JP2021171747A - 不織布及び赤血球含有生体由来液処理フィルター - Google Patents

Abstract

【課題】赤血球を含む生体由来液から、当該赤血球に悪影響を与えることなく、白血球及び／又は血小板を除去することのできる不織布の提供。【解決手段】不織布基材と、不織布基材をコーティングしている、下記一般式（１）で表される構成単位を有するポリマーと、を含み、ポリマーの量が、不織布基材１ｇあたり、１.０ｍｇ以上３０ｍｇ以下である不織布。［式中、Ｒ1は、水素原子又はメチル基、Ｒ2は、メチル基又はエチル基、ｎは、２〜５の整数、ｍは、１又は２である］【選択図】なし

Description

本発明は、不織布、及び赤血球を含む生体由来液の処理フィルターに関する。

輸血分野においては、血液製剤中に含まれる混入白血球を除去した後に輸血を行う白血球除去輸血が一般的になっている。これは輸血にともなう頭痛、吐気、悪寒等の副作用や、受血者により深刻な影響を及ぼすアロ抗原感作、輸血後移植片対宿主疾患（ＧＶＨＤ）、及びウイルス感染等の重篤な副作用が、主として輸血に用いられた血液製剤中に混入している白血球が原因となって引き起こされることが明らかになった為である。

血小板についても、輸血を受けた者の体内で抗血小板抗体が生成されることが明らかになり、抗血小板抗体の生成を抑制するためにも、血小板が除去された血液製剤の需要が高まる一方である。

血液浄化の分野においても、敗血症や全身性炎症反応症候群（SIRS）をはじめとする炎症状態の患者から白血球を体外循環フィルターデバイスで除去することにより、サイトカイン、及びアラーミンといった生理活性物質の産生を抑制する事で、炎症状態を治療する白血球除去療法が注目されている。

これら血液や血液製剤といった赤血球を含む生体由来液を処理する為のフィルターには、目標とするものの除去能力と同時に、赤血球へ溶血等の悪影響を与えないことが要求される。

血液や血液製剤から白血球や血小板を除去するためには、フィルター基材表面にアミノ基などのカチオンを含むポリマーを塗布することで、白血球や血小板との相互作用を高くする手法が一般的に用いられている。しかしながら、白血球、血小板除去能を向上させるためにポリマーに含まれるアミノ基の量を増加させていくと、白血球、血小板の除去能が向上するが、赤血球が溶血を起こしてしまう悪影響がある。

赤血球を含む生体由来液より、白血球や血小板を除去するフィルターにおいて、特許文献１では、通常の溶液重合によって合成した、２−メトキシエチル（メタ）アクリレート（MEMA）と、N,N−ジエチルアミノエチル（メタ）アクリレート（DEAEMA）とメタクリル酸メチルベタイン（CMB）との共重合体を担体表面にコーティングすることで赤血球に悪影響を及ぼすことなく、赤血球を含む生体由来液を処理できるという技術を開示している。

また、特許文献２では基材表面をカチオン化することにより白血球、血小板との相互作用を持たせることに加え、表面を親水化し血液との濡れ性を高めることと流れ性をよくすることで、高い白血球除去性能および血小板除去性能が得られるということを開示している。

一方、特許文献３は血液適合性ポリマーを中空糸膜やビーズにコートすることで長期の使用を経ても血液適合性の低下のおこらない血液処理用分離膜およびその膜を組み込んだ血液処理器を提供することを開示している。

国際公開第２０１６／０５２６１８号公報 特開２０００−１９７８１４号公報 国際公開第２０１６−２０８６４２号公報

本発明は、赤血球を含む生体由来液から、当該赤血球に悪影響を与えることなく、白血球及び／又は血小板を除去することのできる不織布、及び当該不織布を含む処理フィルターを提供する事を目的とする。

特許文献１においては、通常の溶液重合によって合成した、２−メトキシエチル（メタ）アクリレート（ＭＥＭＡ）と、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノエチル（メタ）アクリレート（ＤＥＡＥＭＡ）とメタクリル酸メチルベタイン（ＣＭＢ）との共重合体を担体表面にコーティングすることで赤血球に悪影響を及ぼすことなく、赤血球を含む生体由来液を処理できるという技術を開示している。しかしながら、特許文献１では、従来の白血球除去技術であるアミノ基の含有量を増やし白血球除去能を高め、アミノ基の赤血球への悪影響を緩和するためにメタクリル酸メチルベタインを第三成分として加えたものであり、白血球除去性能の向上は、限定的であり、現行の白血球除去フィルターの1.5倍程度に留まっている上、特許文献１に開示されるポリマーは、３つのモノマーを合成して得られるものであって、その組成により白血球、血小板除去性能が大きく変動する為、精度よく目標組成のポリマーを合成する事、また、ポリマー組成の管理もNMRを用いる必要があるため難しく、コストがかかる問題点がある

