JP2019501386A - 信号増幅を伴う分析キュベットおよび派生物 - Google Patents

Abstract

本発明は、透明な材料または半透明の材料から作製された、生物学的なサンプルを分析するためのキュベット（１）であって、前記キュベットは、キュベットを仕切る少なくとも１つの垂直方向の壁部（２）と底部（３）とからなり、キュベット内で、蛍光酵素反応が実施され得る、キュベット（１）に関する。本発明は、キュベットの一部分が、スリーブ（５）によって外側を部分的に覆われており、前記キュベット（１）と接触している、スリーブ（５）の内側コーティング（４）が、再帰反射材料から作製されていることを特徴とする。
本発明は、少なくとも１つのそのようなキュベットを含有する分析バーにも関し、そのようなキュベットまたはバーの使用にも関する。最後に、本発明は、前記分析キュベットまたはバーのための分析デバイスを提案する。
本発明は、好ましくは、インビトロ診断の分野においても使用され得る。
【選択図】図１

Description

本発明は、一般に、テストサンプルの分析の分野に関し、より具体的には、分析バーに関する。このバーは、随意的に、特定のサンプル分析のための分析バーとともに使用するのに適切なチップを含有する受容部と組み合わされる。この点において、読者は、この主題に関するさらなる情報については、本出願人によって出願された特許出願ＦＲ−Ａ−１２６２７８６を参照されたい。

興味のある被検体を含有し得るサンプルの分析の分野において、信号測定などの特定の測定に基づく方法を使用することは公知の慣行である。したがって、テストサンプルの分析は、サンプル中の検出対象または定量化対象である被検体を表す試薬の使用を含まなければならない。試薬は、反応生成物を得ることを可能にする。次いで、テストサンプルから結果として生じ、反応生成物を含有する媒体は、反応媒体である。したがって、特定の測定は、たとえば、蛍光分析測定を含むことが可能であり、すなわち、サンプルの生物学的な分析の間に放出された蛍光信号を定量化することを可能にする測定を含むことが可能である。この状況において、得られる反応生成物は、蛍光特性を有している。蛍光の原理を適用することによって、励起波長と呼ばれる第１の波長に対応する、光源に暴露されるそのような反応生成物は、次に、放出波長と呼ばれる第２の波長による光線を放出する。これらの蛍光信号からの信号の処理に関連付けられる、この反応媒体における蛍光信号の検出は、たとえば、テストサンプルの中で探し求められる特定の被検体の存在または濃度を決定することを可能にする。当然ながら、分析バーと適切なチップを含有する受容部とを使用する他のタイプのサンプル分析も想定され得る。

サンプル分析は、分析デバイスを使用して実施され得、少なくとも２つのキュベットを含む分析バーが、分析デバイスの中へ導入され、キュベットのそれぞれは、特定の液体によって充填されている。一般的に、分析バーは、テストサンプルを受け入れるのに適切なキュベットを含む。

このサンプルの分析の間に、チップまたはピペットが、所定の量の前記サンプルを吸引するために使用され、また、分析バーの中に存在するさまざまなキュベットの内側に前記サンプルを堆積させるために使用される。さまざまなキュベットの内側に存在する液体は、テストサンプルと反応し、液体搬送サイクルの終わりに、たとえば、キュベットごとに、液体または反応媒体を得ることが可能であり、それに対して、信号の測定が実施され得る。

そのような分析（そのために、分析バーがチップと組み合わせて使用される）が最適に進行することを保証するために、一方では分析バーと、他方ではこの分析バーに適切なチップとを組み合わせることが重要である。適切なチップは、たとえば、分析バーのものと同じバッチから来る。チップおよびバーは、別々に製造され、異なる有効期限を有するので、したがって、バッチが同じターゲット／パラメーターに関するチップおよび分析バーを実際に含有しているということ、ならびに、その有効期限が切れていないということを確認することが賢明である。

また、適切なチップは、信号の放出のために必要とされる試薬の一部を含有することが可能であり、分析バーは、試薬の他の部分を含有している。したがって、この正しい組み合わせは、分析バーおよびチップを含むアッセンブリを使用する分析デバイスが、この組み合わせに関連付けられる分析結果を提供することとなるということを保証する。実際に、分析バーおよびチップから構成されるアッセンブリが使用されるときに、ユーザーは、分析バーを、前記分析バーとともに使用されることが意図されていないチップと組み合わせて、間違って取り扱う可能性がある。このエラーは、偽陰性の結果などのような、実施される分析に関して誤った結果を引き起こす可能性がある。

蛍光分析測定を使用するこれらのテストに伴う最も重要な問題のうちの１つは、放出された蛍光信号のレベルおよび品質（低い背景雑音）にある。関連の生物学的な反応の数が十分に高くないので、それらが弱すぎる場合には、ユーザーまたは装置（それが、自動化されたシステムである場合）が、テストの結果を、それが実際にはポジティブであるのにネガティブであるとして安易に分類することとなるというリスクが存在している。これは、偽陰性と称されるものである。この状況は、以下の者、
− キット製造業者、
− 装置製造業者、
− ユーザーまたは医師、
− 患者
が最も恐れることである。その理由は、このケースでは、患者、および、この分野で働く上述の専門家のすべてが、検討されたパラメーターに関して、患者は良好な健康状態にあると考えることとなるが、これは正しくないからである。

