JP2019532063A - 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 - Google Patents
低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019532063A JP2019532063A JP2019516945A JP2019516945A JP2019532063A JP 2019532063 A JP2019532063 A JP 2019532063A JP 2019516945 A JP2019516945 A JP 2019516945A JP 2019516945 A JP2019516945 A JP 2019516945A JP 2019532063 A JP2019532063 A JP 2019532063A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- sequence
- antigen binding
- binding protein
- item
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 title claims abstract description 208
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 208
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 99
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 128
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims description 69
- 102100034428 Dual specificity protein phosphatase 1 Human genes 0.000 claims description 66
- 102100027088 Dual specificity protein phosphatase 5 Human genes 0.000 claims description 52
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 50
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 35
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 33
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 32
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 18
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 18
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 6
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 63
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 63
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 55
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 54
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 51
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 46
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 43
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 43
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 42
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 42
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 42
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 40
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 40
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 39
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 38
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 38
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 37
- 101710180553 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 description 32
- 102100038955 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Human genes 0.000 description 32
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 31
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 31
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 30
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 30
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 30
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 29
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 28
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 27
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 23
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 21
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 21
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 108010036598 gastric inhibitory polypeptide receptor Proteins 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 241000894007 species Species 0.000 description 16
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 16
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 16
- 102100039997 Gastric inhibitory polypeptide receptor Human genes 0.000 description 15
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 15
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 15
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 15
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 14
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 13
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 102220478507 Vacuolar protein sorting-associated protein 35_T82R_mutation Human genes 0.000 description 12
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 12
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 12
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 12
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 12
- 102200024710 rs104894942 Human genes 0.000 description 12
- 102220135950 rs143613534 Human genes 0.000 description 12
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 12
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 12
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 11
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 11
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 11
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 10
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 10
- 102220015635 rs191057824 Human genes 0.000 description 10
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 9
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 9
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 9
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 8
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 8
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 8
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 8
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 7
- -1 IgG1 Chemical compound 0.000 description 7
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 7
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 7
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 7
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 7
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 7
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 7
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 102220313015 rs1306060482 Human genes 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 101001098868 Homo sapiens Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 description 6
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 6
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 6
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 6
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 6
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 6
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- 102000053786 human PCSK9 Human genes 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 5
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 5
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 5
- 230000002391 anti-complement effect Effects 0.000 description 5
- 108010008730 anticomplement Proteins 0.000 description 5
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 5
- 239000012537 formulation buffer Substances 0.000 description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 5
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 4
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 4
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 4
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 4
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 238000000126 in silico method Methods 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 4
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 4
- 102220014333 rs112445441 Human genes 0.000 description 4
- 102220097520 rs876658986 Human genes 0.000 description 4
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 4
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 4
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010058398 Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor Proteins 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 229960002027 evolocumab Drugs 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 3
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000009878 intermolecular interaction Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- 206010022095 Injection Site reaction Diseases 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- SNEIUMQYRCDYCH-LURJTMIESA-N N(alpha)-acetyl-L-arginine Chemical compound CC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N SNEIUMQYRCDYCH-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 2
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 2
- 238000011091 antibody purification Methods 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 2
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000008364 bulk solution Substances 0.000 description 2
