JP2021500566A - モエシンをバイオマーカーとして使用するｈｅｒ２依存性がんの診断及び／又は予後 - Google Patents
モエシンをバイオマーカーとして使用するｈｅｒ２依存性がんの診断及び／又は予後 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2021500566A JP2021500566A JP2020523009A JP2020523009A JP2021500566A JP 2021500566 A JP2021500566 A JP 2021500566A JP 2020523009 A JP2020523009 A JP 2020523009A JP 2020523009 A JP2020523009 A JP 2020523009A JP 2021500566 A JP2021500566 A JP 2021500566A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- her2
- cancer
- subject
- moesin
- prognosis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 title claims abstract description 182
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 title claims abstract description 182
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 127
- 102100027869 Moesin Human genes 0.000 title claims abstract description 104
- 108010071525 moesin Proteins 0.000 title claims abstract description 92
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 title claims abstract description 90
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 title claims abstract description 56
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 49
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 title abstract description 12
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 106
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 62
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 41
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 41
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 32
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 19
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 7
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 claims description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 4
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 3
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 3
- 206010061424 Anal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 claims description 2
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010062878 Gastrooesophageal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002151 Pleural effusion Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 claims description 2
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 claims description 2
- 201000010255 female reproductive organ cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 2
- 201000006974 gastroesophageal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 claims description 2
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 2
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 claims 1
- 201000005163 papillary serous adenocarcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 abstract 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 42
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 34
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 9
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 7
- 101150054472 HER2 gene Proteins 0.000 description 6
- 239000002136 L01XE07 - Lapatinib Substances 0.000 description 6
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 6
- 108700020302 erbB-2 Genes Proteins 0.000 description 6
- BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N lapatinib Chemical compound O1C(CNCCS(=O)(=O)C)=CC=C1C1=CC=C(N=CN=C2NC=3C=C(Cl)C(OCC=4C=C(F)C=CC=4)=CC=3)C2=C1 BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 5
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 4
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 4
- 230000003831 deregulation Effects 0.000 description 4
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 4
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 4
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 4
- 208000030776 invasive breast carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 4
- 229960001612 trastuzumab emtansine Drugs 0.000 description 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 4
- 101000851181 Homo sapiens Epidermal growth factor receptor Proteins 0.000 description 3
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 229960004891 lapatinib Drugs 0.000 description 3
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 3
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 3
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940094060 tykerb Drugs 0.000 description 3
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 3
- SDEAXTCZPQIFQM-UHFFFAOYSA-N 6-n-(4,4-dimethyl-5h-1,3-oxazol-2-yl)-4-n-[3-methyl-4-([1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridin-7-yloxy)phenyl]quinazoline-4,6-diamine Chemical compound C=1C=C(OC2=CC3=NC=NN3C=C2)C(C)=CC=1NC(C1=C2)=NC=NC1=CC=C2NC1=NC(C)(C)CO1 SDEAXTCZPQIFQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100020903 Ezrin Human genes 0.000 description 2
- 101710153770 Glutathione S-transferase Mu 1 Proteins 0.000 description 2
