JP2021500852A - 共有抗原を標的にする抗原結合タンパク質 - Google Patents

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Abstract

ＨＬＡ−ペプチド標的、およびＨＬＡ−ペプチド標的に結合する抗原結合タンパク質が、本明細書で提供される。ＨＬＡ−ペプチド標的を同定する方法、および所与のＨＬＡ−ペプチド標的に結合する１つ以上の抗原結合タンパク質を同定する方法も開示される。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１７年８月１８日に出願された米国仮出願第６２／５４７，１４６号および２０１７年１１月３日に出願された米国仮出願第６２／５８１，３６８号の利益を主張し、これらの出願は、その全体がすべての目的について参照により本明細書に組み込まれる。
配列表
本出願には配列表が含まれ、この配列表はＡＳＣＩＩ形式で出願されたものであり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。２０１８年８月１６日作成の該ＡＳＣＩＩコピーの名称は、４０６９８ＰＣＴ＿ＣＲＦ＿ｓｅｑｕｅｎｃｅｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔであり、サイズは１，５９１，４４３バイトである。
背景
免疫系は、体液性免疫応答および細胞性免疫応答という２種類の免疫応答を用いて、病原体からの抗原特異的な保護を提供し、これらの免疫応答には、それぞれＢリンパ球およびＴリンパ球を介した病原体抗原の特異的認識が関与する。
Ｔリンパ球は、細胞性免疫の抗原特異的エフェクターであるため、ウイルス、細胞内細菌、マイコプラズマ、および細胞内寄生虫などの細胞内病原体によって媒介される疾患に対する身体の防御において、そのような病原体に感染した細胞を直接細胞溶解することにより中心的な役割を果たす。Ｔリンパ球応答の特異性は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）によって付与され、活性化される。Ｔ細胞受容体は、個々のＴリンパ球にクローン的に分布する抗原特異的受容体であり、その抗原特異性のレパートリーは、抗体遺伝子レパートリーの生成に関与するものと類似の体細胞遺伝子再配列機序により生成される。Ｔ細胞受容体は、膜貫通分子のヘテロ二量体を含み、主要な型は、アルファ−ベータポリペプチド二量体と、ガンマ−デルタポリペプチド二量体のより小さいサブセットとで構成される。Ｔリンパ球受容体サブユニットは、細胞外ドメインの免疫グロブリンに類似した可変および定常領域、アルファおよびベータ鎖の対合を促進するシステインを有する短いヒンジ領域、膜貫通および短い細胞質領域を含む。ＴＣＲによって惹起されるシグナル伝達は、シグナル伝達サブユニットを含む関連マルチサブユニット複合体であるＣＤ３−ゼータを介して間接的に媒介される。
Ｔリンパ球受容体は一般に天然抗原を認識しないものの、ペプチド抗原の提示のための主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）に関連した抗原の細胞内処理断片を含む細胞表面に提示された複合体を認識する。主要組織適合性複合体遺伝子は、種集団全体で高度に多型性であり、個々の遺伝子ごとに複数の共通の対立遺伝子を含む。
主要組織適合性複合体クラスＩ分子は、体内のほぼすべての有核細胞の表面に発現し、ペプチド抗原結合溝を含む膜貫通重鎖と、ベータ２−ミクログロブリンと呼ばれるより小さい細胞外鎖とを含む二量体分子である。ＭＨＣクラスＩ分子は、細胞質のマルチユニット構造であるプロテアソームによる細胞質タンパク質の分解に由来するペプチドを提示する（Ｎｉｅｄｅｒｍａｎｎ Ｇ．，２００２．Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６８：９１−１３６（非特許文献１）；細菌抗原の処理については、Ｗｉｃｋ Ｍ Ｊ，ａｎｄ Ｌｊｕｎｇｇｒｅｎ Ｈ Ｇ．，１９９９．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ．１７２：１５３−６２（非特許文献２）を参照されたい）。切断されたペプチドは、ＴＡＰによって小胞体（ＥＲ）の内腔に輸送され、そこで組み立てられたクラスＩ分子の溝に結合し、結果として生じるＭＨＣ／ペプチド複合体が細胞膜に輸送されて、Ｔリンパ球への抗原提示を可能にする（Ｙｅｗｄｅｌｌ Ｊ Ｗ．，２００１．Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１１：２９４−７（非特許文献３）、Ｙｅｗｄｅｌｌ Ｊ Ｗ．ａｎｄ Ｂｅｎｎｉｎｋ Ｊ Ｒ．，２００１．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：１３−８（非特許文献４））。あるいは、切断されたペプチドは、ＴＡＰに依存しない様式でＭＨＣクラスＩ分子にロードすることができ、交差提示のプロセスを通じて細胞外由来のタンパク質を提示することもできる。そのため、所与のＭＨＣ／ペプチド複合体は、複合体の構造（ペプチド配列およびＭＨＣサブタイプ）のアイデンティティが決定されると、細胞表面に新規の抗原結合タンパク質の標的となり得る新規のタンパク質構造（例えば、抗体またはＴＣＲ）を提示する。
腫瘍細胞は抗原を発現することができ、そのような抗原を腫瘍細胞の表面に提示し得る。そのような腫瘍関連抗原は、腫瘍細胞の特異的標的化のための新規の免疫療法試薬の開発に使用することができる。例えば、腫瘍関連抗原を使用して、治療用抗原結合タンパク質、例えば、ＴＣＲ、抗体、または抗原結合断片を同定することができる。そのような腫瘍関連抗原は、医薬組成物、例えばワクチンにおいても利用され得る。
Ｎｉｅｄｅｒｍａｎｎ Ｇ．，２００２．Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６８：９１−１３６ Ｗｉｃｋ Ｍ Ｊ，ａｎｄ Ｌｊｕｎｇｇｒｅｎ Ｈ Ｇ．，１９９９．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ．１７２：１５３−６２ Ｙｅｗｄｅｌｌ Ｊ Ｗ．，２００１．Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１１：２９４−７ Ｙｅｗｄｅｌｌ Ｊ Ｗ．ａｎｄ Ｂｅｎｎｉｎｋ Ｊ Ｒ．，２００１．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：１３−８
概要
一態様では、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）−ペプチド標的に特異的に結合する単離された抗原結合タンパク質（ＡＢＰ）が本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的は、ＨＬＡクラスＩ分子と複合体化したＨＬＡ拘束性ペプチドを含み、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、ＨＬＡクラスＩ分子のα１／α２ヘテロ二量体部分のペプチド結合溝に位置し、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡを含むか、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹを含むか、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬを含むか、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶを含むか、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＥＶＤＰＩＧＨＶＹを含むか、またはＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹを含む。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡからなるか、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹからなるか、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬからなるか、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶからなるか、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＥＶＤＰＩＧＨＶＹからなるか、またはＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹからなる。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、約５〜１５アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、約８〜１２アミノ酸長である。
一態様では、ＡＢＰは、抗体またはその抗原結合断片を含む。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２５〜３０３２のうちのいずれか１つに示される配列を含むＣＤＲ−Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４３〜３０５０のうちのいずれか１つに示される配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｃ６、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｇ１０、１−Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｂ４、２−Ｇ７Ｒ４−Ｐ２Ｃ２、３−Ｇ７Ｒ４−Ｐ１Ａ３、４−Ｇ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９、５−Ｇ７Ｒ４−Ｂ１０−Ｐ１Ｆ８、またはＢ７（Ｇ７Ｒ３−Ｐ３Ａ９）と指定されるｓｃＦｖからのＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｃ６、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｇ１０、１−Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｂ４、２−Ｇ７Ｒ４−Ｐ２Ｃ２、３−Ｇ７Ｒ４−Ｐ１Ａ３、４−Ｇ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９、５−Ｇ７Ｒ４−Ｂ１０−Ｐ１Ｆ８、またはＢ７（Ｇ７Ｒ３−Ｐ３Ａ９）と指定されるｓｃＦｖからの３つすべての重鎖ＣＤＲおよび３つすべての軽鎖ＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９４〜３００１から選択されるＶＨ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００２〜３００９から選択されるＶＬ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｃ６、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｇ１０、１−Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｂ４、２−Ｇ７Ｒ４−Ｐ２Ｃ２、３−Ｇ７Ｒ４−Ｐ１Ａ３、４−Ｇ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９、５−Ｇ７Ｒ４−Ｂ１０−Ｐ１Ｆ８、またはＢ７（Ｇ７Ｒ３−Ｐ３Ａ９）と指定されるｓｃＦｖからのＶＨ配列およびＶＬ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、拘束性ペプチドＬＬＡＳＳＩＬＣＡの残基１〜５のうちのいずれか１つ以上を介してＨＬＡ−ペプチド標的に結合する。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０２〜２９３３のうちのいずれか１つに示される配列を含むＣＤＲ−Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７１〜２９９３のうちのいずれか１つに示される配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０７、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ１１、Ｇ２−Ｐ２Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０２、Ｇ２−Ｐ１Ｈ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０６、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｃ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０９、Ｇ２−Ｐ１Ａ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０５、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ１２、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｆ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ２Ａ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｄ０４、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ２Ａ０９、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｆ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１１、またはＧ２−Ｐ１Ｄ０６と指定されるｓｃＦｖからのＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０７、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ１１、Ｇ２−Ｐ２Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０２、Ｇ２−Ｐ１Ｈ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０６、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｃ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０９、Ｇ２−Ｐ１Ａ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０５、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ１２、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｆ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ２Ａ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｄ０４、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ２Ａ０９、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｆ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１１、またはＧ２−Ｐ１Ｄ０６と指定されるｓｃＦｖからの３つすべての重鎖ＣＤＲおよび３つすべての軽鎖ＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８１〜２８１５から選択されるＶＨ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１６〜２８５０から選択されるＶＬ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０７、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ１１、Ｇ２−Ｐ２Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０２、Ｇ２−Ｐ１Ｈ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０６、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｃ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０９、Ｇ２−Ｐ１Ａ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０５、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ１２、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｆ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ２Ａ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｄ０４、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ２Ａ０９、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｆ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１１、またはＧ２−Ｐ１Ｄ０６と指定されるｓｃＦｖからのＶＨ配列およびＶＬ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、拘束性ペプチドＮＴＤＮＮＬＡＶＹの残基６〜９を介しておよびＨＬＡサブタイプ対立遺伝子Ａ＊０１０１の残基１５７〜１６０を介してＨＬＡ−ペプチド標的に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、拘束性ペプチドＮＴＤＮＮＬＡＶＹの残基３〜８を介してＨＬＡ−ペプチド標的に結合する。
別の態様では、ＡＢＰは、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）またはその抗原結合部分を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲまたはその抗原結合部分は、ＴＣＲ可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲまたはその抗原結合部分は、１つ以上のＴＣＲ相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲは、アルファ鎖およびベータ鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲは、ガンマ鎖およびデルタ鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、抗原結合タンパク質を含む細胞外部分と細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）の一部である。いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質はｓｃＦｖを含み、細胞内シグナル伝達ドメインはＩＴＡＭを含む。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３−ゼータ（ＣＤ３）鎖のゼータ鎖のシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、細胞外ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインとを連結する膜貫通ドメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８の膜貫通部分を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、Ｔ細胞共刺激分子の細胞内シグナル伝達ドメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞共刺激分子は、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ−４０、ＩＣＯＳ、またはそれらの任意の組み合わせである。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７７、４２７８、４２７９、４２８０、または４２８１である、ＴＣＲアルファＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９１〜４２９５のうちのいずれか１つであるＴＣＲベータＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲクローン型ＩＤ番号ＴＣＲ１９、ＴＣＲ２１、ＴＣＲ２２、ＴＣＲ１８、またはＴＣＲ２３のうちのいずれか１つからのアルファＣＤＲ３およびベータＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファ可変（ＴＲＡＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲアルファ接合（ＴＲＡＪ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ可変（ＴＲＢＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ多様性（ＴＲＢＤ）アミノ酸配列、およびＴＣＲベータ接合（ＴＲＢＪ）アミノ酸配列を含み、ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列の各々は、ＴＣＲクローン型ＩＤ番号ＴＣＲ１９、ＴＣＲ２１、ＴＣＲ２２、ＴＣＲ１８、およびＴＣＲ２３から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファ定常（ＴＲＡＣ）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲベータ定常（ＴＲＢＣ）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０６〜４３１０のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲアルファＶＪ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２１〜４３２５のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファＶＪアミノ酸配列およびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列を含み、ＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列の各々は、ＴＣＲクローン型ＩＤ番号ＴＣＲ１９、ＴＣＲ２１、ＴＣＲ２２、ＴＣＲ１８、およびＴＣＲ２３から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７３〜４２７６または３０５２〜３３５０のうちのいずれか１つであるＴＣＲアルファＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８７〜４２９０または３３５１〜３６５５のうちのいずれか１つであるＴＣＲベータＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲ ＩＤ番号ＴＣＲ１０１−ＴＣＲ４６９、ＴＣＲ２、ＴＣＲ４、ＴＣＲ５３、ＴＣＲ５４、またはＴＣＲ１０１−ＴＣＲ４６９のうちのいずれか１つからのアルファＣＤＲ３およびベータＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファ可変（ＴＲＡＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲアルファ接合（ＴＲＡＪ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ可変（ＴＲＢＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ多様性（ＴＲＢＤ）アミノ酸配列、およびＴＣＲベータ接合（ＴＲＢＪ）アミノ酸配列を含み、ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列の各々は、ＴＣＲ ＩＤ番号ＴＣＲ１０１−ＴＣＲ４６９、ＴＣＲ２、ＴＣＲ４、ＴＣＲ５３、ＴＣＲ５４、またはＴＣＲ１０１−ＴＣＲ４６９から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファ定常（ＴＲＡＣ）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲベータ定常（ＴＲＢＣ）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５６〜３９６１または４３０２〜４３０５のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲアルファＶＪ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２〜４２６９または４３１７〜４３２０のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファＶＪアミノ酸配列およびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列を含み、ＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列の各々は、ＴＣＲ ＩＤ番号ＴＣＲ１０１−ＴＣＲ４６９、ＴＣＲ２、ＴＣＲ４、ＴＣＲ５３、およびＴＣＲ５４から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８４〜４２８６または３１３８のうちのいずれか１つであるＴＣＲアルファＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９８〜４３０１のうちのいずれか１つであるＴＣＲベータＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲ ＩＤ番号ＴＣＲ２９、ＴＣＲ３０、ＴＣＲ３２、またはＴＣＲ３３のうちのいずれか１つからのアルファＣＤＲ３およびベータＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファ可変（ＴＲＡＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲアルファ接合（ＴＲＡＪ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ可変（ＴＲＢＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ多様性（ＴＲＢＤ）アミノ酸配列、およびＴＣＲベータ接合（ＴＲＢＪ）アミノ酸配列を含み、ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列の各々は、ＴＣＲ ＩＤ番号ＴＣＲ２９、ＴＣＲ３０、ＴＣＲ３２、またはＴＣＲ３３から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファ定常（ＴＲＡＣ）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲベータ定常（ＴＲＢＣ）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１３〜４３１６のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲアルファＶＪ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２８〜４３３１のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファＶＪアミノ酸配列およびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列を含み、ＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列の各々は、ＴＣＲ ＩＤ番号ＴＣＲ２９、ＴＣＲ３０、ＴＣＲ３２、またはＴＣＲ３３から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８２または４２８３であるＴＣＲアルファＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９６または４２９７であるＴＣＲベータＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲクローン型ＩＤ番号ＴＣＲ２６またはＴＣＲ２８からのアルファＣＤＲ３およびベータＣＤＲ３配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファ可変（ＴＲＡＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲアルファ接合（ＴＲＡＪ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ可変（ＴＲＢＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ多様性（ＴＲＢＤ）アミノ酸配列、およびＴＣＲベータ接合（ＴＲＢＪ）アミノ酸配列を含み、ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列の各々は、ＴＣＲ ＩＤ番号ＴＣＲ２６またはＴＣＲ２８のための対応するＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファ定常（ＴＲＡＣ）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲベータ定常（ＴＲＢＣ）アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１１または４３１２に対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲアルファＶＪ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２６または４３２７に対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、ＴＣＲアルファＶＪアミノ酸配列およびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列を含み、ＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列の各々は、ＴＣＲ ＩＤ番号ＴＣＲ２６またはＴＣＲ２８のための対応するＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹを含む。いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０３：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＧＶＨＧＧＩＬＮＫを含む。いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＥＶＤＰＩＧＨＶＹを含む。
別の態様では、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）−ペプチド標的に特異的に結合する単離された抗原結合タンパク質（ＡＢＰ）が本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的は、ＨＬＡクラスＩ分子と複合体化したＨＬＡ拘束性ペプチドを含み、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、ＨＬＡクラスＩ分子のα１／α２ヘテロ二量体部分のペプチド結合溝に位置し、ＨＬＡ−ペプチド標的は、表Ａから選択される。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、ＷＴ１またはＭＡＲＴ１から選択される遺伝子に由来しない。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、約５〜１５アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、約８〜１２アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、抗体またはその抗原結合断片を含む。
本明細書に開示の抗体または抗原結合断片うちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は足場に連結し、任意選択で、足場は血清アルブミンまたはＦｃを含み、任意選択で、Ｆｃは、ヒトＦｃであり、ＩｇＧ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＡ（ＩｇＡ１、ＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＥ、またはＩｇＭである。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、リンカーを介して足場に連結し、任意選択で、リンカーはペプチドリンカーであり、任意選択で、ペプチドリンカーはヒト抗体のヒンジ領域である。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ断片、ｓｃＦｖ−Ｆｃ断片、および／または単一ドメイン抗体もしくはその抗原結合断片である。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質はｓｃＦｖ断片を含む。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、１つ以上の抗体相補性決定領域（ＣＤＲ）、任意選択で６つの抗体ＣＤＲを含む。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は抗体を含む。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質はモノクローナル抗体である。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、ヒト化、ヒト、またはキメラ抗体である。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、多重特異性、任意選択で二重特異性である。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、１つ超の抗原または単一抗原上の１つ超のエピトープに結合する。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、およびＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、ヒトＩｇＧクラスでありかつＩｇＧ１、ＩｇＧ４、ＩｇＧ２、およびＩｇＧ３から選択されるサブクラスである重鎖定常領域を含む。本明細書に開示の抗体または抗原結合断片のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は修飾Ｆｃを含み、任意選択で、修飾Ｆｃは、半減期を延長する１つ以上の突然変異を含み、任意選択で、半減期を延長する１つ以上の突然変異はＹＴＥである。
別の態様では、単離されたＨＬＡ−ペプチド標的が本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的は、ＨＬＡクラスＩ分子と複合体を形成したＨＬＡ拘束性ペプチドを含み、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、ＨＬＡクラスＩ分子のα１／α２ヘテロ二量体部分のペプチド結合溝に位置し、ＨＬＡ−ペプチド標的は、表Ａから選択され、但し、単離されたＨＬＡ−ペプチド標的は、標的番号６３６４〜６３６９、６３８６〜６３８９、６５００、６５２１〜６５２４、または６５７８のうちのいずれでもなく、表Ｂまたは表Ｃに見られるＨＬＡ−ペプチド標的ではない。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡを含み、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹを含み、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬを含み、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡレセ（ｒｅｔｈｅ）ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＥＶＤＰＩＧＨＶＹを含み、拘束性ペプチドは配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶを含み、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹを含む。いくつかの実施形態では、ＨＬＡクラスＩ分子はＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ拘束性ペプチドは配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡからなるかまたは本質的にそれからなる。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、約５〜１５アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、約８〜１２アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ＨＬＡサブタイプと拘束性ペプチドとの会合により、ＨＬＡサブタイプのβ２−ミクログロビンサブユニットとＨＬＡサブタイプのα−サブユニットとの共有結合によらない会合が安定する。いくつかの実施形態では、ＨＬＡサブタイプのβ２−ミクログロビンサブユニットとＨＬＡサブタイプのα−サブユニットとの安定した会合は、条件付きペプチド交換により示される。いくつかの実施形態では、単離されたＨＬＡ−ペプチド標的は、親和性標識をさらに含む。いくつかの実施形態では、親和性標識はビオチン標識である。いくつかの実施形態では、単離されたＨＬＡ−ペプチド標的は、検出可能な標識と複合体化している。いくつかの実施形態では、検出可能な標識は、β２−ミクログロビン結合分子を含む。いくつかの実施形態では、β２−ミクログロビン結合分子は標識抗体である。いくつかの実施形態では、標識抗体は蛍光色素標識抗体である。
固体支持体に付着した本明細書に開示のＨＬＡ−ペプチド標的を含む組成物も、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、固体支持体は、ビーズ、ウェル、膜、チューブ、カラム、プレート、セファロース、磁気ビーズ、またはチップを含む。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ−ペプチド標的は、親和性結合対の第１の成員を含み、固体支持体は、親和性結合対の第２の成員を含む。いくつかの実施形態では、第１の成員はストレプトアビジンであり、第２の成員はビオチンである。
表Ａに記載されているＨＬＡサブタイプの単離および精製されたα−サブユニットと、ＨＬＡサブタイプの単離および精製されたβ２−ミクログロビンサブユニットと、表Ａに記載されている単離および精製された拘束性ペプチドと、反応緩衝液とを含む反応混合物も、本明細書で提供される。
本明細書に開示の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的、およびヒト対象から単離された複数のＴ細胞も、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞はＣＤ８＋Ｔ細胞である。
プロモーターに作動可能に連結した、本明細書に開示のＨＬＡ拘束性ペプチドをコードする第１の核酸配列と、本明細書に開示のＨＬＡサブタイプをコードする第２の核酸配列と、を含む、単離されたポリヌクレオチドも、本明細書で提供され、第２の核酸は、第１の核酸配列と同じまたは異なるプロモーターに作動可能に連結し、コードされたペプチドおよびコードされたＨＬＡサブタイプは、本明細書に開示のＨＬＡ／ペプチド複合体を形成する。
プロモーターに作動可能に連結した、本明細書に開示のＨＬＡ拘束性ペプチドをコードする第１の核酸配列を含む第１の構築物と、安定なＨＬＡ−ペプチド複合体の発現における使用のための説明書と、を含む、本明細書に開示の安定なＨＬＡ−ペプチド標的を発現させるためのキットも、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、第１の構築物は、本明細書に開示のＨＬＡサブタイプをコードする第２の核酸配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２の核酸配列は、同じまたは異なるプロモーターに作動可能に連結する。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に開示のＨＬＡサブタイプをコードする第２の核酸配列を含む第２の構築物をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１および第２の構築物の一方または両方は、レンチウイルスベクター構築物である。
本明細書に開示の異種ＨＬＡ−ペプチド標的を含む宿主細胞も、本明細書で提供される。表Ａに記載のＨＬＡ拘束性ペプチドをコードするポリヌクレオチド、例えば、本明細書に開示のＨＬＡ拘束性ペプチドをコードするポリヌクレオチドも、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、内因性ＭＨＣを含まない。いくつかの実施形態では、外因性ＨＬＡを含む。いくつかの実施形態では、宿主細胞はＫ５６２細胞である。
上記の宿主細胞、および表Ａに記載の拘束性ペプチドを含む細胞培養培地も、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、腫瘍細胞株由来の培養細胞である。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞株は、ＨＣＣ−１５９９、ＮＣＩ−Ｈ５１０Ａ、Ａ３７５、ＬＮ２２９、ＮＣＩ−Ｈ３５８、ＺＲ−７５−１、ＭＳ７５１、ＯＥ１９、ＭＯＲ、ＢＶ１７３、ＭＣＦ−７、ＮＣＩ−Ｈ８２、およびＮＣＩ−Ｈ１４６からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、ＨＬＡクラスＩ分子との接触点およびＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡ拘束性ペプチドとの接触点をとおしてＨＬＡ−ペプチド標的に結合する。
いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、医薬として使用するためのものである。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、がんの治療に使用するためのものであり、任意選択で、がんは、ＨＬＡ−ペプチド標的を発現するかまたは発現すると予測される。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、がんの治療に使用するためのものであり、がんは、固形腫瘍および血液系腫瘍から選択される。
本明細書に開示のＡＢＰの保存的に修飾された変異体であるＡＢＰも、本明細書で提供される。本明細書に開示の抗原結合タンパク質と結合について競合する抗原結合タンパク質（ＡＢＰ）も、本明細書で提供される。本明細書に開示の抗原結合タンパク質が結合するものと同じＨＬＡ−ペプチドエピトープに結合する抗原結合タンパク質（ＡＢＰ）も、本明細書で提供される。
本明細書に開示の抗原結合タンパク質を含む受容体を発現する操作された細胞も、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、操作された細胞はＴ細胞であり、任意選択で細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、異種プロモーターから発現される。
本明細書に記載の抗原結合タンパク質またはその抗原結合部分をコードする単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットも、本明細書で提供される。本明細書に記載のＨＬＡ／ペプチド標的をコードする単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットも、本明細書で提供される。本明細書に開示のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含むベクターまたはベクターのセットも、本明細書で提供される。本明細書に開示のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含む宿主細胞も本明細書で提供され、任意選択で、宿主細胞はＣＨＯまたはＨＥＫ２９３であるか、または任意選択で、宿主細胞はＴ細胞である。
上記の宿主細胞を用いて抗原結合タンパク質を発現させることと、発現した抗原結合タンパク質を単離することとを含む、抗原結合タンパク質を産生させる方法も、本明細書で提供される。
本明細書に開示の抗原結合タンパク質と、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物も、本明細書で提供される。有効量の本明細書に開示の抗原結合タンパク質または本明細書に開示の医薬組成物を対象に投与することを含み、対象におけるがんを治療する方法も本明細書で提供され、任意選択で、がんは、固形腫瘍および血液系腫瘍から選択される。いくつかの実施形態では、がんは、ＨＬＡ−ペプチド標的を発現するかまたは発現すると予測される。
本明細書に開示の抗原結合タンパク質または本明細書に開示の医薬組成物、および使用説明書を含むものも、本明細書で提供される。本明細書に開示の少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的と、アジュバントとを含む組成物も、本明細書で提供される。本明細書に開示の少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的および薬学的に許容される賦形剤も、本明細書で提供される。表Ａに開示の少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的のポリペプチドを含むアミノ酸配列を含む組成物も本明細書で提供され、任意選択で、アミノ酸配列は、ポリペプチドから本質的になるかまたはそれからなる。本明細書に開示の単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含むウイルスも、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、ウイルスは繊維状ファージである。本明細書に開示の単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含む酵母細胞も、本明細書で提供される。
表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を提供することと、少なくとも１つの標的を抗原結合タンパク質と結合させ、それにより抗原結合タンパク質を同定することと、を含む、本明細書に開示の抗原結合タンパク質を同定する方法も、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、複数の別個の抗原結合タンパク質を含むファージディスプレイライブラリーに存在する。いくつかの実施形態では、ファージディスプレイライブラリーは、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡに非特異的に結合する抗原結合タンパク質を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、複数の別個のＴＣＲまたはその抗原結合断片を含むＴＣＲライブラリーに存在する。いくつかの実施形態では、結合ステップは、１回超、任意選択で少なくとも３回実行される。いくつかの実施形態では、本方法は、抗原結合タンパク質がＨＬＡ−ペプチド標的に選択的に結合するかどうかを決定するために、抗原結合タンパク質をＨＬＡ−ペプチド標的とは異なる１つ以上のペプチド−ＨＬＡ複合体と接触させることをさらに含み、任意選択で、選択性は、抗原結合タンパク質の可溶性標的ＨＬＡ−ペプチド複合体への結合親和性を標的複合体とは異なる可溶性ＨＬＡ−ペプチド複合体への結合親和性に対して測定することにより決定され、任意選択で、選択性は、抗原結合タンパク質の１つ以上の細胞の表面で発現される標的ＨＬＡ−ペプチド複合体への結合親和性を１つ以上の細胞の表面で発現される標的複合体とは異なるＨＬＡ−ペプチド複合体に対して測定することにより決定される。
表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を得ることと、ＨＬＡ−ペプチド標的を、任意選択でアジュバントと組み合わせて対象に投与することと、抗原結合タンパク質を対象から単離することと、を含む、本明細書に開示の抗原結合タンパク質を同定する方法も、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質を単離することは、抗原結合タンパク質を同定するために、対象の血清をスクリーニングすることを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、抗原結合タンパク質がＨＬＡ−ペプチド標的に選択的に結合するかどうかを決定するために、抗原結合タンパク質をＨＬＡ−ペプチド標的とは異なる１つ以上のペプチド−ＨＬＡ複合体と接触させることをさらに含み、任意選択で、選択性は、抗原結合タンパク質の可溶性標的ＨＬＡ−ペプチド複合体への結合親和性を標的複合体とは異なる可溶性ＨＬＡ−ペプチド複合体への結合親和性に対して測定することにより決定され、任意選択で、選択性は、抗原結合タンパク質の１つ以上の細胞の表面で発現される標的ＨＬＡ−ペプチド複合体への結合親和性を１つ以上の細胞の表面で発現される標的複合体とは異なるＨＬＡ−ペプチド複合体に対して測定することにより決定される。いくつかの実施形態では、対象は、マウス、ウサギ、またはラマである。いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質を単離することは、抗原結合タンパク質を発現する対象からＢ細胞を単離することと、任意選択で、単離されたＢ細胞から抗原結合タンパク質をコードする配列を直接クローニングすることと、を含む。いくつかの実施形態では、本方法は、Ｂ細胞を使用してハイブリドーマを創出することをさらに含む。いくつかの実施形態では、本方法は、Ｂ細胞からＣＤＲをクローニングすることをさらに含む。いくつかの実施形態では、本方法は、任意選択でＥＢＶ形質転換を介して、Ｂ細胞を不死化することをさらに含む。いくつかの実施形態では、本方法は、Ｂ細胞の抗原結合タンパク質を含むライブラリーを創出することをさらに含み、任意選択で、ライブラリーは、ファージディスプレイまたは酵母ディスプレイである。いくつかの実施形態では、本方法は、抗原結合タンパク質をヒト化することをさらに含む。抗原結合タンパク質を含む細胞を得ることと、細胞を表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を含むＨＬＡ多量体と接触させることと、ＨＬＡ多量体と抗原結合タンパク質との間の結合を介して抗原結合タンパク質を同定することと、を含む、本明細書に開示の抗原結合タンパク質を同定する方法も、本明細書で提供される。抗原結合タンパク質を含む１つ以上の細胞を得ることと、１つ以上の細胞を、天然または人工の抗原提示細胞（ＡＰＣ）上に提示された表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を用いて活性化することと、表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的との相互作用により活性化された１つ以上の細胞の選択を介して、抗原結合タンパク質を同定することと、を含む、本明細書に開示の抗原結合タンパク質を同定する方法も、本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、細胞は、Ｔ細胞、任意選択でＣＴＬである。いくつかの実施形態では、本方法は、フローサイトメトリー、磁気分離、または単一細胞分離を任意選択で使用して、細胞を単離することをさらに含む。いくつかの実施形態では、本方法は、抗原結合タンパク質を配列決定することをさらに含む。
表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を提供することと、標的を使用して抗原結合タンパク質を同定することと、を含む、本明細書に開示の抗原結合タンパク質を同定する方法も、本明細書で提供される。
本発明のこれらおよび他の特徴、態様、および利点は、下記の説明および添付の図面と関連させることでよりよく理解されるようになる。
ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ分子の一般構造を示す。ｅｎ．ｗｉｋｉｐｅｄｉａ−Ｏｗｎ ｗｏｒｋ，ＣＣ ＢＹ ２．５，ｈｔｔｐｓ：／／ｃｏｍｍｏｎｓ．ｗｉｋｉｍｅｄｉａ．ｏｒｇ／ｗ／ｉｎｄｅｘ．ｐｈｐ？ｃｕｒｉｄ＝１８０５４２４上のユーザー２３５による。 治療開発のためにＴＣＲを発現系にクローニングするための例示的な構築物要素を示す。 治療開発のためにＴＣＲを発現系にクローニングするための例示的な構築物骨格配列を示す。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３３２を開示する。 治療開発のためにＡ＊０２０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ−（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲを発現系にクローニングするための例示的な構築物配列を示す。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３３３を開示する。 治療開発のためにＡ＊０１０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）に特異的なＴＣＲを発現系にクローニングするための例示的な例示的な構築物配列を示す。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３３４を開示する。 ペプチドＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）のスペクトルデータを示す。本図には、ペプチド断片化情報、およびＨＬＡタイプを含む患者試料に関連する情報が含まれる。 ペプチドＧＶＨＧＧＩＬＮＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４２４）のスペクトルデータを示す。本図には、ペプチド断片化情報、およびＨＬＡタイプを含む患者試料に関連する情報が含まれる。 ペプチドＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶのスペクトルデータを示す。 ペプチドＮＴＤＮＮＬＡＶＹのスペクトルデータを示す。 ペプチドＮＴＤＮＮＬＡＶＹのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 表Ａに開示に開示されている追加のペプチドのスペクトルデータを示す。 Ｇ２標的ＨＬＡ−Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）の標的スクリーン１の設計を示す。 図９Ａは、Ｇ２標的の標的およびミニプールの陰性対照の設計を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３および４３３５〜４３３７を開示する。図９Ｂは、Ｇ２カウンタースクリーン「ミニプール」およびＧ２標的の安定性ＥＬＩＳＡ結果を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３、４３３５〜４３３７、および４３６３を開示する。 追加のＧ２「完全」プールカウンタースクリーンペプチドの安定性ＥＬＩＳＡ結果を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３３８〜４３５２を開示する。 Ｇ７標的ＨＬＡ−Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）の標的スクリーン２の設計を示す。 追加のＧ７「完全」プールカウンタースクリーンペプチドの安定性ＥＬＩＳＡ結果を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３４１〜４４３４、４３５０〜４３５８、および４３３５〜４３３７を開示する。 図１３Ａは、Ｇ７標的の標的およびミニプールの陰性対照の設計を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７および４３３８〜４３４０を開示する。図１３Ｂは、Ｇ７カウンタースクリーン「ミニプール」およびＧ７標的の安定性ＥＬＩＳＡ結果を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７、４３３８〜４３４０、および４３４４を開示する。 図１４Ａおよび１４Ｂは、それぞれ、Ｇ２およびＧ７標的のファージパニング結果を示す。 図１５Ａおよび１５Ｂは、それぞれ、Ｇ２標的ＦａｂクローンＧ−２Ｐ１Ｈ１１およびＧ７標的Ｇ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９のバイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）の結果を示す。 本明細書に記載の位置スキャン実験用のアミノ酸置換のマップを示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３および２７３７を開示する。 図１７Ａは、Ｇ２位置変異体−ＨＬＡの安定性色分け図を示す。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を開示する。図１７Ｂは、ＦａｂクローンＧ２−Ｐ１Ｈ１１の親和性色分け図を示す。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３を開示する。 図１８Ａは、Ｇ７位置変異体の安定性色分け図を示す。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７を開示する。図１８Ｂは、ＦａｂクローンＧ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９の親和性色分け図を示す。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７を開示する。 標的または陰性対照ペプチドでパルスしたＨＬＡ形質導入Ｋ５６２細胞へのＦａｂクローンＧ２−Ｐ１Ｈ１１およびＧ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９の細胞結合結果を示す。 標的または陰性対照ペプチドでパルスしたＨＬＡ形質導入Ｋ５６２細胞へのＦａｂクローンＧ２−Ｐ１Ｈ１１およびＧ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９の細胞結合結果を示す。 結晶構造ＰＤＢ ５ｂｓ０にプロットした水素−重水素交換（ＨＤＸ）データの例を示す。 連結させた摂動ビューを使用して全体を視覚化したｓｃＦｖクローンＧ２−Ｐ１Ｇ０７の例示的なＨＤＸ色分け図を示す。ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３５９を開示する。 試験したＧ２ ｓｃＦｖおよびＦａｂクローンのＨＬＡ α１およびα２ヘリックスのＨＤＸ色分け図を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３６０〜４３６１を開示する。 試験したＧ２ ｓｃＦｖおよびＦａｂクローンのＨＬＡ α１およびα２ヘリックスのＨＤＸ色分け図を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３６０〜４３６１を開示する。 試験したＧ２ ｓｃＦｖおよびＦａｂクローンの拘束性ペプチドＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）のＨＤＸヒートマップを示す。 ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＴＣＲを単離した実験的ワークフローを示す。 ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＴＣＲを単離した実験的ワークフローを示す。 ＭＨＣ標的特異的ＣＤ８＋ Ｔ細胞を選別するためのフローサイトメトリー選別手順を示す。 例示的なＨＬＡ−ペプチド標的であるＢ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７２１）およびＡ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）のフローサイトメトリーの結果を示す。 ＨＬＡ−ペプチド標的Ａ＊０３：０１＿ＧＶＨＧＧＩＬＮＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４２４）のフローサイトメトリーの結果を示す。「ＥＶＤＰＩＧＨＶＹ」をＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６としても開示する。 図２９Ａは、試験したすべてのドナーにわたって合計した、ＨＬＡ−ペプチド標的あたりの単離されたＣＤ８＋ Ｔ細胞の総数を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３、３０２、２７３７、９６、１４２４、２７２１、６、および１を開示する。図２９Ｂは、試験したすべてのドナーにわたって合計した、ＨＬＡ−ペプチド標的あたりの単離されたＣＤ８＋ Ｔ細胞の総数を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、２７３７、３０２、１４２４、６、２７２１、９６、および２３を開示する。 図３０Ａは、試験した各ドナーのＨＬＡ−ペプチド標的あたりの固有のＴＣＲクローン型の数を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３、２７３７、９６、１４２４、２７２１、６、および１を開示する。図３０Ｂは、試験したすべてのドナーにわたって合計した、ＨＬＡ−ペプチド標的あたりの固有のクローン型の総数を示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３、２７３７、９６、１４２４、２７２１、６、および１を開示する。 それぞれのＨＬＡ−ペプチド標的に結合するが、対照ペプチド四量体には結合しない、Ａ＊０２０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ−（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）、Ａ＊０２０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ−（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６）、Ｂ＊４４０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ−（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７２１）、およびＡ＊０１０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）特異的ＴＣＲを発現しているＪｕｒｋａｔ細胞の例を示す。 本明細書で同定したＴＣＲで形質導入したヒトＣＤ８＋細胞がそれらの特定のＨＬＡ−ペプチド標的に結合することを実証するゲーティング戦略およびフローデータを示す。出現順に、それぞれ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７および２７３７を開示する。 レシピエント細胞を本明細書に開示のＴＣＲで形質導入するのに有用な例示的なレンチウイルスベクターを示す。
詳細な説明
他に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語、表記法および他の科学用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有することを意図する。いくつかの場合では、一般的に理解されている意味を持つ用語は、明確化および／またはすぐに参照することができるように本明細書で定義されており、本明細書でそのような定義を含めることは、当該技術分野で一般的に理解されているものとの違いを表すと必ずしも解釈されるべきではない。本明細書に記載または参照される技法および手順は、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ４ｔｈ ｅｄ．（２０１２）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹに記載される広く利用される分子クローニング方法論などの当業者による従来の方法論を利用して、一般的によく理解され、かつ通常用いられる。必要に応じて、市販のキットおよびリガンドの使用を伴う手順は、特に明記しない限り、一般的に製造業者定義のプロトコルおよび条件に従って実施される。
本明細書で使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈により別途明確に示さない限り、複数の参照を含む。「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「など（ｓｕｃｈ ａｓ）」のような用語は、別途明記しない限り、限定的ではない包含を伝えることを意図している。
本明細書で使用する場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、別途明記しない限り、列挙した要素「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」および「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」実施形態も具体的に含む。例えば、「ダイアボディを含む」多重特異性ＡＢＰには、「ダイアボディからなる」多重特異性ＡＢＰと、「本質的にダイアボディからなる」多重特異性ＡＢＰが含まれる。
「約」という用語は、示された値およびその値の上下の範囲を示し、包含する。ある特定の実施形態では、「約」という用語は、指定値±１０％、±５％、または±１％を示す。ある特定の実施形態では、適用可能な場合、「約」という用語は、指定値±その値（複数可）の１標準偏差を示す。
「免疫グロブリン」という用語は、一般に２対のポリペプチド鎖（１対の軽（Ｌ）鎖および１対の重（Ｈ）鎖）を含む構造的に関連するタンパク質のクラスを指す。「完全な免疫グロブリン」では、これらの鎖の４つすべてがジスルフィド結合によって相互接続されている。免疫グロブリンの構造は十分に特徴付けられている。例えば、Ｐａｕｌ，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ７ｔｈ ｅｄ．，Ｃｈ．５（２０１３）Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡを参照されたい。簡単に説明すると、各重鎖は、典型的には、重鎖可変領域（ＶＨ）および重鎖定常領域（ＣＨ）を含む。重鎖定常領域は、典型的には、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３と略される３つのドメインを含む。各軽鎖は、典型的には、軽鎖可変領域（ＶＬ）および軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、典型的には、ＣＬと略される１つのドメインを含む。
「抗原結合タンパク質」または「ＡＢＰ」という用語は、本明細書ではその最も広い意味で使用され、抗原またはエピトープに特異的に結合する１つ以上の抗原結合ドメインを含む特定のタイプの分子を含む。
いくつかの実施形態では、ＡＢＰは抗体を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは抗体からなる。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは本質的に抗体からなる。ＡＢＰには、具体的には、完全な抗体（例えば、完全な免疫グロブリン）、抗体断片、ＡＢＰ断片、および多重特異性抗体が含まれる。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは代替の足場を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは代替の足場からなる。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは本質的に代替の足場からなる。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは抗体断片を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは抗体からなる。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは本質的に抗体断片からなる。いくつかの実施形態では、ＡＢＰはＴＣＲまたはその抗原結合部分を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰはＴＣＲまたはその抗原結合部分からなる。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、本質的にＴＣＲまたはその抗原結合部分からなる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲはＡＢＰを含む。「ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰ」、「抗ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰ」、または「ＨＬＡ−ペプチド特異的ＡＢＰ」は、本明細書で提供されるように、抗原ＨＬＡ−ペプチドに特異的に結合するＡＢＰである。ＡＢＰは、Ｂ細胞（例えば、抗体）またはＴ細胞（例えば、ＴＣＲ）に由来する可変領域などの可変領域を介して抗原またはエピトープに特異的に結合する１つ以上の抗原結合ドメインを含むタンパク質を含む。
本明細書における「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、ポリクローナルおよびモノクローナル抗体を含み、これらには、無傷の抗体と、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂを含む機能的（抗原結合）抗体断片を含むポリクローナルおよびモノクローナル抗体を含む断片、Ｆｖ断片、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）断片、抗原に特異的に結合できる可変重鎖（ＶＨ）領域、Ｆａｂ’断片、Ｆｖ断片、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）断片、抗原に特異的に結合することができる可変重鎖（ＶＨ）領域、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む一本鎖抗体断片、および一本鎖ドメイン抗体（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ）断片を含む、断片抗原結合（Ｆａｂ）断片とが含まれる。本用語は、免疫グロブリンの遺伝子操作および／または別様に修飾された形態の免疫グロブリン、例えば、イントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全ヒト抗体、ヒト化抗体、およびヘテロコンジュゲート抗体、多重特異性、例えば二重特異性の抗体、ダイアボディ、トリアボディ、およびテトラボディ、タンデムジｓｃＦｖ、タンデムトリｓｃＦｖを包含する。別途記載のない限り、「抗体」という用語は、その機能的抗体断片を包含すると理解されるべきである。本用語はまた、ＩｇＧ、ならびにそのサブクラスであるＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、およびＩｇＤを含む、任意のクラスまたはサブクラスの抗体を含む、無傷または完全長の抗体を包含する。
本明細書で使用される場合、「可変領域」は、組換え事象から生じる可変ヌクレオチド配列を指し、例えば、これは、免疫グロブリンのＶ、Ｊ、および／もしくはＤ領域、または活性化されたＴ細胞もしくは活性化されたＢ細胞などのＢ細胞もしくはＴ細胞由来のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）配列を含み得る。
「抗原結合ドメイン」という用語は、抗原またはエピトープに特異的に結合することができるＡＢＰの部分を意味する。抗原結合ドメインの一例は、ＡＢＰの抗体ＶＨ−ＶＬ二量体によって形成される抗原結合ドメインである。抗原結合ドメインの別の例は、アドネクチンの１０番目のフィブロネクチンＩＩＩ型ドメインからの特定のループの多様化によって形成される抗原結合ドメインである。抗原結合ドメインには、重鎖からの抗体ＣＤＲ１、２、および３がこの順序で含まれ、軽鎖からの抗体ＣＤＲ１、２、および３がこの順序で含まれ得る。抗原結合ドメインには、ＴＣＲ ＣＤＲ、例えば、αＣＤＲ１、αＣＤＲ２、αＣＤＲ３、βＣＤＲ１、βＣＤＲ２、およびβＣＤＲ３が含まれ得る。ＴＣＲ ＣＤＲは本明細書に記載されている。
抗体ＶＨおよびＶＬ領域は、さらに保存された領域が散在する超可変性の領域（「超可変領域（ＨＶＲ）」（「相補性決定領域」（ＣＤＲ）とも呼ばれる）にさらに細分され得る。より保存された領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。各ＶＨおよびＶＬは、一般的に、以下の順序で（Ｎ末端からＣ末端に）配置された３つの抗体ＣＤＲおよび４つのＦＲを含む：ＦＲ１−ＣＤＲ１−ＦＲ２−ＣＤＲ２−ＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４。抗体ＣＤＲは、抗原結合に関与し、ＡＢＰの抗原特異性および結合親和性に影響する。参照により全体が組み込まれるＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ ５ｔｈ ｅｄ．（１９９１）Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤを参照されたい。
任意の脊椎動物種からの軽鎖は、その定常ドメインの配列に基づいて、カッパ（κ）およびラムダ（λ）と呼ばれる２つのタイプのうちの１つに割り当てることができる。
脊椎動物種の重鎖は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭの５つの異なるクラス（またはアイソタイプ）のうちの１つに割り当てることができる。これらのクラスは、それぞれα、δ、ε、γ、およびμとも称される。ＩｇＧおよびＩｇＡクラスは、配列および機能の違いに基づいてサブクラスにさらに分けられる。ヒトは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２のサブクラスを発現する。
抗体ＣＤＲのアミノ酸配列境界は、各々参照により全体が組み込まれる、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．の上記（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム）、Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７−９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）、ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２−７４５（「Ｃｏｎｔａｃｔ」番号付けスキーム）、Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，２７：５５−７７（「ＩＭＧＴ」番号付けスキーム）、およびＨｏｎｅｇｇｅ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００１，３０９：６５７−７０（「ＡＨｏ」番号付けスキーム）（「ＡＨｏ」番号付けスキーム）によって記載されたものを含む、いくつかの既知の番号付けスキームのいずれかを使用して、当業者によって決定され得る。
表１４は、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａスキームによって特定された抗体ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、およびＣＤＲ−Ｈ３の位置を提供する。ＣＤＲ−Ｈ１の場合、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの両方の番号付けスキームを使用して、残基の番号付けが提供される。