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 2
- 229950007296 cantuzumab mertansine Drugs 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 229950007313 enokizumab Drugs 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 108020001756 ligand binding domains Proteins 0.000 description 2
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 2
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 2
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 2
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 2
- 239000002287 radioligand Substances 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 238000000518 rheometry Methods 0.000 description 2
- 102200153403 rs104894820 Human genes 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 229960003989 tocilizumab Drugs 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 2
- 238000013060 ultrafiltration and diafiltration Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZMEWRPBAQVSBBB-GOTSBHOMSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-6-[[2-[2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetyl]amino]hexanoic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(=O)NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 ZMEWRPBAQVSBBB-GOTSBHOMSA-N 0.000 description 1
- AUYBSFAHQLKXSW-UHFFFAOYSA-N 1,2-dichloroethane;3-(ethyliminomethylideneamino)-n,n-dimethylpropan-1-amine;hydrochloride Chemical compound Cl.ClCCCl.CCN=C=NCCCN(C)C AUYBSFAHQLKXSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 2-[[(2s)-2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-[4-(methylcarbamoylamino)phenyl]propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound CNC(=O)NC1=CC=C(C[C@@H](CN(CC(C)N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)C=C1 RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical group NC1=NC(N)=NC(Cl)=N1 FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical group N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100030356 Arginase-2, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 208000002109 Argyria Diseases 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- 235000011330 Armoracia rusticana Nutrition 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229940126609 CR6261 Drugs 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 102000005636 Cyclic AMP Response Element-Binding Protein Human genes 0.000 description 1
- 108010045171 Cyclic AMP Response Element-Binding Protein Proteins 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010075944 Erythropoietin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100036509 Erythropoietin receptor Human genes 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 1
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010054017 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100039622 Granulocyte colony-stimulating factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010092372 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016355 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100020948 Growth hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000792835 Homo sapiens Arginase-2, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101100228914 Homo sapiens GIPR gene Proteins 0.000 description 1
- 101000886868 Homo sapiens Gastric inhibitory polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 1
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 102000000646 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000010781 Interleukin-6 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108020004684 Internal Ribosome Entry Sites Proteins 0.000 description 1
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 1
- 102000000853 LDL receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102000014962 Monocyte Chemoattractant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010064136 Monocyte Chemoattractant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108091008606 PDGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000002508 Peptide Elongation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010068204 Peptide Elongation Factors Proteins 0.000 description 1
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 102000011653 Platelet-Derived Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012564 Q sepharose fast flow resin Substances 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 206010039897 Sedation Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 108700025832 Serum Response Element Proteins 0.000 description 1
- 108010068542 Somatotropin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 1
- 108090000253 Thyrotropin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100029337 Thyrotropin receptor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N UNPD107823 Natural products O1C2COP(O)(=O)OC2C(O)C1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 229950003145 apolizumab Drugs 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004669 basiliximab Drugs 0.000 description 1
- 238000010923 batch production Methods 0.000 description 1
- 229960003270 belimumab Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010079452 beta Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229960003008 blinatumomab Drugs 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 229960000455 brentuximab vedotin Drugs 0.000 description 1
- 229960002874 briakinumab Drugs 0.000 description 1
- 229960003735 brodalumab Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229960001838 canakinumab Drugs 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 229950000771 carlumab Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 229950006754 cedelizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 229950010905 citatuzumab bogatox Drugs 0.000 description 1
- 229950002334 clenoliximab Drugs 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 239000011243 crosslinked material Substances 0.000 description 1
- 229940095074 cyclic amp Drugs 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 229950007409 dacetuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960002806 daclizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000030609 dephosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- PGUYAANYCROBRT-UHFFFAOYSA-N dihydroxy-selanyl-selanylidene-lambda5-phosphane Chemical compound OP(O)([SeH])=[Se] PGUYAANYCROBRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000011038 discontinuous diafiltration by volume reduction Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N dmso dimethylsulfoxide Chemical compound CS(C)=O.CS(C)=O CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000011143 downstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 229960002224 eculizumab Drugs 0.000 description 1
- 229960001776 edrecolomab Drugs 0.000 description 1
- 229960000284 efalizumab Drugs 0.000 description 1
- 229950002209 efungumab Drugs 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 229950010640 ensituximab Drugs 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950009760 epratuzumab Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 229960001743 golimumab Drugs 0.000 description 1
- 230000010005 growth-factor like effect Effects 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000007489 histopathology method Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 102000050325 human granulocyte inhibitory Human genes 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229960001001 ibritumomab tiuxetan Drugs 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 1
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229950000518 labetuzumab Drugs 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 229950002884 lexatumumab Drugs 0.000 description 1
- 229950002950 lintuzumab Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010801 machine learning Methods 0.000 description 1
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950001869 mapatumumab Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 229950008001 matuzumab Drugs 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960005108 mepolizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229950005555 metelimumab Drugs 0.000 description 1
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 description 1
- 229950002142 minretumomab Drugs 0.000 description 1
- 229950007699 mogamulizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000000329 molecular dynamics simulation Methods 0.000 description 1
