JP2020014470A - パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン - Google Patents
パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020014470A JP2020014470A JP2019168928A JP2019168928A JP2020014470A JP 2020014470 A JP2020014470 A JP 2020014470A JP 2019168928 A JP2019168928 A JP 2019168928A JP 2019168928 A JP2019168928 A JP 2019168928A JP 2020014470 A JP2020014470 A JP 2020014470A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- virus
- piv5
- influenza
- mice
- gene
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241001559185 Mammalian rubulavirus 5 Species 0.000 title claims abstract description 686
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 194
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 237
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 106
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 106
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims abstract description 95
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 69
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 67
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 67
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims abstract description 58
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 claims abstract description 26
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 101710200413 Small hydrophobic protein Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 351
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 claims description 187
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 claims description 187
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 claims description 187
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 claims description 187
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 claims description 183
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 126
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 claims description 82
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 82
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 78
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 72
- 108010089430 Phosphoproteins Proteins 0.000 claims description 64
- 102000007982 Phosphoproteins Human genes 0.000 claims description 62
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 claims description 60
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 55
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 claims description 53
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 46
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 45
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 claims description 45
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 claims description 45
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 40
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 claims description 35
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 34
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 claims description 33
- 101150084044 P gene Proteins 0.000 claims description 26
- 101150117115 V gene Proteins 0.000 claims description 25
- 102100034574 P protein Human genes 0.000 claims description 23
- 101710181008 P protein Proteins 0.000 claims description 23
- 101710177166 Phosphoprotein Proteins 0.000 claims description 23
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 claims description 21
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 17
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 15
- 241000252870 H3N2 subtype Species 0.000 claims description 14
- 206010064097 avian influenza Diseases 0.000 claims description 13
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 13
- 241000282465 Canis Species 0.000 claims description 12
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 claims description 12
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 12
- 241001263478 Norovirus Species 0.000 claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims description 11
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 claims description 10
- 241001353878 Canine parainfluenza virus Species 0.000 claims description 10
- 241000712083 Canine morbillivirus Species 0.000 claims description 9
- 208000002979 Influenza in Birds Diseases 0.000 claims description 9
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 claims description 9
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 9
- 241000202347 Porcine circovirus Species 0.000 claims description 7
- 101100028758 Influenza A virus (strain A/Swine/Wisconsin/1/1967 H1N1) PB1-F2 gene Proteins 0.000 claims description 6
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 claims description 6
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 claims description 6
- 101150103639 PB1 gene Proteins 0.000 claims description 6
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 6
- 241001519465 Avian metapneumovirus Species 0.000 claims description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 5
- 241000711895 Bovine orthopneumovirus Species 0.000 claims description 5
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 claims description 5
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims description 5
- 241000893570 Hendra henipavirus Species 0.000 claims description 5
- 241000342334 Human metapneumovirus Species 0.000 claims description 5
- 241000711920 Human orthopneumovirus Species 0.000 claims description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 5
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 claims description 5
- 244000045947 parasite Species 0.000 claims description 5
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 5
- 241001559187 Human rubulavirus 2 Species 0.000 claims description 4
- 241000713297 Influenza C virus Species 0.000 claims description 4
- 241001617329 Norovirus isolates Species 0.000 claims description 4
- 101900083372 Rabies virus Glycoprotein Proteins 0.000 claims description 4
- 241000725681 Swine influenza virus Species 0.000 claims description 4
- 208000037798 influenza B Diseases 0.000 claims description 4
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 claims description 4
- 241001473385 H5N1 subtype Species 0.000 claims description 3
- 241000712003 Human respirovirus 3 Species 0.000 claims description 3
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims description 3
- 108010068327 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Proteins 0.000 claims description 2
- 241000726041 Human respirovirus 1 Species 0.000 claims description 2
- 241001559186 Human rubulavirus 4 Species 0.000 claims description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 2
- 240000007651 Rubus glaucus Species 0.000 claims 1
- 235000011034 Rubus glaucus Nutrition 0.000 claims 1
- 235000009122 Rubus idaeus Nutrition 0.000 claims 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims 1
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 abstract description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 334
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 185
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 119
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 118
- 101710133291 Hemagglutinin-neuraminidase Proteins 0.000 description 99
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 95
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 95
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 95
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 90
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 82
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 72
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 72
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 70
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 70
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 67
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 57
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 57
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 55
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 53
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 51
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 51
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 49
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 49
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 49
