JP2021521789A - Ifnと抗pd−l1抗体の融合タンパク質およびその使用 - Google Patents
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Abstract
【選択図】図10
Description
腫瘍浸潤リンパ球の存在にもかかわらず、ほとんどの患者は依然として集中的なPD−1 / PD−L1療法に反応しない。 本発明者らは、生来の免疫抗原提示細胞の不完全な活性化が、PD−1 / PD−L1遮断後の腫瘍特異的T細胞の完全な活性化を制限する可能性があると考えている。 I型インターフェロン(IFN)の局所送達は、抗原提示を回復するが、PD−L1をアップレギュレートし、そしてT細胞の活性化を阻害する。
従来技術の上記の制限および欠陥を克服するために、本発明は、PD−L1およびIFN受容体を同時に標的とすることができるIFN−anti−PD−L1抗体(IFN−anti−PD−L1)融合タンパク質を提供する。 実験では、IFN−anti−PD−L1融合タンパク質が腫瘍組織に蓄積し、抗原のクロスサブミッションを大幅に増加させ、PD−L1を介した免疫抑制を克服できることが観察された。 IFN−anti−PD−L1融合タンパク質は、免疫抑制シグナルを同時に放出し、共刺激シグナルを提供してT細胞を(再)活性化し、腫瘍疾患の治療のための新世代の抗PD−L1抗体として使用できる。
本発明は、さらに、融合タンパク質の使用を提供しており、IFN−anti−PD−L1を腫瘍細胞に投与することで、腫瘍細胞の成長および/または移動を抑制できる。
2)前記ヘテロダイマータンパク質をコードする核酸分子は、SEQ ID NO.4、5、7、8、9、10、38、40、42、44、46、48に示すヌクレオチド配列から選択することは好ましく、SEQ ID NO.4とSEQ ID NO.5,SEQ ID NO.4とSEQ ID NO.40、あるいはSEQ ID NO.4とSEQ ID NO.42であることは好ましい。
特別に説明しない限り、本願に用いられる用語と定義はいずれも当分野における通常の意味であって、また、当業者に了解されている。
1.本発明によって提供されるIFN−anti−PD−L1融合タンパク質は、PD−L1およびIFN受容体の両方を標的とする。データからわかるように、TMEにおけるIFNシグナルの活性化が、より強いT細胞活性化を誘導することによって進行腫瘍のPD −1 / PD−L1治療を増強できる。
マウス:
雌(6〜8週齢)のBALB / cマウスとC57BL / 6マウスは、Weitong Lihua(北京、中国)から購入した。 すべてのマウスは、SPFフリーの条件下で生物物理学研究所の動物室に保管される。 動物の世話と実験は、中国科学院生物物理学研究所のガイドラインに従って行われ、IACUC(Institutional Laboration Animal Care and UseCommittee)によって承認されたプロトコルに従った。 PD−L1−/−およびIFNAR1−/−マウスは、UTの南西医療センターでSPF条件下で飼育された。 動物プロトコルはNIHガイドラインに準拠する。 この研究は、UTサウスウエスタンメディカルセンターの動物管理使用委員会によって承認された。
293F細胞は、Xu Ting博士(Kang Ning Jerry、蘇州市、江蘇省、中国)から提供され、SMM 293−TI培地(M293TI、Sino Biological)で培養された。A20、MC38、およびL929セルラインは、ATCC(Manassas、VA)から購入した。抗PD−1遮断抗体(4H2)は、Bristol−Myers Squibb(Redwood City、CA)から入手した。抗PD−L1抗体(10F.9G2)および抗IFNAR1抗体(MAR1−5A3)は、BioXCell(West Lebanon、NH)から購入した。抗CD8(TIB210)および抗CD4欠失抗体(GK1.5)は実験室で調製された。抗シアル酸GM1抗体は、Biolegend(San Diego、CA)から購入した。