- 229950008897 morolimumab Drugs 0.000 description 1
- 229960001521 motavizumab Drugs 0.000 description 1
- 229960003816 muromonab-cd3 Drugs 0.000 description 1
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229950007708 namilumab Drugs 0.000 description 1
- 239000010955 niobium Substances 0.000 description 1
- GUCVJGMIXFAOAE-UHFFFAOYSA-N niobium atom Chemical compound [Nb] GUCVJGMIXFAOAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950009090 ocaratuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229950005751 ocrelizumab Drugs 0.000 description 1
- 229950008516 olaratumab Drugs 0.000 description 1
- 229960000470 omalizumab Drugs 0.000 description 1
- 229950000846 onartuzumab Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229950009007 orticumab Drugs 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 229950011485 pascolizumab Drugs 0.000 description 1
- 229960005570 pemtumomab Drugs 0.000 description 1
- 229950011098 pendetide Drugs 0.000 description 1
- 238000012510 peptide mapping method Methods 0.000 description 1
- 238000005325 percolation Methods 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000864 peroxy group Chemical group O(O*)* 0.000 description 1
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229950003203 pexelizumab Drugs 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L phosphoramidate Chemical compound NP([O-])([O-])=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000906 photoactive agent Substances 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 230000000291 postprandial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 229960002633 ramucirumab Drugs 0.000 description 1
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000027425 release of sequestered calcium ion into cytosol Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- 229950010316 rontalizumab Drugs 0.000 description 1
- 102220215705 rs759957857 Human genes 0.000 description 1
- 229950005374 ruplizumab Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000036280 sedation Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000007390 skin biopsy Methods 0.000 description 1
- 239000001601 sodium adipate Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 238000012421 spiking Methods 0.000 description 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 108010018381 streptavidin-binding peptide Proteins 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229950010265 tabalumab Drugs 0.000 description 1
- 229950001072 tadocizumab Drugs 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 229950007217 tremelimumab Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 1
- 229960004914 vedolizumab Drugs 0.000 description 1
- 229950000815 veltuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229950004393 visilizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 229950008250 zalutumumab Drugs 0.000 description 1
- 229950009002 zanolimumab Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2869—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against hormone receptors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N11/00—Investigating flow properties of materials, e.g. viscosity, plasticity; Analysing materials by determining flow properties
- G01N11/10—Investigating flow properties of materials, e.g. viscosity, plasticity; Analysing materials by determining flow properties by moving a body within the material
- G01N11/14—Investigating flow properties of materials, e.g. viscosity, plasticity; Analysing materials by determining flow properties by moving a body within the material by using rotary bodies, e.g. vane
Abstract
Description
本願は2017年8月16日に出願された米国仮特許出願第62/546,469号、2016年12月06日に出願された米国仮特許出願第62/430,773号、および2016年9月29日に出願された米国仮特許出願第62/401,770号の優先権を主張するものであり、これらは各々、全ての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
配列番号1〜配列番号383を含む「A−2063−US−PSP3_SeqList_ST25.txt」という表題の配列表は、その全体が参照により本明細書に組み込まれ、それには本明細書に開示の核酸配列および/またはアミノ酸配列が含まれる。配列表は本明細書ではEFSを介してASCIIテキスト形式で提出されており、したがって、紙およびコンピュータに読み込み可能な形式の両方を構成する。配列表は、PatentInを用いて2017年8月16日に最初に作成され、サイズは4.32MBである。
・タンパク質のpIおよび溶液のpHによって規定される分子間相互作用。Cheng et al.(2013),“Linking the solution viscosity of an IgG2 monoclonal antibody to its structure as a function of pH and temperature”,J.Pharm Sci.102:4291−4304。
・電荷相互作用。Yadav et al.(2012),“Viscosity behavior of high−concentration monoclonal antibody solutions:correlation with interaction parameter and electroviscous effects”,J.Pharm Sci.101:998−1011;Yadav et al.(2012),”The influence of charge distribution on self−association and viscosity behavior of monoclonal antibody solutions”.Mol Pharm 9(4):791−802;Singh et al.(2014),“Dipole−Dipole Interaction in Antibody Solutions:Correlation with Viscosity Behavior at High Concentration”,Pharm Res.31(9):2549−2558;Chaudhri et al.(2013),“The role of amino acid sequence in the self−association of therapeutic monoclonal antibodies:insights from coarse−grained modeling”,J.Phys.Chem.B 117:1269−1279。
・疎水性相互作用。Guo et al.(2012),“Structure−activity relationship for hydrophobic salts as viscosity−lowering excipients for concentrated solutions of monoclonal antibodies”,Pharm Res 29:3102−3109。
過去には、Ahoナンバリングアプローチが、安定性および他の生物物理学的特性を改善するために利用された。Ewert et al.(2003),“Structure−based improvement of the biophysical properties of immunoglobulin VH domains with a generalizable approach”,Biochemistry 42:1517−1528;Ewert et al.(2003),“Biophysical properties of human antibody variable domains”,J.Mol.Biol.325:531−553;Ewert et al.(2004),“Stability improvement of antibodies for extracellular and intracellular applications:CDR grafting to stable frameworks and structure−based framework engineering”,Methods 34:184−199;およびRothlisberger et al.(2005),“Domain interactions in the Fab fragment:a comparative evaluation of the single−chain Fv and Fab format engineered with variable domains of different stability”,J Mol.Biol.347:773−789。Ahoナンバリングシステムはまた、過去において、凝集の傾向を低減するために利用された。Borras et al.(2013),米国特許第8,545,849号明細書。
a.82X1、94X2、および95X3から選択される1つ以上の置換を含むVH1|1−18生殖系列サブファミリー配列(ここで、X1はR、KおよびHから選択され、X2はS、T、NおよびQから選択され、X3はR、KおよびHから選択される);
b.1X4、17X5および85X6から選択される1つ以上の置換を含むVH3|3−33生殖系列サブファミリー配列(ここで、X4はDおよびEから選択され、X5はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X6はG.A、V、I、LおよびMから選択される);
c.4X10、13X11、76X12、78F、95X13、97X14および98Pから選択される1つ以上の置換を含むVK3|L16生殖系列サブファミリー(ここで、X10はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X11はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X12はDおよびEから選択され、X13はR、KおよびHから選択され、X14はDおよびEから選択され、変異抗原結合タンパク質は置換78Fのみを含むことはない)。
d.76X12および95X13から選択される1つ以上の置換を含むVK3|IL6生殖系列サブファミリー;
e.253X10、440X11および439X12から選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列(ここで、X10はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X11はR、KおよびHから選択され、X12はDおよびEから選択され、X16がKで、かつX17がEであるとき、抗原結合タンパク質は、253X15、またはサブパラグラフa、b、c、dおよびfから選択される改変の少なくとも1つを含み、また、抗原結合タンパク質はCD20に特異的に結合する);ならびに
f.C末端にX18X19を含むFcドメイン配列(ここで、X18はDおよびE、またはH、KおよびRから選択される1〜4のアミノ酸であり、X19はP、M、G、A、V、I、L、S、T、N、Q、F、YおよびWから選択され、かつX18がDまたはEを含むとき存在せず、X18がそのC末端にKまたはRを含むとき存在し、X18がそのC末端にHを含むとき存在するかまたは存在せず、C末端にPGKP(配列番号381)、PGKKP(配列番号382)、PGKKKP(配列番号383)またはPGEが現れたとき、抗原結合タンパク質は、253X15、またはサブパラグラフa〜eから選択される置換の少なくとも1つを含み、また、抗原結合タンパク質はCD20またはCD38に特異的に結合する)。好ましいFc C末端の改変は、C末端にKP、KKP、KKKP(配列番号380)、EまたはEEを含む。
ここで、可変領域アミノ酸はAhoナンバリングシステムにより番号付けされており、Fcを含む保存領域のアミノ酸はEUナンバリングにより番号付けされている。
a.440X16配列改変を欠く親抗体に対して配列改変440X16を含み、
b.皮下注射により抗原結合タンパク質および親抗体が同じ濃度で投与された場合に、親抗体よりも速く最大血清濃度に達し、かつ
c.皮下注射により抗原結合タンパク質および親抗体が同じ濃度で投与された場合に、親抗体よりも高い最大血清濃度に達する
抗原結合タンパク質を含む。
このような抗原結合タンパク質の好ましい親抗体は、PCSK9結合ポリペプチドであり、抗体AKが最も好ましい。このような抗原結合タンパク質における好ましい置換基X16はKである。さらに、このような抗原結合タンパク質で高コレステロール血症を治療する方法も、本発明の範囲内である。
以下の記載においては、多くの用語が広く用いられている。本発明の理解を容易にするために、以下の定義を提供する。
a.配列番号136のアミノ酸配列を有する重鎖ポリペプチド、および配列番号134のアミノ酸配列を有する軽鎖ポリペプチドを含むmAb(抗体AK、エボロクマブ)、またはその抗原結合フラグメント;
b.PCSK9との結合に関してエボロクマブと競合するmAb;
c.
i.次の相補性決定領域(CDR)を含む重鎖ポリペプチド:配列番号376または378のCDR1である重鎖CDR1;配列番号376または378のCDR2である重鎖CDR2;配列番号376または378のCDR3である重鎖CDR3、および
ii.次の相補性決定領域(CDR)を含む軽鎖ポリペプチド:配列番号377または379のCDR1である軽鎖CDR1;配列番号377または379のCDR2である軽鎖CDR2;配列番号377または379のCDR3である軽鎖CDR3
を含むmAb;
d.PCSK9の次の残基の少なくとも1つに結合するmAbであって、PCSK9は配列番号369のアミノ酸配列を含むmAb:S153、D188、I189、Q190、S191、D192、R194、E197、G198、R199、V200、D224、R237、およびD238、K243、S373、D374、S376、T377、F379、I154、T1897、H193、E195、I196、M201、V202、C223、T228、S235、G236、A239、G244、M247、I369、S372、C375、C378、R237、およびD238;
e.以下を含む抗体によって結合されるエピトープと重なるPCSK9のエピトープでPCSK9に結合するmAbであって:
i.配列番号136のアミノ酸配列の重鎖可変領域;および
ii.配列番号134のアミノ酸配列の軽鎖可変領域、