抗体ＣＤＲは、例えば、ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｓ／ａｂｎｕｍ／で入手可能で、かつ参照によりその全体が組み込まれるＡｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００８，４５：３８３２−３８３９に記載されているＡｂｎｕｍなどのＡＢＰ番号付けソフトウェアを使用して割り当てることができる。
（表１４）ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの番号付けスキームによるＣＤＲの残基
Figure 2021500852
＊ＣＤＲ−Ｈ１のＣ末端は、Ｋａｂａｔ番号付け規則を使用して番号付けされた場合、ＣＤＲの長さに応じてＨ３２とＨ３４との間で異なる。
「ＥＵ番号付けスキーム」は、一般的に、ＡＢＰ重鎖定常領域内の残基を指す場合に（例えば、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌで報告されているように）使用される。別途記載のない限り、ＥＵ番号付けスキームは、本明細書に記載のＡＢＰ重鎖定常領域の残基を指すために使用される。
「完全長抗体」、「完全な抗体」、および「全抗体」という用語は、自然に発生する抗体構造と実質的に類似の構造を有し、Ｆｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指すために、本明細書で互換的に使用される。例えば、ＩｇＧ分子を指すために使用される場合、「完全長抗体」とは、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む抗体である。
ＣＤＲのアミノ酸配列境界は、当業者が多数の既知の番号付けスキームのうちのいずれかを使用して決定できるものであり、これらのスキームには、各々参照により全体が組み込まれる、ＬｅＦｒａｎｃ，Ｍ．−Ｐ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ．１９９７ Ｎｏｖ；１８（１１）：５０９；Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍ．−Ｐ．，”ＩＭＧＴ Ｌｏｃｕｓ ｏｎ Ｆｏｃｕｓ：Ａ ｎｅｗ ｓｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏ遺伝子ｔｉｃｓ”，Ｅｘｐ． Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏ遺伝子ｔ．，１５，１−７（１９９８）、Ｌｅｆｒａｎｃ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｔｈｅ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＦａｃｔｓＢｏｏｋ、およびＭ．−Ｐ．Ｌｅｆｒａｎｃ／ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２７（２００３）５５−７７により記載されているＩＭＧＴ固有番号付けが含まれるが、これらに限定されない。
「ＡＢＰ断片」は、無傷のＡＢＰの抗原結合領域または可変領域など、無傷のＡＢＰの一部を含む。ＡＢＰ断片には、例えば、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片、およびｓｃＦｖ−Ｆｃ断片が挙げられる。ＡＢＰ断片には抗体断片が含まれる。抗体断片には、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片、ｓｃＦｖ−Ｆｃ断片、およびＴＣＲ断片が含まれ得る。
「Ｆｖ」断片には、１つの重鎖可変ドメインおよび１つの軽鎖可変ドメインの非共有結合した二量体が含まれる。
「Ｆａｂ」断片は、重鎖および軽鎖可変ドメインに加えて、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）を含む。Ｆａｂ断片は、例えば、組み換え方法により生成されてもよく、または完全長ＡＢＰのパパイン消化により生成されてもよい。
「Ｆ（ａｂ’）２」断片は、ヒンジ領域付近でジスルフィド結合によって結合された２つのＦａｂ’断片を含有する。Ｆ（ａｂ’）２断片は、例えば、組み換え方法により、または無傷のＡＢＰのペプシン消化によって生成され得る。Ｆ（ａｂ’）断片は、例えば、β−メルカプトエタノールによる処理によって解離することができる。
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」断片は、単一のポリペプチド鎖内にＶＨドメインおよびＶＬドメインを含む。ＶＨおよびＶＬは、一般的に、ペプチドリンカーによって連結される。Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ Ａ．（１９９４）を参照されたい。任意の好適なリンカーを使用することができる。いくつかの実施形態では、リンカーは（ＧＧＧＧＳ）ｎである。いくつかの実施形態では、ｎ＝１、２、３、４、５、または６である。参照により全体が組み込まれる、ＡＢＰｓ ｆｒｏｍ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ．Ｉｎ ＲｏｓｅｎｂｅｒｇＭ．＆Ｍｏｏｒｅ Ｇ．Ｐ．（Ｅｄｓ．），Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ＡＢＰｓ ｖｏｌ．１１３（ｐｐ．２６９−３１５）．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい。
「ｓｃＦｖ−Ｆｃ」断片は、Ｆｃドメインに付着したｓｃＦｖを含む。例えば、Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖのＣ末端に結合してもよい。Ｆｃドメインは、ｓｃＦｖ内の可変ドメインの向きに応じて、ＶＨまたはＶＬに続いてもよい（すなわち、ＶＨ−ＶＬまたはＶＬ−ＶＨ）。当該技術分野で既知のまたは本明細書に記載される任意の好適なＦｃドメインが使用され得る。いくつかの場合には、ＦｃドメインはＩｇＧ４ Ｆｃドメインを含む。
「単一ドメイン抗体」という用語は、ＡＢＰの１つの可変ドメインが他の可変ドメインの存在なしに抗原に特異的に結合する分子を指す。単一ドメインＡＢＰおよびその断片は、各々参照により全体が組み込まれるＡｒａｂｉ Ｇｈａｈｒｏｕｄｉ ｅｔ ａｌ．，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９８，４１４：５２１−５２６ ａｎｄ Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．，２００１，２６：２３０−２４５に記載されている。単一ドメインＡＢＰは、ｓｄＡｂまたはナノボディとしても知られている。
「Ｆｃ領域」または「Ｆｃ」という用語は、自然に発生する抗体では、Ｆｃ受容体および補体系の特定のタンパク質と相互作用する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を意味する。様々な免疫グロブリンのＦｃ領域の構造、およびそこに含まれるグリコシル化部位は、当技術分野において知られている。参照により全体が組み込まれるＳｃｈｒｏｅｄｅｒ ａｎｄ Ｃａｖａｃｉｎｉ，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１０，１２５：Ｓ４１−５２を参照されたい。Ｆｃ領域は、自然に発生するＦｃ領域、または当技術分野または本開示の他の箇所に記載されているように改変されたＦｃ領域であってもよい。
「代替の足場」という用語は、１つ以上の領域が多様化されて、抗原またはエピトープに特異的に結合する１つ以上の抗原結合ドメインを生成する分子を指す。いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ＡＢＰのものに類似した特異性および親和性で抗原またはエピトープに結合する。例示的な代替の足場には、フィブロネクチン（例えば、Ａｄｎｅｃｔｉｎ（商標））、β−サンドイッチ（例えば、ｉＭａｂ）、リポカリン（例えば、Ａｎｔｉｃａｌｉｎ（登録商標））、ＥＥＴＩ−ＩＩ／ＡＧＲＰ、ＢＰＴＩ／ＬＡＣＩ−Ｄ１／ＩＴＩ−Ｄ２（例えば、クニッツドメイン）、チオレドキシンペプチドアプタマー、タンパク質Ａ（例えば、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標））、アンキリンリピート（例えば、ＤＡＲＰｉｎ）、ガンマ−Ｂ−クリスタリン／ユビキチン（例えば、Ａｆｆｉｌｉｎ）、ＣＴＬＤ３（例えば、Ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ）、フィノマー、および（ＬＤＬＲ−Ａモジュール）（Ａｖｉｍｅｒ）が挙げられる。代替の足場に関する追加情報は、各々参照により全体が組み込まれる、Ｂｉｎｚ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２００５ ２３：１２５７−１２６８、Ｓｋｅｒｒａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ．ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００７ １８：２９５−３０４、およびＳｉｌａｃｃｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１４，２８９：１４３９２−１４３９８で提供されている。代替の足場はＡＢＰの一種である。
「多重特異性ＡＢＰ」は、２つ以上の異なるエピトープに集合的に特異的に結合する２つ以上の異なる抗原結合ドメインを含むＡＢＰである。２つ以上の異なるエピトープは、同じ抗原（例えば、細胞によって発現する単一のＨＬＡ−ペプチド分子）または異なる抗原（例えば、同じ細胞によって発現する異なるＨＬＡ−ペプチド分子、またはＨＬＡ−ペプチド分子および非ＨＬＡ−ペプチド分子）上のエピトープであってもよい。いくつかの態様では、多重特異性ＡＢＰは、２つの異なるエピトープ（すなわち、「二重特異性ＡＢＰ」）に結合する。いくつかの態様では、多重特異性ＡＢＰは、３つの異なるエピトープ（すなわち、「三重特異性ＡＢＰ」）に結合する。
「単一特異性ＡＢＰ」は、単一のエピトープに特異的に結合する１つ以上の結合部位を含むＡＢＰである。単一特異性ＡＢＰの例は、二価（すなわち、２つの抗原結合ドメインを有する）であるが、２つの抗原結合ドメインの各々で同じエピトープを認識する自然に発生するＩｇＧ分子である。結合特異性は、任意の好適な価数で存在し得る。
「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団からの抗体を指す。実質的に均質な抗体の集団は、モノクローナル抗体の産生中に通常生じ得る変異体を除いて、実質的に類似し、同じエピトープ（複数可）に結合する抗体を含む。そのような変異体は、一般にほんの少量で存在する。モノクローナル抗体は、典型的には、複数の抗体から単一の抗体を選択することを含むプロセスによって得られる。例えば、選択プロセスは、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、酵母クローン、細菌クローン、または他の組み換えＤＮＡクローンのプールなど、複数のクローンからの固有のクローンの選択であり得る。選択された抗体をさらに変更して、例えば、標的に対する親和性（「親和性成熟」）を改善し、抗体をヒト化し、細胞培養でのその産生を改善し、および／または対象の免疫原性を低下させることができる。
「キメラ抗体」という用語は、重鎖および／または軽鎖の一部が特定の供給源または種に由来し、重鎖および／または軽鎖の残りが異なる供給源または種に由来する抗体を指す。
非ヒト抗体の「ヒト化」型は、非ヒト抗体に由来する配列を最低限で含有するキメラ抗体である。ヒト化抗体は、一般に、１つ以上のＣＤＲからの残基が非ヒト抗体（ドナー抗体）の１つ以上のＣＤＲの残基で代置されたヒト抗体（レシピエント抗体）である。ドナー抗体は、所望の特異性、親和性、または生物学的効果を有する、マウス、ラット、ウサギ、ニワトリ、または非ヒト霊長類抗体などの任意の適切な非ヒト抗体であり得る。いくつかの場合には、レシピエント抗体の選択されたフレームワーク領域残基は、ドナー抗体からの対応するフレームワーク領域残基で代置される。ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含んでもよい。そのような修飾は、抗体機能をさらに洗練するためになされてもよい。さらなる詳細については、各々参照により全体が組み込まれる、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８６，３２１：５２２−５２５、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３３２：３２３−３２９、およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，１９９２，２：５９３−５９６を参照されたい。
「ヒト抗体」は、ヒトまたはヒト細胞によって産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列、またはヒト抗体レパートリーまたはヒト抗体コード配列（ヒトの供給源から得られるか、または新たに設計された）を利用する非ヒト供給源に由来するアミノ酸配列を有するものである。ヒト抗体は、特にヒト化抗体を除外する。
「親和性」とは、分子の単一結合部位（例えば、ＡＢＰ）とその結合パートナー（例えば、抗原またはエピトープ）との間の非共有相互作用の合計の強度を指す。別途記載のない限り、本明細書で使用する「親和性」とは、結合対のメンバー（例えば、ＡＢＰおよび抗体またはエピトープ）の間の１：１相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。パートナーＹに対する分子Ｘの親和性は、解離平衡定数（ＫＤ）によって表すことができる。解離平衡定数に寄与する運動成分については、以下でより詳細に説明する。親和性は、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標））または生体層干渉法（例えば、ＦＯＲＴＥＢＩＯ（登録商標））など、本明細書に記載の方法を含む当技術分野で公知の一般的な方法によって測定することができる。
ＡＢＰの標的分子への結合に関して、特定の抗原（例えば、ポリペプチド標的）または特定の抗原上のエピトープに「結合する」、「特異的結合」、「特異的に結合する」、「特異的に結合する」、「選択的に結合する」、および「に対して選択的に」という用語は、非特異的または非選択的相互作用（例えば、非標的分子との）とは多少は異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、標的分子への結合を測定し、それを非標的分子への結合と比較することによって測定することができる。特異的結合は、標的分子上で認識されるエピトープを模倣する制御分子との競合によっても決定することができる。その場合、標的分子へのＡＢＰの結合が対照分子によって競合的に阻害される場合、特異的結合が示される。いくつかの態様では、非標的分子に対するＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの親和性は、ＨＬＡ−ペプチドに対する親和性の約５０％未満である。いくつかの態様では、非標的分子に対するＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの親和性は、ＨＬＡ−ペプチドに対する親和性の約４０％未満である。いくつかの態様では、非標的分子に対するＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの親和性は、ＨＬＡ−ペプチドに対する親和性の約３０％未満である。いくつかの態様では、非標的分子に対するＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの親和性は、ＨＬＡ−ペプチドに対する親和性の約２０％未満である。いくつかの態様では、非標的分子に対するＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの親和性は、ＨＬＡ−ペプチドに対する親和性の約１０％未満である。いくつかの態様では、非標的分子に対するＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの親和性は、ＨＬＡ−ペプチドに対する親和性の約１％未満である。いくつかの態様では、非標的分子に対するＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの親和性は、ＨＬＡ−ペプチドに対する親和性の約０．１％未満である。
本明細書で使用される「ｋｄ」（秒−１）という用語は、特定のＡＢＰ−抗原相互作用の解離速度定数を指す。この値は、ｋｏｆｆ値とも称される。
本明細書で使用される「ｋａ」（Ｍ−１×秒−１）という用語は、特定のＡＢＰ−抗原相互作用の会合速度定数を指す。この値は、ｋｏｎ値とも称される。
本明細書で使用される「ＫＤ」（Ｍ）という用語は、特定のＡＢＰ−抗原相互作用の解離平衡定数を指す。ＫＤ＝ｋｄ／ｋａ。いくつかの実施形態では、ＡＢＰの親和性は、そのようなＡＢＰとその抗原との間の相互作用に対するＫＤの観点から説明される。明確にするために、当技術分野で知られているように、より小さなＫＤ値はより高い親和性相互作用を示し、より大きなＫＤ値はより低い親和性相互作用を示す。
本明細書で使用される「ＫＡ」（Ｍ−１）という用語は、特定のＡＢＰ−抗原相互作用の会合平衡定数を指す。ＫＡ＝ｋａ／ｋｄ。
「免疫複合体」は、治療薬（例えば、サイトカイン）または診断薬などの１つ以上の異種分子（複数可）にコンジュゲートされたＡＢＰである。
「Ｆｃエフェクター機能」とは、Ｆｃ領域を有するＡＢＰのＦｃ領域によって媒介される生物活性を指し、その活性はアイソタイプに応じて異なり得る。ＡＢＰエフェクター機能の例には、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を活性化するＣ１ｑ結合、ＡＢＰ依存性細胞細胞傷害（ＡＤＣＣ）を活性化するＦｃ受容体結合、ＡＢＰ依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）が挙げられる。
本明細書では２つ以上のＡＢＰの文脈で使用される場合、「と競合する」または「交差競合する」という用語は、２つ以上のＡＢＰが抗原（例えば、ＨＬＡ−ペプチド）への結合について競合することを示す。１つの例示的なアッセイでは、ＨＬＡ−ペプチドが表面上にコーティングされて第１のＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰと接触し、その後、第２のＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰ抗体が添加される。別の例示的なアッセイでは、第１のＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰが表面上にコーティングされてＨＬＡ−ペプチドと接触し、次いで、第２のＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰが添加される。いずれかのアッセイで、第１のＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの存在が第２のＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの結合を低下させる場合、ＡＢＰは互いに競合する。「と競合する」という用語には、１つのＡＢＰが別のＡＢＰの結合を減少させるが、ＡＢＰが逆の順序で添加されるときに競合が観察されないＡＢＰの組み合わせも含まれる。しかしながら、いくつかの実施形態では、第１および第２のＡＢＰは、それらが添加される順序に関係なく、互いの結合を阻害する。いくつかの実施形態では、１つのＡＢＰは、別のＡＢＰのその抗原への結合を、少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％だけ減少させる。当業者は、ＨＬＡ−ペプチドに対するＡＢＰの親和性およびＡＢＰの価数に基づいて、競合アッセイで使用されるＡＢＰの濃度を選択することができる。この定義に記載されているアッセイは例示であり、当業者は、ＡＢＰが互いに競合するかどうかを決定するために任意の好適なアッセイを利用することができる。好適なアッセイは、例えば、各々参照により全体が組み込まれる、Ｃｏｘ ｅｔ ａｌ．，“Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ Ｍｅｔｈｏｄｓ，”Ａｓｓａｙ Ｇｕｉｄａｎｃｅ Ｍａｎｕａｌ［Ｉｎｔｅｒｎｅｔ］，Ｕｐｄａｔｅｄ Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２４，２０１４（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｂｏｏｋｓ／ＮＢＫ９２４３４／；ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２９，２０１５）、Ｓｉｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，２００１，４４：３０−３７、およびＦｉｎｃｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ａｎａｌ．，２０１１，５４：３５１−３５８に記載されている。
「エピトープ」という用語は、ＡＢＰに特異的に結合する抗原の一部を意味する。エピトープは、多くの場合、表面にアクセス可能なアミノ酸残基および／または糖側鎖からなり、特定の３次元構造特性ならびに特定の電荷特性を有してもよい。立体配座エピトープおよび非立体配座エピトープは、変性溶媒の存在下で前者への結合が失われるが後者は失われない可能性があるという点で区別される。エピトープは、結合に直接関与するアミノ酸残基、および結合に直接関与しない他のアミノ酸残基を含んでもよい。ＡＢＰが結合するエピトープは、例えば、異なる点突然変異を有するＨＬＡ−ペプチド変異体またはキメラＨＬＡ−ペプチド変異体へのＡＢＰ結合の試験などのエピトープ決定のための既知の技法を使用して決定することができる。
ポリペプチド配列と参照配列との間のパーセントの「同一性」は、配列を整列させ、必要に応じてギャップを導入して、最大パーセント配列の同一性を達成した後の、参照配列のアミノ酸残基と同一であるポリペプチド配列のアミノ酸残基の割合として定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定するためのアラインメントは、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、ＭＥＧＡＬＩＧＮ（ＤＮＡＳＴＡＲ）、ＣＬＵＳＴＡＬＷ、ＣＬＵＳＴＡＬ ＯＭＥＧＡ、またはＭＵＳＣＬＥソフトウェアなどの一般公開されているコンピュータソフトウェアを使用して、当業者の技術範囲内の様々な方法において、達成することができる。当業者は、比較される配列の完全長にわたって最大の整列を達成するために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、配列を整列させるための適切なパラメーターを決定することができる。
「保存的置換」または「保存的アミノ酸置換」は、化学的または機能的に類似したアミノ酸によるアミノ酸の置換を指す。類似したアミノ酸を提供する保存的置換表は、当技術分野で周知である。例として、表１５〜１７で提供されるアミノ酸のグループは、いくつかの実施形態では、相互の保存的置換とみなされる。
（表１５）ある特定の実施形態における、相互の保存的置換とみなされるアミノ酸の選択されたグループ
Figure 2021500852
（表１６）ある特定の実施形態における、相互の保存的置換とみなされるアミノ酸の追加の選択されたグループ
Figure 2021500852
（表１７）ある特定の実施形態における、相互の保存的置換とみなされるアミノ酸のさらなる選択されたグループ
Figure 2021500852
追加の保存的置換は、例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ２ｎｄ ｅｄ．（１９９３）Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹに見られ得る。親ＡＢＰ中でアミノ酸残基の１つ以上の保存的置換を行うことにより生成されるＡＢＰは、「保存的に修飾された変異体」と称される。
「アミノ酸」という用語は、２０種類の一般的な自然に発生するアミノ酸を指す。自然に発生するアミノ酸には、アラニン（Ａｌａ、Ａ）、アルギニン（Ａｒｇ、Ｒ）、アスパラギン（Ａｓｎ、Ｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ、Ｄ）、システイン（Ｃｙｓ、Ｃ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ、Ｅ）、グルタミン（Ｇｌｎ、Ｑ）、グリシン（Ｇｌｙ、Ｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ、Ｈ）、イソロイシン（Ｉｌｅ、Ｉ）、ロイシン（Ｌｅｕ、Ｌ）、リジン（Ｌｙｓ、Ｋ）、メチオニン（Ｍｅｔ、Ｍ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ、Ｆ）、プロリン（Ｐｒｏ、Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ、Ｓ）、スレオニン（Ｔｈｒ、Ｔ）、トリプトファン（Ｔｒｐ、Ｗ）、チロシン（Ｔｙｒ、Ｙ）、およびバリン（Ｖａｌ、Ｖ）が挙げられる。
本明細書で使用される「ベクター」という用語は、それが連結している別の核酸を伝播することができる核酸分子を指す。この用語には、自己複製核酸構造としてのベクター、およびそれが導入されている宿主細胞のゲノムに組み込まれたベクターが含まれる。特定のベクターは、それらが動作可能に連結されている核酸の発現を指示することができる。そのようなベクターは、本明細書では「発現ベクター」と称される。
「宿主細胞」、「宿主細胞株」、および「宿主細胞培養」という用語は、互換的に使用され、外因性核酸が導入されている細胞、およびそのような細胞の子孫を指す。宿主細胞としては、「形質転換体」（または「形質転換細胞」）および「形質移入体」（または「トランスフェクト細胞」）が挙げられ、各々、一次形質転換またはトランスフェクト細胞およびそれに由来する子孫が含まれる。そのような子孫は、親細胞と核酸含量が完全に同一ではない場合があり、変異を含んでもよい。
「治療すること」（および「治療する」または「治療」などのその変形）という用語は、それを必要とする対象の疾患または状態の自然経過を変更しようとする試みにおける臨床的介入を指す。治療は、予防および臨床病理学の過程の両方のために実行することができる。治療の望ましい効果としては、疾患の発生または再発を予防すること、症状の緩和、疾患の任意の直接的または間接的な病理学的結果の減少、転移を予防すること、疾患の進行速度を低下させること、疾患状態の改善または緩和、および寛解または改善された予後が挙げられる。
本明細書で使用される場合、「治療有効量」または「有効量」という用語は、対象に投与されたときに疾患または障害を治療するのに有効な本明細書で提供されるＡＢＰまたは医薬組成物の量を指す。
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、哺乳動物の対象を意味する。例示的な対象には、ヒト、サル、イヌ、ネコ、マウス、ラット、ウシ、ウマ、ラクダ、ヤギ、ウサギ、およびヒツジが挙げられる。ある特定の実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書で提供されるＡＢＰで治療することができる疾患または状態を有する。いくつかの態様では、疾患または状態はがんである。いくつかの態様では、疾患または状態はウイルス感染である。
「添付文書」という用語は、治療薬または診断薬の市販のパッケージ（キットなど）（そのような治療または診断製品の使用に関する指示、利用能、投与量、管理、併用療法、禁忌、および／または警告に関する情報を含む）に慣習上含まれている使用説明書を指すために使用される。
「腫瘍」という用語は、悪性または良性にかかわらず、すべての新生細胞の成長および増殖、ならびにすべての前がん性およびがん性の細胞および組織を指す。「がん」、「がん性」、「細胞増殖性障害」、「増殖性障害」および「腫瘍」という用語は、本明細書で言及されるように相互に排他的ではない。「細胞増殖性障害」および「増殖性障害」という用語は、ある程度の異常な細胞増殖に関連する障害を指す。いくつかの実施形態では、細胞増殖性障害はがんである。いくつかの態様では、腫瘍は固形腫瘍である。いくつかの態様では、腫瘍は血液悪性腫瘍である。
「医薬組成物」という用語は、その中に含有される活性成分の生物活性が対象を治療するのに有効であることを可能にするような形態であり、かつ医薬組成物で提供される量で対象に許容できないほど毒性である追加成分を含有しない製剤を指す。
「調節する」および「調節」という用語は、列挙された変数を減少または阻害するか、あるいは活性化または増加することを指す。
「増加する」および「活性化する」という用語は、列挙された変数の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、またはそれ以上の増加を指す。
「低減する」および「阻害する」という用語は、列挙された変数の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、またはそれ以上の低減を指す。
「刺激する」という用語は、受容体の活性化に関連する生物学的応答を誘発する受容体シグナル伝達の活性化を指す。「アゴニスト」とは、受容体に結合してそれを刺激する実体である。
「拮抗する」という用語は、受容体の活性化に関連する生物学的応答を阻害する受容体シグナル伝達の阻害を指す。「アンタゴニスト」は、受容体に結合して拮抗する実体である。
「核酸」および「ポリヌクレオチド」という用語は、本明細書では互換的に使用され、任意の長さのヌクレオチドの多量体型、デオキシリボヌクレオチドもしくはリボヌクレオチドのいずれかまたはその類似体を指す。ポリヌクレオチドには、遺伝子または遺伝子断片のコード領域または非コード領域、連鎖解析から定義される遺伝子座（遺伝子座（ｌｏｃｕｓ））、エクソン、イントロン、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、ｃＤＮＡ、組換えポリヌクレオチド、分岐ポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、単離ＤＮＡ、単離ＲＮＡ、核酸プローブ、およびプライマーが含まれ得るが、これらに限定されない。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチド類似体などの修飾ヌクレオチドを含んでもよい。例示的な修飾ヌクレオチドには、例えば、５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−クロロウラシル、５−ヨードウラシル、ヒポキサンチン、キサンチン、４−アセチルシトシン、５−（カルボキシヒドロキシメチル）ウラシル、５−カルボキシメチルアミノメチル−２−チオウリジン、５−カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシル、ベータ−Ｄ−ガラクトシルケオシン（ｇａｌａｃｔｏｓｙｌｑｕｅｏｓｉｎｅ）、イノシン、Ｎ６−イソペンテニルアデニン、１−メチルグアニン、１−メチルイノシン、２，２−ジメチルグアニン、２−メチルアデニン、２−メチルグアニン、３−メチルシトシン、５−メチルシトシン、Ｎ６−置換アデニン、７−メチルグアニン、５−メチルアミノメチルウラシル、５−メトキシアミノメチル−２−チオウラシル、ベータ−Ｄ−マンノシルケオシン（ｍａｎｎｏｓｙｌｑｕｅｏｓｉｎｅ）、５’−メトキシカルボキシメチルウラシル、５−メトキシウラシル、２−メチルチオＮ６−イソペンテニルアデニン、ウラシル−５−オキシ酢酸（ｖ）、ワイブトキソシン（ｗｙｂｕｔｏｘｏｓｉｎｅ）、プソイドウラシル、ケオシン（ｑｕｅｏｓｉｎｅ）、２−チオシトシン、５−メチル−２−チオウラシル、２−チオウラシル、４−チオウラシル、５−メチルウラシル、ウラシル−５−オキシ酢酸メチルエステル、３−（３−アミノ−３−Ｎ−２−カルボキシプロピル）ウラシル、および２，６−ジアミノプリンが含まれる。
単離されたＨＬＡ−ペプチド標的
主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）は、マウスではＨ−２、ヒトではＨＬＡと総称される、連結した遺伝子座のグループによってコードされる抗原の複合体である。ＭＨＣ抗原の２つの主要なクラスであるクラスＩおよびクラスＩＩは、各々、組織型および移植適合性を決定する役割を果たす細胞表面糖タンパク質のセットを含む。移植反応では、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）が主にクラスＩ糖タンパク質に応答し、一方でヘルパーＴ細胞が主にクラスＩＩ糖タンパク質に応答する。
本明細書で互換的にＨＬＡクラスＩ分子と称されるヒト主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩ分子は、ほぼすべての細胞の表面に発現する。これらの分子は、内因性に合成されたタンパク質に主に由来するペプチドを、アルファ−ベータＴ細胞受容体との相互作用を介してＣＤ８＋Ｔ細胞に提示することにおいて機能する。クラスＩ ＭＨＣ分子は、１２ｋＤａの軽鎖ベータ−２ミクログロブリンと共有結合によらずに会合した４６ｋＤａのα鎖で構成されるヘテロ二量体を含む。α鎖は、一般に、ＨＬＡ拘束性ペプチドを提示するための溝を形成するα１およびα２ドメインと、Ｔ細胞のＣＤ８共受容体と相互作用するα３細胞質膜貫通ドメインとを含む。図１（先行技術）は、クラスＩ ＨＬＡ分子の一般構造を示している。
クラスＩ ＭＨＣ拘束性ペプチド（本明細書では互換的に、ＨＬＡ拘束性抗原、ＨＬＡ拘束性ペプチド、ＭＨＣ拘束性抗原、拘束性ペプチド、またはペプチドとも称される）は、一般に、ＭＨＣ分子の対応する結合ポケットと相互作用する約２つまたは３つのアンカー残基を介して重鎖アルファ１−アルファ２溝に結合する。ベータ−２ミクログロブリン鎖は、ＭＨＣクラスＩの細胞内輸送、ペプチド結合、および立体配座安定性において重要な役割を果たす。大部分のクラスＩ分子について、ＭＨＣクラスＩ重鎖、ペプチド（自己、非自己、および／または抗原性）、およびベータ−２ミクログロブリンのヘテロ三量体複合体の形成により、タンパク質の成熟および細胞表面への輸出が生じる。
所与のＨＬＡサブタイプのＨＬＡ拘束性ペプチドへの結合により、例えばＴ細胞上のＴＣＲまたは抗体もしくはその抗原結合断片などのＡＢＰによって特異的に認識され得る固有かつ新規な表面との複合体が形成される。ＨＬＡ拘束性ペプチドと複合体化したＨＬＡは、本明細書では、ＨＬＡ−ペプチドまたはＨＬＡ−ペプチド標的と称される。いくつかの場合には、拘束性ペプチドは、ＨＬＡ分子のα１／α２溝に位置する。いくつかの場合には、拘束性ペプチドは、ＨＬＡ分子の対応する結合ポケットと相互作用する約２つまたは３つのアンカー残基を介してＨＬＡ分子のα１／α２溝に結合する。
したがって、ＨＬＡ−ペプチド標的を含む抗原が本明細書で提供される。ＨＬＡ−ペプチド標的は、特定のＨＬＡサブタイプと複合体化した定義されているアミノ酸配列を有する特定のＨＬＡ拘束性ペプチドを含んでもよい。
本明細書で特定されるＨＬＡ−ペプチド標的は、がん免疫療法に有用であってもよい。いくつかの実施形態では、本明細書で特定されるＨＬＡ−ペプチド標的は、腫瘍細胞の表面上に提示される。本明細書で特定されるＨＬＡ−ペプチド標的は、ヒト対象の腫瘍細胞により発現されてもよい。本明細書で特定されるＨＬＡ−ペプチド標的は、ヒト対象集団の腫瘍細胞により発現されてもよい。例えば、本明細書で特定されるＨＬＡ−ペプチド標的は、がんを有するヒト対象の集団において共通して発現される共有抗原であってもよい。
本明細書で特定されるＨＬＡ−ペプチド標的は、個々の腫瘍型の有病率を有し得る。個々の腫瘍型の有病率は、約０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％であってもよい。個々の腫瘍型の有病率は、約０．１％〜１００％、０．２〜５０％、０．５〜２５％、または１〜１０％である。
好ましくは、ＨＬＡ−ペプチド標的は、一般に、ほとんどの正常組織で発現されない。例えば、ＨＬＡ−ペプチド標的は、遺伝子型組織発現（ＧＴＥｘ）プロジェクトの組織で発現されない場合もあれば、免疫特権組織または非必須組織でのみ発現される場合もある。例示的な免疫特権組織または非必須組織には、精巣、小唾液腺、子宮頸部、および甲状腺が含まれる。いくつかの場合には、ＨＬＡ−ペプチド標的は、拘束性ペプチドが由来する遺伝子の発現の中央値がＧＴＥｘ試料全体で０．５ＲＰＫＭ（マッピングされたリード百万単位あたりの転写物１キロベースあたりのリード（Ｒｅａｄｓ Ｐｅｒ Ｋｉｌｏｂａｓｅ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｐｅｒ Ｍｉｌｌｉｏｎ ｎａｐｐｅｄ ｒｅａｄｓ））未満である場合、遺伝子がＧＴＥＸ試料全体で１０ＲＰＫＭを超えて発現しない場合、遺伝子がすべての必須組織試料にわたって２つ以下の試料において５ＲＰＫＭ以上で発現した場合、またはそれらの組み合わせである場合、必須組織または非免疫特権組織で発現しないとみなされ得る。
ＨＬＡ−ペプチド標的の例示的なＨＬＡクラスＩサブタイプ
ヒトには、多くのＭＨＣハプロタイプ（本明細書では、ＭＨＣサブタイプ、ＨＬＡサブタイプ、ＭＨＣタイプ、およびＨＬＡタイプと互換的に称される）がある。例示的なＨＬＡサブタイプには、単に例として、ＨＬＡ−Ａ２、ＨＬＡ−Ａ１、ＨＬＡ−Ａ３、ＨＬＡ−Ａ１１、ＨＬＡ−Ａ２３、ＨＬＡ−Ａ２４、ＨＬＡ−Ａ２５、ＨＬＡ−Ａ２６、ＨＬＡ−Ａ２８、ＨＬＡ−Ａ２９、ＨＬＡ−Ａ３０、ＨＬＡ−Ａ３１、ＨＬＡ−Ａ３２、ＨＬＡ−Ａ３３、ＨＬＡ−Ａ３４、ＨＬＡ−６８、ＨＬＡ−Ｂ７、ＨＬＡ−Ｂ８、ＨＬＡ−Ｂ４０、ＨＬＡ−Ｂ４４、ＨＬＡ−Ｂ１３、ＨＬＡ−Ｂ１５、ＨＬＡ−Ｂ−１８、ＨＬＡ−Ｂ２７、ＨＬＡ−Ｂ３５、ＨＬＡ−Ｂ３７、ＨＬＡ−Ｂ３８、ＨＬＡ−Ｂ３９、ＨＬＡ−Ｂ４５、ＨＬＡ−Ｂ４６、ＨＬＡ−Ｂ４９、ＨＬＡ−Ｂ５１、ＨＬＡ−Ｂ５４、ＨＬＡ−Ｂ５５、ＨＬＡ−Ｂ５６、ＨＬＡ−Ｂ５７、ＨＬＡ−Ｂ５８、ＨＬＡ−Ｃ＊０１、ＨＬＡ−Ｃ＊０２、ＨＬＡ−Ｃ＊０３、ＨＬＡ−Ｃ＊０４、ＨＬＡ−Ｃ＊０５、ＨＬＡ−Ｃ＊０６、ＨＬＡ−Ｃ＊０７、ＨＬＡ−Ｃ＊１２、ＨＬＡ−Ｃ＊１４、ＨＬＡ−Ｃ＊１６、ＨＬＡ−Ｃｗ８、およびそれらの４桁および６桁のサブタイプすべてが挙げられる。当業者に既知であるように、上記のＨＬＡタイプの対立遺伝子変異体があり、それらはすべて本発明に包含される。ＨＬＡクラス対立遺伝子の完全なリストは、ｈｔｔｐ：／／ｈｌａ．ａｌｌｅｌｅｓ．ｏｒｇ／ａｌｌｅｌｅｓ／に見ることができる。例えば、ＨＬＡクラスＩ対立遺伝子の完全なリストは、ｈｔｔｐ：／／ｈｌａ．ａｌｌｅｌｅｓ．ｏｒｇ／ａｌｌｅｌｅｓ／ｃｌａｓｓ１．ｈｔｍｌに見ることができる。
ＨＬＡ拘束性ペプチド
「拘束性ペプチド」としてのＨＬＡ拘束性ペプチド（本明細書では互換的に言及される）は、腫瘍特異的遺伝子、例えば、がん特異的遺伝子のペプチド断片であり得る。好ましくは、がん特異的遺伝子はがん試料で発現される。がん試料で異常に発現している遺伝子は、データベースを通じて同定することができる。例示的なデータベースには、単に例として、Ｔｈｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｅ Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ）Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｎｅｔｗｏｒｋ：ｈｔｔｐ：／／ｃａｎｃｅｒｇｅｎｏｍｅ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／、ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｅ Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｃｃ．ｉｃｇｃ．ｏｒｇ／が挙げられる。いくつかの実施形態では、がん特異的遺伝子には、ＴＣＧＡデータベースからの少なくとも５つの試料において少なくとも１０ＲＰＫＭの発現が観察される。がん特異的遺伝子は、観察可能な二峰性分布を有してもよい。
がん特異的遺伝子には、少なくとも１つのＴＣＧＡ腫瘍組織において、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００ＴＰＭを超える発現が観察されてもよい。好ましい実施形態では、がん特異的遺伝子には、少なくとも１つのＴＣＧＡ腫瘍組織において１００ＴＰＭを超える発現が観察される。いくつかの場合には、がん特異的遺伝子には、ＴＣＧＡ試料全体で発現の二峰性分布が観察される。理論に束縛されることを望むものではないが、このような二峰性の発現パターンは、すべての腫瘍試料でベースライン時の発現が最小であり、エピジェネティックな調節異常を受けている腫瘍のサブセットで発現がより高い生物学的モデルと一致している。
好ましくは、がん特異的遺伝子は、一般に、ほとんどの正常組織で発現されない。例えば、がん特異的遺伝子は、遺伝子型組織発現（ＧＴＥｘ）プロジェクトの組織で発現されない場合もあれば、免疫特権組織または非必須組織で発現される場合もある。例示的な免疫特権組織または非必須組織には、精巣、小唾液腺、子宮頸部、および甲状腺が含まれる。いくつかの場合には、がん特異的遺伝子は、がん特異的遺伝子の発現の中央値がＧＴＥｘ試料全体で０．５ＲＰＫＭ（マッピングされたリード百万単位あたりの転写物１キロベースあたりのリード（Ｒｅａｄｓ Ｐｅｒ Ｋｉｌｏｂａｓｅ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｐｅｒ Ｍｉｌｌｉｏｎ ｎａｐｐｅｄ ｒｅａｄｓ））未満である場合、遺伝子がＧＴＥＸ試料全体で１０ＲＰＫＭを超えて発現しない場合、遺伝子がすべての必須組織試料にわたって２つ以下の試料において５ＲＰＫＭ以上で発現した場合、またはそれらの組み合わせである場合、必須組織または非免疫特権組織で発現しないとみなされ得る。
いくつかの実施形態では、がん特異的遺伝子は、ＧＴＥｘの評価により以下の基準を満たす：（１）脳、心臓、または肺におけるＧＴＥｘ発現の中央値が、０．１の未満の百万単位あたりの転写物（ＴＰＭ）であり、５ ＴＰＭを超過する試料がない、（２）他の必須器官（精巣、甲状腺、小唾液腺を除く）におけるＧＴＥｘ発現の中央値が２ＴＰＭ未満であり、１つの試料で１０ＴＰＭを超過する試料が１つもない。
いくつかの実施形態では、がん特異的遺伝子は、一般に、免疫細胞で発現する可能性は高くなく、例えば、インターフェロンファミリー遺伝子ではなく、眼関連遺伝子ではなく、嗅覚または味覚受容体遺伝子ではなく、概日周期に関係する遺伝子ではない（例えば、ＣＬＯＣＫ、ＰＥＲＩＯＤ、ＣＲＹ遺伝子ではない）。
拘束性ペプチドは、好ましくは、腫瘍の表面に提示されてもよい。
拘束性ペプチドは、サイズが、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、または約１５、およびその中で誘導可能な任意の範囲の数のアミノ分子残基である。特定の実施形態では、拘束性ペプチドは、サイズが、約８、約９、約１０、約１１、または約１２アミノ分子残基である。拘束性ペプチドは、長さが約５〜１５アミノ酸、好ましくは長さが約７〜１２アミノ酸、またはより好ましくは長さが約８〜１１アミノ酸であってよい。
例示的なＨＬＡ−ペプチド標的
例示的なＨＬＡ−ペプチド標的は表Ａに示されている。表Ａの各行には、各複合体のＨＬＡ対立遺伝子および対応するＨＬＡ拘束性ペプチド配列が示されている。ペプチド配列は、表Ａの各行に示されるそれぞれの配列からなり得る。あるいは、ペプチド配列は、表Ａの各行に示されるそれぞれの配列を含み得る。あるいは、ペプチド配列は、表Ａの各行に示されるそれぞれの配列から本質的になり得る。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡ−ペプチド標的は、表Ａに示される標的である。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡ−ペプチド標的は、単離されたＨＬＡ−ペプチド標的が、標的番号６３６４〜６３６９、６３８６〜６３８９、６５００、６５２１〜６５２４、または６５７８のうちのいずれでもなく、かつ表Ｂまたは表Ｃに見られるＨＬＡ−ペプチド標的ではないことを条件として、表Ａに示される標的である。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、ＷＴ１またはＭＡＲＴ１から選択される遺伝子に由来しない。
拘束性ペプチドリガンドと会合しないＨＬＡクラスＩ分子は、一般に不安定である。したがって、拘束性ペプチドとＨＬＡ分子のα１／α２溝との会合により、ＨＬＡサブタイプのβ２−ミクログロビンサブユニットとＨＬＡサブタイプのα−サブユニットとの共有結合によらない会合が安定する。
ＨＬＡサブタイプのβ２−ミクログロビンサブユニットとＨＬＡサブタイプのα−サブユニットとの共有結合によらない会合の安定性は、任意の好適な手段を使用して決定することができる。例えば、そのような安定性は、ＨＬＡ分子の不溶性凝集体を高濃度の尿素（例えば、約８Ｍの尿素）に溶解し、尿素除去、例えば透析による尿素除去の間に拘束性ペプチドの存在下でＨＬＡ分子が再度折り畳む能力を決定することにより評価してもよい。そのような再折り畳み手法は、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ Ｖｏｌ．８９，ｐｐ．３４２９−３４３３，Ａｐｒｉｌ １９９２に記載されている。
他の例では、そのような安定性は、条件付きＨＬＡクラスＩリガンドを使用して評価してもよい。条件付きＨＬＡクラスＩリガンドは、一般に、ＨＬＡ分子のα１／α２溝に結合することによりＨＬＡクラスＩ分子のβ２およびαサブユニットの会合を安定させ、また条件刺激への露出時に拘束性ペプチドの切断を可能にする１つ以上のアミノ酸修飾を含む短い拘束性ペプチドとして設計される。条件付きリガンドが切断されると、そのような条件付きリガンドがα１／α２溝に結合してＨＬＡ分子を安定させる拘束性ペプチドと交換されない限り、ＨＬＡ分子のβ２およびαサブユニットは解離する。条件付きリガンドは、既知のＨＬＡペプチドリガンドまたは予測される高親和性ＨＬＡペプチドリガンドのいずれかにアミノ酸修飾を導入することにより設計することができる。構造情報が利用可能なＨＬＡ対立遺伝子については、アミノ酸修飾の導入位置を選択するために、側鎖の水利用可能性を使用してもよい。高スループット様式で試験拘束性ペプチドを調べるために使用され得る安定なＨＬＡ−ペプチド複合体のバッチ調製を可能にすることにより、条件付きＨＬＡリガンドの使用が有利となり得る。条件付きＨＬＡクラスＩリガンドおよび産生方法は、例えば、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．２００８ Ｍａｒ １１；１０５（１０）：３８３１−３８３６；Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．２００８ Ｍａｒ １１；１０５（１０）：３８２５−３８３０；Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．２０１８ Ｍａｙ ７；２１５（５）：１４９３−１５０４；Ｃｈｏｏ，Ｊ．Ａ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｃｌｅａｖａｇｅ ａｎｄ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ ｌｉｇａｎｄｓ ｂｙ ｅｍｐｌｏｙｉｎｇ ａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅｓ．Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ Ｉｎｔ Ｅｄ Ｅｎｇｌ ５３，１３３９０−１３３９４（２０１４）；Ａｍｏｒｅ，Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ Ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅ Ｐｅｒｉｏｄａｔｅ−Ｃｌｅａｖａｂｌｅ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ ｔｈａｔ ｉｓ Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ− ａｎｄ Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ−Ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｉｔｓ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ＭＨＣ Ｅｘｃｈａｎｇｅ Ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ．ＣｈｅｍＢｉｏＣｈｅｍ １４，１２３−１３１（２０１２）；Ｒｏｄｅｎｋｏ，Ｂ．ｅｔ ａｌ．Ｃｌａｓｓ Ｉ Ｍａｊｏｒ Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ Ｌｏａｄｅｄ ｂｙ ａ Ｐｅｒｉｏｄａｔｅ Ｔｒｉｇｇｅｒ．Ｊ Ａｍ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ １３１，１２３０５−１２３１３（２００９）、およびＣｈａｎｇ，Ｃ．Ｘ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌ ｌｉｇａｎｄｓ ｆｏｒ Ａｓｉａｎ ＨＬＡ ｖａｒｉａｎｔｓ ｆａｃｉｌｉｔａｔｅ ｔｈｅ ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ８＋ Ｔ−ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ａｃｕｔｅ ａｎｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｖｉｒａｌ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ４３，１１０９−１１２０（２０１３）に記載されている。これらの参考文献は、それらの全体が参照により組み込まれる。
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載される、例えば表Ａに記載されるＨＬＡ拘束性ペプチドが、ＨＬＡ分子のβ２−およびα−サブユニットの会合を安定させる能力は、条件付きリガンド媒介交換反応およびＨＬＡ安定性についてのアッセイを行うことにより評価される。ＨＬＡ安定性は、例えば、質量分析、イムノアッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ）、サイズ排除クロマトグラフィー、およびＨＬＡ多量体染色、それに続くＴ細胞のフローサイトメトリー評価を含む、任意の好適な方法を使用してアッセイすることができる。
ＨＬＡサブタイプのβ２−ミクログロビンサブユニットとＨＬＡサブタイプのα−サブユニットとの共有結合によらない会合の安定性を評価する他の例示的な方法には、ジペプチドを使用するペプチド交換が含まれる。ジペプチドを使用するペプチド交換は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．２０１３ Ｓｅｐ １７，１１０（３８）：１５３８３−８；Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．２０１５ Ｊａｎ ６，１１２（１）：２０２−７に記載されている。
ＨＬＡ−ペプチド標的を含む有用な抗原が、本明細書で提供される。ＨＬＡ−ペプチド標的は、特定のＨＬＡサブタイプ対立遺伝子と複合体化した定義されているアミノ酸配列を有する特定のＨＬＡ拘束性ペプチドを含んでもよい。
ＨＬＡ−ペプチド標的は、単離され、かつ／または実質的に純粋な形態であってもよい。例えば、ＨＬＡ−ペプチド標的は、それらの天然の環境から単離されていてもよく、または技術的処理によって産生されてもよい。いくつかの場合には、ＨＬＡ−ペプチド標的は、他のペプチドまたはタンパク質を実質的に含まない形で提供される。
ＨＬＡ−ペプチド標的は、可溶性形態で提示されてもよく、任意選択で、組換えＨＬＡ−ペプチド標的複合体であってもよい。当業者は、組換えＨＬＡ−ペプチド標的を産生および精製するための任意の好適な方法を使用し得る。好適な方法には、例えば、大腸菌発現系、昆虫細胞などの使用が含まれる。他の方法には、例えば無細胞系を使用する合成産生が含まれる。例示的な好適な無細胞システムは、全体が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第ＷＯ２０１７０８９７５６号に記載されている。
ＨＬＡ−ペプチド標的を含む組成物も、本明細書で提供される。
いくつかの場合には、組成物は、固体支持体に付着したＨＬＡ−ペプチド標的を含む。例示的な固体支持体には、ビーズ、ウェル、膜、チューブ、カラム、プレート、セファロース、磁気ビーズ、およびチップが含まれるが、これらに限定されない。例示的な固体支持体は、例えば、参照により全体が本明細書に組み込まれるＣａｔａｌｙｓｔｓ ２０１８，８，９２；ｄｏｉ：１０．３３９０／ｃａｔａｌ８０２００９２に記載されている。
ＨＬＡ−ペプチド標的は、当該技術分野で既知の任意の好適な方法によって固体支持体に付着させてもよい。いくつかの場合には、ＨＬＡ−ペプチド標的は、固体支持体に共有結合する。
いくつかの場合には、ＨＬＡ−ペプチド標的は、親和性結合対により固体支持体に付着する。親和性結合対は、一般に、２つの分子間の特定の相互作用を伴う。その結合パートナー分子に親和性を有するリガンドは、固体支持体に共有結合することができるため、一般的な親和性結合対を固定するための餌として使用ことができ、例えば、ストレプトアビジンとビオチン、アビジンとビオチン；銅、ニッケル、亜鉛、およびコバルトなどの金属イオンを有するポリヒスチジン標識；ならびに同様のものを含む。
ＨＬＡ−ペプチド標的は、検出可能な標識を含んでもよい。
ＨＬＡ−ペプチド標的を含む医薬組成物
ＨＬＡ−ペプチド標的を含む組成物は、医薬組成物であってもよい。そのような組成物は、複数のＨＬＡ−ペプチド標的を含んでもよい。例示的な医薬組成物は本明細書に記載されている。組成物は、免疫応答を励起することができてもよい。組成物はアジュバントを含んでもよい。好適なアジュバントには、１０１８ ＩＳＳ、ミョウバン、アルミニウム塩、Ａｍｐｌｉｖａｘ、ＡＳ１５、ＢＣＧ、ＣＰ−８７０、８９３、ＣｐＧ７９０９、ＣｙａＡ、ｄＳＬＩＭ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＣ３０、ＩＣ３１、Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ、ＩｍｕＦａｃｔ ＩＭＰ３２１、ＩＳ Ｐａｔｃｈ、ＩＳＳ、ＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸ、ＪｕｖＩｍｍｕｎｅ、ＬｉｐｏＶａｃ、ＭＦ５９、モノホスホリルリピドＡ、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＭＳ １３１２、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ ２０６、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ ５０Ｖ、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ−５１、ＯＫ−４３２、ＯＭ−１７４、ＯＭ−１９７−ＭＰ− ＥＣ、ＯＮＴＡＫ、ＰｅｐＴｅｌベクター系、ＰＬＧ微粒子、Ｒｅｓｉｑｕｉｍｏｄ、ＳＲＬ１７２、ビロソームおよび他のウイルス様粒子、ＹＦ−１７Ｄ、ＶＥＧＦトラップ、Ｒ８４８、ベータ−グルカン、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、サポニンに由来するＡｑｕｉｌａ’ｓ ＱＳ２１ ｓｔｉｍｕｌｏｎ（Ａｑｕｉｌａ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒ，Ｍａｓｓ．，ＵＳＡ）、マイコバクテリア抽出物および合成細菌細胞壁模倣体、ならびにＲｉｂｉ’ｓ Ｄｅｔｏｘ、ＳｕｐｅｒｆｏｓのＱｕｉｌなどの他の専売アジュバントが挙げられるが、これらに限定されない。ＱｕｉｌまたはＳｕｐｅｒｆｏｓ。不完全フロイントまたはＧＭ−ＣＳＦなどのアジュバントが有用である。樹状細胞に特異的ないくつかの免疫学的アジュバント（例えばＭＦ５９）およびそれらの調製は、これまでに説明されている（Ｄｕｐｕｉｓ Ｍ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９８；１８６（１）：１８−２７；Ａｌｌｉｓｏｎ Ａ Ｃ；Ｄｅｖ Ｂｉｏｌ Ｓｔａｎｄ．１９９８；９２：３−１１）。サイトカインも使用することができる。いくつかのサイトカインは、リンパ組織への樹状細胞の移動に対する影響（例えば、ＴＮＦ−アルファ）、樹状細胞のＴリンパ球に対する効率的な抗原提示細胞への成熟の促進（例えば、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１、およびＩＬ−４）（参照により全体が具体的に組み込まれる米国特許第５，８４９，５８９号）、および免疫アジュバントとしての作用（例えば、ＩＬ−１２）（Ｇａｂｒｉｌｏｖｉｃｈ Ｄ Ｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ Ｅｍｐｈａｓｉｓ Ｔｕｍｏｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９６（６）：４１４−４１８）に直結している。
ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰ
本明細書に開示のＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＡＢＰも、本明細書で提供される。
ＨＬＡ−ペプチド標的は、腫瘍細胞を含む任意の好適な標的細胞の表面で発現され得る。
ＡＢＰは、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）−ペプチド標的に特異的に結合することができ、このＨＬＡ−ペプチド標的は、ＨＬＡクラスＩ分子と複合体化したＨＬＡ拘束性ペプチドを含み、このＨＬＡ拘束性ペプチドは、ＨＬＡクラスＩ分子のα１／α２ヘテロ二量体部分のペプチド結合溝に位置する。
いくつかの態様では、ＡＢＰは、ＨＬＡ拘束性ペプチドの非存在下ではＨＬＡクラスＩに結合しない。いくつかの態様では、ＡＢＰは、ヒトＭＨＣクラスＩの非存在下ではＨＬＡ拘束性ペプチドに結合しない。いくつかの態様では、ＡＢＰは、ＨＬＡ拘束性ペプチドと複合体化したヒトＭＨＣクラスＩを提示する腫瘍細胞に結合し、任意選択で、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、がんを特徴付ける腫瘍抗原である。
ＡＢＰは、ＨＬＡ−ペプチド複合体の各部分（すなわち、ＨＬＡ、および複合体の各部分を表すペプチド）に結合することができ、これは、一緒に結合したときに、ペプチドのみまたはＨＬＡサブタイプのみによって提示される表面とは異なるＡＢＰとの相互作用およびＡＢＰによる結合のための新規の標的およびタンパク質表面を形成する。一般に、ＨＬＡのペプチドへの結合によって形成される新規の標的およびタンパク質表面は、ＨＬＡ−ペプチド複合体の各部分が存在しない場合には存在しない。
ＡＢＰは、例えば腫瘍に由来する、ＨＬＡおよびＨＬＡ拘束性ペプチドを含む複合体（ＨＬＡ−ペプチド）に特異的に結合することが可能であり得る。いくつかの態様では、ＡＢＰは、腫瘍に由来するＨＬＡ拘束性ペプチドの非存在下ではＨＬＡに結合しない。いくつかの態様では、ＡＢＰは、ＨＬＡの非存在下では、腫瘍に由来するＨＬＡ拘束性ペプチドに結合しない。いくつかの態様では、ＡＢＰは、腫瘍細胞などの細胞上に自然に提示されるとき、ＨＬＡおよびＨＬＡ拘束性ペプチドを含む複合体に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰにより、ＨＬＡ−ペプチドのＨＬＡ−ペプチドの１つ以上のリガンドへの結合が調節される。
ＡＢＰは、表Ａに開示されるＨＬＡ−ペプチド標的のうちのいずれか１つに特異的に結合してもよい。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、単離されたＨＬＡ−ペプチドが、標的番号６３６４〜６３６９、６３８６〜６３８９、６５００、６５２１〜６５２４のうちのいずれでもなく、かつ表Ｂまたは表Ｃに見られるＨＬＡ−ペプチド標的ではないことを条件として、表Ａに示される標的であるＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ拘束性ペプチドは、ＷＴ１またはＭＡＲＴ１から選択される遺伝子に由来しない。
より具体的な実施形態では、ＡＢＰは、配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡを含むＨＬＡ拘束性ペプチドと複合体化したＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１、配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹを含むＨＬＡ拘束性ペプチドと複合体化したＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１、配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬを含むＨＬＡ拘束性ペプチドと複合体化したＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２、配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶを含むＨＬＡ拘束性ペプチドと複合体化したＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１、配列ＥＶＤＰＩＧＨＶＹを含むＨＬＡ拘束性ペプチドと複合体化したＨＬＡサブタイプ＊０１：０１、および配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹを含むＨＬＡ拘束性ペプチドと複合体化したＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１のうちのいずれか１つから選択されるＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合する。
いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、本明細書で提供される例示的なＡＢＰと競合するＡＢＰである。いくつかの態様では、本明細書で提供される例示的なＡＢＰと競合するＡＢＰは、本明細書で提供される例示的なＡＢＰと同じエピトープに結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＡＢＰは、本明細書では「変異体」と称される。いくつかの実施形態では、そのような変異体は、本明細書で提供される配列から、例えば、親和性成熟、部位指定変異誘発、ランダム変異誘発、または当技術分野で既知であるもしくは本明細書に記載されている任意の他の方法によって、誘導される。いくつかの実施形態では、そのような変異体は、本明細書で提供される配列から誘導されず、例えば、ＡＢＰを得るための本明細書で提供される方法に従って新たに単離されてもよい。いくつかの実施形態では、変異体は、本明細書で提供される配列のうちのいずれかから誘導され、ここでは１つ以上の保存的アミノ酸置換が行われる。いくつかの実施形態では、変異体は、本明細書で提供される配列のうちのいずれかから誘導され、ここでは１つ以上の非保存的アミノ酸置換が行われる。保存的アミノ酸置換は本明細書に記載されている。例示的な非保存的アミノ酸置換には、参照により全体が本明細書に組み込まれる、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００８ Ｍａｙ １；１８０（９）：６１１６−３１に記載されているものが含まれる。好ましい実施形態では、非保存的アミノ酸置換は、機能的変異体の生物活性を妨害または阻害しない。さらにより好ましい実施形態では、非保存的アミノ酸置換は、機能的変異体の生物活性を増強することにより、機能的変異体の生物活性を親ＡＢＰと比較して増加させる。
抗体またはその抗原結合断片を含むＡＢＰ
ＡＢＰは、抗体またはその抗原結合断片を含んでもよい。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは軽鎖を含む。いくつかの態様では、軽鎖はカッパ軽鎖である。いくつかの態様では、軽鎖はラムダ軽鎖である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは重鎖を含む。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＡである。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＤである。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＥである。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＧである。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＭである。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＧ１である。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＧ２である。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＧ３である。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＧ４である。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＡ１である。いくつかの態様では、重鎖はＩｇＡ２である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは抗体断片を含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは抗体断片からなる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは本質的に抗体断片からなる。いくつかの態様では、ＡＢＰ断片はＦｖ断片である。いくつかの態様では、ＡＢＰ断片はＦａｂ断片である。いくつかの態様では、ＡＢＰ断片はＦ（ａｂ’）２断片である。いくつかの態様では、ＡＢＰ断片はＦａｂ’断片である。いくつかの態様では、ＡＢＰ断片はｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片である。いくつかの態様では、ＡＢＰ断片はｓｃＦｖ−Ｆｃ断片である。いくつかの態様では、ＡＢＰ断片は単一ドメインＡＢＰの断片である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰ断片は、本明細書で提供される例示的なＡＢＰから誘導される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰ断片は、本明細書で提供される例示的なＡＢＰから誘導されず、例えば、ＡＢＰ断片を得るための本明細書で提供される方法に従って新たに単離されてもよい。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰ断片は、本明細書に記載の１つ以上のアッセイまたは生物学的効果により測定して、ＨＬＡ−ペプチド標的に結合する能力を保持する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰ断片は、本明細書に記載されるように、ＨＬＡ−ペプチドがそのリガンドのうちの１つ以上と相互作用するのを防止する能力を保持する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰはモノクローナルＡＢＰである。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰはポリクローナルＡＢＰである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰはキメラＡＢＰを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰはキメラＡＢＰからなる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは本質的にキメラＡＢＰからなる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰはヒト化ＡＢＰを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰはヒト化ＡＢＰからなる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは本質的にヒト化ＡＢＰからなる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰはヒトＡＢＰを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰはヒトＡＢＰからなる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは本質的にヒトＡＢＰからなる。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは代替の足場を含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは代替の足場からなる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは本質的に代替の足場からなる。任意の好適な代替の足場が使用され得る。いくつかの態様では、代替の足場は、ＡｄｎｅｃｔｉｎＴＭ、ｉＭａｂ、Ａｎｔｉｃａｌｉｎ（登録商標）、ＥＥＴＩ−ＩＩ／ＡＧＲＰ、クニッツドメイン、チオレドキシンペプチドアプタマー、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）、ＤＡＲＰｉｎ、Ａｆｆｉｌｉｎ、Ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ、Ｆｙｎｏｍｅｒ、およびＡｖｉｍｅｒから選択される。
本明細書に開示のＡＢＰとＨＬＡ−ペプチドへの結合について競合する単離されたヒト化、ヒト、またはキメラＡＢＰも、本明細書に開示される。
本明細書に開示のＡＢＰが結合するＨＬＡ−ペプチドエピトープに結合する単離されたヒト化、ヒト、またはキメラＡＢＰも、本明細書に開示される。
ある特定の態様では、ＡＢＰは、ヒトＦｃ受容体への結合を低減する少なくとも１つの修飾を含むヒトＦｃ領域を含む。
ＡＢＰは、細胞内で発現されると、翻訳後に修飾されることが知られている。翻訳後修飾の例には、カルボキシペプチダーゼによる重鎖のＣ末端でのリジンの切断、ピログルタミル化による重鎖および軽鎖のＮ末端でのグルタミンまたはグルタミン酸のピログルタミン酸への修飾、グリコシル化、酸化、脱アミド化、および糖化が含まれ、そのような翻訳後修飾は様々なＡＢＰで生じることが知られている（参照により全体が組み込まれるＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００８，Ｖｏｌ．９７，ｐ．２４２６−２４４７を参照されたい）。いくつかの実施形態では、ＡＢＰは、翻訳後修飾を受けたＡＢＰまたはその抗原結合断片である。翻訳後修飾を受けたＡＢＰまたはその抗原結合断片の例には、重鎖可変領域のＮ末端でのピログルタミル化および／または重鎖のＣ末端でリジンの欠失を受けたＡＢＰまたはその抗原結合断片が挙げられる。Ｎ末端でのピログルタミル化およびＣ末端でのリジンの欠失によるそのような翻訳後修飾は、ＡＢＰまたはその断片の活性に一切の影響を及ぼさないことが当技術分野で知られている（参照により全体が組み込まれるＡｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００６，Ｖｏｌ．３４８，ｐ．２４−３９）。
単一特異性および多重特異性のＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰ
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは単一特異性ＡＢＰである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは多重特異性ＡＢＰである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される多重特異性ＡＢＰは、１つ超の抗原に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、２つの抗原に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、３つの抗原に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、４つの抗原に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、５つの抗原に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される多重特異性ＡＢＰは、ＨＬＡ−ペプチド抗原上の１つ超のエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、ＨＬＡ−ペプチド抗原上の２つのエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、ＨＬＡ−ペプチド抗原上の３つのエピトープに結合する。
多くの多重特異性ＡＢＰ構築物が当技術分野で既知であり、本明細書で提供されるＡＢＰは、任意の好適な多重特異性の好適な構築物の形態で提供され得る。
いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、各々が共通の軽鎖可変領域と対合する少なくとも２つの異なる重鎖可変領域を含む免疫グロブリンを含む（すなわち、「共通軽鎖ＡＢＰ」）。共通軽鎖可変領域は、２つの異なる重鎖可変領域の各々と別個の抗原結合ドメインを形成する。参照により全体が組み込まれるＭｅｒｃｈａｎｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９８，１６：６７７−６８１を参照されたい。
いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、そのような免疫グロブリンの重鎖または軽鎖のＮ末端またはＣ末端のうちの１つ以上に付着したＡＢＰまたはその断片を含む免疫グロブリンを含む。参照により全体が組み込まれるＣｏｌｏｍａ ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３を参照されたい。いくつかの態様では、そのようなＡＢＰは四価の二重特異性ＡＢＰを含む。
いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、少なくとも２つの異なる重鎖可変領域と少なくとも２つの異なる軽鎖可変領域とを含むハイブリッド免疫グロブリンを含む。各々参照により全体が組み込まれる、Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８３，３０５：５３７−５４０、およびＳｔａｅｒｚ ａｎｄ Ｂｅｖａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：１４５３−１４５７を参照されたい。
いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、多重特異性を有しない副産物の形成を低減するための改変を伴う免疫グロブリン鎖を含む。いくつかの態様では、ＡＢＰは、参照により全体が組み込まれる米国特許第５，７３１，１６８号に記載されている１つ以上の「ノブ・イン・ホール」修飾を含む。
いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、Ｆｃヘテロ多量体の組立てを促進するための１つ以上の静電的修飾を伴う免疫グロブリン鎖を含む。参照により全体が組み込まれる国際公開第ＷＯ２００９／０８９００４号を参照されたい。
いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは二重特異性一本鎖分子を含む。各々参照により全体が組み込まれる、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，１９９１，１０：３６５５−３６５９、およびＧｒｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９４，１５２：５３６８−５３７４を参照されたい。
いくつかの実施形態では、多重特異性ＡＢＰは、ポリペプチドリンカーによって接続された重鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインとを含み、リンカーの長さは、所望の多重特異性を有する多重特異性ＡＢＰの組立てを促進するように選択される。例えば、重鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインとが１２個超のアミノ酸残基のポリペプチドリンカーによって接続されている場合、単一特異性ｓｃＦｖが一般に形成される。各々参照により全体が組み込まれる、米国特許第４，９４６，７７８号および同第５，１３２，４０５号を参照されたい。いくつかの実施形態では、ポリペプチドリンカーの長さを１２アミノ酸残基未満に短縮すると、同じポリペプチド鎖上の重鎖および軽鎖可変ドメインの対合が妨げられ、それにより、相補性ドメインを有するひとつの鎖から別の鎖上の重鎖および軽鎖可変ドメインの対合が可能となる。こうして、得られるＡＢＰは多重特異性を有し、各結合部位の特異性は１つ超のポリペプチド鎖によってもたらされる。３〜１２アミノ酸残基のリンカーで接合される重鎖および軽鎖可変ドメインを含むポリペプチド鎖は、主に二量体（ダイアボディと呼ばれる）を形成する。０〜２アミノ酸残基のリンカーでは、三量体（トリアボディと呼ばれる）および四量体（テトラボディと呼ばれる）が好まれる。しかしながら、オリゴマー化の正確な種類は、リンカーの長さに加えて、アミノ酸残基の組成および各ポリペプチド鎖の可変ドメインの順序（例えば、ＶＨ−リンカー−ＶＬ対ＶＬ−リンカー−ＶＨ）にも依存するようである。当業者であれば、所望の多重特異性に基づいて適切なリンカーの長さを選択することができる。