- 102100036533 Glutathione S-transferase Mu 2 Human genes 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methylglycine Chemical compound OCC(CO)(CO)[NH2+]CC([O-])=O SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100022127 Radixin Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 210000002230 centromere Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 2
- 108010055671 ezrin Proteins 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 229950008835 neratinib Drugs 0.000 description 2
- ZNHPZUKZSNBOSQ-BQYQJAHWSA-N neratinib Chemical compound C=12C=C(NC\C=C\CN(C)C)C(OCC)=CC2=NC=C(C#N)C=1NC(C=C1Cl)=CC=C1OCC1=CC=CC=N1 ZNHPZUKZSNBOSQ-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 108010048484 radixin Proteins 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 229950003463 tucatinib Drugs 0.000 description 2
- WVAKRQOMAINQPU-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-[5-(2,2-dimethylbutyl)-1h-imidazol-2-yl]ethyl]phenyl]pyridine Chemical compound N1C(CC(C)(C)CC)=CN=C1CCC1=CC=C(C=2N=CC=CC=2)C=C1 WVAKRQOMAINQPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100037152 BAG family molecular chaperone regulator 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 1
- 102100033587 DNA topoisomerase 2-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 206010061819 Disease recurrence Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100038595 Estrogen receptor Human genes 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101000740062 Homo sapiens BAG family molecular chaperone regulator 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000934372 Homo sapiens Macrosialin Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 238000010824 Kaplan-Meier survival analysis Methods 0.000 description 1
- 101150079856 MSN gene Proteins 0.000 description 1
- 102100025136 Macrosialin Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 102100025803 Progesterone receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- CGNLCCVKSWNSDG-UHFFFAOYSA-N SYBR Green I Chemical compound CN(C)CCCN(CCC)C1=CC(C=C2N(C3=CC=CC=C3S2)C)=C2C=CC=CC2=[N+]1C1=CC=CC=C1 CGNLCCVKSWNSDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710167605 Spike glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N Syringetin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- 101710183280 Topoisomerase Proteins 0.000 description 1
- 239000007997 Tricine buffer Substances 0.000 description 1
- 108010078814 Tumor Suppressor Protein p53 Proteins 0.000 description 1
- 108010046308 Type II DNA Topoisomerases Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000032341 cell morphogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 208000018463 endometrial serous adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 238000011880 melting curve analysis Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000000092 prognostic biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 208000019694 serous adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000004548 serous cystadenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
- C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/118—Prognosis of disease development
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/158—Expression markers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
【課題】モエシンをバイオマーカーとして使用するＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後の提供。【解決手段】本発明は、対象においてＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測する方法であって、（ａ）上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する工程と、（ｂ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量を基準値と比較する工程と、（ｃ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量が上記基準値から逸脱しているか逸脱していないかを確認する工程と、（ｄ）逸脱しているか逸脱していないかの確認結果を、上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの特定の診断及び／又は予後に帰する工程とを有する方法に関する。【選択図】なし
Description
乳がんは世界中で女性に最も一般的ながんであり、２０１２年にはおよそ１７０万件が新たに診断された（がん全体で二番目に多い）。これは新たながん件数全体の約１２％、女性におけるがん全体の２５％に当たる。乳がん件数の約半数及び死亡者数の６０％が経済的な発展途上国で発生すると推定されている。フランスでの罹患率はヨーロッパの中で最も激しく、一定の割合で増加している。
原発性ヒト乳がんの約２０〜３０％がＨＥＲ２の脱制御された発現を原因としており、フランスの年間患者数約８０００人、世界の年間患者数４５００００人に当たる。ＨＥＲ２は、ヒト上皮成長因子受容体（ＨＥＲ／ＥＧＦＲ／ＥＲＢＢ）ファミリーの１つとして周知である。ＥｒｂＢ２の過剰発現は診断不良と関連しており、ＨＥＲ２が脱制御された腫瘍はより早く成長して悪性度が高まるとともに、化学療法やホルモン療法への感受性が低くなることが分かっている。ＨＥＲ２の脱制御は疾患の再発とも関連している。そして、いわゆるＨＥＲ２依存性がんは、公衆衛生において最大の関心事である非常に特殊ながんグループを構成している。事実、処置を受けた患者のうち２５％しか実際の治療法に反応しない。実際の戦略が狙う標的がＨＥＲ２の細胞外領域であるもの（ハーセプチン／トラスツズマブ、ペルツズマブ、及びＧｅｎｅｎｔｅｃｈ社（米国）が近年開発したトラスツズマブエムタンシン等の抗ＨＥＲ２抗体療法）や、受容体のキナーゼ活性であるもの（ラパチニブ／タイケルブ（ＧＳＫ社、米国）等の小分子チロシンキナーゼ阻害薬）は、作用が限定的であることが判明している。
特に、これらの分子は、ＨＥＲ２の変異型及び切断型に対して強い作用を持たない。トラスツズマブについては、処置を受けた患者のうち６６％〜８８％は処置に全く反応せず（すなわち「一次抵抗性」を呈する）、この薬剤に反応する処置患者のうち１／３では、平均して１年未満で疾患の進行（すなわち「獲得抵抗性」が発生する）が広く見られる。主としてｐ９５ＨＥＲ−２の発現に起因する治療抵抗性の発生によって有効性は限定的となるが、これは、この高活性ＨＥＲ２切断型がトラスツズマブの認識部位を持たないからである。
一般的に、ＨＥＲ２の（過剰）発現は、乳がんの予後不良マーカーとして確立されている。がん／患者がＨＥＲ２に対して「陽性」（すなわちＨＥＲ２＋）又はＨＥＲ２に対して「陰性」（すなわちＨＥＲ２−）であるかどうかを評価するために、蛍光インサイツハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）検査や免疫組織化学的検査（ＩＨＣ検査）等の様々な手法が開発されている。
本発明者らは、モエシンとＨＥＲ２遺伝子との間に強い機能的関連を確認し、ＨＥＲ２依存性がんであるという診断又はＨＥＲ２依存性がんの予後不良は、ＨＥＲ２＋対象においてモエシンレベルが低いことと特異的に関連していることを見出した。
上記発見により、対象においてＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測する新規な方法の開発が可能となる。