iii.mAbのエピトープは、低密度リポタンパク質受容体(LDLR)タンパク質の上皮成長因子様反復A(EGF−A)ドメインが結合する部位とさらに重なる(Horton,Cohen,&Hobbs(2007),Trends Biochem Sci,32(2),71−77.doi:10.1016/j.tibs.2006.12.008;Seidah&Prat(2007)、J Mol Med(Berl),85(7),685〜696)mAb;
f.以下の相補性決定領域(CDR)を含む重鎖ポリペプチドを含むmAb:
i.それぞれ配列番号373、374、および375のアミノ酸配列を有する重鎖CDR1、CDR2、およびCDR3;ならびに
ii.それぞれ配列番号369、370、および371のアミノ酸配列を有する軽鎖CDR1、CDR2、およびCDR3;または
g.配列番号378の重鎖変異領域配列および配列番号379の軽鎖変異領域配列を含むmAb。
グローバル配列特徴と粘度との相関
本明細書の実施例1で報告された研究の主な目的は、高濃度モノクローナル抗体製剤の粘度を低下させる目的で、粘度と、IgGモノクローナル抗体のアミノ酸配列、またはグローバル配列特徴との間の関連を明らかにすることであった。そのために、43の異なるモノクローナル抗体の粘度値を150mg/mlで測定し、5〜33cPの広範囲の値を得た(図1Aおよび1B)。軽鎖および重鎖の型、それらのサブタイプ(生殖系列)、およびpIなどのモノクローナル抗体の主要なグローバル配列特徴を計算し、粘度と相関させたが、直ちに有意な相関は明らかにしなかった(図1Aおよび1B)。IgGアイソタイプ内の多型(アロタイプとして知られる)は、ヒト由来の血清学的試薬を用いて記載され(Ropartz,C.,Schanfield,M.S.,and Steinberg,A.G.(1976),“Review of the notation for the allotypic and related markers of human immunoglobulins,”WHO meeting on human immunoglobulin allotypic markers,held 16−19 July 1974,Rouen,France;report amended June 1976,J Immunogenet.3,357−362)、重鎖および軽鎖の保存領域におけるいくつかの特定の位置における特定のアミノ酸残基と相関した(Jefferis and Lefranc (2009)Human immunoglobulin allotypes:possible implications for immunogenicity, mAbs 1,332−338.)(Vidarsson, G.,Dekkers,G.,and Rispens,T.(2014)IgG subclasses and allotypes:from structure to effector functions,Front Immunol.5,1−17)。アロタイプは軽鎖および重鎖の他の保存領域に、いくつかの異なる残基(以下に記載される)を導入する。本研究で使用した全てのカッパ軽鎖は、同じ(3)アロタイプ(EUナンバリングで残基A153、V191を特徴とする)であった。全てのIgG2重鎖は、同じ(n−)アロタイプ(P189を特徴とする)であった。4つのIgG1重鎖アロタイプが記載された(EUナンバリングで次の関連残基を含む):f(R214);z(K214);a(D356、L358)およびx(G431)(Jefferis&Lefranc,2009)(Vidarsson et al.,2014)。E356、M358およびA431位に代替残基を有するIgG1重鎖は、これらのアミノ酸残基が他のIgGサブクラスに存在するので、アロタイプを構成しない。IgG1アロタイプ(x)は、本研究では存在せず、全てのIgG1重鎖はA431を有した。IgG1重鎖アロタイプ(f)、(z)、(a)および関連残基を図1Aおよび1Bに示す。
以下を含むいくつかのIgGナンバリングシステムが存在する:
・EU−−Edelman et al.(1969),“The covalent structure of an entire gamma immunoglobulin molecule,”Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.63,78−85;
・Kabat−−Kabat et al.(1991),Sequences of proteins of immunological interest,Fifth Edition.NIH Publication No.91−3242;
・Chothia−−Chothia et al.(1992),“Structural repertoire of the human VH segments”,J.Mol.Biol.227:799−817;Tomlinson et al.,(1995),“The structural repertoire of the human V kappa domain.EMBO J.14:4628−4638;
・Aho−−Hoenegger et al.(2001),“Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains:an automatic modeling and analysis tool,”J.Mol.Biol.309,657−670;
など。VH1サブタイプの重鎖のフレーム領域3について、上記の4つのナンバリングシステムを全て、図9の右側に示す。Ahoスキームは、異なる抗体の可変ドメインの400を超える結晶構造に由来するアミノ酸残基の空間位置を利用することによって構築された。3D構造をベースとしたナンバリングシステムであるため、A.Honegger(上記参照)によって定義されたAhoナンバリングシステムを、本研究では使用した。これは、特にCDR中の残基について有意性がある:同じ数の残基は類似の空間領域に位置し、異なるIgG配列にわたって同等である。Ahoナンバリングスキームにおける残基の位置は三次構造に関連するので、それらは生物物理学的および生化学的特性、そしておそらく粘度に、より関連しているはずである。本明細書のいくつかの表に示されるように、Ahoナンバリングは他の主要なナンバリングスキームとアラインし、相関関係がある。4つのナンバリングシステムのいずれも、好ましいアミノ酸置換を特定するために互換的に使用することができる。重鎖可変領域は、異なるナンバリングシステムで以下の残基で終わる:149 Aho、117 EU、113 Kabat、113 Chothia。軽鎖可変領域は、149 Aho、107 EU、107 Kabat、107 Chothiaで終わる。Ahoナンバリングは、KabatおよびChothia(例えば、KabatおよびChothiaでは82b)のように、CDR残基に文字を使用する代わりに、CDR領域により多くの数を割り当てる。その結果、同じ残基に対するAhoの数は、多くの場合、より大きくなる。各可変領域は、3つの相補性決定領域(CDR)および4つのフレームワーク領域(FR)を、以下の配列で含む:FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4。CDRは抗原に結合する目的で大きな配列多様性を提供するが(CDR3領域が最も高頻度で結合する)、FR配列はより保存され、わずかな差異のみを含み、そのうちのいくつかはサブタイプ特異的である。
グローバル配列特徴を評価することに加えて、可変領域の配列をアラインして、粘度差の原因となる残基を明らかにした。視覚的観察に加えて、ソフトウェア機械学習アルゴリズムが開発され、粘度に最も影響を及ぼす残基を特定し、それらの配列から抗体の粘度値を予測するために適用された。予測モデルを、Ahoアライン位置の残基の電荷および疎水性を用いて構築した。
VH T82R。R82はVH1−02で高頻度で生じる。IgG構造モデリングは、重鎖Aho位置82がグロブリンフォールドの上部コアの一部であり、通常、抗原と接触しないが、Ewertet al.(2003),“Biophysical properties of human antibody variable domains”,J.Mol.Biol.325:531−553によればCDR骨格と直接接触し得ることを示した。HC82は、CDR1およびCDR2骨格アミドとの非常に保存された主鎖−側鎖H結合相互作用を有する(Honegger et al.,supra)。R82はまた、CDR2ループの骨格酸素原子を調整し得る。
上記の考察を考慮して、いくつかの変異体を、効力を維持しながら粘度を低下させることを目的として、高粘度VH1−18サブタイプの2つのIgG2抗体AKおよびAOについて生成した(図9B)。図9Bは、モノクローナル抗体変異体記号ならびに重鎖および軽鎖上の関連する変異を含む。
pIに対する粘度の依存性が43mAbの全セットからは明らかではなかったが、VH1サブセットは、mAbのpI値が、pH5.2の製剤中、pI8.5からpI6.5に低下すると、粘度が着実に増加することを明らかに示した(図6)。高粘度VH1|1−18 mAbと低粘度VH1|1−02 mAbとの間のシフトも見られる。予測されたように、AKおよびAO抗体のT82R、R94SおよびS95R変異体は、プロット上のVH1|1−18領域からVH1|1−02領域まで粘度スケールに沿って約2倍下方に移動した(図6)。変異体AO(59 82 94 95)およびAO(59 82 94 95 13)はさらに低い粘度およびわずかに高いpIに移動し、これは、VH1群外から採用されたS59R置換が粘度をさらに低下させるのに有効であったことを示している。残念ながら、R59を含むAK変異体は十分に発現されず、59位の低頻度アルギニン残基の出現が発現に影響を及ぼし得ることを示唆した。
高粘度VH3|3−33および低粘度VH3|3−07抗体は平均すると、粘度に大きな差があるが、類似のpI範囲を占める(図7)。予想外に、平均すると、VH3|3−07はより低い粘度を有し、またより低いpIを有し、これは、文献に報告された一般的な挙動と矛盾する。以下のVH3|3−33分子の粘度値は、変異によって低下させることができる:AQ、AM、AI、AG。
高タンパク質濃度での化学架橋を用いて、粘性抗体溶液中の潜在的なタンパク質−タンパク質相互作用の広範な調査を試みた。化学架橋は、タンパク質の特定の部分が互いに相互作用することを実証するために使用される古典的な生化学的技術である。本明細書では、高濃度粘性抗体溶液中の潜在的なタンパク質‐タンパク質相互作用を明らかにするためのゼロレングス化学架橋試薬の使用について記載する。粘性および非粘性抗体の化学架橋結果を用いて、溶液中の潜在的なタンパク質−タンパク質相互作用のモデルを構築する。
科学文献には、Clq1およびCDC活性との相互作用に関連する抗体の六量体形成に関する研究が含まれる。Diebolderらは、K439EおよびS440Kを含む特定のFc点変異を有する抗CD20抗体がCDC活性を阻害するが、関連するK439E/S440K二重変異体がCDC活性を回復させることを見出した。また、I253A変異はCDC活性を低下させた。Diebolder et al.(2014),“Complement is Activated by IgG Hexamers Assembled at the Cell Surface”,Science 343:1260−3。Diebolderらは、それらが開示する変異体を抗体粘度に対する効果と関連させなかった。同様に、van den Bremerら(2015)は、抗体のC末端の荷電残基が、IgG六量体構造を形成する能力の低下により、Clq1相互作用を低下させ得ることを見出した。著者らは、IgGのC末端に荷電残基が存在することを抗体溶液の粘度に影響することに関連付けなかった。
抗体C末端の特定の修飾は、C1q結合および補体依存性細胞障害(CDC)を妨害する。Van den Bremer et al.(2015),“Human IgG is produced in a pro−form that requires clipping of C−terminal lysines for maximal complement activation”,mAbs 7(4):672−80。著者らは、C末端リシンおよびC末端グルタミン酸がClq1と最も効率的に相互作用することができる抗体の六量体をもたらすFc−Fc相互作用の傾向を低下させる可能性があることを見出した。著者らは、C末端にPGKP(配列番号381)、PGKKP(配列番号382)、PGKKKP(配列番号383)、およびPGEを有するCD20抗体およびCD38抗体の変異体を構築した。彼らは、これらの変異体がCDC活性を有意に低下させたか、または完全に失ったことを見出した。したがって、著者らが以前にCDC活性と相関したとした六量体化を変異が遮断したと結論付けることができる。六量体化と粘度との現在の相関を考慮すると、このような変異はまた、抗原結合タンパク質の粘度を低下させるはずである。したがって、C末端に正電荷アミノ酸または負電荷アミノ酸を配置することは、それが存在するC末端アミノ酸の付加であろうと置換であろうと、抗原結合タンパク質の粘度を低下させると結論付けることは妥当である。
本発明はまた、粘度を低下させ得る変異を有する抗原結合タンパク質の薬物動態学的特性の改善の発見を含む。特に、S440K変異が、Tmax(最大濃度が観察された投与後の時間)およびCmax(投与後に測定された最大観察濃度)の両方を改善することが見出された。任意選択的に他の変異を有する、S440Kを有する抗体AKの変異体は、変異体および親抗体を同じ濃度で皮下注射した後、Tmaxが親抗体AKの半分超減少したことが見出された。このような変異体はまた、変異体および親抗体の皮下注射後、28%または42%高いCmaxを有することが見出された。図22を参照されたい。
本発明はまた、例えば、本明細書中に開示される二重特異性抗体の、軽鎖、軽鎖可変領域、軽鎖定常領域、重鎖、重鎖可変領域、重鎖定常領域、リンカー、ならびにこれらのいくつかおよび全ての成分、および組み合わせを含む、本発明の二重特異性抗体をコードする単離された核酸を含む。本発明の核酸には、本発明の核酸に対して少なくとも80%、より好ましくは少なくとも約90%、より好ましくは少なくとも約95%、最も好ましくは少なくとも約98%の相同性を有する核酸が含まれる。特定の配列を指す場合、用語「類似性パーセント」、「同一性パーセント」および「相同性パーセント」は、University of Wisconsin GCG(登録商標)ソフトウェアプログラムに記載されるように使用される。本発明の核酸はまた、相補的核酸を含む。いくつかの例では、配列は、アラインすると、完全に相補的(ミスマッチなし)である。他の例では、配列中に約20%までのミスマッチが存在し得る。本発明のいくつかの実施形態では、本発明の抗体の重鎖および軽鎖の両方をコードする核酸が提供される。
抗体の精製方法は当該技術分野で知られており、本発明の抗体および二重特異性抗体の生成と共に使用され得る。本発明のいくつかの実施形態では、抗体精製の方法に、濾過、アフィニティカラムクロマトグラフィ、陽イオン交換クロマトグラフィ、陰イオン交換クロマトグラフィ、および濃縮が含まれる。濾過工程は、好ましくは限外濾過、より好ましくは限外濾過および透析濾過を含む。濾過は、好ましくは少なくとも約5〜50回、より好ましくは10〜30回、最も好ましくは14〜27回行われる。アフィニティカラムクロマトグラフィは、例えば、PROSEP(登録商標)アフィニティクロマトグラフィ(Millipore、Billerica、MA)を用いて行うことができる。好ましい実施形態では、アフィニティクロマトグラフィ工程は、PROSEP(登録商標)−vAカラムクロマトグラフィを含む。溶出液は、溶媒洗剤中で洗浄することができる。陽イオン交換クロマトグラフィには、例えば、SP−セファロース陽イオン交換クロマトグラフィが含まれ得る。陰イオン交換クロマトグラフィには、例えば、Q−セファロースファストフロー陰イオン交換が含まれ得るが、これに限定されない。陰イオン交換工程は好ましくは非結合であり、これによりDNAおよびBSAを含む汚染物質を除去することができる。抗体産物は、好ましくは、例えば、Pall DV 20ナノフィルターを用いてナノ濾過される。抗体産物は、例えば、限外濾過および透析濾過によって濃縮することができる。この方法は、凝集体を除去するために、サイズ排除クロマトグラフィの工程をさらに含むことができる。精製のさらなるパラメータは、以下の実施例に記載されている。
Fab変異
材料
異なる標的および異なる配列を有する43個のヒトおよびヒト化組換えモノクローナル抗体分子のセットを、標準的な手順に従って作製し、精製した(図1Aおよび1B)。サイズ排除クロマトグラフィ(SEC)により>98%の同等の純度を有するセットを回収した。試料を、Amicon Ultrafiltration Stirred Cell Model 8003(Millipore、Billerica、MA)を用いて、2〜8℃、30±10psiの最大圧力で、3mLの最大圧力で濃縮した。それらを、20mM酢酸塩、9%スクロース(ポリソルベートなし)を含有するpH5.2の製剤緩衝液中で、おおよその体積減少に従って150mg/mLまで濃縮し、280nmでのタンパク質の吸光度(0.1〜1吸光度単位(AU)以内になるまで希釈した後)およびタンパク質特異的吸光係数を用いて最終濃度を決定した(±10%)。
粘度分析を、CP−40スピンドルおよび試料カップを使用して、Brookfield LV−DVIIIコーンプレート機器(Brookfield Engineering、Middleboro、MA、USA)で行った。測定は全て25℃で行い、試料カップに取り付けた水浴によって制御した。スピンドルのRPMを増加させることによって、規定のトルク範囲(10〜90%)内で手作業により、多数の粘度測定値を収集した。得られた比較チャートの簡略化のため、1試料当たり1つの粘度値を報告するために測定値を平均した。
構造に基づく配列アラインメントを、Zuerich UniversityのDepartment of BiochemistryからダウンロードしたExcel Macroを用いて開発したAb Initioソフトウェアツールによって行った。
Fc変異
変異体の発現および精製
材料および方法
・抗C−キット抗体(抗体BA、配列番号174および176、それぞれ配列番号173および175の核酸によってコードされる)、抗スクレロスチン抗体AH、および抗PCSK9抗体AK
・抗ストレプトアビジンIgG1およびIgG2。
・1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩(EDC)
・n−メチル−2−ピロリドンによる可溶化
・光散乱(LS)によるサイズ排除高速液体クロマトグラフィ(SE−HPLC)
・還元およびアルキル化逆相高速液体クロマトグラフィ(RA RP−HPLC)