Ｆｃ領域および変異体
ある特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは、Ｆｃ領域を含む。Ｆｃ領域は、野生型またはその変異体であり得る。ある特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは、天然に存在するＦｃ領域と比較して、１つ以上のアミノ酸置換、挿入、または欠失を有するＦｃ領域を含む。いくつかの態様では、そのような置換、挿入、または欠失により、安定性、グリコシル化、または他の特徴が改変されたＡＢＰが得られる。いくつかの態様では、そのような置換、挿入、または欠失により、グリコシル化されたＡＢＰが得られる。
「変異Ｆｃ領域」または「操作されたＦｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾、好ましくは１つ以上のアミノ酸置換（複数可）により、天然配列Ｆｃ領域のものとは異なるアミノ酸配列を含む。好ましくは、変異Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域における少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば約１〜約１０個のアミノ酸置換、好ましくは約１〜約５個のアミノ酸置換を有する。本明細書の変異Ｆｃ領域は、好ましくは、天然配列Ｆｃ領域および／または親ポリペプチドのＦｃ領域との少なくとも約８０％の相同性、最も好ましくはそれらとの少なくとも約９０％の相同性、より好ましくはそれらとの少なくとも約９５％の相同性を有することになる。
「Ｆｃ領域を含むＡＢＰ」という用語は、Ｆｃ領域を含むＡＢＰを指す。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ番号付けシステムによる残基４４７）は、例えば、ＡＢＰの精製中に、またはＡＢＰをコードする核酸の組換え操作により、除去されてもよい。したがって、Ｆｃ領域を有するＡＢＰは、Ｋ４４７を伴うまたは伴わないＡＢＰを含み得る。
いくつかの態様では、本明細書で提供されるＡＢＰのＦｃ領域を修飾して、Ｆｃ受容体に対する親和性が改変されたＡＢＰ、または免疫学的により不活性なＡＢＰを得る。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰ変異体は、すべてではないがいくつかのエフェクター機能を保有する。そのようなＡＢＰは、例えば、ＡＢＰの半減期がインビボで重要であるが、ある特定のエフェクター機能（例えば、補体活性化およびＡＤＣＣ）が不要または有害である場合に有用であり得る。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰのＦｃ領域は、ヒンジを安定させる変異Ｓ２２８ＰおよびＬ２３５Ｅのうちの１つ以上を含むヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域である。参照により全体が組み込まれるＡａｌｂｅｒｓｅ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００２，１０５：９−１９を参照されたい。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ４ Ｆｃ領域は、以下の突然変異のうちの１つ以上を含む：Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、およびＬ２３５Ａ。参照により全体が組み込まれるＡｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，４０：５８５−５９３を参照されたい。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ４ Ｆｃ領域は位置Ｇ２３６に欠失を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰのＦｃ領域は、Ｆｃ受容体結合を低減するための１つ以上の変異を含むヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域である。いくつかの態様では、１つ以上の変異は、Ｓ２２８（例えば、Ｓ２２８Ａ）、Ｌ２３４（例えば、Ｌ２３４Ａ）、Ｌ２３５（例えば、Ｌ２３５Ａ）、Ｄ２６５（例えば、Ｄ２６５Ａ）、およびＮ２９７（例えば、Ｎ２９７Ａ）から選択される残基にある。いくつかの態様では、ＡＢＰはＰＶＡ２３６変異を含む。ＰＶＡ２３６は、ＩｇＧ１のアミノ酸位置２３３〜２３６のアミノ酸配列ＥＬＬＧまたはＩｇＧ４のＥＦＬＧがＰＶＡで代置されることを意味する。参照により全体が組み込まれる米国特許第９，１５０，６４１号を参照されたい。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰのＦｃ領域は、各々参照により全体が組み込まれる、Ａｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９９，２９：２６１３−２６２４、国際公開第ＷＯ１９９９／０５８５７２号、および／または英国特許出願第９８０９９５１８号に記載されている修飾である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰのＦｃ領域は、変異Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓのうちの１つ以上を含むヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰのＦｃ領域は、２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、および３２９から選択される１つ以上の位置にアミノ酸置換を有する。参照により全体が組み込まれる米国特許第６，７３７，０５６号を参照されたい。そのようなＦｃ変異体には、残基２６５および２９７がアラニンで置換されたいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体を含む、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７、および３２７のうちの２つ以上において置換されたＦｃ変異体が含まれる。参照により全体が組み込まれる米国特許第７，３３２，５８１号を参照されたい。いくつかの実施形態では、ＡＢＰはアミノ酸位置２６５にアラニンを含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＰはアミノ酸位置２９７にアラニンを含む。
ある特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは、Ｆｃ領域の位置２９８、３３３、および３３４のうちの１つ以上での置換など、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは、参照により全体が組み込まれるＬａｚａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２００６，１０３：４００５−４０１０に記載されているように、位置２３９、３３２、および３３０に１つ以上のアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは、Ｃ１ｑ結合および／またはＣＤＣを改善するまたは減退させる１つ以上の改変を含む。各々参照により全体が組み込まれる、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２、およびＩｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０００，１６４：４１７８−４１８４を参照されたい。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは、Ｃ１ｑ結合および／またはＣＤＣ半減期を延長する１つ以上の改変を含む。半減期が延長し、新生児のＦｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が改善されたＡＢＰは、例えば、各々参照により全体が組み込まれる、Ｈｉｎｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００６，１７６：３４６−３５６、および米国特許公開第２００５／００１４９３４号に記載されている。そのようなＦｃ変異体には、Ｆｃ領域残基：ＩｇＧの２３８、２５０、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１４、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、４２８、および４３４のうちの１つ以上での置換を有するものが含まれる。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰは、各々参照により全体が組み込まれる、米国特許第７，３７１，８２６号、第５，６４８，２６０号、および第５，６２４，８２１号、Ｄｕｎｃａｎ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８８，３２２：７３８−７４０、および国際公開第ＷＯ９４／２９３５１号に記載されているような１つ以上のＦｃ領域変異体を含む。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（Ｇ７）に特異的な抗体
いくつかの態様において、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を含むＡＢＰが本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡ拘束性ペプチドは、配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）（「Ｇ７」）を含む。
Ｇ７特異的抗体の配列
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、さらに詳述するように、１つ以上の配列を含んでもよい。
ＣＤＲ
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、１つ以上の抗体相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含んでもよく、例えば、３つの重鎖ＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３）および３つの軽鎖ＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３）を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、特定の重鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲ−Ｈ３）配列および特定の軽鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲ−Ｌ３）配列を含んでもよい。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３０であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４８である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２５であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４３である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２６であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４４である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２７であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４５である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２８であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４６である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２９であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４７である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３１であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４９である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３２であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５０である。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１０であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１７であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２５であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３３であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７０であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４３であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１１であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１８であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２６であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３４であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４４であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１２であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１９であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２７であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３５であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３９であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４５であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１３であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２０であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２８であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３６であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６２であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４６であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７９であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２１であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２９であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３４であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４０であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４７であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１４であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３０であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３７であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４１であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４８であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１５であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２３であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３１であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４６であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４２であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４９であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０１６であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２４であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３２であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０３８であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４１であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５０であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。
ＶＬ
＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＶＬ配列を含んでもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００２であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００３であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００４であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００５であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００６であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００７であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００８であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００９であってもよい。
ＶＨ
＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＶＨ配列を含んでもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９４であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９５であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９６であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９７であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９８であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９９であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０００であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００１であってもよい。
ＶＨ−ＶＬの組み合わせ
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９４であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００２であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９５であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００３であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９６であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００４であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９７であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００５であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９８であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００６であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９９であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００７であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０００であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００８であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００１であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３００９であるＶＬ配列を含んでもよい。
Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（Ｇ２）に特異的な抗体
いくつかの態様において、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を含むＡＢＰが本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡ拘束性ペプチドは、配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）（「Ｇ２」）を含む。
Ｇ２特異的抗体の配列
Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、さらに詳述するように、１つ以上の配列を含んでもよい。
ＣＤＲ
Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、１つ以上の抗体相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を含んでもよく、例えば、３つの重鎖ＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３）および３つの軽鎖ＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３）を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、特定の重鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲ−Ｈ３）配列および特定の軽鎖ＣＤＲ３（ＣＤＲ−Ｌ３）配列を含んでもよい。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０２であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７１である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０３であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０３であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７３である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０４であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７４である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０５であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７５である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０６であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７６である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０７であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７６である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０８であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７７である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０９であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１０であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７８である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１１であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７６である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１２であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７８である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１３であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７９である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１４であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８０である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０３であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８１である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１５であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８２である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１６であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７３である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１７であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１７であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１８であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７４である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１９であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８３である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２０であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８４である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２１であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２２であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８５である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２３であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８６である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２４であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８７である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２５であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７３である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２６であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８８である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２７であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８９である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２８であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８１である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２９であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９０である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３０であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８９である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３１であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９１である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３２であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９２である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲ−Ｈ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３３であり、ＣＤＲ−Ｌ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９３である。
Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５１であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８０であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０２であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３４であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５５であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７１であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５２であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８１であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０３であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３５であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５６であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５３であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０３であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３６であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５７であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７３であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５４であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０４であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３７であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７４であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５５であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８３であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０５であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３７であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７５であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５５であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０６であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３８であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７６であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５６であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０７であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３９であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５９であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７６であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５７であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０８であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４０であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６０であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７７であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５８であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８４であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０９であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３５であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５９であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１０であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４１であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６１であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７８であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５２であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８５であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１１であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４２であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７６であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６０であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１２であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４３であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６２であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７８であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６１であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８６であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１３であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４４であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６３であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７９であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６２であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８７であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１４であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４５であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８０であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５５であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８８であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０３であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４１であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６２であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８１であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５５であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８９であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１５であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４６であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８２であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６３であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８３であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１６であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４７であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７３であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５６であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９０であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１７であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３４であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６２であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６４であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９１であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１７であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４６であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６４であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６５であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１８であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４１であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６２であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７４であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６６であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９１９であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４８であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８３であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６７であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２０であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４６であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６２であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８４であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６８であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９３であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２１であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４９であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６５であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７２であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８６９であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９４であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２２であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５０であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６６であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８５であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７０であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２３であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４３であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６７であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８６であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７１であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９５であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２４であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５１であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８７であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ
：２８７２であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２５であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５２であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６９であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７３であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７３であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２６であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４３であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８８であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５２であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８８２であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２７であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３５であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８９であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７４であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９６であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２８であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３８であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８１であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７５であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９７であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９２９であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５３であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６１であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９０であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７６であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９８であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３０であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４１であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６２であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９８９であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７７であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８９９であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３１であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４６であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９６４であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９１であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７８であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９００であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３２であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９４６であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５８であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９２であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８７９であるＣＤＲ−Ｈ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０１であるＣＤＲ−Ｈ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９３３であるＣＤＲ−Ｈ３、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９５４であるＣＤＲ−Ｌ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７０であるＣＤＲ−Ｌ２、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９３であるＣＤＲ−Ｌ３を含んでもよい。
ＶＬ
Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＶＬ配列を含んでもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１６であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１７であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１８であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１９であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２０であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２１であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２２であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２３であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２４であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２５であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２６であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２７であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２８であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２９であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３０であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３１であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３２であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３３であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３４であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３５であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３６であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３７であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３８であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３９であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４０であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４１であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４２であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４３であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４４であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４５であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４６であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４７であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４８であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４９であってもよい。ＶＬ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５０であってもよい。
ＶＨ
Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＶＨ配列を含んでもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８１であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８２であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８３であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８４であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８５であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８６であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８７であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８８であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８９であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９０であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９１であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９２であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９３であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９４であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９５であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９６であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９７であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９８であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９９であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８００であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０１であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０２であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０３であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０４であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０５であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０６であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０７であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０８であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０９であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１０であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１１であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１２であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１３であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１４であってもよい。ＶＨ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１５であってもよい。
ＶＨ−ＶＬの組み合わせ
Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８１であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１６であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８２であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１７であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８３であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１８であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８４であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１９であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８５であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２０であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８６であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２１であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８７であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２２であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８８であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２３であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７８９であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２４であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９０であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２５であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９１であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２６であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９２であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２７であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９３であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２８であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９４であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８２９であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９５であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３０であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９６であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３１であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９７であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３２であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９８であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３３であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７９９であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３４であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８００であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３５であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０１であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３６であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０２であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３７であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０３であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３８であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０４であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８３９であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０５であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４０であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０６であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４１であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０７であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４２であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０８であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４３であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８０９であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４４であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１０であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４５であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１１であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４６であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１２であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４７であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１３であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４８であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１４であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８４９であるＶＬ配列を含んでもよい。Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に特異的なＡＢＰは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８１５であるＶＨ配列およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８５０であるＶＬ配列を含んでもよい。
受容体
提供されるＡＢＰ、例えば、ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰには、受容体がある。受容体には、本明細書に開示のＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合する抗原受容体および他のキメラ受容体が含まれ得る。受容体はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）であってもよい。受容体はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であってもよい。
ＴＣＲは、可溶性または膜結合型であり得る。抗原受容体には、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）などの機能的な非ＴＣＲ抗原受容体がある。受容体を発現する細胞、ならびにがんを含むＨＬＡ−ペプチド発現に関連する疾患および障害の治療などの養子細胞療法におけるその使用も提供される。
ＣＡＲを含む例示的な抗原受容体、およびそのような受容体を操作し細胞に導入するための方法には、例えば、国際特許出願公開第ＷＯ２０００１４２５７号、同第ＷＯ２０１３１２６７２６号、同第ＷＯ２０１２／１２９５１４号、同第ＷＯ２０１４０３１６８７号、同第ＷＯ２０１３／１６６３２１号、同第ＷＯ２０１３／０７１１５４号、同第ＷＯ２０１３／１２３０６１、米国特許出願公開第ＵＳ２００２１３１９６０号、同第ＵＳ２０１３２８７７４８号、同第ＵＳ２０１３０１４９３３７号、米国特許第６，４５１，９９５号、同第７，４４６，１９０号、同第８，２５２，５９２号、同第８，３３９，６４５号、同第８，３９８，２８２号、同第７，４４６，１７９号、同第６，４１０，３１９号、同第７，０７０，９９５号、同第７，２６５，２０９号、同第７，３５４，７６２号、同第７，４４６，１９１号、同第８，３２４，３５３号、同第、および同第８，４７９，１１８号、ならびに欧州特許出願第ＥＰ２５３７４１６号に記載されているもの、ならびに／またはＳａｄｅｌａｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｄｉｓｃｏｖ．２０１３ Ａｐｒｉｌ；３（４）：３８８−３９８、Ｄａｖｉｌａ ｅｔ ａｌ．（２０１３）ＰＬｏＳ ＯＮＥ ８（４）：ｅ６１３３８、Ｔｕｒｔｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２０１２ Ｏｃｔｏｂｅｒ；２４（５）：６３３−３９、Ｗｕ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ，２０１２ Ｍａｒ．１８（２）：１６０−７５によって記載されているものが含まれる。いくつかの態様では、抗原受容体には、米国特許第７，４４６，１９０号に記載されているＣＡＲ、および国際特許出願公開第ＷＯ／２０１４０５５６６８ Ａ１号に記載されているものが含まれる。ＣＡＲの例には、例えば、ＷＯ２０１４０３１６８７、米国特許第８，３３９，６４５号、米国特許第７，４４６，１７９号、ＵＳ２０１３／０１４９３３７、米国特許第７，４４６，１９０号、米国特許第８，３８９，２８２号などの前述の公開特許のうちのいずれかに開示されているＣＡＲ、および例えば本明細書で提供されるものなど、抗原結合部分、例えばｓｃＦｖが、抗体によって代置されるものが含まれる。