従って、ここで本発明者らは、診断及び／又は予後のための方法を提案する。該方法では、対象から採取した試料中のモエシン量を基準値と比較したものが、ＨＥＲ２依存性がんの予測又はＨＥＲ２依存性がんの予後を表し、上記対象がＨＥＲ２依存性がんを有する及び／又は進行させる危険性があるか否かを示す。
本発明は、対象においてＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測する方法であって、
（ａ）上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量を基準値と比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量が上記基準値から逸脱しているか逸脱していないかを確認する工程と、
（ｄ）逸脱しているか逸脱していないかの確認結果を、上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの特定の診断及び／又は予後に帰する工程と
を有する方法に関する。
（ａ）上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量を基準値と比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量が上記基準値から逸脱しているか逸脱していないかを確認する工程と、
（ｄ）逸脱しているか逸脱していないかの確認結果を、上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの特定の診断及び／又は予後に帰する工程と
を有する方法に関する。
本発明はまた、対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後の変化をモニターする方法であって、
（ａ）１つ又は複数の連続した時点で本発明の方法を上記対象に対して実施することで、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を決定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断に変化があるか否かを確認する工程と
を有する方法に関する。
（ａ）１つ又は複数の連続した時点で本発明の方法を上記対象に対して実施することで、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を決定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断に変化があるか否かを確認する工程と
を有する方法に関する。
本発明はまた、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後をその対象において決定するためのキットであって、
上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有するキットに関する。
上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有するキットに関する。
本発明はまた、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後をその対象において決定するためのキットの使用であって、該キットは、
対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有する、使用に関する。
対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有する、使用に関する。
本発明はまた、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後をそのヒト対象において決定するための、ｑＲＴ−ＰＣＲによりモエシンのｍＲＮＡレベルを測定するための配列番号４及び配列番号５の２つのプローブの使用に関する。
（定義）
本明細書中、「診断する」又は「診断」並びに「予後予測する」又は「予後」という語は、最も広い意味で使用されており、医療及び臨床実務において一般的に使用され且つ十分に理解されている。限定することはないが、更に説明すれば、「予後予測する」又は「予後」とは、対象においてＨＥＲ２依存性がんが進行する蓋然性、危険性、又は可能性を決定することを意味する。限定することはないが、更に説明すれば、「診断する」又は「診断」とは、対象におけるＨＥＲ２依存性がんの存在の蓋然性又は可能性を決定することを意味する。
本明細書中、「診断する」又は「診断」並びに「予後予測する」又は「予後」という語は、最も広い意味で使用されており、医療及び臨床実務において一般的に使用され且つ十分に理解されている。限定することはないが、更に説明すれば、「予後予測する」又は「予後」とは、対象においてＨＥＲ２依存性がんが進行する蓋然性、危険性、又は可能性を決定することを意味する。限定することはないが、更に説明すれば、「診断する」又は「診断」とは、対象におけるＨＥＲ２依存性がんの存在の蓋然性又は可能性を決定することを意味する。
本明細書中、「ＨＥＲ２」という語は、ヒト上皮成長因子受容体ファミリーを構成するタンパク質の１つである「ヒト上皮成長因子受容体２」を意味する。また、「ＨＥＲ２」は「ＥｒｂＢ２」と呼ばれることも多い。本発明において「ＥｒｂＢ２」及び「ＨＥＲ２」は互換的に使用される。
本明細書中、「ＨＥＲ２依存性がん」、「ＨＥＲ２陽性がん」、又は「ＨＥＲ２＋がん」という語は、ＨＥＲ２活性化の悪化を伴うがんを意味する。特に、「ＨＥＲ２依存性がん」という語は、「ＨＥＲ２非依存性がん」、「ＨＥＲ２陰性がん」、又は「ＨＥＲ２−がん」とは対照的に、ＨＥＲ２遺伝子の脱制御を示すがん細胞が確認されたがん症例を意味する。より具体的には、上記脱制御は、ＨＥＲ２遺伝子の増幅に相当し得る。このような増幅は遺伝子レベル又はタンパク質レベルで検出できる。例えば、アメリカ臨床腫瘍学会／アメリカ病理学会（ＡＳＣＯ／ＣＡＰ）が乳がん向けに発行したガイドラインでは、乳がんのＥｒｂＢ２状態を決定するためのいくつかのカットオフ値が設定されている。これらのガイドラインでは、原発部位について、また可能であれば転移部位について、以下であれば、がんが「ＨＥＲ２依存性」であると考えるべきと規定されている。
・免疫化学的検査（ＩＨＣ）において、浸潤がん細胞の３０％超で均一且つ強い膜染色が見られる。あるいは、
・（ｉ）測定されるＣＥＰ１７（１７番染色体のセントロメア）に対するＨＥＲ２のＦＩＳＨ増幅比が２以上（デュアルプローブ試験）、若しくは（ｉｉ）ＣＥＰ１７（１７番染色体のセントロメア）に対するＨＥＲ２のＦＩＳＨ増幅比が２未満（デュアルプローブ試験）、且つ核１つあたりの平均ＨＥＲ２コピー数が少なくとも６（シングルプローブ試験）、又は（ｉｉｉ）細胞あたりのＨＥＲ２コピー数ではシングルプローブ平均が少なくとも６シグナル。
・免疫化学的検査（ＩＨＣ）において、浸潤がん細胞の３０％超で均一且つ強い膜染色が見られる。あるいは、
・（ｉ）測定されるＣＥＰ１７（１７番染色体のセントロメア）に対するＨＥＲ２のＦＩＳＨ増幅比が２以上（デュアルプローブ試験）、若しくは（ｉｉ）ＣＥＰ１７（１７番染色体のセントロメア）に対するＨＥＲ２のＦＩＳＨ増幅比が２未満（デュアルプローブ試験）、且つ核１つあたりの平均ＨＥＲ２コピー数が少なくとも６（シングルプローブ試験）、又は（ｉｉｉ）細胞あたりのＨＥＲ２コピー数ではシングルプローブ平均が少なくとも６シグナル。
更に、原発部位について、また可能であれば転移部位について、以下である場合、がんが「ＨＥＲ２非依存性」であると考えられる。
・ＩＨＣにおいて、細胞の１０％未満で染色が見られないか、又は弱く不完全な膜染色若しくは弱いが完全な膜染色が見られる。あるいは、
・ＦＩＳＨのＨＥＲ２／ＣＥＰ１７比が２未満、且つ細胞あたりの平均ＨＥＲ２コピー数が４シグナル未満であることが認められるか（デュアルプローブ試験）、又は細胞あたりの平均ＨＥＲ２コピー数が４シグナル未満であることが認められる（シングルプローブを使用する場合）。
・ＩＨＣにおいて、細胞の１０％未満で染色が見られないか、又は弱く不完全な膜染色若しくは弱いが完全な膜染色が見られる。あるいは、
・ＦＩＳＨのＨＥＲ２／ＣＥＰ１７比が２未満、且つ細胞あたりの平均ＨＥＲ２コピー数が４シグナル未満であることが認められるか（デュアルプローブ試験）、又は細胞あたりの平均ＨＥＲ２コピー数が４シグナル未満であることが認められる（シングルプローブを使用する場合）。
原発部位について、また可能であれば転移部位について、以下である場合、ＨＥＲ２状態が不確かであると考えられる（そして、新しい試験を実施すべきである）。
・ＩＨＣにおいて、（ｉ）周辺膜の不完全な標識及び／又は弱い／中程度の標識が認められるが、浸潤がん細胞の１０％超においてであるか、又は（ｉｉ）周辺膜の完全且つ強い標識が認められるが、浸潤がん細胞の１０％以下である。あるいは、
・ＦＩＳＨのＨＥＲ２／ＣＥＰ１７比が２未満、且つ細胞あたりの平均ＨＥＲ２コピー数が４シグナル以上６シグナル未満であることが認められるか（デュアルプローブ試験）、又は細胞あたりの平均ＨＥＲ２コピー数が４シグナル以上６シグナル未満であることが認められる（シングルプローブを使用する場合）。
・ＩＨＣにおいて、（ｉ）周辺膜の不完全な標識及び／又は弱い／中程度の標識が認められるが、浸潤がん細胞の１０％超においてであるか、又は（ｉｉ）周辺膜の完全且つ強い標識が認められるが、浸潤がん細胞の１０％以下である。あるいは、
・ＦＩＳＨのＨＥＲ２／ＣＥＰ１７比が２未満、且つ細胞あたりの平均ＨＥＲ２コピー数が４シグナル以上６シグナル未満であることが認められるか（デュアルプローブ試験）、又は細胞あたりの平均ＨＥＲ２コピー数が４シグナル以上６シグナル未満であることが認められる（シングルプローブを使用する場合）。
ＨＥＲ２遺伝子の脱制御は、そのコピー数に関わらず、ＨＥＲ２遺伝子の活性化変異にも相当し得るので、それによりＨＥＲ２のチロシンキナーゼ活性が増大する。例えば、上記活性化変異としては、Ｖ６５９Ｅ、Ｇ３０９Ａ、Ｄ７６９Ｈ、Ｄ７６９Ｙ、Ｖ７７７Ｌ、Ｐ７８０ｉｎｓ、Ｖ８４２Ｉ、Ｒ８９６Ｃ、Ｋ７５３Ｅ、又はＬ７５５Ｓが挙げられ、ポリメラーゼ連鎖反応法又は任意の配列決定法によって検出できる（Ｂｏｓｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｄｉｓｃｏｖ．，２０１３，３（２），２２４−２３７；Ｚｕｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０１６，２２（１９），４８５９−４８６９）。また、ＨＥＲ２遺伝子の増幅及び体細胞活性化変異はいずれも、同じがん症例で検出できる。
ＦｉｓｈやＩＨＣ以外に、確定したＨＥＲ２状態を有する陰性及び陽性コントロール細胞を使用する周知の分子生物学的試験方法、例えば、酵素結合免疫吸着測定法、ウエスタンブロット法、ポリメラーゼ連鎖反応法等を比較として採用して、がんのＨＥＲ２状態を決定できる。