・エレクトロスプレーイオン化質量分析法(ESI−MS)によるトリプシンペプチドマップ
・コーンプレート型粘度計
高濃度モノクローナル抗体溶液のEDC架橋のSE‐HPLCは、オリゴマーを形成する傾向を示す
化合物1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩(EDC)を用いて、抗体中の酸性残基を抗体中の第一級アミン(N末端および/またはLys残基)に化学架橋し、タンパク質−タンパク質相互作用の領域を決定するために他の研究で用いられている。カルボキシル基の第一級アミンへの近接は、アミド結合が2つの基の間に形成されるので重要である(図16)。形成される架橋は、おそらく溶液中に存在する塩橋である。Carraway and Koshland,Jr.(1972).”Carbodiimide modification of proteins”.Methods Enzymol 25:616−623。抗体パネルを、同一の溶液条件下、EDCで化学架橋した。過去のレオロジー研究では、パネル中の抗体のいくつかは粘性であり、いくつかは粘性でないことがわかった(図17)。非粘性抗体は二量体含量がわずかに増加したが、より高次のものを大量には含まなかった。対照的に、粘性抗体は、大量の二量体ならびにより高次のオリゴマーを含有した。図17に概要を示す。粘性であると確認された抗体は全て、二量体よりも大きいと思われるEDC架橋種を含有した。より大きなオリゴマー種の出現は、濃度に依存する(抗体AHを一例として図18に示す)。さらなる分析を容易にするために、化学架橋条件を変更して、架橋反応を完了させた。200mg/mLで化学架橋した後、溶液は固体になった。固体を緩衝液または緩衝3%NMP溶液で再可溶化した。両試料のSE−HPLC分析は、試料が類似していることを示した。緩衝3%NMP溶液は、より多くの物質が溶液になるにつれて、タンパク質を有意により速く可溶化した。抗体AHを再可溶化し、実施例としてさらに分析した。
架橋した抗体の溶液を、オンライン光散乱を用いたSE−HPLCによって分析して、溶出種のサイズを決定した。SE−HPLCは、EDC化学架橋および3%NMPでの再可溶化の後、抗体AHのオンライン光散乱分析を用いて行った。SE−HPLCは、UVおよびRIに存在する3つのピークを示した。第1のピークは、840.5kDの質量を有する種として特定された。これは、873.2kDの抗体AHの六量体について予想される質量に近い。別の種は494.6kDの質量を有し、これは、抗体AHの三量体について予測された436.6kDの質量に近い。第3の種は139.9kDの質量を有し、これは、抗体AHの単量体について予測された145.5kDの質量に近い。
架橋抗体溶液を、還元およびアルキル化逆相高速液体クロマトグラフィによって分析した。軽鎖(LC)および重鎖(HC)の両方の大部分の回収は、HCまたはLCが互いに架橋されて、SEC分析によって観察された架橋オリゴマーを反映する非天然LC−HCペプチドまたは非天然LC−LCまたはHC−HCペプチドを形成すると推定されたので、予想外であった。抗体AHの場合、LCは、非架橋抗体AH LCと全く同じ質量で同じ場所に溶出した。抗体AH中のHCには濃度依存性の変化があった。確認された質量が100kDの少量のHC−HC架橋物質(約33分で溶出、図21)が存在する。150mg/mLおよび200mg/mLでは、HC種の分布は類似している。より低いタンパク質濃度では、分布が約28.5分で溶出するより多くの種を含む。HC種の分布は、最大量の六量体を含有する200mg/mLサンプルおよび非常に少ないオリゴマーを含有する10mg/mLサンプルを用いてSECによって分析されるように、各サンプル中に存在するオリゴマーの量と相関する。このパターンは、他の粘性抗体溶液において観察された。
抗PCSK9親抗体AKおよび低粘度変異体の薬物動態および薬力学(PKPD)の非ヒト霊長類による研究
材料:抗体AKおよびその変異体。重鎖中の全ての変異。
4匹の雄カニクイザルの4群
・各群は、以下のような1回のSC投与(10mg/kg)を受けた:
第1群:親抗体AK(140mg/ml)
第2群:Fab変異体(210mg/ml)
第3群:Fc変異体(210mg/ml)
第4群:Fab/Fc変異体(210mg/ml)
・第1群および第2群はまた、希釈剤対照のSC投与を有した
・投与3日後に注射部位の皮膚生検を実施
・病理組織学的分析の実施
・血漿LDL、HDL、総コレステロールおよびPKを投与後6週間追跡
4つのホモログは全て、顕著なLDL低下を生じた
・投与2週間後、最大の減少:親での以前の観察より1週間遅い
・効果の底はFab/Fc変異体でさほど深くなかった(約78%対約90%)
・ベースラインへの戻りは、Fc変異体でわずかにより加速されているようである
・PK:平均暴露量(CmaxおよびAUClastに基づく)は全ての処置群間で同程度であった(1.4倍以内)。
・抗PCSK9抗体AKにおけるFabおよび/またはFcの変異は、非ヒト霊長類(NHP)(カニクイザル)の注射部位反応(ISR)または薬物動態および薬力学(PKPD)プロファイルに有意な影響を及ぼさなかった。
Fab変異体:T82(72)R、R94(84)S、S95(85)R;Ahoナンバリング(実際のナンバリング)。
Fc変異体:S(434)K(EUナンバリングではS440K)。
GIPR(2G10.006)抗体AQの低粘度変異体の作製と特徴付け
抗体AQの低粘度変異体のクローニング、発現、精製および高濃度製剤
GIPR(2G10.006)AQ親は、米国仮特許出願第62/387,486号明細書に、2G10_LC1.006(引用特許出願の配列番号74)として記載されている。前述の米国特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。変異部位Q1(1)E、R17(16)G、S85(75)Aを有する重鎖変異体AQ(HC 1、17、85)、および変異部位M4(4)L、V13(13)L、A76(60)D、S95(77)R、Q97(79)E、S98(80)Pを有する軽鎖変異体AQ(LC 4 13 76 95 97 98)を以下のように作製した。GIPR(2G10.006)(抗体AQ)低粘度変異体の合成遺伝子を作製し、消化し、プラスミド発現ベクターにライゲートした。コンストラクトをDNAシークエンシングによって確認した。安定な細胞プールを、クローンCHO宿主細胞株のエレクトロポレーションによって作製した。プールを、生存率が85%を超えるまで選択下で培養した。プールを流加生産培養に10日間播種し、遠心分離した培地を回収した。
グルコース依存性インスリン分泌性ポリペプチド受容体(GIPR)を発現する哺乳動物細胞293/huGIPRを利用するアッセイによって、効力を測定した。抗GIPR親AQおよび低粘度変異体の濃度の増加は、アッセイ中にモニターしたcAMP変化を誘導するGIPとGIPRとの相互作用を遮断した。アッセイの適用は、Tseng C.C.et al.(1996),“Postprandial stimulation of insulin release by glucose−dependent insulinotropic polypeptide(GIP).Effect of a specific glucose−dependent insulinotropic polypeptide receptor antagonist in the rat”,J.Clin..Invest.98:2440−2445に先に記載された。
AQおよび2つの低粘度変異体の粘度分析を、CP25−1/TGスピンドルを用いてAnton Paarレオメーターで行った。測定は全て25℃で行い、試料カップに取り付けた水浴によって制御した。粘度の測定を、0から2000rpmへ剪断速度を増加させながら手動で収集した。剪断速度1000 1/sでの10個の粘度測定結果および剪断速度2000 1/sでの10個の粘度測定結果を各試料について収集し、平均して、1試料当たり1つの粘度値を報告した。
抗GIPR(2G10.006)抗体AQは、重鎖VH3|3−33および軽鎖VK3|L16の高粘度生殖系列サブファミリーに属する。図11および12に由来するいくつかの変異を、AQの粘度を低下させるためにインフレームで作製した。1つの粘度計設定で測定した親AQおよび2つの変異体の粘度は、以下の値を示した:AQ−19.1cP、AQ(HC 1、17、85)−15.8cP、AQ(LC 4 13 76 95 97 98)−12.7cP(図20)。親AQに対して、重鎖変異体AQ(HC 1、17、85)変異体は83%であり、軽鎖変異体AQ(LC 4 13 76 95 97 98)は67%であった。図7および8は、VH3およびVK3ファミリーメンバーについての粘度対pIプロット上の変異体の位置を示す。インビトロcAMP活性は、粘度変異によっても同様に影響を受けなかった。効力は、インビトロ細胞ベースのアッセイの許容誤差内で同じままであった(図20Bを参照されたい)。要約すると、導入された変異は、効力を失うことなく粘度を低下させた。
GIPR低粘度変異軽鎖V78F(AhoナンバリングではLC V78F、リニアナンバリングではLC V62F)
GIPR(2G10.006)抗体AQは、A52Su製剤中150mg/mLで23cPの高粘度を示した。この抗体は、カッパ軽鎖における、低頻度残基V78(Ahoナンバリングで)(リニアナンバリングでV62)を特徴とした(LC V78 Aho)。カッパ生殖系列に関連する軽鎖配列では、V78の発生頻度は<1%であるが、F78は>98%である。残基LC V78は、共分散から逸脱しているため注目を集めた。共分散分析は、抗体の可変領域における残基の生理化学的特性に基づいて、ペアワイズ保存残基位置を確立することを可能にし、不正確に配置された残基(多くの場合、非生殖系列残基である)を特定する。共分散分析はさらに、分子動力学シミュレーションによって明らかにされた大きな立体構造の変化をもたらす、より一般的な生殖系列配列で、逸脱した位置のアミノ酸を置換することを示唆し得る(Kannan G.,”Method of correlated mutational analysis to improve therapeutic antibodies”、米国特許出願第61/451929号明細書、国際出願PCT/US2012/028596号明細書、国際公開第2012/125495号パンフレット)。共分散逸脱を排除し、ヒト配列の割合を増加させるために、LC V78F変異をGIPR(2G10.006)抗体AQに導入した。
カニクイザルによる試験
AKと称する抗体(対照、AMG145およびエボロクマブとしても知られる)、ならびに実施例3に示したFab変異体、Fc変異体、および二重変異体を、実施例1および2に開示される方法論を使用して生成した。これらの抗体の薬物動態特性を、雄カニクイザルへの単回皮下ボーラス注射によってインビボで試験した。
雄カニクイザルを用いて試験を行った。動物は2.7〜3.8歳であり、2.9〜3.8kgの体重であった。投与開始前7日間、動物を実験室での生活に順応させた。選択基準には、処置前のコレステロールレベル(LDLおよびHDLを含む)レベルからの許容可能な結果が含まれた。投与開始前に、全ての動物を無作為化し、コンピュータに基づく無作為化手順を用いて群に割り当てた。
血漿サンプルを、酵素結合免疫吸着検定法(ELISA)を用いて、各試験抗体(抗体AK、AK Fab変異体、AK S440K Fc変異体、およびAK Fab/S440K二重変異体)の濃度について分析した。アッセイは、捕捉試薬として組換えヒトPCSK9を、検出試薬としてヒトIgG1に対する西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗体を使用する。標準および品質管理サンプル(QC)を、抗体AKまたは低粘度ホモログを100%カニクイザルK2−EDTAプールにスパイクすることによって調製する。Costar96ウェルマイクロプレートウェル(Corning Incorporated)を、組換えヒトPCSK9でコーティングする。ブロッキング工程の後、TBS(Thermo Scientific)中のBlocker(商標)BLOTTO中で100の希釈係数で前処理した後、標準、マトリックスブランク(NSB)、QC(QC)および試験試料をマイクロプレートウェルにロードする。試料中の抗体AKは、マイクロプレート上にコーティングされた固定化組換えヒトPCSK9に捕捉される。マイクロプレートウェルを洗浄することによって、結合していない物質を除去する。洗浄後、マウス抗ヒトIgG、Ab35、HRP結合検出抗体をマイクロプレートウェルに添加して、捕捉された抗体AKを結合させる。マイクロプレートウェルを洗浄することによって、結合していない検出抗体を除去する。結合したマウス抗ヒトIgG Ab35 HRP複合体の検出のために、1成分TMB溶液をマイクロプレートウェルに添加する。TMB基質溶液は過酸化物と反応し、HRPの存在下で、捕捉試薬によって結合した抗体AKまたは低粘度変異体ホモログの量に比例する比色シグナルを生成する。2N硫酸を用いて発色を停止し、色の強度(光学濃度またはOD)を450nmマイナス650nmで測定する。データを、1の重み付け係数を有する4パラメータ(Marquardt)回帰モデルを用いるWatsonバージョン7.4 SP3(またはそれ以降)データ縮小パッケージを使用して縮小する。
Tmax(最大観察濃度が観察された投与後の時間)、
Cmax(投与後に測定された最大観察濃度)、
AUC(0−t)(線形または線形/対数台形法を用いて、投与開始から最後に観察された定量可能濃度の投与後の時間までの濃度対時間曲線下の面積)、
AUC(0−t)/D(AUC(0−t)を投与用量で除したもの)、および
RAUC(定常状態におけるT1からT2までの曲線下の面積を、最初の投与間隔中のT1からT2までの曲線下の面積で除したもの)。
時間に対してプロットした試験品濃度を図24Aおよび24Bに示す(各試験品の平均濃度、各時点でn=4)。4つの試験品の薬物動態パラメータを図22に要約する。Fc変異S440K(抗体AK(Fc変異体)および抗体AK(FcおよびFab二重変異体)の両方)を含む抗体は、抗体AK(対照)と比較して、Tmaxの減少(それぞれ0.81日および1日対2.5日)およびCmaxの増加(それぞれ125μg/mLおよび112μg/mL対87.8μg/mL)を示し、抗体AK(Fab変異体)は、粘度を低下させるFc変異を含む抗体が、皮下注射後に血液循環に急速に分布することを示す。
本明細書を通して使用される略語は、以下のように定義される。
AEI アレル発現不均衡
ANOVA 分散分析
AUC 曲線下面積
BSA ウシ血清アルブミン
DMEM ダルベッコ改変イーグル培地
DMSO ジメチルスルホキシド
EDC 1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩
EDTA エチレンジアミン四酢酸
ELISA 酵素結合免疫吸着検定法
eQTL 発現量的形質遺伝子座
ESI−TOF エレクトロスプレーイオン化飛行時間
FACS 蛍光標識細胞分取
FBS ウシ胎仔血清
FPLC 高速タンパク質液体クロマトグラフィ
FVB フレンド白血病ウイルス1b(Fv1b)アレルで同系交配されたマウス株
H&E ヘマトキキシリン−エオジン
HA ヒポキサンチン
HIC 疎水性相互作用クロマトグラフィ
HPLC 高速液体クロマトグラフィ
HRP 西洋わさびペルオキシダーゼ
HUVEC ヒト臍帯静脈上皮細胞
IBD 炎症性腸疾患
IDMEM グルタミンを含まないDMEM
IFN インターフェロン
IL インターロイキン
MCP 単球走化性タンパク質
MSD 高分子構造データベース
PBMC 末梢血単核細胞
PBS リン酸緩衝生理食塩水
PCR ポリメラーゼ連鎖反応
PEG ポリエチレングリコール
PEI ポリエチレンイミン
QTL 量的形質遺伝子座
RPMI Roswell Park Memorial Instituteで開発された培地
SNP 単一ヌクレオチド多型
TFA トリフルオロ酢酸
TMB 3,3’,5,5’−テトラメチルベンジジン
(項目1)
抗原結合タンパク質の粘度を減少させる方法であって、
a.前記抗原結合タンパク質がVH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む場合、前記VH1配列を、82X1、94X2、および95X3から選択される1つ以上の置換を含むように改変すること(ここで、X1はR、K、およびHから選択され、X2はS、T、N、およびQから選択され、X3はR、K、およびHから選択される);
b.前記抗原結合タンパク質がVH3|3−33生殖系列サブファミリーを含む場合、前記VH3配列を、1X4、17X5、および85X6から選択される1つ以上の置換を含むように改変すること(ここで、X4はDおよびEから選択され、X5はG、A、V、I、L、およびMおよびWから選択され、X6はG、A、V、I、L、およびMから選択される);
c.前記抗原結合タンパク質がVK3|L16生殖系列サブファミリーを含む場合、前記VK3配列を、4X10、13X11、76X12、78F、95X13、97X14、および98Pから選択される1つ以上の置換を含むように改変すること(ここで、X10はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X11はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X12はDおよびEから選択され、X13はR、KおよびHから選択され、X14はDおよびEから選択される);
d.前記抗原結合タンパク質が前記VK3|L6生殖系列サブファミリーを含む場合、前記VK3配列を、76X12および95X13から選択される1つ以上の置換を含むように改変すること;
e.Fcドメイン配列を253X15、440X16、および439X17から選択される1つ以上の置換を含むように改変すること(ここで、X15はG、A、V、I、L、およびMから選択され、X16はR、K、およびHから選択され、X17はDおよびEから選択され、前記Fcドメイン配列は440X16および439X17の1つのみを含む);ならびに
f.前記Fcドメイン配列のC末端を、X18X19を含むように改変すること(ここで、X18はDおよびE、またはH、KおよびRから選択される1〜4のアミノ酸であり、X19はP、M、G、A、V、I、L、S、T、N、Q、F、YおよびWから選択され、X18がDまたはEを含むとき存在せず、X18がそのC末端にKまたはRを含むとき存在し、X18がそのC末端にHを含むとき存在するかまたは存在しない)
から選択される、前記抗原結合タンパク質の配列に1つ以上の改変を作ることを含み、
サブパラグラフa、b、c、およびdにおけるアミノ酸はAhoナンバリングシステムにより番号付けされており、サブパラグラフeのアミノ酸はEUナンバリングシステムにより番号付けされている方法。
