JP2020509391A - 検出のためのシステムおよび方法 - Google Patents
検出のためのシステムおよび方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020509391A JP2020509391A JP2019557546A JP2019557546A JP2020509391A JP 2020509391 A JP2020509391 A JP 2020509391A JP 2019557546 A JP2019557546 A JP 2019557546A JP 2019557546 A JP2019557546 A JP 2019557546A JP 2020509391 A JP2020509391 A JP 2020509391A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- wells
- light
- cells
- well
- signal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 85
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 60
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 267
- 230000005284 excitation Effects 0.000 claims description 163
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 69
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 63
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 claims description 48
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 41
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 41
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 40
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 claims description 34
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 claims description 32
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 claims description 32
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 29
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 28
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 27
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 24
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 22
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 20
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims description 15
- 210000000620 electrically active cell Anatomy 0.000 claims description 14
- FYNNIUVBDKICAX-UHFFFAOYSA-M 1,1',3,3'-tetraethyl-5,5',6,6'-tetrachloroimidacarbocyanine iodide Chemical compound [I-].CCN1C2=CC(Cl)=C(Cl)C=C2N(CC)C1=CC=CC1=[N+](CC)C2=CC(Cl)=C(Cl)C=C2N1CC FYNNIUVBDKICAX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- -1 Rhode-2 Chemical compound 0.000 claims description 12
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 12
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 12
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 12
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 210000003594 spinal ganglia Anatomy 0.000 claims description 6
- OUVXYXNWSVIOSJ-UHFFFAOYSA-N Fluo-4 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=C(C=2)C2=C3C=C(F)C(=O)C=C3OC3=CC(O)=C(F)C=C32)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 OUVXYXNWSVIOSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims description 5
- 210000003618 cortical neuron Anatomy 0.000 claims description 5
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 claims description 5
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 claims description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 4
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 claims description 4
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 claims description 4
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 claims description 4
- 108020001213 potassium channel Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- HAPJROQJVSPKCJ-UHFFFAOYSA-N 3-[4-[2-[6-(dibutylamino)naphthalen-2-yl]ethenyl]pyridin-1-ium-1-yl]propane-1-sulfonate Chemical compound C1=CC2=CC(N(CCCC)CCCC)=CC=C2C=C1C=CC1=CC=[N+](CCCS([O-])(=O)=O)C=C1 HAPJROQJVSPKCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims description 3
- IFSXZLJQEKGQAF-UHFFFAOYSA-M nuclear fast red Chemical compound [Na+].O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=C1C(O)=C(S([O-])(=O)=O)C(O)=C2N IFSXZLJQEKGQAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 claims description 3
- OZLGRUXZXMRXGP-UHFFFAOYSA-N Fluo-3 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=C(C=2)C2=C3C=C(Cl)C(=O)C=C3OC3=CC(O)=C(Cl)C=C32)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 OZLGRUXZXMRXGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PITMCSLKSXHPOA-UHFFFAOYSA-N Fluo-5F Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C1=CC=C(F)C=C1OCCOC1=CC(C2=C3C=C(F)C(=O)C=C3OC3=CC(O)=C(F)C=C32)=CC=C1N(CC(O)=O)CC(O)=O PITMCSLKSXHPOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DFCRUBKUVOJCOV-UHFFFAOYSA-N Fluo-5N Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C1=CC=C(C2=C3C=C(F)C(=O)C=C3OC3=CC(O)=C(F)C=C32)C=C1OCCOC1=CC([N+]([O-])=O)=CC=C1N(CC(O)=O)CC(O)=O DFCRUBKUVOJCOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- XAGUNWDMROKIFJ-UHFFFAOYSA-J tetrapotassium;2-[2-[[8-[bis(carboxylatomethyl)amino]-6-methoxyquinolin-2-yl]methoxy]-n-(carboxylatomethyl)-4-methylanilino]acetate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[K+].C1=CC2=CC(OC)=CC(N(CC([O-])=O)CC([O-])=O)=C2N=C1COC1=CC(C)=CC=C1N(CC([O-])=O)CC([O-])=O XAGUNWDMROKIFJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims description 2