キメラ受容体には、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）がある。ＣＡＲなどのキメラ受容体は、一般に、抗ＨＬＡ−ペプチド抗体などの提供される抗ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰのうちの１つを含むか、提供される抗ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰであるか、または提供される抗ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの中に含まれる、細胞外抗原結合ドメインを含む。したがって、キメラ受容体、例えばＣＡＲは、典型的には、それらの細胞外部分に、１つ以上のＨＬＡ−ペプチド−ＡＢＰ、例えば、１つ以上の抗原結合断片、ドメイン、もしくは部分、または１つ以上の抗体可変ドメイン、および／あるいは抗体分子、例えば、本明細書に記載のものを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲには、抗体の可変重（ＶＨ）鎖領域および／または可変軽（ＶＬ）鎖領域などのＡＢＰ（例えば抗体）分子のＨＬＡ−ペプチド結合部分（単数または複数）、例えば、ｓｃＦｖ抗体断片が含まれる。
ＴＣＲ
一態様では、本明細書で提供されるＡＢＰ、例えば、本明細書に開示のＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＡＢＰには、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）が含まれる。ＴＣＲは、単離されても、精製されてもよい。
Ｔ細胞の大部分では、ＴＣＲは、それぞれＴＲＡおよびＴＲＢによってコードされるアルファ（α）鎖およびベータ（β）鎖を有するヘテロ二量体ポリペプチドである。アルファ鎖は、一般に、ＴＲＡＶによってコードされたアルファ可変領域、ＴＲＡＪによってコードされたアルファ接合領域、およびＴＲＡＣによってコードされたアルファ定常領域で構成される。ベータ鎖は、一般に、ＴＲＢＶによってコードされたベータ可変領域、ＴＲＢＤによってコードされたベータ多様性領域、ＴＲＢＪによってコードされたベータ接合領域、およびＴＲＢＣによってコードされたベータ定常領域で構成される。ＴＣＲ−アルファ鎖はＶＪ組換えによって生成され、β鎖受容体はＶ（Ｄ）Ｊ組換えによって生成される。追加のＴＣＲの多様性は、接合部の多様性に起因する。接合部の各々で、いくつかの塩基が削除され、他の塩基が付加され得る（ＮおよびＰヌクレオチドと呼ばれる）。少数のＴ細胞では、ＴＣＲにガンマ鎖およびデルタ鎖が含まれる。ＴＣＲガンマ鎖はＶＪ組換えによって生成され、ＴＣＲデルタ鎖はＶ（Ｄ）Ｊ組換えによって生成される（参照により全体が本明細書に組み込まれる、Ｋｅｎｎｅｔｈ Ｍｕｒｐｈｙ，Ｐａｕｌ Ｔｒａｖｅｒｓ，ａｎｄ Ｍａｒｋ Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｊａｎｅｗａｙ’ｓ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇａｒｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００７）。ＴＣＲの抗原結合部位は、一般に、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。アルファ鎖は、アルファＣＤＲ１、アルファＣＤＲ２、およびαＣＤＲ３の３つのＣＤＲを提供する。ベータ鎖も、ベータＣＤＲ１、ベータＣＤＲ２、およびβＣＤＲ３の３つのＣＤＲを提供する。αＣＤＲ３およびβＣＤＲ３は、Ｖ（Ｄ）Ｊ組換えの影響を最も受ける領域であり、ＴＣＲレパートリーにおける変動の大部分の主因である。
ＴＣＲは、表Ａに開示されているＨＬＡ−ペプチド標的などのＨＬＡ−ペプチド標的を特異的に認識できるため、ＴＣＲは、ＨＬＡ−ペプチドに特異的に結合するＡＢＰであり得る。ＴＣＲは、例えば、Ｂ細胞により分泌される抗体と同様に、可溶性であり得る。ＴＣＲはまた、例えば、Ｔ細胞またはＮＫ細胞などの細胞上で膜結合し得る。このため、ＴＣＲは、可溶性抗体および／または膜結合ＣＡＲに対応する状況で使用することができる。
本明細書に開示のＴＣＲのうちのいずれも、アルファ可変領域、アルファ接合領域、任意選択でアルファ定常領域、ベータ可変領域、任意選択でベータ多様性領域、ベータ接合領域、および任意選択でベータ定常領域を含み得る。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲまたはＣＡＲは組換えＴＣＲまたはＣＡＲである。組換えＴＣＲまたはＣＡＲは、本明細書で特定されるＴＣＲのうちのいずれを含んでもよいが、１つ以上の修飾を含んでもよい。例示的な修飾、例えばアミノ酸置換が、本明細書に記載されている。本明細書に記載のアミノ酸置換は、ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇに見られるＩＭＧＴ命名法およびアミノ酸番号付けを参照して行われ得る。
組換えＴＣＲまたはＣＡＲは、完全ヒト配列、例えば天然ヒト配列を含む、ヒトＴＣＲまたはＣＡＲであってもよい。組換えＴＣＲまたはＣＡＲは、その天然のヒト可変ドメイン配列を保持してもよいが、α定常領域、β定常領域、またはαおよびβ定常領域の両方に対する修飾を含んでもよい。ＴＣＲ定常領域に対するそのような修飾は、例えば、外因性ＴＣＲ鎖の優先的対合を駆動することにより、ＴＣＲ遺伝子療法のためのＴＣＲ組立ておよび発現を改善し得る。
いくつかの実施形態では、αおよびβ定常領域は、マウス定常領域配列をヒト定常領域配列全体に置換することにより修飾される。そのような「マウス化」ＴＣＲおよびそれらの作製方法は、参照により全体が本明細書に組み込まれるＣａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２００６ Ｓｅｐ １；６６（１７）：８８７８−８６に記載されている。
いくつかの実施形態では、αおよびβ定常領域は、特定のヒト残基をマウス残基に入れ替える（ヒト→マウスアミノ酸交換）、ヒトＴＣＲ α定常（ＴＲＡＣ）領域、ＴＣＲ β定常（ＴＲＢＣ）領域、またはＴＲＡＣおよびＴＲＡＢ領域における１つ以上のアミノ酸置換を行うことにより修飾される。ＴＲＡＣ領域の１つ以上のアミノ酸置換は、残基９０でのＳｅｒ置換、残基９１でのＡｓｐ置換、残基９２でのＶａｌ置換、残基９３でのＰｒｏ置換、またはそれらの任意の組み合わせを含んでもよい。ヒトＴＲＢＣ領域の１つ以上のアミノ酸置換は、残基１８でのＬｙｓ置換、残基２２でのＡｌａ置換、残基１３３でのＩｌｅ置換、残基１３９でのＨｉｓ置換、または上記の任意の組み合わせを含んでもよい。そのような標的化したアミノ酸置換は、参照により全体が本明細書に組み込まれるＪ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｊｕｎｅ １，２０１０，１８４（１１）６２２３−６２３１に記載されている。
いくつかの実施形態では、ヒトＴＲＡＣは、残基２１０にＡｓｐ置換を含み、ヒトＴＲＢＣは、残基１３４にＬｙｓ置換を含む。そのような置換により、α鎖とβ鎖との間の塩橋の形成、およびＴＣＲ鎖間ジスルフィド結合の形成が促進され得る。これらの標的化した置換は、参照により全体が本明細書に組み込まれるＪ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｊｕｎｅ １，２０１０，１８４（１１）６２３２−６２４１に記載されている。
いくつかの実施形態では、ヒトＴＲＡＣおよびヒトＴＲＢＣ領域は、追加のジスルフィド結合の形成により外因性ＴＣＲ鎖の優先的対合を改善し得る導入されたシステインを含むように修飾される。例えば、参照により全体が本明細書に組み込まれるＣａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２００７ Ａｐｒ １５；６７（８）：３８９８−９０３ ａｎｄ Ｂｌｏｏｄ．２００７ Ｍａｒ １５；１０９（６）：２３３１−８に記載されているように、ヒトＴＲＡＣは残基４８にＣｙｓ置換を含んでもよく、ヒトＴＲＢＣは残基５７にＣｙｓ置換を含んでもよい。
組換えＴＣＲまたはＣＡＲは、α鎖およびβ鎖に対する他の修飾を含んでもよい。
いくつかの実施形態では、αおよびβ鎖の細胞外ドメインを完全ヒトＣＤ３ζ（ＣＤ３−ゼータ）分子に連結することにより、αおよびβ鎖が修飾される。そのような修飾は、参照により全体が本明細書に組み込まれる、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｊｕｎｅ １，２００８，１８０（１１）７７３６−７７４６；遺伝子Ｔｈｅｒ．２０００ Ａｕｇ；７（１６）：１３６９−７７、およびＴｈｅ Ｏｐｅｎ遺伝子Ｔｈｅｒａｐｙ Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１１，４：１１−２２に記載されている。
いくつかの実施形態では、参照により全体が本明細書に組み込まれるＪ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｊｕｎｅ １，２０１２，１８８（１１）５５３８−５５４６に記載されているように、疎水性アミノ酸置換をα鎖の膜貫通領域に導入することにより、α鎖が修飾される。
アルファまたはベータ鎖は、参照により全体が本明細書に組み込まれるＪ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．２００９ Ｆｅｂ １６；２０６（２）：４６３−４７５に記載されているように、アミノ酸配列中のＮ−グリコシル化部位のうちのいずれか１つを改変することにより修飾されてもよい。
アルファおよびベータ鎖は、各々、二量体化ドメイン、例えば、異種二量体化ドメインを含んでもよい。そのような異種ドメインは、当該技術分野で知られているように、ロイシンジッパー、５Ｈ３ドメインもしくは疎水性プロリンリッチカウンタードメイン、または他の類似のモダリティであってもよい。一例では、アルファおよびベータ鎖は、アルファおよびベータ細胞外ドメインのカルボキシル末端に３０ｍｅｒのセグメントを導入することにより修飾されてもよく、これらのセグメントは、選択的に会合して、安定なロイシンジッパーを形成する。このような修飾については、参照により全体が本明細書に組み込まれるＰＮＡＳ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２２，１９９４．９１（２４）１１４０８−１１４１２；ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０７３／ｐｎａｓ．９１．２４．１１４０８に記載されている。
本明細書で特定されるＴＣＲは、参照により全体が本明細書に組み込まれるＷＯ２０１２／０１３９１３に記載されるものなど、親和性または半減期を増大する変異を含むように修飾されてもよい。
組換えＴＣＲまたはＣＡＲは、一本鎖ＴＣＲ（ｓｃＴＣＲ）であってもよい。そのようなｓｃＴＣＲは、ＴＣＲα鎖定常領域細胞外配列のＮ末端に融合したα鎖可変領域配列、ＴＣＲβ鎖定常領域細胞外配列のＮ末端に融合したＴＣＲβ鎖可変領域、およびαセグメントのＣ末端をβセグメントのＮ末端に連結するか、またはその逆を行うリンカー配列を含んでもよい。いくつかの実施形態では、ｓｃＴＣＲのαおよびβセグメントの定常領域細胞外配列は、ジスルフィド結合により連結する。いくつかの実施形態では、リンカー配列の長さおよびジスルフィド結合の位置は、αおよびβセグメントの可変領域配列が実質的に天然のαβＴ細胞受容体のように相互に配向されるようなものである。例示的なｓｃＴＣＲは、参照により全体が本明細書に組み込まれる米国特許第７，５６９，６６４号に記載されている。
いくつかの場合には、ｓｃＴＣＲの可変領域は、遺伝子Ｔｈｅｒａｐｙ ｖｏｌｕｍｅ ７，ｐａｇｅｓ １３６９−１３７７（２０００）に記載されているもののように、短いペプチドリンカーによって共有結合で接合していてもよい。短いペプチドリンカーは、セリンリッチまたはグリシンリッチリンカーであってもよい。例えば、リンカーは、参照により全体が組み込まれるＣａｎｃｅｒ遺伝子Ｔｈｅｒａｐｙ（２００４）１１，４８７−４９６に記載されているように、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３であってもよい。
組換えＴＣＲまたはその抗原結合断片は、融合タンパク質として発現されてもよい。例えば、ＴＣＲまたはその抗原結合断片は、毒素と融合してもよい。そのような融合タンパク質は、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２００２ Ｍａｒ １５；６２（６）：１７５７−６０に記載されている。ＴＣＲまたはその抗原結合断片は、抗体Ｆｃ領域と融合してもよい。そのような融合タンパク質は、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍａｙ １，２０１７，１９８（１ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）１２０．９に記載されている。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲまたはＣＡＲなどの組換え受容体、例えばその抗体部分は、スペーサーをさらに含み、このスペーサーは、ヒンジ領域、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ領域、ならびに／またはＣＨ１／ＣＬおよび／もしくはＦｃ領域などの、免疫グロブリン領域またはその変異体もしくは修飾型の少なくとも一部であるか、あるいはそれを含んでもよい。いくつかの実施形態では、定常領域または定常部分は、ＩｇＧ４またはＩｇＧ１などのヒトＩｇＧのものである。いくつかの態様では、定常領域の部分は、抗原認識成分、例えばｓｃＦｖと、膜貫通ドメインとの間のスペーサー領域として機能する。スペーサーは、スペーサーの非存在下と比較して、抗原結合後の細胞の応答性を高める長さのものであり得る。いくつかの例では、スペーサーは、長さが１２アミノ酸または約１２アミノ酸であるか、または長さが１２アミノ酸以下である。例示的なスペーサーには、列挙する範囲のうちのいずれかのエンドポイント間のいずれの整数も含めて、少なくとも約１０〜２２９アミノ酸、約１０〜２００アミノ酸、約１０〜１７５アミノ酸、約１０〜１５０アミノ酸、約１０〜１２５アミノ酸、約１０〜１００アミノ酸、約１０〜７５アミノ酸、約１０〜５０アミノ酸、約１０〜４０アミノ酸、約１０〜３０アミノ酸、約１０〜２０アミノ酸、または約１０〜１５アミノ酸を有するスペーサーが含まれる。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は、約１２以下のアミノ酸以下、約１１９以下のアミノ酸、または約２２９以下のアミノ酸を有する。例示的なスペーサーには、ＩｇＧ４ヒンジのみ、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインに連結したＩｇＧ４ヒンジ、またはＣＨ３ドメインに連結したＩｇＧ４ヒンジが含まれる。例示的なスペーサーには、Ｈｕｄｅｃｅｋ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，１９：３１５３または国際特許出願公開第ＷＯ２０１４０３１６８７号に記載されているスペーサーが挙げられるが、これらの限定されない。いくつかの実施形態では、定常領域または部分はＩｇＤのものである。
ＴＣＲまたはＣＡＲなどの受容体の抗原認識ドメインは、ＣＡＲの場合、ＴＣＲ複合体などの抗原受容体複合体をとおした活性化を模倣し、かつ／または別の細胞表面受容体を介してシグナル伝達するシグナル伝達成分など、１つ以上の細胞内シグナル伝達成分に連結することができる。このため、いくつかの実施形態では、ＨＬＡ−ペプチド特異的結合成分（例えば、抗体またはＴＣＲなどのＡＢＰ）は、１つ以上の膜貫通および細胞内シグナル伝達ドメインに連結する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは細胞外ドメインに融合する。一実施形態では、受容体中のドメインのうちの１つ、例えばＣＡＲと自然に会合する膜貫通ドメインが使用される。いくつかの例では、膜貫通ドメインは、同じまたは異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインへのそのようなドメインの結合を回避して、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小限に抑えるように、選択、またはアミノ酸置換により修飾される。
いくつかの実施形態における膜貫通ドメインは、天然源または合成源のいずれかに由来する。供給源が天然である場合、いくつかの態様におけるドメインは、任意の膜結合タンパク質または膜貫通タンパク質に由来する。膜貫通領域には、Ｔ細胞受容体、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤＳ、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、および／またはＣＤ１５４のアルファ、ベータ、またはゼータ鎖に由来する（すなわち、少なくともそれらの少なくとも膜貫通領域（複数可）を含む）領域が含まれる。あるいは、いくつかの実施形態における膜貫通ドメインは合成である。いくつかの態様では、合成膜貫通ドメインは、ロイシンおよびバリンなどの主に疎水性の残基を含む。いくつかの態様では、フェニルアラニン、トリプトファン、およびバリンのトリプレットは、合成膜貫通ドメインの各末端に見られる。いくつかの実施形態では、連結は、リンカー、スペーサー、および／または膜貫通ドメイン（複数可）によるものである。
細胞内シグナル伝達ドメインには、天然の抗原受容体をとおしたシグナル、共刺激受容体と組み合わせたそのような受容体をとおしたシグナル、および／または共刺激受容体のみをとおしたシグナルを模倣または近似するものがある。いくつかの実施形態では、短いオリゴまたはポリペプチドリンカー、例えば、グリシンおよびセリン、例えばグリシン−セリンダブレットを含むものなど、長さが２〜１０アミノ酸のリンカーが存在し、それらの間の結合を形成する。受容体の膜貫通ドメインと細胞質シグナル伝達ドメインとの間の連結を形成する。
受容体、例えば、ＴＣＲまたはＣＡＲは、少なくとも１つの細胞内シグナル伝達成分（単数または複数）を含み得る。いくつかの実施形態では、受容体は、Ｔ細胞活性化および細胞傷害を媒介するＴＣＲ ＣＤ３鎖、例えばＣＤ３ゼータ鎖などのＴＣＲ複合体の細胞内成分を含む。このため、いくつかの態様では、ＨＬＡ−ペプチド結合ＡＢＰ（例えば、抗体）は１つ以上の細胞シグナル伝達モジュールに連結する。いくつかの実施形態では、細胞シグナル伝達モジュールには、ＣＤ３膜貫通ドメイン、ＣＤ３細胞内シグナル伝達ドメイン、および／または他のＣＤ膜貫通ドメインが含まれる。いくつかの実施形態では、受容体、例えばＣＡＲには、Ｆｃ受容体−ガンマ、ＣＤ８、ＣＤ４、ＣＤ２５、またはＣＤ１６などの１つ以上の追加の分子の一部がさらに含まれる。例えば、いくつかの態様では、ＣＡＲには、ＣＤ３−ゼータまたはＦｃ受容体−ガンマと、ＣＤ８、ＣＤ４、ＣＤ２５、またはＣＤ１６との間のキメラ分子が含まれる。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲまたはＣＡＲのライゲーションの際に、受容体の細胞質ドメインまたは細胞内シグナル伝達ドメインが、免疫細胞、例えば受容体を発現するように操作されたＴ細胞の正常なエフェクター機能または応答のうちの少なくとも１つを活性化する。例えば、いくつかの状況において、受容体は、細胞溶解活性またはＴヘルパー活性などのＴ細胞の機能、例えば、サイトカインまたは他の因子の分泌を誘導する。いくつかの実施形態では、例えば、エフェクター機能シグナルを伝達する場合、無傷の免疫刺激鎖の代わりに、抗原受容体成分または共刺激分子の細胞内シグナル伝達ドメインの短縮部分が使用される。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメイン（単数または複数）には、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の細胞質配列が含まれ、またいくつかの態様では、天然の状況でそのような受容体と協働して、抗原受容体の関与に続いてシグナル伝達を開始する共受容体のもの、および／またはそのような分子の誘導体もしくは変異体、および／または同じ機能的能力を有する合成配列が含まれる。
天然ＴＣＲの状況において、完全な活性化には、一般に、ＴＣＲをとおしたシグナル伝達だけでなく、共刺激シグナルも必要とされる。このため、いくつかの実施形態では、完全な活性化を促進するために、二次または共刺激シグナルを生成するための成分も受容体に含まれる。他の実施形態では、受容体には、共刺激シグナルを生成するための成分コンポーネントは含まれない。いくつかの態様では、追加の受容体が同じ細胞内で発現され、二次または共刺激シグナルを生成するための成分が提供される。
Ｔ細胞の活性化は、いくつかの態様において、ＴＣＲをとおした抗原依存性一次活性化を介するもの（一次細胞質シグナル伝達配列）、および抗原依存性の様式で作用して、二次または共刺激シグナルを提供するもの（二次細胞質シグナル伝達配列）という２つのクラスの細胞質シグナル伝達配列によって媒介されるものと説明される。いくつかの態様では、受容体には、そのようなシグナル伝達成分の一方または両方が含まれる。
いくつかの態様では、受容体には、ＴＣＲ複合体の一次活性化を調節する一次細胞質シグナル伝達配列が含まれる。刺激性に作用する一次細胞質シグナル伝達配列には、免疫受容体チロシンベース活性化モチーフまたはＩＴＡＭとして知られるシグナル伝達モチーフが含まれてもよい。一次細胞質シグナル伝達配列を含むＩＴＡＭの例には、ＴＣＲまたはＣＤ３ゼータ、ＦｃＲガンマ、ＦｃＲベータ、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＣＤＳ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、およびＣＤ６６ｄに由来するものが含まれる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲ内の細胞質シグナル伝達分子（複数可）には、細胞質シグナル伝達ドメイン、その一部、またはＣＤ３ゼータに由来する配列が含まれる。
いくつかの実施形態では、受容体には、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＡＰ１０、およびＩＣＯＳなどの共刺激受容体のシグナル伝達ドメインおよび／または膜貫通部分が含まれる。いくつかの態様では、同じ受容体に、活性化成分と共刺激成分との両方が含まれる。
いくつかの実施形態では、活性化ドメインは１つの受容体内に含まれるが、共刺激成分は、別の抗原を認識する別の受容体によって提供される。いくつかの実施形態では、受容体には、活性化受容体または刺激受容体、および共刺激受容体が含まれ、両方とも同じ細胞上で発現される（ＷＯ２０１４／０５５６６８を参照されたい）。いくつかの態様では、ＨＬＡ−ペプチド標的化受容体は、刺激受容体または活性化受容体であり、他の態様では、共刺激受容体である。いくつかの実施形態では、細胞には、ＨＬＡ−ペプチド以外の抗原を認識する受容体などの阻害性受容体（例えば、ｉＣＡＲ、Ｆｅｄｏｒｏｖ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，５（２１５）（Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３）参照）がさらに含まれ、これにより、ＨＬＡ−ペプチド標的化受容体を介して送達される活性化シグナルが、阻害性受容体のそのリガンドへの結合により減退するまたは阻害されて、例えば標的外効果を低減する。
ある特定の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３（例えば、ＣＤ３−ゼータ）細胞内ドメインに連結したＣＤ２８膜貫通ドメインおよびシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータ細胞内ドメインに連結したキメラＣＤ２８およびＣＤ１３７（４−１ＢＢ、ＴＮＦＲＳＦ９）共刺激ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、受容体は、細胞質部分に、１つ以上、例えば２つ以上の共刺激ドメインおよび活性化ドメイン、例えば一次活性化ドメインを含む。例示的な受容体には、ＣＤ３−ゼータ、ＣＤ２８、および４−１ＢＢの細胞内成分が挙げられる。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲ、またはＴＣＲなどの他の抗原受容体には、細胞表面マーカーなどのマーカーがさらに含まれ、これらを使用して、受容体、例えば、短縮ＥＧＦＲ（ｔＥＧＦＲ）などの細胞表面受容体の短縮型を発現するように、細胞の形質導入または操作を確認してもよい。いくつかの態様では、マーカーには、ＣＤ３４、ＮＧＦＲ、または上皮成長因子受容体（例えば、ｔＥＧＦＲ）の全部または一部（例えば、短縮形態）が含まれる。いくつかの実施形態では、マーカーをコードする核酸は、切断可能なリンカー配列またはリボソームスキップ配列、例えばＴ２Ａなどのリンカー配列をコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結する。ＷＯ２０１４０３１６８７を参照されたい。いくつかの実施形態では、Ｔ２Ａリボソームスイッチによって分離したＣＡＲおよびＥＧＦＲｔをコードする構築物の導入により、同じ構築物から２つのタンパク質を発現させることができるため、ＥＧＦＲｔは、そのような構築物を発現する細胞を検出するマーカーとして使用することができる。いくつかの実施形態では、マーカー、および任意選択でリンカー配列は、公開特許出願第ＷＯ２０１４０３１６８７号に開示されているいずれのものであってもよい。例えば、マーカーは、任意選択でＴ２Ａリボソームスキップ配列などのリンカー配列に連結した切断型ＥＧＦＲ（ｔＥＧＦＲ）であり得る。
いくつかの実施形態では、マーカーは、Ｔ細胞上に天然に見られない、またはＴ細胞の表面上に天然に見られない分子、例えば細胞表面タンパク質、またはその一部である。
いくつかの実施形態では、分子は、非自己分子、例えば、非自己タンパク質、すなわち、細胞が養子移入される宿主の免疫系によって「自己」として認識されないものである。
いくつかの実施形態では、マーカーは、治療機能を果たさず、かつ／または遺伝子操作、例えば、操作に成功した細胞の選択のためのマーカーとして使用される以外の効果をもたらさない。他の実施形態では、マーカーは、治療分子または他になんらかの所望の効果を発揮する分子、例えば、養子移入およびリガンドとの遭遇時の細胞の応答を増強および／または抑制する共刺激または免疫チェックポイント分子など、細胞がインビボで遭遇するリガンドであってもよい。
ＴＣＲまたはＣＡＲは、１つ以上の天然に存在するアミノ酸の代わりに１つまたは修飾された合成アミノ酸を含んでもよい。例示的な修飾されたアミノ酸には、アミノシクロヘキサンカルボン酸、ノルロイシン、α−アミノ ｎ−デカン酸、ホモセリン、Ｓ−アセチルアミノメチルシステイン、トランス−３−およびトランス−４−ヒドロキシプロリン、４−アミノフェニルアラニン、４−ニトロフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、４−カルボキシフェニルアラニン、（３−フェニルセリン（３−ヒドロキシフェニルアラニン、フェニルグリシン、α−ナフチルアラニン、シクロヘキシルアラニン、シクロヘキシルグリシン、インドリン−２−カルボン酸、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、アミノマロン酸、アミノマロン酸モノアミド、Ｎ’−ベンジル−Ｎ’−メチル−リジン、Ｎ’，Ｎ’−ジベンジル−リジン、６−ヒドロキシリジン、オルニチン、α−アミノシクロペンタンカルボン酸、α−アミノシクロヘキサンカルボン酸、α−アミノシクロヘプタンカルボン酸、α−（２−アミノ−２−ノルボマン）−カルボン酸、α，γ−ジアミノ酪酸、α，γ−ジアミノプロピオン酸、ホモフェニルアラニン、およびα−ｔｅｒｔブチルグリシンが含まれるが、これらに限定されない。
いくつかの場合には、ＣＡＲは、第１、第２、および／または第３世代のＣＡＲと称される。いくつかの態様では、第１世代のＣＡＲは、抗原結合時にＣＤ３鎖誘導シグナルのみを提供するＣＡＲであり、いくつかの態様では、第２世代のＣＡＲは、そのようなシグナルと、ＣＤ２８またはＣＤ１３７などの共刺激受容体からの細胞内シグナル伝達ドメインを含むものなどの共刺激シグナルとを提供するＣＡＲであり、いくつかの態様では、いくつかの態様における第３世代のＣＡＲは、異なる共刺激受容体の複数の共刺激ドメインを含むＣＡＲである。
いくつかの実施形態では、キメラ抗原受容体には、本明細書に記載の抗体または断片を含む細胞外部分が含まれる。いくつかの態様では、キメラ抗原受容体には、本明細書に記載の抗体または断片を含む細胞外部分と細胞内シグナル伝達ドメインとが含まれる。いくつかの実施形態では、抗体または断片には、ｓｃＦｖまたは単一ドメインＶＨ抗体が含まれ、細胞内ドメインにはＩＴＡＭが含まれる。いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインには、ＣＤ３−ゼータ（ＣＤ３）鎖のゼータ鎖のシグナル伝達ドメインが含まれる。いくつかの実施形態では、キメラ抗原受容体には、細胞外ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインとを連結する膜貫通ドメインが含まれる。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインには、ＣＤ２８の膜貫通部分が含まれる。細胞外ドメインおよび膜貫通は、直接的または間接的に連結し得る。いくつかの実施形態では、細胞外ドメインおよび膜貫通は、本明細書に記載される任意のものなどのスペーサーにより連結する。いくつかの実施形態では、キメラ抗原受容体には、膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインとの間などに、Ｔ細胞共刺激分子の細胞内ドメインが含まれる。いくつかの態様では、Ｔ細胞共刺激分子はＣＤ２８または４１ＢＢである。
いくつかの実施形態では、ＣＡＲには、抗体、例えば抗体断片、ＣＤ２８またはその機能的変異体の膜貫通部分であるかまたはそれを含む膜貫通ドメイン、ならびにＣＤ２８またはその機能的変異体のシグナル伝達部分およびＣＤ３ゼータまたはその機能的変異体のシグナル伝達部分を含む細胞内シグナル伝達ドメインが含まれる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲには、抗体、例えば抗体断片、ＣＤ２８またはその機能的変異体の膜貫通部分であるかまたはそれを含む膜貫通ドメイン、ならびに４−１ＢＢまたはその機能的変異体のシグナル伝達部分およびＣＤ３ゼータまたはその機能的変異体のシグナル伝達部分を含む細胞内シグナル伝達ドメインが含まれる。いくつかのそのような実施形態では、受容体には、ヒンジのみのスペーサーなどの、ＩｇＧ４ヒンジを含むスペーサーをさらに含む。ヒンジのみのスペーサーのような、Ｉｇヒンジ、例えばＩｇＧ４ヒンジといった、ヒトＩｇ分子などのＩｇ分子の一部分を含むスペーサーがさらに含まれる。
いくつかの実施形態では、受容体の膜貫通ドメイン、例えばＣＡＲは、ヒトＣＤ２８またはその変異体の膜貫通ドメイン、例えば、ヒトＣＤ２８の２７アミノ酸膜貫通ドメイン（受託番号Ｐ１０７４７．１）である。
いくつかの実施形態では、キメラ抗原受容体には、Ｔ細胞共刺激分子の細胞内ドメインが含まれる。いくつかの態様では、Ｔ細胞共刺激分子はＣＤ２８または４１ＢＢである。
いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ヒトＣＤ２８またはその機能的変異体もしくは部分の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、例えば、その４１アミノ酸ドメインおよび／または天然ＣＤ２８タンパク質の位置１８６〜１８７にＬＬからＧＧへの置換を有するドメインを含む。いくつかの実施形態では、細胞内ドメインは、４１ＢＢまたはその機能的変異体もしくは部分の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、例えば、ヒト４−１ＢＢ（受託番号Ｑ０７０１１．１）またはその機能的変異体もしくは部分の４２アミノ酸細胞質ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ヒトＣＤ３ゼータのアイソフォーム３の１１２ ＡＡ細胞質ドメインなどのヒトＣＤ３ゼータ刺激シグナル伝達ドメインもしくはその機能的変異体（受託番号：Ｐ２０９６３．２）、または米国特許第７，４４６，１９０号もしくは米国特許第８，９１１，９９３号に記載されているＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの態様では、スペーサーは、ＩｇＧ４またはＩｇＧ１のヒンジのみなど、ＩｇＧのヒンジ領域のみを含む。他の実施形態では、スペーサーは、ＣＨ２および／またはＣＨ３ドメインに連結したＩｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインに連結さしたＩｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、ＣＨ３ドメインのみに連結したＩｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、グリシン−セリンに富む配列、または既知の可動性リンカーなどの他の可動性リンカーであるか、またはそれらを含む。
例えば、いくつかの実施形態では、ＣＡＲには、抗体またはその断片、例えば、本明細書に記載のｓｄＡｂ（例えば、ＶＨ領域のみを含むもの）およびｓｃＦｖを含むＨＬＡ−ペプチド抗体のうちのいずれか、スペーサー、例えば、スペーサーを含むＩｇ−ヒンジのうちのいずれか、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、ＣＤ２８細胞内シグナル伝達ドメイン、ならびにＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインが含まれる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲには、抗体または断片、例えば、本明細書に記載のｓｄＡｂおよびｓｃＦｖを含むＨＬＡ−ペプチド抗体のうちのいずれか、スペーサー、例えば、スペーサーを含むＩｇ−ヒンジのうちのいずれか、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、ＣＤ２８細胞内シグナル伝達ドメイン、ならびにＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインが含まれる。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）［Ｇ７］に対する標的特異的なＴＣＲ
いくつかの態様において、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＴＣＲまたはその抗原結合断片を含むＡＢＰが本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡ拘束性ペプチドは、配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）（「Ｇ７」）を含む。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、αＣＤＲ３配列を含んでもよい。αＣＤＲ３配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７７、４２７８、４２７９、４２８０、または４２８１であってもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、βＣＤＲ３配列を含んでもよい。βＣＤＲ３配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９１〜４２９５のうちのいずれであってもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、特定のαＣＤＲ３配列および特定のβＣＤＲ３配列を含んでもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９５であってもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７７であるαＣＤＲ３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９１であるベータＣＤＲ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７８であるαＣＤＲ３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９２であるベータＣＤＲ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７９であるαＣＤＲ３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９３であるベータＣＤＲ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８０であるαＣＤＲ３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９４であるベータＣＤＲ３を含んでもよい。Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８１であるαＣＤＲ３およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９５であるベータＣＤＲ３を含んでもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、任意選択でＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列、任意選択でＴＲＡＣ配列および任意選択でＴＲＢＣ配列を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ６−５、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ５、ＴＲＡＪ１３、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ２１、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ４、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、アルファＶＪ配列を含んでもよい。アルファＶＪ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０６〜４３１０のうちのいずれであってもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に特異的なＴＣＲは、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含んでもよい。ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２１〜４３２５のうちのいずれであってもよい。
いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２５である。
Ａ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５１）に対する標的特異的なＴＣＲ
いくつかの態様において、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＴＣＲまたはその抗原結合断片を含むＡＢＰが本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡ拘束性ペプチドは、配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５１）を含む。
Ａ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５１）に特異的なＴＣＲは、αＣＤＲ３配列を含んでもよい。αＣＤＲ３配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２〜３３５０または４２７３〜４２７６のうちのいずれであってもよい。
Ａ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５１）に特異的なＴＣＲは、βＣＤＲ３配列を含んでもよい。βＣＤＲ３配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１〜３６５５または４２８７〜４２９０のうちのいずれであってもよい。
Ａ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５１）に特異的なＴＣＲは、特定のαＣＤＲ３配列および特定のβＣＤＲ３配列を含んでもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３７９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０８９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０９９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１００であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３９９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４００であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４０９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５３であってもよい。αＣＤＲ３は
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４１９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１１２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１２９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４２９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３６２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３８１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０６１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１０４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１５９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４５９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０７７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４６９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１６９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４７９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１７９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８４であってもよく、βＣＤ
Ｒ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４８２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１８９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４９９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１９９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５００であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２００であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４３６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４４０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２０９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５０９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２２９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５３９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４６であってもよい。
αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２４９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５４９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２５９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５５９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２６９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５６９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５２２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２３０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５１７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５７９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２７９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５８９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６００であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３００であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３０９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３１９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６２９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２７であっても
よく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３２９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６３９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５９６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３３９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６０１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２８９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４１であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４５であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４７であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１４２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６４９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５０であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２９０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６１４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５１であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４７であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５２であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５３であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３４９であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５４であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３５０であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５５であってもよい。
Ａ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５１）に特異的なＴＣＲは、ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、任意選択でＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列、任意選択でＴＲＡＣ配列および任意選択でＴＲＢＣ配列を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ３−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ１９、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２０、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ１７、ＴＲＢＶ６−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ４、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ５−４、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ１１、ＴＲＢＶ１１−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３４、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ２９、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ４、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ５４、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ２９−１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ１０−２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ１１、ＴＲＢＶ５−４、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ１９、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ６−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ１１−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ５−６、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ４、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ１０、ＴＲＢＶ２５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３９、ＴＲＡＪ４１、ＴＲＢＶ１３、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ５３、ＴＲＢＶ２９−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−１、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ５０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ１０、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−４、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ３−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ５−８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１０、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ３−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ２７、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ９−２、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ７−６、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ１７、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３０、ＴＲＡＪ５８、ＴＲＢＶ１９、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−１、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ２９、ＴＲＢＶ６−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ７−３、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ６−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ１３、ＴＲＢＶ２５−１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ５４、ＴＲＢＶ７−８、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ５３、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２３ＤＶ６、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ１３、ＴＲＢＶ１４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４４、ＴＲＢＶ９、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ３、ＴＲＢＶ３−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ７−２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ１２、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ２２、ＴＲＢＶ１１−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ３、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２７、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ６−５、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ２２、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−１、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１０、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ９−２、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ１１−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ６−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ９−２、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ
５−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ３、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２０、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ７−２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−４、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ１３、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ２８、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−１、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ１９、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ１９、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−１、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ１１、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ６−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ１７、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ５７、ＴＲＢＶ５−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−３、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ５、ＴＲＡＪ３７、ＴＲＢＶ５−６、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ３、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１１−２、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ５−４、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ１２、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ１１−２、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４１、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２５、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ７−２、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ１０−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ６−６、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ７−２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ６−６、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ２９−１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ１２−４、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−１、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ４−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ４４、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−３、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ４−１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３０、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ２８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ５−１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ２９−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ７−２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ２９、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ２８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ１０−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ１５、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ５７、ＴＲＢＶ１３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ１０、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ５−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ２、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３５、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ５、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ２１、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ１２−５、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３６ＤＶ７、ＴＲＡＪ４４、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ２９、ＴＲＢＶ１１−２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ１３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ１１−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ１３、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ１２−３、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１２−４、およびＴＲＢＪ２−１を含んで
もよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ３０、ＴＲＢＶ１３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ１０、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ５、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ７−８、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ４−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ１９、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２２、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ５−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ２８、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ３−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ５、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２３ＤＶ６、ＴＲＡＪ１３、ＴＲＢＶ６−５、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ１２、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ２１、ＴＲＢＶ２８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ９−２、ＴＲＡＪ２９、ＴＲＢＶ５−８、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２７、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ７−６、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ３０、ＴＲＢＶ２０−１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ１２−５、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−１、ＴＲＡＪ５０、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ４０、ＴＲＡＪ４１、ＴＲＢＶ６−５、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ５、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ５−１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ１１、ＴＲＢＶ７−６、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ４８、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ２２、ＴＲＢＶ２９−１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ１０−３、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３９、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ９、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１０、ＴＲＡＪ８、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４８、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ７−２、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ５−１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ９、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ６−６、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２９、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ４１、ＴＲＡＪ４１、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ５−１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ１３、ＴＲＢＶ９、およびＴＲＢＪ１−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ５７、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ５、ＴＲＡＪ４４、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ１１−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−３、ＴＲＡＪ４１、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ５、ＴＲＡＪ４、ＴＲＢＶ１１−２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ６−５、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ４、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ４８、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ４４、ＴＲＢＶ６−１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２７、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−１、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ５、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３９、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２５、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ２９−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３９、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ３０、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ３０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ１８、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ１１−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ４７、ＴＲＢＶ５−６、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２２、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ５−６、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ１４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ２、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ５、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１６、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ１２、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ２９−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３６ＤＶ７、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ１５、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ５８、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、Ｔ