本発明は、放出蛍光を容易に増幅させる技法を提案することによって、偽陰性の数を極めて著しく制限することを提案する。

この趣旨で、本発明は、透明な材料または半透明の材料から作製された、生物学的なサンプルを分析するためのキュベットであって、前記キュベットは、キュベットを仕切る少なくとも１つの垂直方向の壁部と底部とからなり、キュベット内で、蛍光酵素反応が実施され得る、キュベットにおいて、キュベットの一部分は、スリーブによって外側を部分的に覆われており、前記キュベットと接触している、スリーブの内側コーティングは、再帰反射材料から作製されていることを特徴とする、キュベットに関する。

キュベットおよびスリーブの１つの実施形態によれば、前記スリーブの内部形状は、少なくとも１つの領域を除いて、キュベットの外部形状に部分的に一致しており、少なくとも１つの領域は、一方では、励起波長での照射を可能にし、他方では、前記キュベットの外側からの放出波長の検出を可能にする。

キュベットおよびスリーブの別の実施形態によれば、再帰反射材料は、プリズムを含むかまたはビーズを含むかのいずれかである。

キュベットおよびスリーブの１つの実施形態によれば、スリーブは、前記スリーブの内部面の光学的品質の劣化なしに、接着剤結合によってキュベットに取り付けられている。

この実施形態によれば、接着剤は、透明または半透明であり、紫外線を吸収しない。

キュベットおよびスリーブのまた別の実施形態によれば、スリーブは、機械的なクリップ締結によってキュベットに取り付けられている。

キュベットおよびスリーブのさらに別の実施形態によれば、再帰反射材料から作製されている内側コーティングは、キュベットに固定されていないが、前記キュベットとスリーブとの間に挟まれて、クリップを形成している。

これらすべての実施形態の１つの変形例によれば、スリーブは、キュベットの側方仕切りの高さにおいて完全にまたは部分的に存在しており、スリーブは、キュベットの底部には存在しない。

また、本発明は、サンプルの分析を実施するための分析バーであって、分析バーは、液体を含有および貯蔵するのに適切であり、分析の間にチップと組み合わせて使用されるのに適切である複数のキュベットを含み、チップは、第１のキュベットから所定の量の液体を吸引することができ、この量の液体の全部または一部を第２のキュベットの中へ排出することができ、前記分析バーは、上記に説明されているようなキュベットを含む、分析バーに関する。

このバーの１つの実施形態によれば、複数のキュベットは、長手方向軸に沿って位置決めされており、第１のキュベットは、サンプルを受け入れるのに適切であり、最終キュベットは、分析の間にサンプルから結果として生じる、反応媒体によって放出された信号の読み取りを可能にするのに適切であり、前述されているようなキュベットに対応する。

また、本発明は、サンプルを分析するための、前述されている分析キュベットの使用、または、上記に述べられている分析バーの使用に関する。

前述されている、キュベットの使用または分析バーの使用の１つの特定の実施形態によれば、分析は、免疫アッセイによって実施される。

キュベットの使用または分析バーの使用の１つの特定の実施形態では、
− 基材と酵素との間の酵素反応が実施され、
− この反応は、蛍光分子の形態の分解生成物を結果として生じさせ、
− 蛍光分子は、励起波長における照射を受け、これは、次に、放出波長における蛍光を結果として生じさせ、放出波長は、生物学的なサンプルの中に存在する少なくとも１つの被検体に特有のものである。

最後に、本発明は、前述されているようなキュベットまたは分析バーのための分析デバイスであって、前記分析デバイスは、第１の位置から第２の位置へキュベットまたはバーの移動を課すために、前記キュベットまたはバーのためのサポート、および、ガイディングメカニズムを含有する、分析デバイスに関する。