特許文献２においては、白血球除去の為に白血球除去フィルターを構成する基材表面のカチオン化を行うという従来の白血球除去技術に加え、親水化を行うことで、白血球、血小板と基材表面の相互作用を維持したまま、血液の流れ性をよくすることにより、白血球除去能を改善し、簡便に製造可能な白血球除去フィルター及びその製造方法を提供している。しかしながら、特許文献２に開示された技術では、基材表面のカチオンの量を増加させず、親水化による流れ性の向上による効果だけで、白血球除去能の向上を行っている為、白血球除去能の向上は非常に限定的であり、除去性能としては不十分なものであった。加えて、赤血球の溶血防止については言及されていない。加工性、血液適合性などからスポンジ状ウレタン多孔体が好ましいとされている。

一方、特許文献３では、ポリメトキシエチルアクリレート（ＰＭＥＡ）や、ポリ［２−（２−エトキシエトキシ）エチルアクリレート）］（ＰＥｔ２Ａ）、ポリ［３−メトキシプロピルアクリレート］（ＰＭＣ３Ａ）といった血液適合性ポリマーを中空糸膜やビーズにコートすることで長期の使用を経ても血液適合性の低下、すなわち、血小板の表面への付着のおこらない血液処理用分離膜およびその膜を組み込んだ血液処理器を提供することを開示している。特許文献３に記載されているように、従来、側鎖にメトキシ基を持つポリマー表面は、血小板をはじめとする血液成分の付着を抑制するため、血液と接触する医療機器へ用いられる。しかしながら、特許文献３には、白血球との相互作用については検討されておらず、白血球を除去するために用いるという思想もなかった。

本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、不織布基材に、所定の構造を有するポリマーを所定の量でコーティングした不織布を使用することによって、赤血球を含む生体由来液から、当該赤血球に悪影響を与えることなく、白血球及び血小板を除去できることを見出し、本発明を完成した。

すなわち、本発明の態様は、以下に関する。
［１］
不織布基材と、
前記不織布基材をコーティングしている、下記一般式（１）で表される構成単位を有するポリマーを含み、
前記ポリマーの量が、前記不織布基材１ｇあたり、１.０ｍｇ以上３０ｍｇ以下である、
赤血球を含む生体由来液の処理フィルター用の不織布。

［式中、
Ｒ¹は、水素原子又はメチル基であり、
Ｒ²は、メチル基又はエチル基であり、
ｎは、２〜５の整数であり、
ｍは、１又は２である］
［２］
前記ポリマーの量が、前記不織布基材１ｇあたり、１０ｍｇ以上２０ｍｇ以下である、［１］に記載の不織布。
［３］
ｎが２又は３である、［１］又は［２］に記載の不織布。
［４］
Ｒ¹が水素原子であり、Ｒ²がエチル基であり、ｎが２であり、ｍが２である、［１］〜［３］のいずれかに記載の不織布。
［５］
Ｒ¹がメチル基であり、Ｒ²がエチル基であり、ｎが２であり、ｍが２である、［１］〜［３］のいずれかに記載の不織布。
［６］
前記不織布基材が、ポリエチレンテレフタラート又はポリブチレンテレフタラートを含む、［１］〜［５］のいずれかに記載の不織布。
［７］
赤血球を含む生体由来液の入口部及び出口部を有する容器と、
前記容器内の前記入口部と前記出口部との間に配置された、［１］〜［６］のいずれかに記載の不織布と、
を含む、赤血球を含む生体由来液の処理フィルター。

本発明によれば、赤血球を含む生体由来液から、当該赤血球に悪影響を与えることなく、白血球及び／又は血小板を除去することのできる不織布、及び当該不織布を含む処理フィルターを提供することができる。

一実施形態に係る生体由来液処理フィルターを示す分解斜視図である 一実施形態に係る生体由来液処理システムを示す模式図である。

以下、本発明の実施形態について詳細に説明する。なお、本発明は、以下の実施形態に限定されるものではなく、その要旨の範囲内で種々変形して実施することができる。

＜不織布＞
本発明の一実施形態は、不織布基材と、前記不織布基材をコーティングしている、下記一般式（１）で表される構成単位を有するポリマー（以下「コーティングポリマー」という。）と、を含み、前記ポリマーの量が、前記不織布基材１ｇあたり、１.０ｍｇ以上３０ｍｇ以下である、赤血球を含む生体由来液の処理フィルター用の不織布に関する。