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 44
- 231100000111 LD50 Toxicity 0.000 description 43
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 42
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 39
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 35
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 33
- 229960003127 rabies vaccine Drugs 0.000 description 33
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 32
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 32
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 31
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 31
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 31
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 30
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 30
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 30
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 30
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 30
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 29
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 29
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 29
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 28
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 27
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 27
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 27
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 26
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 26
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 25
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 25
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 25
- 238000011161 development Methods 0.000 description 23
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 23
- 230000004044 response Effects 0.000 description 22
- 101150039660 HA gene Proteins 0.000 description 21
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 18
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 17
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 17
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 17
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 17
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 16
- 101150107578 SH gene Proteins 0.000 description 16
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 15
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 15
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 15
- 101150118742 NP gene Proteins 0.000 description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 14
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 13
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 13
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 13
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 13
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 13
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 13
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 13
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 13
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 12
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 12
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 12
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 12
- 101150034814 F gene Proteins 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 11
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 11
- 101150008820 HN gene Proteins 0.000 description 10
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 10
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 10
- LHEJDBBHZGISGW-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-3-(3-oxo-1h-2-benzofuran-1-yl)-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1C(F)=CNC(=O)N1C1C2=CC=CC=C2C(=O)O1 LHEJDBBHZGISGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 9
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 9
- 230000012447 hatching Effects 0.000 description 9
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 9
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 9
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 230000036541 health Effects 0.000 description 8
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 8
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 230000002516 postimmunization Effects 0.000 description 8
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 7
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 7
- 230000034994 death Effects 0.000 description 7
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 7
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 7
- MSXVEPNJUHWQHW-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutan-2-ol Chemical compound CCC(C)(C)O MSXVEPNJUHWQHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101150082239 G gene Proteins 0.000 description 6
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 6
- 101150062031 L gene Proteins 0.000 description 6
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000001857 anti-mycotic effect Effects 0.000 description 6
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 description 6
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 6
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 6
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 6
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 6
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 6
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 101150011571 BSL2 gene Proteins 0.000 description 5
- 201000011001 Ebola Hemorrhagic Fever Diseases 0.000 description 5
- 101800001467 Envelope glycoprotein E2 Proteins 0.000 description 5
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 5
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 5
- 241000711897 Rinderpest morbillivirus Species 0.000 description 5
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 5
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 5
- 101150037646 VP gene Proteins 0.000 description 5
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 5
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 5
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 5
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 5
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 5
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 5
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 5
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 5
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 5
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N tribromoethanol Chemical group OCC(Br)(Br)Br YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 229940033330 HIV vaccine Drugs 0.000 description 4
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 4
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 4
- 208000005647 Mumps Diseases 0.000 description 4
- MQUQNUAYKLCRME-INIZCTEOSA-N N-tosyl-L-phenylalanyl chloromethyl ketone Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)N[C@H](C(=O)CCl)CC1=CC=CC=C1 MQUQNUAYKLCRME-INIZCTEOSA-N 0.000 description 4
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 4
- 241000711504 Paramyxoviridae Species 0.000 description 4
- 238000011053 TCID50 method Methods 0.000 description 4
- 241000223109 Trypanosoma cruzi Species 0.000 description 4
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 4
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 4
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 4
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 4
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 210000005015 mediastinal lymph node Anatomy 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 208000010805 mumps infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 4
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 4
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 4
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 4
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 3
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 101001065501 Escherichia phage MS2 Lysis protein Proteins 0.000 description 3
- 241000714201 Feline calicivirus Species 0.000 description 3
- 241000714165 Feline leukemia virus Species 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 101150105849 H5 gene Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 101710085938 Matrix protein Proteins 0.000 description 3