(項目2)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Aおよび1Bから選択される抗体の配列(配列番号166および168;2および4;178および180;170および172;6および8;10および12;14および16;18および20;22および24;26および28;30および32;34および36;38および40;43および44;46および48;50および52;54および56;58および60;62および64;66および68;70および72;74および76;78および80;82および84;86および88;90および92;94および96;98および100;102および104;106および108;110および112;114および116;118および120;122および124;126および128;130および132;134および136;158および160;138および140;142および144;146および148;150および152;ならびに154および156)を含む、項目1に記載の方法。
(項目3)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH1配列を、82R、94S、および95Rから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、項目1に記載の方法。
(項目4)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH1配列を、82R、94S、および95Rの置換を含むように改変することを含む、項目2に記載の方法。
(項目5)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH1配列を、59X20(ここで、X20はR、KおよびHから選択される)の置換を含むように改変することをさらに含む、項目1に記載の方法。
(項目6)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH1配列を、59Kの置換を含むように改変することをさらに含む、項目1に記載の方法。
(項目7)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH1配列を、59Kの置換を含むように改変することをさらに含む、項目2に記載の方法。
(項目8)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AF、AK、AL、ANおよびAOから選択される抗体の配列(配列番号114および116;134および136;138および140;146および148;ならびに150および152)を含む、項目3に記載の方法。
(項目9)
前記VH3|3−33生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH3配列を、1E、17G、および85Aから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、項目1に記載の方法。
(項目10)
前記VH3|3−33生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH3配列を、1E、17G、および85Aの置換を含むように改変することを含む、項目2に記載の方法。
(項目11)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AQ、AM、AI、およびAGから選択される抗体の配列(配列番号158および160;142および144;126および128;ならびに118および120)を含む、項目10に記載の方法。
(項目12)
抗原結合タンパク質の前記VK3|L16配列を、4L、13L、76D、78F、95R、97E、および98Pから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、項目1に記載の方法。
(項目13)
抗原結合タンパク質の前記VK3|L16配列を、4L、13L、76D、78F、95R、97E、および98Pの置換を含むように改変することを含む、項目2に記載の方法。
(項目14)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AFおよびAQから選択される抗体の配列(配列番号114および116;ならびに158および160)を含む、項目13に記載の方法。
(項目15)
抗原結合タンパク質の前記VK3|L6配列を、76Dおよび95Rから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、項目1に記載の方法。
(項目16)
抗原結合タンパク質のVK3|L6配列を、76Dおよび95Rの置換を含むように改変することを含む、項目2に記載の方法。
(項目17)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AJの配列(配列番号130および132)を含む、項目16に記載の方法。
(項目18)
前記Fcドメイン配列を、253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、項目1に記載の方法。
(項目19)
前記Fcドメイン配列を、253A、440K、および439Eの置換を含むように改変することを含む、項目2に記載の方法。
(項目20)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、抗体BA、AH、およびANから選択される抗体の配列(配列番号174および176;122および124;ならびに146および148)を含む、項目18に記載の方法。
(項目21)
前記FcドメインのC末端を、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含むように改変することを含む、項目1に記載の方法。
(項目22)
前記FcドメインのC末端を、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含むように改変することを含む、項目2に記載の方法。
(項目23)
前記FcドメインのC末端を、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含むように改変することを含む、項目18に記載の方法。
(項目24)
a.82X1、94X2、および95X3から選択される1つ以上の置換を含むVH1|1−18生殖系列サブファミリー配列(ここで、X1はR、KおよびHから選択され、X2はS、T、NおよびQから選択され、X3はR、KおよびHから選択される);
b.1X4、17X5、および85X6から選択される1つ以上の置換を含むVH3|3−33生殖系列サブファミリー配列(ここで、X4はDおよびEから選択され、X5はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X6はG.A、V、I、LおよびMから選択される);
c.4X10、13X11、76X12、95X13、97X14、および98Pから選択される1つ以上の置換を含むVK3|L16生殖系列サブファミリー配列(ここで、X10はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X11はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X12はDおよびEから選択され、X13はR、KおよびHから選択され、X14はDおよびEから選択され、前記抗原結合タンパク質は置換78Fのみを含むことはない);
d.76X12および95X13から選択される1つ以上の置換を含むVK3|L6生殖系列サブファミリー配列;
e.253X15、440X16、および439X17から選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列(ここで、X15はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X16はR、KおよびHから選択され、X17はDおよびEから選択され、前記Fcドメイン配列は440X16および439X17の1つのみを含み、X16がKであるか、X17がEであるとき、前記抗原結合タンパク質は、253X15、またはサブパラグラフa、b、c、dおよびfから選択される改変の少なくとも1つを含み、また、前記抗原結合タンパク質はCD20に特異的に結合する);ならびに
f.そのC末端にX18X19を含むFcドメイン配列(ここで、X18はDおよびE、またはH、KおよびRから選択される1〜4のアミノ酸であり、X19はP、M、G、A、V、I、L、S、T、N、Q、F、YおよびWから選択され、かつX18がDまたはEを含むとき存在せず、X18がそのC末端にKまたはRを含むとき存在し、X18がそのC末端にHを含むとき存在するかまたは存在せず、前記FcドメインのC末端にPGKP(配列番号381)、PGKKP(配列番号382)、PGKKKP(配列番号383)またはPGEが現れたとき、前記抗原結合タンパク質は、253X15、またはサブパラグラフa〜eから選択される置換の少なくとも1つを含み、また、前記抗原結合タンパク質はCD20またはCD38に特異的に結合する)
から選択される1つ以上の配列改変を含む抗原結合タンパク質であって、
サブパラグラフa、b、c、およびdにおけるアミノ酸はAhoナンバリングシステムにより番号付けされており、サブパラグラフeのアミノ酸はEUナンバリングシステムにより番号付けされている抗原結合タンパク質。
(項目25)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Aおよび1Bから選択される抗体の配列(配列番号166および168;2および4;178および180;170および172;6および8;10および12;14および16;18および20;22および24;26および28;30および32;34および36;38および40;43および44;46および48;50および52;54および56;58および60;62および64;66および68;70および72;74および76;78および80;82および84;86および88;90および92;94および96;98および100;102および104;106および108;110および112;114および116;118および120;122および124;126および128;130および132;134および136;158および160;138および140;142および144;146および148;150および152;ならびに154および156)を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目26)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリー配列は、82R、94S、および95Rから選択される1つ以上の置換を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目27)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリー配列は、82R、94S、および95Rの置換を含む、項目25に記載の抗原結合タンパク質。
(項目28)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリー配列は、59X20(ここで、X20はR、KおよびHから選択される)の置換を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目29)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリー配列は、59Kの置換を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目30)
前記VH1|1−18生殖系列サブファミリー配列は、59Kの置換を含む、項目25に記載の抗原結合タンパク質。
(項目31)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AF、AK、AL、ANおよびAOから選択される抗体の配列(配列番号114および116;134および136;138および140;146および148;ならびに150および152)を含む、項目30に記載の抗原結合タンパク質。
(項目32)
前記VH3|3−33生殖系列サブファミリー配列は、1E、17G、および85Aから選択される1つ以上の置換を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目33)
前記VH3|3−33生殖系列サブファミリー配列は、1E、17G、および85Aの置換を含む、項目25に記載の抗原結合タンパク質。
(項目34)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AQ、AM、AI、およびAGから選択される抗体の配列(配列番号158および160;142および144;126および128;ならびに118および120)を含む、項目33に記載の抗原結合タンパク質。
(項目35)
前記VK3|L16配列は、4L、13L、76D、78F、95R、97E、および98Pから選択される1つ以上の置換を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目36)
前記VK3|L16配列は、4L、13L、76D、95R、97E、および98Pの置換を含む、項目25に記載の抗原結合タンパク質。
(項目37)
前記VK3|L16配列は、4L、13L、76D、95R、97E、および98Pから選択される1つ以上の置換を含む、項目26に記載の抗原結合タンパク質。
(項目38)
前記VK3|L16配列は、4L、13L、76D、95R、97E、および98Pから選択される1つ以上の置換を含む、項目29に記載の抗原結合タンパク質。
(項目39)
前記VK3|L16配列は、4L、13L、76D、95R、97E、および98Pから選択される1つ以上の置換を含む、項目32に記載の抗原結合タンパク質。
(項目40)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AFおよびAQから選択される抗体の配列(配列番号114および116;ならびに158および160)を含む、項目36に記載の抗原結合タンパク質。
(項目41)
前記VK3|L6配列は、76Dおよび95Rから選択される1つ以上の置換を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目42)
前記VK3|L6配列は、76Dおよび95Rの置換を含む、項目25に記載の抗原結合タンパク質。
(項目43)
前記VK3|L6配列は、76Dおよび95Rの置換を含む、項目26に記載の抗原結合タンパク質。
(項目44)
前記VK3|L6配列は、76Dおよび95Rの置換を含む、項目29に記載の抗原結合タンパク質。
(項目45)
前記VK3|L6配列は、76Dおよび95Rの置換を含む、項目32に記載の抗原結合タンパク質。
(項目46)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AJの配列(配列番号130および132)を含む、項目39に記載の抗原結合タンパク質。
(項目47)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目48)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目25に記載の抗原結合タンパク質。
(項目49)
前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、抗体BA、AH、およびANから選択される抗体の配列(配列番号174および176;122および124;ならびに146および148)を含む、項目42に記載の抗原結合タンパク質。
(項目50)
253A、440K、および439Eの置換から選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目51)
253A、440K、および439Eの置換から選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目26に記載の抗原結合タンパク質。
(項目52)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目29に記載の抗原結合タンパク質。
(項目53)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目32に記載の抗原結合タンパク質。
(項目54)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目35に記載の抗原結合タンパク質。
(項目55)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目37に記載の抗原結合タンパク質。
(項目56)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目38に記載の抗原結合タンパク質。
(項目57)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目39に記載の抗原結合タンパク質。
(項目58)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目41に記載の抗原結合タンパク質。
(項目59)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目42に記載の抗原結合タンパク質。
(項目60)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目43に記載の抗原結合タンパク質。
(項目61)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目44に記載の抗原結合タンパク質。
(項目62)
253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むFcドメイン配列を含む、項目45に記載の抗原結合タンパク質。
(項目63)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目64)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目26に記載の抗原結合タンパク質。
(項目65)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目29に記載の抗原結合タンパク質。
(項目66)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目32に記載の抗原結合タンパク質。