ヘテロダイマー:特許(特許番号:US8217149B2)によると、PD−L1結合タンパク質(YW243.55.S70)配列の軽鎖および重鎖可変領域が合成された。軽鎖と重鎖の配列をGGGGSGGGGGGSGGGGSリンカーを介して接続し、ヒトIgG1Fc(SEQ ID NO.15)を重鎖のC末端に挿入して、ScFv(PD−L1)−Fc(SEQ ID NO.1)と命名し、ヘテロダイマーの第一ポリペプチドを取得した。次に、ScFv(PD−L1)−Fcのコーディング核酸配列(SEQ ID NO.4)をpEE12.4ベクター(Lonza)にクローン化した。マウスIFN−α4(SEQ ID NO.13)のcDNA配列(SEQ ID NO.14)をクローン化し、(G4S)4リンカーを介してヒトIgG1 FcのN末端に挿入し、ヘテロダイマーの第二ポリペプチドmIFNα4−Fc(SEQ ID NO.2)を発現させて取得した。mIFNα4−Fcをコードするヌクレオチド配列(SEQ ID NO.5)をpEE6.4ベクター(Lonza)にクローン化した。 PD−L1結合タンパク質とIFNαのヘテロ二量体化は、以前に報告されたノブツーホール(knob−to−holes)技術を使用して生成された。プラスミドを293F細胞に1:2の比率で一過性にトランスフェクトした。トランスフェクション後7日目に上清を回収した。取扱説明書(Repligen)に従ってプロテインA−セファロースカラムを使用して融合タンパク質を精製した。
PE−anti−human IgG Fc(eBioscience)を使用して、融合タンパク質の結合を検出した。特異的抗体:抗PD−L1抗体(10F.9G2)、抗IFNAR1抗体(MAR1−5A3)、抗CD45抗体(30−F11)、抗CD80抗体(16−10A1)、抗CD86抗体(GL1) BioLegendまたはeBioscienceに由来した。細胞をFACSバッファー(1%ウシ血清アルブミンおよび0.05%NaN3)に懸濁し、抗CD16/32抗体(抗FcγIII/II受容体、クローン2.4G2)で30分間ブロッキングし、次に特異的抗体で氷上で30分間染色した。サンプルは、FACSCaliburまたはFortessa flowcytometer(BDBiosciences)で分析された。FlowJoソフトウェア(TreeStar)を使用してデータを分析した。
VSV感染に敏感なL929マウス線維芽細胞を使用して、IFNの生物学的活性を定量化した。細胞を段階希釈したIFNα−FcまたはIFN−anti−PD−L1とともに37℃で一晩インキュベートした。翌日、細胞をMOI=5のVSV−GFPに感染させ、さらに30時間培養した。次に、細胞を収集し、4%PFAで固定した。 FACSFotassaフローサイトメーター(BD Biosciences)を使用してデータを取得し、FlowJoソフトウェア(TreeStar)を使用してデータを分析した。 GFP陽性細胞はウイルス感染細胞として定義された。
Balb / cマウスの右側にA20細胞(3×106)を皮下(s.c.)注射した。15日目に、マウスに30μgのIFNα−FcまたはIFN−anti−PD−L1を静脈注射した。 3日目の灌流後、異なるマウス組織を収集し、異なる器官のホモジネート抽出物中のヒトFcのレベルをELISAによって測定した。
Balb/cマウスの右側にA20細胞(3×106)を皮下注射した。 20μgのIFN−anti−PD−L1を静脈内注射した。PD−1シグナル伝達を遮断するために、IFN−anti−PD−L1治療の1日前に2週間に1回、マウスに100μgの抗PD−1抗体(4H2)を静脈内投与した。 CD8+T細胞を除去するために、200μgの抗CD8抗体(TIB210)をIFN−anti−PD−L1治療の1日前に腹腔内注射した。I型IFNシグナル伝達を遮断するために、100μgの抗IFNAR1抗体(MAR1−5A3)をIFN−anti−PD−L1治療の1日前に注射した。C57BL/6マウスの右側に5×105のMC38細胞を皮下注射した。マウスに25μgのIFN−anti−PD−L1を2回静脈内注射した。腫瘍体積は週に2回測定され、(長さ×幅×高さ/2)として計算された。リンパ球の輸送を遮断するために、マウスに25μgのFTY720を腹腔内注射し、遮断を維持するために20μgのFTY720を1日おきに投与した。