［式中、
Ｒ¹は、水素原子又はメチル基であり、
Ｒ²は、メチル基又はエチル基であり、
ｎは、２〜５の整数であり、
ｍは、１又は２である］

本明細書において「赤血球を含む生体由来液」とは、生体に由来する液体であって赤血球が分散されている全てのものを意味し、具体的には血液や、血液から調製された血液製剤が含まれる。

（コーティングポリマー）
コーティングポリマーは、上記一般式（１）で表される構成単位（モノマー単位）を有する。このようなコーティングポリマーを使用することによって、赤血球に悪影響を与えることなく、白血球及び血小板を除去することができる。このような効果が奏される理由としては、以下のことが想定されるが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。コーティングポリマーの側鎖の長さを適切にすることによって、疎水性が適切に保たれ、疎水性相互作用によって白血球除去性能が向上し、また、特定の荷電が不織布表面に局在することが無くなるので、赤血球同士の相互作用も緩和でき、溶血性が低減する。

コーティングポリマーの上記のような構造の側鎖は、分子運動性が高く、そのため、このような側鎖を有するコーティングポリマーはＴｇが低く、上記の効果を生じるものと考えられる。すなわち、コーティングポリマーは、側鎖の分子運動性が高いため、これを含む被膜の表面において、生体由来液に含まれる生体成分等と主鎖との接触が起こりにくくなり、その結果、生体親和性が向上し、粘着性タンパク質や血小板の吸着・変性が軽微になると考えられるが、疎水性になるため、白血球との親和性が上がる。詳細は明らかではないが、ポリマーに付着した白血球を介し血小板との複合体を作ることにより、血小板除去能も高い値を示すと考えられる。

一般式（１）において、ｎが２又は３であることが好ましい。このような側鎖を有するコーティングポリマーを使用することによって、白血球及び血小板の除去性能を更に向上させることができる。

より具体的には、一般式（１）において、Ｒ¹が水素原子であり、Ｒ²がエチル基であり、ｎが２であり、ｍが２であるコーティングポリマー、又はＲ¹がメチル基であり、Ｒ²がエチル基であり、ｎが２であり、ｍが２であるコーティングポリマーを使用することによって、白血球の除去性能を更に顕著に向上させることができる。

コーティングポリマーは、上記一般式（１）で表される構成単位（以下「第１構成単位」という。）を含む。コーティングポリマーが複数の第１構成単位を有する場合、各構成単位は、同一であってもよいし、異なっていてもよい。コーティングポリマーは、本発明の効果に悪影響を与えない限り、第１構成単位以外の構成単位（以下「第２構成単位」という。）を更に有していてもよい。第２構成単位としては、例えば、アクリル酸、メタクリル酸、これらの誘導体（例えば、第１構成単位以外のエステル）に由来する構成単位を挙げることができる。

第１構成単位の量は、コーティングポリマーを構成する全構成単位（全モノマー単位）を１００ｍｏｌ％とした場合、２０ｍｏｌ％以上、４０ｍｏｌ％以上、６０ｍｏｌ％以上、８０ｍｏｌ％以上、又は９０ｍｏｌ％以上であることが好ましい。

または、コーティングポリマーの主鎖を構成する炭素原子10個あたりに対して、一般式（１）中に示す構造の側鎖が1個程度の割合で導入されると、当該側鎖に起因する各種の特徴を発現することが可能であり、一般式（１）中に示す側鎖の密度が上昇するのに伴ってより強くそれらの特徴が発現する。特に主鎖がアクリル骨格である場合（Ｒ¹が水素原子である場合）には、主鎖を構成する炭素原子2個に対して、側鎖が1個の割合で導入されることになり、側鎖に起因する特徴を強く発現することが可能である。したがって、コーティングポリマーの主鎖を構成する炭素原子10個あたりに対して、一般式（１）中に示す側鎖が１個以上であることが好ましく、2個以上であることがより好ましく、5個であることがさらに好ましい。