- 101150096607 Fosl2 gene Proteins 0.000 claims 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 claims 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 22
- 230000036982 action potential Effects 0.000 description 19
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 19
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 19
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 101001047090 Homo sapiens Potassium voltage-gated channel subfamily H member 2 Proteins 0.000 description 9
- 102100022807 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 2 Human genes 0.000 description 9
- 108010052164 Sodium Channels Proteins 0.000 description 9
- 102000018674 Sodium Channels Human genes 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 7
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 7
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 6
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 6
- 241000195585 Chlamydomonas Species 0.000 description 5
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 5
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 5
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 4
- 101000654386 Homo sapiens Sodium channel protein type 9 subunit alpha Proteins 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000013500 data storage Methods 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 108010035848 Channelrhodopsins Proteins 0.000 description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004257 Potassium Channel Human genes 0.000 description 3
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 3
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000013537 high throughput screening Methods 0.000 description 3
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000028161 membrane depolarization Effects 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N nifedipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC)C1C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 102000038650 voltage-gated calcium channel activity Human genes 0.000 description 3
- 108091023044 voltage-gated calcium channel activity Proteins 0.000 description 3
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 2
- 102000001671 Acid Sensing Ion Channels Human genes 0.000 description 2
- 108010068806 Acid Sensing Ion Channels Proteins 0.000 description 2
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000312 Calcium Channels Proteins 0.000 description 2
- 102000003922 Calcium Channels Human genes 0.000 description 2
- 102000018899 Glutamate Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010027915 Glutamate Receptors Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108090000543 Ligand-Gated Ion Channels Proteins 0.000 description 2
- 102000004086 Ligand-Gated Ion Channels Human genes 0.000 description 2
- 102100025912 Melanopsin Human genes 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 2
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 2
- 238000003491 array Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000005388 borosilicate glass Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000003754 machining Methods 0.000 description 2
- 108010005417 melanopsin Proteins 0.000 description 2
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 2
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 2
- 229920000306 polymethylpentene Polymers 0.000 description 2
- 239000011116 polymethylpentene Substances 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002336 repolarization Effects 0.000 description 2
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 2
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NCYCYZXNIZJOKI-IOUUIBBYSA-N 11-cis-retinal Chemical compound O=C/C=C(\C)/C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-IOUUIBBYSA-N 0.000 description 1
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N Adamantane Natural products C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100287595 Caenorhabditis elegans kin-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091005462 Cation channels Proteins 0.000 description 1
- 108010009685 Cholinergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009855 Inwardly Rectifying Potassium Channels Human genes 0.000 description 1
