JP2021502085A5 - - Google Patents
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Description
明瞭な理解を目的として、説明および実施例として少し詳しく開示を提供してきたが、当業者であれば、本開示の精神または範囲から逸脱することなく、様々な変更および修正を実施できることが明らかであろう。したがって、先の記述および実施例は、限定として解釈するべきではない。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
内在性ＣＩＳＨ遺伝子のエクソン２またはエクソン３内にゲノム改変を含む、遺伝子改変された細胞。
(項目２)
前記ゲノム改変が、挿入および／または欠失からなる群より選択される、項目１に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目３)
前記ＣＩＳＨ遺伝子に１個または複数の導入遺伝子が組み込まれている、項目１または項目２に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目４)
前記導入遺伝子が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、免疫調節因子、操作されたまたは外因性のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）をコードする、項目３に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目５)
前記操作されたＴＣＲが、抗体結合Ｔ細胞受容体（ＡＣＴＲ）である、項目４に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目６)
ＣＩＳＨ遺伝子が、ヌクレアーゼによる切断後に改変されている、項目１から５のいずれかに記載の遺伝子改変された細胞。
(項目７)
前記ヌクレアーゼが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＴＡＬＥＮおよび／またはＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓヌクレアーゼ系からなる群より選択される、項目６に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目８)
前記ヌクレアーゼが、表２に示す標的部位に結合するＤＮＡ結合ドメインを含む、項目６または項目７に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目９)
前記ジンクフィンガーヌクレアーゼが、認識ヘリックスを含む４、５または６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質を含み、さらに、前記ジンクフィンガータンパク質が、ＳＢＳ＃５９４８８、ＳＢＳ＃５９４８９、ＳＢＳ＃５９４４０、ＳＢＳ＃５９４４１、ＳＢＳ＃５９５５８、ＳＢＳ＃５９５５７、ＳＢＳ＃５９５８１またはＳＢＳ＃５９５８０と命名されたタンパク質の認識ヘリックス領域を含む、項目７または項目８に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目１０)
造血幹細胞、エフェクターＴ細胞および調節性Ｔ細胞からなる群より選択される、項目１から９のいずれか一項に記載の遺伝子改変された細胞、またはその後代である細胞。
(項目１１)
認識ヘリックス領域をそれぞれ含む６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質であって、ＳＢＳ＃５９４８８、ＳＢＳ＃５９４８９、ＳＢＳ＃５９４４０、ＳＢＳ＃５９４４１、ＳＢＳ＃５９５５８、ＳＢＳ＃５９５５７、ＳＢＳ＃５９５８１またはＳＢＳ＃５９５８０と命名されたタンパク質の認識ヘリックス領域を含むジンクフィンガータンパク質。
(項目１２)
項目１１に記載のジンクフィンガータンパク質と、野生型のもしくは操作された切断ドメインまたは野生型のもしくは操作された切断ハーフドメインとを含む融合タンパク質。
(項目１３)
項目１１または項目１２に記載の１種または複数のタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
(項目１４)
項目１１もしくは項目１２に記載の１種もしくは複数のタンパク質、および／または項目１３に記載の１種もしくは複数のポリヌクレオチドを含む、単離された細胞。
(項目１５)
エフェクターＴ細胞、調節性Ｔ細胞および造血幹細胞からなる群より選択される、項目１４に記載の単離された細胞、またはその後代である細胞。
(項目１６)
項目１１もしくは項目１２に記載の１種もしくは複数のタンパク質、項目１３に記載の１種もしくは複数のポリヌクレオチド、および／または項目１４もしくは項目１５に記載の１種もしくは複数の単離された細胞を含む、キット。
(項目１７)
項目１から１５のいずれか一項に記載の遺伝子改変された細胞を生成する方法であって、前記細胞に、ＣＩＳＨ遺伝子のエクソン２またはエクソン３における標的部位に結合するＤＮＡ結合ドメインを含む１種または複数のヌクレアーゼをコードする、１種または複数のポリヌクレオチドを導入するステップを含み、前記ヌクレアーゼが、前記ＣＩＳＨ遺伝子に結合し、これを切断し、これにより、前記細胞を遺伝子改変する、方法。