コーティングポリマーの数平均分子量は８，０００〜３００，０００であることが好ましい。数平均分子量が８，０００以上とすることにより、分子同士の絡み合いが十分となり、製品としたときに溶出物が減少する傾向にある、また、３０００，０００以下とすることにより、取扱いやすさ（粘着性とか硬さ）と溶媒への溶解性が良くなる傾向がみられる。数平均分子量は、より好ましくは１０，０００〜２５０，０００さらに好ましくは１０，０００〜２００,０００である。

（不織布基材）
不織布基材の形態は、生体由来液を濾過し得る細孔を有する形態であって、各々の単位目付あたりの通気抵抗を有するものであれば特に限定はなく、各種多孔質体を使用することができる。とりわけ、天然繊維、合成繊維、ガラス繊維等からなる編布、織布、不織布等の繊維状媒体、多孔膜、三次元網目状連続孔を有するスポンジ状構造物が好ましい。

不織布基材の材料としては、血球にダメージを与えにくいものであれば特に限定はなく各種のものを用いることができ、有機高分子材料、無機高分子材料、金属等が挙げられる。その中でも有機高分子材料は切断等の加工性に優れるため好ましい材料である。有機高分子材料としては、例えば、ポリエステル、ポリオレフィン、ポリアクリロニトリル、ポリアミド、ポリスチレン、ポリメチルメタアクリレート、ポリ弗化ビニル、ポリウレタン、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセタール、ポリスルホン、ポリ弗化ビニリデン、ポリトリフルオロクロロビニル、弗化ビニリデン−テトラフルオロエチレン共重合体、ポリエーテルスルホン、ポリアクリレート、ブタジエン−アクリロニトリル共重合体、ポリエーテル−ポリアミドブロック共重合体、エチレン−ビニルアルコール共重合体、セルロース、セルロースアセテート等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。これらの中でも、好ましくはポリエステル、ポリオレフィン、特に好ましくはポリエステルであり、より具体的には、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）、ポリブチレンテレフタラート（ＰＢＴ）である。ＰＥＴ又はＰＢＴを使用することにより、その孔径で白血球を更に選択的に捕捉することができる。

不織布基材の目付、繊維径は特に限定されないが、目付は３０．０〜１１０．０ｇ／ｍ²、繊維径は１．００〜３．５０μｍであることが望ましい。

繊維径とは平均繊維直径のことで、以下の手順によって求められる値をいう。先ず、不織布から構成される濾材の一部をサンプリングし、走査電子顕微鏡を用いて拡大倍率２５００倍で観察し写真に撮る。サンプル中央部分およびその近傍箇所の写真を撮っていき、その写真に撮られた繊維の合計本数が各区分１００本以上となるまで撮る。このようにして得た写真について、写っている全ての繊維の直径を測定する。ここで直径とは、繊維軸に対して直角方向の繊維の幅をいう。測定した全ての繊維の直径の和を、繊維の数で割った値を平均繊維直径とする。但し、複数の繊維が重なり合って、他の繊維の陰になってその直径が測定できない場合、また複数の繊維が溶融するなどして、太い繊維になっている場合、更に、直径の異なる繊維が混在している場合、等々の場合には、これらのデータは削除する。

目付は以下の手順によって求められる値をいう。不織布基材から、５ｃｍ×２０ｃｍのサイズの試料を切り出し、これを天秤（型番：ＸＰ２０５、メーカー：ＭＥＴＴＬＥＲ ＴＯＬＥＤＯ）に載せ、その質量を測定した。得られた値から、以下の式にしたがって、不織布基材の目付を算出する。
目付＝不織布基材の質量（ｇ）÷不織布基材の面積（ｍ²）

コーティングポリマーの量が少なすぎると、不織布基材がまんべんなくコートされない結果、濡れ性が悪い不織布領域が生まれ、Ａｉｒブロック（血液の流れがブロックされてしまう現象）が生じる。すると、血液流路が狭くなり、ろ過圧が上昇し、赤血球と濾材との摩擦も増加するため溶血が起こる。一方、コーティングポリマーの量が多すぎても、被覆厚みが向上して流路が狭くなる結果、ろ過圧が上昇し、赤血球と濾材との摩擦も増加するため溶血が起こる。