(項目67)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目35に記載の抗原結合タンパク質。
(項目68)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目37に記載の抗原結合タンパク質。
(項目69)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目38に記載の抗原結合タンパク質。
(項目70)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目39に記載の抗原結合タンパク質。
(項目71)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目41に記載の抗原結合タンパク質。
(項目72)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目42に記載の抗原結合タンパク質。
(項目73)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目43に記載の抗原結合タンパク質。
(項目74)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目44に記載の抗原結合タンパク質。
(項目75)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目45に記載の抗原結合タンパク質。
(項目76)
前記FcドメインのC末端に、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含む、項目47に記載の抗原結合タンパク質。
(項目77)
図10から選択される一連の置換:
a.重鎖におけるT82R、R94S、およびS95R、
b.重鎖におけるS59K、T82R、R94S、およびS95R、
c.重鎖におけるT82R、R94S、およびS95Rと、軽鎖におけるG13L、ならびに
d.重鎖におけるS59K、T82R、R94S、およびS95Rと、軽鎖におけるG13L
を含むことを除いて、PCSK−9結合ポリペプチドの重鎖および軽鎖配列を含み、
前記アミノ酸はAhoナンバリングシステムによって番号付けされている、
PCSK9に特異的に結合する抗原結合タンパク質。
(項目78)
前記PCSK−9結合ポリペプチドは、図1Bからの抗体AKの重鎖および軽鎖配列(配列番号134および136)を含む、項目77に記載の抗原結合タンパク質。
(項目79)
I253A、S440K、またはK439Eの置換の1つ以上を含むことを除いて、図1Bの抗体AKの重鎖配列(配列番号136)を含み、前記アミノ酸はEUナンバリングシステムによって番号付けされている、PCSK9に特異的に結合する抗原結合タンパク質。
(項目80)
前記重鎖はさらに、I253A、S440K、またはK439Eの置換の1つ以上を含み、前記アミノ酸はEUナンバリングシステムによって番号付けされている、項目77に記載の抗原結合タンパク質。
(項目81)
配列番号352、353、および354から選択されるアミノ酸配列を含む、PCSK9に特異的に結合する抗原結合タンパク質。
(項目82)
配列番号351および367から選択されるアミノ酸配列をさらに含む、項目81に記載の抗原結合タンパク質。
(項目83)
図10から選択される一連の置換:
a.重鎖におけるT82R、R94S、およびS95R、
b.重鎖におけるS59K、T82R、R94S、およびS95R、
c.重鎖におけるT82R、R94S、およびS95Rと、軽鎖におけるV13L、ならびに
d.重鎖におけるS59K、T82R、R94S、およびS95Rと、軽鎖におけるV13L
を含むことを除いて、図1Bの抗体AOの重鎖および軽鎖配列(配列番号150および152)を含み、
前記アミノ酸はAhoナンバリングシステムによって番号付けされている、
c−fmsに特異的に結合する抗原結合タンパク質。
(項目84)
配列番号356、357、および358から選択されるアミノ酸配列を含む、c−fmsに特異的に結合する抗原結合タンパク質。
(項目85)
配列番号355のアミノ酸配列をさらに含む、項目84に記載の抗原結合タンパク質。
(項目86)
配列番号359、361、362、364、および368から選択されるアミノ酸配列を含む、GIPRに特異的に結合する抗原結合タンパク質。
(項目87)
配列番号360、363、365、および367から選択されるアミノ酸配列をさらに含む、項目86に記載の抗原結合タンパク質。
(項目88)
a.前記抗原結合タンパク質は440X16置換を欠く親抗体に対して置換440X16を含み、
b.皮下注射により前記抗原結合タンパク質および前記親抗体が同じ濃度で投与された場合に、前記抗原結合タンパク質は前記親抗体よりも速く最大血清濃度に達し、かつ
c.皮下注射により前記抗原結合タンパク質および前記親抗体が同じ濃度で投与された場合に、前記抗原結合タンパク質は前記親抗体よりも高い最大血清濃度に達する、
項目24に記載の抗原結合タンパク質。
(項目89)
項目88に記載の抗原結合タンパク質は、前記親抗体の少なくとも約2倍の速さで最大血清濃度に達する、項目88に記載の抗原結合タンパク質。
(項目90)
項目88に記載の抗原結合タンパク質は、前記親抗体より少なくとも約25%高い最大血清濃度に達する、項目88に記載の抗原結合タンパク質。
(項目91)
前記親抗体は、PCSK−9結合ポリペプチドである、項目88に記載の抗原結合タンパク質。
(項目92)
前記親抗体は、図1Bからの抗体AK(配列番号134および136)である、項目88に記載の抗原結合タンパク質。
(項目93)
X16はKである、項目88に記載の抗原結合タンパク質。
(項目94)
X16はKである、項目89に記載の抗原結合タンパク質。
(項目95)
X16はKである、項目90に記載の抗原結合タンパク質。
(項目96)
X16はKである、項目91に記載の抗原結合タンパク質。
(項目97)
X16はKである、項目92に記載の抗原結合タンパク質。
(項目98)
両方が同じ濃度で投与された場合に、親抗体より高い最大血清濃度に達し、親抗体より速く最大血清濃度に達する抗原結合タンパク質の調製方法であって、前記親抗体に配列改変440X16(ここで、X16はR、K、およびHから選択される)を導入することを含む方法。
(項目99)
前記抗原結合タンパク質は、前記親抗体の少なくとも2倍の速さで最大血清濃度に達する、項目98に記載の方法。
(項目100)
X16はKである、項目98に記載の方法。
(項目101)
X16はKである、項目99に記載の方法。
(項目102)
前記親抗体はPCSK9結合ポリペプチドである、項目98に記載の方法。
(項目103)
前記親抗体はPCSK9結合ポリペプチドである、項目99に記載の方法。
(項目104)
前記親抗体はPCSK9結合ポリペプチドである、項目100に記載の方法。
(項目105)
前記親抗原結合タンパク質は、図1Bからの抗体AK(配列番号134および136)である、項目98に記載の抗原結合タンパク質。
(項目106)
前記親抗原結合タンパク質は、図1Bからの抗体AK(配列番号134および136)である、項目99に記載の抗原結合タンパク質。
(項目107)
前記親抗原結合タンパク質は、図1Bからの抗体AK(配列番号134および136)である、項目100に記載の抗原結合タンパク質。
(項目108)
患者のPCSK9に関連する兆候を治療する方法であって、項目81に記載の抗原結合タンパク質を投与することを含む方法。
(項目109)
前記PCSK9に関連する兆候は高コレステロール血症である、項目108に記載の方法。
(項目110)
患者のPCSK9に関連する兆候を治療する方法であって、項目82に記載の抗原結合タンパク質を投与することを含む方法。
(項目111)
前記PCSK9に関連する兆候は高コレステロール血症である、項目110に記載の方法。
(項目112)
患者のPCSK9に関連する兆候を治療する方法であって、項目88に記載の抗原結合タンパク質を投与することを含む方法。
(項目113)
前記PCSK9に関連する兆候は高コレステロール血症である、項目112に記載の方法。
Claims (15)
- 抗原結合タンパク質の粘度を減少させる方法であって、
a.前記抗原結合タンパク質がVH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む場合、前記VH1配列を、82X1、94X2、および95X3から選択される1つ以上の置換を含むように改変すること(ここで、X1はR、K、およびHから選択され、X2はS、T、N、およびQから選択され、X3はR、K、およびHから選択される);
b.前記抗原結合タンパク質がVH3|3−33生殖系列サブファミリーを含む場合、前記VH3配列を、1X4、17X5、および85X6から選択される1つ以上の置換を含むように改変すること(ここで、X4はDおよびEから選択され、X5はG、A、V、I、L、およびMおよびWから選択され、X6はG、A、V、I、L、およびMから選択される;
c.前記抗原結合タンパク質がVK3|L16生殖系列サブファミリーを含む場合、前記VK3配列を、4X10、13X11、76X12、78F、95X13、97X14、および98Pから選択される1つ以上の置換を含むように改変すること(ここで、X10はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X11はG、A、V、I、LおよびMから選択され、X12はDおよびEから選択され、X13はR、KおよびHから選択され、X14はDおよびEから選択される);
d.前記抗原結合タンパク質が前記VK3|L6生殖系列サブファミリーを含む場合、前記VK3配列を、76X12および95X13から選択される1つ以上の置換を含むように改変すること;
e.Fcドメイン配列を253X15、440X16、および439X17から選択される1つ以上の置換を含むように改変すること(ここで、X15はG、A、V、I、L、およびMから選択され、X16はR、K、およびHから選択され、X17はDおよびEから選択され、前記Fcドメイン配列は440X16および439X17の1つのみを含む);ならびに
f.前記Fcドメイン配列のC末端を、X18X19を含むように改変すること(ここで、X18はDおよびE、またはH、KおよびRから選択される1〜4のアミノ酸であり、X19はP、M、G、A、V、I、L、S、T、N、Q、F、YおよびWから選択され、X18がDまたはEを含むとき存在せず、X18がそのC末端にKまたはRを含むとき存在し、X18がそのC末端にHを含むとき存在するかまたは存在しない)
から選択される、前記抗原結合タンパク質の配列に1つ以上の改変を作ることを含み、
サブパラグラフa、b、c、およびdにおけるアミノ酸はAhoナンバリングシステムにより番号付けされており、サブパラグラフeのアミノ酸はEUナンバリングシステムにより番号付けされている方法。 - 前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Aおよび1Bから選択される抗体の配列(配列番号166および168;2および4;178および180;170および172;6および8;10および12;14および16;18および20;22および24;26および28;30および32;34および36;38および40;43および44;46および48;50および52;54および56;58および60;62および64;66および68;70および72;74および76;78および80;82および84;86および88;90および92;94および96;98および100;102および104;106および108;110および112;114および116;118および120;122および124;126および128;130および132;134および136;158および160;138および140;142および144;146および148;150および152;ならびに154および156)を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記VH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH1配列を、82R、94S、および95Rから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記VH1|1−18生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH1配列を、59X20(ここで、X20はR、KおよびHから選択される)の置換を含むように改変することをさらに含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AF、AK、AL、ANおよびAOから選択される抗体の配列(配列番号114および116;134および136;138および140;146および148;ならびに150および152)を含む、請求項3に記載の方法。
- 前記VH3|3−33生殖系列サブファミリーを含む抗原結合タンパク質の前記VH3配列を、1E、17G、および85Aから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AQ、AM、AI、およびAGから選択される抗体の配列(配列番号158および160;142および144;126および128;ならびに118および120)を含む、請求項6に記載の方法。
- 抗原結合タンパク質の前記VK3|L16配列を、4L、13L、76D、78F、95R、97E、および98Pから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AFおよびAQから選択される抗体の配列(配列番号114および116;ならびに158および160)を含む、請求項8に記載の方法。
- 抗原結合タンパク質の前記VK3|L6配列を、76Dおよび95Rから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、図1Bからの抗体AJの配列(配列番号130および132)を含む、請求項10に記載の方法。
- 前記Fcドメイン配列を、253A、440K、および439Eから選択される1つ以上の置換を含むように改変することを含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記抗原結合タンパク質は、置換を除いて、抗体BA、AH、およびANから選択される抗体の配列(配列番号174および176;122および124;ならびに146および148)を含む、請求項12に記載の方法。
- 前記FcドメインのC末端を、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含むように改変することを含む、請求項1または2に記載の方法。
- 前記FcドメインのC末端を、KP、KKP、KKKP(配列番号380)、およびEから選択されるアミノ酸配列を含むように改変することを含む、請求項14に記載の方法。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022043944A JP2022081654A (ja) | 2016-09-29 | 2022-03-18 | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 |
JP2023182462A JP2023178409A (ja) | 2016-09-29 | 2023-10-24 | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 |
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662401770P | 2016-09-29 | 2016-09-29 | |
US62/401,770 | 2016-09-29 | ||
US201662430773P | 2016-12-06 | 2016-12-06 | |
US62/430,773 | 2016-12-06 | ||
US201762546469P | 2017-08-16 | 2017-08-16 | |
US62/546,469 | 2017-08-16 | ||
PCT/US2017/053967 WO2018064307A2 (en) | 2016-09-29 | 2017-09-28 | Low-viscosity antigen binding proteins and methods of making them |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022043944A Division JP2022081654A (ja) | 2016-09-29 | 2022-03-18 | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019532063A true JP2019532063A (ja) | 2019-11-07 |
Family
ID=60245172
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019516945A Pending JP2019532063A (ja) | 2016-09-29 | 2017-09-28 | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 |
JP2022043944A Pending JP2022081654A (ja) | 2016-09-29 | 2022-03-18 | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 |
JP2023182462A Pending JP2023178409A (ja) | 2016-09-29 | 2023-10-24 | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022043944A Pending JP2022081654A (ja) | 2016-09-29 | 2022-03-18 | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 |
JP2023182462A Pending JP2023178409A (ja) | 2016-09-29 | 2023-10-24 | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11059908B2 (ja) |
EP (1) | EP3519439A2 (ja) |
JP (3) | JP2019532063A (ja) |
KR (2) | KR102551269B1 (ja) |
CN (1) | CN110036031A (ja) |
AU (1) | AU2017336673A1 (ja) |