- 108010009983 Inwardly Rectifying Potassium Channels Proteins 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016193 Metabotropic glutamate receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010010914 Metabotropic glutamate receptors Proteins 0.000 description 1
- NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N Potassium ion Chemical compound [K+] NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 102000002294 Purinergic P2X Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010000836 Purinergic P2X Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100040756 Rhodopsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000820 Rhodopsin Proteins 0.000 description 1
- FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N Sodium cation Chemical compound [Na+] FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031367 Sodium channel protein type 9 subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 108090000013 Voltage-Gated Potassium Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000003734 Voltage-Gated Potassium Channels Human genes 0.000 description 1
- 108010053752 Voltage-Gated Sodium Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000016913 Voltage-Gated Sodium Channels Human genes 0.000 description 1
- APERIXFHHNDFQV-UHFFFAOYSA-N [2-[2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]-5-methylphenoxy]ethoxy]-4-[3,6-bis(dimethylamino)xanthen-9-ylidene]cyclohexa-2,5-dien-1-ylidene]-bis(carboxymethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C12=CC=C(N(C)C)C=C2OC2=CC(N(C)C)=CC=C2C1=C(C=1)C=CC(=[N+](CC(O)=O)CC(O)=O)C=1OCCOC1=CC(C)=CC=C1N(CC(O)=O)CC(O)=O APERIXFHHNDFQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 1
- 102000034337 acetylcholine receptors Human genes 0.000 description 1
- MCEXQZRGUKALLT-VVEOGCPPSA-N acetyloxymethyl 2-[n-[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]-2-[2-[[6-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]-2-[(e)-(5-oxo-2-sulfanylideneimidazolidin-4-ylidene)methyl]-1-benzofuran-5-yl]oxy]ethoxy]-4-methylanilino]acetate Chemical compound CC(=O)OCOC(=O)CN(CC(=O)OCOC(C)=O)C1=CC=C(C)C=C1OCCOC(C(=C1)N(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=CC2=C1OC(\C=C\1C(NC(=S)N/1)=O)=C2 MCEXQZRGUKALLT-VVEOGCPPSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012080 ambient air Substances 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 1
- 229910001423 beryllium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010256 biochemical assay Methods 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 230000005670 electromagnetic radiation Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 231100000613 environmental toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000003269 fluorescent indicator Substances 0.000 description 1
- YFHXZQPUBCBNIP-UHFFFAOYSA-N fura-2 Chemical group CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=3OC(=CC=3C=2)C=2OC(=CN=2)C(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 YFHXZQPUBCBNIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049906 glutamate Drugs 0.000 description 1
- 150000002306 glutamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000048004 human SCN9A Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical compound [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- PNDZEEPOYCVIIY-UHFFFAOYSA-N indo-1 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=C(C=2)C=2N=C3[CH]C(=CC=C3C=2)C(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 PNDZEEPOYCVIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001057 ionotropic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 229910001437 manganese ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000008062 neuronal firing Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229960001597 nifedipine Drugs 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 150000003906 phosphoinositides Chemical class 0.000 description 1
- 229940089949 procardia Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000541 pulsatile effect Effects 0.000 description 1
- 230000010349 pulsation Effects 0.000 description 1
- 239000002213 purine nucleotide Substances 0.000 description 1
- 230000036279 refractory period Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 230000036390 resting membrane potential Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 238000003357 safety pharmacology assay Methods 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 239000010454 slate Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 230000008925 spontaneous activity Effects 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000006794 tachycardia Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