リンパ節(LN)または脾臓を担癌マウスから分離して、単一細胞懸濁液を調製した。60Gysの単回投与(10Gys /分、6分)を使用して、A20腫瘍細胞を照射した。脾細胞またはLN細胞と照射された腫瘍細胞を4:1の比率で48時間共培養した。製造元のプロトコル(BD Biosciences)に従って、IFN−γの生成はIFN−γELISPOTアッセイキットを使用して測定された。イムノスポットアナライザー(CTL)でサイトカインスポットを計算した。
腫瘍組織を収集し、小片に切断し、消化バッファー(1mg/mlコラゲナーゼIVおよび100μg/mlDNase Iを含むRPMI−1640培地)に再懸濁した。 37°Cで45分間消化した後、70μmセルストレーナーで単細胞懸濁液を作成し、CD8+T細胞とDC(MHCII+CD11c+)をFACSで選別した。T細胞、DC、および照射された腫瘍細胞は、IFNα(2ng / ml)または抗PD−L1抗体(10μg/ ml)の条件下で10:1:2.5の比率で培養された。 3日後、上清を回収し、IFN−γレベルをCBAで測定した。
データは平均±SEMとして示された。対になっていないstudent’sの両側t検定を使用して、統計分析を比較した。分析にはGraphPadPrismバージョン5.0(GraphPad Software)を使用した。 *、**、および***で、それぞれp<0.05、p<0.01、およびp<0.001の統計的に有意な差を示した。
ほとんどの患者は、インターフェロンによる、腫瘍への局所薬投与が実施されることができない。さらに、I型IFNの全身送達は、通常、有限的な抗腫瘍活性と重篤な副作用がある。サイトカインを含む標的抗体は、免疫調節分子の局所送達のための効果的な戦略であることが証明されている。ただし、治療標的となる腫瘍特異的分子を特定することは非常に困難である。PD−L1は腫瘍組織で高度に発現していることが報告されている。最近の研究では、抗PD−L1抗体がPD−L1陽性腫瘍組織に特異的に蓄積することが示されている。また、IFNは、その抗腫瘍機能に加えて、PD−L1の発現を強力に誘導し、腫瘍に対するT細胞の反応を阻害する可能性がある。この中和効果を克服し、TMEにおける免疫(再)活性化の相互促進を実現するために、本発明は、IFNおよび抗PD−L1抗体を使用して融合タンパク質IFN−anti−PD−L1を構築することで、腫瘍組織におけるPD−L1の発現をさらにアップレギュレートすることができ、これにより、抗体の蓄積が増加することを提案する。
In vitroでのIFN−anti−PD−L1(IFN−α4)融合タンパク質の強力な活性を考慮して、我々は、それがIn vivoで腫瘍増殖を制御できるかどうかをさらに研究した。進行したA20腫瘍のマウスを融合タンパク質(i.t.)で治療した。抗PD−L1抗体は腫瘍の成長を制御できませんでしたが、IFN−anti−PD−L1融合タンパク質のヘテロダイマーとホモダイマーはほとんどの治療マウスで抗PD−L1耐性を克服して、完全な腫瘍退縮を誘発した(2e)。
I型IFNの使用は、システム配信中の深刻な副作用のために制限されている。IFN(IFN−α4)を有する抗PD−L1抗体のin vivo毒性をテストするために、高用量のヘテロダイマー(IFN−anti−PD−L1)または非標的コントロールIFN−anti−HBs(anti−B肝炎ウイルス表面タンパク質)融合タンパク質を使用した。IFN−anti−HBsの2回目の注射後、担癌マウスは重度の体重減少、活動低下、毛皮のひだとの症状が現れ、すべてのマウスは1日以内に死亡した(図3a)。反対的に、IFN−anti−PD−L1で処理されたマウスはいずれも、死亡しておらず、軽度の体重減少後に回復した(図3aおよび3b)。IFN−anti−PD−L1融合タンパク質は腫瘍に蓄積したが、正常組織には蓄積しなかった(図7a)。