- 101710127721 Membrane protein Proteins 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 241001135989 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Species 0.000 description 3
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 description 3
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 3
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 3
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 3
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 3
- 230000005775 apoptotic pathway Effects 0.000 description 3
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 3
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 3
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N ionomycin Natural products O1C(CC(O)C(C)C(O)C(C)C=CCC(C)CC(C)C(O)=CC(=O)C(C)CC(C)CC(CCC(O)=O)C)CCC1(C)C1OC(C)(C(C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N ionomycin Chemical compound O1[C@H](C[C@H](O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)/C=C/C[C@@H](C)C[C@@H](C)C(/O)=C/C(=O)[C@@H](C)C[C@@H](C)C[C@@H](CCC(O)=O)C)CC[C@@]1(C)[C@@H]1O[C@](C)([C@@H](C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N 0.000 description 3
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 3
- 230000017960 syncytium formation Effects 0.000 description 3
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 229950004616 tribromoethanol Drugs 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010001935 American trypanosomiasis Diseases 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 2
- 206010002515 Animal bite Diseases 0.000 description 2
- 101100272788 Arabidopsis thaliana BSL3 gene Proteins 0.000 description 2
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241001466804 Carnivora Species 0.000 description 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 2
- 241000288673 Chiroptera Species 0.000 description 2
- 208000020406 Creutzfeldt Jacob disease Diseases 0.000 description 2
- 208000003407 Creutzfeldt-Jakob Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 208000010859 Creutzfeldt-Jakob disease Diseases 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 2
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 241000711450 Infectious bronchitis virus Species 0.000 description 2
- 241000134304 Influenza A virus H3N2 Species 0.000 description 2
- 241000713196 Influenza B virus Species 0.000 description 2
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 108091029795 Intergenic region Proteins 0.000 description 2
- 241000726306 Irus Species 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 2
- 101710175243 Major antigen Proteins 0.000 description 2
- 101710169105 Minor spike protein Proteins 0.000 description 2
- 101710081079 Minor spike protein H Proteins 0.000 description 2
- 208000010359 Newcastle Disease Diseases 0.000 description 2
- 241000526636 Nipah henipavirus Species 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 2
- 240000005578 Rivina humilis Species 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- 241000711955 Turkey rhinotracheitis virus Species 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 208000035472 Zoonoses Diseases 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 2
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 230000005101 cell tropism Effects 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 229940028617 conventional vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 230000010460 detection of virus Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- KAKKHKRHCKCAGH-UHFFFAOYSA-L disodium;(4-nitrophenyl) phosphate;hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].[O-][N+](=O)C1=CC=C(OP([O-])([O-])=O)C=C1 KAKKHKRHCKCAGH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 2
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 2
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 2
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 238000012768 mass vaccination Methods 0.000 description 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 2
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 230000016379 mucosal immune response Effects 0.000 description 2
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 230000000174 oncolytic effect Effects 0.000 description 2
- 229940126578 oral vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 230000007444 viral RNA synthesis Effects 0.000 description 2
- 206010048282 zoonosis Diseases 0.000 description 2
- KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 2-(diethylamino)ethyl 4-aminobenzoate;(2s,5r,6r)-3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid;hydrate Chemical compound O.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1.N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GFWBKUDRXMQSFD-FJXQXJEOSA-M 3-aminopropanoyl-[(1s)-1-carboxy-2-(1h-imidazol-5-yl)ethyl]azanide;zinc Chemical compound [Zn].NCCC(=O)[N-][C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 GFWBKUDRXMQSFD-FJXQXJEOSA-M 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100034540 Adenomatous polyposis coli protein Human genes 0.000 description 1
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 1
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241000701157 Canine mastadenovirus A Species 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 208000014085 Chronic respiratory disease Diseases 0.000 description 1
- 241001533384 Circovirus Species 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 1
- 238000011537 Coomassie blue staining Methods 0.000 description 1
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 1
- 208000000655 Distemper Diseases 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 1
- 102100038132 Endogenous retrovirus group K member 6 Pro protein Human genes 0.000 description 1
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- 240000001973 Ficus microcarpa Species 0.000 description 1
- 101150066002 GFP gene Proteins 0.000 description 1
- 241000701047 Gallid alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 1
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 description 1
- 101150111468 H3 gene Proteins 0.000 description 1
- 108700004031 HN Proteins 0.000 description 1
- 229940124873 Influenza virus vaccine Drugs 0.000 description 1
- 241000711828 Lyssavirus Species 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000266847 Mephitidae Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241001183012 Modified Vaccinia Ankara virus Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 1
- 101000985498 Mus musculus Hermansky-Pudlak syndrome 4 protein homolog Proteins 0.000 description 1
- 241000772415 Neovison vison Species 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 241000272458 Numididae Species 0.000 description 1
- 241000712464 Orthomyxoviridae Species 0.000 description 1
- 208000009620 Orthomyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000010191 Osteitis Deformans Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 208000027868 Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 241000702437 Parvovirus H3 Species 0.000 description 1
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000288049 Perdix perdix Species 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 1
- 101800000795 Proadrenomedullin N-20 terminal peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400001018 Proadrenomedullin N-20 terminal peptide Human genes 0.000 description 1
- 241000282335 Procyon Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 1
- 238000010357 RNA editing Methods 0.000 description 1
- 238000010802 RNA extraction kit Methods 0.000 description 1
- 230000026279 RNA modification Effects 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 229940124861 Rabies virus vaccine Drugs 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000702263 Reovirus sp. Species 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- 241000711931 Rhabdoviridae Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 208000003028 Stuttering Diseases 0.000 description 1
- 208000037065 Subacute sclerosing leukoencephalitis Diseases 0.000 description 1