- G01N21/6452—Individual samples arranged in a regular 2D-array, e.g. multiwell plates
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01J—MEASUREMENT OF INTENSITY, VELOCITY, SPECTRAL CONTENT, POLARISATION, PHASE OR PULSE CHARACTERISTICS OF INFRARED, VISIBLE OR ULTRAVIOLET LIGHT; COLORIMETRY; RADIATION PYROMETRY
- G01J1/00—Photometry, e.g. photographic exposure meter
- G01J1/02—Details
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01J—MEASUREMENT OF INTENSITY, VELOCITY, SPECTRAL CONTENT, POLARISATION, PHASE OR PULSE CHARACTERISTICS OF INFRARED, VISIBLE OR ULTRAVIOLET LIGHT; COLORIMETRY; RADIATION PYROMETRY
- G01J1/00—Photometry, e.g. photographic exposure meter
- G01J1/02—Details
- G01J1/04—Optical or mechanical part supplementary adjustable parts
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6408—Fluorescence; Phosphorescence with measurement of decay time, time resolved fluorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
- G01N21/6456—Spatial resolved fluorescence measurements; Imaging
- G01N21/6458—Fluorescence microscopy
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
- G01N2021/6463—Optics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Optical Measuring Cells (AREA)
Abstract
Description
[0027]本明細書で言及されるすべての刊行物、特許、および特許出願は、あたかもそれぞれの個々の刊行物、特許、または特許出願が具体的かつ個別に参照により組み込まれることが示されるのと同程度に参照により本明細書に組み込まれる。参考として援用される刊行物および特許または特許出願が本明細書に含まれる開示と矛盾する限りにおいて、本明細書はそのような矛盾するいかなる資料よりも優先されるおよび/または優位になることを意図している。
[0042]本明細書で使用される「ウェル」という用語は、一般に、1つまたは複数の細胞を受け入れるように構成されているウェルを指す。ウェルは1つの細胞を受け入れるように構成することができる。ウェルは複数の細胞を受け入れるように構成することができる。システムは、マイクロプレートなどのウェルのアレイを受け入れるように構成されてもよい。ウェルのアレイは複数のウェルを含んでもよい。複数のウェルのうちの1つまたは複数のウェルは、単一細胞型または複数の細胞型を含んでもよい。複数のウェルのうちの1つまたは複数のウェルは異なる細胞型を含んでもよい。複数のウェルのうちの1つまたは複数のウェルは、異なる刺激または状態(異なる薬物または異なる培地組成など)を含んでもよい。ウェルのアレイは、特注のマイクロプレートまたは市販のマイクロプレートなどのマイクロプレートであってもよい。システムはウェルのアレイを含んでもよい。システムは、ウェルのアレイを受け入れるように構成されてもよい。ウェルの一部は、ホウケイ酸ガラスなどのガラスを含んでもよい。ウェルの一部は、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリエチレンテレフタレートG、ポリメチルペンテンなどのプラスチックを含んでもよい。
[0085]ここで、NAは開口数である。場合によっては、レンズは周囲空気などの気体媒体中に配置されてもよい。場合によっては、レンズは液体媒体中に配置されてもよい。
[00127]本開示は、本開示の方法を実施するようにプログラムされているコンピュータ制御システムを提供する。図4は、(i)励起源を制御して複数のウェルに光を供給する、(ii)マイクロプレートのウェルの領域に光を向けるなど、光の方向を制御する、(iii)情報(電気信号など)を収集および/またはデータベースまたはメモリなどに転送するように検出アセンブリを制御する、ようにプログラムされているか、あるいは構成されているコンピュータシステム401を示す。コンピュータシステム401は、例えば、(i)励起源を制御する、(ii)検出アセンブリを制御する、(iii)光路または光を受け入れるウェルの一部を制御する、(iv)情報(電気信号など)の収集および/または転送の頻度を制御すること、またはその他のことなど、本開示のデータ収集、データ分析、およびデータ記憶の様々な態様を調整することができる。コンピュータシステム401は、ユーザの電子機器、または電子機器に対して遠隔に位置するコンピュータシステムとすることができる。電子機器は携帯電子機器であってもよい。
[00139]キットは、使用説明書および本明細書に記載のシステム、例えば検出アセンブリおよび照明アセンブリを含むシステムを含んでもよい。キットは、1つまたは複数のアレイ、1つまたは複数のセンサ(例えば、光検出可能センサ)またはそれらの組み合わせをさらに含んでもよい。
[00140]細胞内カルシウム蛍光指示薬Fluo4を、感光性アクチュエータチョップ2および電位依存性カルシウムチャネルを発現するように設計された複数のHEK293細胞に添加する。Fluo4指示薬を含有する複数のHEK293細胞をマイクロプレートのウェルに分割する。分子がマイクロプレートのウェルの一部に添加される。次いで、各ウェル内のHEK293細胞を494ナノメートル(nm)の波長を有する光源で同時にかつ繰り返し刺激する。刺激は照明アセンブリによって提供される。各ウェル内の細胞応答は、516nmの波長でFluo−4指示薬の発光を検出することによって同時にモニターされる。検出アセンブリのフォトダイオードは蛍光発光を検出する。蛍光発光の大きさまたは時間的プロファイルは、分子がカルシウムイオンチャネルの1つまたは複数の過渡的な電位依存性構造に作用することを裏付けている。
[00141]細胞膜電位指示薬BeRSTを、感光性アクチュエータチョップ2、および電位依存性イオンチャネル、ナトリウムチャネルNav1.7を発現するように設計した複数のHEK293細胞に添加する。BeRST指示薬を含有する複数のHEK293細胞をマイクロプレートのウェルに分割する。分子がマイクロプレートのウェルの一部に添加される。次いで、各ウェル内のHEK293細胞を、658ナノメートル(nm)の波長を有する光源で同時に刺激する。460nmの光のパルスは独立してアクチュエータを活性化し、ナトリウムチャネルNav1.7の一時的な反復活性化をもたらす。刺激は照明アセンブリによって提供される。各ウェル内の細胞応答は、683nmの波長でBeRST指示薬の発光を検出することによって同時にモニターされる。検出アセンブリのフォトダイオードは蛍光発光を検出する。蛍光発光の大きさまたは時間的プロファイルは、分子が電位依存性ナトリウムイオンチャネルの1つまたは複数の過渡的な電位依存性構造に作用することを確認する。
[00142]電位感受性色素VF2.1.C1を、IPS細胞から分化した複数の心筋細胞に添加する。VF2.1.C1指示薬を含む複数の心筋細胞をマイクロプレートのウェルに分割する。化合物がマイクロプレートのウェルの一部に添加される。次いで、各ウェル内の心筋細胞を、460ナノメートル(nm)の波長を有する光源で同時に刺激する。刺激は照明アセンブリによって提供される。各ウェル内の細胞応答は、516nmの波長でVF2.1.C1指示薬の発光を検出することによって同時にモニターされる。検出アセンブリのフォトダイオードは蛍光発光を検出する。活動電位持続時間または脱分極速度におけるミリ秒以下のスケールの摂動は、自動発見的アルゴリズムによって検出され、潜在的な標的組織の毒性を予測するために使用される。
[00143]複数の心筋細胞が人工多能性幹(IPS)細胞から分化し、光応答性アクチュエータタンパク質、チョップ2を発現するように改変される。電位感受性色素BeRSTを複数の心筋細胞に添加する。BeRST指示薬を含み、光応答性アクチュエータチョップ2を発現する複数の心筋細胞をマイクロプレートのウェルに分割する。分子がマイクロプレートのウェルの一部に添加される。次いで、各ウェル内の心筋細胞を、第1のペーシング光の時限パルスおよび第2のペーシング光の時限パルスで同時に刺激する。第1のペーシングと第2のペーシングの両方が、460nmの第1の波長で起こり、一方、660nmの第2の励起波長がBeRST指示薬を励起するために提供される。光刺激は照明アセンブリによって提供される。各ウェル内の細胞応答は、690nmの波長でBeRST指示薬の発光を検出することによって同時にモニターされる。検出アセンブリは蛍光発光を検出する。2つの異なるペーシング条件に応じた摂動は、自動発見的アルゴリズムによって検出され、潜在的な心拍数依存性の標的組織毒性を予測するために使用される。
[00144]自発的拍動活性が観察されるまで、誘導多能性幹細胞由来心筋細胞を384ウェルマイクロタイタープレート中で増殖させた。細胞を電位感受性色素で染色した。図6aに示すように、hERG阻害剤、E4031を様々な濃度(400nM、100nM、25nM、6.3nM、1.6nM、0nM)で384ウェルマイクロタイタープレートの異なるウェルへ添加した。電位感受性色素の蛍光発光の変化を、20秒間にわたって384個のウェルすべてに同時に収集した。収集したデータから、活動電位を独自のソフトウェアにより同定し、そして90%再分極における活動電位持続時間(APD90)を測定し、そして図6bに示すようにhERG阻害剤、E4031の用量反応に変換した。