ＲＡＶ１６、ＴＲＡＪ１８、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ４８、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ２−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２９ＤＶ５、ＴＲＡＪ３７、ＴＲＢＶ５−４、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ２４−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ１５、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−１、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ２５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−１、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ４０、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ７−６、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ５、ＴＲＡＪ５、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ４−１、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ５３、ＴＲＢＶ５−１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ４８、ＴＲＢＶ５−６、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ２０−１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−３、ＴＲＡＪ２３、ＴＲＢＶ１３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ７−３、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ５−１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２５、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ２９−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３４、ＴＲＡＪ３７、ＴＲＢＶ２８、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ９、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ６−１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ１１−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ５−４、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ４−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ１３、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ７、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ６−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ５−５、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ４−２、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ３０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２０、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ５−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ７−８、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ４８、ＴＲＢＶ２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２５、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４９、ＴＲＢＶ５−４、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ１２、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３８−２ＤＶ８、ＴＲＡＪ５４、ＴＲＢＶ２４−１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１７、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ４−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ５−４、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ６−５、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４１、ＴＲＢＶ９、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ２０−１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−２、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ６−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−１、ＴＲＡＪ５７、ＴＲＢＶ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−４、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ７−９、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ３−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−４を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ２９、ＴＲＢＶ５−１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１４ＤＶ４、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３５、ＴＲＡＪ４４、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２４、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２５、ＴＲＡＪ２１、ＴＲＢＶ２８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ２８、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ５２、ＴＲＢＶ５−６、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４２、ＴＲＢＶ２８、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ２４、ＴＲＢＶ２８、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ２６、ＴＲＢＶ２、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３１、ＴＲＢＶ２９−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３９、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ６−１、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ３８、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１０、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ３０、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ２、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２７、ＴＲＡＪ４５、ＴＲＢＶ２７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−６を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ１８、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ２８、ＴＲＢＶ２７、およびＴＲＢＪ１−５を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ４−１、およびＴＲＢＪ１−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ４−２、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−２、ＴＲＡＪ４６、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３６、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１−２、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１１−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ６、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２５、ＴＲＡＪ３２、ＴＲＢＶ１９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ３３、ＴＲＢＶ９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ５３、ＴＲＢＶ７−７、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ１０−３、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１２−１、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ６−５、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２６−２、ＴＲＡＪ４３、ＴＲＢＶ２５−１、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−６、ＴＲＡＪ２０、ＴＲＢＶ７−９、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−２を含
んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３、ＴＲＡＪ１８、ＴＲＢＶ２０−１、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２１、ＴＲＡＪ４０、ＴＲＢＶ１１−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２、ＴＲＡＪ１０、ＴＲＢＶ６−５、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−７を含んでもよい。
Ａ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５１）に特異的なＴＣＲは、アルファＶＪ配列を含んでもよい。アルファＶＪ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５６〜３９６１または４３０２〜４３０５のうちのいずれであってもよい。
Ａ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０５１）に特異的なＴＣＲは、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含んでもよい。ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２〜４２６９または４３１７〜４３２０のうちのいずれであってもよい。
いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９８９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６８９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０００である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６９９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７００であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４００９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７０９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０１９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列
はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０２９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７２９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６７６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０３９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９７３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７３９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９９２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７１１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６６３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７６９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７２であり、ベー
タＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０７９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７７９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０８９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７８９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１００である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７９９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０９５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８００であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１０９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８０９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７４７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０４９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１１９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０５３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８１９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１２９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１
４１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１５９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１６９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８６９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１７９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８７９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１４１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１８９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８４１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１３０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８８９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１９９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２００である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９００であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０７である。いくつかの実施形態では、アルフ
ァＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８３０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９０９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９１９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９２９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２３９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９３９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２４９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９００であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２０９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９４９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９００であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２１４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８９９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２２４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２５９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６０である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７５１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６１である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６２である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６３である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６４である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５７であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６５である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５８であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９５９であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６０であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２６９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１７である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２０である。
Ｂ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７２）に対する標的特異的なＴＣＲ
いくつかの態様において、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＴＣＲまたはその抗原結合断片を含むＡＢＰが本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２であり、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡ拘束性ペプチドは、配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７２）を含む。
Ｂ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７２）に特異的なＴＣＲは、αＣＤＲ３配列を含んでもよい。αＣＤＲ３配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８４〜４２８６または３１３８のうちのいずれであってもよい。
Ｂ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７２）に特異的なＴＣＲは、βＣＤＲ３配列を含んでもよい。βＣＤＲ３配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９８〜４３０１のうちのいずれであってもよい。
Ｂ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７２）に特異的なＴＣＲは、特定のαＣＤＲ３配列および特定のβＣＤＲ３配列を含んでもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８４であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９８であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８５であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９９であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８６であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３００であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１３８であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０１であってもよい。
Ｂ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７２）に特異的なＴＣＲは、ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、任意選択でＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列、任意選択でＴＲＡＣ配列および任意選択でＴＲＢＣ配列を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１９、ＴＲＡＪ３９、ＴＲＢＶ７−６、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ１−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ３６ＤＶ７、ＴＲＡＪ３４、ＴＲＢＶ７−６、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−２を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ２４、ＴＲＡＪ１５、ＴＲＢＶ７−６、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ８−４、ＴＲＡＪ１２、ＴＲＢＶ１２−４、ＴＲＢＤ２、およびＴＲＢＪ２−３を含んでもよい。
Ｂ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７２）に特異的なＴＣＲは、アルファＶＪ配列を含んでもよい。アルファＶＪ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１３〜４３１６のうちのいずれであってもよい。
Ｂ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７２）に特異的なＴＣＲは、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含んでもよい。ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２８〜４３３１のうちのいずれであってもよい。
いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１３であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２８である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１４であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２９である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１５であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３３０である。いくつかの実施形態において、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１６であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３３１である。
Ａ＊０２：０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７１）に対する標的特異的なＴＣＲ
いくつかの態様において、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＴＣＲまたはその抗原結合断片を含むＡＢＰが本明細書で提供され、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡ拘束性ペプチドは、配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７１）を含む。
Ａ＊０２：０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７１）に特異的なＴＣＲは、αＣＤＲ３配列を含んでもよい。αＣＤＲ３配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８２〜４２８３のうちのいずれであってもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７１）に特異的なＴＣＲは、βＣＤＲ３配列を含んでもよい。βＣＤＲ３配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９６〜４２９７のうちのいずれであってもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７１）に特異的なＴＣＲは、特定のαＣＤＲ３配列および特定のβＣＤＲ３配列を含んでもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８２であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９６であってもよい。αＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８３であってもよく、βＣＤＲ３はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９７であってもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７１）に特異的なＴＣＲは、ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、任意選択でＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列、任意選択でＴＲＡＣ配列および任意選択でＴＲＢＣ配列を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１３−１、ＴＲＡＪ１１、ＴＲＢＶ６−３、およびＴＲＢＪ２−１を含んでもよい。そのようなＴＣＲは、ＴＲＡＶ１４ＤＶ４、ＴＲＡＪ５４、ＴＲＢＶ４−３、ＴＲＢＤ１、およびＴＲＢＪ２−４を含んでもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７１）に特異的なＴＣＲは、アルファＶＪ配列を含んでもよい。アルファＶＪ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１１〜４３１２のうちのいずれであってもよい。
Ａ＊０２：０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７１）に特異的なＴＣＲは、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含んでもよい。ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２６〜４３２７のうちのいずれであってもよい。
いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１１であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２６である。いくつかの実施形態では、アルファＶＪ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１２であり、ベータＶ（Ｄ）Ｊ配列はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２７である。
操作された細胞
抗原受容体を含む細胞、例えば、本明細書に記載の抗ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰ（例えば、ＣＡＲまたはＴＣＲ）を含む細胞外ドメインを含む細胞も提供される。そのような細胞の集団、およびそのような細胞を含む組成物も提供される。いくつかの実施形態では、組成物または集団は、ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰを発現する細胞が、組成物中の全細胞あるいはＴ細胞またはＣＤ８＋もしくはＣＤ４＋細胞などのある特異定の種類の細胞の少なくとも１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または９９パーセント超を構成するように、そのような細胞が富化されている。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に開示の抗原受容体を含む少なくとも１つの細胞を含む。組成物の中には、養子細胞療法などの投与のための医薬組成物および製剤がある。細胞および組成物を、対象、例えば患者に投与するための治療方法も提供される。
このため、受容体、例えば、ＴＣＲまたはＣＡＲを含むＡＢＰを発現する遺伝子操作された細胞も提供される。細胞は、一般に、哺乳動物細胞などの真核細胞であり、典型的にはヒト細胞である。いくつかの実施形態では、細胞は、血液、骨髄、リンパ、またはリンパ器官に由来し、先天免疫または適応免疫の細胞などの免疫系の細胞、例えば、リンパ球を含む骨髄またはリンパ系細胞、典型的にはＴ細胞および／またはＮＫ細胞である。他の例示的な細胞には、人工万能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む多能性（ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ）および万能性（ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ）幹細胞などの幹細胞が含まれる。細胞は、典型的には、対象から直接単離された細胞および／または対象から単離され凍結された細胞などの初代細胞である。いくつかの実施形態では、細胞には、Ｔ細胞または他の細胞型、例えば、全Ｔ細胞集団、ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞、およびその亜集団、例えば、機能、活性化状況、成熟度、分化、拡大、再循環、局在、および／もしくは持続能力の可能性、抗原特異性、抗原受容体の種類、特定の器官もしくはコンパートメントにおける存在、マーカーもしくはサイトカイン分泌プロファイル、ならびに／または分化の程度によって定義されるもののうちの１つ以上のサブセットが含まれる。治療される対象に関して、細胞は、同種異系および／または自家であってもよい。これらの方法の中には、既製の方法が含まれる。既製技術などのいくつかの態様では、細胞は、万能性および／または多能性、例えば、人工万能性幹細胞（ｉＰＳＣ）などの幹細胞である。いくつかの実施形態では、本方法には、本明細書に記載されるように、細胞を対象から単離し、それらを調製、処理、培養、および／または操作し、凍結保存の前または後に同じ患者にそれらを再導入することを含む。
Ｔ細胞ならびに／またはＣＤ４＋および／もしくはＣＤ８＋Ｔ細胞のサブタイプおよび亜集団の中には、未感作Ｔ（ＴＮ）細胞、エフェクターＴ細胞（ＴＥＦＦ）、メモリーＴ細胞およびそのサブタイプ、例えば、幹細胞メモリーＴ細胞（ＴＳＣＭ）、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞、エフェクターメモリーＴ（ＴＥＭ）細胞、または末端分化エフェクター記憶Ｔ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、未熟Ｔ細胞、成熟Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、粘膜関連不変Ｔ（ＭＡＬＴ）細胞、自然発生および適応調節Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞、ヘルパーＴ細胞、例えば、ＴＨ１細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ３細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２２細胞、濾胞性ヘルパーＴ細胞、アルファ／ベータＴ細胞、デルタ／ガンマＴ細胞がある。
いくつかの実施形態では、細胞はナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。いくつかの実施形態では、細胞は、単球または顆粒球、例えば、骨髄細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、肥満細胞、好酸球、および／または好塩基球である。
細胞は、発現を低下させるか、内因性ＴＣＲをノックアウトするように遺伝修飾されてもよい。そのような修飾は、参照により全体が組み込まれる、Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ．２０１２ Ｄｅｃ；１（１２）：ｅ６３；Ｂｌｏｏｄ．２０１１ Ａｕｇ １１；１１８（６）：１４９５−５０３；Ｂｌｏｏｄ．２０１２ Ｊｕｎ １４；１１９（２４）：５６９７−５７０５；Ｔｏｒｉｋａｉ，Ｈｉｒｏｋｉ ｅｔ ａｌ”ＨＬＡ ａｎｄ ＴＣＲ Ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｂｙ Ｚｉｎｃ Ｆｉｎｇｅｒ Ｎｕｃｌｅａｓｅｓ：Ｔｏｗａｒｄ“ｏｆｆ−ｔｈｅ−Ｓｈｅｌｆ”Ａｌｌｏ遺伝子ｉｃ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ＣＤ１９＋Ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．．”Ｂｌｏｏｄ １１６．２１（２０１０）：３７６６；Ｂｌｏｏｄ．２０１８ Ｊａｎ １８；１３１（３）：３１１−３２２．ｄｏｉ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ−２０１７−０５−７８７５９８；およびＷＯ２０１６０６９２８３に記載されている。
細胞は、サイトカイン分泌を促進するように遺伝修飾されてもよい。そのような修飾は、Ｈｓｕ Ｃ，Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｂｒａｙ ＲＢ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＳＡ，Ｍｏｒｇａｎ ＲＡ．Ｐｒｉｍａｒｙ ｈｕｍａｎ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｃｏｄｏｎ−ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ＩＬ−１５遺伝子ｒｅｓｉｓｔ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ−ｉｎｄｕｃｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｐｅｒｓｉｓｔ ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ｉｎ ｔｈｅ ａｂｓｅｎｃｅ ｏｆ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｃｙｔｏｋｉｎｅ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００５；１７５：７２２６−３４；Ｑｕｉｎｔａｒｅｌｌｉ Ｃ，Ｖｅｒａ ＪＦ，Ｓａｖｏｌｄｏ Ｂ，Ｇｉｏｒｄａｎｏ Ａｔｔｉａｎｅｓｅ ＧＭ，Ｐｕｌｅ Ｍ，Ｆｏｓｔｅｒ ＡＥ，Ｃｏ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ａｎｄ ｓｕｉｃｉｄｅ遺伝子ｓ ｔｏ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｔｕｍｏｒ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｂｌｏｏｄ．２００７；１１０：２７９３−８０２；およびＨｓｕ Ｃ，Ｊｏｎｅｓ ＳＡ，Ｃｏｈｅｎ ＣＪ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｋｅｒｓｔａｎｎ Ｋ，Ｚｈｏｕ Ｊ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｃｌｏｎａｌ ｅｘｐａｎｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｐｒｉｍａｒｙ ｈｕｍａｎ ＣＤ８＋ Ｔ−ｃｅｌｌ ｃｌｏｎｅ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ＩＬ−１５遺伝子．Ｂｌｏｏｄ．２００７；１０９：５１６８−７７に記載されている。
Ｔ細胞上のケモカイン受容体と腫瘍分泌ケモカインとの不一致は、Ｔ細胞の腫瘍微小環境への不十分な輸送の主因であることが示されている。治療の有効性を改善するために、細胞を遺伝子修飾して、腫瘍微小環境におけるケモカインの認識を高めてもよい。そのような修飾の例は、Ｍｏｏｎ，ＥＫＣａｒｐｅｎｉｔｏ，ＣＳｕｎ，ＪＷａｎｇ，ＬＣＫａｐｏｏｒ，ＶＰｒｅｄｉｎａ，Ｊ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ＣＣＲ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｕｍｏｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｅｒａｄｉｃａｔｉｏｎ ｂｙ ｒｅｔａｒｇｅｔｅｄ ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１１；１７：４７１９−４７３０；およびＣｒａｄｄｏｃｋ，ＪＡＬｕ，ＡＢｅａｒ，ＡＰｕｌｅ，ＭＢｒｅｎｎｅｒ，ＭＫＲｏｏｎｅｙ，ＣＭ ｅｔ ａｌ．Ｅｎｈａｎｃｅｄ ｔｕｍｏｒ ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ ｏｆ ＧＤ２ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＣＣＲ２ｂ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２０１０；３３：７８０−７８８に記載されている。
細胞は、ＣＤ２８および４１ＢＢなどの共刺激／増強受容体の発現を増強するように遺伝修飾されてもよい。
Ｔ細胞療法の副作用には、サイトカイン放出症候群および長期にわたるＢ細胞枯渇が含まれ得る。レシピエント細胞に自殺／安全スイッチを導入することで、細胞系療法の安全性プロファイルが改善され得る。したがって、細胞は、自殺／安全スイッチを含むように遺伝子修飾されてもよい。自殺／安全スイッチは、遺伝子が発現する細胞に、薬剤、例えば薬物に対する感受性を付与し、細胞がその薬剤と接触するまたはその薬剤に露出すると、細胞を死滅させる遺伝子であり得る。例示的な自殺／安全スイッチは、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｅｌｌ．２０１７ Ａｕｇ；８（８）：５７３−５８９に記載されている。自殺／安全スイッチはＨＳＶ−ＴＫであってもよい。自殺／安全スイッチは、シトシンダミナーゼ（ｄａｍｉｎａｓｅ）、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、またはニトロレダクターゼであってもよい。自殺／安全スイッチは、米国特許出願公開番号ＵＳ２０１７０１６６８７７Ａ１号に記載されているＲａｐａＣＩＤｅ（商標）であってもよい。自殺／安全スイッチシステムは、Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ．２００９ Ｓｅｐ；９４（９）：１３１６−１３２０に記載されているＣＤ２０／リツキシマブであってもよい。これらの参考文献は、それらの全体が参照により組み込まれる。
ＴＣＲまたはＣＡＲは、ヘテロ二量体化小分子の存在下でのみ組み立てられるスプリット受容体として受容細胞に導入されてもよい。そのようなシステムは、参照により全体が本明細書に組み込まれる、Ｓｃｉｅｎｃｅ２０１５ Ｏｃｔ １６；３５０（６２５８）：ａａｂ４０７７、および米国特許第９，５８７，０２０号に記載されている。
いくつかの実施形態では、細胞には、１つ以上の核酸、例えば本明細書に開示のＴＣＲまたはＣＡＲをコードするポリヌクレオチドが含まれ、このポリヌクレオチドは、遺伝子操作により導入されることで、本明細書に開示の組換えまたは遺伝子操作されたＴＣＲまたはＣＡＲを発現する。いくつかの実施形態では、核酸は、異種であり、すなわち、通常は、別の生物または細胞から得られたものなどの、細胞または細胞から得られた試料には存在しない、例えば、操作されている細胞および／またはまたはそのような細胞が由来する生物には普通は見られない。いくつかの実施形態では、複数の異なる細胞型からの様々なドメインをコードする核酸のキメラの組み合わせを含む、自然界には見られない核酸など、核酸は天然に存在しない。
核酸は、コドン最適化されたヌクレオチド配列を含んでもよい。特定の理論や機序に束縛されることなく、ヌクレオチド配列のコドン最適化により、ｍＲＮＡ転写産物の翻訳効率が増大すると考えられる。ヌクレオチド配列のコドン最適化は、同じアミノ酸をコードする別のコドンを天然コドンに置換することを伴い得るが、細胞内でより利用可能性が高いｔＲＮＡによって翻訳されることができるため、翻訳効率が増大する。ヌクレオチド配列の最適化により、翻訳を妨害し得る二次ｍＲＮＡ構造が減少し得るため、翻訳効率が増大する。
構築物またはベクターを使用して、ＴＣＲまたはＣＡＲをレシピエント細胞に導入してもよい。例示的な構築物は本明細書に記載されている。ＴＣＲまたはＣＡＲのアルファおよびベータ鎖をコードするポリヌクレオチドは、単一の構築物中にあっても、別個の構築物中にあってもよい。アルファ鎖およびベータ鎖をコードするポリヌクレオチドは、プロモーター、例えば異種プロモーターに作動可能に連結してもよい。異種プロモーターは、強力なプロモーター、例えば、ＥＦ１アルファ、ＣＭＶ、ＰＧＫ１、Ｕｂｃ、ベータアクチン、ＣＡＧプロモーターなどであってもよい。異種プロモーターは弱いプロモーターであってもよい。異種プロモーターは誘導性プロモーターであってもよい。例示的な誘導性プロモーターには、ＴＲＥ、ＮＦＡＴ、ＧＡＬ４、ＬＡＣなどが含まれるが、これらに限定されない。他の例示的な誘導性発現系は、参照により全体が組み込まれる、米国特許第５，５１４，５７８号、同第６，２４５，５３１号、同第７，０９１，０３８号、および欧州特許第０５１７８０５号に記載されている。
ＴＣＲまたはＣＡＲをレシピエント細胞に導入するための構築物はまた、シグナルペプチド（シグナルペプチド要素）をコードするポリヌクレオチドを含んでもよい。シグナルペプチドは、導入されたＴＣＲまたはＣＡＲの表面輸送を促進し得る。例示的なシグナルペプチドには、ＣＤ８シグナルペプチド、免疫グロブリンシグナルペプチドが含まれるが、これらに限定されず、特定の例には、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩｇＧカッパが含まれる。そのようなシグナルペプチドは、参照により本明細書に組み込まれる、Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｓｃｉ．２００６ Ｏｃｔ；３１（１０）：５６３−７１．Ｅｐｕｂ ２００６ Ａｕｇ ２１、およびＡｎ，ｅｔ ａｌ．“Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｎｅｗ Ａｎｔｉ−ＣＤ１９ Ｃｈｉｍｅｒｉｃ Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｄ ｔｈｅ Ａｎｔｉ−Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｒａｎｓｄｕｃｅｄ Ｔ Ｃｅｌｌｓ．”Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ７．９（２０１６）：１０６３８−１０６４９．ＰＭＣ．Ｗｅｂ．１６ Ａｕｇ．２０１８に記載されている。
いくつかの場合、例えば、アルファおよびベータ鎖が単一の構築物またはオープンリーディングフレームから発現される場合、またはマーカー遺伝子が構築物に含まれる場合には、構築物はリボソームスキップ配列を含んでもよい。リボソームスキップ配列は、２Ａペプチド、例えば、Ｐ２ＡまたはＴ２Ａペプチドであってもよい。例示的なＰ２ＡおよびＴ２Ａペプチドは、参照により全体が本明細書に組み込まれるＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ ｖｏｌｕｍｅ ７，Ａｒｔｉｃｌｅ ｎｕｍｂｅｒ：２１９３（２０１７）に記載されている。いくつかの場合には、ＦＵＲＩＮ／ＰＡＣＥ切断部位が２Ａ要素の上流に導入される。ＦＵＲＩＮ／ＰＡＣＥ切断部位は、例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｕｏｌａｎ．ｎｅｔ／ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ．ｈｔｍｌに記載されている。切断ペプチドはまた、第Ｘａ因子切断部位であってもよい。アルファおよびベータ鎖が単一の構築物またはオープンリーディングフレームから発現される場合、構築物は内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）を含んでもよい。
構築物は、１つ以上のマーカー遺伝子をさらに含んでもよい。例示的なマーカー遺伝子には、ＧＦＰ、ルシフェラーゼ、ＨＡ、ｌａｃＺが含まれるが、これらに限定されない。マーカーは、当業者に知られているように、抗生物質耐性マーカー、重金属耐性マーカー、または殺生物剤耐性マーカーなどの選択可能なマーカーであってもよい。マーカーは、栄養要求性宿主において使用するための相補マーカーであってもよい。例示的な相補マーカーおよび栄養要求性宿主は、遺伝子．２００１ Ｊａｎ ２４；２６３（１−２）：１５９−６９に記載されている。そのようなマーカーは、ＩＲＥＳ、フレームシフト配列、２Ａペプチドリンカー、ＴＣＲもしくはＣＡＲとの融合を介して発現されてもよく、または別々のプロモーターから別個に発現されてもよい。
ＴＣＲまたはＣＡＲをレシピエント細胞に導入するための例示的なベクターまたはシステムには、アデノ関連ウイルス、アデノウイルス、アデノウイルス＋修飾ワクシニア、アンカラウイルス（ＭＶＡ）、アデノウイルス＋レトロウイルス、アデノウイルス＋センダイウイルス、アデノウイルス＋ワクシニアウイルス、アルファウイルス（ＶＥＥ）レプリコンワクチン、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ビフィオバクテリアム・ロンガム、ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９、大腸菌、フラビウイルス、遺伝子銃、ヘルペスウイルス、単純ヘルペスウイルス、乳酸連鎖球菌、電気穿孔、レンチウイルス、リポフェクション、リステリア菌、麻疹ウイルス、修飾ワクシニアアンカラウイルス（ＭＶＡ）、ｍＲＮＡ電気穿孔、裸／プラスミドＤＮＡ、裸／プラスミドＤＮＡ＋アデノウイルス、裸／プラスミドＤＮＡ＋修飾ワクシニアアンカラウイルス（ＭＶＡ）、裸／プラスミドＤＮＡ＋ＲＮＡ転移、裸／プラスミドＤＮＡ＋ワクシニアウイルス、裸／プラスミドＤＮＡ＋水疱性口内炎ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、非ウイルス、ＰｉｇｇｙＢａｃ（商標）（ＰＢ）トランスポゾン、ナノ粒子系システム、ポリオウイルス、ポックスウイルス、ポックスウイルス＋ワクシニアウイルス、レトロウイルス、ＲＮＡ転移、ＲＮＡ転移＋裸／プラスミドＤＮＡ、ＲＮＡウイルス、出芽酵母、ネズミチフス菌、セムリキ森林熱ウイルス、センダイウイルス、志賀赤痢菌、シミアンウイルス、ｓｉＲＮＡ、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン、ミュータンス連鎖球菌、ワクシニアウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルスレプリコン、水疱性口内炎ウイルス、およびコレラ菌が含まれるが、これらに限定されない。
好ましい実施形態では、ＴＣＲまたはＣＡＲは、アデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）、アデノウイルス、ＣＲＩＳＰＲ−ＣＡＳ９、ヘルペスウイルス、レンチウイルス、リポフェクション、ｍＲＮＡ電気穿孔、ＰｉｇｇｙＢａｃ（商標）（ＰＢ）トランスポゾン、レトロウイルス、ＲＮＡ転移、または Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンを介してレシピエント細胞に導入される。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲまたはＣＡＲをレシピエント細胞に導入するためのベクターは、ウイルスベクターである。例示的なウイルスベクターには、アデノウイルスベクター、アデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、レンチウイルスベクター、ヘルペスウイルスベクター、レトロウイルスベクターなどが含まれる。そのようなベクターは本明細書に記載されている。
ＴＣＲまたはＣＡＲをレシピエント細胞に導入するためのＴＣＲ構築物の例示的な実施形態を図２に示す。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ構築物には、５’−３’方向に、以下のポリヌクレオチド配列が含まれる：プロモーター配列、シグナルペプチド配列、ＴＣＲ β可変（ＴＣＲβｖ）配列、ＴＣＲ β定常（（ＴＣＲβｃ）配列、切断ペプチド（例えば、Ｐ２Ａ）、シグナルペプチド配列、ＴＣＲ α可変（ＴＣＲαｖ）配列、およびＴＣＲ α定常（ＴＣＲαｃ）配列。いくつかの実施形態では、構築物のＴＣＲβｃおよびＴＣＲαｃ配列には、１つ以上のマウス領域、例えば、完全なマウス定常配列または本明細書に記載のヒト→マウスアミノ酸交換が含まれる。いくつかの実施形態では、構築物には、ＴＣＲαｃ配列の３’、切断ペプチド配列（例えば、Ｔ２Ａ）、その後にレポーター遺伝子が含まれる。一実施形態では、構築物には、５’−３’方向に、以下のポリヌクレオチド配列が含まれる：プロモーター配列、シグナルペプチド配列、ＴＣＲ β可変（ＴＣＲβｖ）配列、１つ以上のマウス領域を含むＴＣＲ β定常（（ＴＣＲβｃ）配列、切断ペプチド（例えば、Ｐ２Ａ）、シグナルペプチド配列、ＴＣＲ α可変（ＴＣＲαｖ）配列、および１つ以上のマウス領域を含むＴＣＲ α定常（ＴＣＲαｃ）配列、切断ペプチド（例えば、Ｔ２Ａ）、およびレポーター遺伝子。
図３は、治療開発のためにＴＣＲを発現系にクローニングするための例示的な構築物骨格配列を示す。
図４は、治療開発のために特定されたＡ＊０２０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ特異的ＴＣＲを発現系にクローニングするための例示的な構築物配列を示す。
図４は、治療開発のために特定されたＡ＊０１０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ特異的ＴＣＲを発現系にクローニングするための例示的な構築物配列を示す。
ヌクレオチド、ベクター、宿主細胞、および関連方法
ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰをコードする単離された核酸、核酸を含むベクター、およびベクターと核酸とを含む宿主細胞、ならびにＡＢＰの産生のための組換え技術も提供される。
核酸は組換えであってもよい。組換え核酸は、生細胞内で複製することができる核酸分子またはその複製産物に天然または合成の核酸セグメントを接合することにより、生細胞の外で構築されてもよい。本明細書の目的では、複製は、インビトロ複製またはインビボ複製であり得る。
ＡＢＰの組換え生産のためには、ＡＢＰをコードする核酸（複数可）を単離し、さらなるクローニング（すなわち、ＤＮＡの増幅）または発現のために複製可能なベクターに挿入してもよい。いくつかの態様では、核酸は、例えば、参照により全体が組み込まれる米国特許第５，２０４，２４４号に記載されるように、相同組換えにより産生されてもよい。
多くの異なるベクターが当該技術分野で既知である。ベクター成分には、一般に、例えば、参照により全体が組み込まれる米国特許第５，５３４，６１５号に記載されているように、シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサー要素、プロモーター、および転写終止配列のうちの１つ以上が含まれる。
ＡＢＰ、例えば、ＴＣＲ、ＣＡＲ、抗体、またはその抗原結合断片を発現するのに好適な例示的なベクターまたは構築物には、例えば、ｐＵＣシリーズ（Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔシリーズ（Ｓｔｒａｔａ遺伝子，ＬａＪｏｌｌａ，ＣＡ）、ｐＥＴシリーズ（Ｎｏｖａｇｅｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）、ｐＧＥＸシリーズ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、およびｐＥＸシリーズ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、ＣＡ）が含まれる。ＡＧＴｌＯ、ＡＧＴｌ １、ＡＺａｐＩＩ（Ｓｔｒａｔａ遺伝子）、ＡＥＭＢＬ４、およびＡＮＭｌ １４９などのバクテリオファージベクターも、本明細書に開示のＡＢＰの発現に好適である。
好適な宿主細胞の実例を以下に提供する。これらの宿主細胞は限定することを意味するものではなく、任意の好適な宿主細胞を使用して、本明細書で提供されるＡＢＰを産生してもよい。
好適な宿主細胞には、原核生物（例えば、細菌）、下等真核生物（例えば、酵母）、または高等真核生物（例えば、哺乳動物）細胞が含まれる。好適な原核生物には、グラム陰性またはグラム陽性生物などの真正細菌、例えば、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ（Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、Ｓｅｒｒａｔｉａ（Ｓ．ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ）、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｂａｃｉｌｌｉ（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓおよびＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、およびＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓが含まれる。ひとつの有用な大腸菌クローニング宿主は大腸菌２９４であるが、大腸菌Ｂ、大腸菌Ｘ１７７６、および大腸菌Ｗ３１１０などの他の株も好適である。
原核生物に加えて、糸状菌または酵母などの真核微生物も、ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰをコードするベクターに好適なクローニングまたは発現宿主である。
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、または一般的なパン酵母は、一般に使用される下等真核生物宿主微生物である。しかし、いくつかの他の属、種、および株、例えば、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ、Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ、Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ Ｋ．ｗｉｃｋｅｒａｍｉｉ、Ｋ．ｗａｌｔｉｉ、Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ、Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ、およびＫ．ｍａｒｘｉａｎｕｓ）、Ｙａｒｒｏｗｉａ、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｉａ、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒａｓｓａ、Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ（Ｓ．ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ）、ならびに例えば、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ、およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ（Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓおよびＡ．ｎｉｇｅｒ）などの糸状菌も利用可能かつ有用である。
有用な哺乳類宿主細胞には、ＣＯＳ−７細胞、ＨＥＫ２９３細胞；ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞；チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）；マウスセルトリ細胞；アフリカミドリザル腎細胞（ＶＥＲＯ−７６）などが含まれる。
ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの産生に使用される宿主細胞は、さまざまな培地で培養され得る。例えば、Ｈａｍ’ｓ Ｆ１０、基礎培地（ＭＥＭ）、ＲＰＭＩ−１６４０、およびダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）などの市販の培地が、宿主細胞の培養に好適である。加えて、Ｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．，１９７９，５８：４４、Ｂａｒｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８０，１０２：２５５、および米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、および同第５，１２２，４６９号、またはＷＯ９０／０３４３０およびＷＯ ８７／００１９５に記載されている培地のうちのいずれかを使用してもよい。前述の各参考文献は、それらの全体が参照により組み込まれる。
これらの培地のいずれにも、必要に応じて、ホルモンおよび／または他の成長因子（インスリン、トランスフェリン、または表皮成長因子など）、塩（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、およびリン酸塩など）、緩衝液（ＨＥＰＥＳなど）、ヌクレオチド（アデノシンおよびチミジンなど）、抗生物質、微量元素（マイクロモル範囲の最終濃度で通常存在する無機化合物として定義される）、ならびにグルコースまたは同等のエネルギー源が補充され得る。任意の他の必要なサプリメントも、当業者に既知である適切な濃度で含まれ得る。
培養条件、例えば、温度、ｐＨなどは、発現のために選択された宿主細胞で以前に使用されたものであり、当業者には明らかであろう。
組換え技法を使用する場合、ＡＢＰは、細胞内で、細胞周辺腔で産生される得るか、または培地に直接分泌され得る。ＡＢＰが細胞内で産生される場合、最初のステップとして、宿主細胞または溶解断片のいずれかの粒子状残屑を、例えば遠心分離または限外濾過により除去する。例えば、Ｃａｒｔｅｒら（全体が参照により組み込まれるＢｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９２，１０：１６３−１６７）は、大腸菌の細胞周辺腔に分泌されるＡＢＰを単離する手順を説明している。簡単に言えば、細胞ペーストを酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、およびフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）の存在下で約３０分かけて解凍する。細胞残屑は遠心分離により除去することができる。
いくつかの実施形態では、ＡＢＰは無細胞系で産生される。いくつかの態様では、無細胞系は、参照により全体が組み込まれる、Ｙｉｎ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１２，４：２１７−２２５に記載されているインビトロ転写および翻訳系である。いくつかの場合には態様では、無細胞系は、真核細胞または原核細胞からの無細胞抽出物を利用する。いくつかの態様では、原核細胞は大腸菌である。ＡＢＰの無細胞発現は、例えば、ＡＢＰが不溶性凝集体として細胞に蓄積する場合、または細胞周辺発現からの収量が低い場合に有用であり得る。
ＡＢＰが培地に分泌される場合、そのような発現系からの上清は、一般に、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、Ａｍｉｃｏｎ（登録商標）、またはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ（登録商標）Ｐｅｌｌｃｏｎ（登録商標）限外濾過ユニットを使用して、まず濃縮する。タンパク質分解を阻害するために前述のステップのいずれかにＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害剤を含めてもよく、外来汚染物質の成長を防止するために抗生物質を含めてもよい。
細胞から調製されたＡＢＰ組成物は、例えば、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、およびアフィニティークロマトグラフィーを使用して精製することができ、アフィニティークロマトグラフィーが特に有用な精製技法である。親和性リガンドとしてのタンパク質Ａの適合性は、ＡＢＰに存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種およびアイソタイプに左右される。タンパク質Ａは、ヒトγ１、γ２、またはγ４重鎖を含むＡＢＰの精製に使用することができる（参照により全体が組み込まれる、Ｌｉｎｄｍａｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，１９８３，６２：１−１３）。タンパク質Ｇは、すべてのマウスアイソタイプおよびヒトγ３に有用である（参照により全体が組み込まれる、Ｇｕｓｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，１９８６，５：１５６７−１５７５）。
親和性リガンドが付着している基質は、ほとんどの場合アガロースであるが、他の基質も利用可能である。制御された細孔ガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼンなどの機械的に安定した基質により、アガロースで達成できるものよりも速い流速および短い処理時間が可能となる。ＡＢＰがＣＨ３ドメインを含む場合、ＢａｋｅｒＢｏｎｄ ＡＢＸ（登録商標）樹脂が精製に有用である。
タンパク質精製のための他の技法、例えば、イオン交換カラムでの分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカでのクロマトグラフィー、Ｈｅｐａｒｉｎ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）でのクロマトグラフィー、クロマト分画、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、および硫酸アンモニウム沈殿も利用可能であり、当業者であれば応用することができる。
予備精製ステップ（複数可）の後、目的のＡＢＰおよび汚染物質を含む混合物を、一般的に低塩濃度（例えば、約０〜０．２５Ｍの塩）で行われる約２．５〜約４．５のｐＨの溶出バッファーを使用した低ｐＨ疎水性相互作用クロマトグラフィーに供してもよい。
ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの作製方法
ＨＬＡ−ペプチド抗原の調製
本明細書で提供されるＡＢＰの単離または創出に使用されるＨＬＡ−ペプチド抗原は、無傷のＨＬＡ−ペプチドまたはＨＬＡ−ペプチドの断片であってもよい。ＨＬＡ−ペプチド抗原は、例えば、単離されたタンパク質または細胞の表面に発現したタンパク質の形態であってもよい。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡ−ペプチド抗原は、天然には生じないアミノ酸配列または翻訳後修飾を有するＨＬＡ−ペプチドタンパク質などのＨＬＡ−ペプチドの非天然変異体である。
いくつかの実施形態では、ＨＬＡ−ペプチド抗原は、例えば、細胞内もしくは膜貫通配列、またはシグナル配列の除去により短縮される。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ−ペプチド抗原は、そのＣ末端でヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインまたはポリヒスチジン標識に融合する。
ＡＢＰの同定方法
ＨＬＡ−ペプチドに結合するＡＢＰは、当技術分野で既知の任意の方法、例えば、対象のファージディスプレイまたは免疫化を使用して同定することができる。
抗原結合タンパク質を同定する１つの方法には、少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を提供することと、その少なくとも１つの標的を抗原結合タンパク質と結合させ、それにより抗原結合タンパク質を同定することとが含まれる。抗原結合タンパク質は、複数の別個の抗原結合タンパク質を含むファージディスプレイライブラリーに存在し得る。
いくつかの実施形態では、ライブラリーはファージディスプレイライブラリーである。ファージディスプレイライブラリは、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡに非特異的に結合する抗原結合タンパク質を実質的に含まないように開発することができる。抗原結合タンパク質は、複数の別個の抗原結合タンパク質を含む酵母ディスプレイライブラリーに存在し得る。酵母ディスプレイライブラリは、ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡに非特異的に結合する抗原結合タンパク質を実質的に含まないように開発することができる。
いくつかの実施形態では、ライブラリーは酵母ディスプレイライブラリーである。
いくつかの実施形態では、ライブラリーはＴＣＲディスプレイライブラリである。例示的なＴＣＲディスプレイライブラリーおよびそのようなＴＣＲディスプレイライブラリーを使用する方法は、参照により全体が本明細書に組み込まれる、ＷＯ９８／３９４８２、ＷＯ０１／６２９０８、ＷＯ２００４／０４４００４、ＷＯ２００５１１６６４６、ＷＯ２０１４０１８８６３、ＷＯ２０１５１３６０７２、ＷＯ２０１７０４６１９８、およびＨｅｌｍｕｔ ｅｔ ａｌ，（２０００）ＰＮＡＳ ９７（２６）１４５７８−１４５８３に記載されている。
いくつかの態様では、結合ステップは、１回超、任意選択で少なくとも３回、例えば、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回実行される。
加えて、本方法には、抗原結合タンパク質がＨＬＡ−ペプチド標的と選択的に結合するかどうかを判定するために、抗原結合タンパク質をＨＬＡ−ペプチド標的とは別の１つ以上のペプチド−ＨＬＡ複合体と接触させることも含まれ得る。
抗原結合タンパク質を同定する別の方法には、少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を取得することと、ＨＬＡ−ペプチド標的を、任意選択でアジュバントと組み合わせて対象（例えば、マウス、ウサギ、またはラマ）に投与することと、抗原結合タンパク質を対象から単離することとが含まれ得る。抗原結合タンパク質を単離することには、抗原結合タンパク質を同定するために、対象の血清をスクリーニングすることが含まれ得る。本方法には、例えば抗原結合タンパク質がＨＬＡ−ペプチド標的と選択的に結合するかどうかを判定するために、抗原結合タンパク質をＨＬＡ−ペプチド標的とは別の１つ以上のペプチド−ＨＬＡ複合体と接触させることも含まれ得る。同定された抗原結合タンパク質は、ヒト化することができる。
いくつかの態様では、抗原結合タンパク質を単離することには、抗原結合タンパク質を発現する対象からＢ細胞を単離することが含まれる。このＢ細胞を使用して、ハイブリドーマを創出することができる。Ｂ細胞は、そのＣＤＲのうちの１つ以上のクローニングにも使用できる。Ｂ細胞は、例えばＥＢＶ形質転換を使用することにより、不死化することもできる。抗原結合タンパク質をコードする配列は、不死化Ｂ細胞からクローニングするか、または免疫した対象から単離されたＢ細胞から直接クローニングすることができる。Ｂ細胞の抗原結合タンパク質を含むライブラリーを創出することもでき、任意選択で、ライブラリーは、ファージディスプレイまたは酵母ディスプレイである。
抗原結合タンパク質を同定する別の方法には、抗原結合タンパク質を含む細胞を得ることと、細胞を、少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を含むＨＬＡ−多量体（例えば、四量体）と接触させる；そして、ＨＬＡ−多量体と抗原結合タンパク質との間の結合を介して抗原結合タンパク質を同定する。細胞を少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を含むＨＬＡ多量体（例えば、四量体）と接触させることと、ＨＬＡ多量体と抗原結合タンパク質との間の結合を介して抗原結合タンパク質を同定することとが含まれ得る。
細胞は、例えば、Ｔ細胞、任意選択でＣＴＬ、またはＮＫ細胞などであり得る。本方法には、任意選択でフローサイトメトリー、磁気分離、または単一細胞分離を使用して、細胞を単離することがさらに含まれ得る。本方法には、抗原結合タンパク質の配列決定がさらに含まれ得る。
抗原結合タンパク質を同定する別の方法には、抗原結合タンパク質を含む１つ以上の細胞を得ることと、１つ以上の細胞を、少なくとも１つの抗原提示細胞（ＡＰＣ）上に提示された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を用いてを活性化することと、少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的との相互作用によって活性化された１つ以上の細胞の選択を介して抗原結合タンパク質を同定することとが含まれ得る。
細胞は、例えば、Ｔ細胞、任意選択でＣＴＬ、またはＮＫ細胞などであり得る。本方法には、任意選択でフローサイトメトリー、磁気分離、または単一細胞分離を使用して、細胞を単離することがさらに含まれ得る。本方法には、抗原結合タンパク質の配列決定がさらに含まれ得る。
モノクローナルＡＢＰの作製方法
モノクローナルＡＢＰは、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９７５，２５６：４９５−４９７（参照によりその全体が組み込まれる）によって最初に記載されたハイブリドーマ法、および／または組み換えＤＮＡ法（例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）を使用して得てもよい。モノクローナルＡＢＰはまた、例えば、ファージまたは酵母ベースのライブラリーを使用して得てもよい。例えば、各々参照により全体が組み込まれる米国特許第８，２５８，０８２号および同第８，６９１，７３０号を参照されたい。
ハイブリドーマ法では、マウスまたは他の適切な宿主動物を免疫して、免疫に使用されるタンパク質に特異的に結合するＡＢＰを産生するまたは産生することができるリンパ球を誘発する。あるいは、リンパ球はインビトロで免疫されてもよい。次いで、リンパ球を、ポリエチレングリコールなどの好適な融合剤を使用して骨髄腫細胞と融合させて、ハイブリドーマ細胞を形成する。参照により全体が組み込まれる、Ｇｏｄｉｎｇ Ｊ．Ｗ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ＡＢＰｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ３ｒｄ ｅｄ．（１９８６）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡを参照されたい。
ハイブリドーマ細胞は、融合していない親骨髄腫細胞の成長または生存を阻害する１つ以上の物質を含有する好適な培養地に播種されて成長する。例えば、親骨髄腫細胞に酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）がない場合、ハイブリドーマの培養地は、典型的には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の成長を防ぐ物質であるヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジン（ＨＡＴ培地）を含む。
有用な骨髄腫細胞は、効率的に融合し、選択されたＡＢＰ産生細胞による安定した高レベルのＡＢＰ産生を支援するものであり、ＨＡＴ培地の存在または非存在などの培地条件に敏感である。これらのうち、好ましい骨髄腫細胞株は、ＭＯＰ−２１およびＭＣ−１１マウス腫瘍（Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡから入手可能）およびＳＰ−２またはＸ６３−Ａｇ８−６５３細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから入手可能）などのネズミ科骨髄腫株である。ヒトモノクローナルＡＢＰの産生について、ヒト骨髄腫およびマウス−ヒトヘテロミエローマ細胞株も記載されている。例えば、参照によりそ全体が組み込まれる、Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９８４，１３３：３００１を参照されたい。
所望の特異性、親和性、および／または生物活性のＡＢＰを産生するハイブリドーマ細胞の同定後、選択されたクローンを限界希釈手法によってサブクローニングし、標準的な方法によって成長させてもよい。上記のＧｏｄｉｎｇを参照されたい。この目的に好適な培地には、例えば、Ｄ−ＭＥＭまたはＲＰＭＩ−１６４０培地が挙げられる。加えて、ハイブリドーマ細胞は、動物の腹水腫瘍としてインビボで成長させてもよい。
モノクローナルＡＢＰをコード化するＤＮＡは、従来の手法を使用して（例えば、モノクローナルＡＢＰの重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）容易に単離および配列決定し得る。したがって、ハイブリドーマ細胞は、所望の特性を備えたＡＢＰをコードするＤＮＡの有用な供給源として働き得る。単離したら、ＤＮＡを発現ベクターに入れてもよく、次いで、細菌（例えば、大腸菌）、酵母（例えば、サッカロミセスまたはピキア種）、ＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または別様にＡＢＰを産生しない骨髄腫細胞などの宿主細胞にトランスフェクトして、モノクローナルＡＢＰを産生させる。
キメラＡＢＰの作製方法