そのため、コーティングポリマーの量は、不織布基材１ｇあたり、１．０ｍｇ以上３０ｍｇ以下であり、好ましくは１０ｍｇ以上２０ｍｇ以下である。コーティング量が不織布基材１ｇあたり１．０ｍｇ以上であると、赤血球を含む生体由来液への不織布の濡れ性が適切となり、生体由来液の流れ性が良くなる、また、不織布の一部が機能を果たさなくなるＡｉｒブロックが起こりにくくなることによって、溶血性が低減する。濡れ性向上により、白血球及び血小板は、ポリマーでコーティングされた繊維に捕捉されやすくなる。一方、赤血球を含む生体由来液へのコーティングポリマーの溶出を防止する観点で、コーティング量は不織布基材１ｇあたり３０ｍｇ以下が好ましい。ここで、コーティングとは、コーティングポリマーが、例えば、化学的、物理的又は電気的に不織布基材と結合又は吸着していることを意味する。コーティングポリマーの量を１０ｍｇ以上２０ｍｇ以下とすることにより、濾過圧をより適切な範囲（５ｋＰａ）にでき、赤血球への悪影響を更に低減することができる。

コーティング量は、以下の手順により算出される。コーティングポリマーをコーティングさせる前の不織布基材を６０℃に設定した乾燥機中で１時間乾燥させた後、デシケーター内に１時間以上放置した後に重量（本重量をＡ（ｇ）とする。）を測定する。コーティングポリマーをコーティングさせた不織布を同様に６０℃の乾燥機中で１時間乾燥させた後、デシケーター内に１時間以上放置した後に重量（本重量をＢ（ｇ）とする。）を測定する。コーティング量は以下の算出式により算出される。
コーティング量（ｍｇ／ｇ不織布基材）＝（Ｂ−Ａ）×１０００／Ａ

本実施形態に係る不織布は、赤血球を含む生体由来液を、赤血球へ悪影響を与えずに処理することができるため、赤血球を含む血液製剤から白血球及び／又は血小板を除去するためや、患者血液から活性化した白血球を除去する為の体外循環治療において好適に用いられる。赤血球を含む血液製剤としては、例えば、全血製剤、及び赤血球製剤が挙げられる。上記効果を鑑みれば、赤血球を含む血液製剤は、輸血用製剤であることが好ましい。

体外循環治療の対象疾患としては、敗血症、全身炎症性症候群（ＳＩＲＳ）、リウマチ、及び潰瘍性大腸炎等、白血球による過剰な生理活性物質の放出が原因の一つである疾患が挙げられる。

（不織布の製造方法）
本実施形態の不織布は、上述した不織布基材に、上述したコーティングポリマーをコーティングさせることにより得ることができる。コーティング方法は、特に限定はされないが、例えば、塗布法、スプレー法、ディップ法を挙げることができる。

ディップ法は、アルコール、クロロホルム、アセトン、テトラヒドロフラン、又はジメチルホルムアミド等の適当な有機溶媒に上述したコーティングポリマーを溶解したコーティング液中に、不織布基材を浸漬させた後、余分な溶液を取り除き、ついで風乾等の適切な手段により乾燥させることにより実施できる。乾燥方法としては、乾燥気体中で風乾する方法、減圧雰囲気中で常温又は加熱しながら乾燥を行う方法などがある。

塗布法及びスプレー法は、上記コーティング液を不織布基材に塗布又はスプレーした後、上述のように乾燥させることにより実施できる。

そして、本発明者らが、鋭意研究したところ、コーティング液の溶媒が水と有機溶媒の混合物である場合、水と有機溶媒の混合比によって、コーティングポリマーが基材表面にとどまる量が大きく変わることが分かった。具体的には、有機溶媒の混合比率が小さいほど、コーティングポリマーは基材表面にとどまりやすい傾向にある。その理由は明らかではないが、コーティング液の溶媒がコーティングポリマーを溶解する範囲においては、溶媒中の有機溶媒の混合比率が大きいと、コーティングポリマーはコーティング液に良く溶解しているため、コーティング液を不織布基材上にコートした時にコーティングポリマーも基材内に浸透し表面にとどまりにくいが、有機溶媒の混合比率が小さいと、コーティングポリマーのコーティング液に対する溶解度が小さい為、コーティング液を不織布基材上にコートした時に有機溶媒が先に基材内に浸透するなどして溶媒中の有機溶媒／水のバランスが崩れると、コーティングポリマーがコーティング液から析出し、不織布基材表面上に残るためではないかと推定される。

コーティング液の溶媒が水と有機溶媒の混合物である場合の有機溶媒の混合比率は、コーティングポリマーの種類にもよるが、コーティングポリマーを溶解する限度で、８０質量％以下であることが好ましく、６０質量％以下であることがより好ましく、４０質量％以下であることがさらに好ましい。