I型IFNはPD−L1発現を誘導するための最も効果的なサイトカインであるため、TMEのPD−L1レベルは、IFN−anti−PD−L1(IFN−α4ヘテロダイマー)による全身治療後に測定された。IFN−anti−PD−L1は、腫瘍組織におけるPD−L1の発現を有意に増加させた(図3e)。PD−L1発現の増加は、融合タンパク質の腫瘍特異的蓄積を促進する可能性がある。興味深いことに、CD45 +細胞(白血球)のIFN受容体のレベルも増加し(図3f)、細胞がIFN処理に対して感じやすくなった。要約すると、データは、IFN−anti−PD−L1が複数のフィードフォワード応答を生成したが、これにより、腫瘍のターゲティングと抗腫瘍効果がさらに強化される可能性があることを示した。
多くの腫瘍細胞は、免疫応答を回避するための戦略としてPD−L1を過剰発現する。PD−L1は、腫瘍外の多くの細胞で炎症性サイトカインによってさらに誘発される可能性がある。PD−1/PD−L1遮断療法が腫瘍細胞に作用するのか、或いは非腫瘍細胞に発現されるPD−L1に作用するのかは、まだ結論付けられていない。腫瘍細胞中のPD−L1がIFNを有する抗PD−L1抗体に必要かどうかを確定するために、本発明は、CRISPR/Cas9技術を使用して腫瘍細胞中のPD−L1をノックアウトした。PD−L1の発現は、ノックアウト後のA20およびMC38腫瘍細胞で完全に排除された(図4a)。IFNsはPD−L1の発現を誘発する可能性がある。IFNαによって刺激された場合、野生型(WT)細胞はPD−L1をアップレギュレートしたが、ノックアウト細胞は依然としてPD−L1を発現しなかった(データは示していない)。
次に、I型IFNシグナル伝達が抗腫瘍効果に必要かどうかを調査した。IFN−anti−PD−L1融合タンパク質(ヘテロダイマー)での治療中に、マウスを抗IFNAR遮断抗体で処理した。抗IFNAR抗体は、融合タンパク質の抗腫瘍効果を完全に排除し、I型IFNシグナル伝達の重要な役割を示唆した(図5a)。
後期腫瘍は、一般的にPD−1/PD−L1遮断療法に耐性がある。実際、抗PD−1抗体も抗PD−L1抗体治療も、後期A20腫瘍の成長を制御することはできない(図6a)。PD−1/PD−L1遮断と比較して、IFN−anti−PD−L1融合タンパク質(IFN−α4ヘテロダイマー)はより優れた抗腫瘍効果を示した。ただし、一部の腫瘍は、初期制御後に最終的に再発した(図2f−2g)。免疫療法後のPD−L1の過剰発現は、T細胞を介した腫瘍制御をさらに制限する可能性がある。したがって、抗PD−1抗体とIFN−anti−PD−L1の併用療法は、IFNまたはPD−1/PD−L1遮断療法に対する腫瘍の抵耐性を克服できると仮定した。実際、併用療法はより良い腫瘍制御をもたらし、後期腫瘍はほぼ完全に解消した(図6a)。
データは、腫瘍特異的T細胞が抗腫瘍免疫応答において重要な役割を果たすことを示した。これらのT細胞は、2つの主要な供給源に由来する可能性があった。すでに腫瘍組織にあるT細胞と、末梢から腫瘍組織に移動した新たに活性化されたT細胞であった。IFNは、DCを刺激してTILを活性化するだけでなく、T細胞を引き付けるケモカインを増加させることもできた。どのT細胞集団が必要かをテストするために、FTY720を使用して末梢リンパ球の腫瘍組織への輸送を遮断した。興味深いことに、リンパ球の輸送が遮断された場合でも、コントロール群と同様に、IFNとPD−1/PD−L1遮断の併用も腫瘍を制御できた(図6g)。これらのデータは、IFN−anti−PD−L1(IFN−α4ヘテロダイマー)による既存のT細胞の再活性化が腫瘍制御に十分であることを示した。一致するように、CD8 + T細胞の局所的な欠失は、すべての抗腫瘍効果を減少させた(図6g)。要約すると、これらのデータは、PD−L1遮断がT細胞枯渇の状態を逆転させることができ、IFNが腫瘍制御のために部分的に回収された常在T細胞を効果的に再活性化することを示した。