[00145]HEK293細胞は、静止膜電位を制御するために、Nav1.7ナトリウムチャネル、感光性アクチュエータイオンチャネル、および補助カリウムイオンチャネルを発現するように操作された。マイクロタイタープレート中の細胞単層を電位感受性蛍光色素で染色した。図7に示すように、電圧感受性蛍光色素を励起させ、発せられた蛍光を近赤外波長でモニターし、一方、青色光のパルスは細胞膜電位を部分的に減極させ、蛍光読み出しにおいて見られる一時的なナトリウムチャネル活性および活動電位電圧トレースをもたらした。単層内のパッチクランプされた細胞からの電圧トレースが比較のために示される。
[00146]自発的に拍動している心筋細胞を、近赤外電圧感知色素で染色した384ウェルマイクロタイタープレート中で増殖させ、660nmの光で連続的に照射した。図8a−bに示すように、蛍光発光を20秒間記録し、各活動電位の開始(実線の縦線)および終了(点線の縦線)を独自のアルゴリズムを用いて検出した。約353±14ミリ秒(msec)の90%再分極(APD90)での活動電位持続時間の減少および毎分(bpm)約79.8拍動の拍動期間の減少が、コントロール群(図8b)における約531±37ミリ秒のAPD90および約49.8bpmと比較して、頻脈誘発薬ニフェジピン(Adalata(登録商標)、Procardia(登録商標)、CAS番号21829−25−4)(図8a)を含有するウェルにおいて観察された。同時に取得された96本のトレースのうち2本が表示される。
[00147]心筋細胞を、光依存性細菌チャネル−ロドプシンを発現するHEK293細胞と共にマイクロタイタープレート中で共培養し、近赤外電位感知染料で染色した。図9a−bに示すように、低周波自発活動電位を記録し(図9a)、続いて心筋細胞と操作されたHEK293細胞の電気的結合を介して約460ナノメートル(nm)0.5Hzペーシングパルス(図9b)の列により誘発された活動電位記録を行った。
[00148]ヒトNav1.7電位依存性ナトリウムチャネルと組み合わせて細菌チャネルロドプシンを発現するように操作されたHEK293細胞を、マイクロタイタープレート中で増殖させ、そして近赤外電位感知色素で染色した。図10a〜cに示すように、活動電位を刺激するために、約660ナノメートル(nm)の光および約460nmの光の約4Hzの10ミリ秒パルスでウェルを連続的に照射した(図10a)。96本のうち2本のトレースが同時に蛍光トレースを測定することが図10b−cに示される。
Claims (92)
- (a)励起源からの光をウェルのアレイのうちの複数のウェルに向けるように構成された照明アセンブリであって、前記複数のウェルの各ウェルは細胞を受け入れるように構成され、前記励起源からの光の少なくとも一部は前記複数のウェルの各ウェルの少なくとも一部を照明して少なくとも部分的に照明されたウェルを形成する、照明アセンブリと、
(b)(i)前記複数のウェルの各ウェルから信号を収集し、前記複数のウェルの各ウェルからの信号の収集は実質的に並行して行われ、
(ii)前記複数のウェルの各ウェルから前記信号を対応する検出器に転送し、レンズは前記複数のウェルの各ウェルからの前記信号の少なくとも一部を前記対応する検出器に集束させるように構成され、前記転送は実質的に並行して行われ、前記複数のウェルの各ウェルからの信号の少なくとも一部は独立した検出器に転送される、ように構成された検出アセンブリと、
を含み、
約100ヘルツ(Hz)より大きい、前記複数のウェルにわたる信号のサンプリングレートを含む、
システム。 - 前記複数のウェルのうちの各ウェルからの前記信号の収集は同時に行われる、請求項1に記載のシステム。
- 前記複数のウェルの各ウェルからの2つ以上の信号の収集が実質的に並行して行われる、
請求項1に記載のシステム。 - 前記複数のウェルは5ウェルを超える、
請求項3に記載のシステム。 - 前記複数のウェルの各ウェルからの2つ以上の信号の収集が、約20秒未満の時間枠内に行われる、
請求項3に記載のシステム。 - 透過光を前記複数のウェルの各ウェルに供給するように構成される、
請求項1に記載のシステム。 - 前記検出アセンブリは、透過光の入射経路と実質的に平行な軸に沿って前記複数のウェルの各ウェルから信号を収集するように構成される、
請求項1に記載のシステム。 - 前記検出器は光学検出器である、
請求項1に記載のシステム。 - 前記信号は光信号を含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記信号は前記検出器によって電流信号に変換される、
請求項1に記載のシステム。 - 前記サンプリングレートは、約8,000Hzから約12,000Hzである、
請求項1に記載のシステム。 - 前記検出アセンブリは信号収集光学系を含み、前記信号収集光学系の開口数は約0.2から約0.8である、
請求項1に記載のシステム。 - 前記信号収集光学系の前記開口数は、約0.5である、
請求項12に記載のシステム。 - 前記複数のウェルのうちの少なくとも1つのウェルは実質的に完全に照明されている、
請求項1に記載のシステム。 - 検出器に転送される信号の面積に対する信号が収集されるウェルの面積の比は、約1:0.5から約1:1.5である、
請求項1に記載のシステム。 - 前記比は、約1:1である、
請求項15に記載のシステム。 - 前記照明アセンブリは励起光学系を含み、前記複数のウェルのそれぞれへの前記励起光学系の焦点距離は、前記複数のウェルのうちの対応するウェルから前記信号を収集する前記信号収集光学系の焦点距離よりも長い、
請求項12に記載のシステム。 - 前記励起源の光強度の変化は、約1ミリ秒未満の応答遅れを有する、
請求項1に記載のシステム。 - 前記照明アセンブリは2つ以上の励起源を含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記2つ以上の励起源は異なる、
請求項19に記載のシステム。 - 前記2つ以上の励起源は同じである、
請求項19に記載のシステム。 - 前記励起源は、前記複数のウェルのうちの1つまたは複数のウェルに約5ミリワット/平方ミリメートル(mW/mm2)を超える光強度を提供する、
請求項1に記載のシステム。 - 前記励起源は、前記複数のウェルの各ウェルに約5mW/mm2を超える光強度を提供する、
請求項22に記載のシステム。 - 前記光は、約10−7から約10−5メートルの波長を含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記光は、約400から約800ナノメートル(nm)の波長を含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記検出アセンブリは、約400から約1000nmの波長で前記複数のウェルの各ウェルから前記信号を収集する、
請求項1に記載のシステム。 - 前記信号は前記複数のウェルの各ウェルから対応する検出器に転送される、
請求項26に記載のシステム。 - 前記対応する検出器はフォトダイオードを含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記フォトダイオードは、p−i−n(PIN)フォトダイオード、p−n(PN)フォトダイオード、アバランシェフォトダイオード、ショットキーフォトダイオード、またはそれらの任意の組み合わせを含む、
請求項28に記載のシステム。 - 前記フォトダイオードは、蛍光、燐光、発光、またはそれらの任意の組み合わせを検出する、
請求項28に記載のシステム。 - 前記対応する検出器は、約10−7から約10−5メートルの波長を含む光を検出するように構成される、
請求項1に記載のシステム。 - 前記検出アセンブリは複数の対応する検出器を含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記複数の対応する検出器のうちの各対応する検出器は、前記複数のウェルのうちの異なるウェルに対応する、
請求項32に記載のシステム。 - 前記複数のウェルはウェルのアレイである、
請求項1に記載のシステム。 - 前記複数のウェルは、少なくとも約16個のウェル、32個のウェル、96個のウェル、または384個のウェルを含む、
請求項1に記載のシステム。 - フィルタをさらに含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記フィルタはエミッションフィルタを含む、
請求項36に記載のシステム。 - 複数のレンズと複数の検出器とをさらに含み、前記複数の検出器の各検出器は前記複数のレンズのうちの1つのレンズに動作可能に接続されている、
請求項1に記載のシステム。 - 前記レンズは集束レンズを含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記レンズは単一のコリメーションレンズを含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記検出アセンブリは増幅器をさらに含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記増幅器は、搭載トランスインピーダンス増幅器を含む、
請求項41に記載のシステム。 - 前記複数のウェルの各ウェルは複数の細胞を含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記複数のウェルの少なくとも一部は光検出可能センサを含む、
請求項43に記載のシステム。 - 約1ミリ秒から約1分の範囲の期間内に、前記複数のウェルの各ウェル内の前記光検出可能センサの活性化の有無を検出する、
請求項44に記載のシステム。 - 約1ミリ秒未満で、約5/10mV細胞膜電位変化を超える信号対雑音比で、前記複数のウェルの各ウェル内の前記光検出可能センサからの信号の強度の変化を測定する、
請求項44に記載のシステム。 - 前記光は時限光パルスを含む、
請求項46に記載のシステム。 - 前記時限光パルスの持続時間は約100ミリ秒未満である、
請求項47に記載のシステム。 - 前記時限光パルスは1つまたは複数の波長を含む、