- 206010042297 Subacute sclerosing panencephalitis Diseases 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 230000037453 T cell priming Effects 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 230000010530 Virus Neutralization Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- NOSIYYJFMPDDSA-UHFFFAOYSA-N acepromazine Chemical compound C1=C(C(C)=O)C=C2N(CCCN(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 NOSIYYJFMPDDSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005054 acepromazine Drugs 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 210000001552 airway epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000037640 animal pathogen Species 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003855 balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- AFYNADDZULBEJA-UHFFFAOYSA-N bicinchoninic acid Chemical compound C1=CC=CC2=NC(C=3C=C(C4=CC=CC=C4N=3)C(=O)O)=CC(C(O)=O)=C21 AFYNADDZULBEJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000034303 cell budding Effects 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 230000001010 compromised effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000009429 distress Effects 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 1
- 244000309457 enveloped RNA virus Species 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 230000034725 extrinsic apoptotic signaling pathway Effects 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008826 genomic mutation Effects 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003067 hemagglutinative effect Effects 0.000 description 1
- 210000003677 hemocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940000351 hemocyte Drugs 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 244000144980 herd Species 0.000 description 1
- 230000007236 host immunity Effects 0.000 description 1
- 244000052637 human pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 1
- 230000002480 immunoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 208000037799 influenza C Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000013101 initial test Methods 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 230000034727 intrinsic apoptotic signaling pathway Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229960001226 live attenuated influenza Drugs 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000464 low-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 208000027202 mammary Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 210000001989 nasopharynx Anatomy 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- UYDLBVPAAFVANX-UHFFFAOYSA-N octylphenoxy polyethoxyethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(OCCOCCOCCOCCO)C=C1 UYDLBVPAAFVANX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000017448 oviposition Effects 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- PIRWNASAJNPKHT-SHZATDIYSA-N pamp Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)N)C(C)C)C1=CC=CC=C1 PIRWNASAJNPKHT-SHZATDIYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 229940056457 promace Drugs 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000006648 viral gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000009447 viral pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007919 viral pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 229940023147 viral vector vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 229960000544 whole virus inactivated influenza Drugs 0.000 description 1
- 229940126581 whole-virion vaccine Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/04—Mycobacterium, e.g. Mycobacterium tuberculosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/205—Rhabdoviridae, e.g. rabies virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
- A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/58—Medicinal preparations containing antigens or antibodies raising an immune response against a target which is not the antigen used for immunisation
- A61K2039/585—Medicinal preparations containing antigens or antibodies raising an immune response against a target which is not the antigen used for immunisation wherein the target is cancer
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16171—Demonstrated in vivo effect
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18021—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18711—Rubulavirus, e.g. mumps virus, parainfluenza 2,4
- C12N2760/18721—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18711—Rubulavirus, e.g. mumps virus, parainfluenza 2,4
- C12N2760/18732—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18711—Rubulavirus, e.g. mumps virus, parainfluenza 2,4
- C12N2760/18741—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2760/18743—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18711—Rubulavirus, e.g. mumps virus, parainfluenza 2,4
- C12N2760/18771—Demonstrated in vivo effect
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/20011—Rhabdoviridae
- C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
- C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/20011—Rhabdoviridae
- C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
- C12N2760/20171—Demonstrated in vivo effect
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
本願は、2012年1月24日に出願された米国仮特許出願第61/590,070号明細書、2012年1月24日に出願された米国仮特許出願第61/590,056号明細書、及び2012年8月16日に出願された同第61/683,810号明細書の利益を主張するものであり、これらの仮特許出願の各々は、全体として参照により本明細書に援用される。
本発明は、国立衛生研究所(National Institutes of Health)の提供による補助金交付番号第R01AI070847号及び第R56AI081816号に基づく連邦政府の支援を受けて行われた。連邦政府は本発明に一定の権利を有する。
以下、本発明の実施形態を示す。
(1)異種ポリペプチドを発現する異種ヌクレオチド配列を含むパラインフルエンザウイルス5型(PIV5)ゲノムを含むウイルス発現ベクターであって、前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ(HN)遺伝子とラージRNAポリメラーゼタンパク質(L)遺伝子との間には挿入されない、ウイルス発現ベクター。
(2)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ(HN)遺伝子とラージRNAポリメラーゼタンパク質(L)遺伝子との間よりリーダーの近くに挿入される、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(3)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのスモール疎水性タンパク質(SH)遺伝子とヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ(HN)遺伝子との間に挿入される、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(4)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのF遺伝子とSH遺伝子との間に挿入される、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(5)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのVP遺伝子と基質タンパク質(M)遺伝子との間に挿入される、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(6)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのM遺伝子とF遺伝子との間に挿入される、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(7)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのヌクレオカプシドタンパク質(NP)遺伝子とV/P遺伝子との間に挿入される、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(8)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのリーダー配列とヌクレオカプシドタンパク質(NP)遺伝子との間に挿入される、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(9)PIV5のF又はHN遺伝子の一部が、前記異種ヌクレオチド配列で置換されている、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(10)前記異種ヌクレオチド配列がSH遺伝子ヌクレオチド配列を置換する、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(11)前記異種ヌクレオチド配列が、SH遺伝子ヌクレオチド配列内、NP遺伝子ヌクレオチド配列内、V/P遺伝子ヌクレオチド配列内、M遺伝子ヌクレオチド配列内、F遺伝子ヌクレオチド配列内、HN遺伝子ヌクレオチド配列内、及び/又はL遺伝子ヌクレオチド配列内に挿入される、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(12)前記PIV5ゲノムが1つ以上の突然変異をさらに含む、(1)に記載のウイルス発現ベクター。
(13)突然変異が、V/P遺伝子の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の残基26、32、33、50、102、及び/又は157の突然変異、Vタンパク質のC末端が欠損した突然変異、スモール疎水性(SH)タンパク質が欠損した突然変異、融合(F)タンパク質の突然変異、リンタンパク質(P)の突然変異、ラージRNAポリメラーゼ(L)タンパク質の突然変異、イヌパラインフルエンザウイルス由来の残基を組み込む突然変異、アポトーシスを誘導する突然変異、又はそれらの組み合わせを含む、(14)に記載のウイルス発現ベクター。
(14)前記突然変異が、PIV5VΔC、PIV5ΔSH、PIV5−P−S308G、又はそれらの組み合わせを含む、(14)に記載のウイルス発現ベクター。
(15)前記PIV5ゲノムが1つ以上の突然変異をさらに含む、(2)〜(12)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクター。
(16)突然変異が、V/P遺伝子の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の残基26、32、33、50、102、及び/又は157の突然変異、Vタンパク質のC末端が欠損した突然変異、スモール疎水性(SH)タンパク質が欠損した突然変異、融合(F)タンパク質の突然変異、リンタンパク質(P)の突然変異、ラージRNAポリメラーゼ(L)タンパク質の突然変異、イヌパラインフルエンザウイルス由来の残基を組み込む突然変異、アポトーシスを誘導する突然変異、又はそれらの組み合わせを含む、(15)に記載のウイルス発現ベクター。
(17)前記突然変異が、PIV5VΔC、PIV5ΔSH、PIV5−P−S308G、又はそれらの組み合わせを含む、(16)に記載のウイルス発現ベクター。
(18)異種ポリペプチドを発現する異種ヌクレオチド配列を含むパラインフルエンザウイルス5型(PIV5)ゲノムを含むウイルス発現ベクターであって、前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ(HN)遺伝子とラージRNAポリメラーゼタンパク質(L)遺伝子との間に挿入され、且つ前記PIV5ゲノムが1つ以上の突然変異をさらに含む、ウイルス発現ベクター。
(19)突然変異が、V/P遺伝子の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の残基26、32、33、50、102、及び/又は157の突然変異、Vタンパク質のC末端が欠損した突然変異、スモール疎水性(SH)タンパク質が欠損した突然変異、融合(F)タンパク質の突然変異、リンタンパク質(P)の突然変異、ラージRNAポリメラーゼ(L)タンパク質の突然変異、イヌパラインフルエンザウイルス由来の残基を組み込む突然変異、アポトーシスを誘導する突然変異、又はそれらの組み合わせを含む、(18)に記載のウイルス発現ベクター。
