する1種または複数の分析物の分離、検出、同定、分類および/または定量化に関する。より詳細には、本明細書に記載する実施形態は、キャピラリベースの電気泳動を行うように構成されたシステムおよび方法に関する。
本明細書では、キャピラリ電気泳動ならびに分析可視化および特性評価のためのシステムおよび方法について記載する。一態様では、システムは、ハウジングと、ハウジング内に配置されたカートリッジリテーナと、ハウジング内に配置された検出アセンブリと、ハウジング内に移動可能に配置された試薬トレイホルダとを含む。カートリッジリテーナは、キャピラリを有するキャピラリカートリッジを受けるように構成されている。検出アセンブリは、少なくとも1つの放射体と、第1検出器と、第2検出器とを含む。検出アセンブリは、第1検出器が少なくとも1つの放射体の第1出力を検出する第1形態と、第2検出器が少なくとも1つの放射体の第2出力を検出する第2形態との間で遷移するように構成されている。試薬トレイホルダは、キャピラリカートリッジのキャピラリを試薬体積(reagent volume)と流体連通させるように、カートリッジリテーナに対して移動するように構成されている。
本明細書では、試料のキャピラリ電気泳動、等電点および/または分子量分析を行う装置、方法およびシステムについて記載する。装置およびシステムは、電気泳動分離中および/または電気泳動分離後に試料中の分析物を検出するように構成される。
Claims (62)
- ハウジングと、
前記ハウジング内に配置されたカートリッジリテーナであって、キャピラリを有するキャピラリカートリッジを受けるように構成されているカートリッジリテーナと、
前記ハウジング内に配置された検出アセンブリであって、少なくとも1つの放射体と、第1検出器および第2検出器を含み、前記第1検出器が、前記少なくとも1つの放射体に関連する第1出力を検出する第1形態と、前記第2検出器が、前記少なくとも1つの放射体に関連する第2出力を検出する第2形態との間で遷移するように構成されている検出アセンブリと、
前記ハウジング内に移動可能に配置された試薬トレイホルダであって、前記キャピラリカートリッジのキャピラリを試薬体積と流体連通させるように、前記カートリッジリテーナに対して移動するように構成されている試薬トレイホルダと、
を含むシステム。 - 前記カートリッジリテーナは、前記ハウジング内の実質的に固定された位置に前記キャピラリカートリッジを維持する、請求項1に記載のシステム。
- 前記検出アセンブリは、前記キャピラリカートリッジに関連する1つまたは複数の特性に少なくとも部分的に基づいて前記第1形態と前記第2形態との間で遷移するように構成されている、請求項1に記載のシステム。
- 前記キャピラリは、前記キャピラリカートリッジが前記カートリッジリテーナ内に配置されているときに軸を画定し、
前記試薬トレイホルダは、前記ハウジング内で第1方向および第2方向に移動するように構成され、前記第1方向および前記第2方向は、前記軸に対して垂直である、請求項1に記載のシステム。 - 前記試薬トレイホルダは、第3方向に移動するように構成され、前記第3方向は、前記軸に対して平行である、請求項4に記載のシステム。
- 前記ハウジング内に配置された真空源であって、前記カートリッジリテーナに流体的に結合され、前記カートリッジリテーナは、前記キャピラリカートリッジが前記カートリッジリテーナ内に配置されているときに前記キャピラリカートリッジの一部を前記真空源と流体連通させるように構成されている、真空源をさらに含む、請求項1に記載のシステム。
- 前記少なくとも1つの放射体は、光源であり、
前記第1検出器は、前記光源から放射される、実質的に点に収束する光の第1ビームによって照明されている第1試料に関連する第1光出力を検出するように構成された第1光検出器であり、