本明細書に添付されている図は、説明的な例によって与えられており、本質的に決して限定していない。図は、より明確に本発明を理解することを可能にすることとなる。

検出チップの存在下において、クリップおよびバーの読み取りキュベットの上への再帰反射ペーパーのフィッティングの前の斜視図である。 再帰反射ペーパーおよびバーの読み取りキュベットの上へのクリップのフィッティングの前の斜視図である。 再帰反射ペーパーおよびクリップが適切な場所に置かれる前の、読み取りキュベットの下方からの斜視図である。 再帰反射ペーパーおよびクリップが適切な場所に置かれた後の、読み取りキュベットの下方からの斜視図である。 再帰反射ペーパーおよびクリップが適切な場所に置かれる前の、読み取りキュベットの上方からの斜視図である。 再帰反射ペーパーおよびクリップが適切な場所に置かれた後の、読み取りキュベットの上方からの斜視図である。 ３面の実施形態による、形成前の、本発明による再帰反射ペーパーのシートを表す図である。 ４面の実施形態による、ただし形成後の、本発明による再帰反射ペーパーのシートを表す図である。 再帰反射ペーパーのシートがその中の適切な場所に置かれる前の、スリーブまたはクリップの一実施形態の斜視図である。 図４にしたがって再帰反射ペーパーのシートがその中の適切な場所に置かれた後の、図９によるスリーブまたはクリップの一実施形態の斜視図である。 ガラスマイクロビーズに基づく再帰反射システムの断面図であり、いくつかの光線が、第１の方向Ｆ１に進入し（励起波長と呼ばれる）、球形の体積の半円形内側コーティングの内壁部の上での反射の後に、方向Ｆ２に出射する光線の形態で反射される（放出波長と呼ばれる）ことを示す図である。方向Ｆ１およびＦ２は平行である。 図１１と同一の図であり、唯一の違いは、内側コーティングの内壁部の形状が多面体になっており、少なくとも２つの面が互いに対して垂直であることを表す図である。 ＶＩＤＡＳ（登録商標）ＴＮＩ Ｕｌｔｒａキットにおいて、本発明によるスリーブを用いてまたは用いずに観察される量の決定を示すグラフである。 ＶＩＤＡＳ（登録商標）ＴＮＩ Ｕｌｔｒａキットにおいて本発明を用いてまたは用いずに観察される量の決定を示す図１３のグラフと同様のものであるが、０ｎｇ／ｌから１０００ｎｇ／ｌの間の濃度の領域を拡大した図である。 本発明によるスリーブの存在ありまたはなしの、ＶＩＤＡＳ（登録商標）ＴＮＩ Ｕｌｔｒａキットによって評価されたサンプルＢおよびＣの再現性の検討のグラフィック表示である。２つの明るい柱は、前記スリーブの存在なしで評価されたサンプルＢまたはＣを表す。２つの暗い柱は、前記スリーブの存在下で評価されたサンプルＢまたはＣを表す。

下記の詳細な説明の目的は、とりわけ、例を用いて、十分に明確におよび完全に、本発明を記述することであるが、決して、保護の範囲を、特定の実施形態および下記に提示されている例に限定するものとしてみなされるべきではない。下記の例は、本発明をより明確に理解することを可能にすることとなる。しかし、これらの例は、例示目的のためだけに与えられており、決して、前記発明の範囲を何らかの形で限定するものとしてみなされるべきではない。

本発明は、キュベットの一部分が、スリーブによって外側を部分的に覆われており、前記スリーブと接触している、スリーブの内側コーティングは、再帰反射材料から作製されていることを特徴とする。

再帰反射材料は、供給源へ光を反射する特性を有する任意の材料を意味するように理解される。換言すれば、励起光子が再帰反射材料に衝突するとき、この光子は、読み取りの軸に対して反射される。

本発明は、サンプルの分析、たとえば、生物学的な分析などに関する。本発明によれば、サンプルは、さまざまな起源のものであることが可能であり、たとえば、食物起源、環境起源、獣医学起源、臨床起源、医薬品起源、または化粧品起源のものであることが可能である。

食物起源のサンプルの中でも、包括的ではないが、乳製品（ヨーグルト、チーズなど）、肉、魚、卵、果物、野菜、水、飲料（ミルク、果物ジュース、ソーダなど）サンプルが言及され得る。当然のことながら、これらの食物起源のサンプルは、また、手の込んだソースまたは料理から来ることも可能であり、または、変換されていないかもしくは部分的に変換された原材料から来ることも可能である。また、食物サンプルは、油かすなどのような動物飼料、動物の食事から来ることも可能である。

以前に示されたように、サンプルは、環境起源のものであることが可能であり、また、たとえば、表面から（水などから）取られるサンプルから構成され得る。

また、サンプルは、生物学的なサンプルから構成され得、臨床起源、人間起源、または動物起源のものから構成され得、それは、生物学的な流体（尿、全血、または、血清もしくは血漿などのような派生物、唾液、分泌液（ｐｕｓｓ）、脳脊髄流体、など）から取られるサンプル、排泄物（たとえば、コレラ下痢）から取られるサンプル、鼻、喉、皮膚、創傷部、臓器、組織、または単離細胞から取られるサンプルに対応することが可能である。このリストは、明らかに包括的なものではない。

一般的に、「サンプル」という用語は、分析の目的のために１つまたは複数のエンティティー（ｅｎｔｉｔｙ）から取られる、一部分または量を表しており、より具体的には、小さい部分または小さい量を表している。随意的に、このサンプルは、とりわけ、出発エンティティーが固体状態である場合には、たとえば、混合ステップ、希釈ステップ、または、その他の製粉ステップを含む、前処理を受けていてもよい。

分析されるサンプルは、検出されるか、特徴付けられるか、またはモニタリングされることとなる微生物または病気の存在を表す少なくとも１つの被検体を含有することが可能であり、または、その疑いがある。

サンプル分析は、関心の被検体と被検体に特有の１つまたは複数の結合パートナーとの間の反応を実施することが可能である。

本発明の１つの実施形態によれば、反応は、免疫アッセイ反応であり、また、決定されることとなる被検体は、タンパク質、ペプチド、またはハプテンである。この反応は、結合パートナーとして、抗原および／または抗体、被検体のための受容体を必要とする。免疫アッセイ反応の例として、ＥＬＩＳＡ−タイプまたはＥＬＦＡ−タイプのアッセイにおいて実施される「競争」反応および「サンドイッチ」反応が言及され得る。