CA (1) | CA3038909A1 (ja) |
CL (2) | CL2019000835A1 (ja) |
IL (2) | IL307684A (ja) |
MA (1) | MA46359A (ja) |
MX (1) | MX2019003727A (ja) |
SG (1) | SG10201912565QA (ja) |
WO (1) | WO2018064307A2 (ja) |
ZA (1) | ZA201902297B (ja) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013004841A1 (en) * | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Genmab A/S | Modulation of complement-dependent cytotoxicity through modifications of the c-terminus of antibody heavy chains |
PT2953634T (pt) | 2013-02-07 | 2021-09-02 | Massachusetts Gen Hospital | Métodos de expansão ou depleção das células t reguladoras |
AU2015289874A1 (en) * | 2014-07-14 | 2017-02-02 | Amgen Inc. | Crystalline antibody formulations |
US11813328B2 (en) | 2014-10-23 | 2023-11-14 | Amgen Inc. | Methods for reducing the viscosity of liquid pharmaceutical formulations comprising therapeutic proteins |
CN116715767A (zh) | 2016-05-13 | 2023-09-08 | 综合医院公司 | 拮抗性抗肿瘤坏死因子受体超家族抗体 |
JP7377596B2 (ja) * | 2017-02-22 | 2023-11-10 | アムジエン・インコーポレーテツド | 低粘度、高濃度エボロクマブ製剤及びそれらの製造方法 |
KR20190132215A (ko) | 2018-05-18 | 2019-11-27 | 서울반도체 주식회사 | 발광 다이오드, 발광 다이오드 모듈 및 그것을 갖는 표시 장치 |
WO2020041361A1 (en) * | 2018-08-20 | 2020-02-27 | The General Hospital Corporation | Antagonistic anti-tumor necrosis factor receptor superfamily polypeptides |
WO2020185763A1 (en) * | 2019-03-11 | 2020-09-17 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Cd22 antibodies and methods of using the same |
GB2590642B (en) * | 2019-12-20 | 2024-02-14 | Kymab Ltd | Improved lambda antibodies |
CN114729056A (zh) * | 2019-06-26 | 2022-07-08 | 阿穆尼克斯制药公司 | Egfr抗原结合片段和包含它们的组合物 |
WO2021202013A1 (en) * | 2020-03-30 | 2021-10-07 | Crystal Bioscience Inc. | Anti-gipr antibody and methods of use thereof |
CN113512116B (zh) * | 2020-04-10 | 2022-09-20 | 苏州普乐康医药科技有限公司 | 一种抗igf-1r抗体及其应用 |
WO2022011264A2 (en) * | 2020-07-10 | 2022-01-13 | The Wistar Institute Of Anatomy And Biology | Dna antibody constructs for use against rotavirus |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014516953A (ja) * | 2011-05-10 | 2014-07-17 | アムジエン・インコーポレーテツド | コレステロール関連障害を治療または予防する方法 |
JP2015527064A (ja) * | 2012-07-13 | 2015-09-17 | ロシュ グリクアート アクチェンゲゼルシャフト | 二重特異性抗vegf/抗ang−2抗体及び眼血管疾患の処置におけるそれらの使用 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB8308235D0 (en) | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
JPS6147500A (ja) | 1984-08-15 | 1986-03-07 | Res Dev Corp Of Japan | キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法 |
EP0173494A3 (en) | 1984-08-27 | 1987-11-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Chimeric receptors by dna splicing and expression |
GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
DE69133566T2 (de) | 1990-01-12 | 2007-12-06 | Amgen Fremont Inc. | Bildung von xenogenen Antikörpern |
AR083495A1 (es) | 2010-10-22 | 2013-02-27 | Esbatech Alcon Biomed Res Unit | Anticuerpos estables y solubles |
WO2012125495A2 (en) | 2011-03-11 | 2012-09-20 | Amgen Inc. | Method of correlated mutational analysis to improve therapeutic antibodies |
RU2019108429A (ru) * | 2013-04-29 | 2019-05-06 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Модифицированные асимметричные антитела, связывающие fc-рецептор, и способы их применения |
EP3026061A1 (en) * | 2014-11-26 | 2016-06-01 | Novo Nordisk A/S | Site directed mutagenesis of trem-1 antibodies for decreasing viscosity. |
SG11201805255TA (en) * | 2015-12-23 | 2018-07-30 | Amgen Inc | Method of treating or ameliorating metabolic disorders using binding proteins for gastric inhibitory peptide receptor (gipr) in combination with glp-1 agonists |
-
2017
- 2017-09-28 CA CA3038909A patent/CA3038909A1/en active Pending
- 2017-09-28 AU AU2017336673A patent/AU2017336673A1/en active Pending
- 2017-09-28 EP EP17794111.9A patent/EP3519439A2/en active Pending
- 2017-09-28 SG SG10201912565QA patent/SG10201912565QA/en unknown
- 2017-09-28 KR KR1020197012239A patent/KR102551269B1/ko active IP Right Grant
- 2017-09-28 JP JP2019516945A patent/JP2019532063A/ja active Pending
- 2017-09-28 KR KR1020237022133A patent/KR20230107696A/ko not_active Application Discontinuation
- 2017-09-28 WO PCT/US2017/053967 patent/WO2018064307A2/en active Application Filing
- 2017-09-28 IL IL307684A patent/IL307684A/en unknown
- 2017-09-28 CN CN201780073880.7A patent/CN110036031A/zh active Pending
- 2017-09-28 IL IL265692A patent/IL265692B2/en unknown
- 2017-09-28 US US16/338,292 patent/US11059908B2/en active Active
- 2017-09-28 MA MA046359A patent/MA46359A/fr unknown
- 2017-09-28 MX MX2019003727A patent/MX2019003727A/es unknown
-
2019
- 2019-03-28 CL CL2019000835A patent/CL2019000835A1/es unknown
- 2019-04-11 ZA ZA2019/02297A patent/ZA201902297B/en unknown
-
2021
- 2021-06-11 US US17/346,156 patent/US20210371544A1/en active Pending
- 2021-12-31 CL CL2021003596A patent/CL2021003596A1/es unknown
-
2022
- 2022-03-18 JP JP2022043944A patent/JP2022081654A/ja active Pending
-
2023
- 2023-10-24 JP JP2023182462A patent/JP2023178409A/ja active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014516953A (ja) * | 2011-05-10 | 2014-07-17 | アムジエン・インコーポレーテツド | コレステロール関連障害を治療または予防する方法 |
JP2015527064A (ja) * | 2012-07-13 | 2015-09-17 | ロシュ グリクアート アクチェンゲゼルシャフト | 二重特異性抗vegf/抗ang−2抗体及び眼血管疾患の処置におけるそれらの使用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
"Establishing a Link Between Amino Acid Sequences and Self-Associating and Viscoelastic Behavior of T", PHARMACEUTIVAL RESEARCH, vol. 28, JPN6021036761, 6 April 2011 (2011-04-06), pages 1750 - 1764, ISSN: 0004800282 * |
"食品タンパク質の構造とレオロジー", 化学と生物, vol. 20, no. 5, JPN6022047753, 1982, pages 296 - 304, ISSN: 0004914897 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN110036031A (zh) | 2019-07-19 |
US11059908B2 (en) | 2021-07-13 |
IL307684A (en) | 2023-12-01 |
JP2022081654A (ja) | 2022-05-31 |
US20190233543A1 (en) | 2019-08-01 |
SG10201912565QA (en) | 2020-02-27 |
WO2018064307A3 (en) | 2018-07-05 |
IL265692A (en) | 2019-05-30 |
KR102551269B1 (ko) | 2023-07-05 |
WO2018064307A2 (en) | 2018-04-05 |
KR20190053271A (ko) | 2019-05-17 |
ZA201902297B (en) | 2019-12-18 |
CA3038909A1 (en) | 2018-04-05 |
JP2023178409A (ja) | 2023-12-14 |
AU2017336673A1 (en) | 2019-04-18 |
MA46359A (fr) | 2019-08-07 |
CL2021003596A1 (es) | 2022-08-19 |
WO2018064307A4 (en) | 2018-09-27 |
MX2019003727A (es) | 2019-08-05 |
CL2019000835A1 (es) | 2019-05-31 |
IL265692B2 (en) | 2024-03-01 |
KR20230107696A (ko) | 2023-07-17 |
IL265692B1 (en) | 2023-11-01 |
EP3519439A2 (en) | 2019-08-07 |
US20210371544A1 (en) | 2021-12-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2019532063A (ja) | 低粘度の抗原結合タンパク質およびそれらの作製方法 | |
AU2020248612B9 (en) | Pharmaceutical composition, comprising human hyaluronidase PH20 variant and drug, for subcutaneous injection | |
US20210122805A1 (en) | Fc FUSION PROTEINS COMPRISING NOVEL LINKERS OR ARRANGEMENTS | |
KR102003144B1 (ko) | 타우에 대한 항체 및 그의 용도 | |
TWI486171B (zh) | 具有增進之體內穩定性之抗神經生長因子(ngf)抗體 | |
KR20130108078A (ko) | Csf1r에 결합하는 항체들 | |
CN107207623B (zh) | Fc融合高亲和力IgE受体α链 | |
EP2821416B1 (en) | Novel anti-human il-23 receptor antibody | |
US10988527B2 (en) | Method for preparing TNFR-Fc fusion protein containing target content of impurities | |
TWI788188B (zh) | 用於皮下注射之包含人類玻尿酸酶ph20變異體及藥物的醫藥組合物 | |
TWI781415B (zh) | 用於皮下注射之包含人類玻尿酸酶ph20變異體及藥物的醫藥組合物 | |
EA043899B1 (ru) | Антигенсвязывающие белки, характеризующиеся низкой вязкостью, и способы их получения | |
WO2023242251A1 (en) | Follistatin-fc fusion proteins | |
ZA200109295B (en) | Adipocyte complement related protein homolog zacrp5. | |
NZ733388B (en) | Method for preparing tnfr-fc fusion protein containing target content of impurities |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200928 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210921 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20211221 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220218 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220318 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20220615 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20221014 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20221014 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20221021 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20221024 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20221111 |
|
C211 | Notice of termination of reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C211 Effective date: 20221115 |