前記第2検出器は、前記光源から放射される、光の列を形成する光の第2ビームによって照明されている第2試料に関連する第2光出力を検出するように構成された第2光検出器である、請求項1に記載のシステム。 - 前記光の第1ビームは、前記キャピラリカートリッジが前記カートリッジリテーナ内に配置されているときに前記キャピラリに沿った位置を照明するように構成され、前記第1光検出器は、前記光の第1ビームが前記キャピラリに沿った前記位置を照明するとき、前記キャピラリに収容された試料中の分析物を検出するように構成されている、請求項7に記載のシステム。
- 前記第1出力は、前記第1光出力の吸光度、前記第1光出力によって誘起される標識部分の蛍光、または前記第1光出力によって誘起される分析物の固有蛍光の少なくとも1つである、請求項7に記載のシステム。
- 前記第2出力は、前記第2光出力の吸光度、前記第2光出力によって誘起される標識部分の蛍光、または前記第2光出力によって誘起される分析物の固有蛍光の少なくとも1つである、請求項7に記載のシステム。
- 前記カートリッジリテーナは、電源に電気的に結合され、前記カートリッジリテーナは、前記キャピラリカートリッジが前記カートリッジリテーナ内に配置されているときに前記キャピラリを前記電源に電気的に結合するように構成されている、請求項7に記載のシステム。
- 前記光の第2ビームは、前記キャピラリカートリッジが前記カートリッジリテーナ内に配置されているときに前記キャピラリの長さを照明するように構成され、前記第2光検出器は、前記光の第2ビームが前記キャピラリの前記長さを照明するとき、前記キャピラリ内に収容された試料中の1つまたは複数の分析物を検出するように構成されている、請求項11に記載のシステム。
- 前記検出アセンブリは、前記第1検出器、前記第2検出器または前記少なくとも1つの放射体のうち少なくとも1つを校正するように構成されている、請求項1に記載のシステム。
- 前記カートリッジリテーナは、前記キャピラリカートリッジと接触して前記カートリッジリテーナ内で前記キャピラリカートリッジを位置合せするように構成された複数の接触面を含む、請求項1に記載のシステム。
- ハウジングと、
前記ハウジング内に配置されたカートリッジリテーナであって、第1側部および第2側部を含み、前記第1側部および前記第2側部は、実質的に平行であり、かつそれらの間に、キャピラリカートリッジの少なくとも一部を受けるように構成された空間を画定し、前記第1側部は、第1開口部および第2開口部を画定し、前記第2側部は、前記第1側部の前記第1開口部に実質的に位置合せされた第1開口部を画定し、前記第2側部は、前記第1側部の前記第2開口部に実質的に位置合せされた第2開口部を画定する、カートリッジリテーナと、
前記ハウジング内に配置された光源であって、光の第1ビームおよび光の第2ビームを放射するように構成され、前記光の第1ビームの少なくとも一部は、前記第1側部の前記第1開口部および前記第2側部の前記第1開口部を通るように向けられるように構成され、前記光の第2ビームの少なくとも一部は、前記第1側部の前記第2開口部および前記第2側部の前記第2開口部を通るように向けられるように構成されている、光源と、
前記ハウジング内に配置された検出アセンブリであって、前記検出アセンブリが、前記光の第1ビームの少なくとも一部に関連する光を検出する第1形態と、前記検出アセンブリが、前記光の第2ビームの少なくとも一部に関連する光を検出する第2形態との間で遷移されるように構成されている検出アセンブリと
を含むシステム。 - 前記カートリッジリテーナは、前記第1側部と前記第2側部との間に画定された前記空間内に第1キャピラリカートリッジおよび第2キャピラリカートリッジの少なくとも一方を受けるように構成され、前記光の第1ビームは、前記カートリッジリテーナが前記第1キャピラリカートリッジを受けるときに前記第1キャピラリカートリッジのキャピラリの一部を照明するように構成され、前記光の第2ビームは、前記カートリッジリテーナが前記第2キャピラリカートリッジを受けるときに前記第2キャピラリカートリッジのキャピラリの一部を照明するように構成されている、請求項15に記載のシステム。