当然のことながら、「免疫アッセイ」の中の「免疫」という用語は、本出願では、結合パートナーが抗体などのような免疫アッセイパートナーであるということを厳密に示すものとして考慮されるべきではない。実際に、また、当業者は、結合パートナー（リガンドとも呼ばれる）が、免疫アッセイパートナーではなく、たとえば、アッセイに望まれる被検体のための受容体であるときに、この用語を幅広く使用する。したがって、非免疫アッセイ結合パートナーを使用するアッセイ（より幅広く「Ｌｉｇａｎｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ａｓｓａｙ」と呼ばれる）に関して、ＥＬＩＳＡ（Ｅｎｚｙｍｅ−Ｌｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａｙ）と表すことが公知の実務であるが、同じ「免疫」という用語が、頭字語ＥＬＩＳＡの中に含まれている。明確化のために、本出願において、本出願人は、結合パートナーを使用するタンパク質被検体の任意のアッセイに関して、それが免疫アッセイパートナーでないときでも、「免疫」という用語を使用することとなる。

また、反応は、ハイブリッド形成反応であることが可能であり、また、決定されることとなる被検体は、ＤＮＡまたはＲＮＡタイプの核酸であり、すなわち、それは、決定されることとなる被検体に相補的なヌクレオチド断片を必要とする反応である。

図１は、先行技術による分析バー７およびチップ１１を示しており、チップ１１は、分析バー７とともに使用するのに適切である。分析バー７は、分析バー７を操作するのに適切なサポート９を含む。分析バー７は、第１のキュベット１０、ならびに、複数のキュベット８、すなわち、少なくとも２つのキュベット８を含む。また、分析バー７は、最終キュベット１を含む。それぞれのキュベット８は、サンプルの生物学的な分析の間に使用される液体または流体を受け入れてを調整するのに適切である。キュベットの上側縁部の上に位置付けされている保護フィルム（図示せず）は、さまざまなキュベット１、８および１０のさまざまな内容物を漏れない様式で覆うことを可能にする。保護フィルムは、分析バー７の使用の間に、チップ１１によって穿孔され得、または、キュベット１０を覆うフィルムは、サンプルを受け入れるために事前に穿孔されていてもよく、もしくは、穿孔されていなくてもよい。たとえば円筒形状の第１のキュベット１０は、分析されることとなるサンプルを受け入れるのに適切である。

液体を含有するキュベット８は、すべてのそれらの面において閉じられており、また、テスト被検体の存在を決定するための反応、または、被検体を定量化するための反応に必要とされる試薬を含む。とりわけ、キュベット８のうちの１つが、試薬を含み、試薬は、分析条件に応じて、たとえば、検出または定量化されることとなる被検体の存在下において、反応生成物を発生させることが可能であり、反応生成物は、被検体が前記サンプルの中に存在している場合に、信号を放出する。サンプルの分析は、この反応生成物に基づく。反応生成物は、第１のキュベット１０からキュベット８を介して最終キュベット１への、サンプルの少なくとも一部の移動の結果である。

サンプル分析の間に、さまざまなキュベット１、８、および１０の間で液体を輸送することは、図１に示されているチップ１１によって実施される。チップ１１は、反応における固相として使用される。その理由は、チップの内側は、被検体に結合するための少なくとも１つのパートナーによって覆われているからである。チップ１１は、第１のキュベット１０から液体を吸引することを可能にし、吸引された液体をキュベット８の中へ排出し、第１の混合物を得るようになっている。次いで、チップ１１は、この第１の混合物を吸引し、第１の混合物を別のキュベット８の中へ排出し、第２の混合物を得るようになっており、そして、最終キュベット１までそれが続くようになっており、最終キュベット１の中へ反応媒体が排出される。望まれる分析のタイプにしたがって、すべてまたはいくつかのキュベット８は、最初にキュベット１０から取られたサンプルから結果として生じる反応媒体の分析のために必要とされ得る。

図１に示されているように、分析バー７は、分析バー７の第２の端部に位置付けされている最終キュベット１を含む。最終キュベット１は、約１ミリメートルの厚さを有する垂直方向の壁部を含む。垂直方向の壁部は、２つの傾斜して突き合わせ接合された壁部を含むベースによって一緒に接合されている。

サンプルの分析は、照射するステップ、および、この最終キュベット１の内容物によって放出された信号を検出するステップの同時ステップを使用して実施される。

サンプルの分析の手順、および、最終キュベット１の内容物を分析することによって得られる結果の信頼性を最適化するために、分析を通して、分析バー７のさまざまなキュベットの中のさまざまな流体の搬送のために使用されるチップと分析バー７が正しく対にされることが重要である。

分析バー７およびチップ１１がサンプル分析デバイス（図示せず）の中へ手動で導入されるときに、オペレーターは、注意を払い、分析バーおよびチップの正しい組み合わせを使用しなければならない。分析デバイスが、レールなどのような、いくつかのバーサポートを含む場合には、オペレーターは、それぞれのテストのためのレールの数に等しい複数の操作を慎重に実施しなければならない。これらのさまざまな操作は、テストの前に、分析バーを挿入すること、および、対応するチップを挿入すること、ならびに、テストが実施された後に、分析バーを除去すること、および、チップを除去することから構成される。

オペレーターまたは自動化された分析デバイスを支援するために、および、分析バーおよびチップの正しいペアリングを保証するために、分析バーおよびチップは、識別子を装着され得、識別子は、使用されている分析バーおよびチップのタイプ、それらの有効期限、それらのバッチ数などを識別することを可能にする。