受容体IFNARに結合するIFNαの既知の重要なアミノ酸部位については、部位特異的変異が行われた。特定の変異部位については、図11を参照する。親和性が低下したIFNα変異体をスクリーニングする。 IFNα変異体のアミノ酸配列およびこれをコーデイング核酸配列については、本明細書の配列表のSEQ ID NO.25〜36を参照する。
IFNα−Fc変異体の生物学的活性は、抗ウイルス感染バイオアッセイによって測定された。VSV−GFPウイルスに感染する前に、L929細胞を各タンパク質と混合し、一晩培養した。30時間の培養後、フローサイトメトリーによってウイルス感染細胞の割合を測定し、異なる濃度のタンパク質の細胞感染に対する阻害率とEC50値を計算した(図12)。結果は、構築された変異体はすべてある程度の活性の低減があることを示した。その中で、2つの変異体R144AとA145Gは最も弱い活性を持ち、潜在的な好ましいターゲットであった。
WT PD−L1 + A20細胞とPD−L1−/−A20細胞を使用して、異なる濃度のタンパク質で処理された細胞の増殖結果がCCK8キットによって検出された。結果は、変異体IFN−anti−PD−L1は、野生型融合タンパク質と比較して、ターゲティング欠失を伴うPD−L1−/−A20細胞の増殖を阻害するためのEC50値が低いことを示した。ターゲティングが存在しているPD−L1+/+A20細胞では、細胞増殖阻害に対する変異型IFN−anti−PD−L1と野生型融合タンパク質のEC50値に有意差はなかった(図13)。変異型IFN−anti−PD−L1融合タンパク質の第一のポリペプチドAnti−PD−L1(ScFv(PD−L1)−Fc)のアミノ酸配列はSEQ ID NO.1に示され、第二ポリペプチド変異型mIFNa4 −Fcのアミノ酸配列を下表に示す。
Claims (22)
- 融合タンパク質であって、
インターフェロン(IFN)とPD−L1結合タンパク質を融合接続させてなるIFN−anti−PD−L1であり、前記融合タンパク質はホモダイマータンパク質或いはヘテロダイマータンパク質であり、
好ましくは、前記ホモダイマータンパク質は、第一ペプチドと第二ペプチドを含み、前記第一ペプチドと第二ペプチドが同様であり、前記第一ペプチドと第二ペプチドはN端からC端までの順でIFN、PD−L1結合タンパク質、と免疫グロブリンFc区を含み、
好ましくは、前記ヘテロダイマータンパク質は、第一ペプチドと第二ペプチドを含み、前記第一ペプチドは第二ペプチドと異なり、前記第一ペプチドはPD−L1結合タンパク質を含み、前記第二ペプチドはIFNと免疫グロブリンFc区を含み、IFNはFc区のN端に位置しており、前記第一ペプチドに含まれるFc区と第二ペプチドに含まれるFc区は同様なサブタイプを有する免疫グロブリンに由来する、
ことを特徴とする融合タンパク質。 - 前記インターフェロン(IFN)は、IFN−α、IFN−β、IFN−γ、IFN−λ1(IL−29)、IFN−λ2(IL−28a)、IFN−λ(IL−28b)およびIFN−ωのようなI型インターフェロン、I型インターフェロン変異体、II型インターフェロンおよび/またはIII型インターフェロンから選択させ、
前記IFNはヒトソースあるいはマウスソースに由来でき、
I型インターフェロンは、好ましくIFN−α4(SEQ ID NO.13)であり、さらに好ましくIFN−α4変異体であり、さらに好ましく変異体mIFN−α4(L30A)(SEQ ID NO.25)、−α4(R144A)(SEQ ID NO.27)、mIFN−α4(A145G)(SEQ ID NO.29)、mIFN−α4(R149A)(SEQ ID NO.31)、mIFN−α4(S152A)(SEQ ID NO.33)、hIFN−α2(Q124R)(SEQ ID NO.35)である、