＜生体由来液処理フィルター＞
本発明の一実施形態は、赤血球を含む生体由来液の入口部及び出口部を有する容器と、前記容器内の前記入口部と前記出口部との間に配置された、上記不織布と、を含む、赤血球を含む生体由来液の処理フィルターに関する。

図１は、生体由来液処理フィルターの一例の分解斜視図である。図１に示す生体由来液処理フィルター１００は、赤血球を含む生体由来液の入口部１を有する樹脂製治具１０と、生体由来液の出口部２を有する樹脂製治具１１とを備え、樹脂製治具１０及び樹脂製治具１１で形成された容器内に本実施形態に係る不織布２０を９枚重ねた濾材２１を含んでなる。濾材２１における不織布２０の枚数は、特に制限はなく、適宜設定してよい。また、樹脂製治具１０及び樹脂製治具１１は、融着、接着剤による接着等により、結合していてもよい。

図２は、生体由来液処理システムの一例を示す模式図である。図２に示す生体由来液処理システム２００は、処理前生体由来液２１０を収容したシリンジポンプ１１０と、生体由来液処理フィルター１００と、処理後生体由来液２２０を収容する容器１３０とを備える。シリンジポンプ１１０と生体由来液処理フィルター１００は、チューブ１４０により連結されている。また、生体由来液処理フィルター１００と容器１３０は、チューブ１５０により連結されている。

シリンジポンプ１１０からチューブ１４０を介して移送された処理前生体由来液２１０は、生体由来液処理フィルター１００で処理され、白血球及び血小板が除去される。その際、マノメータ１２０によりろ過圧を測定する。生体由来液処理フィルター１００は、上述した本実施形態に係る不織布を含んでいるため、処理後生体由来液２２０は赤血球の溶血等が生じていない。処理後生体由来液２２０は容器１３０に収容される。例えば生体由来液が血液製剤であれば、輸血用血液製剤として使用される。

以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例によって限定されるものではない。

[実施例１]
（ＰＥｔ２Ａ（ポリ［2-(2-エトキシエトキシ)エチルアクリレート］）の作製）
2-(2-エトキシエトキシ)エチルアクリレート１５ｇを１，４−ジオキサン６０ｇ中でアゾビスイソブチロニトリル（０．１ｇ重量％）を開始剤として、窒素バブリングしながら７５℃で１０時間重合を行った。重合反応終了後得られた重合液をヘキサンに滴下し、生成物を沈殿させ、単離した。得られた生成物をテトラヒドロフランに溶解し、さらに２回ヘキサンを用いて精製を行った。精製物を一昼夜減圧乾燥した。無色透明で水飴状のポリマーが得られた。収量（収率）は１２．０ｇ（８０％）であった。
得られたポリマー構造は、¹ＨＮＭＲによって確認した。
また、ＧＰＣの分子量分析の結果から、その数平均分子量（Ｍｎ）は１１，６００であり、分子量分布（Ｍｗ/Ｍｎ）は３．９であった。

（コーティング液の調整）
上記コーティングポリマーを溶媒重量比 エチルアルコール／水＝９０／１０の溶媒へ添加した後、１２時間攪拌し、コーティングポリマー濃度が０．１０重量％のコーティング液を調整した。

（コーティング方法）
平均繊維直径１．２μｍのポリエチレンテレフテレート（ＰＥＴ）繊維よりなる不織布基材（４０ｇ／ｍ²目付、旭化成せんい社製「マイクロウェッブ」）を２１０ｍｍ×１５０ｍｍの大きさに切り出し、上記コーティング液を入れた金属製バットへ２０秒間浸漬させた。余剰コーティング液を落とした後、室温にて乾燥させた。

（コーティング量の測定）
上記コーティングの際に２１０ｍｍ×１５０ｍｍに切り出した不織布基材を６０℃設定の熱風乾燥機で１時間乾燥の後に測定した不織布基材の重量（Ａg）と、上記方法コーティングを行った不織布を同様に60℃設定の熱風乾燥機で１時間以上乾燥の後に測定した不織布の重量（Ｂg）を用いて、下記算出式よりコーティング量を求めた。
コーティング量＝（重量Ｂ−重量Ａ）×１０００／重量Ａ
その結果、不織布基材１ｇあたりのコーティング量は約１ｍｇであった。