請求項47に記載のシステム。 - 前記光検出可能センサからの前記信号の強度の変化は、前記複数の細胞のうちの少なくとも1つの細胞を、チョップ1タンパク質、チョップ2タンパク質、チョップ1またはチョップ2タンパク質に対して少なくとも約52%の配列相同性、約52%の配列長、またはそれらの組み合わせを有する発現タンパク質、LiGluR、またはそれらの任意の組み合わせと接触させることから生じる、
請求項46に記載のシステム。 - 前記光検出可能センサからの前記信号の強度の変化は、(i)イオンチャネルまたはGタンパク質の光媒介リガンド活性化、(ii)ケージドリガンドまたはその塩または酵素基質またはその塩の光誘導放出、または、(iii)それらの任意の組み合わせ、から生じる、
請求項46に記載のシステム。 - 前記酵素基質またはその塩は、グルタミン酸塩、カルシウム、ヌクレオチド−リン酸塩、それらの任意の塩、またはそれらの任意の組み合わせである、
請求項51に記載のシステム。 - 前記光検出可能センサは、(i)細胞膜電位、(ii)細胞内イオン濃度、(iii)タンパク質構造、または(iv)それらの任意の組み合わせ、の変化を検出するためのセンサを含む、
請求項44に記載のシステム。 - 前記センサは、細胞内のイオン濃度の変化を検出し、前記センサは、フラ−2、インド−1、フルオ−3、フルオ−4、フルオ−5F、フルオ−5N、ロード−2、カルシウムグリーン、カルシウムレッド、フラレッド、クイン−2、これらのいずれかの塩、またはそれらの任意の組み合わせを含む、
請求項53に記載のシステム。 - 前記センサは前記細胞膜電位の変化を検出し、前記センサは、JC−1ヨウ化物(CAS番号47729−63−5)、JC−1(CAS番号3520−43−2)、di−3−ANEPPDHQ、di−4−ANEPPS(CAS番号90134−00−2)、di−8−ANEPPS(CAS番号157134−53−7)、DiBAC4(3)(CAS番号70363−83−6)、BeRST、Di−4−ANBDQBS、VF2.1.C1、RH237(CAS番号83668−91−1)、RH414(CAS番号161433−30−3)、RH421(CAS番号107610−19−5)、RH795(CAS番号172807−13−5)、これらのいずれかの塩、またはそれらの任意の組み合わせを含む、
請求項53に記載のシステム。 - 前記センサは前記細胞内のイオン濃度の変化を検出し、前記イオンは、カルシウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、水素イオン、塩素イオン、またはそれらの任意の組み合わせである、
請求項53に記載のシステム。 - 前記複数のウェルは複数の細胞および培地を含む、
請求項1記載のシステム。 - 前記培地の少なくとも一部は光検出可能センサを含む、
請求項57に記載のシステム。 - 約1ミリ秒から約1分の範囲の期間内に、前記複数のウェルの各ウェル内の前記光検出可能センサの活性化の有無を検出する、
請求項58に記載のシステム。 - 前記光検出可能センサは、(i)細胞膜電位、(ii)細胞外イオン濃度、(iii)タンパク質構造、または(iv)それらの任意の組み合わせ、の変化を検出するためのセンサを含む、
請求項58に記載のシステム。 - 前記複数の細胞は、自発的に電気的に活性な細胞、光学的に歩調のとられた興奮性の細胞、またはそれらの組み合わせを含む、
請求項1に記載のシステム。 - 前記複数の細胞は、前記自発的に電気的に活性な細胞を含み、前記自発的に電気的に活性な細胞は、心筋細胞、皮質ニューロン、後根神経節ニューロン、またはそれらの任意の組み合わせを含む、
請求項61に記載のシステム。 - 前記複数の細胞は前記光学的に歩調のとられた興奮性細胞を含み、前記光学的に歩調のとられた興奮性細胞は心室筋細胞、骨格筋細胞、またはそれらの組み合わせを含む、
請求項61に記載のシステム。 - 前記複数のウェルの各ウェル内の前記複数の細胞は、約50細胞未満である、
請求項42に記載のシステム。 - 前記複数のウェルの各ウェル内の前記複数の細胞は、少なくとも約1,000個の細胞である、
請求項42に記載のシステム。 - 請求項1に記載のシステムと使用説明書とを含むキット。
- 容器をさらに含む、
請求項66に記載のキット。 - 光検出可能センサをさらに含む、
請求項66に記載のキット。 - 前記容器は光検出可能センサを含む、
請求項66に記載のキット。 - データベースをさらに含む、
請求項66に記載のキット。 - 前記使用説明書は、ヒト遅延整流性カリウムイオンチャネル遺伝子(hERG)スクリーニングのための説明書を含む、
請求項66に記載のキット。 - 前記使用説明書は、無傷の心筋細胞に対して分子またはその塩をスクリーニングするための説明書を含む、
請求項66に記載のキット。 - 前記使用説明書は、心筋細胞安全性薬理学スクリーニングのための説明書を含む、
請求項66に記載のキット。 - 1つまたは複数の光検出可能センサと、請求項1に記載のシステムと共に光検出可能センサを使用するための説明書と、を含むキット。
- 無傷の心筋細胞をさらに含む、
請求項74に記載のキット。 - キットの製造方法であって、
請求項1から65のいずれか一項に記載のシステムと使用説明書とを組み合わせるステップを含む方法。 - 前記照明アセンブリおよび前記検出アセンブリを形成するステップを含む、
請求項1に記載のシステムの製造方法。 - hERGスクリーニングの方法であって、
請求項1に記載のシステムを用いてhERGスクリーニングを実施するステップ、
を含む、方法。 - 無傷の心筋細胞に対して分子またはその塩をスクリーニングする方法であって、
請求項1に記載のシステムを用いて前記無傷の心筋細胞に対して前記分子またはその塩をスクリーニングするステップ、
を含む方法。 - 複数の細胞中の光検出可能センサを検出する方法であって、
請求項1に記載のシステムを用いて前記複数の細胞内の前記光検出可能センサを検出するステップを含む、
方法。 - 複数の細胞中の光検出可能センサを検出する方法であって、
複数のウェルから信号を収集するステップであって、前記収集は実質的に並行して行われる、ステップと、
約100Hzよりも大きい、前記複数のウェルにわたるサンプリングレートで前記信号を検出するステップと、
を含む、方法。 - 複数の細胞中の光検出可能センサを検出する方法であって、
(a)複数のウェルを含むウェルのアレイを提供するステップであって、前記複数のウェルの各ウェルは、前記複数の細胞のうちの少なくとも1つの細胞を含み、前記複数の細胞のうちの少なくとも一部分は前記光検出可能センサを含む、ステップと、
(b)励起源からの光を前記複数のウェルの各ウェルに向けて前記複数のウェルの各ウェルの少なくとも一部を照明し、少なくとも部分的に照明されたウェルを形成するステップと、
(c)前記複数のウェルの各ウェルから信号を収集するステップであって、前記収集は実質的に並行して行われる、ステップと、
(d)前記複数のウェルの各ウェルから対応する検出器に前記信号を転送するステップであって、レンズは各ウェルからの前記信号の少なくとも一部を前記対応する検出器に集束させるように構成され、前記転送は実質的に並行して行われ、
前記信号は、前記光検出可能センサの活性化の存在または不在を確認し、前記複数のウェルにわたるサンプリングレートは、約100Hzより大きい、ステップと、
を含む、方法。 - 複数の細胞における分子またはその塩の生物学的活性をスクリーニングする方法であって、
(a)前記複数のウェルのうちの少なくとも一部に前記分子またはその塩を添加するステップであって、前記複数のウェルのうちの1つのウェルは前記複数の細胞のうちの少なくとも1つの細胞を含む、ステップと、
(b)前記複数のウェルの各ウェル内のセンサの活性化の有無を検出するステップであって、前記検出は実質的に並行して行われ、前記複数のウェルにわたるサンプリングレートは約100Hzより大きい、ステップと、
を含む、方法。 - 前記センサは光検出可能センサを含む、
請求項83に記載の方法。 - 前記複数の細胞は心筋細胞を含む、
請求項83に記載の方法。 - 複数の細胞中の分子またはその塩の生物学的活性をスクリーニングする方法であって、
(a)複数のウェルを含むウェルのアレイを提供するステップであって、前記複数のウェルの各ウェルは前記複数の細胞のうちの1つの細胞を含み、前記複数の細胞のうちの少なくとも一部分はセンサを含む、ステップと、
(b)前記複数のウェルの少なくとも一部に前記分子またはその塩を添加するステップと、
(c)励起源からの光を前記複数のウェルの各ウェルに向けて前記複数のウェルの各ウェルの少なくとも一部を照明し、少なくとも部分的に照明されたウェルを形成するステップと、
(d)前記複数のウェルの各ウェル内の前記センサの活性化の有無を検出するステップであって、前記検出は実質的に並行して行われ、前記複数のウェルにわたるサンプリングレートは約100Hzより大きい、ステップと、
を含む、方法。 - 前記センサは光検出可能センサを含む、
請求項86に記載のシステム。 - 前記複数の細胞は心筋細胞を含む、
請求項86に記載のシステム。 - 前記複数のウェルはウェルのアレイである、
請求項86に記載のシステム。 - 前記ウェルのアレイは、6個のウェル、12個のウェル、32個のウェル、96個のウェル、または384個のウェルを含む、
請求項86に記載のシステム。 - 照明アセンブリおよび検出アセンブリを含むシステムであって、
(a)ウェルのアレイのうちの複数のウェルに光を向け、
(b)前記複数のウェルの各ウェルから信号を実質的に並行して収集し、
(c)各信号を実質的に並行して対応する検出器に転送する、
ように構成され、
約100ヘルツ(Hz)より大きい前記複数のウェルにわたる前記信号のサンプリングレートを有する、
システム。 - 前記複数のウェルの各ウェルからの前記信号の収集および転送は同時に行われる、
請求項91に記載のシステム。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022148901A JP2022180500A (ja) | 2017-01-10 | 2022-09-20 | 検出のためのシステムおよび方法 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201762444564P | 2017-01-10 | 2017-01-10 | |
US62/444,564 | 2017-01-10 | ||