ことを特徴とする請求項1に記載の融合タンパク質。 - 前記免疫グロブリンFc区は、IgG1、IgG2、IgG3および/またはIgG4の定常領域アミノ酸配列から選択され、好ましくはIgG1である、
ことを特徴とする請求項1に記載の融合タンパク質。 - 前記PD−L1結合タンパク質は抗PD−L1抗体、一本鎖抗体(ScFv)、Fab断片、F(ab’)2断片から選択され、前記抗PD−L1抗体はTecentriq、Bavencio、Imfinzi、KN035、CS1001、KL−A167、SHR−1316および/またはYW243.55.S70から選択すれば好ましく、さらに好ましくは一本鎖抗体(ScFv)であり、さらに好ましくはYW243.55.S70である、
ことを特徴とする請求項1に記載の融合タンパク質。 - 1)前記ホモダイマータンパク質の第一ペプチドと第二ペプチドはSEQ ID NO.3に示すアミノ酸配列であり、
2)前記ヘテロダイマータンパク質第一ペプチドはSEQ ID NO.1に示すアミノ酸配列を含み、第二ペプチドはSEQ ID NO.2、37、39、41、43、45、47に示すアミノ酸配列を含む、
ことを特徴とする請求項1に記載の融合タンパク質。 - 請求項1〜5に記載の融合タンパク質をコードする単離された核酸分子であって、
1)前記ホモダイマータンパク質をコードする核酸分子は、SEQ ID NO.6に示すヌクレオチド配列であり、
2)前記ヘテロダイマータンパク質をコードする核酸分子は、SEQ ID NO.4、5、7、8、9、10、38、40、42、44、46、48に示すヌクレオチド配列から選択され、SEQ ID NO.4とSEQ ID NO.5、SEQ ID NO.4とSEQ ID NO.40、或いはSEQ ID NO.4とSEQ ID NO.42は好ましい、
ことを特徴とする核酸分子。 - 請求項6に記載の核酸分子を含むことを特徴とするベクター。
- 請求項1〜5のいずれかに記載の融合タンパク質および/または請求項6に記載の核酸分子の薬物組成物または試薬キットの製造における使用であって、
好ましくは、前記薬物組成物は、腫瘍を治療する薬物組成物であり、
好ましくは、前記腫瘍は、単独でPD−1/PD−L1の遮断に無効となる腫瘍または後期腫瘍であり、好ましくは、前記薬物組成物は、B細胞リンパ腫、メラノーマ和結腸癌を治療する薬物組成物である、前記使用。 - 請求項1〜5のいずれか一項に記載の融合タンパク質IFN−anti−PD−L1を含む、
ことを特徴とする薬物製剤、薬物組成物あるいは試薬キット。 - 請求項1〜5のいずれか一項に記載の融合タンパク質IFN−anti−PD−L1、あるいは、前記融合タンパク質をコードする核酸分子を含み、生産融合タンパク質を生産する細胞であって、
前記細胞は人以外の哺乳類動物の細胞であり、好ましくは、CHOとHEK293細胞である、
ことを特徴とする細胞。 - 請求項1〜5のいずれか一項に記載の融合タンパク質IFN−anti−PD−L1と抗PD−1/PD−L1抗体の併用の、腫瘍を治療する薬物組成物あるいは試薬キットの製造における用途。
- 前記腫瘍はPD−1/PD−L1遮断の単独治療に対して無効になる腫瘍あるいは後期腫瘍であり、
好ましくは、抗PD−1/PD−L1抗体の単独の治療に対して耐性がある、または無効になる腫瘍である、
ことを特徴とする請求項11に記載の用途。 - 前記腫瘍の患者は、末梢リンパ球輸送欠陥/障碍に関する疾病があり、前記患者の末梢リンパ球は、腫瘍組織に移動できない、
ことを特徴とする請求項11に記載の用途。 - IFN−αと抗PD−L1抗体の併用の、治療腫瘍を治療する薬物組成物、薬物製剤あるいは試薬キットの製造における用途であって、
前記IFN−αは腫瘍内に投与される、
ことを特徴とする用途。 - 請求項14に記載の用途であって、
前記腫瘍は、PD−1/PD−L1の遮断の単独治療に無効となる腫瘍であり、
IFNの単独治療に無効となる腫瘍、あるいは後期腫瘍であり、