以下に続く説明は、本発明による分析バー、分析デバイス、および、分析バーの使用に関する。

以下に続く説明において、キュベットへの言及は、たとえば、連続的な長方形形状の壁部を含む任意のキュベット、または、たとえば、傾斜して突き合わせ接合された２つの壁部を含むベースによって接合されている垂直方向の壁部を含む任意のキュベットを含む。

以下に続く説明において、保護フィルムへの言及は、たとえば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）／アルミニウム／ポリエチレン（ＰＥ）から作製された、任意のタイプのフィルム、たとえば２層または３層のフィルムを含む。

図１および図２は、本発明による、放出される蛍光信号の品質が改善される方式を示している。

図１の実施形態によれば、分析キュベット１は、スリーブ５を外側に受け入れており、スリーブ５自身は、４面の内側コーティング４を外側に受け入れている。

図２の実施形態によれば、分析キュベット１は、４面の内側コーティング４を外側に受け入れており、４面の内側コーティング４自身は、スリーブ５を外側に受け入れている。

２つの状況では、この４面の内側コーティング４は、再帰反射材料から作製されている。その目的を果たすために、図１の実施形態のケースでは、スリーブ５は、透明な材料またはさらには半透明の材料から作製されていなければならず、それは、光が前記スリーブ５を通過してコーティング４にぶつかることを可能にするということが明らかである。

当然のことながら、コーティング４およびスリーブ５が互いに固定され、複合式または複合スリーブ４および５と称される単に１つのパーツを形成するようになっていることも可能である。

したがって、概念は、前記バー７の修正なしに、複合「ソックス（ｓｏｃｋ）」またはスリーブ４および５を、バー７の基材キュベットまたは分析キュベット１の上の適切な場所に置くことに基づいている。

この複合式スリーブ４および５は、特定の再帰反射光学特性を提供する。励起光子のいくつかは、酵素による基材の分解から結果として生じる蛍光分子と相互作用することなく、分析キュベット１を通過する。複合スリーブ４および５の再帰反射特性は、これらの入射励起光子をそれらが来た方向に再び離れさせることを可能にし、したがって、分析キュベット１をもう一度通り、場合によっては、蛍光分子と反応することを可能にする。

放出光子は、それに関する限り、必ずしも検出器の軸に放出されるわけではない。また、結果的に、放出光子は、それがスリーブ４および５に到達するときに再帰反射され得、このときに、センサーによって捕獲され得る。すべての表面と同様に、再帰反射フィルムは、部分的に反射性である。また、この特性は、追加的な利得を有するアッセンブリを提供する。これは、放出光子が、コーティング４を装着したキュベット１の面に、問題の面の法線に対して角度αで衝突するときに、および、反射角度β（α＝β）がシステムの読み取りの軸の上に重ね合わさるときに、この光子が、読み取りの軸に対して反射されるからである。この特有の補足的な反射がなければ、これらの光子は検出されないこととなり、信号は強力でないこととなる。

さまざまなテストが、最適な設計、および、Ｖｉｄａｓの文脈において最良の特性を有する材料を決定するために使用される。また、多数のテストが、光学特性に有害になることなく、実装の手段を見出すことに向けられてきた。

材料
さまざまな再帰反射材料が供給された。これらの材料は、２つの別個のタイプの中に配置される。
・ 反射部が半球形の形状２４を有している、ビーズベースの再帰反射物質（ガラスビーズであることが多い）、図１１を参照。
・ 反射部の底部が直角形状２３を有している、プリズムベースの（プラスチックの）再帰反射物質、図１２を参照。

テストされた再帰反射材料は、ＶＩＤＡＳ ＴＮＩ Ｕｌｔｒａテスト（ｂｉｏＭｅｒｉｅｕｘ−Ｍａｒｃｙ ｌ’Ｅｔｏｉｌｅ−Ｆｒａｎｃｅ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：３０４４８）によるＶｉｄａｓ（登録商標）免疫学装置（ｂｉｏＭｅｒｉｅｕｘ−Ｍａｒｃｙ ｌ’Ｅｔｏｉｌｅ−Ｆｒａｎｃｅ−ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：ＶＩＤＡＳ（登録商標）３０ Ｌｅｇａｃｙ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ４１０４１７）の上でテストされた。
これらの材料は以下の通りである。
・ 再帰反射材料２３１ＷＷ（Ｓｉｇｎｓ＆Ｌａｖｅｌｓ−Ｓｔｏｃｋｐｏｒｔ−Ｅｎｇｌａｎｄ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：２３１ＷＷ、または、Ｒａｄｉｏｓｐａｒｅｓ−Ｂｅａｕｖａｉｓ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：７６３−２０４２）、
・ 再帰反射材料Ｔｅｓｔｏ（Ｔｅｓｔｏ−Ｆｏｒｂａｃｈ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ０５５４ ０４９３、または、Ｒａｄｉｏｓｐａｒｅｓ−Ｂｅａｕｖａｉｓ、Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：１８８−３９３）、
・ 再帰反射材料Ｍａｃｔａｃ４７００（ＭＡＣｔａｃ Ｆｒａｎｃｅ−Ｍｏｒａｎｇｉｓ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ４７００）、
・ 再帰反射材料Ｍａｃｔａｃ５７００（ＭＡＣｔａｃ Ｆｒａｎｃｅ−Ｍｏｒａｎｇｉｓ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ５７００）、
・ 再帰反射材料ＸＵＺＢ１１（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ−Ｅｌｅｃｔｒｉｃ−Ｒｕｅｉｌ Ｍａｌｍａｉｓｏｎ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：ＸＵＺＢ１１、または、Ｒａｄｉｏｓｐａｒｅｓ−Ｂｅａｕｖａｉｓ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：３２４−１６２０）。