（白血球除去性能、血小板除去性能、溶血、ろ過圧の確認試験方法）
上記コーティング後不織布を２０Φｍｍの打ち抜き刃で打ち抜き、9枚重ねて、図１に示すような血液製剤の入口１と出口２を備えた樹脂製治具１０及び１１に挟んで除去フィルターを作製した。この除去フィルターについて、図２に示すような処理システムを用いて血液評価試験（白血球除去性能、血小板除去性能、溶血、ろ過圧の確認試験）を実施した。血液評価試験に用いた血液製剤は、ＣＰＤ添加保存ヒト全血である。ドナーより採血し、室温にて１時間保存後の血液を用いた。試験の際の血液製剤の流量は４０ｍＬ／時に設定した。

（白血球除去性能）
以下の計算式に従い、白血球除去性能を算出した結果、白血球除去性能は４．５であった。
白血球除去性能＝−ｌｏｇ[（ろ過後血液製剤中の白血球濃度）／（ろ過前血液製剤中の白血球濃度）]
なお、ろ過前後の血液製剤中の白血球濃度の測定は、ベクトンデッキンソン社（ＢＤ社）製白血球数測定用キット「ＬｅｕｃｏＣＯＵＮＴ」及びＢＤ社製フローサイトメーター ＦＡＣＳ ＣａｎｔII を使用して行った。

（血小板除去性能）
以下の計算式に従い、血小板除去性能を算出した結果、血小板除去性能は９０％であった。
血小板除去性能（％）＝[（ろ過前血液製剤中の血小板濃度−ろ過後血液製剤中の血小板濃度）／ろ過前血液製剤中の血小板濃度]×１００
なお、ろ過前後の血液製剤中の血小板濃度は、多項目自動血球計数装置（日本Ｓｙｓｍｅｘ社製Ｋ−４５００）を用いて測定した。

（溶血試験方法）
ろ過前後の血液製剤を３０００回転／分（１７００×ｇ）１５分間遠心分離した後、白い紙等を背景にして、上澄み部分の着色をろ過前後で観察比較し、以下の基準で評価した。その結果、溶血無（−）であった。
［評価基準］
(ｉ)ろ過前の血液製剤の上澄みと比べて、ろ過後の血液製剤の上澄みの赤色が明らかに濃いものを（＋）溶血あり。
(ｉｉ)ろ過前の血液製剤の上澄みと比べて、ろ過後の血液製剤の上澄みの赤色が上記（ｉ）よりも濃いものを（＋＋）溶血あり。
(ｉｉｉ)ろ過前の血液製剤の上澄みと比べて、ろ過後の血液製剤の上澄みに赤色着色が見られるものを（±）溶血あり。
(ｉｉｉｉ)ろ過前の血液製剤の上澄みと比べて、ろ過後の血液製剤の上澄みに赤色着色が認められないものを（−）溶血なし。

（ろ過圧測定方法）
図２のマノメータ１２０に表示される値を、ろ過後血液０．５ｍＬ回収するごとに記録し、最高圧力値をろ過圧とした。その結果、１５ｋＰａであった。

［実施例２］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり１５．０ｍｇであること以外は実施例1と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例３］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり３０．０ｍｇであること以外は実施例1と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例４］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例２と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例５］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例２と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例６］
コーティングポリマーのＲ¹がＣＨ₃であること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例７］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり１５．０ｍｇであること以外は実施例６と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例８］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり３０．０ｍｇであること以外は実施例６と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例９］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例７と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例１０］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例７と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．５、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例１１］
コーティングポリマーのｎが3、ｍが1、Ｒ²がＣＨ₃であること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、９０％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例１２］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり１５．０ｍｇであること以外は実施例１１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例１３］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり３０．０ｍｇであること以外は実施例１１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、９０％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例１４］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例１２と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例１５］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例１２と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、９０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例１６］
コーティングポリマーのｎが５、ｍが１、Ｒ²がＣＨ₃であること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．５、７５％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例１７］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり１５．０ｍｇであること以外は実施例１６と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．５、７５％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例１８］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり３０．０ｍｇであること以外は実施例１６と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．５、７５％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例１９］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例１７と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．５、７５％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例２０］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例１７と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．５、７５％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例２１］
コーティングポリマーのｍが1、Ｒ²がＣＨ₃であること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、７５％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例２２］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり１５．０ｍｇであること以外は実施例２１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、７５％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例２３］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり３０．０ｍｇであること以外は実施例２１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、７５％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例２４］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例２２と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、７５％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例２５］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例２２と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、４．０、７５％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例２６］
コーティングポリマーのｎが４、ｍが1、Ｒ²がＣＨ₃であること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．７、８０％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例２７］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり１５．０ｍｇであること以外は実施例２６と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．７、８０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例２８］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり３０．０ｍｇであること以外は実施例２６と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．７、８０％、（−）溶血無、１５ｋＰａであった。