本発明に係るＨＥＲ２依存性がんは、乳がん、子宮内膜がん、子宮がん、又は卵巣がん等の女性生殖器がん、膀胱がん、肛門がん、大腸がん、特に子宮体部漿液性腺がん（ｕｔｅｒｉｎｅ ｐａｐｉｌｌａｒｙ ｓｅｒｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）等の子宮漿液性がん、肺がん、特に非小細胞肺がん、肝臓がん、腎臓がん、胃食道がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、膵臓がん、及び胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）からなる群より選択されることが好ましい。好ましい実施形態において、上記ＨＥＲ２依存性がんは、ＨＥＲ２＋乳がん、ＨＥＲ２＋卵巣がん、ＨＥＲ２＋膀胱がん、ＨＥＲ２＋大腸がん、ＨＥＲ２＋子宮体部漿液性腺がん、及びＨＥＲ２＋胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）であってもよく、ＨＥＲ２＋乳がんが好ましい。
本発明の目的上、「マーカー（又は「バイオマーカー」）」という語は、タンパク質又はリボ核酸（ＲＮＡ）等、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後のために使用できる実体である。本発明によれば、上記バイオマーカーはモエシン、すなわちタンパク質自体、又は該モエシンをコードするｍＲＮＡ等のＲＮＡである。本発明の目的上、上記バイオマーカーはタンパク質であることが好ましい。
モエシン（膜組織化伸張スパイクタンパク質（ｍｅｍｂｒａｎｅ−ｏｒｇａｎｉｚｉｎｇ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ ｓｐｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ））は、ヒトにおいてＭＳＮ遺伝子によりコードされるタンパク質である。モエシンは、密接に関連する３種のタンパク質であるエズリン、ラディキシン、及びモエシンで構成されたＥＲＭタンパク質ファミリーの１種である。これらのタンパク質は、膜タンパク質と皮質細胞骨格との結合を制御し、シグナル伝達経路を誘発するので、細胞の形態形成、接着、又は遊走等、多くの重要な生理学的プロセスにおいて中心的な役割を果たす。モエシンの例としては、配列番号１のアミノ酸配列を有するヒトモエシン（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号：Ｐ２６０３８）が挙げられるが、これに限定されない。
本明細書中、「対象」又は「患者」という語は、ＨＥＲ２依存性がんの影響を受けた又は受けやすいヒト又はヒト以外の哺乳類（げっ歯類（マウス、ラット）、ネコ、イヌ、又は霊長類等）を意味する。上記対象は、ヒト、男性、又は女性であることが好ましい。上記対象はＨＥＲ２＋であることが好ましい。
本明細書中、「ＨＥＲ２＋対象」という語は、ＨＥＲ２の発現及び／又は活性化に対して陽性であるがんを有する対象を意味する。ＨＥＲ２発現の検査には、蛍光インサイツハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）検査、発色インサイツハイブリダイゼーション、リアルタイム定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＲＴ−ＰＣＲ）、又は免疫組織化学（ＩＨＣ）検査等、様々な手法が採用できる。
本明細書中、「試料」又は「生体試料」という語は、対象から得られた生物学的検体（腫瘍試料又は体液試料等）を含む。体液試料は、血液、血清血漿、唾液、尿、羊水、母乳、気管支洗浄液、脳脊髄液、腹水、精液、涙、及び胸水からなる群より選択でき、血液が好ましい。腫瘍試料は、腫瘍生検等の生検を含んでいてもよい。
「基準値」又は「基準プロファイル」という語は、（ｉ）ＨＥＲ２依存性がんではないという診断、（ｉｉ）ＨＥＲ２依存性がんであるという診断、（ｉｉｉ）ＨＥＲ２依存性がんの予後良好、又は（ｉｖ）ＨＥＲ２依存性がんの予後不良を表す値又はプロファイルを意味する。例えば、モエシン量の基準値は以下のようにして得られる。
（ａ）
（ａ１）ＨＥＲ２依存性がんではない１つ以上の対象から採取した１つ以上の試料、又は
（ａ２）ＨＥＲ２依存性がんである１つ以上の対象から採取した１つ以上の試料
におけるモエシン量を測定する。
（ｂ）
（ｂ１）（ａ１）で測定したモエシン含量を、ＨＥＲ２依存性がんではないという診断及び／又は予後を表す基準値、又は
（ｂ２）（ａ２）で測定したモエシン含量を、ＨＥＲ２依存性がんであるという診断及び／又は予後を表す基準値
として保存する。
（ａ）
（ａ１）ＨＥＲ２依存性がんではない１つ以上の対象から採取した１つ以上の試料、又は
（ａ２）ＨＥＲ２依存性がんである１つ以上の対象から採取した１つ以上の試料
におけるモエシン量を測定する。
（ｂ）
（ｂ１）（ａ１）で測定したモエシン含量を、ＨＥＲ２依存性がんではないという診断及び／又は予後を表す基準値、又は
（ｂ２）（ａ２）で測定したモエシン含量を、ＨＥＲ２依存性がんであるという診断及び／又は予後を表す基準値
として保存する。
また、基準値は基準範囲を包含する。
「量」、「含量」、及び「レベル」という語は同義語であり、当該分野において一般的に十分理解されている。本明細書中、これらの用語は、特に試料におけるバイオマーカーの絶対的定量、又は試料におけるバイオマーカーの相対的定量（すなわち、別の値に対して、例えば、本明細書中で教示される基準値に対して）を意味していてもよく、あるいはバイオマーカーのベースライン発現を示す数値範囲を意味していてもよい。これらの値又は範囲は、単一の患者から得られたものであっても、患者群から得られたものであってもよい。試料中のバイオマーカーの絶対含量は、重量又はモル量で表現するのが有利であり、濃度で表現するのがより一般的である。試料中のバイオマーカーの相対含量は、別の値に対する（すなわち、別の値と比較した）、例えば基準値に対する（すなわち、基準値と比較した）増加又は減少として表現するのが有利である。
第一の値の第二の値からの「逸脱」という語は、一般に、第二の値と比較して第一の値が増加又は減少しているなど、任意の方向性を包含していてもよい。
「処置する」又は「処置」という語は、この用語が適用される障害若しくは異常、又は該障害若しくは異常の１つ以上の症状を元に戻すこと、軽減すること、その進行を阻害すること、又は予防することを意味する。具体的には、障害の処置は、がん細胞を破壊すること、枯渇させること、又はその増殖を阻害することであってもよい。このような処置によってがん細胞を完全に枯渇させることが最も好ましい。
（診断及び／又は予後）
本発明は、本発明者らが明らかにした利点、すなわち、モエシン量の増加又は減少によって、ＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測できるという利点から得られたものである。得られる用途を以下に記載する。
本発明は、本発明者らが明らかにした利点、すなわち、モエシン量の増加又は減少によって、ＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測できるという利点から得られたものである。得られる用途を以下に記載する。
本発明は、対象においてＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測する方法であって、
（ａ）上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量を基準値と比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量が上記基準値から逸脱しているか逸脱していないかを確認する工程と、
（ｄ）逸脱しているか逸脱していないかの確認結果を、上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの特定の診断及び／又は予後に帰する工程と
を有する方法に関する。
（ａ）上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量を基準値と比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量が上記基準値から逸脱しているか逸脱していないかを確認する工程と、
（ｄ）逸脱しているか逸脱していないかの確認結果を、上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの特定の診断及び／又は予後に帰する工程と
を有する方法に関する。
本発明の方法は、まだＨＥＲ２依存性がんであるとは診断されていない個体（例えば予防スクリーニング）、ＨＥＲ２依存性がんであると診断された個体、ＨＥＲ２依存性がんが疑われる個体（例えば、ＨＥＲ２依存性がんに特徴的な症状を１つ以上示す）、又はＨＥＲ２依存性がんが進行する危険性がある個体に使用できる。また、本方法は、ＨＥＲ２依存性がんの進行又は重症度の各種段階を検出するのにも使用できる。
工程（ａ）
工程（ａ）では、対象から採取した試料中のモエシン量を測定する。
工程（ａ）では、対象から採取した試料中のモエシン量を測定する。
モエシン量は、従来技術において公知である任意の好適な手法で測定できる。いくつかの実施形態において、モエシン量は、モエシン及び／又はその断片と特異的に結合できる結合剤を用いて測定できる。上記結合剤は、抗体、アプタマー、タンパク質、ペプチド、又は小分子であってもよい。例えば、モエシン量は、酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）、免疫放射定量測定法（ＩＲＭＡ）、若しくは放射免疫測定法（ＲＩＡ）等の免疫測定法、質量分析法、又はクロマトグラフィー法を用いて、あるいは上記方法を組み合わせて測定する。他のいくつかの実施形態において、モエシン量は、ＲＮＡ又はＤＮＡマイクロアレイに対するデジタル分子バーコード法又はｑＲＴ−ＰＣＲ等の任意の好適な手法を用いたモエシンｍＲＮＡの測定により決定できる。
工程（ｂ）＆（ｃ）
工程（ｂ）及び（ｃ）では、工程（ａ）で測定したモエシン量を基準値と比較し、工程（ａ）で測定したモエシン量が基準値から逸脱しているか逸脱していないかを確認する。
工程（ｂ）及び（ｃ）では、工程（ａ）で測定したモエシン量を基準値と比較し、工程（ａ）で測定したモエシン量が基準値から逸脱しているか逸脱していないかを確認する。
モエシン量の逸脱は、基準値と比較したモエシン量の減少、又は基準値と比較したモエシン量の増加を包含していてもよい。
例えば、基準値と比較したモエシン量の逸脱は、基準値と比較して少なくとも約１０％（約０．９倍以下）、少なくとも約２０％（約０．８倍以下）、少なくとも約３０％（約０．７倍以下）、少なくとも約４０％（約０．６倍以下）、少なくとも約５０％（約０．５倍以下）、少なくとも約６０％（約０．４倍以下）、少なくとも約７０％（約０．３倍以下）、少なくとも約８０％（約０．２倍以下）、少なくとも約９０％（約０．１倍以下）、又はそれ以上の減少を包含していてもよい。
例えば、基準値と比較したモエシン量の逸脱は、基準値と比較して少なくとも約１０％（約１．１倍以上）、少なくとも約２０％（約１．２倍以上）、少なくとも約３０％（約１．３倍以上）、少なくとも約４０％（約１．４倍以上）、少なくとも約５０％（約１．５倍以上）、少なくとも約６０％（約１．６倍以上）、少なくとも約７０％（約１．７倍以上）、少なくとも約８０％（約１．８倍以上）、少なくとも約９０％（約１．９倍以上）、少なくとも約１００％（約２倍以上）、少なくとも約１５０％（約２．５倍以上）、少なくとも約２００％（約３倍以上）、少なくとも約５００％（約６倍以上）、少なくとも約９００％（約１０倍以上）、又はそれ以上の増加を包含していてもよい。