キメラＡＢＰを作製する例示的な方法は、例えば、各々参照により全体が組み込まれる、米国特許第４，８１６，５６７号、およびＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８４，８１：６８５１−６８５５に記載されている。いくつかの実施形態では、キメラＡＢＰは、組換え技法を使用して、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはサルなどの非ヒト霊長類に由来する可変領域）をヒトの定常領域と組み合わせることによって作製される。
ヒト化ＡＢＰの作製方法
ヒト化ＡＢＰは、非ヒトモノクローナルＡＢＰの構造部分の大部分またはすべてを対応するヒトＡＢＰ配列で代置することにより生成させてもよい。結果として、抗原特異的可変またはＣＤＲのみが非ヒト配列で構成されるハイブリッド分子が生成される。ヒト化ＡＢＰを得るための方法には、例えば、各々参照により全体が組み込まれる、Ｗｉｎｔｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，１９９１，３４９：２９３−２９９、Ｒａｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９８，９５：８９１０−８９１５、Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０００，２７５：３６０７３−３６０７８、Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９８９，８６：１００２９−１００３３、ならびに米国特許第５，５８５，０８９号、同第５，６９３，７６１号、同第５，６９３，７６２号、および同第６，１８０，３７０号に記載されているものが含まれる。
ヒトＡＢＰの作製方法
ヒトＡＢＰは、例えば、トランスジェニック動物（例えば、ヒト化マウス）を使用することにより、当該技術分野で既知の様々な技法により生成することができる。例えば、各々参照により全体が組み込まれる、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９９３，９０：２５５１、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９３，３６２：２５５−２５８、Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏ．，１９９３，７：３３、ならびに米国特許第５，５９１，６６９号、同第５，５８９，３６９号、および同第５，５４５，８０７号を参照されたい。ヒトＡＢＰはまた、ファージディスプレイライブラリーに由来し得る（例えば、各々参照により全体が組み込まれる、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２７：３８１−３８８、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９１，２２２：５８１−５９７、ならびに米国特許第５，５６５，３３２号および同第５，５７３，９０５号を参照されたい）。ヒトＡＢＰはまた、インビトロで活性化されたＢ細胞によって生成してもよい（例えば、各々参照により全体が組み込まれる、米国特許第５，５６７，６１０号および同第５，２２９，２７５号を参照されたい）。ヒトＡＢＰはまた、酵母ベースのライブラリーに由来してもよい（例えば、参照により全体が組み込まれる米国特許第８，６９１，７３０号を参照されたい）。
ＡＢＰ断片の作製方法
本明細書で提供されるＡＢＰ断片は、本明細書に記載の例示的な方法または当技術分野で既知の方法を含む、任意の好適な方法により作製され得る。好適な方法としては、組み換え技法およびＡＢＰ全体のタンパク質分解が挙げられる。ＡＢＰ断片を作製する例示的な方法は、例えば、参照により全体が組み込まれる、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，２００３，９：１２９−１３４に記載されている。ｓｃＦｖ ＡＢＰを作製する方法は、例えば、各々参照により全体が組み込まれる、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）、ＷＯ９３／１６１８５、ならびに米国特許番号５，５７１，８９４および同第５，５８７，４５８号に記載されている。
代替足場の作製方法
本明細書で提供される代替の足場は、本明細書に記載の例示的方法または当技術分野で既知の方法を含む、任意の好適な方法により作製され得る。例えば、Ａｄｎｅｃｔｉｎｓ（商標）を調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｅｍａｎｕｅｌ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１１，３：３８−４８に記載されている。ｉＭａｂを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、米国特許公開第２００３／０２１５９１４号に記載されている。Ａｎｔｉｃａｌｉｎｓ（登録商標）を調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｖｏｇｔ ａｎｄ Ｓｋｅｒｒａ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２００４，５：１９１−１９９に記載されている。クニッツドメインを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｗａｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．＆Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．，１９９２，１８６：１１８−１１４５に記載されている。チオレドキシンペプチドアプタマーを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｇｅｙｅｒ ａｎｄ Ｂｒｅｎｔ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，２０００，３２８：１７１−２０８で提供されている。アフィボディを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００４，１５：３６４−３７３で提供されている。ＤＡＲＰｉｎを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｚａｈｎｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００７，３６９：１０１５−１０２８で提供されている。アフィリンを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｅｂｅｒｓｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２００７，３７２：１７２−１８５で提供されている。テトラネクチンを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｇｒａｖｅｒｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０００，２７５：３７３９０−３７３９６で提供されている。アビマーを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００５，２３：１５５６−１５６１で提供されている。フィノマーを調製する方法は、参照により全体が組み込まれる、Ｓｉｌａｃｃｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１４，２８９：１４３９２−１４３９８で提供されている。代替の足場に関するさらなる情報は、各々参照により全体が組み込まれる、Ｂｉｎｚ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２００５ ２３：１２５７− １２６８、およびＳｋｅｒｒａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ．ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２００７ １８：２９５−３０４で提供されている。
多重特異性ＡＢＰの作製方法
本明細書で提供される多重特異性ＡＢＰは、本明細書に記載の例示的方法または当技術分野で既知の方法を含む、任意の好適な方法により作製され得る。一般的な軽鎖ＡＢＰを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＭｅｒｃｈａｎｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９８，１６：６７７−６８１に記載されている。四価二重特異性ＡＢＰを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＣｏｌｏｍａ ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３に記載されている。ハイブリッド免疫グロブリンを作製する方法は、その各々は参照により全体が組み込まれる、Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，１９８３，３０５：５３７−５４０、およびＳｔａｅｒｚ ａｎｄ Ｂｅｖａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：１４５３−１４５７に記載されている。ノブ・イン・ホール修飾を備えた免疫グロブリンを作製する方法は、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第５，７３１，１６８号に記載されている。静電的修飾を伴う免疫グロブリンを作製する方法は、参照によりその全体が組み込まれるＷＯ２００９／０８９００４に提供されている。二重特異性単鎖ＡＢＰを作製する方法は、その各々は参照によりその全体が組み込まれる、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，１９９１，１０：３６５５−３６５９、およびＧｒｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９４，１５２：５３６８−５３７４に記載されている。リンカーの長さが変化し得る一本鎖ＡＢＰを作製する方法は、その各々は参照によりその全体が組み込まれる、米国特許第４，９４６，７７８号および同第５，１３２，４０５号に記載されている。ダイアボディを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９３，９０：６４４４−６４４８に記載されている。トリアボディおよびテトラボディを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＴｏｄｏｒｏｖｓｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１，２４８：４７−６６に記載されている。三重特異性Ｆ（ａｂ’）３誘導体を作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＴｕｔｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，１４７：６０−６９に記載されている。架橋ＡＢＰを作製する方法は、各々参照により全体が組み込まれる、米国特許第４，６７６，９８０号、Ｂｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８５，２２９：８１−８３、Ｓｔａｅｒｚ，ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，１９８５，３１４：６２８−６３１、およびＥＰ０４５３０８２に記載されている。ロイシンジッパーによって組み立てられた抗原結合ドメインを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＫｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９２，１４８：１５４７−１５５３に記載されている。ＤＮＬアプローチを介してＡＢＰを作製する方法は、各々参照により全体が組み込まれる、米国特許第７，５２１，０５６号、同第７，５５０，１４３号、同第７，５３４，８６６号、および同第７，５２７，７８７号に記載されている。ＡＢＰおよび非ＡＢＰ分子のハイブリッドを作製する方法は、そのようなＡＢＰの例について、参照により全体が組み込まれるＷＯ９３／０８８２９に記載されている。ＤＡＦ ＡＢＰを作製する方法は、参照によりその全体が組み込まれる米国特許公開第２００８／００６９８２０号に記載されている。還元および酸化を介してＡＢＰを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＣａｒｌｒｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１１，６：ｅ２２５３３に記載されている。ＤＶＤ−Ｉｇｓ（商標）を作製する方法は、参照により全体が組み込まれる米国特許第７，６１２，１８１号に記載されている。ＤＡＲＴｓ（商標）を作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＭｏｏｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１１，１１７：４５４−４５１に記載されている。ＤｕｏＢｏｄｉｅｓ（登録商標）を製造する方法は、各々参照により全体が組み込まれる、Ｌａｂｒｉｊｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２０１３，１１０：５１４５−５１５０、Ｇｒａｍｅｒ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１３，５：９６２−９７２、およびＬａｂｒｉｊｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，２０１４，９：２４５０−２４６３に記載されている。ＩｇＧからＣＨ３のＣ末端に融合されたｓｃＦｖを含むＡＢＰを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＣｏｌｏｍａ ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１９９７，１５：１５９−１６３に記載されている。Ｆａｂ分子が免疫グロブリンの定常領域に付着しているＡＢＰを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＭｉｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，１７０：４８５４−４８６１に記載されている。ＣｏｖＸ−ボディを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＤｏｐｐａｌａｐｕｄｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２０１０，１０７：２２６１１−２２６１６に記載されている。Ｆｃａｂ ＡＢＰを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＷｏｚｎｉａｋ−Ｋｎｏｐｐ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．，２０１０，２３：２８９−２９７に記載されている。ＴａｎｄＡｂ（登録商標）ＡＢＰを作製する方法は、各々参照により全体が組み込まれる、Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９９，２９３：４１−５６およびＺｈｕｋｏｖｓｋｙ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１３，１２２：５１１６に記載されている。タンデムＦａｂを作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＷＯ２０１５／１０３０７２に記載されている。Ｚｙｂｏｄｉｅｓ（商標）を作製する方法は、参照により全体が組み込まれるＬａＦｌｅｕｒ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ，２０１３，５：２０８−２１８に記載されている。
変異体の作製方法
任意の好適な方法を使用して、エラーを起こしやすいＰＣＲ、チェーンシャッフリング、およびトリヌクレオチド特異性突然変異誘発（ＴＲＩＭ）などのオリゴヌクレオチド特異的突然変異誘発を含む、ＡＢＰをコード化するポリヌクレオチド配列（複数可）に変動性を導入することができる。いくつかの態様では、いくつかのＣＤＲ残基（例えば、一度に４〜６残基）が無作為化される。抗原結合に関与するＣＤＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング突然変異誘発またはモデリングを使用して、特異的に同定されてもよい。特にＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３は、多くの場合、突然変異の標的になる。
可変領域および／またはＣＤＲへの多様性の導入は、二次ライブラリーを産生するために使用することができる。次に、二次ライブラリーをスクリーニングして、親和性が改善されたＡＢＰ変異体を同定する。二次ライブラリーを構築および再選択することによる親和性成熟は、例えば、参照により全体が組み込まれるＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，１７８：１−３７に記載されている。
ＡＢＰを用いて細胞を操作するための方法
抗体、ＣＡＲ、およびＴＣＲを含む受容体を含むＡＢＰを発現させるため、ならびにそのようなＡＢＰを発現する遺伝子操作された細胞を産生させるための方法、核酸、組成物、およびキットも提供される。遺伝子操作には、一般に、レトロウイルス形質導入、トランスフェクション、または形質転換などによる、組み換えられたまたは操作された成分をコードする核酸を細胞に導入することが伴う。
いくつかの実施形態では、遺伝子移入は、例えばサイトカインまたは活性化マーカーの発現によって測定して、増殖、生存、および／または活性化などの応答を誘導する刺激と細胞とを組み合わせることなどによってまず細胞を刺激し、続いて、活性化された細胞を形質導入し、臨床用途に十分な数まで培養して拡大することにより達成される。
一部の状況では、刺激因子（例えば、リンホカインまたはサイトカイン）の過剰発現は、対象にとって毒性であり得る。このため、一部の状況では、操作された細胞には、養子免疫療法における投与時など、細胞をインビボでのネガティブ選択に感受性にする遺伝子セグメントが含まれる。例えば、いくつかの態様では、細胞は、それらが投与される患者の生体内状態の変化の結果として除去され得るように設計される。ネガティブ選択が可能な表現型は、投与された薬剤、例えば化合物への感受性を付与する遺伝子の挿入から生じてもよい。ネガティブ選択が可能な遺伝子には、ガンシクロビル感受性を付与する単純ヘルペスウイルスＩ型チミジンキナーゼ（ＨＳＶ−１ ＴＫ）遺伝子（Ｗｉｇｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ＩＩ：２２３，１９７７）、細胞ヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＰＲＴ）遺伝子、細胞アデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＡＰＲＴ）遺伝子、細菌シトシンデアミナーゼ（Ｍｕｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８９：３３（１９９２））が含まれる。
いくつかの態様では、細胞は、さらに、サイトカインまたは他の因子の発現を促進するように設計される。遺伝子操作された成分、例えば抗原受容体、例えばＣＡＲを導入するための様々な方法が周知であり、これらを、提供される方法および組成物とともに使用してもよい。例示的な方法には、ウイルス、例えばレトロウイルスまたはレンチウイルス、形質導入、トランスポゾン、および電気穿孔を含む、受容体をコードする核酸の移入のための方法が含まれる。
いくつかの実施形態では、例えば、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）、アデノウイルス、アデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）に由来するベクターなどの組換え感染性ウイルス粒子を使用して、組換え核酸を細胞に移入する。いくつかの実施形態では、組換えレンチウイルスベクター、またはガンマレトロウイルスベクターなどのレトロウイルスベクターを使用して、組換え核酸をＴ細胞に移入する（例えば、Ｋｏｓｔｅ ｅｔ ａｌ．（２０１４）遺伝子Ｔｈｅｒａｐｙ ２０１４ Ａｐｒ．３．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｇｔ．２０１４．２５、Ｃａｒｌｅｎｓ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ ２８（１０）：１１３７−４６、Ａｌｏｎｓｏ−Ｃａｍｉｎｏ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄｓ ２，ｅ９３、Ｐａｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０１１ Ｎｏｖ．２９（１１）：５５０−５５７を参照されたい）。
いくつかの実施形態では、レトロウイルスベクターは、長い末端反復配列（ＬＴＲ）、例えば、モロニーマウス白血病ウイルス（ＭｏＭＬＶ）、骨髄増殖性肉腫ウイルス（ＭＰＳＶ）、マウス胚性幹細胞ウイルス（ＭＥＳＶ）、マウス幹細胞ウイルス（ＭＳＣＶ）、脾臓フォーカス形成ウイルス（ＳＦＦＶ）、またはアデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）に由来するレトロウイルスベクターを有する。大部分のレトロウイルスベクターは、マウスレトロウイルスに由来する。いくつかの実施形態では、レトロウイルスには、鳥類または哺乳類の細胞源に由来するものが含まれる。レトロウイルスは、典型的には両種性であり、これは、レトロウイルスが、ヒトを含むいくつかの種の宿主細胞に感染できることを意味する。一実施形態では、発現される遺伝子は、レトロウイルスｇａｇ、ｐｏｌ、および／またはｅｎｖ配列を代置する。いくつかの例示的なレトロウイルス系が説明されている（例えば、米国特許第５，２１９，７４０号、同第６，２０７，４５３号、同第５，２１９，７４０号、Ｍｉｌｌｅｒ ａｎｄ Ｒｏｓｍａｎ（１９８９）ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ７：９８０−９９０、Ｍｉｌｌｅｒ，Ａ．Ｄ．（１９９０）Ｈｕｍａｎ遺伝子Ｔｈｅｒａｐｙ １：５−１４、Ｓｃａｒｐａ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １８０：８４９−８５２、Ｂｕｒｎｓ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：８０３３−８０３７、およびＢｏｒｉｓ−Ｌａｗｒｉｅ ａｎｄ Ｔｅｍｉｎ（１９９３）Ｃｕｒ．Ｏｐｉｎ．遺伝子ｔ．Ｄｅｖｅｌｏｐ．３：１０２−１０９）。
レンチウイルス形質導入の方法は既知である。例示的な方法は、例えば、Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３５（９）：６８９−７０１、Ｃｏｏｐｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｂｌｏｏｄ．１０１：１６３７−１６４４、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．５０６：９７−１１４、およびＣａｖａｌｉｅｒｉ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｂｌｏｏｄ．
１０２（２）：４９７−５０５に記載されている。
いくつかの実施形態では、組換え核酸は、電気穿孔を介してＴ細胞に移入される（例えば、Ｃｈｉｃａｙｂａｍ ｅｔ ａｌ，（２０１３）ＰＬｏＳ ＯＮＥ ８（３）：ｅ６０２９８、Ｖａｎ Ｔｅｄｅｌｏｏ ｅｔ ａｌ．（２０００）遺伝子 Ｔｈｅｒａｐｙ ７（１６）：１４３１−１４３７、およびＲｏｔｈ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｎａｔｕｒｅ ５５９：４０５−４０９を参照されたい）。いくつかの実施形態では、組換え核酸は、転位を介してＴ細胞に移入される（例えば、Ｍａｎｕｒｉ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｈｕｍ遺伝子Ｔｈｅｒ ２１（４）：４２７−４３７、Ｓｈａｒｍａ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｍｏｌｅｃ Ｔｈｅｒ Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄｓ ２，ｅ７４、およびＨｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ５０６：１１５−１２６を参照されたい）。免疫細胞に遺伝物質を導入および発現させる他の方法には、リン酸カルシウムトランスフェクション（例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ．Ｎ．Ｙ．に記載されているとおり）、プロトプラスト融合、カチオン性リポソーム媒介トランスフェクション、タングステン粒子促進性微粒子衝撃（Ｊｏｈｎｓｔｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ，３４６：７７６−７７７（１９９０））、およびリン酸ストロンチウムＤＮＡ共沈（Ｂｒａｓｈ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．，７：２０３１−２０３４（１９８７））が含まれる。
組換え産物をコードする核酸を移入するための他のアプローチおよびベクターは、例えば、国際特許出願公開第ＷＯ２０１４０５５６６８号、および米国特許第７，４４６，１９０号に記載されているものである。
追加の核酸、例えば、導入のための遺伝子の中には、移入された細胞の生存能力および／または機能を促進することなどにより、治療の有効性を改善するもの；インビボの生存または局在を評定するためなどの、細胞の選択および／または評価のための遺伝子マーカーを提供する遺伝子；例えば、Ｓ．Ｄ．ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．，１１：６（１９９１）、およびＲｉｄｄｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍａｎ 遺伝子 Ｔｈｅｒａｐｙ ３：３１９−３３８（１９９２）に記載されているように、細胞をインビボでのネガティブ選択に感受性にすることにより安全性を改善する遺伝子がある。優勢なポジティブ選択可能なマーカーをネガティブ選択可能なマーカーと融合させることから得られる二機能性の選択可能な融合遺伝子の使用を記載しているＬｕｐｔｏｎらによるＰＣＴ／ＵＳ９１／０８４４２およびＰＣＴ／ＵＳ９４／０５６０１も参照されたい。例えば、Ｒｉｄｄｅｌｌらの米国特許第６，０４０，１７７号、１４〜１７欄を参照されたい。
操作された細胞の調製
いくつかの実施形態では、操作された細胞の調製には、１つ以上の培養および／または調製ステップが含まれる。ＨＬＡ−ペプチド−ＡＢＰ、例えば、ＴＣＲまたはＣＡＲの導入のための細胞は、生体試料、例えば、対象から得られたまたは対象に由来する試料などの試料から単離することができる。いくつかの実施形態では、細胞が単離される対象は、疾患もしくは状態を有するか、細胞療法を必要とするか、または細胞療法が施される対象である。いくつかの実施形態における対象は、細胞が単離、処理、および／または操作される養子細胞療法などの特定の治療的介入を必要とするヒトである。
したがって、いくつかの実施形態における細胞は、初代細胞、例えば、初代ヒト細胞である。試料には、対象から直接採取した組織、体液、および他の試料、ならびに分離、遠心分離、遺伝子操作（例えば、ウイルスベクターによる形質導入）、洗浄、および／またはインキュベーションなどの１つ以上の処理ステップから生じる試料が含まれる。生体試料は、生体供給源から直接得られた試料または処理される試料であり得る。生体試料には、血液、血漿、血清、脳脊髄液、滑液、尿、および汗などの体液、組織、ならびに臓器試料が、それらに由来する処理された試料を含めて挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの態様では、細胞が由来するまたは単離される試料は、血液もしくは血液由来試料であるか、またはアフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス製品であるかもしくはそれらに由来する。例示的な試料には、全血、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、白血球、骨髄、胸腺、組織生検、腫瘍、白血病、リンパ腫、リンパ節、胃腸管関連リンパ組織、粘膜関連リンパ組織、脾臓、他のリンパ組織、肝臓、肺、胃、腸、結腸、腎臓、膵臓、乳房、骨、前立腺、子宮頸部、精巣、卵巣、扁桃腺、もしくは他の器臓器、および／またはそれらに由来する細胞が含まれる。試料には、細胞療法、例えば養子細胞療法の状況では、自家および同種源からの試料が含まれる。
いくつかの実施形態では、細胞は、細胞株、例えばＴ細胞株に由来する。いくつかの実施形態における細胞は、異種源、例えば、マウス、ラット、非ヒト霊長類、またはブタから得られる。
いくつかの実施形態では、細胞の単離には、１つ以上の調製および／または非親和性ベースの細胞分離ステップが含まれる。いくつかの例では、細胞を、洗浄、遠心分離、および／または１つ以上の試薬の存在下でインキュベートして、例えば、不要な成分を除去し、所望の成分を富化し、特定の試薬に対して感受性である細胞を溶解または除去する。いくつかの例では、細胞は、密度、接着特性、サイズ、感度、および／または特定の成分への耐性などの１つ以上の特性に基づいて分離される。
いくつかの例では、対象の循環血液からの細胞は、例えば、アフェレーシスまたは白血球アフェレーシスにより得られる。試料には、いくつかの態様では、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血球、赤血球、および／または血小板を含むリンパ球が含まれ、いくつかの態様では、赤血球および血小板以外の細胞が含まれる。
いくつかの実施形態では、対象から収集された血球は、例えば、血漿画分を除去するため、およびその後の処理ステップのために細胞を適切な緩衝液または培地に配置するために洗浄される。いくつかの実施形態では、細胞はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。いくつかの実施形態では、洗浄溶液には、カルシウムおよび／またはマグネシウムおよび／または多くのまたはすべての二価カチオンが欠如している。いくつかの態様では、洗浄ステップは、製造業者の指示に従って、半自動化された「フロースルー」遠心分離機（例えば、Ｃｏｂｅ ２９９１細胞処理機、Ｂａｘｔｅｒ）により達成される。いくつかの態様では、洗浄ステップは、製造業者の指示に従って接線流ろ過（ＴＦＦ）により達成される。いくつかの実施形態では、細胞は、洗浄後に、例えばＣａ＋＋／Ｍｇ＋＋を含まないＰＢＳなどの様々な生体適合性緩衝液に再懸濁される。ある特定の実施形態では、血球試料の成分が除去され、細胞が培養培地に直接再懸濁される。
いくつかの実施形態では、本方法には、赤血球を溶解することによる末梢血からの白血球の調製およびパーコールまたはフィコール勾配をとおした遠心分離などの密度ベースの細胞分離方法が含まれる。
いくつかの実施形態では、単離方法には、表面マーカー、例えば表面タンパク質、細胞内マーカー、または核酸などの１つ以上の特定の分子の細胞における発現または存在に基づく異なる細胞型の分離を含む。いくつかの実施形態では、そのようなマーカーに基づく分離のためのいずれの既知の方法を使用してもよい。いくつかの実施形態では、分離は、親和性または免疫親和性に基づく分離である。例えば、いくつかの態様における分離には、１つ以上のマーカー、典型的には細胞表面マーカーの細胞の発現または発現レベルに基づく細胞および細胞集団の分離が含まれ、これは、例えば、そのようなマーカーに特異的に結合する抗体または結合パートナーとのインキュベーション、続いて、一般的には、洗浄、および抗体または結合パートナーに結合していない細胞からの抗体または結合パートナーに結合した細胞の分離による。
そのような分離ステップは、試薬に結合した細胞がさらなる使用のために保持されるポジティブ選択、および／または抗体もしくは結合パートナーに結合していない細胞が保持されるネガティブ選択に基づき得る。いくつかの例では、両方の画分が、さらなる使用のために保持される。いくつかの態様では、ネガティブ選択は、分離が所望の集団以外の細胞によって発現されるマーカーに基づくと最適に行われるような、異種集団の細胞型を特異的に同定する抗体が利用できない場合に特に有用である。
分離は、特定の細胞集団または特定のマーカーを発現する細胞の１００％富化または除去をもたらす必要はない。例えば、マーカーを発現する細胞などの特定の種類の細胞のポジティブ選択または富化は、そのような細胞の数または割合の増加を指すが、マーカーを発現しない細胞の完全な欠如をもたらす必要はない。同様に、マーカーを発現する細胞などの特定の種類の細胞のネガティブ選択、除去、または枯渇は、そのような細胞の数または割合の減少を指すが、すべてのそのような細胞の完全な除去をもたらす必要はない。
いくつかの例では、複数ラウンドの分離ステップが実行され、この場合、１つのステップからのポジティブ選択またはネガティブ選択された画分は、その後の正ポジティブ選択またはネガティブ選択など、別の分離ステップに供される。いくつかの例では、単一分離ステップは、各々ネガティブ選択を標的にしたマーカーに特異的な複数の抗体または結合パートナーとともに細胞をインキュベートすることなどにより、同時に複数のマーカーを発現する細胞を枯渇させることができる。同様に、さまざまな細胞型で発現した複数の抗体または結合パートナーとともに細胞をインキュベートすることにより、複数の細胞型を同時にポジティブ選択することができる。
例えば、いくつかの態様では、１つ以上の表面マーカー、例えば、ＣＤ２８＋、ＣＤ６２Ｌ＋、ＣＣＲ７＋、ＣＤ２７＋、ＣＤ１２７＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、および／またはＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞について陽性であるかまたはそれらを高レベルで発現する細胞などのＴ細胞の特定の亜集団は、ポジティブ選択またはネガティブ選択技法により単離される。
例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ２８＋Ｔ細胞は、ＣＤ３／ＣＤ２８コンジュゲート磁気ビーズ（例えば、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ．ＲＴＭ．Ｍ−４５０ ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｅｘｐａｎｄｅｒ）を使用してポジティブ選択され得る。
いくつかの実施形態では、単離は、ポジティブ選択による特定の細胞集団の富化、またはネガティブ選択による特定の細胞集団の枯渇によって実行される。いくつかの実施形態では、ポジティブ洗濯またはネガティブ選択は、それぞれ、ポジティブ選択された細胞またはネガティブ選択された細胞上で発現されるまたは比較的高いレベル（マーカー高）で発現される（マーカー＋）１つ以上の表面マーカーに特異的に結合する１つ以上の抗体または他の結合剤とともに細胞をインキュベートすることにより達成される。
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、非Ｔ細胞、例えば、Ｂ細胞、単球、またはＣＤ１４などの他の白血球に発現されるマーカーのネガティブ選択によってＰＢＭＣ試料から分離される。いくつかの態様では、ＣＤ４＋またはＣＤ８＋選択ステップを使用して、ＣＤ４＋ヘルパーおよびＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞を分離する。このようなＣＤ４＋およびＣＤ８＋集団は、１つ以上の未感作、メモリー、および／またはエフェクターＴ細胞亜集団で発現されるまたは比較的高度に発現されるマーカーのポジティブ選択またはネガティブ選択により、亜集団にさらに選別され得る。
いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋細胞は、それぞれの亜集団に関連する表面抗原に基づくポジティブ選択またはネガティブ選択などにより、未感作、セントラルメモリー、エフェクターメモリー、および／またはセントラルメモリー幹細胞がさらに富化されるまたは枯渇する。いくつかの実施形態では、投与後の長期生存、拡大、および／または生着を改善するなど、有効性を高めるために、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞の富化が行われ、これは、いくつかの態様では、そのような亜集団で特に堅牢である。Ｔｅｒａｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｂｌｏｏｄ．１：７２−８２、Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３５（９）：６８９−７０１を参照されたい。いくつかの実施形態では、ＴＣＭ富化ＣＤ８＋Ｔ細胞とＣＤ４＋Ｔ細胞とを組み合わせることにより、有効性がさらに向上する。
実施形態では、メモリーＴ細胞は、ＣＤ８＋末梢血リンパ球のＣＤ６２Ｌ＋およびＣＤ６２Ｌ−サブセットの両方に存在する。ＰＢＭＣは、抗ＣＤ８および抗ＣＤ６２Ｌ抗体を使用するなどして、ＣＤ６２Ｌ−ＣＤ８＋および／またはＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ８＋画分を富化するまたは枯渇させることができる。
いくつかの実施形態では、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞の富化は、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ６２Ｌ、ＣＣＲ７、ＣＤ２８、ＣＤ３、および／またはＣＤ１２７の陽性のまたは高い表面発現に基づき、いくつかの態様では、ＣＤ４５ＲＡおよび／またはグランザイムＢを発現するまたは高度に発現する細胞のネガティブ選択に基づく。いくつかの態様では、ＴＣＭ細胞を富化したＣＤ８＋集団の単離は、ＣＤ４、ＣＤ１４、ＣＤ４５ＲＡを発現する細胞の枯渇、およびＣＤ６２Ｌを発現する細胞のポジティブ選択または富化により実行される。一態様では、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞の富化は、ＣＤ４発現に基づいて選択された細胞のネガティブ画分を用いて開始され、これは、ＣＤ１４およびＣＤ４５ＲＡの発現に基づくネガティブ選択、ならびにＣＤ６２Ｌに基づくポジティブ選択に供される。いくつかの態様におけるそのような選択は同時に実行され、他の態様では、いずれかの順序で連続的に実行される。一部の態様では、ＣＤ４ベースの分離からのポジティブ画分とネガティブ画分との両方が本方法の後続のステップでも保持および使用されるように、ＣＤ８＋細胞集団または亜集団の調製に使用されるのと同じＣＤ４発現ベースの選択ステップを使用して、ＣＤ４＋細胞集団または亜集団を生成し、任意選択で１つ以上のさらなるポジティブ選択またはネガティブ選択ステップが続く。
特定の例では、ＰＢＭＣの試料または他の白血球試料がＣＤ４＋細胞の選択に供され、ここでは、ネガティブ画分とポジティブ画分との両方が保持される。その後、ネガティブ画分は、ＣＤ１４およびＣＤ４５ＲＡまたはＲＯＲ１の発現に基づくネガティブ選択、ならびにＣＤ６２ＬまたはＣＣＲ７などのセントラルメモリーＴ細胞のマーカー特性に基づくポジティブ選択に供され、ここでは、ポジティブ選択およびネガティブ選択はいずれかの順序で実行される。
ＣＤ４＋Ｔヘルパー細胞は、細胞表面抗原を有する細胞集団を同定することにより、未感作細胞、セントラルメモリー細胞、およびエフェクター細胞に選別される。ＣＤ４＋リンパ球は、標準的な方法により取得することができる。いくつかの実施形態では、未感作ＣＤ４＋Ｔリンパ球は、ＣＤ４５ＲＯ−、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＤ６２Ｌ＋、ＣＤ４＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、セントラルメモリーＣＤ４＋細胞は、ＣＤ６２Ｌ＋およびＣＤ４５ＲＯ＋である。いくつかの実施形態では、エフェクターＣＤ４＋細胞は、ＣＤ６２Ｌ−およびＣＤ４５ＲＯ−である。
一例では、ネガティブ選択によりＣＤ４＋細胞を富化するため、モノクローナル抗体カクテルには、典型的に、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ−ＤＲ、およびＣＤ８に対する抗体が含まれる。いくつかの実施形態では、抗体または結合パートナーは、磁気ビーズまたは常磁性ビーズなどの固体支持体または基質に結合させて、ポジティブ選択および／またはネガティブ選択のために細胞の分離を可能にする。例えば、いくつかの実施形態では、細胞および細胞集団は、免疫磁気（または親和性磁気）分離技術を使用して分離または単離される（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｖｏｌ．５８：Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｖｏｌ．２：Ｃｅｌｌ Ｂｅｈａｖｉｏｒ Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ ａｎｄ Ｉｎ Ｖｉｖｏ，ｐ １７−２５ Ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ：Ｓ．Ａ．Ｂｒｏｏｋｓ ａｎｄ Ｕ．Ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒ Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．で総括されている）。
いくつかの態様では、分離される細胞の試料または組成物は、小さい磁化可能または磁気応答性の材料、例えば、常磁性ビーズ（例えば、ＤｙｎａｂｅａｄｓまたはＭＡＣＳビーズなど）などの磁気応答性粒子または微粒子とともにインキュベートされる。磁気応答性材料、例えば粒子は、一般に、分離が所望される、例えば、ネガティブ選択またはポジティブ選択が所望される細胞（単数または複数）または細胞の集団に存在する分子、例えば表面マーカーに特異的に結合する結合パートナー、例えば抗体に直接的または間接的に付着する。
いくつかの実施形態では、磁性粒子またはビーズは、抗体または他の結合パートナーなどの特定の結合メンバーに結合した磁気応答性材料を含む。磁気分離法で使用される磁気応答性材料は、多数周知である。好適な磁性粒子には、参照により本明細書に組み込まれる、Ｍｏｌｄａｙの米国特許第４，４５２，７７３号、および欧州特許明細書第ＥＰ ４５２３４２ Ｂ号に記載されているものが含まれる。Ｏｗｅｎの米国特許第４，７９５，６９８号およびＬｉｂｅｒｔｉらの米国特許第５，２００，０８４号に記載されているものなどのコロイドサイズの粒子は、他の例である。
インキュベーションは、一般に、磁性粒子またはビーズに付着する、抗体もしくは結合パートナー、またはそのような抗体もしくは結合パートナーに特異的に結合する二次抗体もしくは他の試薬などの分子が、試料内の細胞に存在する場合、細胞表面に特異的に結合する条件下で実行される。
いくつかの態様では、試料は磁場に置かれ、磁気応答性粒子または磁化可能粒子が付着した細胞が磁石に引き付けられて、標識されていない細胞から分離する。ポジティブ選択の場合、磁石に引き付けられた細胞は保持され、ネガティブ選択の場合、引き付けられない細胞（標識されていない細胞）が保持される。いくつかの態様では、ポジティブ選択とネガティブ選択との組み合わせが同じ選択ステップ中に行われ、ここでは、ポジティブ画分およびネガティブ画分が保持され、さらに処理されるか、またはさらなる分離ステップに供される。
ある特定の実施形態では、磁気応答性粒子は、一次抗体または他の結合パートナー、二次抗体、レクチン、酵素、またはストレプトアビジンでコーティングされる。ある特定の実施形態では、磁性粒子は、１つ以上のマーカーに特異的な一次抗体のコーティングを介して細胞に付着する。ある特定の実施形態では、ビーズではなく細胞を一次抗体または結合パートナーで標識し、次いで、細胞型特異的二次抗体または他の結合パートナー（例えば、ストレプトアビジン）をコーティングした磁性粒子を加える。ある特定の実施形態では、ストレプトアビジンをコーティングした磁性粒子は、ビオチン化一次抗体または二次抗体と併用される。
いくつかの実施形態では、磁気応答性粒子は、続いてインキュベート、培養、および／または操作される細胞に付着したままである。いくつかの態様では、粒子は、患者への投与のための細胞に付着したままである。いくつかの実施形態では、磁化可能または磁気応答性粒子は細胞から除去される。磁化可能粒子を細胞から除去する方法は既知であり、これらの方法には、例えば、競合する標識されていない抗体、磁化可能粒子、または切断可能なリンカーにコンジュゲートした抗体などの使用が含まれる。いくつかの実施形態では、磁化可能粒子は生分解性である。
いくつかの実施形態では、親和性に基づく選択は、磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ａｕｂｕｒｎ，Ｃａｌｉｆ．）を介したものである。磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）システムは、磁化粒子が付着した細胞の高純度選択が可能である。ある特定の実施形態では、ＭＡＣＳは、外部磁場の印加後に、非標的種および標的種が連続的に溶出されるモードで動作する。つまり、磁化粒子に付着した細胞は定位置に保たれ、付着していない種が溶出される。次に、この最初の溶出ステップが完了した後、磁場に閉じ込められ、溶出が妨げられた種が、何らかの様式で解放され、その結果、溶出および回収ができるようになる。ある特定の実施形態では、非標的細胞は、標識され、異種細胞集団から枯渇される。
ある特定の実施形態では、単離または分離は、本方法の単離、細胞調製、分離、処理、インキュベーション、培養、および／または製剤化ステップのうちの１つ以上を実行するシステム、デバイス、または装置を使用して実行される。いくつかの態様では、本システムは、例えば、エラー、ユーザーの取扱い、および／または汚染を最小限に抑えるために、閉鎖環境または無菌環境でこれらのステップの各々を実行するために使用される。一例では、本システムは、国際特許出願公開第ＷＯ２００９／０７２００３号、またはＵＳ ２０１１０００３３８０ Ａ１に記載されているシステムである。
いくつかの実施形態では、本システムまたは装置は、単離、処理、操作、および製剤化ステップのうちの１つ以上、例えばすべてを、統合システムもしくは自己完結型システム中で、および／または自動化された様式もしくはプログラム可能な様式で実行する。いくつかの態様では、本システムまたは装置には、システムまたは装置と通信するコンピューターおよび／またはコンピュータープログラムが含まれ、これらにより、ユーザーが、処理、単離、操作、および製剤化ステップの様々な局面のプログラム、制御、その結果の評定、および／または調整を行うことが可能となる。
いくつかの態様において、分離および／または他のステップは、例えば、閉鎖および滅菌システムにおいて臨床規模のレベルで細胞を自動分離するために、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステム（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｉｃ）を使用して実行される。構成要素には、統合されたマイクロコンピューター、磁気分離ユニット、蠕動ポンプ、およびさまざまなピンチ弁が含まれ得る。一部の態様における統合されたコンピューターは、機器のすべての構成要素を制御し、標準化された順序で繰り返し手順を実行するようシステムに指示する。いくつかの態様における磁気分離ユニットには、選択カラム用の可動永久磁石およびホルダーが含まれる。蠕動ポンプにより、チューブセット全体の流量が制御され、ピンチ弁と併せることで、システムをとおした緩衝液の制御された流れ、および細胞の継続的な懸濁が確実となる。
いくつかの態様におけるＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムは、無菌の非発熱性溶液で供給される抗体に結合した磁化可能粒子を使用する。いくつかの実施形態では、細胞を磁性粒子で標識した後、細胞を洗浄して、過剰な粒子を除去する。次に、細胞調製バッグをチューブセットに接続し、今度はチューブセットを緩衝液を収容するバッグおよび細胞収集バッグに接続する。チューブセットは、プレカラムおよび分離カラムを含む、事前に組み立てられた滅菌チューブからなり、単回使用のみを目的とする。分離プログラムの開始後、システムは自動的に細胞試料を分離カラムに適用する。標識された細胞はカラム内に保持され、標識されていない細胞は一連の洗浄ステップにより除去される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法とともに使用するための細胞集団は、標識されておらず、カラムに保持されない。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法とともに使用するための細胞集団は、標識されており、カラムに保持される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法ともに使用するための細胞集団は、磁場の除去後にカラムから溶出され、細胞収集バッグ内に収集される。
ある特定の実施形態では、分離および／または他のステップは、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステム（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して実行される。いくつかの態様におけるＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムには、遠心分離による細胞の自動洗浄および分画を可能にする細胞処理ユニットが装備されている。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムには、ソース細胞製品の肉眼的な層を識別することにより、最適な細胞分画エンドポイントを決定するオンボードカメラおよび画像認識ソフトウェアが含まれ得る。例えば、末梢血は、赤血球層、白血球層、および血漿層に自動的に分離されてもよい。また、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムには、細胞培養プロトコル、例えば、細胞分化および拡大、抗原ローディング、ならびに長期細胞培養などを達成する、統合型細胞培養チャンバも含まれ得る。入力ポートにより、培地の滅菌除去および補充が可能となり、統合型顕微鏡を使用して、細胞を監視することができる。例えば、Ｋｌｅｂａｎｏｆｆ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３５（９）：６５１−６６０、Ｔｅｒａｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｂｌｏｏｄ．１：７２−８２、およびＷａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３５（９）：６８９−７０１を参照されたい。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の細胞集団は、複数の細胞表面マーカーについて染色された細胞が流体流で運ばれるフローサイトメトリーを介して収集および富化（または枯渇）される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される細胞集団は、調製スケール（ＦＡＣＳ）選別により収集および濃縮（または枯渇）される。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の細胞集団は、ＦＡＣＳベースの検出システムと組み合わせた微小電気機械システム（ＭＥＭＳ）チップの使用により、収集および濃縮（または枯渇）される（例えば、ＷＯ２０１０／０３３１４０、Ｃｈｏ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｌａｂ Ｃｈｉｐ １０，１５６７−１５７３、およびＧｏｄｉｎ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｊ Ｂｉｏｐｈｏｔｏｎ．１（５）：３５５−３７６を参照されたい）。どちらの場合でも、細胞は複数のマーカーで標識することができ、これにより、十分に定義されたＴ細胞サブセットを高純度で分離できるようになる。
いくつかの実施形態では、抗体または結合パートナーは、１つ以上の検出可能なマーカーで標識され、ポジティブおよび／またはネガティブ選択のための分離を促進する。例えば、分離は、蛍光標識された抗体への結合に基づいてもよい。いくつかの例では、１つ以上の細胞表面マーカーに特異的な抗体または他の結合パートナーの結合に基づく細胞の分離は、例えばフローサイトメトリー検出システムとの組み合わせた、分取スケール（ＦＡＣＳ）および／または微小電気機械システム（ＭＥＭＳ）チップを含む蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）などにより、流体流で運ばれる。そのような方法により、同時に複数のマーカーに基づいてポジティブ選択およびネガティブ選択を行うことが可能となる。
いくつかの実施形態では、調製方法には、単離、インキュベーション、および／または操作の前または後のいずれかに、細胞を凍結、例えば凍結保存するためのステップが含まれる。いくつかの実施形態では、凍結およびその後の解凍ステップにより、細胞集団の中の顆粒球、およびある程度で単球が除去される。いくつかの実施形態では、細胞は、例えば、血漿および血小板を除去するための洗浄ステップに続いて、凍結溶液に懸濁される。いくつかの態様における様々な既知の凍結溶液およびパラメーターのうちのいずれを使用してもよい。ある例では、２０％ＤＭＳＯおよび８％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含有するＰＢＳ、または他の好適な細胞凍結培地の使用を伴う。次に、これを培地で１：１に希釈し、ＤＭＳＯおよびＨＳＡの最終濃度がそれぞれ１０％および４％になるようにする。他の例には、Ｃｒｙｏｓｔｏｒ（登録商標）、ＣＴＬ−Ｃｒｙｏ（商標）ＡＢＣ凍結培地などが含まれる。その後、細胞を毎分１度の速度で−８０℃に凍結し、液体窒素貯蔵タンクの気相中で保存する。
いくつかの実施形態では、提供される方法には、養殖、インキュベーション、培養、および／または遺伝子操作のステップが含まれる。例えば、いくつかの実施形態では、枯渇した細胞集団および培養開始組成物をインキュベートおよび／または操作する方法が提供される。
このため、いくつかの実施形態では、細胞集団は、培養開始組成物中でインキュベートされる。インキュベーションおよび／または操作は、培養容器、例えば、ユニット、チャンバ、ウェル、カラム、チューブ、チューブセット、弁、バイアル、培養皿、バッグ、または細胞を培養または養殖するための他の容器の中で実行されてもよい。
いくつかの実施形態では、細胞は、遺伝子操作の前にまたはそれに関連して、インキュベートおよび／または培養される。インキュベーションステップには、培養、養殖、刺激、活性化、および／または増殖が含まれ得る。いくつかの実施形態では、組成物または細胞は、刺激条件または刺激剤の存在下でインキュベートされる。そのような条件には、集団内の細胞の増殖、拡大、活性化、および／または生存を誘導し、抗原露出を模倣し、かつ／または組換え抗原受容体の導入などの遺伝子操作のために細胞をプライミングするように設計された条件が含まれる。
条件には、特定の培地、温度、酸素含有量、二酸化炭素含有量、時間、薬剤、例えば、栄養素、アミノ酸、抗生物質、イオン、および／または刺激因子、例えば、サイトカイン、ケモカイン、抗原、結合パートナー、融合タンパク質、組換え可溶性受容体、および細胞を活性化するように設計された任意の他の薬剤のうちの１つ以上が含まれ得る。
いくつかの実施形態では、刺激条件または薬剤には、ＴＣＲ複合体の細胞内シグナル伝達ドメインを活性化することができる１つ以上の薬剤、例えばリガンドが含まれる。一部の態様では、薬剤は、Ｔ細胞のＴＣＲ／ＣＤ３細胞内シグナル伝達カスケードをオンにするかまたは開始する。そのような薬剤には、ＴＣＲ成分および／または共刺激受容体、例えば、例えばビーズなどの固体支持体に結合した抗ＣＤ３、抗ＣＤ２８、および／または１つ以上のサイトカインに特異的な抗体などの抗体が含まれ得る。任意選択で、拡大方法は、抗ＣＤ３および／または抗ＣＤ２８抗体を培地に（例えば、少なくとも約０．５ｎｇ／ｍｌの濃度で）添加するステップをさらに含んでもよい。いくつかの実施形態では、刺激剤には、ＩＬ−２および／またはＩＬ−１５、例えば、少なくとも約１０単位／ｍＬのＩＬ−２濃度が含まれる。
いくつかの態様では、インキュベーションは、Ｒｉｄｄｅｌｌらの米国特許第６，０４０，１７７号、Ｋｌｅｂａｎｏｆｆ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３５（９）：６５１−６６０、Ｔｅｒａｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｂｌｏｏｄ．１：７２−８２、および／またはＷａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３５（９）：６８９−７０１に記載されているものなどの技法にしたがって実行される。
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、非分裂性末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）などの培養開始組成物支持細胞に加えること（例えば、結果として生じる細胞集団が、拡大される初期集団中の各Ｔリンパ球について、少なくとも約５、１０、２０、または４０個以上のＰＢＭＣ支持細胞を含むようにする）、および培養物をインキュベートすること（例えば、Ｔ細胞の数を増やすのに十分な時間）により拡大される。一部の態様では、非分裂性支持細胞は、ガンマ線照射ＰＢＭＣ支持細胞を含み得る。いくつかの実施形態では、細胞分裂を防ぐために、ＰＢＭＣに約３０００〜３６００ラドの範囲のガンマ線を照射する。いくつかの実施形態では、ＰＢＭＣ支持細胞をマイトマイシンＣで不活性化する。いくつかの態様では、Ｔ細胞の集団を加える前に、支持細胞を培地に加える。
いくつかの実施形態では、刺激条件には、ヒトＴリンパ球の成長に好適な温度、例えば、少なくとも約２５℃、一般に少なくとも約３０℃、一般に３７℃または約３７℃が含まれる。任意選択で、インキュベーションは、非分裂性ＥＢＶ形質転換リンパ芽球様細胞（ＬＣＬ）を支持細胞として加えることをさらに含んでもよい。ＬＣＬには、約６０００〜１０，０００ラドの範囲のガンマ線を照射し得る。いくつかの態様におけるＬＣＬ支持細胞は、任意の好適な量、例えば、ＬＣＬ支持細胞と初期Ｔリンパ球との比が少なくとも約１０：１で提供される。
実施形態では、抗原特異的ＣＤ４＋および／またはＣＤ８＋Ｔ細胞などの抗原特異的Ｔ細胞は、未感作または抗原特異的Ｔリンパ球を抗原で刺激することにより得られる。例えば、感染した対象からＴ細胞を分離し、同じ抗原を用いてインビトロで細胞を刺激することにより、サイトメガロウイルス抗原に対する抗原特異的Ｔ細胞株またはクローンを生成することができる。
アッセイ
当該技術分野で既知の様々なアッセイを使用して、本明細書中に提供されるＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰを同定および特徴付けてもよい。
結合、競合、およびエピトープマッピングアッセイ
本明細書で提供されるＡＢＰの特異性抗原結合活性は、本開示の他の箇所で説明されるように、ＳＰＲ、ＢＬＩ、ＲＩＡおよびＭＳＤ−ＳＥＴを使用することを含む任意の好適な方法によって評価し得る。さらに、抗原結合活性は、フローサイトメトリーを使用するＥＬＩＳＡアッセイ、および／またはウエスタンブロットアッセイによって評価してもよい。
２つのＡＢＰ、またはＡＢＰと別の分子（例えば、ＴＣＲなどのＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰの１つ以上のリガンド）との間の競合を測定するためのアッセイは、本開示の他の箇所、および例えば、参照により全体が組み込まれる、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，ＡＢＰｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ｃｈ．１４，１９８８，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙに記載されている。
本明細書で提供されるＡＢＰが結合するエピトープをマッピングするためのアッセイは、例えば、参照により全体が組み込まれるＭｏｒｒｉｓ“Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，”Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．６６，１９９６，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．に記載されている。いくつかの実施形態では、エピトープはペプチド競合によって決定される。いくつかの実施形態では、エピトープは質量分析によって決定される。いくつかの実施形態では、エピトープは変異生成によって決定される。いくつかの実施形態では、エピトープは結晶学によって決定される。
エフェクター機能のアッセイ
本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞による治療後のエフェクタ機能は、各々参照により全体が組み込まれる、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９１，９：４５７−４９２、米国特許第５，５００，３６２号、同第５，８２１，３３７号、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８６，８３：７０５９−７０６３、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８５，８２：１４９９−１５０２、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１９８７，１６６：１３５１−１３６１、Ｃｌｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９８，９５：６５２−６５６、ＷＯ２００６／０２９８７９、ＷＯ２００５／１００４０２、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９９６，２０２：１６３−１７１、Ｃｒａｇｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００３，１０１：１０４５−１０５２、Ｃｒａｇｇ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ，２００４，１０３：２７３８−２７４３、およびＰｅｔｋｏｖａ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００６，１８：１７５９−１７６９に記載されているものを含む、当技術分野で既知の様々なインビトロおよびインビボアッセイを使用して評価することができる。
医薬組成物
本明細書で提供されるＡＢＰ、細胞、またはＨＬＡ−ペプチド標的は、任意の適切な医薬組成物に製剤化され、任意の好適な投与経路によって投与され得る。好適な投与経路としては、動脈内、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、経鼻、非経口、肺、および皮下経路が挙げられるが、これらに限定されない。
医薬組成物は、１つ以上の医薬賦形剤を含んでもよい。任意の好適な医薬賦形剤を使用し得、当業者は好適な医薬賦形剤を選択することができる。したがって、以下に提供される医薬賦形剤は、例示を目的とするものであり、限定するものではない。追加の医薬賦形剤には、例えば、参照により全体が組み込まれるＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．（Ｅｄｓ．）６ｔｈ Ｅｄ．（２００９）に記載されているものが含まれる。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は消泡剤を含む。任意の好適な消泡剤を使用し得る。いくつかの態様では、消泡剤は、アルコール、エーテル、油、ワックス、シリコーン、界面活性剤、およびそれらの組み合わせから選択される。いくつかの態様では、消泡剤は、鉱油、植物油、エチレンビスステアラミド、パラフィンワックス、エステルワックス、脂肪アルコールワックス、長鎖脂肪アルコール、脂肪酸石鹸、脂肪酸エステル、シリコングリコール、フルオロシリコーン、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコール共重合体、ポリジメチルシロキサン−二酸化ケイ素、エーテル、オクチルアルコール、カプリルアルコール、ソルビタントリオレエート、エチルアルコール、２−エチル−ヘキサノール、ジメチコン、オレイルアルコール、シメチコン、およびそれらの組み合わせから選択される。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は共溶媒を含む。共溶媒の実例としては、エタノール、ポリ（エチレン）グリコール、ブチレングリコール、ジメチルアセトアミド、グリセリン、プロピレングリコール、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は緩衝液を含む。緩衝剤の実例としては、アセテート、ボラート、炭酸塩、乳酸塩、りんご酸塩、リン酸塩、シトラート、水酸化物、ジエタノールアミン、モノエタノールアミン、グリシン、メチオニン、ガーゴム、グルタミン酸ナトリウム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、担体または充填剤を含む。担体または充填剤の実例としては、ラクトース、マルトデキストリン、マンニトール、ソルビトール、キトサン、ステアリン酸、キサンタンガム、グアーガム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は界面活性剤を含む。界面活性剤の実例としては、ｄ−アルファトコフェロール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、ドキュセートナトリウム、ベヘン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、ラウリン酸、マクロゴール１５ヒドロキシステアレート、ミリスチルアルコール、リン脂質、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、ポリオキシルグリセリド、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンエステル、ビタミンＥポリエチレン（グリコール）コハク酸塩、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は固化防止剤を含む。固化防止剤の実例としては、リン酸カルシウム（三塩基性）、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、酸化マグネシウム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
医薬組成物とともに使用され得る他の賦形剤としては、例えば、アルブミン、抗酸化剤、抗菌剤、抗真菌剤、生体吸収性ポリマー、キレート剤、制御放出剤、希釈剤、分散剤、溶解促進剤、乳化剤、ゲル化剤、軟膏基剤、浸透促進剤、防腐剤、可溶化剤、溶媒、安定化剤、糖、およびそれらの組み合わせが挙げられる。これらの薬剤の各々の特定例は、例えば、参照により全体が組み込まれるＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．（Ｅｄｓ．）６ｔｈ Ｅｄ．（２００９），Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓに記載されている。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は溶媒を含む。いくつかの態様では、溶媒は、無菌等張食塩水またはデキストロース溶液などの生理食塩水である。いくつかの態様では、溶媒は注射用水である。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、微粒子またはナノ粒子などの粒子形態である。微粒子およびナノ粒子は、ポリマーまたは脂質などの任意の好適な材料から形成され得る。いくつかの態様では、微粒子またはナノ粒子は、ミセル、リポソーム、またはポリマーソームである。
本明細書では、水がいくつかのＡＢＰの分解を促進することができるため、ＡＢＰを含む無水医薬組成物および剤形がさらに提供される。
本明細書で提供される無水医薬組成物および剤形は、無水または低水分含有成分および低水分または低湿度条件を使用して調製することができる。製造、包装、および／または保管中に水分および／または湿度との実質的な接触が予想される場合、ラクトース、および第１級または第２級アミンを含む少なくとも１つの活性成分を含む、医薬組成物および剤形は無水であり得る。
無水の医薬組成物は、その無水の性質が維持されるように調製および保存されるべきである。したがって、無水組成物は、好適な処方キットに含めることができるように、水への暴露を防ぐことが知られている材料を使用して包装することができる。好適な包装の例としては、密閉ホイル、プラスチック、単位用量容器（例えば、小瓶）、ブリスターパック、およびストリップパックが挙げられるが、これらに限定されない。
特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞は、非経口剤形として製剤化される。非経口剤形は、皮下、静脈内（注入およびボーラス注射を含む）、筋肉内、および動脈内を含むがこれらに限定されない様々な経路によって対象に投与することができる。それらの投与は、典型的には、汚染物質に対する対象の自然な防御を回避するため、非経口剤形は、典型的には、無菌であるか、対象への投与前に滅菌することができる。非経口剤形の例としては、注射の準備ができている溶液、注射用の薬学的に許容可能なビヒクルに溶解または懸濁する準備ができている乾燥（例えば、凍結乾燥）製品、注射の準備ができている懸濁液、およびエマルジョンが挙げられるが、これらに限定されない。
非経口剤形を提供するために使用することができる好適なビヒクルは、当業者に周知である。例としては、注射液ＵＳＰのための水；塩化ナトリウム注射液、リンガー注射液、デキストロース注射液、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射液、乳酸加リンガー注射液が挙げられるが、これらに限定されない水性ビヒクル；エチルアルコール、ポリエチレングリコール、およびポリプロピレングリコールが挙げられるが、これらに限定されない水混和性ビヒクル；ならびにコーン油、綿実油、落花生油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、および安息香酸ベンジルが挙げられるが、これらに限定されない非水性ビヒクルが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書で開示されるＡＢＰおよび／または細胞のうちの１つ以上の溶解度を増加させる賦形剤も、非経口剤形に組み込むことができる。
いくつかの実施形態では、非経口剤形は凍結乾燥されている。例示的な凍結乾燥製剤は、例えば、各々参照により全体が組み込まれる、米国特許第６，２６７，９５８号および同第６，１７１，５８６号、ならびにＷＯ２００６／０４４９０８に記載されている。
ヒトの治療では、医師は予防的または治療的治療に応じて、ならびに治療対象に特有の年齢、体重、状態、および他の要因に応じて、医師が最も適切と考える薬量を決定する。
特定の実施形態では、本明細書で提供される組成物は、医薬組成物または単一単位剤形である。本明細書で提供される医薬組成物および単一単位剤形は、予防的または治療的有効量の１つ以上の予防的または治療的ＡＢＰを含む。
障害またはその１つ以上の症状の予防または治療に有効となるＡＢＰ、細胞、または組成物の量は、疾患または状態の性質および重症度、ならびにＡＢＰおよび／または細胞が投与される経路によって異なる。頻度および投与量は、投与される特定の治療法（治療薬または予防薬など）、障害、疾患、または状態の重症度、投与経路、ならびに対象の年齢、身体、体重、応答、および過去の病歴に応じて、各対象に固有の要因によっても異なる。有効用量は、インビトロまたは動物モデルの試験システムから得られた用量反応曲線から推定されてもよい。
当業者によって容易に知られるように、異なる疾患および状態に対して異なる治療有効量が適用可能であり得る。同様に、そのような障害を予防、管理、治療または改善するのに十分であるが、本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞に関連する有害作用を引き起こすには不十分であるか、または低減するのに十分な量も、本明細書で提供される投与量および投与頻度スケジュールに包含される。さらに、本明細書で提供される組成物の複数の投与量を対象に投与する場合、投与量のすべてが同じである必要はない。例えば、対象に投与される投与量は、組成物の予防または治療効果を改善するために増加させてもよく、または特定の対象が経験している１つ以上の副作用を減少させるために低減してもよい。
特定の実施形態では、治療または予防は、１回以上の維持用量に続いて、本明細書で提供されるＡＢＰまたは組成物の１回以上の負荷用量で開始することができる。
特定の実施形態では、ある用量の本明細書で提供されるＡＢＰ、細胞、または組成物を投与して、対象の血液または血清中のＡＢＰおよび／または細胞の定常状態濃度を達成することができる。定常状態濃度は、当業者が利用可能な技術に従って測定することにより決定することができ、または身長、体重、年齢などの対象の身体的特性に基づくことができる。
本開示の他の箇所でより詳細に考察されるように、本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞は、疾患または障害を予防または治療するのに有用な１つ以上の追加の薬剤とともに任意選択的に投与されてもよい。そのような追加の薬剤の有効量は、製剤中に存在するＡＢＰの量、障害または治療のタイプ、および当技術分野で知られているかまたは本明細書に記載されている他の要因に依存し得る。
治療用途
治療用途の場合、ＡＢＰおよび／または細胞は、当技術分野で既知のものおよび上記で考察したものなどの薬学的に許容可能な剤形で哺乳動物、一般的にはヒトに投与される。例えば、ＡＢＰおよび／または細胞は、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、髄腔内、または腫瘍内経路によって、ボーラスとして、または一定期間の連続注入によって、ヒトに静脈内投与されてもよい。ＡＢＰはまた、局所的および全身的治療効果を発揮するために、腫瘍周囲、病変内、または病変周辺経路によって好適に投与される。腹腔内経路は、例えば、卵巣腫瘍の治療では特に有用であり得る。
本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞は、ＨＬＡ−ペプチドが関与するいずれの疾患または状態の治療にも有用であり得る。いくつかの実施形態では、疾患または状態は、抗ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰおよび／または細胞による治療から利益を得ることができる疾患または状態である。いくつかの実施形態では、疾患または状態は腫瘍である。いくつかの実施形態では、疾患または状態は細胞増殖性障害である。いくつかの実施形態では、疾患または状態はがんである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞は、医薬として使用するために提供される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞は、医薬の製造または調製に使用するために提供される。いくつかの実施形態では、医薬は、抗ＨＬＡ−ペプチド ＡＢＰおよび／または細胞から利益を得ることができる疾患または状態の治療用である。いくつかの実施形態では、疾患または状態は腫瘍である。いくつかの実施形態では、疾患または状態は細胞増殖性障害である。いくつかの実施形態では、疾患または状態はがんである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される有効量のＡＢＰおよび／または細胞を対象に投与することによって、疾患または状態の治療を、それを必要とする対象において行う方法が、本明細書で提供される。いくつかの態様では、疾患または状態はがんである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される有効量のＡＢＰおよび／または細胞を対象に投与することによって、それを必要とする対象の疾患または状態を治療する方法が、本明細書で提供され、疾患または状態はがんであり、がんは固形腫瘍と血液腫瘍から選択される。
いくつかの実施形態では、それを必要とする対象における免疫応答の調節を、それを必要とする対象において行う方法が提供され、本方法は、本明細書に開示の有効量のＡＢＰおよび／もしくは細胞または医薬組成物を対象に投与することを含む。
併用療法