(20)前記突然変異が、PIV5VΔC、PIV5ΔSH、PIV5−P−S308G、又はそれらの組み合わせを含む、(18)に記載のウイルス発現ベクター。
(21)異種ポリペプチドを発現する異種ヌクレオチド配列を含むパラインフルエンザウイルス5型(PIV5)ゲノムを含むウイルス発現ベクターであって、前記異種ポリペプチドがインフルエンザヌクレオカプシドタンパク質(NP)を含む、ウイルス発現ベクター。
(22)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ(HN)遺伝子とラージRNAポリメラーゼタンパク質(L)遺伝子との間に挿入される、(21)に記載のウイルス発現ベクター。
(23)前記異種ヌクレオチド配列が、前記PIV5ゲノムのヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ(HN)遺伝子とラージRNAポリメラーゼタンパク質(L)遺伝子との間よりリーダーの近くに挿入され;前記PIV5ゲノムのヌクレオカプシドタンパク質(NP)遺伝子の上流に挿入され;前記PIV5ゲノムのリーダー配列の直ちに下流に挿入され;前記PIV5ゲノムのスモール疎水性タンパク質(SH)遺伝子とヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ(HN)遺伝子との間に挿入され;前記PIV5ゲノムのF遺伝子とSH遺伝子との間に挿入され;前記PIV5ゲノムのVP遺伝子と基質タンパク質(M)遺伝子との間に挿入され;前記PIV5ゲノムのM遺伝子とF遺伝子との間に挿入され;前記PIV5ゲノムのヌクレオカプシドタンパク質(NP)遺伝子とV/P遺伝子との間に挿入され;前記PIV5ゲノムのリーダー配列とヌクレオカプシドタンパク質(NP)遺伝子との間に挿入され;ここでPIV5のF又はHN遺伝子の一部が、前記異種ヌクレオチド配列で置換されており;SH遺伝子ヌクレオチド配列を置換し;SH遺伝子ヌクレオチド配列内、NP遺伝子ヌクレオチド配列内、V/P遺伝子ヌクレオチド配列内、M遺伝子ヌクレオチド配列内、F遺伝子ヌクレオチド配列内、HN遺伝子ヌクレオチド配列内、及び/又はL遺伝子ヌクレオチド配列内に挿入される、(21)に記載のウイルス発現ベクター。
(24)前記PIV5ゲノムが1つ以上の突然変異をさらに含む、(21)〜(23)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクター。
(25)突然変異が、V/P遺伝子の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の残基26、32、33、50、102、及び/又は157の突然変異、Vタンパク質のC末端が欠損した突然変異、スモール疎水性(SH)タンパク質が欠損した突然変異、融合(F)タンパク質の突然変異、リンタンパク質(P)の突然変異、ラージRNAポリメラーゼ(L)タンパク質の突然変異、イヌパラインフルエンザウイルス由来の残基を組み込む突然変異、アポトーシスを誘導する突然変異、又はそれらの組み合わせを含む、(24)に記載のウイルス発現ベクター。
(26)前記突然変異が、PIV5VΔC、PIV5ΔSH、PIV5−P−S308G、又はそれらの組み合わせを含む、(24)に記載のウイルス発現ベクター。
(27)前記異種ポリペプチドが、インフルエンザヘマグルチニン(HA)、インフルエンザノイラミニダーゼ(NA)、インフルエンザヌクレオカプシドタンパク質(NP)、M1、M2、PA、PB1、PB2、PB1−F2、NS1又はNS2を含む、(1)又は(18)に記載のウイルス発現ベクター。
(28)前記インフルエンザが、A型インフルエンザ、B型インフルエンザ、又はC型インフルエンザウイルスを含む、(27)に記載のウイルス発現ベクター。
(29)前記異種ポリペプチドが、A型インフルエンザウイルスH1〜H18亜型株由来のヘマグルチニン(HA)を含む、(27)に記載のウイルス発現ベクター。
(30)前記異種ポリペプチドが、A型インフルエンザウイルスH5N1、H3N2、又はH1N1株由来のヘマグルチニン(HA)を含む、(27)に記載のウイルス発現ベクター。
(31)前記異種ポリペプチドが、インフルエンザA型N1〜N10亜型由来のインフルエンザノイラミニダーゼ(NA)を含む、(27)に記載のウイルス発現ベクター。
(32)前記NP、M1、M2、PA、PB1、PB2、PB1−F2、NS1又はNS2がA型インフルエンザウイルスH1〜H17株由来であり、且つ前記NAがA型インフルエンザウイルスN1〜N10株由来である、(27)に記載のウイルス発現ベクター。(33)前記異種ポリペプチドが、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、パラインフルエンザウイルス1型、パラインフルエンザウイルス2型、パラインフルエンザウイルス3型、パラインフルエンザウイルス4型、ヒト呼吸器合胞体ウイルス、ウシ呼吸器合胞体ウイルス、ヒトメタニューモウイルス、トリインフルエンザ、イヌインフルエンザ、トリメタニューモウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、狂犬病ウイルス、エボラウイルス、ブタサーコウイルス、ブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニューカッスル病ウイルス、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、イヌジステンパーウイルス、ネコ白血病ウイルス、ヒトカリシウイルス、動物カリシウイルス(veterinary calcivirus)、ヒトノロウイルス、動物ノロウイルス、牛疫ウイルス、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)、及び/又はヒト若しくは動物における新興インフルエンザウイルスに由来する、(1)又は(18)に記載のウイルス発現ベクター。
(34)前記異種ポリペプチドが細菌又は寄生体に由来する、(1)又は(18)に記載のウイルス発現ベクター。
(35)異種ポリペプチドを発現する2つ以上の異種ヌクレオチド配列を含む、(1)、(18)、又は(21)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクター。
(36)(1)〜(35)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクターを含むウイルス粒子。
(37)(1)〜(36)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクター又はウイルス粒子の組成物。
(38)アジュバントをさらに含む、(37)に記載の組成物。
(39)細胞において異種ポリペプチドを発現する方法であって、前記細胞を、(1)〜(38)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物と接触させる工程を含む方法。
(40)対象において異種ポリペプチドに対する免疫応答を誘導する方法であって、(1)〜(39)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物を前記対象に投与する工程を含む方法。
(41)前記免疫応答が、体液性免疫応答及び/又は細胞性免疫応答を含む、(40)に記載の方法。
(42)対象において異種ポリペプチドを発現する方法であって、(1)〜(38)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物を前記対象に投与する工程を含む方法。
(43)対象をワクチン接種する方法であって、(1)〜(38)のいずれか一に記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物を前記対象に投与する工程を含む方法。
(44)前記ウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物が、鼻腔内に、筋肉内に、局所的に、経口的に、又は卵内に投与される、(40)〜(43)のいずれか一に記載の方法。
ワクチンベクターとしてのパラインフルエンザウイルス(PIV5)
インフルエンザウイルスのHAを発現するPIV5が、致死性高病原性鳥インフルエンザH5N1(HPAI)であって最も病原性の強いインフルエンザウイルス株であるH5N1による攻撃を防御することができるかどうかを試験するため、H5N1のHAを発現する組換えPIV5(PIV5−H5)を作成し、動物におけるこのウイルスの有効性を試験した。図2A〜図2Dに示されるとおり、PIV5−H5の単一用量接種が致死性H5N1攻撃を防御したことから、PIV5がワクチン開発向けに優れたベクターであることが示される。
パラインフルエンザウイルス5型に対する免疫が先在する宿主におけるパラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチンの評価
ベクターとしてのPIV5の使用に関する重要な論点は、PIV5に対する先行曝露がPIV5ベースのワクチンの使用を妨げるかどうかである。この例では、A型インフルエンザウイルス3亜型のヘマグルチニン(HA)を発現する組換えPIV5(rPIV5−H3)の免疫原性を、PIV5に対して免疫したイヌにおいて調べた。PIV5に対する中和抗体を含むイヌにrPIV5−H3をワクチン接種すると、A型インフルエンザウイルスに対する免疫が生じたことが見出され、PIV5ベースのワクチンが先行曝露を有するイヌにおいて免疫原性であることを示している。さらに、ヒト集団におけるPIV5の曝露を調べた。45例中13例のヒト血清試料(約29%)で、PIV5に対する中和抗体(nAb)が検出されている。ヒトにおけるnAb力価はワクチン接種イヌより低かったことから、ヒトにおけるnAbのためにPIV5がヒトにおいて有効なベクターとなれない可能性は低いことが示唆される。
ウイルス及び細胞。10%ウシ胎仔血清(FBS)及び100IU/mlペニシリン−100μg/mlストレプトマイシンを含有するダルベッコ変法イーグル培地(DMEM)(Invitrogen)でMDBK、BHK21及びVero細胞を成長させた。A型インフルエンザウイルス(A/Udorn/72、H3N2亜型)ヘマグルチニン(HA)遺伝子を含むrPIV5−H3ウイルスを、以前記載されるとおり構築した(Tompkins et al.,2007,Virology;362:139−150)。2%FBS含有DMEMを使用してPIV5ウイルスをMDBK細胞で4〜5日間成長させ、以前報告されたとおりウイルス力価をBHK21細胞に対するプラークアッセイにより調べた(He et al.,1997,Virology;237:249−260)。簡潔に言えば、6ウェルプレートにあるBHK21細胞を、段階希釈ウイルス(1:101〜1:107)に感染させた。2時間(h)後、接種混合物を取り出し、2%FBS、100IU/mlペニシリン、100μg/mlストレプトマイシン、及び1%低融点アガロースを含有する4ml DMEMに交換した。感染後4〜6日目(dpi)にプラークを計数した。力価計算には、各時間点につき2つのレプリケートを用意した。ムンプスウイルスのJeryl Lynn(JL)ワクチン株をVero細胞で成長させ、4〜7dpiで回収した。以前記載されたとおり、Vero細胞においてプラークアッセイによりウイルス力価を計測した(Xu et al.,2011,Virology;417:126−136)。インフルエンザA/Udorn/72ウイルスを卵内で成長させた(Paterson and Lamb,1993,The molecular biology of influenza viruses and paramyxoviruses(インフルエンザウイルス及びパラミクソウイルスの分子生物学).所収:Davidson A,Elliott RM編.Molecular Virology:A Practical Approach.Oxford:IRL Oxford University Press.pp.35−73)。
PIV5及びrPIV5−H3による「未感作」イヌの感染。本明細書に含まれるさらなる例は、マウスにおいてインフルエンザウイルスに対する免疫を生じさせるのにrPIV5−H3が有効であることを示しているが、同じウイルスがイヌにおいて免疫を生じさせるのに有効となり得るかどうかは明らかでない。従って、イヌに鼻腔内経路によってrPIV5−H3を接種し、イヌにおけるウイルスの複製を決定し、ウイルスに対する免疫応答を測定した。イヌは通常、幼齢(早ければ3週齢)で生PIV5を含むワクチンのワクチン接種を受ける。動物供給業者の手配により、生PIV5のワクチン接種を受けていない8匹の12週齢イヌを入手した。これらのイヌのPIV5抗体の力価を、ELISA及び中和アッセイを用いて測定した。ELISAでは、全てのイヌがPIV5に陽性であった(図11A)。しかしながら、中和抗体(nAb)力価は検出不能であった(図11B)。イヌ(n=4)を鼻腔内(IN)経路でPIV5又はrPIV5−H3に感染させた。感染後3日目及び5日目、感染したイヌから鼻スワブを採取し、ウイルスの存在についてアッセイした。プラークアッセイを用いてスワブを分析したところ、ウイルスは検出されなかった(図12)が、感染後3日目(dpi)に8匹中7匹のイヌでRT−PCR産物が検出され、5dpiに8匹中5匹のイヌで極めて弱いRT−PCRシグナルが検出されたことから、感染後3日目の感染イヌの鼻孔においてPIV5の複製は限られていたこと、及び感染後5日目には感染が除去されていたことが示唆される。感染後21日目にイヌを出血させた。全てのイヌにおいて抗PIV5力価の増加が検出されたことから、イヌが感染したことが示唆される。HAIアッセイを用いた抗HA力価の計測から、全てのrPIV5−H3接種イヌが血清転換し、感染後3週間目に平均42.5(20〜80の範囲)のHAI力価を有したことが示された(図13)。PIV5を接種したイヌにおいてHAIは検出されなかった。
PIV5が発見されて以来、ヒトにおける多くの疾患がPIV5と関連付けられたが、それらは全て、最終的に誤りであることが分かった。なぜPIV5がこれらの疾患と結び付けられてきたのかについては、振り返ってみると、いくつかの考えられる説明がある。一つは、ヒト研究においてウイルス単離に用いられた条件に基づき、すなわち研究室はサル細胞系を使用したが、サル細胞系はPIV5に持続感染している可能性があり、且つこれらの細胞は検出可能な細胞変性効果を示さないことが多い(Hsiung,1972,Prog Med Virol;14:241−274;及びChatziandreou et al.,2004,J Gen Virol;85:3007−3016)。別の可能性は、PIV5と近縁で、且つヒト集団でほぼ100パーセント曝露を有するムンプスウイルスなどの遍在性パラミクソウイルスとのPIV5の抗原交差反応性である(Randall and Young,1988,J Gen Virol;69(Pt 8)2051−2060;Tsurudome et al.,1989,Virology;171:38−48;及びKomada et al.,1991,Arch Virol;116:277−283)。この例では、ヒト集団におけるPIV5の曝露を調べ、ヒト血清中に抗PIV5抗体が認められた。興味深いことに、抗ムンプスウイルスと抗PIV5との間に力価の相関は見出されなかったことから、PIV5陽性ヒトは、少なくともその一部について、PIV5に曝露されていた可能性があることが示唆される。ヒト血清試料の約29%がPIV5に対する中和抗体を有した。その一部は、ムンプスウイルスに対してロバストな抗体を有しなかった(図17)ことから、少なくとも一部のヒトはムンプスウイルスとは別にPIV5に曝露されていたことが示唆される。イヌとヒトとの間の密接な接触は、ヒトがイヌからのPIV5に曝露されることに寄与する要因となり得るものと思われる。イヌは鼻腔内ワクチン接種を受け、多くの場合にワクチン接種の間にくしゃみをするため、獣医診療従事者及び飼い主も同様に曝露される。加えて、3dpiでRT−PCRを用いて、未感作イヌでPIV5が検出されたことから、ワクチン接種イヌがワクチン接種後にウイルスを排出し、ヒトのそのウイルスへの曝露がもたらされ得る可能性があることが示唆される。これは、生PIV5を含むケンネルコフワクチンの利用が普及していること、及び米国の人口の約40%が犬の飼い主であることと整合する。
A型インフルエンザウイルスH5N1のHAを発現する組換えパラインフルエンザウイルス5型は、マウスを致死性高病原性鳥インフルエンザH5N1攻撃から防御した
安全且つ有効なワクチンは、ヒト集団における大規模な高病原性鳥インフルエンザウイルス(HPAI)H5N1の集団発生を防ぐ最良の方法である。現在FDAに認可されているH5N1ワクチンには、重大な制限がある。より有効なH5N1ワクチンが緊急に必要とされている。本明細書に示されるとおり、H5N1亜型由来のH5N1のHA遺伝子を発現する生の組換えPIV5(rPIV5−H5)の単一用量が、マウスにおいて致死量のHPAI H5N1感染に対する殺菌免疫を提供した。さらに、PIV5ゲノム内の種々の位置にH5N1 HAを挿入することによる、PIV5ベースのワクチンの有効性に対する効果を調べたところ、PIV5の事実上のプロモーターであるリーダー配列と、第1のウイルス遺伝子NPとの間へのH5N1 HAの挿入が、生存ウイルスをもたらさなかったことが示された。NPと次の遺伝子V/Pとの間へのH5N1 HAの挿入は、成長を欠くウイルスをもたらした。SH遺伝子とHN遺伝子との間の接合部へのH5N1 HAの挿入では、HPAI H5N1攻撃に対する最良の免疫が得られた:マウスにおいて致死性HPAI H5N1攻撃を防御するのに、1000プラーク形成単位(PFU)もの低い用量で十分であった。従って、H5N1 HAを発現する組換えPIV5は、HPAI H5N1ワクチンとしての大きい潜在力を有する。この例では、HA導入遺伝子をリーダー配列に近い部位に順次挿入して組換えPIV5ウイルスの有効性を試験した。さらに、PIV5を使用してH5N1高病原性鳥インフルエンザ(HPAI)ウイルスのHAを発現させ、致死性HPAI攻撃の確立されたマウスモデルにおいて、それらのワクチン候補としての有効性を試験した。
細胞。BSR T7細胞の単層培養は、10%ウシ胎仔血清(FBS)、10%リン酸トリプトースブロス(TPB)及び400μg/ml G418を含有するDMEM中に維持した。Vero細胞、MDBK細胞、MDCK細胞及びBHK細胞の単層培養は、10%FBS、100IU/mlペニシリン、及び100μg/mlストレプトマイシンを含有するDMEM中に維持した。全ての細胞は37℃、5%CO2でインキュベートした。ウイルス感染細胞は、2%FBSを含有するDMEM中で成長させた。PIV5のプラークアッセイはBHK細胞を使用して実施し、インフルエンザウイルスのプラークアッセイはMDCK細胞を使用して実施した。