好ましい実施形態において、対象から採取した試料中のモエシン量は、基準値と比較して少なくとも０．５倍減少しており、より好ましくは少なくとも０．７倍減少している。
別の好ましい実施形態において、対象から採取した試料中のモエシン量は、基準値と比較して少なくとも１．５倍増加しており、より好ましくは少なくとも２倍増加している。
別の好ましい実施形態において、対象から採取した試料中のモエシン量は基準値と等しい。
工程（ｄ）
工程（ｄ）では、工程（ｃ）での逸脱しているか逸脱していないかの確認結果を、対象におけるＨＥＲ２依存性がんの特定の診断及び／又は予後に帰する。
工程（ｄ）では、工程（ｃ）での逸脱しているか逸脱していないかの確認結果を、対象におけるＨＥＲ２依存性がんの特定の診断及び／又は予後に帰する。
基準値と比較したモエシン量の逸脱が増加である場合、ＨＥＲ２依存性がんではないという診断、又はＨＥＲ２依存性がんの予後良好を表している。従って、対象から採取した試料中のモエシン量が基準値と比較して多い場合、該対象はＨＥＲ２依存性がんではないこと、又は該対象は生存期間が長いことを示している。
基準値と比較したモエシン量の逸脱が減少である場合、ＨＥＲ２依存性がんであるという診断、又はＨＥＲ２依存性がんの予後不良を表している。従って、対象から採取した試料中のモエシン量が基準値と比較して少ない場合、該対象はＨＥＲ２依存性がんであること、及び／又は該対象は生存期間が短いことを示している。
モエシン量と基準値との間に逸脱が見られない場合、そのように逸脱が存在しないということは、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後が基準値で表されるものと実質的に同じであるという結論を示しているか、あるいはそのような結論に帰すことができる。
また、本発明の方法は、ＨＥＲ２依存性がんに関する別の１種以上のバイオマーカーの評価と組み合わせてもよい。
上記１種以上のバイオマーカーは、ＥＲ／ＰＲ（エストロゲン受容体／プロゲステロン受容体）、ＨＥＲ２、ｐ９５ＨＥＲ２、ＫＩ６７、ＴＯＰ２Ａ（トポイソメラーゼ２α）、ＢＣＬ２（Ｂ細胞リンパ腫２）、ＧＳＴＭ１（グルタチオンＳ−トランスフェラーゼＭｕ１）、ＢＡＧ１、サイクリンＢ１、カテプシンＬ２、ＣＤ６８、及びＴＰ５３からなる群より選択できる。
（診断及び／又は予後の変化をモニターする方法）
また、対象におけるＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測する方法を用いて、予防又は治療処置等の介入治療に対するＨＥＲ２依存性がんの反応を検出することができ、例えば、該予防又は治療処置等の介入治療中の各時点で上記方法を実施することによって検出できる。
また、対象におけるＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測する方法を用いて、予防又は治療処置等の介入治療に対するＨＥＲ２依存性がんの反応を検出することができ、例えば、該予防又は治療処置等の介入治療中の各時点で上記方法を実施することによって検出できる。
従って、本発明は、対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後の変化をモニターする方法であって、
（ａ）１つ又は複数の連続した時点で請求項１〜１０のいずれかの方法を上記対象に対して実施することで、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を決定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断に変化があるか否かを確認する工程と
を有する方法に関する。
（ａ）１つ又は複数の連続した時点で請求項１〜１０のいずれかの方法を上記対象に対して実施することで、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を決定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断に変化があるか否かを確認する工程と
を有する方法に関する。
いくつかの実施形態において、上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後の変化は、上記対象の医学的処置中にモニターされる。
上記医学的処置は、予防処置又は治療処置であってもよく、抗腫瘍処置であることが好ましい。上記抗腫瘍処置は、上記ＨＥＲ２依存性がんの処置として知られている任意の処置であってもよい。例えば、上記抗腫瘍処置は、抗ＨＥＲ２抗体療法（例えば、ハーセプチン／トラスツズマブ、ペルツズマブ、及びトラスツズマブエムタンシン（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ社、米国））等、ＨＥＲ２の細胞外領域を標的とすることを狙ったものでもよいし、あるいは上記抗腫瘍処置は、小分子チロシンキナーゼ阻害薬（例えば、ネラチニブ、ツカチニブ（Ｔｕｃａｔｉｎｉｂ）、又はラパチニブ／タイケルブ（ＧＳＫ社、米国））等、ＨＥＲ２のキナーゼ活性を標的とすることを狙ったものでもよい。また、上記抗腫瘍処置は、パクリタキセル等のタキサン系化学療法であってもよい。
（キット）
本発明はまた、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後をその対象において決定するためのキットであって、
・上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
・ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有するキットに関する。
本発明はまた、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後をその対象において決定するためのキットであって、
・上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
・ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有するキットに関する。
本発明はまた、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後をその対象において決定するためのキットの使用であって、上記キットは、
・上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
・ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有する、使用に関する。
・上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
・ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有する、使用に関する。
いくつかの実施形態において、手段は、モエシン及び／又はその断片と特異的に結合できる結合剤を含んでいてもよい。上記結合剤は、抗体、アプタマー、タンパク質、ペプチド、又は小分子であってもよい。
他のいくつかの実施形態において、手段は、モエシンｍＲＮＡの特異的且つ定量的な増幅のための特異的増幅プライマー及び／又はプローブを含んでいてもよく、例えば、上記プライマー及び／又はプローブは配列番号４及び配列番号５である。
本発明はまた、ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後をそのヒト対象において決定するための、モエシンｍＲＮＡの特異的且つ定量的な増幅のための配列番号４及び配列番号５のプライマー及び／又はプローブの使用に関する。
（処置方法）
上述の通り、本発明は、予防又は治療処置等の介入治療に対するＨＥＲ２依存性がんの反応を検出するのに有用であり、例えば、該予防又は治療処置等の介入治療中の各時点で上記方法を実施することによって検出できる。
上述の通り、本発明は、予防又は治療処置等の介入治療に対するＨＥＲ２依存性がんの反応を検出するのに有用であり、例えば、該予防又は治療処置等の介入治療中の各時点で上記方法を実施することによって検出できる。
同様に、本発明はまた、対象におけるＨＥＲ２依存性がんを処置する方法であって、
（ｉ）本発明に係る診断又は予後予測方法を実施する工程と、
（ｉｉ）上記方法により上記対象はＨＥＲ２依存性がんであると示される場合、及び／又は上記対象は生存期間が短いと示される場合、上記対象において適切な処置を開始する工程と
を有する方法に関する。
（ｉ）本発明に係る診断又は予後予測方法を実施する工程と、
（ｉｉ）上記方法により上記対象はＨＥＲ２依存性がんであると示される場合、及び／又は上記対象は生存期間が短いと示される場合、上記対象において適切な処置を開始する工程と
を有する方法に関する。
具体的な一実施形態において、上記適切な処置は、予防処置又は治療処置から選択される１種以上の薬物療法であり、抗ＨＥＲ２抗体療法（例えば、ハーセプチン／トラスツズマブ、ペルツズマブ、及びトラスツズマブエムタンシン（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ社、米国））等、ＨＥＲ２の細胞外領域を標的とすること、又は小分子チロシンキナーゼ阻害薬（例えば、ネラチニブ、ツカチニブ（Ｔｕｃａｔｉｎｉｂ）、又はラパチニブ／タイケルブ（ＧＳＫ社、米国））等、ＨＥＲ２のキナーゼ活性を標的とすることを目的とした抗腫瘍処置であることが好ましい。
以下の実施例により本発明を説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されない。
（実施例１：方法）
方法：
データセット及びｍＲＮＡ発現分析
ＴＣＧＡコホートの浸潤性乳がん患者から採取した試料５２９個におけるＭＳＮ及びＨＥＲ２のｍＲＮＡ発現プロファイルをｃｂｉｏｐｏｒｔａｌデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｉｏｐｏｒｔａｌ．ｏｒｇ）から収集した。それらの発現量を色分けした表示を上パネルに、散布図を下パネルに示す。次いで、ＧｒａｐｈＰａｄ ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用し、スピアマンのｒｈｏ係数算出により相関分析した（図３）。
方法：
データセット及びｍＲＮＡ発現分析
ＴＣＧＡコホートの浸潤性乳がん患者から採取した試料５２９個におけるＭＳＮ及びＨＥＲ２のｍＲＮＡ発現プロファイルをｃｂｉｏｐｏｒｔａｌデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｉｏｐｏｒｔａｌ．ｏｒｇ）から収集した。それらの発現量を色分けした表示を上パネルに、散布図を下パネルに示す。次いで、ＧｒａｐｈＰａｄ ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用し、スピアマンのｒｈｏ係数算出により相関分析した（図３）。
データセット及びｍＲＮＡ発現分析