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞は、少なくとも１つの追加の治療薬とともに投与される。本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞とともに、任意の好適な追加の治療薬を投与してもよい。追加の治療薬をＡＢＰに融合させることができる。いくつかの態様では、追加の治療薬は、放射線、細胞毒性薬、毒素、化学療法薬、細胞増殖抑制薬、抗ホルモン薬、ＥＧＦＲ阻害薬、免疫調節薬、抗血管新生薬、およびそれらの組み合わせから選択される。いくつかの実施形態では、追加の治療薬はＡＢＰである。
診断方法
対象に由来する細胞上の所定のＨＬＡ−ペプチドの存在を予測および／または検出する方法も提供される。そのような方法は、例えば、本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞による治療に対する応答性を予測および評価するために使用されてもよい。
いくつかの実施形態では、血液または腫瘍試料を対象から得て、ＨＬＡ−ペプチドを発現する細胞の割合を決定する。いくつかの態様では、そのような細胞により発現されるＨＬＡ−ペプチドの相対量を決定する。ＨＬＡ−ペプチドを発現する細胞の割合およびそのような細胞により発現されるＨＬＡ−ペプチドの相対量は、任意の好適な方法により決定することができる。いくつかの実施形態では、フローサイトメトリーを使用して、そのような測定を行う。いくつかの実施形態では、蛍光支援細胞選別（ＦＡＣＳ）を使用して、そのような測定を行う。末梢血中のＨＬＡ−ペプチドの発現を評価する方法については、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ，２００３，２１：８３−９２を参照されたい。
いくつかの実施形態では、対象に由来する細胞上の所定のＨＬＡ−ペプチドの存在の検出は、免疫沈降および質量分析を使用して実施する。これは、原発腫瘍標本などの腫瘍試料（例えば、凍結腫瘍試料）を取得し、免疫沈降を適用して１つ以上のペプチドを単離することにより実施することができる。腫瘍試料のＨＬＡ対立遺伝子は、実験により決定するか、第三者の供給元から得ることができる。１つ以上のペプチドをＭＳに供して、それらの配列（複数可）を決定することができる。その後、ＭＳからのスペクトルをデータベースに対して検索することができる。以下の実施例の節で例を提供する。
いくつかの実施形態では、対象に由来する細胞上の所与のＨＬＡ−ペプチドの存在の予測は、ペプチド配列に適用したコンピューターベースのモデルおよび／または腫瘍試料に由来するペプチド配列を含む１つ以上の遺伝子のＲＮＡ測定（例えば、ＲＮＡ ｓｅｑまたはＲＴ−ＰＣＲ、またはナノストリング）を使用して実施する。使用するモデルは、すべての目的で参照により全体が本明細書に組み込まれる国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０６７１５９に記載されているとおりであり得る。
キット
本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞を含むキットも提供される。キットは、本明細書に記載されているように、疾患または障害の治療、予防、および／または診断に使用されてもよい。
いくつかの実施形態では、キットは、容器と、容器上または容器に関連付けられたラベルまたは添付文書とを含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、小瓶、注射器、およびＩＶ溶液バッグが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成されてもよい。容器は、それ自体で、または別の組成物と組み合わせたときに、疾患または障害を治療、予防、および／または診断するのに効果的な組成物を保持する。容器は無菌のアクセスポートを有してもよい。例えば、容器が静脈注射用の溶液バッグまたは小瓶の場合、容器は、針で刺すことができるポートを有してもよい。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、本明細書で提供されるＡＢＰである。ラベルまたは添付文書は、選択した状態を治療するために組成物が使用されることを示す。
いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）第１の組成物が中に含まれる第１の容器であって、第１の組成物が、本明細書で提供されるＡＢＰおよび／または細胞を含む、第１の容器と、（ｂ）その中に含まれる第２の組成物が中に含まれる第２の容器であって、第２の組成物が、さらなる治療薬を含む、第２の容器と、を含む。この実施形態のキットは、組成物を使用して特定の状態、例えば番を治療することができることを示す添付文書をさらに含むことができる。
あるいは、またはさらに、キットは、薬学的に許容可能な賦形剤を含む第２（または第３）の容器をさらに含んでもよい。いくつかの態様では、賦形剤は緩衝剤である。キットはさらに、フィルター、針、および注射器を含む、商業的なおよび使用者の観点から望ましい他の材料を含んでもよい。
以下は、本発明を実施するための特定の実施形態の実施例である。実施例は、例示の目的のみのために提供され、本発明の範囲を決して限定することを意図するものではない。使用された数値（例えば、量、温度など）に関して正確さを確保するための努力がなされたが、もちろん、いくらかの実験誤差および偏差は許容されるべきである。
本発明の実施は、特に明記しない限り、当技術分野の範囲内のタンパク質化学、生化学、組み換えＤＮＡ技法、および薬理学の従来の方法を使用することになる。そのような技法は、文献で完全に説明されている。例えば、Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ（Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ， １９９３）、Ａ．Ｌ．Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｗｏｒｔｈ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．，ｃｕｒｒｅｎｔ ａｄｄｉｔｉｏｎ）、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８９）、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ｓ．Ｃｏｌｏｗｉｃｋ ａｎｄ Ｎ．Ｋａｐｌａｎ ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ （Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ： Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）、Ｃａｒｅｙ ａｎｄ Ｓｕｎｄｂｅｒｇ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３ｒｄ Ｅｄ．（Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ）Ｖｏｌｓ Ａ ａｎｄ Ｂ（１９９２）を参照されたい。
実施例１：予測されるＨＬＡ−ペプチド複合体の同定
３つの計算ステップを使用して、がん特異的なＨＬＡ−ペプチド標的を同定した。まず、Ｇｅｎｏｔｙｐｅ−Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ（ＧＴＥｘ）Ｐｒｏｊｅｃｔ［１］をとおして利用可能なデータを使用して、大部分の正常な組織で一般に発現しない遺伝子を同定した。次に、Ｔｈｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｅ Ａｔｌａｓ （ＴＣＧＡ） Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｎｅｔｗｏｒｋ（ｈｔｔｐ：／／ｃａｎｃｅｒｇｅｎｏｍｅ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）からのデータを使用して、これらの遺伝子のどれががん試料で異常に発現しているのかを同定した。これらの遺伝子中、すべての目的で参照により全体が本明細書に組み込まれる国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０６７１５９に記載されているように、ＭＳ／ＭＳによって配列決定されたＨＬＡ提示ペプチドでトレーニングされたディープラーニングモデルを使用して、ＭＨＣクラスＩタンパク質によって細胞表面抗原として提示される可能性が高いペプチドを同定した。
通常は正常な組織では発現しない遺伝子を特定するために、Ｇｅｎｏｔｙｐｅ−Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ（ＧＴＥｘ）Ｐｒｏｊｅｃｔ（バージョンＶ６ｐ）から集約された遺伝子発現データを得た。このデータセットには、５０を超える組織型からの８，５５５の死後試料が含まれた。発現を、ＲＮＡ−Ｓｅｑを使用して測定し、ＧＴＥｘ標準パイプライン（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｇｔｅｘｐｏｒｔａｌ．ｏｒｇ／ｈｏｍｅ／ｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎＰａｇｅ）に従って計算処理した。この分析の目的上、遺伝子は、ＧＴＥｘにおいてどの組織にも発現していないことが判明した場合、または精巣、小唾液腺、および子宮頸部（すなわち、免疫特権組織または非必須組織）のうちの１つ以上にのみ発現した場合、正常な組織では発現しないと見なした。また、タンパク質をコードする遺伝子のみを含めるように検索を制限した。ＧＴＥｘおよびＴＣＧＡは計算解析においてヒトゲノムの異なる注釈を使用するため、ＥＮＣＯＤＥマッピングなどの標準的な技法を使用して２つのデータセット間でマッピングすることができない遺伝子は除外した。
腫瘍特異性を確保するために厳格であった正常な組織で発現した除外した遺伝子に対して基準を定義しようとしたが、散発性の低レベルの転写またはリードミスアライメントなどの潜在的なアーチファクトから生じる非ゼロ測定値は除外しなかった。したがって、遺伝子は、その発現の中央値がＧＴＥｘ試料全体で０．５ＲＰＫＭ（マッピングされたリード百万単位あたりの転写物１キロベースあたりのリード（Ｒｅａｄｓ Ｐｅｒ Ｋｉｌｏｂａｓｅ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｐｅｒ Ｍｉｌｌｉｏｎ ｎａｐｐｅｄ ｒｅａｄｓ））未満であり、１０ＲＰＫＭ超で決して発現されず、すべての必須組織試料全体で２つ以下の試料において５ＲＰＫＭで発現された場合、非免疫特権組織または必須組織において正常に発現されないとみなした。発現している可能性はあるが、ＧＴＥＸ分析パイプラインを使用してＲＮＡ−Ｓｅｑにより測定できない遺伝子を除外するために、すべての試料中の０ＲＰＫＭで測定された遺伝子も除外した。これらの基準により、大部分の正常な組織では発現していないように見えるタンパク質コード遺伝子のセットが残った。
次に、これらの遺伝子のどれが腫瘍で異常に発現しているかの同定を試みた。ＴＣＧＡ（Ｄａｔａ Ｒｅｌｅａｓｅ ６．０）から入手可能な１１，０９３個の試料を調べた。遺伝子は、少なくとも５つの試料中、少なくとも５ＦＰＫＭ（マッピングされたリード百万単位あたりの転写物１キロベースあたりの断片（Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ Ｐｅｒ Ｋｉｌｏｂａｓｅ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｐｅｒ Ｍｉｌｌｉｏｎ ｍａｐｐｅｄ ｒｅａｄｓ）の発現で観察された場合に、発現したとみなした。通常、１つの断片は２つのマップされたリードからなるため、５ＦＰＫＭは約１０ ＲＰＫＭに相当する。
ＧＴＥｘデータは広範囲の組織型にまたがっているが、人体に存在するすべての細胞タイプが含まれているわけではない。したがって、ＤＡＶＩＤ ｖ ６．８［２］を使用して遺伝子の生物学的機能カテゴリーのリストをさらに調査し、文献の見直しと併せてこの分析を使用して、遺伝子リストをさらにフィルタリングした。免疫細胞で発現する可能性が高い遺伝子（例えば、インターフェロンファミリー遺伝子）、眼関連遺伝子（例えば、ＦＡＮＴＯＭ５データセットの網膜、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｒｏｔｅｉｎａｔｌａｓ．ｏｒｇ）、口および鼻で発現する遺伝子（例えば、嗅覚遺伝子および味覚受容体）、ならびに概日周期に関連する遺伝子を除去した。ヒストン遺伝子を含む大型の遺伝子ファミリーの一部である遺伝子も除外し、これは、これらの発現が、配列の相同性を理由に、ＲＮＡ配列決定により正確に評定することが難しいためである。
次に、ＴＣＧＡ試料全体の残りの遺伝子の発現の分布を調査した。既知のがん精巣抗原（ＣＴＡ）、例えば、遺伝子のＭＡＧＥファミリーを調査したとき、対数空間でのこれらの遺伝子の発現は、一般に、ＴＣＧＡにおける試料全体の二峰性分布によって特徴付けられたことが観察された。この分布には、より低い発現値の周囲の左モードと、より高い発現レベルでの右モード（または太い尾部）とが含まれた。この発現パターンは、いくらかの最小の発現がすべての試料でベースライン時に検出され、エピジェネティックな調節異常を受けている腫瘍のサブセットでより高い遺伝子発現が観察される生物学的モデルと一致している。ＴＣＧＡ試料全体にわたる各遺伝子の発現の分布を確認し、有意な右手尾部のない単峰性の分布のみを観察したものを破棄した。これは、この分布が（非限定的な例として）正常な組織における発現のベースラインが低い遺伝子を特徴付ける可能性が高いためである。
これにより、精巣特異的な生物学的プロセスおよび発生に関与する遺伝子が高度に富化された６３０個超の遺伝子の残りの遺伝子リストが得られた。これらの遺伝子の多くは異なるアイソフォームを産生するため、これらの遺伝子を、ＵＮＩＰＲＯＴマッピングサービスを使用して１，２００個超のタンパク質にマッピングした。厳しい計算基準を満たす遺伝子に加えて、既に科学文献でがん精巣抗原として同定されているいくつかの遺伝子を追加した。
ＭＨＣクラスＩタンパク質によって細胞表面抗原として提示される可能性が高いペプチドを同定するために、スライディングウィンドウを使用して、これらのタンパク質の各々をその構成８〜１１アミノ酸配列に解析した。これらのペプチドおよびその隣接配列をＨＬＡペプチド提示ディープラーニングモデルで処理し、５ＴＰＭ（細胞１個あたり１個の転写物におよそ対応する）［３］〜２００ＴＰＭ（すなわち、高レベルの発現）の間の発現レベルでの各ペプチドの提示の可能性を計算した。ペプチドは、発明者らのモデルにより計算したその提示の確率が、発現５ＴＰＭ以上のＴＣＧＡデータセット中１０人以上の患者で０．１を超えた場合、推定ＨＬＡ−ペプチド標的とみなした。
結果を表Ａに示す。この実施例から、約４００個の遺伝子および２５個の分析したＨＬＡ対立遺伝子にわたってＨＬＡ−ペプチド標的は１，８００個超あった。明確にするために、各ＨＬＡ−ペプチドに、表Ａにおいて標的番号を割り当てた。例えば、ＨＬＡ−ペプチド標的１はＨＬＡ−Ａ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ、ＨＬＡ−ペプチド標的２はＨＬＡ−Ａ＊２９：０２＿ＦＶＱＥＮＹＬＥＹなどである。
全体として、このＨＬＡ−ペプチド標的のリストは、がん特異的標的の知識の状態に大きく貢献すると期待される。要約すると、本実施例では、ＡＢＰ研究開発の標的候補として追求できる腫瘍特異的ＨＬＡ−ペプチドの大型のセットが提供される。
参考文献
Figure 2021500852
実施例２：予測ＨＬＡ−ペプチド複合体の初期検証
上記のアプローチから生じる予測ＨＬＡ−ペプチド標的を検証するための初期評定として、ＨＬＡ結合親和性測定、ＨＬＡペプチド質量分析、およびＴ細胞応答の測定を含む様々なアッセイ技法によって以前に同定されている標的の報告について、公開データベースおよび選定した文献を審査した。ＩＥＤＢ（Ｖｉｔａら、２０１５）およびＴａｎｔｉｇｅｎ（Ｏｌｓｅｎら、２０１７）という、ＨＬＡ−ペプチド対のアッセイ結果注釈を含む２つの包括的なデータベースを使用した。コンピューターで予測された標的のうち１９個（遺伝子全体で１５個が固有）がデータベースで以前に報告されており、その多くが、長年がん免疫学の研究対象となっている遺伝子（例えば、がん精巣抗原）であった。表Ｂを参照されたい。
（表Ｂ）
Figure 2021500852
上記の公開データベースで見られないペプチドについては、追加の限定的な文献の見直しを行った。表Ｃに示す、以下のペプチドを同定した。
（表Ｃ）
Figure 2021500852
表Ｃからの注目すべき例の１つは、ＫＫＬＣ１ ＨＬＡ−Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹである。Ｋｉｔａ−ｋｙｕｓｈｕ肺がん抗原−１（ＫＫ−ＬＣ−１；ＣＴ８３）は、多くの異なるがん種で広く発現されることが示されているがん精巣抗原（ＣＴＡ）である。もともとは、ＫＫ−ＬＣ−１ペプチド７６−８４−ＲＱＫＲＩＬＶＮＬにクローニングされたＣＴＬに基づいて発見された（Ｆｕｋｕｙａｍａら、２００６）。より最近では、Ｓｔｅｖａｎｏｖｉｃら、２０１７により、子宮頸がん患者のＣＴＬによって認識されるＫＫ−ＬＣ−１からの別のペプチド、予測ペプチドＫＫ−ＬＣ−１ ５２−６０ ＮＴＤＮＮＬＡＶＹが明らかとなった。このＣＴＬに対応するＴＣＲは、現在、ＮＩＨウェブサイトｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｏｔｔ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ／ｅ−１５３−２０１６／に列挙されており、ペプチドは、すべての目的について参照により全体が本明細書に組み込まれるＷＯ ２０１７／０８９７５６ Ａ１に列挙されている。
この実施例は、表Ａの予測ＨＬＡ−ペプチド標的の期待値を強調する。どのＣＴＡ ＨＬＡ−ペプチド標的が以前に知られているかに関する情報は予測に組み込まれていないが、分析により、文献に記載されている多くの標的が得られ、新規の標的の多くは、同様に実験的に検証することができ、また最終的には１つ以上のＡＢＰの標的として機能できることが示される。
参考文献
Figure 2021500852
実施例３：予測ＨＬＡ−ペプチド複合体の同定
次に、７個の遺伝子のタンパク質からのＨＬＡ−ペプチド標的ＡＦＰ、ＫＫＬＣ−１、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＲＴ−１、ＮＹ−ＥＳＯ−１、およびＷＴ１を同定した。
ＭＨＣクラスＩタンパク質によって細胞表面抗原として提示される可能性が高いペプチドを同定するために、スライディングウィンドウを使用して、これらのタンパク質の各々をその構成８〜１１アミノ酸配列に解析した。次に、これらのペプチドおよびその隣接配列をＨＬＡペプチド提示ディープラーニングモデル（ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０６７１５９および上記の実施例１を参照されたい）で処理し、６４個のクラスＩ ＨＬＡタイプの各々について、１００ＴＰＭ（高発現）の発現レベルでの各ペプチドの提示の可能性を計算した。各ＨＬＡが同じ分布からのスコアを提示するように、各ＨＬＡの分位点正規化モデルスコアによるトレーニングデータバイアスに起因して、より強力なスコアがある特定のＨＬＡに付与され得る、可能性のあるモデリングアーチファクトを除去した。正規化には、ＨＬＡ対立遺伝子配列の優先傾向を制御するために、７個の標的遺伝子および５０個のランダムに選択した遺伝子を含めた。モデル正規化スコアが、文献において提示されることが分かっているペプチドの提示スコアに基づいて選択した０．０００７５より高い場合、遺伝子は提示される可能性が高いとみなした。
結果を表Ａ（続き）に示す。実施例１で説明したように、各ＨＬＡ−ペプチド標的には標的番号を割り当てた。
実施例４：予測ＨＬＡ−ペプチド複合体の検証
表ＡのＨＬＡ−ペプチド複合体からのペプチドの存在を、それぞれのＨＬＡ−ペプチド複合体からの所与のＨＬＡ対立遺伝子各々について陽性であることが分かっている腫瘍試料に対する質量分析（ＭＳ）を使用して決定した。
ＨＬＡ−ペプチド分子の単離を、組織試料（１〜４）の溶解および可溶化後に、伝統的な免疫沈降（ＩＰ）法を使用して行った。新鮮な凍結組織をまず液体窒素で凍結し、粉砕した（ＣｒｙｏＰｒｅｐ；Ｃｏｖａｒｉｓ，Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）。溶解緩衝液（１％ＣＨＡＰＳ、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤、ｐＨ＝８）を添加して組織を可溶化し、プロテオミクスおよびゲノム配列決定の取組みのために試料の１／１０を分取した。試料の残りを４℃で２時間回転させて、残屑をペレット化した。澄ませた溶解物をＨＬＡ特異的ＩＰに使用した。
ＨＬＡ分子に特異的である、ビーズに結合した抗体を使用して、免疫沈降を行った。汎クラスＩ ＨＬＡ免疫沈降には、抗体Ｗ６／３２（５）を使用し、クラスＩＩ ＨＬＡ−ＤＲには、抗体Ｌ２４３（６）を使用した。一晩のインキュベーションの間に、抗体をＮＨＳ−セファロースビーズに共有結合させた。共有結合させた後、ビーズを洗浄し、ＩＰ用に分取した。抗体のタンパク質Ａ／Ｇ捕捉、磁気ビーズ単離、または免疫沈降に一般的に使用される他の方法を含むがこれらに限定されない、ならなるＩＰ方法を使用することができる。
溶解物を抗体ビーズに添加し、免疫沈降のために４℃で一晩回転させた。免疫沈降後、ビーズを溶解物から除去し、溶解物を、さらなるＩＰを含むさらなる実験のために保存した。ＩＰビーズを洗浄して、非特異的に結合したものを除去し、ＨＬＡ／ペプチド複合体を２Ｎ酢酸でビーズから溶出させた。分子量スピンカラムを使用して、タンパク質成分をペプチドから除去した。得られたペプチドは、ＳｐｅｅｄＶａｃ蒸発により乾固させ、ＭＳ分析の前に−２０℃で保存してもよい。
乾燥ペプチドをＨＰＬＣ緩衝液Ａ中で再構成し、質量分析計への勾配溶出のためにＣ−１８マイクロキャピラリーＨＰＬＣカラムにロードした。１８０分の０から４０％のＢ（８０％アセトニトリル中、溶媒Ａ−０．１％ギ酸、溶媒Ｂ−０．１％ギ酸）の勾配を使用して、ペプチドをＦｕｓｉｏｎ Ｌｕｍｏｓ質量分析計（Ｔｈｅｒｍｏ）に溶出させた。ペプチドの質量／電荷（ｍ／ｚ）のＭＳ１スペクトルを、解像度が１２０，０００のＯｒｂｉｔｒａｐ検出器で収集し、２０回のＭＳ２スキャンを続けた。ＭＳ２イオンの選択は、データ依存取得モード、およびイオンのＭＳ２選択後３０秒の動的除外を使用して行った。ＭＳ１スキャンの自動ゲイン制御（ＡＧＣ）は、４×１０５に、ＭＳ２スキャンに対しては１×１０４に設定した。ＨＬＡペプチドを配列決定するため、＋１、＋２、および＋３の電荷状態をＭＳ２断片化に選択し得る。これは一般に標的化質量分析法と称され、定性的な様式または定量的のいずれかで行った。定量法では、重い標識アミノ酸を使用して合成するために、各ペプチドを定量する必要がある（Ｄｏｅｒｒ ２０１３）。
各分析からのＭＳ２スペクトルを、Ｃｏｍｅｔ（７〜８）を使用してタンパク質データベースに対して検索し、ペプチド同定を、Ｐｅｒｃｏｌａｔｏｒ（９〜１１）を使用するか、またはＰＥＡＫＳの統合されたデノボ配列決定およびデータベース検索アルゴリズムを使用してスコアリングした。
ＨＬＡ−ペプチド複合体からのペプチドの存在を、それぞれのＨＬＡ−ペプチド複合体からの所与のＨＬＡ対立遺伝子各々について陽性であることが分かっている様々な腫瘍試料に対する質量分析（ＭＳ）を使用して決定した。選択したＨＬＡ拘束性ペプチドの代表的なスペクトルデータを図６および７に示す。各スペクトルには、ペプチド断片化情報、およびＨＬＡタイプを含む患者試料に関連する情報が含まれる。
アミノ酸の自発的修飾は、多くのアミノ酸に生じ得る。システインは、この修飾の影響を特に受けやすく、酸化され得るか、または遊離システインで修飾され得る。加えて、Ｎ末端グルタミンアミノ酸は、ピログルタミン酸に変換され得る。これらの修飾の各々は、質量の変化を生じさせるので、ＭＳ２スペクトル中で明確に割り当てることができる。これらのペプチドをＡＢＰの調製に使用するには、ペプチドに質量分析計で見られるのと同じ修飾を含める必要がある。これらの修飾は、簡素な実験室およびペプチド合成法を使用して創出することができる（Ｌｅｅら、参考文献１４）。
参考文献
Figure 2021500852
Figure 2021500852
２０１７）または予測される断片イオンを分析するための他の方法。
予測されたＨＬＡ−ペプチド複合体からの複数のペプチドの存在を、それぞれのＨＬＡ−ペプチド複合体からの所与のＨＬＡ対立遺伝子各々について陽性であることが分かっている様々な腫瘍試料に対する質量分析（ＭＳ）を使用して決定する。
アミノ酸の自発的修飾は、多くのアミノ酸に生じ得る。システインは、この修飾の影響を特に受けやすく、酸化され得るか、または遊離システインで修飾され得る。加えて、Ｎ末端グルタミンアミノ酸は、ピログルタミン酸に変換され得る。これらの修飾の各々は、質量の変化を生じさせるので、ＭＳ２スペクトル中で明確に割り当てることができる。これらのペプチドをＡＢＰの調製に使用するには、ペプチドに質量分析計で見られるのと同じ修飾を含める必要がある。これらの修飾は、簡素な実験室およびペプチド合成法を使用して創出することができる（Ｌｅｅら、参考文献１４）。
参考文献
Figure 2021500852
Figure 2021500852
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実施例６：ＨＬＡ−ペプチド複合体に結合する抗体またはその抗原結合断片の同定
概要
次の例は、腫瘍特異的ＨＬＡ拘束性ペプチドを認識する抗体（Ａｂ）を特定できることを示している。そのようなＡｂによって認識される全体的なエピトープは、一般に、ペプチドとその特定のペプチドを提示するＨＬＡタンパク質との両方の複合表面を含む。ＨＬＡ複合体をペプチド特異的に認識するＡｂは、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）様ＡｂまたはＴＣＲ模倣Ａｂと称されることが多い。抗体発見のために選択されたＨＬＡ−ペプチド標的抗原は、ＨＬＡ−Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（「Ｇ２」と指定される、表Ａの標的Ｘ）およびＨＬＡ−Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（「Ｇ７」と指定される、表Ａの標的Ｘ）である。これらのＨＬＡ−ペプチド抗原の細胞表面提示は、実施例４に記載されているように、腫瘍試料から得られたＨＬＡ複合体の質量分析により確認した。
ＨＬＡ−ペプチド標的複合体およびカウンタースクリーンペプチド−ＨＬＡ複合体の生成、ならびに安定性分析
ＨＬＡ−ペプチド標的であるＧ２およびＧ７、ならびにカウンタースクリーン陰性対照ペプチド−ＨＬＡを、確立された方法を使用して、ＨＬＡ分子の条件付きリガンドを使用して、組換えにより産生させた。合計で、Ｇ２およびＧ７標的の各々について、１８個のカウンタースクリーンＨＬＡ−ペプチドを生成した。
ファージライブラリースクリーニングの全体設計
Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ Ｂｉｏ Ｉｎｃの極めて多様なＳｕｐｅｒＨｕｍａｎ ２．０合成未感作ｓｃＦｖライブラリー（超安定かつ多様なＶＨ／ＶＬ足場上の全多様性７．６ｅ１０）をファージディスプレイに使用した。ファージライブラリーは、１８個のプールされた陰性ｐＨＬＡ複合体（「完全プール」）で最初に枯渇し、続いて、確立されたプロトコルを使用して標的ｐＨＬＡ複合体によりビーズベースのファージパニングを３〜４回行って、ＨＬＡ−ペプチド標的であるそれぞれＧ２およびＧ７に対するｓｃＦｖバインダーを同定した。ファージ力価をパニングの各ラウンドで決定して、非結合ファージの除去を確立した。ファージＥＬＩＳＡの結果を図１４Ａおよび１４Ｂに示す。Ｇ２およびＧ７標的の各々について、後のラウンドのパニングにおいて結合ファージの富化があった。出力ファージ上清も、ＥＬＩＳＡによって標的結合について試験した。
Ｇ２標的の標的スクリーン１の設計を図８に示す。同様に、Ｇ７標的の標的スクリーン２の設計を図１１に示す。簡単に言えば、各標的について、３つの「ミニプール」カウンタースクリーンペプチドを、標的と同じＨＬＡ対立遺伝子に結合し、また著しく異なる、荷電、バルク、芳香族、または疎水性残基などのＡＢＰ向きの特徴を有する能力に関して選択した。Ｇ２については図９Ａを、Ｇ７については図１３Ａを参照されたい。加えて、明確な拘束性ペプチド配列および異なるＨＬＡ対立遺伝子を特徴とする追加のカウンタースクリーンペプチド−ＨＬＡ複合体を生成した。１５個の追加のカウンタースクリーンＨＬＡ−ペプチドと３つの「ミニプール」ＨＬＡ−ペプチドにより、合計１８個のカウンタースクリーンＨＬＡ−ペプチド複合体の「完全プール」が形成された。
ペプチド−ＨＬＡ複合体の生成
様々なヒト白血球抗原（ＨＬＡ）のαおよびβ２ミクログロブリン鎖は、確立された手順（Ｇａｒｂｏｃｚｉ、Ｈｕｎｇ、およびＷｉｌｅｙ、１９９２）を使用してＢＬ２１適格大腸菌細胞（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）中で別々に発現した。自動誘導後、細胞を、Ｂｕｇｂｕｓｔｅｒ（登録商標）中の超音波処理およびベンゾナーゼタンパク質抽出試薬（Ｎｏｖａｇｅｎ）を介して溶解させた。得られた封入体を、０．５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００（５０ｍＭのトリス、１００ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ）を含む洗浄緩衝液または含まない洗浄緩衝液中で洗浄および超音波処理した。最後の遠心分離後、封入体ペレットを、尿素溶液（８Ｍの尿素、２５ｍＭのＭＥＳ、１０ｍＭのＥＤＴＡ、０．１ｍＭのＤＴＴ、ｐＨ６．０）に溶解させた。Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイ（Ｂｉｏｒａｄ）を使用して濃度を定量し、封入体を−８０℃で保存した。
ＨＬＡ複合体を、確立された手順を使用して、組換えによって生成されたサブユニットおよび合成によって得られたペプチドの再折り畳みによって得た（Ｇａｒｂｏｃｚｉら、１９９２）。簡単に言うと、精製されたαおよびβ２ミクログロブリン鎖を、選択した拘束性ペプチドを含む再折り畳み緩衝液（ｐＨ８．０の１００ｍＭのトリス、４００ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ、２ｍＭのＥＤＴＡ、５０ｍＭの酸化グルタチオン、５ｍＭの還元グルタチオン、プロテアーゼ阻害剤錠剤）中で再折り畳みさせた。いくつかの実験では、選択した拘束性ペプチドは条件付きリガンドペプチドであり、これは、条件刺激に露出すると切断可能である。いくつかの実験では、選択した拘束性ペプチドはＧ２またはＧ７標的ペプチド、またはカウンタースクリーンペプチドであった。再折り畳み溶液は、Ｖｉｖａｆｌｏｗ ５０または５０Ｒクロスフローカセット（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｓｔｅｄｉｍ）を用いて濃縮した。ｐＨ８．０の２０ｍＭのトリス中での３ラウンドの透析を、各々少なくとも８時間行った。抗体スクリーニングおよび機能アッセイのために、再折り畳みされたＨＬＡを、ＢｉｒＡビオチンリガーゼ（Ａｖｉｄｉｔｙ）を使用して酵素的にビオチン化した。再折り畳みされたタンパク質複合体を、Ａｋｔａ ＦＰＬＣシステムに取り付けたＨｉＰｒｅｐ（１６／６０ Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ２００）サイズ排除カラムを使用して精製した。ビオチン化は、再折り畳みされたタンパク質を、過剰なストレプトアビジンとともに、ＳＤＳ−ＰＡＧＥの前に室温で１５分間インキュベートすることにより、非還元条件下のストレプトアビジンゲルシフトアッセイにおいて確認した。得られたペプチド−ＨＬＡ複合体を分取し、−８０℃で保存した。
ペプチド−ＨＬＡ複合体の安定性分析
ＨＬＡ−ペプチドの安定性を、条件付きリガンドペプチド交換および安定性ＥＬＩＳＡアッセイにより評定した。簡単に言うと、条件付きリガンド−ＨＬＡ複合体を、カウンタースクリーンまたは試験ペプチドの存在下または非存在下で±条件刺激に供した。条件刺激への露出により、条件付きリガンドがＨＬＡ複合体から切断され、その結果、ＨＬＡ複合体が解離する。カウンタースクリーンまたは試験ペプチドは、ＨＬＡ複合体のα１／α２溝に安定して結合する場合、ＨＬＡ複合体を解離から「救助」する。
ＨＬＡ安定性ＥＬＩＳＡは、確立された手順を使用して行った。（Ｃｈｅｗ ｅｔ ａｌ．，２０１１、Ｒｏｄｅｎｋｏ ｅｔ ａｌ．，２００６）３８４ウェルの透明な平底ポリスチレンマイクロプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に、ＰＢＳ中２μｇ ｍＬ−１で５０μｌのストレプトアビジン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を事前コーティングした。３７℃で２時間インキュベートした後、ウェルをＰＢＳ中０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０（４回、５０μＬ）の洗浄緩衝液で洗浄し、５０μｌの遮断緩衝液（ＰＢＳ中２％ＢＳＡ）で処理し、３０分間室温でインキュベートした。続いて、２０ｍＭのトリスＨＣｌ／５０ｍＭのＮａＣｌで３００倍に希釈した２５μｌのペプチド交換試料を４連で添加した。試料を１５分間室温でインキュベートし、０．０５％Ｔｗｅｅｎ洗浄緩衝液（４×５０μＬ）で洗浄し、室温で２５μＬのＨＲＰコンジュゲート抗β２ｍ（ＰＢＳ中１μｇ ｍＬ−１）を用いて１５分間処理し、０．０５％Ｔｗｅｅｎ洗浄緩衝液（４×５０μＬ）で洗浄し、２５μＬのＡＢＴＳ溶液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で１０〜１５分間発達させ、１２．５μＬの停止緩衝液（０．１Ｍクエン酸中の０．０１％アジ化ナトリウム）を添加して反応を停止させた。その後、分光光度計（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ｉ３ｘ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して、４１５ｎｍで吸光度を測定した。
Ｇ２カウンタースクリーン「ミニプール」およびＧ２標的の結果を図９Ｂに示す。３つのカウンタースクリーンペプチドおよびＧ２ペプチドはすべて、ＨＬＡ複合体を解離から救助した。
追加のＧ２「完全」プールカウンタースクリーンペプチドの結果を図１０に示し、これらも安定なＨＬＡ−ペプチド複合体を形成することが実証される。
Ｇ７カウンタースクリーン「ミニプール」およびＧ７標的の結果を図１３Ｂに示す。３つのカウンタースクリーンペプチドおよびＧ７ペプチドはすべて、ＨＬＡ複合体を解離から救助した。
追加のＧ７「完全」プールカウンタースクリーンペプチドの結果を図１２に示し、これらも安定なＨＬＡ−ペプチド複合体を形成することが実証される。
ファージライブラリースクリーニング
ファージライブラリのスクリーニングを、上記の全体的なスクリーニング設計に従って実行した。各ペプチド−ＨＬＡ複合体へのｓｃＦｖバインダーを同定するために、３〜４ラウンドのビーズベースのパニングを行った。パニングの各ラウンドについて、開始ファージのアリコートを入力力価測定のために取っておき、残りのファージをＤｙｎａｂｅａｄ Ｍ−２８０ストレプトアビジンビーズ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に対して３回枯渇させた後、１００ピコモルのプールされた陰性ペプチド−ＨＬＡ複合体と事前に結合させたストレプトアビジンに対して枯渇させた。パニングの最初のラウンドでは、ストレプトアビジンビーズに結合した１００ピコモルのペプチド−ＨＬＡ複合体を、枯渇させたファージとともに２時間室温で回転させながらインキュベートした。１倍ＰＢＳＴ（ＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０）中０．５％ＢＳＡでの５分間の洗浄を３回、続いて１倍ＰＢＳ中０．５％ＢＳＡでの５分間の洗浄を３回用いて、ペプチド−ＨＬＡ複合体結合ビーズに結合していないファージを除去した。洗浄したビーズから結合したファージを溶出させるために、１ｍｌの０．１Ｍ ＴＥＡを添加し、回転させながら室温で１０分間インキュベートした。溶出したファージをビーズから収集し、ｐＨ７．５、０．５ｍｌの１Ｍトリス−ＨＣｌで中和した。次に、中和したファージを使用して対数増殖ＴＧ−１細胞を感染させ（ＯＤ６００＝０．５）、３７℃で１時間感染させた後、後続のパニングラウンドのための出力力価および細菌成長用に、細胞を、１００μｇ／ｍｌのカルベニシリンおよび２％グルコース（２ＹＴＣＧ）寒天を含む２ＹＴ培地にプレーティングした。後続ラウンドのパニングでは、表１に示すように、選択抗原濃度が低下した一方、洗浄は、量および洗浄時間の長さが増加した。
（表１）ファージライブラリスクリーニング戦略
Figure 2021500852
個々のｓｃＦｖをファージからクローニングし、ＤＮＡサンガー法（「配列固有バインダー」）で配列決定した。個々のｓｃＦｖは大腸菌でも発現され、個々の粗ｓｃＦｖを含む大腸菌からの細胞周辺抽出物（ＰＰＥ）をｓｃＦｖ ＥＬＩＳＡに供した。
ｓｃＦｖ細胞周辺抽出物（ＰＰＥ）のＥＬＩＳＡ
パニングの最終ラウンドで得られ、大腸菌で発現されたファージからクローニングされた個々のｓｃＦｖを、以下のようにｓｃＦｖ ＰＰＥ ＥＬＩＳＡに供した。
９６ウェルおよび／または３８４ウェルのストレプトアビジンコーティングプレート（Ｐｉｅｒｃｅ）をＨＬＡ緩衝液中の２ｕｇ／ｍｌのペプチド−ＨＬＡ複合体でコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。プレートを、各ステップの合間にＰＢＳＴ（ＰＢＳ＋０．０５％）で３回洗浄した。抗原でコーティングしたプレートを、ＰＢＳ中３％ＢＳＡ（遮断緩衝液）を用いて１時間室温で遮断した。洗浄後、ｓｃＦｖ ＰＰＥをプレートに添加し、室温で１時間インキュベートした。洗浄後、遮断緩衝液中のマウス抗ｖ５抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を添加してｓｃＦｖを検出し、室温で１時間インキュベートした。洗浄後、ＨＲＰ−ヤギ抗マウス抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を添加し、室温で１時間インキュベートした。次に、プレートをＰＢＳＴで３回、ＰＢＳで３回洗浄してから、ＴＭＢ １−ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌ Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（Ｓｅｒａｃａｒｅ）でＨＲＰ活性を検出し、２Ｎの硫酸で中和した。
陰性ペプチド−ＨＬＡ複合体のカウンタースクリーニングのために、コーティング抗原を除き、上記のとおりにｓｃＦｖ ＰＰＥ ＥＬＩＳＡを行った。ＨＬＡミニプールは、一緒にプールされ、特定のペプチド−ＨＬＡ複合体への結合を比較するためにストレプトアビジンプレート上にコーティングされた、各２ｕｇ／ｍｌの３個の陰性ペプチド−ＨＬＡ複合体からなった。ＨＬＡビッグプールは、一緒にプールされ、特定のペプチド−ＨＬＡ複合体への結合を比較するためにストレプトアビジンプレート上にコーティングされた、各２ｕｇ／ｍｌの１８個すべての陰性ペプチド−ＨＬＡ複合体からなった。
粗ＰＰＥとしてのｓｃＦｖ−ＥＬＩＳＡにより、陰性対照ｐＨＬＡと比較して、標的ｐＨＬＡに対する選択性を示したｓｃＦｖを、別個に発現させ精製した。精製したｓｃＦｖを、陰性対照ｐＨＬＡ（「選択的バインダー」）と比較して標的ｐＨＬＡのみに結合することを確認するために、ｓｃＦｖ ＥＬＩＳＡにより滴定した。
クローンは、さらなる生化学および機能分析のために、ＩｇＧ、Ｆａｂ、またはｓｃＦｖにフォーマットした。対応するｐＨＬＡ複合体を用いた結晶化に使用するＦａｂ生産用に選択されたＳｃＦｖクローンを、配列の多様性、結合親和性、選択性、およびＣＤＲ３多様性といういくつかのパラメーターに基づいて選択した。クラスタル（ｃｌｕｓｔａｌ）ソフトウェアを使用して、樹状図を作成し、Ｆａｂクローンの配列多様性を評定した。ＶＨタイプに基づいたｓｃＦｖ配列の標準的な３Ｄ構造も、可能であれば検討した。平衡解離定数（ＫＤ）により決定される結合親和性は、Ｏｃｔｅｔ ＨＴＸ（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）を使用して測定した。特定のペプチド−ＨＬＡ複合体の選択性を、精製したｓｃＦｖのＥＬＩＳＡ滴定を用いて決定し、陰性ペプチドまたはストレプトアビジン単独と比較した。ＫＤおよび選択性のカットオフ値は、各標的セットについて、各セット内のＦａｂに対して得られた値の範囲に基づいて決定した。次に、配列ファミリーおよびＣＤＲ３の最高の多様性を得るように、最終クローンを選択した。
表２は、上記のスクリーニングキャンペーンのヒット率を示す。
（表２）スクリーニングキャンペーンのヒット率
Figure 2021500852
表３は、ＨＬＡ−ペプチド標的ＨＬＡ−Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹに選択的なＧ２ ｓｃＦｖ選択的バインダーのＶＨおよびＶＬ配列を示す。
表４は、ＨＬＡ−ペプチド標的ＨＬＡ−Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹに選択的なＧ２選択的バインダーのＣＤＲ配列を示す。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って決定した。
表５は、ＨＬＡ−ペプチド標的ＨＬＡ−Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡに選択的なＧ７ ｓｃＦｖ選択的バインダーのＶＨおよびＶＬ配列を示す。
表６は、ＨＬＡ−ペプチド標的ＨＬＡ−Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡに選択的なＧ７選択的バインダーのＣＤＲ配列を示す。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って決定した。
実施例７：抗体のＦａｂ／ｓｃＦｖ／ＩｇＧクローンへの再フォーマット
選択したクローンを、次のように、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、またはＩｇＧ形式に再フォーマットした。
Ｆａｂタンパク質断片の構築および産生
選択したＧ２およびＧ７ Ｆａｂの構築物を、哺乳動物発現に対して最適化したベクターにクローニングした。各ＤＮＡ構築物をトランスフェクション用に規模拡大し、配列を確認した。１００ｍＬの一時的な生産を、各ＨＥＫ２９３細胞（Ｔｕｎａ２９３（商標）Ｐｒｏｃｅｓｓ）において完了した。タンパク質を、抗ＣＨ１精製により精製した後、ＨｉＬｏａｄ １６／６００ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００を介したＳＥＣ研磨により精製した。ＳＥＣ研磨に使用した移動相は、２０ｍＭのトリス、５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７であった。最終確認ＣＥ−ＳＤＳ分析を行った。
ｓｃＦｖタンパク質断片の構築および産生
発現プラスミドをＢＬ２１（ＤＥ３）株に形質転換し、４００ｍＬの大腸菌培養中で周辺シャペロンとともに共発現させた。細胞ペレットを再構成した：１０ｍｌ／１ｇのバイオマス（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、０．３ＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、１０％グリセロール、０．７５％ＣＨＡＰＳ、１ｍＭのＤＴＴ）およびリゾチーム、ならびにベンゾナーゼおよびＬａｋｅ Ｐｈａｒｍａプロテアーゼ阻害剤カクテル。細胞懸濁液を振盪台で室温で３０分間インキュベートした。溶解物を、４℃、１３，０００×ｒｐｍで１５分間遠心分離することにより澄ませた。澄ませた溶解物を、ＩＭＡＣ緩衝液Ａ（２０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、Ｐｈ７．５、３００ｍＭのＮａＣｌ／１０％グリセロール／１ｍＭのＤＴＴ）で事前に平衡化した５ｍｌのＮｉ ＮＴＡ樹脂にロードした。樹脂を、１０ＣＶの緩衝液Ａにより（または安定したベースラインに達するまで）、続いて１０ＣＶの８％ＩＭＡＣ緩衝液Ｂ（２０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、Ｐｈ７．５；３００ｍＭのＮａＣｌ／１０％グリセロール／１ｍＭのＤＴＴ／２５０ｍＭのイミダゾール）により洗浄した。標的タンパク質を、１００％ＩＭＡＣ緩衝液Ｂまでの２０ＣＶ勾配で溶出させた。５ＣＶの１００％ＩＭＡＣ Ｂでカラムを洗浄して、タンパク質の完全な除去を確実にした。溶出画分をＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロット（抗Ｈｉｓ）で分析し、適宜プールした。プールを最終製剤緩衝液（２０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、Ｐｈ７．５、３００ｍＭのＮａＣｌ／１０％グリセロール／１ｍＭのＤＴＴ）に対して透析し、最終タンパク質濃度が０．３ｍｇ／ｍｌ超になるまで濃縮し、１ｍＬバイアルに分取して、液体窒素中で瞬間凍結させた。最終ＱＣステップには、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびＡ２８０の測定を含めた。
ＩｇＧタンパク質の構築および産生
Ｇシリーズ抗体の発現構築物を、哺乳動物発現に対して最適化したベクターにクローニングした。各ＤＮＡ構築物をトランスフェクション用に規模拡大し、配列を確認した。１０ｍＬの一時的な産生を、各ＨＥＫ２９３細胞（Ｔｕｎａ２９３（商標）Ｐｒｏｃｅｓｓ）において完了した。タンパク質をタンパク質Ａ精製により精製し、最終ＣＥ−ＳＤＳ分析を行った。
実施例８：ＨＬＡ−ペプチド標的に対するＦａｂクローンの親和性
Ｏｃｔｅｔ Ｑｋｅ（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）で親和性測定を行った。１倍動力学緩衝液中のビオチン化ｐＨＬＡ複合体を、使用した最高濃度の各Ｆａｂに最適なｎｍシフト応答（約０．６ｎｍ）を与える濃度で、ストレプトアビジンセンサーにロードした。ｐＨＬＡ複合体を３００秒間ロードし、その後、リガンドをロードした先端部を１２０秒間動力学緩衝液中で平衡化した。次に、リガンドをロードしたバイオセンサーを、２倍希釈に滴定したＦａｂ溶液に２００秒間浸漬した。開始Ｆａｂ濃度は１００ｎＭ〜２ｕＭの範囲であり、その後はＦａｂのＫＤ値に基づいて最適化した。動力学緩衝液の解離ステップを２００秒間測定した。データを、１：１結合モデルを使用するＦｏｒｔｅＢｉｏデータ分析ソフトウェアを使用して分析した。
図１５Ａおよび１５Ｂは、それぞれ、Ｇ２標的ＦａｂクローンＧ−２Ｐ１Ｈ１１およびＧ７標的ＦａｂクローンＧ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９のＢＬＩ結果を示す。
結果を下の表に示す。
（表７）標的ペプチド−ＨＬＡ複合体に結合するＦａｂの最適化したＯｃｔｅｔ ＢＬＩ親和性測定
Figure 2021500852
実施例９：Ｇ２およびＧ７拘束性ペプチド配列の位置スキャン
選択したＦａｂクローンの接触点として作用するアミノ酸残基を決定するために、Ｇ２およびＧ７拘束性ペプチドの位置スキャンを実行した。
簡単に言うと、Ｇ２またはＧ７ペプチド配列の単一の位置におけるアミノ酸置換を用いて、すべての位置にわたってスキャンした変異体Ｇ２およびＧ７の位置スキャンライブラリーを生成した。所与の位置におけるアミノ酸置換は、アラニン（保存的置換）、アルギニン（正に荷電）、またはアスパラギン酸塩（負に荷電）のいずれかであった。位置スキャン実験用のアミノ酸置換のマップを図１６に示す。アスタリスクは、アミノ酸置換の欠如を示す。
位置スキャンライブラリーメンバーとＨＬＡサブタイプ対立遺伝子とを含むペプチド−ＨＬＡ複合体を、実施例６に記載のとおりに生成した。変異体Ｇ２およびＧ７ペプチドが所望のＨＬＡ対立遺伝子と複合体化できたかどうかを決定するために、得られた複合体の安定性分析を、実施例６に記載の条件付きリガンドペプチド交換およびＥＬＩＳＡを使用して実行した。次に、位置変異体−ＨＬＡ複合体のＦａｂクローンへの結合親和性を、実施例８に記載のように、ＢＬＩにより評定した。
Ｇ２位置変異体−ＨＬＡの安定性色分け図を図１７Ａに示す。［赤色］は非常に低い安定性、［灰色］は低い安定性、［青色］は高い安定性を示す。図１７Ａは、Ｃ末端アミノ酸残基（９位）ならびに第２および第３のＮ末端残基（２位および３位）が、ペプチドをＨＬＡに固定し、それにより三重複合体を安定させるのに重要な残基であったことを示す。
ＦａｂクローンＧ２−Ｐ１Ｈ１１の親和性色分け図を図１７Ｂに示す。色分け図に示されている結合の程度は、ｐＨＬＡへのＦａｂの結合に起因するＢＬＩバイオセンサーのｎｍシフトに基づく。上述のように、［赤色］は結合親和性の不在（−０．０２〜０．１８ｎｍのシフト）を示し、［灰色］は弱い結合親和性（０．１９〜０．２５ｎｍのシフト）を示し、［青色］は高い結合親和性（０．２６〜０．３２ｎｍのシフト）を示す。予想どおり、不安定な複合体（２位、３位、および９位）を生じさせた位置変異は、Ｆａｂ結合も生じさせなかった。図１７Ｂは、３位〜８位に導入された置換により、ＦａｂクローンがＨＬＡ−ペプチド複合体への結合に失敗したことを示している。これらの結果は、ＨＬＡ分子への結合に関与せず、またＨＬＡタンパク質から突出する可能性が高い残基である残基の大部分が、ＦａｂクローンＧ２−Ｐ１Ｈ１１のペプチド特異性に重要であることを示唆する。
Ｇ７位置変異体の安定性色分け図を図１８Ａに示す。１位、２位、６位、および９位は、ＨＬＡ複合体を安定させるために重要であるように見受けられる。
ＦａｂクローンＧ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９の親和性色分け図を図１８Ｂに示す。上述のように、［赤色］は結合親和性の不在（−０．０２〜０．１８ｎｍのシフト）を示し、［灰色］は弱い結合親和性（０．１９〜０．２５ｎｍのシフト）を示し、［青色］は高い結合親和性（０．２６〜０．７２ｎｍのシフト）を示し、１位〜５位がＦａｂクローンのペプチド特異性に重要であることが示される。
実施例１０：生成された抗体は、ＨＬＡ−ペプチド標的を提示する細胞への結合に成功する
ｓｃＦｖクローンＧ２−Ｐ１Ｈ１１およびＧ７−ＥｐからのＩｇＧを、実施例７に記載のように創出した。
ＩｇＧが標的拘束性ペプチドでパルスしたＫ５６２細胞に結合する能力を、フローサイトメトリーにより評定した。
レトロウイルスの産生
Ｐｈｏｅｎｉｘ−ＡＭＰＨＯ細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）、ＣＲＬ−３２１３（商標））を、６ウェルプレートに５×１０５細胞／ウェルでプレーティングし、一晩３７℃でインキュベートした。
Ｐｈｏｅｎｉｘ−ＡＭＰＨＯ細胞を、以下のように所望のＨＬＡサブタイプの発現カセットを含むレトロウイルスベクターでトランスフェクトした。１０μｇのプラスミド、１０μＬのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ＬＴＸ ＰＬＵＳ（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号１５３３８１００）試薬、および１００μＬのＯｐｔｉ−ＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ（商標）、カタログ番号３１９８５０６２）を、室温で１５分間インキュベートした。同時に、８μＬのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅを、９２μＬのＯｐｔｉ−ＭＥＭとともに室温で１５分間インキュベートした。これらの２つの反応物を組み合わせ、１５分間室温で再度インキュベートした後、８００μＬのＯｐｔｉ−ＭＥＭを添加した。培地をＰｈｏｅｎｉｘ細胞から吸引し、５ｍＬの予熱したＯｐｔｉ−ＭＥＭで洗浄した。Ｏｐｔｉ−ＭＥＭを細胞から吸引し、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ混合物を添加した。細胞を３時間３７℃でインキュベートし、３ｍＬの完全培地を添加した。次に、プレートを一晩３７℃インキュベートした。培地をＰｈｏｅｎｉｘ培地に交換し、プレートをさらに２日間３７℃でインキュベートした。
培地を回収し、４５μｍのフィルターに通して清潔な６ウェル皿に濾過した。２０μＬのＰｌｕｓ試薬を各ウイルス懸濁液に添加し、室温で１５分間インキュベートした後、８μＬ／ウェルのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅを添加し、さらに１５分間室温でインキュベートした。
ＨＬＡ−ペプチド標的を発現するＫ５６２細胞の生成および例示的なＩｇＧクローンとの細胞結合
内因性ＭＨＣを欠くＫ５６２細胞に、それぞれＧ２またはＧ７のＨＬＡサブタイプを導入するためにレトロウイルスを形質導入した。ＨＬＡ形質導入Ｋ５６２細胞を、前夜に、６ウェルプレートにおいて、１％ＦＢＳを含有するＩＤＭＥＭ中、５０μＭの標的または陰性対照ペプチド（Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ）でパルスし、標準的な組織培養条件下でインキュベートした。細胞を採集し、ＰＢＳで洗浄し、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ ４５０を用いて１５分間室温で染色した。ＰＢＳ＋１％ＦＢＳでさらに洗浄した後、さまざまな濃度の試験ＩｇＧ（Ｇ２−Ｐ１Ｈ１１またはＧ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９）とともに細胞を再懸濁した。細胞を抗体とともに１時間４℃でインキュベートした。さらに洗浄した後、ＰＥコンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を、３０分間４℃で、１：２００で添加した。ＰＢＳ＋１％ＦＢＳで洗浄した後、細胞をＰＢＳ＋１％ＦＢＳに再懸濁し、フローサイトメトリーで分析した。フローサイトメトリー分析は、Ａｔｔｕｎｅ ＮｘＴ Ｓｏｆｔｗａｒｅを使用するＡｔｔｕｎｅ ＮｘＴ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）で行った。ＦｌｏｗＪｏを使用して、データを分析した。
結果を図１９および２０に示す。Ｇ２−Ｐ１Ｈ１１とＧ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９との両方が、陰性対照ペプチドでパルスしたＨＬＡ形質導入細胞と比較して、標的ペプチドでパルスしたＨＬＡ形質導入Ｋ５６２細胞に選択的に結合した。
インビボでの概念実証
リード抗体またはＣＡＲ−Ｔ構築物をインビボで評価して、ヒト化マウス腫瘍モデルにおける指向腫瘍殺滅を実証する。リード抗体またはＣＡＲ−Ｔ構築物を、ヒト腫瘍およびＰＢＭＣを移植した異種移植腫瘍モデルにおいて評価する。抗腫瘍活性を測定し、対照構築物と比較して、標的特異的な腫瘍殺滅を実証する。
実施例１１：水素／重水素交換および質量分析によるｓｃＦｖ−ｐＨＬＡ構造
水素／重水素交換
２０μＭのＨＬＡ−ペプチドを３倍モル過剰のｓｃＦｖまたはＦａｂフォーマット化ＡＢＰとともに２０分間室温（２０〜２５℃）でインキュベートして、交換実験用の複合体を生成した。Ａｐｏ対照については、ＨＬＡ−ペプチドを、ＡＢＰなしで、等量の５０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭのトリス、ｐＨ ８．０とともにインキュベートした。その後のすべての反応ステップは、Ｃｈｒｏｎｏｓ ４．８．０ソフトウェア（Ｌｅａｐ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｍｏｒｒｉｓｖｉｌｌｅ，ＮＣ）によって制御される自動ＨＤＸ ＰＡＬシステムによって４℃で行った。重水素交換は、３０秒〜３時間の範囲で二連で実行した。５μｌのタンパク質複合体を、Ｈ２Ｏ（０分の対照時点）または指定時間のＤ２Ｏへと１０倍に希釈した後、０．８Ｍの塩酸グアニジン、０．４％酢酸（ｖ／ｖ）、および７５ｍＭのトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン中で３分間クエンチングした。統合されたライン上でのタンパク質消化のために、約５０ピコモルのクエンチしたタンパク質複合体を固定化Ｐｒｏｔｅｉｎ ＸＩＩＩ／Ｐｅｐｓｉｎカラム（ＮｏｖａＢｉｏＡｓｓａｙｓ，Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）に移した。
液体クロマトグラフィー、質量分析、およびＨＤＸ分析
ペプチドのクロマトグラフィー分離を、トラップＣ１８カラム（粒径５μＭおよび直径２．１ｍｍ）および分析用Ｃ１８カラム（粒径１．９μＭおよび直径１ｍｍ）を含むＵｌｔｉＭａｔｅ ３０００ Ｂａｓｉｃ Ｍａｎｕａｌ ＵＨＰＬＣ Ｓｙｓｔｅｍ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して実行した。試料を、１０％アセトニトリル、０．５％ギ酸を用いて、４０μｌ／分の流速で２分間脱塩し、ペプチドを、９５％アセトニトリル、０．５％ギ酸の濃度を漸増させながら４０μｌ／分の流速で溶出させた。質量分析は、Ｏｒｂｉｔｒａｐ Ｆｕｓｉｏｎ Ｌｕｍｏｓ質量分析計（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）で行い、ＥＳＩソースは３７００Ｖの陽イオン電圧に設定した。水素−重水素交換実験を行う前に、各ＨＬＡ−ペプチド複合体のペプチド断片を、データ依存性ＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより分析し、データを、ペプチド前駆体の質量許容値１０ｐｐｍ、断片イオンの質量許容値０．１Ｄａで、ＰＥＡＫＳ Ｓｔｕｄｉｏ（Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ Ｉｎｃ．，Ｗａｔｅｒｌｏｏ，ＯＮ，Ｃａｎａｄａ）を使用して検索した。ＨＬＡ、β２Ｍ、およびペプチドの配列を検索し、おとりデータベース戦略を使用して誤検出率を同定した。水素−重水素実験からのペプチドをＬＣ／ＭＳにより検出し、保持時間枠サイズ０．２２分、７．０ ｐｐｍのエラーで、ＨＤＸ Ｗｏｒｋｂｅｎｃｈ（Ｏｍｉｃｓ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，Ｈｏｎｏｌｕｌｕ，ＨＩ）により分析した。重水素（Ｄ）交換試料では、次に、ペプチドを溶出時間枠内で同定し、質量の差を決定した。Ｄは分子量がＨよりも１大きいため、質量はペプチド骨格で交換された各Ｄについて１増加する。質量および同位体イオンの強度の差により、各ペプチドのＤ％の値が生成された。Ｐｙｍｏｌ（Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）を使用して、重水素取り込みの差を関連するタンパク質結晶構造にマッピングした。Ａｐｏ対照とＡＢＰと間のＤ交換の減少を計算し、アミノ酸によりプロットした。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ７．０（Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）を使用して、統計分析およびグラフ表示を行った。
結晶構造ＰＤＢ ５ｂｓ０にプロットしたｓｃＦｖ Ｇ２−Ｐ１Ｇ０７のデータの例を図２１に示す。結晶構造は、ＵＲＬ ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｒｃｓｂ．ｏｒｇ／ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ／５ｂｓ０（Ｒａｍａｎら）に見ることができる。ＭＳデータで網羅されていない領域を黒色で示し、Ｄ交換が最も減少した領域（ＡＢＰの結合部位を示す）を丸で囲む。明確にするために、結合溝およびヘリックスのみを示す。
連結させた摂動ビューを使用して全体を視覚化したｓｃＦｖクローンＧ２−Ｐ１Ｇ０７の例示的な色分け図を図２２に示す。
所与のＨＬＡ−ペプチド標的について試験したＡＢＰ全体のデータをよりよく比較するために、各ＡＢＰのデータをエクスポートし、色分け図をＥｘｃｅｌで生成した。得られた色分け図を図２３に示し、これは、α１ヘリックス（上）およびα２ヘリックス（下）にわたる色分け図を示している。図２４は、拘束性ペプチド残基１〜９にわたってＡ＊０１０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹについて試験されたすべてのＡＢＰの色分け図を示す。これらの結果は、拘束性ペプチドの残基６〜９およびＨＬＡ残基１５７〜１６０が、その特定のＡＢＰへの結合のためのＡ＊０１０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ ＨＬＡ−ペプチド標的複合体の重要な接点であることを示している。別途記載されない限り、ＨＤＸ色分け図中のすべてのクローン項目はｓｃＦｖ形式である。
実施例１２：ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＴＣＲの分離
図２５は、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合するＴＣＲを単離した実験的ワークフローを示す。簡単に言うと、ＨＬＡ−ペプチド標的に結合する未感作ＣＤ８＋Ｔ細胞をフローサイトメトリーにより単離し、ポリクローナルに拡大させた。拡大後、ＨＬＡ−ペプチド標的複合体に対する細胞の特異性をフローサイトメトリーにより試験した。拡張させた集団の大部分（７５％超）がＨＬＡ−ペプチド標的に特異的であった場合、集団全体を全体として配列決定して、ＴＣＲを同定した。あるいは、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合した細胞を再選別し、再選別後に単離した細胞のみを配列決定した。ＴＣＲ配列を発現ベクターにクローニングし、組換えＴＣＲとしてレシピエントＴ細胞に導入した。評価したＴＣＲの発現およびＴＣＲ組換えＴ細胞による同種ＨＬＡ−ペプチド標的複合体の結合を評価した。
同定したＨＬＡ−ペプチド標的は、ＣＤ８＋Ｔ細胞により容易に認識された
健康なドナーからの末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、以下のように未感作ＣＤ８＋Ｔ細胞について磁気的に富化した。健康なドナーからの白血球アフェレーシス試料を処理することにより、ＰＢＭＣを得た。凍結ＰＢＭＣを解凍し、ビオチン化ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２５、ＣＤ３４、ＣＤ３６、ＣＤ５７、ＣＤ１２３、抗ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ２３５ａ（グリコホリンＡ）、ＣＤ２４４、およびＣＤ４抗体のカクテルとともにインキュベートし、その後、ＰＢＭＣ集団からの除去のために、抗ビオチンマイクロビーズで磁気標識した。富化した未感作ＣＤ８ Ｔ細胞を、標的ペプチドおよび適切なＨＬＡ分子を含む四量体で標識し、生／死および系統マーカーで染色し、図２６に示すゲーティング手順に従ってフローサイトメトリーにより選別した。ＨＬＡ−ペプチド四量体に結合した細胞を単離した。ポリクローナル拡大の後、拡大させたＣＤ８＋Ｔ細胞の特異性を、ＨＬＡ−ペプチドまたは四量体なしの対照で標識することにより再評定した。例示的なＨＬＡ−ペプチド標的であるＢ＊４４：０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬおよびＡ＊０１：０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹのフローサイトメトリーの結果を図２７に示す。ＨＬＡ−ペプチド標的Ａ＊０３：０１＿ＧＶＨＧＧＩＬＮＫのフローサイトメトリーの結果は図２８に示す。
ドナーごとのＨＬＡ−ペプチド標的あたりの単離ＣＤ８＋Ｔ細胞の数、および試験したすべてのドナーにわたるＨＬＡ−ペプチド標的あたりの単離ＣＤ８＋Ｔ細胞頻度の分布を、図２９（２９Ａ（単離ＣＤ８＋Ｔ細胞の数）および２９Ｂ（頻度））。標的あたりの単離された未感作ＣＤ８＋Ｔ細胞の総数は２３〜４１８１個の抗原特異的細胞の範囲であり、これは、既知の免疫原性ウイルス抗原に特異的なＴ細胞の前駆体頻度と一致している。これらの細胞は、配列決定およびさらなる特性評価のための天然ＴＣＲのソースを提供する。
試験したすべてのドナーにわたって要約した標的あたりの単離された標的特異的Ｔ細胞の数を表８に示す。
（表８）すべてのドナーにわたって要約した標的あたりの単離された標的特異的Ｔ細胞の数
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これらのデータは、天然のＣＤ８＋Ｔ細胞が、予測される関連ＭＨＣ分子の状況において標的ペプチドを結合／認識するＨＬＡ適合ヒト血液中に存在するので、同定されたＨＬＡ−ペプチド標的が生物学的に関連性があることを示す。
ＣＤ８＋Ｔ細胞により、ＨＬＡ−ペプチド標的に結合した固有のＴＣＲの多様なレパートリーが得られた
Ｔ細胞の配列決定の基準
拡張させた集団の大部分（７５％超）がＨＬＡ−ペプチド標的に特異的であった場合、集団全体を全体として配列決定して、ＴＣＲを同定した。次に、集団から選択したＴＣＲ配列を発現ベクターにクローニングし、特異性を確認するためにレシピエントＴ細胞にトランスフェクトした。あるいは、ＨＬＡ−ペプチド標的に特異的に結合した細胞を再選別し、再選別後に単離した細胞のみを配列決定した。
配列決定プロトコル
図２６に記載するように単離し拡大させたＴ細胞は、１０ｘ Ｇｅｎｏｍｉｃｓの単一細胞分解能対合免疫ＴＣＲプロファイリングアプローチを使用して配列決定した。具体的には、後の単一細胞ｃＤＮＡ生成および全長ＴＣＲプロファイリングのために、２〜８０００個の生Ｔ細胞を単一細胞エマルジョン中に分割した（定常領域をとおして５’ＵＴＲ、アルファ鎖およびベータ鎖の対合を確保する）。１つのアプローチでは、転写産物の５’末端で分子バーコード化テンプレートスイッチングオリゴを利用し、第２のアプローチでは、３’末端で分子バーコード化定常領域オリゴを利用し、第３のアプローチは、ＲＮＡポリメラーゼプロモーターをＴＣＲの５’末端または３’末端のいずれかに結合させる。これらのアプローチはすべて、単一細胞レベルでのアルファおよびベータＴＣＲペアの同定およびデコンボリューションを可能にするものである。得られたバーコード化ｃＤＮＡ転写産物は、最適化された酵素およびライブラリー構築ワークフローを経て、バイアスを減らし、細胞プール内のクローン型の正確な表現を保証する。ライブラリーは、ＩｌｌｕｍｉｎａのＭｉＳｅｑまたはＨｉＳｅｑ４０００機器（ペアードエンド１５０サイクル）上、細胞あたり約５〜５００００リードの標的配列決定深度で配列決定した。
配列決定リードを、１０ｘにより提供されたソフトウェアＣｅｌｌ Ｒａｎｇｅｒによって処理した。配列決定リードをクロミウム細胞バーコードおよびＵＭＩで標識し、これを使用して、Ｖ（Ｄ）Ｊ転写産物を細胞ごとに組み立てた。次に、組み立てられたコンティグをＥｎｓｅｍｂｌバージョン ８７（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｎｓｅｍｂｌ．ｏｒｇ／）からのＶ（Ｄ）Ｊ参照配列にマッピングすることにより、各細胞の組み立てられたコンティグに注釈を付けた。
クローン型を、固有のＣＤＲ３アミノ酸配列のアルファ鎖ベータ鎖対として定義した。特定のドナーの標的ペプチドあたりのクローン型の最終リストを得るために、２細胞を超える頻度で存在する単一のアルファ鎖および単一のベータ鎖対に対して、クローン型をフィルタリングした。図３０Ａは、試験した各ドナーのＨＬＡ−ペプチド標的あたりの固有のＴＣＲクローン型の数を示す。図３０Ｂは、試験したすべてのドナーにわたって合計した、ＨＬＡ−ペプチド標的あたり固有のクローン型の総数を示す。
再選別した細胞からのユニークなクローン型のＴＣＲ配列
再選別した細胞からの、Ａ＊０１０１＿ＥＶＤＰＨＩＧＨＬＹに特異的なＴＣＲクローン型の注釈付き可変、多様性、接合、および定常領域を、表９で以下に示す。
（表９）再選別した細胞から配列決定したＡ＊０１０１＿ＥＶＤＰＨＩＧＨＬＹに特異的な固有のＴＣＲの注釈付きＴＣＲ配列
Figure 2021500852
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Ａ＊０１０１＿ＥＶＤＰＨＩＧＨＬＹに特異的なＴＣＲクローン型のαおよびβ鎖のＶ（Ｄ）ＪおよびＣＤＲ３配列を表１０に示す。
レシピエントＴ細胞中で確認済みの特異性を示したＴＣＲクローン型の注釈付き可変、多様性、接合、および定常領域を、表１１で以下に示す。
（表１１）レシピエントＴ細胞中の特異性が確認された固有のＴＣＲの注釈付きＴＣＲ配列
Figure 2021500852
レシピエントＴ細胞中で確認済みの特異性を示したＴＣＲクローン型のαおよびβ鎖のＶ（Ｄ）ＪおよびＣＤＲ３配列を表１２に示す。
注釈付き参照α変数（ＴＲＡＶ）、α接合（ＴＲＡＪ）、α定常（ＴＲＡＣ）、β可変（ＴＲＢＶ）、β多様性（ＴＲＢＤ）、β接合（ＴＲＢＪ）、およびβ定常（ＴＲＢＣ）配列の表、ならびにそれらの対応するＥｎｓｅｍｂｌ転写産物（ＥＮＳＴ）参照番号を、表１３に示す。開示のＴＣＲのいずれについても、表９および表１１に開示されている、注釈付き参照配列と、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または９９％超同一であるアミノ酸配列は、本発明に包含される。
（表１３）アルファおよびベータＴＣＲ領域の注釈付き参照遺伝子
Figure 2021500852
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実施例１３：同定したＴＣＲで一時的にトランスフェクトしたＴ細胞株は、それらの標的ＨＬＡ−ペプチド複合体に特異的に結合するが、陰性対照ペプチド−ＨＬＡには結合しない
Ｊｕｒｋａｔ ＴＩＢ−１５２ Ｔ細胞株培養物を、Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ ４Ｄ電気穿孔機を使用して、ヒトＣＤ８を発現するプラスミドと、ＧＦＰレポーター遺伝子を有するＴＣＲ αおよびβ鎖を発現するプラスミドとで同時トランスフェクトした。トランスフェクションに使用したプラスミドを図４および５に記載する。トランスフェクションの２４〜４８時間後、Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞を目的のＴＣＲの発現について分析した。フローサイトメトリーを使用して、ＨＬＡ−ペプチド複合体および対照の感染症ベースのペプチド四量体への結合について、細胞を評定した。ＨＬＡ−ペプチド標的四量体の結合を評価する前に、全集団を単一ＧＦＰ発現生細胞でゲーティングした。図３１は、それぞれのＨＬＡ−ペプチド標的に結合するが、対照ペプチド四量体には結合しない、Ａ＊０２０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ−、Ａ＊０２０１＿ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶ−、Ｂ＊４４０２＿ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬ−、およびＡ＊０１０１＿ＥＶＤＰＩＧＨＬＹ特異的ＴＣＲを発現しているＪｕｒｋａｔ細胞の例を示す。
実施例１４：ウイルスベクターにクローニングしたＴＣＲは、初代ヒトＣＤ８＋Ｔ細胞中で安定して発現され、同種ペプチド標的−ＭＨＣ複合体に結合する
レンチウイルスベクターを、ＨＬＡ−ペプチド標的であるＨＬＡ−Ａ＊０２０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡに特異的なＴＣＲのために生成した。モデルベクターシステムとして、Ｓｙｓｔｅｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ，ＣＡから市販されている第３世代レンチウイルスベース発現ベクターシステムを使用した。図３３を参照されたい。
初代ヒトＣＤ８＋Ｔ細胞を単離し、感染の多重度（ＭＯＩ〜１０）で組換えＴＣＲレンチウイルスにより形質導入した。Ｔ細胞を、四量体染色によるＣＤ８Ｔ細胞上のＴＣＲ発現の評定の前に、１〜２週間、急速拡大プロトコルを使用して拡大させた。
図３２は、形質導入したヒトＣＤ８＋細胞がＨＬＡ−ペプチド標的に結合することを実証するゲーティング戦略およびフローデータを示す。
実施例１５：ＭＨＣ／ペプチド標的反応性ＴＣＲの同定
Ｔ細胞を、患者の血液、リンパ節、または腫瘍から単離する。患者は、ＳＡＴとＨＬＡ適合しており、標的を担持するタンパク質の発現に基づいて選択する。次に、例えば、ＳＡＴ−ＭＨＣ四量体結合細胞を選別することにより、またはＴ細胞とＳＡＴパルス抗原提示細胞とのインビトロの共培養において刺激した活性化細胞を選別することにより、Ｔ細胞を、ＳＡＴ特異的Ｔ細胞について富化する。
ＳＡＴに関連するアルファ−ベータＴＣＲ二量体は、ＳＡＴ特異的Ｔ細胞のＴＣＲの単一細胞配列決定により同定する。あるいは、ＳＡＴ特異的Ｔ細胞のバルクＴＣＲ配列決定を行い、ＴＣＲ対合法を使用して、一致する可能性の高いアルファ−ベータ対を決定する。
あるいはまたは加えて、ＳＡＴ特異的Ｔ細胞を、健康なドナーからの未感作Ｔ細胞のインビトロのプライミングをとおして得ることができる。ＰＢＭＣ、リンパ節、または臍帯血から得られたＴ細胞を、ＳＡＴパルス抗原提示細胞により繰り返し刺激して、抗原経験のあるＴ細胞の分化をプライミングする。次に、ＴＣＲを、患者からのＳＡＴ特異的Ｔ細胞について上に記載したものと同様に同定する。
実施例１６：操作されたＴＣＲ Ｔ細胞の産生
ＴＣＲアルファおよびベータ鎖配列を、適切な構築物にクローニングする。ＴＣＲ自己または異種バルクＴ細胞を構築物を形質導入して、操作されたＴＣＲ Ｔ細胞を産生する。これらのＴ細胞を、後の実験で使用するために、抗ＣＤ３抗体およびＩＬ−２サイトカインの存在下で拡大させる。ある特定の場合には、天然ＴＣＲを欠失させるか、または挿入したＴＣＲを修飾して、適当な多量体化を増加させる。
ＴＣＲ特異性のインビトロでの検証
まず、適切なＭＨＣを発現し、適切な標的（複数可）でパルスした抗原提示細胞を使用して、操作されたＴＣＲを保有するＴ細胞を標的認識についてスクリーニングする。
スクリーニングの最初のラウンドで同定したＴＣＲを、次に、自然な標的の認識について試験する。リードＴＣＲは、ＨＬＡが一致した原発腫瘍およびＳＡＴ担持タンパク質を発現する腫瘍細胞株の特異的な認識に基づいて指名する。
特異性を確保するために、リードＴＣＲは、標的外認識に基づいて選択解除する。これらを、複数の組織および器官の種類を網羅するＨＬＡ一致および不一致細胞株のパネルに対して、また感染疾患抗原のパネルでパルスしたＨＬＡ一致および不一致抗原提示細胞を用いて、スクリーニングする。自己抗原または一般的な非自己抗原の特異的および非特異的標的外認識を有するＴＣＲは、選択解除する。
実施例１７：ウサギＢ細胞クローニング技術を使用する、腫瘍抗原を提示するＭＨＣクラスＩ分子を標的とするモノクローナル抗体（ｍＡｂ）の同定
目的の腫瘍抗原を提示するヒトクラスＩ ＭＨＣ分子を標的とする強力かつ選択的なｍＡｂを同定する。ヒト腫瘍抗原を提示する可溶性ヒトｐＭＨＣ分子を、複数のマウスまたはウサギの免疫化に利用し、その後、免疫した動物に由来するＢ細胞をスクリーニングして、標的のクラスＩ ＭＨＣ分子に結合するｍＡｂを発現するＢ細胞を同定する。マウスまたはウサギのスクリーニングから同定したｍＡｂをコードする配列は、単離したＢ細胞からクローニングすることになる。次に、回収したｍＡｂを無関係のｐＭＨＣのパネルに対して評価して、標的ｐＭＨＣに選択的に結合するリードｍＡｂを同定する。リードｍＡｂは、標的結合親和性および選択性を決定するために十分に特徴付ける。強力かつ選択的な結合を示すリードｍＡｂをヒト化して、全長ヒトＩｇＧモノクローナル抗体（ｍＡｂ）構築物を生成する。加えて、リードｍＡｂを、ＣＡＲ Ｔ細胞の生成に使用できる、二重特異性ｍＡｂ構築物およびキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）構築物に組み込む。全長二重特異性構築物またはｓｃＦＶベースの二重特異性構築物を構築することができる。
インビトロでのヒト腫瘍細胞の標的化を実証
免疫組織化学技術を利用して、標的ｐＭＨＣ分子を発現するヒト腫瘍細胞へのリード抗体の特異的結合を実証する。ＣＡＲ−Ｔ構築物でトランスフェクトしたＴ細胞株をヒト腫瘍細胞とともにインキュベートして、インビトロでのｉ腫瘍細胞の殺滅を実証する。あるいは、標的を発現する腫瘍細胞を二重特異性構築物（ＡＢＰおよびエフェクタードメインをコードするもの）およびＰＢＭＣまたはＴ細胞とともにインキュベートする。
インビボでの概念実証
リード抗体またはＣＡＲ−Ｔ構築物をインビボで評価して、ヒト化マウス腫瘍モデルにおける指向腫瘍殺滅を実証する。リード抗体またはＣＡＲ−Ｔ構築物を、ヒトＰＢＭＣを移植した異種移植腫瘍モデルにおいて評価する。抗腫瘍活性を測定し、対照構築物と比較して、標的依存性の腫瘍殺滅を実証する。
腫瘍抗原を提示するヒトクラスＩ ＭＨＣ分子を選択的に標的とする強力かつ選択的なｍＡｂは、ファージディスプレイまたはＢ細胞クローニング技術を使用して同定する。ＡＢＰの有用性は、ＡＢＰが、抗体またはＣＡＲ−Ｔ細胞構築物に組み込まれた場合に、インビトロおよびインビボで腫瘍細胞殺滅を媒介することを示すことにより実証される。
好ましい実施形態および様々な代替実施形態を参照して本発明を具体的に示し説明したが、当業者であれば、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、形態および詳細に様々な変更を行うことができることを理解するであろう。
本明細書の本文内で引用されたすべての参考文献、発行特許、および特許出願は、あらゆる目的のために、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
配列
（表３）ＨＬＡ−ペプチド標的ＨＬＡ−Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に選択的なＧ２ ｓｃＦｖ選択的バインダーのＶＨおよびＶＬ配列
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（表４）ＨＬＡ−ペプチド標的ＨＬＡ−Ａ＊０１：０１＿ＮＴＤＮＮＬＡＶＹ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３）に選択的なＧ２選択的バインダーのＣＤＲ配列（Ｋａｂａｔ番号付けに従って決定）