- 前記カートリッジリテーナは、圧力源に流体的に結合され、前記カートリッジリテーナは、前記キャピラリカートリッジの少なくとも前記一部が前記第1側部と前記第2側部との間の前記空間内に配置されているときに前記キャピラリカートリッジを前記圧力源と流体連通させるように構成され、前記圧力源は、前記キャピラリカートリッジの一部内の圧力を選択的に上昇または下降させるように構成されている、請求項15に記載のシステム。
- 前記カートリッジリテーナは、弁アクチュエータを含み、前記弁アクチュエータは、前記キャピラリカートリッジのピンチ弁と係合して、前記ピンチ弁を第1形態と第2形態との間で移動させるように構成され、前記キャピラリカートリッジのキャピラリ内のバルク流は、前記ピンチ弁が前記第2形態にあるときに実質的に阻止される、請求項17に記載のシステム。
- 前記カートリッジリテーナは、前記キャピラリカートリッジが、前記第1側部と前記第2側部との間に画定された前記空間内に配置されているときに前記キャピラリカートリッジと接触しているように構成された複数の面を含む、請求項15に記載のシステム。
- 前記第1側部の前記第1開口部と前記第2側部の前記第1開口部とは、実質的に直径を有する円であり、
前記第1側部の前記第2開口部と前記第2側部の前記第2開口部とは、長さおよび幅を有する実質的に細長い開口部であり、前記第2開口部の前記長さは、前記第2開口部の前記幅より大きい、請求項15に記載のシステム。 - 前記第1側部は、内面と、前記内面と反対側の外面とを有し、および前記第2側部は、内面と、前記第2側部の前記内面と反対側の外面とを有し、前記第1側部の前記内面と前記第2側部の前記内面とは、前記空間を画定し、
前記検出アセンブリは、前記第1側部の前記外面に隣接する第1部と、前記第2側部の前記外面と隣接する第2部とを含み、前記検出アセンブリの前記第2部は、前記第2側部の前記外面から間隔をあけて配置されている、請求項15に記載のシステム。 - 前記ハウジング内に移動可能に配置された試薬トレイホルダであって、前記キャピラリカートリッジが、前記第1側部と前記第2側部との間に画定された前記空間内に配置されているときに前記キャピラリカートリッジのキャピラリを試薬体積と流体連通させるように、前記カートリッジリテーナに対して移動するように構成された試薬トレイホルダをさらに含む、請求項15に記載のシステム。
- 前記カートリッジリテーナは、係合部を含み、前記係合部は、前記試薬トレイホルダが前記カートリッジリテーナに対して移動されるときに前記試薬トレイホルダの表面と選択的に接触されるように構成されている、請求項22に記載のシステム。
- ハウジングと、
前記ハウジング内に配置されたカートリッジリテーナであって、キャピラリを有するキャピラリカートリッジを受けるように構成され、前記キャピラリカートリッジと接触し、かつ前記カートリッジリテーナ内で前記キャピラリカートリッジを位置合せするように構成された複数の接触面を含む、カートリッジリテーナと、
前記ハウジング内に配置された検出アセンブリであって、第1放射体および第2放射体と、第1検出器および第2検出器を含み、少なくとも部分的に前記キャピラリカートリッジに関連する1つまたは複数の特性に基づいて第1形態と第2形態との間で遷移するように構成され、前記第1検出器は、前記検出アセンブリが前記第1形態にあるとき、前記第1放射体に関連する出力を検出するように構成され、前記第2検出器は、前記検出アセンブリが前記第2形態にあるとき、前記第2放射体に関連する出力を検出するように構成されている、検出アセンブリと、
前記ハウジング内に移動可能に配置された試薬トレイホルダであって、前記キャピラリカートリッジのキャピラリを試薬体積と流体連通させるように、前記カートリッジリテーナに対して移動するように構成された試薬トレイホルダと、
前記ハウジング内に配置された制御アセンブリであって、前記キャピラリカートリッジが前記カートリッジリテーナ内に配置されているとき、前記キャピラリカートリッジに関連するデータを受け取るように構成され、前記キャピラリカートリッジに関連する前記データに基づいて、前記検出アセンブリを前記第1形態または前記第2形態にするための信号を前記検出アセンブリに送るように構成された制御アセンブリと、
を含むシステム。 - 前記カートリッジリテーナは、前記カートリッジリテーナの前記接触面の少なくとも1つが前記キャピラリカートリッジと接触しているときに前記制御アセンブリに信号を送信するように構成されている、請求項24に記載のシステム。
- 前記制御アセンブリは、前記試薬トレイホルダを前記カートリッジリテーナに対して移動させるように動作可能な1つまたは複数の信号を送信するように構成されている、請求項24に記載のシステム。
- 前記ハウジング内に配置された圧力源であって、前記カートリッジリテーナと流体連通しており、前記カートリッジリテーナは、前記キャピラリカートリッジが前記カートリッジリテーナ内に配置されているときに前記キャピラリカートリッジを前記圧力源と流体連通させるように構成され、前記圧力源は、前記キャピラリカートリッジの第1部内の圧力を低下させるように構成され、かつ前記キャピラリカートリッジの第2部内の圧力を上昇させるように構成されている、圧力源をさらに含む、請求項24に記載のシステム。
- 前記キャピラリカートリッジの前記第1部は、前記キャピラリによって画定された内腔を含み、前記キャピラリカートリッジの前記第1部内の前記圧力の低下は、前記キャピラリが前記試薬体積と流体連通しているときに前記キャピラリの前記内腔内に試薬を引き込むように作動可能である、請求項27に記載のシステム。
- 1つまたは複数の流体流路を介して前記キャピラリリテーナまたは前記試薬トレイホルダの少なくとも一方と流体連通している流体リザーバをさらに含み、
前記制御アセンブリは、前記1つまたは複数の流体流路内の圧力に関連する信号を受け取るように構成され、かつ少なくとも部分的に前記圧力に基づいて前記流体リザーバの充填容積を求めるように構成され、前記制御アセンブリの一部は、前記流体リザーバの前記充填容積が閾値充填レベル未満であるときに表示を行うように構成されている、請求項24に記載のシステム。 - 前記カートリッジリテーナは、ピンチ弁アクチュエータを含み、前記制御装置は、前記ピンチ弁アクチュエータを前記カートリッジリテーナに対して第1位置と第2位置との間で移動させる命令を示す信号をモータに送信するように構成され、前記ピンチ弁アクチュエータは、前記キャピラリカートリッジが前記カートリッジリテーナ内に配置され、かつ前記ピンチ弁アクチュエータが前記第2位置にあるときに前記キャピラリカートリッジのピンチ弁と接触するように構成されている、請求項24に記載のシステム。
- カートリッジ本体と、
分析物を含む試料を収容するように構成された内部容積を画定するキャピラリであって、前記カートリッジ本体内に配置され、前記内部容積の第1端部を画定する第1端部と、前記内部容積の第2端部を画定する第2端部とを有するキャピラリと、
前記カートリッジ本体内に配置されている、緩衝液を収容する導電性バイアルであって、第1隔壁および第2隔壁を有し、前記緩衝液は、前記内部容積が前記試料を収容しているとき、前記試料が前記バイアルに電気的に結合されるように、前記第1隔壁を介して前記キャピラリの前記内部容積の前記第1端部に電気的に結合される、導電性バイアルと、
前記導電性バイアルに電気的に結合された第1電極と、
第2電極であって、前記導電性バイアルと前記キャピラリの前記第2端部との間で前記キャピラリに電気的に結合され、それにより、前記第1電極、前記第2電極および前記試料が、前記内部容積が前記試料を収容しているときに回路の一部を画定する、第2電極と
を含む装置。 - 前記導電性バイアルは、導電性プラスチックで構成されている、請求項31に記載の装置。
- 前記流体が前記キャピラリの前記内部容積内に吸引され得るように、前記試料を収容する試料ウェル内に挿入されるように構成された入口チューブをさらに含む、請求項31に記載の装置。
- 前記入口チューブは、カーボンで構成されている、請求項33に記載の装置。
- 前記第2隔壁は、カートリッジ本体が分析器内に配置され、それにより、前記キャピラリが前記導電性バイアルを介して前記分析器に流体的に結合されるときに破壊されるように構成されている、請求項31に記載の装置。
- 前記カートリッジ本体は、圧力ポートおよび真空ポートを画定し、前記圧力ポートは、圧力源に流体的に結合されるように構成され、前記真空ポートは、真空源に流体的に結合されるように構成されている、請求項31に記載の装置。
- 前記カートリッジ内に配置され、かつ前記カートリッジ本体によって画定されたポートから延在し、それにより、前記ポートを介して分析器の圧力源に流体的に結合されるように構成されている圧力ラインであって、試薬が前記キャピラリ内に吸引されている間、前記カートリッジの外部の試薬バイアルが前記圧力ラインを介して加圧され得るように前記試薬バイアル内に延在するように構成された圧力ラインをさらに含む、請求項31に記載の装置。
- 前記キャピラリは、前記カートリッジ本体の長手方向軸に対して平行に配置され、および
前記カートリッジ本体は、前記長手方向軸が垂直であるように分析器内に配置されるように構成されている、請求項31に記載の装置。 - 分析器内に配置されるように構成されたカートリッジ本体と、
前記カートリッジ本体内に配置されたキャピラリであって、分析物分離のために構成されたキャピラリと、
前記カートリッジ本体内に配置されかつ前記キャピラリの端部に結合され、それにより、前記分析器が前記キャピラリに圧力または真空の少なくとも一方をかけることができる、チューブと、
前記カートリッジ本体によって画定された開口部であって、前記チューブの少なくとも一部は、前記開口部を介して露出され、前記開口部は、前記分析器のピンチ弁アクチュエータの一部を受けるように構成され、前記ピンチ弁アクチュエータは、前記チューブをはさむように構成されている、開口部と
を含む装置。 - 導電性バイアルと前記キャピラリの内部容積との間に配置された膜をさらに含み、前記膜は、前記導電性バイアルから前記キャピラリの前記内部容積へのバルク流体流を阻止するように構成されている、請求項39に記載の装置。
- 前記膜は、前記導電性バイアルから前記キャピラリの前記内部容積へのイオン流を可能にするように構成されている、請求項39に記載の装置。
- 前記ピンチ弁アクチュエータは、前記キャピラリ内に配置された試料が流れることを妨げられるように前記チューブをはさむように構成されている、請求項39に記載の装置。
- 前記分析物が前記キャピラリ内で移動するように、前記キャピラリの長さに沿って電位を印加するように構成された複数の電極をさらに含む、請求項39に記載の装置。
- 前記ピンチ弁アクチュエータは、前記分析物が前記キャピラリ内で移動する間、前記バルク流が阻止されるように前記チューブをはさむように構成されている、請求項43に記載の装置。
- 前記チューブは、流体が前記キャピラリ内に吸引されるように前記キャピラリに前記圧力または前記真空の少なくとも一方をかけるように構成されている、請求項39に記載の装置。
- 前記キャピラリは、前記分析物の移動が光学的に検出され得るように前記カートリッジ本体の窓の後方に配置されている、請求項39に記載の装置。
- スリットプレートをさらに含み、前記スリットプレートは、前記分析物の前記移動が前記キャピラリの一部を介して光学的に検出され得るように前記キャピラリの直径より小さい幅を有するスリットを画定する、請求項46に記載の装置。
- 前記キャピラリは、前記カートリッジ本体の長手方向軸に対して平行に配置され、
前記カートリッジ本体は、前記長手方向軸が垂直であるように分析器内に配置されるように構成されている、請求項39に記載の装置。 - 分析器内に配置されるように構成されたカートリッジ本体と、
前記カートリッジ本体内に配置されたキャピラリであって、分析物分離のために構成され、前記カートリッジ本体内に配置された出力を有するキャピラリと、
前記キャピラリ出力に結合された出口チューブと、
前記出口チューブに流体的に結合された出口ポートと、
前記カートリッジ本体内に画定されかつ前記出口チューブに流体的に結合された廃棄物容器であって、液体は、前記出口チューブから前記出口ポートに流れることを妨げるように構成された廃棄物容器と
を含む装置。 - 前記廃棄物容器は、前記液体を収容するように構成された吸収性材料を含む、請求項49に記載の装置。
- 前記廃棄物容器は、気体が前記出口ポートを通って流れることを可能にする一方、液体が前記出口ポートを通って流れることを妨げるように構成されている、請求項49に記載の装置。
- 前記液体は、第1アッセイに関連する第1液体であり、前記廃棄物容器は、前記装置が再使用可能であるように、第2アッセイに関連する第2液体が前記出口チューブから前記出口ポートに流れることを妨げるように構成されている、請求項49に記載の装置。
- 前記分析物は、複数のアッセイからのアッセイに関連する第1分析物であり、および前記カートリッジ本体は、前記カートリッジ本体が前記複数のアッセイからのアッセイ間で前記分析器から取り外され得るように、前記分析器内に取外し可能に配置されるように構成され、前記装置は、前記分析器が、前記カートリッジ本体を用いて行われる前記複数のアッセイを識別することができるように、前記カートリッジ本体に関連する一意の識別子をさらに含む、請求項49に記載の装置。
- 前記廃棄物容器は、所定量の液体が前記出口ポートに流れることを妨げるように構成され、前記所定量の液体は、所定数のアッセイに関連する、請求項53に記載の装置。
- 前記キャピラリは、前記カートリッジ本体の長手方向軸に対して平行に配置され、
前記カートリッジ本体は、前記長手方向軸が垂直であるように分析器内に配置されるように構成されている、請求項49に記載の装置。 - 分析器内に配置されるように構成されたカートリッジ本体と、
前記カートリッジ本体内に配置されたキャピラリであって、等電点に基づいて分析物を分離するように構成されたキャピラリと、
前記カートリッジ本体内のバイアル内に配置された緩衝液であって、前記キャピラリの長さに沿ってpH勾配を引き起こすように構成された緩衝液と、
前記緩衝液と前記キャピラリとの間に配置された第1隔壁と、
前記緩衝液と前記分析器との間に配置された第2隔壁であって、圧力または真空の少なくとも一方が前記バイアルにかけられ得るように前記分析器によって破壊されるように構成された第2隔壁と
を含む装置。 - 前記カートリッジ本体は、分離中に前記分析物が撮像され得るように窓を画定する、請求項56に記載の装置。
- 前記窓は、前記キャピラリ内の複数の位置で前記分析物が撮像され得るように構成されている、請求項57に記載の装置。
- 前記バイアルに結合された第1電極と、
前記キャピラリの底部に結合された入口チューブに結合された第2電極と、
をさらに含む、請求項56に記載の装置。 - 前記バイアルおよび前記出口チューブは、前記キャピラリの導電率より大きい導電率を有する、請求項59に記載の装置。
- 前記第1電極は、前記バイアルおよび前記緩衝液を介して、前記キャピラリによって画定された内部容積の上部に電気的に結合されるように構成されている、請求項59に記載の装置。
- 前記第1電極および前記第2電極は、前記キャピラリの内部容積内に配置された分析物を含有する流体を含む電気回路を完成するように集合的に構成されている、請求項59に記載の装置。
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