オンラインのカプラン・マイヤープロッター（ｈｔｔｐ：／／ｋｍｐｌｏｔ．ｃｏｍ／ａｎａｌｙｓｉｓ／）を用いて、乳がん患者の全生存期間を評価した。患者（ＧＥＯ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ社製ＨＧＵ１３３Ａ及びＨＧＵ１３３＋２マイクロアレイ）から得た患者１８０９人に由来する遺伝子発現データ及び生存情報）をモエシン発現レベルの下位四分位に従って２群に分けた。分析は、ＨＥＲ２陽性状態（（ＩＣＨ）のみ及び分子サブタイプＨＥＲ２＋ＥＲ、ｎ＝３０）又はＨＥＲ２−（ＥＲ＋／−、ｎ＝１３０）の乳がん患者のいずれかに限定した。カプラン・マイヤー生存プロットによって２群の患者コホートを比較し、９５％信頼区間のハザード比とログランクＰ値とを算出する。各データベースは半年ごとに更新する（図２）。
オンラインのカプラン・マイヤープロッター（ｈｔｔｐ：／／ｋｍｐｌｏｔ．ｃｏｍ／ａｎａｌｙｓｉｓ／）を用いて、乳がん患者の全生存期間を評価した。患者（ＧＥＯ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ社製ＨＧＵ１３３Ａ及びＨＧＵ１３３＋２マイクロアレイ）から得た患者１８０９人に由来する遺伝子発現データ及び生存情報）をモエシン発現レベルの下位四分位に従って２群に分けた。分析は、ＨＥＲ２陽性状態（（ＩＣＨ）のみ及び分子サブタイプＨＥＲ２＋ＥＲ、ｎ＝３０）又はＨＥＲ２−（ＥＲ＋／−、ｎ＝１３０）の乳がん患者のいずれかに限定した。カプラン・マイヤー生存プロットによって２群の患者コホートを比較し、９５％信頼区間のハザード比とログランクＰ値とを算出する。各データベースは半年ごとに更新する（図２）。
また、ＭＥＴＡＢＲＩＣコホートの乳がん患者の全生存期間を、ｃｂｉｏｐｏｒｔａｌデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｉｏｐｏｒｔａｌ．ｏｒｇ／）で得られた該患者の臨床及びトランスクリプトームプロファイルに基づいて分析した。ＨＥＲ２＋乳がん患者２３６人又はＨＥＲ２−乳がん患者１６６８人をモエシン発現レベル中央値に従って２群に分けた。カプラン・マイヤー生存プロットによって２群の患者コホートを比較し、９５％信頼区間のハザード比とログランク（Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ）検定値とを算出した。
細胞株
異なるＨＥＲ２状態を有する乳がん細胞株から得たライセート（ＵＡＣＣ−８１２（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１８９７（商標））、ＭＤＡ−ＭＢ−３６１（ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−２７（商標））、ＺＲ−７５−３０（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１５０４（商標））、ＨＣＣ２０２（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−２３１６（商標））、及びＳＫ−ＢＲ−３［ＳＫＢＲ３］（ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−３０（商標）））を分析した。それらは、Ｅｍｍａｎｕｅｌｌｅ Ｃｈａｒａｆｅ−Ｊａｕｆｆｒｅｔ博士（エクス＝マルセイユ大学、Ｉｎｓｔｉｔｕｔ Ｐａｏｌｉ−Ｃａｌｍｅｔｔｅｓ）から入手した。
異なるＨＥＲ２状態を有する乳がん細胞株から得たライセート（ＵＡＣＣ−８１２（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１８９７（商標））、ＭＤＡ−ＭＢ−３６１（ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−２７（商標））、ＺＲ−７５−３０（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１５０４（商標））、ＨＣＣ２０２（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−２３１６（商標））、及びＳＫ−ＢＲ−３［ＳＫＢＲ３］（ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−３０（商標）））を分析した。それらは、Ｅｍｍａｎｕｅｌｌｅ Ｃｈａｒａｆｅ−Ｊａｕｆｆｒｅｔ博士（エクス＝マルセイユ大学、Ｉｎｓｔｉｔｕｔ Ｐａｏｌｉ−Ｃａｌｍｅｔｔｅｓ）から入手した。
試薬
一次抗体としては、抗ＨＥＲ２（ａｂ２４２８、Ａｂｃａｍ社、１：１０００）、抗クラスリン（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社、＃６１０５００、１：１０００）を使用した。二次抗体としては、ＨＲＰ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社、１：５０００）と結合させた抗ウサギＩｇＧ（＃ＮＡ９３４０−１ＭＬ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）又は抗マウスＩｇＧ（＃ＮＡ９３１０−１ＭＬ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）を使用した。抗ＭＳＮは、Ｐａｕｌ Ｍａｎｇｅａｔ博士（モンペリエ大学）から贈呈されたものであり、１：１０００希釈で使用した。
一次抗体としては、抗ＨＥＲ２（ａｂ２４２８、Ａｂｃａｍ社、１：１０００）、抗クラスリン（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社、＃６１０５００、１：１０００）を使用した。二次抗体としては、ＨＲＰ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社、１：５０００）と結合させた抗ウサギＩｇＧ（＃ＮＡ９３４０−１ＭＬ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）又は抗マウスＩｇＧ（＃ＮＡ９３１０−１ＭＬ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）を使用した。抗ＭＳＮは、Ｐａｕｌ Ｍａｎｇｅａｔ博士（モンペリエ大学）から贈呈されたものであり、１：１０００希釈で使用した。
ウエスタンブロット
標準プロトコルに従い、Ｌａｅｍｍｌｉバッファを用いて９５℃１０分でライセートを変性させ、勾配バッファ（１００ｍＭトリス、１００ｍＭトリシン、０．１％ＳＤＳ）中、１０％ＳＤＳ／ポリアクリルアミドゲル（ＰｒｏＳｉｅｖｅ、Ｌｏｎｚａ社）でタンパク質を分離し、転写バッファ（２０％ＥｔＯＨ、２５ｍＭトリス、１９２ｍＭグリシン、ｐＨ８．５）を用いてニトロセルロース膜（Ｗｈａｔｍａｎ（登録商標））上に転写した。３％ＢＳＡ含有ＴＢＳＴバッファ（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、３ｍＭ ＫＣｌ、２５ｍＭトリス、０．１％Ｔｗｅｅｎ）を用いて室温３０分で膜をブロッキングし、一次抗体と共に４℃で一晩インキュベートした。二次抗体として、西洋わさびペルオキシダーゼ結合抗ウサギ又は抗マウス抗体を使用した。ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ Ｗｅｓｔ Ｐｉｃｏ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（Ｐｉｅｒｃｅ社）を用いて、ＦＵＳＩＯＮ−ＦＸ７−ＳＰＥＣＴＲＡ撮影システム（Ｖｉｌｂｅｒ Ｌｏｕｒｍａｔ社）で検出した。
標準プロトコルに従い、Ｌａｅｍｍｌｉバッファを用いて９５℃１０分でライセートを変性させ、勾配バッファ（１００ｍＭトリス、１００ｍＭトリシン、０．１％ＳＤＳ）中、１０％ＳＤＳ／ポリアクリルアミドゲル（ＰｒｏＳｉｅｖｅ、Ｌｏｎｚａ社）でタンパク質を分離し、転写バッファ（２０％ＥｔＯＨ、２５ｍＭトリス、１９２ｍＭグリシン、ｐＨ８．５）を用いてニトロセルロース膜（Ｗｈａｔｍａｎ（登録商標））上に転写した。３％ＢＳＡ含有ＴＢＳＴバッファ（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、３ｍＭ ＫＣｌ、２５ｍＭトリス、０．１％Ｔｗｅｅｎ）を用いて室温３０分で膜をブロッキングし、一次抗体と共に４℃で一晩インキュベートした。二次抗体として、西洋わさびペルオキシダーゼ結合抗ウサギ又は抗マウス抗体を使用した。ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ Ｗｅｓｔ Ｐｉｃｏ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（Ｐｉｅｒｃｅ社）を用いて、ＦＵＳＩＯＮ−ＦＸ７−ＳＰＥＣＴＲＡ撮影システム（Ｖｉｌｂｅｒ Ｌｏｕｒｍａｔ社）で検出した。
ＲＮＡ抽出、ｃＤＮＡ調製、及びリアルタイム定量ＲＴ−ＰＣＲ分析
Ｔｒｉ Ｒｅａｇｅｎｔ（登録商標）（Ｓｉｇｍａ社、Ｔ９４２４）を用いて細胞から全ＲＮＡを抽出した。ＮａｎｏＤｒｏｐ２０００分光光度計（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、デラウェア州ウィルミントン）を用いて、全ＲＮＡの濃度及び完全性を測定した。ＲＮａｓｅＯＵＴ（商標）処理（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、デラウェア州ウィルミントン）後にＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ（商標）ＩＩ ＲＴを用いて全ＲＮＡ２００ｎｇで逆転写反応を実施した。製造業者の指示書に従い、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｉ Ｍａｓｔｅｒキット（Ｒｏｃｈｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ社）を用いて、ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ ４８０ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ＩＩでリアルタイム定量ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）を１０μｌで実施した。
Ｔｒｉ Ｒｅａｇｅｎｔ（登録商標）（Ｓｉｇｍａ社、Ｔ９４２４）を用いて細胞から全ＲＮＡを抽出した。ＮａｎｏＤｒｏｐ２０００分光光度計（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、デラウェア州ウィルミントン）を用いて、全ＲＮＡの濃度及び完全性を測定した。ＲＮａｓｅＯＵＴ（商標）処理（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、デラウェア州ウィルミントン）後にＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ（商標）ＩＩ ＲＴを用いて全ＲＮＡ２００ｎｇで逆転写反応を実施した。製造業者の指示書に従い、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｉ Ｍａｓｔｅｒキット（Ｒｏｃｈｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ社）を用いて、ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ ４８０ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ＩＩでリアルタイム定量ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）を１０μｌで実施した。