Figure 2021500852
（表５）ＨＬＡ−ペプチド標的ＨＬＡ−Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に選択的なｓｃＦｖ選択的バインダーのＶＨおよびＶＬ配列
Figure 2021500852
（表６）ＨＬＡ−ペプチド標的ＨＬＡ−Ａ＊０２：０１＿ＬＬＡＳＳＩＬＣＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７３７）に選択的なＧ７選択的バインダーのＣＤＲ配列
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（表１０）再選別をとおして確認されたＴＣＲクローン型のＣＤＲ３およびＶ（Ｄ）Ｊ配列
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（表１２）クローニングをとおして確認されたＴＣＲクローン型のＣＤＲ３およびＶ（Ｄ）Ｊ配列
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（表Ａ）
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（表Ａ）続き
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Claims (178)

  1. ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）−ペプチド標的に特異的に結合する単離された抗原結合タンパク質（ＡＢＰ）であって、前記ＨＬＡ−ペプチド標的が、ＨＬＡクラスＩ分子と複合体化したＨＬＡ拘束性ペプチドを含み、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、前記ＨＬＡクラスＩ分子のα１／α２ヘテロ二量体部分のペプチド結合溝に位置し、
    ａ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡからなる、
    ｂ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹからなる、
    ｃ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬからなる、
    ｄ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶからなる、
    ｅ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＥＶＤＰＩＧＨＶＹからなる、または、
    ｆ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹからなる、
    単離されたＡＢＰ。
  2. 前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、約５〜１５アミノ酸長である、請求項１に記載の単離されたＡＢＰ。
  3. 前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、約８〜１２アミノ酸長である、請求項２に記載の単離されたＡＢＰ。
  4. 抗体またはその抗原結合断片を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  5. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡを含む、請求項４に記載の単離されたＡＢＰ。
  6. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０２５〜３０３２のいずれか１つに示される配列を含むＣＤＲ−Ｈ３を含む、請求項５に記載の単離されたＡＢＰ。
  7. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０４３〜３０５０のいずれか１つに示される配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む、請求項５または６に記載の単離されたＡＢＰ。
  8. Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｃ６、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｇ１０、１−Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｂ４、２−Ｇ７Ｒ４−Ｐ２Ｃ２、３−Ｇ７Ｒ４−Ｐ１Ａ３、４−Ｇ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９、５−Ｇ７Ｒ４−Ｂ１０−Ｐ１Ｆ８、またはＢ７（Ｇ７Ｒ３−Ｐ３Ａ９）と指定されるｓｃＦｖからのＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３を含む、請求項５〜７のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  9. Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｃ６、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｇ１０、１−Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｂ４、２−Ｇ７Ｒ４−Ｐ２Ｃ２、３−Ｇ７Ｒ４−Ｐ１Ａ３、４−Ｇ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９、５−Ｇ７Ｒ４−Ｂ１０−Ｐ１Ｆ８、またはＢ７（Ｇ７Ｒ３−Ｐ３Ａ９）と指定されるｓｃＦｖからの３つすべての重鎖ＣＤＲおよび３つすべての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項５〜８のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  10. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９９４〜３００１から選択されるＶＨ配列を含む、請求項５〜９のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  11. ３００２〜３００９から選択されるＶＬ配列を含む、請求項５〜１０のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  12. Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｃ６、Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｇ１０、１−Ｇ７Ｒ３−Ｐ１Ｂ４、２−Ｇ７Ｒ４−Ｐ２Ｃ２、３−Ｇ７Ｒ４−Ｐ１Ａ３、４−Ｇ７Ｒ４−Ｂ５−Ｐ２Ｅ９、５−Ｇ７Ｒ４−Ｂ１０−Ｐ１Ｆ８、またはＢ７（Ｇ７Ｒ３−Ｐ３Ａ９）と指定されるｓｃＦｖからのＶＨ配列およびＶＬ配列を含む、請求項５〜１１のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  13. 前記拘束性ペプチドＬＬＡＳＳＩＬＣＡの残基１〜５のうちのいずれか１つ以上を介して前記ＨＬＡ−ペプチド標的に結合する、請求項５〜１２のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  14. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹを含む、請求項４に記載の単離されたＡＢＰ。
  15. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９０２〜２９３３のいずれか１つに示される配列を含むＣＤＲ−Ｈ３を含む、請求項１４に記載の単離されたＡＢＰ。
  16. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９７１〜２９９３のいずれか１つに示される配列を含むＣＤＲ−Ｌ３を含む、請求項１４または１５に記載の単離されたＡＢＰ。
  17. Ｇ２−Ｐ２Ｅ０７、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ１１、Ｇ２−Ｐ２Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０２、Ｇ２−Ｐ１Ｈ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０６、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｃ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０９、Ｇ２−Ｐ１Ａ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０５、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ１２、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｆ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ２Ａ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｄ０４、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ２Ａ０９、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｆ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１１、またはＧ２−Ｐ１Ｄ０６と指定されるｓｃＦｖからのＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３を含む、請求項１４〜１６のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  18. Ｇ２−Ｐ２Ｅ０７、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ１１、Ｇ２−Ｐ２Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０２、Ｇ２−Ｐ１Ｈ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０６、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｃ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０９、Ｇ２−Ｐ１Ａ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０５、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ１２、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｆ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ２Ａ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｄ０４、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ２Ａ０９、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｆ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１１、またはＧ２−Ｐ１Ｄ０６と指定されるｓｃＦｖからの３つすべての重鎖ＣＤＲおよび３つすべての軽鎖ＣＤＲを含む、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  19. ２７８１〜２８１５から選択されるＶＨ配列を含む、請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  20. ２８１６〜２８５０から選択されるＶＬ配列を含む、請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  21. Ｇ２−Ｐ２Ｅ０７、Ｇ２−Ｐ２Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ１１、Ｇ２−Ｐ２Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０２、Ｇ２−Ｐ１Ｈ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０６、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｃ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０９、Ｇ２−Ｐ１Ａ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｂ１０、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０５、Ｇ２−Ｐ１Ｄ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ１２、Ｇ２−Ｐ２Ｈ１１、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０３、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０７、Ｇ２−Ｐ１Ｆ１２、Ｇ２−Ｐ１Ｇ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ２Ａ１０、Ｇ２−Ｐ２Ｄ０４、Ｇ２−Ｐ１Ｃ０６、Ｇ２−Ｐ２Ａ０９、Ｇ２−Ｐ１Ｂ０８、Ｇ２−Ｐ１Ｅ０３、Ｇ２−Ｐ２Ａ０３、Ｇ２−Ｐ２Ｆ０１、Ｇ２−Ｐ１Ｈ１１、またはＧ２−Ｐ１Ｄ０６と指定されるｓｃＦｖからのＶＨ配列およびＶＬ配列を含む、請求項１４〜２０のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  22. 前記拘束性ペプチドＮＴＤＮＮＬＡＶＹの残基６〜９を介しておよび前記ＨＬＡサブタイプ対立遺伝子Ａ＊０１０１の残基１５７〜１６０を介して前記ＨＬＡ−ペプチド標的に結合する、請求項１４〜２１のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  23. 前記拘束性ペプチドＮＴＤＮＮＬＡＶＹの残基３〜８を介して前記ＨＬＡ−ペプチド標的に結合する、請求項１４〜２２のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  24. Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）またはその抗原結合部分を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  25. 前記ＴＣＲまたはその抗原結合部分が、ＴＣＲ可変領域を含む、請求項２４に記載の抗原結合タンパク質。
  26. 前記ＴＣＲまたはその抗原結合部分が、１つ以上のＴＣＲ相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、請求項２４または２５に記載の抗原結合タンパク質。
  27. 前記ＴＣＲが、アルファ鎖およびベータ鎖を含む、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  28. 前記ＴＣＲが、ガンマ鎖およびデルタ鎖を含む、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  29. 抗原結合タンパク質を含む細胞外部分と細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）の一部である、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  30. 前記抗原結合タンパク質がｓｃＦｖを含み、前記細胞内シグナル伝達ドメインがＩＴＡＭを含む、請求項２９に記載の抗原結合タンパク質。
  31. 前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３−ゼータ（ＣＤ３）鎖のゼータ鎖シグナル伝達ドメインを含む、請求項２９または３０に記載の抗原結合タンパク質。
  32. 前記細胞外ドメインと前記細胞内シグナル伝達ドメインとを連結する膜貫通ドメインをさらに含む、請求項２９〜３１のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  33. 前記膜貫通ドメインが、ＣＤ２８の膜貫通部分を含む、請求項３２に記載の抗原結合タンパク質。
  34. Ｔ細胞共刺激分子の細胞内シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項２９〜３３のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  35. 前記Ｔ細胞共刺激分子が、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ−４０、ＩＣＯＳ、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項３４に記載の抗原結合タンパク質。
  36. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡを含む、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  37. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７７、４２７８、４２７９、４２８０、または４２８１であるＴＣＲアルファＣＤＲ３配列を含む、請求項３６に記載の単離されたＡＢＰ。
  38. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９１〜４２９５のうちのいずれか１つであるＴＣＲベータＣＤＲ３配列を含む、請求項３６または３７に記載の単離されたＡＢＰ。
  39. ＴＣＲクローン型ＩＤ番号：ＴＣＲ１９、ＴＣＲ２１、ＴＣＲ２２、ＴＣＲ１８、またはＴＣＲ２３のうちのいずれか１つからのアルファＣＤＲ３およびベータＣＤＲ３配列を含む、請求項３６〜３８のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  40. ＴＣＲアルファ可変（ＴＲＡＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲアルファ接合（ＴＲＡＪ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ可変（ＴＲＢＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ多様性（ＴＲＢＤ）アミノ酸配列、およびＴＣＲベータ接合（ＴＲＢＪ）アミノ酸配列を含み、
    前記ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列の各々が、ＴＣＲクローン型ＩＤ番号：ＴＣＲ１９、ＴＣＲ２１、ＴＣＲ２２、ＴＣＲ１８、およびＴＣＲ２３から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である、
    請求項３６〜３９のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  41. ＴＣＲアルファ定常（ＴＲＡＣ）アミノ酸配列を含む、請求項３６〜４０のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  42. ＴＣＲベータ定常（ＴＲＢＣ）アミノ酸配列を含む、請求項３６〜４１のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  43. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３０６〜４３１０のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲアルファＶＪ配列を含む、請求項３６〜４２のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  44. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２１〜４３２５のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含む、請求項３６〜４３のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  45. ＴＣＲアルファＶＪアミノ酸配列およびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列を含み、
    前記ＴＣＲアルファＶＪおよび前記ＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列の各々が、ＴＣＲクローン型ＩＤ番号：ＴＣＲ１９、ＴＣＲ２１、ＴＣＲ２２、ＴＣＲ１８、およびＴＣＲ２３から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である、
    請求項３６〜４４のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  46. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹを含む、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  47. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２７３〜４２７６または３０５２〜３３５０のうちのいずれか１つであるＴＣＲアルファＣＤＲ３配列を含む、請求項４６に記載の単離されたＡＢＰ。
  48. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８７〜４２９０または３３５１〜３６５５のうちのいずれか１つであるＴＣＲベータＣＤＲ３配列を含む、請求項４６または４７に記載の単離されたＡＢＰ。
  49. ＴＣＲ ＩＤ番号：ＴＣＲ１０１〜ＴＣＲ４６９、ＴＣＲ２、ＴＣＲ４、ＴＣＲ５３、ＴＣＲ５４、またはＴＣＲ１０１〜ＴＣＲ４６９のうちのいずれか１つからのアルファＣＤＲ３およびベータＣＤＲ３配列を含む、請求項４６〜４８のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  50. ＴＣＲアルファ可変（ＴＲＡＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲアルファ接合（ＴＲＡＪ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ可変（ＴＲＢＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ多様性（ＴＲＢＤ）アミノ酸配列、およびＴＣＲベータ接合（ＴＲＢＪ）アミノ酸配列を含み、
    前記ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列の各々が、ＴＣＲ ＩＤ番号：ＴＣＲ１０１〜ＴＣＲ４６９、ＴＣＲ２、ＴＣＲ４、ＴＣＲ５３、ＴＣＲ５４、またはＴＣＲ１０１〜ＴＣＲ４６９から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である、
    請求項４６〜４９のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  51. ＴＣＲアルファ定常（ＴＲＡＣ）アミノ酸配列を含む、請求項４６〜５０のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  52. ＴＣＲベータ定常（ＴＲＢＣ）アミノ酸配列を含む、請求項４６〜５０のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  53. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６５６〜３９６１または４３０２〜４３０５のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲアルファＶＪ配列を含む、請求項４６〜５２のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  54. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９６２〜４２６９または４３１７〜４３２０のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含む、請求項４６〜５３のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  55. ＴＣＲアルファＶＪアミノ酸配列およびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列を含み、
    前記ＴＣＲアルファＶＪおよび前記ＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列の各々が、ＴＣＲ ＩＤ番号：ＴＣＲ１０１〜ＴＣＲ４６９、ＴＣＲ２、ＴＣＲ４、ＴＣＲ５３、およびＴＣＲ５４から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、および１００％同一である、
    請求項４６〜５４のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  56. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬを含む、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  57. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８４〜４２８６または３１３８のうちのいずれか１つであるＴＣＲアルファＣＤＲ３配列を含む、請求項５６に記載の単離されたＡＢＰ。
  58. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９８〜４３０１のうちのいずれか１つであるＴＣＲベータＣＤＲ３配列を含む、請求項５６または５７に記載の単離されたＡＢＰ。
  59. ＴＣＲ ＩＤ番号：ＴＣＲ２９、ＴＣＲ３０、ＴＣＲ３２、またはＴＣＲ３３のうちのいずれか１つからのアルファＣＤＲ３およびベータＣＤＲ３配列を含む、請求項５６〜５８のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  60. ＴＣＲアルファ可変（ＴＲＡＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲアルファ接合（ＴＲＡＪ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ可変（ＴＲＢＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ多様性（ＴＲＢＤ）アミノ酸配列、およびＴＣＲベータ接合（ＴＲＢＪ）アミノ酸配列を含み、
    前記ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列の各々が、ＴＣＲ ＩＤ番号：ＴＣＲ２９、ＴＣＲ３０、ＴＣＲ３２、またはＴＣＲ３３から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である、
    請求項５６〜５９のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  61. ＴＣＲアルファ定常（ＴＲＡＣ）アミノ酸配列を含む、請求項５６〜６０のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  62. ＴＣＲベータ定常（ＴＲＢＣ）アミノ酸配列を含む、請求項５６〜６１のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  63. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１３〜４３１６のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲアルファＶＪ配列を含む、請求項５６〜６２のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  64. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２８〜４３３１のうちのいずれか１つに対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含む、請求項５６〜６３のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  65. ＴＣＲアルファＶＪアミノ酸配列およびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列を含み、
    前記ＴＣＲアルファＶＪおよび前記ＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列の各々が、ＴＣＲ ＩＤ番号：ＴＣＲ２９、ＴＣＲ３０、ＴＣＲ３２、またはＴＣＲ３３から選択されるＴＣＲクローン型のうちのいずれか１つについての対応するＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である、
    請求項５６〜６４のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  66. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶを含む、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  67. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２８２または４２８３であるＴＣＲアルファＣＤＲ３配列を含む、請求項６６に記載の単離されたＡＢＰ。
  68. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２９６または４２９７であるＴＣＲベータＣＤＲ３配列を含む、請求項６６または６７に記載の単離されたＡＢＰ。
  69. ＴＣＲクローン型ＩＤ番号：ＴＣＲ２６またはＴＣＲ２８からのアルファＣＤＲ３およびベータＣＤＲ３配列を含む、請求項６６〜６８のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  70. ＴＣＲアルファ可変（ＴＲＡＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲアルファ接合（ＴＲＡＪ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ可変（ＴＲＢＶ）アミノ酸配列、ＴＣＲベータ多様性（ＴＲＢＤ）アミノ酸配列、およびＴＣＲベータ接合（ＴＲＢＪ）アミノ酸配列を含み、
    前記ＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列の各々が、ＴＣＲ ＩＤ番号：ＴＣＲ２６またはＴＣＲ２８についての対応するＴＲＡＶ、ＴＲＡＪ、ＴＲＢＶ、ＴＲＢＤ、およびＴＲＢＪアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である、
    請求項６６〜６８のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  71. ＴＣＲアルファ定常（ＴＲＡＣ）アミノ酸配列を含む、請求項６６〜７０のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  72. ＴＣＲベータ定常（ＴＲＢＣ）アミノ酸配列を含む、請求項６６〜７１のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  73. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３１１または４３１２に対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲアルファＶＪ配列を含む、請求項６６〜７２のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  74. ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３２６または４３２７に対して、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有するＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊ配列を含む、請求項６６〜７３のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  75. ＴＣＲアルファＶＪアミノ酸配列およびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列を含み、
    前記ＴＣＲアルファＶＪおよび前記ＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列の各々が、ＴＣＲ ＩＤ番号：ＴＣＲ２６またはＴＣＲ２８についての対応するＴＣＲアルファＶＪおよびＴＣＲベータＶ（Ｄ）Ｊアミノ酸配列と、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一である、
    請求項６６〜７４のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  76. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹを含む、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  77. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０３：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＧＶＨＧＧＩＬＮＫを含む、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  78. 前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＥＶＤＰＩＧＨＶＹを含む、請求項２４〜３５のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  79. ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）−ペプチド標的に特異的に結合する単離された抗原結合タンパク質（ＡＢＰ）であって、前記ＨＬＡ−ペプチド標的が、ＨＬＡクラスＩ分子と複合体化したＨＬＡ拘束性ペプチドを含み、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、前記ＨＬＡクラスＩ分子のα１／α２ヘテロ二量体部分のペプチド結合溝に位置し、前記ＨＬＡ−ペプチド標的が、表Ａから選択される、単離されたＡＢＰ。
  80. 前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、ＷＴ１またはＭＡＲＴ１から選択される遺伝子に由来しない、請求項７９に記載の単離されたＡＢＰ。
  81. 前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、約５〜１５アミノ酸長である、請求項７９または８０に記載の単離されたＡＢＰ。
  82. 前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、約８〜１２アミノ酸長である、請求項８１に記載の単離されたＡＢＰ。
  83. 抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項７９〜８２のいずれか一項に記載の単離されたＡＢＰ。
  84. 前記抗原結合タンパク質が足場に連結し、任意選択で、前記足場が血清アルブミンまたはＦｃを含み、任意選択で、Ｆｃが、ヒトＦｃであり、ＩｇＧ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＡ（ＩｇＡ１、ＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＥ、またはＩｇＭである、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  85. 前記抗原結合タンパク質が、リンカーを介して足場に連結し、任意選択で、前記リンカーがペプチドリンカーであり、任意選択で、前記ペプチドリンカーがヒト抗体のヒンジ領域である、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  86. Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ断片、ｓｃＦｖ−Ｆｃ断片、および／または単一ドメイン抗体もしくはその抗原結合断片を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  87. ｓｃＦｖ断片を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  88. １つ以上の抗体相補性決定領域（ＣＤＲ）、任意選択で６つの抗体ＣＤＲを含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  89. 抗体を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  90. モノクローナル抗体である、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  91. ヒト化抗体、ヒト抗体、またはキメラ抗体である、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  92. 多重特異性であり、任意選択で二重特異性である、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  93. １つ超の抗原または単一抗原上の１つ超のエピトープに結合する、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  94. ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、およびＩｇＭから選択されるクラスの重鎖定常領域を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  95. 前記ヒトＩｇＧクラスであり、ＩｇＧ１、ＩｇＧ４、ＩｇＧ２、およびＩｇＧ３から選択されるサブクラスである重鎖定常領域を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  96. 前記抗原結合タンパク質が修飾Ｆｃを含み、任意選択で、前記修飾Ｆｃが、半減期を延長する１つ以上の突然変異を含み、任意選択で、前記半減期を延長する１つ以上の突然変異がＹＴＥである、請求項に記載の抗原結合タンパク質。
  97. 単離されたＨＬＡ−ペプチド標的であって、前記ＨＬＡ−ペプチド標的が、ＨＬＡクラスＩ分子と複合体化したＨＬＡ拘束性ペプチドを含み、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、前記ＨＬＡクラスＩ分子のα１／α２ヘテロ二量体部分のペプチド結合溝に位置し、前記ＨＬＡ−ペプチド標的が、表Ａから選択され、但し、前記単離されたＨＬＡ−ペプチド標的が、標的番号６３６４〜６３６９、６３８６〜６３８９、６５００、６５２１〜６５２４、または６５７８のうちのいずれでもなく、表Ｂまたは表Ｃに見られるＨＬＡ−ペプチド標的ではない、単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  98. ａ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡを含む、
    ｂ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＥＶＤＰＩＧＨＬＹを含む、
    ｃ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＢ＊４４：０２であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＧＥＭＳＳＮＳＴＡＬを含む、
    ｄ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＧＶＹＤＧＥＥＨＳＶを含む、
    ｅ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＥＶＤＰＩＧＨＶＹを含む、または、
    ｆ．前記ＨＬＡクラスＩ分子が、ＨＬＡサブタイプＨＬＡ−Ａ＊０１：０１であり、前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、配列ＮＴＤＮＮＬＡＶＹを含む、
    請求項９７に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  99. 配列ＬＬＡＳＳＩＬＣＡからなるかまたはそれから本質的になる拘束性ペプチドと複合体化したＨＬＡサブタイプＡ＊０２：０１を含む、請求項９８に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  100. 前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、約５〜１５アミノ酸長である、請求項９７〜９９のいずれか一項に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  101. 前記ＨＬＡ拘束性ペプチドが、約８〜１２アミノ酸長である、請求項９７〜１００のいずれか一項に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  102. 前記ＡＢＰが、抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項９７〜１０１のいずれか一項に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  103. 前記ＨＬＡサブタイプと前記拘束性ペプチドとの会合により、前記ＨＬＡサブタイプのβ２−ミクログロビンサブユニットと前記ＨＬＡサブタイプのα−サブユニットとの、共有結合によらない会合が安定する、請求項９７〜１０２のいずれか一項に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  104. 前記ＨＬＡサブタイプの前記β２−ミクログロビンサブユニットと前記ＨＬＡサブタイプの前記α−サブユニットとの前記安定した会合が、条件付きペプチド交換により示される、請求項１０３に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  105. 親和性標識をさらに含む、前記請求項のいずれか一項に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  106. 前記親和性標識がビオチン標識である、請求項１０５に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  107. 検出可能な標識と複合体化している、前記請求項のいずれか一項に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  108. 前記検出可能な標識が、β２−ミクログロビン結合分子を含む、請求項１０７に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  109. 前記β２−ミクログロビン結合分子が、標識抗体である、請求項１０８に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  110. 前記標識抗体が、蛍光色素標識抗体である、請求項１０９に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的。
  111. 固体支持体に付着した前記請求項のいずれか一項に記載のＨＬＡ−ペプチド標的を含む、組成物。
  112. 前記固体支持体が、ビーズ、ウェル、膜、チューブ、カラム、プレート、セファロース、磁気ビーズ、またはチップを含む、請求項１１１に記載の組成物。
  113. 前記ＨＬＡ−ペプチド標的が、親和性結合対の第１の成員を含み、前記固体支持体が、前記親和性結合対の第２の成員を含む、請求項１１１または１１２に記載の組成物。
  114. 前記第１の成員がストレプトアビジンであり、前記第２の成員がビオチンである、請求項１１３に記載の組成物。
  115. ａ．表Ａに記載されているＨＬＡサブタイプの、単離および精製されたα−サブユニットと、
    ａ．前記ＨＬＡサブタイプの、単離および精製されたβ２−ミクログロビンサブユニットと、
    ｂ．表Ａに記載されている、単離および精製された拘束性ペプチドと、
    ｃ．反応緩衝剤と
    を含む、反応混合物。
  116. ａ．前記請求項のいずれか一項に記載の単離されたＨＬＡ−ペプチド標的と、
    ｂ．ヒト対象から単離された複数のＴ細胞と
    を含む、反応混合物。
  117. 前記Ｔ細胞がＣＤ８＋Ｔ細胞である、請求項１１６に記載の反応混合物。
  118. プロモーターに作動可能に連結した、請求項９７または９８に定義のＨＬＡ拘束性ペプチドをコードする第１の核酸配列と、
    請求項９７または９８に定義のＨＬＡサブタイプをコードする第２の核酸配列と
    を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、
    前記第２の核酸が、前記第１の核酸配列と同じまたは異なるプロモーターに作動可能に連結し、
    前記コードされたペプチドおよびコードされたＨＬＡサブタイプが、請求項９７または９８に定義のＨＬＡ／ペプチド複合体を形成する、
    単離されたポリヌクレオチド。
  119. プロモーターに作動可能に連結した、請求項９７または９８に定義のＨＬＡ拘束性ペプチドをコードする第１の核酸配列を含む第１の構築物と、
    安定なＨＬＡ−ペプチド複合体の発現における使用のための説明書と
    を含む、請求項に記載の安定なＨＬＡ−ペプチド標的を発現させるためのキット。
  120. 前記第１の構築物が、請求項９７または９８に定義のＨＬＡサブタイプをコードする第２の核酸配列をさらに含む、請求項１１９に記載のキット。
  121. 前記第２の核酸配列が、同じまたは異なるプロモーターに作動可能に連結する、請求項１２０に記載のキット。
  122. 請求項９７または９８に定義のＨＬＡサブタイプをコードする第２の核酸配列を含む第２の構築物をさらに含む、請求項１１９に記載のキット。
  123. 前記第１および第２の構築物の一方または両方が、レンチウイルスベクター構築物である、請求項１１９〜１２２のいずれか一項に記載のキット。
  124. 請求項９７または９８に記載の異種ＨＬＡ−ペプチド標的を含む、宿主細胞。
  125. 表Ａに記載のＨＬＡ拘束性ペプチドをコードするポリヌクレオチド、例えば、請求項９７または９８に記載のＨＬＡ拘束性ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む、宿主細胞。
  126. 内因性ＭＨＣを含まない、請求項１２５に記載の宿主細胞。
  127. 外因性ＨＬＡを含む、請求項１２６に記載の宿主細胞。
  128. Ｋ５６２細胞である、請求項１２７に記載の宿主細胞。
  129. ａ．請求項１２８に記載の宿主細胞と、
    ｂ．表Ａに記載の拘束性ペプチドを含む細胞培養培地と
    を含む、細胞培養システム。
  130. 腫瘍細胞株由来の培養細胞である、請求項１２４に記載の宿主細胞。
  131. 前記腫瘍細胞株が、ＨＣＣ−１５９９、ＮＣＩ−Ｈ５１０Ａ、Ａ３７５、ＬＮ２２９、ＮＣＩ−Ｈ３５８、ＺＲ−７５−１、ＭＳ７５１、ＯＥ１９、ＭＯＲ、ＢＶ１７３、ＭＣＦ−７、ＮＣＩ−Ｈ８２、およびＮＣＩ−Ｈ１４６からなる群から選択される、請求項１３０に記載の宿主細胞。
  132. 前記抗原結合タンパク質が、前記ＨＬＡクラスＩ分子との接触点および前記ＨＬＡ−ペプチド標的の前記ＨＬＡ拘束性ペプチドとの接触点を通して、前記ＨＬＡ−ペプチド標的に結合する、前記請求項のいずれか一項に記載のＡＢＰ。
  133. 医薬として使用するための前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  134. がんの治療に使用するためのものであり、任意選択で、前記がんが、前記ＨＬＡ−ペプチド標的を発現するかまたは発現すると予測される、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  135. 固形腫瘍および血液系腫瘍から選択されるがんの治療に使用するための前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。
  136. 前記請求項のいずれか一項に記載のＡＢＰの保存的に修飾された変異体である、ＡＢＰ。
  137. 前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質と結合について競合する、抗原結合タンパク質（ＡＢＰ）。
  138. 前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質が結合するものと同じＨＬＡ−ペプチドエピトープに結合する、抗原結合タンパク質（ＡＢＰ）。
  139. 前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質を含む受容体を発現する、操作された細胞。
  140. Ｔ細胞、任意選択で細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）である、請求項１３９に記載の操作された細胞。
  141. 前記抗原結合タンパク質が、異種プロモーターから発現される、請求項１３９または１４０に記載の操作された細胞。
  142. 前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質またはその抗原結合部分をコードする、単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセット。
  143. 前記請求項のいずれか一項に記載のＨＬＡ／ペプチド標的をコードする、単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセット。
  144. 請求項１４２または１４３に記載のポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含む、ベクターまたはベクターのセット。
  145. 任意選択でＣＨＯもしくはＨＥＫ２９３であるか、または任意選択でＴ細胞である、前記請求項のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドもしくはポリヌクレオチドのセットまたは請求項１４４に記載のベクターもしくはベクターのセットを含む宿主細胞。
  146. 請求項１４５に記載の宿主細胞を用いて前記抗原結合タンパク質を発現させることと、
    前記発現した抗原結合タンパク質を単離することと
    を含む、抗原結合タンパク質を産生させる方法。
  147. 前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質と、薬学的に許容される賦形剤と、を含む、医薬組成物。
  148. 対象におけるがんを治療する方法であって、有効量の前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質または請求項１４７に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含み、任意選択で、前記がんが固形腫瘍および血液系腫瘍から選択される、方法。
  149. 前記がんが、前記ＨＬＡ−ペプチド標的を発現するかまたは発現すると予測される、請求項１４８に記載の方法。
  150. 前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質または請求項１４７に記載の医薬組成物と、
    使用説明書と
    を含む、キット。
  151. 請求項９７に記載の少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的と、
    アジュバントと
    を含む、組成物。
  152. 請求項９７に記載の少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的と、
    薬学的に許容される賦形剤と
    を含む、組成物。
  153. 表Ａに開示の少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的のポリペプチドを含むアミノ酸配列を含む組成物であって、任意選択で、前記アミノ酸配列が、前記ポリペプチドから本質的になるかまたはそれからなる、組成物。
  154. 前記請求項のいずれか一項に記載の単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含む、ウイルス。
  155. 繊維状ファージである、請求項１５４に記載のウイルス。
  156. 前記請求項のいずれか一項に記載の単離されたポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドのセットを含む、酵母細胞。
  157. 表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を提供することと、
    前記少なくとも１つの標的を前記抗原結合タンパク質と結合させ、それにより前記抗原結合タンパク質を同定することと
    を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質を同定する方法。
  158. 前記抗原結合タンパク質が、複数の別個の抗原結合タンパク質を含むファージディスプレイライブラリーに存在する、請求項１５７に記載の方法。
  159. 前記ファージディスプレイライブラリーが、前記ＨＬＡ−ペプチド標的のＨＬＡに非特異的に結合する抗原結合タンパク質を実質的に含まない、請求項１５８に記載の方法。
  160. 前記抗原結合タンパク質が、複数の別個のＴＣＲまたはその抗原結合断片を含むＴＣＲライブラリーに存在する、請求項１５７に記載の方法。
  161. 前記結合ステップが、１回超、任意選択で少なくとも３回実行される、請求項１５７〜１６０のいずれか一項に記載の方法。
  162. 前記抗原結合タンパク質が前記ＨＬＡ−ペプチド標的に選択的に結合するかどうかを決定するために、前記抗原結合タンパク質を前記ＨＬＡ−ペプチド標的とは異なる１つ以上のペプチド−ＨＬＡ複合体と接触させることをさらに含み、
    任意選択で、可溶性標的ＨＬＡ−ペプチド複合体への前記抗原結合タンパク質の結合親和性を、標的複合体とは異なる可溶性ＨＬＡ−ペプチド複合体への結合親和性に対して測定することにより、選択性が決定され、
    任意選択で、１つ以上の細胞の表面で発現される標的ＨＬＡ−ペプチド複合体への前記抗原結合タンパク質の結合親和性を、１つ以上の細胞の表面で発現される標的複合体とは異なるＨＬＡ−ペプチド複合体に対して測定することにより、選択性が決定される、
    請求項１５７〜１６１のいずれか一項に記載の方法。
  163. 表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を得ることと、
    前記ＨＬＡ−ペプチド標的を、任意選択でアジュバントと組み合わせて、対象に投与することと、
    前記抗原結合タンパク質を前記対象から単離することと
    を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質を同定する方法。
  164. 前記抗原結合タンパク質を単離することが、前記抗原結合タンパク質を同定するために、前記対象の血清をスクリーニングすることを含む、請求項１６３に記載の方法。
  165. 前記抗原結合タンパク質が前記ＨＬＡ−ペプチド標的に選択的に結合するかどうかを決定するために、前記抗原結合タンパク質を前記ＨＬＡ−ペプチド標的とは異なる１つ以上のペプチド−ＨＬＡ複合体と接触させることをさらに含み、
    任意選択で、可溶性標的ＨＬＡ−ペプチド複合体への前記抗原結合タンパク質の結合親和性を、標的複合体とは異なる可溶性ＨＬＡ−ペプチド複合体への結合親和性に対して測定することにより、選択性が決定され、
    任意選択で、１つ以上の細胞の表面で発現される標的ＨＬＡ−ペプチド複合体への前記抗原結合タンパク質の結合親和性を、１つ以上の細胞の表面で発現される標的複合体とは異なるＨＬＡ−ペプチド複合体に対して測定することにより、選択性が決定される、
    請求項１６３に記載の方法。
  166. 前記対象が、マウス、ウサギ、またはラマである、請求項１６３に記載の方法。
  167. 前記抗原結合タンパク質を単離することが、前記抗原結合タンパク質を発現する前記対象からＢ細胞を単離することと、任意選択で、前記単離されたＢ細胞から前記抗原結合タンパク質をコードする配列を直接クローニングすることと、を含む、請求項１６３に記載の方法。
  168. 前記Ｂ細胞を使用してハイブリドーマを創出することをさらに含む、請求項１６７に記載の方法。
  169. 前記Ｂ細胞からＣＤＲをクローニングすることをさらに含む、請求項１６７に記載の方法。
  170. 任意選択でＥＢＶ形質転換を介して、前記Ｂ細胞を不死化することをさらに含む、請求項１６７に記載の方法。
  171. 前記Ｂ細胞の前記抗原結合タンパク質を含むライブラリーを創出することをさらに含み、任意選択で、前記ライブラリーがファージディスプレイまたは酵母ディスプレイである、請求項１６７に記載の方法。
  172. 前記抗原結合タンパク質をヒト化することをさらに含む、請求項１６３に記載の方法。
  173. 前記抗原結合タンパク質を含む細胞を得ることと、
    表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を含むＨＬＡ多量体と前記細胞を接触させることと、
    前記ＨＬＡ多量体と前記抗原結合タンパク質との間の結合を介して前記抗原結合タンパク質を同定することと
    を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質を同定する方法。
  174. 前記抗原結合タンパク質を含む１つ以上の細胞を得ることと、
    天然または人工の抗原提示細胞（ＡＰＣ）上に提示された、表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を用いて、前記１つ以上の細胞を活性化することと、
    表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的との相互作用により活性化された１つ以上の細胞の選択を介して、前記抗原結合タンパク質を同定することと
    を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質を同定する方法。
  175. 前記細胞が、Ｔ細胞、任意選択でＣＴＬである、請求項１７３または１７４に記載の方法。
  176. フローサイトメトリー、磁気分離、または単一細胞分離を任意選択で使用して、前記細胞を単離することをさらに含む、請求項１７３または１７４に記載の方法。
  177. 前記抗原結合タンパク質を配列決定することをさらに含む、請求項１７６に記載の方法。
  178. 表Ａに列挙された少なくとも１つのＨＬＡ−ペプチド標的を提供することと、
    前記標的を使用して前記抗原結合タンパク質を同定することと
    を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質を同定する方法。
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Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE056607T2 (hu) 2014-12-23 2022-02-28 Immatics Biotechnologies Gmbh Új peptidek és peptidkombinációk, hepatocelluláris karcinóma (HCC) és más rákok elleni immunoterápiában történõ alkalmazásra
GB201501017D0 (en) 2014-12-23 2015-03-04 Immatics Biotechnologies Gmbh Novel peptides and combination of peptides for use in immunotherapy against hepatocellular carcinoma (HCC) and other cancers
US9422547B1 (en) 2015-06-09 2016-08-23 Gigagen, Inc. Recombinant fusion proteins and libraries from immune cell repertoires
CN111010866A (zh) 2017-05-24 2020-04-14 潘迪恩治疗公司 靶向免疫耐受性
US10946068B2 (en) 2017-12-06 2021-03-16 Pandion Operations, Inc. IL-2 muteins and uses thereof
US10174091B1 (en) 2017-12-06 2019-01-08 Pandion Therapeutics, Inc. IL-2 muteins
CN111886027A (zh) * 2017-12-28 2020-11-03 磨石肿瘤生物技术公司 靶向共同抗原的抗原结合蛋白
EP3784255A4 (en) * 2018-04-19 2022-06-22 Board of Regents, The University of Texas System MAGE-B2 SPECIFIC T LYMPHOCYTE RECEPTORS AND THEIR USES
CN111138521B (zh) * 2018-11-06 2022-10-28 香雪生命科学技术（广东）有限公司 源自于afp抗原的短肽
CN111138522B (zh) * 2018-11-06 2023-01-24 香雪生命科学技术（广东）有限公司 衍生自afp的肿瘤抗原短肽
WO2020191365A1 (en) * 2019-03-21 2020-09-24 Gigamune, Inc. Engineered cells expressing anti-viral t cell receptors and methods of use thereof
EP3714941A1 (en) * 2019-03-27 2020-09-30 Medigene Immunotherapies GmbH Mage-a4 tcrs
US20200318068A1 (en) * 2019-04-04 2020-10-08 Immatics US, Inc. Use of retinoic acid in t-cell manufacturing
US20220213167A1 (en) * 2019-05-03 2022-07-07 Gigamune, Inc. Engineered cells expressing anti-tumor t cell receptors and methods of use thereof
AU2020279240A1 (en) 2019-05-20 2021-12-23 Pandion Operations, Inc. MAdCAM targeted immunotolerance
CA3146227A1 (en) * 2019-07-09 2021-01-14 Medigene Immunotherapies Gmbh Magea10 specific t cell receptors and their use
CA3145791A1 (en) 2019-07-16 2021-01-21 Gilead Sciences, Inc. Hiv vaccines and methods of making and using
CN112300261B (zh) * 2019-07-23 2023-03-17 香雪生命科学技术（广东）有限公司 一种衍生自afp的肿瘤抗原短肽
KR20220050168A (ko) * 2019-08-19 2022-04-22 팬디온 오퍼레이션스, 인코포레이티드 Pd-1 작용제로 표적된 면역관용
WO2021048381A1 (en) * 2019-09-13 2021-03-18 Evaxion Biotech Aps Method for identifying stable mhc binding peptides using mass spectrometry
EP4045066A4 (en) * 2019-10-18 2024-03-20 Board of Regents, The University of Texas System HLA-RESTRICTED VCX/Y PEPTIDES AND T-CELL RECEPTORS AND THEIR USE
WO2021092094A1 (en) * 2019-11-04 2021-05-14 Gritstone Oncology, Inc. Antigen-binding proteins targeting shared neoantigens
JP2023502625A (ja) * 2019-11-15 2023-01-25 グリットストーン バイオ インコーポレイテッド 共有新抗原を標的にする抗原結合タンパク質
CN112898399A (zh) * 2019-12-03 2021-06-04 香雪生命科学技术（广东）有限公司 源自于afp抗原的短肽
CN116496383A (zh) * 2019-12-13 2023-07-28 南京大户生物科技有限公司 原发性肝癌相关抗原的胸腺依赖性淋巴细胞抗原表位肽及其应用
CN113072636B (zh) * 2020-01-06 2024-05-28 香雪生命科学技术（广东）有限公司 一种识别afp的t细胞受体及其编码序列
WO2021168079A1 (en) 2020-02-21 2021-08-26 Pandion Operations, Inc. Tissue targeted immunotolerance with a cd39 effector
CN113321727B (zh) * 2020-02-28 2024-04-09 香雪生命科学技术（广东）有限公司 一种识别afp抗原短肽的t细胞受体及其编码序列
CN113321725B (zh) * 2020-02-28 2024-06-11 香雪生命科学技术（广东）有限公司 一种识别afp的t细胞受体
EP4118112A1 (en) * 2020-03-10 2023-01-18 Massachusetts Institute of Technology Compositions and methods for immunotherapy of npm1c-positive cancer
CN113493505A (zh) * 2020-03-20 2021-10-12 香雪生命科学技术（广东）有限公司 识别afp抗原的高亲和力tcr
EP4153633A1 (en) * 2020-05-19 2023-03-29 Amgen Inc. Mageb2 binding constructs
JP2023530245A (ja) * 2020-06-09 2023-07-14 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム 操作されたｔ細胞受容体および使用の方法
KR20220006479A (ko) 2020-07-08 2022-01-17 주식회사 엘지에너지솔루션 배터리 팩, 및 이를 포함하는 자동차
EP4188962A1 (en) * 2020-07-29 2023-06-07 Gritstone bio, Inc. Engineered multi-specific antibodies and related methods of use and manufacture
GB2614166A (en) * 2020-09-04 2023-06-28 Us Health T cell receptors recognizing R273C or Y220C mutations in P53
JP2023546950A (ja) * 2020-10-23 2023-11-08 ルートパス・ジェノミクス，インコーポレーテッド Ｔ細胞受容体同定のための組成物及び方法
JP2023548556A (ja) * 2020-11-05 2023-11-17 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム Ｅｇｆｒ抗原を標的とする操作されたｔ細胞受容体および使用方法
WO2022155503A1 (en) * 2021-01-14 2022-07-21 Gritstone Bio, Inc. Multi-specific antibodies and methods of use
CA3207989A1 (en) * 2021-02-16 2022-08-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Hla class i?restricted t cell receptors against cd22
MX2023010541A (es) 2021-03-09 2023-11-24 Cdr Life Ag Proteinas de union al antigeno del peptido del mhc mage-a4.
KR20240005714A (ko) * 2021-03-29 2024-01-12 더 보드 오브 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 Sars-cov-2 항원을 표적화하는 펩티드 및 조작된 t 세포 수용체 및 사용 방법
WO2022229966A1 (en) 2021-04-29 2022-11-03 Yeda Research And Development Co. Ltd. T cell receptors directed against ras-derived recurrent neoantigens and methods of identifying same
EP4091627A1 (en) * 2021-05-21 2022-11-23 Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin in der Helmholtz-Gemeinschaft Tcr constructs specific for magea4-derived epitopes
CN117999097A (zh) * 2021-08-06 2024-05-07 安亚迪公司 用于产生个人化癌症免疫疗法的方法
WO2023050063A1 (zh) * 2021-09-28 2023-04-06 溧阳瑅赛生物医药有限公司 一种识别hla-a*02:01/e629-38的tcr及其应用
AU2022377062A1 (en) * 2021-10-29 2024-05-30 David Hou T cell receptor recognizing r175h mutation in p53 and its application
WO2023148494A1 (en) * 2022-02-03 2023-08-10 University College Cardiff Consultants Limited Novel t-cell receptor
WO2023164455A2 (en) * 2022-02-23 2023-08-31 Aloe Therapeutics Inc Compositions and methods to modulate the immune system
NL2031118B1 (en) * 2022-03-01 2023-09-07 Academisch Ziekenhuis Leiden T cell receptors directed against transcription factor wt1 and uses thereof
CN116836261A (zh) * 2022-03-24 2023-10-03 香雪生命科学技术（广东）有限公司 一种识别mage-a4抗原的高亲和力tcr及其序列和应用
AU2023241307A1 (en) * 2022-10-05 2024-05-02 Tscan Therapeutics, Inc. Magea1 immunogenic peptides, binding proteins recognizing magea1 immunogenic peptides, and uses thereof
CN116158405B (zh) * 2023-01-30 2024-04-26 西北农林科技大学 一种提高奶山羊后代母羔率的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005506058A (ja) * 2001-06-19 2005-03-03 テクニオン・リサーチ・アンド・ディベロップメント・ファウンデーション・リミテッド 癌の治療に特に有用な免疫擬装の方法及び薬学的組成物
WO2017124001A2 (en) * 2016-01-14 2017-07-20 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center T cell receptor-like antibodies specific for foxp3-derived peptides

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1485075A4 (en) * 2002-02-20 2006-04-26 Dyax Corp MHC-PEPTIDE COMPLEX BINDING LIGANDS
JP2012508017A (ja) * 2008-11-07 2012-04-05 ファブラス エルエルシー 抗ｄｌｌ４抗体及びその使用
WO2013039889A1 (en) * 2011-09-15 2013-03-21 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services T cell receptors recognizing hla-a1- or hla-cw7-restricted mage
US20150018530A1 (en) * 2012-02-29 2015-01-15 Ambrx, Inc. Novel Prodrug Containing Molecule Compositions and Their Uses
TWI702229B (zh) * 2014-12-19 2020-08-21 美商再生元醫藥公司 流行性感冒病毒血球凝集素之人類抗體
CA2986713A1 (en) * 2015-05-22 2016-12-01 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center T cell receptor-like antibodies specific for a prame peptide
GB201520559D0 (en) * 2015-11-23 2016-01-06 Immunocore Ltd & Adaptimmune Ltd Peptides

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005506058A (ja) * 2001-06-19 2005-03-03 テクニオン・リサーチ・アンド・ディベロップメント・ファウンデーション・リミテッド 癌の治療に特に有用な免疫擬装の方法及び薬学的組成物
WO2017124001A2 (en) * 2016-01-14 2017-07-20 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center T cell receptor-like antibodies specific for foxp3-derived peptides

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CLAUDIA PARET ET AL.: "CXorf61 is a target for T cell based immunotherapy of triple-negative breast cancer.", ONCOTARGET, vol. 6, no. 28, JPN6022030669, 29 July 2015 (2015-07-29), pages 25356 - 25367, ISSN: 0005013829 *

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SG11202001368SA (en) 2020-03-30

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