これらの材料のシートが、フラッシュなしで、および、次いでフラッシュありで、写真装置によって取られるときに、再帰反射フィルム同士の間の顕著な違いがすでに注目されている。

最良の材料は、それがＶＩＤＡＳ（登録商標）とともに使用されるときに、Ｔｅｌｅｍｅｃａｎｉｑｕｅであり、それは、マイクロリフレクターまたはマイクロ４面体の配置に対応している。この４面体は、３つの筋向いの頂点を通過する平面によって切断される立方体に対応している。この材料は、視覚的な異方性を示し、すなわち、それは、観察の方向に応じて、同じ光学的な挙動（このケースでは、反射）を示さない。

キュベット１の上への再帰反射材料の装着
いくつかのオプションが、ＶＩＤＡＳ（登録商標）ＴＮＩ Ｕｌｔｒａテストによって、生物学の観点から評価された。
⇒ いくつかのタイプの両面接着剤によって基材キュベットの上に結合する接着剤
〇 ＴＥＳＡ４９７２（ＴＥＳＡ Ｆｒａｎｃｅ−Ｌｉｅｕｓａｉｎｔ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：４９７２）、
〇 ＴＥＳＡ４９５９（ＴＥＳＡ Ｆｒａｎｃｅ−Ｌｉｅｕｓａｉｎｔ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：４９５９）、
〇 Ａｒｃａｒｅ８５７０（Ａｄｈｅｓｉｖｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｒｅｌａｎｄ Ｌｔｄ−Ｌｉｍｅｒｉｃｋ−Ｉｒｅｌａｎｄ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：８５７０）、
〇 Ｍａｃｔａｃ ＰＴ２１１３（ＭＡＣｔａｃ Ｆｒａｎｃｅ−Ｍｏｒａｎｇｉｓ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅＰＴ２１１３）。
⇒ キュベット１の上の機械的なクリップ締結
〇 バッグクリップ（Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ−Ｓａｉｎｔ Ｎｏｍ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：２３１ ０４０）、
〇 ドキュメントバインダー（Ｏｆｆｉｃｅ Ｄｅｐｏｔ−Ｄａｒｄｉｌｌｙ−Ｆｒａｎｃｅ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：００１７１０３）。

クリップに関して、それらは、とりわけサイズの観点から、ＶＩＤＡＳ（登録商標）自動化されたデバイスと適合するままでなければならないということが留意されるべきである。

生物学的な結果
心筋トロポニンＩの濃度の範囲（図１３および図１４）に対してだけでなく、実験の再現性に対しても（表１および図１５）、これらのスリーブ４＋５の影響を決定するために、多数のテストが実施された。この範囲は、血清マトリックスから構成されており、組み換え型心筋トロポニンＩが、血清マトリックスにさまざまな濃度で追加された。

理論的な投与量と比較して約４０％の濃度または投与量の増加が、スリーブ５の存在下で観察され、スリーブ５自身は、４つの面の上に存在する再帰反射コーティングによって覆われている。また、表１およびグラフ３に明確に実証されているように、これらの性能レベルの再現性は非常に満足のいくものであるということが留意されるべきである。サンプルＢおよびＣは、組み換え型心筋トロポニンＩがオーバーロードされた血清マトリックスから構成されている。Ｂの理論的な滴定濃度は、３０ｎｇ／ｌであり、Ｃの理論的な滴定濃度は、５５ｎｇ／ｌである。
表１：本発明によるスリーブの存在ありまたはなしの、ＶＩＤＡＳ（登録商標）ＴＮＩ Ｕｌｔｒａキットを用いて評価されたサンプルＢおよびＣの再現性の検討

図３は、分析キュベット１の高さにおいて下方から見たバー７の端部の拡大図を示している。バー７の端部において、位置決めラグ１２の存在が留意され、前記ラグは、自動化されたデバイス（図には表されていない）の中への前記バー７の設置を促進させ、自動化されたデバイスは、バー７に関連付けられた生物学的なテストを実施するのに適切である。この図では、前記キュベット１は、むき出しになっており、すなわち、任意の取り付けられたエレメントを備えていない。それは、４つの実質的に垂直方向の平坦な壁部および２つの底部壁部３から構成されており、それは、分析キュベット１を一緒に仕切っている。図４は、分析キュベット１の高さにおいて下方から見たバー７の端部の拡大図を示している。この図は、前述のものと同一であり、この図では、前記キュベット１が、コーティング４およびスリーブ５によって覆われている。このキュベット１は、依然として、４つの実質的に垂直方向の平坦な壁部および２つの底部壁部３から構成されているが、４つの実質的に垂直方向の平坦な壁部は、複合スリーブ４および５によって覆われており、２つの底部壁部３は、分析キュベット１を一緒に仕切っているが、スリーブ４および５によって覆われていない。結果として、これは、領域６を生成させ、領域６は、とりわけ、読み取りを可能にすることとなる。