PCT/US2018/013188 WO2018132487A1 (en) | 2017-01-10 | 2018-01-10 | Systems and methods for detection |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022148901A Division JP2022180500A (ja) | 2017-01-10 | 2022-09-20 | 検出のためのシステムおよび方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020509391A true JP2020509391A (ja) | 2020-03-26 |
JP2020509391A5 JP2020509391A5 (ja) | 2021-02-04 |
Family
ID=62840498
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019557546A Pending JP2020509391A (ja) | 2017-01-10 | 2018-01-10 | 検出のためのシステムおよび方法 |
JP2022148901A Pending JP2022180500A (ja) | 2017-01-10 | 2022-09-20 | 検出のためのシステムおよび方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022148901A Pending JP2022180500A (ja) | 2017-01-10 | 2022-09-20 | 検出のためのシステムおよび方法 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US11041806B2 (ja) |
EP (1) | EP3568677A4 (ja) |
JP (2) | JP2020509391A (ja) |
WO (1) | WO2018132487A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11041806B2 (en) * | 2017-01-10 | 2021-06-22 | Photoswitch Biosciences, Inc. | Systems and methods for detection |
DE102019129932B4 (de) * | 2019-11-06 | 2023-12-21 | Technische Universität Braunschweig | Optische Detektionseinrichtung und Verfahren zum Betreiben einer optischen Detektionseinrichtung |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003098200A1 (de) * | 2002-05-15 | 2003-11-27 | Evotec Oai Ag | Vorrichtung und verfahren zur untersuchung chemischer und/oder biologischer proben |
WO2004017374A2 (en) * | 2002-08-16 | 2004-02-26 | Clinical Microarrays, Inc. | Reading of fluorescent arrays |
JP2008508537A (ja) * | 2004-08-02 | 2008-03-21 | イノディアグ | 生物学的反応支持体微小付着物を支えるプレートを読み取るための装置 |
JP2011059095A (ja) * | 2009-08-12 | 2011-03-24 | Sony Corp | 光検出装置 |
US20140101785A1 (en) * | 2012-10-10 | 2014-04-10 | Howard Hughes Medical Institute | Genetically encoded calcium indicators and methods of use |
US20160041095A1 (en) * | 2014-08-08 | 2016-02-11 | Quantum-Si Incorporated | Optical system and assay chip for probing, detecting and analyzing molecule |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0650286B2 (ja) | 1984-05-16 | 1994-06-29 | 株式会社東芝 | 発光体の残光特性測定装置 |
EP0238856B1 (de) | 1986-02-21 | 1991-06-05 | Degussa Aktiengesellschaft | Verfahren und Vorrichtung zur Messung der Fluoreszenz-Abklingdauer einer fluoreszierenden Substanz |
DE19748211A1 (de) * | 1997-10-31 | 1999-05-06 | Zeiss Carl Fa | Optisches Array-System und Reader für Mikrotiterplatten |
JP2000249650A (ja) * | 1999-03-03 | 2000-09-14 | Shimadzu Corp | マイクロプレートリーダ |
CA2436098C (en) * | 2001-01-26 | 2014-04-01 | Biocal Technology, Inc. | Optical detection in a multi-channel bio-separation system |
JP2003202292A (ja) | 2001-12-28 | 2003-07-18 | Hamamatsu Photonics Kk | 蛍光寿命測定装置および方法 |
WO2003098279A2 (en) * | 2002-05-17 | 2003-11-27 | Applera Corporation | Optical instrument includung excitation source |
US20050157299A1 (en) * | 2004-01-15 | 2005-07-21 | Heffelfinger David M. | Optical analysis systems |
WO2005088280A1 (ja) | 2004-03-17 | 2005-09-22 | Olympus Corporation | 光測定装置及び光測定方法 |
US7391512B2 (en) | 2004-12-22 | 2008-06-24 | Avago Technologies General Ip Pte. Ltd. | Integrated optoelectronic system for measuring fluorescence or luminescence emission decay |
JPWO2007010803A1 (ja) * | 2005-07-15 | 2009-01-29 | オリンパス株式会社 | 光測定装置 |
WO2008089495A2 (en) * | 2007-01-19 | 2008-07-24 | Purdue Research Foundation | System with extended range of molecular sensing through integrated multi-modal data acquisition |
US7700928B2 (en) * | 2007-01-25 | 2010-04-20 | Etaluma, Inc. | Apparatus and method for interleaving detection of fluorescence and luminescence |
JP2009180516A (ja) * | 2008-01-29 | 2009-08-13 | Fujifilm Corp | 蛍光検出方法および蛍光検出装置 |
EP2276571A1 (en) * | 2008-05-13 | 2011-01-26 | Nxp B.V. | A sensor array and a method of manufacturing the same |
US9494520B2 (en) * | 2010-02-12 | 2016-11-15 | Raindance Technologies, Inc. | Digital analyte analysis |
WO2012027358A1 (en) | 2010-08-23 | 2012-03-01 | President And Fellows Of Harvard College | Optogenetic probes for measuring membrane potential |
EP3134719B1 (en) * | 2014-04-21 | 2021-11-03 | Aber Instruments, Inc. | Particle sensor with interferent discrimination |
US11680904B2 (en) | 2016-05-02 | 2023-06-20 | The George Washington University | Automated system for high-throughput all-optical dynamic electrophysiology |
US11041806B2 (en) * | 2017-01-10 | 2021-06-22 | Photoswitch Biosciences, Inc. | Systems and methods for detection |
-
2018
- 2018-01-10 US US16/475,864 patent/US11041806B2/en active Active
- 2018-01-10 WO PCT/US2018/013188 patent/WO2018132487A1/en unknown