H5N1のHAを発現する組換えPIV5(rPIV5−H5)をインビトロで作成及び分析する。H5N1のHAを発現する組換えPIV5が致死的攻撃HPAI H5N1からマウスを防御することができるかどうかを試験するため、多塩基切断部位のないHPAI H5N1のHA遺伝子(Horimoto and Kawaoka,1994,J Virol;68:2130−3128;及びSuguitan et al.,2012,J Virol;86:2706−2714)を、PIV5の完全長cDNAゲノムを含むプラスミド(ZL48)のPIV5のHNとLとの遺伝子間の接合部に挿入した(図18A)。このプラスミドを、以前記載されたとおりNP、P及びLをコードするプラスミドと共にBSR T7細胞にトランスフェクトすることにより、感染性ウイルスZL48(rPIV5−H5)を回収した(Sun et al.,2011,J Virol;85:8376−8385)。回収したウイルスをプラーク精製し、Vero細胞で成長させた。プラーク精製ウイルスの完全長ゲノムを、直接RT−PCR配列決定法を用いて配列決定した。ウイルスの大量ストックをMDBK細胞で成長させた。ウイルスの力価は108pfu/mlであった(図18B)。ZL48感染細胞からのH5N1 HAの発現を、免疫ブロット法(図19A)及び免疫蛍光法(図19B)を用いて確認した。ZL48は、低MOI成長曲線に示されるとおり(図19C)、野生型PIV5と同程度に成長した。
この例では、マウスにおける最も病原性の強いインフルエンザウイルス、HPAI H5N1による攻撃に対して、H5N1のHAを発現する組換えPIV5を試験した。この組換えワクチンは、極めて低い用量であっても、HPAI H5N1攻撃に対するマウスの防御において有効であったことから、PIV5がH5N1ワクチンの開発に実行可能なベクターであることが示される。現在、H5N1に対して唯一FDAが承認しているワクチンには、特にそれが2回投与しなければならず、且つ中程度の有効性を実現するのに、従来のインフルエンザワクチンと比較して実質的により高濃度のワクチンが必要であるとおり、重大な制限がある。H5N1ウイルスのHA及びNAを利用する従来のワクチンは免疫原性が不十分となっており、且つ安全性及び生産に問題を抱えている(Stephenson et al.,2004,Lancet Infect Dis;4:499−509にレビューされている)。ZL46などのPIV5ベースのH5N1ワクチンは単一の低い用量(103PFU/マウス)で防御免疫を生じさせることができる一方、このワクチンは組織培養細胞で、特定の無菌卵なしに108PFU/mlまで成長することができて、ワクチンの生産が従事者に健康上のリスクをもたらすことがないため、PIV5ベースのH5N1ワクチンは、現行のFDA承認H5N1ワクチンと比べて利点を有する。さらに、PIV5ベースのH5N1ワクチンの費用対効果の高い性質により、それをニワトリなどのH5N1の保菌動物に対して使用することが可能である。
狂犬病ウイルス糖タンパク質を発現する組換えパラインフルエンザウイルス5型ベースの狂犬病ワクチン
有効で且つ費用対効果の高い狂犬病ワクチンが必要とされている。この例では、PIV5ベクター化狂犬病ワクチンをマウスにおいて試験した。RABV糖タンパク質(G)をコードする組換えPIV5(rPIV5−RV−G)を鼻腔内(IN)、筋肉内(IM)及び経口接種によりマウスに投与した。ワクチン接種マウスを50致死的脳内狂犬病攻撃用量(LD50)のCVS−24で攻撃した。IN経路により投与したとき、単一用量の106PFUのrPIV5−RV−Gが100%防御に十分であった。IM経路により108PFUのrPIV5−RV−Gの単一用量でワクチン接種したマウスは、極めてロバストな防御を提供した(90%〜100%)。興味深いことに、108PFUのrPIV5−RV−Gの単一用量を経口ワクチン接種したマウスは50%生存率を示したが、これは弱毒化狂犬病ワクチンrLBNSE株接種マウスの60%生存率に匹敵する。これは、ベクターとしてのPIV5に基づく動物において経口的に有効な狂犬病ワクチン候補の初めての報告であり、rPIV5−RV−Gが新世代の組換え狂犬病ワクチンの優れた候補であり、PIV5が有望な経口ワクチン用ベクターであることを示している。
細胞。BHK21、BHK21細胞に由来するクローン細胞系であるBSR−T7細胞及びBSR細胞(Sarmento et al.,2006,Virus Res;121:144−151)は、10%リン酸トリプトースブロス、10%ウシ胎仔血清(FBS)及び1%ペニシリン−ストレプトマイシンを含有するダルベッコ変法イーグル培地(DMEM)に維持した。MDBK細胞は、10%FBS含有DMEMで成長させた。マウス神経芽細胞腫(NA)細胞は、10%FBSを補足したRPMI 1640培地に維持した。BSR−T7細胞の培地にはG418を添加し、400μg/mlの終濃度とした。ウイルス感染のため、単層をリン酸緩衝生理食塩水(PBS)で洗浄し、次にDMEM+1%ウシ血清アルブミン中のウイルスを接種した。次に単層をPBSで洗浄し、37℃、5%CO2において2%FBS含有DMEMでインキュベートした。
RV−G1、5’AACAAGCGGCGGCCGCCGCCACCATGGTTCCTCAGGCTCTCCTGTTTGTAC(配列番号5);及びRV−G2、5’AACAAGCGCGGCCGCTCACAGTCTGGTCTCACCCC CACTC(配列番号6)。PIV5感染性クローンベクターにPCR断片を挿入して、追加の遺伝子としてHNとLとの間にRABV Gを含むプラスミド、pPIV5−RV−Gを作成した。rPIV5−RV−Gゲノムの長さは、6の倍数として維持した。
RABV Gを発現する組換えPIV5の作成及び分析。PIV5ベクターを使用した組換え狂犬病ワクチンを、以下のとおり構築した。狂犬病EAR株の糖タンパク質遺伝子(RV−G)をPIV5のHNとLとの遺伝子間に挿入した(図26A)。PIV5ゲノムにおけるRV−G遺伝子には、NP遺伝子とV/P遺伝子との接合部領域の遺伝子開始(GS)、遺伝子間配列(I)及び遺伝子終了(GE)配列が隣接し、これは高度な転写を生じた(He et al.,1997,Virology;237:249−260)。ウイルスを回収し、逆転写(RT)PCR分析及び配列決定によってゲノムを確認した。
過去10年の間、弱毒生RABV又はRABV Gを発現する組換えウイルス(V−RGなど)をベースとする数多くの組換え狂犬病ワクチン候補が、現行の狂犬病ワクチンに代わる可能性を有するものとして開発されてきた(Ge et al.,2011,J Virol;85:8241−8252;Li et al.,2006,Virology;356:147−154;Tordo et al.,2008,Dev Biol(Basel);131:467−476;Weyer et al.,2007,Vaccine;25:4213−4222;Weyer et al.,2009,Vaccine;27:7198−7201;及びZhou et al.,2006,Mol Ther;14:662−672)。それらのワクチン候補の一部は、IMによる投与時に防御免疫を生じたが、これらの候補による経口免疫の有効性に関するデータは欠けている。報告されている中で、狂犬病G遺伝子を有するイヌアデノウイルスによる経口免疫は、マウスにおいて狂犬病感染に対する防御を付与しなかった(Li et al.,2006,Virology;356:147−154)。V−RGに代わるより安全なものとして、狂犬病ウイルス糖タンパク質遺伝子を発現する組換えMVAワクチンが作成されてマウスで試験され、その結果から、109PFUもの高い用量を末梢経路によりワクチン接種したマウスにおいてのみ、防御が認められたことが示された(Weyer et al.,2009,Vaccine;27:7198−7201)。
卵内ワクチン接種用のPIV5ベースのワクチンの免疫原性
この例は、潜在的な卵内接種用ワクチンとしてのPIV5ベースのワクチンの有効性を実証する。表1に示すとおり、H5N1のHAを発現するPIV5(PIV5−H5、ZL46としても知られる;ここでH5はPIV5ゲノム内のSHとHNとの遺伝子間に挿入された)の卵内注射は、孵化率に影響を及ぼさなかった。
動物の健康のためのワクチン
PIV5イヌインフルエンザワクチン開発。イヌインフルエンザに対するPIV5−H3ベクター化ワクチンを開発するため、以下を行う:
イヌインフルエンザのH3遺伝子のDNA配列を決定する;
発現制御エレメントを選択する;
RGプラスミド系の所望の挿入部位にHA遺伝子を合成及びクローニングする;
HA遺伝子及び発現制御エレメントの配列を確認する;
適切な細胞系において組換えウイルスをトランスフェクト及びレスキューする;
組換えウイルスからのHAタンパク質の発現を確認する;
組換えウイルスストックを調製及び保存する;
組換えウイルスをプラーク精製する;
プラーク精製ウイルスの5、10及び15継代目に、H3タンパク質発現並びにプロモーター及びターミネーター配列を含めたDNA配列のインビトロ安定性を確認する;
少なくとも2つの動物試験を行うのに十分なP10〜12のウイルスストックを調製する;及び
イヌにおいてPOC動物試験を実施する。
CDVのF及びH遺伝子のDNA配列を決定する;
発現制御エレメントを選択する;
RGプラスミド系の所望の挿入部位にF及びH遺伝子をクローニングする;
F及びH遺伝子及び発現制御エレメントの配列を確認する;
適切な細胞系において組換えウイルスをトランスフェクト及びレスキューする;
組換えウイルスからのF及びHタンパク質の発現を確認する;
組換えウイルスストックを調製及び保存する;
組換えウイルスをプラーク精製する;
プラーク精製ウイルスの5、10及び15継代目に、F及びHタンパク質発現並びにプロモーター及びターミネーター配列を含めたDNA配列のインビトロ安定性を確認する; 少なくとも2つの動物試験を行うのに十分なP10〜12のウイルスストックを調製する;及び
イヌにおいてPOC動物試験を実施する。
FeLv gp70のDNA配列を決定する;
発現制御エレメントを選択する;
RGプラスミド系の所望の挿入部位にgp70遺伝子を合成及びクローニングする;
gp70遺伝子及び発現制御エレメントの配列を確認する;
適切な細胞系において組換えウイルスをトランスフェクト及びレスキューする;
組換えウイルスからのgp70タンパク質の発現を確認する;
組換えウイルスストックを調製及び保存する;
組換えウイルスをプラーク精製する;
プラーク精製ウイルスの5、10及び15継代目に、gp70タンパク質発現並びにプロモーター及びターミネーター配列を含めたDNA配列のインビトロ安定性を確認する; 少なくとも2つの動物試験を行うのに十分なP10〜12のウイルスストックを調製する;及び
ネコにおいてPOC動物試験を実施する。
ネコカリシウイルスのカプシド遺伝子のDNA配列を決定する;
発現制御エレメントを選択する;
RGプラスミド系の所望の挿入部位にカプシド遺伝子を合成及びクローニングする;
カプシド遺伝子及び発現制御エレメントの配列を確認する;
適切な細胞系において組換えウイルスをトランスフェクト及びレスキューする;
組換えウイルスからのカプシドタンパク質の発現を確認する;
組換えウイルスストックを調製及び保存する;
組換えウイルスをプラーク精製する;
プラーク精製ウイルスの5、10、及び15継代目に、カプシドタンパク質発現並びにプロモーター及びターミネーター配列を含めたDNA配列のインビトロ安定性を確認する;
少なくとも2つの動物試験を行うのに十分なP10〜12のウイルスストックを調製する;及び
ネコにおいてPOC動物試験を実施する。
インフルエンザヘマグルチニンをコードする組換えPIV5ワクチンは、鼻腔内又は筋肉内送達時、H5N1高病原性鳥インフルエンザウイルス感染を防御する
インフルエンザウイルス感染を予防する新しいワクチン接種手法が必要とされている。H5N1高病原性鳥インフルエンザ(HPAI)ウイルスなどの新興ウイルスは、世界的流行の脅威をもたらすのみならず、ワクチン開発及び生産にも難題を提起する。パラインフルエンザウイルス5型(PIV5)はワクチン開発に魅力的なベクターである。この例では、H5N1 HPAIウイルス由来のHAをコードするPIV5−H5の有効性を種々のワクチンスキームで試験した。生PIV5−H5による単回の筋肉内又は鼻腔内免疫は、ロバストな中和血清抗体反応を速やかに誘発し、HPAI攻撃を防御したが、鼻腔内免疫によりプライムされた粘膜IgA応答は、肺におけるウイルス複製をより有効に制御した。PIV5−H5ワクチンはH5 HAをビリオンに組み込み、不活化フォーマットのワクチンの有効性を試験した。不活化PIV5−H5は中和血清抗体反応をプライムし、H5N1ウイルス複製を制御したが、他のH5抗原ワクチンと同様に、防御免疫応答をプライムするのにブースター免疫が必要であった。まとめると、これらの結果は、PIV5−HAワクチン及び詳細にはH5特異的ワクチンが、複数のフォーマットで、且つ複数の投与経路により利用され得ることを示唆している。これは、専ら鼻腔内投与であることに基づき起こり得る禁忌を回避し、単一のワクチンベクターを使用しながらも、より広い適用機会を提供し得る。
インフルエンザウイルス。用いられるA型インフルエンザウイルスには、VNH5N1−PR8/CDC−RG(H5N1;rgVN−PR8;Ruben Donis博士,CDC,Atlanta,GAから供与された)及びA/ベトナム/1203/04(H5N1;Richard Webby,セント・ジュード小児研究病院(St.Jude Children’s Research Hospital),Memphis,TNから供与された))が含まれる。A/VN−PR8は、孵化鶏卵の尿膜腔において37℃で48〜72時間増殖させた。β−プロピオラクトン(BPL)不活化A/ベトナム/1203/04は、セント・ジュード小児研究病院(St.Jude Children’s Research Hospital)(Memphis,TN)のRichard Webbyから供与された。A/ベトナム/1203/04は、孵化鶏卵の尿膜腔において37℃で24時間増殖させた。ウイルスは全て、アリコートに分け、−80℃で保存した。生の高病原性鳥インフルエンザウイルスを使用した実験は全て、ジョージア大学(University of Georgia)の機関内バイオセーフティプログラムによる審査及び承認を受け、CDCによって承認されている指定生物剤の使用に関する指針に従いバイオセーフティレベル3、高度な封じ込め下で行われた。
rPIV5−H5ビリオンにおけるHAの発現及び取り込み。組換えPIV5ウイルスの正常な発現及びパッケージングを試験するため、MDBK細胞を、PIV5、ZL48、ZL46に感染させ、又はモック感染させた。ZL48は、HNとLとの間に挿入されたH5遺伝子を有するもので(実施例3)、既発表のウイルスと比較可能な対照として含めた。上清を採取し、ショ糖で精製し、SDS−PAGEにより分離し、クーマシー染色してタンパク質バンドを可視化した。PIV5 HN、NP、F、M及びMタンパク質に該当するサイズのタンパク質バンドを全ての試料に容易に見ることができ、一方、インフルエンザHAに該当するサイズのバンドはZL48及びZL46試料に見ることができたが、PIV5には見られなかった(図34B)。これらのバンドのアイデンティティをウエスタンブロットにより確認した。
H5N1由来のNPを発現する組換えパラインフルエンザウイルス5型の単一用量ワクチン接種は、A型インフルエンザウイルスに対する広域免疫を提供する
インフルエンザウイルスは、既往のインフルエンザウイルス感染及び/又はワクチン接種にも関わらず、多くの場合に抗原ドリフト及びシフトによって宿主免疫を回避する。最適な防御には、循環ウイルス株に適合するワクチンが必要である。広域の交差防御免疫を提供する万能インフルエンザワクチンの開発は、大きな利点となり得る。A型インフルエンザウイルスの核タンパク質(NP)は、A型インフルエンザウイルスの全ての株にわたり高度に保存されており、万能インフルエンザウイルスワクチン開発の抗原として探究されている。この例では、高病原性鳥インフルエンザ(HPAI)ウイルスであるH5N1(A/ベトナム/1203/2004)由来のNPをHNとLとの間に含む組換えパラインフルエンザウイルス5型(PIV5)(PIV5−NP−HN/L)を作成し、その有効性を試験した。PIV5−NP−HN/Lは、マウスにおいて体液性応答及びT細胞応答を誘導した。PIV5−NP−HN/Lの単回接種により、致死性異種亜型H1N1攻撃に対する完全な防御、及び致死性H5N1 HPAI攻撃に対する50%防御が提供された。有効性を向上させるため、PIV5ゲノム内の種々の位置にNPを挿入した。FとSHとの間(PIV5−NP−F/SH)又はSHとHNとの間(PIV5−NP−SH/HN)にNPを含む組換えPIV5は、PIV5−NP−HN/Lと比べてH5N1 HPAI攻撃に対してより優れた防御を提供した。これらの結果は、H5N1由来のNPを発現するPIV5が万能インフルエンザウイルスワクチンとして利用される潜在力を有することを示している。
細胞。MDBK、MDCK及びVero細胞の単層培養は、10%ウシ胎仔血清(FBS)、100IU/mlペニシリン、及び100μg/mlストレプトマイシンを含有するDMEM中に維持した。BHK及びBSR−T7細胞は、10%FBS、10%リン酸トリプトースブロス(TPB)を含有するDMEM中に維持した。BSR−T7細胞にはG418を添加した。全ての細胞を、37℃、5%CO2でインキュベートした。ウイルス感染細胞は、還元型FBS(2%)を含有する培地で培養した。以前記載されるとおりBHK細胞を使用してPIV5ウイルスのプラークアッセイを実施した(He et al.,1997,Virology;237:249−260)。以前記載されるとおりMDCK細胞を使用してインフルエンザウイルスのTCID50アッセイを実施した(Soboleski et al.,2011,PLoS One;6:e21937)。
PIV5−NP−HN/Lの作成及び分析。H5N1 HPAI由来のNPを発現する組換えPIV5が、マウスにおいて種々の亜型のインフルエンザウイルス攻撃に対し防御を提供し得るかどうかを試験するため、PIV5のcDNAのHNとLとの遺伝子間にH5N1 HPAI NP遺伝子を挿入した(図38)。以前記載されるとおり、NP遺伝子がHNとLとの遺伝子間に挿入されたPIV5ゲノムを含むプラスミドを、PIV5 NP、P及びL遺伝子をコードする3つのヘルパープラスミドと共にBSR−T7細胞にトランスフェクトして、感染性ウイルスを回収した(Sun et al.,2011,J Virol;85:8376−8385)。感染性PIV5−NP−HN/Lウイルスをプラーク精製し、実施例3に記載されるとおりRT−PCR配列決定を用いてPIV5−NP−HN/Lの完全長ゲノム配列を決定した(Li et al.,2013,J Virol;87:354−362 21も参照のこと)。ゲノム配列の正確なcDNAに一致する一つのプラーク精製クローンを、以降の全ての実験に使用した。