図５は、分析キュベット１の高さにおいて上方から見たバー７の端部の拡大図を示している。位置決めラグ１２が、依然として、バー７の端部に存在している。この図では、前記キュベット１は、むき出しになっており、すなわち、取り付けられたエレメントを備えていない。図６は、分析キュベット１の高さにおいて上方から見たバー７の端部の拡大図を示している。この図は、前述のものと同一であり、この図では、前記キュベット１は、スリーブ５によって覆われており、コーティング４は、この図では見ることができない。その理由は、コーティング４がキュベット１と前記スリーブ５との間に挟まれているからである。

図７は、以前に表されていない別の実施形態における本発明による再帰反射ペーパー１４のシートを表している。したがって、この再帰反射コーティング１４は、３つの面：中央面１５および２つの側面１６を含む、シートから構成されている。

また、３面コーティング１４を位置決めするための切り欠き部１３の存在が留意され、切り欠き部１３は、３面コーティング１４を形成するためにその折り畳みを促進させ、次いで、分析キュベット１の可能な限り近くの適切な場所に３面コーティング１４を置くことを促進させ、分析キュベット１自身は、小さいリブ２５および大きいリブ２６から構成されており、それらは、図３から図６に明確に見ることができる。

図８は、４面の実施形態による本発明による再帰反射ペーパー４のシートを表しているが、それを形成した後のものである。

これらの４つの面は、コーティング４の２つの中央面１８および２つの側面１９から構成されている。また、４面コーティング４を位置決めするための切り欠き部１７の存在が留意される。これらの切り欠き部は、サイズ１７ａにおいて小さく、または、サイズ１７ｂにおいて大きくなっていることが可能である。前述のもので見られた切り欠き部１３と同様に、それらは、コーティング４を形成するためにコーティング４の折り畳みを促進させ、次いで、分析キュベット１の可能な限り近くの適切な場所にコーティング４を置くことを促進させ、分析キュベット１自身は、小さいリブ２５および大きいリブ２６から構成されており、それらは、図３から図６に明確に見ることができる。

バー７のリブ２５および２６、ならびに、コーティング１４および４の切り欠き部１３、１７ａ、および１７ｂは、互いに対する正しい位置決めのために一緒に協働する。

図９は、再帰反射ペーパー４のシートがその中の適切な場所に置かれる前の、スリーブ５の１つの実施形態の斜視図を表している。スリーブ５は、再帰反射コーティング４と同様に、２つの中央壁部２７および２つの側壁部２８から構成されている。また、ショルダー部２９が、２つの側壁部２８の上側部に存在しており、ショルダー部２９の機能は、引き続いて下記に説明されることとなる。

図１０は、再帰反射ペーパーのシートが図４にしたがってその中の適切な場所に置かれた後の、図９によるスリーブまたはクリップ５の１つの実施形態の斜視図を表している。この構成は、ショルダー部２９の役割のより良好な理解を与え、ショルダー部２９は、糊または接着剤などの使用なしにコーティング４を適切な位置に保持することを可能にする。当然のことながら、単に１つのショルダー部だけが存在することが可能である。代替的に、中央壁部２７のうちの少なくとも１つの上に単に１つのショルダー部だけが存在することが可能であり、または、その他、壁部２７および２８のそれぞれの上に１つのショルダー部が存在することが可能である。

スリーブ５に固定された再帰反射コーティング４のケースでは、スリーブ５は、したがって、ショルダー部の存在なしで済ませることができることとなる。

本発明は、すべての光学的なシステムにおいて、光信号および結果的に物理的な測定を増加させることに関連している。それは、システムの中の光子の損失を回避しながら信号を増加させる受動的な手段である。入射光のビームが、特徴付けられることとなる媒体を通過し、戻りのときに、通過される媒体による入射光の修正が測定される、すべての測定システムは、本発明が有利であることを見出し得る。

蛍光、拡散、濁度などの技法が、本発明から利益を得る可能性がある。光ビームが、コヒーレント光、たとえば、レーザーでないとき、本発明は、とりわけ有利であるということが留意されるべきである。また、このシステムは、測定セルのサイズを減少させることを可能にする。その理由は、任意の大きな位置決めおよびアライメントの制約を課すことなく、光が同じ場所に２倍通過するからである。したがって、これは、応答信号の簡単化および増幅によって、励起発光ダイオードを備えたマイクロ流体の回路にとって有利である可能性がある。