好ましくは、抗PD−1/PD−L1抗体の単独治療に対して耐性がある腫瘍である、
ことを特徴とする用途。 - IFN−αと抗PD−L1抗体を含む薬物組成物、薬物製剤あるいは試薬キットであって、前記IFN−αは腫瘍内に投与される必要がある、
ことを特徴とする薬物組成物、薬物製剤あるいは試薬キット。 - 請求項1〜5のいずれか一項に記載の融合タンパク質IFN−anti−PD−L1の白血球におけるIFN受容体発現をアップレギュレートする用途であって、
好ましくは、前記白血球は、CD45+細胞であり、
好ましくは、前記IFN受容体はIFNARである、
ことを特徴とする薬物組成物、薬物製剤あるいは試薬キット。 - 請求項1〜5のいずれか一項に記載の融合タンパク質IFN−anti−PD−L1のDC細胞あるいはTIL細胞の活性化における用途。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載の融合タンパク質IFN−anti−PD−L1の腫瘍常駐T細胞の活性化における用途。
- IFN−α4変異体であって、
前記変異体は、受容体との親和性が低下した突然変異であり、mIFN−α4(L30A)(SEQ ID NO.25)、mIFN−α4(R144A)(SEQ ID NO.27)、mIFN−α4(A145G)(SEQ ID NO.29)、mIFN−α4(R149A)(SEQ ID NO.31)、mIFN−α4(S152A)(SEQ ID NO.33)、および/またはhIFN−α2(Q124R)(SEQ ID NO.35)を含む、
ことを特徴とする変異体。 - 請求項20に記載の変異体をコードする単離された核酸分子であって、
前記核酸分子のヌクレオチド配列はSEQ ID NO.26、28、30、32、34、36に示す配列である、
ことを特徴とする核酸分子。 - 請求項20に記載のIFN−α4変異体の、治療腫瘍を治療する融合タンパク質或いは薬物の製造における用途。
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Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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WO2017134302A2 (en) * | 2016-02-05 | 2017-08-10 | Orionis Biosciences Nv | Targeted therapeutic agents and uses thereof |
Family Cites Families (13)
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WO1997033998A1 (en) * | 1996-03-14 | 1997-09-18 | The Immune Response Corporation | Targeted delivery of genes encoding interferon |
CA2372400C (en) * | 1999-05-19 | 2010-04-27 | Lexigen Pharmaceuticals Corp. | Expression and export of interferon-alpha proteins as fc fusion proteins |
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WO2017091611A1 (en) * | 2015-11-23 | 2017-06-01 | Immungene, Inc | Enhanced cancer immunotherapy using antibody-interferon fusion molecules |
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