この例は、単一のNP遺伝子を発現する生ウイルスベクターベースのワクチンが、マウスにおけるロバストな攻撃モデル(20LD50攻撃)において、致死性H1N1攻撃に対し完全な防御性を有し、且つ高致死率のH5N1攻撃に対し実質的な防御(67%)を提供したことの初めての報告であり、NPベースのワクチンについてPIV5がAdV及びVVと比べてより有効なウイルスベクターであることを示している。
パラインフルエンザウイルス5型(PIV5)ベースのH5N1ワクチン
この例では、引き続きPIV5をベクターとして使用してH5N1に対するワクチンを開発し、万能インフルエンザウイルスワクチン用のベクターとしてのPIV5の使用を探究する。この例は、H5N1抗原を発現する組換えPIV5の、フェレットにおけるHPAI H5N1攻撃に対する有効性を試験することを含む。H5N1抗原HA、NA、NP、M1及びM2を発現する組換えPIV5(まとめてPIV5−H5N1と称される)が作成されている。一部のPIV5−H5N1の単一用量接種は、マウスにおいて致死性HPAI H5N1攻撃に対する完全な防御を提供した(死亡なし、罹患なし及び肺における攻撃ウイルスの検出なし、本発明者らはこれを殺菌免疫と定義する)。これらのワクチン候補の有効性を、限定はされないがフェレット動物モデルを含めた、さらなる動物モデルで試験する。フェレットは、インフルエンザウイルス感染に最良の小動物モデルである。フェレットとヒトとの間には肺の生理及び形態に著しい類似性がある。フェレットは、インフルエンザウイルスへの感染に高度の感受性を示す。ワクチン候補をフェレットでH5N1攻撃に対して試験する。この例では、マウス並びにフェレットにおいてPIV5ベースのワクチン候補により生じる免疫の機構をさらに研究する。この例は、H5N1抗原を発現する組換えPIV5の、H5N1に対する有効性の改良、及び万能インフルエンザウイルスワクチンの開発を含む。ベクターは、より優れた有効性を実現し、且つ潜在的な安全性リスクを低下させるように、さらに修飾される。rPIV5−NPは、H5N1攻撃に対する防御のみならず、H1N1攻撃に対する防御もまた提供する。興味深いことに、H1N1のNAを発現する組換えPIV5は、致死性H1N1攻撃を完全に防御したのみならず、致死性H5N1及びH3N2攻撃も部分的に防御した。ワクチン候補は、H5N1に対する有効性が高まるだけでなく、異種亜型インフルエンザウイルス攻撃に対するより優れた防御も提供することで万能ワクチンへとつながるように、さらに修飾される。
改良狂犬病ワクチン
狂犬病は、世界各地で依然として重大な公衆衛生上の脅威であり、毎年7万人を超える死亡者を生じている。ヒト狂犬病の予防には、愛玩動物及び保菌野生生物の免疫化、リスクを有する人の曝露前免疫化、及び狂犬病の動物に噛まれた人の曝露後治療が含まれる。細胞培養物から調製された不活化狂犬病ウイルス(RV)ワクチンは、安全且つ有効であるものの、欠点を有する。第一に、これらのワクチンは高価であり、従って発展途上国のワクチンを必要とするほとんどの人には手が届かない。さらに、防御免疫応答を生じさせるには、不活化ワクチンによる頻回の免疫化が必要である。加えて、これらの不活化ワクチンは常にアジュバントを含むが、アジュバントは副作用を引き起こし得る。従って、より安全で、より安価な、且つより有効なRVワクチンが必要とされている。
結核菌(Mycobacterium tuberculosis)に対するワクチンとしてのPIV5
結核(TB)の病原因子である結核菌(Mycobacterium tuberculosis)(Mtb)は、毎年約140万人が死亡し、世界人口の3分の1が感染している細胞内細菌性病原体である。1世紀以上にわたる研究及び臨床使用の結果から、生ワクチンがMtbによるエアロゾル感染に対して最良の防御を提供することが示されている。今日使用されているなかで最も広く投与されているワクチンはBCGであり、BCGは、反芻動物において結核を引き起こす近縁種、ウシ型結核菌(Mycobacterium bovis)の弱毒生変異体である。BCGワクチンは、世界のほとんどの国で出生時に皮下投与されるが、防御は一定せず、青年期までに減弱する。免疫抑制者に対するBCG投与は播種し、重篤な生命を脅かす感染をもたらし得る。この固有の安全性リスクは、Mtb抗原及び/又は宿主細胞内部での生存率が高い細菌を浸透させる因子を発現するように修飾された第二世代BCGワクチンにも依然として残る。加えて、BCGワクチン接種に対する免疫応答は、世界で最も広く用いられているTB検査であるツベルクリン皮膚検査と交差反応するため、結果が信頼できないものとなる。このような理由で、米国及びカナダの公衆衛生局はBCGワクチンの使用を推奨していない。従って、安全でより有効なTBワクチンが必要とされている。この例では、パラインフルエンザウイルス5型(PIV5)をベースとする新規TBワクチンを開発する。
Ag85A又はAg85Bを発現するPIV5(PIV5−85A又は85B)を作成及び分析する。Mtb Ag85A又はAg85Bを発現する組換えPIV5(PIV5−85A及びPIV5−85B)を作成し、インビトロ及びインビボでのウイルス成長特性及び安全性を分析する。
さらなるPIV5抗原コンストラクト
図49A〜図49Hに示す以下のさらなるPIV5抗原コンストラクトが作製されている。これには、RSV抗原F及びGを発現するPIV5コンストラクト(図49A)、ニパウイルス抗原F及びGを発現するPIV5コンストラクト(図49B)、結核菌(Mycobacteria Tuberculosis)抗原85A、85B及びESAT6を発現するPIV5コンストラクト(図49C)、PRRSV抗原を発現するPIV5コンストラクト(図49D)、ブタサーコウイルス(PCV2)抗原を発現するPIV5コンストラクト(図49E)、クルーズトリパノソーマ(T.Cruzi)抗原Tsを発現するPIV5コンストラクト(図49F)、ノロウイルス抗原を発現するPIV5コンストラクト(図49G)、及びHIV抗原Envを発現するPIV5コンストラクト(gp160、gp140又はgp120及びGag)(図49H)が含まれる。
さらなるPIV5ベクター
この例では、全て市販のケンネルコフワクチンを入手し、それらのPIV5株を配列決定した。以下の市販のケンネルコフワクチンから分離したPIV5株を配列決定した:BI、FD、Merck及びMerialワクチン。また、ATCCに寄託された2つのPIV5分離株、すなわちイヌパラインフルエンザウイルス株78−238(ATCC番号VR−1573)(Evermann et al.,1980,J Am Vet Med Assoc;177:1132−1134;及びEvermann et al.,1981,Arch Virol;68:165−172)及びイヌパラインフルエンザウイルス株D008(ATCC番号VR−399)(Binn et al.,1967,Proc Soc Exp Biol Med;126:140−145)も配列決定した。表2においてヌクレオチド配列を比較する。これは、市販の実験室株(WR株)及びケンネルコフワクチン株及び野生型分離株(ATCCから入手した2つの株によって代表される)の間の初めての配列比較である。
Claims (26)
- 異種ポリペプチドを発現する異種ヌクレオチド配列を含むパラインフルエンザウイルス5型(PIV5)ゲノムを含むウイルス発現ベクターであって、前記異種ヌクレオチド配列が前記PIV5ゲノムの融合(F)遺伝子とスモール疎水性タンパク質(SH)遺伝子との間に挿入される、前記ウイルス発現ベクター。
- 前記PIV5ゲノムが1つ以上の突然変異をさらに含む、請求項1記載のウイルス発現ベクター。
- 前記突然変異が、V/P遺伝子の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の突然変異、V及びPタンパク質の共通N末端の残基26、32、33、50、102及び/又は157の突然変異、Vタンパク質のC末端が欠損した突然変異、Fタンパク質の突然変異、リンタンパク質(P)の突然変異、ラージRNAポリメラーゼ(L)タンパク質の突然変異、イヌパラインフルエンザウイルス由来の残基を組み込む突然変異、アポトーシスを誘導する突然変異、又はそれらの組み合わせを含む、請求項2記載のウイルス発現ベクター。
- 前記突然変異が、PIV5VΔCを含む、請求項2記載のウイルス発現ベクター。
- 前記異種ポリペプチドがインフルエンザポリペプチドを含む、請求項1〜4のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター。
- 前記異種インフルエンザポリペプチドが、インフルエンザヘマグルチニン(HA)、インフルエンザノイラミニダーゼ(NA)、インフルエンザヌクレオカプシドタンパク質(NP)、M1、M2、PA、PB1、PB2、PB1-F2、NS1又はNS2ポリペプチドを含む、請求項5記載のウイルス発現ベクター。
- 前記インフルエンザが、A型インフルエンザ、B型インフルエンザ、又はC型インフルエンザウイルスを含む、請求項5記載のウイルス発現ベクター。
- 前記インフルエンザウイルスが、インフルエンザウイルスH5N1、H3N2、又はH1N1株を含む、請求項5記載のウイルス発現ベクター。
- 前記異種ポリペプチドが、A型インフルエンザウイルスH1〜H18亜型株由来のヘマグルチニン(HA)を含む、請求項5記載のウイルス発現ベクター。
- 前記異種ポリペプチドが、A型インフルエンザウイルスH5N1、H3N2、又はH1N1株由来のヘマグルチニン(HA)を含む、請求項5記載のウイルス発現ベクター。
- 前記異種ポリペプチドが、インフルエンザA型N1〜N10亜型由来のインフルエンザノイラミニダーゼ(NA)を含む、請求項5記載のウイルス発現ベクター。
- 前記NP、M1、M2、PA、PB1、PB2、PB1-F2、NS1又はNS2がA型インフルエンザウイルスH1〜H17株由来であり、且つ前記NAがA型インフルエンザウイルスN1〜N10株由来である、請求項6記載のウイルス発現ベクター。
- 前記異種ポリペプチドが、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、パラインフルエンザウイルス1型、パラインフルエンザウイルス2型、パラインフルエンザウイルス3型、パラインフルエンザウイルス4型、ヒト呼吸器合胞体ウイルス、ウシ呼吸器合胞体ウイルス、ヒトメタニューモウイルス、トリインフルエンザ、イヌインフルエンザ、トリメタニューモウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、狂犬病ウイルス、エボラウイルス、ブタサーコウイルス、ブタ繁殖・呼吸障害症候群ウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニューカッスル病ウイルス、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、イヌジステンパーウイルス、ネコ白血病ウイルス、ヒトカリシウイルス、動物カリシウイルス(veterinary calcivirus)、ヒトノロウイルス、動物ノロウイルス、牛疫ウイルス、結核菌(Mycobacterium tuberculosis)、及び/又はヒト若しくは動物における新興インフルエンザウイルスに由来する、請求項1〜4のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター。
- 前記異種ポリペプチドが細菌又は寄生体に由来する、請求項1〜4のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター。
- 前記異種ポリペプチドが狂犬病ウイルス糖タンパク質(G)を含む、請求項1〜4のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター。
- 異種ポリペプチドを発現する2つ以上の異種ヌクレオチド配列を含む、請求項1〜4のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター。
- 請求項1〜16のいずれか1項記載のウイルス発現ベクターを含むウイルス粒子。
- 請求項1〜17のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター又はウイルス粒子の組成物。
- アジュバントをさらに含む、請求項18記載の組成物。
- 細胞において異種ポリペプチドを発現する方法であって、前記細胞を、請求項1〜19のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物とin vitroで接触させる工程を含む、前記方法。
- 非ヒト対象において異種ポリペプチドに対する免疫応答を誘導する方法であって、請求項1〜19のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物を前記対象に投与する工程を含む、前記方法。
- 前記免疫応答が、体液性免疫応答及び/又は細胞性免疫応答を含む、請求項21記載の方法。
- 対象におけるウイルス感染症に対するワクチンの製造のための、請求項1〜19のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物の使用。
- 対象において異種ポリペプチドを発現するための、請求項1〜19のいずれか1項記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物。
- 前記ウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物が、鼻腔内に、筋肉内に、局所的に、経口的に、又は卵内に投与される、請求項21〜23のいずれか1項記載の方法又は使用。
- 前記ウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物が、鼻腔内に、筋肉内に、局所的に、経口的に、又は卵内に投与される、請求項24記載のウイルス発現ベクター、ウイルス粒子、又は組成物。
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261590056P | 2012-01-24 | 2012-01-24 | |
US201261590070P | 2012-01-24 | 2012-01-24 | |
US61/590,070 | 2012-01-24 | ||
US61/590,056 | 2012-01-24 | ||
US201261683810P | 2012-08-16 | 2012-08-16 | |
US61/683,810 | 2012-08-16 | ||
JP2017198111A JP2018050624A (ja) | 2012-01-24 | 2017-10-12 | パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017198111A Division JP2018050624A (ja) | 2012-01-24 | 2017-10-12 | パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020014470A true JP2020014470A (ja) | 2020-01-30 |
JP6900437B2 JP6900437B2 (ja) | 2021-07-07 |
Family
ID=48873896
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014554824A Active JP6228136B2 (ja) | 2012-01-24 | 2013-01-24 | パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン |
JP2017198111A Pending JP2018050624A (ja) | 2012-01-24 | 2017-10-12 | パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン |
JP2019168928A Active JP6900437B2 (ja) | 2012-01-24 | 2019-09-18 | パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014554824A Active JP6228136B2 (ja) | 2012-01-24 | 2013-01-24 | パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン |
JP2017198111A Pending JP2018050624A (ja) | 2012-01-24 | 2017-10-12 | パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (6) | US9732358B2 (ja) |
EP (2) | EP2806891B1 (ja) |
JP (3) | JP6228136B2 (ja) |
CN (2) | CN104093422B (ja) |
AU (1) | AU2013212097B2 (ja) |
BR (1) | BR112014018179B1 (ja) |
CA (2) | CA2860388C (ja) |
ES (1) | ES2728248T3 (ja) |
MX (1) | MX359638B (ja) |
MY (1) | MY173638A (ja) |
PH (1) | PH12014501255A1 (ja) |
PT (1) | PT2806891T (ja) |
WO (2) | WO2013112720A1 (ja) |
Families Citing this family (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9649371B2 (en) | 2011-02-25 | 2017-05-16 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Recombinant mumps virus vaccine |
ES2728248T3 (es) | 2012-01-24 | 2019-10-23 | Univ Georgia | Vacunas basadas en el virus paragripal 5 |