ＰＣＲプライマーは以下の通りである。
ＨＥＲ２
フォワードＨＥＲ２ ５’−ＧＣＣＧＣＡＧＴＧＡＧＣＡＣＣＡＴ−３（配列番号２）
リバースＨＥＲ２ ５’−ＣＧＣＡＧＣＴＴＣＡＴＧＴＣＴＧＴＧＣ−３’（配列番号３）
ＭＳＮ
フォワードＭＳＮ ５’−ＧＧＡＡＴＧＡＧＡＣＡＧＧＡＣＣＴＡＧＧＡＴＡＴＣＴＴ−３’（配列番号４）
リバースＭＳＮ ５’−ＧＧＡＡＴＧＡＧＡＣＡＧＧＡＣＣＴＡＧＧＡＴＡＴＣＴＴ−３’（配列番号５）
ＧＡＰＤＨ
フォワードＧＡＰＤＨ ５’−ＧＡＴＣＣＣＴＣＣＡＡＡＡＴＣＡＡＧＴＧＧ−３’（配列番号６）
リバースＧＡＰＤＨ ５’−ＧＣＡＡＡＴＧＡＧＣＣＣＣＡＧＣＣＴＴＣＴＣ−３’（配列番号７）
ＨＥＲ２
フォワードＨＥＲ２ ５’−ＧＣＣＧＣＡＧＴＧＡＧＣＡＣＣＡＴ−３（配列番号２）
リバースＨＥＲ２ ５’−ＣＧＣＡＧＣＴＴＣＡＴＧＴＣＴＧＴＧＣ−３’（配列番号３）
ＭＳＮ
フォワードＭＳＮ ５’−ＧＧＡＡＴＧＡＧＡＣＡＧＧＡＣＣＴＡＧＧＡＴＡＴＣＴＴ−３’（配列番号４）
リバースＭＳＮ ５’−ＧＧＡＡＴＧＡＧＡＣＡＧＧＡＣＣＴＡＧＧＡＴＡＴＣＴＴ−３’（配列番号５）
ＧＡＰＤＨ
フォワードＧＡＰＤＨ ５’−ＧＡＴＣＣＣＴＣＣＡＡＡＡＴＣＡＡＧＴＧＧ−３’（配列番号６）
リバースＧＡＰＤＨ ５’−ＧＣＡＡＡＴＧＡＧＣＣＣＣＡＧＣＣＴＴＣＴＣ−３’（配列番号７）
ＰＣＲ条件は、９５℃１０秒；６０℃１０秒；７２℃１５秒であった。各ランの最後に融解曲線分析を実施して、単一の生成物が合成されたことを確認した。２−ΔΔＣｔ法を用いて、ＧＡＰＤＨで標準化したＨＥＲ２の相対発現量を算出した。各種のＨＥＲ２状態を有する２５種類の乳がん細胞株について、ＨＥＲ２及びＭＳＮのｍＲＮＡレベルの分析を実施した。
（実施例２：ＨＥＲ２発現に対するモエシン発現の影響）
（材料及び方法）
異なるＨＥＲ２状態を有するいくつかの乳がん細胞株（ＵＡＣＣ８１２、ＭＤＡＭＢ３６１、ＺＲ−７５３０、ＨＣＣ２０２、及びＳＫＢＲ３）において、ＨＥＲ２及びモエシンの発現レベルをウエスタンブロットで分析し、定量した（図１Ａ）。
（材料及び方法）
異なるＨＥＲ２状態を有するいくつかの乳がん細胞株（ＵＡＣＣ８１２、ＭＤＡＭＢ３６１、ＺＲ−７５３０、ＨＣＣ２０２、及びＳＫＢＲ３）において、ＨＥＲ２及びモエシンの発現レベルをウエスタンブロットで分析し、定量した（図１Ａ）。
ＨＥＲ２及びモエシンのｍＲＮＡ発現レベルをＡｇｉｌｅｎｔ社のマイクロアレイデータから入手し、ＴＣＧＡコホートの浸潤性乳がん患者５２９人から収集した（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｂｉｏｐｏｒｔａｌ．ｏｒｇ）。それらの発現量を色分けした表示を上パネルに、散布図を下パネルに示す。ＨＥＲ２発現レベルが低い患者（ｚスコア＜２）を薄灰色で、ＨＥＲ２発現レベルが高い患者（ｚスコア≧２）を黒色で示す。そして、スピアマンのｒｈｏ係数算出（ｒ＝−０．３０１２、Ｐ＜０．０００１）によって、ＨＥＲ２とＭＳＮとのｍＲＮＡ発現の相関を評価した（図３）。
オンラインの乳がん用カプラン・マイヤープロッター（ｈｔｔｐ：／／ｋｍｐｌｏｔ．ｃｏｍ／ａｎａｌｙｓｉｓ／）を用いて、乳がん患者の全生存期間に対するモエシン発現レベルの影響を分析した。モエシン発現レベルの下位四分位に従って患者を２群に分けた。分析は、ＨＥＲ２陽性状態（分子サブタイプ（ＨＥＲ２＋ＥＲ）に対する免疫組織化学的検査（ＩＨＣ）によりＨＥＲ２＋、図２Ａ）又はＨＥＲ２−乳がん患者（図２Ｂ）のいずれかに限定した。
（結果）
様々な乳がん細胞株に対してインビトロで分析を行った結果、ＨＥＲ２の発現／活性化レベルとモエシンの発現レベルとに強い逆相関が見られた（図１）。
様々な乳がん細胞株に対してインビトロで分析を行った結果、ＨＥＲ２の発現／活性化レベルとモエシンの発現レベルとに強い逆相関が見られた（図１）。
これはインビボでも確認されたものであり、浸潤性乳がん患者５２９人から採取した腫瘍試料を分析したところ、ＨＥＲ２発現が高い患者ではモエシン発現が低いことがはっきりと観察された（図３）。実際、スピアマン相関検定によって、ＨＥＲ２及びモエシンのｍＲＮＡ発現レベルに強く且つ非常に顕著な逆相関があることが明らかとなった（ｒ＝−０．３０１２、Ｐ＜０．０００１）（図３）。
乳がんデータに対するカプラン・マイヤー生存期間分析の結果、ＨＥＲ２＋乳がんであると診断された患者３０人に見られるモエシン発現レベルの低さは、モエシン発現が高い患者と比較して全生存期間が顕著に短いこと及び予後が不良であることと関連することが明らかとなった（４２ヶ月対＞１５０ヶ月（Ｐ＝０、０２３９）；死亡率：７５％に対して＜３０％）（図２Ａ）。しかしながら、モエシン発現レベルがＨＥＲ２−乳がん患者の生存プロファイルを変化させなかったことから、これはＨＥＲ２＋乳がんに特異的なものであった（図２Ｂ）。
これらの発見は、ＭＥＴＡＢＲＩＣコホートから得られた分析データにより裏付けられる。ＨＥＲ２＋乳がんであると診断された患者２３６人に見られるモエシン発現レベルの低さは、モエシン発現が高い患者と比較して全生存期間が顕著に短いこと及び予後が不良であることと関連することが分かる（８５．３ヶ月対１２０．１ヶ月（Ｐ＝０．０１７３）；死亡率：６８％に対して５５％）（図４Ａ）。重要な点として、モエシン発現レベルではＨＥＲ２−乳がん患者をその予測全生存期間により区分けすることはできないことから、これはＨＥＲ２＋乳がんに特異的である（ＨＥＲ２−患者１１６８人、Ｐ＝０．３６７６、図４Ｂ）。
（結論）
これらの結果から、インビトロ（乳がん細胞中）及びインビボ（乳がん患者から採取した腫瘍試料中）においてＨＥＲ２及びＭＳＮの抑制は逆相関することが確認された。更に、生存期間分析の結果、モエシンの発現レベルの低さは、ＨＥＲ２＋乳がんであると診断された患者において特異的に全生存期間が短いことと関連することが確認された。従って、モエシンは、対象においてＨＥＲ２＋乳がんを診断及び／又は予後予測するための予測バイオマーカーである。更に、上記データから、ＭＳＮの喪失はＨＥＲ２＋ＢＣに特異的であることが分かる。ＢＣ患者におけるＭＳＮの喪失は、ＨＥＲ２＋がんであることを示している。
これらの結果から、インビトロ（乳がん細胞中）及びインビボ（乳がん患者から採取した腫瘍試料中）においてＨＥＲ２及びＭＳＮの抑制は逆相関することが確認された。更に、生存期間分析の結果、モエシンの発現レベルの低さは、ＨＥＲ２＋乳がんであると診断された患者において特異的に全生存期間が短いことと関連することが確認された。従って、モエシンは、対象においてＨＥＲ２＋乳がんを診断及び／又は予後予測するための予測バイオマーカーである。更に、上記データから、ＭＳＮの喪失はＨＥＲ２＋ＢＣに特異的であることが分かる。ＢＣ患者におけるＭＳＮの喪失は、ＨＥＲ２＋がんであることを示している。
Claims (15)
- 対象においてＨＥＲ２依存性がんを診断及び／又は予後予測する方法であって、
（ａ）上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量を基準値と比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で測定したモエシン量が上記基準値から逸脱しているか逸脱していないかを確認する工程と、
（ｄ）逸脱しているか逸脱していないかの確認結果を、上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの特定の診断及び／又は予後に帰する工程と
を有する方法。 - 上記対象から採取した試料中のモエシン量が上記基準値と比較して少ない場合、上記対象はＨＥＲ２依存性がんであること、及び／又は上記対象は生存期間が短いことを示している、請求項１に記載の方法。
- 上記対象から採取した試料中のモエシン量が上記基準値と比較して多い場合、上記対象はＨＥＲ２依存性がんではないこと、又は上記対象は生存期間が長いことを示している、請求項１に記載の方法。
- 上記試料は腫瘍試料又は体液試料である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
- 上記体液試料は、血液、血清血漿、唾液、尿、羊水、母乳、気管支洗浄液、脳脊髄液、腹水、精液、涙、及び胸水からなる群より選択され、好ましくは血液である、請求項４に記載の方法。
- 上記対象から採取した試料中のモエシン量は、上記基準値と比較して少なくとも０．５倍減少しており、より好ましくは少なくとも０．７倍減少している、請求項２に記載の方法。
- 上記対象から採取した試料中のモエシン量は、上記基準値と比較して少なくとも１．５倍増加しており、より好ましくは少なくとも２倍増加している、請求項３に記載の方法。
- 上記対象から採取した試料中のモエシン量は上記基準値と等しい、請求項１、４、又は５に記載の方法。
- 上記基準値は、（ｉ）ＨＥＲ２依存性がんではないという診断、又は（ｉｉ）ＨＥＲ２依存性がんであるという診断、（ｉｉｉ）ＨＥＲ２依存性がんの予後良好、又は（ｉｖ）ＨＥＲ２依存性がんの予後不良を表す、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
- 上記ＨＥＲ２依存性がんは、乳がん、子宮内膜がん、子宮がん、又は卵巣がん等の女性生殖器がん、膀胱がん、肛門がん、大腸がん、特に子宮体部漿液性腺がん（ｕｔｅｒｉｎｅ ｐａｐｉｌｌａｒｙ ｓｅｒｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）等の子宮漿液性がん、肺がん、特に非小細胞肺がん、肝臓がん、腎臓がん、胃食道がん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、膵臓がん、及び胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）からなる群より選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
- 上記ＨＥＲ２依存性がんはＨＥＲ２＋乳がんである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
- 対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後の変化をモニターする方法であって、
（ａ）１つ又は複数の連続した時点で請求項１〜１１のいずれかの方法を上記対象に対して実施することで、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を決定する工程と、
（ｂ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後を比較する工程と、
（ｃ）上記工程（ａ）で決定された、上記連続した時点での上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断に変化があるか否かを確認する工程と