(項目１８)
前記遺伝子改変された細胞が、前記ＣＩＳＨ遺伝子に組み込まれ、前記細胞において発現される導入遺伝子を含む、項目１７に記載の方法。
(項目１９)
タンパク質を必要とする被験体に前記タンパク質を提供する方法であって、項目３から１５のいずれかに記載の遺伝子改変された細胞を投与するステップを含み、前記細胞が、前記被験体において導入遺伝子を発現する、方法。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
内在性ＣＩＳＨ遺伝子のエクソン２またはエクソン３内にゲノム改変を含む、遺伝子改変された細胞。
(項目２)
前記ゲノム改変が、挿入および／または欠失からなる群より選択される、項目１に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目３)
前記ＣＩＳＨ遺伝子に１個または複数の導入遺伝子が組み込まれている、項目１または項目２に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目４)
前記導入遺伝子が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、免疫調節因子、操作されたまたは外因性のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）をコードする、項目３に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目５)
前記操作されたＴＣＲが、抗体結合Ｔ細胞受容体（ＡＣＴＲ）である、項目４に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目６)
ＣＩＳＨ遺伝子が、ヌクレアーゼによる切断後に改変されている、項目１から５のいずれかに記載の遺伝子改変された細胞。
(項目７)
前記ヌクレアーゼが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＴＡＬＥＮおよび／またはＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓヌクレアーゼ系からなる群より選択される、項目６に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目８)
前記ヌクレアーゼが、表２に示す標的部位に結合するＤＮＡ結合ドメインを含む、項目６または項目７に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目９)
前記ジンクフィンガーヌクレアーゼが、認識ヘリックスを含む４、５または６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質を含み、さらに、前記ジンクフィンガータンパク質が、ＳＢＳ＃５９４８８、ＳＢＳ＃５９４８９、ＳＢＳ＃５９４４０、ＳＢＳ＃５９４４１、ＳＢＳ＃５９５５８、ＳＢＳ＃５９５５７、ＳＢＳ＃５９５８１またはＳＢＳ＃５９５８０と命名されたタンパク質の認識ヘリックス領域を含む、項目７または項目８に記載の遺伝子改変された細胞。
(項目１０)
造血幹細胞、エフェクターＴ細胞および調節性Ｔ細胞からなる群より選択される、項目１から９のいずれか一項に記載の遺伝子改変された細胞、またはその後代である細胞。
(項目１１)
認識ヘリックス領域をそれぞれ含む６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質であって、ＳＢＳ＃５９４８８、ＳＢＳ＃５９４８９、ＳＢＳ＃５９４４０、ＳＢＳ＃５９４４１、ＳＢＳ＃５９５５８、ＳＢＳ＃５９５５７、ＳＢＳ＃５９５８１またはＳＢＳ＃５９５８０と命名されたタンパク質の認識ヘリックス領域を含むジンクフィンガータンパク質。
(項目１２)
項目１１に記載のジンクフィンガータンパク質と、野生型のもしくは操作された切断ドメインまたは野生型のもしくは操作された切断ハーフドメインとを含む融合タンパク質。
(項目１３)
項目１１または項目１２に記載の１種または複数のタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
(項目１４)
項目１１もしくは項目１２に記載の１種もしくは複数のタンパク質、および／または項目１３に記載の１種もしくは複数のポリヌクレオチドを含む、単離された細胞。
(項目１５)
エフェクターＴ細胞、調節性Ｔ細胞および造血幹細胞からなる群より選択される、項目１４に記載の単離された細胞、またはその後代である細胞。
(項目１６)
項目１１もしくは項目１２に記載の１種もしくは複数のタンパク質、項目１３に記載の１種もしくは複数のポリヌクレオチド、および／または項目１４もしくは項目１５に記載の１種もしくは複数の単離された細胞を含む、キット。
(項目１７)
項目１から１５のいずれか一項に記載の遺伝子改変された細胞を生成する方法であって、前記細胞に、ＣＩＳＨ遺伝子のエクソン２またはエクソン３における標的部位に結合するＤＮＡ結合ドメインを含む１種または複数のヌクレアーゼをコードする、１種または複数のポリヌクレオチドを導入するステップを含み、前記ヌクレアーゼが、前記ＣＩＳＨ遺伝子に結合し、これを切断し、これにより、前記細胞を遺伝子改変する、方法。