- 2018-01-10 EP EP18738807.9A patent/EP3568677A4/en active Pending
- 2018-01-10 JP JP2019557546A patent/JP2020509391A/ja active Pending
-
2021
- 2021-05-18 US US17/323,188 patent/US11726042B2/en active Active
-
2022
- 2022-09-20 JP JP2022148901A patent/JP2022180500A/ja active Pending
-
2023
- 2023-05-31 US US18/204,322 patent/US20240192138A1/en active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003098200A1 (de) * | 2002-05-15 | 2003-11-27 | Evotec Oai Ag | Vorrichtung und verfahren zur untersuchung chemischer und/oder biologischer proben |
WO2004017374A2 (en) * | 2002-08-16 | 2004-02-26 | Clinical Microarrays, Inc. | Reading of fluorescent arrays |
JP2008508537A (ja) * | 2004-08-02 | 2008-03-21 | イノディアグ | 生物学的反応支持体微小付着物を支えるプレートを読み取るための装置 |
JP2011059095A (ja) * | 2009-08-12 | 2011-03-24 | Sony Corp | 光検出装置 |
US20140101785A1 (en) * | 2012-10-10 | 2014-04-10 | Howard Hughes Medical Institute | Genetically encoded calcium indicators and methods of use |
US20160041095A1 (en) * | 2014-08-08 | 2016-02-11 | Quantum-Si Incorporated | Optical system and assay chip for probing, detecting and analyzing molecule |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3568677A4 (en) | 2020-10-21 |
US20220026364A1 (en) | 2022-01-27 |
US20240192138A1 (en) | 2024-06-13 |
US20190346368A1 (en) | 2019-11-14 |
US11726042B2 (en) | 2023-08-15 |
JP2022180500A (ja) | 2022-12-06 |
WO2018132487A1 (en) | 2018-07-19 |
US11041806B2 (en) | 2021-06-22 |
EP3568677A1 (en) | 2019-11-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20200072817A1 (en) | Cell line, system and method for optical-based screening of ion-channel modulators | |
Kulkarni et al. | Voltage imaging: pitfalls and potential | |
US20240192138A1 (en) | Systems and methods for detection | |
US7986824B2 (en) | Predetermined site luminescence measuring method, predetermined site luminescence measuring apparatus, expression amount measuring method, and measuring apparatus | |
US5589351A (en) | Fluorescence detection apparatus | |
Wang et al. | A selected review of recent advances in the study of neuronal circuits using fiber photometry | |
JP2015505979A (ja) | 高い空間的および/または時間的精度での撮像のためのシステムおよび方法 | |
AU2019368519B2 (en) | System and method for real-time screening and measurement of cellular specific photosensitive effect | |
Zhang et al. | Comparison of fluorescence biosensors and whole-cell patch clamp recording in detecting ACh, NE, and 5-HT | |
US20220205914A1 (en) | Plate imager | |
JP2024501848A (ja) | 光遺伝学のためのイメージャの較正および正規化 | |
US20220206280A1 (en) | Microscope with spatial imaging and beam homogenizer | |
KR200458306Y1 (ko) | 고감도 휴대용 fret 형광측정 장치 | |
Zecevic et al. | Imaging nervous system activity with voltage‐sensitive dyes | |
JP2024501849A (ja) | 光学プレートコントローラおよびリーダ | |
Mukherjee et al. | ‘Radical’differences between two FLIM microscopes affect interpretation of cell signaling dynamics | |
Lo et al. | All-optical mapping of barrel cortex circuits based on simultaneous voltage-sensitive dye imaging and channelrhodopsin-mediated photostimulation | |
Hedrick et al. | Imaging signaling transduction in single dendritic spines | |
JP2007155557A (ja) | 微弱光解析方法 | |
CN107449715B (zh) | 活细胞胞内代谢分析仪及其分析方法 | |
XIANKE | Quantification of biomolecule dynamics and interactions in living zebrafish embryos by fluorescence correlation spectroscopy | |
Kim | The dynamics of calmodulin signaling revealed using optical methods | |
Smith | Characterization of the Efficacy of a Novel Adenosine Biosensor Used in vivo In Conjunction with Fiber Photometry | |
KR20160114752A (ko) | 광감각제에 의해 발생되는 단일항 산소 측정법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201218 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20201218 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20211228 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220111 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220401 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20220525 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220920 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20220920 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20221006 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20221007 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20221021 |
|
C211 | Notice of termination of reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C211 Effective date: 20221025 |
|
C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C22 Effective date: 20230216 |
|
C23 | Notice of termination of proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C23 Effective date: 20230427 |