を有する方法。 - 上記対象におけるＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後の変化は、上記対象の医学的処置中にモニターされる、請求項１２に記載の方法。
- 上記医学的処置は予防処置又は治療処置であり、好ましくは抗腫瘍処置である、請求項１２又は１３のいずれか１項に記載の方法。
- ＨＥＲ２依存性がんの診断及び／又は予後をその対象において決定するためのキットの使用であって、該キットは、
上記対象から採取した試料中のモエシン量を測定する手段と、
ＨＥＲ２依存性がんの公知の診断及び／又は予後を表す上記モエシン量の基準値又は該基準値を設定する手段と
を有する、使用。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP17306465 | 2017-10-24 | ||
| EP17306465.0 | 2017-10-24 | ||
| PCT/EP2018/079213 WO2019081608A1 (en) | 2017-10-24 | 2018-10-24 | DIAGNOSIS AND / OR PROGNOSIS OF HER2-DEPENDENT CANCER USING MOESIN AS A BIOMARKER |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2021500566A true JP2021500566A (ja) | 2021-01-07 |
Family
ID=60413117
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2020523009A Pending JP2021500566A (ja) | 2017-10-24 | 2018-10-24 | モエシンをバイオマーカーとして使用するｈｅｒ２依存性がんの診断及び／又は予後 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20200308652A1 (ja) |
| EP (1) | EP3701049B1 (ja) |
| JP (1) | JP2021500566A (ja) |
| WO (1) | WO2019081608A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102355205B1 (ko) | 2020-04-22 | 2022-01-25 | 서울대학교병원 | 방광암 세포의 이동성 예측용 조성물 및 이를 포함하는 키트 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20170045519A1 (en) * | 2014-04-22 | 2017-02-16 | Shanghai Kexin Biotech Co., Ltd. | Method and biomarker for detecting cancer |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2188385A2 (en) * | 2007-09-07 | 2010-05-26 | Université Libre de Bruxelles | Methods and tools for prognosis of cancer in her2+ patients |
| EP2278026A1 (en) * | 2009-07-23 | 2011-01-26 | Université de la Méditerranée | A method for predicting clinical outcome of patients with breast carcinoma |
| FR3018919B1 (fr) * | 2014-03-18 | 2018-03-16 | Universite Paris Descartes | Procede de criblage d'inhibiteurs d'erbb2 et ses applications |
-
2018
- 2018-10-24 US US16/758,644 patent/US20200308652A1/en not_active Abandoned
- 2018-10-24 EP EP18788798.9A patent/EP3701049B1/en active Active
- 2018-10-24 JP JP2020523009A patent/JP2021500566A/ja active Pending
- 2018-10-24 WO PCT/EP2018/079213 patent/WO2019081608A1/en unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20170045519A1 (en) * | 2014-04-22 | 2017-02-16 | Shanghai Kexin Biotech Co., Ltd. | Method and biomarker for detecting cancer |
| JP2017515107A (ja) * | 2014-04-22 | 2017-06-08 | シャンハイ クーシン バイオテック カンパニー，リミテッド | がんを検出するための方法およびバイオマーカー |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| M BARTOVA ET AL: "Expression of ezrin and moesin in primary breast carcinoma and matched lymph metastases", CLINICAL AND EXPREIMINTAL METASTASIS, vol. 34, no. 5, JPN7022003493, 17 June 2017 (2017-06-17), pages 333 - 344, XP036299974, ISSN: 0005006360, DOI: 10.1007/s10585-017-9853-y * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2019081608A1 (en) | 2019-05-02 |
| EP3701049B1 (en) | 2021-12-08 |
| EP3701049A1 (en) | 2020-09-02 |
| US20200308652A1 (en) | 2020-10-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10539566B2 (en) | Use of markers including filamin A in the diagnosis and treatment of prostate cancer | |
| US20120225954A1 (en) | Methods and compositions for the classification of non-small cell lung carcinoma | |
| US20210310080A1 (en) | Composition for diagnosing cancer using potassium channel proteins | |
| CN114854863A (zh) | 基于生物标志物构建的模型在预测癌症免疫疗效中的应用 | |
| JP2020143103A (ja) | 癌処置のためのＭｅｔタンパク質の定量 | |
| US20240069029A1 (en) | Pd-ecgf as biomarker of cancer | |
| JP6361943B2 (ja) | 補体因子ｂタンパク質に特異的に結合する抗体及び糖鎖抗原１９−９タンパク質に特異的に結合する抗体を含む膵臓癌診断用キット | |
| JP2021500566A (ja) | モエシンをバイオマーカーとして使用するｈｅｒ２依存性がんの診断及び／又は予後 | |
| US11814685B2 (en) | Diagnosis and/or prognosis of HER2-dependent cancer using one or more miRNA as a biomarker | |
| JP2018531234A6 (ja) | 癌処置のためのＭｅｔタンパク質の定量 | |
| EP2895863B1 (en) | New biomarkers for the diagnosis and/or prognosis of clear cell renal cell carcinoma | |
| EP3336547A1 (en) | Novel human bladder cancer biomarkers and their diagnostic use | |
| Olivieri et al. | Urinary protease inhibitor Serpin B3 is higher in women and is further increased in female patients affected by aldosterone producing adenoma | |
| US11994513B2 (en) | Diagnostic and prognostic methods for estrogen-induced cancers | |
| KR102326119B1 (ko) | 암의 면역 치료 후 예후 예측용 바이오 마커 | |
| US20230228753A1 (en) | Methods of detecting cancer | |
| US20240044902A1 (en) | Methods for the detection and treatment of ovarian cancer | |
| JP2017201255A (ja) | がんの検出法 | |
| CN107850599B (zh) | Wbp2与her2作为共预后因子对患者分层以进行治疗 | |
| CA2929492C (en) | Methods of detecting cancer | |
| US20190064172A1 (en) | Prognosis of serous ovarian cancer using biomarkers | |
| KR20230126529A (ko) | 췌장암 진단을 위한 세포외 소포체 유래 miRNA 유전자 바이오마커 및 이의 용도 | |
| KR20210080694A (ko) | 암의 진단용 조성물 | |
| TW201740109A (zh) | 檢測癌症之方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201116 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210916 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20220719 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220726 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20230307 |