(項目１８)
前記遺伝子改変された細胞が、前記ＣＩＳＨ遺伝子に組み込まれ、前記細胞において発現される導入遺伝子を含む、項目１７に記載の方法。
(項目１９)
タンパク質を必要とする被験体に前記タンパク質を提供する方法であって、項目３から１５のいずれかに記載の遺伝子改変された細胞を投与するステップを含み、前記細胞が、前記被験体において導入遺伝子を発現する、方法。
Claims (19)
- 内在性ＣＩＳＨ遺伝子のエクソン２またはエクソン３内にゲノム改変を含む、遺伝子改変された細胞。
- 前記ゲノム改変が、挿入および／または欠失からなる群より選択される、請求項１に記載の遺伝子改変された細胞。
- 前記ＣＩＳＨ遺伝子に１個または複数の導入遺伝子が組み込まれている、請求項１または請求項２に記載の遺伝子改変された細胞。
- 前記導入遺伝子が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、免疫調節因子、操作されたまたは外因性のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）をコードする、請求項３に記載の遺伝子改変された細胞。
- 前記操作されたＴＣＲが、抗体結合Ｔ細胞受容体（ＡＣＴＲ）である、請求項４に記載の遺伝子改変された細胞。
- ＣＩＳＨ遺伝子が、ヌクレアーゼによる切断後に改変されている、請求項１から５のいずれかに記載の遺伝子改変された細胞。
- 前記ヌクレアーゼが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＴＡＬＥＮおよび／またはＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓヌクレアーゼ系からなる群より選択される、請求項６に記載の遺伝子改変された細胞。
- 前記ヌクレアーゼが、表２に示す標的部位に結合するＤＮＡ結合ドメインを含む、請求項６または請求項７に記載の遺伝子改変された細胞。
- 前記ジンクフィンガーヌクレアーゼが、認識ヘリックスを含む４、５または６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質を含み、さらに、前記ジンクフィンガータンパク質が、ＳＢＳ＃５９４８８、ＳＢＳ＃５９４８９、ＳＢＳ＃５９４４０、ＳＢＳ＃５９４４１、ＳＢＳ＃５９５５８、ＳＢＳ＃５９５５７、ＳＢＳ＃５９５８１またはＳＢＳ＃５９５８０と命名されたタンパク質の認識ヘリックス領域を含む、請求項７または請求項８に記載の遺伝子改変された細胞。
- 造血幹細胞、エフェクターＴ細胞および調節性Ｔ細胞からなる群より選択される、請求項１から９のいずれか一項に記載の遺伝子改変された細胞、またはその後代である細胞。
- 認識ヘリックス領域をそれぞれ含む６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質であって、ＳＢＳ＃５９４８８、ＳＢＳ＃５９４８９、ＳＢＳ＃５９４４０、ＳＢＳ＃５９４４１、ＳＢＳ＃５９５５８、ＳＢＳ＃５９５５７、ＳＢＳ＃５９５８１またはＳＢＳ＃５９５８０と命名されたタンパク質の認識ヘリックス領域を含むジンクフィンガータンパク質。
- 請求項１１に記載のジンクフィンガータンパク質と、野生型のもしくは操作された切断ドメインまたは野生型のもしくは操作された切断ハーフドメインとを含む融合タンパク質。
- 請求項１１または請求項１２に記載の１種または複数のタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
- 請求項１１もしくは請求項１２に記載の１種もしくは複数のタンパク質、および／または請求項１３に記載の１種もしくは複数のポリヌクレオチドを含む、単離された細胞。
- エフェクターＴ細胞、調節性Ｔ細胞および造血幹細胞からなる群より選択される、請求項１４に記載の単離された細胞、またはその後代である細胞。
- 請求項１１もしくは請求項１２に記載の１種もしくは複数のタンパク質、請求項１３に記載の１種もしくは複数のポリヌクレオチド、および／または請求項１４もしくは請求項１５に記載の１種もしくは複数の単離された細胞を含む、キット。
- 請求項１から１５のいずれか一項に記載の遺伝子改変された細胞を生成する方法であって、前記細胞に、ＣＩＳＨ遺伝子のエクソン２またはエクソン３における標的部位に結合するＤＮＡ結合ドメインを含む１種または複数のヌクレアーゼをコードする、１種または複数のポリヌクレオチドを導入するステップを含み、前記ヌクレアーゼが、前記ＣＩＳＨ遺伝子に結合し、これを切断し、これにより、前記細胞を遺伝子改変する、方法。
- 前記遺伝子改変された細胞が、前記ＣＩＳＨ遺伝子に組み込まれ、前記細胞において発現される導入遺伝子を含む、請求項１７に記載の方法。
- タンパク質を必要とする被験体に前記タンパク質を提供するための組成物であって、請求項３から１５のいずれかに記載の遺伝子改変された細胞を含み、前記細胞が、前記被験体において前記導入遺伝子を発現する、組成物。
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