［実施例２９］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例２７と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．７、８０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［実施例３０］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、実施例２７と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、３．７、８０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［比較例１］
コーティングポリマーの組成がヒドロキシプロピルメタクリレート（ＨＰＭＡ）／Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノエチルメタクリレート（ＤＭ）＝９７／３で、コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり１５．０ｍｇであること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、１．０、５０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［比較例２］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、比較例1と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、１．０、５０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［比較例３］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、比較例2と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、１．０、５０％、（−）溶血無、５ｋＰａであった。

［比較例４］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり０．８ｍｇであること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、０．５、３０％、（＋）溶血有、２０ｋＰａであった。

［比較例５］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、比較例４と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、０．５、３０％、（＋）溶血有、２０ｋＰａであった。

［比較例６］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、比較例４と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、０．５、３０％、（＋）溶血有、２０ｋＰａであった。

［比較例７］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり３２．０ｍｇであること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、５．５、８０％、（＋＋）溶血有、５０ｋＰａであった。

［比較例８］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、比較例7と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、５．５、８０％、（＋＋）溶血有、５０ｋＰａであった。

［比較例９］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、比較例7と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、５．５、８０％、（＋＋）溶血有、５０ｋＰａであった。

［比較例１０］
コーティングポリマーのｎが６、ｍが１、Ｒ²がＣＨ₃であること以外は実施例１と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、０．５、６０％、（＋）溶血有、３０ｋＰａであった。

［比較例１１］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり１５．０ｍｇであること以外は比較例１０と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、０．５、６０％、（＋）溶血有、２０ｋＰａであった。

［比較例１２］
コーティングポリマーのコーティング量が不織布基材１ｇあたり３０．０ｍｇであること以外は比較例１０と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、０．５、６０％、（＋）溶血有、３０ｋＰａであった。

［比較例１３］
コーティングする不織布基材の繊維径が２．５０μｍ、目付が３８．０ｇ／ｍ²であること以外は、比較例11と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、0.5、60%、（+）溶血有、20kPaであった。

［比較例１４］
コーティングする不織布基材の繊維径が１．００μｍ、目付が７０．０ｇ／ｍ²であること以外は、比較例11と同様であるフィルターを使用した。実施例１と同様の方法で白血球除去性能、血小板除去性能、溶血評価、ろ過圧測定を行った結果、それぞれ、０．５、６０％、（＋）溶血有、２０ｋＰａであった。

上記実施例及び比較例で使用したフィルターの構成及び性能を以下の表１〜表３に示す。

１・・入口部
２・・出口部
１０、１１・・樹脂製治具
２０・・不織布
２１・・濾材
１００・・生体由来液処理フィルター
１１０・・シリンジポンプ
１２０・・マノメータ
１３０・・容器
１４０、１５０・・チューブ
２００・・生体由来液処理システム
２１０・・処理前生体由来液
２２０・・処理後生体由来液

Claims (7)

1. 不織布基材と、
   前記不織布基材をコーティングしている、下記一般式（１）で表される構成単位を有するポリマーと、
   を含み、
   前記ポリマーの量が、前記不織布基材１ｇあたり、１.０ｍｇ以上３０ｍｇ以下である、
   赤血球を含む生体由来液の処理フィルター用の不織布。
   

   

   ［式中、
   Ｒ¹は、水素原子又はメチル基であり、
   Ｒ²は、メチル基又はエチル基であり、
   ｎは、２〜５の整数であり、
   ｍは、１又は２である］
2. 前記ポリマーの量が、前記不織布基材１ｇあたり、１０ｍｇ以上２０ｍｇ以下である、請求項１に記載の不織布。
3. ｎが２又は３である、請求項１又は２に記載の不織布。
4. Ｒ¹が水素原子であり、Ｒ²がエチル基であり、ｎが２であり、ｍが２である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の不織布。
5. Ｒ¹がメチル基であり、Ｒ²がエチル基であり、ｎが２であり、ｍが２である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の不織布。
6. 前記不織布基材が、ポリエチレンテレフタラート又はポリブチレンテレフタラートを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の不織布。
7. 赤血球を含む生体由来液の入口部及び出口部を有する容器と、
   前記容器内の前記入口部と前記出口部との間に配置された、請求項１〜６のいずれか一項に記載の不織布と、
   を含む、赤血球を含む生体由来液の処理フィルター。

Images