このシステムは、サンプルが非常に小さい体積を有しているとき、および／または、測定セルが非常に小さい体積を有しているときに、とりわけ良く適している。

１ 分析キュベット
２ キュベット１を仕切る垂直方向の壁部
３ キュベット１を仕切る底部
４ ４面内側コーティング
５ スリーブ
６ スリーブ４によって覆われていないキュベット１の領域
７ 分析バー
８ コンパートメントとも呼ばれる複数のキュベット
９ サポート
１０ 第１のキュベット
１１ 検出チップ
１２ 位置決めラグ
１３ コーティング１４を位置決めするための切り欠き部
１４ ３面内側コーティング
１５ コーティング１４の中央面
１６ コーティング１４の２つの側面
１７ａ コーティング４を位置決めするための小さい切り欠き部
１７ｂ コーティング４を位置決めするための大きい切り欠き部
１８ コーティング４の２つの中央面
１９ コーティング４の２つの側面
２０ スリーブ５の内側面
２１ スリーブ５を位置決めするための小さい切り欠き部
２２ スリーブ５を位置決めするための大きい切り欠き部
２３ 直角形状のキュベット１の底部
２４ 半球形の形状のキュベットの底部
２５ 分析キュベット１の小さいリブ
２６ 分析キュベット１の大きいリブ
２７ スリーブ５の２つの中央壁部
２８ スリーブ５の２つの側壁部
２９ スリーブ５のショルダー部
Ｆ１ 励起ビーム
Ｆ２ 放出ビーム

Claims (14)

1. 透明な材料または半透明の材料から作製された、生物学的なサンプルを分析するためのキュベット（１）であって、前記キュベットは、前記キュベットを仕切る少なくとも１つの垂直方向の壁部（２）と底部（３）とからなり、前記キュベット内で、蛍光酵素反応が実施され得る、キュベット（１）において、前記キュベットの一部分は、スリーブ（５）によって外側を部分的に覆われており、前記キュベット（１）と接触している、前記スリーブ（５）の内側コーティング（４または１４）は、再帰反射材料から作製されていることを特徴とする、キュベット（１）。
2. 前記スリーブ（５）の内部形状は、少なくとも１つの領域（６）を除いて、前記キュベット（１）の外部形状に部分的に一致しており、前記少なくとも１つの領域（６）は、一方では、励起波長での照射を可能にし、他方では、前記キュベットの前記外側からの放出波長の検出を可能にすることを特徴とする、請求項１に記載のキュベット。
3. 前記再帰反射材料（４または１４）は、プリズムベースまたはビーズベースのいずれかであることを特徴とする、請求項１または２に記載のキュベット。
4. 前記スリーブ（５）は、前記スリーブの内部面の光学的品質の劣化なしに、接着剤結合によって前記キュベット（１）に取り付けられていることを特徴とする、請求項１または２に記載のキュベット。
5. 前記接着剤は、透明または半透明であり、紫外線を吸収しないことを特徴とする、請求項４に記載のキュベット。
6. 前記スリーブ（５）は、機械的なクリップ締結によって前記キュベット（１）に取り付けられていることを特徴とする、請求項１または２に記載のキュベット。
7. 再帰反射材料（４または１４）から作製されている前記内側コーティングは、前記キュベット（１）に固定されていないが、前記キュベット（１）と前記スリーブ（５）との間に挟まれて、クリップを形成していることを特徴とする、請求項１から３のいずれか一項または請求項６に記載のキュベット。
8. 前記スリーブ（５）は、前記キュベット（１）の側方仕切りの高さまで完全にまたは部分的に存在しており、前記スリーブ（５）は、前記キュベット（１）の前記底部（３）には存在しないことを特徴とする、請求項１から７のいずれか一項に記載のキュベット。
9. サンプルの分析を実施するための分析バーであって、前記分析バー（７）は、液体を含有および貯蔵するのに適切であり、前記分析の間にチップ（１１）と組み合わせて使用されるのに適切である複数のキュベット（８）を含み、前記チップ（１１）は、第１のキュベット（８）から所定の量の液体を吸引することができ、この量の液体の全部または一部を第２のキュベット（８または１）の中へ排出することができ、前記分析バー（７）は、請求項１から８のいずれか一項に記載のキュベット（１）を含む、分析バー。
10. 前記複数のキュベット（８および１）は、長手方向軸に沿って位置決めされており、第１のキュベット（１０）は、前記サンプルを受け入れるのに適切であり、最終キュベット（１）は、前記分析の間に前記サンプルから結果として生じる、反応媒体によって放出された信号の読み取りを可能にするのに適切であり、請求項１から７のいずれか一項に記載のキュベット（１）に対応することを特徴とする、請求項９に記載のバー。
11. サンプルを分析するための、請求項１から８のいずれか一項に記載の分析キュベットの使用、または、請求項９または１０に記載の分析バー（７）の使用。
12. 前記分析は、免疫アッセイによって実施される、請求項１１に記載のキュベット（１）の使用または分析バー（７）の使用。
13. − 基材と酵素との間の酵素反応が実施され、
    − この反応は、蛍光分子の形態の分解生成物を結果として生じさせ、
    − 前記蛍光分子は、励起波長における照射を受け、これは、次に、放出波長における蛍光を結果として生じさせ、前記放出波長は、前記生物学的なサンプルの中に存在する少なくとも１つの被検体に特有のものである、請求項１１または１２に記載のキュベット（１）の使用または分析バー（７）の使用。
14. 請求項１から１０のいずれか一項に記載のキュベット（１）または分析バー（７）のための分析デバイスであって、前記分析デバイスは、第１の位置から第２の位置へ前記キュベット（１）またはバー（７）の移動を課すために、前記キュベット（１）またはバー（７）のためのサポート、および、ガイディングメカニズムを含有する、分析デバイス。