KR101577397B1 (ko) * | 2014-01-15 | 2015-12-28 | 경북대학교 산학협력단 | 신규한 돼지 파라인플루엔자 바이러스 5(pPIV5), 이를 포함하는 백신 조성물 및 이를 이용한 돼지 파라인플루엔자 바이러스 검정 키트 |
CN107847610B (zh) * | 2015-04-28 | 2022-02-01 | 塞维卡有限责任公司 | 基于piv5的扩增病毒样颗粒 |
WO2016199936A1 (ja) * | 2015-06-12 | 2016-12-15 | 国立大学法人三重大学 | ヒトパラインフルエンザ2型ウイルスベクター及びワクチン |
CN110891584B (zh) * | 2017-05-25 | 2024-02-13 | 弗罗里达中央大学研究基金会 | 用于使肿瘤细胞对自然杀伤细胞的杀灭敏感的新型溶瘤病毒 |
RU2681473C1 (ru) * | 2018-01-16 | 2019-03-06 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для обнаружения генома вируса парагриппа 3 типа у крупного рогатого скота с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени |
GB201816873D0 (en) * | 2018-10-17 | 2018-11-28 | Imperial Innovations Ltd | Fusion protein |
WO2020092207A1 (en) * | 2018-10-28 | 2020-05-07 | University Of Georgia Research Foundation | Broadly reactive immunogens of influenza virus, compositions, and methods of use thereof |
CL2018003869A1 (es) * | 2018-12-28 | 2021-01-15 | Univ Pontificia Catolica Chile | Anticuerpos monoclonales específicos para la proteína quimérica l del virus de la parainfluenza humana (piv), secuencias nucleotídicas; método y kit de diagnóstico de infección producida por piv |
JP2023542922A (ja) * | 2020-09-21 | 2023-10-12 | ユニバーシティ オブ ジョージア リサーチ ファンデーション,インコーポレーテッド | Piv5ベースのcovid-19ワクチン |
WO2022099185A1 (en) * | 2020-11-09 | 2022-05-12 | Thrive Bioscience, Inc. | Plaque counting assay method |
CN113005149A (zh) * | 2021-03-26 | 2021-06-22 | 中国农业大学 | 一种表达冠状病毒受体结合域串联二聚体的重组副流感病毒5型载体 |
WO2023028012A1 (en) * | 2021-08-26 | 2023-03-02 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | J paramyxovirus vaccines |
GB202209861D0 (en) * | 2022-07-05 | 2022-08-17 | Univ Court Univ St Andrews | Viral vectors |
US20240148857A1 (en) * | 2022-11-04 | 2024-05-09 | Blue Lake Biotechnology, Inc. | Recombinant rsv vaccine: methods of making and using the same |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999046278A1 (en) * | 1998-03-13 | 1999-09-16 | Wake Forest University | Viral vector directed to predetermined target cells |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6638762B1 (en) | 1994-11-28 | 2003-10-28 | Genetic Therapy, Inc. | Tissue-vectors specific replication and gene expression |
CA2160038A1 (en) * | 1995-07-14 | 1997-01-15 | Biosignal Inc. | Methods of screening compounds for their pharmacological relevance based on downregulation of recombinant receptors |
JP2000509280A (ja) * | 1996-05-01 | 2000-07-25 | アメリカ合衆国 | 組換えdna由来ヌクレオキャプシドタンパク質を用いるウイルストランスフェクタントの作製 |
US6410023B1 (en) * | 1997-05-23 | 2002-06-25 | United States Of America | Recombinant parainfluenza virus vaccines attenuated by deletion or ablation of a non-essential gene |
MXPA01008108A (es) | 1999-12-10 | 2004-11-12 | Health | Uso de virus de parainfluenza recombinante (pivs) como vectores para la proteccioncontra la infeccion y enfermedad provocadas por piv y otros patogenos humanos. |
US6764685B1 (en) * | 2000-03-21 | 2004-07-20 | Medimmune Vaccines, Inc. | Recombinant parainfluenza virus expression systems and vaccines |
JP2002153278A (ja) | 2000-11-22 | 2002-05-28 | Hisamitsu Pharmaceut Co Inc | ウイルスベクターの製造に用いられる細胞、その製法およびその細胞を用いたウイルスベクターの製造方法 |
EP1438399A4 (en) * | 2001-09-28 | 2005-09-14 | Univ North Carolina | PARAMYXOVIRUSES AS GENE TRANSFER VECTORS TO PULMONARY CELLS |
US7585667B2 (en) * | 2003-06-13 | 2009-09-08 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Negative strand RNA virus replicon |
EP2176427A4 (en) * | 2007-07-19 | 2011-10-05 | Novavax Inc | VIRAL PESUDO-PARTICLES OF THE CHIMÈRE AVIAN INFLUENZA |
US20090208495A1 (en) * | 2008-02-14 | 2009-08-20 | Bayer Schering Pharma Ag | Anti-tumor effective paramyxovirus |
FR2938840B1 (fr) | 2008-11-21 | 2010-12-17 | Centre Nat Rech Scient | Proteines mutantes de la proteine f de piv-5 et de piv-2 |
US10227569B2 (en) | 2011-04-12 | 2019-03-12 | Emory University | Respiratory syncytial virus expression vectors |
ES2728248T3 (es) | 2012-01-24 | 2019-10-23 | Univ Georgia | Vacunas basadas en el virus paragripal 5 |
-
2013
- 2013-01-24 ES ES13741216T patent/ES2728248T3/es active Active
- 2013-01-24 CN CN201380006495.2A patent/CN104093422B/zh active Active
- 2013-01-24 CN CN201810061733.4A patent/CN108130345A/zh active Pending
- 2013-01-24 US US14/374,070 patent/US9732358B2/en active Active
- 2013-01-24 BR BR112014018179-9A patent/BR112014018179B1/pt active IP Right Grant
- 2013-01-24 WO PCT/US2013/022962 patent/WO2013112720A1/en active Application Filing
- 2013-01-24 MX MX2014008557A patent/MX359638B/es active IP Right Grant
- 2013-01-24 WO PCT/US2013/022898 patent/WO2013112690A1/en active Application Filing
- 2013-01-24 CA CA2860388A patent/CA2860388C/en active Active
- 2013-01-24 CA CA3128591A patent/CA3128591A1/en active Pending
- 2013-01-24 US US14/374,061 patent/US9505807B2/en active Active
- 2013-01-24 MY MYPI2014702016A patent/MY173638A/en unknown
- 2013-01-24 JP JP2014554824A patent/JP6228136B2/ja active Active
- 2013-01-24 PT PT13741216T patent/PT2806891T/pt unknown
- 2013-01-24 EP EP13741216.9A patent/EP2806891B1/en active Active
- 2013-01-24 EP EP19165071.2A patent/EP3536341A1/en active Pending
- 2013-01-24 AU AU2013212097A patent/AU2013212097B2/en active Active
-
2014
- 2014-06-04 PH PH12014501255A patent/PH12014501255A1/en unknown
-
2016
- 2016-10-18 US US15/296,346 patent/US10752916B2/en active Active
-
2017
- 2017-06-30 US US15/638,946 patent/US10329585B2/en active Active
- 2017-10-12 JP JP2017198111A patent/JP2018050624A/ja active Pending
-
2019
- 2019-05-24 US US16/421,837 patent/US20190284578A1/en not_active Abandoned
- 2019-09-18 JP JP2019168928A patent/JP6900437B2/ja active Active
-
2020
- 2020-08-10 US US16/989,038 patent/US11542527B2/en active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999046278A1 (en) * | 1998-03-13 | 1999-09-16 | Wake Forest University | Viral vector directed to predetermined target cells |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
VIROLOGY, vol. 362, JPN6016040820, 2007, pages 139 - 150, ISSN: 0004361474 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6900437B2 (ja) | パラインフルエンザウイルス5型ベースのワクチン | |
JP2022091775A (ja) | インフルエンザウイルスワクチン及びその使用 | |
US8475807B2 (en) | Avian influenza virus live attenuated vaccine and uses thereof | |
US8597661B2 (en) | Neuraminidase-deficient live influenza vaccines | |
US11180737B2 (en) | Generation of infectious influenza viruses from virus-like particles | |
Altstein et al. | Immunization with influenza A NP-expressing vaccinia virus recombinant protects mice against experimental infection with human and avian influenza viruses | |
JP2023524990A (ja) | SARS-CoV-2スパイクタンパク質を発現する組換えニューカッスル病ウイルス及びその使用 | |
Le et al. | Induction of influenza-specific mucosal immunity by an attenuated recombinant Sendai virus | |
KR101908905B1 (ko) | 인플루엔자 바이러스의 h9 및 h5의 다중 아형에 대한 교차 면역반응을 형성하는 신규한 재조합 인플루엔자 바이러스 및 이를 포함하는 백신 | |
DK2739724T3 (en) | Recombinant swine flu virus and its applications | |
Giles | Development of a broadly reactive vaccine for highly pathogenic H5N1 influenza | |
US20240207391A1 (en) | Engineered influenza viruses expressing sars-cov-2 antigens, vaccines and methods of making and using the same | |
WO2023196945A2 (en) | Recombinant newcastle disease virus expressing lassa virus gp or np, and uses thereof | |
Baker | The Packaging Signals of Influenza A and B Viruses Contribute to Their Speciation and Can Be Manipulated for Novel Vaccine Development | |
Mooney et al. | PROTECTION AGAINST H5N1 VIRUS CHALLENGE BY IMMUNIZATION WITH RECOMBINANT PIV5 EXPRESSING HA OF H5N1 (rPIV5-H5) | |
WO2014101195A1 (zh) | 表达小反刍兽疫病毒f蛋白的重组新城疫病毒及其应用 | |
WO2014101210A1 (zh) | 表达小反刍兽疫病毒h蛋白的重组新城疫病毒及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190919 |
|
RD01 | Notification of change of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7426 Effective date: 20191213 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20191213 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20201006 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20201224 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210322 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210518 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20210616 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6900437 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |