JP2021532836A - アデノウイルス ペントンベースのゼリーロールフォールドドメイン由来である多量体化ポリペプチド - Google Patents
アデノウイルス ペントンベースのゼリーロールフォールドドメイン由来である多量体化ポリペプチド Download PDFInfo
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Abstract
Description
[式1]
ここで、
Aはアデノウイルスペントンベースタンパク質のN末端アミノ酸ストレッチ、
Bはアデノウイルスペントンベースタンパク質のアミノ酸ストレッチ、
CはアデノウイルスペントンベースのC末端アミノ酸ストレッチ;
ここで、Bは前記アデノウイルスペントンベースの配列にAおよびCの間に位置するアミノ酸ストレッチであり、
ここでA、BおよびCは、前記アデノウイルスペントンベースタンパク質のゼリーロールフォールドドメインを形成する。
[配21]
ここで、
アミノ酸ストレッチAは、C末端のZ1の前のT残基またはZ1からZ15のアミノ酸で終わり、
U は、いずれのアミノ酸であるかアミノ酸が存在せず、
X1 は、EまたはG であり、
X2 は、EまたはS であり、
X3 は、LまたはV であり、
X4 は、AまたはS であり、
X5 は、LまたはQ であり、
X6 は、YまたはE であり、
X7 は、RまたはK であり、
X8 は、VまたはL であり、
X9 は、VまたはI であり、
X10 は、FまたはY であり、
X11 は、TまたはS であり、
X12 は、AまたはTまたはIまたはG であり、
X13 は、SまたはG であり、
X14 は、FまたはL であり、
X15 は、EまたはD であり、
X16 は、AまたはG であり、
X17 は、DまたはQ であり、
X18 は、LまたはM であり、
X19 は、HまたはR であり、
Z1 は、もし存在するのであれば、N であり、
Z2 は、もし存在するのであれば、M であり、
Z3 は、もし存在するのであれば、P であり、
Z4 は、もし存在するのであれば、N であり、
Z5 は、もし存在するのであれば、VまたはI であり、
Z6 は、もし存在するのであれば、N であり、
Z7 は、もし存在するのであれば、EまたはD であり、
Z8 は、もし存在するのであれば、YまたはF であり、
Z9 は、もし存在するのであれば、M であり、
Z10 は、もし存在するのであれば、FまたはSまたはY であり、
Z11 は、もし存在するのであれば、TまたはS であり、
Z12 は、もし存在するのであれば、SまたはN であり、
Z13 は、もし存在するのであれば、K であり、
Z14 は、もし存在するのであれば、F であり、
Z15 は、もし存在するのであれば、K である。
[配22]
ここで、
アミノ酸ストレッチBは、N末端のZ17からZ27またはZ27の後のアミノ酸Qで始まり、
アミノ酸ストレッチBは、C末端のZ28の前のアミノ酸LまたはZ28からZ30のアミノ酸で終わり、
Z17 は、もし存在するのであれば、LまたはS であり
Z18 は、もし存在するのであれば、TまたはPまたはC であり、
Z19 は、もし存在するのであれば、TまたはP であり、
Z20 は、もし存在するのであれば、PまたはSまたはAまたはR であり、
Z21 は、もし存在するのであれば、NまたはD であり、
Z22 は、もし存在するのであれば、GまたはV であり、
Z23 は、もし存在するのであれば、HまたはT であり、
Z24 は、もし存在するのであれば、C であり、
Z25 は、もし存在するのであれば、G であり、
Z26 は、もし存在するのであれば、AまたはVまたはS であり、
Z27 は、もし存在するのであれば、EまたはQ であり、
X20 は、LまたはM であり、
X21 は、QまたはK であり、
X22 は、QまたはRまたはS であり、
X23 は、VまたはI であり、
X24 は、SまたはN であり、
X25 は、YまたはF であり、
X26 は、AまたはV であり、
Z28 は、もし存在するのであれば、MまたはL であり、
Z29 は、もし存在するのであれば、P であり、
Z30 は、もし存在するのであれば、VまたはF である。
[配23]
ここで、
アミノ酸ストレッチCは、N末端のZ31からZ33またはZ33の後のアミノ酸Aで始まり、
Z31 は、もし存在するのであれば、N であり、
Z32 は、もし存在するのであれば、V であり、
Z33 は、もし存在するのであれば、P であり、
X27 は、RまたはSまたはG であり、
X28 は、VまたはI であり、
X29 は、YまたはH であり、
X30 は、AまたはS であり、
X31 は、RまたはK である。
[式2]
ここで
a は一般式(I)のAをコードする核酸配列であり、
b は一般式(I)のBをコードする核酸配列であり、
c は一般式(I)のCをコードする核酸配列であり、
I1、I2 はそれぞれ核酸配列であり、
is1からis4 はそれぞれ独立に、少なくとも一つの挿入部を有する核酸配列である。
[配27]
VAJB−CHIK (配列番号 28):
[配28]
Claims (36)
- 式(I)の構造を有するポリペプチドであって、
[式1]
ここで、
Aはアデノウイルスペントンベースタンパク質のN末端アミノ酸ストレッチ;
Bはアデノウイルスペントンベースタンパク質のアミノ酸ストレッチ;
CはアデノウイルスペントンベースのC末端アミノ酸ストレッチ;であり、
ここで、Bは前記アデノウイルスペントンベースの配列中のAおよびCの間に位置するアミノ酸ストレッチであり、
ここで、A、BおよびCは、前記アデノウイルスペントンベースタンパク質のゼリーロールフォールドドメインを形成し、
L1およびL2は、互いに独立に、オリゴペプチド、ポリペプチド、タンパク質、タンパク質複合体からなる群から選ばれ、
ここで、前記オリゴペプチド、ポリペプチド、タンパク質、タンパク質複合体はそれぞれ、本質的に非アデノウイルスであるか、または、アデノウイルスである場合は前記アミノ酸ストレッチA、BおよびCが由来するアデノウイルスの血清型と比して異なる血清型を有するアデノウイルス由来である、
ことを特徴とするポリペプチド。 - 前記アミノ酸ストレッチAが、前記アデノウイルスのゼリーロールフォールドドメインのβシート1,2および3を有する、請求項1に記載のポリペプチド。
- 前記アミノ酸ストレッチBが前記アデノウイルスのゼリーロールフォールドドメインのβシート4および5を含む、請求項1または2に記載のポリペプチド。
- 前記アミノ酸ストレッチCが前記アデノウイルスのゼリーロールフォールドドメインのβシート6,7および8を含む、請求項1から3のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記アミノ酸ストレッチA、BおよびCが、ヒトアデノウイルス血清型2、ヒトアデノウイルス血清型3、ヒトアデノウイルス血清型4、ヒトアデノウイルス血清型5、ヒトアデノウイルス血清型7、ヒトアデノウイルス血清型11、ヒトアデノウイルス血清型12、ヒトアデノウイルス血清型17、ヒトアデノウイルス血清型25、ヒトアデノウイルス血清型35、ヒトアデノウイルス血清型37、ヒトアデノウイルス血清型41、ゴリラアデノウイルス、チンパンジーアデノウイルス、サルアデノウイルス血清型18、サルアデノウイルス血清型20、サルアデノウイルス血清型49、アカゲザルアデノウイルス血清型51、アカゲザルアデノウイルス52、アカゲザルアデノウイルス53、のペントンベースからなる群からそれぞれ独立に選ばれるアミノ酸配列を有する、
請求項1から4のいずれか1項に記載のポリペプチド。 - 前記アミノ酸ストレッチAが次のコンセンサス配列(配列番号21)
[配21]
を有し、
ここで、アミノ酸ストレッチAは、C末端のZ1の前のT残基またはZ1からZ15のアミノ酸で終わり、
U は、いずれのアミノ酸であるかアミノ酸ではなく、
X1 は、EまたはG であり、
X2 は、EまたはS であり、
X3 は、LまたはV であり、
X4 は、AまたはS であり、
X5 は、LまたはQ であり、
X6 は、YまたはE であり、
X7 は、RまたはK であり、
X8 は、VまたはL であり、
X9 は、VまたはI であり、
X10 は、FまたはY であり、
X11 は、TまたはS であり、
X12 は、AまたはTまたはIまたはG であり、
X13 は、SまたはG であり、
X14 は、FまたはL であり、
X15 は、EまたはD であり、
X16 は、AまたはG であり、
X17 は、DまたはQ であり、
X18 は、LまたはM であり、
X19 は、HまたはR であり、
Z1 は、もし存在するのであれば、N であり、
Z2 は、もし存在するのであれば、M であり、
Z3 は、もし存在するのであれば、P であり、
Z4 は、もし存在するのであれば、N であり、
Z5 は、もし存在するのであれば、VまたはI であり、
Z6 は、もし存在するのであれば、N であり、
Z7 は、もし存在するのであれば、EまたはD であり、
Z8 は、もし存在するのであれば、YまたはF であり、
Z9 は、もし存在するのであれば、M であり、
Z10 は、もし存在するのであれば、FまたはSまたはY であり、
Z11 は、もし存在するのであれば、TまたはS であり、
Z12 は、もし存在するのであれば、SまたはN であり、
Z13 は、もし存在するのであれば、K であり、
Z14 は、もし存在するのであれば、F であり、
Z15 は、もし存在するのであれば、K である、
請求項5に記載のポリペプチド。 - 前記アミノ酸ストレッチAが、次の配列;
UniProt Acc. No.Q2Y0H9の1から48位から選ばれるアミノ酸から129から144位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.P03276の1から48位から選ばれるアミノ酸から129から144位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.Q2KSF3の1から44位から選ばれるアミノ酸から125から140位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.P12538の1から48位から選ばれるアミノ酸から129から144位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.Q9JFT6の1から48位から選ばれるアミノ酸から129から144位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.D2DM93の1から48位から選ばれるアミノ酸から129から144位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.P36716の1から38位から選ばれるアミノ酸から119から134位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.F1DT65の1から35位から選ばれるアミノ酸から116から131位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.M0QUK0の1から43位から選ばれるアミノ酸から124から139位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.Q7T941の1から49位から選ばれるアミノ酸から130から145位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.Q912J1の1から35位から選ばれるアミノ酸から116から131位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.F8WQN4の1から46位から選ばれるアミノ酸から127から142位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.E5L3Q9の1から49位から選ばれるアミノ酸から130から145位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.G9G849の1から44位から選ばれるアミノ酸から125から140位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.H8PFZ9の1から46位から選ばれるアミノ酸から127から142位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.F6KSU4の1から45位から選ばれるアミノ酸から126から141位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.F2WTK5の1から46位から選ばれるアミノ酸から127から142位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.A0A0A1EWW1の1から43位から選ばれるアミノ酸から124から139位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.A0A0A1EWX7の1から43位から選ばれるアミノ酸から124から139位から選ばれるアミノ酸、
および
UniProt Acc. No.A0A0A1EWZ7の1から44位から選ばれるアミノ酸から125から140位から選ばれるアミノ酸、
からなる群から選ばれる請求項6に記載のポリペプチド。 - 前記一般式(I)の前記アミノ酸ストレッチBが次のコンセンサス配列(配列番号22)
[配22]
を有し、
ここで、
アミノ酸ストレッチBは、N末端のZ17からZ27またはZ27の後のアミノ酸Qで始まり、
アミノ酸ストレッチBは、C末端のZ28の前のアミノ酸またはZ28からZ30のアミノ酸で終わり、
Z17 は、もし存在するのであれば、LまたはS であり
Z18 は、もし存在するのであれば、TまたはPまたはC であり、
Z19 は、もし存在するのであれば、TまたはP であり、
Z20 は、もし存在するのであれば、PまたはSまたはAまたはR であり、
Z21 は、もし存在するのであれば、NまたはD であり、
Z22 は、もし存在するのであれば、GまたはV であり、
Z23 は、もし存在するのであれば、HまたはT であり、
Z24 は、もし存在するのであれば、C であり、
Z25 は、もし存在するのであれば、G であり、
Z26 は、もし存在するのであれば、AまたはVまたはS であり、
Z27 は、もし存在するのであれば、EまたはQ であり、
X20 は、LまたはM であり、
X21 は、QまたはK であり、
X22 は、QまたはRまたはS であり、
X23 は、VまたはI であり、
X24 は、SまたはN であり、
X25 は、YまたはF であり、
X26 は、AまたはV であり、
Z28 は、もし存在するのであれば、MまたはL であり、
Z29 は、もし存在するのであれば、P であり、
Z30 は、もし存在するのであれば、VまたはF である、
請求項5から7のいずれか1項に記載のポリペプチド。 - 前記アミノ酸ストレッチBが、次の配列;
UniProt Acc. No.Q2Y0H9の398から409位から選ばれるアミノ酸から440から443位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.P03276の425から436位から選ばれるアミノ酸から467から470位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.Q2KSF3の379から390位から選ばれるアミノ酸から421から444位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.P12538の425から436位から選ばれるアミノ酸から467から470位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.Q9JFT6の398から409位から選ばれるアミノ酸から440から443位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.D2DM93の415から426位から選ばれるアミノ酸から457から460位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.P36716の351から362位から選ばれるアミノ酸から393から397位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.F1DT65の370から381位から選ばれるアミノ酸から413から416位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.M0QUK0の388から399位から選ばれるアミノ酸から440から443位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.Q7T941の445から456位から選ばれるアミノ酸から497から500位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.Q912J1の372から383位から選ばれるアミノ酸から414から417位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.F8WQN4の362から373位から選ばれるアミノ酸から404から407位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.E5L3Q9の416から427位から選ばれるアミノ酸から458から461位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.G9G849の372から383位から選ばれるアミノ酸から420から423位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.H8PFZ9の353から364位から選ばれるアミノ酸から395から398位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.F6KSU4の358から369位から選ばれるアミノ酸から400から403位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.F2WTK5の356から367位から選ばれるアミノ酸から398から401位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.A0A0A1EWW1の352から363位から選ばれるアミノ酸から394から397位から選ばれるアミノ酸、
UniProt Acc. No.A0A0A1EWX7の350から361位から選ばれるアミノ酸から392から395位から選ばれるアミノ酸、
および
UniProt Acc. No.A0A0A1EWZ7の351から362位から選ばれるアミノ酸から393から396位から選ばれるアミノ酸、
からなる群から選ばれる請求項8に記載のポリペプチド。 - 前記アミノ酸ストレッチCが、次の配列;
UniProt Acc. No.Q2Y0H9の492から495位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.P03276の519から522位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.Q2KSF3の466から469位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.P12538の492から495位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.Q9JFT6の465から468位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.D2DM93の482から485位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.P36716の419から422位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.F1DT65の438から441位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.M0QUK0の455から458位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.Q7T941の522から525位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.Q912J1の439から442位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.F8WQN4の429から432位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.E5L3Q9の483から486位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.G9G849の445から448位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.H8PFZ9の420から423位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.F6KSU4の425から428位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.F2WTK5の423から426位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.A0A0A1EWW1の419から422位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
UniProt Acc. No.A0A0A1EWX7の417から420位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
および
UniProt Acc. No.A0A0A1EWZ7の418から421位から選ばれるアミノ酸からC末端アミノ酸、
からなる群から選ばれる請求項10に記載のポリペプチド。 - 前記アミノ酸ストレッチAが、UniProt Acc. No.Q2Y0H9の1から132位の配列を有し、
前記アミノ酸ストレッチBが、UniProt Acc. No.Q2Y0H9の407から442位の配列を有し、
前記アミノ酸ストレッチCが、UniProt Acc. No.Q2Y0H9の493から544位の配列を有する、
請求項1から11のいずれか1項に記載のポリペプチド。 - 前記L1および/またはL2がアミノ酸GおよびSから選ばれる4から40アミノ酸の配列を有するオリゴペプチドである、
請求項1から12のいずれか1項に記載のポリペプチド。 - 前記L1および/またはL2が独立にGGGS(配列番号24)およびGGSGGS(配列番号25)からなる群から選ばれる、
請求項13に記載のポリペプチド。 - 前記L1は、前記アミノ酸ストレッチA、BおよびCが由来するアデノウイルス血清型と比して異なるアデノウイルス血清型を有するアデノウイルスペントンベースのRGDループを含むアデノウイルス配列である、および/または
前記L2は、前記アミノ酸ストレッチA、BおよびCが由来するアデノウイルス血清型と比して異なるアデノウイルス血清型を有するアデノウイルスペントンベースの可変ループを含むアデノウイルス配列である、
請求項1から12のいずれか1項に記載のポリペプチド。 - 前記L1は、前記アミノ酸ストレッチA、BおよびCが由来するアデノウイルス血清型と比して異なるアデノウイルス血清型を有するアデノウイルスペントンベースのクラウンドメインの大きなフラグメントであり、
前記L2は、前記アミノ酸ストレッチA、BおよびCが由来するアデノウイルス血清型と比して異なるアデノウイルス血清型を有するアデノウイルスペントンベースのクラウンドメインの小さなフラグメントである、
請求項15に記載のポリペプチド。 - 前記大きなフラグメントおよび前記小さなフラグメントが、同じアデノウイルスのペントンベースタンパク質に由来する、請求項16に記載のポリペプチド。
- 前記大きなフラグメントおよび前記小さなフラグメントが、異なるアデノウイルスのペントンベースタンパク質に由来する、請求項16に記載のポリペプチド。
- 前記RGDループおよび/または前記可変ループに、一以上のアデノウイルスでない配列が挿入された、請求項15から18のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記L1および/またはL2が抗原を含む、請求項1から19のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記抗原が、感染因子の抗原および腫瘍抗原からなる群から選ばれる、請求項20に記載のポリペプチド。
- 前記L1および/又はL2に、核酸、薬剤、ラベル、および/又は、生物的結合対の結合パートナーが結合する、請求項1から21のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 請求項1から22のいずれか1項に記載のポリペプチドをコードする、核酸。
- 前記is1からis4が、制限酵素の認識配列およびホーミングエンドヌクレアーゼの認識配列からなる群から選ばれる、請求項24に記載のポリペプチド。
- 前記is1がEcoRI部位、前記is2がRsrII部位、前記is3がSacI部位、および前記is4がXbaI部位を含む、請求項25に記載の核酸。
- 請求項23から26のいずれか1項に記載の核酸を有するベクター。
- 請求項23から26のいずれか1項に記載の核酸を発現カセット内に含む、請求項27に記載のベクター。
- 請求項23から26のいずれか1項に記載の核酸または請求項27または28に記載のベクターを含む、組み換え宿主細胞。
- 請求項1から22のいずれかに記載のポリペプチドの五量体複合体。
- 請求項30に記載の12個の五量体複合体を含む、ウイルス様粒子(Virus Like Particles (VLP))。
- 請求項1から22のいずれか1項に記載のポリペプチド、請求項23に記載の核酸、請求項27または28に記載のベクター、請求項29に記載の宿主細胞、または請求項31に記載のVLPの医薬品としての使用。
- 請求項1から22のいずれか1項に記載のポリペプチド、請求項23に記載の核酸、請求項27または28に記載のベクター、請求項29に記載の宿主細胞、または請求項31に記載のVLPを、薬学的に許容可能な担体、賦形剤および/または希釈剤の少なくとも一つ、とともに含む、薬学組成物。
- 請求項29に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、請求項1から22のいずれか1項に記載のポリペプチドの製造方法であって、
請求項29に記載の宿主細胞を培養する工程を含み、
前記宿主細胞は、請求項23に記載の核酸を含む請求項28に記載のベクターを有し、
前記ポリペプチドの発現が可能である状態下である、
ことを特徴とする、ポリペプチドの製造方法。 - 請求項31に記載のVLPの製造方法であって、請求項1から12のいずれか1項に記載のポリペプチドがVLPに会合することが可能な状態下で、前記ポリペプチドの溶液をインキュベートする工程を含む、VLPの製造方法。
- 請求項1から22のいずれか1項に記載のポリペプチド、請求項23に記載の核酸、請求項27または28に記載のベクター、請求項29に記載の宿主細胞、または請求項31に記載のVLPの、感染症、免疫疾患、癌または腫瘍の治療および/または予防への使用。
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